SK88496A3 - Cyclic derivatives, manufacturing process thereof, pharmaceutical compositions containing them and their use antifungal sordaridin derivatives - Google Patents

Abstract

A compound represented by formula (I), wherein Z is a tetrahydro-pyrano group selected from (a) and (b), having antifungal activity, processes for their preparation and their use in medicine.

Description

Cyklické deriváty, spôsob ich výroby, farmaceutické prostriedky s ich obsahom a ich použitieCyclic derivatives, process for their preparation, pharmaceutical compositions containing them and their use

Oblasť technikyTechnical field

Vynález sa týka cyklických derivátov, najmä derivátov sordarínu s antifungálnym účinkom, spôsobu výroby týchto látok a farmaceutických prostriedkov, ktoré tieto látky obsahujú a sú určené na liečenie alebo na prevenciu chorôb, spôsobených hubami u živočíchov vrátane človeka.The invention relates to cyclic derivatives, in particular sordarin derivatives having antifungal activity, to a process for the preparation of these substances and to pharmaceutical compositions containing them and intended for the treatment or prevention of diseases caused by fungi in animals, including humans.

Doterajší stav technikyBACKGROUND OF THE INVENTION

V britskom patentovom spise č. 1 162 027 sa opisuje príprava antibiotika SL2266 kultiváciou kmeňa NRRL 3196 huby Sordaria araneosa. Toto antibiotikum, neskoršie označované sordarín má fungistatickú účinnosť. Tí .istí autori opísali tiež degradáciu sordarínu na sordaricín v Helvetica Chimica Acta, 1971, 51, 119 až 120. Zverejnená japonská patentová prihláška č. 76 2040292A opisuje spôsob výroby antibiotika zofimarínu, pre toto antibiotikum sa tiež uvádza antif ungá'lna účinnosť.In British Pat. No. 1,162,027 describes the preparation of the antibiotic SL2266 by culturing a strain of NRRL 3196 from Sordaria araneosa. This antibiotic, later called sordarin, has fungistatic efficacy. These authors have also described the degradation of sordarin to sordaricin in Helvetica Chimica Acta, 1971, 51, 119-120. 762040292A discloses a method for producing the antibiotic zofimarin, the antibiotic also disclosing antifungal activity.

Pre sordarín, sordaricín a zofimarín je možné uviesť nasledujúci spoločný všeobecný vzorec AFor sordarin, sordaricin and zofimarin, the following general formula A may be given:

kde v prípade, že OR znamená skupinuwherein when OR is a group

ide o sordarín, v prípade, že OR znamená OH, ide o sordaricín a v prípade, že OR znamená skupinu ococh=^zch-ch=^echch₃ ^H0^\-'^0CH3 . i ide o zofimarín.to the sordarin, where the OR is OH, to the sordaricin and, where OR is a group OCOCH = ^Z CH = CHCH ₃ ^{H0 e} ^ \ - ^'0CH third This is zofimarin.

ο^Λθ th₃ ο ^Λ θ th ₃

Aj napriek tomu, že sordarín a zofimarín majú antifungálnu účinnosť, sú obe tieto zlúčeniny len málo účinné a majú obmedzené spektrum účinku pri testovaní proti celému radu hubových organizmov.Although sordarin and zofimarin have antifungal activity, both compounds have little activity and have a limited spectrum of activity when tested against a variety of fungal organisms.

Teraz bola zistená nová skupina fungicídnych sordarínových drivátov s veľmi dobrou antifungálnou účinnosťou a súčasne so širokým spektrom účinku.A new class of fungicidal sordarin drivatives with a very good antifungal activity and a broad spectrum of activity has now been found.

Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION

Podstatu vynálezu tvoria cyklické deriváty všeobecného vzorca IThe present invention provides cyclic derivatives of formula (I)

(D kde Z je tetrahydropyránová skupina a) alebo b)(D wherein Z is tetrahydropyran group a) or b)

(a)(A)

(b)(B)

ako aj farmaceutický prijateľné soli a solváty, napríklad hydráty týchto zlúčenín alebo ich metabolický labilné deriváty, v ktorýchas well as pharmaceutically acceptable salts and solvates, for example, hydrates of these compounds or metabolic labile derivatives thereof, in which:

R¹ znamená atóm vodíka alebo halogénu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka alebo acyloxyskupinu,R ¹ is hydrogen or halogen, hydroxy, C 1 -C 4 alkoxy or acyloxy,

R^x a nezávisle znamenajú atóm vodíka, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkoxyalkyl s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti alebo tvoria spoločne s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, skupinu C=0, C=S alebo cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka,R ^x and independently represent hydrogen, C 1 -C 6 alkyl or C 1 -C 4 alkoxyalkyl in each moiety or together with the carbon atom to which they are attached form C = O, C = S or C 3 -C 3 cycloalkyl up to 8 carbon atoms,

R⁴ znamená atóm vodíka alebo skupinu CI^R, v ktorej R' je atóm vodíka, hydroxyskupina alebo alkoxyskupinaR ⁴ represents a hydrogen atom or a C 1 R ⁴ group in which R 1 is a hydrogen atom, a hydroxy group or an alkoxy group

O s 1 až 4 atómami uhlíka alebo skupina OCOR , v ktorej R⁸ je alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka alebo aryl, r5 a R⁶ nezávisle znamenajú atóm vodíka, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkoxyalkyl s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti alebo tvoria spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, skupinu C=0, C=S alebo cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka, n znamená celé číslo 0 alebo 1,O with 1 to 4 carbon atoms or an OCOR group in which R ⁸ is alkyl of 1 to 4 carbon atoms or aryl, r ⁵ and R ⁶ independently represent hydrogen, alkyl of 1 to 6 carbon atoms or alkoxyalkyl of 1 to 4 carbon atoms in each moiety or together with the carbon atom to which they are attached form C = O, C = S or C 3 -C 8 cycloalkyl, n represents an integer of 0 or 1,

X a Y nezávisle znamenajú atóm kyslíka alebo síry alebo skupinu CR^rI-Q (kde R⁹ a R¹® nezávisle znamenajú vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka alebo alkoxyalkyl s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti alebo tvoria spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, skupinu C=0, C=S, cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka alebo skupinu C=CHR¹¹, v ktorej R¹¹ je atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka), alebo v prípade, že X aleboX and Y independently represent an oxygen or sulfur atom or a CR 1 R 1 -Q group (wherein R ⁹ and R ¹⁰ independently represent hydrogen, alkyl of 1 to 6 carbon atoms, alkoxy of 1 to 4 carbon atoms or alkoxyalkyl of 1 to 4 atoms in each moiety or together with the carbon atom to which they are attached form C = O, C = S, C 3 -C 8 cycloalkyl or C = CHR ¹¹ in which R ¹¹ is hydrogen or C 1 -C 8 alkyl; to 4 carbon atoms), or in the case of X or

33

Y znamená atóm kyslíka a n =0, môžu skupiny -Y-CR RY represents an oxygen atom and n = 0, the groups -Y-CR R can be

O Q Q alebo -X-CR R znamenať tiež skupiny -N=CR - alebo -NR¹²-CR²R³- (kde CR² a R³ znamenajú skupinu C=0 q 9 a R znamená alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka alebo acyl 13 13 vzorca COR , kde R znamená alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka) alebo v prípade, že Y znamená atóm kyslíka a n = 0, môže X znamenať skupinu CR¹¹ (kde R¹¹ má vyššie uvedený význam), viazanú na pyránový kruh dvojitou väzbou,OQQ or -X-CRR is also -N = CR- or -NR ¹² -CR ² R ³ - (wherein CR ² and R ³ are C = O q 9 and R is C 1 -C 4 alkyl or acyl 13 13 of formula COR (where R is alkyl of 1 to 6 carbon atoms) or, when Y is oxygen and n = 0, X may be CR ¹¹ (where R ¹¹ is as defined above) attached to the pyran ring double bond,

R¹⁵ znamená atóm vodíka alebo halogénu, azidoskupinu, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka (pripadne substituovanú jednou alebo dvoma hydroxyskupinami alebo jej acetál alebo substituovanú jednou alebo dvoma alkoxyskup.inami s 1 až 3 atómami uhlíka) , arylalkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, alkenyl18 oxyskupinu s 3 až 6 atómami uhlíka, skupinu OCOR (kde R¹⁸ znamená arylalkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovej časti alebo alkyl s 1 až 10 atómami uhlíka, prípadne obsahujúci jednu alebo dve dvojité väzby) alebo alkoxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v prvej a s 1 až 4 atómami uhlíka v druhej alkoxylovej časti aR ( ¹⁵⁾ is hydrogen or halogen, azido, (C1-C6) alkyl, hydroxy, (C1-C6) alkoxy (optionally substituted by one or two hydroxy or its acetal or substituted by one or two (C1-C3) alkoxy) C 1 -C 4 arylalkoxy, C 1 -C 6 alkenyl 18 oxy, OCOR (where R ¹⁸ is C 1 -C 4 arylalkoxy or C 1 -C 10 alkyl, optionally containing one or two double bonds) or an alkoxycarbonylalkoxy group having from 1 to 6 carbon atoms in the first and from 1 to 4 carbon atoms in the second alkoxy moiety, and

R¹⁶ znamená atóm vodíka alebo tvorí a R¹^ spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, skupinu C=0 alebo c=ch₂,R ¹⁶ is H or forms a ^1, and R ^ together with the carbon atom to which they are attached represent a group C = 0 or C = _CH2,

R¹⁷ znamená skupinu CH₂R¹^, v ktorej R¹⁹ znamená atóm vodíka, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 14 atómami 9 n 9 n uhlíka alebo skupinu OCOR , v ktorej R znamená alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka aR ¹⁷ is CH ₂ R ¹ , wherein R ¹⁹ is hydrogen, hydroxy, C 1 -C 14 alkoxy or OCOR, wherein R is C 1 -C 4 alkyl, and

V znamená atóm kyslíka alebo síry alebo skupinu CH₂ a prerušovaná čiara v skupine a) znamená prípadnú prítomnosť ďalšej väzby.V represents an oxygen or sulfur atom or a CH ₂ group and the dotted line in group a) represents the optional presence of an additional bond.

Vhodné .farmaceutický prijateľné soli zlúčenín všeobecného vzorca I zahrnujú soli s anorganickými bázami, napríklad s alkalickými kovmi, ako soli sodné alebo draselné, amónne soli a soli s organickými bázami. Ako vhodné organické bázy je možné uviesť soli s amínmi, napríklad s trialkylSuitable pharmaceutically acceptable salts of the compounds of formula I include salts with inorganic bases such as alkali metals such as sodium or potassium salts, ammonium salts and salts with organic bases. Suitable organic bases include salts with amines such as trialkyl

amínmi, ako trietylaminom, soli s dialkylamínmi, ako dicyklohexy'lamínom, soli s prípadne substituovaným benzylamínom, ako fenylbenzylamínom alebo p-brómbenzylamínom, soli s prokaínom, etanolaminom, dietanolamínom, N-metylglukozamínom a tri(hydroxymetyl)-metylaminom a soli s aminokyselinami, ako lyzínom alebo arginínom.amines such as triethylamine, salts with dialkylamines such as dicyclohexylamine, salts with optionally substituted benzylamine such as phenylbenzylamine or p-bromobenzylamine, salts with procaine, ethanolamine, diethanolamine, N-methylglucosamine and tri (hydroxymethyl) amines, such as lysine or arginine.

Pokiaľ ide v priebehu prihlášky o zlúčeniny všeobecného vzorca I, rozumejú sa pod týmto pojmom vždy aj farmaceutický prijateľné soli uvedených látok.As used herein, the term "pharmaceutically acceptable salts" of the compounds of the formula (I) is to be understood.

Deilšie soli, ktoré nie sú farmaceutický prijateľné, je možné použiť na výrobu cyklických derivátov všeobecného vzorca I, tieto soli tvoria tiež jedno z uskutočnení vynálezu .Other non-pharmaceutically acceptable salts can be used to produce the cyclic derivatives of formula (I), which also form one embodiment of the invention.

Metabolický labilné deriváty zlúčenín všeobecného vzorca I sú zlúčeniny, ktoré sa v organizme menia na zlúčeniny všeobecného vzorca I. Ako príklady takýchto derivátov je možné uviesť bežne známe metabolický labilné estery, vytvorené na voľnej karboxylovej skupine v molekule.Metabolic labile derivatives of the compounds of formula (I) are compounds which are converted into compounds of formula (I) in the body. Examples of such derivatives include the commonly known metabolic labile esters formed on the free carboxyl group in the molecule.

Vynález zahrnuje tiež akékoľvek jednotlivé izoméry vrátane optických izomérov zlúčenín všeobecného vzorca I a ich zmesi vrátane celkom alebo čiastočne racemických zmesí.The invention also includes any individual isomers including optical isomers of the compounds of Formula I and mixtures thereof including wholly or partially racemic mixtures.

Alkylové skupiny ako samostatné skupiny alebo ako časti iných skupín môžu mať priamy alebo rozvetvený reťazec. Ako príklady týchto skupín je možné uviesť metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, n-butyl, sek.butyl a terc.butyl, n-hexyl a n-oktyl.Alkyl groups as separate groups or as parts of other groups may have straight or branched chain. Examples of such groups include methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, sec-butyl and tert-butyl, n-hexyl and n-octyl.

Arylové skupiny ako samostatné skupiny alebo ako časť .iných skupín môžu znamenať fenyl alebo heteroaryl, tieto skupiny môžu byť substituované jedným alebo väčším počtom, napríklad 1, 2 alebo 3 atómami alebo skupinami zo skupiny atóm halogénu, hydroxyskupina, alkyl alebo alkoxyl vždy s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkoxykarbonyl s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti. Heteroarylovou skupinou môže by č 5- alebo 6-členný heteroaromatický kruh a obsahom jedného alebo väčšieho počtu heteroatómov zo skupiny dusík, kyslík a síra. Vhodným príkladom heteroarylových skupín môžu byť pyridyl, furyl, tienyl a pyrolyl.Aryl groups as separate groups or as part of other groups may be phenyl or heteroaryl, which groups may be substituted by one or more, for example 1, 2 or 3, halogen or hydroxy, alkyl or alkoxy groups having from 1 to 2 C 1 -C 4 alkoxycarbonyl or C 1 -C 4 alkoxycarbonyl. The heteroaryl group may be a 5- or 6-membered heteroaromatic ring containing one or more heteroatoms selected from nitrogen, oxygen and sulfur. Suitable examples of heteroaryl groups include pyridyl, furyl, thienyl and pyrrolyl.

Atómom halogénu sa rozumie atóm .fluóru, chlóru, brómu alebo jódu.Halogen means fluorine, chlorine, bromine or iodine.

V prípade, že R¹ znamená acyloxyskupinu, môže ísť napríklad o skupinu OCOR , kde R má vyššie uvedený význam.Where R ¹ is acyloxy, it may be, for example, OCOR, where R is as defined above.

Príkladom cykloalkylovej skupiny s 3 až 8 atómami uhlíka môžu byť cyklopentyl a cyklohexyl.Examples of C 3 -C 8 cycloalkyl include cyclopentyl and cyclohexyl.

Ako príklady skupiny X je možné uviesť atóm kyslíka, skupinu CR^R¹⁰, kde R⁹ a R¹⁰ znamenajú atómy vodíka, alkoxyl alebo alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka alebo CR°R¹⁰ vo význame C=0 alebo C=CHR¹¹, napríklad C=CH₉ alebo môže X znamenať CR¹¹.Examples of X groups include O, CR & R ^10, wherein R ⁹ and R ¹⁰ are hydrogen, alkoxy or alkyl of 1 to 4 carbon atoms or a CR c R ¹⁰ in the meaning of C = 0 or C = CHR ¹¹ , for example C = CH ₉ or X may be CR ¹¹ .

Ako príklad vhodných skupín Y je možné použiť kyslík alebo , kde R⁹ je atóm vodíka, alkoxyskupina alebo alkyl vždy s 1 až 4 atómami uhlíka a R¹® znamená atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka.Examples of suitable Y groups include oxygen or wherein R ⁹ is hydrogen, alkoxy or alkyl of 1 to 4 carbon atoms and R ¹⁰ is hydrogen or alkyl of 1 to 4 carbon atoms.

V prípade, že R znamená nenasýtenú alkylovú skupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, môže zvlášť ísť o alkyl s 5 až 8 atómami uhlíka s priamym alebo rozvetveným reťazcom s dvoma dvojitými väzbami, napríklad -CH=^CH-CH=^CHCH₃.If R is an unsaturated alkyl radical having 1 to 10 carbon atoms, may specifically be an alkyl of 5-8 carbon atoms, straight or branched chain with two double bonds, e.g., -CH = CH-CH ^ CHCH ^ _third

V prípade, že R¹⁵ znamená alkoxyskupinu, substituovanú hydroxyskupinou alebo alkoxyskupinou, môže napríklad ísť o 2,3-díhydroxypropoxyskupinu alebo odvodený acetál acetónu, odvodený od tejto skupiny alebo o 2,3-dimetoxypropoxyskupiWhen R ¹⁵ is an alkoxy group substituted by a hydroxy or alkoxy group, it may be, for example, a 2,3-dihydroxypropoxy group or a derived acetone acetal derived therefrom or a 2,3-dimethoxypropoxy group.

nu.nu.

R¹⁵ je s výhodou atóm vodíka pri R¹⁵ v konfigurácii a.R ¹⁵ is preferably a hydrogen atom at R ¹⁵ in the a configuration.

R¹ môže znamenať napríklad atóm vodíka alebo hydroxylovú skupinu.R ¹ may for example be a hydrogen atom or a hydroxyl group.

R môže znamenať napríklad atóm vodíka alebo alkylR can be, for example, hydrogen or alkyl

Q s 1 až 4 atómami uhlíka, napríklad metyl a R môže znamenať napríklad atóm vodíka, alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, napríklad metyl, etyl alebo n-propyl alebo alkoxyalkyl s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti, napríklad metoxyetyl alebo môže skupina CR^R^-9 znamenať C=O, C=S alebo cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka, napríklad cyklopentyl.Q is C 1 -C 4, for example methyl, and R can be, for example, hydrogen, C 1 -C 4 alkyl, for example methyl, ethyl or n-propyl, or C 1 -C 4 alkoxyalkyl in each moiety, for example methoxyethyl, or CR (R) ^{-9 is} C = O, C = S or C 3 -C 8 cycloalkyl, for example cyclopentyl.

R⁴ môže znamenať napríklad metyl alebo alkoxymetyl s 1 až 4 atómami uhlíka, napríklad metoxymetyl.R ⁴ can be, for example, methyl or C 1 -C 4 alkoxymethyl, for example methoxymethyl.

R⁵ a R⁵ môžu nezávisle znamenať atóm vodíka alebo alkyl s .1 až 4 atómami uhlíka, napríklad metyl.R ⁵ and R ⁵ can independently be hydrogen or C 1 -C 4 alkyl, for example methyl.

Ako príklady kruhových systémov, predstavovaných skupinouAs examples of the ring systems represented by the group

Ako príklady skupín R¹⁵ je možné uviesť atóm halogénu, napríklad fluóru, azidoskupinu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, benzyloxyskupinu, benzyloxykarbonyloxyskupinu, alkoxykarbonyloxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, alkoxyalkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti, ako metoxyetoxyskupinu, alkoxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v každej alkoxylovej časti, alkylkarbonyloxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovej časti, 2,3-dihydroxypropoxyskupinu a jej acetoacetál, 2,3-dimetoxypropoxyskupinu, alkenyloxyskupinu s 3 až 6 atómami uhlíka, ako alyloxyskupinu alebo 3-metylalyloxyskupinu alebo tvorí R¹⁵ a R¹⁶ spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané skupinu C=0 alebo C=CH2r!1 môže znamenať napríklad metyl alebo alkoxymetyl s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, ako metoxymetyl alebo hydroxymetyl.Examples of R ¹⁵ include halogen, for example fluorine, azido, hydroxy, C 1 -C 4 alkoxy, benzyloxy, benzyloxycarbonyloxy, C 1 -C 4 alkoxycarbonyloxy, C 1 -C 4 alkoxyalkoxy moieties such as methoxyethoxy, C 1 -C 4 alkoxycarbonylalkoxy, C 1 -C 4 alkylcarbonyloxy, 2,3-dihydroxypropoxy and its acetoacetal, 2,3-dimethoxypropoxy, alkenyloxy 6 , such as allyloxy or 3-methylalyloxy, or form R ¹⁵ and R ¹⁶ together with the carbon atom to which they are bonded C = O or C = CH 2 R 11 may mean, for example, methyl or C 1 -C 4 alkoxymethyl in the alkoxy moiety, such as methoxymethyl or hydroxymethyl.

R¹⁵ s výhodou znamená ailkoxyskupinu s 1. až 4 atómami uhlíka, alkenyloxyskupinu s 3 až 4 atómami uhlíka, benzyloxyskupinu alebo OCOR⁴, kde R⁴ je alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, zvlášť v konfigurácii a.R ¹⁵ is preferably C 1 -C 4 alkoxy, C 3 -C 4 alkenyloxy, benzyloxy or OCOR ⁴ , wherein R ⁴ is C 1 -C 4 alkyl, especially in the a configuration.

R s výhodou znamená metyl, M s výhodou znamená atóm kyslíka.R is preferably methyl, M is preferably oxygen.

Zvlášť výhodnú skupinu zlúčenín podľa vynálezu tvoria cyklické deriváty všeobecného vzorca I, v ktorom Z znamená skupinuA particularly preferred group of compounds of the invention are cyclic derivatives of formula I wherein Z is

kde jeden zo symbolovwhere one of the symbols

X a Y znamená atóm kyslíka a druhý znamená skupinu CR⁹R¹⁸.X and Y are oxygen and the other is CR ⁹ R ¹⁸ .

Zo zlúčenín z tejto skupiny zvlášť výhodné sú tie látky, v ktorých R¹ znamená hydroxyskupinu alebo atóm vodíka, X znamená atóm kyslíka alebo skupinu CR⁹R¹⁸, v ktorej R⁹ znamená atóm vodíka, alkoxyskupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka a R¹⁸ znamená atóm vodíka alebo znamená skupina CR⁹R¹⁸ skupinu C=0 alebo C=CHR¹¹, Y znamená atóm kyslíka alebo skupinu CHR⁹, kde R⁹ znamená vodík alebo alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, R a R nezávisle znamenajú vodík, alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, napríklad metyl alebo propyl alebo alkoxya'lkyl s 1 až 4 atómami uhlíka v al2 3 koxylovej časti, ako metoxymetyl alebo R a R tvoria spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané cyklopentylovú skupinu, skupinu C=0 alebo C=S a R⁵ a R⁶ s výhodou znamenajú atómy vodíka.Particularly preferred compounds of this group are those wherein R ¹ is hydroxy or hydrogen, X is oxygen or CR ⁹ R ¹⁸ wherein R ⁹ is hydrogen, C 1 -C 3 alkoxy, And R ¹⁸ is hydrogen or CR ⁹ R ^{18 is} C = O or C = CHR ¹¹ , Y is oxygen or CHR ⁹ wherein R ⁹ is hydrogen or C 1 -C 4 alkyl , R and R independently represent hydrogen, alkyl of 1 to 4 carbon atoms, for example methyl or propyl or alkoxyalkyl of 1 to 4 carbon atoms in the 13-3 alkoxy moiety such as methoxymethyl or R and R together with the carbon atom on which they form are C-O or C-S, and R ⁵ and R ⁶ are preferably hydrogen atoms.

V prípade, že R¹ znamená hydroxyskupinu alebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, nachádza sa táto skupina s výhodou v axiálnej konfigurácii. S výhodou však R¹ znamená atóm vodíka.Where R ¹ is hydroxy or alkoxy of 1 to 4 carbon atoms, this group is preferably in the axial configuration. Preferably, however, ^R1 is a hydrogen atom.

R² a R³ môžu nezávisle znamenať zvlášť atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka.R @ ² and R @ ³ can each independently be hydrogen or C1 -C4 alkyl.

R⁴ s výhodou znamená metyl, R⁵ a R⁶ s výhodou znamenajú atómy vodíka a n s výhodou znamená 0.R ⁴ is preferably methyl, R ⁵ and R ⁶ are preferably hydrogen atoms and preferably is 0.

Výhodný kruhový systém, com predstavovaný všeobecným vzor-The preferred ring system, represented by the general pattern

je napríklad skupinais, for example, a group

Q kde R a R majú vyššie uvedený význam aQ wherein R and R are as defined above and

X a Y nezávisle znamenajú atóm kyslíka alebo skupinu CR⁹R¹⁰, v ktorej R⁹ a R¹⁰ majú vyššie uvedený význam za predpokladu, že najmenej jeden zo symbolov X a Y znamená atóm kyslíka, ďalšou výhodnou skupinou je skupinaX and Y independently represent an oxygen atom or a CR ⁹ R ¹⁰ group wherein R ⁹ and R ¹⁰ are as defined above, provided that at least one of X and Y is an oxygen atom, another preferred group is

Z kruhových systémovFrom circular systems

sú výhodnými kruhmi také kruhy, v ktorých jeden zo symbolov X a Y znamená atóm kyslíka a druhý znamená skupinu CR⁹R¹⁰ (kde R⁹ a R¹⁰ nezávisle znamenajú vodík alebo alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, napríklad metyl alebo znamená skupina CR⁹R¹⁰ skupinu C=0 alebo alebo znamenajú oba symbolypreferred rings are those in which one of X and Y is O and the other is CR ⁹ R ¹⁰ (wherein R ⁹ and R ¹⁰ independently represent hydrogen or C 1 -C 4 alkyl, for example methyl or CR ⁹ R ^{10 is} C = O or both

X a Y atómy kyslíka, R a R znamena vodík, alkyl s 1 az 4 atómami uhlíka alebo skupinu CO.X and Y are O, R and R are hydrogen, alkyl of 1 to 4 carbon atoms or CO.

Je zrejmé, že vynález zahrnuje akékoľvek kombinácie vyššie uvedených výhodných významov jednotlivých symbolov.It is to be understood that the invention encompasses any combination of the above-mentioned preferred meanings of the individual symbols.

Ďalšiu zvláštnu skupinu zlúčenín podľa vynálezu tvoria tie zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Z znamená skupinu a), R¹ znamená atóm vodíka a R⁴ znamená metyl, n = 0, aAnother particular group of compounds of the invention are those compounds of formula I wherein Z is a), R ¹ is hydrogen and R ⁴ is methyl, n = 0, and

R a R^J znamenajú atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, X a Y sú atómy kyslíka alebo Y znamená atóm kyslíka a X znamená skupinu CHR⁹, kde R⁹ je atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, C=0, C=CH₂ alebo X znamená skupinu CH, Y znamená atóm kyslíka, n = 0 a R a R sú atómy vodíka.R and R ^J are hydrogen or C 1 -C 4 alkyl, X and Y are O or Y is O and X is CHR ⁹ wherein R ⁹ is hydrogen or C 1 -C 4 alkyl, C = 0, C = _CH2 or X is CH, Y is oxygen, n is 0 and R and R are hydrogen.

Ďalšiu špecifickú skupinu zlúčenín podľa vynálezu tvoria cyklické deriváty všeobecného vzorca I, v ktorom Z znamená skupinu b)Another specific group of compounds of the invention are the cyclic derivatives of formula I wherein Z is b)

(b) ako aj farmaceutický prijateľné soli a solváty, napríklad hydráty týchto zlúčenín, v ktorých V znamená atóm kyslíka alebo síry a R¹^ má vyššie uvedený význam. Najmä znamená V atóm kyslíka a R¹⁵ znamená alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, benzyloxyskupinu alebo skupinu 0C0R⁴, v ktorej R⁴ znamená alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, napríklad izopropyl alebo terc.butyl alebo tiež alkenyloxyskupinu s 3 až 4 atómami uhlíka alebo alkoxykarbonylalkoxyskupnu s 3 a 4 atómami uhlíka v každej alkoxylovej časti.(b) and pharmaceutically acceptable salts and solvates, such as hydrates thereof, wherein W is O or S and R ^ ¹ is as defined above. In particular, it represents oxygen and R ¹⁵ is C 1 -C 4 alkyl, benzyloxy or a group 0C0R ^4, wherein R ⁴ is alkyl of 1 to 4 carbon atoms, such as isopropyl or t-butyl, or also C 3 -C 4 alkyl or C 3 -C 4 alkoxycarbonylalkoxy in each alkoxy moiety.

Ako špecifické zlúčeniny podľa vynálezu je možné uviesť nasledujúce látky:Specific compounds of the invention include:

kyselina [ÍR-(Ια,3ηβ,4p,4ap,7p,7aa,8ap)]-8a-[[lS,7R,9R]-2,8dioxa-9-metyl-4-metylén-cis-b.icyklo[3.4.0]non-7-yloxymetyl] 4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(lH)-karboxylová, kyselina [lR-(lα,3aβ,4β,4aβ,7β,7aα,8aβ)]-8a-[(2,6-dideoxy3,4-0-izopropy’lidén-β-D-alopyranosyloxy) -metyl] -4-formyl4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro - 7- metyl - 3- (1 - met y let yl) -1,4metán-s-indacén-3a(1H)- karboxylová, kyselina [lR-(la,3ap,4p,4ap,7p,7aa,8ap)]-8a-[[lS,4R,7R,9R]2,8-dioxa-4,9-dimetyl-cis-bicyklo[3.4.0]non-7-yloxymetyl]4-fo.rmyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3 - (1-metyletyl) -1,4-metán-s-:i.ndacén-3a(lH) -karboxylová, kyselina [ÍR-(Ια,3ap,4β,4ap,7β,7aa,δΆβ)]-8a-[[1S,4S,6R,8R]2,7-dioxa-4,6-d imety1-cis-bicyklo[3.4.0]non-8-yloxymetyl]4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(lH)-karboxylová,[1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4β, 4β, 7β, 7αa, 8β)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-9-methyl-4-methylene-cis-bicyclo [ 3.4.0] non-7-yloxymethyl] 4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane- s-indacene-3α (1H) -carboxylic acid [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(2,6-dideoxy-3,4-O-isopropylidene- β-D-Allopyranosyloxy) methyl] -4-formyl4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methyl-yl) -1,4-methane -s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid [1R- (1a, 3ap, 4p, 4ap, 7p, 7aa, 8ap)] - 8a - [[1S, 4R, 7R, 9R] 2,8-dioxa -4,9-dimethyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yloxymethyl] 4-fo.rmyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3 - (1-methylethyl) -1,4-methane-s-: indacen-3a (1H) -carboxylic acid [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, δΆβ)] - 8a- [[1S, 4S, 6R, 8R] 2,7-Dioxa-4,6-dimethyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-8-yloxymethyl] 4-formyl-4,4a, 5,6,7 , 7, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (lH) -carboxylic acid,

kyselina [1Η-(1α,33β,4β,4aβ,7β,7aa,83β)]-8a-[(2,3-anhydro6-deoxy-4-0-propyl-β-D-manopyranosyloxy)-metyl]-4-formyl4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro- 7-metyl-3 - (1-mety lety 1) -1,4metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylová, kyselina [lR-(lα,3aβ,4β,4aβ,7β,7aa,83β)]-8a-[(2,3-anhydro6-deoxy-4-0-metyl-β-D-manopyranosyloxy)oxymetyl]-4-formyl4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4metán-s-indacén-3a(1H)- karboxylová, ako aj farmaceutický prijateľné soli a solváty, napríklad hydráty týchto látok alebo ich metabolický labilné deriváty.[1Η- (1α, 33β, 4β, 4aβ, 7β, 7aa, 83β)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-propyl-β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4 -formyl4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methyl-1) -1,4-methane-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid, [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αa, 83β)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-methyl-β-D-manopyranosyloxy) oxymethyl] -4- formyl4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4methane-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid as well as pharmaceutically acceptable salts and solvates such as hydrates thereof or metabolically labile derivatives thereof.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I sú veľmi účinné fungicídne látky, ktoré je možné použiť na liečenie .fungálnych infekcii u živočíchov, vrátane človeka. Je napríklad možné ich použiť nizmami z na liečenie infekcií, ktoré boli vyvolané orgačeľade Candida ako Candida albicans, Candida glabrata, (Torulopsis glabrata), Candida tropicalis, Candida parapsilosis a Candida Pseudotropicalis') , Cryptococcus neoformans, Pneumocystis carinii, Aspergillus Sp (ako Aspergillus flavus a Aspergillus fumigatus') , Coccidioides (ako Coccidioides immitis), Paracoccidioides (ako Paracoccidioides brasíliensis), Histoplasma (ako Histoplasma capsulatum), Blastomyces (ako Blastomyces dermatitidis).The compounds of formula I are very effective fungicidal agents which can be used for the treatment of fungal infections in animals, including humans. For example, they can be used by the nisms of z to treat infections caused by candida such as Candida albicans, Candida glabrata, (Torulopsis glabrata), Candida tropicalis, Candida parapsilosis and Candida Pseudotropicalis', Cryptococcus neoformans, Pneumocystillis carusii, Aspergergillis carusii, Asperg flavus and Aspergillus fumigatus'), Coccidioides (such as Coccidioides immitis), Paracoccidioides (such as Paracoccidioides brasíliensis), Histoplasma (such as Histoplasma capsulatum), Blastomyces (such as Blastomyces dermatitidis).

Uvedené látky je možné použiť aj na liečenie infekcií, ktoré boli spôsobené čeľaďami Candida, Trichophyton, MicroThey can also be used for the treatment of infections caused by Candida, Trichophyton, Micro

sporum alebo Epidermophyton (ako Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Microsporum canis alebo Epidermophyton floccosum) alebo na liečenie infekcie slizníc, vyvolaných Candida albicans.sporum or Epidermophyton (such as Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Microsporum canis or Epidermophyton floccosum) or for treating mucosal infections caused by Candida albicans.

Cyklické deriváty všeobecného vzorca I je tiež možné použiť na liečenie ďalších infekcií, vyvolaných čeľaďami vláknitých húb, ako Geotrichum (ako Geotrichum clavatum), Trichosporon (ako Trichosporon beigelii), Blastoschizomyces (ako Blastoschizomyces capitatus), Sporothrix (ako Sporothrix schenckii') , Scedosporium (ako Scedosporium apiosperum) , Cladosporium (ako Cladosporium carrioni') , a Pityrosporum ovale.The cyclic derivatives of the formula I can also be used for the treatment of other infections caused by filamentous fungus families such as Geotrichum (such as Geotrichum clavatum), Trichosporon (such as Trichosporon beigelii), Blastoschizomyces (such as Blastoschizomyces capitatus), Sporothrix (Scorckrix) (as Scedosporium apiosperum), Cladosporium (as Cladosporium carrioni '), and Pityrosporum ovale.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I je tiež možné použiť na liečenie infekcií, spôsobených prvokmi, ako sú Toxoplasma, Cryptosporidium, Leishmania, Trypanosoma, Giardia a Trichomonas.The compounds of formula I can also be used to treat infections caused by elements such as Toxoplasma, Cryptosporidium, Leishmania, Trypanosoma, Giardia and Trichomonas.

Vyhodnotenie anti.f ungálnej účinnosti zlúčenín podľa vynálezu bolo vykonávané na kvapalnom alebo tuhom živnom prostredí pomocou bežného zrieďovacieho radu na stanovenie minimálnej in.hibičnej koncentrácie MIC účinnej látky, táto koncentrácia bola stanovená pre rast po 24 až 48 hodinách pri inkubácii pri teplote 37 °C. Rady agarových platní alebo riedeného bujónu s vždy dvojnásobným riedením účinnej látky boli naočkované štandardnou kultúrou patogénneho organizmu, napríklad Candida albicans. Výsledky boli odčítané podľa prítomnosti alebo neprítomnosti rastúceho mikroorganizmu a bola zaznamenaná príslušná hodnota MIC.Evaluation of the anti-inflammatory activity of the compounds of the invention was carried out on a liquid or solid medium using a conventional dilution series to determine the minimum inhibitory concentration of MIC of the active ingredient, determined for growth after 24 to 48 hours incubation at 37 ° C. . Rows of agar plates or diluted broth each with twice the dilution of the active ingredient were inoculated with a standard culture of a pathogenic organism, for example Candida albicans. The results were read according to the presence or absence of the growing microorganism and the appropriate MIC value was recorded.

Hodnoty MCF, to znamená najnižšie koncentrácie, pri pri ktorých uhynie v kvapalnom prostredí najmenej 99,9 % mikroorganizmov, pôvodne naočkovaného do prostredia je možné stanoviť tak, že sa pestuje vždy 0,01 až 0,1 mikrolitra živného prostredia z kontrolného vyhĺbenia a prvého vyhĺbenia s obsahom rastúceho mikroorganizmu a každého vyhĺbenia, zbaveného mikroorganizmu na agarových platniach.The MCF values, i.e. the lowest concentrations at which at least 99.9% of the microorganisms initially inoculated into the medium die in the liquid medium, can be determined by growing from 0.01 to 0.1 microliters of culture medium from the control well and the first. wells containing the growing microorganism and any wells cleared of the microorganism on agar plates.

Vyhodnotenie zlúčenín všeobecného vzorca I in vivo je možné uskutočniť s radom dávok, podávaných napríklad podkožné, perorálne, intraperitonálne alebo vnútrožilovo myšiamThe in vivo evaluation of compounds of formula I may be performed with a range of doses, administered, for example, subcutaneously, orally, intraperitoneally or intravenously to mice.

alebo krysám, ktorým bol naočkovaný kmeň Candida albicans. Neošetrené zvieratá uhynú v rozmedzí. 3 až 9 dní, hodnotí sa dávka, pri ktorej zlúčenina poskytuje 50% ochranu proti uhynutiu pokusných zvierat.or rats inoculated with Candida albicans. Untreated animals die within range. 3 to 9 days, the dose at which the compound provides 50% protection against death of the test animals is evaluated.

Vzhľadom na svoju účinnosť bude možné zlúčeniny všeobecného vzorca T. využiť pri rade infekcií, spôsobených hubami u rôznych živočíchov, vrátane človeka. Môže ísť o infekcie povrchové, kožné, podkožné alebo tiež o systemické mykotické infekcie, napríklad infekcie dýchacích ciest, tráviacej sústavy, srdcového a cievneho systému, močových ciest, CNS, vrátane kandidózy a chronickej mucokandidózy, najmä tiež v pošve, najmä ide o kožné infekcie spôsobené hubami, infekcie pokožky a slizníc, vyvolané kvasinkami kandida, o rôzne dermotofytózy, vrátane ochorenia vlasovej pokožky hlavy, ochorenia nôh, nechtov na nohách, o pityriasisi versicolor, arythrasma, intertrigo, prchavé vyrážky hubovitého pôvodu, kandidózy vonkajšieho genitálu, balanitídu a tiež zápaly vonkajšieho zvukovodu hubovitého pôvodu. Uvedené látky je možné použiť aj na prevenciu systemického a miestneho ochorenia uvedeného typu. Pri prevencii môžu byť zlúčeniny podľa vynálezu použité ako časť zložiek na selektívnu dekontamináciu čriev na prevenciu infekcií najmä u chorých s nedostatočne fungujúcim .imunitným systémom, napríklad v prípade AIDS, u chorých, liečených na zhubné nádory alebo po transplantácii. Prevencia rastu húb môže byť vhodná tiež pri použití niektorých typov antibiotík alebo pri iatrogénnych ochoreniach.Because of their activity, the compounds of formula (T) will be useful in a variety of fungal infections in a variety of animals, including humans. These can be superficial, dermal, subcutaneous or systemic fungal infections, for example, respiratory, digestive, cardiovascular, urinary tract, CNS, including candidiasis and chronic mucocandidosis, especially in the vagina, especially skin infections. caused by fungi, candida yeast-induced skin and mucosal infections, o various dermotophytoses, including scalp diseases, leg diseases, toenails, pityriasisi versicolor, arythrasma, intertrigo, epididious rashes of fungal origin, external genital candidiasis, balanceitis and external ear canal of fungal origin. The compounds may also be used to prevent systemic and local diseases of this type. In prevention, the compounds of the invention can be used as part of the components for selective intestinal decontamination to prevent infections, particularly in patients with a poorly functioning immune system, for example in AIDS, in patients treated for malignant tumors or after transplantation. Prevention of fungal growth may also be useful in the use of certain types of antibiotics or in iatrogenic diseases.

Pri vyššie uvedenom použití je možné využiť zlúčeniny podľa vynálezu ako chemické látky, je však výhodnejšie ich však spracovať na farmaceutické prostriedky. Podstatu vynálezu preto tvoria aj farmaceutické prostriedky, ktoré ako svoju účinnú zložku obsahujú cyklické deriváty všeobecného vzorca I alebo ich fyziologicky prijateľné soli spolu, s najmenej jedným farmaceutickým nosičom a prípadne s pomocnými látkami a/alebo ďalšími účinnými látkami. Nosič musí byť prijateľný v tom zmysle, že je kompatibilný s ostatnými zložkami a nemá škodlivý účinok na chorého.In the above use, the compounds of the present invention may be used as chemical agents, but are more preferably formulated into pharmaceutical compositions. Accordingly, the present invention also provides pharmaceutical compositions comprising, as an active ingredient, cyclic derivatives of the formula I or their physiologically acceptable salts together with at least one pharmaceutical carrier and, optionally, excipients and / or other active ingredients. The carrier must be acceptable in the sense of being compatible with the other ingredients and not deleterious to the patient.

Farmaceutické prostriedky podľa vynálezu zahrnujú liekové formy, upravené na perorálne, bukálne, parenterálne, rektálne alebo miestne podanie, na podanie vo forme implantátu, do oka alebo do pohlavného a močového ústrojenstva alebo vo forme, vhodnej na podanie inhaláciou alebo insufláciou.The pharmaceutical compositions of the invention include dosage forms adapted for oral, buccal, parenteral, rectal or topical administration, for administration in the form of an implant, eye, genital or urinary tract, or in a form suitable for administration by inhalation or insufflation.

Tablety a kapsuly na perorálne podanie môžu obsahovať bežné pomocné látky, napríklad spojivá, ako sirupy, akáciovú gumu, želatínu, sorbitol, tragakant, škrobový sliz alebo polyvinylpyrolidón, plnivá, ako sú laktóza, cukry, mikrokryštalická celulóza, kukuričný škrob, fosforečnan vápenatý alebo sorbitol, klzné látky, ako sú stearan horečnatý, kyselina stearová, mastenec, polyetylénglykol alebo oxid kremičitý, dezintegračné činidlá, napríklad zemiakový škrob, sodnú soľ glykolátu škrobu alebo sodnú soľ zosietenej karmelózy alebo zmáčadlá, ako laurylsíran sodný. Tablety môžu byť žuvacie, dispergovateľné alebo efervescentné a môžu byť poťahované známym spôsobom. Kvapalné prostriedky na perorálne podanie môžu mať napríklad formu suspenzii vo vode alebo v oleji, roztokov, emulzií, sirupov alebo elixírov, alebo môže byť účinná látka dodávaná v suchej forme a určená na zmiešanie s vodou alebo iným vhodným nosným prostredím tesne pred použitím. Tieto kvapalné prostriedky môžu obsahovať bežné prí sady, ako suspenzné činidlá, napríklad sorbito'lový sirup,Tablets and capsules for oral administration may contain conventional excipients such as binding agents such as syrups, acacia gum, gelatin, sorbitol, tragacanth, starch slime or polyvinylpyrrolidone, fillers such as lactose, sugars, microcrystalline cellulose, corn starch, calcium phosphate or sorbitol glidants such as magnesium stearate, stearic acid, talc, polyethylene glycol or silica, disintegrating agents such as potato starch, sodium starch glycolate or sodium croscarmellose sodium or wetting agents such as sodium lauryl sulphate. The tablets may be chewable, dispersible or effervescent and may be coated in a known manner. Liquid compositions for oral administration may be in the form of, for example, suspensions in water or oil, solutions, emulsions, syrups or elixirs, or the active ingredient may be presented in dry form and intended to be mixed with water or other suitable vehicle just prior to use. These liquid compositions may contain conventional additives such as suspending agents, for example, sorbitol syrup,

metylcelulózu, sacharózový sirup, želatínu, hydroxyetylcelulózu, karboxymetylcelulózu, gél stearanu hlinitého alebo hydrogenované jedlé oleje, ďalej emulgačné činidlá, ako sú lecitín, sorbitan monooleát alebo akáciovú gumu, alebo môžu tieto prostriedky obsahovať nosné prostredie nevodnej povahy, vrátane jedlých olejov, ako sú mandľový olej frakciono vaný kokosový olej, estery typu olejov, propylénglykol alebo etylalkohol a konzervačné prostriedky, napríklad metyl- alebo propyl-p-hydroxybenzoáty alebo kyselinu sorbovú.methylcellulose, sucrose syrup, gelatin, hydroxyethylcellulose, carboxymethylcellulose, aluminum stearate gel or hydrogenated edible oils, emulsifying agents such as lecithin, sorbitan monooleate or acacia gum, or may contain a non-aqueous vehicle such as edible oils, such as edible oils oil fractionated coconut oil, oily esters, propylene glycol or ethyl alcohol and preservatives, for example methyl or propyl p-hydroxybenzoates or sorbic acid.

Na podanie ústnou sliznicou môžu mať farmaceutické prostriedky formu tabliet alebo kosoštvorčekových tabliet, vyrobených zvyčajným spôsobom.For oral administration, the pharmaceutical compositions may take the form of tablets or lozenges formulated in conventional manner.

Na parenterálne podanie je možné vyrobiť farmaceutickéPharmaceutical preparations can be made for parenteral administration

prostriedky v injekčnej forme alebo vo forme kontinuálnych infúzií. Na injekčné podanie je možné prostriedky uložiť do ampúl alebo do fľaštičiek, ktoré obsahujú väčší počet dávok spolu s konzervačným činidlom. Takéto prostriedky môžu mať formu suspenzii, roztokov alebo emulzií v olejovom alebo vo vodnom prostredí a môžu obsahovať pomocné látky, ako suspenzné, stabilizačné alebo dispergačné činidlá. Účinná látka môže byť dodávaná tiež vo forme prášku, určeného na zmiešanie s vhodným nosným prostredím, napríklad so sterilnou bezpyrogénnou vodou tesne pred použitím.compositions by injection or by continuous infusion. For injection, the compositions may be presented in ampoules or vials containing a plurality of doses together with a preservative. Such compositions may take the form of suspensions, solutions or emulsions in oily or aqueous media, and may contain formulatory agents such as suspending, stabilizing or dispersing agents. The active ingredient may also be presented in powder form for constitution with a suitable vehicle, for example sterile pyrogen-free water, just prior to use.

Na podanie inhaláciou sa zlúčeniny podľa vynálezu spracovávajú na aerosóly, podávané z tlakového balenia za použitia vhodného hnacieho plynu, napríklad dichlórdifluórmetánu, trichlórfluórmetánu, dichlórtetrafluóretánu, oxidu uhličitého alebo iného vhodného plynu, alebo sa použije jednoduchý rozprašovač. V prípade tlakového balenia je možné nádobku vybaviť odmerným ventilom na podanie vopred určenej dávky.For administration by inhalation, the compounds of the invention are formulated for aerosols delivered from a pressurized pack using a suitable propellant, for example dichlorodifluoromethane, trichlorofluoromethane, dichlorotetrafluoroethane, carbon dioxide or other suitable gas, or a single nebulizer. In the case of a pressure pack, the container may be provided with a metering valve to deliver a predetermined dose.

Na podanie inhaláciou môžu mať prostriedky podľa vynálezu tiež formu suchého prášku, napríklad práškovej zmesi účinnej látky s inertnou látkou, napríklad laktózou alebo škrobom, alebo môže ísť o modifikovanú fyzikálnu formu účinnej látky. Aj v tomto prípade je možné účinnú látku dodávať vo forme, obsahujúcej jednotlivú dávku, napríklad vo forme želatínových kapsúl alebo vo forme blistra, z ktorého je možné práškový materiál podávať pomocou inhalačného alebo insulfačného prístroja.For administration by inhalation, the compositions of the invention may also be in the form of a dry powder, for example a powder mix of the active ingredient with an inert substance, for example lactose or starch, or may be a modified physical form of the active ingredient. In this case too, the active ingredient can be delivered in a unit dose form, for example in the form of gelatin capsules or in the form of a blister, from which the powdered material can be administered by means of an inhalation or insulphation device.

Zlúčeniny podľa vynálezu je možné spracovávať aj na čapí ky, ktoré obsahujú okrem účinnej látky bežný základ na výrobu čapíkov alebo podobne na pesary.The compounds of the invention may also be formulated into suppositories which contain, in addition to the active ingredient, a conventional suppository base or the like into pessaries.

Účinné látky môžu byť tiež spracované na prostriedky na miestne podanie, ako sú masti, krémy, gély, lotióny, šampóny, práškové materiály a púdre, pesary, tampóny, spreje, kúpele, kvapky, napríklad do oka, ucha alebo do nosa. Masti a krémy môžu obsahovať napríklad vodný alebo olejový základ s vhodnými zahusťovadlami alebo gély. Na podanie do oka môžu byť tieto prostriedky sterilné. Masti v úplne kvapalnom stave môžu byť určené na použitie vo veterinárnom lekárstve,The active ingredients may also be formulated for topical administration such as ointments, creams, gels, lotions, shampoos, powder materials and powders, pessaries, tampons, sprays, baths, drops, for example, in the eye, ear or nose. Ointments and creams may contain, for example, an aqueous or oily base with suitable thickeners or gels. For administration to the eye, the compositions may be sterile. Ointments in completely liquid form may be intended for use in veterinary medicine,

vhodným základom môže byť olej s obsahom organického rozpúšťadla, prípadne s obsahom pomocných látok, ako sú stabilizačné a solubilizačné činidlá. Pesary a tampóny na aplikáciu do pošvy je možné vyrábať bežným spôsobom. Tieto prostriedky môžu obsahovať efervescenčné nosné prostredie a prípadne ešte ďalšie účinné zložky, napríklad kortikosteroidy, antibiotiká alebo látky proti parazitom.a suitable base may be an oil containing an organic solvent, optionally containing excipients such as stabilizing and solubilizing agents. Pessaries and vaginal swabs can be manufactured in conventional manner. These compositions may contain an effervescent vehicle and optionally other active ingredients such as corticosteroids, antibiotics or anti-parasite agents.

Kvapalné prostriedky na podanie do nosa môžu mať formu roztoku alebo suspenzie a môžu obsahovať bežné pomocné látky, napríklad prostriedky na úpravu osmotického tlaku, ako chlorid sodný, dextrózu alebo manitol, konzervačné látky, ako benzalkóniumchlorid, tiomersal alebo fenyletylalkohol a ďalšie pomocné látky, napríklad pufre, suspenzné, stabilizačné alebo dispergačné činidlá a/alebo látky na úpravu chuti .Liquid nasal formulations may be in the form of a solution or suspension and may contain conventional excipients such as osmotic pressure adjusters such as sodium chloride, dextrose or mannitol, preservatives such as benzalkonium chloride, thiomersal or phenylethyl alcohol, and other excipients such as buffers , suspending, stabilizing or dispersing agents and / or flavorings.

Transdermálne prostriedky môžu byť upravené tak, že obsahujú systém, podporujúci vstrebávanie účinnej látky pokožkou a môžu obsahovať bázu, nanesenú vo .forme náplasti, pripadne obsahujúcu krycie filmy, membrány a izolačné medzivrstvy, podporujúce uvoľnenie účinnej látky. Ako látku, podporujúcu vstrebávanie, môžu tieto prostriedky obsahovať napríklad alkoholy alebo látky, vyvolávajúce ionoforézu.The transdermal compositions may be formulated to contain a system that promotes the absorption of the active ingredient through the skin and may include a base applied in the form of a patch, optionally containing release films, membranes and insulating interlayers. As absorption enhancers, these compositions may include, for example, alcohols or iontophoresis agents.

Prostriedky podľa vynálezu môžu byť tiež spracované ako depotné prostriedky. Tieto prostriedky s dlhodobým účinkom sú napríklad implantáty, napríklad pod kožu alebo do svalu, alebo môže ísť o vnútrosvalové injekcie. Takéto prostriedky zvyčajne obsahujú vhodné polymérne alebo hydrofóbne materiály, napríklad vo forme emulzie vo vhodnom oleji alebo ionomeničové živice, alebo môže ísť o ťažko rozpustné deriváty, napríklad o málo rozpustné soli.The compositions of the invention may also be formulated as depot compositions. Such long-acting formulations are, for example, implants, for example under the skin or into the muscle, or may be intramuscular injections. Such compositions usually contain suitable polymeric or hydrophobic materials, for example in the form of an emulsion in a suitable oil or ion exchange resins, or they may be sparingly soluble derivatives, for example, sparingly soluble salts.

V prípade, že prostriedok má obsahovať v určitej liekovej forme dávku pre jednotlivé podanie, bude táto jednotka obsahovať 0,001 až 1000 mg, s výhodou 0,01 až 400 mg účinnej látky v prípade perorálneho podania. Denná dávka pre dospelého človeka sa bude pohybovať v rozmedzí 0,001 až 5000 mg účinnej látky, s výhodou 0,01 až 2000 mg účinnej látky pri podaní 1 až 4x denne, v závislosti na spôsobe podania, na stave chorého a na liečenom ochorení.If the composition is to contain, in a certain dosage form, a dosage for a single administration, the unit will contain 0.001 to 1000 mg, preferably 0.01 to 400 mg, of the active ingredient in the case of oral administration. The daily dose for an adult will be in the range of 0.001 to 5000 mg of active ingredient, preferably 0.01 to 2000 mg of active ingredient when administered 1 to 4 times a day, depending on the route of administration, the condition of the patient and the disease being treated.

Účinná látka môže byť podaná vo forme vnútrožilovej infúzie, napríklad až 50 mg/kg denne účinnej látky. Doba liečenia bude závisieť skôr na rýchlosti odpovede než na časo vom úseku, počas ktorého je látka podávaná.The active ingredient may be administered by intravenous infusion, for example up to 50 mg / kg of active ingredient daily. The duration of treatment will depend on the rate of response rather than the time during which the agent is administered.

Zlúčeniny podľa vynálezu je možné použiť aj v kombinácii s inými účinnými látkami, vynález sa týka aj kombinácií zlúčenín podľa vynálezu spolu s ďalšou účinnou látkou.The compounds of the invention may also be used in combination with other active ingredients, the invention also relates to combinations of the compounds of the invention together with another active ingredient.

Zlúčeniny podľa vynálezu je napríklad možné použiť v kombinácii s jednou alebo väčším počtom látok s antifungálnym účinkom, napríklad zo skupiny polyénových derivátov,For example, the compounds of the invention may be used in combination with one or more antifungal agents, for example from the group of polyene derivatives,

ako sú Amphotericin B, Nystatin, alebo prostriedok, obsahujúci Amphoteritin B v tukovom základe, ďalej azolové deriváty, ako sú Fluconazole, Intraconazole, Ketoconazole, Miconazole, Clotrinazole, ZD-08070, UK-109496, ďalej môže ísť o kombináciu s 5-fluórcytozínom alebo pneumocandínom alebo s derivátmi echinocandínu, ako sú cilofungín, LY-303366,such as Amphotericin B, Nystatin, or a composition comprising Amphoteritin B in a fat base, further azole derivatives such as Fluconazole, Intraconazole, Ketoconazole, Miconazole, Clotrinazole, ZD-08070, UK-109496, further may be a combination with 5-fluorocytosine or pneumocandin or echinocandin derivatives such as cilofungin, LY-303366,

L-733560 a/alebo spolu interferón, napríklad IL-1, IL-2, IL-3 a IL-8 nií, napríklad (G)-CSF, júce obranu organizmu.L-733560 and / or together an interferon, for example IL-1, IL-2, IL-3 and IL-8, such as (G) -CSF, defending the organism.

s imunomodulačnými látkami, ako sú IGN-gama, interleukíny, napríklad a faktory, stimulujúce tvorbu koló (M)-CSF a (GM)-CSF a látky, podporuZvlášť výhodnými látkami pre tieto kombinácie sú intraconazole, flucytosine, fluconazole a amphotericin B.with immunomodulatory agents such as IGN-gamma, interleukins, e.g.

V prípade, že sú zlúčeniny podľa vynálezu podávané v kombinácii s ďalšou antifungálnou látkou, je možné obe zložky podávať v doporučenej maximálnej klinickej dávke alebo v nižších dávkach.When the compounds of the invention are administered in combination with another antifungal agent, both components may be administered at the recommended maximum clinical dose or at lower doses.

Uvedené kombinácie je možné spracovať na farmaceutické prostriedky, ktoré budú obsahovať túto kombináciu spolu s farmaceutickým nosičom. Jednotlivé zložky kombinácie je však možné podávať tiež súčasne alebo následne vo forme oddelených farmaceutických prostriedkov.Said combinations may be formulated into pharmaceutical compositions comprising the combination together with a pharmaceutical carrier. However, the individual components of the combination may also be administered simultaneously or sequentially in the form of separate pharmaceutical compositions.

V prípade, že sa zlúčenina podľa vynálezu použije v kombinácii s ďalšou látkou, účinnou proti tomu istému ochoreniu, môže sa dávka látok líšiť od dávok, v ktorých sa zlúčeniny podávajú jednotlivo. Príslušnú dávku urči každýWhen the compound of the invention is used in combination with another agent effective against the same disease, the dose of the agents may differ from those in which the compounds are administered individually. The dose is determined by everyone

odborník .expert.

Podstatu vynálezu teda tvoria cyklické deriváty všeobecného vzorca I alebo ich fyziologicky prijateľné soli na použitie na liečebné účely, zvlášť na liečenie hubových infekcií u živočíchov, zvlášť u človeka.Accordingly, the present invention provides cyclic derivatives of formula (I) or physiologically acceptable salts thereof for use in therapy, in particular for the treatment of fungal infections in animals, especially humans.

Podstatu vynálezu tvorí tiež použitie cyklických derivátov všeobecného vzorca I a ich fyziologicky prijateľných solí na výrobu farmaceutických prostriedkov, určených na liečenie hubových infekcií u ľudí a u iných živočíchov.The present invention also provides the use of cyclic derivatives of formula I and their physiologically acceptable salts for the manufacture of pharmaceutical compositions for the treatment of fungal infections in humans and other animals.

Je zrejmé, že v prípade, že sa uvádza liečenie hubových infekcií, znamená toto liečenie tiež preventívne použitie a nie len liečenie už vzniknutej infekcie.Obviously, when treating fungal infections, the treatment is also a preventive use and not just a treatment of an already existing infection.

Cyklické deriváty podľa vynálezu je možné pripraviť celým radom všeobecných postupov, ktoré budú ďalej podrobnejšie uvedené.The cyclic derivatives of the present invention can be prepared by a variety of general procedures, which are described in more detail below.

Podľa všeobecného postupu A na výrobu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Z znamená skupinu a) sa nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca IIAccording to general procedure A for the preparation of compounds of the formula I in which Z is a) a compound of the formula II is reacted

kdewhere

R¹ a R⁴ majú význam, uvedený vo vzorci I,R ¹ and R ⁴ are as defined in formula I,

RP znamená ochrannú skupinu na karboxylovej skupine,RP stands for a protecting group on the carboxyl group,

X a Y majú význam, uvedený vo vzorci I s tou výnimkou, žeX and Y have the meanings given in formula I, except that

X a/alebo Y neznamenajú skupinu CR⁹R¹⁰, tak, aby sa vytvoril cyklický systém, s následným odstránením ochrannej skupiny na karboxylovej skupine.X and / or Y do not represent a CR ⁹ R ^{10 group} , so as to form a cyclic system, followed by deprotection at the carboxyl group.

Podľa prvého uskutočnenia postupu A je možné pripraviť cyklické deriváty všeobecného vzorca la, v ktorých R¹ až R⁴.According to a first embodiment of process A, the preparation of cyclic derivatives of formula Ia wherein R ¹ to R ^4th

majú význam, uvedený vo vzorci I, n=0aXaY znamená atómy kyslíka tak, že sa na diol všeobecného vzorca IIIhave the meanings given in formula I, n = 0 and X and Y are oxygen atoms by reacting the diol of formula III

kdewhere

R¹ a R⁴ majú význam, uvedený vo vzorci I aR ¹ and R ⁴ are as defined for formula I, and

RP znamená ochrannú skupinu na karboxyskupine, pôsobí zlúčeninou všeobecného vzorca (L)₂CR²R³,RP is a carboxy-protecting group, acts by a compound of formula (L) ₂ CR ² R ³ ,

kdewhere

33

R , R majú význam, uvedený vo vzorci la aR, R are as defined in formula Ia and

L znamená odštiepiteľnú skupinu, s následným odstránením ochrannej skupiny na karboxyskupine.L represents a leaving group, followed by deprotection at the carboxy group.

33

V prípade, že R a R znamenajú atómy vodíka, je možné uskutočniť uzavretie kruhu pôsobením bihalogénmetánu, napríklad dibrómmetánu na zlúčeninu vzorca III v prítomnosti silnej bázy, napríklad hydroxidu alkalického kovu, ako hydroxidu sodného, s výhodou za podmienok na prenos fáz, napríklad za použitia tetraalkylamóniovej soli, ako tetrabutylamóniumbromidu, približne pri teplote miestnosti. V pripáde, že aspoň jedna zo skupín R a R je alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkoxyalkyl s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti alebo v prípade, že CR R znamená cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka, je možné kruh ľahko uzavrieť tak, že sa na zlúčeninu všeobecného vzorca III pôsobí ketalom všeobecného vzorca (RO)₂CR R , kde R znamená alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, napríklad metyl, s výhodou v prítomnostiWhen R and R are hydrogen atoms, ring closure can be accomplished by treatment with a bihalomethane, e.g. dibromomethane, compound of formula III in the presence of a strong base such as an alkali metal hydroxide such as sodium hydroxide, preferably under phase transfer conditions, e.g. tetraalkylammonium salts such as tetrabutylammonium bromide at about room temperature. When at least one of R and R is C 1 -C 6 alkyl or C 1 -C 4 alkoxyalkyl in each moiety or when CR R is C 3 -C 8 cycloalkyl, the ring may be readily can be closed by treating the compound of formula III with a ketal of formula (RO) ₂ CR R where R is alkyl of 1 to 6 carbon atoms, for example methyl, preferably in the presence of

vhodnej kyseliny, napríklad kyseliny p-toluénsulfónovej alebo pyridínium-p-toluénsulfonátu vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad ketóne, ako acetóne, v nitrile, ako acetonitríle alebo v halogenovanom uhľovodíku, napríklad dichlórmetáne približne pri teplote miestnosti. Zlúčeniny všeobecného vzorca la, v ktorých X a/alebo Y znamená atóm síry je podobne možné pripraviť z medziproduktov, ktoré zodpovedajú zlúčeninám všeobecného vzorca III, v ktorých sú jedna alebo obe diolové hydroxylové skupiny nahradené tiolovými skupinami. V prípade, že CR R znamená C = 0 alebo C = S, je možné reakciu, vedúcu k vytvoreniu kruhu ľahko uskutočniť tak, že sa zlúčenina vzorca III nechá reagovať s karbonyldiimidazolom alebo tiokarbonyldiimidazolm vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad v uhľovodíku, ako je toluén alebo v éteri, ako tetrahydrofuráne pri teplote varu pod spätným chladičom. Tiež v priO Q páde, že CR R znamená C - S, je možné reakciu, vedúcu k uzavretiu kruhu uskutočniť tak, že sa na zlúčeninu vzorca III. pôsobí oxidom cínu, napríklad oxidom dibutylcínu v uhľovodíkovom rozpúšťadle, napríklad pri teplote varu v toluéne pod spätným chladičom, s následným pridaním halogéntiomravčanu, napríklad fenylchlórtiomravčanu v uhľovodíkovom rozpúšťadle, napríklad toluéne približne pri teplote miestnosti .a suitable acid, for example p-toluenesulfonic acid or pyridinium p-toluenesulfonate in a suitable solvent, for example a ketone such as acetone, nitrile, such as acetonitrile or a halogenated hydrocarbon, for example dichloromethane at about room temperature. Similarly, compounds of formula Ia in which X and / or Y are S may be prepared from intermediates corresponding to compounds of formula III in which one or both of the diol hydroxyl groups are replaced by thiol groups. In the case where CR R is C = O or C = S, the ring formation reaction can be easily carried out by reacting the compound of formula III with carbonyldiimidazole or thiocarbonyldiimidazole in a suitable solvent, for example a hydrocarbon such as toluene or in ether such as tetrahydrofuran at reflux. Also in the case of Q R, when CR R is C - S, the ring closure reaction can be carried out by reacting to the compound of formula III. with tin oxide, for example dibutyltin oxide in a hydrocarbon solvent, for example at reflux temperature in toluene, followed by the addition of a halothioformate, for example phenyl chlorothioformate, in a hydrocarbon solvent, for example toluene, at about room temperature.

Podľa ďalšieho uskutočnenia postupu A je možné zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorých a R⁴ majú význam zoIn another embodiment of Process A, compounds of formula (I) wherein and R ⁴ are as defined above are possible

3 vzorca I, jedna zo skupín R a R je alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka a druhá znamená vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, alebo alkoxyalkyl s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti, (Cr5r6)_h znamená skupinu CR^R^, kde a majú význam, uvedený vo vzorci I a X a Y znamenajú atómy kyslíka, pripraviť tak, že sa na diol vzorca III pôsobí oxidom cínu, napríklad oxidom dibutylcínu v uhľovodíku, napríklad v toluéne pri teplote varu pod spätným chladičom, potom sa pridá alylhalogenid HalCR^R^CR²=CHR¹⁴, kde R¹⁴ je vodík alebo alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka a Hal je halogén, napríklad bróm s fluoridom, napríklad tetrabutylamóniumfluoridom v rozpúšťadle, napríklad éteri, ako tetrahydrofuráne so zahriatím ca IV zmesi na 403 of formula I, one of R and R is alkyl of 1 to 6 carbon atoms and the other is hydrogen, alkyl of 1 to 6 carbon atoms, or alkoxyalkyl of 1 to 4 carbon atoms in each moiety, (C 5 R 6) _h is CR Where R is as defined in formula (I) and X and Y are oxygen atoms, prepared by treating the diol of formula (III) with a tin oxide such as dibutyltin in a hydrocarbon such as toluene at reflux, then an allyl halide HalCR 1 R 2 CR ² = CHR ¹⁴ wherein R ¹⁴ is hydrogen or alkyl of 1 to 6 carbon atoms and Hal is halogen such as bromine with fluoride such as tetrabutylammonium fluoride in a solvent such as ether such as tetrahydrofuran with ca. IV mixtures to 40

ía zlúčeniny všeobecného vzor-Compounds of the general formula

je potom možné premeniť vzorca la cyklizáciou, lárnu elektrofilnú adíciu pôsobením trifluóracetátu meďnatého s následnou redukciou túto látku všeobecnéhoit is then possible to convert the formula Ia by cyclization, linear electrophilic addition by treatment with copper (I) trifluoroacetate, followed by reduction

požadovanú zlúčeninu zahrnujúcou intramolekumeďnatej soli, napríklad hydrínom, napríklad hydridom trialkylcínu, ako tributylcínu, nakoniec sa odstráni ochranná skupina na karboxylovej skupine. Reakciu je možné ľahko uskutočniť približne pri teplote miestnosti v prítomnosti vhodného rozpúšťadla, napríklad éteru,the desired compound comprising an intramolecum copper salt, for example a hydrine, for example a trialkyltin hydride such as tributyltin, finally removing the protecting group on the carboxyl group. The reaction can be easily carried out at about room temperature in the presence of a suitable solvent, for example ether,

ako tetrahydrofuránu.as tetrahydrofuran.

V ďalšom možnom uskutočnení postupu A je možné zlúčeninu všeobecného vzorca la, v ktorom R¹ až R⁴ majú význam, uvedený vo vzorci I, n = 0 a jeden zo symbolov X a Y znamená atóm kyslíka a druhý znamená skupinu CR⁹R¹⁰, kde jeden zo symbolov R⁹ a R¹⁰ znamená alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka a druhý znamená vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkoxyalkyl s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti alebo skupina CR⁹R¹⁰ znamená C = CHR¹¹, pripraviť tak, že sa na zlúčeninu všeobecného vzorca III pôsobí oxidom cínu, napríklad oxidom dibutylcínu v uhlíkovom rozpúšťadle, napríklad toluéne, pri teplote varu pod spätným chladičom a prípadne v prítomnosti fluoridu, ako tetrabutylamóniumfluoridu, potom sa pridá alylhaLoegnid HalCR²R³CR⁹=CHR¹⁴ alebo alkinylhalogenid HalCR^R^C^CR¹¹, kde R¹¹, R¹⁴ a Hal majú vyššie uvedený význam alebo sa pridá alylhalogenid alebo alkinylhalogenid po zavedení ochrannej skupiny na jednu z dvoch diolových hydroxylových skupín za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorcaIn another possible embodiment of Process A, a compound of formula Ia in which R ¹ to R ⁴ are as defined in formula I, n = 0 and one of X and Y is oxygen and the other is CR ⁹ R ¹⁰ , wherein one of R ⁹ and R ¹⁰ is C 1 -C 6 alkyl and the other is hydrogen, C 1 -C 6 alkyl or C 1 -C 4 alkoxy in each moiety or CR ⁹ R ¹⁰ is C = CHR ¹¹ , prepared by treating a compound of formula III with a tin oxide such as dibutyltin oxide in a carbon solvent such as toluene at reflux and optionally in the presence of a fluoride such as tetrabutylammonium fluoride, followed by the addition of allyl halide HalCR ² R ³ CR ⁹ = CHR ¹⁴ or an alkynyl halide HalCR 1 R 2 -C 1 CR ¹¹ where R ¹¹ , R ¹⁴ and Hal are as defined above or an allyl halide or alkynyl halide is added after the deprotection of the one of two diol hydroxyl groups to form a compound of formula

(V)(IN)

kdewhere

X¹ X ¹

Y¹ Y ¹

X¹ znamená skupinu OH a znamená OCR²R³CR⁹=CHR¹⁴ alebo OCR²R³C=CR^lľL alebo znamená OCR²R³CR⁹=CHR¹⁴ alebo OCR²R³C=CR^lľL a znamená ochrannú skupinu na hydroxylovej skupine.X ¹ is OH and is OCR ² R ³ CR ⁹ = CHR ¹⁴ or OCR ² R ³ C = CR ^{11 L} or is OCR ² R ³ CR ⁹ = CHR ¹⁴ or OCR ² R ³ C = CR ^{11 L} and represents a protecting group on a hydroxyl group.

Cyklizáciu je možné dovŕšiť rak, že sa najskôr odstráni prítomná ochranná skupina na hydroxylovej skupine a potom sa voľná hydroxylová skupina aktivuje napríklad tvorbouCyclization can be accomplished by crayfish by first removing the protecting group present on the hydroxyl group and then activating the free hydroxyl group by, for example,

S-alkylditiokarbonátu, napríklad S-metylditiokarbonátu, po tom sa kruh uzavrie za podmienok radikálovej reakcie, na príklad tak, že sa na roztok aktivovaného medziproduktu v uhľovodíkovom rozpúšťadle, napríklad toluéne pri teploteS-alkyldithiocarbonate, for example S-methyldithiocarbonate, after which the ring is closed under the conditions of a radical reaction, for example by reacting to a solution of the activated intermediate in a hydrocarbon solvent such as toluene at a temperature of

varu pod spätným chladičom pôsobí donorom vodíka, napríklad redukčným činidlom typu hydridu, ako hydridom trialkylcínu, napríklad hydridom tributylcínu v prítomnosti aktivačného činidla, napríklad azobis(izobyronitrilu). Nakoniec sa odstráni ochranná skupina na karboxylovej skupine. Tvorbu S-alkylditiokarbonátu je možné uskutočniť tak, že sa na zlúčeninu všeobecného vzorca V, v ktorej jedna zo skupín X¹ a Y¹ je hydroxyskupina a druhá znamená OCR²R³CR⁹=CHR¹⁴ alebo OCR R C=CR pôsobí silnou bázou na báze alkalického kovu, napríklad hydridom sodíka v prítomnosti imidazolu vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad éteri, ako tetrahydrofuráne pri nižšej teplote, napríklad 0 °C a potom sa pridá sírouhlík a alky'lhalogenid, napríklad metyljodid približne pri teplote miestnosti.the refluxing agent is treated with a hydrogen donor such as a hydride type reducing agent such as a trialkyl tin hydride such as tributyltin hydride in the presence of an activating agent such as azobis (isobyronitrile). Finally, the protecting group on the carboxyl group is removed. The formation of S-alkyldithiocarbonate can be accomplished by treating a compound of formula V wherein one of X ¹ and Y ¹ is hydroxy and the other is OCR ² R ³ CR ⁹ = CHR ¹⁴ or OCR RC = CR with a strong base an alkali metal base such as sodium hydride in the presence of imidazole in a suitable solvent such as an ether such as tetrahydrofuran at a lower temperature such as 0 ° C and then carbon disulphide and an alkyl halide such as methyl iodide are added at about room temperature.

Pri ďalšom možnom uskutočnení spôsobu A je možné pripraviť zlúčeninu všeobecného vzorca I, v ktorom Y znamená 7 Q kyslík, n = 0, R a R sú atómy vodíka a X znamená skupinuIn another possible embodiment of Method A, a compound of formula I can be prepared wherein Y is 7 Q is oxygen, n = 0, R and R are hydrogen and X is a group

CR^R¹⁸ tak, že sa nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca V, v ktorom X¹ znamená hydroxylovú skupinu, s trifenylfosfínom, jódom a imidazolom vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad tetrahydrofuráne za vzniku derivátu vzorca Va, obsahujúceho atóm jódu v polohe 4. Uzavretie kruhu je potom možné uskutočniť za podmienok radikálovej reakcie, napríklad rovnako ako reakciu s hydridom trialkylcínu v uhľovodíkovom rozpúšťadle za súčasného zahrievania.CR 1 R ¹⁸ by reacting a compound of formula V wherein X ¹ is a hydroxyl group with triphenylphosphine, iodine and imidazole in a suitable solvent, for example tetrahydrofuran, to give a derivative of formula Va containing an iodine atom at the 4-position. it is then possible to carry out under the conditions of a radical reaction, for example, as well as the reaction with a trialkyl tin hydride in a hydrocarbon solvent with heating.

(Va)(Va)

V ďalšom možnom uskutočnení spôsobu A je možné pripraviť zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom Y znamená atóm kyslíka, X znamená NR a skupina CR R znamena C = 0 tak, že sa jodovaná zlúčenina všeobecného vzorca Va nechá reago12 vať s hydridom sodíka a izokyanatom vzorca R NCO v aprotickom rozpúšťadle, napríklad tetrahydrofuráne s následným odstránením ochrannej skupiny na karboxylovej skupine.In another possible embodiment of Method A, compounds of formula I wherein Y is O, X is NR, and CR R is C = O may be prepared by reacting the iodinated compound of formula Va with sodium hydride and an isocyanate of formula R NCO in an aprotic solvent such as tetrahydrofuran followed by deprotection at the carboxyl group.

V ďalšom možnom uskutočnení spôsobu A je možné pripraviť zlúčeninu všeobecného vzorca I, v ktorom R¹ a R⁴ majúIn another possible embodiment of Method A, a compound of formula I wherein R ¹ and R ⁴ have both can be prepared

3 význam, uvedený vo vzorci I, R a R nezávisle znamenajú vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkoxyalky'l s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti alebo skupina CR R znamena cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka, n = 0 a jeden zo symbolov X a Y znamená skupinu -NR^{V * * * * X} , kde R má vyznám, uvedený vo vzorci I a druhý z týchto symbolov znamená atóm kyslíka, (VI)3 is as defined in formula I, R and R are independently hydrogen, alkyl of 1 to 6 carbon atoms or alkoxyalkyl of 1 to 4 carbon atoms in each moiety or CR R is cycloalkyl of 3 to 8 carbon atoms, n = 0 and one of X and Y is -NR ^{V * * * * X} , where R is as defined in formula I, and the other is O, (VI)

N-acyláciou zlúčeniny všeobecného vzorca VIBy N-acylation of a compound of formula VI

kde jeden zo symbolov X³¹ a Y¹³· znamená hydroxyskupinu a druhý znamená aminoskupinu, alebo chráneného derivátu tejto zlúčeniny, napríklad za použitia acylhalogenidu, ako acylchloridu za zvyčajných podmienok, potom sa na vzniknutý amid pôsobí aldehydom alebo ketónom R R C=0 alebo dialkylacetálom vzorca R R C(0Alkyl)2 v prítomnosti vhodnej kyseliny, ako kyseliny p-toluénsulfónovej alebo pyridínium-p-toluénsulfonátu vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad halogenovanom uhľovodíku, ako dichlórmetáne približne p.ri teplote miestnosti, potom sa odstráni akákoľvek prítomná ochranná skupina .where one of X ³¹ and Y ¹³ is hydroxy and the other is amino, or a protected derivative thereof, for example using an acyl halide such as an acyl chloride under conventional conditions, then the resulting amide is treated with an aldehyde or ketone RRC = 0 or dialkylacetal of RRC (OAlkyl) 2 in the presence of a suitable acid such as p-toluenesulfonic acid or pyridinium p-toluenesulfonate in a suitable solvent, for example a halogenated hydrocarbon such as dichloromethane at about room temperature, then any protecting group present is removed.

V ďalšom možnom uskutočnení spôsobu A je možné pripraviť zlúčeninu všeobecného vzorca la, v ktorom R¹ a R⁴ majú význam, uvedený vo vzorci I, n = 0, -X-CR²R³ alebo -Y-CR²R³ znamená -N=CR , kde R znamená alkyl s 1 az 6 atómami uhlíka a zvyšný symbol Y a X znamená atóm kyslíka tak, že sa na zlúčeninu všeobecného vzorca VI pôsobí iminoesterom vzorca OIn another possible embodiment of Method A, a compound of formula Ia wherein R ¹ and R ⁴ are as defined in formula I can be prepared, n = 0, -X-CR ² R ³ or -Y-CR ² R ³ is - N = CR where R is alkyl of 1 to 6 carbon atoms and the remainder of Y and X are oxygen by treatment of a compound of formula VI with an iminoester of formula O

R C(=NH)0R, kde R znamená alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, napríklad metyl.R C (= NH) OR wherein R is alkyl of 1 to 6 carbon atoms, for example methyl.

Podľa ďalšieho postupu B je možné pripraviť zlúčeninu všeobecného vzorca I, v ktorom Z znamená skupinu a) a Y zna2 3 mená atóm kyslíka, n = O, R a R znamenajú atómy vodíka a X znamená CH tak, že sa nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca VII kdeAccording to a further process B, a compound of formula I can be prepared wherein Z is a) and Y is 23 O, n = O, R and R are hydrogen and X is CH by reacting a compound of formula VII where

R²¹ R ²¹

RPRP

znamená skupinu CHO alebo jej chránený derivát a znamená chránenú karboxylovú skupinu,represents a CHO group or a protected derivative thereof and represents a protected carboxyl group,

s dialkyldiazometylfosfátom v prítomnosti bázy, napríklad terc.butoxidu draselného v aprotickom rozpúšťadle, napríklad v éteri, ako tetrahydrofuráne s následným odstránením ochrannej skupiny RP na karboxylovej skupine a prípadne ochrannej skupiny na aldehydovej skupine.with a dialkyldiazomethyl phosphate in the presence of a base, for example potassium tert-butoxide in an aprotic solvent, for example ether, such as tetrahydrofuran, followed by removal of the RP protecting group on the carboxyl group and optionally the protecting group on the aldehyde group.

4-ketotet.rahydropyránový derivát všeobecného vzorca VIIThe 4-ketotetrahydropyran derivative of formula VII

je možné pripraviť oxidáciou zodpovedajúceho 4-hydroxyderivátu bežným spôsobom, napríklad Swernovou oxidáciou.can be prepared by oxidation of the corresponding 4-hydroxy derivative in a conventional manner, for example by Swern oxidation.

Podľa všeobecného spôsobu C je možné pripraviť všeobecného vzorca znamená atóm kyslíka ny a VAccording to general method C, the following formula may be prepared: oxygen atom and V

I, v ktorom cyklizáciou zlúčeniZ znamená skupinu b) všeobecného vzorca VIIIWherein the cyclization of the compound Z is a group (b) of formula (VIII)

(VIII)(VIII)

RP majú význam, uvedený vzorci I alebo ide o chránené deriváty týchto znamená atóm vodíka alebo ochrannú skupinu na lovej skupine, skupín, karboxy26RP are as defined in formula I or are protected derivatives of these means a hydrogen atom or a protecting group on the

L znamená odštiepiteľnú skupinu, napríklad alkyl- alebo arylsulfonyloxyskupinu aL is a leaving group, such as an alkyl or arylsulfonyloxy group; and

9 9 99 9 9

R znamená atóm vodíka alebo znamená OR rovnakú skupinu, ako vo význame L, s následným prípadným odstránením akejkoľvek prítomnej ochrannej skupiny.R is hydrogen or OR is the same as L, with subsequent removal of any protecting group present.

Cyklizačnú reakciu je možné uskutočniť tak, že sa na zlúčeninu všeobecného vzorca VIII pôsobí silnou bázou, napríklad hydridom alkalického kovu, ako hydridom sodíka vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad dimetylformamide alebo v éteri, ako tetrahydrofuráne, reakcia dobre prebieha pri teplote miestnosti. Je tiež možné použiť sodík v alkoholovom rozpúšťadle, napríklad v metanole, zvlášť v tom prípade, kedy skupina OR je skupina vo význame, uvedenom pre L. V tomto prípade sa báza pridáva k roztoku zlúčeniny všeobecného vzorca VIII vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad v halogenovanom uhľovodíku, ako dichlórmetáne a reakcia sa vykonáva pri teplote miestnosti až teplote varu reakčnej zmesi pod spätným chladičom.The cyclization reaction may be carried out by treating a compound of formula VIII with a strong base, for example an alkali metal hydride such as sodium hydride in a suitable solvent, for example dimethylformamide or an ether such as tetrahydrofuran, and the reaction proceeds well at room temperature. It is also possible to use sodium in an alcoholic solvent, for example methanol, especially when the OR group is as defined for L. In this case, the base is added to a solution of the compound of formula VIII in a suitable solvent, for example a halogenated hydrocarbon The reaction is carried out at room temperature to the reflux temperature of the reaction mixture.

Podľa všeobecného postupu D je možné pripraviť zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom V znamená atóm síry tak, že sa na zlúčeninu všeobecného vzorca IXAccording to general procedure D, it is possible to prepare compounds of formula I in which V is a sulfur atom by reacting to a compound of formula IX

(ix) kde(ix) where

R¹⁵, R¹⁶ a R¹⁶ majú význam, uvedený vo vzorci I, pôsobí donorom síry. Reakciu je možné ľahko uskutočniť tak, že sa na zlúčeninu všeobecného vzorca IX pôsobí 5,5-dimetyl2-tiolo-2-tioxo-l,3,2-dioxafosforinanom v rozpúšťadle, naR ¹⁵ , R ¹⁶ and R ¹⁶ are as defined in formula I and act as a sulfur donor. The reaction is readily accomplished by treating the compound of formula IX with 5,5-dimethyl-2-thiolo-2-thioxo-1,3,2-dioxaphosphorinane in a solvent to

príklad v dimetylformamide, s výhodou v prítomnosti vhodnej bázy, napríklad trialkylamínu ako trietylamínu pri vyššej teplote, napríklad v rozmedzí 80 až 120 °C.for example in dimethylformamide, preferably in the presence of a suitable base, for example a trialkylamine such as triethylamine at a higher temperature, for example in the range of 80 to 120 ° C.

Zlúčeniny všeobecného vzorca IX je možné ľahko pripraviť zo zlúčeniny všeobecného vzorca VII, v ktorom L znamená hydroxyskupinu a skupina OR znamená vhodnú odštiepiteľnú skupinu, napríklad alkyl- alebo aryIsulfonyloxyskupinu za použitia podmienok, opísaných v postupe C s prípadným následným odstránením akejkoľvek prítomnej ochrannej skupiny.Compounds of formula (IX) may be readily prepared from a compound of formula (VII) wherein L is hydroxy and OR is a suitable leaving group such as an alkyl or aryl sulfonyloxy group using the conditions described in Procedure C with optional subsequent removal of any protecting group present.

Podľa ďalšieho všeobecného postupu E je možné získať zlúčeniny všeobecného vzorca I z odlišných zlúčenín všeobecného vzorca I alebo ich chránených derivátov.According to a further general procedure (E), compounds of formula (I) may be obtained from different compounds of formula (I) or protected derivatives thereof.

Podľa prvého uskutočnenia spôsobu E je možné derivát zlúčeniny všeobecného vzorca I s chránenou skupinou, v ktorom Z znamená skupinu a) a R¹ znamená hydroxylovú skupinu premeniť na zodpovedajúci derivát všeobecného vzorca I, v ktorom R¹ znamená atóm vodíka tak, že sa i) vytvorí S-alkylditiokarbonát vyššie opísaným spôsobom a ii.) uvedená skupina sa odstráni tak, že sa na roztok uvedeného medziproduktu v uhľovodíkovom rozpúšťadle, napríklad v toluéne, pôsobí pri vyššej teplote, napríklad v rozmedzí 80 až 120 °C redukčným činidlom typu hydridu, napríklad hydridom trialkylcinu, ako hydridom tributylcínu, potom sa odstráni ochranná skupina na karboxylovej skupine.According to a first embodiment of Method E, a derivative of a compound of formula I with a protected group in which Z is a) and R ¹ is a hydroxyl group can be converted to the corresponding derivative of formula I in which R ¹ is a hydrogen atom by i) and ii.) removing said group by treating a solution of said intermediate in a hydrocarbon solvent such as toluene with a hydride reducing agent such as 80-120 ° C at a higher temperature, e.g. with a trialkyl tin hydride such as tributyltin hydride, then deprotecting the carboxyl group.

V ďalšom možnom uskutočnení spôsobu E je možné pripraviť zlúčeninu všeobecného vzorca I, v ktorom Z znamená skupinu a), R¹ znamená alkoxyskupinu a/alebo R⁴ znamená alkoxymetylovú skupinu vždy s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti tak, že sa podrobí alkylácii chránený derivát zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R¹ znamená hydroxyskupinu a/alebo R⁴ znamená hydroxymetylovú skupinu, pričom akékoľvek labilné skupiny, napríklad karboxylové a hydroxylové skupiny sú chránené a ochranné skupiny sa po skončení reakcie opäť odstránia. Alkyláciu je možné ľahko uskutočniť počiatočnou reakciou so silnou bázou alkalického kovu, napríklad hydridom sodíka a potom reakciou s alkylhalogenidom, napríklad metyljodidom. Reakciu je možné vykonať vo vhodnom rozpúšťad28In another possible embodiment of Method E, a compound of formula (I) may be prepared wherein Z is a), R ¹ is alkoxy and / or R ⁴ is C 1 -C 4 alkoxymethyl in the alkoxy moiety by alkylation a protected derivative of a compound of formula I wherein R ¹ is hydroxy and / or R ⁴ is hydroxymethyl, wherein any labile groups such as carboxyl and hydroxyl groups are protected and the protecting groups are removed again after the reaction is complete. Alkylation can readily be accomplished by initial reaction with a strong alkali metal base such as sodium hydride and then reaction with an alkyl halide such as methyl iodide. The reaction may be carried out in a suitable solvent28

le, napríklad éteri, ako tetrahydrofuráne pri teplote v rozmedzí 0 až 30 °C.1e, for example an ether such as tetrahydrofuran at a temperature in the range of 0 to 30 ° C.

