SU1235864A1

SU1235864A1 - Нитроксильные производные 5-фторурацила,обладающие противоопухолевой активностью

Info

Publication number: SU1235864A1
Application number: SU833557801A
Authority: SU
Inventors: Николай Маркович Эмануэль; Альбина Николаевна Розенберг; Валерий Александрович Голубев; Геннадий Николаевич Богданов; Любовь Сергеевна Васильева; Нина Петровна Коновалова
Original assignee: Отделение ордена Ленина института химической физики АН СССР
Priority date: 1983-03-11
Filing date: 1983-03-11
Publication date: 1986-06-07
Also published as: WO1984003510A1; JPS60500869A; EP0139023A1; EP0139023A4; US4558127A; DE3473268D1; EP0139023B1

Abstract

Нитроксильные производные 5- -фторурацила общей формулы гле а R,,; д б) R,-R,, R2-H; Н, в R,-H, R,R,;НгС If СНз г) R,-Na, обладающие противоопухолевой активностью . i (О

Description

Изобретение относитс к новым логически активным соединени м - роксильным производным З -фторура общей формулы

О

i;

Rf

L К

где а) ,;

А,

б) R, R,,

5

3

НзС/ч Лснз

в) RJ-RI; . -HjC Y сн

г)R, Na, RI RS;0

обладающим противоопухолевой активностью , которые могут найти применение в биологии, и медицине.

Известен 5-фторурациЛд который примен етс в насто щее врем в онкологии при неоперабельных формах рака желудочно-кишечного тракта, рака легкого и ичников. Однако это соединение обладает высокой токсичностью , особенно сильно нарушает функци костного мозга и желудочно-кишечного тракта.

Другой аналог предлагаемого соединени - фторафур - малотоксичный продукт ( дл мьшей 750 мг/кг), имеет довольно высокую активность в отношении солидных экспериментальных опухолей: саркомы 180, меланомы Гар- динга-Пасси, карциносаркомы Уокера 256, альвеол рного рака печени РС-1. В клинике препарат примен ют при раке молочной железы, пр мой кишки, толстого кишечника и раке желудка. этот препарат угнетает органы кроветворени и вызывает осложнени со стороны желудочно-кишечного тракта . Кроме того, у фторафура так же, как и у фторурацила отсутствуют парамагнитные свойства.

Цель изобретени - получение новых соединений, обладаюшд х противоопухолевой активностью, с парамагнитными свойствами.

Поставленна цель достигаетс предлагаемыми нитроксихшными производными 5-фторурацила общей формулы I, обладающими противоопухолевой активностью.

Предлагаемые соединени получают конденсацией otic -(триметилсилил)-5- -фторурацила (ll) с хлорангидридом 2,2,5,5-тетраметил-1-оксил-Д -пир- рОЛИн-3-к.арбоновой кислоты (ill) в среде инертного растворител , например бензола, или без растворите10

30

45

50

л при комнатной температуре или при слабом нагревании.

При взаимодействии соединени II с двум мол ми соединени III происходит замещение обеих триметил- с шильных групп на пирролиноильные остатки R, и с выходом 74-77% образуетс I.3-ди(2,2,5,5-тетраметил -1 -окО Ш-й -пиppoлин-3-oшl)-5-фтop- ypaцшI (l).

При взаимодействии хлорангидрида соединени III с избытком соединени II происходит селективное замещение одной триметилсилильной группы на

ацильный остаток R. После гидроли- т гческого отщеплени оставшейс три- метилсилипьной группы получают с выходом 48-50% 1(2,2,5,5-тетраме- тил-1-оксил-Д -пирролин-3-оил)-5 -фторурацил {1б)

Натриевую соль 3-(2,2,5,5-тетра- метил-1-окси-й -пирролин-3-оил)-5- -фторурацила (1г) получают обработкой спиртового раствора дипирро- линоилфторурацила (l) эквивалентным количеством алкогол та натри . При этом селективно отщепл етс 1-пирро- линоильна группа, и с выходом 90- 96% образуетс соль (ir), которую осаждают из спиртового раствора эфиром ,

3-(2,2,5,5-Тетраметил-1-оксил- -& -пирролин-3-оил)-5-фторурацил (IB) получают обработкой натриевой

35 соли (ir) эквивалентным количеством разбавленной кислоты, например НС1 или . Образующеес при этом соединение 1в экстрагируют эфиром iли хлороформом. Выход соединени

40 1В составл ет 70-75%.

