SU1151217A3 - Способ получени холестеринэстеразы - Google Patents
Способ получени холестеринэстеразы Download PDFInfo
- Publication number
- SU1151217A3 SU1151217A3 SU802966345A SU2966345A SU1151217A3 SU 1151217 A3 SU1151217 A3 SU 1151217A3 SU 802966345 A SU802966345 A SU 802966345A SU 2966345 A SU2966345 A SU 2966345A SU 1151217 A3 SU1151217 A3 SU 1151217A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- dsm
- pseudomonas
- spec
- producing
- inducer
- Prior art date
Links
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХОЛЕСТЕРИНЭСТЕРАЗН , предусматривающий культивирование продуцирующего микроорганизма Pseudomonas на питательной среде, содержащей минеральные соли, фосфатный буфер и индуктор с последующим выделением фермента из культуральной жидкости и/или клеток, отличающийс тем, что, с целью повьшени активности целевого продукта, в качестве продуцирующего микроорганизма используют штаммы Pseudomonas spec. DSM 1281 или Pseudoraonas spec, DSM 1280, a в качестве индуктора лецитин или соевый лецитин в количестве 0,5-2% от массы среды. (Л
Description
Изобретение относитс к микробиологической промышленности и касаетс способа получени холестеринэстеразн
Известен способ получени холестеринэстеразн , предусматривающий культивирование продуцирующего штамм Nocardia cho estero icum NRRL 5767 или NRRL 5768 на питательной среде, содержащей необходимые мине1 альные соли и индуктор - холестериновый эфир или холестерин в количестве 1-10 г/л и экстракт дрожжей с пойледующим выделением фермента. Максимальна активность фермента - 49,2.
Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому положительному эффекту вл етс способ получени холестеринэстеразн 2J , предусматривающий культивировакие продуцирующих штаммов Pseudomonas fluorescens KY 3955, 4032 .и т.д. на питательной среде, содержащей минеральные соли, фосфатный буфер и индуктор - холестериновый эфир с последующим выделением фермента из культуральной жидкости и/или клеток. Согласно способу используют питательную среду, содержащую, г/л: холестериновый эфир-5, кукурузный экстракт 2, NaNO, 2, KjHPQ, 1, КС2 0,5 и MgSO, 2. Активность фермента - 17.
Известным способам присущ общий недостаток - низка активность фермента .
Цель изобретени - повышение активности целевого продукта.
Поставленна цель достигаетс тем, что согласно способу получени холестеринэстеразн, пр едусматривающему культивирование продуцирующего микроорганизма Pseudomonas на питательной среде, содержащей минеральные соли, фосфатный буфер, и индуктор с последующим выделением фермента из культуральной жидкости и/или клеток, в качестве продуцирующего микроорганизма используют штаммы Pseudomonas spec. DSM 1281 или P seudomonas spec. DSM 1280, a в качестве индуктора - лецитин или соевый лецитин в количестве 0,5-2% от массы среды.
Примен емые в соответствии с изобретением микроорганизмы вл ютс очень похожими и обладают следующие признаки: грамотрицательный; об зательно аэробный; желтоватые колонки на агаре из пептонов м са; рост при 25, 30 и 37 С; отсутствие роста при 10j более размер клеток от 0,8 до 1 мкм, от 2 до 4 мкм; подвижность , lophotrich begeipelt; склонность к образованию цепей, отсутствие спор или продолжительных стадий: цитохром - оксидаза +; каталаза + ; индол-; нитрит-; желатина моносубстрат - деструкци : адонит + цитрат +; галактоза +; глюкоза +; изонит +; лактоза +; маннит +; манноза +; салицин +; сорбит +.
Процесс культивировани ведут в аэробных услови х при 15-45 С, предпочтительно между 25 и , использу посевные культуры, выращенные на качалке или на воздухе - Pumbersкультуры . Максимальный выход достигаетс после 1-2 суток культивировани .
Пример 1. Штамм Pseudomona spec, DSM 1280, перенесенный из охлажденной до низкой температуры ампулы в пробирку со скощенным агаром , предварительно культивировали в течение двух суток в основной культуральной среде при 30 С в аэробных услови х (качалочна колба) и затем в количестве до 10% пересевали в среду , котора имела на 1 л воды следующий состав:
Двузамещенный фосфорнокислый натрий7 г Однозамещенньй фосфорнокисльй калий 3 г Хлористьй аммоний 1 г Хлористый натрий 0,05 г 1%-нь1Й раствор хлорного железа 0,1 мл 0,2%-ный раствор хлористой меди . 0,1 мл 1%-ный раствор сернокислого цинка 0,1 мл 10%-нЫй раствор хлористого кальци 1,0 мл 12%-ный раствор сернокислого магни 5,0 мл Соевый лецитин 1,5% РН : 7,0
Культивирование производили при в качалочной колбе при соблюдении аэробных условий. Через 2 суток достигаетс активность приблизительно 1500 v/л (раствор и биомасса: субстрат : холестерилолеат). Примерно такой же выход получали в том случае, когда при прочих равных услови х вместо Pseudomonas spec. DSM 1280 примен ли Pseudomonas .spec. DSM 1281. Пример 2. Из культурального раствора, полученного в соответствии с примером 1, выдел ли центрифугированием нерастворимую клеточную массу и примен ли ее дл определени холестеринового эфира. Определение производили в соответствии со следующей схемой реакций: 1.Холесте- Холестерин-Холестерин+ РИНОВЫЙ+ экстераза кислота Н.О эфир жирного р д 2.Холесте- Холестери-Холестенонн рин+1/2 0 ноксидаза+ 0 (катализа) Дл измерени примен ли следующие растворы: 1.Фосфатный буфер 0,5 М, рН 7,5, 0,4% тезита. 2.Холестеринолеат с 4 в тезитдиоксане (v/v 1/1). 3.Hj,0 примерно 0,6 м (5 мл пергидрола/100 мл) . 4.Каталаза (0,01 мг белка/мл). 5.Холестериноксидаза (мин. 50 v/мл). 6.Культуральный раствор (примерно 5000 v/л, 1:5 разбавленный , 0,01 мл- тест). .Дл измерени 2,95 мл раствора 1 смешивают с 0,02 мл раствора 3. Через 5 мин добавл ют 0,01 мл раствора 6 и 0,02 мл раствора 5 и спуст 1 мин инициируют реакцию добавлением . 0,1 мл раствора 2. Расчет осуществл ют по формуле 3,12-51000 „/ . , Т5 5 0 ОТЛЕ/МИН v/л культурального раствора. Таким образом, предлагаемый способ позвол ет значительно повысить активность холестеринэстеразн.