V ďalšom možnom uskutočnení spôsobu E je možné pripraviť derivát všeobecného vzorca I, v ktorom R¹ znamená acylo-In another possible embodiment of Method E, a derivative of the Formula I can be prepared wherein R ¹ is acylo-

A O xyskupinu a/alebo R znamená skupinu CH^OCOR acyláciou chráneného derivátu zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R¹ znamená hydroxylovú skupinu a/alebo R⁴ znamená skupinu CH2OH a akékoľvek labilné skupiny, napríklad karboxylové a hydroxylové skupiny sú chránené, s následným odstránením akejkoľvek prítomnej ochrannej skupiny. Acylačnú reakciu je možné uskutočniť za použitia bežných postupov, napríklad pôsobením karboxylovou kyselinou v prítomnosti aktivačného činidla, ako dicyklohexykarbodiimidu a vhodnej bázy, napríklad dimetylaminopyridínu alebo za použitia halogenidu kyseliny, napríklad chloridu kyseliny, pripadne v prítomnosti vhodnej bázy, ako pyridínu alebo 4-dimetylaminopyridínu.AO x and / or R is CH 2 OCOR by acylating a protected derivative of a compound of formula I wherein R ¹ is hydroxyl and / or R ⁴ is CH 2 OH and any labile groups such as carboxyl and hydroxyl groups are protected, followed by removal any protecting group present. The acylation reaction may be carried out using conventional procedures, for example by treatment with a carboxylic acid in the presence of an activating agent such as dicyclohexycarbodiimide and a suitable base such as dimethylaminopyridine or using an acid halide such as acid chloride, optionally in the presence of a suitable base such as pyridine or 4-dimethylaminopyridine.

Podľa ďalšieho možného uskutočnenia spôsobu E je možné pripraviť derivát všeobecného vzorca I, v ktorom R¹ znamená hydroxylovú skupinu v equatoriálnej konfigurácii z chráneného derivátu zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R¹ znamená hydroxylovú skupinu v axiálnej konfigurácii a akákoľvek labilná skupina, napríklad karboxylová alebo hydroxylová skupina alebo skupina CHO je chránená, s následným odstránením akejkoľvek prítomnej chránenej skupiny. Izomerizačnú reakciu je možné ľahko uskutočniť v dvoch stupňoch Tak, že sa i) oxiduje 2’-axiálna skupina OH na oxoskupinu pôsobením vhodného oxidačného systému, napríklad oxidu chrómového v prítomnosti pyridínu v rozpúšťadle, napríklad v halogenovanom uhľovodíku, ako dichlórmetáne s obsahom anhydridu kyseliny octovej, potom sa ii) redukuje oxoskupina na equatoriálnu skupinu OH za použitia vhodného redukčného činidla, napríklad typu hydroborátu, ako hydroborátu sodného. Redukciu je možné ľahko uskutočniť vo vhodnom rozpúšťadle, ako alkohole, napríklad vo vhodnom metanole pri teplote v rozmedzí 0 až 10 “C.In another possible embodiment of Method E, a derivative of formula I wherein R ¹ is a hydroxyl group in an equatorial configuration from a protected derivative of a compound of formula I wherein R ¹ is a hydroxyl group in an axial configuration and any labile group such as a carboxyl or the hydroxyl group or the CHO group is protected, followed by removal of any protected group present. The isomerization reaction is readily accomplished in two steps by (i) oxidizing the 2'-axial OH group to the oxo group by treatment with a suitable oxidation system such as chromium oxide in the presence of pyridine in a solvent such as a halogenated hydrocarbon such as dichloromethane containing acetic anhydride then (ii) reducing the oxo group to the equatorial OH group using a suitable reducing agent, for example a type of borohydride such as sodium borohydride. The reduction can be easily carried out in a suitable solvent such as an alcohol, for example in a suitable methanol at a temperature in the range of 0 to 10 ° C.

V ďalšom uskutočnení spôsobu E je možné pripraviť deriváty vzorca 1, v ktorých R¹ znamená atóm halogénu z chráneIn another embodiment of Method E, derivatives of Formula 1 wherein R ¹ is a halogen atom from a protecting group can be prepared

ného derivátu zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R^ znamená hydroxylovú skupinu s následným odstránením akejkoľvek ochrannej skupiny. Reakcia prebieha súčasne s premenou konfigurácie. Je teda napríklad možné axiálnu skupinu OH ľahko premeniť na equatoriálny atóm jódu tak, že sa jód pridá k roztoku východiskovej látky vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad uhľovodíku, napríklad toluéne v prítomnosti trifenylfosfínu a jódu a potom sa zmes zahreje, napríklad na teplotu varu pod spätným chladičom.A derivative of a compound of formula I wherein R 1 is a hydroxyl group followed by removal of any protecting group. The reaction takes place simultaneously with the configuration change. Thus, for example, an axial OH group can be easily converted to an equatorial iodine atom by adding iodine to a solution of the starting material in a suitable solvent such as a hydrocarbon such as toluene in the presence of triphenylphosphine and iodine and then heating the mixture, e.g. .

Podobným spôsobom je tiež možné zaviesť atóm fluóru pôsobením vhodného fluoračného činidla, napríklad trifluoridu dietylamínosíry (DAST) vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad halogenovanom uhľovodíku, ako dichlórmetáne, alebo aromatickom uhľovodíku, ako toluéne, približne pri teplote miestnosti .In a similar manner, it is also possible to introduce a fluorine atom by treating with a suitable fluorinating agent, for example diethylaminosulfur trifluoride (DAST) in a suitable solvent, for example a halogenated hydrocarbon such as dichloromethane or an aromatic hydrocarbon such as toluene at about room temperature.

V ďalšom uskutočnení spôsobu E je možné zlúčeninu všeobecného vzorca I, v ktorom Y znamená atóm kyslíka, n = 0, R a R znamenajú atómy vodíka a X znamená skupinu CH alebo chránený derivát tejto zlúčeniny premeniť na zodpovedajúcu zlúčeninu, v ktorej X znamená CH₂ redukciou vodíkom v prítomnosti vhodného katalyzátora, napríklad paládia na aktívnom uhlí vo vhodnom rozpúšťadle s následným odstránením ochrannej skupiny na karboxylovej skupine.In another embodiment of Method E, a compound of formula I wherein Y is O, n = 0, R and R are hydrogen and X is CH or a protected derivative thereof can be converted to the corresponding compound wherein X is CH ₂ reduction with hydrogen in the presence of a suitable catalyst, for example palladium on charcoal in a suitable solvent, followed by deprotection on the carboxyl group.

V inom uskutočnení spôsobu E je možné zlúčeninu všeobecného vzorca I, v ktorom Y znamená atóm kyslíka, n = 0,In another embodiment of Method E, a compound of Formula I wherein Y is O, n = 0,

33

R a R' znamenajú atómy vodíka a X znamená skupinu C=CH₂ premeniť na zodpovedajúcu zlúčeninu, v ktorej X znamená skupinu C = 0 oxidáciou, napríklad za použitia oxidu osmičelého a j odistanú sodného.R and R 'are hydrogen atoms and X is C = CH _{2 to be} converted to the corresponding compound in which X is C = O by oxidation, for example using osmium tetroxide as well as distilled sodium.

Podobne je možné zlúčeninu všeobecného vzorca I, v kto2 3 rom Y znamená atóm kyslíka, n = 0, R a R sú atómy vodíka a X znamená skupinu C = CH₂ premeniť na zodpovedajúcu zlúče2 3 ninu všeobecného vzorca I, v ktorom R a R^a tvoria spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, skupinu C =0 oxidáciou, napríklad pôsobením oxidu chrómového v pyridíne.Similarly, a compound of formula (I) in which Y 3 is oxygen, n = 0, R and R are hydrogen and X is C = CH _{2 can be} converted to the corresponding compound of formula (I) in which R and R ^and form together with the carbon atom to which they are attached a group C = O by oxidation, for example by treatment with chromium trioxide in pyridine.

Podľa ďalšieho možného uskutočnenia spôsobu E je možné derivát zlúčeniny všeobecného vzorca I s chránenou karboxyIn another possible embodiment of Method E, a carboxy protected derivative of a compound of Formula I is possible

lovou skupinou, v ktorom R¹⁵ znamená hydroxylovú skupinu premeniť na zodpovedajúci derivát vzorca I, v ktorom R¹⁵ znamená atóm halogénu štandardnou reakciou, pri ktorej sa hydroxyskupina nahradí atómom halogénu, potom sa odstráni ochranná skupina na karboxylovej skupine. Napríklad náhradu hydroxylovej skupiny atómom fluóru je možné ľahko uskutočniť inverziou konfigurácie tak, že sa k roztoku východiskovej látky pridá DAST v rozpúšťadle, napríklad v halogenovanom uhľovodíku, ako dichlórmetáne. Reakcia dobre prebieha približne pri teplote miestnosti.A compound in which R ¹⁵ is a hydroxyl group is converted to the corresponding derivative of formula I in which R ¹⁵ is a halogen atom by a standard reaction in which the hydroxy group is replaced by a halogen atom, then the protecting group on the carboxyl group is removed. For example, replacement of a hydroxyl group by a fluorine atom can be readily accomplished by inversion of the configuration by adding DAST in a solvent, for example, a halogenated hydrocarbon such as dichloromethane to a solution of the starting material. The reaction proceeds well at about room temperature.

Pri ďalšom uskutočnení spôsobu E je možné zlúčeninu všeobecného vzorca I, v ktorom R¹⁵ znamená alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovanú a/alebo R znamená alkoxymety'lovú skupinu s alkoxylovou časťou s 1 až 4 atómami uhlíka pripraviť alkyláciou chráneného derivátu zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R a/alebo R obsahuje voľnú hydroxylovú skupinu, súčasne sa akékoľvek labilné skupiny, napríklad karboxyskupiny alebo hydroxylové skupiny chránia a ochranné skupiny sa po skončení reakcie opäť odstránia. Alkyláciu je možné ľahko uskutočniť počiatočnou reakciou so silnou bázou alkalického kovu, napríklad hydridom sodíka a potom reakciou s alkylhalogenidom, napríklad metylbromidom. Reakciu je možné uskutočniť vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad v éteri ako tetrahydrofuráne pri teplote v rozmedzí 0 až 50 ’C. V prípade potreby je možné reakciu vykonávať v prítomnosti amóniovej soli, napríklad tetraalkylamóniumhalogenidu, ako tetrabutylamóniumjodídu.In another embodiment of Method E, a compound of Formula I wherein R ¹⁵ is C 1 -C 6 alkoxy optionally substituted and / or R is C 1 -C 4 alkoxymethyl may be prepared by alkylation of a protected derivative of the compound of the formula I in which R and / or R contain a free hydroxyl group, at the same time any labile groups such as carboxy or hydroxyl groups are protected and the protecting groups are removed again after the reaction is complete. Alkylation can readily be accomplished by initial reaction with a strong alkali metal base such as sodium hydride and then reaction with an alkyl halide such as methyl bromide. The reaction may be carried out in a suitable solvent, for example in ether such as tetrahydrofuran at a temperature in the range of 0 to 50 ° C. If desired, the reaction may be carried out in the presence of an ammonium salt, for example a tetraalkylammonium halide such as tetrabutylammonium iodide.

Je tiež možné zaviesť alkylovú skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom v dvoch stupňoch tak, že sa v prvom stupni uskutoční alkenylácia pôsobením vhodného alkenylhalogenidu v prítomnosti bázy, napríklad uhličitanu, ako uhličitanu cézneho v rozpúšťadle, napríklad dimetylformamide približne pri teplote miestnosti a v druhom stupni sa vykonáva hydrogenácia v prítomnosti katalyzátora na báze paládia, napríklad 10% paládia na aktívnom uhlí, postup sa vykonáva približne pri teplote miestnosti.It is also possible to introduce a straight or branched chain alkyl group in two stages by firstly alkenylating with a suitable alkenyl halide in the presence of a base such as a carbonate such as cesium carbonate in a solvent such as dimethylformamide at about room temperature in the first stage. hydrogenation in the presence of a palladium catalyst, for example 10% palladium on charcoal, at about room temperature.

Podľa ďalšieho možného uskutočnenia spôsobu E je možné pripraviť zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom znamená skupinu CF^OCOR alebo R znamená skupinu OCOR acyláciou chráneného derivátu zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R^x znamená CF^OH alebo R znamená hydroxylovú skupinu a akékoľvek labilné skupiny, napríklad karboxylové skupiny a hydroxyskupiny sú chránené a ochranné skupiny sa po skončení reakcie opäť odstránia. Acylačnú reakciu je možné uskutočniť bežným spôsobom, napríklad za použitia karboxylovej kyseliny v prítomnosti aktivačného činidla, ako di-In another possible embodiment of Method E, compounds of formula I wherein CF is OCOR or R is OCOR by acylating a protected derivative of a compound of formula I wherein R ^x is CF 4 OH or R is hydroxyl and any labile may be prepared. groups such as carboxyl and hydroxy groups are protected and the protecting groups are removed again after the reaction is complete. The acylation reaction may be carried out in a conventional manner, for example using a carboxylic acid in the presence of an activating agent such as di-

cyklohexylkarbodimidu a vhodnej bázy, napríklad dimetylaminopyridínu alebo za použitia halogenidu, kyseliny, prípadne v prítomnosti vhodnej alebo dimetylaminopyridínu.cyclohexylcarbodimide and a suitable base, for example dimethylaminopyridine or using a halide, acid, optionally in the presence of a suitable or dimethylaminopyridine.

Podľa ďalšieho možného uskutočnenia pripraviť zlúčeninu všeobecného vzorca I napríklad bázy, ako chloridu pyridínu postupu E , v ktorom CR j e možnéIn another embodiment, a compound of formula I, for example, a base such as pyridine chloride of process E, wherein CR is possible

15_r1615 _r 16

znamená skupinu C = 0 oxidáciou chráneného derivátu zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R¹⁵ znamená hydroxylovú skupinu, pričom akékoľvek labilné skupiny, napríklad karboxylové skupiny a hydroxyskupiny sú chránené a akékoľvek prítomné ochranné skupiny sa po skončení reakcie opäť odstránia. Oxidačnú reakciu je možné ľahko uskutočniť pridaním vhodného oxidačného činidla, napríklad dimetylsulfoxidu v prítomnosti anhydridu kyseliny trifluóroctovej. Oxidáciu je možné uskutočniť vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad halogenovanom uhľovodíku, ako dichlórmetáne pri vyššej teplote, napríklad 40 až 80 °C.is a C = O group by oxidizing a protected derivative of a compound of formula I wherein R ¹⁵ is a hydroxyl group, with any labile groups such as carboxyl and hydroxy groups being protected and any protecting groups present after removal of the reaction. The oxidation reaction can be easily carried out by adding a suitable oxidizing agent, for example dimethylsulfoxide, in the presence of trifluoroacetic anhydride. The oxidation may be carried out in a suitable solvent, for example a halogenated hydrocarbon such as dichloromethane at a higher temperature, for example 40 to 80 ° C.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom CR^R¹⁶ znamenajú skupinu CH = je možné pripraviť reakciou zodpovedajúcej zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej chráneného derivátu, v ktorom CR^^R¹⁶ znamená skupinu C = 0, s alkyl trifenylfosfóniumhalogenidom a alkyllítiom v aprotickom rozpúšťadle, napríklad tetrahydrofuráne.Compounds of formula I in which CR 1 R ¹⁶ is CH = may be prepared by reaction of the corresponding compound of formula I or a protected derivative thereof in which CR 1 R ¹⁶ is C = O with an alkyl triphenylphosphonium halide and an alkyl lithium in an aprotic solvent , for example tetrahydrofuran.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom znamená azidoskupinu, je možné pripraviť zo zodpovedajúcej zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej chráneného derivátu, v ktorom R¹⁵ znamená hydroxylovú skupinu reakciou s toluénsulfonylhalogenidom, výsledný toluénsulfonátový derivát sa potom necháThe compounds of formula I where is azido may be prepared from the corresponding compound of formula I, or a protected derivative thereof, wherein R ¹⁵ is hydroxy by reaction with toluénsulfonylhalogenidom, toluenesulfonate resulting compound is then allowed to

reagovať s azidom alkalického kovu, napríklad azidom lítia v aprotickom rozpúšťadle, napríklad dichlórmetáne.react with an alkali metal azide such as lithium azide in an aprotic solvent such as dichloromethane.

V rade vyššie uvedených postupov je nutné odstrániť v konečnom stupni jednu alebo väčší počet ochranných skupín na získanie výsledných látok vzorca I. Podľa ďalšieho všeobecného postupu F je možné odstrániť ochranné skupiny z chráneného derivátu zlúčeniny vzorca I. Vhodné ochranné skupiny na karboxylovej skupine a hydroxylovej skupine zahrnujú bežne používané skupiny, opísané napríklad v Protective Groups in Organic Chemistry, Ed. J. F. V. McOmie, Plénum Press, 1973 alebo Protective Groups in Organic Synthesis, Theodor V. Greene, John Viley and Sons, 1991. Ako príklady vhodných ochranných skupín na karboxylovej skupine je možné uviesť arylalkylové skupiny, ako dif enylmety'Lovú, p-metoxybenzylovú a silylovú skupinu, napríklad trimetylsilyletyl alebo terc.butyldimetylsilyl. Ako príklady vhodných ochranných skupín na hydroxyskupine je možné uviesť arylalkylové skupiny, napríklad p-metoxybenzylové a esterové skupiny, ako benzyloxykarbonylovú skupinu. Aldehydové skupiny je možné chrániť vo forme cyklických acetálov.In a number of the above processes it is necessary to remove one or more protecting groups in the final step to give the final compounds of formula I. According to another general procedure F, it is possible to remove protecting groups from a protected derivative of a compound of formula I. Suitable protecting groups on carboxyl and hydroxyl groups include commonly used groups, as described, for example, in Protective Groups in Organic Chemistry, Ed. JFV McOmie, Plenum Press, 1973, or Protective Groups in Organic Synthesis, Theodor V. Greene, John Viley and Sons, 1991. Examples of suitable protecting groups on a carboxyl group include arylalkyl groups such as diphenylmethyl, p-methoxybenzyl and the like. a silyl group, for example trimethylsilylethyl or tert-butyldimethylsilyl. Examples of suitable hydroxy protecting groups include arylalkyl groups such as p-methoxybenzyl and ester groups such as benzyloxycarbonyl. The aldehyde groups can be protected in the form of cyclic acetals.

Ochranné skupiny je možné po skončení reakcie odstrániť bežným spôsobom. Napríklad difenylmetylovú skupinu je možné ľahko odstrániť pôsobením kyseliny trifluóroctovej alebo hydrogenolýzou v prítomnosti katalyzátora na báze paládia, napríklad 10% paládiom na aktívnom uhlí. Benzyloxykarbonylovú skupinu je možné ľahko odstrániť tiež hydrogenolýzou v prítomnosti katalyzátora na báze paládia, napríklad 10% paládiom na aktívnom uhli. Ďalšie skupiny, napríklad p-metoxybenzylovú skupinu je možné ľahko odštiepiť pôsobením 2,3dichlór-5,6-dikyano-l , 4-benzochinónu . Si'Lylové skupiny, napríklad trimetylsilyletylovú skupinu alebo terc.butyldimetylsilylovú skupinu je možné ľahko odstrániť pôsobením fluoridových iónov. Cyklické acetálové skupiny je možné ľahko premeniť na aldehydové skupiny adíciou vhodnej kyseliny, napríklad kyseliny chlorovodíkovej.The protecting groups can be removed by conventional means after the reaction is complete. For example, the diphenylmethyl group can be readily removed by treatment with trifluoroacetic acid or by hydrogenolysis in the presence of a palladium catalyst such as 10% palladium on charcoal. The benzyloxycarbonyl group can also be easily removed by hydrogenolysis in the presence of a palladium catalyst, for example 10% palladium on activated carbon. Other groups, such as the p-methoxybenzyl group, can be readily cleaved by treatment with 2,3-dichloro-5,6-dicyano-1,4-benzoquinone. Siyl groups, for example trimethylsilylethyl or tert-butyldimethylsilyl, can be easily removed by treatment with fluoride ions. Cyclic acetal groups can be readily converted to aldehyde groups by addition of a suitable acid, for example hydrochloric acid.

Východiskové látky všeobecného vzorca II je možné pripraviť tak, že sa nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzor (X) ca XThe starting materials of the formula II can be prepared by reacting a compound of the formula (X) and X

kdewhere

R⁸ znamená ochrannú skupinu na karboxylovej skupine, so zlúčeninou všeobecného vzorca XIR ⁸ represents a carboxyl protecting group with a compound of formula XI

(xi)(Xi)

kdewhere

R¹, R⁴, X a Y majú význam, uvedený vo vzorci II, alebo s chráneným derivátom tejto zlúčeniny, s následným prípadným odstránením akejkoľvek prítomnej ochrannej skupiny. Reakciu je možné ľahko uskutočniť tak, že sa zlúčeniny všeobecného vzorca X a XI zahrejú na teplotu v rozmedzí 40 až 80 °C vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad v uhľovodíku, ako toluéne v prítomnosti kyseliny, napríklad zmesi kyseliny bromovodíkovej a trifenylfos.f ínu .R ¹ , R ⁴ , X and Y are as defined in formula II, or with a protected derivative thereof, followed by optional removal of any protecting group present. The reaction can be conveniently carried out by heating the compounds of formula X and XI to a temperature between 40 ° C and 80 ° C in a suitable solvent such as a hydrocarbon such as toluene in the presence of an acid such as a mixture of hydrobromic acid and triphenylphosphine.

V prípade, že vo vzorci XI znamenajú skupiny XH a YH hydroxylové skupiny, je možné tieto skupiny chrániť ako acyloxyskupiny, napríklad acetoxyskupiny a ochranné skupiny potom po ukončení reakcie opäť odstrániť. Acetoxyskupinu je možné odstrániť pridaním vhodnej bázy, napríklad alkoxidu, ako metoxidu sodíka vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad alkohole, ako metanole približne pri teplote miestnosti.When XH and YH are hydroxyl groups in formula XI, they can be protected as acyloxy groups, for example acetoxy groups and protecting groups can then be removed again after completion of the reaction. The acetoxy group may be removed by addition of a suitable base, for example an alkoxide such as sodium methoxide in a suitable solvent, for example an alcohol such as methanol at about room temperature.

Vyššie uvedená reakcia je zvlášť výhodná na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca II, v ktorých R⁴ má význam, odlišný od metylovej skupiny. V prípade, že R⁴ znamená metylovú skupinu, môže byť vhodnejšie pripravovať zlúčeniny všeobecného vzorca II zo 4’-demetyIsordarínu vzorca XII (XII)The above reaction is particularly advantageous for the preparation of compounds of formula II in which R ⁴ has a meaning different from the methyl group. In the case where R ⁴ is a methyl group, it may be preferable to prepare compounds of formula II from 4'-demethylsordarin of formula XII (XII)

Napríklad zlúčeniny všeobecného vzorca III, v ktorom R⁴ znamená metyl, je možné pripraviť tak, že sa karboxylová skupinžt v zlúčeninách všeobecného vzorca XII chráni bežným spôsobom, potom sa premení 2’-axiálna hydroxyskupina na inú skupinu vo význame R¹ vyššie: uvedenými postupmi. Pri manipulácii s 2’-axiálnou hydroxylovou skupinou môže: byť nevyhnutné chrániť hyd.roxylové skupiny v polohách 3’- a 4’. Túto ochranu je možné uskutočniť tvorbou izoproylidénovej skupiny spôsobom podľa prvého uskutočnenia spôsobu A. Túto skupinu je potom možné na vytvorenie diolovej funkcie odstrániť pôsobením kyseliny, napríklad anorganickej kyseliny, ako kyseliny chlorovodíkovej.For example, compounds of formula III in which R ⁴ is methyl can be prepared by protecting the carboxyl group in compounds of formula XII in a conventional manner, then converting the 2'-axial hydroxy group to another R ¹ group as described above: . When handling a 2'-axial hydroxyl group, it may be necessary to protect the hydroxyl groups at the 3'- and 4 'positions. This protection can be accomplished by forming an isoproylidene group by the method of the first embodiment of Method A. This group can then be removed by treatment with an acid, for example an inorganic acid such as hydrochloric acid to produce the diol function.

V prípade, že sa karboxylová skupina v zlúčenine všeobecného vzorca XII má chrániť difenylmetylovou skupinou, je možné pôsobiť na roztok zlúčeniny všeobecného vzorca XII v alkoholovom rozpúšťadle, napríklad v metanole a/alebo v halogenovanom uhľovodíku, ako dichlórmetáne difenylazometanom, ktorý sa pridáva vo forme roztoku v halogenovanom uhľovodíku, napríklad v dichlórmetáne.When a carboxyl group in a compound of formula XII is to be protected by a diphenylmethyl group, a solution of a compound of formula XII in an alcoholic solvent such as methanol and / or a halogenated hydrocarbon such as dichloromethane with diphenylazomethane can be treated as a solution. in a halogenated hydrocarbon, for example dichloromethane.

Zlúčeniny všeobecného vzorca II, v ktorom X a Y znamenajú atóm kyslíka alebo síry, je možné tiež pripraviť dekarbonyláciou zodpovedajúceho chráneného derivátu zlúčeniny 2 3 všeobecného vzorca I, v ktorom CR R znamená C = 0 a n = 0. Dekarbonyláciu je možné ľahko uskutočniť pridaním alkoxyz'lúčeniny, napríklad CH^ONa vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad alkohole, ako metanole.Compounds of formula II in which X and Y are O or S may also be prepared by decarbonylation of the corresponding protected derivative of compound 2 of formula I in which CR R is C = O and n = 0. Decarbonylation may be readily accomplished by the addition of alkoxy. compounds, for example CH 2 ONa in a suitable solvent, for example an alcohol such as methanol.

Zlúčeniny všeobecného vzorca X je možné ľahko pripraviť zo sordaricínu za použitia bežných ochranných skupín na karCompounds of formula (X) may be readily prepared from sordaricin using conventional carboxy protecting groups

boxylovej skupine. Napríklad v prípade, že RP v zlúčenine všeobecného vzorca X znamená trimetylsilyletyl, je možné túto skupinu zaviesť tak, že sa na sordaricín pôsobí 0-[2(trimetylsilyl)etyl]-N,N’-diizopropulizomočovinou, bežne vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad éteri, ako tetrahydrofuráne pri zvýšenej teplote, napríklad za varu pod spätným chladičom. V prípade, že RP znamená difenylmetylovú skupinu, je možné túto skupinu naviazať vyššie uvedeným spôsobom.boxyl group. For example, when RP in the compound of formula (X) is trimethylsilylethyl, this group can be introduced by treating the sordaricin with O- [2- (trimethylsilyl) ethyl] -N, N'-diisopropuloisourea, usually in a suitable solvent, e.g. such as tetrahydrofuran at elevated temperature, for example under reflux. When RP is a diphenylmethyl group, it can be attached as described above.

V prípade, že hydroxylovú skupinu v deriváte sordarínu s chránenou karboxylovou skupinou alebo v zlúčenine všeobecného vzorca XII je potrebné chrániť za použitia p-metoxybenzylovej skupiny, je možné túto skupinu zaviesť reakciou s oxidom cínu, napríklad s oxidom dibutylcínu v uhľovodíkovom rozpúšťadle, napríklad v toluéne, pri teplote varu pod spätným chladičom, s následným pridaním p-metoxybenzylhalogenidu v prítomnosti fluoridu, napríklad tetrabutylamóniumfluoridu. V prípade, že ochrannou skupinou má byť benzyloxykarbonylová skupina, je možné túto skupinu zaviesť reakciou s benzy’lhalogénmravčanom v prítomnosti vhodného amínu, napríklad 4-dimetylaminopyridínu v rozpúšťadle, napríklad v halogenovanom rozpúšťadle, ako dichlórmetáne alebo acetonitrile.When a hydroxyl group in a carboxy-protected sordarin derivative or a compound of formula XII is to be protected using a p-methoxybenzyl group, it can be introduced by reaction with a tin oxide such as dibutyltin oxide in a hydrocarbon solvent such as toluene , at reflux, followed by the addition of p-methoxybenzyl halide in the presence of a fluoride such as tetrabutylammonium fluoride. When the protecting group is to be a benzyloxycarbonyl group, it may be introduced by reaction with a benzyl haloformate in the presence of a suitable amine, for example 4-dimethylaminopyridine, in a solvent, for example a halogenated solvent such as dichloromethane or acetonitrile.

Zavedenie skupiny L do vzorca VIII, v ktorom L znamená alkyl- alebo arylsulfonyloxyskupinu a/alebo skupiny R 0, ktorá znamená alkyl- alebo arylsulfonyloxyskupinu, je možné uskutočniť reakciou vhodne chráneného derivátu sordarínu alebo zlúčeniny vzorca XII s alkyl- alebo arylsulfonylhalogenidom v prítomnosti vhodného rozpúšťadla, napríklad pyridínu, prípadne obsahujúceho amín, napríklad 4-dimetylaminopyridín alebo v halogenovanom uhľovodíku, ako dichlórmetáne v prítomnosti vhodného amínu, ako 4-dimetylaminopyridín.u. Reakciu je možné ľahko uskutočniť približne pri teplote miestnosti. Ďalšie skupiny je možné podobne zaviesť za použitia bežných postupov.The introduction of the L group into formula VIII wherein L is an alkyl- or arylsulfonyloxy group and / or the R0 group which is an alkyl- or arylsulfonyloxy group may be carried out by reacting a suitably protected sordarin derivative or compound of formula XII with an alkyl- or arylsulfonyl halide in the presence of a suitable solvent. pyridine optionally containing an amine such as 4-dimethylaminopyridine or in a halogenated hydrocarbon such as dichloromethane in the presence of a suitable amine such as 4-dimethylaminopyridine. The reaction can be easily carried out at about room temperature. Other groups may similarly be introduced using conventional procedures.

Je zrejmé, že môže byť potrebné premeniť hydroxylovú skupinu na požadovanú skupinu R¹⁵ pred cyklizáciou podľa spôsobu C. V tomto prípade je možné príslušne chránený deri36Obviously, it may be necessary to convert the hydroxyl group to the desired R ¹⁵ group prior to cyclization according to Method C. In this case, the appropriately protected derivative may be used.

vát 4 ’-demetylsordarínu alebo zlúčeniny vzorca II, v ktorom R^25a znamená hydroxylovú skupinu, nechať reagovať tak, aby došlo k premene 4’-hydroxylovej skupiny na požadovanú skupinu R¹ bežnými postupmi. Napríklad premenu na alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyalkoxyskupinu alebo arylalkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylových častiach uskutočniť bežnou alkyláciou, napríklad niektorým z vyššie uvedených postupov. Hydroxylovú skupinu na získanie zlúčeniny, v ktorej R¹⁵ znamená atóm vodíka, je možné ľahko odstrániť v dvoch stupňoch tak, že sa i) vytvorí S-alkylditiokarbonát pôsobením silnej bázy alkalického kovu, napríklad hydridu sodíka v prítomnosti imidazolu vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad éteri ako tetrahydrofuráne pri nižšej teplote, napríklad 0 °C a potom sa pridá sírouhlík a alkylhalogenid, napríklad metyljodid pri teplote miestnosti, potom sa .ii) uvedená skupina odstráni tak, že sa na roztok medziproduktu v uhľovodíku, napríklad toluéne, pri vyššej teplote, napríklad 80 až 120 °C pôsobí redukčným činidlom typu hydridu, napríklad hydridom trialkylcínu, napríklad tributylcínu, prípadne v prítomnosti alktivačného činidla, ako azobis(izobutyronitrilu). Premenu na alkylovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka je možné uskutočniť tak, že sa i) vytvorí S-alkylditiokarbonát vyššie uvedeným spôsobom, ii) táto skupina sa nahradí alkenylovou skupinou reakciou s trialkenylcínom za podmienok, uvedených vyššie na odstránenie S-alkylditiokarbonátovej skupiny a iii) alkenylová skupina sa redukuje na alkylovú skupinu, napríklad hydrogenáciou v prítomnosti vhodného katalyzátora na báze paládia, ako 10% paládia na aktívnom uhlí.The 4'-methylsordarin formate or the compound of formula II in which R ^25a represents a hydroxyl group is reacted to convert the 4'-hydroxyl group to the desired R ¹ group by conventional procedures. For example, conversion to C 1 -C 6 alkoxy, C 1 -C 4 alkoxyalkoxy or C 1 -C 4 arylalkoxy can be accomplished by conventional alkylation, for example, by any of the above procedures. The hydroxyl group to obtain a compound in which R ¹⁵ is a hydrogen atom can be readily removed in two stages by i) forming the S-alkyldithiocarbonate by treatment with a strong alkali metal base such as sodium hydride in the presence of imidazole in a suitable solvent such as an ether such as tetrahydrofuran at a lower temperature, e.g. 0 ° C, and then carbon disulphide and an alkyl halide such as methyl iodide at room temperature are added, then (ii) the group is removed by removing to a solution of the intermediate in a hydrocarbon such as toluene at a higher temperature, e.g. to 120 ° C is treated with a hydride-type reducing agent, for example a trialkyl tin hydride, for example tributyltin, optionally in the presence of an inactivating agent such as azobis (isobutyronitrile). Conversion to a C 2 -C 6 alkyl group may be accomplished by i) forming an S-alkyl di-dithiocarbonate as described above, ii) replacing it with an alkenyl group by reaction with a trialkenyltin under the conditions outlined above to remove the S-alkyl di-dithiocarbonate group; iii) the alkenyl group is reduced to an alkyl group, for example by hydrogenation in the presence of a suitable palladium catalyst such as 10% palladium on charcoal.

Soli zlúčenín všeobecného vzorca I s bázami je možné ľahko vytvoriť tak, že sa na zlúčeninu všeobecného vzorca I pôsobí príslušnou soľou alebo bázou. Je napríklad možné pôsobiť na zlúčeninu všeobecného vzorca I hydroxidom sodným alebo draselným, hydrogénuhličitanom, uhličitanom alebo octanom sodným alebo draselným, napríklad hydroxidom sodným, hydrogénuhličitanom draselným, hydrogénuhličitanom sodným alebo octanom draselným, ďalej octanom amónnym alebo vápenaThe salts of the compounds of the formula I with bases can easily be formed by treating the compound of the formula I with an appropriate salt or base. It is possible, for example, to treat a compound of the formula I with sodium or potassium hydroxide, sodium or potassium bicarbonate, carbonate or acetate, for example sodium hydroxide, potassium bicarbonate, sodium hydrogen carbonate or potassium acetate, ammonium acetate or lime

tým alebo L-lyzínom. Soľ je možné pripraviť napríklad tak, že sa príslušná soľ alebo báza, v prípade potreby vo vhodnom roztoku pridá k roztoku alebo k suspenzii zlúčeniny všeobecného vzorca I vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad alkohole, ako metanole alebo v dioxáne pri teplote v rozmedzí 0 až 80 °C, bežne približne pri teplote miestnosti.or L-lysine. The salt may be prepared, for example, by adding the appropriate salt or base, if necessary in a suitable solution, to a solution or suspension of a compound of formula I in a suitable solvent such as an alcohol such as methanol or dioxane at a temperature between 0 and 80 °. C, typically at about room temperature.

Farmaceutický prijateľné soli je možné tiež pripraviť z iných solí vrátane iných farmaceutický prijateľných solí zlúčenín všeobecného vzorca I bežnými postupmi.Pharmaceutically acceptable salts may also be prepared from other salts including other pharmaceutically acceptable salts of the compounds of formula I by conventional procedures.

Metabolický labilné estery zlúčení n všeobecného vzorca I je možné vytvoriť na karboxylovej skupine niektorým zo zvyčajných postupov. Podobne je možné metabolický labilné estery vytvoriť aj na ktorejkoľvek voľnej hydroxylovej skupine v molekule.The metabolic labile esters of the compounds of formula (I) may be formed on the carboxyl group by any of the usual methods. Similarly, metabolic labile esters can be formed at any free hydroxyl group in the molecule.

Nové zlúčeniny všeobecného vzorca XII je možné pripraviť ďalej uvedenou fermentáciou alebo tiež demetyláciou sordarínu za použitia biologickej premeny.The novel compounds of formula (XII) may be prepared by the following fermentation or also by demethylation of sordarin using biological conversion.

Fermentačný postup spočíva v tom, že sa pestuje mikroorganizmus, produkujúci zlúčeninu vzorca XII a táto látka sa potom zo živného prostredia izoluje.The fermentation process consists in culturing a microorganism producing a compound of formula XII and then isolating it from the culture medium.

Mikroorganizmom, schopným produkovať zlúčeninu všeobecného vzorca XII môže byť mutovaný kmeň Sordaria araneosa, ktorý je možné ľahko identifikovať tak, že sa sledujú kmene, prežívajúce po tvorbe mutácie a analyzujú sa vzorky živného prostredia týchto kmeňov bežným spôsobom. Príslušný mutovaný kmeň Sordaria araneosa bol uložený v stálej verejnej zbierke kultúr CAB International Mycological Inštitúte, Genetic Resource Reference Collection, Bakehan Lane, Egham, Surrey TV20 9TY, Anglicko. Kmeň bol uložený 10. júna 1994 pod č. IMI 362 184 a jeho životaschopnosť bola overená 13. 21. júna 1994. Zbierka je uznávaná podľa Budapeštianskej dohody. Vlastnosti kmeňa IMI 362 184 sú uvedené v príklade 74.The microorganism capable of producing a compound of formula (XII) may be a mutated strain of Sordaria araneosa, which can be easily identified by tracing the strains surviving after mutation and analyzing the culture samples of these strains in a conventional manner. The respective mutated strain of Sordaria araneosa was deposited at the Permanent Public Culture Collection of CAB International Mycological Institute, Genetic Resource Reference Collection, Bakehan Lane, Egham, Surrey TV20 9TY, England. The strain was deposited on 10 June 1994 under no. IMI 362 184 and its viability was verified on June 21, 1994. The collection is recognized under the Budapest Agreement. The properties of strain IMI 362 184 are shown in Example 74.

Uvedený mikroorganizmus IMI 362 184 tiež tvorí súčasť podstaty vynálezu.The microorganism IMI 362 184 also forms part of the invention.

Mutanty kmeňa IMI 362 184 môžu vznikať samovoľne, alebo je možné ich vytvoriť radom postupov, uvedených napríklad v súhrnej publikácii Techniques fo.r the Development of MicMutants of strain IMI 362 184 may be spontaneous, or may be produced by a variety of techniques, such as those described in Techniques fo.r the Development of Mic.

roorganisms, H. I. Adler, Radiation and Radioisotopes for Industrial Microorganisms, Proceedings of the Symposium, Viedeň 1973, str. 241, Internátional Atomic Energy Authority. Postupy na tvorbu mutácii zahrnujú pôsobenie ionizačného žiarenia, chemické metódy, napríklad pôsobenie N-metyl-N’nitro-N-nitrozoguanidínu NTG, pôsobenie tepla, genetické postupy, ako sú rekombinácie a transformácie a selektívne techniky pre vznik spontánnych mutant.roorganisms, H. I. Adler, Radiation and Radioisotopes for Industrial Microorganisms, Proceedings of the Symposium, Vienna 1973, p. 241, International Atomic Energy Authority. Methods for generating mutations include ionizing radiation, chemical methods such as N-methyl-N'nitro-N-nitrosoguanidine NTG, heat treatment, genetic techniques such as recombination and transformation, and selective techniques for spontaneous mutant formation.

Zlúčeniny všeobecného vzorca XII je možné pripraviť fermentáciou bežným spôsobom, napríklad pestovaním vhodného organizmu v prítomnosti využiteľných zdrojov uhlíka, dusíka a anorganických solí s následnou izoláciou požadovaného výsledného produktu.The compounds of formula (XII) may be prepared by fermentation in a conventional manner, for example by growing a suitable organism in the presence of useful sources of carbon, nitrogen and inorganic salts, followed by isolation of the desired end product.

Využiteľnými zdrojmi uhlíka, dusíka a anorganických solí môžu byť jednoduché alebo komplexné látky. Zdrojom uhlíka je zvyčajne glukóza, maltóza, škrob, glycerol, melasa, dextrin, laktóza, sacharóza, fruktóza, galaktóza, myoinozitol, D-manitol, sójový olej, karboxylové kyseliny, aminokyseliny, glyceridy, alkoholy, alkány a rastlinné oleje. Zdroje uhlíka budú zvyčajne tvoriť 0,5 až 10 % hmotnostných fermentačného prostredia. Výhodnými zdrojmi uhlíka sú najmä fruktóza, glukóza a sacharóza.The usable sources of carbon, nitrogen and inorganic salts may be simple or complex substances. The carbon source is usually glucose, maltose, starch, glycerol, molasses, dextrin, lactose, sucrose, fructose, galactose, myoinositol, D-mannitol, soybean oil, carboxylic acids, amino acids, glycerides, alcohols, alkanes, and vegetable oils. The carbon sources will generally comprise 0.5 to 10% by weight of the fermentation broth. Preferred carbon sources are in particular fructose, glucose and sucrose.

Zo zdrojov dusíka je možné uviesť napríklad sójovú múku, kukuričný výluh, liehovarenské výpalky, extrakt z kvasníc, múku z bavlníkových semien, peptóny, mleté orechy, sladový extrakt, melasu, kazeín, zmes aminokyselín, plynný alebo kvapalný amoniak, amónne soli a dusičnany. Je možné použiť aj močovinu a iné amidy. Zdroje dusíka budú zvyčajne tvoriť 0,1 až 10 % hmotnostných fermentačného prostredia.Nitrogen sources include, for example, soy flour, corn steep liquor, distillers, yeast extract, cottonseed flour, peptones, ground nuts, malt extract, molasses, casein, amino acid mixtures, gaseous or liquid ammonia, ammonium salts and nitrates. Urea and other amides may also be used. The nitrogen sources will generally comprise 0.1 to 10% by weight of the fermentation broth.

Živné anorganické soli je možné zaradiť do živného prostredia ako bežné soli, schopné dodávať sodík, draslík, amónne ióny, železo, horčík, zinok, nikel, kobalt, mangán, vanád, chróm, vápnik, meď, molybdén, bór, fosfátové, sulfátové, chloridové a karbonátové ióny.The nutrient inorganic salts may be included in the culture medium as common salts capable of supplying sodium, potassium, ammonium, iron, magnesium, zinc, nickel, cobalt, manganese, vanadium, chromium, calcium, copper, molybdenum, boron, phosphate, sulfate, chloride and carbonate ions.

Organizmus sa zvyčajne pestuje pri teplote 20 až 40 C s výhodou 20 až 35 °C a zvlášť pri teplote 25 °C, je žiaduce živné prostredie prevzdušniť a miešať, napríklad pretrepáva39The organism is usually grown at a temperature of 20 to 40 ° C, preferably 20 to 35 ° C, and especially at a temperature of 25 ° C, it is desirable to aerate and mix the culture medium, for example, shaking39

ním alebo priamym miešaním. Na začiatku pestovania je možné živné prostredie naočkovať malým množstvom mycélia a/alebo spór. Získaný vegetatívny očkovací materiál je možné preniesť do fermentačného prostredia alebo je ho možné ešte pomnožiť pred prenesením do hlavného fermentačného prostredia. Fermentácia zvyčajne prebieha pri pH v rozmedzí 3,5 až 9,5, s výhodou 4,5 až 7,5. Môže byť potrebné pridávať k fermentačnému prostrediu bázu alebo kyselinu na udržanie pH v žiadúcom rozmedzí. Vhodnými bázami na tento účel sú hydroxidy alkalických kovov, napríklad vodný roztok hydroxidu sodného alebo hydroxidu draselného. Vhodnými kyselinami sú anorganické kyseliny, napríklad kyselina chlorovodíková, sírová alebo fosforečná.mixing or direct mixing. At the start of cultivation, the culture medium can be inoculated with a small amount of mycelia and / or spores. The vegetative seeding material obtained can be transferred to the fermentation broth or multiplied before being transferred to the main fermentation broth. The fermentation generally takes place at a pH in the range of 3.5 to 9.5, preferably 4.5 to 7.5. It may be necessary to add a base or acid to the fermentation broth to maintain the pH in the desired range. Suitable bases for this purpose are alkali metal hydroxides, for example aqueous sodium or potassium hydroxide. Suitable acids are inorganic acids, for example hydrochloric, sulfuric or phosphoric acid.

Fermentáciu je možné vykonávať 4 až 30 dní, s výhodou 5 až 15 dní. Proti príliš veľkému peneniu je možné pridávať protipenivé látky v príslušných intervaloch. Vo vhodných intervaloch je podľa potreby možné do fermentačného prostredia pridávať aj zdroje uhlíka a/alebo dusíka.The fermentation can be carried out for 4 to 30 days, preferably for 5 to 15 days. Anti-foaming agents can be added at appropriate intervals to prevent excessive foaming. Carbon and / or nitrogen sources may also be added to the fermentation broth as appropriate at appropriate intervals.

Zlúčenina všeobecného vzorca XII je po fermentácii prevažne spojená s bunkovým materiálom a je možné j ú uvoľniť do roztoku pridaním kyseliny a s vodou miešateľného organického rozpúšťadla alebo s výhodou pridaním bázy, napríklad hydroxidu sodného. Bunkový materiál je z roztoku možné oddeliť odstredením, bežnou filtráciou alebo filtráciou za použitia membrán. Výsledný roztok je potom možné okysliť, napríklad kyselinou sírovou až do pH nižšieho než 6, napríklad 4,5.After fermentation, the compound of formula (XII) is predominantly associated with cellular material and can be released into solution by addition of an acid and a water-miscible organic solvent, or preferably by addition of a base such as sodium hydroxide. The cellular material can be separated from the solution by centrifugation, conventional filtration or membrane filtration. The resulting solution can then be acidified, for example with sulfuric acid, to a pH of less than 6, for example 4.5.

Zlúčeninu všeobecného vzorca XII je možné izolovať a čistiť rôznymi frakcionačnými postupmi, napríklad kombináciou adsorpcie a elúcie, zrážaním, frakčnou kryštalizáciou, extrakciou rozpúšťadlom alebo delením medzi rôzne rozpúšťadlá, tieto postupy je možné rôznym spôsobom kombinovať.The compound of formula (XII) can be isolated and purified by a variety of fractionation techniques, for example, by combining adsorption and elution, by precipitation, fractional crystallization, solvent extraction, or separation between different solvents.

Bolo dokázané, že na izoláciu a čistenie zlúčeniny všeobecného vzorca IX je zvlášť vhodná adsorpia na tuhý nosič s následnou elúciou.It has been shown that adsorption to a solid support followed by elution is particularly suitable for the isolation and purification of the compound of formula (IX).

Vhodným tuhým nosičom je napríklad oxid kremičitý, makroretikulárna adsorpčná živica bez funkčných skupín, napríklad zosietená živica na báze polyméru etyréndivinylbenzénu,A suitable solid carrier is, for example, silica, a non-functional macroreticular adsorption resin, for example, a cross-linked resin based on ethylenedivinylbenzene polymer,

napríklad CG161, Amberlit XAD-2, XAD-4, XAD-16 alebo XAD-1180 (Rohm a Haas Limited) alebo Kastell S 112 (Montedison) , ďalej substituovaný styréndivinylbenzénový polymér, napríklad Diaion SP207 (Mitsubishi), anionomenič, napríklad IRA-958 alebo MacroPrep Hugh Q (BioRad), s organickým rozpúšťadlom kompatibilný zosietený dextrán, napríklad Sephadex LH20 (Pharraacia UK Limited), alebo materiál v reverznej fáze, napríklad oxid kremičitý, viazaný na uhľovodík, napríklad C-£g-viazaný oxid kremičitý.for example CG161, Amberlite XAD-2, XAD-4, XAD-16 or XAD-1180 (Rohm and Haas Limited) or Kastell S 112 (Montedison), a further substituted styrenedivinylbenzene polymer such as Diaion SP207 (Mitsubishi), an anion exchanger such as IRA- 958 or MacroPrep Hugh Q (BioRad), an organic solvent compatible crosslinked dextran, for example Sephadex LH20 (Pharraacia UK Limited), or a reverse phase material, for example a hydrocarbon-bound silica, for example C 8 -g bonded silica.

Zlúčeninu všeobecného vzorca XII je tiež možné izolovať a čistiť za použitia kvapalného anionomeniča, napríklad LA 2.The compound of formula XII can also be isolated and purified using a liquid anion exchanger, for example LA 2.

Vhodným rozpúšťadlom na elúciu zlúčeniny všeobecného vzorca XII bude rozpúšťadlo, závislé na povahe adsorpčného prostriedku. Použitím polymérnej živice, napríklad XAD-16 je zvlášť vhodné použitie rozpúšťadiel, miešateľných vodou, ako sú metanol, acetón, izopropanol alebo acetonitril v zmesi s rôznymi podielmi vody.A suitable solvent for eluting the compound of formula (XII) will be a solvent depending on the nature of the adsorbent. By using a polymeric resin, for example XAD-16, it is particularly suitable to use water-miscible solvents such as methanol, acetone, isopropanol or acetonitrile in admixture with various portions of water.

Prítomnosť zlúčeniny všeobecného vzorca XII v priebehu extrakcie a izolácie je možné sledovať bežnými postupmi, napríklad pomocou HPLC alebo UV-spektroskopie alebo využitím optickej otáčavosti alebo inej vlastnosti výslednej látky.The presence of a compound of formula (XII) during extraction and isolation can be monitored by conventional procedures, for example by HPLC or UV-spectroscopy, or by using optical rotation or other property of the resulting compound.

V prípade, že sa zlúčenina všeobecného vzorca XII získa vo forme roztoku v organickom rozpúšťadle, napríklad po čistení. absorpciou a elúciou, je možné rozpúšťadlo odstrániť bežnými postupmi, napríklad odparením a tak získať požadovanú zlúčeninu. V prípade potreby je možné výslednú látku ďalej čistiť chromatograficky, napríklad protiprúdovou chromatograf iou za použitia špirálových extrakčných materiálov, napríklad s väčším počtom vrstiev alebo tiež pomocou HPLC alebo použitím kvapaliny v superkr.itickom stave a rôznych adsorpčných materiálov, ako sú uhlík, oxid hlinitý, vanád, polymerné živice alebo oxid kremičitý, prípadne s ďalšou naviazanou fázou. Vhodné systémy rozpúšťadiel a elučných činidiel na chromatografické čistenie alebo delenie zlúčeniny všeobecného vzorca XII od iných látok budú samozrejme závisieť na povahe použitého adsorpčného činidla. V prípade, žeWhen the compound of formula XII is obtained as a solution in an organic solvent, for example after purification. absorption and elution, the solvent may be removed by conventional means, for example by evaporation, to give the desired compound. If desired, the resulting material can be further purified by chromatography, for example, by countercurrent chromatography using spiral extraction materials, for example with multiple layers, or also by HPLC or using supercritical fluid and various adsorbent materials such as carbon, alumina, vanadium, polymeric resins or silica, optionally with another phase bound. Suitable solvent and eluent systems for chromatographic purification or separation of the compound of formula (XII) from other materials will, of course, depend on the nature of the adsorbent used. In case that

sa použije C8-viazaný oxid kremičitý, je zvlášť vhodným systémom zmes acetonitrilu a vody. Zlúčeninu ej možné ďalej čistiť extrakciou rozpúšťadlom, napríklad vhodným organickým rozpúšťadlom, ako je ketón, napríklad acetón alebo metyletylketón, halogenovaným uhľovodíkom, alkoholom, ako metanolom, diolom, ako propán-1,2-diolom alebo bután-1,3-diolom alebo esterom, napríklad metylacetátom alebo etylacetátom. V ďalšom možnom uskutočnení je možné roztoky zlúčeniny všeobecného vzorca XII ďalej čistiť za použitia adsorpčných činidiel, ktoré selektívne odstránia nečistoty po pridaní vo vhodnom množstve, napríklad pri použití DEAE-celulózy alebo tiež kryštalizácii, napríklad zo zmesi acetonitrilu a vody, alebo pri použití kombinácii vyššie uvedených postupov.C8-bound silica is used, a particularly suitable system is a mixture of acetonitrile and water. The compound may be further purified by solvent extraction, for example with a suitable organic solvent such as a ketone, for example acetone or methyl ethyl ketone, a halogenated hydrocarbon, an alcohol such as methanol, a diol such as propane-1,2-diol or butane-1,3-diol or ester , such as methyl acetate or ethyl acetate. In another embodiment, solutions of the compound of formula (XII) may be further purified using adsorbents which selectively remove impurities after addition in an appropriate amount, for example using DEAE-cellulose or also by crystallization, for example from acetonitrile / water, or a combination of the above. of these procedures.

Biologickú transformáciu sordarínu na 4’-demetylsordarin, zlúčeninu vzorca XII je možné uskutočniť tak, že sa sordarín inkubuje v kultúre vhodného organizmu spolu so zdrojom uhlíka a dusíka a potom sa zlúčenina vzorca XII z kultúry izoluje.The biological transformation of sordarin to 4 ' -demethylsordarin, a compound of formula XII, can be accomplished by incubating sordarin in a culture of a suitable organism with a source of carbon and nitrogen, and then isolating the compound of formula XII from the culture.

Mikroorganizmy, schopné demetylovať sordarín v polohe 4’ je možné ľahko identifikovať za použitia testu v malom meradle s následnou analýzou vzorky, za použitia bežných postupov, napríklad HPLC. Ako príklady mikroorganizmov, schopných demetylovať sordarín je možné uviesť Streptomyces capreolus ATCC 31963, Streptomyces avermitilis ATCC 31272, Streptomyces armentosus NRRL 3176, Streptomyces antibioticus ATCC 31771, Streptomyces rimosus ATCC 23955, Streptomyces platensis ATCC 29778, Streptomyces mashuensis ATCC 23934, Streptomyces eurythermus ATCC 14975, Nocardia orientalis ATCC 43491 a Cunninghamella echinuata var. elegans ATCC 36112.Microorganisms capable of demethylating the sordarin at the 4-position can be readily identified using a small-scale assay followed by sample analysis using conventional procedures, such as HPLC. Examples of microorganisms capable of demethylating sordarin include Streptomyces capreolus ATCC 31963, Streptomyces avermitilis ATCC 31272, Streptomyces armentosus NRRL 3176, Streptomyces antibioticus ATCC 31771, Streptomyces rimosus ATCC 23955, Streptomyces e34 plaensis, Streptomyces34 platensis Nocardia orientalis ATCC 43491 and Cunninghamella echinuata var. elegans ATCC 36112

Mikroorganizmus sa zvyčajne pestuje pri teplote 20 až 40, s výhodou 20 až 35 a zvlášť 28 °C, žiadúce je prevzdušnenie a miešanie živného prostredia, napríklad pretrepávaním alebo pomocou miešadla. Živné prostredie môže byť na začiatku naočkované malým množstvom mycélia a/alebo spór. Získaný vegetatívny očkovací materiál môže byť prenesený priamo do hlavného fermentačného prostredia alebo môže byť ďalej po42The microorganism is usually grown at a temperature of 20 to 40, preferably 20 to 35 and in particular 28 ° C, aeration and mixing of the culture medium, for example by shaking or by means of a stirrer, are desirable. The culture medium may initially be inoculated with a small amount of mycelia and / or spores. The vegetative seeding material obtained may be transferred directly to the main fermentation medium or may be further42

množený v jednom alebo viacerých stupňoch, napríklad v priebehu 1 až 3 dní pred prenesením do hlavného fermentačného prostredia. Hlavné fermentačné prostredie bude tiež obsahovať sordarín, fermentácia bude zvyčajne vykonávaná pri pH 3,5 až 9,5, s výhodou 4,5 až 7,5. V priebehu fermentácie môže byť potrebné k fermentačnému prostrediu pridávať kyselinu alebo bázu na udržanie pH v požadovanom rozmedzí. Vhodnou bázou je napríklad hydroxid alkalického kovu, napríklad vodný roztok hydroxidu sodného alebo hydroxidu draselného. Vhodnou kyselinou môže byť anorganická kyselina, napríklad kyselina chlorovodíková, sírová alebo fosforečná. Fermentácia môže prebiehať 2 až 5 dní, s výhodou približne 3 dni. Na zabránenie penenia je možné pridávať vo vhodných intervaloch protipenivé činidlo. Do fermentačného prostredia je možné podľa potreby pridávať aj zdroje uhlíka a/alebo dusíka.propagated in one or more stages, for example within 1 to 3 days prior to transfer to the main fermentation broth. The main fermentation medium will also contain sordarin, the fermentation will usually be carried out at a pH of 3.5 to 9.5, preferably 4.5 to 7.5. During fermentation, it may be necessary to add an acid or base to the fermentation broth to maintain the pH within the desired range. A suitable base is, for example, an alkali metal hydroxide, for example an aqueous solution of sodium hydroxide or potassium hydroxide. A suitable acid may be an inorganic acid such as hydrochloric, sulfuric or phosphoric acid. The fermentation can take about 2 to 5 days, preferably about 3 days. An anti-foaming agent may be added at suitable intervals to prevent foaming. Carbon and / or nitrogen sources may also be added to the fermentation medium as desired.

Oddelenie a izoláciu zlúčeniny vzorca XII zo živného prostredia je možné uskutočniť bežnými postupmi, ktoré už boli opísané. V prípade, že je žiadúce znížiť pH zmesi na hodnotu nižšiu než 6, napríklad 2,5, je toto možné ľahko dosiahnuť pridaním kyseliny, ako kyseliny ortofosforečnej.Separation and isolation of the compound of formula XII from the culture medium can be accomplished by conventional procedures as previously described. If it is desired to lower the pH of the mixture to a value below 6, for example 2.5, this can be easily achieved by adding an acid such as orthophosphoric acid.

Je zrejmé, že biologickú transformáciu je možné uskutočniť celým radom rôznych postupov. Je napríklad možné bunky vypestovať a oddeliť pred pridaním k roztoku sordarínu napríklad pufra, oddelením živného prostredia alebo vo vode. Je tiež možné príslušné enzýmy izolovať a potom použiť, pripadne s príslušnými koenzýmami, alebo enzýmy klonovať a dosiahnuť ich zvýšenú expresiu.Obviously, the biological transformation can be accomplished in a variety of ways. For example, it is possible to cultivate and harvest cells before adding them to a sordarin solution such as a buffer, separating the culture medium or water. It is also possible to isolate the respective enzymes and then use them, optionally with the appropriate coenzymes, or to clone the enzymes and to increase their expression.

Ako už bolo vyššie uvedené, sordarín a sordaricín sú známe látky, ktoré je možné získať spôsobmi, ktoré už boli opísané. Napríklad príprava sordarínu kultiváciou Sordaria araneosa NRRL 3196 (tiež ATCC 36386) bola opísaná v britskom patentovom spise č. 1 162 027, kde sú opísané špecifické príklady na prípravu sordarínu.As mentioned above, sordarin and sordaricin are known substances which can be obtained by the methods already described. For example, the preparation of sordarin by cultivation of Sordaria araneosa NRRL 3196 (also ATCC 36386) has been described in British Pat. No. 1,162,027, where specific examples for the preparation of sordarin are described.

Sordaricín je možné pripraviť za podobných fermentačných podmienok, aké boli opísané pre sordarín za použitia Sordaria araneosa NRRL 3196 alebo vhodnej mutanty s následnou izoláciou požadovanej zlúčeniny vhodnými chromatograficSordaricin can be prepared under fermentation conditions similar to those described for sordarin using Sordaria araneosa NRRL 3196 or a suitable mutant followed by isolation of the desired compound by suitable chromatography

kými postupmi. Jedna z takýchto mutant bola uložená v stálej zbierke kultúr, CAB International Mycological Inštitúte, Genetic Resource Reference Collection, Bakeham Lane, Egham, Surrey TV20 9TY, Anglicko. Kmeň bol do zbierky uložený 11. augusta 1944 pod číslom IMI 362947 a jeho životaschopnosť bola potvrdená 19. augusta 1994. Uvedená zbierka je uznávaná Budapeštianskou dohodou. Vlastnosti kmeňa IMI 362947 budú opísané podrobnejšie v príklade 75.procedures. One such mutant was deposited in a permanent collection of cultures, CAB International Mycological Institute, Genetic Resource Reference Collection, Bakeham Lane, Egham, Surrey TV20 9TY, England. The strain was deposited in the collection on 11 August 1944 under IMI number 362947 and its viability was confirmed on 19 August 1994. The collection is recognized by the Budapest Agreement. The properties of strain IMI 362947 will be described in more detail in Example 75.

Mikroorganizmus IMI 362947 a jeho prípadné mutanty tvoria tiež súčasť podstaty vynálezu.The microorganism IMI 362947 and its possible mutants also form part of the invention.

Spôsob získania mutant tohto kmeňa a genetického materiálu bude podobný ako v prípade IMI 362184 vyššie.The method for obtaining mutants of this strain and genetic material will be similar to that of IMI 362184 above.

Sordaricín je tiež možní pripraviť zo sordarínu biologickou transformáciou. Túto transformáciu je možné ľahko uskutočniť tak, že sa sordarín inkubuje v kultúre vhodného organizmu a vzniknutý sordaricín sa potom z kultúry izoluje.Sordaricin can also be prepared from sordarin by biological transformation. This transformation can be easily accomplished by incubating the sordarin in a culture of a suitable organism and then recovering the resulting sordaricin from the culture.

Mikroorganizmy schopné premeniť sordarín na sordaricín je možné ľahko identifikovať jednoduchými skúškami a analýzou získaných vzoriek bežnými postupmi, napríklad HPLC. Jeden z týchto mikroorganizmov bol identifikovaný a uložený vo verejnej zbierke kultúr National Collestions od Industrial and Marine Bacteria Limited, NCIMB, 23 St. Machar Drive, Aberdeen AB2 1RY, Škótsko. Kmeň bol uložený do zbierky 4. augusta 1994 a ten istý deň bol určený ako životaschopný a schválený na účely patentovej ochrany. Ide o čeľaď Coryneformis, vlastnosti sú uvedené v príklade 76, mikroorganizmus bol označený číslom NCIMB 40675. Zbierka je jednou zo zbierok, uznávaných podľa Budapeštianskej dohody.Microorganisms capable of converting sordarin to sordaricin can be readily identified by simple assays and analysis of the samples obtained by conventional procedures, such as HPLC. One of these microorganisms has been identified and deposited in the National Collestions Public Collection of Industrial and Marine Bacteria Limited, NCIMB, 23rd St. Machar Drive, Aberdeen AB2 1RY, Scotland. The strain was deposited on 4 August 1994 and was determined to be viable on the same day and approved for patent protection. It is a family of Coryneformis, the properties are given in example 76, the microorganism was designated NCIMB 40675. The collection is one of the collections recognized under the Budapest Agreement.

Mikroorganizmus NCIMV 40675 a jeho prípadné mutanty tiež tvoria súčasť podstaty vynálezu.The microorganism NCIMV 40675 and its possible mutants also form part of the invention.

Podľa vynálezu je tiež možné pripraviť genetický materiál kmeňa NCIMB 40675 na účely biologickej premeny sordarínu na sordaricín.It is also possible according to the invention to prepare genetic material of strain NCIMB 40675 for the biological conversion of sordarin to sordaricin.

Spôsob získania mutant kmeňa NCIMB 40675 a genetického materiálu tohto kmeňa budú podobné ako v prípade vyššie uvedeného kmeňa IMI 362184.The method of obtaining the mutant strain NCIMB 40675 and the genetic material of this strain will be similar to the above strain IMI 362184.

Kmeň NCIMB 40675 sa zvyčajne pestuje pri teplote v roz44NCIMB 40675 is usually grown at a temperature of about 44

medzí 20 až 40, s výhodou 20 až 35 a zvlášť približne 28 °C, žiadúce je prevzdušnenie a miešanie živného prostredia. Prostredie môže byť na začiatku naočkované malým množstvom mycélia a/alebo spór. Získaný vegetatívny očkovací materiál môže byť prenesený priamo do hlavného fermentačného prostredia alebo môže byť ďalej pomnožený v jednom alebo viacerých stupňoch, napríklad v priebehu 1 až 3 dní pred prenesením do hlavného fermentačného prostredia. Hlavné fermentačné prostredie bude tiež obsahovať sordarín, fermentácia bude zvyčajne vykonávaná pri pH 3,5 až 9,5, s výhodou bude približne 7,5. V priebehu fermentácie môže byť potrebné k fermentačnému prostrediu pridávať kyselinu alebo bázu na udržanie pH v požadovanom rozmedzí. Vhodnou bázou je napríklad hydroxid alkalického kovu, napríklad vodný roztok hydroxidu sodného alebo hydroxidu draselného. Vhodnou kyselinou môže byť anorganická kyselina, napríklad kyselina chlorovodíková, sírová alebo fosforečná. Fermentácia môže prebiehať 4 až 8 dní, s výhodou približne 6 dní. Na zabránenie penenia je možné pridávať vo vhodných intervaloch protipenivé činidlo. Do fermentačného prostredia je možné podľa potreby pridávať aj zdroje uhlíka a/alebo dusíka.between 20 to 40, preferably 20 to 35, and especially about 28 ° C, aeration and mixing of the nutrient medium is desirable. The environment may be initially inoculated with a small amount of mycelia and / or spores. The vegetative seeding material obtained may be transferred directly to the main fermentation broth or may be further multiplied in one or more stages, for example within 1 to 3 days prior to transfer to the main fermentation broth. The main fermentation medium will also contain sordarin, the fermentation will usually be carried out at a pH of 3.5 to 9.5, preferably about 7.5. During fermentation, it may be necessary to add an acid or base to the fermentation broth to maintain the pH within the desired range. A suitable base is, for example, an alkali metal hydroxide, for example an aqueous solution of sodium hydroxide or potassium hydroxide. A suitable acid may be an inorganic acid such as hydrochloric, sulfuric or phosphoric acid. The fermentation can be carried out for 4 to 8 days, preferably about 6 days. An anti-foaming agent may be added at suitable intervals to prevent foaming. Carbon and / or nitrogen sources may also be added to the fermentation medium as desired.

Je zrejmé, že biologickú premenu je možné uskutočniť radom rôznych postupov. Je napríklad možné bunkový materiál vypestovať a oddeliť pred jeho pridaním k roztoku sordarínu napríklad v pufri, oddelenom živnom prostredí alebo vo vode. Je tiež možné izolovať príslušné enzýmy alebo enzýmy klonovať a dosiahnuť ich zvýšenú expresiu.Obviously, the biological transformation can be accomplished in a number of different ways. For example, the cellular material can be grown and separated before it is added to the sordarin solution, for example in a buffer, a separate culture medium or water. It is also possible to isolate the respective enzymes or to clone the enzymes and to increase their expression.

Sordaricín je možné oddeliť a izolovať z fermentačného prostredia vyššie opísanými všeobecnými postupmi. V prípade, že je potrebné znížiť pH pod hodnotu 6, je možné pridať kyselinu, napríklad kyselinu ortofosforečnú.Sordaricin can be separated and isolated from the fermentation broth by the general procedures described above. If it is desired to lower the pH below 6, an acid such as orthophosphoric acid may be added.

Je zrejmé, že fermentácia a biologická premena na prípravu sordaricínu, tak ako bola vyššie opísaná, tvorí tiež súčasť podstaty vynálezu.It will be appreciated that fermentation and biological conversion for the preparation of sordaricin, as described above, also form part of the invention.

Praktické uskutočnenie vynálezu bude vysvetlené nasledujúcimi príkladmi, ktoré však nemajú v žiadnom smere slúžiť na obmedzenie vynálezu.The following examples illustrate the invention but do not limit the invention in any way.

Príklady uskutočnenia vynálezuDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

Príprava 1Preparation 1

Príprava sordarínuPreparation of sordarin

Kultúra Sordaria araneosa NRRL 3196 (ATCC 36386) sa pestuje na agarovom prostredí až do zrelosti. Vyrezané časti agaru s priemerom 6 mm, obsahujúce mikroorganizmus, sa prenesú do sterilnej vody alebo do živného prostredia s bujónom z mozgu a srdca (Oxoid) s 10% glycerolom a potom sa skladujú pri teplote miestnosti alebo -140 ’C. Suspenzia z dvoch takýchto častí agaru sa potom použije na naočkovanie Erlenmeyerovej banky s objemom 250 ml, obsahujúcej 50 ml prostredia FS.A culture of Sordaria araneosa NRRL 3196 (ATCC 36386) is grown on agar medium to maturity. The cut 6 mm diameter agar containing microorganisms are transferred to sterile water or a broth of brain and heart broth (Oxoid) with 10% glycerol and then stored at room temperature or -140 ° C. A suspension of two such agar portions is then used to inoculate a 250 ml Erlenmeyer flask containing 50 ml of FS medium.

Prostredie FSFS environment

Pepton (Oxoid L34) 10 sladový extrakt (Oxoid L39) 21 glycerol (Glyceríne CP) 40Pepton (Oxoid L34) 10 malt extract (Oxoid L39) 21 glycerol (Glycerin CP) 40

Junlon 110 (Honeywell a Stein) 1 destilovaná vodaJunlon 110 (Honeywell and Stein) 1 distilled water

Kultúra sa .inkubuje 5 dní pri teplote 25 °C na rotačnej trepačke pri 250 otáčkach za minútu s výkyvom 50 mm. Podiely 2 ml tohto prostredia sa potom použijú na naočkovanie ďalšej Erlenmeyerovej banky s objemom 250 ml, opäť obsahujúcej 50 ml prostredia FS a prostredie sa inkubuje rovnako ako je uvedené. 80 ml takto získaného očkovacieho materiálu sa použije na naočkovanie každého z dvoch fermentorov s objemom 7 litrov a s obsahom 5 litrov prostredia FS. Fermentácia sa nechá prebiehať pri teplote 25 C. Kultúra sa mieša pri 400 otáčkach za minútu za prevzdušnenia 2 l/minútu. Po troch dňoch sa 10 litrov prostredia použije na naočkovanie fermentora s objemom 780 litrov s obsahom 500 1 prostredia SM55VAR.The culture is incubated for 5 days at 25 ° C on a rotary shaker at 250 rpm with a 50 mm swing. Aliquots of 2 ml of this medium are then used to inoculate another 250 ml Erlenmeyer flask, again containing 50 ml of FS medium, and incubated as described above. 80 ml of the inoculum thus obtained is used to inoculate each of the two 7-liter fermenters containing 5 liters of FS medium. The fermentation was allowed to proceed at 25 [deg.] C. The culture was stirred at 400 rpm with aeration of 2 l / min. After three days, 10 liters of medium is used to inoculate a 780 liter fermenter containing 500 liters of SM55VAR medium.

SM55VARSM55VAR

Glucidex 32D (Roquette Frere)Glucidex 32D Roquette Frere

Pepton (Oxoid L37)Pepton (Oxoid L37)

Proflo (Traders Protein)Proflo (Traders Protein)

repná melasabeet molasses

MgS0₄.7H₂0 (BDH) uhličitan vápenatý (BDH)MgS0 ₄ .7H ₂ 0 (BDH) calcium carbonate (BDH)

FeSO₄.7H₂0 (Sigma)FeSO ₄ .7H ₂ 0 (Sigma)

ZnS0₄.7H₂0 (BDH)ZnSO ₄ .7H ₂ 0 (BDH)

L-tryptofán (Sigma)L-tryptophan (Sigma)

PPG2000 (K a K Greef)PPG2000 (K and K Greef)

Silicone 1520 (Dow Corning) destilovaná vodaSilicone 1520 (Dow Corning) distilled water

g/-^L g / - ^L

0,040.04

0,50.5

0,040.04

Fermentácia sa nechá prebiehať pri teplote 25 °C. Prostredie sa mieša rýchlosťou 300 až 350 otáčok/minútu za prevzdušnenia 200 litrov za minútu. Do kultúry sa privádza 70% roztok prostriedku Meritose (Tunnel Refineries) na udržanie pozitívnej reziduálnej koncentrácie glukózy. Destilovaná voda sa pridáva na udržanie objemu kultúry na hodnote 500 litrov. Protipenivé činidlo PPG2000 sa pridáva na zníženie penenia. Extrakty živného prostredia vo vodnom acetonitrile s 1 % kyseliny trifluóroctovej sa analyzujú na prítomnosť sordarínu pomocou HPLC v reverznej fáze. Kultúra sa pestuje 11 dní, po tejto dobe je možné dokázať obsah sordarínu 0,6 g/1. Fermentačné prostredie sa upraví 0,1 M hydroxidom sodným a po uložení cez noc pri teplote miestnosti sa prefiltruje cez Dicalite na rotačnom filtri za odsávania (1% Dicalite sa pridá ako pomocný prostriedok na filtráciu). Potom sa filtrát upraví na pH 6 až 7 pridaním koncentrovanej kyseliny sírovej a roztok sa nanesie na živicu XAD16 (10 objemov filtrátu na jeden objem živice). Živica sa premyje vodou a zmesou acetónu a vody v pomere 1:3 a potom sa vymýva sordarín za použitia dvoch objemov stĺpca zmesi acetónu a vody v pomere 3:1. Rýchlosť prietoku je 1 ažThe fermentation was allowed to proceed at 25 ° C. The medium is agitated at 300 to 350 rpm with aeration of 200 liters per minute. A 70% solution of Meritose (Tunnel Refineries) was added to the culture to maintain a positive residual glucose concentration. Distilled water is added to maintain the culture volume at 500 liters. The anti-foaming agent PPG2000 is added to reduce foaming. The broth extracts in aqueous acetonitrile with 1% trifluoroacetic acid are analyzed for the presence of sordarin by reverse phase HPLC. The culture is cultivated for 11 days, after which time a sordarin content of 0.6 g / l can be detected. The fermentation broth was treated with 0.1 M sodium hydroxide and, after overnight at room temperature, filtered through Dicalite on a rotary filter under suction (1% Dicalite was added as filter aid). Then the filtrate was adjusted to pH 6-7 by addition of concentrated sulfuric acid and the solution was applied to XAD16 resin (10 volumes of filtrate per volume of resin). The resin was washed with water and 1: 3 acetone / water and then eluted with sordarin using two column volumes of 3: 1 acetone: water. The flow rate is 1 to

objemy stĺpca za hodinu. Eluát sa odparí na 8,5 litrov a koncentrát sa upraví na pH 3 pridaním kyseliny fosforečnej a nechá sa stáť cez noc pri teplote miestnosti na usadenie vyzrážaného sordarínu. Supernatant sa zleje a potom sa odstredí, supernatant po odstredení sa odloží. Usadenina a zrazenina sa rozpustí v 75% vodnom acetonitrile, získa sa 3,9 litrov tmavohnedého roztoku. K tomuto roztoku sa pridá 1 liter 0,2 M dihydrogénfosforečnanu amónneho za miešania a roztok sa upraví pridaním kyseliny fosforečnej na pH 4,0, konečný objem roztoku je 5 litrov, približné zloženie je 60% acetonitril a 0,1 M dihydrogénfosforečnan amónny. 5 litrov surového roztoku sordarínu sa potom podrobí preparatívnej HPLC po 10 podieloch s objemom 450 až 550 ml na stĺpci s rozmerom 15 x 25 cm, 7 mm Kromasil C8, mobilná fáza 50% acetonitril a 0,1 M dihydrogénfosforečnan amónny s pH 4 (50 litrov acetonitrilu sa doplní na 100 litrov vodou, obsahujúcou 575 dihydrogénforforčnanu amónneho a 40 ml kyseliny fosforečnej), rýchlosť prietoku 600 ml/minútu, detekcia v UV svetle pri 210 nm.column volumes per hour. The eluate was evaporated to 8.5 liters and the concentrate was adjusted to pH 3 by the addition of phosphoric acid and allowed to stand overnight at room temperature to settle the precipitated sordarin. The supernatant is decanted and then centrifuged and the supernatant is discarded. The pellet and precipitate were dissolved in 75% aqueous acetonitrile to give 3.9 liters of a dark brown solution. To this solution is added 1 liter of 0.2 M ammonium phosphate monobasic with stirring and the solution is adjusted to pH 4.0 by addition of phosphoric acid, the final volume of the solution is 5 liters, approximately 60% acetonitrile and 0.1 M ammonium dihydrogen phosphate. 5 liters of the crude sordarin solution are then subjected to a preparative HPLC in 10 portions of 450-550 ml on a 15 x 25 cm 7 mm Kromasil C8 column, 50% acetonitrile mobile phase and 0.1 M ammonium dihydrogen phosphate pH 4 (50 ml). liters of acetonitrile is made up to 100 liters with water containing 575 ammonium phosphate dibasic and 40 ml phosphoric acid), flow rate 600 ml / min, detection in UV light at 210 nm.

Zhromaždia sa frakcie s dobou retencie 15,4 až 19,2 minút. Frakcie z 10 podielov (celkom 23 litrov) sa zriedia vodou na 50 litrov a roztok sa čerpá späť cez stĺpec Kromasilu rýchlosťou 28 litrov za hodinu. Stĺpec sa premyje 25 litrami vody a potom sa vymýva 10 litrami 90% acetonitrilu. Eluát sa odparí na 1300 ml a roztok sa lyofilizuje, čím sa získa 105,6 g špinavobieleho práškového materiálu. Hmotnostné spektrum a NMR produktu sú v súlade s analýzou vzorky sordarínu.Fractions with a retention time of 15.4 to 19.2 minutes were collected. The fractions from 10 aliquots (total 23 liters) were diluted with water to 50 liters and the solution was pumped back through the Kromasil column at a rate of 28 liters per hour. The column is washed with 25 liters of water and then eluted with 10 liters of 90% acetonitrile. The eluate was evaporated to 1300 ml and the solution was lyophilized to give 105.6 g of off-white powder. The mass spectrum and NMR of the product are consistent with the analysis of the sordarin sample.

Príprava 2Preparation 2

Príprava draselnej soli sordarínuPreparation of sordarin potassium salt

Sordaria araneosa NRRL 3196 (ATCC 36386) sa udržuje v živnom prostredí s bujónom z mozgu a srdca (Oxoid) s 10% glycerolom pri teplote -140 °C rovnako ako v príklade 1. Suspenzia s obsahom dvoch vyrezaných úsekov agaru sa použijeSordaria araneosa NRRL 3196 (ATCC 36386) is maintained in brain and heart broth (Oxoid) with 10% glycerol at -140 ° C as in Example 1. A slurry containing two carved sections of agar is used.

na naočkovanie Erlenmeyerovej banky s objemom 250 ml a obsahom 50 ml prostredia FS. Kultúra sa inkubuje 5 dní pri teplote 25 °C na rotačnej trepačke pri 250 otáčkach/minútu a výkyvom 50 ml. Podiely 2 ml očkovacieho materiálu sa použijú na naočkovanie ďalšej Erlenmeyerovej banky s objemom 250 ml a obsahom 50 ml prostredia FS a živné prostredie sa inkubuje rovnako ako je uvedené vyššie. 80 ml takto získaného očkovacieho materiálu sa použije na naočkovanie každého z dvoch ferinentov s objemom 7 litrov a obsahom 5 litrov prostredia FS. Fermentácia sa vykonáva pri teplote 25 °C. Kultúra sa mieša rýchlosťou 400 otáčok za minútu pri prevzdušnení 2 litre za minútu. Po troch dňoch sa 10 litrov tejto kultúry použije na naočkovanie fermentora s objemom 780 litrov a obsahom 500 litrov živného prostredia SD1.inoculate a 250 ml Erlenmeyer flask containing 50 ml of FS medium. The culture is incubated for 5 days at 25 ° C on a rotary shaker at 250 rpm with a 50 ml swing. Aliquots of 2 ml of inoculum were used to inoculate another 250 ml Erlenmeyer flask containing 50 ml of FS medium and incubated as above. 80 ml of the inoculum material thus obtained was used to inoculate each of the two 7 liter ferrites containing 5 liters of FS medium. The fermentation is carried out at 25 ° C. The culture is agitated at 400 rpm with aeration of 2 liters per minute. After three days, 10 liters of this culture were used to inoculate a 780 liters fermenter containing 500 liters of SD1 broth.

SD1 g/1SD1 g / l

Meritose (Tunnel refineries)22 laktóza20Meritose (Tunnel refineries) 22 lactose20

Glucidex 32D (Roquette Frere)30Glucidex 32D (Roquette Frere) 30

Arkasoy (The British Arkády Co.)20Arkasoy (The British Arcade Co.) 20

CSL20CSL20

FeCl₃.6H₂O0,05FeCl ₃ .6H ₂ O.05

NH₄H₂PO₄5NH ₄ H ₂ PO ₄ 5

ZnS0₄.7H₂0 (BDH)0,1ZnSO ₄ .7H ₂ O (BDH) 0.1

PPG20000,5 destilovaná vodaPPG20000,5 distilled water

Fermentácia sa nechá prebiehať pri teplote 25 ’C. Živné prostredie sa mieša pri 350 otáčkach za minútu a prevzdušnení 200 litrov za minútu. Destilovaná voda sa pridáva na udržanie objemu 500 litrov. Extrakty živného prostredia sa skúšajú na prítomnosť sordarinu pomocou HPLC v reverznej fáze. Kultúra sa pestuje 6 dní, po tejto dobe je možné dokázať obsah sordarinu 1,3 g/1. Vzorka s objemom 50 litrov sa upraví na 0,1 M hydroxidu sodného a uloží cez nocThe fermentation is allowed to proceed at 25 C. C. The medium is mixed at 350 rpm and aerated at 200 liters per minute. Distilled water is added to maintain a volume of 500 liters. Culture media extracts were tested for the presence of sordarin by reverse phase HPLC. The culture is grown for 6 days, after which time a sordarin content of 1.3 g / l can be detected. A 50 liter sample is adjusted to 0.1 M sodium hydroxide and stored overnight

pri teplote 4 “C. Bunkový materiál sa oddelí filtráciou za odsávania cez vrstvu prostriedku Dicalite, ďalšie 2 % Dicalitu sa pridajú k živnému prostrediu ako pomocný prostriedok pre filtráciu. Filtrát sa upraví na pH približne 6 koncentrovanou kyselinou sírovou. Extrakt živného prostredia sa prečerpáva cez vrstvu živice Amberogrom CG161 rýchlosťou 320 ml/min, 0,64 objemu stĺpca za minútu. Frakcia sa sleduje pomocou HPLC. Po 45 minútach, to znamená po prechode objemu 14,4 litrov sa objaví sordarín a čerpadlo sa odpojí. Adsorpčný prostriedok sa premyje 2 litrami vody a potom 2 litrami acetónu s koncentráciou 25 % objemových vo vode. Na elúciu sordarínu sa použije 1,5 litra acetónu s koncentráciou 75 % objemových vo vode. Eluát sa odparí na objem približne 200 ml na rotačnom odparovači pri teplote 40 °C. Pridá sa 200 ml butanol-l-olu a zmes sa odparuje až do získania viskózneho oleja, ktorý obsahuje malé množstvo butan-l-olu. Tento olejovitý materiál sa extrahuje 2 x 500 ml horúceho metanolu. Extrakty sa spoja, prefiltrujú cez papier Vhatman č. la potom sa odparia pri teplote 40 až 45 °C na viskózny olej. Tento olej sa extrahuje 2 x 500 ml horúceho acetónu. Acetónové extrakty sa spoja, prefiltrujú a odparia na viskózny olej. K oleju sa pridá pri teplote 45 °C celkom 350 ml propan-2-olu, čím vznikne číry hnedý roztok. Roztok 2-etylhexanoátu draselného (39% roztok v propan-2-ole, % hmotnostné, 54 g) sa naviaže do kónickej flaše s objemom 500 ml. Potom sa do tejto fľaše vleje roztok sordarínu v propán-2-o'Le, obsah sa premieša a nechá sa 4 hodiny stáť pri teplote miestnosti. Potom sa roztok naočkuje približne 5 mg kryštálikov draselnej soli sordarínu a uzavretá nádoba sa uloží na 3 dni pri teplote 4 °C. Špinavobiela tuhá látka, ktorá sa vyzráža, sa odfiltruje vo vákuu (lievik so sintrom č. 4), filtračný koláč sa premyje približne 20 až 30 ml propan-2-olu. Tuhý podiel sa prenesie do kryštalizačnej nádobky a suší sa 16 hodín vo vákuu nad oxidom fosforečným, čím sa získa 10,5 g produktu.at 4 ° C. The cellular material was collected by suction filtration through a Dicalite layer, and an additional 2% Dicalite was added to the culture medium as a filter aid. The filtrate is adjusted to a pH of about 6 with concentrated sulfuric acid. The culture extract is pumped through the Amberogrom CG161 resin layer at a rate of 320 ml / min, 0.64 column volume per minute. The fraction was monitored by HPLC. After 45 minutes, i.e. after passing a volume of 14.4 liters, the sordarin appears and the pump is disconnected. The adsorbent is washed with 2 liters of water and then with 2 liters of 25% v / v acetone in water. 1.5 liters of 75% v / v acetone are used to elute the sordarin. The eluate is evaporated to a volume of approximately 200 ml on a rotary evaporator at 40 ° C. Butanol-1-ol (200 ml) was added and the mixture was evaporated until a viscous oil was obtained which contained a small amount of butan-1-ol. This oily material was extracted with hot methanol (2 x 500 mL). Combine the extracts, filter through Vhatman paper no. and then evaporated at 40 to 45 ° C to a viscous oil. This oil was extracted with 2 x 500 mL hot acetone. The acetone extracts were combined, filtered and evaporated to a viscous oil. A total of 350 mL of propan-2-ol was added to the oil at 45 ° C to give a clear brown solution. Potassium 2-ethylhexanoate solution (39% solution in propan-2-ol, wt.%, 54 g) was weighed into a 500 ml conical bottle. A solution of sordarin in propan-2-ol was then poured into the flask, stirred and allowed to stand at room temperature for 4 hours. The solution is then seeded with approximately 5 mg of sordarin potassium salt crystals and the sealed container is stored at 4 ° C for 3 days. The off-white solid that precipitates is filtered off under vacuum (sintered funnel # 4), the filter cake is washed with about 20-30 ml of propan-2-ol. The solid was transferred to a crystallization vessel and dried in vacuo over phosphorus pentoxide for 16 hours to give 10.5 g of product.