Строение полученных веществ однозначно подтверждаетс элементным анализом и методами ЭПР-, ИК-, электронной и масс-спектрометрии.

В ПК-спектрах пирролиноил-5-фтор- урацилов (I а, б, в) присутствует группа полос в области 1670-1760 , обусловленна колебани ми карбонильных групп урацила и пирролиноильных заместителей. В соответствии с числом карбонильных групп монопирролин- фторурацилы (1б-1г) содержат меньшее число карбонильных полос, чем дипир- ролигюилфторурацил. У натриевой соли (ir) карбонильные полосы урацила (1561 и 1673 ct-f ) сильно смещены в низкочастотную сторону в результате делокализации отрицательного зар да

аниона на карбонильные группу ураци- ла.

В ИК-спектрах всех веществ I (а-г присутствуют также полосы валентных колебаний св зей пирролина и ура цила с частотой 1620-1625 , полосы валентных колебаний протонов метипьных групп пирролина (28003000 см- )

и Н-С С-групп пирролина -(

и урацила (3030-3100 см ). У моно- пирролиноилфторурацилов (l6, в) имеютс также полосы группы N-H с частотой 3200 см .

Парамагнетизм полученных веществ подтверждаетс методом ЭПР. Спектры ЭПР разбавленных растворов монопир- ролиноилфторурацилов (Тб,в,г) состо из трех линий, которые характерны дл нитроксильных монорадикалов. Спектры ЭПР дипирролиноилфторурацила (l) состо т из дев ти линий и харак- Херны дл нитроксильных бирадикалов, у которых энерги обменного взаимодействи электронов ,8 а М . Кон- С гаты сверхтонкого взаимодействи а N и g-факторы полученных веществ (Та-г) характерны дл нитроксильных радикалов пирролинового р да.

Электронные спектры ацетонитриль- ных растворов пирролиноилфторураци- лов в области 12500-50000 см содержат четыре перекрывающихс полосы которые обусловлены поглощением роксильного пирролиноильного и ураци лового хромофоров. Интенсивнстсть эти полос у дипирролиноилфторурацила (l) в 1,5-2 раза выше, чем у моно- пирролиноилфторурацилов (1б,в). Электронные спектры водных растворов

МОНОПИррОЛИНОИЛфтОрураЦИЛОВ (1б,в)

и натриевой соли (ir) завис т от рН. При рН 3 они обусловлены в основном поглощением монопирролиноилурацилов, а при рН J11 - поглощением соответствующих анионов.

Электронные спектры 3-пирролино- илфторурацила (1в) и соответствующего ему аниона сильно отличаютс по частоте и интенсивности полосы, св занной с поглощением урацилового хромофора. У соединени 1в эта полоса имеет частоту 41710 см , а у аниона - 33710 . Такое различие частот характерно дл всех 3-за- мещенных урацилов и таким образом подтверждает строение соединений IB и 1г. Спектры 1-пирролиноилфтор- урацила (iST) и соответствующего ему

to

5

5 20

0 . i

Q

5

0 5

аниона близки друг другу, что -также типично дл -замещенных урацилов.

В масс-спектрах пирролиноилфтор- урацилоБ присутствуют молекул рные ионы М , а также осколочные ионы, подтверждающие число и место присоединени пирролиноильных групп RJ к 5-фторурацилу (Fu). Так, в масс- спектре З-пирролиноил-5-фторурацила (IB) присутствуют осколочные ионы м/е 167 Н,и м/е 130 , а также осколочные ионы м/е 226 (R NHCONrl r и м/е 225 ИР ШТСОГШ свидетельствующие о присоединении 2,2,5,5- -тетраметил-1-оксил л -пирролинсиль- ной группы к атому Nj урацила. В масс-спектре дипирролиноилфторурацила (la) присутствует осколочный . ион м/е 296 , обусловленный отщеплением одной из двух групп от молекул рного иона М .

В отличие от 5-фторурацила пирро- линоилфторурацилы (I а-в) хорошо растворимы в органических растворител х: в спиртах, ацетоне, ацетонит- риле, диметилформамиде, диметил- сульфоксиде. Натриева соль (ir) очень хорошо растворима в воде. Ее водные растворы имеют .щелочную реакцию . 3-Пирролиноилфторурацил (le)- плохо растворим в воде, но хорошо в водных растворах щелочей ши в буферных растворах при .