Claims (1)
- СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХОЛЕСТЕРИНЭСТЕРАЗН, предусматривающий культивирование продуцирующего микроорганизма Pseudomonas на питательной среде, содержащей минеральные соли, фосфатный буфер и индуктор с последующим выделением фермента из культуральной жидкости и/или клеток, отличающийся тем, что, с' целью повышения активности целевого продукта, в качестве продуцирующего микроорганизма используют штаммы Pseudomonas spec. DSM 1281 или Pseudomonas spec. DSM 1280, а в качестве индуктора лецитин или соевый лецитин в коли- с честве 0,5-2% от массы среды.ω1151217 2
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE19792933646 DE2933646A1 (de) | 1979-08-20 | 1979-08-20 | Verfahren zur gewinnung von cholesterinesterase |
DE19792933648 DE2933648A1 (de) | 1979-08-20 | 1979-08-20 | Verfahren zur gewinnung von cholesterinesterase |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1151217A3 true SU1151217A3 (ru) | 1985-04-15 |
Family
ID=25780607
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU802966345A SU1151217A3 (ru) | 1979-08-20 | 1980-08-15 | Способ получени холестеринэстеразы |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1151217A3 (ru) |
-
1980
- 1980-08-15 SU SU802966345A patent/SU1151217A3/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
1. Патент FR № 2362927, кл, С 12 D 13/10, опублик. 1978. 2, Патент FR № 2274686, кл. С 12 D 13/10, опублик, 1976 (прототип). * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US3634195A (en) | Production of lipase | |
US4283494A (en) | Microbial lipase, process for its preparation and microbiologically pure culture therefor | |
US4387163A (en) | Process for producing the enzyme cholesterol esterase and for hydrolyzing cholesterol esters of fatty acids by using the enzyme itself | |
US4985364A (en) | Preparation of cyclopropanecarboxylic acids | |
CA2047306A1 (en) | Mutant bacterium clostridium histolyticum, a process for the obtaining thereof, and its use in the production of clostripain-free collagenase | |
US4450238A (en) | Biologically pure culture of Saccharomyces cerevisiae | |
US3912592A (en) | Method for producing L-sorbosone | |
Stark et al. | Isolation of bacterial, cell-free, starch saccharifying enzymes from the medium at 70 C | |
RU2096460C1 (ru) | Способ получения s-(+)-2,2-диметилциклопропанкарбоксамида, штаммы бактерий comamonas acidovorans, pseudomonas sp., bacterium sp., предназначенные для получения s-(+)-2,2-диметилциклопропанкарбоксамида (варианты) | |
SU1151217A3 (ru) | Способ получени холестеринэстеразы | |
HU181488B (en) | Process for the hydrolysis of racemic hydantoins into optically active n-carbamoyl-aminoacid derivatives and for preparing the hydrolyzing enzymatic complex | |
US3980520A (en) | Process for the production of l-malic acid by microbiological fermentation and means suitable for carrying out the same | |
US4011135A (en) | Production of L(+)-tartaric acid | |
US4360596A (en) | Process for the preparation of cholesterol esterase | |
Arima et al. | BACTERIAL OXIDATION OF DIPICOLINIC ACID I: Isolation of Microorganisms, Their Culture Conditions, and End Products | |
JPS6243671B2 (ru) | ||
DK148362B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af kolesterinesterase | |
SU1472502A1 (ru) | Способ получени бактериальной холинэстеразы | |
JPH04365473A (ja) | クリプトコッカス・ラウレンティdsm2762 | |
GB1412244A (en) | Enzyme preparations and microbiological production thereof | |
KR820000907B1 (ko) | 글루코오스 산화효소의 제조방법 | |
SU767196A1 (ru) | Способ выращивани продуцентов литических ферментов | |
JPH0378106B2 (ru) | ||
SU960256A1 (ru) | Штамм eRWINIa саRотоVоRа МЛ-1-продуцент транс-элиминазы | |
SU1507788A1 (ru) | Способ получени биомассы дрожжей CaNDIDo тRорIсаLIS К-1 |