Príprava 3Preparation

Príprava draselnej soli sordarínuPreparation of sordarin potassium salt

500 litrov živného prostredia sa pripraví rovnakým spôsobom ako v príprave 1. Roztok sa upraví na obsah 0,1 M hydroxidu sodného a po 4 dňoch státia pri teplote 0 °C sa prefiltruje cez Dicalite na rotačnom filtri za odsávania. 1 % Dicalitu sa pridá k živnému prostrediu ako pomocný prostriedok pre filtráciu. Potom sa pH filtrátu upraví z 9,6 až na 7,5 pridaním koncentrovanej kyseliny sírovej. 10 litrov filtrátu sa upraví až na pH 6 pridaním kyseliny fosforečnej a nanesie sa na 200 ml živice XAD-16 vo vode, rýchlosť prietoku je 1 až 1,5 objemov vrstvy za hodinu. Potom sa živica premyje jedným objemom vody a 2,5 objemami 25% vodného izopropanolu, na elúciu sa použije čistý izopropanol. Najskôr sa nechá prejsť 50 ml izopropanolu a potom sa odoberajú .frakcie po 100 ml. Frakcie 2 až 6, ktoré sú bohaté na sordarín, sa spoja a odparia na polovicu svojho objemu. Pridá sa izopropanol na doplnenie objemu na 500 ml a potom sa zmes odparí na polovicu svojho objemu opakovane na odstránenie zvyšku vody azeotrópnou destiláciou. Po treťom odparení na polovicu objemu sa zmes prefiltruje a filter sa premyje izopropanolom. Filtrát a premývacia kvapalina sa spojí a pridá sa roztok 8 g 2-etylhexanoátu draselného v 100 ml izopropanolu. Zmes sa naočkuje kryštálikmi draselnej soli sordarínu a nechá sa stáť niekoľko dní pri teplote 4 “C, v priebehu tejto doby dôjde k pomalej kryštalizácii. Kryštálky sa odfiltrujú za použitia sintra č. 3, premyjú sa malým množstvom ľadovo chladného izopropanolu a suší sa vo vákuu, čím sa získa 4,85 g produktu vo forme svetlohnedého prášku.500 liters of broth are prepared in the same manner as in Preparation 1. The solution is adjusted to 0.1 M sodium hydroxide and after 4 days at 0 ° C it is filtered through Dicalite on a rotary filter with suction. 1% Dicalit is added to the culture medium as a filter aid. The pH of the filtrate is then adjusted from 9.6 to 7.5 by adding concentrated sulfuric acid. 10 liters of the filtrate are adjusted to pH 6 by the addition of phosphoric acid and applied to 200 ml of XAD-16 resin in water at a flow rate of 1 to 1.5 bed volumes per hour. The resin was then washed with one volume of water and 2.5 volumes of 25% aqueous isopropanol, using pure isopropanol to elute. First, 50 ml of isopropanol is passed and then 100 ml fractions are collected. Fractions 2-6, which are rich in sordarin, are pooled and evaporated to half their volume. Isopropanol is added to make up the volume to 500 ml and then the mixture is evaporated to half its volume repeatedly to remove residual water by azeotropic distillation. After a third evaporation to half volume, the mixture is filtered and the filter is washed with isopropanol. The filtrate and washings were combined and a solution of 8 g of potassium 2-ethylhexanoate in 100 ml of isopropanol was added. The mixture was seeded with sordarin potassium crystals and allowed to stand for several days at 4 ° C, during which time crystallization slowly occurred. The crystals are filtered off using sinter no. 3, washed with a small amount of ice-cold isopropanol and dried under vacuum to give 4.85 g of the product as a light brown powder.

P.ríp.ravci 4P.ríp.ravci 4

Príprava 4 ’-deinetylsordarínuPreparation of 4'-deinetylsordarin

i) Kmeň IMI 362184 sa uloží v bujóne zo srdca a mozgu (Oxoid) s 10 % glycerolu pri teplote -140 “C, ako je opísané v príprave 1. Suspenzia s obsahom dvoch vyrezaných úsekov agaru s obsahom kultúry mikroorganizmu sa použije na naočkovanie Erlenmeyerovej banky s objemom 250 ml, obsahujúcej 50 ml prostredia FS. Kultúra sa inkubuje 5 dní pri teplote 25 °C na rotačnej trepačke s rýchlosťou pretrepávania 250 otáčok/minútu pri výkyve 50 mm. Podiely 2 ml očkovacieho materiálu sa použijú na naočkovanie ďalšej banky s objemom 250 ml a obsahom 50 ml prostredia FS a materiál sa inkubuje rovnako ako je uvedené vyššie. Potom sa 80 ml výsledného očkovacieho materiálu použije na naočkovanie každého z dvoch fermentorov s objemom 7 litrov a obsahom 5 litrov prostredia FS. Fermentácia sa nechá prebiehať pri teplote 25 °C. Kultúra sa mieša pri 400 otáčok/minútu a pri prevzdušnení 2 1/min. Po troch dňoch fermentácie sa 10 litrov kultúry použije na naočkovanie fermentora s objemom 780 litrov a obsahom 500 litrov prostredia SM55VAR, ktoré bolo opísané v príprave 1. Fermentácia sa opäť nechá prebiehať pri teplote 25 °C. Prostredie sa mieša pri 350 otáčok/minútu a za prevzdušnenia 500 1/minútu. Do kultúry sa pridáva 70% roztok prostriedku Meritose (Tunnel Refineries) na udržanie pozitívnej koncentrácie glukózy. Destilovaná voda sa pridáva na udržanie objemu 500 litrov. Extrakty kultúry sa skúšajú na prítomnosť 4’-demetylsordarínu pomocou HPLC v reverznej fáze. Po 10 dňoch pestovania obsahuje prostredie 4’-demetylsordarín v množstve 0,8 g/1. Prostredie sa upraví na 0,1 M hydroxid sodný ci po jednej hodine státia pri teplote miestnosti sa prefiltruje cez Dicalite na rotačnom filtri za odsávania, 1 % Dicalitu sa pridá ako pomocný prostriedok pre filtráciu. Filtrát sa upraví na pH 4,5 koncentrovanou kyselinou sírovou a roztok sa nanesie na živicu XAD16 (20 g produktu/1 živice). Adsorpčný prostriedok sa premyje 0,1% kyselinou fosforečnou (10 objemov stĺpca) a zmesou acetonitrilu a vody v pomere 1:4 (5 objemov stĺpca), na elúciu produktu sa použije zmes acetonitrilu a vody 1:1 (2 objemy stĺpca). Rýchlosť prietoku v priebehu celého postupu je 1 až(i) Strain IMI 362184 is stored in a heart and brain broth (Oxoid) with 10% glycerol at -140 ° C as described in Preparation 1. A suspension containing two carved sections of agar containing a micro-organism culture is used to inoculate Erlenmeyer 250 ml flasks containing 50 ml of FS medium. The culture is incubated for 5 days at 25 ° C on a rotary shaker with a shaking rate of 250 rpm at a 50 mm pivot. Aliquots of 2 ml of inoculum were used to inoculate another 250 ml flask containing 50 ml of FS medium and incubated as above. Then, 80 ml of the resulting seed material is used to inoculate each of the two 7-liter fermenters containing 5 liters of FS medium. The fermentation was allowed to proceed at 25 ° C. The culture is agitated at 400 rpm and aerated at 2 L / min. After three days of fermentation, 10 liters of culture are used to inoculate a 780 liters fermenter containing 500 liters of SM55VAR as described in Preparation 1. The fermentation is again run at 25 ° C. The medium is stirred at 350 rpm and aerated at 500 l / min. A 70% solution of Meritose (Tunnel Refineries) is added to the culture to maintain a positive glucose concentration. Distilled water is added to maintain a volume of 500 liters. Culture extracts were tested for the presence of 4 ' -demethylsordarin by reverse phase HPLC. After 10 days of cultivation, 4´-demethylsordarin contains 0.8 g / l. The medium is adjusted to 0.1 M sodium hydroxide, or after standing for one hour at room temperature, filtered through Dicalite on a rotary filter with suction, 1% Dicalite is added as a filter aid. The filtrate was adjusted to pH 4.5 with concentrated sulfuric acid and the solution was applied to XAD16 resin (20 g product / 1 resin). The adsorbent was washed with 0.1% phosphoric acid (10 column volumes) and 1: 4 acetonitrile / water (5 column volumes), using 1: 1 acetonitrile / water (2 column volumes) to elute the product. The flow rate throughout the procedure is 1 to

objemy stĺpca za hodinu. Eluát sa odparí do sucha za pridávania butan-l-olu a tuhý podiel sa extrahuje najskôr 12 litrami metanolu a potom 10 litrami acetónu pri teplote 60 C. Nerozpustný materiál sa vždy odfiltruje cez sklenený sinter č. 3 a extrakty sa odparia do sucha. Tuhý podiel sa nechá kryštalizovať zo zmesi acetonitrilu a vody v pomere 3:7 a potom sa nechá prekryštalizovať z toho istého rozpúšťadla a potom sa suší do stálej hmotnosti nad oxidom fosforečným, čím sa získa 244,0 kg produktu, NMR dokazuje zhodu s autentickou vzorkou 4’-demetylsordarínu.column volumes per hour. The eluate is evaporated to dryness by the addition of butan-1-ol and the solid is extracted first with 12 liters of methanol and then with 10 liters of acetone at a temperature of 60 ° C. 3 and the extracts are evaporated to dryness. The solid is crystallized from 3: 7 acetonitrile: water and then recrystallized from the same solvent and then dried to constant weight over phosphorus pentoxide to yield 244.0 kg of product. NMR shows identity with an authentic sample 4'-demethylsordarin.

ii) Opakuje sa postup podľa odstavca i), po úprave materiálu na koncentráciu 0,1 M hydroxidu sodného sa zmes podrobí ultrafiltrácii cez membránu ETNA 10A (oddelí sa materiál od molekulovej hmotnosti 10 000). Po diafiltrácii proti vode sa získa číry roztok. Po úprave pH na 5,2 za použitia koncentrovanej kyseliny sírovej sa permeát nanesie na stĺpec živice XAD16 rýchlosťou dva objemy stĺpca za hodinu, výsledné zaťaženie je 32 g 4’-demetylsordarínu na liter živice. Stĺpec sa premýva rýchlosťou dva objemy stĺpca za hodinu najskôr kyselinou fosforečnou s koncentráciou 0,1 % objemové a potom desiatimi objemami stĺpca za použitia zmesi acetonitrilu a vody s koncentráciou acetonitrilu 20 % objemových. Na elúciu sa použije 65% acetonitril vo vode pri rýchlosti dva objemy stĺpca(ii) The procedure of (i) is repeated, after treatment of the material to a concentration of 0.1 M sodium hydroxide, the mixture is subjected to ultrafiltration through an ETNA 10A membrane (separating the material from a molecular weight of 10,000). After diafiltration against water, a clear solution is obtained. After adjusting the pH to 5.2 using concentrated sulfuric acid, the permeate is applied to the XAD16 resin column at a rate of two column volumes per hour, resulting in a loading of 32 g of 4'-demethylsordarin per liter of resin. The column was washed at a rate of two column volumes per hour, first with 0.1% v / v phosphoric acid and then with ten column volumes using 20% v / v acetonitrile / water. To elute, 65% acetonitrile in water was used at a rate of two column volumes

objemov stĺpca stĺpca sa v naneseného do sa odloží. V eluáte získa stĺpca. Tento za hodinu. Tuhý podiel 0,75 nasledujúcich 1,6 objemoch % 4’-demetylsordarínu, eluát sa 5 minút mieša s DE52-celulózou v koncentrácii 2 % hmotnostné, celulóza sa odfiltruje. Podiel takto spracovaného eluátu sa potom zahustí na 62 % pôvodného objemu (43 % acetonitrilu) za použitia rotačného odparovača. Koncentrovaný eluát sa udržuje 15 hodín na teplote 4 °C a vykryštalizovaný materiál sa odfiltruje cez sklenený sinter. Kryštáliky sa premyjú štyrmi objemami filtračného koláča, na premytie sa použije zmes acetonitrilu a vody s 30 % objemovými acetonitrilu a produkt sa suší pri 30 °C vo vákuu. Získa sa 1,94 g výsledného produktu vo forme svetlošedej tuhej látky.the column volumes of the column in the deposited until discarded. Columns are obtained in the eluate. This one in an hour. A solid fraction of 0.75 followed by 1.6 volumes of 4'-demethylsordarin, the eluate was mixed with DE52-cellulose at a concentration of 2% by weight for 5 minutes, the cellulose was filtered off. A portion of the treated eluate was then concentrated to 62% of the original volume (43% acetonitrile) using a rotary evaporator. The concentrated eluate was maintained at 4 ° C for 15 hours and the crystallized material was filtered through a sinter glass. The crystals were washed with four volumes of filter cake, washed with a mixture of acetonitrile and water with 30% v / v acetonitrile and dried at 30 ° C under vacuum. 1.94 g of the title compound are obtained in the form of a light gray solid.

Príprava 5Preparation

Sledovanie mikroorganizmov, schopných demetylovať sordarín v polohe 4’Monitoring of microorganisms capable of demethylating sordarin in position 4 '

Mikroorganizmy, schopné demetylovať sordarín v polohe 4’ je možné identifikovať tak, že sa pestujú pri teplote 28 “C v prípade baktérií alebo 25 °C v prípade húb v 10 ml prostredia SB1 v prípade baktérií alebo FBI v prípade húb v 50 ml kónických fľašiach, pretrepávaných rýchlosťou 250 otáčok/minútu. Po dvoch dňoch sa pridá sordarín do koncentrácie 0,5 mg/ml (zo zásobného roztoku 200 mg/ml v 80% etanole) a fľaše sa potom inkubujú ešte 3 dni. Potom sa vzorka kultúry s objemom 500 mikrolitrov zmieša v Eppendorfovej skúmavke s 500 mikrolitrami 80% acetonitrilu s 2% kyseliny trifluóroctovej, extrakcia prebieha 30 minút pri teplote miestnosti. Supernatant, získaný odstredením vzorky v mikroodstredivke sa skúša pomocou izokratickej HPLC na prítomnosť 4’-demetylsordarínu. Táto látka sa vymýva po 3,35 minútach za použitia 35% acetonitrilu vo vode pri rýchlosti prietoku 2 ml/min a za použitia stĺpca Spherisorb Cg (5 mikrometrov, 15 cm x 4,6 mm). Týmto spôsobom boli nasledujúce mikroorganizmy identifikované ako organizmy, schopné demetylovať sordarín:Microorganisms capable of demethylating sordarin at the 4 'position can be identified by growing at 28 ° C for bacteria or 25 ° C for fungi in 10 ml SB1 medium for bacteria or FBI for fungi in 50 ml conical flasks , agitated at 250 rpm. After two days, sordarin is added to a concentration of 0.5 mg / ml (from a 200 mg / ml stock solution in 80% ethanol) and the bottles are then incubated for a further 3 days. Then, a 500 microliter sample of the culture was mixed in an Eppendorf tube with 500 microliter 80% acetonitrile with 2% trifluoroacetic acid, extraction was performed at room temperature for 30 minutes. The supernatant obtained by centrifuging the sample in a microcentrifuge is assayed by isocratic HPLC for the presence of 4 ' -demethylsordarin. This material was eluted after 3.35 minutes using 35% acetonitrile in water at a flow rate of 2 ml / min and using a Spherisorb Cg column (5 microns, 15 cm x 4.6 mm). In this way, the following microorganisms have been identified as being able to demethylate sordarin:

Streptomyces Streptomyces Streptomyces S treptomyces Streptomyces Streptomyces Streptomyces Streptomyces Nocardia o capreolus avermitilis armentosus autLbioticus rimosus platens is mashuensis eurythermus rientaLisStreptomyces Streptomyces Streptomyces With treptomyces Streptomyces Streptomyces Streptomyces Streptomyces Nocardia of capreolus avermitilis armentosus of Lbioticus rimosus platens is mashuensis eurythermus rientaLis

ATCC 31963ATCC 31963

ATCC 31272ATCC 31272

NRRL 3176NRRL 3176

ATCC 31771ATCC 31771

ATCC 23955ATCC 23955

ATCC 29778ATCC 29778

ATCC 23934ATCC 23934

ATCC 14975ATCC 14975

ATCC 43491ATCC 43491

Cunninghamella echinulata var elegansCunninghamella echinulata var elegans

ATCC 36112ATCC 36112

Prostredie SB1SB1 environment

Arkasoy extrakt z kvasníc kh₂po₄ glukóza destilovaná voda pH 7 g/1Arkasoy yeast extract kh ₂ to ₄ glucose distilled water pH 7 g / l

Prostredie FBI g/1FBI environment g / 1

sój ový olej 30 Arkasoy 10 extrakt z kvasníc 5 KH₂P0₄ 5 glukóza 20 destilovaná voda pH 5,5soybean oil 30 Arkasoy 10 yeast extract 5 KH ₂ P0 ₄ 5 glucose 20 distilled water pH 5,5

Príprava 6Preparation 6

Príprava 4’-demetylsordarinu biologickou transformáciou sordarínuPreparation of 4´-demethylsordarin by biological transformation of sordarin

0,3 ml suspenzie spór Streptomyces capreolus ATCC 31963 po skladovaní pri teplote -20 °C v 15%-glyce.role sa použije na naočkovanie 30 ml prostredia SB1 v Er’l.enmeyerovej banke s objemom 250 ml, čím sa získa očkovacia kultúra, ktorá sa inkubuje pri teplote 28 °C a 250 otáčkach/minútu na rotačnej trepačke. Po 4 dňoch sa 0,5 ml tohto materiálu použije na naočkovanie 35 ml prostredia SB1 v banke s objemom 250 ml a materiál sa opäť pestuje pri teplote 28 °C a 250 otáčkach/minútu celkom 48 hodín. Potom sa kultúra rozdelí po podieloch 10 ml do Erlenmeyerových baniek s 50 ml živného prostredia a 5 mg sordarínu (zo zásobného roztoku 200 mg/ml v etanole). Zmes sa inkubuje ešte 3 dni, potom sa pridá k 14 ml prostredia 14 ml 80% acetonitrilu vo vode a zmes sa nechá stáť pri teplote miestnosti za občasného premiešania. Po 30 minútach sa bunkový materiál odstredí, acetonitril sa odparí a pH vodného podielu sa upraví na 2,5 kyselinou ortofosforečnou. Roztok sa nechá prejsť stĺpcom živice Amberlit XAD-16 (objem vrstvy 5 ml). Živica sa postupne premyje 10 ml vody, 20 ml 10% acetonitrilu vo vode, 10 ml 30% acetonitrilu vo vode, 20 ml 50% acetonitrilu vo vode a 10 ml 30% acetonitrilu vo vode, 20 ml 50% acetonitrilu vo0.3 ml of the Streptomyces capreolus ATCC 31963 spore suspension after storage at -20 ° C in 15% glycerol was used to inoculate 30 ml of SB1 medium in a 250 ml Er'en.meyer flask to obtain a seed culture. which is incubated at 28 ° C and 250 rpm on a rotary shaker. After 4 days, 0.5 ml of this material was used to inoculate 35 ml of SB1 medium in a 250 ml flask and the material was again grown at 28 ° C and 250 rpm for a total of 48 hours. The culture was then aliquoted in 10 ml portions into Erlenmeyer flasks with 50 ml culture medium and 5 mg sordarin (from a 200 mg / ml stock solution in ethanol). The mixture is incubated for a further 3 days, then 14 ml of 80% acetonitrile in water is added to 14 ml of medium and the mixture is allowed to stand at room temperature with occasional stirring. After 30 minutes, the cell material was centrifuged, the acetonitrile was evaporated and the pH of the aqueous portion was adjusted to 2.5 with orthophosphoric acid. The solution was passed through a column of Amberlite XAD-16 resin (5 mL bed volume). The resin is washed successively with 10 ml of water, 20 ml of 10% acetonitrile in water, 10 ml of 30% acetonitrile in water, 20 ml of 50% acetonitrile in water and 10 ml of 30% acetonitrile in water, 20 ml of 50% acetonitrile in water.

vode a 10 ml 90% acetonitrilu vo vode, vo všetkých prípadoch ide o % objemové. Frakcie sa sledujú pomocou HPLC. 4’-demetylsordarín sa nachádza v eluáte za použitia 50% acetonitrilu vo vode. 4’-demetylsordarín sa potom čistí preparatívnom HPLC za nasledujúcich podmienok:water and 10 ml of 90% acetonitrile in water, all by volume. Fractions were monitored by HPLC. 4'-Demethylsordarin is found in the eluate using 50% acetonitrile in water. 4'-Demethylsordarin is then purified by preparative HPLC under the following conditions:

stĺpec column Spherisorb, 5 mikrometrov Cg 25 x 2,5 cm Spherisorb, 5 microns Cg 25 x 2.5 cm rýchlosť prietoku flow rate 25 ml/min 25 ml / min detekcia detection UV pri 210 nm UV at 210 nm mobilná fáza mobile phase 350 ml acetonitrilu sa doplní na 1000 ml 0,05 M dihydrogénfosforečnanom amónnym vo vode a pH sa upraví na 2,5 kyselinou ortofosforečnou Acetonitrile (350 ml) was made up to 1000 ml of 0.05 M ammonium dihydrogen phosphate in water and adjusted to pH 2.5 with orthophosphoric acid. vstreknutý objem injection volume 4,5 ml. 4.5 ml.

Za týchto podmienok dôjde k elúcii 4’-demetylsordarínu po 10 minútach. Frakcie zo štyroch vzoriek po analýze HPLC sa spoja, zriedia sa vodou v pomere 1:1 a potom sa materiál nechá znova prepojiť oxidom acetonitrilom a znova uvedeným kremičitým po premytí do rovnovážneho stavu vo vode.Under these conditions, 4'-demethylsordarin elutes after 10 minutes. Fractions from four samples after HPLC analysis were pooled, diluted 1: 1 with water and then re-coupled with acetonitrile and again silica after washing to equilibrate in water.

Adsorpčný prostriedok sa premyje 200 ml vody, na elúciu sa použije 200 ml 95% acetonitrilu vo vode. Tento eluát sa odparí na odstránenie organického rozpúšťadla a vodný roztok sa lyofilizuje, čím sa získa 1,5 mgThe adsorbent is washed with 200 ml of water, eluting with 200 ml of 95% acetonitrile in water. This eluate was evaporated to remove the organic solvent and the aqueous solution was lyophilized to give 1.5 mg

4’-demetylsordarínu vo forme bieleho prášku.4'-demethylsordarin in the form of a white powder.

δ (¹H,CDCI₃); 9,74(s,1H); 6,08(brd,3,1H); 4,70(0,1,5,11-1); 4,16(d,9_f5,1H); 4_f08(dd,4_r5,3,5,1H); 3_r88(dd,4,5,1,5,1H); 3,75(dq,8,5,6,1 H); 3,62(d,9,5,1H);δ ⁽¹ H, _CDCl3); 9.74 (s, 1H); 6.08 (brd, 3,1H); 4.70 (0,1,5,11-1); 4.16 (d, 9 _f 5,1H); 4 _f 08 (d, _r 4 5,3,5,1H); 3 _r 88 (dd, 4,5,1,5,1H); 3.75 (dq, 8.5.6, 1H); 3.62 (d, 9,5,1H);

3,68(dd,8,5,-3,5,1 H); 2,65(m,1H); 2.34(m,1H); 1,32(d,6,3H); 1,30(d,12,5,1 H); 1,23(m,1H); 1,04(d,7,3H); 0_r99(d,7,3H); 0,81(d,7,3H)3.68 (dd, 8.5, -3.5, 1H); 2.65 (m, 1H); 2:34 (m, 1H); 1.32 (d, J = 6,3H); 1.30 (d, 12.5, 1H); 1.23 (m, 1H); 1.04 (d, 7,3H); _D 99 (d, 7.3H); 0.81 (d, 7,3H)

Príprava 7Preparation 7

Príprava sordaricínu rovnako ako v príprave ktorá sa vymýva tieto frakcieThe preparation of sordaricin as well as the preparation eluting these fractions

Frakcia, oddelí aFraction, separated and

Postupuje sa preparátívnej HPLC. až 25,0 minút sa vstreknutých vzoriek. Týmto litrov materiálu, ktorý saPreparative HPLC was performed. up to 25.0 minutes with injected samples. This liters of material to be

1, vrátane v rozmedzí 21,4 sa spoja z 10 získa celkom 22 a roztok sa spôsobom sa zriedi rovnakým objemom vody nechá znova prejsť stĺpcom s prostriedkom1, including in the range of 21.4, a total of 22 is obtained from 10, and the solution is diluted in an equal volume of water by passing through the column with the composition again.

Kromasil rýchlosťou 28 1/h. Stĺpec sa premyje 20 litrami vody a potom sa vymýva 4,5 litrami 90% acetonitrilu. Tento eluát sa spojí so 4,5 litrami zodpovedajúcej frakcie z inej fermentácie. Potom sa spojené eluáty odparia na ktorej Potom odparovači znížení zahrieva spojené eluáty až do začiatku kryštalizácie, ku objemu na približne 1,6 litrov.Kromasil at 28 L / h. The column is washed with 20 liters of water and then eluted with 4.5 liters of 90% acetonitrile. This eluate was combined with 4.5 liters of the corresponding fraction from another fermentation. Thereafter, the combined eluates are evaporated, whereupon the evaporative reduction heats the combined eluates until crystallization begins, to a volume of approximately 1.6 liters.

na vodnom rotačnom dôjde pri sa roztok množstva acetonitrilu približne 1,6 kúpeli na 60 °C s na získanie číreho roztoku. Roztok sa pridaním malého ochladí uloží sa odfiltrujú hnedá tuhá na sintri prion an aqueous rotary run, a solution of an amount of acetonitrile of approximately 1.6 is bathed at 60 ° C to obtain a clear solution. The solution was added by addition of a small chill and the brown solid filtered on a sinter at

č. 3 acetónu látka, ktorá sa vody v pomere 25% acetonitrilom a premyje sa získa 10,7 g produktu. Hmotnostné s hodnotami pre autentickú vzorku teplote 4 C. Kryštáliky sa a sušia vo vákuu, čím sa získa nechá prekryštalizovať zo zmesi 40:60, produkt sa prefiltruje, suší sa vo vákuu, čim sa spektrum a NMR sú v súlade sordaricínu.no. 3 acetone was taken up in water (25% acetonitrile and washed) to give 10.7 g of product. The crystals were dried under vacuum to obtain recrystallization from a 40:60 mixture, the product was filtered, dried under vacuum to bring the spectrum and NMR consistent with sordaricin.

Príprava 8Preparation

Biologická premena sordarínu na sordaricínBiological conversion of sordarin to sordaricin

0,2 ml suspenzie NCIMB 40675 sa použije na naočkovanie0.2 ml of NCIMB 40675 suspension is used for seeding

Erlenmeyerovej banky s objemom 250 ml, obsahujúcej ml živného prostredia (Oxoid), doplneného 0,2 % extraktu z kvasníc. Kultúra sa inkubuje 29 hodín pri teplote 28 °C na rotačnej trepačke pri 250 otáčkach/minútu a výkyve 50 mm.250 ml Erlenmeyer flasks containing 1 ml of nutrient medium (Oxoid) supplemented with 0,2% yeast extract. The culture is incubated for 29 hours at 28 ° C on a rotary shaker at 250 rpm and a 50 mm swing.

Podiely očkovacieho materiálu po 1 ml sa použijú na naočkovanie ďalšej banky s objemom 250 ml a obsahom 50 ml1 ml aliquots of inoculum were used to inoculate another 250 ml flask containing 50 ml.

dvojnásobnej koncentrácie živného prostredia (Oxoid), doplneného 0,1 % extraktu z kvasníc. Kultúry sa inkubujú 24 hodín, 62 kultúr sa potom spojí, čím sa získa 2,65 litrov materiálu, ktorý sa pridá k 30 litrom filtrátu fermentačného prostredia s obsahom sordarínu, pH sa upraví na 7,5, je možné použiť filtrát z prípravy 1. Reakcia sa vykonáva vo fermentore s objemom 70 litrov pri teplote 30 °C, miešanie 200 otáčok/minútu, prevzdušnenie 0,5 objemu za minútu. Súčasne sa pH udržuje na 7,5 pridávaním 1 M kyseliny chlorovodíkovej . Po 6 dňoch sa približne 16 g sordarínu premení na sordaricín. Zmes sa prefiltruje cez Dicalit za odsávania a adsorpčný materiál sa premyje vodou, čím sa získa 31,5 litrov filtrátu s pH 8,2. Po úprave pH na 6,0 kyselinou fosforečnou sa materiál nechá prejsť vrstvou živice Amberchrom CG161 rýchlosťou 290 ml/minútu. Použije sa vrstva 25 x 5 cm. Táto vrstva sa potom premyje 2 litrami 0,1% kyseliny fosforečnej a 4 litrami 25% acetonitrilu, na elúciu sa použijú 2 litre 60% metylkyanidu. Eluát sa odparí na rotačnom odparovači až do začiatku kryštalizácie, zahustený zvyšok sa zahrieva na 60 °C na vodnom kúpeli s pridaním malého množstva acetonitrilu na dosiahnutie číreho roztoku. Tento roztok sa ochladí a uloží cez noc pri teplote 4 °C. Potom sa vytvorené kryštáliky odfiltrujú, premyjú sa 25% acetonitrilom a sušia vo vákuu, čím sa získa hnedý prášok, ktorý sa nechá prekryštalizovať z 1 litra zmesi acetonitrilu a vody 40:60, potom sa kryštáliky odfiltrujú, premyjú sa a sušia ako je uvedené vyššie, čím sa získa 6,15 g sordaricínu vo forme svetlohnedých ihličkových kryštálikov.twice the concentration of the medium (Oxoid), supplemented with 0.1% yeast extract. The cultures are incubated for 24 hours, 62 cultures are then pooled to give 2.65 liters of material, which is added to 30 liters of sordarin-containing fermentation broth, the pH is adjusted to 7.5, the filtrate of Preparation 1 being used. The reaction is carried out in a 70 liter fermenter at 30 ° C, stirring at 200 rpm, aerating at 0.5 volume per minute. At the same time, the pH was maintained at 7.5 by addition of 1 M hydrochloric acid. After 6 days, approximately 16 g of sordarin is converted to sordaricin. The mixture is filtered through Dicalite with suction and the adsorbent material is washed with water to give 31.5 liters of filtrate at pH 8.2. After adjusting the pH to 6.0 with phosphoric acid, the material was passed through a layer of Amberchrom CG161 resin at a rate of 290 mL / minute. A 25 x 5 cm layer was used. This layer was then washed with 2 liters of 0.1% phosphoric acid and 4 liters of 25% acetonitrile, eluting with 2 liters of 60% methyl cyanide. The eluate was evaporated on a rotary evaporator until crystallization began, the concentrated residue was heated to 60 ° C in a water bath with the addition of a small amount of acetonitrile to obtain a clear solution. This solution was cooled and stored overnight at 4 ° C. The crystals formed are then filtered off, washed with 25% acetonitrile and dried in vacuo to give a brown powder which is recrystallized from 1 liter of a 40:60 mixture of acetonitrile and water, then the crystals are filtered, washed and dried as above. to give 6.15 g of sordaricin as pale brown needle crystals.

Príprava 9Preparation 9

Biologická transformácia sordarínu na sordaricínBiological transformation of sordarin to sordaricin

Materiál, odobratý bakteriologickou slučkou z agarovej kultúry NCIMB 40675 sa použije na naočkovanie Erlenmeyerovej banky s objemom 250 ml s obsahom 50 ml živného prostredia (Oxoid), doplneného 0,2 % extraktu z kvasníc. Kultúra sa inkubuje 26 hodín p.ri teplote 25 °C na rotačnom odparovači pri 250 otáčkach/minútu a výkyvom 50 mm. Vždy 1 ml vyvinutej kultúry sa použije na naočkovanie ďalších baniek s objemom 250 ml vyššie uvedeným spôsobom. Do baniek sa pridá čistý sordarín v 80% etanole do konečnej koncentrácie 1,25 mg/ml. Banky sa inkubujú rovnako ako vyššie 8 dní a potom sa obsah spoji, čím sa získa 365 ml živného prostredia s obsahom sordaricínu. Zmes po biologickej premene sa odstredí na odstránenie buniek NCIMB 40675 a 350 ml supernatantu sa odloží. K supernatantu sa pridá 5 ml prostriedku Vhatman Partisil P40 ODS-3, vopred zvlhčeného acetonitrilom a pH saNCIMB 40675 agar culture loops were used to inoculate a 250 ml Erlenmeyer flask containing 50 ml of medium (Oxoid) supplemented with 0.2% yeast extract. The culture is incubated for 26 hours at 25 ° C on a rotary evaporator at 250 rpm with a 50 mm swing. 1 ml of the developed culture was used to inoculate additional 250 ml flasks as described above. Pure sordarin in 80% ethanol is added to the flasks to a final concentration of 1.25 mg / ml. The flasks were incubated as above for 8 days and the contents were pooled to give 365 ml of sordaricin-containing broth. The mixture after centrifugation is centrifuged to remove NCIMB 40675 cells and 350 ml of the supernatant is discarded. 5 ml of Vhatman Partisil P40 ODS-3, pre-wet with acetonitrile, was added to the supernatant and the pH was

upraví kyselinou fosforečnou na 4,0. Potom sa Partisil odfiltruje na Buchnerovom lieviku, na elúciu sa použije 100 ml acetonitrilu a potom 100 ml 75% acetonitrilu. Eluáty sa spoja, odparia na vodný zvyšok s objemom 10 až 15 ml a tento zvyšok sa zahrieva na vodnom kúpeli a súčasne sa pridáva acetonitril až roztoku, potom sa pridáva voda až do s teplotou 60 °C do vzniku číreho zakalenia roztoku.adjusted to 4.0 with phosphoric acid. Then, Partisil is filtered on a Buchner funnel, eluting with 100 ml of acetonitrile and then with 100 ml of 75% acetonitrile. The eluates are combined, evaporated to an aqueous residue of 10-15 ml and heated in a water bath while acetonitrile is added to the solution, then water is added up to 60 ° C until the solution becomes cloudy.

Potom sa zmes ochladí a uloží na niekoľko dní pri teplote “C. Vzniknuté kryštáliky sa odfiltrujú za použitia sintraThe mixture was then cooled and stored for several days at a temperature of " The resulting crystals are filtered off using sinter

č. 3, premyjú sa vodou a sušia vo vákuu nad oxidom fosforečným, čím sa získa 92 mg sordaricínu vo forme bielych ihličkovítých kryštálikov.no. 3, washed with water and dried in vacuo over phosphorus pentoxide to give 92 mg of sordaricin as white needle crystals.

Príprava 10Preparation 10

Príprava sordaricínuPreparation of sordaricin

Zmrazená ampulka kmeňa IMI 362947 sa použije na naočkovanie 50 ml prostredia FS v Erlenmeyerovej banke s objemom 250 ml. Naočkované prostredie sa inkubuje 6 dní pri teplote 25 °C na rotačnej trepačke pri 250 otáčkach/minútu a pri výkyve 50 mm. Potom sa použijú podiely po 1 ml na naočkovanie štyroch baniek s obsahom 250 ml, obsahujúcich 50 ml produkčného prostredia SM55/A.The frozen vial of strain IMI 362947 is used to inoculate 50 ml of FS medium in a 250 ml Erlenmeyer flask. The inoculated medium is incubated for 6 days at 25 ° C on a rotary shaker at 250 rpm and with a 50 mm swing. 1 ml aliquots are then used to inoculate four 250 ml flasks containing 50 ml SM55 / A production medium.

SM55/ASM55 / A

Maltodextrín MD30E (Roquette Frere)Maltodextrin MD30E (Roquette Frere)

120120

repná melasa pepton (Oxoid L37)peptone beet molasses (Oxoid L37)

Proflo (Traders Protein) L-tryptofán (Sigma) ZnS0₄.7H₂0 (BDH)Proflo (Traders Protein) L-Tryptophan (Sigma) ZnSO ₄ .7H ₂ 0 (BDH)

FeSO₄.7H₂0 (Sigma)FeSO ₄ .7H ₂ 0 (Sigma)

CaC0₃ (BDH)CaCO ₃ (BDH)

NgSO₄.7H₂O (BDH)NgSO ₄ .7H ₂ O (BDH)

0,040.04

Zmes sa doplní destilovanou vodou a sterilizuje 120 minút v autokláve pri teplote 121 °C.The mixture was charged with distilled water and sterilized for 120 minutes in an autoclave at 121 ° C.

Kultúra sa inkubuje vyššie uvedeným spôsobom celkom 7 dní. Potom sa obsah baniek spojí a k 40 ml obsahu sa pridajú 4 ml IM hydroxidu sodného a zmes sa mieša 45 minút pri teplote miestnosti. Potom sa bunkový materiál odstráni odstredením 20 minút pri 3000 otáčkach/minútu, supernatant sa oddelí a jeho pH sa upraví na hodnotu 3 pridaním 1 M kyseliny chlorovodíkovej. Potom sa roztok nechá prejsť cez stĺpec Bond Elut (1 g, C18) a adsorpčný prostriedok sa premyje 20 ml vody a potom sa na elúciu použije 15 ml 90% acetonitrilu vo vode. Získaný eluát sa odparí do sucha pri teplote miestnosti a odparok sa rozpustí v 9 ml 50% acetonitrilu vo vode (% objemové). Sordaricín sa potom čistí pomocou HPLC za nasledujúcich podmienok:The culture is incubated for 7 days as above. Then the contents of the flasks were combined and 40 ml of the contents were added with 4 ml of 1M sodium hydroxide and stirred at room temperature for 45 minutes. Thereafter, the cell material is removed by centrifugation at 3000 rpm for 20 minutes, the supernatant is collected and its pH adjusted to 3 by addition of 1 M hydrochloric acid. The solution was passed through a Bond Elut column (1 g, C18) and the adsorbent was washed with 20 mL water and then eluted with 15 mL 90% acetonitrile in water. The eluate obtained is evaporated to dryness at room temperature and the residue is dissolved in 9 ml of 50% acetonitrile in water (v / v). The sordaricin is then purified by HPLC under the following conditions:

stĺpeccolumn

Spherisorb, 5 mikrometrov ODS-2 (25 x 2,12 cm) rýchlosť prietoku mobilná fáza ml/minSpherisorb, 5 micrometers ODS-2 (25 x 2.12 cm) Flow Rate Mobile Phase ml / min

550 ml acetonitrilu sa doplní na 100 ml vodou, potom sa pridá 1 ml kyseliny trifluóroctovej na 1 liter mobilnej fázy detekciaMake up to 550 ml of acetonitrile to 100 ml with water, then add 1 ml of trifluoroacetic acid per liter of mobile phase

210 nm vstrekovaný obj em210 nm injected volume

Za týchto podmienok sa sordaricín vymýva po dobe retencie 6,0 minút. Frakcie, ktoré sordaricín obsahujú sa spoja, acetonitril sa odstráni odparením na rotačnom odparovači pri teplote miestnosti a vodný roztok sa potom lyofilizuje, čím sa získa 8,9 mg produktu vo forme bieleho prášku.Under these conditions, the sordaricin elutes after a retention time of 6.0 minutes. The sordaricin-containing fractions were combined, the acetonitrile was removed by rotary evaporation at room temperature and the aqueous solution was then lyophilized to give 8.9 mg of the product as a white powder.

Medziprodukt 1Intermediate 1

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4aP,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(6-deoxy^-D-altropyranosyloxy)-metyl]-4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)- karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αP, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [(6-deoxy-4-D-altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6, 7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) 1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 10,0 g 4’-demetylsordarínu v 200 ml metanolu bolo pridaných po kvapkách pri teplote miestnosti 90 ml 0,35 M roztoku difenyldiazometánu v dichlórmetáne a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná, po dobu 6 hodín.To a solution of 10.0 g of 4'-demethylsordarin in 200 ml of methanol was added dropwise at room temperature 90 ml of a 0.35 M solution of diphenyldiazomethane in dichloromethane and the resulting reaction mixture was stirred for 6 hours.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent to dryness, the residue was flash chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (3: 1) as eluent.

Bolo získaných 12,6 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme svetložltej sfarbenej peny.12.6 g of the title compound were obtained as a light yellow colored foam.

δ (1 H, CDCI3): 9,73 (s, 1 H, CHO), 6,98 (s, 1 H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a , 3,6 Hz), 4,65 (d, 1H, H-ľ, J=1,5 Hz), 4,09, 3,76 (2d, 2H, 83-(¾ J=9Hz), 4,01 (m, 1H, H-2'),. 3,84 (m, 1H, H-3'), 3,75 (m, .1H, H-5'), 3.69 (m, 1H, H-4'), 2,73 (t, 1H, H-1, J=4,2 Hz).δ (1H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 6.98 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6.05 (dd, 1H, H-2, J = 1.5) α, 3.6 Hz), 4.65 (d, 1H, H-1 ', J = 1.5 Hz), 4.09, 3.76 (2d, 2H, 83- (¾ J = 9Hz), 4 1.01 (m, 1H, H-2 '), 3.84 (m, 1H, H-3'), 3.75 (m, 1H, H-5 '), 3.69 (m, 1H, H -4 '), 2.73 (t, 1H, H-1, J = 4.2 Hz).

Medziprodukt 2Intermediate 2

Príprava d.i.f enylmetylesteru kyseliny [ ÍR-(Ια , 3ηβ , 4β , 4ηβ , 7β , 7aa,8ηβ)]-8a-[(6-deoxy-3,4-0-izopropylidén^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl3-(l-metyletyl)-(1H)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O-isopropylidene-4-D-altropyranosyloxy) methyl] -4- formy1-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methyl-ethyl) - (1H) -1,4-methano-s-indacene-3a (1 H) - carboxylic acid

K roztoku 650 mg medziproduktu 1, pripraveného v predchádzajúcom stupni, v 15 ml zmesi dimetoxypropán-acetónTo a solution of 650 mg of intermediate 1 prepared in the previous step in 15 ml of dimethoxypropane-acetone mixture

(1:2), bolo pridaných 10 mg kyseliny p-toluénsulfónovej. Potom, čo bol vzniknutý roztok miešaný pri teplote miestnosti po dobu 1,5 hodiny, bol pridaný 1 g uhličitanu draselného a reakčná zmes bola miešaná po dobu ďalších 30 minút.(1: 2), 10 mg of p-toluenesulfonic acid was added. After the resulting solution was stirred at room temperature for 1.5 hours, 1 g of potassium carbonate was added and the reaction mixture was stirred for an additional 30 minutes.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bola surová zmes vytrepaná medzi 50 ml etylacetátu a 25 ml vody a vodná fáza bola potom vytrepaná 2 x 50 ml etylacetátu. Organická fáza bola premytá soľankou, vysušená síranom horečnatým a potom bola odparená do sucha.After evaporation of the solvent to dryness, the crude mixture was partitioned between 50 mL of ethyl acetate and 25 mL of water, and the aqueous phase was then extracted with 2 x 50 mL of ethyl acetate. The organic phase was washed with brine, dried over magnesium sulfate and then evaporated to dryness.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (1:3).The residue was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (1: 3).

Bolo získaných 600 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.600 mg of the title compound was obtained as a white foam.

Ô (¹H, CDCI₃): 9,73 (s, 1H, ČHO), 7,45-7,24 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4_;57 (d, 1 H, H-ľ, J=3,0 Hz), 4_f30 (dd, 1 H, H-3', J=3,6 a 5,7 Hz), 4,07 (d, 1 H, 8aCH₂, J=9,0 Hz), 3,95-3,93 (m, 1H, H-2'), 3,85 (dd, 1H, H-4', J=5,7 a 9,3 Hz), 3,75 (d, 1 H, 8aCH₂, J=9,0 Hz ), 3,44 (dq, 1 H, H-5', J_d=9,3 Hz, J_q=6.3 Hz), 2,73 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz).(@ ¹ H, _CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.45-7.24 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.06 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 4 _; 57 (d, 1H, H-1 ', J = 3.0 Hz), 4 _f 30 (dd, 1H, H-3', J = 3.6 and 5.7 Hz), 4.07 (d 1 H, 8aCH ₂ , J = 9.0 Hz), 3.95-3.93 (m, 1H, H-2 '), 3.85 (dd, 1H, H-4', J = 5, 7 and 9.3 Hz), 3.75 (d, 1H, 8aCHa _2, J = 9.0 Hz), 3.44 (dq, 1H, H-5 ', J _d = 9.3 Hz, J _q = 6.3 Hz), 2.73 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz).

Medziprodukt 3Intermediate 3

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ap,7β, 7aa,δΗβ)]-8a-[(6-deoxy-3,4-0-(2-pentylidén)-β-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4β, 4αp, 7β, 7aa, δΗβ)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O- (2-pentylidene) -β-D-altropyranosyloxy) methyl] ] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1 H) - carboxylic acid

K suspenzii 500 mg medziproduktu 1, ktorého príprava je opísaná vyššie a 5 mg p-toluénsulfónovej kyseliny v 5 ml dichlórmetánu, boli pridané 2 ml 2,2-dimetoxypentánu a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 2 hodín. Potom bolo pridaných 150 mg uhličitanu draselného a zmes bola miešaná ďalších 30 minút.To a suspension of 500 mg of intermediate 1 described above and 5 mg of p-toluenesulfonic acid in 5 ml of dichloromethane was added 2 ml of 2,2-dimethoxypentane and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 2 hours. 150 mg of potassium carbonate was then added and the mixture was stirred for an additional 30 minutes.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (15:85) a (30:70) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent to dryness, the residue was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (15:85) and (30:70) as eluent.

Bolo získaných 474 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .474 mg of the title compound are obtained.

δ (¹Η, CDCI₃): 9,73 (s, 1Η, CHO), 7,45-7,24 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,57 (d, 1H, H-ľ, J=2,1 Hz), 4,30 (dd, 1H, H-3', J=3,9 a 6,0 Hz), 4,04 ( d, 1H, 8aCH2, J=9,0 Hz), 3,94-3,91. (m, 1 H, H-2'), 3,86 (dd, 1 H, H-4', J=6,3 a 9,6 Hz), 3,73 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,0 Hz), 3,45 (dq, 1 H, H-5, J_d= 9,0 Hz, J_q=6,0 Hz), 2,72 (t, 1 H, H-1, J=3,6 Hz).δ ⁽¹ Η, _CDCl3): 9.73 (s, 1Η, CHO), 7.45-7.24 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.06 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 4.57 (d, 1H, H-1 ', J = 2.1 Hz), 4.30 (dd, 1H, H -3 ', J = 3.9 and 6.0 Hz), 4.04 (d, 1H, 8aCH 2, J = 9.0 Hz), 3.94-3.91. (m, 1 H, H-2 '), 3.86 (dd, 1H, H-4', J = 6.3, 9.6 Hz), 3.73 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.0 Hz), 3.45 (dq, 1H, H-5, J _d = 9.0 Hz, J _q = 6.0 Hz), 2.72 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz).

Medziprodukt 4Intermediate 4

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8ap)]-8a-[(6-deoxy-3,4-0-(4-metoxy-2-butylidén)-β-Daltropyranosyloxy)-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αp)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O- (4-methoxy-2-butylidene) -β-Daltropyranosyloxy) ) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a - (1H) carboxylic acid

K suspenzii 350 mg medziproduktu 1, ktorého príprava je opísaná vyššie a 5 mg p-toluénsulfónovej kyseliny v 4 ml dichlórmetánu, bol pridaný 1 ml 2,2,4-trimetoxybutánu a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Potom bolo pridaných 150 mg uhličitanu draselného a zmes bola miešaná ďalších 30 minút.To a suspension of 350 mg of intermediate 1 described above and 5 mg of p-toluenesulfonic acid in 4 ml of dichloromethane was added 1 ml of 2,2,4-trimethoxybutane and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour. 150 mg of potassium carbonate was then added and the mixture was stirred for an additional 30 minutes.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (3:7) a (4:6) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent to dryness, the residue was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (3: 7) and (4: 6) as eluent.

Bolo získaných 290 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, v pomere epimérov 3:1.290 mg of the title compound are obtained in a 3: 1 epimer ratio.

δ (^H, CDCI3) signály pre hlavnú zložku 9₍.73 (s, 1 H, CHO), 7,45-7,20 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,57 (d, 1H, H-ľ, J=2,1 Hz), 4,31 (dd, 1H, H-3', J=3,9 a 6,0 Hz), 4,05 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,0 Hz), 3,95-3,90 (m, 1H, H-2’), 3,88 (dd, 1H, H-4', J=6,0 a 9,3 Hz), 3,73 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,0 Hz), 3,51 (t, 2H, CH₂O, J=7_f2 Hz), 3,50-3,45 (m, 1H, H5'), 3,33 (s, 3H, CH₃O), 2,72 (t, 1H, H-1, J=3_f6 Hz).δ (1 H, CDCl 3) signals for the major component 9 ₍ .73 (s, 1H, CHO), 7.45-7.20 (m, 10H, 2Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh ₂ ) 6.06 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.57 (d, 1H, H-1 ', J = 2.1 Hz), 4.31 (dd) , 1 H, H-3 ', J = 3.9 and 6.0 Hz), 4.05 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.0 Hz), 3.95-3.90 (m, 1 H H-2 '), 3.88 (dd, 1H, H-4', J = 6.0 and 9.3 Hz), 3.73 (d, 1H, 8 and CH ₂ , J = 9.0 Hz) , 3.51 (t, 2H, CH ₂ O, J = 7 Hz _f 2), 3.50-3.45 (m, 1H, H5 '), 3.33 (s, 3H, CH ₃ O); 2.72 (t, 1 H, H-1, J = 3 Hz _f 6).

Medziprodukt 5Intermediate 5

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4aβ,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(6-deoxy-3,4-0-cyklopentylidén^-D-altropyranosyloxy)-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7 metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4αβ, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O-cyclopentylidene-4-D-altropyranosyloxy) methyl] -4- formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K suspenzii 160 mg medziproduktu 1, ktorého príprava je opísaná vyššie, v zmesi 4 ml dichlórmetán-1,1-dimetoxycyklopentán (3:1), bolo pridaných 5 mg kyseliny p-toluénsulfónovej a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 2 hodín. Potom bol pridaný 1 g uhličitanu draselného a zmes bola miešaná po dobu ďalších 30 minút.To a suspension of 160 mg of intermediate 1 prepared above in a mixture of 4 ml of dichloromethane-1,1-dimethoxycyclopentane (3: 1) was added 5 mg of p-toluenesulfonic acid and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 2 hours. hours. 1 g of potassium carbonate was then added and the mixture was stirred for an additional 30 minutes.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (1:4) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent to dryness, the residue was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (1: 4) as eluent.

Bolo získaných 142 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .142 mg of the title compound are obtained.

Ô (¹H, CDCI₃): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,45-7,25 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh2), 6,06 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,55 (d, 1H, H-ľ, J=1,8 Hz), 4,17 (dd, 1 H, H-3', J=3,0 a 5,1 Hz), 4,08 (d, 1 H, 8aCH₂, J=9,0 Hz), 3,95 (dt, 1 H, H2', J_d=1,8 Hz, J_t=3,0 Hz), 3,81 (dd, 1H, H-4', J=5,1 a 9,3 Hz), 3,76 ( d, 1H, 8aCH2, J=9,0 Hz), 3,42 (dq, 1H, H-5', J_d=9,3 Hz, J_q=6,3 Hz), 2,73 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz).(@ ¹ H, _CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.45-7.25 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh2), 6.06 ( dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.55 (d, 1H, H-1 ', J = 1.8 Hz), 4.17 (dd, 1H, H-3 ', J = 3.0, 5.1 Hz), 4.08 (d, 1H, 8aCHa _2, J = 9.0 Hz), 3.95 (dt, 1 H, H-2', J _d = 1.8 Hz, J _t = 3.0 Hz), 3.81 (dd, 1H, H-4 ', J = 5.1 and 9.3 Hz), 3.76 (d, 1H, 8aCH2) J = 9.0 Hz), 3.42 (dq, 1H, H-5 ', J _d = 9.3 Hz, J _q = 6.3 Hz), 2.73 (t, 1H, H-1) , J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 6Intermediate 6

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(6-deoxy-3,4-0-izopropylidén-2-0-(metyltio)tiokarbonyl -β- D-a'ltropyranosyloxy) - metyl ] - 4-f ormyl-4,4a , 5,6 , 7,7a, 8,8a-oktahyd.ro - 7-metyl - 3 - (1-metylety 1) -1,4-metán - sindacén-3a~(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O-isopropylidene-2-O- (methylthio) thiocarbonyl-β-) D-Altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6, 7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1, 4-methane-sindacene-3α- (1H) -carboxylic acid

K roztoku, pripravenému rozpustením 100 mg medziproduktu 2, ktorého príprava je opísaná vyššie a 1 mg imidazolu v atmosfére dusíka, v 4 ml vysušeného tetrahydrofuránu, bolo pridaných 5 mg hydridu sodíka a vzniknutá suspenzia bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 0,5 hodiny. Potom bol k vzniknutej reakčnej zmesi pridaný sulfid uhličitý (27 μΐ) a po 20 minútovom miešaní bolo k zmesi pridaných 18 μΐ metyl j odidu.To a solution prepared by dissolving 100 mg of intermediate 2 described above and 1 mg of imidazole under nitrogen in 4 ml of dried tetrahydrofuran was added 5 mg of sodium hydride and the resulting suspension was stirred at room temperature for 0.5 hour. Carbon dioxide (27 μΐ) was then added to the resulting reaction mixture, and after stirring for 20 minutes, 18 μΐ of methyl iodide was added.

Po 2 hodinách bola reakcia prerušená pridaním 20 ml 1 M roztoku chloridu amónneho a zmes bola vytrepaná 3 x 25 ml etylacetátu. Organická fáza bola premytá soľankou, vysušená síranom horečnatým a potom bolo rozpúšťadlo odparené do sucha.After 2 hours, the reaction was quenched by addition of 20 mL of 1 M ammonium chloride solution and the mixture was shaken with 3 x 25 mL of ethyl acetate. The organic phase was washed with brine, dried over magnesium sulfate and then the solvent was evaporated to dryness.

Zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi etylacetát-hexán (1:9), ako elučného činidla.The residue was purified by flash column chromatography on silica gel using ethyl acetate-hexane (1: 9) as eluent.

Bolo získaných 110 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .110 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,71 (s, 1H, CHO), 7,44-7,25 (m, 10H, 2Ph), 6,96 (s, 1H, CHPh₂), 6,01 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 6,90 (dd, 1H, H-2', J=2,4 a 5,4 Hz), 4,85 (d, 1H, H-ľ, J=2,4 Hz), 4,53 (dd, 1H, H-3', J=5,4 a 6,3 Hz), 4,00 (dd, 1H, H-4', J=6,3 a 8,7 Hz), 3,93 (d, 1 H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,65 (dq, 1H, H-5', J_d=8,7, J_q= 6,3 Hz), 2,68 (t, 1H, H-1, J=3_f9 Hz), 2,59 (s, 3H, CH₃S).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.71 (s, 1H, CHO), 7.44-7.25 (m, 10H, 2 Ph), 6.96 (s, 1H, CHPh _2), 6.01 ( dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 6.90 (dd, 1H, H-2 ', J = 2.4 and 5.4 Hz), 4.85 ( d, 1H, H-1 ', J = 2.4 Hz), 4.53 (dd, 1H, H-3', J = 5.4 and 6.3 Hz), 4.00 (dd, 1H, H) -4 ', J = 6.3 and 8.7 Hz), 3.93 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.3 Hz), 3.65 (dq, 1H, H-5', J _d = 8.7, J _q = 6.3 Hz), 2.68 (t, 1 H, H-1, J = 3 Hz _f 9), 2.59 (s, 3H, _CH3 s).

Medziprodukt 7Intermediate 7

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3a0,4β,4ap,7β, 7aa,8aP)]- 8a-[(2,6-dideoxy-3,4-0-izopropylidén^-D-alopyranosyloxy)-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-índacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1a, 3a0,4β, 4ap, 7β, 7aa, 8aP)] - diphenylmethyl ester - 8a - [(2,6-dideoxy-3,4-O-isopropylidene-4-D-alopyranosyloxy) methyl] - 4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

V 5 ml vysušeného toluénu bol v atmosfére dusíka rozpustený medziprodukt 6 (95 mg), ktorého príprava je opísaná vyššie a vzniknutý roztok bol zahrievaný na teplotu 110 °C. Po 1,5 hodine miešania bol k tomuto roztoku pridaný po kvapkách roztok 64 μΐ tributylstaniumhydridu v 5 ml vysušeného toluénu a reakčná zmes bola zahrievaná po dobu ďalšej 1,5 hodiny, potom boli pridané 2 ml metanolu a rozpúšťadlo bolo odparené do sucha.Intermediate 6 (95 mg), prepared as described above, was dissolved in 5 mL of dried toluene under nitrogen and heated to 110 ° C. After stirring for 1.5 hours, a solution of 64 μΐ of tributyltin hydride in 5 ml of dried toluene was added dropwise and the reaction mixture was heated for an additional 1.5 hours, then 2 ml of methanol was added and the solvent was evaporated to dryness.

Rýchlou chromatografiou zvyšku na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (1:9), bolo získaných 42 mg žiadaného, v nadpise uvedeného produktu.Flash chromatography of the residue on silica gel using ethyl acetate-hexane (1: 9) afforded 42 mg of the desired product.

δ (¹H, CDCI₃): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,44-7,25 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (1 H, s, CHPh₂), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,54 ( dd, 1H, H-ľ, J=2,7 and 9,3 Hz), 4,39 (dt, 1H, H-3', J_d=2,7 Hz, J_t=3,6 Hz), 4,04 (d, 1 H, 8aCH₂, J=9_T0 Hz),3,67 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,0 Hz), 3,65 (dd, 1H, H-4‘, J=3_r6 a 8.7 Hz), 3,44 (dq, 1H, H-5', J_d=6,3 Hz, J_q=8_f7 Hz), 2,75 (t, 1H, J=3,9 Hz).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.44-7.25 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (1H, s, CHPh _2), 6, Δ (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.54 (dd, 1H, H-1 ', J = 2.7 and 9.3 Hz), 4.39 ( dt, 1 H, H-3 ', J _d = 2.7 Hz, J _t = 3.6 Hz), 4.04 (d, 1H, 8aCHa _2, J = 9 _T 0 Hz), 3.67 ( d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.0 Hz), 3.65 (dd, 1 H, H-4 ', J = 3 _r 6 and 8.7 Hz), 3.44 (dq, 1H, H-5' J _d = 6.3 Hz, J _q = 8 ₍ 7 Hz), 2.75 (t, 1H, J = 3.9 Hz).

Roztok 5,5 ml tributylstaniumhydridu v 150 ml vysušeného toluénu bol po dobu 1 hodiny odplyňovaný v prúde argónu a potom bol zahrievaný za refluxu pod spätným chladičom. Po 2 hodinách bol k tomuto roztoku pridaný po kvapkách roztok medziproduktu 6 (6 g) v 50 ml vysušeného toluénu a v zahrievaní reakčnej zmesi sa pokračovalo, dokiaľ nebola reakcia skončená (1,5 hodiny). Po odstránení rozpúšťadla za zníženého tlaku bol zvyšný surový produkt spracovaný rýchlou chromatograf iou na silikagél! za použitia zmesi hexán a hexánetylacetát (20:1 až 15:1) ako elučného činidla.A solution of 5.5 ml of tributyltin hydride in 150 ml of dried toluene was degassed for 1 hour under a stream of argon and then heated to reflux. After 2 hours, a solution of intermediate 6 (6 g) in 50 mL of dried toluene was added dropwise to this solution and heating was continued until the reaction was complete (1.5 hours). After removal of the solvent under reduced pressure, the remaining crude product was flash chromatographed on silica gel! eluting with hexane: hexane / ethyl acetate (20: 1 to 15: 1).

Boli získané 4 g v nadpise uvedenej zlúčeniny.4 g of the title compound were obtained.

Medziprodukt 8Intermediate 8

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3a£,4β,4ap,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(2,6-dideoxy-3,4-0-(4-metoxy-2-butylidén)-β-Dalopyranosyloxy)-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)-i,4-metán-s-indacén-3a-(1H)karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αp, 7β, 7aa, 8αβ)] - 8α - [(2,6-dideoxy-3,4-O- (4-methoxy-2-butylidene) - β-Dalopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-1methylethyl) -i, 4-methano-s indacene-3a (1H) carboxylic acid

K roztoku 600 mg medziproduktu 4, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 10 ml vysušeného tetrahydrofuránu, bolo pridaných pri teplote 0 °C v atmosfére dusíka 30 mg hydridu sodného a 5 mg imidazolu. Po 10 minútovom miešaní bol k roztoku pridaný sulfid uhličitý (147 μΐ) a po ďalšom 20 minútovom miešaní metyljodid (127 μΐ) a táto reakčná zmes bola miešaná ešte ďalších 30 minút. Po pridaní 20 ml 1 M roztoku chloridu amónneho bola zmes vytrepaná 3 x 25 ml etylacetátu a oddelená organická fáza bola premytá solankou a vysušená síranom horečnatým.To a solution of 600 mg of intermediate 4 prepared above in 10 ml of dried tetrahydrofuran was added at 0 ° C under nitrogen atmosphere 30 mg of sodium hydride and 5 mg of imidazole. After stirring for 10 minutes, carbon disulfide (147 μΐ) was added to the solution, and after stirring for another 20 minutes, methyl iodide (127 μΐ) was added and the reaction mixture was stirred for an additional 30 minutes. After addition of 20 ml of 1 M ammonium chloride solution, the mixture was washed with 3 x 25 ml of ethyl acetate and the separated organic phase was washed with brine and dried over magnesium sulfate.

Po odparení rozpúšťadiel do sucha bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (15:85) ako elučného činidla.After evaporation of the solvents to dryness, the residue was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (15:85) as eluent.

Získaná biela látka vo forme peny bola rozpustená v 10 ml vysušeného toluénu (v atmosfére dusíka) a po dvojhodinovom zahrievaní pri teplote 115 °C bol k zmesi pridaný po kvapkách roztok 0,46 ml tributylstaniumhydridu v 10 ml toluénu a zmes bola zahrievaná po dobu ďalších 2 hodín.The white foam obtained was dissolved in 10 ml of dried toluene (under nitrogen) and after heating at 115 ° C for two hours, a solution of 0.46 ml of tributyltin hydride in 10 ml of toluene was added dropwise and the mixture was heated for further 2 hours.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (15:85) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent to dryness, the residue was purified by flash chromatography on silica gel using ethyl acetate-hexane (15:85) as eluent.

Bolo získaných 260 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny v pomere epimérov 4:1.260 mg of the title compound were obtained in a 4: 1 epimer ratio.

δ (¹H, CDCI3): 9,63 (s, 1H, CHO), 7,44-7,20 ( m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1 H, H-2, J=1_f2 a 3,3 Hz), 4,53 (dd, 1 H, H-1J=2.7 a 8,7 Hz), 4,42 (dt, 1 H, H-3', J_d=3,0 Hz, Jf=4,2 Hz), 4,03 (d, 1 H, 8aCH₂, J=9,0 Hz), 3.68 (dd, 1 H, H-4', J=5,1 a 9,3 Hz), 3,66 (d, 1 H, 83(¾ J=9,0 Hz), 3,52 (t, 2H, CH₂O, J=7,2 Hz), 3,40 (dq, 1H, H-5', J_d=9,3 Hz, J_q=6,3 Hz), 3,34 (s, 3H, CH3O), 2,74 (t, 1H, H-1, J=4,2 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.63 (s, 1H, CHO), 7.44-7.20 (m, 10H, 2 Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6.06 ( dd, 1H, H-2, J = _1f 2 and 3.3 Hz), 4.53 (dd, 1H, H-1J = 2.7 and 8.7 Hz), 4.42 (dt, 1H , H-3 ', J _d = 3.0 Hz, Jf = 4.2 Hz), 4.03 (d, 1H, 8aCHa _2, J = 9.0 Hz), 3.68 (dd, 1H, H -4 ', J = 5.1 and 9.3 Hz), 3.66 (d, 1H, 83 (¾ J = 9.0 Hz), 3.52 (t, 2H, CH ₂ O, J = 7.2 Hz), 3.40 (dq, 1H, H-5 ', J _d = 9.3 Hz, J _q = 6.3 Hz), 3.34 (s, 3H, CH 3 O), 2.74 (t, 1H, H-1, J = 4.2Hz).

Medziprodukt 9Intermediate 9

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ap,7β, 7aa,83β)]-8a-[(2,6-dideoxy-3,4-0-tiokarbonyl^-D-alopyranosyloxy) metyl ] -4-f or my 1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7-metyl3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4αp, 7β, 7aa, 83β)] - 8α - [(2,6-dideoxy-3,4-O-thiocarbonyl-4-D-alopyranosyloxy) methyl] -4 -from my 1-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a- (1H) ) carboxylate

Zmes 0,5 g medziproduktu 1, ktorého príprava je opísaná vyššie a 0,270 g tiokarbonyldiimidazolu v 10 ml tetrahydrofuránu bola zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom po dobu 6 hodín. Potom bolo rozpúšťadlo za vákua odparené a získaný žltý zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) ako elučného činidla.A mixture of 0.5 g of intermediate 1 as described above and 0.270 g of thiocarbonyldiimidazole in 10 ml of tetrahydrofuran was heated at reflux for 6 hours. The solvent was evaporated in vacuo and the resulting yellow residue was flash chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (3: 1) as eluent.

Bolo získaných 0,263 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.0.263 g of the title compound was obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,71 (s, 1H, CHO), 7,44-7,26 (m, 10H, 2xPh), 6,97 (s, 1H, CO2CHPh2), 6,06 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,93 (dd, 1H, H-3’, J=3,9 and 7,2 Hz), 4,63 (d, 1 H, H-ľ, J=2,1 Hz), 4,61 (dd, 1H, H-4', J=7,2 a 9,3 Hz), 4,12 (m, 1H, H-2'), 4(08 (d, 1H, 8aCH2, JAB⁼⁹r³ Hz), ³.⁷⁴ (^d· ^1H. 8aCH2,δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.71 (s, 1H, CHO), 7.44-7.26 (m, 10H, 2xPh), 6.97 (s, 1H, CO2CHPh2), 6.06 (dd 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 4.93 (dd, 1H, H-3 ', J = 3.9 and 7.2 Hz), 4.63 (d, 1 H, H-1 ', J = 2.1 Hz), 4.61 (dd, 1H, H-4', J = 7.2 and 9.3 Hz), 4.12 (m, 1H, H- 2 '), 4 (08 (d, 1 H, 8aCH2, JAB ^{= 9} Hz ³ r), ^{3. 74 (1 H d} ·. 8aCH2,

Jab=⁹,3 Hz), 3,64 (m, 1 H, H-5'), 2,69 (m, 1 H, H-1). .Jab = ^9.3 Hz), 3.64 (m, 1H, H-5 '), 2.69 (m, 1H, H-1). .

Medziprodukt 10Intermediate 10

Príprava difenylmetyleste.ru kyseliny [ ÍR-(Ια , 3ap , 4β , 4ap , 7β , 7aa,8aP)]-8a-[(2,6-dideoxy-p-D-alopyranosyloxy)metyl]-4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ethyl ester [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(2,6-dideoxy-β-D-allopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5, 6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) 1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 1,5 g medziproduktu 7, ktorého príprava je opísaná vyššie, v zmesi 30 ml tetrahydrofuránu a 15 ml metanolu, bolo pridaných po kvapkách pri teplote miestnosti a za intenzívneho miešania 15 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej . Hneď ako bola reakcia skončená (kontrola pomocou chromatografie na tenkej vrstve), bolo k zmesi pridaných 50 ml nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a 200 ml etylacetátu a zmes bola vytrepaná a vodná a organická fáza boli oddelené. Potom bola organická fáza premytá 2 x 100 ml vody a vysušená síranom horečnatým.To a solution of 1.5 g of intermediate 7 described above in a mixture of 30 ml of tetrahydrofuran and 15 ml of methanol was added dropwise at room temperature and with vigorous stirring 15 ml of a 1 M hydrochloric acid solution. Once the reaction was complete (thin layer chromatography control), 50 mL of saturated aqueous sodium bicarbonate solution and 200 mL of ethyl acetate were added to the mixture, and the mixture was shaken and the aqueous and organic phases were separated. The organic phase was then washed with 2 x 100 ml of water and dried over magnesium sulfate.

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok spracovaný rýchlou •chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (5:1) a (2:1) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the residue was flash chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (5: 1) and (2: 1) as eluent.

Bolo získaných 1,1 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.1.1 g of the title compound were obtained as a white foam.

δ (*>H, CDCI₃): 9,73 (s, 1 H, CHO), 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,.99 (s, 1H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,64 (dd, 1H, H-ľ, J=2,1 a 9,6 Hz), 4,11 (m, 1 H, H-3'), 4,06 (d, 1H, 8aCH₂, ÍAB⁼⁹ _f ³ Hz), ³.⁷⁰ (^m· ^2Η· Π’⁵' ^{a 8aCH}2)· 3,34 (m, 1H, H-4'), 2,75 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz).δ (*> H, CDCl ₃ ): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 10H, 2Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6.05 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.64 (dd, 1H, H-1 ', J = 2.1 and 9.6 Hz), 4 , 11 (m, 1 H, H-3 '), 4.06 (d, 1 H, 8aCHa _{2, f} IAB ^{= 9 3} Hz); ^{3. 70} ( ^m · ^2Η · Π ' ⁵ ' ^{and 8aCH} 2) · 3.34 (m, 1H, H-4 '), 2.75 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz).

Medziprodukt 11Intermediate 11

Príprava difenyImetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3aP,4β,4aP,7β, 7aa,8ap)]-8a-[(2,6-dideoxy-3,4-0-tiokarbonyl-P-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of DiphenylImethyl ester [1R- (Ια, 3αP, 4β, 4αP, 7β, 7αa, 8αp)] - 8α - [(2,6-dideoxy-3,4-O-thiocarbonyl-PD-alopyranosyloxy) methyl] -4- formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Suspenzia 160 mg medziproduktu 10, ktorého príprava jeA suspension of 160 mg of intermediate 10, the preparation of which is

opísaná vyššie a 124,5 mg dibutylstaniumoxidu v 15 ml vysušeného toluénu bola zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom v banke vybavenej Dean-Starkovým kondenzátorom po dobu 2 hodín a potom bola ponechaná stáť v kľude v atmosfére dusíka pri teplote miestnosti. K takto pripravenému roztoku bolo pridaných 69 μΐ fenylchlórtioformiátu v 5 ml vysušeného toluénu.described above and 124.5 mg of dibutyltin oxide in 15 ml of dried toluene were heated at reflux in a flask equipped with a Dean-Stark condenser for 2 hours and then allowed to stand under a nitrogen atmosphere at room temperature. To this solution was added 69 μΐ of phenylchlorothioformate in 5 ml of dried toluene.

Kontrolou chromatografie na tenkej vrstve bolo dokázané, že reakcia bolo dokončená po 6 hodinách. Po odstránení rozpúšťadla za zníženého tlaku bola surová zmes spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (20:1) a (15:1) ako elučného činidla.TLC analysis showed that the reaction was complete after 6 hours. After removal of the solvent under reduced pressure, the crude mixture was flash chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (20: 1) and (15: 1) as eluent.

Bolo získaných 150 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bezfarebnej olej ovitej látky.150 mg of the title compound were obtained as a colorless oil.

δ (¹H. CDCI₃): 9,72 (s, 1H, CHO), 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,97 (s, 1H, CHPh₂), 6.05 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,10 (m, 1H, H-3'), 4,61 (dd, 1 H, H-ľ, J=2.4 a 8,4 Hz), 4,44 (dd, 1H, H-4', J=6,6a 9,0 Hz), 4,04 a 3,67 (2d, 2H,δ ⁽¹ H _CDCl3): 9.72 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.97 (s, 1H, _CHPh2), 6.5 (d 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5.10 (m, 1H, H-3 '), 4.61 (dd, 1H, H-1', J = 2.4) and 8.4 Hz), 4.44 (dd, 1H, H-4 ', J = 6.6 and 9.0 Hz), 4.04 and 3.67 (2d, 2H,

8aCH₂, JaB=9 Hz), 3,62 (m, 1H, H-5'), 2,70 (t, 1H, H-1, J=2,0 Hz).8aCH ₂ , J a = 9 Hz), 3.62 (m, 1H, H-5 '), 2.70 (t, 1H, H-1, J = 2.0 Hz).

Medziprodukt 12Intermediate 12

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4a0,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(4-0-alyl-2,6-dideoxy^-D-alopyranosyloxy)metyl ] - 4- f orinyl-4,4a ,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl - 3- (1metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4α0,7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(4-O-allyl-2,6-dideoxy-4-D-alopyranosyloxy) methyl] -4-f orinyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

Suspenzia 400 mg medziproduktu 10, ktorého príprava je opísaná vyššie a 240 mg tributylstaniumoxidu v 50 ml vysušeného toluénu, bola zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom v banke vybavenej Dean-Starkovým kondenzátorom a potom bola ponechaná stáť v pokoji v atmosfére dusíka pri teplote miestnosti (bolo odstráneno približne 10 ml azeotropickej zmesi). Potom bolo k reakčnej zmesi pridaných postupne 71 μΐ alylbromídu a 0,95 ml tetrametylamóniumfluoridu (1 M roztok v tetrahydrofuráne) a vzniknutá reakčná zmes bola zahrievaná pri teplote 50 °C po dobu 24 hodín.A suspension of 400 mg of intermediate 10 described above and 240 mg of tributyltin oxide in 50 ml of dried toluene was heated to reflux in a flask equipped with a Dean-Stark condenser and then allowed to stand under a nitrogen atmosphere at room temperature. approximately 10 ml of azeotropic mixture was removed). 71 µL of allyl bromide and 0.95 ml of tetramethylammonium fluoride (1 M solution in tetrahydrofuran) were then added sequentially and the resulting mixture was heated at 50 ° C for 24 hours.

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi acetón-hexán (1:20) a (1:15) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the residue was flash chromatographed on silica gel using acetone-hexane (1:20) and (1:15) as eluent.

Bolo získaných 300 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bezfarebnej olej ovitej látky.300 mg of the title compound were obtained as a colorless oil.

δ (¹ H. CDCI3): 9,72 (s, 1H, CHO), 7,52-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,89 (m, 1 H, CH=CH₂), 5,30-5,20 (m, 2H, CH=CH2), 4,64 (dd, 1H, H-ľ, J=2,1 a 9,6 Hz), 4,19 (m, 1H, H-3'), 4,15-3,95 (m, 3H, CH₂CH=CH₂+8aCH₂), 3,80-3,60 (m, 2H, H-5'+8aCH₂), 3,06 (dd, 1H, H-4', J-3,3 a 9,3 Hz), 2,75 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz), 2,38 (bd, 1 H, OH).δ ⁽¹ H CDCl3): 9.72 (s, 1H, CHO), 7.52 to 7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, H, _CHPh2), 6.05 ( dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5.89 (m, 1H, CH = _CH2), 5.30 to 5.20 (m, 2H, CH = CH 2 4.64 (dd, 1H, H-1 ', J = 2.1 and 9.6 Hz), 4.19 (m, 1H, H-3'), 4.15-3.95 (m, 3H, CH ₂ CH = CH ₂ + 8aCH ₂ ), 3.80-3.60 (m, 2H, H-5 '+ 8aCH ₂ ), 3.06 (dd, 1H, H-4', J-3) , 3 and 9.3 Hz), 2.75 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.38 (bd, 1H, OH).

Medziprodukt 13Intermediate 13

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(2,6-dideoxy-4-Ο-(2-mety1-2-propenyl)-β-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(2,6-dideoxy-4-Ο- (2-methyl-2-propenyl) -β-D) -alopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Suspenzia 500 mg medziproduktu 10, ktorého príprava je opísaná vyššie a 300 mg tributylstaniumoxidu v 50 ml vysušeného toluénu, bola zohrievaná za refluxu pod spätným chladičom v banke vybavenej Dean-Stávkovým kondenzátorom a potom bola ponechaná v pokoji v atmosfére dusíka pri teplote miestnosti (bolo odstránených približne 10 ml azeotropnej zmesi). Potom bolo k reakčnej zmesi pridaných postupne 202 μΐ 3-bróm-2-metylpropénu a 0,90 ml tetrabutylamóniumfluoridu (IM roztok v tetrahydrofuráne) a vzniknutá reakčná zmes bola zahrievaná pri teplote 50 “C po dobu 24 hodín.A suspension of 500 mg of intermediate 10 described above and 300 mg of tributyltin oxide in 50 ml of dried toluene was heated to reflux in a flask equipped with a Dean-Batch condenser and then left to stand in a nitrogen atmosphere at room temperature (removed). 10 ml of azeotrope). Then 202 µL of 3-bromo-2-methylpropene and 0.90 ml of tetrabutylammonium fluoride (1M solution in tetrahydrofuran) were added sequentially and the resulting mixture was heated at 50 ° C for 24 hours.

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi acetón-hexán (1:20) a (1:15) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the residue was flash chromatographed on silica gel using acetone-hexane (1:20) and (1:15) as eluent.

Bolo získaných 340 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bezfarebnej olej ovitej látky.340 mg of the title compound were obtained as a colorless oil.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,50-7,20 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s,1 H, CHPh2), •6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,96 a 4,91 (2m, 2H, =CH2), 4,65 (dd, 1H, H-ľ, J=1,8 a ‘9,6 Hz), 4,20 (m, 1H, H-3'), 4,05 a 3,68 (2d, 2H, 8aCH2. JäB⁼⁹<3 Hz), 4,00 a 3,87 (2d, 2H, OCH2, JaB⁼¹² Hz), ³.⁷⁵ (^m· ^1H. H-5’),δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.50-7.20 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh2), 6.05 • (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.96 and 4.91 (2m, 2H, = CH2), 4.65 (dd, 1H, H-1 ', J) = 1.8 and 9.6 Hz), 4.20 (m, 1H, H-3 &apos;), 4.05 and 3.68 (2d, 2H, 8aCH2, J and B ^{= 9} &lt; 3 Hz), 00 and 3.87 (2d, 2H, OCH 2, J a ^{= 12} Hz), ³ . ⁷⁵ ( ^{m, 1H} , H-5 '),

3.06 (dd, 1 H, H-4', J=3 a 9,6 Hz), 2,75 (t, 1 H. H-1, J=3,6 Hz), 2,37 (bd, 1H, OH), 1,76 (bs,3H, CH_?C=CH?).3.06 (dd, 1H, H-4 ', J = 3 and 9.6 Hz), 2.75 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz), 2.37 (bd, 1H) , OH), 1.76 (bs, 3H, _CH? C? CH?).

Medziprodukt 14Intermediate 14

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8aP)]- 8a-[[1S,7R,9R]-2,5,8 -1rioxa-3,7-dimetyl-cisbicyklof 4.4.0]-dek-9-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8, 8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] -2,5,8-1-oxa-3,7-dimethyl-cis-bicycophof 4.4 .0] -Dec-9-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4 methane-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 200 mg medziproduktu 12, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 10 ml bezvodého tetrahydrofuránu, bolo pridaných v atmosfére dusíka pri teplote miestnosti a po malých dávkach 213 mg tuhej formy trifluóracetátu ortuťnatého. Potom, čo bola vzniknutá reakčná zmes ponechaná v pokoji stáť pri teplote miestnosti po dobu 30 minút, bolo k nej za intenzívneho miešania pridaných 135 μΐ tributylstaniumhydridu. Po 30 minútach bolo pridaných k reakčnej zmesi 50 ml etylacetátu a vzniknutá suspenzia bola prefiltrovaná cez celit a bol získaný bezfarebný roztok, ktorý bol premytý 3 x 100 ml vody a potom bol vysušený síranom horečnatým.To a solution of 200 mg of intermediate 12 described above in 10 ml of anhydrous tetrahydrofuran was added under a nitrogen atmosphere at room temperature and in small portions 213 mg of solid form of mercuric trifluoroacetate. After the resulting reaction mixture was allowed to stand at room temperature for 30 minutes, 135 μΐ of tributyltin hydride was added with vigorous stirring. After 30 minutes, 50 mL of ethyl acetate was added to the reaction mixture, and the resulting suspension was filtered through celite, giving a colorless solution, which was washed with 3 x 100 mL of water and then dried over magnesium sulfate.

Po odstránení rozpúšťadla bola zvyšná látka olej ovitej konzistencie spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi acetón-hexán (1:15) ako elučného činidla. Bolo získaných 120 mg žiadanej, va nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme zmesί epimérov 1:1 na C-3’.After removal of the solvent, the residual oily consistency was flash chromatographed on silica gel using acetone-hexane (1:15) as eluent. 120 mg of the title compound were obtained as a 1: 1 mixture of epimers on C-3 '.

Ô (¹ H, CDCI3) zahrnuje : 4,73 (dd, 1 H, H-9', J=3,0 ai 6,3 Hz), 4,62 (dd, 1H, H- 9', J=2,1 a 9_r9 Hz).Ô ( ¹ H, CDCl 3) includes: 4.73 (dd, 1H, H-9 ', J = 3.0 and 6.3 Hz), 4.62 (dd, 1H, H-9', J = 2.1 and 9 ₍ 9 Hz).

Medziprodukt 15Intermediate 15

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[[1S,7R,9S]-2,5,8-trioxa-3,3,7-trimetyl-cisbicyklo[4.4.0]-dek-9-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8, 8a-oktahyd.ro-7-metyl-3- (1-metyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [[1S, 7R, 9S] -2,5,8-trioxa-3,3,7-trimethyl- cisbicyclo [4.4.0] dec-9-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-Methane-s-indacene-3α (1 H) -carboxylic acid

K roztoku 325 mg medzíproduktu 13, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 10 ml bezvodého tetrahydrofuránu, bolo pridaných v atmosfére dusíka pri teplote miestnosti a po malých dávkach 303 mg tuhej formy trifluóracetátu ortuťnatého. Potom, čo bola reakčná zmes ponechaná stáť v pokoji pri teplote miestnosti po dobu 30 minút, bolo k nej za intenzívneho miešania pridaných 192 μΐ tributylstaniumhydridu. Po 30 minútach bolo k reakčnej zmesi pridaných 50 ml etylacetátu a vzniknutá suspenzia bola prefiltrovaná cez celit a bol získaný bezfarebný roztok, ktorý bol premytý 3 x 100 ml vody a potom bol vysušený síranom horečnatým.To a solution of 325 mg of intermediate 13 described above in 10 ml of anhydrous tetrahydrofuran was added under nitrogen atmosphere at room temperature and in small portions of 303 mg of solid form of mercuric trifluoroacetate. After the reaction mixture was allowed to stand at room temperature for 30 minutes, 192 μΐ of tributyltin hydride was added with vigorous stirring. After 30 minutes, 50 mL of ethyl acetate was added to the reaction mixture, and the resulting suspension was filtered through celite to give a colorless solution, which was washed with 3 x 100 mL of water and then dried over magnesium sulfate.

Po odstránení rozpúšťadla bola zvyšná látka olej ovitej konzistencie spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi acetón-hexán (1:20) a (1:15) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the residual oily consistency was flash chromatographed on silica gel using acetone-hexane (1:20) and (1:15) as eluent.

Bolo získaných 210 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bezfarebnej olej ovitej látky.210 mg of the title compound are obtained as a colorless oil.

δ (¹H, CDCI₃): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,50-7,20 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1 H, CHPh₂), 6,03 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 Hz, J=3,3 Hz), 4,54 (dd, 1 H, H-9', J=2,1 aδ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.50-7.20 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6, 03 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 Hz, J = 3.3 Hz), 4.54 (dd, 1H, H-9 ', J = 2.1 and

9,6 Hz), 4,25 (m, 2H, H-7* a Η-Γ), 4,05 a 3,66 (2d, 2H, 8aCH₂, J_AB=⁹ Hz), 3,41a 3,18 (2d, 2H, OCH₂, J_Ag=11,7 Hz), 3,25 (dd, 1 H, H-6', J=3,3 a 10,29.6 Hz), 4.25 (m, 2H, H-7 * and Η-Γ), 4.05 and 3.66 (2d, 2H, 8aCH ₂ , J _A B = ⁹ Hz), 3.41a 3.18 (2d, 2H, _OCH2, J, _and g = 11.7 Hz), 3.25 (dd, 1H, H-6 ', J = 3.3 and 10.2

Hz), 2,75 (t, 1H, H-1, J=3,3 Hz), 1,25 a 1,16 (2s, 2CH₃).Hz), 2.75 (t, 1 H, H-1, J = 3.3 Hz), 1.25 and 1.16 (2s, 2 CH _3).

Medziprodukt 16Intermediate 16

Príprava difenylmetyleste.ru kyseliny [ ÍR-(la , 3ap , 4β , 4ap , 7β , 7aa,8ηβ)]-8a-[(2,6-dideoxy-4-0-p-metoxybenzyl^-D-alopyranosyloxy) metyl ] - 4-f ormyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7-metyl3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ethyl acid [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [(2,6-dideoxy-4-O-p-methoxybenzyl-4-D-alopyranosyloxy) methyl] 4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a- (1H) ) carboxylate

Suspenzia 500 mg medziproduktu 10, ktorého príprava je opísaná vyššie, s 374 mg tributylstaniumoxidu v 50 ml vysušeného toluénu, bola zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom v banke vybavenej Dean-Starkovým kondenzátorom a potom bola ponechaná stáť v pokoji v atmosfére dusíka pri teplote miestnosti (bolo odstránených približne 10 ml azeotropickej zmesi). Potom bolo k reakčnej zmesi postupne pridaných 135A suspension of 500 mg of intermediate 10, as described above, with 374 mg of tributyltin oxide in 50 ml of dried toluene was heated to reflux in a flask equipped with a Dean-Stark condenser and then allowed to stand at room temperature under a nitrogen atmosphere ( approximately 10 ml of the azeotropic mixture was removed). 135 was then added gradually to the reaction mixture

μΐ p-metoxybenzylchlo.ridu a 1,50 ml tetrabutylamóniumfluoridu (1 M roztok v tetrahydrofuráne) a vzniknutá reakčná zmes bola zahrievaná pri teplote 60 °C po dobu 24 hodín.μΐ of p-methoxybenzyl chloride and 1.50 ml of tetrabutylammonium fluoride (1 M solution in tetrahydrofuran) and the resulting reaction mixture was heated at 60 ° C for 24 hours.

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi acetón-hexán (1:20) a (1:15) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the residue was flash chromatographed on silica gel using acetone-hexane (1:20) and (1:15) as eluent.