3-Пирролиноилфторурацил (1в) и соответствующий ему анион достаточно устойчивы к гидролизу. При комнатной температуре в интервале рН 3-1I соединение IB и соль соединени 1г не претерпевают заметного гидролитического расщеплени в течение часа,

1-Пирролиноилфторурацил также хорошо растворим в водных растворах щелочей, однако быстро гидролизуетс до фторурацила и 2,2,5,5-тетраме- тил-1 -оксил-Д -пирролин-3« карбоновой кислоты. Скорость гидролиза возрастает с увеличением рН среды.

Пример I. Получение 1,3-ди (2,2,5,5-тетраметил-1-оксил-Д -пир- ролин-З-оил)-5-фторурацила (la)..

К раствору 8,11 г хлорангидрида 2,2,5,5-тетраметил-1-оксил U -пирро- лин-З-карбоновой кислоты в 40 мл сухого бензола добавл ют в атмосфере сухого азота 5,49 г tiC (триметил- си.п)-5-фторурацил-а. Оранжевые кристаллы дипирролиноилфторурацила от- фильтровьгвают, промывают небольшим

количеством бензола и гексана и сушат . Выход 6,8-7,1 г (74-77%). Оранжевые призмы (из толуола), т.пл. 195 198°С.

Найдено, %: С 57,4tO,3| Н 5,9tO,l N 12,110,1; F 3,7iO,3; м/е 462 . С„Нг, FN,06

Вычислено, %: С 57,14; Н 5,98; N 12, 11; F4J 1%, М 462, 4745.

ИК-спектр в СС14 , , см (, л/моль-см)S 1621/230/ С С. 1676/620/ 1705/1100/, 1729/800/, 1762/520/ , 2870/100/, 2935/220/, 2984/310/ 3030/80/, 3065/70/, 3095/90/; СН| в КВг 1625 1675, 1700, 1725, 1760 , 2870, 2935, 2980 СН 3052, 3064, 3090 СН.

ЭПР-спектры в толуоле, 25 , 5-10 М: 9 линий с соотношением амп- литуд 0,16 100:29:33:95:32:24:86 0.15. Рассто ние боковьпс линий до центральной, в единицах а„: 0,41: :0,58; 1:2:2,3 ,00560±l . Ш а 14,18tO,04 Гс.

Электронный спектр в MeCN, (с см (е, л/моль.см); 26500±100 пл /8112/ 37400±100 пл /82001100/,

44560160 пл /209001200/, 470001100 /224001200/.

Масс-спектр: м/е (ион) J/J/ййкс 463 (M+i) /1,4/, 462 (м) /4,4/, 447 (М-СН,) /0,22/, 432 (М-NO)- /2,2/, 296 (RCOFU) /5,7/-, 28 (RCOFU-CH,) /О, 6/, 266 (RCOFU-NO) /4,7/, 167 (RCO) /16/, 152 (RCO- /16/, 139 (RCO-CO) , 137 (RCO-NO) /52/, 109 (RCO-NO-U) /100/, где R - 2,2,5,5-тeтpaмeтил- - -ОКСИЛ-Л -пирролинил и -урацил.

П p и м е p 2. Получение 1-(2,2, 5,5-тетрамети.п-1 -оксил-Д -пирролин- -3-оил)-5-фторурацила (Тб),.

К раствору 2,02 г хлорангкдрнда 2,2,5,5-тетраметил- -оксил-Д -пир- ролин-3-кар6оновой кислоты в 100 мл сухого бензола добавл ют в атмосфер сухого азота 5,49 г (триметил- силил)-5-фторурацила.

Оранжево-красные кристаллы пирро линоилфторурацила отфильтровывают,, промывают бензолом, затем гексаном и сушат. Выход 1,4-1,5 г (48-50%).. Оранжево-красные иглы (из нитроме- тана), т.пл. 198-201°С.

Найдено, %: С 52,410,3; Н 5,10.t 10,05; N 13,8tO,2., м/е 296 C,,H,5FN,04

Вычислено, %: С 52,70; Н 5,10; К 14,18,,М 296, 2760.

