СОWITH
| Изобретение относитс к микробиологической промышленности, а именно к микробиологическому способу получени липидов, обладающих хемотаксическим действием. SlvmHflfA, содержащие эпокси-оксипроизводные полиненасышенных жирных кислот, обладающие хемотаксическим действием дл полиморфно дернык . лейкоцитов, могут быть использованы как средство дл усилени иммунного ответа организма при онкологических и почечных заболевани х. Известен способ получени липидов , предусматривающий культивирование грибов l . Полученные при этом липиды не обладают хемотаксическим действием. Известен способ получени липидов обладающих хемотаксическим действием согласно которому аракидоновую кисл оту инкубируют с тромбоцитами, выделенньми из крови животных с последующим вьщелением 10-окси-11,12эпокси-5 ,8,14-эйкозатриеновой кислоты , обладающей хемотаксическим действием 2 . Недостатком способа вл етс его сложность, св занна с трудностью получени тромбоцитов и арахидоновой кислоты высокой степени чист.оты. Цель изобретени - повышение выхода липидов. Указанна цель достигаетс тем, что согласно способу получени липидов , обладающей хемотаксическим действием, выращиванию подвергают штамм грибов Fusarium sainbucinum ВК F-842 на питательной среде, содержа щей источники углерода, азота и фос фора, при азрации воздухом, составл ющей 0,8-1,2 л/л/мин, с последующим отделением биомассы и выделением целевого продукта. Способ осуществл ют следующим об разом. Гриб Fusarium sambucinum БКМ F-8 выращивают на жидкой питательной ср де при аэрации 0,8-1,2 л/л/мин. Изм неине аэрации в сторону уменьшени или увеличени указанного интервала при водит к уменьшению выхода липидов. После завершени ферментации био массу отдел ют, высушивают на возду хе и измельчают До порошкообразного состо ни . Липиды экстрагируют органическими растворител ми и анал зируют с помощью газовой хроматографии . Пример 1. Мицелий гриба Fusarium sainbucinum ВКМ F-842 вырапщвают в ферментационном аппарате объемом 250 л (рабочий объем 125 л) на питательной .среде, содержащей 0,25% картофельного крахмала, 2% сахарозы, 0,15% однозамещенногй фосфорнокислого кали , 0,3% азотнокислого аммони , в периодическом режиме в течение 36 ч при , скорости аэрировани 1,0 л/л/мин и посто нном перемешивании (скорость оборотов мешалки 126 об/мин). После завершени ферментации мицелиальную биомассу отдел ют от культуральной жидкости на вакуумном фильтре и получают 6375 г прессованной биомассы, которую далее высушивают на воздухе при 28-30 С в течение 24 ч и измельчают в измельчителе тканей при 700 об/мин до порошкообразного состо ни . К 630 г полученной сухой биомассы добавл ют 150 мп 2%-ного раствора додецилсульфата натри , перемешивают в течение 10 мин, добавл ют 36 л смеси этанол-эфир (1:1) и экстрагируют липиды при перемешивании в реакторе в течение 6 ч при 26-28 С. Остаток отдел ют фильтрованием и фильтрат упаривают сначала в вакуумном испарителе типа Simax до объема 600 мл затем на роторном испарителе в вакууме при 35 С до сухого остатка. Получают 99,5 г липидов (15,0 г в 100 г сухой биомассы ) . Дл определени содержани жирных кислот в липидах провод т гидролиз полученного экстракта. Образец обезвоженньк липидов (1г) гидролизуют 10 мл 1 н. J аОН в метаноле в течение 1 ч при 30 С. По окончании гидролиза добавл ют к смеси 10 мл натрий-фосфатного буфера (,0) и экстрагируют смесь 3 раза порци ми по 15 мл гептаном, подкисл ют водно-метанольный остаток 2 н. НС до ,8-4,0 и экстрагируют 3 раза порци ми по 15 мл хлороформом. Хлороформенные экстракты объедин ют и упаривают на роторном испарителе в вакууме досуха . Получают смесь жирных кислот в количестве 0,29 г. Жирные кислоты в виде метиловых эфиров анализируют газохроматографИ чески (ГЖХ) на хроматографе марки| The invention relates to the microbiological industry, namely to the microbiological method for the preparation of lipids with chemotactic action. SlvmHflfA, containing epoxy-hydroxy derivatives of polyunsaturated fatty acids, which have a chemotactic effect for polymorphically turf. leukocytes can be used as a means to enhance the body's immune response in cancer and kidney diseases. A method of producing lipids is known, which involves the cultivation of fungi l. The resulting lipids do not have a chemotactic effect. A known method for producing lipids with a chemotactic effect, according to which arakidonovuyu acid is incubated with platelets isolated from the blood of animals, followed by the separation of 10-hydroxy-11,12 epoxy-5, 8,14-eicosatrienoic acid, which has chemotactic action 2. The disadvantage of the method is its complexity due to the difficulty of obtaining platelets and arachidonic acid of high purity. The purpose of the invention is to increase the yield of lipids. This goal is achieved by the fact that, according to the method for producing lipids having a chemotactic effect, the strain of the fungi Fusarium sainbucinum BF F-842 is subjected to cultivation in a nutrient medium containing sources of carbon, nitrogen and phosphorus, with air of 0.8-1 , 2 l / l / min, followed by the separation of biomass and the selection of the target product. The method is carried out as follows. The mushroom Fusarium sambucinum PCM F-8 is grown on liquid nutrient sr de with aeration of 0.8-1.2 l / l / min. Measuring aeration in the direction of decreasing or increasing this interval leads to a decrease in lipid yield. After the fermentation is complete, the biomass is separated, dried in air and crushed to a powder. The lipids are extracted with organic solvents and analyzed by gas chromatography. Example 1. Mycelium of the fungus Fusarium sainbucinum VKM F-842 is grown in a 250 l fermentation apparatus (working volume 125 l) in a nutrient medium containing 0.25% potato starch, 2% sucrose, 0.15% potassium phosphate, 0 , 3% ammonium nitrate, in a batch mode for 36 hours at an aeration rate of 1.0 l / l / min and constant stirring (stirrer speed 126 rpm). After fermentation, mycelial biomass is separated from the culture fluid on a vacuum filter and 6375 g of compressed biomass is obtained, which is then dried in air at 28-30 ° C for 24 hours and ground in a tissue grinder at 700 rpm to a powder. 150 mp of 2% sodium dodecyl sulfate solution are added to 630 g of the obtained dry biomass, stirred for 10 minutes, 36 l of ethanol-ether (1: 1) are added and the lipids are extracted with stirring in a reactor for 6 hours at 26 -28 ° C. The residue is filtered and the filtrate is evaporated, first in a Simax type vacuum evaporator, to a volume of 600 ml, then on a rotary evaporator in vacuo at 35 ° C to a dry residue. 99.5 g of lipids are obtained (15.0 g per 100 g of dry biomass). To determine the fatty acid content of lipids, the resulting extract is hydrolyzed. A sample of dehydrated lipids (1g) is hydrolyzed with 10 ml of 1N. JONH in methanol for 1 hour at 30 ° C. At the end of the hydrolysis, 10 ml of sodium phosphate buffer (0) are added to the mixture and extracted with 3 times in 15 ml portions of heptane, acidified with water-methanol residue 2N. HC is 8-4.0 and extracted 3 times with 15 ml portions of chloroform. The chloroform extracts are combined and evaporated on a rotary evaporator under vacuum until dry. A mixture of fatty acids in the amount of 0.29 g is obtained. The fatty acids in the form of methyl esters are analyzed by gas chromatography (GLC) on a chromatograph of the brand