Bolo získaných 300 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny , vo forme bezfarebnej Látky olej ovitej konzistencie, δ (¹ H. CDCI3): 9,72 (s, 1H, CHO), 7,5-7,2 (m, 12H, 2Ph a 2Hortho), 6,97 (s,300 mg of the title compound are obtained as a colorless oil of oily consistency, δ ( ¹ H, CDCl 3): 9.72 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 12H, 2Ph and 2Hortho), 6.97 (s,

H, CHPh₂), 6,88 (m, 2H, 2Hmeta), 6,04 (dd, 1H, H-2, J=1,5 Hz, J=3,6 Hz),H, CHPh ₂ ), 6.88 (m, 2H, 2Hmetal), 6.04 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 Hz, J = 3.6 Hz),

4.64 (dd, 1H, H-ľ, J=2,4a 9,9 Hz), 4,55 a 4,50 (2d, 2H, CH₂Ph, J_AB=11,24.64 (dd, 1 H, H ', J = 2.4 A 9.9 Hz), 4.55 and 4.50 (2d, 2H, _CH2 Ph, _JAB = 11.2

Hz), 4,18 (m, 1H, H-3'), 4,04 a 3,66 (2d, 2H, 8aCH₂, J_AB=9 Hz), 3,80 (s, 3H, CH₃O), 3,74 (m, 1Η. Ή-5'), 3,12 (dd, 1H, H-4', J=3_f0 a 9,3 Hz), 2,75 (t, 1H, H-Hz), 4.18 (m, 1H, H-3 '), 4.04 and 3.66 (2d, 2H, 8aCH ₂ , J _AB = 9 Hz), 3.80 (s, 3H, CH ₃ O) ), 3.74 (m, 1H, H-5 '), 3.12 (dd, 1H, H-4', J = 3 _f and 9.3 Hz), 2.75 (t, 1H, H -

I, J=3,9Hz).I, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 17Intermediate 17

Príprava difenylmetyleste.ru kyseliny [ ÍR-(la , 3a3,4β , 4ap , 7β , 7aa,8αβ)]-8a-[(3-0-alyl-2,6-dideoxy-4-0-p-metoxybenzyl^-Dalopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)karboxylovejPreparation of diphenylmethyl esters of acid [1R- (1a, 3a3,4β, 4ap, 7β, 7aa, 8αβ)] - 8a - [(3-O-allyl-2,6-dideoxy-4-O-p-methoxybenzyl) - Dalopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-1methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a - (1H) carboxylic acid

K intenzívne miešanému roztoku medziproduktu 16 (400 mg), ktorého príprava je opísaná vyššie, bolo pridaných v atmosfére dusíka, pri teplote 0 °C a v malých dávkach 48 mg hydridu sodného. Po skončení tejto operácie bola reakčná zmes ponechaná v pokoji pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny a potom bolo k nej pridaných 191 μΐ alylbromidu.To a vigorously stirred solution of intermediate 16 (400 mg), the preparation of which was described above, was added 48 mg of sodium hydride under nitrogen atmosphere at 0 ° C and in small portions. At the end of this operation, the reaction mixture was allowed to stand at room temperature for 1 hour, after which 191 μL of allyl bromide was added.

Po 24 hodinách bola reakčná zmes prerušená pridaním 100 ml 1 M vodného roztoku chloridu amónneho a reakčná zmes bola potom vytrepaná s 200 ml etylacetátu.After 24 hours, the reaction mixture was quenched by addition of 100 mL of 1 M aqueous ammonium chloride solution, and the reaction mixture was then extracted with 200 mL of ethyl acetate.

Oddelená organická vrstva bola premytá 1 x 100 ml vody, vysušená síranom horečnatým a po zahustení do sucha bola získaná látka olej ovitej konzistencie, ktorá bola spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (1:20) a (1:15) ako elučného činidla.The separated organic layer was washed with 1 x 100 mL of water, dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness to give an oily consistency which was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (1:20) and (1:15). as eluent.

- 73 Bolo získaných 400 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bezfarebnej látky olej ovitej konzistencie, δ (¹ H, CDCI3): 9,74 (s, 1 H, CHO), 7,5-7,2 (m, 12H, 2Ph a 2Hortho), 6,98 (s, H, CHPh2), 6,86 (m, 2H, 2Hmeta), 6,04 (dd, 1 H, H2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,95 (m, 1H, CH=CH2), 5,28 a 5,15 (2m, 2H, CH=CH2), 4,60 (m, 2H, H-Γ a CH2Ph), 4,42 (d, 1H; CH2Ph, JAb=11,4 Hz), 4,13 (m, 2H, CH2-CH=), 4,02 a. 3,68 (2d, 2H, 8aČH2, JaB⁼⁹i⁶ Hz), ³(⁸⁹ (^m. 2H, H-5' a H-3'), 3,80 (s, 3H, CH3O), 3,09 (dd, 1 H, H-4’, J=3,0 a 9,3 Hz), 2,73 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz).- 73 to afford 400 mg of the title compound as a colorless oily consistency, δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.74 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m (12H, 2Ph and 2Hortho), 6.98 (s, H, CHPh2), 6.86 (m, 2H, 2Hmetal), 6.04 (dd, 1H, H2, J = 1.2 and 3.3) Hz), 5.95 (m, 1H, CH = CH 2), 5.28 and 5.15 (2m, 2H, CH = CH 2), 4.60 (m, 2H, H-Γ and CH 2 Ph), 4, 42 (d, 1H; CH 2 Ph, JAb = 11.4 Hz), 4.13 (m, 2H, CH 2 -CH =), 4.02 a. 3.68 (2d, 2H, 8aCH2, JaB ^{= 9} and ⁶ Hz), ³ ( ⁸⁹ ( ^m , 2H, H-5 ' and H-3 &apos;)), 3.80 (s, 3H, CH3 O), 3, 09 (dd, 1H, H-4 ', J = 3.0 and 9.3 Hz), 2.73 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 18Intermediate 18

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ηβ,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(3-0-alyl-2,6-dideoxy^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3α, 4α, 4α, 4αβ, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(3-O-allyl-2,6-dideoxy-4-D-alopyranosyloxy) methyl] -4-formyl 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 2,30 g medziproduktu 17, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 200 ml dichlórmetánu a miešanému s 20 ml vody, bolo pridaných 0,79 g 2,3-dichlór-5,6-dikyánchinónu. Po celonočnom miešaní pri teplote miestnosti bola reakčná zmes prefiltrovaná cez vrstvu celitu za použitia väčšieho množstva dichlórmetánu.To a solution of 2.30 g of intermediate 17 described above in 200 ml of dichloromethane and stirred with 20 ml of water was added 0.79 g of 2,3-dichloro-5,6-dicyanquinone. After stirring overnight at room temperature, the reaction mixture was filtered through a pad of celite using more dichloromethane.

Dichlórmetánová fáza bola premytá najskôr s vodným roztokom hýdrogénuhličitanu sodného a potom s roztokom chloridu sodného, potom bola vysušená síranom sodným bezvodým, prefiltrovaná a zahustená do sucha.The dichloromethane phase was washed first with aqueous sodium hydrogen carbonate solution and then with brine, then dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated to dryness.

Získaný zvyšok bol chromatografovaný na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metano’L (49:1) ako elučného činidla .The residue was chromatographed on silica gel using dichloromethane-methanol (49: 1) as eluent.

Bolo získaných 1,95 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.1.95 g of the title compound are obtained as a white foam.

δ 0Η, CDCI3): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,45-7,24 (m, 10H, Ph₂), 6_f99 (s, 1H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 5,95 (m, 1 H, CH=CH₂), 5_r26 (m, 2H, CH=CH2), 4,53 (dd, 1H, H-ľ, J=1,8 a 9,6 Hz), 4,19 a 3,96 (2m, 2H, CH₂CH=CH₂), 4,03 a 3,69 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 3,80 (q, 1H, H-3', J=3,3 Hz), 3,60 (dq, 1H, H-5’, J=9,6 a 6,3 Hz), 3,23 (ddd, 1H, H-4', J= 10,8,δ 0Η, CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.45-7.24 (m, 10H, Ph _2), 6 _F 99 (s, 1H, CHPh _2), 6.05 (dd , 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 5.95 (m, 1H, CH = _CH2), 5 _r 26 (m, 2H, CH = CH 2), 4.53 (dd, 1H, H-1 ', J = 1.8 and 9.6 Hz), 4.19 and 3.96 (2m, 2H, CH ₂ CH = CH ₂ ), 4.03 and 3.69 (2d , 2H, _8a-CH2, J = 9.3 Hz), 3.80 (q, 1 H, H-3 ', J = 3.3 Hz), 3.60 (dq, 1H, H-5', J = 9.6 and 6.3 Hz), 3.23 (ddd, 1H, H-4 ', J = 10.8,

9,6 a 3,3 Hz), 2,74 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz), 2_f25 (d, 1H, OH, J=10,8 Hz).9.6 and 3.3 Hz), 2.74 (t, 1 H, H-1, J = 3.6 Hz), _f 2 25 (d, 1H, OH, J = 10.8 Hz).

Medziprodukt 19Intermediate 19

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3aP,4β,4ap,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(3-0-alyl-2,6-dideoxy-4-0-(metyÍrio)-tiokarbonyl^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1a, 3aP, 4β, 4ap, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [(3-O-allyl-2,6-dideoxy-4-O- (methyl) thiocarbonyl-4 -) - Dallopyranosyloxy) methyl] -4-formy1-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoktahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Ku chladenému roztoku medziproduktu 18 (1,9 g), ktorého príprava je opísaná vyššie, v 50 ml bezvodého tetrahydrofuránu, bolo pridaných v atmosfére dusíka po malých dávkach 240 mg hydridu sodného a katalytické množstvo imidazolu. Po odstavení ľadom chladeného kúpeľa bola reakčná zmes miešaná po dobu 1 hodiny pri teplote miestnosti. Potom bolo k zmesi pridaných postupne 1,5 ml sulfidu uhličitého a 1,25 ml metyl j odídu.To a cooled solution of intermediate 18 (1.9 g), as described above, in 50 ml of anhydrous tetrahydrofuran, 240 mg of sodium hydride and a catalytic amount of imidazole were added in small portions under nitrogen. After the ice-bath was removed, the reaction mixture was stirred for 1 hour at room temperature. Then 1.5 ml of carbon disulfide and 1.25 ml of methyl iodide were added successively.

Hneď ako je reakcia skončená (kontrola pomocou chromatografie na tenkej vrstve), bola surová zmes naliata do 500 ml etylacetátu a prerušená pridaním 250 ml 0,1 M vodného roztoku chloridu amónneho.Once the reaction was complete (TLC analysis), the crude mixture was poured into 500 mL of ethyl acetate and quenched by the addition of 250 mL of 0.1 M aqueous ammonium chloride solution.

Oddelená organická fáza bola potom premytá 1 x 500 ml soľanky a 1 x 500 inl vody, vysušená s bezvodým síranom sodným a bola zahustená do sucha.The separated organic phase was then washed with 1 x 500 ml brine and 1 x 500 ml water, dried with anhydrous sodium sulfate and concentrated to dryness.

Zvyšok olej ovitej konzistencie bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexándichlórmetán (3:5) ako elučného činidla.The residual oily consistency was flash chromatographed on silica gel using hexane: dichloromethane (3: 5) as eluent.

Bolo získaných 1,85 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.1.85 g of the title compound are obtained as a white foam.

δ (¹H CDCI₃): 9,74 (s, 1H, CHO), 7,45-7,24 (m, 10H, Ph₂), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 ai 3,3 Hz), 5,88 (m, 1H, CH=CH₂), 5,41 (dd, 1H, H-4', J=2,7 a 9,6 Hz), 5,22 (m, 2H, CH^l·^), 4,70 (dd, 1 H, H-Γ, J=2,1 a 9,3 Hz), 4,20-4,02 (m, 5H, H-5', CH₂-CH=CH₂, H-3' a 8a-CH₂ (1H)), 3,71 (d, 1H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 2,75 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,58 (s, 3H, SCH3).δ ⁽¹ H _CDCl3): 9.74 (s, 1H, CHO), 7.45-7.24 (m, 10H, Ph _2), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6.06 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 i 3.3 Hz), 5.88 (m, 1 H, CH = _CH2), 5.41 (dd, 1 H, H-4 ', J = 2.7 and 9.6 Hz), 5.22 (m, 2H, CH 2 H +), 4.70 (dd, 1H, H-Γ, J = 2.1 and 9.3 Hz) 4.20-4.02 (m, 5H, H-5 ', CH ₂ -CH = CH ₂ , H-3' and 8a-CH ₂ (1H)), 3.71 (d, 1H, 8a-). CH ₂ , J = 9.3 Hz), 2.75 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.58 (s, 3H, SCH 3).

Medziprodukt 20Intermediate 20

a) Príprava.difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap, 7β,7aa,8aβ)]-8a-[[lS,4S,6R,8R]-2,7-dioxa-4,6-dimetyl-cisbicyklo[3.4.0]-non-8-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej aa) Preparation of [1R- (1α, 3α, 4β, 4β, 4α, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [[1S, 4S, 6R, 8R] -2,7-dioxa-4,6-dimethyl] -cisbicyclo [3.4.0] non-8-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid a

b) difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3aβ,4β,43β,7β,7aa, 8ηβ)]-8a-[[1S,4R,6R,8R]-2,7-dioxa-4,6-dimetyl-cisbicyklo[3.4.0]-non-8-yl-oxymetyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej(b) Diphenylmethyl [1R- (1α, 3αβ, 4β, 43β, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 4R, 6R, 8R] -2,7-dioxa-4,6-dimethyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-8-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1 , 4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Roztok 1,8 g medziproduktu 19, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 250 ml vysušeného toluénu, bol počas 1 hodiny odplynený v prúde argónu a potom bol zahriaty za refluxu pod spätným chladičom. Potom bolo počas zahrievania v priebehu približne 2 hodín pridané v prúde argónu pomocou injekčnej striekačky katalytické množstvo azobis(izobutyronitrilu) a 0,95 ml tributylstaniumhydridu, rozpusteného v 50 ml vysušeného toluénu.A solution of 1.8 g of intermediate 19 described above in 250 ml of dried toluene was degassed in a stream of argon for 1 hour and then heated to reflux. Then, a catalytic amount of azobis (isobutyronitrile) and 0.95 ml of tributyltin hydride dissolved in 50 ml of dried toluene were added in an argon stream over a period of about 2 hours with heating.

Hneď ako je reakcia skončená, reakčná zmes bola ďalej zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom ešte po dobu 1 hodiny a potom bola ochladená, zahustená do sucha a spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia hexánu a potom zmesi hexán-etylacetát (9:1) ako elučných činidiel.Once the reaction was complete, the reaction mixture was further heated at reflux for 1 hour and then cooled, concentrated to dryness and flash chromatographed on silica gel using hexane followed by hexane-ethyl acetate (9: 1) as eluents.

Bolo získaných 680 mg medziproduktu 20 (a) vo forme bielej peny, Rf = 0,31, hexán-etylacetát (4:1) a ďalej bolo získaných 180 mg medziproduktu 20 (b) vo forme bielej tuhej látky, Rf = 0,25, hexán-etylacetát (4:1).680 mg of intermediate 20 (a) was obtained as a white foam, Rf = 0.31, hexane-ethyl acetate (4: 1), and 180 mg of intermediate 20 (b) was obtained as a white solid, Rf = 0.25 hexane-ethyl acetate (4: 1).

(a) δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,45-7,28 (m, 10H, Ph2), 6,99 (s, 1H, CHPh2), 6,05 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,46 (dd, 1 H, H-8', J=2,4 a 9,6 Hz), 4,14-4,05 (m, 3H, 8a-CH2 (1H), H-ľ a CH2-3' (1H)), 3,67 (d, 1H. 8aCH21 J=9,3 Hz), 3,36-3,25 (m, 2H, H-6' a CH2-3' (1 H)), 2.77 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz), 1,05 (d, 3H, 4^,-CH31 J=6,9 Hz).(a) δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.45-7.28 (m, 10H, Ph 2), 6.99 (s, 1H, CHPh2), 6, Δ (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.46 (dd, 1H, H-8 ', J = 2.4 and 9.6 Hz), 4 14-4.05 (m, 3H, 8a-CH2 (1H), H-1 'and CH2-3' (1H)), 3.67 (d, 1H, 8aCH21 J = 9.3 Hz), 3, 36-3.25 (m, 2H, H-6 'and CH2-3' (1H)), 2.77 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 1.05 (d, 3H, 4 ^, -CH 3 J = 6.9 Hz).

(b) δ (¹H, CDCI3): 9,72 (s, 1 H, CHO), 7,45-7,24 (m, 10H, Ph₂), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,50 a 3,6 Hz), 4,42 (dd, 1 H, H-8', J=2,1 a(b) δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.72 (s, 1H, CHO), 7.45-7.24 (m, 10H, Ph _2), 6.99 (s, 1H, CHPh ₂₎ 6.05 (dd, 1H, H-2, J = 1.50 and 3.6 Hz), 4.42 (dd, 1H, H-8 ', J = 2.1 and

9,6 Hz), 4,20 (m, 1H, H-ľ), 4,07 a 3,67 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 3,97 (t, 1H CH₂-3', J=8,4 Hz),3,54 (m, 1H, H-6'), 3,46 (dd, 1H, CH₂-3', J=10,5 Hz), 2,77 (t, 1 H. H-1, J=3,9 Hz), 2,53 (m, 1H, H-4'), 1,02 (d, 3H, 6-CH3).9.6 Hz), 4.20 (m, 1 H, H-I '), 4.07 and 3.67 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.3 Hz), 3.97 (t, 1 H _CH2 -3 ', J = 8.4 Hz), 3.54 (m, 1 H, H-6'), 3.46 (dd, 1H, _CH2 -3 ', J = 10.5 Hz) 2.77 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.53 (m, 1H, H-4 &apos;), 1.02 (d, 3H, 6-CH3).

Medziprodukt 21Intermediate 21

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8ηβ)]- 8a-[(4-0-alyl-2,6-dideoxy-3-0-(metyltio)-tiokarboηγΙ-β-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahyd.ro-7-metyl-3- (l-metyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [(4-O-allyl-2,6-dideoxy-3-O- (methylthio) thiocarbonyl-β) -D-Allopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoctahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanes-s- indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 380 mg medziproduktu 12, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 10 ml bezvodého tetrahydrofuránu, bolo pridaných v atmosfére dusíka, pri teplote 0 °C a po malých dávkach 48 mg hydridu sodného a katalytické množstvo imidazolu. Po skončení tejto operácie bol ľadom chladený kúpeľ odstavený a reakčná zmes bola ponechaná pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny v pokoji. Potom bol postupne pridaný sulfid uhličitý (300 μΐ) a metyljodid (250 μΐ). Po 4 hodinách bola reakčná zmes naliata do 100 ml etylacetátu a reakcia bola prerušená pridaním 50 ml 1 M vodného roztoku chloridu amónneho.To a solution of 380 mg of intermediate 12 described above in 10 ml of anhydrous tetrahydrofuran was added under nitrogen atmosphere at 0 ° C and in small portions 48 mg of sodium hydride and a catalytic amount of imidazole. Upon completion of the operation, the ice-cooled bath was removed and the reaction mixture was allowed to stand at room temperature for 1 hour. Carbon disulfide (300 μΐ) and methyl iodide (250 μΐ) were then added sequentially. After 4 hours, the reaction mixture was poured into 100 mL of ethyl acetate and quenched with 50 mL of 1 M aqueous ammonium chloride solution.

Oddelená organická fáza bola potom premytá 1 x 100 ml soľanky a 1 x 100 ml vody, vysušená síranom horečnatým a následne bola vysušená do sucha.The separated organic phase was then washed with 1 x 100 ml brine and 1 x 100 ml water, dried with magnesium sulfate and then dried to dryness.

Získaná žltá látka olej ovitej konzistencie bola spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (1:25) a (1:20) ako elučného činidla.The obtained yellow oil of oily consistency was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (1:25) and (1:20) as eluent.

Bolo získaných 350 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.350 mg of the title compound are obtained as a white foam.

δ (1 H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,50-7,20 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, H, CHPh₂), 6,24 (m, 1 H, H-3'), 6,05 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,85 (m, 1 H, CH=CH₂), 5,30-5,20 (m, 2H, CH=CH₂), 4,56 (dd, 1H, H-ť, J=1,8 a 9,3 Hz), 4,15-3,75 (m, 4H, CH2CH=CH₂+8aCH₂+H-5'), 3.69 (d, 1 H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,21 (dd,δ (1H, CDCl 3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.50-7.20 (m, 10H, 2Ph), 6.98 (s, H, CHPh ₂ ), 6.24 ( m, 1H, H-3 '), 6.05 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5.85 (m, 1H, CH = CH ₂ ) , 5.30 to 5.20 (m, 2H, CH = _CH2), 4.56 (dd, 1 H, H-d, J = 1.8, 9.3 Hz), 4.15 to 3.75 (m, 4H, CH ₂ CH = CH ₂ + 8aCH ₂ + H-5 '), 3.69 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.3 Hz), 3.21 (dd,

Η, Η-4’, J=3,3 a 9,3 Hz), 2,72 (t, 1 H, H-1, J=3,89 Hz), 2,59 (s, 3H, SCH3).Δ, Η-4 ', J = 3.3 and 9.3 Hz), 2.72 (t, 1H, H-1, J = 3.89 Hz), 2.59 (s, 3H, SCH3) .

Medziprodukt 22Intermediate 22

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2,6-dideoxy-3-0-(metyltio)-tiokarbonyl-4-0(2-metyl-2-propenyl)^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4, 4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)-1,4metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [(2,6-dideoxy-3-O- (methylthio) -thiocarbonyl-4-0 (2-methyl) -2-propenyl-4-D-alopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1, 4metán-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Ku chladenému roztoku 700 mg medziproduktu 13, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 30 ml bezvodého tetrahydrofuránu, bolo pridaných v atmosfére dusíka po malých dávkach 85 mg hydridu sodného a katalytické množstvo imidazolu. Po odstavení ľadom chladeného kúpeľa bola reakčná zmes miešaná pri teplote miestnosti pomocou magnetického miešadla po dobu 1 hodiny. Potom bolo k reakčnej zmesi postupne pridaných 0,54 ml sulfidu uhličitého a 0,45 metyljodídu.To a cooled solution of 700 mg of intermediate 13, prepared as described above, in 30 ml of anhydrous tetrahydrofuran, 85 mg of sodium hydride and a catalytic amount of imidazole were added in small portions under nitrogen. After the ice-bath was removed, the reaction mixture was stirred at room temperature with a magnetic stirrer for 1 hour. Then, 0.54 ml of carbon disulfide and 0.45 methyl iodide were added successively to the reaction mixture.

Hneď ako bola reakcia skončená (kontrola pomocou chromatograf ie na tenkej vrstve), bola surová zmes naliata do 200 ml etylacetátu a potom bola reakcia prerušená pridaním 120 ml 0,1 M vodného roztoku chloridu amónneho.Once the reaction was complete (thin layer chromatography control), the crude mixture was poured into 200 mL of ethyl acetate and then quenched by the addition of 120 mL of 0.1 M aqueous ammonium chloride solution.

Oddelená organická fáza bola potom premytá 1 x 200 ml soľanky a potom 1 x 200 ml vody, vysušená bezvodým síranom sodným a následne bola zahustená do sucha.The separated organic phase was then washed with 1 x 200 ml brine and then 1 x 200 ml water, dried over anhydrous sodium sulfate, and then concentrated to dryness.

Zvyšok olej ovitej konzistencie bol spracovaný ďalej chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (19:1) ako elučného činidla.The residual oily consistency was further chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (19: 1) as eluent.

Bolo získaných 600 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .600 mg of the title compound are obtained.

δ (1 H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO),7,45-7,26 (m, 10H, Ph₂), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,24 (m, 1 H, H-3'), 6,05 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,92 a 4,88 (2m, 2H, C=CH2), 4,55 (dd, 1 H, H-ľ, J=2 ,1 a 9,6 Hz), 4,03 a 3,69 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 3,95 a 3,82 (2d, 2H, CH2-C=CH₂, J=12,3 Hz), 3,86 (m, 1 H, H-5’), 3,19 (dd,1H, H-4', J=3 a 9,3 Hz), 2,72 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz), 2,58 (s, 3H, SCH₃), 1,70 (s, 3H,.CH3C=CH₂).δ (1H, CDCl 3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.45-7.26 (m, 10H, Ph ₂ ), 6.98 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6.24 (m, 1H, H-3 '), 6.05 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.92 and 4.88 (2m, 2H, C = CH 2), 4.55 (dd, 1 H, H ', J = 2, 1, 9.6 Hz), 4.03 and 3.69 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9, 3 Hz), 3.95 and 3.82 (2d, 2H, CH2-C = _CH2, J = 12.3 Hz), 3.86 (m, 1 H, H-5 '), 3.19 ( dd, 1H, H-4 &apos;, J = 3 and 9.3 Hz), 2.72 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.58 (s, 3H, SCH3 ₎ 1.70 (s, 3H, CH ₃ C = CH ₂ ).

Medziprodukt 23Intermediate 23

a) Príprava d.ifenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4aP, 7β,7aa,8aβ)]- 8a-[[lS,4R,7R,9R]-2,8-dioxa-4,9-dimetyl-cisbicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-i.ndacén-3a-(1H)-karboxylovej a(a) Preparation of d.Phenylmethyl ester [1R- (1a, 3ap, 4β, 4aP, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8a - [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4,9- dimethyl-cisbicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-indacen-3a- (1H) -carboxylic acid a

b) difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β,7aa, 88β)]-8a-[[1S,4S,7R,9R]-2,8-dioxa-4,9-dimetyl-cisbicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahydrO“7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej(b) Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 88β)] - 8α - [[1S, 4S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4,9-dimethyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydrof7-methyl-3- (1-methylethyl) -1 , 4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Postup AProcedure

Roztok 1,5 g medziproduktu 21, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 150 ml vysušeného toluénu, bol odplyňovaný v prúde argónu po dobu 90 minút a potom bol zahriaty pod spätným chladičom do refluxu. K tomuto vriacemu roztoku bolo pridaných 847 μΐ tributylstaniumhydridu a 33 mg azob.is(izobutyronitrilu) a táto reakčná zmes bola zahrievaná po dobu ďalších 30 minút.A solution of 1.5 g of intermediate 21, prepared as described above, in 150 ml of dried toluene was degassed in a stream of argon for 90 minutes and then heated to reflux. To this boiling solution was added 847 μΐ of tributyltin hydride and 33 mg of azobis (isobutyronitrile) and the reaction mixture was heated for an additional 30 minutes.

Po odstránení rozpúšťadla bola zvyšná surová zmes spracovaná 2 x rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (20:1) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the remaining crude mixture was chromatographed twice on silica gel using hexane-ethyl acetate (20: 1) as eluent.

Bolo získaných 150 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny a), Rf = 0,6, hexán-etylacetát (4:1) a 260 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny b), Rf = 0,4, hexán-etylacetát (4:1), pričom obe zlúčeniny boli získané vo forme bezfarebnej olej ovitej konzistencie.150 mg of the title compound a), Rf = 0.6, hexane-ethyl acetate (4: 1) and 260 mg of the title compound b), Rf = 0.4, hexane-ethyl acetate (4) were obtained. Both compounds were obtained in the form of a colorless oil-like consistency.

(a) δ (¹H, CDCI3): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1H, H-2, J=1_r5 a 3,6 Hz), 4,46 (dd, 1H, H-7', J=3 a 7,5 Hz), 4,06-3,95 (m, 2H, H-3' a 8aCH₂), 3,78-3,60 (m, 2H, H-ľ a 8aCH₂), 3,38-3,26 (m, 2H, H-9* a H-3'), 2,75 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz), 0,98 (d, 3H, CH3.CH, J=6,9 Hz).(a) δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6 , 06 (dd, 1 H, H-2, J = 1 _r 5 and 3.6 Hz), 4.46 (dd, 1 H, H-7 ', J = 3 and 7.5 Hz), 4,06- 3.95 (m, 2H, H-3 'and 8aCH ₂ ), 3.78-3.60 (m, 2H, H-1' and 8aCH ₂ ), 3.38-3.26 (m, 2H, H -9 * and H-3 '), 2.75 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz), 0.98 (d, 3H, CH 3 CH, J = 6.9 Hz).

(b) δ (1h, CDCI₃): 9,74 (s, 1H, CHO), 7,5-7,2 (m, d OH, 2Ph), 6,99 (S, 1H, CHPh₂), 6,04 (dd, 1H, H-1, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,74 (t, 1 H, H-7', J=3 Hz), 3,94 a 3,61 (2d, 2H, 8aCH₂, J_AB=9,3 Hz), 3,88 a 3,76 (2d, 2H, H-3'), 3,66 (m, 1H, H-9’), 3,43 (t, 1H, H-ľ, J=7,8 Hz), 2,72 (t, 1 H. H-1, J=3,6 Hz), 2,46 (2m, 2H, CHCH₂O a H-5'), 0,97 (d, 3H, ΟΗβΟΗ, J=6,9 Hz).(b) δ (1h, CDCl ₃ ): 9.74 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, d OH, 2Ph), 6.99 (S, 1H, CHPh ₂ ), 6.04 (dd, 1H, H-1, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.74 (t, 1H, H-7 ', J = 3 Hz), 3.94 and 3, 61 (2d, 2H, 8aCHa _2, J _AB = 9.3 Hz), 3.88 and 3.76 (2d, 2H, H-3 '), 3.66 (m, 1 H, H-9'), 3.43 (t, 1H, H-1 ', J = 7.8 Hz), 2.72 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz), 2.46 (2m, 2H, CHCH) ₂ O and H-5 '), 0.97 (d, 3H, ββΟΗ, J = 6.9 Hz).

Postup BProcedure B

Roztok 685 mg medziproduktu 98, ktorého príprava je opísaná ďalej, v 15 ml o-xylénu, bol odplyňovaný 60 minút v prúde argónu a potom bol zahriaty pod spätným chladičom do refluxu. K tomuto roztoku bolo pridaných 379 μΐ tributylstaniumhydridu a táto reakčná zmes bola zahrievaná po dobu ďalších 15 minút. Po ochladení bola zmes vytrepaná medzi 150 ml dietyléteru a 100 ml vody a po oddelení bola organická fáza premytá nasýteným vodným roztokom fluoridu draselného a premývanie pokračovalo tak dlho, dokiaľ bolo pozorované zrážanie tributylstaniumfluoridu. Po prefiltrovaní a odparení organickej fázy do sucha bol získaný zvyšok, ktorý bol ďalej spracovaný 2 x rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (20:1) ako elučného činidla.A solution of 685 mg of intermediate 98, the preparation of which is described below, in 15 ml of o-xylene, was degassed for 60 minutes under a stream of argon, and then heated under reflux to reflux. To this solution was added 379 μΐ of tributyltin hydride and the reaction mixture was heated for an additional 15 minutes. After cooling, the mixture was partitioned between 150 ml of diethyl ether and 100 ml of water and after separation the organic phase was washed with saturated aqueous potassium fluoride solution and washing was continued until precipitation of tributyltin fluoride was observed. After filtration and evaporation of the organic phase to dryness, a residue was obtained which was further subjected to flash chromatography on silica gel (hexane-ethyl acetate 20: 1) as eluent.

Bolo získaných 103 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, označenej a) a 235 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, označenej b).103 mg of the title compound (a) and 235 mg of the title compound (b) were obtained.

Postup CProcedure C

Roztok 684 μΐ tributystaniumhydridu v 25 ml vysušeného toluénu bol odplyňovaný v prúde argónu po dobu 60 minút a potom bol zahriaty pod spätným chladičom do refluxu. Po 2 hodinách zahrievania bol k uvedenému roztoku pridaný pomocou injekčnej striekačky roztok medziproduktu 98, ktorého príprava je opísaná ďalej (610 mg), v 30 ml vysušeného toluénu a reakčná zmes bola zahrievaná po dobu ďalších 3,5 hodín .A solution of 684 μΐ of tributyltin hydride in 25 ml of dried toluene was degassed in a stream of argon for 60 minutes and then heated to reflux. After 2 hours of heating, a solution of intermediate 98, described below (610 mg) in 30 ml of dried toluene was added via syringe and the reaction mixture was heated for an additional 3.5 hours.

Po odstránení rozpúšťadla za zníženého tlaku bol získaný surový produkt spracovaný rýchlou chromatografiou na si likagéli za použitia najskôr hexánu a potom zmesi hexán-etylacetát (10:1) až (8:1) ako elučného činidla.After removal of the solvent under reduced pressure, the crude product obtained was flash chromatographed on silica gel using hexane first and then hexane-ethyl acetate (10: 1) to (8: 1) as eluent.

Bolo získaných 357 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, označenej a).357 mg of the title compound (a) were obtained.

Medziprodukt 24Intermediate 24

Príprava difenylmetyleste.ru kyseliny [ ÍR-(la , 3a0,4β , 4aP , 7β , 7aa,8αβ) ]-8a-[ [lS,7R,9R]-2,8-d.ioxa-4,4,8-tri metyl-ci sbicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8, 8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl esters of acid [1R- (1a, 3a0,4β, 4aP, 7β, 7aa, 8αβ)] -8a- [[1S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4,4,8- tri-methyl-bicyclo [3.4.0] non-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1 methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Roztok 580 mg medziproduktu 22, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 150 ml vysušeného toluénu, bol odplyňovaný v prúde argónu po dobu 60 minút a potom bol zahriaty pod spätným chladičom do refluxu. Po 2 hodinách zahrievania bol za stáleho privádzania prúdu argónu do zmesi pridaný pomocou injekčnej striekačky azobis(izobutyronitril) v katalytickom množstve a potom 0,27 ml tributylstaniumhydridu, rozpusteného v 20 ml vysušeného toluénu. Hneď ako táto operácia bola skončená, reakčná zmes bola ďalej zahrievaná po dobu 3 hodín. Potom bola ochladená a zahustená.A solution of 580 mg of intermediate 22, prepared as described above, in 150 ml of dried toluene was degassed in a stream of argon for 60 minutes and then heated under reflux to reflux. After 2 hours of heating, azobis (isobutyronitrile) was added in a catalytic amount, followed by 0.27 ml of tributyltin hydride dissolved in 20 ml of dried toluene, while the argon stream was added to the mixture. Once this operation was complete, the reaction mixture was further heated for 3 hours. It was then cooled and concentrated.

Zvyšok bol chromatograficky spracovaný na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1) ako elučného činidla.The residue was chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (4: 1) as eluent.

Bolo získaných 100 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.100 mg of the title compound was obtained as a white foam.

δ (¹ H, CDCI₃): 9,74 (s, 1H CHO), 7,45-7,26 (m, 10H, Ph₂), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,04 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,71 (t, 1H, H-7' J=3,3 Hz), 3,93 a 3,61 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 3,85 (t, 1H, H-Γ, J=8,7 Hz), 3,56 (m, 1 H, H-9'), 3,55 a 3,43 (2d. 2H, CH₂-3', J=8,4 Hz), 2,73 (m, 1H, H-1), 1,08 a 0,99 (2s, 6H, 4'-CH₃).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.74 (s, 1H, CHO), 7.45-7.26 (m, 10H, Ph _2), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6.04 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.71 (t, 1H, H-7 ' J = 3.3 Hz), 3.93 and 3.61 ( 2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.3 Hz), 3.85 (t, 1 H, H-Γ, J = 8.7 Hz), 3.56 (m, 1 H, H-9 ' ), 3.55 and 3.43 (2d. 2H, _CH2 -3 ', J = 8.4 Hz), 2.73 (m, 1 H, H-1), 1.08 and 0.99 (2 s (6H, 4'-CH ₃ ).

Medziprodukt 25Intermediate 25

Príprava difeny Ime ty’lesteru kyseliny [ÍR-(la,3aβ,4β,4ηβ,7β, 7aα,8aβ)]-8a-[ (6-deoxy^-D-a.Ltropyranosyloxy)metyl 1-4-(1,381 dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylene methyl ester [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α- [(6-deoxy-4-Da.Ltropyranosyloxy) methyl 1-4- (1,381 dioxolane-2) yl) 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Za stáleho miešania bolo k 2,5 g medziproduktu 1, ktorého príprava je opísaná vyššie, rozpusteného v 100 ml vysušeného acetonitrilu, pridaných pri teplote miestnosti postupne 30 ml etylénglykolu, 2 ml trimetylortoformiátu a katalytické množstvo kyseliny p-toluénsulfónovej. Vzniknutá reakčná zmes bola miešaná po dobu 3 hodín, potom bola zriedená s 300 ml etylacetátu a postupne premytá 5% vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a soľankou.While stirring, 2.5 g of intermediate 1 described above, dissolved in 100 ml of dried acetonitrile, were added at room temperature successively with 30 ml of ethylene glycol, 2 ml of trimethyl orthoformate and a catalytic amount of p-toluenesulfonic acid. The resulting reaction mixture was stirred for 3 hours, then diluted with 300 mL ethyl acetate and washed sequentially with 5% aqueous sodium bicarbonate and brine.

Oddelená organická fáza bola vysušená bezvodým síranom sodným a zahustená.The separated organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated.

Zvyšok bol prečistený chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) ako elučného činidla.The residue was purified by silica gel chromatography eluting with hexane-ethyl acetate (3: 1).

Bolo získaných 2,6 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .2.6 g of the title compound are obtained.

δ (¹H CDCI3): 7,46-7,24 (m, 10H, Ph₂), 6,94 (s, 1H, CHPh₂), 5,83 (dd, 1 H. H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 5,07 (s, 1H, CH beta), 4,65 (d, 1H, H-ľ, J=1,8 Hz), 4,07-4,04 (m, 2H, 8a-CH₂ (1H) a H-3'), 3,88-3,69 (m, 8H, OCH₂CH₂O,8a-CH₂(1H), H2', H-4' a H-5'), 2,51 (t, 1H, H-1, J=4,5 Hz), 2,37 (d, 1H, OH, J=2,7 Hz), 2,28 (d, 1H, OH, J=3,6 Hz), 2,04 (d, 1H, OH, J=5,7 Hz).δ ⁽¹ H CDCl3): 7.46-7.24 (m, 10H, Ph _2), 6.94 (s, 1H, CHPh _2), 5.83 (dd, 1H, H-2, J 1.2 and 3.6 Hz), 5.07 (s, 1H, CH beta), 4.65 (d, 1H, H-1 ', J = 1.8 Hz), 4.07-4.04 ( m, 2H, _8a-CH2 (1H) and H-3 '), 3.88 to 3.69 (m, 8H, OCH ₂ CH ₂ O, _8a-CH2 (1H), H2', H4 H and H-5 '), 2.51 (t, 1H, H-1, J = 4.5 Hz), 2.37 (d, 1H, OH, J = 2.7 Hz), 2.28 ( d, 1H, OH, J = 3.6 Hz), 2.04 (d, 1H, OH, J = 5.7 Hz).

Medziprodukt 26Intermediate 26

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ap,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(6-deoxy-3,4-0-izopropylidén^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-(1,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7-metyl-3- (1-metyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a- (1H) karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O-isopropylidene-4-D-altropyranosyloxy) methyl] -4- ( 1,3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane -indacene-3a- (1H) carboxylic acid

Roztok 200 mg medziproduktu 25, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 6 ml vysušeného acetonitrilu, bol v atmosfére dusíka zmiešaný s 0,6 ml 2,2-dimetoxypropánu a potom bolo pridané katalytické množstvo pyridínium- p-toluénsulfonátu. Po 4 hodinách, keď vzniknutá reakčná zmes bola ponechaná v pokoji stáť pri teplote miestnosti, bolo pridanýchA solution of 200 mg of intermediate 25 described above in 6 ml of dried acetonitrile was mixed with 0.6 ml of 2,2-dimethoxypropane under a nitrogen atmosphere, and then a catalytic amount of pyridinium p-toluenesulfonate was added. After 4 hours, when the resulting reaction mixture was allowed to stand at room temperature, it was added

ml nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a zmes bola vytrepaná 2 x 20 ml etylacetátu. Spojené organické fázy boli premyté vodou a soľankou, vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a potom boli odparené do sucha.ml of saturated aqueous sodium bicarbonate solution and the mixture was extracted with 2 x 20 ml of ethyl acetate. The combined organic phases were washed with water and brine, dried over magnesium sulfate, filtered and then evaporated to dryness.

Zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1) ako elučného činidla. Príslušné frakcie boli spojené a potom odparené.The residue was purified by flash chromatography on silica gel eluting with hexane-ethyl acetate (4: 1). Appropriate fractions were combined and then evaporated.

Bolo získaných 205 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.205 mg of the title compound was obtained as a white foam.

δ (¹ H, CDCI3): 7,47-7,2 (m, 10H,2Ph), 6.93 (s, 1 H, CHPh2), 5,83 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 5,08 (s, 1H, 1,3-dioxolán ), 4,56 (d, 1H, H-ľ, J=2,1 Hz), 4,3 (dd, 1H, H-3', J=3,6 a 5,7 Hz), 4,04 (d, 1 H, A časť 8aCH2, JAb=9 Hz), 3,953,75 (m, 7H, H-2¹, H-4’, OCh^ClijO a B časť 8aCH2), 3,44 (dq, 1H, H-5', J=6 a 9 Hz), 2,65 (m, 1 H, CHMe₂), 2,51 (bt, 1 H, H-1, J=3.6 Hz), 2,35 (d, 1H, 0H2'), 1,47, 1,36 (2s, 6H, 2CH3 isopropylidén ketal).δ ⁽¹ H, CDCl3): 7.47 to 7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.93 (s, 1H, CHPh2), 5.83 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 5.08 (s, 1H, 1,3-dioxolane), 4.56 (d, 1H, H-1 ', J = 2.1 Hz), 4.3 (dd, 1H, H-3 ', J = 3.6, 5.7 Hz), 4.04 (d, 1H, a part of 8aCH2, JAB = 9 Hz), 3,953,75 (m, 7H, H-2 ¹ H -4 ', OCH 2 Cl 2 O and B part 8aCH 2), 3.44 (dq, 1H, H-5', J = 6 and 9 Hz), 2.65 (m, 1H, CHMe ₂ ), 2.51 (bt, 1H, H-1, J = 3.6 Hz), 2.35 (d, 1H, OH 2 '), 1.47, 1.36 (2s, 6H, 2CH 3 isopropylidene ketal).

Medziprodukt 27Intermediate 27

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa , 8ηβ) ] -8a- [ (6-deoxy-3,4-0-.izopropylidén^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-(1,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7aa, 8ηβ)] -8α- [(6-deoxy-3,4-O-isopropylidene-4-D-alopyranosyloxy) methyl] -4- (1,3-dioxolan-2-yl) -4,4, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-1methylethyl) -1,4-methano-s indacene-3a (1H) carboxylic acid

K zmesi 412 mg oxidu chrómového v 25 ml dichlórmetánu bolo pridaných pri teplote 0 °C 0,67 ml pyridínu a po 15 minútach státia bolo pridaných 0,4 ml anhydridu kyseliny octovej a po ďalších 10 minútach bol pri uvedenej teplote 0 C pridaný roztok 750 mg medziproduktu 26, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 25 ml dichlórmetánu. Vzniknutá reakčná zmes bola miešaná po dobu 2 hodín a potom bola prefiltrovaná cez stĺpec silikagélu, vybavenom v hornej časti vrstvou síranu horečnatého a získaný filtrát bol za zníženého tlaku odparený do sucha.To a mixture of 412 mg of chromium trioxide in 25 ml of dichloromethane was added at 0 ° C 0.67 ml of pyridine and after 15 minutes of standing 0.4 ml of acetic anhydride was added and after a further 10 minutes a solution of 750 was added at 0 ° C. mg of intermediate 26, the preparation of which is described above, in 25 ml of dichloromethane. The resulting reaction mixture was stirred for 2 hours and then filtered through a silica gel column equipped with a layer of magnesium sulfate at the top and the filtrate evaporated to dryness under reduced pressure.

Získaná látka sirupovitej konzistencie bola rozpustená v zmesi (11 ml) metanol-voda (10:1) a k tomuto roztoku bolo pridaných pri teplote 0 °C 40 mg tetrahydroboritanu sodného.The obtained syrup-like substance was dissolved in a mixture (11 ml) of methanol-water (10: 1) and to this solution was added 40 mg of sodium borohydride at 0 ° C.

Táto zmes bola udržovaná pri teplote 0 °C po dobu 2 hodín, potom bola okyslená 1 M roztokom kyseliny chlorovodíkovej na pH 6 až 7 a následne bola za zníženého tlaku odparená do sucha.The mixture was kept at 0 ° C for 2 hours, then acidified to pH 6-7 with 1M hydrochloric acid solution and then evaporated to dryness under reduced pressure.

Bola získaná bielo sfarbená tuhá látka, ktorá bolaA white colored solid was obtained which was

x prečistená pomocou rýchlej chromatografie na silikagéli za postupného premývania zmesou hexán-etylacetát (6:1) a potom (2:1).x purified by flash chromatography on silica gel eluting sequentially with hexane-ethyl acetate (6: 1) then (2: 1).

Frakcie, obsahujúce žiadaný produkt boli spojené a za vákua odparené.The fractions containing the desired product were combined and evaporated in vacuo.

Bolo získaných 585 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .585 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 7,24-7,46 (m, 10H, 2Ph), 6,92 (s, 1 H. CHPh₂), 5,87 (dd, 1H, H-2, J= 3,9 a 1,5 Hz), 5.09 (s, 1H, CH-dioxolán ), 4,52 (t, 1H, H-3', J= 4,5 Hz), 4,45 (d, 1H, H-ľ, J= 7,8 Hz, 4,07 (d, 1H, 8aCH₂, J= 9 Hz), 3,74-3,86 (m, 6H, 2CH₂-dioxolán.H-4', 8aCH₂), 3,67 (m, 1H, H-2'), 2,65 (m, 1H, H-14), 2,58 (t, 1H, H-11).δ ⁽¹ H, CDCl3): 7.24-7.46 (m, 10H, 2 Ph), 6.92 (s, 1H, CHPh _2), 5.87 (dd, 1 H, H-2, J 3.9 and 1.5 Hz), 5.09 (s, 1H, CH-dioxolane), 4.52 (t, 1H, H-3 &apos;, J = 4.5 Hz), 4.45 (d, 1H, H-1 ', J = 7.8 Hz, 4.07 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9 Hz), 3.74-3.86 (m, 6H, 2CH ₂ -dioxolane.H-4', ₂ 8aCHa), 3.67 (m, 1 H, H-2 '), 2.65 (m, 1 H, H-14), 2.58 (t, 1 H, H-11).

Medziprodukt 28Intermediate 28

Príprava 2-(trimetylsilyl)etylesteru kyseliny [lR-(la,3aP, 4β,43β,7β,7aa,83β)]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro8a-hydroxymetyl-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of 2- (trimethylsilyl) ethyl ester [1R- (1a, 3aP, 4β, 43β, 7β, 7aa, 83β)] - 4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro8a- hydroxymethyl-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacén3a- (1H) -carboxylic acid

Roztok 6,6 g sordaricínu a 9,3 g 0-[2-(trimetylsilyl)etyl]-N,N’-diizopropylizomočovinyl) v 150 ml bezvodého tetrahydrofuránu bol zahrievaný za refluxu pod spätným chladičom po dobu 3 hodín. Potom bola reakčná zmes ochladená na teplotu miestnosti, prefiltrovaná a zahustená do sucha.A solution of 6.6 g of sordaricin and 9.3 g of O- [2- (trimethylsilyl) ethyl] -N, N'-diisopropylisourea) in 150 ml of anhydrous tetrahydrofuran was heated at reflux for 3 hours. The reaction mixture was then cooled to room temperature, filtered and concentrated to dryness.

Zvyšok bol rozpustený v 750 ml etylacetátu a potom bol postupne premytý 1 M roztokom kyseliny chlorovodíkovej, 5%-ným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a soľankou. Oddelená organická fáza bola vysušená bezvodým síranom sodným a potom bola za vákua zahustená.The residue was dissolved in 750 mL of ethyl acetate and then washed sequentially with 1 M hydrochloric acid solution, 5% aqueous sodium bicarbonate solution and brine. The separated organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate and then concentrated in vacuo.

Zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia 10%-ného etylacetátu v hexáne ako elučné ho činidla.The residue was purified by flash chromatography on silica gel eluting with 10% ethyl acetate in hexane.

Bolo získaných 6,8 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.6.8 g of the title compound were obtained as a white foam.

δ (¹ H, CDCI3): 9,67 (s, 1H, CHO), 6,07 (dd, 1H, H-2, J=1_r5 a 3,6 Hz), 4,27 (m, 2H, CH2CH2O), 3,93 a 3,49 (2m, 2H, 8a-CH₂), 2,75 (bs,1H, OH), 2,54 (t, 1H, H-1), 1,05 (m, 2H, CH₂CH₂Si), 0,07 (š, 9H, (CH3)₃Si); δ (13c, CDCI3): 204,9 (CHO), 173,6 (COOTMSE), 148,2 (C-3), 130,6 (C-2), 66,9 (8a-CH₂O),δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.67 (s, 1H, CHO), 6.07 (dd, 1 H, H-2, J = 1 _R 5 and 3.6 Hz), 4.27 (m, 2H , CH ₂ CH ₂ O), 3.93 and 3.49 (2m, 2H, 8a-CH2), 2.75 (bs, 1H, OH), 2.54 (t, 1H, H-1), 1.05 ( m, 2H, CH ₂ CH ₂ Si), 0.07 (s, 9H, (CH 3) ₃ Si); δ (13c, CDCl 3): 204.9 (CHO), 173.6 (COOTMSE), 148.2 (C-3), 130.6 (C-2), 66.9 (8a-CH ₂ O),

64,0 (CH₂CH₂O), 177,7 (CH₂CH₂Si), 1,6 (CH₃)₃Si).64.0 (CH ₂ CH ₂ O), 177.7 (CH ₂ CH ₂ Si), 1.6 (CH ₃ ) ₃ Si).

Mathias L. J., Synthesis, 561 (1979).Mathias L.J., Synthesis, 561 (1979).

Medziprodukt 29Intermediate 29

Príprava trimetylsilyletylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β, 4ηβ,7β,7aa,8ηβ)]- 8a-[(3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxy^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of trimethylsilylethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(3,4,6-tri-O-acetyl-2-deoxy-4-D-alopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7a-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 63 mg medziproduktu 28, ktorého príprava je opísaná vyššie a 20 mg 3,4,6-tri-O-acetyl-D-alalu¹) v 1 ml vysušeného toluénu, bolo pridaných 9 mg kyseliny bromovodíkovej-trifenylfosfínu a vzniknutá reakčná zmes bola zahrievaná po dobu 2 hodín na teplotu 60 °C a potom bola naliata do 100 ml 1 M roztoku hydrogénuhličitanu sodného. Po pridaní 100 ml etylacetátu bola oddelená organická vrstva premytá vodou, vysušená bezvodým síranom horečnatým a prefiltrovaná a potom bola odparená do sucha.To a solution of 63 mg of intermediate 28 described above and 20 mg of 3,4,6-tri-O-acetyl-D-alalu ¹ ) in 1 mL of dried toluene was added 9 mg of hydrobromic acid triphenylphosphine and the resulting reaction mixture was added. The reaction mixture was heated at 60 ° C for 2 hours and then poured into 100 mL of 1 M sodium bicarbonate solution. After addition of 100 ml of ethyl acetate, the separated organic layer was washed with water, dried over anhydrous magnesium sulfate and filtered and then evaporated to dryness.

Zvyšok bol prečistený rýchlou stĺpcovou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (10:1).The residue was purified by flash column chromatography on silica gel using hexane-ethyl acetate (10: 1).

Bolo získaných 16 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.16 mg of the title compound were obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,73.(s, 1H, CHO), 6,03 (dd, 1H, H-2, J= 1,5 a 3,6 Hz), 5,48 (m, 1H, H-3’), 4,89 (dd, 1H, H-4', J=3,3 a 9,6 Hz), 4,65 (dd, 1H, H-1', J=2,4 a ’ 8,7 Hz), 4,23 (m, 4H, H-6', COOCHpCH? Si), 4,02 (ddd, 1H, H-5', J= 3, 5,4 a 9,6 Hz), 3.92 a ’ 3,69 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 2,75 (t, 1H, H-1), 2,28 (m, 1H,CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, CDCl 3): 9.73. (s, 1H, CHO), 6.03 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5.48 (m, 1H, H-3 '), 4.89 (dd, 1H, H-4', J = 3.3 and 9.6 Hz), 4.65 (dd, 1H, H-1 ', J = 2, 4 and 8.7 Hz), 4.23 (m, 4H, H-6 &apos;, COOCH3 CH2 Si), 4.02 (ddd, 1H, H-5 &apos;, J = 3, 5.4 and 9), 6), and 3.92 '3.69 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9.6 Hz), 2.75 (t, 1 H, H-1), 2.28 (m, 1 H, CH (CH ₃ ) ₂ ).

^) Vittman M. D., Halcomb R. L. a Danishefsky S. J., J. Org.^) Vittman M. D., Halcomb R. L. and Danishefsky S. J., J. Org.

Chem., 55, 1979 až 1981 (1990).Chem., 55, 1979-1981 (1990).

Medziprodukt 30Intermediate 30

Príprava 2-(trimetylsilyl)etylesteru kyseliny [lR-(la,3ap, 4β , 4ap , 7β , 7act, 8ap) ] -8a- [ (2-deoxy-3,4-0-izopropylidén-6-0metyl^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8, 8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of 2- (trimethylsilyl) ethyl ester [1R- (1a, 3ap, 4β, 4ap, 7β, 7act, 8ap)] -8a- [(2-deoxy-3,4-O-isopropylidene-6-O-methyl) -D -alopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3- (1H) -carboxylic acid

K stále miešanému roztoku 275 mg medziproduktu 29, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 10 ml absolútneho metanolu, boli pridané 2 alebo 3 kvapky 1 M roztoku metoxidu sodného v metanole. Vzniknutá reakčná zmes bola potom po dobu 1,5 hodiny miešaná, následne bola zahustená a zriedená 10 ml toluénu. Po zahustení bola získaná látka vo forme žltého sirupu, ktorý bol rozpustený v 5 ml acetónu a k tomuto roztoku bolo pridaných 60 μΐ 2,2-dimetoxypropánu a 75 mg monohydrátu kyseliny p-toluénsulfónovej. Potom bola reakčná zmes miešaná pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny, potom bola zneutralizovaná uhličitanom sodný, prefiltrovaná a filtrát bol zahustený do sucha.To a constantly stirred solution of 275 mg of intermediate 29, prepared as described above, in 10 mL of absolute methanol, was added 2 or 3 drops of a 1 M solution of sodium methoxide in methanol. The reaction mixture was stirred for 1.5 hours, then concentrated and diluted with 10 mL of toluene. After concentration, a yellow syrup was obtained, which was dissolved in 5 ml of acetone and to this solution was added 60 μΐ of 2,2-dimethoxypropane and 75 mg of p-toluenesulfonic acid monohydrate. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour, then neutralized with sodium carbonate, filtered and the filtrate was concentrated to dryness.

Zvyšok vo forme olej ovitej konzistencie bol rozpustený v 20 ml etylacetátu, premytý vodou a soľankou, vysušený a zahustený na látku olej ovitej konzistencie, ktorá po rozpustení v 5 ml vysušeného tetrahydrofuránu reagovala pri teplote 0 °C s 10 mg hydridu sodného, potom bola zmes po dobu 30 minút miešaná a následne bolo pridaných 100 μΐ metylj odídu.The oily residue was dissolved in 20 ml of ethyl acetate, washed with water and brine, dried and concentrated to an oily substance which, after dissolution in 5 ml of dried tetrahydrofuran, was treated with 10 mg of sodium hydride at 0 DEG C. After stirring for 30 minutes, 100 μ 100 methyl iodide was added.

Táto reakčná zmes bola postupne počas 3 hodín vytemperovaná na teplotu miestnosti a po prerušení reakcie pridaním 1 ml metanolu bola zmes zahustená.The reaction mixture was gradually warmed to room temperature over 3 hours and after quenching with 1 mL of methanol, the mixture was concentrated.

Zvyšok bol prečistený 3 x rýchlou stĺpcovou chromatografiou za postupného premývania zmesou hexán-etylacetát (10:1), (6:1) a (4:1) ako elučných činidiel.The residue was purified by 3X flash column chromatography, eluting sequentially with hexane-ethyl acetate (10: 1), (6: 1) and (4: 1) as eluents.

Príslušné frakcie boli spojené a rozpúšťadlá boli odpa rené .Appropriate fractions were combined and the solvents were evaporated.

Bolo získaných 50 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bezfarebnej látky olej ovitej konzistencie, δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1 H, CHO), 6,04 (dd, 1H, H-2, J)1_f2 a 3,6 Hz), 4,61 (dd, 1H, H-ľ, J=2,4 a 8,4 Hz), 4,43 (m, 1H, H-3'), 4,34-4,10 (m, 2H, CH₂SEM chrániaca skupina 3,66 a 3,89 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9.3 Hz), 3,87 (m, 1H, H-4’), 3.48-3,64 (m, 3H, 2H-6' a H-5'), 3,24 (s, 3H,6OMe), 2,73 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz), 1,34 a 1,35 (2s, 6H, metylové skupiny izopropylidénu)To afford 50 mg of the title compound as a colorless oily consistency, δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 6.04 (dd, 1 H, H-2, J) 1 ₍ 2 and 3.6 Hz), 4.61 (dd, 1H, H-1 ', J = 2.4 and 8.4 Hz), 4.43 (m, 1H, H-3'), 4.34-4.10 (m, 2H, _CH2 SEM protecting group, 3.66 and 3.89 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9.3 Hz), 3.87 (m, 1 H, H-4 ' 3.48-3.64 (m, 3H, 2H-6 'and H-5'), 3.24 (s, 3H, 6OMe), 2.73 (t, 1H, H-1, J = 3, 6 Hz), 1.34 and 1.35 (2s, 6H, isopropylidene methyl groups)

Medziprodukt 31Intermediate 31

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(4-0-((E)-2-butenyl)-2,6-dideoxy^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl-3- (1-metyletyl) -1,4-metán-s-i.ndacén-3a- (1H) -karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3α, 4β, 4α, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(4-0 - ((E) -2-butenyl) -2,6-dideoxy) -4-D- alopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanesinden-3a- ( 1H) -carboxylic acid

Suspenzia 1,5 g medziproduktu 10, ktorého príprava je opísaná vyššie a 0,9 g dibutylstaniumoxidu v 150 ml vysušeného toluénu, bola zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom v banke vybavenej Dean-Starkovým kondenzátorom po dobu 2 hodín a potom bola ponechaná stáť v pokoji pri teplote miestnosti v atmosfére dusíka (bolo odstránených približne 20 ml azeotropickej zmesi). Potom bolo k zmesi pridaných postupne 0,37 ml krotylbromidu (výhodne trans-forma), 3,6 ml 1 M roztoku tetrabutylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne a 4 molekulové sito (aktivovaná látka vo forme prášku) a vzniknutá reakčná zmes bola zahrievaná na teplotu 60 °C po dobu 24 hodín. Po odfiltrovaní molekulového sita bolo rozpúšťadlo odstránené.A suspension of 1.5 g of intermediate 10 described above and 0.9 g of dibutyltin oxide in 150 ml of dried toluene was heated to reflux in a flask equipped with a Dean-Stark condenser for 2 hours and then allowed to stand still. at room temperature under a nitrogen atmosphere (approximately 20 mL of the azeotropic mixture was removed). Thereafter, 0.37 ml of crotyl bromide (preferably the trans form), 3.6 ml of a 1 M solution of tetrabutylammonium fluoride in tetrahydrofuran and 4 molecular sieves (activated powder) were added successively and the resulting reaction mixture was heated to 60 ° C. for 24 hours. After filtration of the molecular sieve, the solvent was removed.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-acetón (95:5) ako elučného činidla.The residue was flash chromatographed on silica gel using hexane-acetone (95: 5) as eluent.

Bol získaný 1 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.1 g of the title compound was obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,44-7,23 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 ε 3,6 Hz), 5,75-5,52 (m, 2H, CH=CH), 4,64 (dd, 1 H. H-ľ, J=2,1 ai ’ 9,6 Hz), 4,16 (m, 1H, H-3'), 4,98 (m, 3H, 8a-CH₂, (1H) a CH2CH=CH(2H)), 3,74 (m, 1H, H-5'), 3,67 (d, 1H, 8a-CH₂ (1H), J= 9,3 Hz), 3,05 (dd, 1 H, H< J=3,0 a 9,6 Hz), 2,75 (t, 1 H, H-1, J=3,6 Hz), 2,40 (d, 1H, OH, J=2,1 Hz), 1,72 (m, 3H, CH3CH=CH).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.44-7.23 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.05 ( dd, 1H, H-2, J = 1.5 ε 3.6 Hz), 5.75-5.52 (m, 2H, CH = CH), 4.64 (dd, 1H). , J = 2.1 i '9.6 Hz), 4.16 (m, 1 H, H-3'), 4.98 (m, 3H, _8a-CH2, (1H) and CH 2 CH = CH (2 H )), 3.74 (m, 1 H, H-5 '), 3.67 (d, 1 H, _8a-CH2 (1H), J = 9.3 Hz), 3.05 (dd, 1H, H (J = 3.0 and 9.6 Hz), 2.75 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz), 2.40 (d, 1H, OH, J = 2.1 Hz), 1.72 (m, 3H, CH 3 CH = CH).

Medziprodukt 32Intermediate 32

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2,6-dideoxy-4-0-propargyl-^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3α, 4α, 4α, 4α, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [(2,6-dideoxy-4-O-propargyl-4-D-alopyranosyloxy) methyl] -4- formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3 (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Suspenzia 2 g medziproduktu 10, ktorého príprava je opísaná vyššie a 1,2 dibutylstaniumoxidu v 150 ml vysušeného toluénu, bola zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom v banke vybavenej Dean-Starkovým kondenzátorom po dobu 2 hodín a potom bola ponechaná stáť pri teplote miestnosti a v atmosfére dusíka v pokoji (bolo odstránených približne 20 ml azeotropickej zmesi). Potom bolo k zmesi postupne pridaných 0,55 ml 80%-ného roztoku (hmotnostné %) propargylbromidu, 4,80 ml 1 M roztoku tetrabutylamóniumfluoridu a 4 molekulové sito (aktivovaná látka vo forme prášku) a vzniknutá reakčná zmes bola zahrievaná na teplotu 60 °C po dobu 24 hodín .A suspension of 2 g of intermediate 10 described above and 1,2 dibutyltin oxide in 150 ml of dried toluene was heated at reflux in a flask equipped with a Dean-Stark condenser for 2 hours and then allowed to stand at room temperature and atmosphere. nitrogen at rest (approximately 20 mL of the azeotropic mixture was removed). Then 0.55 ml of 80% (w / w) propargyl bromide, 4.80 ml of 1 M tetrabutylammonium fluoride solution and 4 molecular sieves (activated powder) were added successively and the resulting reaction mixture was heated to 60 °. C for 24 hours.

Po odfiltrovaní molekulového sita bolo rozpúšťadlo odstránené .After filtration of the molecular sieve, the solvent was removed.

Zvyšok bol spracovaný 2 x rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-acetón (96:4) ako elučného činidla.The residue was chromatographed twice on silica gel using hexane-acetone (96: 4) as eluent.

Bolo získaných 1,25 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.1.25 g of the title compound was obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,44-7,26 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,65 (dd, 1 H, H-ľ, J=2,1 a 9,6 Hz), 4,29 (m, 1 H, H-3'), 4,24 a 4,22 (2d, 2H, CH2C=CH, J=2,4 Hz), 4,05 a 3,68 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 3,75 (m, 1 H, H-5'), 3,25 (dd, 1 H. H-4', J=3,0 a’ ; 9,3 Hz), 2,75 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,46 (t, 1H, C^CH, J=2,4 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.44-7.26 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.05 ( dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.65 (dd, 1H, H-1 ', J = 2.1 and 9.6 Hz), 4.29 (m 1 H, H-3 '), 4.24 and 4.22 (2d, 2H, CH 2 C = CH, J = 2.4 Hz), 4.05 and 3.68 (2d, 2H, 8a-CH ₂₎ J = 9.3 Hz), 3.75 (m, 1H, H-5 '), 3.25 (dd, 1H, H-4', J = 3.0 a '; 9.3 Hz) ), 2.75 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.46 (t, 1H, CH3, J = 2.4 Hz).

Medziprodukt 33Intermediate 33

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(1α,3ηβ,4β,4ap,7β,Preparation of diphenylmethyl acid [1R- (1α, 3ηβ, 4β, 4ap, 7β,

7aa,8ap)]-8a-[(4-0-(3-metyl-2-butenyl)-2,6-dideoxy^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej7a, 8a?)] - 8 - [(4-0- (3-methyl-2-butenyl) -2,6-dideoxy-D-allopyranosyloxy ^) methyl] -4-formy1-4,4a, 5.6; 7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Suspenzia 1 g medziproduktu 10, ktorého príprava je opísaná vyššie a 600 mg tributylstaniumoxidu v 150 ml vysušeného toluénu, bola zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom v banke vybavenej Dean-Starkovým kondenzátorom po dobu 2 hodín (bolo odstránených 25 ml azeotropickej zmesi). Po ochladení reakčnej zmesi na teplotu miestnosti bolo postupne pridaných 276 μΐ 2-metyl-4-bróm-2-buténu a 2,4 ml 1 M roztoku tetrabutylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne a vzniknutá reakčná zmes bola zahrievaná na teplotu 50 °C po dobu 24 hodín. Po odparení rozpúšťadiel bola získaná surová látka, ktorá bola spracovaná rýchlou chromatografiou za použitia zmesi etylacetát-hexán (1:20, 1:15 a 1:20) ako elučného činidla .A suspension of 1 g of intermediate 10 described above and 600 mg of tributyltin oxide in 150 ml of dried toluene was refluxed in a flask equipped with a Dean-Stark condenser for 2 hours (25 ml of azeotropic mixture was removed). After cooling the reaction mixture to room temperature, 276 µL of 2-methyl-4-bromo-2-butene and 2.4 mL of a 1 M solution of tetrabutylammonium fluoride in tetrahydrofuran were added successively and the resulting reaction mixture was heated at 50 ° C for 24 hours. Evaporation of the solvents gave the crude material which was flash chromatographed using ethyl acetate-hexane (1:20, 1:15 and 1:20) as eluent.

Bolo získaných 770 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme peny (výťažok 69%).770 mg of the title compound were obtained as a foam (69% yield).

δ (1 H, CDCI3): 9,73 (s, 1 H, CHO), 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1 H, H2, J=1,5 a 3,3 Hz), 5,33 (m, 1H, OCH₂CH=), 4,64 (dd, 1H, HT, J=2,1 a 9,6 Hz), 4,20 (m, 1H, H3'), 4,25-3,95 (m, 3H, OCH2C=+8aCH₂), 3,75-3,65 (m, 2H, H5'+8aCH₂), 3.03 (dd, 1 H, H4', J=3,3 a 9,6 Hz), 2,75 (t, 1H, H1, J=3,9 Hz), 2,44 (d, 1 H, OH, J=2_T1 Hz).δ (1H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 10H, 2Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6.05 (dd, 1H, H2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 5.33 (m, 1H, OCH ₂ CH =), 4.64 (dd, 1H, HT, J = 2.1 and 9.6 Hz), 4.20 (m, 1H, H 3 '), 4.25-3.95 (m, 3H, OCH ₂ C = + 8aCH ₂ ), 3.75-3.65 (m, 2H, H5) '8aCHa + _2), 3.3 (dd, 1H, H-4', J = 3.3, 9.6 Hz), 2.75 (t, 1H, H1, J = 3.9 Hz), 2.44 ( d, 1H, OH, J = 2 _T 1 Hz).

Medziprodukt 34Intermediate 34

Príprava difenylmetyleste.ru kyseliny [ ÍR- (Ια , 3ηβ , 4β , 4ηβ , 7β , 7aa,8ηβ)]-8a-[(4-0-((E)-2-butenyl)-2,6-dideoxy-3-0-(metyltiο)-1iokarbony1 -β-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formy1-4,4a, 5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-sindacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyleste.ru acid [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(4-0 - ((E) -2-butenyl) -2,6-dideoxy-3)] -O- (methylthio) -1iocarbonyl-β-D-allopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) ) -1,4-methano-s-indacen-3a (1H) -carboxylic acid

K chladenému roztoku 1 g medziproduktu 31, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 20 ml bezvodého tetrahydrofuránu, bolo pridaných v atmosfére dusíka po malých častiach 0,156 g hydridu sodného a katalytické množstvo imidazolu. Po odstránení ľadom chladeného kúpeľa bola vzniknutá reakčná zmes miešaná pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Potom bolo k zmesi pridaných postupne 0, 58 ml sulfidu uhličitého a 0,80 ml metyljodidu.To a cooled solution of 1 g of intermediate 31, prepared as described above, in 20 ml of anhydrous tetrahydrofuran, 0.156 g of sodium hydride and a catalytic amount of imidazole were added in small portions under a nitrogen atmosphere. After removal of the ice-cooled bath, the resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour. Then, 0.558 ml of carbon disulfide and 0.80 ml of methyl iodide were added sequentially.

Hneď ako bola reakcia skončená (kontrola pomocou chromatografie na tenkej vrstve), bola surová zmes naliata do 400 ml etylacetátu a potom bola reakcia prerušená pridaním 500 ml 1 M vodného roztoku chloridu amónneho. Oddelená organická fáza bola potom postupne premytá 200 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 5%-ným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného a 200 ml solanky, potom vysušená bezvodým síranom sodným, prefiltrovaná a za vákua bola zahustená.Once the reaction was complete (thin layer chromatography control), the crude mixture was poured into 400 mL of ethyl acetate and then quenched by the addition of 500 mL of 1 M aqueous ammonium chloride solution. The separated organic phase was then washed successively with 200 ml of 1 M hydrochloric acid solution, 5% aqueous sodium hydrogen carbonate solution and 200 ml of brine, then dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated in vacuo.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-hexán (6:4), ako elučného činidla.The residue was flash chromatographed on silica gel using dichloromethane-hexane (6: 4) as eluent.

Bolo získaných 1,04 g žiadanej v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.1.04 g of the title compound was obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,45-7,26 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh2), 6,23 (dd, 1H, H-3', J=3,0 a 6,3 Hz), 6,05 (dd, 1 H, H-2, J=1.5 a 3,3 Hz), 5.75-5,40 (m, 2H,CH=CH), 4,55 (dd, 1H, H-1', J=1,8 a 9,3 Hz), 4,05-3,80 (m, 4H, 8a-CH₂(1H), CH2CH=CH(2H) a H-5j, 3,75 (d, 1 H, 8a-CH₂(1H), J=9,3 Hz), 3,20 (dd, 1H, H-4', J=3,0 a 9,3 Hz), 2,72 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,58 (s, 3H, CH₃S), 1,68 (m, 3H, CH3CH=CH).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.45-7.26 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh2), 6.23 (dd 1 H, H-3 ', J = 3.0 and 6.3 Hz), 6.05 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 5.75-5.40 (m 2H, CH = CH), 4.55 (dd, 1H, H-1 &apos;, J = 1.8 and 9.3 Hz), 4.05-3.80 (m, 4H, 8a-CH2 ₎ ( 1H), CH 2 CH = CH (2H) and H-5j, 3.75 (d, 1H, 8a-CH ₂ (1H), J = 9.3 Hz), 3.20 (dd, 1H, H-4) ', J = 3.0 and 9.3 Hz), 2.72 (t, 1 H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.58 (s, 3H, _CH3 s), 1.68 (m, 3H, CH 3 CH = CH).

Medziprodukt 35Intermediate 35

Príprava difenyImetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3aβ,4β,4ap,7β, 7aa , 83β) ] -8a- [ (2,6-dideoxy-3.-0- (metyltio) -tiokarbonyl-4-Οpropargyl - β - D-alopyranosyloxy) metyl ] - 4-f o.rmyl-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylImethyl ester [1R- (Ια, 3αβ, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 83β)] -8α- [(2,6-dideoxy-3-O- (methylthio) -thiocarbonyl-4-β-propargyl-β - D-alopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane- p-indacén3a- (1H) -carboxylic acid

K chladenému roztoku 1,25 g medziproduktu 32, ktoréhoTo a cooled solution of 1.25 g of intermediate 32 of which

príprava je opísaná vyššie, v 25 ml bezvodého tetrahydrofuránu, bolo pridaných v atmosfére dusíka po malých častiach 0,2 g hydridu sodného a katalytické množstvo imidazolu. Po odstránení ľadom chladeného kúpeľa bola vzniknutá reakčná zmes miešaná pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Potom bolo k zmesi pridaných postupne 0,6 ml sulfidu uhličitého a 0,75 ml metyljodídu.the preparation as described above, in 25 ml of anhydrous tetrahydrofuran, was added in small portions 0.2 g of sodium hydride and a catalytic amount of imidazole under nitrogen. After removal of the ice-cooled bath, the resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour. Then, 0.6 ml of carbon disulfide and 0.75 ml of methyl iodide were added successively.

Hneď ako bola reakcia skončená (kontrola chromatografiou na tenkej vrstve), bola surová zmes naliata do 400 ml etylacetátu a reakcia bola potom prerušená pridaním 500 ml 1 M vodného roztoku chloridu amónneho. Oddelená organická fáza bola potom postupne premytá 200 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 200 ml 5%-ného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a 200 ml soľanky, potom bola vysušená bezvodým síranom sodným, prefiltrovaná a za vákua bola zahustená .Once the reaction was complete (thin layer chromatography control), the crude mixture was poured into 400 mL of ethyl acetate and the reaction was then quenched by the addition of 500 mL of 1 M aqueous ammonium chloride solution. The separated organic phase was then washed successively with 200 ml of 1 M hydrochloric acid solution, 200 ml of 5% aqueous sodium hydrogen carbonate solution and 200 ml of brine, then dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated in vacuo.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (97:3 a 95:5), ako elučného činidla.The residue was flash chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (97: 3 and 95: 5) as eluent.

Bolo získaných 1,20 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.1.20 g of the title compound was obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI₃): 9,73 (s, 1 H, CHO), 7,45-7,26 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1 H, •CHPh₂), 6,28 (q, 1 H, H-3', J=3,3 Hz), 6,06 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,57 (dd, 1H, H-ľ, J=1,8 a 9,3 Hz), 4,19 a 4,17 (2d, 2H, CH^CH, J=2,4 Hz), 4,03 a 3,70 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 3,86 (dq, 1H, H-5‘, J=6,3 a 9,3 Hz), 3,50 (dd, 1H, H-4’, J=3,0 a 9,3 Hz), 2,73 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,58 (s, 3H, CH3S), 2.42 (t, 1H,C=CH).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.45-7.26 (m, 10H, 2 Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh ₂ •). 6.28 (q, 1H, H-3 ', J = 3.3 Hz), 6.06 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.57 ( dd, 1H, H-1 ', J = 1.8 and 9.3 Hz), 4.19 and 4.17 (2d, 2H, CH 2 CH, J = 2.4 Hz), 4.03 and 3, 70 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.3 Hz), 3.86 (dq, 1H, H-5 ', J = 6.3 and 9.3 Hz), 3.50 (dd, 1 H, H-4 ', J = 3.0 and 9.3 Hz), 2.73 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.58 (s, 3H, CH 3 S), 2.42 (t, 1H, C.dbd.CH).

Medziprodukt 36Intermediate 36

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3αβ,4β,4αβ,7β, 7aa , 8πβ) ]-8a-[ (4-0 - (3-metyl-2-butenyl) - 2,6-d:i.deoxy-3-0(metyltio)-tiokarbonyl^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)-1,4metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7aa, 8πβ)] -8a- [(4-0- (3-methyl-2-butenyl) -2,6-dioxyoxy) -3-0 (methylthio) thiocarbonyl -D-allopyranosyloxy) methyl] -4-formyl4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-1methylethyl) - 1,4metán-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 770 mg medziproduktu 33, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml vysušeného tetrahydrofuránu, bolo pridaných pri teplote 0 °C v atmosfére dusíka 105 mg hydridu sodného a 30 mg imidazolu. Potom, čo bola reakčná zmes miešaná po dobu 1 hodiny pri teplote miestnosti, bolo postupne pridaných 300 μΐ sulfidu uhličitého a 311 μΐ metyljodidu. Potom bola zmes ešte 1 hodinu miešaná a reakcia bola skončeTo a solution of 770 mg of intermediate 33, as described above, in 15 ml of dried tetrahydrofuran was added at 0 ° C under nitrogen atmosphere 105 mg of sodium hydride and 30 mg of imidazole. After stirring the reaction mixture for 1 hour at room temperature, 300 μΐ of carbon disulfide and 311 μΐ of methyl iodide were added successively. The mixture was stirred for 1 hour and the reaction was complete

ná pridaním 50 ml 0,1 M roztoku chloridu amónneho a zmes bola vytrepaná 2 x 200 ml etylacetátu, potom bola vysušená síranom horečnatým a následne zahustená.50 ml of 0.1 M ammonium chloride solution was added and the mixture was extracted with 2 x 200 ml of ethyl acetate, then dried over magnesium sulfate and then concentrated.

Získaný zvyšok vo forme olej ovitej konzistencie bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexány (1:25 a 1:20) ako elučného činidla.The obtained oil-like residue was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexanes (1:25 and 1:20) as eluent.

Bolo získaných 780 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny (výťažok 90 %).780 mg of the title compound was obtained as a white foam (yield 90%).

δ (¹H, CDCI₃): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,26 (m, 1H, H3‘), 6,06 (dd, 1H. H2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,26 (m, 1H, OCH₂CH=), 4_f54 (dd, 1H, ΗΓ, J=1_f8 a 9,6 Hz), 4,10-3,75 (m, 4H, 8aCH₂+OCH₂C=+H5')_I 3,69 (d, 1 H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 3,18 (dd, 1 H. H4’, J=3 a 9,3 Hz), 2,72 (t, 1 H, H1, J=3,9 Hz), 2,58 (s, 3H, SCH3).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.26 (m, 1H, H 3 '), 6.06 (dd, 1H, H 2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 5.26 (m, 1H, OCH ₂ CH =), 4 _f 54 (dd) , 1 H, ΗΓ, J = 8 and 1 _F 9.6 Hz), 4.10-3.75 (m, 4 H, 8aCHa _{2-OCH 2} C = + H5 ') _I 3.69 (d, 1H, ₂ 8aCHa, J = 9.6 Hz), 3.18 (dd, 1H, H4 ', J = 3 and 9.3 Hz), 2.72 (t, 1H, H1, J = 3.9 Hz 2.58 (s, 3H, SCH 3).

Medziprodukty 37 a 38Intermediates 37 and 38

a) Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap, 7β,7aa,8aβ)]-8a-[[lS,4R,7R,9R]-2,8-dioxa-4-etyl-9-metylc.is-bicyklo[ 3.4.0] - non-7-yl-oxymetyl ] - 4-formyl-4,4a, 5,6 , 7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)-1,4-metán-sindacén-3a-(1H)-karboxylovej aa) Preparation of [1R- (1α, 3α, 4α, 4β, 4α, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4-ethyl-9- methylcis-bicyclo [3.4.0] non-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6, 7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1 -methylethyl) -1,4-methanesindacene-3a- (1H) -carboxylic acid; and

b) difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3aβ,4β,4aβ,7β,7aa, 8ηβ)]-8a-[[1S,4S,7R,9R]-2,8-dioxa-4-etyl-9-metyl-cisbicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahyd.ro-7-metyl-3- (1-metyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejb) Diphenylmethyl [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 4S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4-ethyl-9-methyl] -cisbicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1- methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

Roztok 1,04 g medziproduktu 34, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 50 ml vysušeného toluénu, bol odplyňovaný v prúde argónu po dobu 60 minút a potom bol zahrievaný za refluxu pod spätným chladičom po dobu 1 hodiny. Potom boloA solution of 1.04 g of intermediate 34, as described above, in 50 ml of dried toluene was degassed in a stream of argon for 60 minutes and then heated under reflux for 1 hour. Then it was

k reakčnej zmesi pridaných 0,55 ml tributylstaniumhydridu a katalytické množstvo azobis(izobutyronitrilu) a reakčná zmes bola ďalej zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom ďalších 20 minút. Potom bola zmes ochladená a zahustená.0.55 ml of tributyltin hydride and a catalytic amount of azobis (isobutyronitrile) were added to the reaction mixture, and the reaction mixture was further heated under reflux for a further 20 minutes. The mixture was then cooled and concentrated.

Zvyšok bol spracovaný 2 x rýchlou chromatografiou na silikagéli najskôr za použitia hexánu a potom zmesi hexán-etylacetát (94:6) ako elučných činidiel.The residue was chromatographed twice on silica gel using hexane and then hexane-ethyl acetate (94: 6) as eluents.

Bolo získaných 220 mg medziproduktu 37, vo .forme bielej peny (Rf = 0,32, hexán-etylacetát (4:1)) a ďalej bolo získaných 444 mg medziproduktu 38, vo forme bielej tuhej látky (Rf = 0,27, hexán-etylacetát (4:1)).220 mg of intermediate 37 was obtained as a white foam (Rf = 0.32, hexane-ethyl acetate (4: 1)) and 444 mg of intermediate 38 was further obtained as a white solid (Rf = 0.27, hexane). ethyl acetate (4: 1)).

Medziprodukt 37 δ (¹H, CDCI₃): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,45-7,26 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,50 (dd, 1 H, H-7', J=2,7 a 6,9 Hz), 4,06 a 3,38 (2dd, 2H, CH₂-3', J=8,4 a 7,5 Hz),4,01 a 3,65 ( 2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,0 Hz), 3,71 (dd, 1H, H-ľ, J=7,5 a 9,0 Hz), 3,34 (m, 1H, H-9'), 2_r75 (t, 1H, H-1), 0,93 (t, 3H, CH3CH₂, J=7,5 Hz).Intermediate 37 δ ( ¹ H, CDCl ₃ ): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.45-7.26 (m, 10H, 2Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6 .06 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.50 (dd, 1H, H-7 ', J = 2.7 and 6.9 Hz), 4.06 and 3.38 (2 dd, 2H, _CH2 -3 ', J = 8.4 and 7.5 Hz), 4.01 and 3.65 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9 0.1 Hz), 3.71 (dd, 1H, H-1 ', J = 7.5 and 9.0 Hz), 3.34 (m, 1H, H-9'), 2 _r 75 (t, 1H H-1) 0.93 (t, 3H, CH ₃ CH ₂ , J = 7.5 Hz).

Medziprodukt 38 δ (¹H, CDCI₃): 9,74 (s, 1H, CHO), 7,45-7,26 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,04 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,73 (t, 1H, H-7', J=3,0 Hz), 3,92 (m, 2H, 8a-CH₂(1H) a CH₂-3'(1H)), 3,75 (m, 2H, H-9* a H-ľ). 3,62 (d, 1H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 3,48 (m, 1H, CH₂-3' (1 H)), 2,71 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz), 2,55 a 2,23 (2m, 3H, H-4’, H-5' a ’ 3-CH), 0.96 (m, 3H, CH3CH2).Intermediate 38 δ ( ¹ H, CDCl ₃ ): 9.74 (s, 1H, CHO), 7.45-7.26 (m, 10H, 2Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6 0.04 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.73 (t, 1H, H-7 ', J = 3.0 Hz), 3.92 (m, 2H, _8a-CH2 (1H) and _CH2 -3 '(1H)), 3.75 (m, 2H, H-9 and H * L). 3.62 (d, 1 H, _8a-CH2, J = 9.3 Hz), 3.48 (m, 1H, _CH2 -3 '(1H)), 2.71 (t, 1 H, H 1, J = 3.6 Hz), 2.55 and 2.23 (2m, 3H, H-4 ', H-5' and '3-CH), 0.96 (m, 3H, CH 3 CH 2).

Medziprodukty 39 a 40Intermediates 39 and 40

a) Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4a£, 7β,7ηα,8ηβ) ]-8a-[ [lS,4R,7R,9R]-2,8-d.ioxa-4 - (1 - mety lety 1) 9 -me tyl -cis- bicyk’lo [3.4.0] - non - 7-yl- oxymetyl ] - 4 - f or myl - 4 , 4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7-metyl-3- (1 - met y lety 1) -1,4metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej a(a) Preparation of diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4α, 7β, 7ηα, 8ηβ)] -8α- [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxiox-4 - ( 1-methyl-1) 9-methyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-methyl-4, 4a, 5,6,7,7a, 8 8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methyl-1) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid and

b) difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β,7aa, 8ηβ)]-8a-[[lS,4S,7R,9R]-2,8-dioxa-4-(1-metylety1)-9metyl-cis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-formyl4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej(b) Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 4S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4- (1-methylethyl)] -9-methyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1- methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Roztok 780 mg medziproduktu 36, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 50 ml vysušeného toluénu, bol odplyňovaný v prúde argónu po dobu 1,0 hodiny a potom bol zahrievaný za refluxu pod spätným chladičom. Potom bolo k reakčnej zmesi pridaných 367 μΐ tributylstaniumhydridu a katalytické množstvo (20 mg) a,a’-azoizobutyronitrilu a reakčná zmes bola ďalej zahrievaná pod spätným chladičom ešte 2 hodiny. Potom bola zmes ochladená na teplotu miestnosti a rozpúšťadlo bolo odstránené.A solution of 780 mg of intermediate 36, as described above, in 50 ml of dried toluene, was degassed under a stream of argon for 1.0 hour and then heated to reflux. Then, 367 μΐ of tributyltin hydride and a catalytic amount (20 mg) of α, α'-azoisobutyronitrile were added to the reaction mixture, and the reaction mixture was further refluxed for 2 hours. The mixture was cooled to room temperature and the solvent was removed.

Získaný zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (25:1, 20:1, 18:1 a 15:1) .The obtained residue was flash chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (25: 1, 20: 1, 18: 1 and 15: 1).

Bolo získaných 280 mg medziproduktu 39 (výťažok 41 %) a ďalej bolo získaných 300 mg medziproduktu 40 (výťažok 44 %). Oba medziprodukty boli získaní vo forme látky olej ovitej konzistencie.280 mg of intermediate 39 were obtained (yield 41%) and further 300 mg of intermediate 40 were obtained (yield 44%). Both intermediates were obtained as an oily consistency.

Rf medziproduktu 39 = 0,50 a Rf medziproduktu 40 = 0, (za použitia zmesi hexány-etylacetát (objem/objem) 3:1)). Medziprodukt 39 δ (¹H, CDCI3): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6_r05(dd, 1H, H2, J=1,2a 3,6 Hz), 4,57 (dd, 1H, H7', J=2,7 a 5,7 Hz), 4,053,90 (m, 2H, H3'+8aCH₂), 3,73 (dd, 1 H, Hľ, J=8,1 a 9,3 Hz), 3,62 (d, 1H, 8aCH₂, J=9 Hz),. 3,50-3,45 (m, 2H, H3’+H9’), 2,74 (t, 1H, H1, J=3,9 Hz).Rf of intermediate 39 = 0.50 and Rf of intermediate 40 = 0 (using hexanes-ethyl acetate 3: 1). Intermediate 39 δ ( ¹ H, CDCl 3): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 10H, 2Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6 _years Δ (dd, 1H, H 2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.57 (dd, 1H, H 7 ', J = 2.7 and 5.7 Hz), 4,053.90 (m, 2H, H3 '+ ₂ 8aCHa), 3.73 (dd, 1H, H, J = 8.1 and 9.3 Hz), 3.62 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9 Hz) ,. 3.50-3.45 (m, 2H, H 3 '+ H 9'), 2.74 (t, 1H, H 1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 40 δ (¹ H, CDCI3): 9,74 (s, 1H, CHO), 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,03 (dd, 1H, H2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,74 (t, 1H, H7', J=3 Hz), 4,0-3,8 (m, 8aCH₂+H9'+H3'), 3,73 (dd, 1H, Hľ, J=3,3 a 4,5 Hz), 3,63 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 3,52 (dd, 1H, H3', J=8,1 a 10,5 Hz), 2,70 (t, 1H, H1, J=3,9 Hz).Intermediate 40 δ ( ¹ H, CDCl 3): 9.74 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 10H, 2Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6, O 3 (dd, 1H, H 2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 4.74 (t, 1H, H 7 ', J = 3 Hz), 4.0-3.8 (m, 8aCH ₂ +) H9 '+ H3'), 3.73 (dd, 1 H, H, J = 3.3 and 4.5 Hz), 3.63 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.6 Hz), 3. 52 (dd, 1H, H 3 ', J = 8.1 and 10.5 Hz), 2.70 (t, 1H, H 1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 41Intermediate 41

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ 1R- (Ια,3ηβ,4β,4aP,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[[1S,7R,9R]-2,8-dioxa-4-metylén-9-metyl-cisbicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8, 8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4β, 4aP, 7β, 7aa, 8aβ)] - diphenylmethyl ester - 8a - [[1S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4-methylene-9-methyl-cisbicyclo [ 3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1, 4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Roztok 1,02 g medziproduktu 35, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 50 ml vysušeného toluénu, bol odplyňovaný v prúde argónu za použitia refluxu po dobu 1 hodiny. Potom bolo k reakčnej zmesi pridaných 0,55 ml tributylstaniumhydridu a katalytické množstvo azobis(izobutyronitrilu) a reakčná zmes bola ďalej zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom ešte 1 ďalšiu hodinu. Potom bola zmes ochladená a zahustená.A solution of 1.02 g of intermediate 35, as described above, in 50 ml of dried toluene was degassed in a stream of argon using reflux for 1 hour. Then, 0.55 ml of tributyltin hydride and a catalytic amount of azobis (isobutyronitrile) were added to the reaction mixture, and the reaction mixture was further heated under reflux for a further 1 hour. The mixture was then cooled and concentrated.