ИК-спектр в MeCN, -5 , см (Е , л/моль-см): 1627 /ПО/ к , 1685 /330/, 1730 /1700/ , 2835/40, 2872 /52/,, 2946 /155/, 2983 /210/, СИ,; 3105 /140/ СН; 3225 /130/ NH, в вазелиновом масле: 1622 , 1672 1706, 1724, 1745 , 3055, 3095 СН 3152; 3195 Ш.

ЭПР-спектр в толуоле, 25 , 510 М:3 линии с соотношением амплитуд: 100:99:90; ,0056213 1 0 ; а,, 14,2510,03 Гс.

Электронный спектр в KeCN g, ,см (, л/моль-см): 26120450 пл /5011/, 37120150 пл /77001100/, 40700140 /10000±100/, 47030140 /134001200/, в водной 0,001 М НС1 &I84t8079700/, 47320180 /i14400/.

Пример 3. Получение натриевой соли 3-(2,2,5,5-тетраметил-1- -оксил-Д -пирролин-3-оил)-5-фтор- урацила (ir).

К 4,62 г дипирролиноилфторура- цила (la) приливают 10 мл 1-мол рного раствора этилата натри в абс. этаноле. Реакционную смесь перемешивают , затем добавл ют 40 мл диэти- лового эфира. Выпавший желтый осадо соли (г) отфильтровывают, промьша- ют эфиром и сушат. Выход 2,85-3,05 (90-96%). Соль не имеет четкой температуры плавлени , постепенно разлагаетс прИ 250-330°С.

Найдено, %: N 13,0; 0,2

С,- п,ф

Вычислено, %: N 13,20.

ИК-спектр в вазелиновом масле, 5, : 1620 , 1561 , 1673, . 1738 , 3070 СН.

Электронный спектр в водной 0,001 М (, л/моль-см 37400:50 пл /72001100/, 41700±40 /138001100/ 4671100 /121001100/, в водной 0,001 М NaOH: 33700130 /8100. ±100/ 44270150 /157001300/.

ЭПР-спектр в воде, 25, 5-10 М: линии с соотношением амплитуд: 100:101:;80; ,0051411 . 10 , а. 15,8810,05 Гс.

П р и м е р 4. Получение 3-(2,2, 5,5-тетраметил-1-оксил-i -пирролин- -3-ош1)-5-фторурацнла (1в).

К 1,59 г натриевой соли (ir) приливают 25 мл 0,2 Н. НС 1. Смесь перемешивают 10 мин и многократно экст7

рагируют хлороформом. Хлороформные выт жки сушат , растворитель испар ют в вакууме, а остаток пере- кристаллизовьгоают из толуола. Пирро линоилфторурацил кристаллизуетс в виде мелких желтых игл т. пл. 169- 171°С. Выход 1,04-1,11 г (70-75%). Найдено, %: С 52,610,2; Н 5,09± tO,05; N 14,310,1, F 6,44tO,005, м/е 296

С„ H,N,0,

Вычислено, %: С 52,70; Н 5,10; N 14,18; F 6,41; М 296,276.

ИК-спектр в MeCN, 5 , см (, л/моль-см): 1622 /180/ 1680 /1330/, 1723 /760/, 1754 /960/ 2877 /47/, 294 /130/, 2989 /190/ СН 3087/90/ СН; 3270 /140/; в КВг: 1620 1665, 1720, 1760 , 2840, 2940,, 2990 СН.; 3084 СН, 3210 NH.ЭПР-спектр в толуоле,25 j 5-1 OT М: 3 линии с соотношением амплитуд 100:99:90; ,00561±I, 10 ; а, 14.,-1510,01 Гс.

Электронный спектр в MeCNj axc (, л/моль.см): 25l40i20 /52,6± to,5/; 38190120 пл /85001200/; 42480120 /14000 500/ 47430160 /13200 600/, в водной 0,001 М НС1: 37410160 пл /72001100/ 41710±30 /139001100/, 46700170 /120001100/, в водной. 0,001 М ГГаОН 33710±30; /81601150/, 44270190 /15700 300/.