Zvyšok bol spracovaný 2 x rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia najskôr hexánu a potom zmesi hexán-etylacetát (94:6) ako elučného činidla.The residue was chromatographed twice on silica gel using hexane followed by hexane-ethyl acetate (94: 6) as eluent.

V nadpise uvedená žiadaná čistá zlúčenina bola získaná v množstve 380 mg vo forme bielej peny.The title compound (380 mg) was obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI₃): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,44-7,28 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,5a 3,6 Hz), 5,07 a 5,02 (2dd, 2H, CH^C,δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.44-7.28 (m, 10H, 2 Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6.05 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5.07 and 5.02 (2dd, 2H, CH 2 C,

J=2,4 a 4,8 Hz), 4,49-4,31 (m, 3H, H-7' as CH₂-3'), 3,95 a 3,66 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 3,80 (dd, 1 H, H-Γ, J=7,5 a 9,3 Hz), 3,26 (m, 1H, H-9'), 3_f02 (m, 1H, H-5’), 2,76 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,4 (CHO), 171,0 (COODPM), 148,8 a 148,3 (C-3 a C-4'), 139,5 a 139,4 (2 CIV Ph), 130,7 (C-2), 128,6, 128,5, 128,2, 128,0, 127,7 a 127,0 (2 x 5CH(Ph)), 103,9 (CH₂=C), 98,3 (C-7’), 80,4 a 69,5 (C-ľ a C-9'), 78,5 (CHPh₂), 73,9 a 70,6 (C8a-C a C-3 j.J = 2.4 and 4.8 Hz), 4.49 to 4.31 (m, 3H, H-7 'and _CH2 -3'), 3.95 and 3.66 (2d, 2H, 8a CH ₂ , J = 9.3 Hz), 3.80 (dd, 1H, H-Γ, J = 7.5 and 9.3 Hz), 3.26 (m, 1H, H-9 '), 3 _f 02 (m, 1 H, H-5 '), 2.76 (t, 1 H, H-1, J = 3.9 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.4 (CHO), 171.0 (COODPM), 148.8 and 148.3 (C-3 and C-4 '), 139.5 and 139.4 (2 CIV) Ph), 130.7 (C-2), 128.6, 128.5, 128.2, 128.0, 127.7 and 127.0 (2 x 5CH (Ph)), 103.9 (CH ₂₎ = C), 98.3 (C-7 '), 80.4 and 69.5 (C-1' and C-9 '), 78.5 (CHPh ₂ ), 73.9 and 70.6 (C8-). C and C-3 i.

Medziprodukt 42Intermediate 42

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4aP,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[[lS,7R,9R]-2,8-dioxa-9-metyl-4-metylén-3-oxocis-bicykΙο[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7, 7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4aP, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-9-methyl-4-methylene-3- oxocis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7, 7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) ) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 0,23 g oxidu chrómového a 0,37 ml vysušeného pyridínu vo vysušenom dichlórmetáne (20 ml) bolo pridaných za stáleho miešania pri teplote 0 °C 0,15 g medziproduktu 41, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 3 ml vysušeného dichlórmetánu. Vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti ešte po dobu 6 hodín a potom bola priamo spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia dichlórmetánu ako elučného činidla.To a solution of 0.23 g of chromium trioxide and 0.37 ml of dried pyridine in dried dichloromethane (20 ml) was added, with stirring at 0 ° C, 0.15 g of intermediate 41, as described above, in 3 ml of dried dichloromethane. . The resulting reaction mixture was stirred at room temperature for a further 6 hours and then directly subjected to flash chromatography on silica gel using dichloromethane as eluent.

Bolo získaných 65 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej peny.65 mg of the title compound was obtained as a white foam.

δ (1H, CDCI3): 9,74 (s, 1H, CHO), 7,44-7,25 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,37 a 5,64 (2d, 2H, CH^C), 6,04 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,-47 (dd, 1 H, H-7', J=3,6 a 6,0 Hz), 4,29 (m, 1 H, H-ľ), 4,00 a 3,64 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 3,40 (m, 1H, H-5¹), 3,30 (m, 1H, H-9'), 2,73 (t, 1 H, H-1, J=3_f9 Hz).δ (1H, CDCl 3): 9.74 (s, 1H, CHO), 7.44-7.25 (m, 10H, 2Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6.37 and 5 Δ 64 (2d, 2H, CH ^C), 6.04 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.47 (dd, 1H, H-7) ', J = 3.6, 6.0 Hz), 4.29 (m, 1 H, H-I'), 4.00 and 3.64 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.3 Hz), 3.40 (m, 1 H, ¹ H-5), 3.30 (m, 1 H, H-9 '), 2.73 (t, 1H, H-1, J = 9 Hz, 3 _f ).

Medziprodukt 43Intermediate 43

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3a0,4β,4ap,7β, 7aa,8ββ)]-8a-[[1S,7R,9R]-2,8-dioxa-9-metyl-4-oxo-cis-bicyklo [3.4.0] - non- 7-yl-oxymetyl ] -4-f o.rmyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3a0,4β, 4αp, 7β, 7aa, 8ββ)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-9-methyl-4-oxo-cis- bicyclo [3.4.0] non-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoctahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Postup AProcedure

K ľadom chladnej zmesi 105 mg medziproduktu 41, ktorého príprava je opísaná vyššie a 43 mg N-metylmorfolín-N-oxidu v zmesi acetón-voda (9 ml) pomer 8:1, bolo pridaných 0,075 ml 2,5%-ného roztoku (hmotnostné percentá) oxidu osmičelého v 2-metyl-2-propanole. Po odstavení ľadom chladeného kúpeľa bola reakčná zmes miešaná pri teplote miestnosti po dobu 24 hodín. Reakcia bola potom skončená bisulfitom sodným a reakčná zmes bola miešaná po dobu 1 hodiny. Po skončení tejto operácie bolo rozpúšťadlo odparené a získaný surový zvyšok bol zriedený so 100 ml etylacetátu a potom bol postupne premytý 30 ml vody, 30 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 30 ml nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a nakoniec 30 ml vody, potom bol roztok vysušený a odparený.To the ice-cold mixture of 105 mg of intermediate 41 described above and 43 mg of N-methylmorpholine-N-oxide in an acetone-water (9 mL) ratio of 8: 1 was added 0.075 mL of a 2.5% solution ( % by weight) of osmium tetroxide in 2-methyl-2-propanol. After removing the ice-cooled bath, the reaction mixture was stirred at room temperature for 24 hours. The reaction was then quenched with sodium bisulfite and stirred for 1 hour. At the end of this operation, the solvent was evaporated and the crude residue was diluted with 100 ml of ethyl acetate and then washed successively with 30 ml of water, 30 ml of 1 M hydrochloric acid solution, 30 ml of saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution and finally 30 ml of water. dried and evaporated.

Surový produkt bol rozpustený v 6 ml zmesi dioxán-voda (2:1) a potom bol ochladený na teplotu 0 C. Po pridaní 0,13 g jod.istanu sodného (po malých častiach) bola reakčná zmes miešaná po dobu 6 hodín pri postupnom zvyšovaní teploty z O °C na teplotu miestnosti. Potom bola zmes zahustená a surový produkt bol vytrepaný medzi 60 ml vody a 60 ml etylacetátu. Po oddelení bola organická fáza vysušená a zahustená a takto získaný zvyšok bol prečistený rýchlou chro matograf iou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (85:15) ako elučného činidla.The crude product was dissolved in 6 mL of dioxane-water (2: 1) and then cooled to 0 ° C. After addition of 0.13 g of sodium periodate (in small portions), the reaction mixture was stirred for 6 hours with increasing the temperature from 0 ° C to room temperature. The mixture was then concentrated and the crude product was partitioned between 60 mL of water and 60 mL of ethyl acetate. After separation, the organic phase was dried and concentrated and the residue thus obtained was purified by flash chromatography on silica gel using hexane-ethyl acetate (85:15) as eluent.

Bolo získaných 0,045 g žiadanej, zlúčeniny.0.045 g of the desired compound was obtained.

v nadpise uvedenejin the title above

Postup BProcedure B

K roztoku 0,43 ml anhydridu kyseliny trifluóroctovej v 2,5 ml vysušeného dichlórmetánu bol pridaný v atmosfére dusíka pri teplote -60 °C a za intenzívneho miešania dimetylsulfoxid (0,22 ml). Po 10 minútach bol k tomuto roztoku pridaný roztok 470 mg medziproduktu 79, ktorého príprava je opísaná ďalej, v 2,5 ml vysušeného dichlórmetánu a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote -60 °C po dobu 2 hodín. Potom bolo pridaných počas 10 minút k zmesi 1,4 ml trietylamínu (po kvapkách) a teplota bola ponechaná, aby samovoľne vystúpila na -20 °C. Po pridaní 20 ml vody bola reakčná zmes miešaná pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny a potom bola vytrepaná a vodná vrstva bola extrahovaná 100To a solution of 0.43 mL of trifluoroacetic anhydride in 2.5 mL of dried dichloromethane was added dimethylsulfoxide (0.22 mL) under nitrogen at -60 ° C with vigorous stirring. After 10 minutes, to this solution was added a solution of 470 mg of intermediate 79, the preparation of which is described below, in 2.5 ml of dried dichloromethane, and the resulting reaction mixture was stirred at -60 ° C for 2 hours. 1.4 ml of triethylamine (dropwise) were then added to the mixture over 10 minutes and the temperature was allowed to rise to -20 ° C spontaneously. After addition of 20 ml of water, the reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour and then shaken and the aqueous layer was extracted with 100 ml.

ml dichlórmetánu.ml of dichloromethane.

Spojené organické fázy boli premyté 100 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 100 ml nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a 100 ml soľanky, potom boli vysušené síranom horečnatým a zahustené do sucha na produkt olej ovitej konzistencie, ktorý bol rozpustený v dichlórmetáne a cez noc bol reagovaný s 1 ml trietylamínu.The combined organic phases were washed with 100 ml of 1M hydrochloric acid solution, 100 ml of saturated aqueous sodium bicarbonate solution and 100 ml of brine, then dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness to an oily product which was dissolved in dichloromethane and reacted overnight. with 1 ml triethylamine.

Po odstránení rozpúšťadiel bola výsledná látka olej ovitej konzistencie spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesí etylacetát-hexán (1:25, 1:20 a 1:15) ako elučných činidiel.After removal of the solvents, the resulting oily consistency was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (1:25, 1:20 and 1:15) as eluents.

Bolo získaných 400 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny (výťažok 86 %).400 mg of the title compound are obtained (yield 86%).

δ (¹Η, CDCI₃): 9,71 (s, 1 Η, CHO), 7,44-7,26 (m, 10H, 2Ph), 6,97 (s, 1H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,18-4,11 (m, 3H, H-7', H-ľ a H-3'(1H), 4,00 a 3,62 (2d, 1H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 3,91 (d, 1H, H-3', J=18 Hz), 3,30 (m, 1H, H-9'), 2,85 (bt, 1H, H-5', J=7,8 Hz), 2,75 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz).δ ⁽¹ Η, _CDCl3): 9.71 (s, 1 Η, CHO), 7.44-7.26 (m, 10H, 2 Ph), 6.97 (s, 1H, CHPh _2), 6, Δ (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.18-4.11 (m, 3H, H-7 ', H-1' and H-3 '(1H) , 4.00 and 3.62 (2d, 1H, _8a-CH2, J = 9.3 Hz), 3.91 (d, 1 H, H-3 ', J = 18 Hz), 3.30 (m 1 H, H-9 '), 2.85 (bt, 1H, H-5', J = 7.8 Hz), 2.75 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 44Intermediate 44

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3a3,4β,4ap,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(4-0-(trans-2-butenyl)-6-deoxy^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3a3,4β, 4αp, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(4-O- (trans-2-butenyl) -6-deoxy-4-D-altropyranosyloxy) methyl] 4-formy1-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Suspenzia 5 g medziproduktu 1, ktorého príprava je opísaná vyššie a 2,3 g dibutylstaniumoxidu v 300 ml vysušeného toluénu, boli zahrievané za .refluxu pod spätným chladičom v banke vybavenej Dean-Starkovým kondenzátorom v atmosfére dusíka po dobu 3 hodín. Po ochladení reakčnej zmesi na teplotu 60 °C boli postupne pridané: molekulové sito (vo forme prášku, 4), 2,40 ml krotylbromidu a 23 ml 1 M roztoku tetrabutylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne. Táto zmes bola zahrievaná na teplotu 60 °C po dobu 1 hodiny a potom ešte 12 hodín ponechaná stáť v pokoji pri teplote miestnosti.A suspension of 5 g of intermediate 1 as described above and 2.3 g of dibutyltin oxide in 300 ml of dried toluene was heated to reflux in a flask equipped with a Dean-Stark condenser under nitrogen for 3 hours. After cooling the reaction mixture to 60 ° C, molecular sieves (as powder, 4), 2.40 ml of crotyl bromide and 23 ml of a 1 M solution of tetrabutylammonium fluoride in tetrahydrofuran were added successively. The mixture was heated to 60 ° C for 1 hour and then allowed to stand at room temperature for 12 hours.

Po odparení rozpúšťadla bol zvyšok chromatografovaný za použitia zmesi počínajúc hexánom až k zmesi hexán-acetón (9: 1) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent, the residue was chromatographed using hexane to hexane-acetone (9: 1) as eluent.

Bolo získaných 3,2 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej peny.3.2 g of the title compound are obtained in the form of a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,45-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6_f05 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,8-5,65 (m, 1H, CH=CH), 5,65-5,5 (m, 1H, CH=CH), 4,63 (d, 1H, H-ľ, J=0,9 Hz), 4,2-3,8 (m, 5H, H-2', H-3', 8aCHa a O-CH2-C=C), 3,8-3,65 (m, 2H, H-5', 8aCHb), 3,6 (dd, 1 H, H-4', J=3 a 9,3 Hz), 2,74 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 1,71 (dd, 3H, CH₃-C=C, J=1,2 a 6,3 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.45-7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6 _F 05 ( dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5.8-5.65 (m, 1H, CH-CH), 5.65-5.5 (m, 1H, CH = CH), 4.63 (d, 1H, H-1 ', J = 0.9 Hz), 4.2-3.8 (m, 5H, H-2', H-3 ', 8aCH 3 and O- CH 2 -C = C), 3.8-3.65 (m, 2H, H-5 ', 8aCHb), 3.6 (dd, 1H, H-4', J = 3 and 9.3 Hz) 2.74 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 1.71 (dd, 3H, CH ₃ -C =C, J = 1.2 and 6.3 Hz).

Medziprodukt 45, 46 a 47Intermediate 45, 46 and 47

a) Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap, 7β,7aa,83β)]-8a-[(2,3-anhydro-4-0-(trans-2-butenyl)-6deoxy^-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-sindacén-3a-(1H)-karboxylovej a(a) Preparation of diphenylmethyl ester [1R- (1a, 3ap, 4β, 4ap, 7β, 7aa, 83β)] - 8a - [(2,3-anhydro-4-O- (trans-2-butenyl) -6-deoxy) - D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanesindacen-3a - (1H) -carboxylic acid a

b) difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,33β,4β,43β,7β,7aa, 83β)]-8a-[[1S,4S,6S,7R,9R]-2,8-dioxa-4-etyl-6-hydroxy-9metyl-cis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]-4-formyl-4, 4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej a(b) Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 33β, 4β, 43β, 7β, 7aa, 83β)] - 8α - [[1S, 4S, 6S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4-ethyl-6 -hydroxy-9-methyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl -3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid; and

c) difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3aβ,4β,4ηβ,7β,7aa, 83β)]- 8a-[[lS,4R,6S,7R,9R]-2,8-dioxa-4-etyl-6-hydroxy-9mety1-cis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]-4-formyl-4, 4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejc) Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3αβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 83β)] - 8α - [[1S, 4R, 6S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4-ethyl-6 -hydroxy-9-methyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl 3- (l-methylethyl) -1,4metán-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Medziprodukt 44 (1,225 g), ktorého príprava je opísaná vyššie, 1,38 g trifenyIfosfínu a 0,36 g imidazolu boli za stáleho miešania zahrievané za refluxu pod spätným chladičom v 35 ml toluénu. K tejto zmesi bol počas 2 hodín pridaný po kvapkách roztok 0,89 g jódu v 15 ml toluénu a potom ešte 0,2 g tetrabutylamóniumjodídu a reakčná zmes bola zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom ešte ďalšiu 1 hodinu, potom bola ochladená a vytrepaná medzi 100 ml etylacetátu a 50 ml 1 M vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej.Intermediate 44 (1.225 g) described above, 1.38 g of triphenylphosphine and 0.36 g of imidazole were heated under reflux in 35 ml of toluene with stirring. To this mixture was added dropwise a solution of 0.89 g of iodine in 15 ml of toluene over 2 hours, followed by 0.2 g of tetrabutylammonium iodide, and the reaction mixture was heated at reflux for a further 1 hour, then cooled and shaken between 100 ml. ml of ethyl acetate and 50 ml of a 1 M aqueous hydrochloric acid solution.

Oddelená organická fáza bola postupne premytá 1 M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej, vodou, vodným roztokom disiričitanu sodného, vodou a soľankou a potom bola vysušená síranom sodným, prefiltrovaná a za vákua bola zahustená .The separated organic phase was washed successively with 1 M aqueous hydrochloric acid solution, water, aqueous sodium metabisulphite solution, water and brine, and then dried over sodium sulfate, filtered and concentrated in vacuo.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (7:1) ako elučného činidla.The residue was flash chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (7: 1) as eluent.

Bola získaná zmes 1,08 g dvoch zlúčenín v pomere 2:1 s veľmi podobným Rf, t.j. 0,4 (hexán-etylacetát/4:1).A mixture of 1.08 g of two compounds in a ratio of 2: 1 with a very similar Rf was obtained, i. 0.4 (hexane-ethyl acetate / 4: 1).

Vyššie zmienená zmes dvoch zlúčenín bola rozpustená v 25 ml vysušeného toluénu a vzniknutý roztok bol po dobu 1 hodiny odplyňovaný v prúde argónu a potom bol zahriaty do refluxu pod spätným chladičom. Potom bolo k roztoku pridaných 0,36 ml tributylstaniumhydridu a zmes bola zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom ešte 20 minút. Po ochladení boli k reakčnej zmesi pridané 2 ml tetrachlórmetánu a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Potom bol k zmesi pridávaný roztok jódu v éteri tak dlho, pokial pretrvávalo sotva viditeľné zafarbenie.The above mixture of the two compounds was dissolved in 25 mL of dried toluene, and the resulting solution was degassed under argon for 1 hour and then heated to reflux. Then, 0.36 ml of tributyltin hydride was added to the solution, and the mixture was refluxed for 20 minutes. After cooling, 2 mL of carbon tetrachloride was added to the reaction mixture, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. A solution of iodine in ether was then added to the mixture as long as the barely visible color remained.

Po odstránení rozpúšťadiel za vákua bol zvyšok vybratý do dietyléteru a potom niekolkokrát premytý nasýteným vodným roztokom fluoridu draselného, až už nebolo zrejmé vyzrážanie tributylstaniumfluoridu.After removal of the solvents under vacuum, the residue was taken up in diethyl ether and then washed several times with saturated aqueous potassium fluoride solution until precipitation of tributyltin fluoride was no longer apparent.

Oddelená vodná vrstva bola vysušená a odparená a zvyšok bol spracovaný 2 x rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-etylacetát 95:5 a 9:1 ako elučného činidla.The separated aqueous layer was dried and evaporated and the residue was chromatographed twice on silica gel using dichloromethane-ethyl acetate 95: 5 and 9: 1 as eluent.

Bolo získaných 230 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny , označenej a), t.j. medziprodukt 47 (Rf = 0,8, dichlórmetán-etylacetát/9:1) a 275 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, označenej b), t.j. medziprodukt 45 (Rf = 0,50, dichlórmetán-etylacetát/9:1) a 200 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, označenej c), i·j· medziprodukt 46 (Rf = 0,40, dichló.rmetán-etylacetát/9:1) . Medziprodukt 45 δ (¹H, CDCI3): 9,72 (s, 1H, CHO), 7,46-7,23 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,61 (d, 1 H, H-7', J=3,3 Hz), 4,03 (d, 1H, 8a-CHa, J=9,3 Hz), 3,90 (dd, 1H, Ha-3', J=6,9 a 8,7 Hz), 3,82-3,69 (m, 3H, H-6', H-ľ a H-9'), 3,66 (d, 1H, 8a-CHb, J=9,6 Hz), 3,61 (dd, 1H, Hb-3', J=6,6 a 8,4 Hz), 2,B9 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz).230 mg of the title compound (a), i.e. intermediate 47 (Rf = 0.8, dichloromethane-ethyl acetate / 9: 1) and 275 mg of the title compound, (b) i.e. intermediate 45, were obtained. (Rf = 0.50, dichloromethane-ethyl acetate / 9: 1) and 200 mg of the desired title compound, c), intermediate 46 (Rf = 0.40, dichloromethane-ethyl acetate / 9): 1). Intermediate 45 δ ( ¹ H, CDCl 3): 9.72 (s, 1H, CHO), 7.46-7.23 (m, 10H, 2Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6, Δ (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.61 (d, 1H, H-7 ', J = 3.3 Hz), 4.03 (d 1H, 8a-CHa, J = 9.3 Hz), 3.90 (dd, 1H, Ha-3 ', J = 6.9 and 8.7 Hz), 3.82-3.69 (m, 3H, H-6 ', H-1' and H-9 '), 3.66 (d, 1H, 8a-CHb, J = 9.6 Hz), 3.61 (dd, 1H, Hb-3', J = 6.6 and 8.4 Hz), 2.29 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 46 δ (¹H, CDCI3): 9,74 (s, 1H, CHO), 7,45-7,22 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1H, H-2, J=1_r5 a 3,6 Hz), 4,50 (d, 1H, H-7', J=2,1 Hz); 4,14,02 (m, 2H, 8aCHa a Ha-3'), 3,84 (dd, 1 H, H-ľ, J=7,5 a 8,7 Hz), 3,76-3,66 (m, 2H, 8aCHb a H-6'), 3,5-3,38 (m, 2H, H-9* a Hb-3’), 2,72 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 0,94 (t, 3H, CH₂-CH3, J=7,5 Hz).INTERMEDIATE 46 δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.74 (s, 1H, CHO), 7.45-7.22 (m, 10H, 2 Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6, 06 (dd, 1 H, H-2, J = 1 _r 5 and 3.6 Hz), 4.50 (d, 1 H, H-7 ', J = 2.1 Hz); 4.14.02 (m, 2H, 8aCHa and Ha-3 '), 3.84 (dd, 1H, H-1', J = 7.5 and 8.7 Hz), 3.76-3.66 (m, 2H, 8aCHb and H-6 &apos;), 3.5-3.38 (m, 2H, H-9 &apos; and Hb-3 &apos;), 2.72 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 0.94 (t, 3H, _CH2 CH3, J = 7.5 Hz).

1Ô01Ô0

Medziprodukt 47 δ (¹H, CDCI3): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,45-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,08 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,85-5,7 (m, 1 H, CH=CH), 5,65-5,5 (m, 1 H, CH=CH), 4,67 (s, 1 H, H-ľ), 4,2-4,05 (m, 2H, OCHa-C=C a 8aCHa), 4,053,9 (m, 1H, OCHb-C=C), 3,78 (d, 1H, 8aCHb, J=9 Hz), 3,3-3,15 (m, 3H, H-3', H4' a H5'), 3,12 (d, 1H, H-2', J=3,9 Hz), 2,86 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz).Intermediate 47 δ ( ¹ H, CDCl 3): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.45-7.2 (m, 10H, 2Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6, Δ (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5.85-5.7 (m, 1H, CH = CH), 5.65-5.5 (m, 1 H, CH = CH), 4.67 (s, 1H, H-1 '), 4.2-4.05 (m, 2H, OCHa-C = C and 8aCHa), 4,053.9 (m, 1H 3.88 (d, 1H, 8aCHb, J = 9 Hz), 3.3-3.15 (m, 3H, H-3 &apos;, H4 ' and H5 &apos;), 3, 12 (d, 1H, H-2 &apos;, J = 3.9 Hz), 2.86 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 48Intermediate 48

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3a£,4β,4ap,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(6-deoxy-4-0-metyl^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3α, 4α, 4α, 4α, 4α, 7β, 7αa, 8ηβ)] diphenylmethyl ester - 8α - [(6-deoxy-4-O-methyl-4-D-altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl- 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1metylety1) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Roztok 10 g sordarínu v 150 ml dichlórmetánu bol reagovaný s roztokom 85 ml difenyldiazometánu (0,35 M) v dichlórmetáne pridávanom po kvapkách. Vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 24 hodín. Po odparení rozpúšťadla za zníženého tlaku bol získaný zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1) a (2:1) ako elučného činidla.A solution of 10 g of sordarin in 150 ml of dichloromethane was treated with a solution of 85 ml of diphenyldiazomethane (0.35 M) in dichloromethane added dropwise. The resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 24 hours. After evaporation of the solvent under reduced pressure, the residue was purified by flash chromatography on silica gel using hexane-ethyl acetate (4: 1) and (2: 1) as eluent.

Spojené frakcie boli odparené a bolo získaných 11,8 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.The combined fractions were evaporated to give the title compound (11.8 g) as a white foam.

Φ δ (¹H, CDCI3): 10,00 (s, 1H, CHO), 7,63 (m, 10H, 2Ph), 7,26 (s, 1H, CHPh₂),Δ ( ¹ H, CDCl 3): 10.00 (s, 1H, CHO), 7.63 (m, 10H, 2Ph), 7.26 (s, 1H, CHPh ₂ ),

6,30 (dd, 1H, H-2, J=1_r2 a 3,3 Hz), 4,92 (d, 1 H, H-ľ, J=0,9 Hz), 4,84 (t, 1H, H-3', J=3,3 Hz),4_f03 a 4,35 (2d, 2H, 8aCH₂, J= 9 Hz), 3,88 (m, 1 H, H-2'), 3,70 (dq, 1H, H-5', J=6,3 a 9,3 Hz), 3,41 (s, 3H, 4'-0Me), 3,20 (dd, 1H, H-4', J=3_f3 a 9 Hz), 2,75 (t, 1 H, H-1).6.30 (dd, 1 H, H-2, J 1 _R 2, 3.3 Hz), 4.92 (d, 1 H, H ', J = 0.9 Hz), 4.84 (t , 1 H, H-3 ', J = 3.3 Hz), 4 _F 03 and 4.35 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9 Hz), 3.88 (m, 1 H, H-2' 3.70 (dq, 1H, H-5 &apos;, J = 6.3 and 9.3 Hz), 3.41 (s, 3H, 4 ' -Ome), 3.20 (dd, 1H, H) -4 ', J = 3 ₍ 3 and 9 Hz), 2.75 (t, 1H, H-1).

Medziprodukt 49Intermediate 49

a) Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4aβ, 7β,7aa,8ηβ)]-8a-[(6-deoxy-4-0-metyl-2,3-di-0-tosyl^-Daltropyranosyloxy)metyl] -4-.formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovej a(a) Preparation of diphenylmethyl acid [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4aβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(6-deoxy-4-O-methyl-2,3-di-O-tosyl) - Daltropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoctahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a ( 1H) -carboxylic a

101101

b) difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β,7aa, 8aβ)]-8a-[(6-deoxy-4-0-metyl-2-0-tosyl^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl-3-(1-metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)karboxylovejb) [1R- (1α, 3α, 4α, 4α, 4α, 7α, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(6-deoxy-4-O-methyl-2-O-tosyl-4-altropyranosyloxy) methyl] diphenylmethyl ester ] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-1methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) carboxylic acid

V 30 ml vysušeného pyridínu boli rozpustené 2 g medziproduktu 48, ktorého príprava je opísaná vyššie a 500 mg 4-dimetylaminopyridínu a k tomuto roztoku bol pridaný po kvapkách ďalší roztok, pripravený rozpustením 960 mg tosylchloridu v 20 ml vysušeného pyridínu. Vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 4 dní. Po odparení rozpúšťadla za vákua zostal žltý zvyšok, ktorý bol ďalej spracovaný chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1 a 1:1) ako elučného činidla.2 g of intermediate 48 described above and 500 mg of 4-dimethylaminopyridine were dissolved in 30 ml of dried pyridine and another solution prepared by dissolving 960 mg of tosyl chloride in 20 ml of dried pyridine was added dropwise. The resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 4 days. Evaporation of the solvent in vacuo left a yellow residue which was further chromatographed on a silica gel column using hexane-ethyl acetate (4: 1 and 1: 1) as eluent.

Bolo získaných 1,65 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, označenej a), vo forme bielej peny s vyšším R.f a 1,17 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, označenej b), vo forme bielej peny s nižším Rf.1.65 g of the desired title compound (a) was obtained as a white foam with a higher R.f and 1.17 g of the title compound which was designated b) as a white foam with a lower Rf.

Zlúčenina, označená a) (a) δ (¹H, CDCI3): 9,71 (s, 1H, CHO), 7,85-7,91 (m, 4H, ortho-Ts), 7,26-7,41 (m, 14H, meta-Ts a 2 Ph), 6,95 (s, 1H, CO2CHPh2), 5,87 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,92 (dd, 1 H, H-3', J=3,3 a 4,2 Hz), 4,65 (dd, 1 H, H-2', J=1,2 a 4,5 Hz), 4,61 (d, 1H, H-ľ, J=1,2 Hz), 3,50 a 3,94 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,68 (dq, 1 H, H-5', J=6,6 a 9 Hz), 3,16 (dd, 1H, H-4¹, J=3 a 9Hz), 2,78 (s, 3H, 4'-OMé), 2,45 a 2,47 (2s, 6H, 2Ts).The compound, designated a) (a) δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.71 (s, 1H, CHO), 7.85-7.91 (m, 4H, ortho-Ts), 7.26 to 7, 41 (m, 14H, meta-Ts and 2 Ph), 6.95 (s, 1H, CO 2 CHPh 2), 5.87 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4 .92 (dd, 1H, H-3 ', J = 3.3 and 4.2 Hz), 4.65 (dd, 1H, H-2', J = 1.2 and 4.5 Hz) , 4.61 (d, 1 H, H ', J = 1.2 Hz), 3.50 and 3.94 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9 Hz), 3.68 (dq, 1H , H-5 ', J = 6.6 and 9 Hz), 3.16 (dd, 1 H, H-4 ^1, J 3 and 9 Hz), 2.78 (s, 3H, 4'-OMe), 2.45 and 2.47 (2s, 6H, 2Ts).

Zlúčenina, označená b) (b) δ (¹H, CDCI₃): 9,71 (s, 1H, CHO), 7,85 (m, 2H, ortho-Ts), 7,26-7.41 (m, 12H, meta-Ts a 2Ph), 6,95 (s, 1H, CHPh₂), 5,87 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,61 (d, 1H, H-ľ, 3=1,5 Hz), 4,55 (dd, 1 H, H-2’,J=1,2 a 4,2 Hz), 4,37 (m, 1 H, H-3'), 3,50 a 3,95 (2d, 2H, 8aCH₂, J= 9Hz), 3,70 (dq, 1 H, H-5', J=8,4 a 6,3 Hz), 3,23 (dd, 1 H, H-4',J=3,3 s 8,7 Hz), 2,42 (s, 3H, Ts).The compound, called b) (b) δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.71 (s, 1H, CHO), 7.85 (m, 2H, ortho-Ts), 7,26-7.41 (m, 12 H , meta-Ts and 2Ph), 6.95 (s, 1H, CHPh ₂ ), 5.87 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 4.61 (d, 1H, H-1 ', 3 = 1.5 Hz), 4.55 (dd, 1H, H-2', J = 1.2 and 4.2 Hz), 4.37 (m, 1H, H -3 '), 3.50 and 3.95 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9 Hz), 3.70 (dq, 1H, H-5', J = 8.4 and 6.3 Hz) 3.23 (dd, 1H, H-4 ', J = 3.3 with 8.7 Hz), 2.42 (s, 3H, Ts).

102102

Medziprodukt 50Intermediate 50

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ββ,4β,4ap,7β, 7ηα,8αβ)]-8η-[(2,3-anhydro-6-deoxy-4-0-metyl-^-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3ββ, 4β, 4β, 4αp, 7β, 7ηα, 8αβ)] - 8η - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-methyl-4-D-manopyranosyloxy) methyl] ] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1 H) - carboxylic acid

K 50 ml bezvodého metanolu bol pri chladení na teplotu 0 °C pridaný sodík (0,5 g) a potom roztok 670 mg medziproduktu 49a) v 20 ml vysušeného dichlórmetánu. Vzniknutá reakčná zmes bola potom miešaná pri teplote miestnosti po dobu 5 dní a potom ešte 4 dni zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom. Potom bola zmes prefiltrovaná a rozpúšťadlo bolo odparené.Sodium (0.5 g) was added to 50 ml of anhydrous methanol while cooling to 0 ° C, followed by a solution of 670 mg of intermediate 49a) in 20 ml of dried dichloromethane. The resulting reaction mixture was then stirred at room temperature for 5 days and then heated at reflux for 4 days. The mixture was then filtered and the solvent was evaporated.

Získaný zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1), ako elučného činidla .The residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (3: 1) as eluent.

Bolo získaných 330 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .330 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI₃): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,26-7,44 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CO₂CHPh₂), 6,08 (dd, 1H, H-2, J=1,5 ä 3 Hz), 4,68 (s, 1H, H-ľ), 3,78 a 4,11 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,49 (s, 3H, 4'-0Me), 3,26 (d, 1H, H-2’, J=3,9δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.26-7.44 (m, 10H, 2 Ph), 6.99 (s, 1 H, CO ₂ CHPh _2), 6 , 08 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3 Hz), 4.68 (s, 1 H, H-I '), 3.78 and 4.11 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9 Hz), 3.49 (s, 3H, 4'-O Me), 3.26 (d, 1H, H-2 ', J = 3.9

Hz), 3,18 (m, 1H, H-5'), 3,12 (d, 1H, HHz), 3.18 (m, 1H, H-5 '), 3.12 (d, 1H, H

1H, H-ľ).1H, H-1 ').

Medziprodukt 51Intermediate 51

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β, 7aa,8αβ)]-8a-[(2,3-anhydro-6-deoxy-4-0-metyl^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl3- (1-rnetyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a- (1H) -karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8αβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-methyl-4-D-alopyranosyloxy) methyl] -4-Forms of -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methyl-ethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

V 5 ml vysušeného dimetylformamidu bolo nasuspendovaných 25,9 mg suchého hydridu sodného a k takto vzniknutej suspenzii bolo pridaných po kvapkách 470 mg medziproduktu 49b), ktorého príprava je opísaná vyššie, vo vysušenom dimetylformamide a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná po dobu25.9 mg of dry sodium hydride were suspended in 5 ml of dried dimethylformamide and 470 mg of intermediate 49b), prepared as described above, was added dropwise in dried dimethylformamide and the resulting mixture was stirred for

103103

minút pri teplote miestnosti. Potom bola zmes naliata za stáleho miešania do 20 ml ľadom vychladenej vody a vzniknutý roztok bol vytrepaný 3 x 20 ml etylacetátu.minutes at room temperature. The mixture was then poured with stirring into 20 ml of ice-cold water and the resulting solution was washed with 3 x 20 ml of ethyl acetate.

Oddelené organické fázy boli spojené a vysušené bezvodým síranom horečnatým a potom boli rozpúšťadlá odparené.The separated organic phases were combined and dried over anhydrous magnesium sulfate, and then the solvents were evaporated.

Zvyšok, vo forme látky gumovitej konzistencie, bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexánetylacetát (5:1) ako elučného činidla.The residue, as a gum, was purified by flash chromatography using hexane / ethyl acetate (5: 1) as eluent.

Bolo získaných 332 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.332 mg of the title compound was obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,26-7,44 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CO₂CHPh₂), 6,08 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3 Hz), 4,60 (s, 1H, H-ľ), 3,76 a 4,03 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,51 (m, 4H, H-4' a 4’-OMe), 3,33 (m, 3H, Hľ.H-ľa H-5'), 2,80 (m, 1H, H-1).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.26-7.44 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1 H, CO ₂ CHPh _2), 6, Δ (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3 Hz), 4.60 (s, 1H, H-1 '), 3.76 and 4.03 (2d, 2H, 8 and CH ₂ , J) = 9.3 Hz), 3.51 (m, 4H, H-4 'and 4'-OMe), 3.33 (m, 3H, 1H-H and H-5'), 2.80 (m (1H, H-1).

Medziprodukt 52Intermediate 52

Príprava [lR-(la,3ap,4p,4ap,7p,7aa,8ap)]-8a-[(2,3-anhydro-6deoxy-4-0-metyl-β-D-altropyranosyloxy)metyl] -4-fo.rmyl-4,4a, 5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-sindacén-3a-(1H)-karboxylovej kyselinyPreparation of [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αp)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-methyl-β-D-altropyranosyloxy) methyl] -4- F-methyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanesindacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 100 mg medziproduktu 51, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 100 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná v Parrovom autokláve za tlaku 0,105 MPa vodíka pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora boli rozpúšťadlá odparené do sucha a zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) a zmesi dichlórmetán-metanol (15:1) ako elučných činidiel.To a solution of 100 mg of intermediate 51 prepared above in 15 ml of ethyl acetate was added 100 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere, and the resulting mixture was stirred in a Parr autoclave at 0.105 MPa of hydrogen at room temperature. for 1 hour. After filtering off the catalyst, the solvents were evaporated to dryness and the residue was purified by flash chromatography on silica gel using hexane-ethyl acetate (3: 1) and dichloromethane-methanol (15: 1) as eluents.

Príslušné frakcie boli spojené a rozpúšťadlá boli odparené .Appropriate fractions were combined and the solvents were evaporated.

Bolo získaných 70 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme peny.70 mg of the title compound was obtained as a foam.

δ (¹ H, CDCI3): 9,77 (s, 1 H, CHO), 6,09 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,67 (d, 1H, H-ľ, J=0,9 Hz), 3,58 a 4,17 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 3,51 (m, 4H, H-3’δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.77 (s, 1H, CHO), 6.09 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.67 (d , 1 H, H ', J = 0.9 Hz), 3.58 and 4.17 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9.6 Hz), 3.51 (m, 4 H, H-3'

104 a 4'-OMe), 3,38 (m, 1H, H-5‘), 3,34 (d, 1 H, H-2', J=4,2 Hz), 3,30 (dd, 1 H, H-4', J=9 a 1,5 Hz), 2,65 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz).104 and 4'-OMe), 3.38 (m, 1H, H-5 '), 3.34 (d, 1H, H-2', J = 4.2 Hz), 3.30 (dd, 1 H, H-4 ', J = 9 and 1.5 Hz), 2.65 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 53Intermediate 53

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3a3,4β,4aβ,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(4-0-alyl-6-deoxy^-D-altropyranosyloxy)metyl ] -4-f ormyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7-metyl-3- (1metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1a, 3a3,4β, 4aβ, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8a - [(4-O-allyl-6-deoxy-4-D-altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl- 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

Suspenzia 2 g medziproduktu 1, ktorého príprava je opísaná vyššie a 870 mg dibutylstaniumoxidu v 25 ml vysušeného toluénu, bola zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom v banke, vybavenej Dean-Starkovým kondenzátorom, po dobu 2 hodín v prostredí dusíka a potom bola reakčná zmes ponechaná stáť v pokoji pri teplote miestnosti. Potom bolo k zmesi postupne pridaných 0,30 ml alylbromidu a 3,5 ml 1 M roztoku tetrabutylamónumfluoridu a reakčná zmes bola potom zahrievaná v atmosfére dusíka na teplotu 40 °C po dobu 24 hodín.A suspension of 2 g of intermediate 1 described above and 870 mg of dibutyltin oxide in 25 ml of dried toluene was heated to reflux in a flask equipped with a Dean-Stark condenser for 2 hours under nitrogen, and then the reaction mixture was left. stand still at room temperature. 0.30 ml of allyl bromide and 3.5 ml of a 1 M solution of tetrabutylammonium fluoride were then added sequentially and the reaction mixture was then heated under nitrogen at 40 ° C for 24 hours.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-acetón (10:1) a (9:1) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent to dryness, the residue was flash chromatographed on a silica gel column using hexane-acetone (10: 1) and (9: 1) as eluent.

Bolo získaných 1,7 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej peny.1.7 g of the title compound are obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1 H, CHO), 6,98 (s, 1H, CHPhý), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,89 (m, 1H, CH=CH2), 5,25 (m, 2H, CH=CH2). 4,64 (d, 1H, H-ľ, J=1,5 Hz), 4,15 (t, 1H, H-3', J=3,3 Hz), 4,09 (m, 3H, CH2-CH=CH₂ a 8aCH2), 3,87 (m, 1H, H-2’), 3,74 (m, 2H, H-5' a 8a-CH2), 3,38 (dd, 1H, H-4', J=3,3 a 9 Hz), 2,74 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 6.98 (s, 1 H, CHPh), 6.05 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3 6 Hz), 5.89 (m, 1H, CH = CH 2), 5.25 (m, 2H, CH = CH 2). 4.64 (d, 1H, H-1 ', J = 1.5 Hz), 4.15 (t, 1H, H-3', J = 3.3 Hz), 4.09 (m, 3H, CH 2) CH = _CH2 and 8aCH2), 3.87 (m, 1 H, H-2 '), 3.74 (m, 2H, H-5' and 8aCH2), 3.38 (dd, 1 H, H -4 ', J = 3.3 and 9 Hz), 2.74 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 54Intermediate 54

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ββ,4β,4aβ,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(4-0-benzyl-6-deoxy^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3ββ, 4β, 4αβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(4-O-benzyl-6-deoxy-4-altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4 4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

105105

Intenzívne miešaná zmes 6 g medziproduktu 1, ktorého vyššie a 3,55 g dibutylstaniumoxidu, toluénu, bola zahrievaná za refluxu pod banke vybavenej Dean-Starkovým kondenzádusíka, po dobu 3 hodín. Potom bola re0 °C a potom reagovala roztoku tetrabutylamóPo zahrievaní zmesi ' po dobu 18 hodín, bola a získaný zvyšok bol prepoužitia zmesi hexánčinidla.A vigorously stirred mixture of 6 g of intermediate 1 above and 3.55 g of dibutyltin oxide, toluene, was heated at reflux under a flask equipped with a Dean-Stark condensate for 3 hours. It was then re-OC and then reacted with the tetrabutylammonium solution. After heating the mixture for 18 hours, the residue was passed through a hexane reagent mixture.

rozpúšťadlá boli odpa príprava je opísaná v 80 ml vysušeného spätným chladičom v torom, v atmosfére > akčná zmes ochladená na teplotu s 1,2 ml benzylbromidu a 10 ml 1 M niumfluoridu v tetrahydrofuráne.the solvents were evaporated as described in 80 ml of reflux condenser, under an atmosphere of> action cooled to 1.2 ml of benzyl bromide and 10 ml of 1M nium fluoride in tetrahydrofuran.

v atmosfére dusíka pri teplote 40 zmes za zníženého tlaku zahustená čistený rýchlou chromatografiou etylacetát (6:1) a (4:1) ako elučného Príslušné frakcie boli spojené a °C za rené.under a nitrogen atmosphere at 40, the mixture was concentrated under reduced pressure and purified by flash chromatography with ethyl acetate (6: 1) and (4: 1) as eluent. The appropriate fractions were combined and concentrated.

Bolo získaných 3,73 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.3.73 g of the title compound are obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCIo): 9,73 (s, 1H. CHO), 7,24-7,44 (m, 15H, 3Ph), 6,98 (s, 1H, CO₂CHPh₂), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,65 (d, 1H, H-ľ. J=1,2 Hz), 4,57 (AB systém, 4OCH₂Ph, J=11,1 Hz), 4,21 (m, 1H, H-3'), 3,76 a 4,07 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,87 (m, 1H, H-2’), 3,76 (m, 1 H. H-5‘), 3_f49 (dd, 1H, H-4', J=3,3 a 9 Hz), 2,74 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl): 9.73 (s, 1H. CHO), 7.24-7.44 (m, 15H, 3Ph), 6.98 (s, 1 H, CO ₂ CHPh _2), 6, Δ (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.65 (d, 1H, H-1 ', J = 1.2 Hz), 4.57 (AB system, 4OCH) ₂ Ph, J = 11.1 Hz), 4.21 (m, 1 H, H-3 '), 3.76 and 4.07 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9 Hz), 3.87 ( m, 1H, H-2 '), 3.76 (m, 1H, H-5'), 3 _f 49 (dd, 1H, H-4 ', J = 3.3 and 9 Hz), 2, 74 (t, 1H, H-1, J = 3.6Hz).

Medziprodukt 55Intermediate 55

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4a£,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2-0-benzyloxykarbonyl-6-deoxy-4-0-metyl^-Daltropyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H) karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3α, 4α, 4α, 4α, 7β, 7αa, 8ηβ)] - [8a - [(2-O-benzyloxycarbonyl-6-deoxy-4-O-methyl-4-Dalopyranosyloxy) methyl] - 4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) carboxylic acid

K roztoku 3 mmolov medziproduktu 48, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml vysušeného dichlórmetánu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 6,3 mmolov 4-dimetylaminopyridínu. Po uplynutí 15 minút bola reakčná zmes vychladená na teplotu -20 “C a bol k nej pridaný po kvapkách roztok (3,6 mmol) benzylchlórformiátu v 15 ml vysušeného dichlórmetánu. Po uplynutí 2 hodín bolo rozpúšťadlo odparené a zvyšok bolTo a solution of 3 mmol of intermediate 48, as described above, in 15 mL of dried dichloromethane, was added, under a nitrogen atmosphere, 6.3 mmol of 4-dimethylaminopyridine. After 15 minutes, the reaction mixture was cooled to -20 ° C and a solution (3.6 mmol) of benzyl chloroformate in 15 mL of dried dichloromethane was added dropwise. After 2 hours the solvent was evaporated and the residue was

106 prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) ako elučného činidla.106 was purified by flash chromatography eluting with hexane-ethyl acetate (3: 1).

Bolo získaných 1,2 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .1.2 g of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,70 (s, 1H, CHO), 7,35 (m, 15H, 3xPh), 6,96 (s, 1H, CHPh₂), 5,99 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,18 (AB systém, 2H, OCP^Ph, J=12 Hz), 5,00 (dd, 1H, H-2', J=1,5 a 4,2 Hz), 4,70 (d, 1 H. H-ľ, J=1,8 Hz), 4,13 (m, 1H, H-3'), 4,01 a 3,66 (d,d, 1H, 1H, 8a-CH₂, J=9 Hz), 3,75 (m, 1H, H-5’), 3,40 (s, 3H, OMe), 3,17 (dd, 1H, H-4', J=3,3 a 8,4 Hz), 2,62 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz), 2,43 (d, 1H, OH, J=2,4 Hz), 2,21 (m, 1H, CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.70 (s, 1H, CHO), 7.35 (m, 15H, 3xPh), 6.96 (s, 1H, CHPh _2), 5.99 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5.18 (AB system, 2H, OCP ^ Ph, J = 12 Hz), 5.00 (dd, 1H, H-2 &apos;, J = 1.5 and 4.2 Hz), 4.70 (d, 1H, H-1 ', J = 1.8 Hz), 4.13 (m, 1H, H-3'), 4.01 and 3 , 66 (d, d, 1 H, 1 H, _8a-CH2, J = 9 Hz), 3.75 (m, 1 H, H-5 '), 3.40 (s, 3H, OMe), 3.17 (dd, 1H, H-4 &apos;, J = 3.3 and 8.4 Hz), 2.62 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz), 2.43 (d, 1H, OH, J = 2.4 Hz), 2.21 (m, 1 H, CH (CH _{3) 2).}

Medziprodukt 56Intermediate 56

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,33β,4β,4a3,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(4-0-alyl-2-0-benzyloxykarbonyl-6-deoxy^-Daltropyranosyloxy)metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 33β, 4β, 4a3,7β, 7aa, 8aβ)] - diphenylmethyl ester - 8a - [(4-O-allyl-2-O-benzyloxycarbonyl-6-deoxy-4-Dalopyranosyloxy) methyl] -4 -formy1-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) carboxylic acid

K roztoku 1,4 g medziproduktu 53, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 30 ml vysušeného dichlórmetánu, bolo pridaných pri teplote 0 °C 513 mg dimetylaminopyridínu a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná po dobu 15 minút, a potom k nej bolo pridaných 0,35 ml benzylchlórformiátu v 15 ml vysušeného dichlórmetánu tak, aby pridávanie prebiehalo po kvapkách počas 15 minút. Potom bola reakčná zmes zriedená 1 ml metanolu s 20 ml dichlórmetánu a premytá vodou, 1 M roztokom kyseliny chlorovodíkovej a soľankou. Oddelená organická fáza bola vysušená bezvodým síranom horečnatým, prefiltrovaná a rozpúšťadlá boli odparené do sucha.To a solution of 1.4 g of intermediate 53 described above in 30 ml of dried dichloromethane was added at 0 ° C 513 mg of dimethylaminopyridine, and the resulting mixture was stirred for 15 minutes, followed by the addition of 0, 35 ml of benzyl chloroformate in 15 ml of dried dichloromethane such that the addition was carried out dropwise over 15 minutes. The reaction mixture was then diluted with 1 mL of methanol with 20 mL of dichloromethane and washed with water, 1 M hydrochloric acid solution and brine. The separated organic phase was dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and the solvents were evaporated to dryness.

Zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (7:1) a (5:1), ako elučného činidla .The residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (7: 1) and (5: 1) as eluent.

Bolo získaných 1,1 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .1.1 g of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,70 (s, 1 H, CHO), 6,96 (s, 1H, CHPh₂), 5,99 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,88 (m, 1H, CH=CH₂), 5,20 (m, 4H, Ph-Ch^-O, CH₂-CH=CH2),δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.70 (s, 1H, CHO), 6.96 (s, 1H, CHPh _2), 5.99 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5, 3.6 Hz), 5.88 (m, 1 H, CH = _CH2), 5.20 (m, 4H, Ph-CH-O, CH ₂ CH = CH 2),

107107

4,99 (dd, 1H, H-2', J=1,5 a 4,2 Hz), 4,70 (d, 1 H, H-ľ, J=1,5 Hz), 4,12 (m, 1H, H-3'), 4,03 (m, 3H, CH₂-CH=CH₂ a H-Sa-Cl·^), 3,76 (m, 1H, H-3'), 3,64 (d, 1H, ea-Cl·^, 8,7 Hz), 3,34 (dd, 1H, H-4', J=3,3 a 8,7 Hz), 2,61 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz).4.99 (dd, 1H, H-2 ', J = 1.5 and 4.2 Hz), 4.70 (d, 1H, H-1', J = 1.5 Hz), 4.12 ( m, 1 H, H-3 '), 4.03 (m, 3H, CH ₂ CH = CH ₂ and H-Sa-C ^ ·), 3.76 (m, 1 H, H-3'), 3 .64 (d, 1H, [alpha] -Cl4, 8.7 Hz), 3.34 (dd, 1H, H-4 &apos;, J = 3.3 and 8.7 Hz), 2.61 (t, 1 H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 57Intermediate 57

Príprava difenylmetyleste.ru kyseliny [ ÍR-(Ια , 3ηβ , 4β , 4ap , 7β , 7aa,8ηβ)]-8a-[(4-0-benzyl-2-0-benzyloxykarbonyl-6-deoxy^-Daltropyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)karboxylovejPreparation of diphenylmethyleste.ru [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4β, 4β, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(4-O-benzyl-2-O-benzyloxycarbonyl-6-deoxy-4-Dalopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) carboxylic acid

K roztoku 3,7 g medziproduktu 54, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 25 ml vysušeného dichlórmetánu, bolo v atmosfére dusíka a pri teplote 0 °C pridaných 1,85 g 4-dimetylaminopyridínu. Vzniknutá reakčná zmes bola po dobu 15 minút miešaná, potom bola ochladená na -20 C a bol k nej po kvapkách pridávaný roztok 0,68 ml benzylchlórformiátu v 10 ml vysušeného dichlórmetánu tak dlho, dokiaľ nebol delegovaný produkt pomocou chromatografie na tenkej vrstve (hexánetylacetát/4:1).To a solution of 3.7 g of intermediate 54 described above in 25 ml of dried dichloromethane was added 1.85 g of 4-dimethylaminopyridine under nitrogen at 0 ° C. The resulting reaction mixture was stirred for 15 minutes, then cooled to -20 ° C and a solution of 0.68 mL of benzyl chloroformate in 10 mL of dried dichloromethane was added dropwise until the product was delegated by thin layer chromatography (hexane / ethyl acetate / hexane). 4: 1).

Po odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (6:1) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent to dryness, the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (6: 1) as eluent.

Bolo získaných 3,6 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.3.6 g of the title compound are obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI₃): 9,70 (s, 1H, CHO), 7,26-7,42 (m, 20H, 4Ph), 6,96 (s, 1H, CO₂CHPh₂), 5,99 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,18 (AB systém, 2'OCO₂CH₂Ph, J= 12,3 Hz), 5,00 (dd, 1H, H-2', J=1,5 a 4,2 Hz), 4,71 (d, 1 H. H-ľ, J=1,5 Hz), 4,56 (AB systém, 4-OCf^Ph, J=11,1 Hz), 4,15 (m, 1H, H-3'), 3,66 a 4,00 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,81 (dq, 1H, H-5', J=6,6 a 9 Hz), 3,43 (dd, 1H, H-4’, J=3,3 a 9 Hz), 2,60 (t, 1H, H-1, J=3,6Hz).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.70 (s, 1H, CHO), 7.26-7.42 (m, 20H, 4Ph), 6.96 (s, 1 H, CO ₂ CHPh _2), 5 .99 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 5.18 (AB system, 2'OCO ₂ CH ₂ Ph, J = 12.3 Hz), 5.00 ( dd, 1H, H-2 ', J = 1.5 and 4.2 Hz), 4.71 (d, 1H, H-1', J = 1.5 Hz), 4.56 (AB system, 4 -OCF ^ Ph, J = 11.1 Hz), 4.15 (m, 1 H, H-3 '), 3.66 and 4.00 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9 Hz), 3. 81 (dq, 1H, H-5 ', J = 6.6 and 9 Hz), 3.43 (dd, 1H, H-4', J = 3.3 and 9 Hz), 2.60 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz).

108108

Medziprodukt 58Intermediate 58

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4afi,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2-0-benzyloxykarbonyl-6-deoxy-4-0-metyl-3-0tosyl^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7, 7a, 8, 8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1a, 3ap, 4β, 4afi, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2-O-benzyloxycarbonyl-6-deoxy-4-O-methyl-3-thosyl) -D- altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7, 7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a (1H) -carboxylic acid

Roztok 3 mmolov medziproduktu 55, ktorého príprava je opísaná vyššie a 5,1 mmolov 4-dimetylaminopyridínu v 60 ml vysušeného dichlórmetánu, reagoval s roztokom 4,5 mmolov tosylchloridu v 20 ml vysušeného dichlórmetánu, pridávaného po kvapkách. Po 24 hodinách bolo rozpúšťadlo odparené a zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (5:1) ako elučného činidla.A solution of 3 mmol of intermediate 55 described above and 5.1 mmol of 4-dimethylaminopyridine in 60 mL of dried dichloromethane was treated with a solution of 4.5 mmol of tosyl chloride in 20 mL of dried dichloromethane added dropwise. After 24 hours, the solvent was evaporated and the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (5: 1) as eluent.

Bolo získaných 1,8 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .1.8 g of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,70 (s, 1H, CHO), 7,84 a 7,32 (d, m, 2H, 17H, Ar), 6,96 (s, 1H, CHPh2), 5,94 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,17 (AB systém, 2H, OCF^Ph, J=12 Hz), 5,10 (m, 1 H. H-3’), 4,88 (dd, 1H, H-2', J=3 a 5,4 Hz), 4,68 (d, 1H, H-ľ, J=2,1 Hz), 3,97 a 3,63 (2d, 2H, 8a-CH2, J=9 Hz), 3,76 (dd, 1 H. H-5¹, J=6,3 a 8,1 Hz), 3,18 (dd, 1H, H-4', J=3 a 8,1 Hz), 3,05 (s, 3H, OMe), 2,51 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz), 2,43 (s, 3H, ΟΗβΑτ), 2,01 (m, 1H, CH(CH3)₂).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.70 (s, 1H, CHO), 7.84 and 7.32 (d, m, 2H, 17H, Ar), 6.96 (s, 1H, CHPh2), 5 94 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5.17 (AB system, 2H, OCF-Ph, J = 12 Hz), 5.10 (m, 1H) H-3 '), 4.88 (dd, 1H, H-2', J = 3 and 5.4 Hz), 4.68 (d, 1H, H-1 ', J = 2.1 Hz), 3.97 and 3.63 (2d, 2H, 8a-CH2, J = 9 Hz), 3.76 (dd, 1H, H5 ^1, J = 6.3 and 8.1 Hz), 3. 18 (dd, 1H, H-4 &apos;, J = 3 and 8.1 Hz), 3.05 (s, 3H, OMe), 2.51 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz) ), 2.43 (s, 3H, ββατ), 2.01 (m, 1H, CH (CH 3) ₂ ).

Medziprodukt 59Intermediate 59

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3aβ,4β,4πβ,7β, 7aa , 8ηβ) ] -8a- [ (4-0-alyl-2-0-benzyloxyka.rbonyl-6-deoxy-3-0tosyl-β-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8, 8a-oktahydro-7-metyl-3- (l-metyletyl) -1,4-metán-s-.indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4πβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] -8α- [(4-O-allyl-2-O-benzyloxycarbonyl-6-deoxy-3-thosyl-β) -D-Altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s- .indacén-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 1,1 g medziproduktu 56, ktorého príprava je opísaná vyššie, a 300 mg dimetylaminopyridínu v 40 ml vysušeného dichlórmetánu, bol pridaný po kvapkách roztok 400 mg tosylchloridu v 20 ml vysušeného dichlórmetánu a vzniknutáTo a solution of 1.1 g of intermediate 56 described above and 300 mg of dimethylaminopyridine in 40 ml of dried dichloromethane was added dropwise a solution of 400 mg of tosyl chloride in 20 ml of dried dichloromethane and the resulting

109109

reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 3 dní .the reaction mixture was stirred at room temperature for 3 days.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-etylacetát (9:1) a (6:1) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent to dryness, the residue was flash chromatographed on a silica gel column using hexane-ethyl acetate (9: 1) and (6: 1) as eluent.

Bolo získaných 820 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .820 mg of the title compound are obtained.

δ (¹ H, CDCI₃): 9,70 (s, 1 H, CHO), 6,95 (s, 1H, CHPh₂), 5,94 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a: 3,9 Hz), 5,61 (m, 1H, CH=CH₂), 5,12 (m, 4H, Ph-Ch^-O, CH₂-CH=CH₂), 4,84 (dd, 1 H, H-2', J=3 a 5,1 Hz), 4,69 (d, 1 H, H-ľ, J=1,8 Hz), 3,96 a 3,63 (2d, 2H, 8a-GH2. J=9,0 Hz), 3,76 (m, 4H, H-3', H-5', CH₂-CH=CH₂), 3,38 (dd, 1 H, H-4', J=3 a 8,1 Hz), 2,50 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,42 (s, 3H, CH3-Ph).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.70 (s, 1H, CHO), 6.95 (s, 1H, CHPh _2), 5.94 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 α: 3.9 Hz), 5.61 (m, 1H, CH = CH ₂ ), 5.12 (m, 4H, Ph-CH 2 -O, CH ₂ -CH = CH ₂ ), 4.84 ( dd, 1H, H-2 ', J = 3 and 5.1 Hz), 4.69 (d, 1H, H-1', J = 1.8 Hz), 3.96 and 3.63 (2d 2 H, 8a-GH 2, J = 9.0 Hz), 3.76 (m, 4H, H-3 ', H-5', CH ₂ -CH = CH ₂ ), 3.38 (dd, 1H) H-4 ', J = 3 and 8.1 Hz), 2.50 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.42 (s, 3H, CH 3 -Ph).

Medziprodukt 60Intermediate 60

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ηβ,7β, 7aa,8αβ)]-8a-[(4-0-benzyl-2-0-benzyloxykarbonyl-6-deoxy-3-0tosyl-β-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8, 8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (1a, 3ap, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8αβ)] - 8α - [(4-O-benzyl-2-O-benzyloxycarbonyl-6-deoxy-3-thosyl-β-D) -altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene- 3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 3,5 g medziproduktu 57, ktorého príprava je opísaná vyššie a 1,30 g dimetylaminopyridínu v 80 ml vysušeného dichlórmetánu, bol pridaný po kvapkách roztok 2 g tosylchloridu v 50 ml vysušeného dichlórmetánu a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestností po dobu 3 dní.To a solution of 3.5 g of intermediate 57 described above and 1.30 g of dimethylaminopyridine in 80 ml of dried dichloromethane was added dropwise a solution of 2 g of tosyl chloride in 50 ml of dried dichloromethane, and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 3 days.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-etylacetát (9:1) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent to dryness, the residue was flash chromatographed on a silica gel column using hexane-ethyl acetate (9: 1) as eluent.

Bolo získaných 3,14 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .3.14 g of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,70 (s, 1H, CHO), 6,95 (s, 1H, CHPh₂), 5,95 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,16 (m, 3H, Ph-CH^O, H-2'), 4,93 (dd, 1H, H-3', J=3 a 4,8 Hz), 4,71 (d, 1H, H-ľ, J=1,8 Hz), 4,25 (AB systém, 2H, O-CH₂Ph, J=11,5 Hz), 3,96, 3,63 (2d, 2H, ea-CH^ J=9,0 Hz), 3,83 (m, 1H, H-5'), 3,45 (dd, 1H, H-4’, J= 3 a 8,4 Hz), 2,51 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,35 (s, 3H, CH₃-Ph).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.70 (s, 1H, CHO), 6.95 (s, 1H, CHPh _2), 5.95 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3 3 Hz), 5.16 (m, 3H, Ph - CH3 O, H-2 &apos;), 4.93 (dd, 1H, H-3 &apos;, J = 3 and 4.8 Hz), 4, 71 (d, 1 H, H ', J = 1.8 Hz), 4.25 (AB system, 2H, _O-CH2 Ph, J = 11.5 Hz), 3.96, 3.63 (2d 2H, [alpha] -CH3 J = 9.0 Hz), 3.83 (m, 1H, H-5 &apos;), 3.45 (dd, 1H, H-4 &apos;, J = 3 and 8.4 Hz) 1.51 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.35 (s, 3H, CH ₃ -Ph).

110110

Medziprodukt 61Intermediate 61

Príprava difenylmetyleste.ru kyseliny [ ÍR-(la , 3ap , 4β , 4a£ , 7β , 7aa,8aβ)]-8a-[(6-deoxy-4-0-metyl-3-0-tosyl^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl esters of [1R- (1α, 3αp, 4β, 4α £, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(6-deoxy-4-O-methyl-3-O-tosyl) -D-altropyranosyloxy acid ) methyl] -4-formy1-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1 H ) carboxylate

K roztoku 1,9 mmolov medziproduktu 58, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 60 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 100 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola trepaná v Parrovom autokláve za tlaku 0,105 MPa vodíka pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora roztok reagoval s 20 ml 0,35 M roztoku difenyldiazometánu.To a solution of 1.9 mmol of intermediate 58, as described above, in 60 mL of ethyl acetate was added 100 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere, and the resulting mixture was shaken in a Parr autoclave under 50 psi of hydrogen at 0.105 MPa. at room temperature for 1 hour. After filtering off the catalyst, the solution was treated with 20 ml of a 0.35 M diphenyldiazomethane solution.

Po 2 hodinách bolo rozpúšťadlo odparené a zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) ako elučného činidla.After 2 hours, the solvent was evaporated and the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (3: 1) as eluent.

Bolo získaných 1,3 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .1.3 g of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,72 (s, 1H, CHO), 7,85 a 7,32 (d, m, 2H, 12H, Ar), 6,98 (s, 1 H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1H, H-2, J= 1,2 a 3,3 Hz), 4,84 (dd, 1 H, H-3', J=3 a 4,2 Hz), 4,64 (d, 1 H, H-1J=1,5 Hz), 4,06 a 3,75 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 4,02 (m, 1 H, H-2'), 3,70 (m, 1 H, H-5'), 3,16 (dd, 1 H, H-4', J=3 a 9 Hz), 2,93 (s, 3H, OMe), 2,69 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,45 (s, 3H, Ch^Ar), 2,30 (d, 1H, OH, J=3 Hz), 2,23 (m, 1 H, CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.72 (s, 1H, CHO), 7.85 and 7.32 (d, m, 2H, 12H, Ar), 6.98 (s, 1H, CHPh ₂₎ 6.06 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.84 (dd, 1H, H-3 ', J = 3 and 4.2 Hz), 4 , 64 (d, 1H, H-1 J = 1.5 Hz), 4.06 and 3.75 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.3 Hz), 4.02 (m, 1 H, H-2 '), 3.70 (m, 1H, H-5'), 3.16 (dd, 1H, H-4 ', J = 3 and 9 Hz), 2.93 (s 3H, OMe), 2.69 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.45 (s, 3H, CH 2 Ar), 2.30 (d, 1H, OH, J = 3 Hz), 2.23 (m, 1H, CH _{(CH3) 2).}

Medziprodukt 62Intermediate 62

Príprava difenylmetyleste.ru kyseliny [ ÍR- (la , 3aβ , 4β , 4aβ , 7β , 7aa,8aβ)]-8a-[(6-deoxy-4-0-propyl-3-0-tosyl^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl esters of acid [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(6-deoxy-4-O-propyl-3-O-tosyl-4-D-altropyranosyloxy)] methyl] -4-formy1-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) carboxylate

K roztoku 800 mg medziproduktu 59, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 200 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 300 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola trepaná v Parrovom autokláveTo a solution of 800 mg of intermediate 59 described above in 200 ml of ethyl acetate was added 300 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere and the resulting mixture was shaken in a Parr autoclave.

111 za tlaku 0,105 MPa vodíka pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha a k zvyšku, rozpustenému v 50 ml dichlórmetánu bol po kvapkách pridaný roztok 0,35 M difenyldiazometánu (6 ml) a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 3 hodín.111 at a pressure of 0.105 MPa of hydrogen at room temperature for 1 hour. After the catalyst was filtered off, the solvent was evaporated to dryness and a solution of 0.35 M diphenyldiazomethane (6 ml) was added dropwise to the residue dissolved in 50 ml of dichloromethane and the resulting mixture was stirred at room temperature for 3 hours.

Po odparení rozpúšťadla bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-etylacetát (8:1) a (3:1) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent, the residue was flash chromatographed on a silica gel column using hexane-ethyl acetate (8: 1) and (3: 1) as eluent.

Bolo získaných 630 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .630 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,72 (s, 1 H, CHO), 6,98 (s, 1 H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1H, H-2, J=1_f2 a 3,3 Hz), 4,84 (dd, 1Η. Ή-2’, J=3 a 4,2 Hz), 4,64 (d, 1H, H-ľ, J=1,5 Hz), 4,05 (m, 2H, H-3' a H-8a-CH2), 3,73 (m, 2H, H-5' a H-Ba-CH2), 3,29 (dd, 1H, H-4', J=2,7 a 9 Hz), 3,01 (t, 2H, OCH2CH2CH3 , J= 7 Hz), 2,68 (t, 1H, H1, J=3,9 Hz), 2,44 (s, 3H, p-Ts).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.72 (s, 1H, CHO), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.06 (dd, 1 H, H-2, J = 1 2 _f and 3.3 Hz), 4.84 (dd, 1H, H-2 ', J = 3 and 4.2 Hz), 4.64 (d, 1H, H-1', J = 1.5 Hz), 4.05 (m, 2H, H-3 ' and H-8a-CH2), 3.73 (m, 2H, H-5 &apos; and H-Ba-CH2), 3.29 (dd, 1H, H- 4 ', J = 2.7 and 9 Hz), 3.01 (t, 2H, OCH 2 CH 2 CH 3, J = 7 Hz), 2.68 (t, 1H, H 1, J = 3.9 Hz), 2.44 (s, 3H, p-Ts).

Medziprodukt 63Intermediate 63

Príprava kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ββ,7β,7aa,8a0)]-8a-[(4-0benzyl-6-deoxy-3-0-tosyl-p-D-altropyranosyloxy)metyl]-4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3αp, 4β, 4ββ, 7β, 7aa, 8α0)] - 8α - [(4-O-benzyl-6-deoxy-3-O-tosyl-β-D-altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4 4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-1methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 1 g medziproduktu 60, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 70 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 600 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola trepaná v Parrovom autokláve za tlaku 0,105 MPa vodíka pri teplote miestnosti po dobu 4 hodín. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha a zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) a (1:1) ako elučného činidla.To a solution of 1 g of intermediate 60 described above in 70 ml of ethyl acetate was added 600 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere, and the resulting mixture was shaken in a Parr autoclave at 0.105 MPa of hydrogen at room temperature. for 4 hours. After filtering off the catalyst, the solvent was evaporated to dryness and the residue was purified by flash chromatography on silica gel using hexane-ethyl acetate (3: 1) and (1: 1) as eluent.

Príslušné frakcie boli spojené a rozpúšťadlá boli odparené .Appropriate fractions were combined and the solvents were evaporated.

Bolo získaných 530 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .530 mg of the title compound are obtained.

112 δ (¹Η, CDCI₃): 9,70 (s. 1Η, CHO), 7,81 a 7,10-7,30 (2m, 9H, Ts a Ph), 6,08 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,91 (dd, 1 H, H-3', J=3,3 a 4,5 Hz), 4,68 (d, 1H, H-ľ, J=1.5 Hz), 4,12 (m, 3H, CP^Ph a H-2'), 4,06 a 3,64 (2d, 2H, 8aCH2, J=9,3 Hz), 3,46 (m, 1H, H-4'), 2,65 (m, 1H, H-1), 2,36 (s, 3H, Ts).112 δ ( ¹ Η, CDCl ₃ ): 9.70 (s, 1H, CHO), 7.81 and 7.10-7.30 (2 m, 9H, Ts and Ph), 6.08 (dd, 1H) H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz, 4.91 (dd, 1H, H-3 &apos;, J = 3.3 and 4.5 Hz), 4.68 (d, 1H) H-1 ', J = 1.5 Hz), 4.12 (m, 3H, CP 3 Ph and H-2'), 4.06 and 3.64 (2d, 2H, 8aCH 2, J = 9.3 Hz) 3.46 (m, 1H, H-4 &apos;), 2.65 (m, 1H, H-1), 2.36 (s, 3H, Ts).

Medziprodukt 64Intermediate 64

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3a0,4β,4ap,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2,3-anhydro-6-deoxy-4-0-metyl^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl-3-(1-metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3a0,4β, 4ap, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-methyl-4-D-altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-1methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Suspenzia 3,2 mmolu hydridu sodného v 6 ml vysušeného dimetylformamidu v atmosfére dusíka reagovala so 6 ml roztoku medziproduktu 61, ktorého príprava je opísaná vyššie (1,6 mmol) vo vysušenom dimetylformamide. Po 40 minútach bolo pridaných 60 ml zmesi voda-etylacetát (1:1) a oddelená organická fáza bola potom odparená a zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1) ako elučného činidla.A suspension of 3.2 mmol of sodium hydride in 6 ml of dried dimethylformamide under a nitrogen atmosphere was treated with 6 ml of a solution of intermediate 61, the preparation of which is described above (1.6 mmol) in dried dimethylformamide. After 40 minutes, 60 mL of water-ethyl acetate (1: 1) was added and the separated organic phase was then evaporated and the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (4: 1) as eluent.

Bolo získaných 960 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .960 mg of the title compound are obtained.

NMR protónové spektrum bolo identické ako u zlúčeniny medziproduktu 50.The NMR proton spectrum was identical to that of Intermediate 50.

Medziprodukt 65Intermediate 65

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4aβ,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2,3-anhydro-6-deoxy-4-0-propyl^-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7mety'1-3- (1-metyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a- (1H) -karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4aβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-propyl-4-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a- (1H) carboxylate

K suspenzii 35 mg hydridu sodného v 10 ml dimetylformamidu bol pridaný po kvapkách roztok 600 mg medziproduktu 62, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml vysušenéhoTo a suspension of 35 mg of sodium hydride in 10 ml of dimethylformamide was added dropwise a solution of 600 mg of intermediate 62, as described above, in 15 ml of dried form.

113113

dimetylformamidu. Vzniknutá reakčná zmes bola miešaná v atmosfére dusíka pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny a potom bolo k nej pridaných 50 ml 1 M roztoku chloridu amónneho a 70 ml etylacetátu. Organická fáza bola premytá vodou a soľankou, vysušená bezvodým síranom horečnatým a potom bola do sucha odparená.dimethylformamide. The reaction mixture was stirred under nitrogen at room temperature for 1 hour and then 50 mL of 1 M ammonium chloride solution and 70 mL of ethyl acetate were added. The organic phase was washed with water and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and then evaporated to dryness.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-etylacetát (8:1) a (6:1) ako elučného činidla.The residue was flash chromatographed on a silica gel column eluting with hexane-ethyl acetate (8: 1) and (6: 1).

Bolo získaných 450 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.450 mg of the title compound were obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,75 (s, 1H, CHO), 6,99 (s, 1 H, CHPH₂), 6,08 (dd, 1H- H-2, J=1,5 a 4,8 Hz), 4,68 (s, 1 H, H-1 ’), 4,11 a 3,79 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9₍0 Hz), 3,68 (m, 1 H, H-5'), 3,45 (m, 1H, H-4’), 3,24 a 3,12 (2d, 2H, H-2’, H-3’, J=3,9 Hz), 3,19 (t, 2H, OCH2CH2CH3, J=7 Hz), 2,86 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 6.99 (s, 1H, _CHPh2), 6.08 (dd, 1H-H-2, J = 1.5, 4.8 Hz), 4.68 (s, 1H, H-1 '), 4.11 and 3.79 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9 ₍₀ Hz), 3.68 ( m, 1H, H-5 '), 3.45 (m, 1H, H-4'), 3.24 and 3.12 (2d, 2H, H-2 ', H-3', J = 3 9 Hz), 3.19 (t, 2H, OCH 2 CH 2 CH 3, J = 7 Hz), 2.86 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 66Intermediate 66

Príprava kyseliny [lR-(lα,3aβ,4β,4aβ,7β,7aα,8aβ)]-8a-[(6deoxy-3-0-tosyl^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metáns-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(6-deoxy-3-O-tosyl-4-D-altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanesulfonyl-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K suspenzii 800 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí v 60 ml etylacetátu v hydrogenačnej nádobe bol pridaný v atmosfére dusíka roztok 1 g medziproduktu 60, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 30 ml etylacetátu a 4 ml zmesi metanol-1 M kyselina chlorovodíková (3:1). Nádobka bola trepaná v Parrovom hydrogenačnom autok’láve pri tlaku 0,21 MPa vodíka po dobu 18 hodín. Potom bola reakčná zmes prefiltrovaná a filtrát bol odparený do sucha.To a suspension of 800 mg of 10% palladium on charcoal in 60 ml of ethyl acetate in a hydrogenation vessel was added, under a nitrogen atmosphere, a solution of 1 g of intermediate 60 as described above in 30 ml of ethyl acetate and 4 ml of methanol-1M hydrochloric acid. (3: 1). The vial was shaken in a Parr hydrogenation autoclave at 0.21 MPa of hydrogen for 18 hours. Then the reaction mixture was filtered and the filtrate was evaporated to dryness.

Zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (20:1) ako elučného činidla.The residue was purified by flash column chromatography on silica gel using dichloromethane-methanol (20: 1) as eluent.

Príslušné frakcie boli spojené a rozpúšťadlá boli odparené. Bolo získaných 380 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.Appropriate fractions were combined and the solvents were evaporated. 380 mg of the title compound are obtained.

114 δ (¹ Η, CDCI₃): 9.70 (s, 1 Η, CHO), 7,84 a 7,38 (2d, 4H, Ts), 6,06 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,75 (dd, 1H, H-3', J=3,3 a 4,5 Hz), 4,61 (d, 1H, H-ľ, J=1,2 Hz), 4,05 (d, 1H, H-8aCH₂a, J=9,3 Hz), 3,92 (dd, 1H, H-2', J=1,2 a 4,5 Hz), 3,65 (m, 3H, H-5', H-4' a H-8aCH₂b), 2,63 (m, 1H, H-1), 2,46 (s, 3H, Ts).114 δ ( ¹ Η, CDCl ₃ ): 9.70 (s, 1 Η, CHO), 7.84 and 7.38 (2d, 4H, Ts), 6.06 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.75 (dd, 1H, H-3 ', J = 3.3 and 4.5 Hz), 4.61 (d, 1H, H-1', J = 1 2 Hz), 4.05 (d, 1H, H-8aCH ₂ α, J = 9.3 Hz), 3.92 (dd, 1H, H-2 ', J = 1.2 and 4.5 Hz) ), 3.65 (m, 3H, H-5 ', H-4 and _H-2 b 8aCHa), 2.63 (m, 1 H, H-1), 2.46 (s, 3H, Ts) .

Medziprodukt 67Intermediate 67

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3aP,4β,4ap,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2,3-anhydro-6-deoxy-^-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3 -(1metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3αP, 4β, 4β, 4β, 7β, 7aa, 8ηβ)] - diphenylmethyl ester - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl- 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

Roztok (585 mg) zlúčeniny, pripravenej v rámci príkladu 55, opísanom ďalej, v 20 ml dichlórmetánu, reagoval s purpurovo sfarbeným a po kvapkách pridávaným roztokom difenyldiazometánu v dichlórmetáne (0,35 M, 8,0 ml). Výsledná reakčná zmes bola potom miešaná pri teplote miestnosti po dobu 14 hodín.A solution (585 mg) of the compound prepared in Example 55, described below, in 20 mL of dichloromethane was treated with a purple-colored, dropwise addition of a solution of diphenyldiazomethane in dichloromethane (0.35 M, 8.0 mL). The resulting reaction mixture was then stirred at room temperature for 14 hours.

Po odstránení rozpúšťadla za zníženého tlaku bol zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (6:1) a (4:1) ako elučného činidla.After removal of the solvent under reduced pressure, the residue was purified by flash chromatography on silica gel using hexane-ethyl acetate (6: 1) and (4: 1) as eluent.

Príslušné frakcie boli spojené a odparené.Appropriate fractions were combined and evaporated.

Bolo získaných 764 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej peny.764 mg of the title compound was obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI₃): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,26-7,44 (m, 10H, 2Ph), 7,00 (s, 1H, CO₂CHPh₂), 6,09 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,71 (s, 1H, H-ľ), 3,79 a 4,12 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,63 (dd, 1H, H-4', J=5,7 a . 8,7 Hz), 3,21 (m, 1H, H-5'), 3,15 a 3,24 (2d, 2H, H-2' a H-3', J=3,6 Hz), 2,86 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.26-7.44 (m, 10H, 2 Ph), 7.00 (s, 1 H, CO ₂ CHPh _2), 6 09 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.71 (s, 1H, H-1 '), 3.79 and 4.12 (2d, 2H, 8aCH) ₂ , J = 9.3 Hz), 3.63 (dd, 1H, H-4 ', J = 5.7 and 8.7 Hz), 3.21 (m, 1H, H-5'), 3.15 and 3.24 (2d, 2H, H-2 'and H-3', J = 3.6 Hz), 2.86 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 68Intermediate 68

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β, 7aa , 8ηβ) ]-8a-[ (2,3-anhyd.ro-4,6-dideoxy-4-fluór-β-ϋ-talopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] -8α- [(2,3-anhydro-4,6-dideoxy-4-fluoro-β-tal-talopyranosyloxy) ) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1 H ) carboxylate

115115

Roztok 300 mg medziproduktu 67, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 25 ml dichlórmetánu, bol zmiešaný s 0,16 ml diétylaminosulfurtrifluoridu a výsledná reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti cez noc. Potom bola ochladená na teplotu 0 °C a po rýchlom pridaní 15 ml metanolu bola za zníženého tlaku zahustená.A solution of 300 mg of intermediate 67, as described above, in 25 ml of dichloromethane was mixed with 0.16 ml of diethylaminosulfur trifluoride and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature overnight. It was then cooled to 0 ° C and concentrated under reduced pressure after the rapid addition of 15 ml of methanol.

Rýchlou chromatografiou zvyšku na silikagélu, za použitia zmesi hexán-etylacetát (6:1) a (4:1) ako elučného činidla, bola získaná žiadaná, v nadpise uvedená zlúčenina v množstve 160 mg.Flash chromatography of the residue on silica gel using hexane-ethyl acetate (6: 1) and (4: 1) as eluent gave the title compound (160 mg).

δ (¹H, CDCI₃): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,45 - 7,26 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂),6,09 (dd, 1H, H-2, J= 1,5 a 3,9 Hz), 5.09 (d, 1H, H-ľ, J= 1,5 Hz), 4,75 a 4,58 (2dq, 1 H, H-5*, J₅· _F=48,6 Hz, J= 6,6 Hz, J= 3,9 Hz), 4,18 a 4,11 (2d, 1H, H-4', J4'F=23,1 Hz, J=3,9 Hz), 3,97 a 3,81 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,75 a 3,70 (2m, 2H, H-2' a H-3'), 2,84 (t, 1 H, H-1).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.45 to 7.26 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.09 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.9 Hz), 5.09 (d, 1H, H-1 ', J = 1.5 Hz), 4.75 and 4.58 (2dq, 1) H, H-5 *, J ₅ · _F = 48.6 Hz, J = 6.6 Hz, J = 3.9 Hz), 4.18 and 4.11 (2d, 1H, H-4 ', J4) 1 F = 23.1 Hz, J = 3.9 Hz), 3.97 and 3.81 (2d, 2H, 8aCH ₂ , J = 9.3 Hz), 3.75 and 3.70 (2m, 2H) H-2 'and H-3'), 2.84 (t, 1H, H-1).

Medziprodukt 69Intermediate 69

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ap,7β, 7aa,8πβ)]-8a-[(2,3-anhydro-6-deoxy-4-0-(2-metoxyetyl)-β-Dmanopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4β, 4αp, 7β, 7aa, 8πβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-0- (2-methoxyethyl) -β-Dmanopyranosyloxy) ) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) carboxylic acid

K suspenzii 24 mg hydridu sodného v 20 ml vysušeného tetrahydrofuránu bolo pridaných pri teplote 0 °C v atmosfére dusíka 300 mg medziproduktu 67, ktorého príprava je opísaná vyššie a táto zmes bola miešaná po dobu 30 minút. Potom bolo k zmesi pridaných 300 mg β-brómfenetolu a 2 ml 1 N tetrabutylamóniumjodidu a reakčná zmes bola potom zahrievaná na teplotu 40 “C po dobu 2 dní. Potom bola reakcia ukončená pridaním 10 ml 1 M roztoku chloridu amónneho a zmes bola zriedená s 30 ml etylacetátu. Oddelená organická fáza bola premytá vodou a soľankou, vysušená bezvodým síranom horečnatým a rozpúšťadlá boli potom odparené do sucha.To a suspension of 24 mg of sodium hydride in 20 ml of dried tetrahydrofuran was added at 0 ° C under a nitrogen atmosphere, 300 mg of intermediate 67, the preparation of which was described above, and the mixture was stirred for 30 minutes. 300 mg of β-bromophenetol and 2 ml of 1 N tetrabutylammonium iodide were then added to the mixture and the reaction mixture was then heated at 40 ° C for 2 days. The reaction was quenched with 10 mL of 1 M ammonium chloride solution and diluted with 30 mL of ethyl acetate. The separated organic phase was washed with water and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and the solvents were then evaporated to dryness.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-etylacetát (5:1) akoThe residue was flash chromatographed on a silica gel column using hexane-ethyl acetate (5: 1) as the

116 elučného činidla.116 eluent.

Bola získaná žiadaná, v nadpise uvedená zlúčenina (množstvo neuvedené), vo .forme bezfarebnej látky olej ovitej konzistencie.The title compound (amount not shown) was obtained as a colorless oil of oil-like consistency.

δ (¹ H, CDCI3): 9,75 (s, 1 H, CHO), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,08 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,67 (s, 1 H, H-ľ), 4,10 a 3,78 (2d, 2H, 8a-CH2, J=9,0 Hz) 4,094,00 (m, 2H, H-4', H-5'), 3,90-3,53 (m, 4H, OCh^CKzOC^), 3,40 (s, 3H, CH3OCH₂CH₂), 3,29 a 3,11 (2d, 2H, H-3', a H-2', J=3,9 a 3,9 Hz), 2,86 (t, 1H, H-1, J=3,7 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.08 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2, 3.3 Hz), 4.67 (s, 1H, H-1 '), 4.10 and 3.78 (2d, 2H, 8a-CH2, J = 9.0 Hz) 4,094.00 (m, 2H , H-4, H-5 '), 3.90 to 3.53 (m, 4 H, oCH ^ ^ CKzOC), 3.40 (s, 3 H, CH3OCH _{2 CH2),} 3.29 and 3. 11 (2d, 2H, H-3 ', and H-2', J = 3.9 and 3.9 Hz), 2.86 (t, 1H, H-1, J = 3.7 Hz).

Medziprodukt 70Intermediate 70

Priprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(2,3-anhydro-6-deoxy-4-0-(2-metylprop-2-enyl)β-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahydro-7-metyl-3 -(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O- (2-methylprop-2-enyl)) β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoctahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene 3a (1H) -carboxylic acid

Zmes 0,4 mmol medziproduktu 67, ktorého priprava je opísaná vyššie, 0,3 mmol· uhličitanu cézneho a 0,5 3-bróm-2metyl-propénu v 1,5 ml vysušeného dimetylformamidu bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 3 dní. Po zriedení 30 ml· dietyléteru bola potom reakčná zmes premytá vodou, rozpúšťadlá boli odparené a zvyšok bo.L prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1) ako elučného činidla.A mixture of 0.4 mmol of intermediate 67 prepared above, 0.3 mmol of cesium carbonate and 0.5 3-bromo-2-methyl-propene in 1.5 ml of dried dimethylformamide was stirred at room temperature for 3 days. After diluting with 30 ml of diethyl ether, the reaction mixture was washed with water, the solvents were evaporated and the residue was purified by flash chromatography on silica gel using hexane-ethyl acetate (4: 1) as eluent.

Bolo získaných 62 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .62 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,35 (m, 10H, 2xPh), 6,99 (s, 1 H, CHPh₂), 6,08 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,00 s 4,93 (m,m, 1H, 1H, CH₂=C), 4,70 (s, 1H, H-ľ), 4,12 a 3,79 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 4,12 a 3,96 (d,d, 1H, 1H, CH₂O, J=12 Hz), 3,26 (m, 3H, H-3', H-4* a H-5'), 3,13 (d, 1H, H2', J=3,9 Hz), 2,86 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,23 (m, 1H, CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.35 (m, 10H, 2xPh), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6.08 (dd, 1 H , H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5.00 a 4.93 (m, m, 1 H, 1 H, _CH2 = C), 4.70 (s, 1 H, H-I ' ), 4.12 and 3.79 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.3 Hz), 4.12 and 3.96 (d, d, 1 H, 1 H, CH ₂ O, J = 12 Hz), 3.26 (m, 3H, H-3 &apos;, H-4 ' and H-5 &apos;), 3.13 (d, 1H, H2 &apos;, J = 3.9 Hz), 2.86 ( t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.23 (m, 1 H, CH (CH _{3) 2).}

117117

Medziprodukt 71Intermediate 71

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa , 8&β) ]-8a-[ (2,3-anhyd.ro-6-deoxy-4-0- (l-metyletyl) karbony]-β-D-manopyranosyloxy)metyl]- 4-formyl-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a - oktahyd.ro - 7 - metyl - 3 - (l-metyletyl) -1,4 - metán - s - indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7aa, 8β)] -8α- [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O- (1-methylethyl) carbones] -β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4- methane-s-indacene-3- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 160 mg medziproduktu 67, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 ml vysušeného dichlórmetánu bolo pridaných 70 mg 4-dimetylaminopyridínu a 60 μΐ izobutyrylchloridu. Vzniknutá reakčná zmes bola pri teplote miestnosti cez noc miešaná a potom bola zahustená.To a solution of 160 mg of intermediate 67 prepared above in 5 ml of dried dichloromethane was added 70 mg of 4-dimethylaminopyridine and 60 μ a of isobutyryl chloride. The resulting reaction mixture was stirred at room temperature overnight and then concentrated.

Zvyšok, vo forme žlto sfarbenej látky olej ovitej konzistencie, bol spracovaný ďalej rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-etylacetát (5:1) ako elučného činidla.The residue, as a yellow oil of oily consistency, was subjected to further flash chromatography on a silica gel column using hexane-ethyl acetate (5: 1) as eluent.

Bolo získaných 162 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.162 mg of the title compound are obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI₃): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,26-7,44 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,08 (dd, 1H, H-2), 5,75 (s, 1H, H-ľ), 4,68 (d, 1H, H-4', J=9 Hz), 4,12 a 3,80 (2d, 2H, SaCl·^, J=9 Hz), 3,43 (dq, 1H, H-5', J=6,6 s 9 Hz), 3,15 (s, 2H, H-2' a H-3'), 2,86 (m, 1 H, H-11), 2,59 (m, 1 H, 4'-OCOCHMe₂).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.26-7.44 (m, 10H, 2 Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6.08 (dd, 1H, H-2), 5.75 (s, 1H, H-1 '), 4.68 (d, 1H, H-4', J = 9 Hz), 4.12 and 3.80 ( 2d, 2H, SaCl 4, J = 9 Hz), 3.43 (dq, 1H, H-5 ', J = 6.6 with 9 Hz), 3.15 (s, 2H, H-2' and H-3 '), 2.86 (m, 1H, H-11), 2.59 (m, 1H, 4'-OCOCHMe ₂ ).

Medziprodukt 72Intermediate 72

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β, 7αα,8ηβ)]-8η-[(2,3-anhyd.ro-6-deoxy-4-0-(2,2-dimetylpropionyl)-β-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8, 8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7αα, 8ηβ)] - 8η - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O- (2,2-dimethylpropionyl)) -β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane- p-indacén3a- (1H) -carboxylic acid

Zmes 0,3 mmol medziproduktu 67, ktorého príprava je opísaná vyššie a 60 mmol 4-dimetylam.inopyridínu v 15 ml vysušeného dichlórmetánu, bola zmiešaná s 0,45 mmol pivaloylchloridu a po 2,5 hodinách bola táto reakčná zmes premytá vodou. Oddelená organická fáza bola odparená a zvyšok bolA mixture of 0.3 mmol of intermediate 67 described above and 60 mmol of 4-dimethylaminopyridine in 15 ml of dried dichloromethane was mixed with 0.45 mmol of pivaloyl chloride and after 2.5 hours the reaction mixture was washed with water. The separated organic phase was evaporated and the residue was

118 prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (5:1) ako elučného činidla.118 purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (5: 1) as eluent.

Bolo získaných 190 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .190 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI₃): 9,76 (s, 1H, CHO), 7,83 (m, 10H, 2xPh), 7,00 (s, 1H, CHPh₂), 6,08 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,77 (s, 1 H, H-ľ). 4,67 (d, 1H, H-4', J= 9 Hz), 4,13 a 3,81 (d,d, 1H, 1H, 8a-CH₂, J= 9 Hz), 3,43 (m, 1H, H-5'), 3,13 (m, 2H, H-2' a H-3'), 2,86 (t, 1 H, H-1, J= 3,9 Hz), 2,24 (m, 1 H, CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.76 (s, 1H, CHO), 7.83 (m, 10H, 2xPh), 7.00 (s, 1H, CHPh _2), 6.08 (dd, 1 H H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 4.77 (s, 1H, H-1 '). 4.67 (d, 1 H, H-4 ', J = 9 Hz), 4.13 and 3.81 (d, d, 1 H, 1 H, _8a-CH2, J = 9 Hz), 3.43 ( m, 1H, H-5 '), 3.13 (m, 2H, H-2' and H-3 '), 2.86 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.24 (m, 1H, CH _{(CH3) 2).}

Medziprodukt 73Intermediate 73

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4a3,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(2,3-anhydro-4-0-benzyloxy-karbonyl-6-deoxyβ -D-inanopyranosyloxy) metyl ] - 4- f or myl-4,4a , 5,6,7,7 a ,8,8aoktahydro-7-metyl-3 -(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4a3,7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-4-O-benzyloxycarbonyl-6-deoxy-D-inanopyranosyloxy) methyl 4-Methyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoctahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a (1H) ) carboxylate

K roztoku 0,3 mmol medziproduktu 67, ktorého príprava je opísaná vyššie a 0,8 mmol 4-dimetylaminopyridínu, v 15 ml dichlórmetánu, bolo po kvapkách pridaných 0,7 mmol benzyloxykarbonylchloridu a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná po dobu 3 hodín.To a solution of 0.3 mmol of intermediate 67 described above and 0.8 mmol of 4-dimethylaminopyridine in 15 mL of dichloromethane was added dropwise 0.7 mmol of benzyloxycarbonyl chloride and the resulting reaction mixture was stirred for 3 hours.

Po premytí vodou a solankou bolo rozpúšťadlo odparené a zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (5:1) ako elučného činidla.After washing with water and brine, the solvent was evaporated and the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (5: 1) as eluent.

Bolo získaných 185 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .185 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,32 (m, 15H, 3xPh), 6,99 (s, 1H, CHPh2), 6,08 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,20 (m, 2H, OCľ^Ph), 4,72 (s, 1H, H-ľ), 4,57 (d, 1H, H-4', J=8,4 Hz), 4,11 a 3,79 (2d, 2H, 8a-CH2 , J=9 Hz), 3,43 (m, 1H, H-5¹), 3,27 a 3,15 (2d, 2H, H-2' a H-3', J=3,6 Hz), 2S85 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz), 2,24 (m, 1H, CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.32 (m, 15H, 3xPh), 6.99 (s, 1H, CHPh2), 6.08 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 5.20 (m, 2H, OCl-Ph), 4.72 (s, 1H, H-1 '), 4.57 (d, 1H, H-4 ', J = 8.4 Hz), 4.11 and 3.79 (2d, 2H, 8a-CH2, J = 9 Hz), 3.43 (m, 1 H, H-5 ^1), 3 , 27 and 3.15 (2d, 2H, H-2 'and H-3', J = 3.6 Hz), 2S85 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2, 24 (m, 1H, CH (C H ₃ ) ₂ ).

Medziprodukt 74Intermediate 74

Príprava difenylnietyleste.ru kyseliny [ ÍR- (Ια , 3ηβ , 4β , 4ηβ , 7β , 7aa,8ηβ)]-8a-[(2,3-anhydro-6-deoxy-4-oxo-^-D-manopyranosylPreparation of diphenylnitrile ethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-oxo-4-D-manopyranosyl)

119 oxy) metyl ] -4-f ormyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7-metyl - 3(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej119 oxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s- indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 0,1 ml anhydridu kyseliny trifluóroctovej v 5 ml vysušeného dichlórmetánu bolo pridaných pri teplote -60 °C po kvapkách 0,06 ml dimety'lsulfoxidu a roztok 0,39 mmol medziproduktu 67, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 ml vysušeného dichlórmetánu. Po 60 minútach bol k tejto reakčnej zmesi pridaný trietylamín (0,24 ml) a zmes bola miešaná pri teplote -20 °C po dobu 2 hodín.To a solution of 0.1 ml of trifluoroacetic anhydride in 5 ml of dried dichloromethane was added dropwise at -60 ° C 0.06 ml of dimethylsulfoxide and a solution of 0.39 mmol of intermediate 67, as described above, in 5 ml of dried dichloromethane. dichloromethane. After 60 minutes, triethylamine (0.24 mL) was added to the reaction mixture, and the mixture was stirred at -20 ° C for 2 hours.

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexánetylacetát (4:1) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the residue was purified by flash chromatography using hexane / ethyl acetate (4: 1) as eluent.

Bolo získaných 171 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .171 mg of the title compound are obtained.

δ (1 H, CDCI3): 9,76 (s, 1H, CHO), 7,36 (m, 10H, 2xPh), 6,59 (s, 1 H, CHPh₂), 6,09 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,84 (s, 1 H, H-1 ’), 4,11 a 3,84 (2d, 2H, 8a-CH₂ ,, J=9 Hz), 3,92 (q, 1H, H-5', J=6,9 Hz), 3,59 a 3,37 (2d, H-2’a H3', J=4.2 Hz), 2,86 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,26 (m, 1H, CH(CH₃)₂).δ (1H, CDCl3): 9.76 (s, 1H, CHO), 7.36 (m, 10H, 2xPh), 6.59 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6.09 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.84 (s, 1H, H-1 '), 4.11 and 3.84 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9 Hz), 3.92 (q, 1H, H-5 &apos;, J = 6.9 Hz), 3.59 & 3.37 (2d, H-2 &apos; and H3 &apos;, J = 4.2 Hz) ), 2.86 (t, 1 H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.26 (m, 1 H, CH (CH _{3) 2).}

Medziprodukt 75Intermediate 75

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4a£,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2-0-benzoyl-6-deoxy-4-0-metyl^-D-altropyranosyloxy) metyl ] -4-f ormyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7metyl-3-(1-rnetyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4α, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2-O-benzoyl-6-deoxy-4-O-methyl-4-D-altropyranosyloxy) methyl 4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methyl-ethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- ( 1H) -carboxylic acid

K roztoku 15,88 g medziproduktu 48, ktorého príprava je opísaná vyššie a 8,83 g dimetylaminopyridínu, v 200 ml vysušeného dichlórmetánu, boli pridané po kvapkách pri teplote -25 °C v citinosfére dusíka 2 ml benzoylchloridu v 10 ml vysušeného dichlórmetánu. Vzniknutá reakčná zmes bola miešaná po dobu 45 minút, potom bol chladiaci kúpeľ odstavený a bolo pridaných veľmi opatrne 10 ml 1 M roztoky kyseliny chlorovodíkovej . Po oddelení oboch fáz bola organická fáza zriedená 600 ml dichlórmetánu a premytá postupne 500 ml 1 M roztokuTo a solution of 15.88 g of intermediate 48 described above and 8.83 g of dimethylaminopyridine in 200 mL of dried dichloromethane was added dropwise at -25 ° C in nitrogen citinosphere nitrogen 2 mL of benzoyl chloride in 10 mL of dried dichloromethane. The resulting reaction mixture was stirred for 45 minutes, then the cooling bath was removed and 10 mL of 1 M hydrochloric acid solution was added very carefully. After separation of the two phases, the organic phase was diluted with 600 ml of dichloromethane and washed successively with 500 ml of a 1 M solution.

120120

kyseliny chlorovodíkovej, 500 ml 10%-ného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a 500 ml soľanky.hydrochloric acid, 500 ml of 10% sodium bicarbonate solution and 500 ml of brine.

Po rozpustení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok vo forme látky olej ovitej konzistencie spracovaný pomocou rýchlej chromatografie na silikagéli za použitia zmesi etylacetáthexány (objem/objem 1:20 a 1:7) ako elučného činidla.After dissolution of the solvent to dryness, the residue as an oil was subjected to flash chromatography on silica gel using ethyl acetate / hexanes (v / v 1:20 and 1: 7) as eluent.

Bolo získaných 8,75 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme peny (výťažok 48 %).8.75 g of the title compound are obtained as a foam (yield 48%).

δ (1 H, CDCI₃): 9,66 (s, 1 H, CHO), 8,15-8,05, 7,60-7,2 (2m, 15H, 3Ph), 6,95 (s, 1H, CHPh₂), 5,93 (bd, 1H, H2, J=2,1 Hz), 5,35 (dd, 1H, H2', J=1,5 a 4,8 Hz), 4,82 (d, 1H, ΗΓ, J=1,8 Hz), 4,25 (m, 1 H, H3'), 3,99 (d, 1H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,86 (dq, 1H, H5', J=6,3 a 8,1 Hz), 3,68 (d, 1H, 8aCH₂, J=9 hz), 3,43 (s, 3H, OCH₃), 3,22 (dd, 1H, H4', J=3 a 8,1 Hz), 2,62 (t, 1H, H1, J=3,9 Hz), 2,45 (d, 1H, OH, J=2,4 Hz), 2,19 (m, 1 H, CH(CH₃)₂).δ (1H, CDCl ₃ ): 9.66 (s, 1H, CHO), 8.15-8.05, 7.60-7.2 (2m, 15H, 3Ph), 6.95 (s, 1H, CHPh ₂ ), 5.93 (bd, 1H, H 2, J = 2.1 Hz), 5.35 (dd, 1H, H 2 ', J = 1.5 and 4.8 Hz), 4.82 (d, 1H, J, 1.8 Hz), 4.25 (m, 1H, H 3 '), 3.99 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9 Hz), 3.86 (dq) 1 H, H 5 ', J = 6.3 and 8.1 Hz), 3.68 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9 Hz), 3.43 (s, 3H, OCH ₃ ), 3.22 (dd, 1H, H 4 ', J = 3 and 8.1 Hz), 2.62 (t, 1H, H 1, J = 3.9 Hz), 2.45 (d, 1H, OH, J = 2, 4 Hz), 2.19 (m, 1H, CH _{(CH3) 2).}

Medziprodukt 76Intermediate 76

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2-0-benzoyl- 3,6-dideoxy-4-0-metyl-3-oxo^-Dalopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-me tyl-3 -(1-metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H) karboxy LovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3α, 4β, 4α, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [(2-O-benzoyl-3,6-dideoxy-4-O-methyl-3-oxo) - Dalopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene- 3α- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 1,29 ml anhydridu kyseliny trifluóroctovej v 15 ml vysušeného dichlórmetánu, bolo pridaných po 10 minútach, pri teplote -60 °C a v atmosfére dusíka, 0,66 ml dimetylsulfoxidu. K vzniknutej suspenzii bol pridaný roztok 3,45 medziproduktu 75, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 30 ml vysušeného dichlórmetánu a táto zmes bola miešaná pri teplote -60 °C po dobu 1 hodiny. Potom bolo k zmesi pridaných po kvapkách 5,76 ml trietylamínu a teplota bola samovoľne vytemperovaná na -20 °C a bolo pridaných 6 ml vody k výslednej, žltosfarbenej reakčnej zmesi, ktorá bola potom miešaná pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny.To a solution of 1.29 ml of trifluoroacetic anhydride in 15 ml of dried dichloromethane was added, after 10 minutes, at -60 ° C and under a nitrogen atmosphere, 0.66 ml of dimethylsulfoxide. To the resulting suspension was added a solution of 3.45 of intermediate 75, as described above, in 30 mL of dried dichloromethane, and the mixture was stirred at -60 ° C for 1 hour. Then, 5.76 mL of triethylamine was added dropwise to the mixture and the temperature was allowed to warm to -20 ° C and 6 mL of water was added to the resulting, yellow-colored reaction mixture, which was then stirred at room temperature for 1 hour.

Po pridaní 200 ml dichlórmetánu a 200 ml vody sa utvorili 2 fázy. Organická fáza bola po oddelení vysušená síranom horečnatým a zahustená do sucha.After addition of 200 ml of dichloromethane and 200 ml of water, 2 phases were formed. After separation, the organic phase was dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness.

121121

Získaný surový zvyšok bol rozpustený v 10 ml dichlórmetánu a reagoval s 2 ml trietylamínu cez noc.The obtained crude residue was dissolved in 10 mL of dichloromethane and treated with 2 mL of triethylamine overnight.

Po odparení rozpúšťadiel bola zvyšná látka olej ovitej konzistencie spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexány (objem/objem, 1:15 a 1:10) ako elučného činidla.After evaporation of the solvents, the residual oily consistency was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexanes (v / v, 1:15 and 1:10) as eluent.

Bolo získaných 2,60 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme peny (výťažok 76 %).2.60 g of the title compound were obtained as a foam (yield 76%).

δ (¹ H, CDCI₃): 9,68 (s, 1 H. CHO), 8,2-8,0, 7,6-7,2 (2m, 15H, 3Ph), 6,96 (s, 1H, CHPh₂), 5,76 (dd, 1H, H2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,77 (dd, 1H, H2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,39 (dd, 1 H. H2', J=1,2 a 8,1 Hz), 4,53 (d, 1 H, Hľ, J=8,1 Hz), 4,09 (d, 1H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,75 (d, 1H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,7-3,4 (m, 5H, H4'+OCH₃+H5'), 2,63 (t, 1H, H1, J=4,2 Hz).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.68 (s, 1H, CHO), 8.2 to 8.0, 7.6-7.2 (2m, 15H, 3Ph), 6.96 (s, 1H, CHPh _2), 5.76 (dd, 1H, H2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 5.77 (dd, 1H, H2, J = 1.2 and 3.3 Hz); 5.39 (dd, 1H, H2 ', J = 1.2 and 8.1 Hz), 4.53 (d, 1H, 1H, J = 8.1 Hz), 4.09 (d, 1H) 8aCH ₂ , J = 9 Hz), 3.75 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9 Hz), 3.7-3.4 (m, 5H, H 4 '+ OCH ₃ + H 5'), 2 63 (t, 1H, H 1, J = 4.2 Hz).

Medziprodukt 77Intermediate 77

Príprava difenyImetylestéru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4aP,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(2,3,6-trideoxy-4-0-metyl-3-oxo^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester of [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αP, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(2,3,6-trideoxy-4-O-methyl-3-oxo-4-D-alopyranosyloxy)] methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) carboxylate

K dobre odplynenému roztoku (argón, 15 minút) 5,96 ml tributylstaniumhydridu v 120 ml vysušeného toluénu bol pridaný pomocou injekčnej striekačky pri teplote 90 °C po 1 hodine roztok 5,7 g medziproduktu 76 a 420 mg a,a’-azoizobutyronitrilu v 50 ml vysušeného toluénu, a zahrievanie zmesi pokračovalo, pokiaľ nebola reakcia skončená. Potom bola reakčná zmes ochladená na teplotu miestnosti a po pridaní 40 ml vody a 1,5 g fluoridu draselného bola cez noc miešaná.To a well degassed solution (argon, 15 min) of 5.96 mL of tributyltin hydride in 120 mL of dried toluene was added a solution of 5.7 g of intermediate 76 and 420 mg of α, α'-azoisobutyronitrile in 90 mL of syringe at 90 ° C after 1 h. 50 mL of dried toluene, and heating continued until the reaction was complete. The reaction mixture was then cooled to room temperature and stirred overnight after addition of 40 ml of water and 1.5 g of potassium fluoride.

Po odparení rozpúšťadla bol surový zvyšok miešaný s dietyléterom po dobu 1 hodiny a tuhé zložky boli potom odfiltrované .After evaporation of the solvent, the crude residue was stirred with diethyl ether for 1 hour and the solids were then filtered off.

Éterický roztok bol zahustený do sucha a získaná látka olej ovitej konzistencie bola spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexány (1:15 a 1:10) ako elučného činidla.The ethereal solution was concentrated to dryness and the resulting oily consistency was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexanes (1:15 and 1:10) as eluent.

Bolo získaných 2,22 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlú2.22 g of the title compound are obtained, m.p.

122 ceniny (po vysušení vo vákuu) , vo .forme peny. Výťažok 61 %.122 (after drying under vacuum), in the form of a foam. Yield 61%.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1 H, CHO), 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6_f04 (dd, 1H, H2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,45 (dd, 1H, Hľ, J=2,7 a 8,7 Hz), 4,06 (d, 1H, 8aCH₂, J=9Hz), 3,70 (d, 1H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,52 (s, 3H, OCH3), 3,53,3 (m, 2H, H4'+H5'), 2,7-2,5 (m, 3H, H1+H2'), 2,24 (m, 1H, CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6 _F 04 (dd, 1H, H2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.45 (dd, 1H, 1H, J = 2.7 and 8.7 Hz), 4.06 (d, 1H, 8aCH) ₂ , J = 9 Hz), 3.70 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9 Hz), 3.52 (s, 3H, OCH 3), 3.53.3 (m, 2H, H 4 '+ H 5') 2.7-2.5 (m, 3H, H 1 + H 2 '), 2.24 (m, 1H, CH (CH ₃ ) ₂ ).

Medziprodukt 78Intermediate 78

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ηβ,7β, 7ηα,8ηβ)]-8a-[(1S,7R,9R)- 2,8-dioxa-9-metyl-bicyklo[3.4.0]non-4-en-7-yloxy-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,Ίά,8,8a-oktahydro- 7-metyl-3- (1 -metyletyl.) -1,4-metán-s-indacén-3a- (1H) karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4ηβ, 7β, 7ηα, 8ηβ)] - 8α - [(1S, 7R, 9R) - 2,8-dioxa-9-methylbicyclo [3.4.0] non-4-en-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,8,8,8,8-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1, 4-methane-s-indacene-3a- (1H) carboxylic acid

K intenzívne miešanému roztoku 260 mg medziproduktu 77, ktorého príprava je opísaná vyššie a 110 mg dietyldiazometylfosfonátu vo vysušenom tetrahydrofuráne, bola pomaly pridaná pri teplote 0 °C v atmosfére dusíka kaša pripravená zo 112 mg tetrabutoxidu draselného v 1 ml vysušeného tetrahydrofuránu (bezprostredne bol pozorovaný vývoj plynu). Po 10 minútach bola zmes zriedená so 100 ml. dichlórmetánu a premytá 2 x 100 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, potom 2 x 100 ml hydrogénuhličitanu sodného a 2 x 100 ml soľanky a potom bola vysušená síranom horečnatým.To a vigorously stirred solution of 260 mg of intermediate 77 described above and 110 mg of diethyldiazomethylphosphonate in dried tetrahydrofuran, a slurry prepared from 112 mg of potassium tetrabutoxide in 1 ml of dried tetrahydrofuran was slowly added at 0 ° C (immediately observed development) gas). After 10 minutes, the mixture was diluted with 100 mL. dichloromethane and washed with 2 x 100 ml of 1 M hydrochloric acid solution, then 2 x 100 ml of sodium bicarbonate and 2 x 100 ml of brine, and then dried over magnesium sulfate.

Po odstránení rozpúšťadla bola získaná látka olej ovitej konzistencie, ktorá bola spracovaná ďalej rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (objem/objem, 1:15 a 1:12) ako elučného činidla.Removal of the solvent gave an oily consistency which was further subjected to flash chromatography on silica gel using ethyl acetate-hexane (v / v, 1:15 and 1:12) as eluent.

Bolo získaných 200 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme peny. Výťažok 77 %.200 mg of the title compound was obtained as a foam. Yield 77%.

δ (¹H, CDCI3): 9,75 (s, 1H, CHO), 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1H, H2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,45 (m, 1H, H4'), 4,65 (m, 2H, H3'), 4,254,15(m, 2H, H7'+Hľ), 4,07 (d, 1H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,71 (d, 1 H, 8aCH₂, j=9 Hz), 3,19 (dq, 1H, H9’, J=6 a 8,4 Hz), 2,77 (t, 1H, H1, J=3,9 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6.05 ( dd, 1H, H 2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 5.45 (m, 1H, H 4 '), 4.65 (m, 2H, H 3'), 4.254.15 (m, 2H, H7 '+ H), 4.07 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9 Hz), 3.71 (d, 1H, 8aCHa _2, J = 9 Hz), 3.19 (dq, 1H, H9 J, J = 6 and 8.4 Hz), 2.77 (t, 1H, H1, J = 3.9 Hz).

123123

Medziprodukt 79Intermediate 79

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ηβ,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(1S,4R,7R,9R)- 2,8-dioxa-4-hydroxy-9-metyl-čisti icykl ο [3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]- 4-formy1-4, 4a, 5,6,7,7a,8, 8a-oktahydro-7-metyl- 3 -(1-metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(1S, 4R, 7R, 9R) - 2,8-dioxa-4-hydroxy-9-methyl- Purification of cyclone ο [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4, 4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) ) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 620 mg medziproduktu 78, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 m.1 bezvodého tetrahydrofuránu, bol pridaný v atmosfére dusíka 0,5 M roztok 9-borabicyklo[3.3.1]nonánu (6 ml) a vzniknutá reakčná zmes bola zahrievaná po dobu 1 hodiny na teplotu 50 ’C. Po pridaní ďalšieho objemu roztoku 9-borabicyklo[3.3.1]nonánu pri teplote 50 °C, bola reakcia počas 3 hodín ukončená a reakčná zmes bola potom miešaná pri teplote miestnosti ešte ďalšiu 1 hodinu. Potom boli k zmesi pridané opatrne 2 ml etylalkoholu (vývoj plynu) a zmes bola miešaná opäť po dobu 1 hodiny. Po skončení tejto operácie bolo k zmesi pridaných 5 ml 3 M roztoku hydroxidu sodného a 5 ml 35%-ného (objem/objem) peroxidu vodíka pri teplote 0 °C a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti, pri teplote 0 °C a pri teplote 70 °C cez noc (zmysel nejasný).To a solution of 620 mg of intermediate 78, as described above, in 5 ml of anhydrous tetrahydrofuran was added, under a nitrogen atmosphere, a 0.5 M solution of 9-borabicyclo [3.3.1] nonane (6 ml) and the resulting reaction mixture was heated for 1 hour at 50 ° C. After an additional volume of 9-borabicyclo [3.3.1] nonane solution was added at 50 ° C, the reaction was complete for 3 hours and the reaction mixture was then stirred at room temperature for a further 1 hour. Then, 2 ml of ethanol (gas evolution) was carefully added to the mixture, and the mixture was stirred again for 1 hour. At the end of this operation, 5 ml of 3M sodium hydroxide solution and 5 ml of 35% (v / v) hydrogen peroxide were added to the mixture at 0 ° C and the mixture was stirred at room temperature, 0 ° C and at room temperature. 70 ° C overnight (meaning unclear).

Výsledná reakčná zmes bola ochladená na teplotu miestnosti a zahustená na polovicu zostávajúceho objemu, potom zriedená 100 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej a vytrepaná 2 x 100 ml etylacetátu.The resulting reaction mixture was cooled to room temperature and concentrated to half the remaining volume, then diluted with 100 mL of 1 M hydrochloric acid solution and shaken with 2 x 100 mL of ethyl acetate.

Oddelená organická fáza bola premytá postupne 100 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 2 x 100 ml roztoku hydrogénuhličitanu sodného a 100 ml soľanky.The separated organic phase was washed sequentially with 100 ml of 1 M hydrochloric acid solution, 2 x 100 ml of sodium bicarbonate solution and 100 ml of brine.

Po vysušení síranom sodným a zahustení, bola z organickej fázy získaná látka sirupovitej konzistencie, ktorá bola ďalej spracovaná rýchlou chromatografiou za použitia zmesi acetón-hexán (1:10 a 1:5) ako elučného činidla.After drying over sodium sulfate and concentration, a syrup-like substance was obtained from the organic phase, which was further subjected to flash chromatography using acetone-hexane (1:10 and 1: 5) as eluent.

Bolo získaných 475 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme peny. Výťažok 74 %.475 mg of the title compound was obtained as a foam. Yield 74%.

δ (¹H, CDCI3): 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 7,04 (s, 1 H, CHPh₂), 5,90 (dd, 1H, H2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,75 (d, 1H, HOCH₂, J=10_r5 Hz), 4,62 (dd, 1H, H7', J=2,7δ ⁽¹ H, CDCl3): 7.5-7.2 (m, 10H, 2 Ph), 7.04 (s, 1H, CHPh _2), 5.90 (dd, 1H, H2, J = 1, 5 and 3.6 Hz), 4.75 (d, 1H, HOCH _2, J = 10 _r 5 Hz), 4.62 (dd, 1 H, H-7 ', J = 2.7

124 a 5,1 Hz), 4,27 (m, 1H, H4'), 4,16 (d, 1H, 8aCH2, J=9 Hz), 4,09 (dd, 1 H, H3', J=6 a 9,6 Hz), 3,91 (t, 1H, H3’, J=6,9 Hz), 3,7-3,5 (m, 3H, 8aCH₂+Hľ+H9'), 3,35 (d, 1H, HOCH₂, J=11,5 Hz), 3,22 (dd, 1H, HOCH₂, J=11,1 a 12 Hz), 2,57 (t, 1H, H1, 1=4,5 Hz), 2,48 (m, 1H, H5'), 2,30 (m, 1H, CH(CH₃)₂).124 and 5.1 Hz), 4.27 (m, 1H, H 4 '), 4.16 (d, 1H, 8aCH 2, J = 9 Hz), 4.09 (dd, 1H, H 3', J = 6 and 9.6 Hz), 3.91 (t, 1H, H 3 ', J = 6.9 Hz), 3.7-3.5 (m, 3H, 8aCH ₂ + H + + H 9'), 3, 35 (d, 1 H, HOCH ₂ , J = 11.5 Hz), 3.22 (dd, 1 H, HOCH ₂ , J = 11.1 and 12 Hz), 2.57 (t, 1H, H 1, 1 = 4.5 Hz), 2.48 (m, 1H, H 5 '), 2.30 (m, 1H, CH (CH ₃ ) ₂ ).

Medziprodukt 80Intermediate 80

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4aP,7β, 7aa,8aP) ] - 8a- [ (lS,7R,9R)-2,8-dioxa-9-b.icyklo[ 3.4.0] -non-4en-7-yl-oxymetyl]- 4-(terc.butyl-dimetylsilyl-oxymetyl)-4,4a, 5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-sindacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αP, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(1S, 7R, 9R) -2,8-dioxa-9-bicyclo [3.4.0] -non-4en-7-yl-oxymethyl] -4- (tert-butyl-dimethylsilyloxy-methyl) -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1 methylethyl) -1,4-methano-s-indacen-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 200 mg medziproduktu 78, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 ml tetrahydrofuránu, bolo pridaných 18, 9 mg tuhej .formy tetrahydroboritanu sodného a 1 ml vody a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote 0 °C po dobu 30 minút a potom ešte 1 hodinu pri teplote miestnosti. Potom boli k zmesi pridané opatrne 2 ml vody pri teplote 0 °C a zmes bola vytrepaná medzi 100 ml etylacetátu a 100 ml vody. Oddelená organická fáza bola vysušená síranom horečnatým a zahustená do sucha.To a solution of 200 mg of intermediate 78 described above in 5 ml of tetrahydrofuran was added 18.9 mg of solid sodium borohydride and 1 ml of water, and the resulting mixture was stirred at 0 ° C for 30 minutes and then 1 hour at room temperature. Then, 2 mL of water was carefully added at 0 ° C and the mixture was partitioned between 100 mL of ethyl acetate and 100 mL of water. The separated organic phase was dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness.

Zvyšok vo forme látky sirupovitej konzistencie bol rozpustený v 5 ml dimetylformainidu a ponechaný reagovať v atmosfére dusíka pri teplote miestnosti s 204 mg imidazolu a 316 mg terc.butyldimetyIsilylchloridu cez noc. Potom bola reakčná zmes naliata do 100 ml zmesi 1 M roztoku chloridu amónneho a etylacetátu (obj ein/objem, 1:1) a miešaná po dobu 1 hodiny.The syrup-like residue was dissolved in 5 ml of dimethylformainide and allowed to react under a nitrogen atmosphere at room temperature with 204 mg of imidazole and 316 mg of tert-butyldimethylsilyl chloride overnight. The reaction mixture was then poured into 100 mL of 1 M ammonium chloride / ethyl acetate (v / v, 1: 1) and stirred for 1 hour.

Oddelená organická fáza bola postupne premytá 100 ml 1 M roztoku chloridu amónneho a 100 ml soľanky, potom bola vysušenti síranom horečnatým a zahustená do sucha.The separated organic phase was washed successively with 100 ml of 1 M ammonium chloride solution and 100 ml of brine, then dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness.

Zvyšok vo forme peny bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexány (objein/objem , 1:20) ako elučného činidla.The foam residue was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexanes (v / v, 1:20) as eluent.

Bolo získaných 215 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny. Celkový výťažok bol 92 %.215 mg of the title compound are obtained. The overall yield was 92%.

125 δ (¹Η, CDCI₃): 7,5-7,2 (m, 10Η, 2Ph), 6,94 (s, 1H, CHPh₂), 5,96(dd, 1 H, H2, J=1,2 a 3,6 Hz), 5,54 (m, 1H, H4’), 4,65 (m, 2H, H3j, 4,25-4,15 (m, 3H, SiOCH₂+H7'+Hľ), 4,1 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,69 (d, 1H, SiOCH₂, J=9 Hz), 3,30 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,19 (dq, 1 H, H9', J=6 a 9 Hz), 2,68 (dd, 1H, H6', J=2 a 13,2 Hz), 2,57 (t, 1H, H1, J=4.2), 2,3 (m, 2H, CH(CH₃)₂+H6'), -0,017 a ' -0,031 (2s, 6H, (CH₃)₂Si).125 δ ( ¹ Η, CDCl ₃ ): 7.5-7.2 (m, 10 °, 2Ph), 6.94 (s, 1H, CHPh ₂ ), 5.96 (dd, 1H, H2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 5.54 (m, 1H, H 4 '), 4.65 (m, 2H, H 3', 4.25-4.15 (m, 3H, SiOCH ₂ + H 7 '+) H +), 4.1 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.3 Hz), 3.69 (d, 1H, SiOCH _2, J = 9 Hz), 3.30 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.3 Hz), 3.19 (dq, 1H, H9 ', J = 6 and 9 Hz), 2.68 (dd, 1H, H6', J = 2 and 13.2 Hz), 2 57 (t, 1H, H 1, J = 4.2), 2.3 (m, 2H, CH (CH ₃ ) ₂ + H 6 '), -0.017 and -0.031 (2s, 6H, (CH ₃ ) ₂ Si ).

Medziprodukt 81Intermediate 81

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ββ,4β,4ηβ,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(lS,4R,7R,9R)-2,8-dioxa-4-hydroxy-9-metylcis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-(terc.butyl-dimetylsilyl-oxymetyl)-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ββ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [(1S, 4R, 7R, 9R) -2,8-dioxa-4-hydroxy-9-methylcis- bicyclo [3.4.0] non-7-yloxymethyl] -4- (tert-butyl-dimethylsilyl-oxymethyl) 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl- 3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 700 mg medziproduktu 80, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 ml vysušeného tetrahydrofuránu, bol pridaný 0,5 M roztok 9-borabicyklo[3.3.1]nonánu (6 ml) v atmosfére dusíka a vzniknutá reakčná zmes bola zahrievaná po dobu hodiny na teplotu 50 °C. Po pridaní ďalšieho objemu roztoku 9-borabicyklo[3.3.1]nonánu pri teplote 50 C, bola reakcia počas 3 hodín skončená a reakčná zmes bola potom miešaná pri teplote miestnosti ešte potom, čo boli opatrne pridané ml etylalkoholu, 1 hodinu. Po skončení tejto operácie bolo k zmesi pridaných 5 ml roztoku 3 M hydroxidu sodného a potom 5 ml 35%-ného (objem/objem) peroxidu vodíka pri teplote 0 °C a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu a potom pri teplote 70 °C cez noc.To a solution of 700 mg of intermediate 80, as described above, in 5 ml of dried tetrahydrofuran was added a 0.5 M solution of 9-borabicyclo [3.3.1] nonane (6 ml) under a nitrogen atmosphere and the resulting reaction mixture was heated for hours at 50 ° C. After addition of an additional volume of 9-borabicyclo [3.3.1] nonane solution at 50 ° C, the reaction was complete for 3 hours and the reaction mixture was then stirred at room temperature after carefully adding 1 ml of ethyl alcohol for 1 hour. At the end of this operation, 5 ml of 3M sodium hydroxide solution and then 5 ml of 35% (v / v) hydrogen peroxide were added to the mixture at 0 ° C and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour and then at 70 ° C overnight.

Výsledná reakčná zmes bola ochladená na teplotu miestnosti a zahustená na polovicu zostávajúceho objemu, potom bola zriedená 100 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej a vytrepaná 2 x 200 ml etylacetátu.The resulting reaction mixture was cooled to room temperature and concentrated to half the remaining volume, then diluted with 100 mL of 1 M hydrochloric acid solution and shaken with 2 x 200 mL of ethyl acetate.

Oddelená organická fáza bola postupne premytá 100 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, potom 100 ml nasýteného vodného roztoku hydrogénuhliči tanú sodného a 100 rnl solanky, vysušená síranom horečnatým a po zahustení do sucha bol zvyšok vo forme látky sirupovitej konzistencie spracovaThe separated organic phase was washed successively with 100 ml of 1M hydrochloric acid solution, then with 100 ml of saturated aqueous sodium hydrogen carbonate solution and 100 ml of brine, dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness to give a syrup-like residue.

126 ný pomocou rýchlej chromatografie, za použitia zmesi acetón-hexány (1:20 a 1:15) ako elučného činidla.Flash chromatography, eluting with acetone-hexanes (1:20 and 1:15).

Bolo získaných 550 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny. Výťažok 77 %.550 mg of the title compound was obtained as a white foam. Yield 77%.

δ (¹H, CDCI3): 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,94 (s, 1H, CHPh2), 5,95 (m, 1 H, H2), 4,57 (dd, 1H, H7', J= 3 a 5,1 Hz), 4,30-^4,15 (m, 2H, H4’+CH2OSi), 4,10-3,95 (m, 2H, H3^,+8aCH2),. 3,87 (t, 1H, H3’, J=6,9 Hz), 3,7-3,5 (m, 3H, ΗΓ+δόΟΗ^Ηθ¹), 3,30 (d, 1H, CH₂OSi, J=9,3 Hz), 2,53 (t, 1H, H1, J=3,9 Hz), 2,46 (m, 1H, H5'), 2,32 (m, 1H, CH(CH₃)₂), -0,016 a -0,029 (2s, 6H, (CH₃)₂SÍ).δ ⁽¹ H, CDCl3): 7.5-7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.94 (s, 1H, CHPh2), 5.95 (m, 1H, H2), 4.57 ( dd, 1H, H 7 ', J = 3 and 5.1 Hz), 4.30 - 4.15 (m, 2H, H 4' + CH 2 OSi), 4.10-3.95 (m, 2H, H 3 ^, + 8aCH2) ,. 3.87 (t, 1H, H3 ', J = 6.9 Hz), 3.7-3.5 (m, 3H, ΗΓ-δόΟΗ Ηθ ^ ^1), 3.30 (d, 1 H, CH ₂ OSi J = 9.3 Hz), 2.53 (t, 1H, H 1, J = 3.9 Hz), 2.46 (m, 1H, H 5 '), 2.32 (m, 1H, CH (CH) ₃ ) ₂ ), -0.016 and -0.029 (2s, 6H, (CH ₃ ) ₂ Si).

Medziprodukt 82Intermediate 82

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3a0,4β,4ap,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(1S,4R,9R)- 2,8-dioxa-4-metoxy-9-metyl-cisbicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8, 8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1a, 3a0,4β, 4ap, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8a - [(1S, 4R, 9R) -2,8-dioxa-4-methoxy-9-methyl-cis-bicyclo [ 3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1, 4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 537 mg medziproduktu 81, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 ml bezvodého tetrahydrofuránu, bol pri teplote 0 °C pridaný v atmosfére dusíka po malých častiach hydrid sodný (75 mg). Vzniknutá reakčná zmes bola miešaná po dobu 10 minút a potom bolo k nej pridaných 374 μΐ metyljodídu a zmes bola ponechaná pri teplote miestnosti, pokiaľ nebola reakcia skončená. Potom bolo k zmesi rýchlo pridaných 100 ml vody a zmes bola vytrepaná 100 ml etylacetátu.To a solution of 537 mg of intermediate 81, as described above, in 5 ml of anhydrous tetrahydrofuran was added sodium hydride (75 mg) in small portions at 0 ° C under nitrogen. The resulting reaction mixture was stirred for 10 minutes and then 374 µL of methyl iodide was added and the mixture was left at room temperature until the reaction was complete. 100 ml of water was then added rapidly to the mixture and the mixture was extracted with 100 ml of ethyl acetate.

Oddelená organická fáza bola premytá 100 ml soľanky a po zahustení, do sucha bola získaná látka penovitej konzistencie, ktorá bola rozpustená v 5 ml bezvodého tetrahydrofuránu a potom ponechaná reagovať pri teplote 40 °C 24 hodín s 2 ml 1,1 M roztoku tetrabutylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne. Výsledná reakčná zmes bola zahustená do sucha a zvyšok bol rozpustený v etylacetáte, premytý 2 x 100 ml vody, vysušený síranom horečnatým a po zahustení bola získaná látka sirupovitej konzistencie, ktorá bola rozpustená v 85 ml vysušeného dichlórmetánu.The separated organic phase was washed with 100 ml of brine and, after concentration, to dryness a foam-like substance was obtained which was dissolved in 5 ml of anhydrous tetrahydrofuran and then treated at 40 ° C for 24 hours with 2 ml of a 1.1 M solution of tetrabutylammonium fluoride in tetrahydrofuran. . The resulting reaction mixture was concentrated to dryness and the residue was dissolved in ethyl acetate, washed with water (2 x 100 mL), dried over magnesium sulfate and concentrated to give a syrupy solid which was dissolved in 85 mL of dried dichloromethane.

127127

K tejto zmesi bolo pridaných 215 mg pyridíniumchlórchromanu a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti, pokiaľ nebola reakcia skončená. Potom bola suspenzia naliata do intenzívne miešanej zmesi dichlórmetánu a 10%-ného vodného roztoku disiričitanu sodného.To this mixture was added 215 mg pyridinium chlorochromate and the mixture was stirred at room temperature until the reaction was complete. The suspension was then poured into a vigorously stirred mixture of dichloromethane and a 10% aqueous sodium metabisulfite solution.

Po oddelení bola organická fáza premytá 200 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej a 200 ml 1 M roztoku hydroxidu sodného, vysušená síranom horečnatým a zahustená do sucha.After separation, the organic phase was washed with 200 ml of 1 M hydrochloric acid solution and 200 ml of 1 M sodium hydroxide solution, dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness.

Zvyšok vo forme látky olej ovitej konzistencie bol spracovaný pomocou rýchlej chromatografie na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (1:15, 1:10 a 1:8) ako elučného činidla.The oily residue was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (1:15, 1:10 and 1: 8) as eluent.

Bolo získaných 255 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme látky olej ovitej konzistencie. Celkový výťažok 57 %.255 mg of the title compound was obtained as an oil. Total yield 57%.

δ (¹H, CDCI₃): 9,74 (s, 1 H, CHO), 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,04 (dd, 1H, H2, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,60 (m, 1H, H7'), 4,10-3,95 (m, 2H, H4'+8aCH₂), 3,90-3,65 (m, 3H, H3'+Hľ), 3,65-3,55 (m, 2H, 8aCH₂+H9'), 3,35 (s, 3H, OCH3), 2,73 (t, 1H, H1, J-=3_f6 Hz), 2,54 (m, 1H, H5j, 22,4 (m, 1H, CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.74 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6, O 4 (dd, 1H, H 2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.60 (m, 1H, H 7 '), 4.10-3.95 (m, 2H, H 4' + 8aCH ₂ ) 3.90-3.65 (m, 3H, H 3 '+ H 1'), 3.65-3.55 (m, 2H, 8aCH ₂ + H 9 '), 3.35 (s, 3H, OCH 3), 2 73 (t, 1H, H1, J = 3 _f 6), 2.54 (m, 1 H, H5j, 22.4 (m, 1 H, CH (CH _{3) 2).}

Medziprodukt 83Intermediate 83

Príprava dif enylme tyleste.ru kyseliny [ ÍR-(Ια , 3ap , 4β , 4a0,7β , 7aa,8ηβ)]-8a-[(6-deoxy-4-0-metyl-3-oxo^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-(1,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3- (1-inetyletyl) -1,4-metán-s- indacén-3a- (1H) karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester of [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4α0.7β, 7αα, 8ηβ)] - 8α - [(6-deoxy-4-O-methyl-3-oxo-4-altropyranosyloxy)] methyl] -4- (1,3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-ethylethyl) -1,4 -methane-s-indacene-3a- (1H) carboxylic acid

Roztok 9,7 mmol medziproduktu 48, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 40 ml vysušeného metanolu, bol zmiešaný so 110 ml etylénglykolu, 3,25 ml trimetylortoformiátu a katalytickým množstvom kyseliny p-toluénsulfónovej a vzniknutá reakčná zmes bola zahrievaná pri teplote 40 ⁰ C po dobu 3 hodín. Po ochladení bola zmes naliata do 500 ml zmesi etylacetát-vodný roztok hydrogénuhličítanu sodného (1: 1) a oddelená vodná fáza bola dôkladne extrahovaná s etylacetáA solution of 9.7 mmol of intermediate 48, as described above, in 40 ml of dried methanol, was mixed with 110 ml of ethylene glycol, 3.25 ml of trimethyl orthoformate and a catalytic amount of p-toluenesulfonic acid, and the resulting reaction mixture was heated at 40 ^° C. for 3 hours. After cooling, the mixture was poured into 500 ml of ethyl acetate-aqueous sodium bicarbonate solution (1: 1) and the separated aqueous phase was thoroughly extracted with ethyl acetate.

128128

tom. Spojené organické fázy boli premyté s vodou a soľankou a vysušené.it. The combined organic phases were washed with water and brine and dried.

Po odstránení rozpúšťadiel bol zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (6:1) ako elučného činidla.After removal of the solvents, the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (6: 1) as eluent.

Bolo získaných 6,1 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .6.1 g of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 7,43 a 7,30 (m,m, 4H, 6H, 2xPh), 6,94 (s, 1H, CHPh₂), 5,83 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 5,07 (s, 1H, 4-CH), 4,63 (d, 1H, H-ľ, J=1,5 Hz), 4,20 (t, 1H, H-3', J=3,3 Hz), 4,07 (d, 1H, 8a-CHa, J=9,3 Hz), 3,84 (m, 6H, H-2’, 8a-CHb a OCH₂CH₂O), 3,71 (m, 1H, H-5'), 3,42 (s, 3H, OCH3), 3,21 (dd, 1H, H-4', J=3 a 9 Hz), 2,63 (m, 1H, CH(CH₃)₂), 2,54 (t, 1H, H-1, J=3,9Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 7.43 and 7.30 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6.94 (s, 1H, CHPh _2), 5.83 (dd, 1 H, H-2 J = 1.2 and 3.6 Hz), 5.07 (s, 1H, 4-CH), 4.63 (d, 1H, H-1 ', J = 1.5 Hz), 4.20 (s) t, 1H, H-3 ', J = 3.3Hz), 4.07 (d, 1H, 8a-CHa, J = 9.3Hz), 3.84 (m, 6H, H-2', 8a-CH ₃ and OCH ₂ CH ₂ O), 3.71 (m, 1H, H-5 '), 3.42 (s, 3H, OCH 3), 3.21 (dd, 1H, H-4', J = 3 and 9 Hz), 2.63 (m, 1 H, CH _{(CH3) 2),} 2.54 (t, 1 H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 84Intermediate 84

Príprava difenylinetylesteru kyseliny [ ÍR-(la , 3aP , 4β , 4aP , 7β , 7aa,8aβ)]-8a-[(2-0-benzoyl-6-deoxy-4-0-metyl-3-oxo^-Daltropyranosyloxy)metyl]-4-(l,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7, 7a, 8,8a-oktahyd.ro-7-metyl-3- (l-metyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylinethyl ester [1R- (1α, 3αP, 4β, 4αP, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(2-O-benzoyl-6-deoxy-4-O-methyl-3-oxo-4-Dalopyranosyloxy)] methyl] -4- (1,3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7, 7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1 , 4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 12,12 g medziproduktu 83, ktorého príprava je opísaná vyššie a 6,3 g dimetylaminopyridínu v 155 ml vysušeného dichlórmetánu bolo pridaných v atmosfére dusíka pri teplote -20 °C po kvapkách 1,4 ml benzoylchloridu v 50 ml vysušeného dichlórmetánu. Vzniknutá reakčná zmes bola potom po dobu 2 hodín miešaná, potom ponechaná samovoľne vytemperovať na teplotu miestnosti a následne bola premytá postupne 500 ml 0,1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 500 ml nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a 500 ml soľanky.To a solution of 12.12 g of intermediate 83 described above and 6.3 g of dimethylaminopyridine in 155 ml of dried dichloromethane was added dropwise 1.4 ml of benzoyl chloride in 50 ml of dried dichloromethane under a nitrogen atmosphere at -20 ° C. The reaction mixture was stirred for 2 hours then allowed to warm to room temperature and washed sequentially with 0.1M hydrochloric acid (500 mL), saturated aqueous sodium bicarbonate (500 mL) and brine (500 mL).

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok spracovaný .rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetáthexány (objem/objem, 1:4) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the residue was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate / hexanes (v / v, 1: 4) as eluent.

Bolo získaných. 5,89 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej peny. Výťažok 42 %.It was obtained. 5.89 g of the title compound as a white foam. Yield 42%.

129 δ (¹Η, CDCI3): 8,14-8,05, 7,6-7,2 (2m, 1.5Η, 3Ph), 6,91 (s, 1H, CHPh₂), 5,70 (bd, 1H, H2, J=2,1 Hz), 5,34 (dd, 1H, H2*. J=2,1 a 5,1 Hz), 5,01 (s, 1H, OCHO), 4,82 (d, 1H, ΗΓ, J=1,8 Hz), 4,26 (m,. 1H, H3'), 3,98 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,92-3,74 (m, 5H, H5'+OCH₂CH₂O), 3,72 (d, 1 H. 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,42 (s, 3H, OCH₃), 3,23 (dd, 1H, H4', J=3,3 a 8,1 Hz), 2,57 (m, 1H, CH(CH₃)₂), 2,44-2,38 (m, 2H, OH+H1).129 δ ( ¹ Η, CDCl 3): 8.14-8.05, 7.6-7.2 (2m, 1.5Η, 3Ph), 6.91 (s, 1H, CHPh ₂ ), 5.70 (bd) 1H, H2, J = 2.1 Hz), 5.34 (dd, 1H, H2 *, J = 2.1 and 5.1 Hz), 5.01 (s, 1H, OCHO), 4.82 (d, 1H, J, J = 1.8 Hz), 4.26 (m, 1H, H 3 '), 3.98 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.3 Hz), 3.92 -3.74 (m, 5H, H 5 '+ OCH ₂ CH ₂ O), 3.72 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.3 Hz), 3.42 (s, 3H, OCH ₃ ) 3.23 (dd, 1H, H 4 ', J = 3.3 and 8.1 Hz), 2.57 (m, 1H, CH (CH ₃ ) ₂ ), 2.44-2.38 (m, 2H, OH + H1).

Medziprodukt 85Intermediate 85

Príprava difenylmetyleste.ru kyseliny [ÍR-(la,3aP,4β,4aP,7β, 7aa,8ap)]-8a-[(2-0-benzoyl-3,6-dideoxy-4-0-metyl-3-oxo-p-Dalopyranosyloxy) rnety’l ] -4- (1,3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahyd.ro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ethyl acid [1R- (1α, 3αP, 4β, 4αP, 7β, 7αa, 8αp)] - 8α - [(2-O-benzoyl-3,6-dideoxy-4-O-methyl-3-oxo) -p-Dalopyranosyloxy) methyl] -4- (1,3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacén3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 0,45 ml anhydridu kyseliny trifluóroctovej v 5 ml vysušeného dichlórmetánu bolo pridaných v atmosfére dusíka pri teplote -60 °C počas 10 minút 0,23 ml dimetylsulfoxidu. K vzniknutej suspenzii bol potom pridaný roztok 1,2 g medziproduktu 84, pripraveného v predchádzajúcom stupni, v 5 ml vysušeného dichlórmetánu a táto reakčná zmes bola miešaná pri teplote -60 °C po dobu 1 hodiny. Potom bolo po kvapkách pridaných 1,24 ml trietylamínu a teplota zmesi bola vytemperovaná na -20 °C a k vzniknutému žlto sfarbenému roztoku boli pridané 2 ml vody a táto zmes bola potom miešaná pri teplote miestnosti 1 hodinu.To a solution of 0.45 mL of trifluoroacetic anhydride in 5 mL of dried dichloromethane was added 0.23 mL of dimethylsulfoxide under nitrogen at -60 ° C for 10 min. A solution of 1.2 g of intermediate 84 prepared in the previous step in 5 ml of dried dichloromethane was added to the resulting suspension, and the reaction mixture was stirred at -60 ° C for 1 hour. 1.24 ml of triethylamine was added dropwise and the temperature of the mixture was allowed to warm to -20 ° C and 2 ml of water was added to the resulting yellow solution, which was then stirred at room temperature for 1 hour.

Po pridaní 200 ml dichlórmetánu a 200 ml vody sa reakčná zmes rozdelila na dve fázy. Oddelená organická fáza bola vysušená síranom horečnatým a po zahustení do sucha bol získaný surový zvyšok rozpustený v 10 ml dichlórmetánu a ponechaný reagovať s 2 ml trietyl ainínu cez noc.After addition of 200 ml of dichloromethane and 200 ml of water, the reaction mixture was separated into two phases. The separated organic phase was dried over magnesium sulfate and, after concentration to dryness, the crude residue was dissolved in 10 mL of dichloromethane and treated with 2 mL of triethyl ainine overnight.

Po odparení rozpúšťadiel bola získaná Látka olej ovitej konzistencie, ktorá bola ďalej spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexány (objem/objem, 1:15 a 1:10) ako elučného činidla.After evaporation of the solvents, an oily consistency was obtained which was further subjected to flash chromatography on silica gel using ethyl acetate-hexanes (v / v, 1:15 and 1:10) as eluent.

Bolo získaných 1,1 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme (po vysušení vo vákuu) peny. Výťažok 92 %.1.1 g of the title compound are obtained in the form of (after drying under vacuum) a foam. Yield 92%.

130 δ (¹Η, CDCI3): 8,2-8,0, 7,6-7,2 (2m, 15Η, 3Ph), 6,90 (s, 1 H, CHPh₂), 5,57 (dd, 1H, H2, J=1,2a 3,6 Hz), 5,37 (dd, 1H, H2', J=1,5 a 8,1 Hz), 5,05 (s, 1 H,130 δ ( ¹ Η, CDCl 3): 8.2-8.0, 7.6-7.2 (2m, 15Η, 3Ph), 6.90 (s, 1H, CHPh ₂ ), 5.57 (dd) 1 H, H2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 5.37 (dd, 1H, H2 ', J = 1.5 and 8.1 Hz), 5.05 (s, 1H,

OCHO), 4,52 (d, 1H, Hľ, J=8,1 Hz), 4,08 (d, 1H, 8aCH₂, J=8,7 Hz), 3,9-3,7 (m, 5H, OCH₂CH₂O+8aCH₂), 3,6-3,4 (m, 5H, H4'+OCH3+H5'), 2,62 (m, 1H, CH(CH₃)₂), 2,43 (t, 1 H, H1, J=3,9 Hz).OCHO), 4.52 (d, 1 H, H, J = 8.1 Hz), 4.08 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 8.7 Hz), 3.9-3.7 (m, 5H, OCH ₂ CH ₂ O + 8aCH ₂ ), 3.6-3.4 (m, 5H, H 4 '+ OCH 3 + H 5'), 2.62 (m, 1H, CH (CH ₃ ) ₂ ), 2 43 (t, 1H, H1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 86Intermediate 86

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa₎8aβ)]-8a-[(2,3,6-trideoxy-4-0-metyl-3-oxo^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-(1,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3 -(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa ₎ 8αβ)] - 8α - [(2,3,6-trideoxy-4-O-methyl-3-oxo-4-D-alopyranosyloxy)] methyl] -4- (1,3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4 methane-s-indacene-3a (1H) carboxylic acid

K dobre odplynenému roztoku (argón, 15 minút) 263 μΐ tributylstaniumhydridu v 10 ml vysušeného toluénu bol pridaný pomocou injekčnej striekačky pri teplote 90 “C počas 1 hodiny roztok 250 mg medziproduktu 85, ktorého príprava je opísaná vyššie a 16 mg a,a’-azoizobutyronitrilu v 5 ml vysušeného toluénu a zahrievanie zmesi pokračovalo, pokiaľ nebola reakcia skončená. Potom bola reakčná zmes ochladená na teplotu miestnosti a po pridaní 5 ml vody a 100 mg fluoridu draselného bola cez noc miešaná.To a well degassed solution (argon, 15 minutes) of 263 μΐ of tributyltin hydride in 10 ml of dried toluene was added a solution of 250 mg of intermediate 85, the preparation of which is described above and 16 mg a, of azoisobutyronitrile in 5 mL of dried toluene and heating continued until the reaction was complete. The reaction mixture was then cooled to room temperature and stirred overnight after addition of 5 ml of water and 100 mg of potassium fluoride.

Po odparení rozpúšťadla bol surový zvyšok miešaný s dietylétérom po dobu 1 hodiny a tuhé zložky boli odfiltrované.After evaporation of the solvent, the crude residue was stirred with diethyl ether for 1 hour and the solids were filtered off.

Éterický roztok bol zahustený do sucha a získaná látka olej ovitej konzistencie bola spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexány (1:15 a 1:10) ako elučného činidla.The ethereal solution was concentrated to dryness and the resulting oily consistency was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexanes (1:15 and 1:10) as eluent.

Bolo získaných 168 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny (po vysušení, vo vákuu), vo forme peny. Výťažok 80 %.168 mg of the title compound (dried in vacuo) were obtained as a foam. Yield 80%.

δ (¹H, CDCI₃): 7,6-7,1 (m, 10H, 2Ph), 6,92 (s, 1H, CHPh₂), 5,80 (dd, 1H, H2, J=0,9 a; 3,6 Hz), 5,08 (s, 1H, OCHO), 4,44 (dd, 1H, Hľ, J=2,7 a 8,7 Hz), 4,05 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,9-3,7 (m, 5H, OCH₂CH₂O+8aCH₂), 3,50-3,30 (m, 2H, H5'+H4'), 2,5-2,1 (m, 3H, H2’+CH(CH₃)₂), 2,50 (t, 1H, H1, J=4,5 Hz).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 7.6-7.1 (m, 10H, 2 Ph), 6.92 (s, 1H, CHPh _2), 5.80 (dd, 1H, H2, J = 0, 9a; 3.6Hz), 5.08 (s, 1H, OCHO), 4.44 (dd, 1H, 1H, J = 2.7 and 8.7Hz), 4.05 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.3 Hz), 3.9-3.7 (m, 5H, OCH ₂ CH ₂ O + 8aCH ₂ ), 3.50-3.30 (m, 2H, H 5 '+ H 4' 2.5-2.1 (m, 3H, H 2 + CH (CH ₃ ) ₂ ), 2.50 (t, 1H, H 1, J = 4.5 Hz).

131131

Medziprodukt 87Intermediate 87

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4ηβ,7β, 7aa,8ap)]-8a-[(lS,7R,9R)-2,8-dioxa-9-metyl-bicyklo[3.4.0]non-4-en-7-yl-oxymetyl]-4-(1,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8αp)] - 8α - [(1S, 7R, 9R) -2,8-dioxa-9-methylbicyclo [3.4.0] non-4-en-7-yl-oxymethyl] -4- (1,3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3 - (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacén3a- (1H) -carboxylic acid

K intenzívne miešanému roztoku medziproduktu 86, ktorého príprava je opísaná vyššie (160 mg) a 63 mg dietyldiazometylfosfonátu vo vysušenom tetrahydrofuráne bola pridaná pomaly v atmosfére dusíka a pri teplote 0 “C kaša pripravená zo 100 mg terc.butoxidu draselného v 2,3 ml vysušeného tetrahydrof uránu (bezprostredne bol pozorovaný vývoj plynu).To a vigorously stirred solution of intermediate 86 described above (160 mg) and 63 mg of diethyldiazomethylphosphonate in dried tetrahydrofuran was added slowly under a nitrogen atmosphere and at 0 ° C a slurry prepared from 100 mg of potassium tert-butoxide in 2.3 ml of dried tetrahydrofuran (gas evolution was immediately observed).

Po 10 minútach bola reakčná zmes zriedená 100 ml dichlórmetánu a premytá postupne 2 x 100 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 2 x 100 ml nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a 2 x 100 ml soľanky a následne bola vysušená so síranom horečnatým.After 10 minutes, the reaction mixture was diluted with 100 mL of dichloromethane and washed successively with 2 x 100 mL of 1 M hydrochloric acid solution, 2 x 100 mL of saturated aqueous sodium bicarbonate solution and 2 x 100 mL of brine, and then dried with magnesium sulfate.

Po odstránení rozpúšťadiel bola zvyšná látka olej ovitej konzistencie spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (objem/objem, 1:15 a 1:12) ako elučného činidla.After removal of the solvents, the residual oily consistency was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (v / v, 1:15 and 1:12) as eluent.

Bolo získaných 110 rng žiadanej , v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme peny. Výťažok 70 %.110 g of the title compound were obtained as a foam. Yield 70%.

δ (¹H, CDCI3): 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,94 (s, 1H, CHPh₂), 5,83 (dd, 1H. H2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,53 (m, 1H, H4'), 5,06 (s, 1H, OCHO), z 65 (m, 2H, H3'), 4,25-4,10 (m, 2H, H7'+Hľ), 4,05 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,90-3,70 (m, 5H, OCH₂CH₂O+8aCH₂), 3,18 (dq, 1H, H9', J=6 a 8,7 Hz), 2,75-2,50 (m, 3H, H6’+CH(CH3)₂+H1).δ ⁽¹ H, CDCl3): 7.5-7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.94 (s, 1H, CHPh _2), 5.83 (dd, 1H. H2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 5.53 (m, 1H, H 4 '), 5.06 (s, 1H, OCHO), z 65 (m, 2H, H 3'), 4.25-4.10 (m , 2H, H 7 '+ H), 4.05 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.3 Hz), 3.90-3.70 (m, 5H, _{OCH2 CH2} O + 8aCHa _2), 3.18 (dq, 1H, H 9 ', J = 6 and 8.7 Hz), 2.75-2.50 (m, 3H, H 6' + CH (CH 3) ₂ + H 1).

Medziprodukt 88Intermediate 88

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3πβ,4β,4ηβ,7β, 7aa , 8αβ) ] -8a- [ (4-O-alyl-3,6 - dideoxy-3 - j ód-β-D--manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydto-7-metyl-3(1-metylety1)-1,4-metán- s-indacén-3a-(1H)- karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3πβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8αβ)] -8α- [(4-O-allyl-3,6-dideoxy-3-iodo-β-D-manopyranosyloxy) (methyl) -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydto-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanes-indacen-3a- ( 1H) - carboxylic acid

132132

Roztok 103 mg medziproduktu 53 (GM-2008), ktorého príprava je opísaná vyššie, 197 mg trifenylfosfínu a 51 mg imidazolu v 5 ml vysušeného tetrahydrofuránu bol .reagovaný s 95 mg po častiach pridávaného jódu. Po jednohodinovom miešaní pri teplote miestnosti bola reakčná zmes zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom tak dlho, pokiaľ nebol všetok východiskový materiál spotrebovaný (kontrola chromatografiou na tenkej vrstve, zmes hexán-etylacetát (4: 1).A solution of 103 mg of intermediate 53 (GM-2008), the preparation of which is described above, 197 mg of triphenylphosphine and 51 mg of imidazole in 5 ml of dried tetrahydrofuran was reacted with 95 mg in portions of added iodine. After stirring at room temperature for 1 hour, the reaction mixture was heated to reflux until all of the starting material was consumed (thin layer chromatography control, hexane-ethyl acetate (4: 1)).

Potom bola reakčná zmes ochladená a vytrepaná medzi 50 ml etylacetátu a 30 ml IM vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej . Oddelená organická fáza bola postupne premytá 1 M roztokom kyseliny chlorovodíkovej, vodou, vodným roztokom disiričitanu sodného, vodou a soľankou a potom bola vysušená síranom sodným, prefiltrovaná a zahustená.The reaction mixture was then cooled and partitioned between 50 mL of ethyl acetate and 30 mL of 1M aqueous hydrochloric acid. The separated organic phase was washed successively with 1 M hydrochloric acid solution, water, aqueous sodium metabisulphite solution, water and brine, and then dried over sodium sulfate, filtered and concentrated.

Zvyšok bol spracovaný pomocou rýchlej chromatografie na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (9:1) ako elučného činidla. Bolo získaných 70 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.The residue was flash chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (9: 1) as eluent. 70 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H. CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,46-7,22 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,03 (dd, 1H, H-2, J=1_;5 a 3,6 Hz), 6,02-5,9 (m, 1H, O-C-CH=C), 5,35-5,15 (m, 2H, O-C-C=CH2), 4,4-4,32 (m, 1H, O-CHa-C=C), 4,35 (d, 1 H, Hľ, J=0,6 Hz), 4,18-3,96 (m, 4H, O-CHb-C=C, H-2', H-3', 8aCHa), 3,75 (d, 1H, 8a-CHb, J=9 Hz), 3,45 (dd, 1H, H-4', J=9 a 10,2 Hz), 3,34 (dq, 1H, H-5', J=5,7 a 8,7 Hz), 2,72 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz).δ ⁽¹ H CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.46-7.22 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.03 ( dd, 1 H, H-2, J = _1, 5 and 3.6 Hz), 6.02 to 5.9 (m, 1 H, OC-CH = C), 5.35-5.15 (m, 2H OCC = CH2), 4.4-4.32 (m, 1H, O-CH3-C = C), 4.35 (d, 1H, 1H, J = 0.6 Hz), 4.18- 3.96 (m, 4H, O-CH2-C = C, H-2 ', H-3', 8aCHa), 3.75 (d, 1H, 8a-CHb, J = 9 Hz), 3.45 (dd, 1H, H-4 &apos;, J = 9 and 10.2 Hz), 3.34 (dq, 1H, H-5 &apos;, J = 5.7 and 8.7 Hz), 2.72 (t 1 H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 89a 89bIntermediate 89a 89b

a) Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ, 7β,7aa,8Άβ)]-8a~[(lS,4S,6R,7R,9R)-2,8-dioxa-4,9- dimetyl6 -hydroxy -cis- bicyklo [3.4.0]-non -7-yl-oxymetyl ] -4-fo.rmyl4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-(a) Preparation of diphenylmethyl acid [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8β)] - 8α- [(1S, 4S, 6R, 7R, 9R) -2,8-dioxa-4,9- dimethyl-6-hydroxy-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -

1.4- metán-s-indcicén-3a- (1H) -karboxylovej a1,4-methane-s-indcicene-3a- (1H) -carboxylic acid a

b) difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β,7aa, 8aβ)]-8a-[(1S,4R,6S,7R,9R)-2,8-dioxa-4,9-dimetyl-6hydroxy-cis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-formyl4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-b) Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [(1S, 4R, 6S, 7R, 9R) -2,8-dioxa-4,9-dimethyl] -6hydroxy-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1- methylethyl) -

1.4- metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

133133

Roztok 80 mg medziproduktu 88, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 20 ml vysušeného toluénu, bol odplyňovaný v prúde argónu po dobu 60 minút a potom bol zahriaty za refluxu pod spätným chladičom. K tomuto roztoku bolo pridaných 41 μΐ tributylstaniumhydridu a vzniknutá reakčná zmes bola zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom ešte po dobu 15 minút. Po odstránení rozpúšťadla za vákua bol zvyšok vybratý do 50 ml dietyléteru a tento roztok bol niekoľkokrát premytý nasýteným vodným roztokom fluoridu draselného tak, až nebolo pozorované žiadne zrážanie tributylstaniumfluoridu. Organická fáza bola vysušená a odparená do sucha.A solution of 80 mg of intermediate 88, as described above, in 20 ml of dried toluene was degassed in a stream of argon for 60 minutes and then heated to reflux. To this solution was added 41 μΐ of tributyltin hydride and the resulting reaction mixture was refluxed for 15 minutes. After removal of the solvent in vacuo, the residue was taken up in 50 ml of diethyl ether and this solution was washed several times with saturated aqueous potassium fluoride solution until no precipitation of tributyltin fluoride was observed. The organic phase was dried and evaporated to dryness.

Zvyšok bol prečistený preparatívnou chromatografiou na tenkej vrstve za použitia silikagélu a zmesi dichlórmetánetylacetát (95:5) ako elučného činidla.The residue was purified by preparative thin layer chromatography using silica gel and dichloromethane / ethyl acetate (95: 5) as eluent.

Bolo získaných 35 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, označenej a) t.j. medziprodukt 89a, (Rf - 0,40, dichlórmetán-etylacetát, 9:1) a 24 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, označenej b), t.j. medziprodukt 89b), (Rf = 0,30, dichlórmetán-etylacetát, 9:1).35 mg of the title compound of the title compound (a) i.e. Intermediate 89a, (Rf = 0.40, dichloromethane-ethyl acetate, 9: 1) and 24 mg of the desired title compound, b), i. Intermediate 89b), (Rf = 0.30, dichloromethane-ethyl acetate, 9: 1).

Medziprodukt 89a δ (¹H, CDCI₃): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,46-7,22 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh2), 6,05 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,63 (d, 1 H, H-7’, J=3,3 Hz), 4,02 (d, 1H, 8aCHa, J=9 Hz), 3,86 (dd, 1H, Ha-3', J=6_r6 a 8,7 Hz), 3,83-3,6 (m, 4H, H-6', H-ľ, H-9’ a 8a-CHb),3,52 (dd, 1H, Hb-3¹, J=5,7 a 8,7 Hz), 2,69 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz).Intermediate 89a δ ( ¹ H, CDCl ₃ ): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.46-7.22 (m, 10H, 2Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh2), 6, Δ (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.63 (d, 1H, H-7 ', J = 3.3 Hz), 4.02 (d 1 H, 8aCHa, J = 9 Hz), 3.86 (dd, 1H, Ha-3 ', J = 6 _and 6 Hz), 3.83-3.6 (m, 4H, H- 6 ', H-H-9' and 8a-CHb), 3.52 (dd, 1 H, 3 H ^b-1, J = 5.7 and 8.7 Hz), 2.69 (t, 1 H, H-1, J = 3.9 Hz).

Medziprodukt 89b δ (¹H, CDCI₃): 9,74 (s, 1H, CHO), 7,45-7,22 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,48 (d, 1 H, H-7', J=2,1 Hz), 4,1 4,0 (m, 2H, 8a-CHa a Ha-3'), 3,85 (dd, 1H, H-ľ, J=7,8 a 9 Hz), 3,76-3,68 (m, 2H, 8a-CHb a H-6'), 3,46-3,3 (m, 2H, H-9’ a . Hb-3'), 2,73 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz).Intermediate 89b δ ( ¹ H, CDCl ₃ ): 9.74 (s, 1H, CHO), 7.45-7.22 (m, 10H, 2Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6 Δ (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.48 (d, 1H, H-7 ', J = 2.1 Hz), 4.1 4, O (m, 2H, 8a-CHa and Ha-3 '), 3.85 (dd, 1H, H-1', J = 7.8 and 9 Hz), 3.76-3.68 (m, 2H, 8a-CHb and H-6 '), 3.46-3.3 (m, 2H, H-9' and Hb-3 '), 2.73 (t, 1H, H-1, J = 3, 9 Hz).

134134

Medziprodukt 90Intermediate 90

Príprava di.fenylmetyleste.ru kyseliny [ ÍR- (Ια , 3ηβ , 4β , 4ηβ , 7β , 7ηα,8ηβ)]-8η-[(6-deoxy-β-D-altropyranosyloxy)metyl]-4formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahyd.ro-7-metyl-3- (1-metylety’l) -1,4-metán- s - indacén- 3a- (1H) - karboxylovejPreparation of di.phenylmethyleste.ru acid [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7ηα, 8ηβ)] - 8η - [(6-deoxy-β-D-altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanes-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 10 g 4’-demetylsordarínu v 20 ml metanolu, bolo pridaných pri teplote miestnosti po kvapkách 90 ml roztoku difenyldiazometánu v dichlórmetáne a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná po dobu 6 hodín.To a solution of 10 g of 4'-demethylsordarin in 20 ml of methanol, 90 ml of a solution of diphenyldiazomethane in dichloromethane was added dropwise at room temperature, and the resulting reaction mixture was stirred for 6 hours.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na s.ilikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent to dryness, the residue was flash chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (3: 1) as eluent.

bolo získaných 12,6 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme svetložltej peny.12.6 g of the title compound are obtained as a pale yellow foam.

δ (¹H, CDCI₃): 9,73 (s, 1H, CHO), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,65 (d, 1H, H-ľ, J=1,5 Hz), 4,09, 3,76 (2d, 2H, 8a-CH2, J=9Hz), 4,01 (m, 1H, H-2'), 3,84 (m, 1H, H-3'), 3,75 (m, 1H, H-5'), 3,69 (m, 1H, H-4'), 2,73 (t, 1H, H-1, J=4,2 Hz).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.05 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.65 (d, 1H, H-1 ', J = 1.5 Hz), 4.09, 3.76 (2d, 2H, 8a-CH2, J = 9 Hz), 4, Δ (m, 1H, H-2 '), 3.84 (m, 1H, H-3'), 3.75 (m, 1H, H-5 '), 3.69 (m, 1H, H- 4 '), 2.73 (t, 1H, H-1, J = 4.2 Hz).

Medziprodukt 91Intermediate 91

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3aβ,4β,4aβ,7β, 7aa , 8ηβ) ] -8a- [ (6-deoxy-3,4-0-izopropyl.idén^-D-altropyranosyloxy) metyl ] - 4- f ormyl- 4,4a, 5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro - 7-metyl3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αa, 8ηβ)] - [alpha] - [(6-deoxy-3,4-O-isopropyl.idene-4-D-altropyranosyloxy) methyl] -4-diphenylmethyl ester - formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) - carboxylic acid

K roztoku 650 mg medziproduktu 90, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml 2,2-dimetoxyp.ropán/acetónu (1:2), bolo pridaných 10 mg kyseliny p-to'luénsulf ônovej s po 1,5 hodine miešania pri teplote miestnosti bol k reakčnej zmesi pridaný 1 g uhličitanu draselného a zmes bola miešaná ďalších 30 minút.To a solution of 650 mg of intermediate 90, as described above, in 15 ml of 2,2-dimethoxypropane / acetone (1: 2) was added 10 mg of p-toluenesulfonic acid with stirring for 1.5 hours at room temperature. 1 g of potassium carbonate was added to the reaction mixture at room temperature, and the mixture was stirred for an additional 30 minutes.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bola zvyšná surová zmes vytrepaná medzi 50 ml etylacetátu a 25 ml vody a oddelená vodná fáza bola vytrepaná 2 x 50 ml etylacetátu. OddeAfter evaporation of the solvent to dryness, the remaining crude mixture was partitioned between 50 mL of ethyl acetate and 25 mL of water and the separated aqueous phase was extracted with 2 x 50 mL of ethyl acetate. Odde

- 135 lená organická fáza bola premytá soľankou, vysušená síranom horečnatým a potom bola odparená do sucha.The 135 organic phase was washed with brine, dried over magnesium sulfate and then evaporated to dryness.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (1:3) ako elučného činidla.The residue was flash chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (1: 3) as eluent.

Bolo získaných 600 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny , vo forme bielej peny.600 mg of the title compound was obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,45-7,24 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,06 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,57 (d, 1 H, H-ľ, J=3,0 Hz), 4,30 (dd, 1H, H-3', J=3,6 a 5,7 Hz), 4,07 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,0 Hz), 3,95-3,93 (m, 1 H, H-2'), 3,85 (dd, 1 H, H-4', J=5,7 a 9,3 Hz), 3,75 (d, 1 H, 8aCH₂, J=9,0 Hz ), 3,44 (dq, 1 H, H-5', J_d=9,3 Hz, J_q=6,3 Hz), 2,73 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.45-7.24 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.06 ( dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 4.57 (d, 1H, H-1 ', J = 3.0 Hz), 4.30 (dd, 1H, H -3 ', J = 3.6 and 5.7 Hz), 4.07 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.0 Hz), 3.95-3.93 (m, 1H, H- 2 '), 3.85 (dd, 1H, H-4', J = 5.7 and 9.3 Hz), 3.75 (d, 1H, 8aCHa _2, J = 9.0 Hz); 3.44 (dq, 1H, H-5 ', J _d = 9.3 Hz, J _q = 6.3 Hz), 2.73 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz) .

Medziprodukt 92Intermediate 92

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4a3,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(6-deoxy-3,4-0-izopropylidén-2-0-(metyltio)tiokarbonyl-β-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6, 7,7a , 8,8a-oktahyd.ro-7-metyl - 3 - (1 -metyletyl) -1,4-metán-sindacén-3a-(1H)- karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4α3,7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O-isopropylidene-2-O- (methylthio) thiocarbonyl-β- D-Altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6, 7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanesindacene -3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 100 g medziproduktu 91, ktorého príprava je opísaná vyššie a 1 g imidazolu, rozpustených v 4 ml vysušeného tetrahydrofuránu v atmosfére dusíka, bolo pridaných 5 mg hydridu sodného a vzniknutá suspenzia bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 0,5 hodiny. Po skončení tejto operácie bol k suspenzii pridaný sulfid uhličitý (2,7 ml) a reakčná zmes bola miešaná ďalších 20 minút, kedy k nej bolo pridaných 18 ml metyljodidu.To a solution of 100 g of intermediate 91 as described above and 1 g of imidazole dissolved in 4 ml of dry tetrahydrofuran under a nitrogen atmosphere was added 5 mg of sodium hydride and the resulting suspension was stirred at room temperature for 0.5 hour. At the end of this operation, carbon disulfide (2.7 mL) was added to the suspension, and the reaction mixture was stirred for an additional 20 minutes while 18 mL of methyl iodide was added.

Po 2 hodinách bola reakcia skončená pridaním 20 ml 1 M roztoku chloridu amónneho a reakčná zmes bola vytrepaná 3 x 25 ml etylacetátu. Oddelená organická fáza bola premytá soľankou, vysušená síranom horečnatým a potom boli rozpúšťadlá odparené do sucha.After 2 hours, the reaction was quenched by addition of 20 mL of 1 M ammonium chloride solution and the reaction mixture was shaken with 3 x 25 mL of ethyl acetate. The separated organic phase was washed with brine, dried with magnesium sulfate and then the solvents were evaporated to dryness.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi etylacetát-hexán (1:9) ako elučného činidla.The residue was flash chromatographed on a silica gel column using ethyl acetate-hexane (1: 9) as eluent.

136136

Bolo získaných 110 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .110 mg of the title compound are obtained.

δ (1h, CDCI3): 9,71 (s, 1H, CHO), 7,44-7,25 (m, 10H, 2Ph), 6,96 (s, 1H, CHPh₂), 6,01 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 6,90 (dd, 1H, H-2', J=2,4 a 5,4 Hz), 4,85 (d, 1H, H-ľ, J=2,4 Hz), 4,53 (dd, 1H, H-3', J=5,4 a 6,3 Hz), 4,00 (dd, 1H, H-4', J=6,3 a 8,7 Hz), 3,93 (d, 1H, 8aCH₂, J-9,3 Hz), 3,65 (dq, 1H, H-5', J_d=8,7, Jq= 6,3 Hz), 2,68 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,59 (s, 3H, CH3S).δ (1h, CDCl 3): 9.71 (s, 1H, CHO), 7.44-7.25 (m, 10H, 2Ph), 6.96 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6.01 (dd) 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 6.90 (dd, 1H, H-2 ', J = 2.4 and 5.4 Hz), 4.85 (d, 1H, H-1 ', J = 2.4 Hz), 4.53 (dd, 1H, H-3', J = 5.4 and 6.3 Hz), 4.00 (dd, 1H, H-4) ', J = 6.3 and 8.7 Hz), 3.93 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.3 Hz), 3.65 (dq, 1H, H-5', J _d = 8 J, Jq = 6.3 Hz), 2.68 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.59 (s, 3H, CH3 S).

Medziprodukt 93Intermediate 93

Príprava di.fenylmetyleste.ru kyseliny [ ÍR- (la , 3ap , 4β , 4ηβ , 7β , 7aa,8ηβ)]-8a-[(2,6-dideoxy-3,4-0-izopropylidén^-D-alopyranosyloxy) metyl ] - 4-f ormyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of di.phenylmethyleste.ru acid [1R- (1a, 3ap, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2,6-dideoxy-3,4-O-isopropylidene-4-D-alopyranosyloxy)] methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

V 5 ml vysušeného toluénu bolo rozpustených 95 mg medziproduktu 92, ktorého príprava je opísaná vyššie, v atmosfére dusíka a vzniknutý roztok bol zahriaty na teplotu 110 °C. Po 1,5 hodine miešania bol k roztoku pridaný po kvapkách roztok 64 ml tributylstaniumhydridu v 5 ml vysušeného toluénu a reakčná zmes bola miešaná pri zahrievaní ďalšiu 1,5 hodinu.95 mg of intermediate 92, as described above, was dissolved in 5 ml of dried toluene under a nitrogen atmosphere and the resulting solution was heated to 110 ° C. After stirring for 1.5 hours, a solution of 64 ml of tributyltin hydride in 5 ml of dried toluene was added dropwise to the solution, and the reaction mixture was stirred under heating for a further 1.5 hours.

Po pridaní 2 ml metanolu k zmesi boli rozpúšťadlá odparené do sucha a zvyšok bol spracovaný chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi etylacetát-hexán (1:9) ako e’lučného činidla.After addition of 2 ml of methanol to the mixture, the solvents were evaporated to dryness and the residue was chromatographed on silica gel using ethyl acetate-hexane (1: 9) as eluent.

Bolo získaných 42 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .42 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1 H, CHO), 7,44-7,25 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (1H, s, CHPh₂), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,54 ( dd, 1H, H-ľ, J=2,7 a 9,3 Hz), 4,39 (dt, 1H, H-3', J_d=2,7 Hz, J_t=3,6 Hz), 4,04 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,0 Hz),3,67 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,0 Hz), 3,65 (dd, 1H, H-4', J=3,6 a 8,7 Hz), 3,44 (dq, 1 H, H-5', J_d=6,3 Hz, J_q=8,7 Hz), 2,75 (t, 1H, J=3,9 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.44-7.25 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (1 H, s, CHPh _2), 6.05 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.54 (dd, 1H, H-1 ', J = 2.7 and 9.3 Hz), 4.39 (dt 1 H, H-3 ', J _d = 2.7 Hz, J _t = 3.6 Hz), 4.04 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.0 Hz), 3.67 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.0 Hz), 3.65 (dd, 1 H, H-4 ', J = 3.6 and 8.7 Hz), 3.44 (dq, 1H, H-5 ', J _d = 6.3 Hz, J _q = 8.7 Hz), 2.75 (t, 1 H, J = 3.9 Hz).

137137

Medziprodukt 94Intermediate 94

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8ap)]-8a-[(2,6-dideoxy^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4forinyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3- (l-metyletyl) 1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αp)] - 8α - [(2,6-dideoxy-4-D-allopyranosyloxy) methyl] -4-vinyl-4,4a, 5,6 , 7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) 1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

Za intenzívneho miešania bol k roztoku 1,5 g medziproduktu 93, ktorého príprava je opísaná vyššie, v zmesi 30 ml tetrahydrofuránu a ml metanolu pridaný po kvapkách priWith vigorous stirring, a solution of 1.5 g of intermediate 93, as described above, was added dropwise in a mixture of 30 ml of tetrahydrofuran and ml of methanol at

teplote miestnosti 1 M roztok kyseliny chlorovodíkovej (15 ml). Hneď ako bola reakcia skončená (kontrola pomocou chromatografie na tenkej vrstve), bolo k reakčnej zmesi prida ných 50 ml nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanú sodného a 200 ml etylacetátu a po tejto operácii sa reakčná zmes rozdelila na vodnú a organickú fázu, ktorá bola premytá x 100 ml vody a vysušená síranom horečnatým.at room temperature, 1 M hydrochloric acid solution (15 mL). Once the reaction was complete (thin layer chromatography control), 50 mL of saturated aqueous sodium bicarbonate solution and 200 mL of ethyl acetate were added to the reaction mixture, after which the reaction mixture was separated into an aqueous and organic phase, which was washed x 100 ml of water and dried over magnesium sulfate.

Po odstránení rozpúšťadiel bol zvyšok spracovaný rých lou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (5:1) a (2:1) ako elučného činidla.After removal of the solvents, the residue was flash chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (5: 1) and (2: 1) as eluent.

Bolo získaných 1,1 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.1.1 g of the title compound were obtained as a white foam.