Масс-спектр, м/е ион (J/JMOIKC ) 297 (М-И) /7,1/, 296 , 282 (,) /26/, 281 (М-СН,) - /1,2/, 266 (М-МО) /12/, 226 (RCOraCONH) /0,44/, 225 (HRCONCONHj) /1,4/, 167 (RCO)- /42/, 152 (RCOCK,) /67/, 139 (RCO-CO) /16/, 137 (RCO-NO) /82/, 136 (ECO-HNO) /100/, 130 (Fu) /91/, 109 (RCO-NO-CO) /96/, где ,2,5,5-тетраметил-1-ОКСИЛ- -Л -пирролинил-3 и урацил.

Биологические испытани предлагаемых нитроксильных производных 5- -фторурацила.

Токсичность соединений определена в острых опытах при внутрибрюшинном введении препаратов и оценена по методу Бернса (по кривым накоплени частот гибели животных в зависимости от дозы). Работу вели на мышах чистых линий. Определение противоопухолевой активности проводили на перевиваемых опухол х крыс и мьшей.

358648

Использованы следующие опухоли мьаией: лейк.емии L-1210, Р-388, лейкоз La,, меланома В-16, аденокарцио- нома 755 (Са 755) и опухоли крыс: 5 аритромиелоз Швеца, Карциносаркома Уокера (КСУ), карционома Герена.

Лейкеми L-1210 перевиваетс внут- рибрюшинно, 10 клеток в 0,2 мл асцитической жи;1,кости, препараты 10 вводили внутрибрюпшнно, ежедневно, начина с 1-х суток, 5 раз.

Лейкеми Р-388. Перевиваетс внутрибрюшинно, 10 клеток в 0,2 мл асцита, препараты вводили внутри- 15 брюшинно ежедневно, начина с I «-х суток, 5 раз.

Лейкоз La острый гемоцитобластоз, получен в 1955 г от облученной мьши. Перевиваетс внутрибрюшинно взвесью 20 опухолевых клеток (10 клеток). Препараты вводили внутрибрюшинно, первое введение через 3 ч после заражени , затем ежедневно 7 введений.

Солидные опухоли перевивали опухо- 5 левой взвесью в разведении физиологическим раствором 1:1 по весу и вводили подкожно. Препараты вводили внутрибрюшинно, начина лечение через сутки после перевивки (дл карциномы Q Герена - 7 суток), ежедневно 10 вв,е- дений.

Препараты вводились в эквитоксич- 1 ньгх или эквимол рных дозах. Описание условий проведени опытов, критерии оценки противоопухолевого действи и результаты по терапевтической активности приведены в таблице.

5

Критерием оценки противоопухоле- вой активности на модел х Р-388 и L-1210 вл етс увеличение средней продолжительности жизни (УПЖ) опытных животных по сравнению с контрольными , %, которое вычисл ют по фор- муле

УПЖ

к где Lp - врем жизни животных в

опытной группе;

L| - врем жизни животньк в контрольной группе без введени препарата. На модели лейкоза La критерием противоопухолевой активности вл - етс кинетический критерий /JK ) Д оп и JK удельные скорости роста опухоли селезенки в опыте и контроле соответственно.

Сравнительную оценку широт терапевтического действи провод т по химиотерапевтическим индексам

(дл лейкемии L 1210)

ЛД,

Моо

je(дл лейкемии Р-388)

чпхчоо

где ЛД . - доза, вызьшающа 10% гибели животныхJ

EД jnЖйO

иЕД,| - величины доз, увеличивающих продолжительность жизни животных на 60 и 100%. Результаты по ан- тилейкемической активности предлагамых соединений и вз тых дл сравнени фторафура и 5-фторурацила также приведены в табл це.

На фиг. 1 приведены кинетические кривые увеличений массы селезенки при лейкозе La: в контроле (1) и при действии эквимолйртшк (0,2 мМ) доз фторафура (2), 5-фтструрацила (З) и наиболее aicTSfSHoro нз предлагаемых соединений 1г (4).

Из наклонов кинетических тсривых увеличени веса селезенки следует, что наиболее эффективно тормозит рост лейкоза La препарат 1г. Его активность несколько вьше,активности 5-фторурацила и во много раз превосходит активность фторафура.

В качестве показател противоопухолевой активности на солцдных опухол х используют процент торможе- ,ни Т увеличени объема опухоли по сравнению с контролем, который вычис л ют по формуле

т- iOO .(VK-VO)

v7

где У - средний объем отгухоли в контроле;

Oft

- Средний объем опухоли в опыте.