δ (¹ H, CDCI₃): 9,73 (s, 1 H, CHO), 7,5-7,2 (m, 10H, 2Ph), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,64 (dd, 1 H, H-ľ, J=2,1 a 9,6 Hz), 4,11 (m, 1 H. H-3'), 4,06 (d, 1 H, 8aCH₂, J_AB=9,3 Hz), ³>⁷⁰ (^m- ^2H· ^H’⁵' ^{a 8aCH}2). 3,34 (m, 1H, H-4'), 2,75 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.5-7.2 (m, 10H, 2 Ph), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6, Δ (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.64 (dd, 1H, H-1 ', J = 2.1 and 9.6 Hz), 4.11 (m, 1H, H-3 '), 4.06 (d, 1H, 8aCH ₂ , J _AB = 9.3 Hz), ³ > ⁷⁰ ( ^m - ^2H · ^H ' ⁵ ', ^{and 8aCH} 2). 3.34 (m, 1H, H-4 &apos;), 2.75 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz).

Medziprodukt 95Intermediate 95

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3aβ,4β,4aβ,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2,3,6-trideoxy-3 -j ód-β-D-glukopyranosyloxy)metyl ] -4 - f or myl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro - 7 -metyl - 3 - (1metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl [1R- (Ια, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [(2,3,6-trideoxy-3-iodo-β-D-glucopyranosyloxy) methyl] -4 - methyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) carboxylate

K roztoku 2 g medziproduktu 94, ktorého príprava je opísaná vyššie, 3,4 g tifenylfosfinu a 186 mg imidazolu,To a solution of 2 g of intermediate 94, the preparation of which is described above, 3.4 g of thiphenylphosphine and 186 mg of imidazole,

138138

ktorý bol zahrievaný za refluxu pod spätným chladičom za stáleho miešania s 50 ml toluénu, bolo po malých častiach pridaných 610 mg jódu a reakčná zmes bola potom zahrievaná za refluxu pod spätným chladičom ešte ďalšie 4 hodiny. Potom bola zmes ochladená a prevedená do prebytku vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a tiosíranu sodného v pridávacom lieviku. Potom bola reakčná zmes trepaná tak dlho, pokiaľ nebol jód spotrebovaný. Oddelená toluénová fáza bola potom premytá vodou, vysušená síranom horečnatým a zahustená.which was heated to reflux with stirring with 50 ml of toluene, 610 mg of iodine was added in small portions and the reaction mixture was then heated at reflux for a further 4 hours. The mixture was then cooled and taken up in an excess of aqueous sodium bicarbonate and sodium thiosulfate in an addition funnel. The reaction mixture was then shaken until iodine was consumed. The separated toluene phase was then washed with water, dried over magnesium sulfate and concentrated.

Zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexány-etylacetát (15:1) a (5:1) ako elučného činidla.The residue was purified by flash chromatography using hexanes-ethyl acetate (15: 1) and (5: 1) as eluent.

Bolo získaných 1,65 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .1.65 g of the title compound are obtained.

δ (1h, CDCI₃): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,26-7,44 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂),6,04(dd, 1H, H-2, J=1,2c 3,3 Hz), 4,25 (dd, 1H, H-ľ, J=1_Ý8 a -9,3δ (1h, CDCl ₃ ): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.26-7.44 (m, 10H, 2Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6.04 ( dd, 1 H, H-2, J = 3.3 Hz 1,2-c), 4.25 (dd, 1 H, H ', J = 8 and _Y 1 -9.3

Hz), 4,08 (m, 1H, H-4'), 3,67 a 4,01 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,40 (m, 1 H, H3'), 3,32 (m 1 H, H-5'), 2,74 (t, 1 H, H-1, J=4,2 Hz), 2,32 a 2,53 (2m, 2H, 2H-2').Hz), 4.08 (m, 1 H, H-4 '), 3.67 and 4.01 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9 Hz), 3.40 (m, 1H, H3') 3.32 (m 1H, H-5 '), 2.74 (t, 1H, H-1, J = 4.2 Hz), 2.32 and 2.53 (2m, 2H, 2H- 2 ').

Medziprodukt 96Intermediate 96

Príprava dif enylmetyleste.ru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8αβ)]-8a-[((2,3,6-trideoxy-3-etylamino-3-N,4-0-karbony1β-D-alopyranosyl) oxy)metyl] -4-fo.rmyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyleste.ru acid [1R- (1a, 3ap, 4β, 4ap, 7β, 7aa, 8αβ)] - 8a - [((2,3,6-trideoxy-3-ethylamino-3-N, 4-0) -carbonyl-β-D-alopyranosyl) oxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoctahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4- methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 200 mg medziproduktu 95, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml vysušeného tetrahydrofuránu, ktorý bol reagovaný po dobu 15 minút s 24 mg (1 mmol) hydridu sodného, bolo pridaných 0,04 ml etylizokyanátu a táto reakčná zmes bola miešaná za refluxu pod spätným chladičom po dobu 6 hodín. Po ukončení reakcie pridaním 3 ml vody, bola zmes vytrepaná 3x5 ml etylacetátu a spojené organické extrakty boli premyté 1 x 5 ml solanky, potom boli vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a za vákua zahustené na zvyšok sirupovitej konzistencie, ktorý bol prečistený rýchlou chromáTo a solution of 200 mg of intermediate 95 described above in 15 ml of dried tetrahydrofuran, which was treated for 15 minutes with 24 mg (1 mmol) of sodium hydride, was added 0.04 ml of ethyl isocyanate, and the reaction mixture was stirred under stirring. reflux for 6 hours. After completion of the reaction by addition of 3 ml of water, the mixture was washed with 3 x 5 ml of ethyl acetate and the combined organic extracts were washed with 1 x 5 ml of brine, then dried over magnesium sulfate, filtered and concentrated in vacuo to a syrupy residue.

139139

tografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) ako elučného činidla.silica gel column chromatography eluting with hexane-ethyl acetate (3: 1).

Bolo získaných 75 mg žiadanej v nadpise uvedenej zlúčeniny v čistej forme.75 mg of the title compound are obtained in pure form.

δ (¹H, CDCI3): 9/4 (s, 1H, CHO), 7,44-7,26 (m, 10H, 2Ph), 6,98 (s, 1H, CHPh₂), 6,03 (dd, 1H, H-2, J=3,3 a 1,2 Hz), 4,60 (dd, 1H, H-ľ, J=5,1 a 3,9 Hz), 4,12 (m, 2H, H-3*, H4'), 4,01 (d, 1H, H-8a, J=9,3 Hz), 3,64 (d, 1H, H-8a, J=9,3 Hz), 3,61 (dq, 1H, H-5', J=8,7 a 6,3 Hz), 3,49 (m, 1H, CH^CHs), 3,13 (m, 1H, CH^CHs), 2,70 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,24 (m, 1H, CH(CH₃)₂), 1,14 (t, 3H, CH3, J-7,2 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 04.09 (s, 1H, CHO), 7.44-7.26 (m, 10H, 2 Ph), 6.98 (s, 1H, CHPh _2), 6.03 ( dd, 1H, H-2, J = 3.3 and 1.2 Hz), 4.60 (dd, 1H, H-1 ', J = 5.1 and 3.9 Hz), 4.12 (m, 2H, H-3 *, H4 '), 4.01 (d, 1H, H-8a, J = 9.3 Hz), 3.64 (d, 1H, H-8a, J = 9.3 Hz) 3.61 (dq, 1H, H-5 &apos;, J = 8.7 and 6.3 Hz), 3.49 (m, 1H, CH3CH3), 3.13 (m, 1H, CH3CH3) ), 2.70 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.24 (m, 1H, CH (CH ₃ ) ₂ ), 1.14 (t, 3H, CH 3, J - 7.2 Hz).

Medziprodukt 97Intermediate 97

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ηβ,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(lS,4R,6S,7R,9R)-2,8-dioxa-4,9-dimetyl-6 (metyltio)tiokarbonyloxy-cis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3 -(1metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3α, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [(1S, 4R, 6S, 7R, 9R) -2,8-Dioxa-4,9-dimethyl- 6 (methylthio) thiocarbonyloxy-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl- 3- (1-Methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

V 10 ml vysušeného tetrahydrofuránu bolo rozpustených v atmosfére argónu 250 mg medziproduktu 89b), ktorého príprava je opísaná vyššie, a katalytické množstvo imidazolu. K takto pripravenému roztoku bolo pridaných 45 mg anhydridu sodného a vzniknutá suspenzia bola miešaná pri teplote miestnosti 20 minút. Potom bolo k reakčnej zmesi pridaných 140 μΐ sulfidu uhličitého a po 20 minútovom miešaní bolo k zmesi pridaných ešte 150 μ.1 metylj odídu. Po 2 hodinách bola reakcia skončená pridaním 10 ml etylacetátu a potom po kvapkách pridávanou vodou (5 ml) .250 mg of intermediate 89b), described above, and a catalytic amount of imidazole were dissolved in 10 ml of dried tetrahydrofuran under argon. To the thus prepared solution was added 45 mg of sodium anhydride and the resulting suspension was stirred at room temperature for 20 minutes. Then, 140 μΐ of carbon disulfide was added to the reaction mixture, and after stirring for 20 minutes, 150 μl of methyl iodide was added. After 2 hours, the reaction was quenched with 10 mL of ethyl acetate and then dropwise with water (5 mL).

Reakčná zmes bola potom vytrepaná medzi 50 ml etylacetátu a 50 ml vody a oddelená organická fáza bola premytá vodou a soľankou, potom bola vysušená a odparená.The reaction mixture was then partitioned between 50 ml of ethyl acetate and 50 ml of water and the separated organic phase was washed with water and brine, then dried and evaporated.

Zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (10:1) a (8: 1) ako elučného činidla.The residue was purified by flash chromatography on silica gel eluting with hexane-ethyl acetate (10: 1) and (8: 1).

Bolo získaných 211 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .211 mg of the title compound are obtained.

140 δ (¹Η, CDCI3): 9,72 (s, 1Η, CHO), 7,46-7,22 (m, 10H, 2Ph), 6,97 (s, 1H, CHPh2), 6,02 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,80 (dd, 1H, H-6', J=2,1 a 6,3 Hz), 4,72 (d, 1H, H-7', J=2,1 Hz), 4,05 (dd, 1H, Ha-3', J=7,2 a 8,4 Hz), 3,983,86 (m, 2H, 8aCHa a Hľ), 3,66-3,55 (m, 2H, 8aCHb a H-9¹), 3,34 (t, 1H, Hb-3’, J=8,4 Hz), 2,73 (t, 1H, H1, J=3,9 Hz), 2,59 (s, 3H, SCH3).140 δ ( ¹ δ, CDCl 3): 9.72 (s, 1 H, CHO), 7.46-7.22 (m, 10 H, 2 Ph), 6.97 (s, 1H, CHPh 2), 6.02 ( dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 5.80 (dd, 1H, H-6 &apos;, J = 2.1 and 6.3 Hz), 4.72 (d 1 H, H-7 ', J = 2.1 Hz), 4.05 (dd, 1H, Ha-3', J = 7.2 and 8.4 Hz), 3,983.86 (m, 2H, 8aCHa) and HI), 3.66-3.55 (m, 2H, 8aCHb and H-9 ^1), 3.34 (t, 1 H, Hb-3 ', J = 8.4 Hz), 2.73 (t 1H, H1, J = 3.9 Hz), 2.59 (s, 3H, SCH3).

Medziprodukt 98Intermediate 98

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4aP,7β, 7aa,8aβ)]-8a-[(4-O-alyl-3-jód-2,3,6-trideoxy-β-D-glukopyranosyloxy)metyl]- 4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-ok tahydro-7 metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4αP, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(4-O-allyl-3-iodo-2,3,6-trideoxy-β-D-glucopyranosyloxy) (methyl) -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-ocahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

Roztok 67 mg medziproduktu 12, ktorého príprava je opísaná vyššie, 105 mg trifenylfosfínu a 28 mg imidazolu v 5 ml vysušeného tetrahydrofuránu bol ponechaný reagovať s 51 mg po častiach pridávaného jódu. Vzniknutá reakčná zmes bola potom miešaná pri teplote miestnosti po dobu 1,5 hodiny a následne vytrepaná medzi 30 ml etylacetátu a 30 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej.A solution of 67 mg of intermediate 12, the preparation of which is described above, 105 mg of triphenylphosphine and 28 mg of imidazole in 5 ml of dried tetrahydrofuran was allowed to react with 51 mg in portions of added iodine. The resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 1.5 hours and then partitioned between 30 mL of ethyl acetate and 30 mL of 1 M hydrochloric acid solution.

Oddelená organická fáza bola postupne premytá 1 M roztokom kyseliny chlorovodíkovej, vodným roztokom disiričitanu sodného, vodou a soľankou, potom bola vysušená, prefiltrovaná a zahustená.The separated organic phase was washed successively with 1 M hydrochloric acid solution, aqueous sodium metabisulphite solution, water and brine, then dried, filtered and concentrated.

Zvyšok bol spracovaný pomocou rýchlej chromatografie na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (9:1) ako elučného činidla.The residue was flash chromatographed on silica gel using hexane-ethyl acetate (9: 1) as eluent.

Bolo získaných 68 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .68 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 7,45-7,22 (m, 10H, 2Ph), 6,97 (s, 1H, CHPh₂), 6,07-5,9 (m, 2H, H-2 a OC-CH-C), 5,37-5,14 (m, 2H, O-C-C^Cl·^), 4,45-4,35 (m, 1H, O-CHa-C=C), 4,25-4,1 (m, 2H, H-ľ a O-CHb-C=C), 4,13,95 (m, 2H, H-3' a 8a-CHa), 3,66 (d, 1H, 8a-CHb, J=9 Hz), 3,29 (dq, 1H, H5', J=6 a 8_f7 Hz), 3,15 (dd, 1H, H-4', J=8,7 a 9,9 Hz), 2,73 (t, 1H, H-1, J=3_f9 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 7.45-7.22 (m, 10H, 2 Ph), 6.97 (s, 1H, CHPh _2), 6,07- 5.9 (m, 2H, H-2 and OC-CH-C), 5.37-5.14 (m, 2H, OCC-CH3), 4.45-4.35 (m, 1H, O-CHa-C = C), 4.25-4.1 (m, 2H, H-1 'and O-CHb-C = C), 4.13.95 (m, 2H, H-3' and 8a) -CHa), 3.66 (d, 1H, 8a-CHb, J = 9 Hz), 3.29 (dq, 1H, H 5 ', J = 6 and 8 _f 7 Hz), 3.15 (dd, 1H , H-4 ', J = 8.7, 9.9 Hz), 2.73 (t, 1 H, H-1, J = 3 Hz _f 9).

141141

Medziprodukt 99Intermediate 99

Príprava difenyImetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4aP,7β, 7aa₎8aβ)]-8a-[(2,3 -anhydro-6-deoxy-β-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-(1,3-dioxolan-2-yl)- 4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylImethyl ester [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4αP, 7β, 7αa ₎ 8αβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4- (1 (3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

Roztok medziproduktu 67 (3,2 mmol), ktorého príprava je opísaná vyššie, v 40 ml vysušeného acetonitrilu, bol zmiešaný s 39 ml etylénglykolu, 1,1 ml trimetylformiátu a 30 mg kyseliny p-toluénsulfónovej. Po 5 hodinách bola táto reakčná zmes dôkladne vytrepaná s etylacetátom.A solution of intermediate 67 (3.2 mmol), as described above, in 40 ml of dried acetonitrile was mixed with 39 ml of ethylene glycol, 1.1 ml of trimethylformate and 30 mg of p-toluenesulfonic acid. After 5 hours, the reaction mixture was shaken vigorously with ethyl acetate.

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (3: 1) as eluent.

Bolo získaných 2,08 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .2.08 g of the title compound are obtained.

δ (¹ H, CDCI3): 7,43 a 7,29 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6,95 (s, 1 H, CHPh₂), 5,86 (d, 1H, H-2, J=3,3 Hz), 5,08 (s, 1H, 4-CH), 4,69 (s, 1H, H-ľ), 4,11 (d, 1H, 8aCHa, J=9,3 Hz), 3,81 (m, 5H, 8a-CHb a O-Ch^CH^O), 3,63 (m, 1H, H-5'), 3,23 a. 3,15 (d, d, 1H, 1H, H-2’ and H-3’, J=3,6 Hz), 3,20 (m, 1H, H-4'), 2,63 (m, 2H, H-1 a CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, CDCl3): 7.43 and 7.29 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6.95 (s, 1H, CHPh _2), 5.86 (d, 1 H, H 2, J = 3.3 Hz), 5.08 (s, 1H, 4-CH), 4.69 (s, 1H, H-1 '), 4.11 (d, 1H, 8aCHa, J = 9, 3 Hz), 3.81 (m, 5H, 8a-CH 3 and O-CH 2 CH 3 O), 3.63 (m, 1H, H-5 '), 3.23 a. 3.15 (d, d, 1H, 1H, H-2 &apos; and H-3 &apos;, J = 3.6 Hz), 3.20 (m, 1H, H-4 &apos;), 2.63 (m, 2H, H-1 and CH _{(CH3) 2).}

Medziprodukt 100Intermediate 100

Príprava difenyImetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3aβ,4β,4aβ,7β, 7aα,8aβ) ]-8a-[ (2,3-anhydro-4-oxo-6-deoxy^-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-(1,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro - 7 - metyl - 3 - (1 - met y lety 1) - 1,4 - metán - s - indacén - 3 a- ( 1H) karboxylovejPreparation of diphenylImethyl ester [1R- (Ια, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] -8α- [(2,3-anhydro-4-oxo-6-deoxy-4-D-manopyranosyloxy) methyl] -4 - (1,3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methyl-1) -1, 4-methane-s-indacene-3α- (1H) carboxylic acid

Roztok 230 μΐ anhydridu kyseliny trifluóroctovej v 10 ml vysušeného dichlórmetánu bol pri teplote -60 °C zmiešaný so 138 μΐ po kvapkách pridávaného dímetylsulfoxidu a roztokom 0,9 mmol medziproduktu 99, ktorého príprava je opísaná vyššie, vo vysušenom dichlórmetáne (10 ml). K vzniknutej reA solution of 230 μΐ of trifluoroacetic anhydride in 10 ml of dried dichloromethane at -60 ° C was mixed with 138 μΐ of dropwise added dimethylsulfoxide and a solution of 0.9 mmol of intermediate 99, as described above, in dried dichloromethane (10 ml). Re re

142 akčnej zmesí bolo po 60 minútach pridaných 554 μΐ trietylamínu a zmes bola miešaná pri teplote -20 °C po dobu 2 hodín .After 60 minutes of 142 action mixtures, 554 μΐ of triethylamine was added and the mixture was stirred at -20 ° C for 2 hours.

Po skončení uvedenej operácie bola zmes zriedená dichlórmetánom a premytá vodou. Po odstránení rozpúšťadiel bol zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1), ako elučného činidla.After completion of the operation, the mixture was diluted with dichloromethane and washed with water. After removal of the solvents, the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (4: 1) as eluent.

Bolo získaných 214 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .214 mg of the title compound are obtained.

δ (1 H, CDCI₃):. 7,44 a 7,30 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6,94 (s, 1H, CHPh₂), 5,87 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a , 3,6 Hz), 5,10 (s, 1H, 4-CH), 4,81 (s, 1H, H-ľ), 4,09 (d, 1 H, 8a-CHa, J=8,7 Hz), 3,88 (m, 5H, 8a-CHb a OCF^CH^-O), 3,58 a 3,36 Φ (d, d, 1 H, 1 H, H-2' a H-3', J=3,9 Hz), 2,65 (m, 2H, H-1 a CH(CH₃)₂).δ (1 H, _CDCl3) :. 7.44 and 7.30 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6.94 (s, 1H, CHPh ₂ ), 5.87 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and, 3.6 Hz), 5.10 (s, 1H, 4-CH), 4.81 (s, 1H, H-1 '), 4.09 (d, 1H, 8a-CHa, J = 8.7 Hz), 3.88 (m, 5H, 8a-CH3 and OCF3CH3 -O), 3.58 and 3.36 Φ (d, d, 1H, 1H, H-2 'and H-3) ', J = 3.9 Hz), 2.65 (m, 2H, H-1 and CH _{(CH3) 2).}

Medziprodukt 101Intermediate 101

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4a3,7β, 7aa,8aβ) ]-8a-[ (2,3-anhydro-4,6-dideoxy-4-metyl.én^-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-(1,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a,8, 8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4α3,7β, 7αα, 8αβ)] -8α- [(2,3-anhydro-4,6-dideoxy-4-methyl.en-4-D-manopyranosyloxy)] methyl] -4- (1,3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4 p-methane-indacén3a- (1H) -carboxylic acid

Roztok 0,3 mmol metyltrifenylfosfóniumbromidu v 10 ml vysušeného tetrahydrofuránu bol reagovaný v atmosfére dusíka pri teplote -78 °C s 0,15 ml 2,44 M n-butyllítia. Po 15 minútach bol k tejto reakčnej zmesi pridaný medziprodukt 100 (0,21 mmol), ktorého príprava je opísaná vyššie v 5 ml vysušeného tetrahydrofuránu tak, aby pridávanie prebiehalo pomaly a táto reakčná zmes bola pomaly vytemperovaná na teplotu miestnosti. Potom bola zmes zriedená etylacetátom a premytá 1 M roztokom chloridu amónneho a soľankou.A solution of 0.3 mmol of methyltriphenylphosphonium bromide in 10 mL of dried tetrahydrofuran was treated with 0.15 mL of 2.44 M n-butyllithium under nitrogen at -78 ° C. After 15 minutes, intermediate 100 (0.21 mmol) was prepared as described above in 5 mL of dried tetrahydrofuran to allow the addition to proceed slowly and the reaction mixture was slowly warmed to room temperature. The mixture was then diluted with ethyl acetate and washed with 1 M ammonium chloride solution and brine.

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (4: 1) as eluent.

Bolo získaných 91 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .91 mg of the title compound are obtained.

143 δ (¹Η, CDCI₃): 7,45 a 7,29 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6,95 (s, 1 H, CHPh₂), 5,87 (m, 1H. H-2), 5,35 a 5,22 (d, d, 1H, 1H, CH₂=C, J=2,4 Hz), 5,08 (s, 1H, 4CH), 4,68 (s, 1H, H-ľ), 4,10 (m, 2H, 8a-CHa a H-5’), 3,82 (m, 5H, 8a-CHb a 0-0^0^0),3,57 3 3,35 (d, d, 1 H, 1 H, H-2'a H-3', J=3,9 Hz), 2,63 (m, 2H, H-1 a CH(CH₃)₂).Δ 143 ⁽¹ Η, _CDCl3): 7.45 and 7.29 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6.95 (s, 1H, CHPh _2), 5.87 (m, 1H. H-2), 5.35 and 5.22 (d, d, 1 H, 1 H, _CH2 = C, J = 2.4 Hz), 5.08 (s, 1 H, 4 CH), 4.68 (s 1H, H-1 '), 4.10 (m, 2H, 8a-CHa and H-5'), 3.82 (m, 5H, 8a-CHb and O-O-Ob), 3.57 3.35 (d, d, 1H, 1H, H-2'and H-3 ', J = 3.9 Hz), 2.63 (m, 2H, H-1 and CH (CH3 ₎ ) ₂ ).

Medziprodukt 102Intermediate 102

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3a0,4β,4ap,7β, 7aa,83β)]-8a-[(2,3-anhydro-6-deoxy^-D-talopyranosyloxy)metyl]-4-(1,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro7-metyl-3-(1-metylety1)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)- karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3a0,4β, 4αp, 7β, 7aa, 83β)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-D-talopyranosyloxy) methyl] -4- (1, 3-dioxolan-2-yl) -4,4, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7a-methyl-3- (1-1methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a ( 1H) - carboxylic acid

K roztoku 1,13 mmol medziproduktu 100, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 45 ml vysušeného tetrahydrofuránu, bolo pridaných v atmosfére dusíka pri teplote -78 °C 2,0 ml 1 N L-selektridu. Po uplynutí 1 hodiny bola vyššie uvedená reakčná zmes zriedená 100 ml etylacetátu, vytemperovaná na teplotu miestnosti a potom premytá 1 M roztokom chloridu amónneho, vodou a soľankou.To a solution of 1.13 mmol of intermediate 100, as described above, in 45 mL of dried tetrahydrofuran, was added 2.0 mL of 1 N L-selectride under nitrogen at -78 ° C. After 1 hour, the above reaction mixture was diluted with 100 mL ethyl acetate, warmed to room temperature, and then washed with 1 M ammonium chloride solution, water, and brine.

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (3: 1) as eluent.

Bolo získaných 431 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .431 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI₃): 7,44 a 7,31 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6,95 (s, 1H, CHPh₂), 5,85 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 5,08 (s, 1H, 4-CH), 4,92 (s, 1H, H-ľ), 4,11 (d, 1H, 8a-CHa, J=9,3 Hz), 3,83 (m, 5H, 8a-CHb a ΟΟΗ^ΟΗ^Ο), 3,62 (m, 1H, H4’), 3,54 (dd, 1H, H-3', J=3,6 a 5,1 Hz), 3,40 (m, 1H, H-5’), 3,24 (d, 1 H,. H-2', J=3,9 Hz).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 7.44 and 7.31 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6.95 (s, 1H, CHPh _2), 5.85 (dd, 1H, H -2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 5.08 (s, 1H, 4-CH), 4.92 (s, 1H, H-1 '), 4.11 (d, 1H, 8a) -CHa, J = 9.3 Hz), 3.83 (m, 5H, 8a-CHb and .beta.), 3.62 (m, 1H, H4 '), 3.54 (dd, 1H, H-3 ', J = 3.6 and 5.1 Hz), 3.40 (m, 1H, H-5'), 3.24 (d, 1H, H-2 ', J = 3, 9 Hz).

Medziprodukt 103Intermediate 103

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2,3-anhydro-4-0-terc.butylkarbonyl-6-deoxy-βPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-4-O-tert-butylcarbonyl-6-deoxy-β)

144144

D-talopyranosyloxy)metyl]-4-(1,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7, 7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-rnetyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejD-Talopyranosyloxy) methyl] -4- (1,3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7, 7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Zmes 0,2 mmol medziproduktu 102, ktorého príprava je opísaná vyššie a 0,4 mmol 4-dimetylaminopyridinu, v 15 ml vysušeného dichlórmetánu, bola ponechaná reagovať s 0,3 mmol pivaloylchloridu.A mixture of 0.2 mmol of intermediate 102 described above and 0.4 mmol of 4-dimethylaminopyridine in 15 mL of dried dichloromethane was treated with 0.3 mmol of pivaloyl chloride.

Po 30 minútach bola reakčná zmes premytá vodou a prečistená rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexánetylacetát (5:1) ako elučného činidla.After 30 minutes, the reaction mixture was washed with water and purified by flash chromatography using hexane / ethyl acetate (5: 1) as eluent.

Bolo získaných 95 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .95 mg of the title compound are obtained.

δ (¹ H, CDCI3): 7,44 a 7,30 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6,95 (s, 1 H, CHPh₂), 5,85 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 5,08 (s, 1 H, 4-CH), 4,82 (t, 1 H, H-4', J=3,9 Hz), 4,60 (s, 1H, H-ľ), 4,12 (d, 1H, 8a-CHa, J=9,6 Hz), 3,83 (m, 5H, 8a-CHb a 0CH2CH2-°), 3,65 (m, 1 H, H-5'), 3,53 (t, 1H, H-3', J=4,2 Hz), 3,17 (d, 1H, H-2', J=4,2 Hz), 2,63 (m, 2H, H-1 a CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, CDCl3): 7.44 and 7.30 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6.95 (s, 1H, CHPh _2), 5.85 (dd, 1H, H -2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 5.08 (s, 1H, 4-CH), 4.82 (t, 1H, H-4 ', J = 3.9 Hz) 4.60 (s, 1H, H-1 '), 4.12 (d, 1H, 8a-CHa, J = 9.6 Hz), 3.83 (m, 5H, 8a-CHb and OCH2CH2-O) 3.65 (m, 1H, H-5 '), 3.53 (t, 1H, H-3', J = 4.2 Hz), 3.17 (d, 1H, H-2 ', J = 4.2 Hz), 2.63 (m, 2H, H-1 and CH _{(CH3) 2).}

Medziprodukt 104Intermediate 104

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ap,7β, 7aa , 8ηβ) ] -8a- [ (4-0-alyl-2,3-anhydro-6-deoxy^-D-talopy.ranosyloxy)metyl]-4-(l,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-rnetyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4αp, 7β, 7aa, 8ηβ)] -8α- [(4-O-allyl-2,3-anhydro-6-deoxy-4-talopyranosyloxy)] methyl] -4- (l, 3-dioxolan-2-yl) -4,4, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4 methane-s-indacene-3a (1H) carboxylic acid

K roztoku 0,3 mmol medziproduktu 102, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 10 ml vysušeného tetrahydroduránu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 0,6 mmol hydridu sodného a katalytické množstvo tetrabutylamóniumjodidu. Po 10 minútach bol k takto pripravenej reakčnej zmesi pridaný alylbromid (0,9 mmol) a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti cez noc. Potom bola zriedená 10 ml etylacetátu a premytá 1 M roztokom chloridu amónneho a soľankou.To a solution of 0.3 mmol of intermediate 102 described above in 10 ml of dried tetrahydroduran was added 0.6 mmol of sodium hydride and a catalytic amount of tetrabutylammonium iodide under a nitrogen atmosphere. After 10 minutes, allyl bromide (0.9 mmol) was added and the mixture was stirred at room temperature overnight. It was then diluted with 10 mL of ethyl acetate and washed with 1 M ammonium chloride solution and brine.

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1) akoAfter removal of the solvent, the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (4: 1) as the

145 elučného činidla.145 of the eluent.

Bolo získaných 163 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .163 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 7r44 a ' 7,29 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6,95 (s, 1H, CHPh2), 5,96 (m, 1H, H-2), 5,85 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 5,30 a 5,12 (m, m, 1 H, 1H, CH2-3), 5,06 (s, 1H, 4-CH), 4,58 (s, 1 H, H-ľ), 4,31 (m, 1H, H-4¹), 4,10 (m, 2H, H-5’ a 8a-CHa), 3,83 (m, 5H, 8a-CHb a O-CF^Cľ^-O), 3,53 (m, 2H, CH2O), 4,23 (t, 1 H, H-3;, J=4,2 Hz), 3,19 (d, 1H, H-2', J=4,2 Hz), 2,65 (t, 1H, H1. J=4,2 Hz), 2,61 (m, 1H, CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, CDCl3): 7r44 a '7.29 (m, m, 4H, 6H, 2xPh), 6.95 (s, 1H, CHPh2), 5.96 (m, 1 H, H-2), 5.85 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 5.30 and 5.12 (m, m, 1H, 1H, CH 2 -3), 5.06 ( s, 1 H, 4-CH), 4.58 (s, 1 H, H-I '), 4.31 (m, 1 H, H-4 ^1), 4.10 (m, 2H, H-5' and 8a-CHa), 3.83 (m, 5H, 8a-CH3 and O-CF3 Cl2-O), 3.53 (m, 2H, CH2 O), 4.23 (t, 1H, H-3) J = 4.2 Hz), 3.19 (d, 1H, H-2 ', J = 4.2 Hz), 2.65 (t, 1H, H1, J = 4.2 Hz), 2 , 61 (m, 1 H, CH (CH _{3) 2).}

Medziprodukt 105Intermediate 105

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β, 7aa,8aβ) ]-8a-[ (2,3 -anhyd.ro- 6-deoxy-4-0-tosyl-β-D-talopyranosyloxy)metyl]-4-(l,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H) karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αβ)] -8α- [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-tosyl-β-D-talopyranosyloxy) ) methyl] -4- (l, 3-dioxolan-2-yl) -4,4, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1, 4-methane-s-indacene-3a- (1H) carboxylic acid

Roztok 0,45 mmol medziproduktu 102, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 7 ml vysušeného dichlórmetánu, bol miešaný s 1,35 mmol 4-dimetylaminopyridínu a 0,9 mmol tosylchloridu a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti cez noc. Po skončení tejto operácie bola zmes premytá vodou a solankou.A solution of 0.45 mmol of intermediate 102 described above in 7 ml of dried dichloromethane was stirred with 1.35 mmol of 4-dimethylaminopyridine and 0.9 mmol of tosyl chloride and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature overnight. After this operation, the mixture was washed with water and brine.

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok prečistený chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (3:1) ako elučného činidla.After removal of the solvent, the residue was purified by chromatography using hexane-ethyl acetate (3: 1) as eluent.

Po odparení príslušných frakcií bolo získaných 277 mg žiadanej v nadpise uvedenej zlúčeniny.Evaporation of the appropriate fractions gave 277 mg of the title compound.

δ (1h, CDCI3): 7,86, 7,42 a 7,29 (m, m, 10H, Ar), 6,93 (s, 1 H, CHPh₂), 5,82 (m, 1H, H-2), 5,06 (s, 1H, 4-CH), 4,68 (t, 1H, H-3’, J=4,2 Hz), 4,55 (s, 1H, H-ľ), 4,07 (d, 1H, 8a-CHa, J=8,7 Hz), 3,81 (m, 5H, 8a-CHb a O-CI^CH^O), 3,62 (m, 1H, H-5'), 3,30 (t, 1H, H-2', J=4,2 Hz), 3,15 (d, 1 H, H-4', J=3,9 Hz), 2,61 (m, 2H, H-1 a CH(CH₃)₂).δ (1h, CDCl 3): 7.86, 7.42 and 7.29 (m, m, 10H, Ar), 6.93 (s, 1H, CHPh ₂ ), 5.82 (m, 1H, H) -2), 5.06 (s, 1H, 4-CH), 4.68 (t, 1H, H-3 ', J = 4.2 Hz), 4.55 (s, 1H, H-1') 4.07 (d, 1H, 8a-CHa, J = 8.7 Hz), 3.81 (m, 5H, 8a-CHb and O-Cl 2 CH 2 O), 3.62 (m, 1H, H-5 '), 3.30 (t, 1H, H-2', J = 4.2 Hz), 3.15 (d, 1H, H-4 ', J = 3.9 Hz), 2 , 61 (m, 2H, H-1 and CH _{(CH3) 2).}

146146

Medziprodukt 106Intermediate 106

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3aP,4β,4ηβ,7β, 7aa₎8aβ)]-8a-[(2,3-anhydro-4-azido-4,6-dideoxy^-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-(l,3-dioxolan-2-yl)-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahyd.ro-7-metyl-3- (1-metyletyl) -1,4-metán-s-índacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl ester [1R- (1a, 3aP, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa ₎ 8aβ)] - 8a - [(2,3-anhydro-4-azido-4,6-dideoxy-4-D-manopyranosyloxy) methyl] -4- (1,3-dioxolan-2-yl) -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoctahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane -s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Roztok 0,15 mmol medziproduktu 105, ktorého príprava je opísaná vyššie a 0,45 mmol lítiumazidu v 3 ml vysušeného dimetylformamidu, bol zahrievaný pri teplote 100 °C cez noc. Potom bola reakčná zmes zriedená 20 ml etylacetátu a premytá vodou a soľankou. Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1) ako elučného činidla.A solution of 0.15 mmol of intermediate 105 described above and 0.45 mmol of lithiumazide in 3 mL of dried dimethylformamide was heated at 100 ° C overnight. The reaction mixture was then diluted with 20 mL of ethyl acetate and washed with water and brine. After removal of the solvent, the residue was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (4: 1) as eluent.

Po odparení príslušných frakcií bolo získaných 53 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.Evaporation of the appropriate fractions gave 53 mg of the title compound.

δ (¹H, CDCI₃): 7,46-7,23 (m, 10H, Ph₂), 6,94 (s, 1 H, CHPh₂), 5,86 (dd, 1H, H2, J=1,2 a 3,6 Hz), 5,08 (s, 1H, 4-CH), 4,67 (s, 1 H, H-ľ), 4,10 (d, 1H, 8aCHa, J=8,7 Hz), 3,83 (m, 4H, 8a-CHb a O-Cb^Ch^-O), 3,40 (d, 1H, H-4', J=9,3 Hz), 3,31 a 3,15 (d, d, H-2’a H-3', J=3,6 Hz), 3,23 (m, 1H, H-5'), 2,65 (m, 2H, H-1 a CH(CH₃)₂).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 7.46 to 7.23 (m, 10H, Ph _2), 6.94 (s, 1H, CHPh _2), 5.86 (dd, 1H, H2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 5.08 (s, 1H, 4-CH), 4.67 (s, 1H, H-1 '), 4.10 (d, 1H, 8aCHa, J = 8 7 Hz), 3.83 (m, 4H, 8a-CHb and O-Cb2 CH2 -O), 3.40 (d, 1H, H-4 &apos;, J = 9.3 Hz), 3, 31 and 3.15 (d, d, H-2 ' and H-3 &apos;, J = 3.6 Hz), 3.23 (m, 1H, H-5 &apos;), 2.65 (m, 2H, H-1 and CH (CH ₃ ) ₂ ).

Medziprodukt 107Intermediate 107

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3aβ,4β,4aβ,7β, 7aα,8aβ)]-8a-[(4-0-alyl-2,3-anhydro-6-deoxy-β-D-manopyranosyloxy) metyl ] - 4-f orinyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahyd.ro-7metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of Diphenylmethyl [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(4-O-allyl-2,3-anhydro-6-deoxy-β-D-manopyranosyloxy) methyl] 4-phenynyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- ( 1H) -carboxylic acid

Postup AProcedure

K roztoku 650 mg medziproduktu 21, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 50 ml vysušeného tetrahydrofuránu, bolo pri teplote 0 °C pridaných 90 mg hydridu sodného a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná v atmosfére dusíka pri teplote 0To a solution of 650 mg of intermediate 21 described above in 50 ml of dried tetrahydrofuran was added 90 mg of sodium hydride at 0 ° C and the resulting mixture was stirred under nitrogen at 0 ° C.

147147

°C po dobu 30 minút. Potom bolo k zmesi pridaných 875 mg alylbromidu a katalytické množstvo (50 mg) tetrabutylamóniumjodidu. Reakcia bola skončená po 5-hodinovom miešaní pri teplote miestnosti. K surovému materiálu bol pridaný 1 M roztok chloridu amónneho a etylacetát a organická fáza bola premytá vodou a soľankou, vysušená bezvodým síranom horečnatým a potom bola odparená do sucha.° C for 30 minutes. Then, 875 mg of allyl bromide and a catalytic amount (50 mg) of tetrabutylammonium iodide were added to the mixture. The reaction was complete after stirring at room temperature for 5 hours. To the crude material was added 1 M ammonium chloride solution and ethyl acetate, and the organic phase was washed with water and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and then evaporated to dryness.

Zvyšok bol chromatografovaný na stĺpci silikagélu za použitia zmesi n-hexán-etylacetát (7:1) ako elučného činidla .The residue was chromatographed on a silica gel column using n-hexane-ethyl acetate (7: 1) as eluent.

Bolo získaných 590 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .590 mg of the title compound are obtained.

Postup BProcedure B

K roztoku 3 g medziproduktu 53, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 200 ml vysušeného dichlórmetánu, bolo pri teplote miestnosti pridaných 2,35 g dimetylaminopyridínu a potom ešte za stáleho miešania bol pridaný pomaly roztok 3,66 g tosylchloridu v 100 ml dichlórmetánu. Potom bola reakčná zmes miešaná pri teplote miestnosti po dobu 3 dní, dokiaľ nebola reakcia skončená. Surový materiál bol premytý 1 M roztokom kyseliny chlorovodíkovej, nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanú sodného a soľankou.To a solution of 3 g of intermediate 53 prepared above in 200 ml of dried dichloromethane was added 2.35 g of dimethylaminopyridine at room temperature and then, while stirring, a solution of 3.66 g of tosyl chloride in 100 ml of dichloromethane was added slowly. The reaction mixture was then stirred at room temperature for 3 days until the reaction was complete. The crude material was washed with 1 M hydrochloric acid solution, saturated aqueous sodium bicarbonate solution and brine.

Oddelená organická fáza bola vysušená s bezvodým síranom horečnatým, pref i'ltrovaná a filtrát bol ponechaný reagovať s 20 ml roztoku metoxidu sodného v metanole (25% hmotnostné percentá). Táto reakčná zmes bola potom miešaná pri teplote miestnosti 1 deň a surový materiál, bol spracovaný 1 M roztokom kyseliny chlorovodíkovej a potom bol premytý vodou a soľankou. Oddelená organická fáza bola vysušená bezvodým síranom horečnatým a odparená.The separated organic phase was dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and the filtrate was treated with 20 ml of a solution of sodium methoxide in methanol (25% by weight). The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 day and the crude material was treated with 1 M hydrochloric acid solution and then washed with water and brine. The separated organic phase was dried over anhydrous magnesium sulfate and evaporated.

Zvyšok bol prečistený .rýchlou chromatografiou za použitia zmesi n-hexán-etylacetát (8:1) ako elučného činidla.The residue was purified by flash chromatography using n-hexane-ethyl acetate (8: 1) as eluent.

Bola získaná žiadaná, v nadpise uvedená zlúčenina (množstvo nešpecifikované) vo forme bielej peny. Celkový výťažok 45 %.The title compound (unspecified amount) was obtained as a white foam. Total yield 45%.

148 δ (¹Η, CDCI₃): 9,75 (s, 1Η, CHO), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,08 (dd, 1H, H-12, J=1_r2 a 3,3 Hz), 5,90 (m, 1 H, CH=CH₂), 5,28 (m, 2H, CH=CH2). 4,69 (d, 1H, H-1, J=1.2 Hz), 4,23 (m, 1H, H-5'), 4,11 (d, 1H, H-19a, J=9 Hz), 4,06 (m, 1H, H4'), 3,79 (d, 1 H, H-19b, J=9 Hz), 3,26 (d, 1H, H-2', J=3,9 Hz), 3,21 (m, 2H, 01+?CH=CH₂), 3,13 (d, 1 H, H-3', J=3,9 Hz), 2,86 (t, 1H, H-11. J=3,6 Hz).148 δ ( ¹ Η, CDCl ₃ ): 9.75 (s, 1Η, CHO), 6.99 (s, 1H, CHPh ₂ ), 6.08 (dd, 1H, H-12, J = 1 _r 2) and 3.3 Hz), 5.90 (m, 1H, CH = CH ₂ ), 5.28 (m, 2H, CH = CH 2). 4.69 (d, 1H, H-1, J = 1.2Hz), 4.23 (m, 1H, H-5 '), 4.11 (d, 1H, H-19a, J = 9Hz), 4.06 (m, 1H, H 4 '), 3.79 (d, 1H, H-19b, J = 9 Hz), 3.26 (d, 1H, H-2', J = 3.9 Hz) 3.21 (m, 2H, O 2+ CH = CH ₂ ), 3.13 (d, 1H, H-3 ', J = 3.9 Hz), 2.86 (t, 1H, H -11 (J = 3.6 Hz).

Medziprodukt 108Intermediate 108

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(la,3aβ,4β,4aβ,7β, 7aa,8αβ)]-8a-[(2,3-anhydro-6-deoxy-4-0-(2,3-dihydroxypropy 1) -β-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8, 8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of diphenylmethyl ester [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O- (2,3-dihydroxypropyl) - β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s -indacén3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 2 g medziproduktu 7, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 50 ml acetónu a 5 ml vody, bol pri teplote 0 “C pridaný 1 g N-oxidu N-metylmorfolinu a k vzniknutej reakčnej zmesi bolo pridaných 0,2 ml roztoku oxidu osmičelého (2,5% (hmotnostné) v izobutanole) a hydroxylácia látky GM-218045X bola dokončená po trojdennom miešaní pri teplote miestnosti.To a solution of 2 g of intermediate 7 prepared above in 50 ml of acetone and 5 ml of water at 0 ° C was added 1 g of N-methylmorpholine N-oxide and to the resulting reaction mixture was added 0.2 ml of osmium tetroxide solution. (2.5% (w / w) in isobutanol) and hydroxylation of GM-218045X was completed after stirring at room temperature for 3 days.

Surový materiál bol zmiešaný s hydrogénsiričitanom sodným, prefiltrovaný cez celit a odparený do sucha. Zvyšok bol rozpustený v etylacetáte a premytý vodou a soľankou. Oddelená organická fáza bola vysušená bezvodým síranom horečnatým, odparená do sucha a potom bol zvyšok chromatografovaný na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-etylacetát (1:1) a zmesi dichlórmetán-metanol (50:1) ako elučných činidiel.The crude material was mixed with sodium bisulfite, filtered through celite and evaporated to dryness. The residue was dissolved in ethyl acetate and washed with water and brine. The separated organic phase was dried over anhydrous magnesium sulfate, evaporated to dryness, and then the residue was chromatographed on a silica gel column using hexane-ethyl acetate (1: 1) and dichloromethane-methanol (50: 1) as eluents.

Bola získaná žiadaná, v nadpise uvedená zlúčenina (1,75 g), ako zmes enantiomérov 50:50, vo forme bielej peny.The title compound (1.75 g) was obtained as a 50:50 mixture of enantiomers as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,75 (s, 1H, CHO), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,08 (dd, 1H, H-12, J=1_r5 a 3,6 Hz), 4,69 (s, 1H, H-ľ), 4,10 (d, 1H, H-19a, J=9,3 Hz), 3,90-3,58 (m, 5H, CH2OH, CHOH, OCH^CHOH in 4'), 3,79 (d, 1H, H-19b, J=9,3 Hz),. 3,27, 3,13 (d, d, 1 H, 1 H, H-2'.a H-3', J=3,9 Hz), 3,28-3,22 (m, 2H, H-4' a H5'), 2,85 (t, 1H, H-11, J=3,6 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 6.99 (s, 1H, CHPh _2), 6.08 (dd, 1 H, H-12, J = 1 5 and _R 3 6 Hz), 4.69 (s, 1H, H-1 '), 4.10 (d, 1H, H-19a, J = 9.3 Hz), 3.90-3.58 (m, 5H, CH 2 OH, CHOH, OCH 2 CHOH in 4 '), 3.79 (d, 1H, H-19b, J = 9.3 Hz) ,. 3.27, 3.13 (d, d, 1H, 1H, H-2 'and H-3', J = 3.9 Hz), 3.28-3.22 (m, 2H, H -4 'and H5'), 2.85 (t, 1H, H-11, J = 3.6 Hz).

149149

Medziprodukt 109Intermediate 109

Príprava difenylmetylesteru kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4aP,7β, 7aa,8ηβ)]-8a-[(2,3-anhydro-6-deoxy-4-0-[(2,3-0-izopropylidén) -2,3-dihyd.roxypropyl] ^-D-manopyranosyloxy)metyl] -4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl- 3-(1-metylety1)-Preparation of Diphenylmethyl ester [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4αP, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O - [(2,3-O-isopropylidene) (-2,3-dihydroxypropyl) -4-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -

1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 350 mg medziproduktu 108, ktorého príprava je opi šantí vyššie, v 20 ml vysušeného acetónu, bolo pridaných 250 μΐ 2,2-dimetoxypropánu a katalytické množstvo (30 mg) kyseliny p-toluénsulfónovej a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná v atmosfére dusíka pri teplote miestnosti po dobu 2 hodín.To a solution of 350 mg of intermediate 108, prepared as described above, in 20 ml of dried acetone, was added 250 μΐ of 2,2-dimethoxypropane and a catalytic amount (30 mg) of p-toluenesulfonic acid, and the resulting reaction mixture was stirred under nitrogen. at room temperature for 2 hours.

Surový materiál bol odparený do sucha a zvyšok bol opäť rozpustený v 70 ml. etylacetátu a vzniknutý roztok bol premytý vodou a soľankou. Po zahustení organickej fázy bol získaný zvyšok prečistený chromatografiou na stĺpci silikagélu, za použitia zmesi hexán-etylacetát (6:1) ako elučného činidla .The crude material was evaporated to dryness and the residue redissolved in 70 mL. ethyl acetate and the resulting solution was washed with water and brine. After concentrating the organic phase, the residue was purified by silica gel column chromatography using hexane-ethyl acetate (6: 1) as eluent.

Bolo získaných 290 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, ako zmes izomérov 50:50, vo forme bielej peny, δ (¹H, CDCI₃): 9,74 (s, 1H, CHO), 6,99 (s, 1H, CHPh₂), 6,08 (dd, 1 H, H-12, J=0,9 a ' 3,3 Hz), 4.67 (d, 1H, H-ľ, J=2.1 Hz), 4,32-4,22 (m, 1 H, CHOH in 4'), 4,12-4,03 (m, 2H, H-19a a OCl·^ in 4’), 3,82-3,51 (m, 4H, H-19b, OCH2CHOH-CH2O), 3,29 a ‘ 3,12 (d, d, 1H, 1H, H-2' a H-3', J=3,9 Hz), 3,26-3,20 (m,2H, Η-4'a H-5'), 2,85 (t, 1 H, H-11, J=3,9 Hz), 1,42 a 4,36 (d,d, 3H, 3H, (CH3)₂-C izopropylidénu).To afford 290 mg of the title compound as a mixture of 50/50, as a white foam. Δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.74 (s, 1H, CHO), 6.99 (s, 1 H , CHPh _2), 6.08 (dd, 1H, H-12, J = 0.9, '3.3 Hz), 4.67 (d, 1 H, H', J = 2.1 Hz), 4.32 -4.22 (m, 1H, CHOH in 4 '), 4.12-4.03 (m, 2H, H-19a and OCl · 4 in 4'), 3.82-3.51 (m, 4H, H-19b, OCH 2 CHOH-CH 2 O), 3.29 and 3.12 (d, d, 1H, 1H, H-2 'and H-3', J = 3.9 Hz), 3.26- 3.20 (m, 2H, Η-4'and H-5 '), 2.85 (t, 1H, H-11, J = 3.9 Hz), 1.42 and 4.36 (d, d, 3H, 3H, (CH 3) ₂ -C isopropylidene).

Príklad 1Example 1

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3αβ,4β,4ηβ,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[(6deoxy-3,4-0-izopropylidén-β-D-altropyranosyloxy)metyl)-4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-me tyl-3- (l-metyletyl) -Preparation of acid [1R- (Ια, 3αβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O-isopropylidene-β-D-altropyranosyloxy) methyl) -4-formyl-4,4a , 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -

1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K suspenzii 10%-ného paládia na aktívnom uhlí (80 mg)To a slurry of 10% palladium on activated carbon (80 mg)

150150

Príklad 1Example 1

Príprava kyseliny [ÍR- (Ια,3ap,4β,4ap,7β,7aa,8ap)]-8a-[(6deoxy-3,4-0-izopropylidén-β-D-altropyranosyloxy)metyl]-4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-Preparation of [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αp)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O-isopropylidene-β-D-altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a , 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -

1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K suspenzii 10%-ného paládia na aktívnom uhlí (80 mg) v 10 ml etylacetátu, bol v atmosfére dusíka pridaný roztok 180 mg medziproduktu 2, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 10 ml etylacetátu a vzniknutá reakčná zmes bola hydrogenovaná pri teplote miestnosti a tlaku 0,21 MPa vodíka po dobu 1 hodiny. Potom bol katalyzátor odfiltrovaný a rozpúšťadlo bolo odparené do sucha.To a suspension of 10% palladium on charcoal (80 mg) in 10 mL of ethyl acetate, under a nitrogen atmosphere, was added a solution of 180 mg of intermediate 2 described above in 10 mL of ethyl acetate, and the resulting reaction mixture was hydrogenated at room temperature and pressure of 0.21 MPa of hydrogen for 1 hour. The catalyst was then filtered off and the solvent was evaporated to dryness.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (20:1) ako elučného činidla.The residue was flash chromatographed on silica gel using dichloromethane-methanol (20: 1) as eluent.

Bolo získaných 128 mg v nadpise uvedenej zlúčeniny.128 mg of the title compound were obtained.

δ (¹ H, CDCI3): 9,73 (s, 1 H, CHO), 6,08 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz),'4,61 (d, 1H, H-Γ, J=2,1 Hz), 4,30 (dd, 1H, H-3', J=3,6 a 5,4 Hz), 4,04 (d, 1H, 8aCH2, J=9,3 Hz), 3,95 (dd, 1 H, H-2', J=2,1 a 3,6 Hz), 3,85 (dd, 1H, H-4', J=5(4 a 9,0 Hz), 3,66 (d, 1H, J=9.3 Hz), 3,49 (dq, 1H, H-5', Jd=9,0 Hz, Jq=6,3 Hz), 2,69 (t, 1Η.Ή-1, J=3,6 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,8 (CHO), 175,4 (CO2H), 148,3 (C3), 130,7 (C-2), 109,3 (Cq.ísop), (98,9 (C-ľ), 76,9 (C-4¹), 75,8 (C-2‘), 74,2 (8aCH₂), 71,7 (C-3¹), 68,6 (C-5'), 65,6 (C-8a), 58.9 (C-4).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), '4.61 ( d, 1H, H-1, J = 2.1 Hz), 4.30 (dd, 1H, H-3 ', J = 3.6 and 5.4 Hz), 4.04 (d, 1H, 8aCH2) J = 9.3 Hz), 3.95 (dd, 1H, H-2 ', J = 2.1 and 3.6 Hz), 3.85 (dd, 1H, H-4', J = Δ (4 and 9.0 Hz), 3.66 (d, 1H, J = 9.3 Hz), 3.49 (dq, 1H, H-5 ', J d = 9.0 Hz, Jq = 6.3 Hz) Δ ( ¹³ C, CDCl3): 204.8 (CHO), 175.4 (CO2H), 148.3 (C3), 2.69 (t, 1 ,.Η-1, J = 3.6 Hz); , 130.7 (C-2), 109.3 (Cq.ísop), (98.9 (C-I '), 76.9 (C-4 ^1), 75.8 (C-2'), 74 , 2 ₍₂ 8aCHa), 71.7 (C-3 ^1), 68.6 (C-5 '), 65.6 (C-8), 58.9 (C-4).

Príklad 2Example 2

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β,7aa, 8ηβ) ] -8a- [ (6-deoxy-3,4-0-izopropylidén^-D-alt.ropyranosyloxy)metyl] -4-.formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1Η)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] -8α- [(6-deoxy-3,4-O-isopropylidene-4-D-altopyranosyloxy) methyl] - 4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a- (1 ') - carboxylic acid

K roztoku 246 mg zlúčeniny, pripravenej v rámci vyššie opísaného príkladu 1, v 2 ml dioxánu, bol pridaný 0,5 M roztok hydrogénuhličitanu sodného (0,99 ml) a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná po dobu 15 minút.To a solution of 246 mg of the compound prepared as described in Example 1 above in 2 mL of dioxane was added 0.5 M sodium bicarbonate solution (0.99 mL) and the resulting reaction mixture was stirred for 15 minutes.

151151

Po vymrazeni bolo získaných 256 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.After freeze-drying, 256 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,88 (s, 1H, CHO), 5,95 ( dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,51 (d, 1H, H-ľ, J=1,8 Hz), 4,26 (dd, 1 H, H-3', J=4,8 a 6,0 Hz), 4,01 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 3,87-3,80 (m, 2H, H-2’ a H4’), 3,74 (d, 1 H, 8aCH₂, J=9,6 . Hz), 3,50-3,42 (m, 1 H, H-5'), 2,66 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.88 (s, 1H, CHO), 5.95 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 4.51 (d, 1 H H-1 ', J = 1.8 Hz), 4.26 (dd, 1H, H-3', J = 4.8 and 6.0 Hz), 4.01 (d, 1H, 8 and CH ₂ , J = 9.6 Hz), 3.87-3.80 (m, 2H, H-2 'and H4'), 3.74 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.6 Hz), 3.50-3.42 (m, 1H, H-5 '), 2.66 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz).

Príklad 3Example 3

Príprava kyseliny [1R-(Ια,3aP,4β,4aβ,7β,7aa,8a3)]-8a-[(6deoxy-3,4-0-(2-pentylidén)^-D-altropyranosyloxy)metyl]-4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metylety1)-Preparation of [1R- (Ια, 3αP, 4β, 4αβ, 7β, 7αa, 8α3)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O- (2-pentylidene) -4-D-altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl- 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-1methylethyl) -

1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K suspenzii 30 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí v 10 ml etylacetátu, bol v prostredí dusíka pridaný roztok 140 mg medziproduktu 3, ktorého príprava je opísaná vyššie, v etylacetáte a vzniknutá reakčná zmes bola hydrogenovaná za tlaku 0,21 MPa vodíka po dobu 45 minút. Potom bol katalyzátor odfiltrovaný a rozpúšťadlo bolo odparené do sucha.To a suspension of 10 mg of 10% palladium on charcoal in 10 ml of ethyl acetate was added, under nitrogen, a solution of 140 mg of intermediate 3, the preparation of which was described above, in ethyl acetate, and the resulting reaction mixture was hydrogenated under 50 psi of hydrogen. for 45 minutes. The catalyst was then filtered off and the solvent was evaporated to dryness.

Rýchlou chromatografiou zvyšku na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (30:1) ako elučného činidla, bolo získaných 75 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme epimérov 26:74.Flash chromatography of the residue on silica gel using dichloromethane-methanol (30: 1) as eluent gave 75 mg of the title compound as an epimer of 26:74.

δ (¹H, CDCI3): 9,82 (s, 1H, CHO), 6,08 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,60 (d, 1 H, H-ľ, J=1,8 Hz), 4,30 (dd, 1H, H-3’, J=4,2 a 6,0 Hz), 3,98 (d, 1H, 8aCH2, 1=9,3 Hz), 3,94 (dd, 1H, H-2', J=1,8 a 4,2 Hz), 3,87 (dd, 1H, H-4', J=6,0 a 9,3 Hz), 3,65 (d, 1H, 8aCH2, J=9,3 Hz), 3,47 (dq, 1H, H-5', Jd=9,3 Hz, Jq=6,3 Hz), 2,70 ( t, 1H, H-1, J=3,9 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,5 (CHO), 176,5 (CO2H), 148,2 (C-3), 130,6 (C-2), 110,8 (Cq acetal), 98,8 (C-ľ), 76,6 (C-4'), 75,6 (C2'),73,9 (8aCH₂), 71,3 (C-3'), 68,9 (C-5'), 65,5 (C8a), 58,8 (C-4).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.82 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 4.60 (d, 1 H, H-1 ', J = 1.8 Hz), 4.30 (dd, 1H, H-3', J = 4.2 and 6.0 Hz), 3.98 (d, 1H, 8 and CH 2, 1) = 9.3 Hz), 3.94 (dd, 1H, H-2 ', J = 1.8 and 4.2 Hz), 3.87 (dd, 1H, H-4', J = 6.0 and 9.3 Hz), 3.65 (d, 1H, 8aCH 2, J = 9.3 Hz), 3.47 (dq, 1H, H-5 ', Jd = 9.3 Hz, Jq = 6.3 Hz), 2.70 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.5 (CHO), 176.5 (CO 2 H), 148.2 (C-3), 130.6 (C-2), 110.8 (Cq acetal), 98, 8 (C-1 '), 76.6 (C-4'), 75.6 (C 2 '), 73.9 (8aCH ₂ ), 71.3 (C-3'), 68.9 (C-5) 65.5 (C8a), 58.8 (C-4).

Príklad 4Example 4

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[(6deoxy-3,4-0-(4-metoxy-2-butylidén)-β-D-altropyranosyloxy)metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-mety1- 3 -(1152 metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejAcid preparation [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O- (4-methoxy-2-butylidene) -β-D-altropyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1152 methylethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a- (1H) ) carboxylate

K suspenzii 100 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí, v 15 ml etylacetátu, bol pridaný roztok 260 mg medziproduktu 4, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 10 ml etylacetátu a vzniknutá reakčná zmes bola hydrogenovaná za tlaku 0,21 MPa vodíka po dobu 45 minút. Potom bol katalyzátor odfiltrovaný a rozpúšťadlo bolo odparené do sucha.To a suspension of 100 mg of 10% palladium on charcoal in 15 ml of ethyl acetate was added a solution of 260 mg of intermediate 4, as described above, in 10 ml of ethyl acetate, and the resulting reaction mixture was hydrogenated under 50 psi hydrogen. for 45 minutes. The catalyst was then filtered off and the solvent was evaporated to dryness.

Rýchlou chromatografiou zvyšku na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (30:1) ako elučného činidla, bolo získaných 172 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.Flash chromatography of the residue on silica gel using dichloromethane-methanol (30: 1) as eluent gave 172 mg of the title compound.

Ô(¹H, CDCI3): 9,71 (s, 1 H, CHO), 6,08 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a... 3,6 Hz), 4,60 (d, 1 H, H-ľ, J=2,4 Hz), 4,31 (dd, 1H, H-3', J=4,2 a 6,0 Hz), 3,98 (d, 1H, 8aCH2, J=9,3 Hz), 3,94 (dd, 1H, H-2', J=2,4 a 4,2 Hz), 3,88 (dd, 1 H, H-4', J=6,0 a 9,3 Hz), 3,65 (d, 1H, 8aCH2, J=9,3 Hz), 3,50 (t, 1H, CH2O, J=7.2 Hz), 3,50-3,40 ( m, 1 H, H-5'), 2,69 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,5 (CHO), 176,2 (CO₂H), 148,2 (C-3), 130,6 (C-2), 109,8 (C-2), 98,8 (C-ľ), 76,7 (C^T), 75,7 (C2'), 73,8 (8aCH₂), 71,2 (C-2'), 68,8 (C-5'), 68,4 (CH₂O), 65,6 (C8a), 58,9 (C-4), 58,5 (CH3O).(@ ¹ H, CDCl3): 9.71 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5, ... 3.6 Hz), 4.60 (d, 1H, H-1 ', J = 2.4 Hz), 4.31 (dd, 1H, H-3', J = 4.2 and 6.0 Hz), 3.98 (d, 1H 8aCH2, J = 9.3 Hz), 3.94 (dd, 1H, H-2 ', J = 2.4 and 4.2 Hz), 3.88 (dd, 1H, H-4', J = 6.0 and 9.3 Hz), 3.65 (d, 1H, 8aCH2, J = 9.3 Hz), 3.50 (t, 1H, CH2 O, J = 7.2 Hz), 3.50- 3.40 (m, 1H, H-5 '), 2.69 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.5 (CHO), 176.2 (CO ₂ H), 148.2 (C-3), 130.6 (C-2), 109.8 (C-2) , 98.8 (C-1 '), 76.7 (C-2'), 75.7 (C 2 '), 73.8 (8aCH ₂ ), 71.2 (C-2'), 68.8 (C -5 '), 68.4 (CH ₂ O), 65.6 (C 8a), 58.9 (C-4), 58.5 (CH 3 O).

Príklad 5Example 5

Príprava kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ηβ,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[(6deoxy-3,4-0-cyklopentylidén^-D-altropyranosyloxy)metyl]4-fo.rmyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3- (1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3αp, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O-cyclopentylidene-4-D-altropyranosyloxy) methyl] 4-formyl-4 4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K suspenzii 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí v 10 ml etylacetátu, bol pridaný roztok 232 mg medziproduktu 5, ktorého príprava je opísaná vyššie, v etylacetáte a vzniknutá reakčná zmes bola hydrogenovaná pri teplote miestnosti a tlaku 0,245 MPa vodíka po dobu 1,5 hodín. Potom bol katalyzátor odfiltrovaný a rozpúšťadlo bolo odparené do sucha.To a suspension of 50 mg of 10% palladium on charcoal in 10 ml of ethyl acetate was added a solution of 232 mg of intermediate 5, as described above, in ethyl acetate, and the resulting mixture was hydrogenated at room temperature and 50 psi hydrogen for 1 hour. ,5 hours. The catalyst was then filtered off and the solvent was evaporated to dryness.

Rýchlou chromatografiou zvyšku na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (30:1) ako elučného činidla,Flash chromatography of the residue on silica gel using dichloromethane-methanol (30: 1) as eluent,

153 bolo získaných 67 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, δ (1 H, CDCI₃): 9,71 (s, 1H, CHO), 6,07 ( dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,59 (d, 1H, H-ľ, J=2,1 Hz), 4,17 (dd, 1H, H-3', J=3,6 a 5,4 Hz), 4,54 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,97 ( dd, 1H, H-2¹, J=2,1 a 3,6 Hz), 3,81 (dd, 1H, H-4’, J=5,4 a 9,0 Hz), 3,70 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,44 (dq, 1H, H-5', J_d=9,0 Hz, Jq=6,3 Hz), 2,69 (t, 1 H, H-1, J=3,3 Hz).153 to give 67 mg of the title compound. Δ (1 H, _CDCl3): 9.71 (s, 1H, CHO), 6.07 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5, 3.3 Hz), 4.59 (d, 1H, H-1 ', J = 2.1 Hz), 4.17 (dd, 1H, H-3', J = 3.6 and 5.4 Hz) , 4.54 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.3 Hz), 3.97 (dd, 1 H, ¹ H-2, J = 2.1 and 3.6 Hz), 3.81 (dd 1 H, H-4 ', J = 5.4 and 9.0 Hz), 3.70 (d, 1H, 8 and CH ₂ , J = 9.3 Hz), 3.44 (dq, 1H, H-5) ', J _d = 9.0 Hz, Jq = 6.3 Hz), 2.69 (t, 1H, H-1, J = 3.3 Hz).

Príklad 6Example 6

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3&β,4β,4aP,7β,7aa,8aP)]-8a-[(2,6dideoxy-3,4-0-cyklopentylidén)^-D-altropyranosyloxy)metyl]4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3β, 4β, 4β, 4αP, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(2,6dideoxy-3,4-O-cyclopentylidene) -4-D-altropyranosyloxy) methyl] 4-formyl- 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 1,2 g medziproduktu 7, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 60 ml etylacetátu, bolo pridaných 600 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí v atmosfére dusíka a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná v Parrovom autokláve pri teplote miestnosti pri tlaku 0,28 MPa vodíka po dobu 1 hodiny. Potom bol katalyzátor odfiltrovaný a premytý väčším množstvom etylacetátu. Potom bolo rozpúšťadlo odparené do sucha.To a solution of 1.2 g of intermediate 7 described above in 60 ml of ethyl acetate was added 600 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere and the resulting mixture was stirred in a Parr autoclave at room temperature at 0. 28 MPa of hydrogen for 1 hour. The catalyst was then filtered off and washed with more ethyl acetate. Then the solvent was evaporated to dryness.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (25:1) ako elučného činidla.The residue was flash chromatographed on silica gel using dichloromethane-methanol (25: 1) as eluent.

Bolo získaných 0,79 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .0.79 g of the title compound is obtained.

δ (1 H, CDCI3): 9,81 (s, 1H, CHO), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,63 (dd, 1H, H-ľ, J-2,4 a 8,4 Hz), 4,38 (dt, 1H, H-3', J_d=3,0 Hz, J_t=5,1 Hz), 4,29 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 3,64 (dd, 1H, H-4’, J=5,1 a 9,3 Hz), 4,43 (dq, 1H, H-5', J_d=9,3 Hz, J_q=6,0 Hz), 3,40 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 2,53 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz); δ (¹³C, CDCI₃): 204,7 (CHO), 174,6 (CO₂H), 148,2 (C-3), 130,6 (C2), 108,9 (C(CH₃)₂), 98,3 (C-ľ), 76,6 (C-4'), 73,7 (8aCH₂), 72,5 (C-3¹), 71,7 (C5'), 67,0 (C8a), 65,2,59,0 (C-4).δ (1H, CDCl3): 9.81 (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.63 (dd, 1H) H-1 ', J-2.4 and 8.4 Hz), 4.38 (dt, 1H, H-3', J _d = 3.0 Hz, J _t = 5.1 Hz), 4.29 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.3 Hz), 3.64 (dd, 1H, H-4 ', J = 5.1 and 9.3 Hz), 4.43 (dq, 1H, H -5 ', J _d = 9.3 Hz, J _q = 6.0 Hz), 3.40 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.3 Hz), 2.53 (t, 1H, H- 1. J = 3.9 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl ₃ ): 204.7 (CHO), 174.6 (CO ₂ H), 148.2 (C-3), 130.6 (C2), 108.9 (C (CH ₃ )) _2), 98.3 (C-I '), 76.6 (C-4'), 73.7 ₍₂ 8aCHa), 72.5 (C-3 ^1), 71.7 (C 5 '), 67, O (C 8a), 65,2,59,0 (C-4).

154154

Príklad 7Example 7

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ap,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[(2,6dideoxy-3,4-0-(4-metoxy-2-butylidén)-β-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejAcid preparation [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4αp, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2,6dideoxy-3,4-O- (4-methoxy-2-butylidene) -β-D- allopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a ( 1H) -carboxylic acid

K suspenzii 300 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí v 10 ml etylacetátu bol pridaný roztok 246 mg medziproduktu 8, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 10 ml etylacetátu a vzniknutá reakčná zmes bola hydrogenovaná pri teplote miestnosti a tlaku 0,315 MPa vodíka po dobu 1 hodiny. Potom bol katalyzátor odfiltrovaný a rozpúšťadlo bolo odparené do sucha.To a suspension of 10% palladium-on-charcoal (300 mg) in ethyl acetate (10 ml) was added a solution of intermediate (8) (246 mg) described above in ethyl acetate (10 ml) and hydrogenated at room temperature and 50 psi hydrogen for 30 min. 1 hour. The catalyst was then filtered off and the solvent was evaporated to dryness.

Zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (30:1) ako elučného činidla.The residue was purified by flash chromatography on silica gel using dichloromethane-methanol (30: 1) as eluent.

Bolo získaných 182 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, ako zmes epimérov 4:1, vo forme bielej sfarbenej peny.182 mg of the title compound are obtained as a 4: 1 mixture of epimers as a white colored foam.

δ (1 H. CDCI3): 9,81 (s, 1 H, CHO), 6,06 (dd, 1H,δ (1H, CDCl3): 9.81 (s, 1H, CHO), 6.06 (dd, 1H,

H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,62 (dd, 1H, H-ľ, J=2,7 a 8,1 Hz), 4,41 (dt, 1H.H-3', J_d=3,3 Hz, J_t=2,5 Hz), 4,24 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,0 Hz), 3,68 (dd, 1 H, H-4', J=5,7 a 9,0 Hz), 3_r50 (t, 2H, CH₂, J=7,5 Hz), 3,46-3,38 (m, 1H, H-5'), 3,33 (s, 3H, CH3O), 2,54 (t, 1H, H-1, J=4,2 Hz),; δ (¹³C, CDCI3): 204,5 (CHO), 175,1 (CO₂H), 148,2 (C-3), 130,7 (C-2), 109,4 (C-2), 98,3 (C-ľ), 76,4 (C-4'), 73,6 (8aCH₂), 71,9 (C-3'), 71,4 (C-5*), 68,6 (CH₂O), 65,2 (C8a), 58.9 (C-4), 58,6 (CH3O).H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.62 (dd, 1H, H-1 ', J = 2.7 and 8.1 Hz), 4.41 (dt, 1H, H- 3 ', J _d = 3.3 Hz, J _t = 2.5 Hz), 4.24 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.0 Hz), 3.68 (dd, 1H, H- 4 ', J = 5.7 and 9.0 Hz), 3 _r 50 (t, 2H, CH ₂ , J = 7.5 Hz), 3.46-3.38 (m, 1H, H-5' 1.33 (s, 3H, CH 3 O), 2.54 (t, 1H, H-1, J = 4.2 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.5 (CHO), 175.1 (CO ₂ H), 148.2 (C-3), 130.7 (C-2), 109.4 (C-2) , 98.3 (C-1 '), 76.4 (C-4'), 73.6 (8aCH ₂ ), 71.9 (C-3 '), 71.4 (C-5 *), 68, 6 (CH ₂ O), 65.2 (C 8a), 58.9 (C-4), 58.6 (CH 3 O).

Príklad 8Example 8

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β,7aa,Sodium salt preparation [IR- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa,

8ηβ) ] -8a- [(2,6-di.deoxy-3,4-0-izopropylidén^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3(1-metyletyl) -1,4-metán-s-.indacén-3a- (1H) -karboxylovej8ηβ)] -8a- [(2,6-dioxyoxy-3,4-O-isopropylidene-4-D-alopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8, 8α-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku, pripravenému rozpustením 376 mg zlúčeniny,To the solution prepared by dissolving 376 mg of the compound,

155 pripravenej v rámci príkladu 6, v 3 ml dioxánu, bol pridaný 0,5 N roztok hydrogénuhličitanu sodného (1,5 ml).155 prepared in Example 6, in 3 ml dioxane, was added 0.5 N sodium bicarbonate solution (1.5 ml).

Výsledná reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 30 minút a potom vymrazená.The resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 30 minutes and then frozen.

Bolo získaných 392 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .392 mg of the title compound are obtained.

δ (1 H, CDCI3): 9,84 (s, 1H, CHO), 5,94 (dd, 1H, H-2,. J=1_f5 a 3,6 Hz), 4,52 (dd, 1H, H-ľ, J=2,4 a . 9,0 Hz), 4,41-4,37 (m, 1H, H-3'), 4,02 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 3,74 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 3,57 (dd, 1H, H-4', J=5,4 a 10,0 Hz), 3,42 (dq, 1 H, H-5', J_d=6,3 Hz, J_q=6,3 Hz), 2,56 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz).δ (1 H, CDCl3): 9.84 (s, 1H, CHO), 5.94 (dd, 1 H, H-2 ,. J = 1 _f 5 and 3.6 Hz), 4.52 (dd, 1H, H-1 ', J = 2.4 and 9.0 Hz), 4.41-4.37 (m, 1H, H-3'), 4.02 (d, 1H, 8 and CH ₂ , J = 9.6 Hz), 3.74 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.6 Hz), 3.57 (dd, 1 H, H-4 ', J = 5.4 and 10.0 Hz); 3.42 (dq, 1H, H-5 ', J _d = 6.3 Hz, J _q = 6.3 Hz), 2.56 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz) .

Príklad 9Example 9

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ap,7β,7aa,8ap)]-8a-[(6deoxy-3,4-0-tiokarbonyl-P-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4β, 4β, 7β, 7aa, 8ap)] - 8α - [(6-Deoxy-3,4-O-thiocarbonyl-PD-allopyranosyloxy) methyl] -4-formyl4,4a, 5 , 6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4metán-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 0,22 g medziproduktu 9, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 ml dichlórmetánu, bol pri teplote 0 °C pridaný 2%-ný roztok t.ri.fluóroctovej kyseliny v dichlórmetáne (20 ml). Vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote 0 °C po dobu 1 hodiny a potom bola premytá 2 x 20 ml vody a vysušená síranom horečnatým.To a solution of 0.22 g of intermediate 9 described above in 5 ml of dichloromethane was added a 2% solution of trifluoroacetic acid in dichloromethane (20 ml) at 0 ° C. The resulting reaction mixture was stirred at 0 ° C for 1 hour and then washed with 2 x 20 mL water and dried over magnesium sulfate.

Po odparení rozpúšťadla bol získaný zvyšok, ktorý bol chromatografovaný na stĺpci silikagélu za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (40:1 až 20:1), ako elučného činidla.Evaporation of the solvent gave a residue which was chromatographed on a silica gel column using dichloromethane-methanol (40: 1 to 20: 1) as eluent.

Bolo získaných. 0,1 g žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .It was obtained. 0.1 g of the title compound is obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,68 (s, 1 H, CHO), 6,09 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,94 (dd, 1 H, H-3', J=3,9 a 7,2 Hz), 4,62 (m, 2H, H-ľ a H-4'), 4,14 (dd, 1 H, H-2', J=2,1 a 3,9 Hz), 4,00 (d, 1H, 8aCH2, Jab=9>³ Hz), 3,72 (d, 1H, 8aCH2, ^JAB⁼⁹t³ Hz), 3,68 (m, 1H, H-5'), 2,71 (m, 1 H, H-1); δ (¹³C, CDCI3): 204,4 (CHO), 190,2 (CS), 176,4 (CO₂H), 148,4 (C-3), 130,6 (C-2), 98,2 (C-ľ), 82,3 a 80,1 (C-3' a C-4'), 74,5 (8aCH₂), 71,7 (C-3a), 69,2 a 66,4 (0-2' a. i C5'); 65,5 (C-8a), 58,8 (C-4), 46,0 (C-1).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.68 (s, 1H, CHO), 6.09 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.94 (dd, 1 H, H-3 ', J = 3.9 and 7.2 Hz), 4.62 (m, 2H, H-1' and H-4 '), 4.14 (dd, 1H, H-2) Δ, J = 2.1 and 3.9 Hz), 4.00 (d, 1H, 8aCH 2, Jab = 9> ³ Hz), 3.72 (d, 1H, 8aCH 2, ^J AB ^{= 9} t ³ Hz) 3.68 (m, 1H, H-5 '); 2.71 (m, 1H, H-1); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.4 (CHO), 190.2 (CS), 176.4 (CO ₂ H), 148.4 (C-3), 130.6 (C-2), 98 , 2 (C-1 '), 82.3 and 80.1 (C-3' and C-4 '), 74.5 (8aCH ₂ ), 71.7 (C-3a), 69.2 and 66, 4 (0-2 'and C5'); 65.5 (C-8a), 58.8 (C-4), 46.0 (C-1).

156156

Príklad 10Example 10

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4ηβ,7β,7aa,8aβ)]-8a-[(2,6dideoxy-3,4-0-karbonyl^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl4,4a,5,6,7, 7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [(2,6-dideoxy-3,4-O-carbonyl-4-D-alopyranosyloxy) methyl] -4-formyl4, 4a, 5,6,7, 7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanes-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 125 mg medziproduktu 10, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml toluénu zahrievanému za refluxu pod spärným chladičom, bol pridaný v atmosfére dusíka po malých častiach prebytok karbonyldiimidazolu. Hneď ako bola reakcia skončená (kontrola chromatografiou na tenkej vrstve), bolo rozpúšťadlo za zníženého tlaku odstránené a zvyšný surový materiál bol rozpustený v 200 ml dichlórmetánu a postupne premytý 3 x 100 ml IM roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 1 x 100 ml soľanky a 1 x 100 ml vody.To a solution of 125 mg of intermediate 10, as described above, in 15 ml of toluene heated at reflux under a reflux condenser, was added excess carbonyldiimidazole in small portions under a nitrogen atmosphere. Once the reaction was complete (thin layer chromatography control), the solvent was removed under reduced pressure and the remaining crude material was dissolved in 200 mL dichloromethane and washed successively with 3 x 100 mL IM hydrochloric acid, 1 x 100 mL brine and 1 x 100 mL ml of water.

Po vysušení síranom horečnatým a zahustením do sucha bola získaná látka olej ovitej konzistencie použitá ďalej bez ďalšieho čistenia a po rozpustení v 15 ml etylacetátu bola trepaná v Parrovom autokláve za tlaku 0,14 MPa vodíka za prítomnosti 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí, pri teplote miestnosti a po dobu 1 hodiny.After drying over magnesium sulphate and concentration to dryness, the oily consistency was used without further purification and after dissolution in 15 ml of ethyl acetate was shaken in a Parr autoclave under 50 psi of hydrogen in the presence of 50 mg of 10% palladium on charcoal. , at room temperature and for 1 hour.

Po odfiltrovaní katalyzátora a odstránení rozpúšťadla bola získaná látka sirupovitej konzistencie, ktorá bola prečistená preparatívnou chromatografiou na tenkej vrstve za použitia zmesi metanol-dichlórmetán (1:15) ako elučného činidla.After filtering off the catalyst and removing the solvent, a syrupy substance was obtained, which was purified by preparative thin layer chromatography using methanol-dichloromethane (1:15) as eluent.

Bolo získaných 50 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny z frakcie s Rf = 0,5.50 mg of the title compound was obtained from the fraction with Rf = 0.5.

δ (¹H, CDCI3): 9,70 (s, 1H, CHO), 6,07 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,93 (m, 1H, H-3'), 4,63 (dd, 1H, H-ľ, J=2,4 a 7,8 Hz), 4,24 (dd, 1 H, H-4¹, J=6,6 a 9,3 Hz), 4,05 a 3,57 (2d, 2H, 8aCH₂, Jab=9 Hz), 3_f63 (m, 1 H, H-5’), 2,66 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,6 (COH), 176,0 (COOH), 154,0 (OCO), 148,2 (C-3), 130,7 (C-2), 97,5 (C-ľ), 76,6 (C-4’), 74,7 (C-3j, 69,9 (C-5*), 31,7 (C-2').δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.70 (s, 1H, CHO), 6.07 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.93 (m, 1 H , H-3 '), 4.63 (dd, 1 H, H', J = 2.4, 7.8 Hz), 4.24 (dd, 1H, H-4 ^1, J = 6.6 and 9.3 Hz), 4.05 and 3.57 (2d, 2H, 8aCHa _2, J AB = 9 Hz), 3 63 _f (m, 1H, H-5 '), 2.66 (t, 1 H H-1 (J = 3.9 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.6 (COH), 176.0 (COOH), 154.0 (OCO), 148.2 (C-3), 130.7 (C-2), 97.5 (C-1 '), 76.6 (C-4'), 74.7 (C-3 ', 69.9 (C-5'), 31.7 (C-2 ').

157157

Príklad 11Example 11

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β,7aa,8a3)]-8a-[(2,6dideoxy-3,4-0-tiokarbonyl-β-D-alopyranosyloxy)metyl]-4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)1,4-metán-s-indacén-3a-(1Η)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8a3)] - 8α - [(2,6-dideoxy-3,4-O-thiocarbonyl-β-D-allopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4 4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) 1,4-methano-s-indacene-3a (1Η) -carboxylic acid

K roztoku 130 mg medziproduktu 11, ktorého príprava je opísaná vyššie, 5 ml vysušeného dichlórmetánu, bolo pridaných pri teplote 0 °C 250 μΐ kyseliny trifluóroctovej. Po 2 hodinách bola vzniknutá reakčná zmes zriedená s 50 ml dichlórmetánu a postupne premytá 2 x 100 ml vody, vysušená síranom horečnatým a zahustená do sucha.To a solution of 130 mg of intermediate (11), as described above, with 5 ml of dried dichloromethane, was added at 0 ° C 250 μΐ of trifluoroacetic acid. After 2 hours, the resulting reaction mixture was diluted with 50 mL of dichloromethane and washed successively with 2 x 100 mL of water, dried over magnesium sulfate, and concentrated to dryness.

Zvyšok vo forme látky olej ovitej konzistencie bol prečistený preparatívnou chromatografiou na tenkej vrstve, za použitia silikagélu a zmesi metanol-dichlórmetán (1:15) ako elučného činidla.The oily residue was purified by preparative thin layer chromatography using silica gel and methanol-dichloromethane (1:15) as eluent.

Bolo získaných 68 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny z frakcie Rf = 0,6.68 mg of the title compound of Rf = 0.6 was obtained.

δ (¹H, CDCI₃): 9,70 (s, 1 H, CHO), 6,07 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,08 (m, 1H, H-3'), 4,63 (dd, 1H, H-ľ, J=2,7 a 8,4 Hz), 4,45 (dd, 1H, H-4', J=6,6 a 9,0 Hz), 4,03 a 3,59 (2d, 2H, 8aCH₂, Jab=⁹,³ Hz), 3,64 (m, 1H, H-5’), 2,67 (t, 1H, H-1, J=3,0 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204.5 (COH), 190,9 (CS), 176,3 (COOH), 148,2 (C-3), 130,7 (C-2), 97,5 (C-1), 80,3 (C-4'), 79,6 (C-3¹), 69,5 (C5'), 31,3 (C-2¹).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.70 (s, 1H, CHO), 6.07 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 5.08 ( m, 1H, H-3 '), 4.63 (dd, 1H, H-1', J = 2.7 and 8.4 Hz), 4.45 (dd, 1H, H-4 ', J = 6) , 6, 9.0 Hz), 4.03 and 3.59 (2d, 2H, 8aCHa _2, J AB = ^{9, 3} Hz), 3.64 (m, 1 H, H-5 '), 2.67 ( t, 1H, H-1, J = 3.0Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.5 (COH), 190.9 (CS), 176.3 (COOH), 148.2 (C-3), 130.7 (C-2), 97.5 (C) -1), 80.3 (C-4 '), 79.6 (C-3 ^1), 69.5 (C 5'), 31.3 (C-2 ^1).

Príklad 12Example 12

Pripravil kyseliny [ ÍR- (Ια , 33β , 4β , 4aβ , 7β , 7aa , 8ηβ) ]-8a- [ (2,6dideoxy-3,4-0-metylén^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPrepared acids [1R- (Ια, 33β, 4β, 4aβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] -8a- [(2,6-dideoxy-3,4-O-methylene-4-D-allopyranosyloxy) methyl] -4-formyl4, 4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4metán-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 450 mg medziproduktu 10, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 10 ml dibrómmetánu, bolo za intenzívneho miešania pridaných 40 mg tetrabutylamóniumbromidu a 100 ml vodného, 50%-ného roztoku hydroxidu sodného. Po 12 hodináchTo a solution of 450 mg of intermediate 10, as described above, in 10 ml of dibromomethane, was added with vigorous stirring 40 mg of tetrabutylammonium bromide and 100 ml of aqueous 50% sodium hydroxide solution. After 12 hours

158158

bolo k reakčnej zmesi rýchlo pridaných 100 ml IM roztoku kyseliny chlorovodíkovej a zmes bola vytrepaná so 100 ml dichlórmetánu. Oddelená organická fáza bola premytá 1 x 100 ml 1 M roztokom kyseliny chlorovodíkovej, vysušená síranom horečnatým a zahustená do sucha.100 ml of 1M hydrochloric acid solution was quickly added to the reaction mixture and the mixture was shaken with 100 ml of dichloromethane. The separated organic phase was washed with 1 x 100 ml of 1M hydrochloric acid solution, dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness.

Zvyšok, vo forme bielej sfarbenej látky, bol použitý ďalej bez ďalšieho čistenia a po rozpustení v 15 ml etylacetátu bol vytrepaný v Parrovom autokláve za tlaku 0,14 MPa vodíka za prítomnosti 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí pri teplote miestnosti a po dobu 1 hodiny.The residue, as a white solid, was used without further purification and, after dissolution in 15 ml of ethyl acetate, was taken up in a Parr autoclave under 50 psi of hydrogen in the presence of 50 mg of 10% palladium on charcoal at room temperature. for 1 hour.

Po odfiltrovaní katalyzátora a odstránení rozpúšťadla, bol získaný zvyšok vo forme: látky olej ovi tej konzistencie, ktorý bol ďalej spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi acetón-hexán (1:10) a (1:5), ako elučného činidla.After filtering off the catalyst and removing the solvent, an oil-like residue was obtained, which was further flash chromatographed on silica gel using acetone-hexane (1:10) and (1: 5) as eluent.

Bolo získaných 130 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme látky olej ovitej konzistencie.130 mg of the title compound are obtained as an oil.