Испытани проведены на солидных опухол х: эритромиелоз Швеца, мела- нома В-16:(В-16), карционосаркома

Рассто ние между лини ми ЗПР- спектров Т (а-г) определ етс величиной константы сверхтонгсого взаимодействи aN, котора зависит от вещества и пол рности среды.

Характер спектра ЭПР пирролиноил

Уокера (КСУ) карционома Черена., аде-, урацилов I (а-г) зависит от враща .нокарцинома 755(Са-755).

На фиг.. 2 представлены кинетические кривые изменени объема опухоли Са-755 в контроле (1) и при действии наиболее активного из опи- сьшаемых соединений I г (2) и известного противоопухолевого препарата - фторафура.

55

тельной подвижности этих радикалов, поэтому по спектрам можно судить о в зкости системы, окружающей препар ты. Спектры ЭПР I (а-г), кроме того анизотропны, поэтому спектроскопи ЭПР позвол ет также различать анизо тропный и изотропкьй характер окружающей препараты среды.

)

10

15

3586410

Как видно из фиг. 2, соединение 1г значительно тормозит увеличение объема опухоли (70% торможени ), тогда как фторафур не про вл ет прот1геоолухолевого действи .

Проведенные испытани показали, что противоопухолева активность предлагаемых соединений I (а,б,в) при их скрининге оказалась несколько ниже, чем препаратов, вз тых дл сравнени , однако она определ лась с использованием малых доз этих соединений. Об этом свидетельствуют высокие значени химиотера- певтических индексов, рассчитанных дл увеличени продолжительности жизни на 40% (J ).

Таким образом, все предлагаемые соединени обладают противоопухолевой активностью, з гачительной широтой терапевтического действи и, кроме того, парамагнитными свойст - вами.

Парамагнетизм пирролиноилфторура- цилов I (а-г) обусловлен кеспарен- нымн электронами, которые локализованы , в основном, на атомах азота и кислорода нитроксильной группы. Наиболее универсальньм методом исследовани парамагнитных веществ вл етс метод электронного парамаг нитного резонанса (ЭПР), которьш дает информацию как о структуре веществ, так и о структуре их микроокружени .

20

25

30

Спектры ЭПР пирролиноилурацилов I (а-г) позвол ют однозначно идентифицировать эти препараты в ткан х, крови и вьщелени х организма, так как,они отличаютс от спектров парамагнетиков , присутствующих в организме .

Характер спектра ЭПР пирролиноил

тельной подвижности этих радикалов, поэтому по спектрам можно судить о в зкости системы, окружающей препараты . Спектры ЭПР I (а-г), кроме того, анизотропны, поэтому спектроскопи ЭПР позвол ет также различать анизотропный и изотропкьй характер окружающей препараты среды.

11

Метод ЭПР позвол ет не только надежно идентифицировать парамагнитны препараты I (а-г) и определ ть их локализацию в организме, но и с высокой точностью определ ть 1алые количества этих веществ. Метод ЭПР позвол ет определ ть до 10 моль Обычно примен емые лечебные дозы дл животных на 3 пор дка больше этой концентрации.

64

12

Использование парамаглитных сое-. динений позвол ет с помощью метода ЭПР определ ть их локализацию в организме , следить за накоплением их в органах, крови и выделени х организма . Все это значительно упрощает контроль лечебного процесса и позвол ет проводить работы по вы снению механизма противоопухолевой активности веществ.

S 8, W / /4 Фиг.1t.cym

12 7S

фиг.2

го 24 28 t,ey/n.

Составитель В. Волкова Редактор Н. Егорова Техред О.Сопко Корректор О. Лугова

Заказ 3058/21 Тираж 379Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР .

по делам изобретений и открьп ий 1 13035, Москва, Ж-35, Раушска наб.,, д. 4/5

Производственно-полиграфическое предпри тие , г, Ужгород, ул. Проектна , 4

Claims

Нитроксильные производные 5-фторурацила общей формулы

где а)

б)

в)

г)

КI —К 2 з 1 К₍ —, 1^2 »

—Н, Н₂ ⁼Е*51 Κ,-Ыа, К₂=Кэ;

к₃Н.зС,

Н₃с

с=о

№

сн₃

обладающие противоопухолевой активностью.

00

СЛ

00

йь

1

1235864
2