δ (¹H, CDCI₃): 9,80 (s, 1H, CHO), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,12 a 4,86 (2m, 2H, OCH₂O), 4,60 (dd, 1H, H-ľ, J=2,4 a 8,7 Hz), 4,20 a 3,44 (2d, 2H, 8aCH₂, J_AB=9,3 Hz), 4,13 (^m. ^1H· H-3'), 3,67 (dd, 1H, H4', J=5,1 a 8,7 Hz), 3,38 (m, 1H, H-5'), 2,58 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz); δ (¹³C, CDCI3):δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.80 (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 5.12 and 4, 86 (2m, 2H, OCH ₂ O), 4.60 (dd, 1H, H-1 ', J = 2.4 and 8.7 Hz), 4.20 and 3.44 (2d, 2H, 8aCH ₂ , J _AB = 9.3 Hz), 4.13 ( ^m , ^1H, H-3 '), 3.67 (dd, 1H, H 4', J = 5.1 and 8.7 Hz), 3.38 ( m, 1H, H-5 '), 2.58 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz); δ ( ¹³ ° C, CDCl 3):

204,6 (COH), 174,8 (COOH), 148,3 (C-3), 130,6 (C-2), 98,1 (C-ľ), 94,9 (OCH₂O), 75,4 (C-4¹), 73,9 (C-3'), 70,3 (C-5j, 32,3 (C-2').204.6 (COH), 174.8 (COOH), 148.3 (C-3), 130.6 (C-2), 98.1 (C-1 '), 94.9 (OCH ₂ O), 75.4 (C-4 ^1), 73.9 (C-3 '), 70.3 (C-5J, 32.3 (C-2').

Príklad 13Example 13

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(la,3a0,4β,4ap,7β,7aa, 8ηβ)]-8a-[(2,6-dideoxy-3,4-0-metylén^-D-alopyranosyloxy)metyl ] -4-.formyl-4,4a, 5,6,7,7a , 8,8a-oktahydro-7-metyl-3- (1me tyletyl)-1,4-metán-s- i ndacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (1a, 3a0,4β, 4ap, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2,6-dideoxy-3,4-O-methylene-4-D-allopyranosyloxy) methyl] - 4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methyl-ethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a- (1H) carboxylate

K roztoku zlúčeniny, pripravenej v rámci príkladu 12 (200 mg) v 5 ml metanolu, bol pridaný po kvapkách 0,106 M roztok hydroxidu sodného v 3,98 ml vody. Po 30 minútach bolo rozpúšťadlo za zníženého tlaku odstránené a zvyšok bol rozpustený v 5 ml dioxánu a potom lyofilizovaný.To a solution of the compound prepared in Example 12 (200 mg) in 5 mL of methanol was added dropwise a 0.106 M sodium hydroxide solution in 3.98 mL of water. After 30 minutes the solvent was removed under reduced pressure and the residue was dissolved in 5 ml dioxane and then lyophilized.

Bolo získaných 209 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlú209 mg of the title compound are obtained

159 ceniny .159 valuables.

δ (¹ H, CD3OD): 9,87 (s, 1H, CHO), 6,54 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,10 a 4,82 (2m, 2H, OCH2O), 4,51 (dd, 1H, H-ľ, J=2,4 a 8,7 Hz), 4,12 (m, 1 H, H-3'), 4,03 ε 3,73 (2d, 2H, 8aCH2, JaB⁼⁹>⁹ Hz), ³>⁶¹ (^m· ^1Η· H-4’), ³.³⁵ (^m1H, H-5’), 2,56 (t, 1H, H-1); δ (¹³C, CD3OD): 200,2 (COH), 169,0 (COOH), 142,9 (C-2), 120,6 (C-2), 90,3 (C-ľ), 86,4 (OCH2O), 67,5 (C-4¹), 66,2 (C-3¹), 61,8 (C-5¹).δ ⁽¹ H, CD 3 OD): 9.87 (s, 1H, CHO), 6.54 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5.10 and 4.82 (2m, 2H, OCH 2 O), 4.51 (dd, 1H, H-1 ', J = 2.4 and 8.7 Hz), 4.12 (m, 1H, H-3'), 4.03 ε 3.73 (2d, 2H, 8aCH2, J a ^{= 9} > ⁹ Hz), ³ > ⁶¹ ( ^m · ^1Η · H-4 '), ³ . ³⁵ ( ^m 1H, H-5 &apos;), 2.56 (t, 1H, H-1); δ ( ¹³ C, CD 3 OD): 200.2 (COH), 169.0 (COOH), 142.9 (C-2), 120.6 (C-2), 90.3 (C-1 '), 86 , 4 (OCH 2), 67.5 (C-4 ^1), 66.2 (C-3 ^1), 61.8 (C-5 ^1).

Príklad 14Example 14

a) Príprava kyseliny [lR-(la,3ap,4p,4ap,7p,7aa,8aP)]-8a[ [1S,3R,7R,9R]-2,5,8-trioxa-3,7-dimetyl-cis-bicyklo[4.4.0]-dek-9-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)- karboxylovej aa) Preparation of [1R- (1a, 3a, 4a, 4a, 4a, 7a, 7aa, 8aP)] - 8a [[1S, 3R, 7R, 9R] -2,5,8-trioxa-3,7-dimethyl- cis-bicyclo [4.4.0] dec-9-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoktahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) - 1,4-methane-s-indacene-3- (1H) -carboxylic acid a

b) kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4a0,7β,7aa,8ap)]-8a-[[1S,3S,7R, 9R]-2,5,8-trioxa-3,7-dimetyl-cis-bicyklo[4.4.0]-dek- 9-yloxymetyl ]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej(b) [1R- (1α, 3α, 4β, 4α0,7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [[1S, 3S, 7R, 9R] -2,5,8-trioxa-3,7-dimethyl- cis-bicyclo [4.4.0] dec-9-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1, 4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

V Parrovom autokláve bola za prítomnosti 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí trepaných pri tlaku 0,14 MPa vodíka pri teplote miestnosti 120 mg medziproduktu 14, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla za zníženého tlaku bola získaná látka sirupovitej konzistencie, ktorá bola ďalej spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi acetón-hexán (1:10), (1:7) a (1:5) ako elučného činidla.In a Parr autoclave, in the presence of 50 mg of 10% palladium on charcoal, 120 mg of intermediate 14, prepared as described above, in 15 ml of ethyl acetate were shaken under 15 psi of hydrogen at room temperature for 1 hour. After filtering off the catalyst and evaporating the solvent under reduced pressure, a syrup-like material was obtained which was further subjected to flash chromatography on silica gel using acetone-hexane (1:10), (1: 7) and (1: 5) as eluent.

Bolo získaných 35 mg zlúčeniny, označenej a) (Rf = 0,50 (zmes hexán-acetón, 4:1)) a 40 mg zlúčeniny, označenej b) (Rf = 0,40 (zmes hexán-acetón, 4:1).35 mg of the compound labeled a) (Rf = 0.50 (hexane-acetone, 4: 1)) and 40 mg of the compound labeled b) were obtained (Rf = 0.40 (hexane-acetone, 4: 1) .

Obe zmienené zlúčeniny boli získané vo forme bezfarebnej látky olej ovitej konzistencie.Both compounds were obtained in the form of a colorless oil of oil-like consistency.

(a) δ (¹H, CDCI3): 9,80 (s, 1H, CHO), 6,04 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,62 (dd, 1H, H-9’, J=2,1 a 9,9 Hz), 4,20 (m, 2H, 8aCH₂+H-7'), 3,97 (m, 1H, H-ľ), 3,73 (m, 1H, OCHCH3), 3,40 (m, 2H, 8aCH₂+OCH₂), 3,27 (d, 1H, OCH₂, JAB^¹⁰!⁸ Hz), 3,¹⁸ (d^d. ^1Η· H-6', J=3,3 a 10,2 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,6(a) δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.80 (s, 1H, CHO), 6.04 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.62 ( dd, 1H, H-9 ', J = 2.1 and 9.9 Hz), 4.20 (m, 2H, 8aCH ₂ + H-7'), 3.97 (m, 1H, H-1 ') , 3.73 (m, 1H, OCHCH3), 3.40 (m, 2H, 8aCHa ₂ + _OCH2), 3.27 (d, 1 H, OCH _2, J AB? ^{10? 8),} 3, ¹⁸ ( d ^d . ^1Η · H-6 ', J = 3.3 and 10.2 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.6

160 (COH), 174,6 (COOH), 148,3 (C-3), 130_r6 (C-2), 97,9 (C-9'), 73,5 (OCH₂), 73,2 (C-6'), 72,1 (C-ľ), 71,9 (OCHCH3), 65,4 (C-7'), 31,9 (C-10'), 22,7 (OCHCH3).160 (COH), 174.6 (COOH), 148.3 (C-3), _R 130 6 (C-2), 97.9 (C-9 '), 73.5 (OCH _2), 73, 2 (C-6 '), 72.1 (C-1'), 71.9 (OCHCH 3), 65.4 (C-7 '), 31.9 (C-10'), 22.7 (OCHCH 3) .

(b) δ (1 H, CDCI3): 9,79 (s, 1 H, CHO), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,73 (dd, 1H, H-9', J=3,0 a 6,3 Hz), 4,26 (m, 1H, H-ľ), 4,15 (m, 2H, 8aCH₂+H-7'), 3,98 (m, 1H, OCHCH3), 3,79 (dd, 1H, OCH₂ , J=3,1 a 11,4 Hz), 3,41 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 3,35 (m, 1H, OCH₂ , J=3,1 a 6,3 Hz), 3,27 (dd, 1H; H-6', J=5,7 s 11,7 Hz), 2,55 (t, 1H, H-1); δ (¹³C, CDCI3): 204,6 (COH), 174,6 (COOH), 148,3 (C-3), 130,6 (C-2), 99,2 (C-9*), 74,7 (OCHCH3),(b) δ (1H, CDCl3): 9.79 (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.73 (dd, 1H, H-9 ', J = 3.0 and 6.3 Hz), 4.26 (m, 1H, H-1'), 4.15 (m, 2H, 8aCH ₂ + H-7 ') 3.97 (m, 1H, OCHCH 3), 3.79 (dd, 1H, OCH ₂ , J = 3.1 and 11.4 Hz), 3.41 (d, 1H, 8 and CH ₂ , J = 9) 6 Hz), 3.35 (m, 1H, OCH ₂ , J = 3.1 and 6.3 Hz), 3.27 (dd, 1H; H-6 ', J = 5.7 with 11.7 Hz), 2.55 (t, 1H, H-1); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.6 (COH), 174.6 (COOH), 148.3 (C-3), 130.6 (C-2), 99.2 (C-9 *), 74.7 (OCHCH 3),

73,6 (OCH₂), 69,3 (C-6'), 66,3 (C-ľ), 65,4 (C-7'), 31,9 (C-10’), 22,6 (OCHCH3).73.6 (OCH ₂ ), 69.3 (C-6 '), 66.3 (C-1'), 65.4 (C-7 '), 31.9 (C-10'), 22.6 (OCHCH3).

Príklad 15Example 15

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4aP,7β,7aa,8ap)]-8a-[[1S, 7R,9R]-2,5,8-trioxa-3,3,7-trimetyl-cis-bicyklo[4.4.0]-dek9-yl-oxymetyl ] -4 - f ormyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7 metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4αP, 7β, 7αa, 8αp)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] -2,5,8-trioxa-3,3,7-trimethyl-cis -bicyclo [4.4.0] -dec9-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 200 mg medziproduktu 1.5, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, bolo pridaných 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí v prostredí dusíka a vzniknutá reakčná zmes bola trepaná v Pátrovom autokláve za tlaku 0,14 MPa vodíka pri teplote miestnosti po dobu 0,1 hodiny.To a solution of 200 mg of intermediate 1.5 prepared above in 15 ml of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal under nitrogen and the resulting reaction mixture was shaken in a Autoclave at 50 psi of hydrogen at 50 psi hydrogen. at room temperature for 0.1 hour.

Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi acetón-hexán (1:10) a (1:15) ako elučného činidla .After filtering off the catalyst and evaporating the solvent, the residue was flash chromatographed on silica gel using acetone-hexane (1:10) and (1:15) as eluent.

Bolo získaných 140 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej peny.140 mg of the title compound are obtained as a white foam.

δ (¹ H, CDCI3): 9,81 (s, 1H, CHO), 6,03 (dd, 1H, H-2, J=1,5 Hz), 4,62 (dd, 1 H, Hľ, J=2,1 Hz, J=9,6 Hz), 4,35-4,15 (m, 3H, 8aCH₂, H-7' a H-ľ), 3,40 (m, 2H, 8aCH₂ a OCH₂), 3,25-3,15 (m, 2H, H-6'a OCH₂), 2,52 (t, 1H, H-1), 1,33 a 1,13 (2s, 2CH₃); δ (^³C, CDCI3): 204,7 (COH), 174,1 (COOH), 148,3 (C-3),δ ( ¹ H, CDCl 3): 9.81 (s, 1H, CHO), 6.03 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 Hz), 4.62 (dd, 1H, H 1 ', J = 2.1 Hz, J = 9.6 Hz), 4.35-4.15 (m, 3H, 8aCH ₂ , H-7 'and H-1'), 3.40 (m, 2H, 8aCH ₂₎ and OCH ₂ ), 3.25-3.15 (m, 2H, H-6 'and OCH ₂ ), 2.52 (t, 1H, H-1), 1.33 and 1.13 (2s, 2CH) ₃ ); δ (? ³ C, CDCl 3): 204.7 (COH), 174.1 (COOH), 148.3 (C-3),

130,6 (C-2), 98,0 (C-9'), 73,4 (OCH₂), 73,3 (C-6'), 65,1 (C-ľ), 64,7 (C-7), 31,9 (C-10'), 21,1 (2CH₃).130.6 (C-2), 98.0 (C-9 '), 73.4 (OCH ₂ ), 73.3 (C-6'), 65.1 (C-1 '), 64.7 (C-1') C-7), 31.9 (C-10 '), 21.1 (2 CH _3).

161161

Príklad 16Example 16

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3πβ,4β,4ap,7β,7aa,8ap)]-8a[[lS,4S,6R,8R]-2,7-dioxa-4,6-dimetyl-cis-bicyklo[3.4.0]non-8-yl-oxymetyl ] -4-.formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3πβ, 4β, 4β, 4β, 7β, 7aa, 8ap)] - 8α [[1S, 4S, 6R, 8R] -2,7-dioxa-4,6-dimethyl-cis-bicyclo [ 3.4.0] non-8-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4- methano-s-indacene-3a (1H) carboxylic acid

K roztoku 680 mg medziproduktu 20 a), ktorého príprava je opísaná vyššie, v 100 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 200 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola predložená do Parrovho autoklávu, kde bola pri tlaku 0,175 MPa vodíka pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny trepaná. Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla do sucha bol získaný zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou, za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (49:1), ako elučného činidla.To a solution of 680 mg of intermediate 20 a) described above in 100 ml of ethyl acetate was added 200 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere and the resulting reaction mixture was submitted to a Parr autoclave at 0.175. MPa of hydrogen at room temperature for 1 hour with shaking. After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, the residue was purified by flash chromatography using dichloromethane-methanol (49: 1) as eluent.

Bolo získaných 450 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.450 mg of the title compound were obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9.86 (s, 1H, CHO),.6.04 (dd, 1 H, H-2, J=1.5 a 3.6 Hz), 4.57 (dd, 1H, H-8', J=2.4 a 9.3 Hz), 4.40 (d, 1H, 8a-CH2, J=9.6 Hz), 4.08 (m, 2H, H-ľ and CH2-3' (1H)), 3.27 (m, 3H, H-6', CH2-3’ (1H), 8a-CH2 (1 H)), 2.47 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 1.02 (d, 3H, 4'-CH3, J=6.6 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204.7 (CHO), 173.8 (COOH), 148.4 (C-3), 130.5 (C-2), 98.5 (C-8‘), 75.2 (C-ľ), 74.3 (8a-CH2), 73.3 (C-3j, 71.9 (C-6'), 51.2 (C-5j, 36.0 (C-4’), 32.9 (C-9‘), 19.4 (4'CH₃).δ ( ¹ H, CDCl 3): 9.86 (s, 1H, CHO), 6.04 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.57 (dd, 1H, H-8 ', J = 7 H); 2.4 and 9.3 Hz), 4.40 (d, 1H, 8a-CH 2, J = 9.6 Hz), 4.08 (m, 2H, H-1 'and CH 2 -3' (1H)), 3.27 (m, 3H, H-6) ', CH2-3' (1 H), 8a-CH 2 (1 H)), 2.47 (t, 1 H, H-1, J = 3.9 Hz), 1.02 (d, 3H, 4'-CH 3, J = 6.6 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.7 (CHO), 173.8 (COOH), 148.4 (C-3), 130.5 (C-2), 98.5 (C-8 '), 75.2 (C-1'), 74.3 (8a) -CH 2), 73.3 (C-3 ', 71.9 (C-6'), 51.2 (C-5 ', 36.0 (C-4'), 32.9 (C-9 '), 19.4 (4'CH ₃ ).

Príklad 17Example 17

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(Ια,3aβ,4β,4aβ,7β,7aa, 8aβ)]-8a-[[lS,4S,6R,8R]-2,7-dioxa-4,6-dimetyl-cis-bicyklo[3,4.0]-non-8-yl-oxymetyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahydro-7-metyl-3 -(l-me tyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)- karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (Ια, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [[1S, 4S, 6R, 8R] -2,7-dioxa-4,6-dimethyl-cis -bicyclo [3.4.0] non-8-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoctahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) - 1,4-methane-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 450 mg zlúčeniny, pripravenej v rámci vyššie opísaného príkladu 16, v 100 ml metanolu, bol pridaný poTo a solution of 450 mg of the compound prepared as described in Example 16 above in 100 mL of methanol was added po

162 kvapkách 0,099 M vodný roztok hydroxidu sodného (9,5 ml). Rozpúšťadlo bolo za zníženého tlaku odstránené a zvyšok bol rozpustený v 80 ml vody a potom bol lyofilizovaný.162 drops of a 0.099 M aqueous sodium hydroxide solution (9.5 mL). The solvent was removed under reduced pressure and the residue was dissolved in 80 ml of water and then lyophilized.

Bolo získaných 470 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .470 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CD3OD): 9,86 (s, 1 H, CHO), 5,94 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3_r6 Hz),δ ⁽¹ H, CD 3 OD): 9.86 (s, 1H, CHO), 5.94 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3 _R 6),

4,43 (dd, 1H, H-8', J=2,1 a 9,3 Hz), 4,13-4,02 (m, 3H, 8a-CH₂ (1H), H-ľ, CH₂-3' (1H)), 3,74 (d, 1H, 8a-CH₂, J=9,9 Hz), 3,34-3,23 (m, 2H, CH₂-3' (1H), H-6'), 2,56 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,34 (m, 1H, H-4') 0,99 (d, 3H, 4'-CH₃, J=6,9 Hz); δ (^C, CD3OD): 209,7 (CHO), 178,4 (COO-Na⁺), 152,4 (C-3), 130,1 (C2), 100,1 (C-8'), 77,2 (C-ľ), 77,0 (C-3'), 75,3 (8a-CH₂), 73,0 (C-6j, 52,8 (C-5j, φ 37,2 (C-4'), 34,5 (C-9'), 19,6 (4'-CH₃).4.43 (dd, 1 H, H-8 ', J = 2.1 and 9.3 Hz), 4.13-4.02 (m, 3H, _8a-CH2 (1H), H-CH ₂ -3 '(1 H), 3.74 (d, 1 H, 8a-CH ₂ , J = 9.9 Hz), 3.34-3.23 (m, 2H, CH ₃ -3' (1 H) H-6 '), 2.56 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.34 (m, 1H, H-4') 0.99 (d, 3H, 4 ') -CH ₃ , J = 6.9 Hz); δ (C C, CD 3 OD): 209.7 (CHO), 178.4 (COO-Na ⁺ ), 152.4 (C-3), 130.1 (C2), 100.1 (C-8 ') 77.2 (C-1 '), 77.0 (C-3'), 75.3 (8a-CH ₂ ), 73.0 (C-6j, 52.8 (C-5j, φ 37.2) (C-4 '), 34.5 (C-9'), 19.6 (4'-CH ₃ ).

Príklad 18Example 18

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[[1S, 4R,6R,8R]-2,7-dioxa-4,6 -dimetyl-cis-bicyklo[3.4.0]-non-8-yloxymetyl]- 4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 4R, 6R, 8R] -2,7-dioxa-4,6-dimethyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-8-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3 (1-methylethyl) -1,4- methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 180 mg medziproduktu 20b), ktorého príprava je opísaná vyššie, v 60 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 100 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí. Vzniknutá suspenzia bola po predložení do Parrovho autoklávu trepaná za tlaku 0,175 MPa vodíka pri teplote miestnosti po dobu 2 hodín. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha.To a solution of 180 mg of intermediate 20b) described above in 60 ml of ethyl acetate was added 100 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere. The resulting slurry was shaken at 50 psi hydrogen at room temperature for 2 hours after being introduced into a Parr autoclave. After filtering off the catalyst, the solvent was evaporated to dryness.

Zvyšok bol 2 x spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (49:1) a potom ešte zmesi hexán-acetón (4:1) ako elučných činidiel.The residue was flash chromatographed twice on silica gel using dichloromethane-methanol (49: 1) followed by hexane-acetone (4: 1) as eluents.

Bolo získaných. 90 mg žiadanej , v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej peny.It was obtained. 90 mg of the title compound as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 11,5 (bs, 1H, COOH), 9,87 (s, 1H, CHO), 6,04 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,53 (dd, 1 H, H-3', J=2,4 a 9,9 Hz), 4,45 a 3,26 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 4,19 (q, 1H, H-ľ, J=3,3 Hz), 3,96 (t, 1H, CH₂-3', J=8,4 Hz), 3,58 (m, 1H, H-6’), 3,43 (dd, 1H, CH₂-3', J=10,2 Hz), 2,55 (m, 1H, H-4'); δ (13c, CDCI3): 204,6 (CHO), 174,4 (COOH), 148,3 (C-3), 130,6 (C-2), 97,9 (Cδ ⁽¹ H, CDCl 3): 11.5 (bs, 1H, COOH), 9.87 (s, 1H, CHO), 6.04 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3, 3 Hz), 4.53 (dd, 1 H, H-3 ', J = 2.4, 9.9 Hz), 4.45 and 3.26 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9 , 3 Hz), 4.19 (q, 1 H, H ', J = 3.3 Hz), 3.96 (t, 1H, _CH2 -3', J = 8.4 Hz), 3.58 (m, 1 H, H-6 '), 3.43 (dd, 1H, _CH2 -3', J = 10.2 Hz), 2.55 (m, 1 H, H-4 '); δ (13c, CDCl 3): 204.6 (CHO), 174.4 (COOH), 148.3 (C-3), 130.6 (C-2), 97.9 (C)

163163

8'), 78,7 (C-Γ), 73,3 (C-3'), 72,9 (8a-CH₂), 68,7 (C-6'), 46,1 (C-5‘), 36,6 (C-4¹),8 '), 78.7 (C-6), 73.3 (C-3'), 72.9 (8a-CH ₂ ), 68.7 (C-6 '), 46.1 (C-5) '), 36.6 (C-4 ^1),

34,02 (C-9¹), 21,8 (6'-CH₃), 13,6 (4'-CH₃).34.02 ^(C-1 9), 21.8 _(6'-CH3), 13.6 (4'-CH _3).

Príklad 19Example 19

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ββ,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[[1S, 4R,7R,9R]-2,8-dioxa-4,9-dimetyl-cis-bicyklo[3.4.0]-ηοη-7-yloxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3 (1-rnetyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejAcid preparation [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ββ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4,9-dimethyl-cis-bicyclo [3.4.0] -ηo-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4- methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 150 mg medziproduktu 23a), ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola trepaná v Parrovom autokláve pri tlaku 0,14 MPa vodíka a teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha.To a solution of 150 mg of intermediate 23a) described above in 15 ml of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere, and the resulting mixture was shaken in a Parr autoclave at 50 psi hydrogen. and room temperature for 1 hour. After filtering off the catalyst, the solvent was evaporated to dryness.

Zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zrnesi acetón-hexán (1:3) ako elučného činidla.The residue was purified by flash chromatography using a 1: 3 mixture of acetone-hexane as eluent.

Bolo získaných 100 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme tuhej kryštalickej látky.100 mg of the title compound was obtained as a crystalline solid.

δ (¹H, CDCI₃): 9,86 (s, 1 H, CHO), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,63 (dd, 1H, H-7', J=3_t3 a 6,6 Hz), 4,37 (d, 1H, 8aCH₂, Jab=9,6 Hz), 3,98 a 3,67 (2dd, 2H, H-3', J=6,6 a 8,1 Hz), 3,40-3,20 (m, 3H, 8aCH₂ , H-9' a Hľ), 2,46 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 1,04 (d, 3H, CH3CH).δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.86 (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.63 (dd , 1 H, H-7 ', J = 3 _t 3 and 6.6 Hz), 4.37 (d, 1 H, 8aCHa _2, J AB = 9.6 Hz), 3.98 and 3.67 (2 dd, 2H H-3 ', J = 6.6 and 8.1 Hz), 3.40-3.20 (m, 3H, 8aCH ₂ , H-9' and H '), 2.46 (t, 1H, H -1, J = 3.9 Hz), 1.04 (d, 3H, CH 3 CH).

Príklad 20Example 20

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β,7aa, 8ηβ)]-8a-[[lS,4R,7R,9R]-2,8-dioxa-4,9-dimetyl-cis-bicyklo[3.4.0]- non-7-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahyd.ro-7-metyl-3- (1-rnetyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4,9-dimethyl-cis -bicyclo [3.4.0] non-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoctahydro-7-methyl-3- (1-methyl-ethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 100 mg zlúčeniny, pripravenej v rámci príkladu 19, opísaného vyššie, v 5 ml metanolu, bol pridaný po kvapkách 0,106 M vodný roztok hydroxidu sodného (1,88 ml).To a solution of 100 mg of the compound prepared in Example 19 described above in 5 mL of methanol was added dropwise 0.106 M aqueous sodium hydroxide solution (1.88 mL).

164164

Po 30 minútach bolo rozpúšťadlo za zníženého tlaku odparené a zvyšok bol rozpustený v 3 ml vody a potom lyofilizovaný.After 30 minutes, the solvent was evaporated under reduced pressure and the residue was dissolved in 3 ml of water and then lyophilized.

Bolo získaných 104 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .104 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CD₃OD): 9,88 (s, 1H, CHO), 5,93 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,49 (m, 1H, H-7'), 4,02 (m, 2H, H-3' a 8a CH₂), 3,72 (d, 1 H, 8aCH₂, J_AB⁼⁹>³ Hz), 2,56 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz); δ (¹³C, CD3OD): 209,7 (CHO), 178,4 (COOH),δ ⁽¹ H, CD ₃ OD): 9.88 (s, 1H, CHO), 5.93 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.49 (m 1 H, H-7 '), 4.02 (m, 2H, H-3' and 8a CH ₂ ), 3.72 (d, 1H, 8aCH ₂ , J _A B ^{= 9} > ³ Hz), 2 56 (t, 1H, H-1, J = 3.6Hz); δ ( ¹³ C, CD 3 OD): 209.7 (CHO), 178.4 (COOH),

152,4 (C-3), 130,1 (C-2), 99,9 (C-7'), 82,1 (C-Γ), 76,5 (8aCH₂), 72,2 (C-9')_t 37,5(0-5'), 15,2 (CH3-CH).152.4 (C-3), 130.1 (C-2), 99.9 (C-7 '), 82.1 (C-6), 76.5 (8aCH ₂ ), 72.2 (C -9 ') _t 37.5 (0-5'), 15.2 (CH 3 -CH).

Príklad 21Example 21

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ap,7β,7aa,8a£)]-8a-[[1S, 4S,7R,9R]-2,8-dioxa-4,9-dimetyl-cis-bicyklo[3.4.0]-ηοη-7-yloxyme tyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4αp, 7β, 7aa, 8α £)] - 8α - [[1S, 4S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4,9-dimethyl-cis- bicyclo [3.4.0] -en-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3 (1-methylethyl) -1, 4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 260 mg medziproduktu 23b), ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, bolo pridaných 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola trepaná v Parrovom autokláve za tlaku 0,14 MPa vodíka pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha a zvyšok bol prečistený preparatívnou chromatografiou na tenkej vrstve za použitia silikagélu a zmesi metanol-dichlórmetán (1:20), ako elučného činidla.To a solution of 260 mg of intermediate (23b) described above in 15 ml of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal and the resulting mixture was shaken in a Parr autoclave at 50 psi hydrogen at room temperature. for 1 hour. After filtering off the catalyst, the solvent was evaporated to dryness and the residue was purified by preparative thin layer chromatography using silica gel and methanol-dichloromethane (1:20) as eluent.

Bolo získaných 185 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme látky olej ovitej konzistencie. Rf = 0,60. δ (¹ H, CDCI3): 9,85 (s, 1 H, CHO), 6,04 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,88 (t, 1H, H-7', 2,7 Hz), 4,27 a 3,28 (2d, 2H, 8aCH2, JAb=⁹,⁹ Hz), 3,85 a 3,73 (2m, 2H, OCH2), 3,60 (m, 1H, H-9'), 3,37 (dd, 1H, H-ľ, J=7,2 a 8,4 Hz), 2,47 (m, 3H, H-5'+CHCH₃+H1); δ (¹³C, CDCI3): 204,4 (CHO), 173,7 (COOH),.148,2 (C-3), 130,5 (C-2), 98,7 (C-7'), 81,2 (C-ľ), 72,8 (8aCH₂+OCH₂), 69,9 (C-9j,185 mg of the title compound are obtained as an oil. Rf = 0.60. δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.85 (s, 1H, CHO), 6.04 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.88 (t , 1 H, H-7 ', 2.7 Hz), 4.27 and 3.28 (2d, 2H, 8aCH2, JAB = ^{9, 9} Hz), 3.85 and 3.73 (2m, 2H, OCH2) 3.60 (m, 1H, H-9 '), 3.37 (dd, 1H, H-1', J = 7.2 and 8.4 Hz), 2.47 (m, 3H, H-5) '+ H1 + C H CH _3); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.4 (CHO), 173.7 (COOH), 148.2 (C-3), 130.5 (C-2), 98.7 (C-7 ') 81.2 (C-1 '), 72.8 (8aCH ₂ + OCH ₂ ), 69.9 (C-9j,

25,4 (C-6'), 12,4 (CH3CH).25.4 (C-6 '), 12.4 (CH 3 CH).

165165

Príklad 22Example 22

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4ap,7β,7aa,8ap)]-8a-[[1S, 7R,9R]-2,8-dioxa-4,4,9-t.rimetyl-cis-bicyklo [3.4.0] - non-7-y 1oxymetyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3(1-metyletyl) -1,4-metán-s-.indacén-3a- (1H) -karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αp)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4,4,9-trimethyl-cis -bicyclo [3.4.0] non-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3 (1-methylethyl) -1 4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 100 mg medziproduktu 24, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 40 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhli a vzniknutá reakčná zmes bola trepaná v Parrovom autokláve pri tlaku 0,175 MPa vodíka, pri teplote miestnosti, po dobu 2 hodín. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha.To a solution of 100 mg of intermediate 24 described above in 40 ml of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere and the resulting reaction mixture was shaken in a Parr autoclave at 50 psi hydrogen at a temperature of room, for 2 hours. After filtering off the catalyst, the solvent was evaporated to dryness.

Zvyšok bol spracovaný 2 x rýchlou chromatografiou za postupného použitia 1,5%-ného metanolu v dichlórmetáne a 15%-ného acetónu v hexáne, ako elučných činidiel.The residue was chromatographed twice using 1.5% methanol in dichloromethane and 15% acetone in hexane sequentially as eluents.

Bolo získaných 40 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej peny.40 mg of the title compound are obtained as a white foam.

δ (¹ H, CDCI₃): 9,85.(s, 1 H, CHO), 6,05 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,84 (t, 1H, H-7’, J=3 Hz), 4,23 a 3,29 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,6 Hz), 3,81 (t, 1H, H-ľ,δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.85. (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.84 (t, 1 H, H-7 ', J = 3 Hz), 4.23 and 3.29 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.6 Hz), 3.81 (t, 1 H, H -L

J=8,7 Hz), 3,52 (dq, 1H, H-9', J=9,3 a 6,3 Hz), 3,50 a 3,42 (2d, 2H, CH₂-3', J=8,4 Hz), 2,48 (t, 1H, H-1, J=4,2 Hz), 1,09 a 0,98 (2s, 6H, 4'-CH₃); δ (¹³C, CDCI3): 204,5 (CHO), 174,0 (COOH), 148,2 (C-3), 130,5 (C-2), 98,7 (C-7j, φ 81,01 (C-ľ), 78,8 (C-3¹), 72,7 (8a-CH2), 70,2 (C-9'), 41,3 (C-4j, 40,4 (C-5j,J = 8.7 Hz), 3.52 (dq, 1H, H-9 ', J = 9.3 and 6.3 Hz), 3.50 and 3.42 (2d, 2H, _CH2 -3' , J = 8.4 Hz), 2.48 (t, 1 H, H-1, J = 4.2 Hz), 1.09 and 0.98 (2s, 6H, _4'-CH3); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.5 (CHO), 174.0 (COOH), 148.2 (C-3), 130.5 (C-2), 98.7 (C-7j, φ 81) , 01 (C-I '), 78.8 (C-3 ^1), 72.7 (8a-CH2), 70.2 (C-9'), 41.3 (C-4B, 40.4 (C -5j.

27,3 (4'-CH₃), 26,5 (C-6'), 22,8 (4’-CH₃).27.3 (4'-CH ₃ ), 26.5 (C-6 '), 22.8 (4'-CH ₃ ).

Príklad 23Example 23

Prí prava kyseliny [ÍR- (Ια , 3aβ,4β,4ηβ,7β,7aa,83β)]-8a-[(6deoxy-3,4-0-izopropylidén^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4f ormy 1 -4,4a,5,6,7,7a,8,8a - oktahyd.ro - 7 - metyl - 3 - (1 - metyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (Ια, 3αβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 83β)] - 8α - [(6-deoxy-3,4-O-isopropylidene-4-D-allopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4 4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 125 mg medziproduktu 27, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 25 ml metanolu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 100 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutáTo a solution of 125 mg of intermediate 27 described above in 25 ml of methanol was added 100 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere and the resulting

166166

reakčná zmes bola trepaná v Parrovom autokláve pri tlaku 0,105 MPa vodíka a pri teplote miestnosti po dobu 1,5 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo pri teplote 0 °C pridaných k filtrátu 0,5 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej . Vzniknutá zmes bola miešaná po dobu 1 hodiny a potom bola zneutralizovaná 10%-ným roztokom hydrogénuhličitanu sodného.the reaction mixture was shaken in a Parr autoclave at 50 psi hydrogen at room temperature for 1.5 hours. After the catalyst was filtered off, 0.5 ml of a 1 M hydrochloric acid solution was added to the filtrate at 0 ° C. The resulting mixture was stirred for 1 hour and then neutralized with 10% sodium bicarbonate solution.

Po odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok vo forme látky olej ovitej konzistencie, prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1) a potom zmesi dichlórmetán-metanol (20:1) ako elučných činidiel.After evaporation of the solvent to dryness, the residue as an oil was purified by flash chromatography using hexane-ethyl acetate (4: 1) and then dichloromethane-methanol (20: 1) as eluents.

Bolo získaných 62 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .62 mg of the title compound are obtained.

δ (¹ H, CDCI3): 9.73 (s, 1 H, CHO), 6.10 (dd, 1 H. H-2, J=1.2 and 3.3 Hz), 4.51 (t, 1H, H-2', J=4.5 Hz), 4.48 (d, 1H, H-ľ, J=7.5 Hz), 3.65 and 4.07 (2d, 2H, 8aCH2, J=9.3 Hz), 3.78 (dd, 1H, H-4', J=9 and 5.1 Hz), 3.69 (dd, 1H, H-3', J=7.5 and 5.1 Hz), 3.50 (m, 1 H, H-5', J=6 and 9 Hz), 2.59 (t, 1H, H-1, J=3.9 Hz), 2.32 (m, 1H, CHMe2); δ (¹³C, CDCI3): 204.6 (CHO), 176.1 (CO2H), 148.2 (C-3), 130.8 (C-2),δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 6.10 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4:51 (t, 1 H, H-2 ', J 4.5 Hz), 4.48 (d, 1H, H-1 ', J = 7.5 Hz), 3.65 and 4.07 (2d, 2H, 8aCH 2, J = 9.3 Hz), 3.78 (dd, 1H, H-4', J = 9) and 5.1 Hz), 3.69 (dd, 1H, H-3 &apos;, J = 7.5 and 5.1 Hz), 3.50 (m, 1H, H-5 &apos;, J = 6 and 9 Hz), 2.59 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.32 (m, 1H, CHMe 2); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.6 (CHO), 176.1 (CO 2 H), 148.2 (C-3), 130.8 (C-2),

110.4 ( kvartérny C izopropylidén) 100.9 (C-ľ), 78;34 (C-4‘), 75.1 (C-2), 74.7 (8aCH₂), 72.5 (C-4a), 71.7 (C-3'), 69.3 (C-5¹), 65.6 (C-8a), 58.9 (C-4), 46.3 (C1).110.4 (quaternary C isopropylidene) 100.9 (C-1 '), 78; 34 (C-4'), 75.1 (C-2), 74.7 (8aCH ₂ ), 72.5 (C-4a), 71.7 (C-3 ') , 69.3 (C-5 ^1), 65.6 (C-8), 58.9 (C-4), 46.3 (C1).

Príklad 24Example 24

Príprava kyseliny [ÍR- (Ια,3ap,4β,4ηβ,7β,7aa,8ap)]-8a- [ (2deoxy-3,4-0-izopropylidén-6-0-metyl^-D-alopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1metyl-etyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8αp)] - 8α - [(2-Deoxy-3,4-O-isopropylidene-6-O-methyl-4-D-allopyranosyloxy) methyl] - 4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methyl-ethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1 H) - carboxylic acid

Roztok 50 mg medziproduktu 30, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 ml tetrahydrofuránu, bol pri teplote miestnosti ponechaný reagovať s 1 M roztokom tetrabutylamóniumfluoridu v tetrahydrofuráne (200 μΐ). Po 24 hodinách bola reakčná zmes zahustená do sucha a zvyšná žlto sfarbená látka olej ovi tej konzistencie bolti prečistená .rýchlou chromatografiou, za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (15:1) ako elučného činidla. Bolo získaných 18 mg žiadanej, v nadpiseA solution of 50 mg of intermediate 30, as described above, in 5 ml of tetrahydrofuran was allowed to react at room temperature with a 1 M solution of tetrabutylammonium fluoride in tetrahydrofuran (200 μΐ). After 24 hours, the reaction mixture was concentrated to dryness and the remaining yellow oil was purified by flash chromatography eluting with dichloromethane-methanol (15: 1). 18 mg of the title compound were obtained

167 uvedenej zlúčeniny.167 of the title compound.

δ (¹H, CDCI3): 9.80 (s, 1 H, CHO), 5.98 (dd, 1H, H-2, J=1.2 a 3.3 Hz), 4.64 (dd, 1H, H-ľ, J=2.7 a 8.1 Hz), 4.42 (m, 1H, H-3’), 3.68 a 4.01 (2d, 2H, 8aCH2, J=9 Hz), 3.90 (m, 1 H, H-4'), 3.45-3.65 (m, 3H, H-5' a 2H-6'), 3.22 (s, 3H, 6'-OCH3), 2.60 (m, 1H, H-ľ), 1.34 a 1.35 (2s, 6H, metyiové skupiny izopropylidénu)· δ (¹³C, CDCl3): 206.3 (CHO), 175.7 (CO₂H), 149.7 (C-3), 129.7 (C-2), 108.9 ( kvarxérny C izopropylidénu), 98.2 (C-ľ), 74.8 (C-3a), 74.8 (C-4), 74.4 (8aCH₂), 72.6 (C-3'), 71.3 (C-5‘), 65.1 (C-8a), 61.1 (C-6'), 58.4 (C-4), 48.4 (6'-OMe), 46.1 (C-1), 32.8 (C-2').δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.80 (s, 1H, CHO), 5.98 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.64 (dd, 1 H, H ', J = 2.7 and 8.1 Hz), 4.42 (m, 1H, H-3 &apos;), 3.68 and 4.01 (2d, 2H, 8aCH2, J = 9 Hz), 3.90 (m, 1H, H-4 &apos;), 3.45-3.65 (m , 3H, H-5 'and 2H-6'), 3.22 (s, 3H, 6'-OCH 3), 2.60 (m, 1H, H-1 '), 1.34 and 1.35 (2s, 6H, isopropylidene methyl groups) · δ ( ¹³ C, CDCl 3): 206.3 (CHO), 175.7 (CO ₂ H), 149.7 (C-3), 129.7 (C-2), 108.9 (quaternary C isopropylidene), 98.2 (C-1 '), 74.8 ( C-3), 74.8 (C-4), 74.4 (8aCHa _2), 72.6 (C-3 '), 71.3 (C-5'), 65.1 (C-8), 61.1 (C-6 '), 58.4 (C-4), 48.4 (6'-OMe), 46.1 (C-1), 32.8 (C-2 &apos;).

Príklad 25Example 25

Príprava kyseliny [ÍR-(la,3a£,4β,4ap,7β,7aa,8aP)]-8a-[[1S, 4R,7R,9R]- 2,8-dioxa-4-etyl-9-metyl-cis-bicyklo[3.4.0]-non7-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl- 3- (1-metyletyl) -1,4-metán-s-.indacén-3a- (1H) -karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3α, 4β, 4β, 4β, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4-ethyl-9-methyl- cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1, 4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 200 mg medziproduktu 37, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 40 ml etylacetátu, bolo pridaných 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí v atmosfére dusíka a vzniknutá reakčná zmes bola predložená do Pátrovho autoklávu, kde bola trepaná pri tlaku 0,21 MPa vodíka a pri teplote miestnosti po dobu 2 hodín. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha a získaný zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (98:2), ako elučného činidla.To a solution of 200 mg of intermediate 37 prepared above in 40 ml of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere and the resulting reaction mixture was submitted to a Stath autoclave where it was shaken at 0, 21 MPa of hydrogen at room temperature for 2 hours. After filtering off the catalyst, the solvent was evaporated to dryness and the residue was subjected to flash chromatography on silica gel using dichloromethane-methanol (98: 2) as eluent.

Bolo získaných 125 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .125 mg of the title compound are obtained.

δ (1h, CDCI₃): 9,86 (s, 1H, CHO), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,66 (dd, 1H, H-7', J=3,0 a 6,0 Hz), 4,32 a 3,29 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,6 Hz), 4,02 (dd, 1 H, ČH₂-3',(1H), J=7,2 a 8,4 Hz), 3,67 (dd, 1H, H-ľ, J=7,8 a 9,3 Hz), 3,41-3,22 (m, 2H, H-9' a CH₂-3' (1 H)), 2,48 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz), 0,92 (t, 3H, CH5CH2, J=7,5 Hz); δ (¹³C, CDCI₃): 204,5 (CHO), 174,2 (COOH), 148,3 (C-3), 130,5 (C-2), 98,5 (C-7‘), 80,3 (C-ľ), 73,0 a 73,0 (8a-C a C-3j, 70,9 \(C-9’).δ (1h, CDCl ₃ ): 9.86 (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 4.66 (dd, 1H) , H-7 ', J = 3.0 and 6.0 Hz), 4.32 and 3.29 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.6 Hz), 4.02 (dd, 1 H, CH ₂ -3 ', (1H), J = 7.2 and 8.4 Hz), 3.67 (dd, 1H, H-1', J = 7.8 and 9.3 Hz), 3, 41 to 3.22 (m, 2H, H-9 'and _CH2 -3' (1H)), 2.48 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 0.92 (t, 3H, CH 5 CH 2, J = 7.5 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl ₃ ): 204.5 (CHO), 174.2 (COOH), 148.3 (C-3), 130.5 (C-2), 98.5 (C-7 ') , 80.3 (C-1 '), 73.0 and 73.0 (8a-C and C-3j, 70.9' (C-9 ')).

168168

Príklad 26Example 26

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(la,3aP,4β,4ap,7β,7aa, 8ηβ)]- 8a-[[1S,4R,7R,9R]-2,8-dioxa-4-etyl-9-metyl-cisbicyklo[ 3.4.0] -non-7-yl-oxynietyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3- (l-metyletyl) -1,4-metán-s-.indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (1a, 3aP, 4β, 4ap, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4-ethyl-9-methyl -cisbicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxyniethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) 1,4-methano-.indacén3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 88 mg zlúčeniny, pripravenej a opísanej v .rámci príkladu 25, v 10 ml metanolu, bolo po kvapkách pridaných 1,8 ml 0,099 M vodného roztoku hydroxidu sodného. Po odstránení rozpúšťadla za zníženého tlaku, bol získaný zvyšok rozpustený v 50 ml vody a lyofilizovaný.To a solution of 88 mg of the compound prepared and described in Example 25 in 10 ml of methanol was added dropwise 1.8 ml of a 0.099 M aqueous sodium hydroxide solution. After removal of the solvent under reduced pressure, the obtained residue was dissolved in 50 ml of water and lyophilized.

Bolo získaných 92 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .92 mg of the title compound are obtained.

δ (1h, DMSO-dg): 9,77 (s, 1H, CHO), 5,78 (m, 1H, H-2), 4,40 (brdd, 1 H, H-7'), 3,92 (m, 1H, H-3'), 3,87 (d, 1H, 8a-CH₂ (1 H), J=9,6 Hz), 3,50 (m, 2H, 8a-CH₂ (1H) a H-ľ), 3,38-3,21 (m, 2H, H-3' a H-9').δ (1h, DMSO-d6): 9.77 (s, 1H, CHO), 5.78 (m, 1H, H-2), 4.40 (brdd, 1H, H-7 '), 3, 92 (m, 1 H, H-3 '), 3.87 (d, 1 H, _8a-CH2 (1H), J = 9.6 Hz), 3.50 (m, 2H, _8a-CH2 ( 1H) and H-1 ', 3.38-3.21 (m, 2H, H-3' and H-9 ').

Príklad 27Example 27

Príprava kyseliny [ÍR-(la,3aβ,4β,4aβ,7β,7aa,8aβ)]-8a-[[1S, 4S,7R,9R]- 2,8-dioxa-4-etyl-9-metyl-cis-bicyklo[3.4.0]-non-7yl-oxy metyl ] - 4 - f or myl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7 - metyl3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejAcid preparation [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [[1S, 4S, 7R, 9R] - 2,8-dioxa-4-ethyl-9-methyl-cis -bicyclo [3.4.0] non-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) ) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 420 mg medziproduktu 38, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 80 ml etylacetátu, bolo pridaných 100 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí v atmosfére dusíka a vzniknutá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho autoklávu trepaná za tlaku 0,21 MPa vodíka a pri teplote miestnosti po dobu 1,5 hodiny.To a solution of 420 mg of intermediate 38 prepared above in 80 ml of ethyl acetate was added 100 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere, and the resulting mixture was shaken at 50 psi after being introduced into a Parr autoclave. hydrogen and at room temperature for 1.5 hours.

Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla do sucha bol získaný zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (98:2) ako elučného činidla.After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, the residue was purified by flash chromatography on silica gel using dichloromethane-methanol (98: 2) as eluent.

Bolo získaných 280 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlú280 mg of the title compound are obtained

169 ceniny .169 valuables.

δ (¹H, CDCI3): 9,86 (s, 1 H. CHO), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,89 (m, 1H, H-7'), 4,29 a 3,29 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,9 Hz), 3,90 (dd, 1H, H-3', J=7,5 a 8,7 Hz), 3,75 (m, 1 H, H-ľ), 3,64 (m, 1 H, H-9'), 3,43 (t, 1H, H-3', J=8,7 Hz), 2,46 (t, 1 H, H-1, J=3,6 Hz), 0,93 (t, 3H, CH3-CH₂, J=7,2 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,4 (CHO), 173,7 (COOH), 148,2 (C-3), 130,5 (C-2), 98,8 (C-7'), 81,3 (C-ľ), 72,8 a 70,9 (8a-C a C-3 j, 69,8 (C-9').δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.86 (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.89 (m, 1 H, H-7 '), 4.29 and 3.29 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.9 Hz), 3.90 (dd, 1 H, H-3', J = 7, 5 and 8.7 Hz), 3.75 (m, 1H, H-1 '), 3.64 (m, 1H, H-9'), 3.43 (t, 1H, H-3 ', J = 8.7 Hz), 2.46 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz), 0.93 (t, 3H, CH 3 -CH ₂ , J = 7.2 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.4 (CHO), 173.7 (COOH), 148.2 (C-3), 130.5 (C-2), 98.8 (C-7 '), 81.3 (C-1 '), 72.8 and 70.9 (8a-C and C-3', 69.8 (C-9 ').

Príklad 28Example 28

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ap,7β , 7aa, 8ap)]- 8a-[[1S,4S,7R,9R]-2,8-dioxa-4-etyl-9-metyl-cisbicyklo[ 3.4.0] -non-7-yl-oxymetyl ] -4-f o.rmyl-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of the sodium salt of [1R- (1a, 3ap, 4β, 4ap, 7β, 7aa, 8ap)] - 8a - [[1S, 4S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4-ethyl-9-methyl -cisbicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1) methylethyl) -1,4-methano-s-indacén3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 262 mg zlúčeniny, pripravenej a opísanej v príklade 27, uvedenom vyššie, v 20 ml metanolu, bol pridaný po kvapkách 0,099 M vodný roztok hydroxidu sodného (5,3 ml) . Po odstránení rozpúšťadla za zníženého tlaku bol získaný zvyšok rozpustený v 100 ml vody a potom bol lyofilizovanýBolo získaných 272 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .To a solution of 262 mg of the compound prepared and described in Example 27 above, in 20 mL of methanol, was added dropwise a 0.099 M aqueous sodium hydroxide solution (5.3 mL). After removal of the solvent under reduced pressure, the obtained residue was dissolved in 100 ml of water and then lyophilized to obtain 272 mg of the title compound.

φ δ (¹H, DMSO-dg): 9,77 (s, 1 H, CHO), 5,79 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,57 (m, 1 H, H-7 j, 3,83 a 3,45 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,6 Hz), 3,76 a 3,33 (2m, 2H, CH₂-3j, 3,52 (m, 2H, H-ľ a H-9j.φ δ ⁽¹ H, DMSO-d?): 9.77 (s, 1H, CHO), 5.79 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.57 (m, 1 H, H-7 j, 3.83 and 3.45 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.6 Hz), 3.76 and 3.33 (2m, 2H, _CH2 -3j, 3.52 (m, 2H, H-1 'and H-9j).

Príklad 29Example 29

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4αβ,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[[1S, 4R,7R,9R]-2,8-dioxa-4-(metyletyl)-9-mety1-cis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4αβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4- (methylethyl) -9-methyl cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoktahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 280 mg medziproduktu 39, ktorého príprava jeTo a solution of 280 mg of intermediate 39, the preparation of which is

170170

opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola po preložení do Pátrovho autoklávu trepaná pri tlaku 0,14 MPa a pri teplote miestnosti počas 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení do sucha bol získaný zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexány-etylacetát (objem/objem, 10:1 a 5:1), ako elučného činidla.as described above, in 15 ml of ethyl acetate, 50 mg of 10% palladium on charcoal was added under a nitrogen atmosphere, and the resulting mixture was shaken at 0.14 MPa at room temperature for 1 hour after transfer to a PTC autoclave. After filtration of the catalyst and evaporation to dryness, the residue was purified by flash chromatography on silica gel using hexanes-ethyl acetate (v / v, 10: 1 and 5: 1) as eluent.

Bolo získaných 180 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme látky olej ovitej konzistencie. Výťažok 84 % δ (¹H, CDCI3): 12-11 (b, 1H, COOH), 9,88 (s, 1 H, CHO), 6)053 (dd, 1 H, H2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,77 (m, 1H, H7'), 4,37 (d, 1H, 8aCH2, J=9,3 Hz), 3,95 (dd, 1 H, H3', J=7,2 a 8,7 Hz), 3,67 (dd, 1 H, ΗΓ, J=8,7 a 9 Hz), 3,5-3,36 (m, 2H, H3'+H9')_t 3,23 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,3 Hz), 2,43 (t, 1H, H1, J=3,9 Hz).180 mg of the title compound were obtained as an oil. Yield 84% δ ⁽¹ H, CDCl3): 12-11 (b, 1H, COOH), 9.88 (s, 1H, CHO), 6) 053 (dd, 1H, H2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.77 (m, 1H, H7 '), 4.37 (d, 1H, 8aCH2, J = 9.3 Hz), 3.95 (dd, 1H, H3', J = 7.2 and 8.7 Hz), 3.67 (dd, 1H, J, J = 8.7 and 9 Hz), 3.5-3.36 (m, 2H, H 3 '+ H 9') _, 3.23 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.3 Hz), 2.43 (t, 1H, H1, J = 3.9 Hz).

Príklad 30Example 30

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4a£,7β,7aa, 8ηβ)]-8a-[[lS,4R,7R,9R]-2,8-dioxa-4-(1-metylety1)- 9-metylcis-bicyklo-[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6, 7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-sindacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4α £, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4- (1-methylethyls) 9-Methyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6, 7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl 3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacen-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku zlúčeniny, pripravenej a opísanej v rámci príkladu 29 (170 mg), v 15 ml metanolu, bolo pridaných 3,45 ml 0,0956 M roztoku hydroxidu sodného. Po jednohodinovom miešaní vzniknutej reakčnej zmesi bolo rozpúšťadlo odparené do sucha a získaná tuhá látka bola rozpustená v 3 ml vody a potom bola do sucha lyofilizovaná. Údaje o množstve nie sú uvedené.To a solution of the compound prepared and described in Example 29 (170 mg) in 15 mL of methanol was added 3.45 mL of 0.0956 M sodium hydroxide solution. After stirring the resulting reaction mixture for 1 hour, the solvent was evaporated to dryness and the solid obtained was dissolved in 3 ml of water and then freeze-dried. Quantity data not shown.

δ (¹H, DMSO-dg): 9,78 (s, 1H, CHO), 5,80 (dd, 1H, H2, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,46 (dd, 1H, H7', J=2,7 a 5,1 Hz), 3,9-3,8 (m, 2H, H3'+8aCH2), 3,54 (dd, 1H, Hľ, J=8,1 s 9 Hz), 3,47 (d, 1H, 8aCH2, J=9,3 Hz); δ (¹³C, DMSO^6): 206,4 (CHO), 174,3 (C00-). 151,3 (C3), 127,6 (C2), 97,1 (C7¹), 80,7 (ď).δ ⁽¹ H, DMSO-d?): 9.78 (s, 1H, CHO), 5.80 (dd, 1H, H2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.46 (dd, 1 H H7 ', J = 2.7 and 5.1 Hz), 3.9-3.8 (m, 2H, H3' + 8aCH2), 3.54 (dd, 1H, H1 ', J = 8.1 s) 9 Hz), 3.47 (d, 1H, 8aCH 2, J = 9.3 Hz); δ ( ¹³ C, DMSO-d 6): 206.4 (CHO), 174.3 (COO-). 151.3 (C3), 127.6 (C-2), 97.1 (C 7 ^1), 80.7 (d).

171171

Príklad 31Example 31

Príprava [lR-(la,3aP,4p,4ap,7p,7aa,8ap)]-8a-[lS,4R,7R,9R]2,8-dioxa-4-(1-metylety1)-9-metyl-cis-bicyklo-[3.4.0]-non7-yl-oxy-metyl]- 4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej kyselinyPreparation of [1R- (1α, 3αP, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αp)] - 8α- [1S, 4R, 7R, 9R] 2,8-dioxa-4- (1-methylethyl) -9-methyl- cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 280 mg medziproduktu 40, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho autoklávu trepaná pri tlaku 0,14 MPa, pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla bol získaný zbytok spracovaný pomocou rýchlej chromatografie na silikagéli za použitia zmesi hexány-acetón (objem/objem, 10:1 a 5:1), ako elučného činidla.To a solution of Intermediate 40 (280 mg) described above in 15 mL of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere, and the resulting mixture was shaken at 50 psi on a Parr autoclave. , at room temperature for 1 hour. After filtering off the catalyst and evaporating the solvent, the residue was flash chromatographed on silica gel using hexanes-acetone (v / v, 10: 1 and 5: 1) as eluent.

Bolo získaných 190 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme tuhej, kryštalickej látky. Výťažok 89%. δ (¹H, CDCI₃): 9,88 (s, 1 H, CHO), 6,05 (dd, 1H, H2, J=1,5 a 3,3 Hz), 4,92 (t, 1H, H7'_t J=2,7 Hz, 4,33 (d, 1 H, 8aCH₂, J=10,2 Hz), 3,94 (t, 1H, H3', J=8,1 Hz), 3,8-3,7 (m, 2H, ΗΓ+Η9'), 3,47 (dd, 1H, H3', J=8,4 a 10,8 Hz), 3,29 (d, 1H, 8aCH₂, J=10,5 Hz).190 mg of the title compound were obtained as a crystalline solid. Yield 89%. δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.88 (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1H, H2, J = 1.5 and 3.3 Hz), 4.92 (t, 1 H H7 _'t J = 2.7 Hz, 4.33 (d, 1H, 8aCHa _2, J = 10.2 Hz), 3.94 (t, 1H, H3', J = 8.1 Hz); 3.8-3.7 (m, 2H, ΗΓ + '9 '), 3.47 (dd, 1H, H 3', J = 8.4 and 10.8 Hz), 3.29 (d, 1H, 8aCH) ₂ , J = 10.5 Hz).

Príklad 32Example 32

Príprava sodnej soli kyseliny [1R-(Ια,3a3,4β,4ap,7β,7aa, 8aβ)]-8a-[[1S,4R,7R,9R]-2,8-dioxa-4-(l-metyletyl)- 9-metyΙοί s-bicyklo-[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6, 7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-sindacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (Ια, 3a3,4β, 4αp, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4- (1-methylethyl) - 9-methyl-s-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6, 7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl 3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacen-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 165 mg zlúčeniny, pripravenej a opísanej v rámci príkladu 31, v 15 ml metanolu, bolo pridaných 3,35 ml 0,0956 M roztoku hydroxidu sodného. Po jednohodinovom miešaní bolo z reakčnej zmesi rozpúšťadlo odstránené do sucha a získaná tuhá látka bola rozpustená v 3 ml vody a poTo a solution of 165 mg of the compound prepared and described in Example 31 in 15 mL of methanol was added 3.35 mL of 0.0956 M sodium hydroxide solution. After stirring for 1 hour, the solvent was removed to dryness from the reaction mixture and the resulting solid was dissolved in 3 ml of water and

172 tom lyofilizovaná.172 lyophilized.

Údaj o množstve, prípadne kvalite a ani výťažku v nadpise uvedenej a žiadanej zlúčeniny nie je uvedený.Indication of the amount, quality and / or yield of the title compound and the desired compound is not indicated.

δ (¹H, CDCI3): 9,77 (s, 1H, CHO), 5,79 (dd, 1H, H2, J=0,9 a 3,3 Hz), 4,58 (bs, 1H, H7’), 3,85-3,72 (m, 2H, H3'+8aCH₂), 3,71-3,56 (m, 2H, H9'+Hľ), 3,45 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,9 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 206,3 (CHO), 174,3 (COO’), 151,.4 (C3), 127,5 (C2), 96,7 (C7'), 80,8 (ď).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.77 (s, 1H, CHO), 5.79 (dd, 1H, H2, J = 0.9 and 3.3 Hz), 4.58 (bs, 1 H, H-7 3.85-3.72 (m, 2H, H 3 '+ 8aCH ₂ ), 3.71-3.56 (m, 2H, H 9' + H '), 3.45 (d, 1H, 8aCH _2); , J = 9.9 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 206.3 (CHO), 174.3 (COO '), 151.4 (C3), 127.5 (C2), 96.7 (C7'), 80.8 ( d).

Príklad 33Example 33

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ββ,4β,4a0,7β,7aa,8ap)]-8a-[[1S, 7R,9R]- 2,8-dioxa-9-metyl-4-metylén-cis-bicyklo[3.4.0]-non7-yl-oxy-metyl]- 4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3ββ, 4β, 4a0.7β, 7aa, 8ap)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] - 2,8-dioxa-9-methyl-4-methylene-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4 methane-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K ľadom chladenému roztoku 330 mg medziproduktu 41, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 4 ml dichlórmetánu bolo pridaných 0,2 ml triflóroctovej kyseliny a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote 0 °C po dobu 20 minút a potom bola zriedená s 150 ml dichlórmetánu, a nasledovne bola premytá 3 x 100 ml vody.To an ice-cooled solution of 330 mg of intermediate 41 prepared above in 4 ml of dichloromethane was added 0.2 ml of trifluoroacetic acid and the resulting mixture was stirred at 0 ° C for 20 minutes and then diluted with 150 ml of dichloromethane. , and then washed with 3 x 100 mL water.

Organická fáza bola po oddelení vysušená síranom sodným bezvodným a zahustená do sucha. Získaná látka olej ovitej konzistencie bola spracovaná rýchlou chromatografiou na silikagéli, za použitia zmesi díchlórmetán-metanol (98:2) ako elučného činidla.After separation, the organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated to dryness. The oil of an oily consistency was flash chromatographed on silica gel, eluting with dichloromethane-methanol (98: 2).

Príslušné frakcie bo’ly zhromaždené a RP-18 chromatografované za použitia stredne silného tlaku (približne 1 MPa) , za použitia lineárneho gradientu acetonítrilu (60 až 70%), vo vode.The appropriate fractions were collected and RP-18 chromatographed using moderate pressure (approximately 1 MPa), using a linear gradient of acetonitrile (60-70%), in water.

Bola získaná v nadpise uvedená, žiadaná zlúčenina. Údaje o množstve ani výťažku nie sú uvedené.The title compound was obtained. No amount or yield data are given.

δ (¹H, CDCI3): 9,87 (s, 1 H, CHO), 6,04 (d, 1H, H-2, J=3,3 Hz), 5,08 s 5,02 (2m, 2H,.^0=), 4,50 (dd, 1 H, H-7’, J=2,7 a 8,4 Hz), 4,48-4,29 (m, 3H, Ch^-3* a 8a-CH₂(1 H)), 3,76 (dd, 1 H, H-ľ, J=7,2 a 9,3 Hz), 3,27 (m, 1 H, H-9'), 3,02 (m, 1 H, H-5'), 2,45 (m, 1H, H-1); δ (^ ³C, CDCI3): 205,1 (CHO), 176,0 (COOH),δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.87 (s, 1H, CHO), 6.04 (d, 1 H, H-2, J = 3.3 Hz), 5.08 p 5.02 (2m, 2H, .delta. = 0, 4.50 (dd, 1H, H-7 &apos;, J = 2.7 and 8.4 Hz), 4.48-4.29 (m, 3H, CH3 -3). * and _8a-CH2 (1H)), 3.76 (dd, 1 H, H ', J = 7.2, 9.3 Hz), 3.27 (m, 1 H, H-9' 1.02, 3.02 (m, 1H, H-5 '), 2.45 (m, 1H, H-1); δ (? ³ C, CDCl 3): 205.1 (CHO), 176.0 (COOH),

173173

148,6 (C-3), 130,4 (C-2), 104,2 (CH₂=), 98,2 (C-7'), 80,1 (C-ľ), 73,4 a 70,6 (8a-CH₂ a C-3'), 69,8 (C-9‘).148.6 (C-3), 130.4 (C-2), 104.2 (CH ₂ =), 98.2 (C-7 '), 80.1 (C-1'), 73.4 and 70.6 _(8a-CH2 and C-3 '), 69.8 (C-9').

Príklad 34Example 34

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4ap,7β,7aa, 8aP)]-8a-[[1S,7R,9R]-2,8-dioxa-9-metyl-4-metylén-cisbicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-okrahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-9-methyl-4-methylene-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-ocrahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) 1,4-methano-indacén3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku zlúčeniny, pripravenej a opísanej v príklade 33 (140 mg), v 15 ml metanolu, bolo po kvapkách pridaných 3,06 ml 0,945 M vodného roztoku hydroxidu sodného. Po odstránení rozpúšťadla z reakčnej zmesi za zníženého tlaku bol zvyšok rozpustený v 60 ml vody a lyofilizovaný. Bolo získaných 145 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.To a solution of the compound prepared and described in Example 33 (140 mg) in 15 mL of methanol was added dropwise 3.06 mL of 0.945 M aqueous sodium hydroxide solution. After removal of the solvent from the reaction mixture under reduced pressure, the residue was dissolved in 60 ml of water and lyophilized. 145 mg of the title compound are obtained.

δ (1 H, DMSO-dg): 9,76 (s, 1H, CHO), 5,76 (d, 1H, H-2, J=3,3 Hz), 5,04 (m, 2H, H2C=), 4,34^,20 (m, 3H, H-7‘ a CH₂-3’), 3,84 a 3,50 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,9 Hz), 3,62 (dd, 1H, H-ľ, J=7,5 a 9,3 Hz), 3,15 (m, 1 H, H-9'), 2,89 (m, 1H, H-5').δ (1H, DMSO-d6): 9.76 (s, 1H, CHO), 5.76 (d, 1H, H-2, J = 3.3 Hz), 5.04 (m, 2H, H2C) =), 4.34 ^ 20 (m, 3H, H-7 'and _CH2 -3'), 3.84 and 3.50 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.9 Hz) 3.62 (dd, 1H, H-1 ', J = 7.5 and 9.3 Hz), 3.15 (m, 1H, H-9'), 2.89 (m, 1H, H- 5 ').

Príklad 35Example 35

Príprava [ÍR-(Ια,3ap,4β,4ηβ,7β,7aa,8aP)]-8a-[[lS,7R,9R]-2,8dioxa-9-metyl-4-me tylén-3-oxo-cis-bicyklo-[3.4.0]-non-7-yloxy-inetyl] -4-fo.rmyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej kyselinyPreparation of [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8aP)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-9-methyl-4-methylene-3-oxo-cis -bicyclo- [3.4.0] non-7-yloxy-ethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3 (1- methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3α- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 62 mg medziproduktu 42, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 1,1 ml vysušeného dichlórmetánu bolo pridaných 0,05 ml triflóroctovej kyseliny a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote 0 °C po dobu 20 minút a potom bola zriedená s 50 ml dichlórmetánu, a nasledovne bola premytá 3x so 25 ml vody.To a solution of 62 mg of intermediate 42 described above in 1.1 ml of dried dichloromethane was added 0.05 ml of trifluoroacetic acid, and the resulting mixture was stirred at 0 ° C for 20 minutes and then diluted with 50 ml. dichloromethane, and was subsequently washed 3 times with 25 ml of water.

Organická fáza bola vysušená síranom sodným bezvodnýmThe organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate

174174

a zahustená na látku olej ovitej konzistencie, ktorá bola spracovaná 2x rýchlou chromatografiou na silikagéli, za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (98 :2), ako elučného činidla .and concentrated to an oily consistency which was subjected to 2X flash chromatography on silica gel using dichloromethane-methanol (98: 2) as eluent.

Bolo získaných 25 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme peny sfarbenej do svetložltá.25 mg of the title compound was obtained as a pale yellow foam.

δ (¹H, CDCI₃): 9,75 (s, 1H, CHO), 6,35 a 5,63 (2d, 2H, H2C=C, J=3,3 Hz), 6,04 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,52 (t, 1H, H-7', J= 4,8 Hz), 4,24 (t, 1H, H-4’, J=8,7 Hz), 4,09 a 3,46 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,3 Hz), 3,38 (m, 1 H, H-5'), 3,30 (m, 1H, H-9'), 2,59 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,5 (CHO), 175,3 (COOH), 169,7 (C-3'), 148,2 (C-3), 136,8 (0-4¹). 130,6 (C-2), 122,4 (C=CH2), 97,7 (G-7j, 77,8 (C-ľ) a 71,2 (C-9').δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 6.35 and 5.63 (2d, 2H, H2C = C, J = 3.3 Hz), 6.04 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.52 (t, 1H, H-7 ', J = 4.8 Hz), 4.24 (t, 1H, H- 4 ', J = 8.7 Hz), 4.09 and 3.46 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.3 Hz), 3.38 (m, 1 H, H-5') 3.30 (m, 1H, H-9 &apos;), 2.59 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.5 (CHO), 175.3 (COOH), 169.7 (C-3 '), 148.2 (C-3), 136.8 (0-4 ¹ ) . 130.6 (C-2), 122.4 (C = CH 2), 97.7 (G-7j, 77.8 (C-1 ') and 71.2 (C-9').

Príklad 36Example 36

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(la,3aP,4β,4aP,7β , 7aa, 8aβ)]-8a-[[lS,7R,9R]- 2,8-dioxa-9-metyl-4-metylén-3-oxo-cisbicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (1α, 3αP, 4β, 4αP, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] - 2,8-dioxa-9-methyl-4-methylene-3 -oxo-cisbicyclo [3.4.0] non-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- ( methylethyl) -1,4-methano-s-indacén3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 25 mg zlúčeniny, pripravenej a opísanej v rámci príkladu 35, uvedeného vyššie, v 10 ml metanolu, bolo po kvapkách pridaných 0,53 ml 0,0945 M vodného roztoku hydroxidu sodného. Po odstránení rozpúšťadla z reakčnej zmesi za zníženého tlaku, bol zbytok rozpustený v 25 ml vody a potom lyofilizovaný. Bolo získaných 26 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.To a solution of 25 mg of the compound prepared and described in Example 35 above in 10 mL of methanol was added dropwise 0.53 mL of a 0.0945 M aqueous sodium hydroxide solution. After removal of the solvent from the reaction mixture under reduced pressure, the residue was dissolved in 25 ml of water and then lyophilized. 26 mg of the title compound are obtained.

δ (¹ H, DMSO-d₆): 9,75 (s, 1 H, CHO), 6,15 a 5,82 (2d, 2H, H2C=C, J=3,3 Hz), 5,76 (bŕd, 1H, H-2), 4,31 (dd, 1H, H-7', J= 2,4 a 7,8 Hz), 4,24 (t, 1 H, H-ľ, J=8,7 Hz), 3,84 a 3,52 (2d, 2H, 8a-CH₂, J=9,9 Hz), 3,38 (m, 1 H, H-5'), 3,21 (m, 1H, H-9').δ ⁽¹ H, _DMSO-d6): 9.75 (s, 1H, CHO), 6.15 and 5.82 (2d, 2H, H2C = C, J = 3.3 Hz), 5.76 (brd, 1H, H-2), 4.31 (dd, 1H, H-7 ', J = 2.4 and 7.8 Hz), 4.24 (t, 1H, H-1', J = 8.7 Hz), 3.84 and 3.52 (2d, 2H, _8a-CH2, J = 9.9 Hz), 3.38 (m, 1 H, H-5 '), 3.21 ( m, 1H, H-9 &apos;).

Príklad 37Example 37

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,43β,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[[1S, 7R , 9R] - 2,8-dioxa-9-metyl-4-oxo-cis-bicyklo [3.4.0] - non-7 - ylPreparation of acid [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 43β, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] - 2,8-dioxa-9-methyl-4-oxo-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl

175 oxy-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3(1-metyletyl)-1,4-metán-s-.indacén-3a-(1H)-karboxylovej175 Oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacen- 3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku medziproduktu 43 (45 mg), ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 25 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí. Vzniknutá reakčná zmes bola po preložení do Parrovho autoklávu trepaná pri tlaku 0,175 MPa vodíka a teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha a zbytok bol prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (65:35) ako elučného činidla.To a solution of intermediate 43 (45 mg) described above in 15 mL of ethyl acetate was added 25 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere. The resulting reaction mixture was shaken at 50 psi of hydrogen at room temperature for 1 hour after transfer to a Parr autoclave. After filtering off the catalyst, the solvent was evaporated to dryness and the residue was purified by flash chromatography on silica gel using hexane-ethyl acetate (65:35) as eluent.

Bolo získaných 25 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúče niny .25 mg of the title compound are obtained.

δ (1 H, CDCľ₃): 9,77 (s, 1H, CHO), 6,05 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,17 (m, 4H, H-3' (1H), 8a-CH₂ (1H), H-7* a H-ľ), 3,90 (d, 1H, H-3’ (1H), J=17,7 Hz), 3,42 (d, 1H, 8a-CH₂ (1H), J=9 Hz), 3,31 (m, 1H, H-9'), 2,85 (m, 1H, H-5'), 2,58 (t, 1H, H-3, J=3,9 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 214,4 (C-4), 204,8 (CHO), 148,3 (C-3), 130,6 (C-2), 98,9 (C-7'), 78,6 a 70,3 (C-ľ a C-9'), 73,6 a 69,1 (C8a-C a C-3¹).δ (1 H, _CDCl3): 9.77 (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.17 (m, 4 H, H-3 '(1H), _8a-CH2 (1H), H-7 and H * I'), 3.90 (d, 1 H, H-3 '(1H), J = 17.7 Hz ), 3.42 (d, 1 H, _8a-CH2 (1H), J = 9 Hz), 3.31 (m, 1 H, H-9 '), 2.85 (m, 1 H, H-5' 1.58 (t, 1H, H-3, J = 3.9 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 214.4 (C-4), 204.8 (CHO), 148.3 (C-3), 130.6 (C-2), 98.9 (C-7 ') ), 78.6 and 70.3 (C-I and C-9 '), 73.6 and 69.1 (C8a-C and C-3 ^1).

Príklad 38Example 38

Príprava kyseliny [ ÍR- (la , 3ap , 4β,4ηβ,7β,7aa,8aP)]-8a-[[1S, 7R, 9R] - 2,8-dioxa-4-etyl-6-hydroxy-9-metyl-cis-b.icyklo[3.4.0]-non-7-y1-oxy-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (1a, 3a, 4a, 4aa, 7a, 7aa, 8aP)] - 8a - [[1S, 7R, 9R] - 2,8-dioxa-4-ethyl-6-hydroxy-9-methyl cis b.icyklo [3.4.0] non-7-y1-oxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoktahydro-7-methyl-3- ( methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku (123 mg) medziproduktu 45, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 50 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 65 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola hydrogenovaná pri tlaku 0,105 MPa vodíka a teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátoru a odparení rozpúšťadla do sucha bol zbytok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (19:1) až (18:2), akoTo a solution (123 mg) of intermediate 45 described above in 50 mL of ethyl acetate was added 65 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere and the resulting mixture was hydrogenated at 50 psi hydrogen at room temperature for 30 min. for 1 hour. After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, the residue was flash chromatographed on silica gel using dichloromethane-methanol (19: 1) to (18: 2) as

176 elučného činidla.176 eluent.

Bolo získaných 90 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .90 mg of the title compound are obtained.

δ (1h, CDCI3): 9,67 (s, 1H, CHO), 6,07 (d, 1H, H-2, J=3,3 Hz), 4,64 (d, 1H, H-7', J=3,6 Hz), 4,02 (d, 1H, 8aCHa, J=9,9 Hz), 3,89 (dd, 1H, Ha-3’, J=6,9 a 9 Hz), 3,85-3,7 (m, 3H, H-6', H-ľ a H-9j, 3,68-3,5 (m, 2H, Hb-3’ a 8a-CHb), 2,65 (t, 1H, H-1, J=3,.6 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,9 (CHO), 176,3 (CO₂H), 148,9 (C3), 130,1 (C-2), 99,2 (C-7’), 80,5, 70,1 a 65,5 (C-6\ C-ľ a C-9’), 73,7 a 71,0 (8a-CH₂ a C-3’), 13,4 (CH₂-CH₃).δ (1h, CDCl 3): 9.67 (s, 1H, CHO), 6.07 (d, 1H, H-2, J = 3.3Hz), 4.64 (d, 1H, H-7 ') J = 3.6 Hz), 4.02 (d, 1H, 8aCHa, J = 9.9 Hz), 3.89 (dd, 1H, Ha-3 ', J = 6.9 and 9 Hz), 3.85-3.7 (m, 3H, H-6 ', H-1' and H-9j, 3.68-3.5 (m, 2H, Hb-3 'and 8a-CHb), 2.65 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.9 (CHO), 176.3 (CO ₂ H), 148.9 (C3), 130 , 1 (C-2), 99.2 (C-7 '), 80.5, 70.1 and 65.5 (C-6, C-1' and C-9 '), 73.7 and 71, O (8a-CH ₂ and C-3 '), 13.4 (CH ₂ -CH ₃ ).

Príklad 39Example 39

Príprava kyseliny [ÍR-(la,3aP,4β,4a3,7β,7aa,8ap)]-8a-[[1S, 4R,6S,7R,9R]-2,8-dioxa-4-etyl-6-hydroxy-9-metyl-cis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1a, 3aP, 4β, 4a3.7β, 7aa, 8ap)] - 8a - [[1S, 4R, 6S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4-ethyl-6-hydroxy] -9-methyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxy-methyl] -4-formy1-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoktahydro-7-methyl-3 - (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku (102 mg) medziproduktu 46, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 25 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 60 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola hydrogenovaná pri tlaku 0,105 MPa vodíka, pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny.To a solution (102 mg) of intermediate 46 prepared above in 25 ml of ethyl acetate was added 60 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere and the resulting mixture was hydrogenated at 0.105 MPa hydrogen at room temperature. for 1 hour.

Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha a zbytok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (25:1) ako elučného činidla.After filtering off the catalyst, the solvent was evaporated to dryness and the residue was flash chromatographed on silica gel using dichloromethane-methanol (25: 1) as eluent.

Bolo získaných 75 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .75 mg of the title compound are obtained.

δ (¹ H, CDCI3): 9,73 (s, 1 H,. CHO), 6,08 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,53 (d, 1H, H-7’, J=1,8 Hz), 4,05 (dd, 1H, Ha-3', J=7,2 a 8,4 Hz), 4,02 (d, 1H, 8aCHa, J=9,3 Hz), 3,83 (dd, 1H, H-ľ, J=7,2 a 8,7 Hz), 3,72 (dd, 1H, H-6’, J=2,1 a 4,8 Hz), 3,64 (d, 1 H, 8a-CHb, J=9,3 Hz), 3,54-3,36 (m, 2H, H-9’ a Hb-3’), 2,68 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 0,96 (t, 3H, CH3-CH2, J=7?5 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,7 (CHO), 176,1 (CO2H), 148,5 (C-3), 130,5 (C-2), 98,8 (C-7¹), 79,2, 70,7 a 69,1 (C-8¹, C-ľ a C-9’), 73,7 a 72,7 (8a-CH₂ a C-3'), 12,7 (CH₂CH3).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1 H ,. O), 6.08 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.53 ( d, 1H, H-7 &apos;, J = 1.8 Hz), 4.05 (dd, 1H, Ha-3 &apos;, J = 7.2 and 8.4 Hz), 4.02 (d, 1H, 8aCHa, J = 9.3 Hz), 3.83 (dd, 1H, H-1 ', J = 7.2 and 8.7 Hz), 3.72 (dd, 1H, H-6', J = 2) , 1 and 4.8 Hz), 3.64 (d, 1H, 8a-CHb, J = 9.3 Hz), 3.54-3.36 (m, 2H, H-9 'and Hb-3) 2.68 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 0.96 (t, 3H, CH 3 -CH 2, J = 7.5 Hz); δ ⁽¹³ C, CDCl3): 204.7 (CHO), 176.1 (CO2 H), 148.5 (C-3), 130.5 (C-2), 98.8 (C-7 ^1), 79.2, 70.7 and 69.1 (C-8 ^1, C 'and C-9'), 73.7 and 72.7 _(8a-CH2 and C-3 '), 12.7 ( CH ₂ CH 3).

177177

Príklad 40Example 40

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4ap,7β,7aa, 8ηβ)]-8a-[[1S,4R,6S,7R,9R]- 2,8-dioxa-4-etyl-6-hydroxy-9metyl-cis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]-4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metáns-índacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 4R, 6S, 7R, 9R] - 2,8-dioxa-4-ethyl-6 -hydroxy-9-methyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7 methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methanesulfonyl-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 490 mg zlúčeniny, pripravenej a opísanej v rámci príkladu 39, uvedeného vyššie, v 50 ml etanolu, bolo pridaných po kvapkách 10 ml 0,095 M vodného roztoku hydroxidu sodného. Po 30 minútach bolo rozpúšťadlo z reakčnej zmesi za zníženého tlaku odstránené a získaný produkt bol rozpustený v 10 ml vody a potom bol lyofilizovaný.To a solution of 490 mg of the compound prepared and described in Example 39 above in 50 ml of ethanol was added dropwise 10 ml of a 0.095 M aqueous sodium hydroxide solution. After 30 minutes, the solvent was removed from the reaction mixture under reduced pressure, and the obtained product was dissolved in 10 ml of water and then lyophilized.

Bolo získaných 475 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .475 mg of the title compound are obtained.

δ (¹ H, (CD₃)₂SO): 9,77 (s, 1 H, CHO), 5,8 (d, 1 H, H-2, J=2,4 Hz), 4,41 (bs, 1H, OH), 4,31 (d, 1H, H-7', J=2,1 Hz), 3,94-3,82 (m, 2H, 8aCHa a Ha-3'), 3,66 (t, 1 H, H-ľ, J=8,1 Hz), 3,54-3,34 (m, 3H, 8aCHb, H-6’ a H-9¹), 3,24 (t, 1 H. Hb-3’, J=8,1 Hz), 2,55 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz).δ ⁽¹ H, (CD _{3) 2} SO): 9.77 (s, 1H, CHO), 5.8 (d, 1 H, H-2, J = 2.4 Hz), 4.41 ( bs, 1H, OH), 4.31 (d, 1H, H-7 &apos;, J = 2.1 Hz), 3.94-3.82 (m, 2H, 8aCHa and Ha-3 &apos;), 3, 66 (t, 1 H, H ', J = 8.1 Hz), 3.54-3.34 (m, 3H, 8aCHb, H-6' and H-9 ^1), 3.24 (t, 1 H, Hb-3 &apos;, J = 8.1 Hz), 2.55 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz).

Príklad 41Example 41

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β,7aa, 8aβ)]-8a-[[lS,7R,9R]-2,8-dioxa-9-metyl-4-oxo-cis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8aoktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-9-methyl-4-oxo-cis bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoktahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 350 mg medziproduktu 43, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 50 mg 10%-ného paládia ma aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho autoklávu trepaná pri tlaku 0,175 MPa pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení .rozpúšťadla do sucha bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (objem/obTo a solution of 350 mg of intermediate 43, prepared as described above, in 15 ml of ethyl acetate, 50 mg of 10% palladium-on-carbon was added under a nitrogen atmosphere and the resulting mixture was shaken at 0.175 MPa at 50 psi after being introduced into a Parr autoclave. room for 1 hour. After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, the residue was flash chromatographed on silica gel using dichloromethane-methanol (v / v).

178 jem, 100:1, 70:1 a 50:1), ako elučného činidla.178 µm, 100: 1, 70: 1 and 50: 1) as eluent.

Bolo získaných 200 mg látky vo forme peny, ktorá bola rozpustená v 10 ml metanolu a potom reagovaná so 4,54 ml 0,0947 M roztoku hydroxidu sodného.200 mg of a foam was obtained, which was dissolved in 10 ml of methanol and then treated with 4.54 ml of 0.0947 M sodium hydroxide solution.

Po odstránení rozpúšťadla za vákua bola zvyšná tuhá látka rozpustená v 15 ml vody a lyofilizovaná.After removal of the solvent in vacuo, the residual solid was dissolved in 15 mL of water and lyophilized.

Nie sú uvedené žiadne údaje o množstve, ani forme žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.There is no indication of the amount or form of the title compound.

δ (¹ H, DMSO-d6): 9,76 (s, 1H, CHO), 5,80 (dd, 1 H, H2, J-0,9 a 3,3Hz), 4,203,95 (m, 4H, H/'+Hľ+HS'), 3,89 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 3,47 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 2,92 (m, 1H, H5').δ ⁽¹ H, DMSO-d 6): 9.76 (s, 1H, CHO), 5.80 (dd, 1H, H2, J = 0.9, 3.3 Hz), 4,203,95 (m, 4 H 1 H (+ H + + H +), 3.89 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.6 Hz), 3.47 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.6 Hz), 2 92 (m, 1H, H 5 ').

Príklad 42Example 42

Príprava sodnej soli kyseliny [ ÍR-(Ια,3ap,4β,4ηβ,7β,7aa, 8ηβ)]- 8a-[[1S,4R,7R,9R]-2,8-dioxa-4-metoxy-9-metyl-cisbicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3- (1 -inetyletyl) -1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4-methoxy-9-methyl -cisbicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1- methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 250 mg medziproduktu 82, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho autoklávu trepantí pri teplote miestnosti a tlaku 0,175 MPa vodíka po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (100:1, 70:1, 50:1 ει 40:1) ako elučného činidla.To a solution of 250 mg of intermediate 82 described above in 15 ml of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere and the resulting mixture was shaken at room temperature and 0.175 pressure at room temperature under a Parr autoclave. MPa of hydrogen for 1 hour. After filtering off the catalyst and evaporating the solvent, the residue was flash chromatographed on silica gel using dichloromethane-methanol (100: 1, 70: 1, 50: 1 and 40: 1) as eluent.

Bolo získaných. 120 mg látky sirupovitej konzistencie, ktorá bola rozpustená v 15 ml metanolu a ponechaná reagovať s 2,51 ml 0,0947 M roztoku hydroxidu sodného.It was obtained. 120 mg of syrup-like substance which was dissolved in 15 ml of methanol and treated with 2.51 ml of 0.0947 M sodium hydroxide solution.

Po odstránení rozpúšťadla bola získaná polotuhá látka, ktorá bola rozpustená v 15 ml vody a potom bola lyofilizovaná.After removal of the solvent, a semi-solid was obtained, which was dissolved in 15 ml of water and then lyophilized.

Nie sú uvedené žiadne údaje o množstve, ani forme žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.There is no indication of the amount or form of the title compound.

179 δ (1 Η, DMS0-d6): 9,77 (s, 1 Η, CHO), 5,80 (dd, 1H, H2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,47 (t, 1H, H7', J=3,9 Hz), 3,96-3,84 (m, 2H, H3’+8aCH₂), 3,80 (m, 1H, H4'), 3,653,40 (m, 4H, H^+eaCH^HS'+Hľ), 3,23 (s, 3H, OCH₃), 2,46-2,2 (m, 4H, H1+H6'+H5'+CH(CH3)₂); δ (¹³C, DMSO-d6): 206,4 (CHO), 174,4 (COO'), 151,3 (C3), 127,6 (C2), 96,9 (C7'), 84,1 (C4')_t 56,6 (OCH3).179 δ (1 Η, DMSO-d6): 9.77 (s, 1 Η, CHO), 5.80 (dd, 1H, H2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.47 (t 1 H, H 7 ', J = 3.9 Hz), 3.96-3.84 (m, 2H, H 3' + 8aCH ₂ ), 3.80 (m, 1H, H 4 '), 3.653.40 (m 3.24 (s, 3H, OCH ₃ ), 2.46-2.2 (m, 4H, H 1 + H 6 '+ H 5' + CH (CH 3) ₂ ); δ ( ¹³ C, DMSO-d 6): 206.4 (CHO), 174.4 (COO '), 151.3 (C3), 127.6 (C2), 96.9 (C7'), 84.1 (C 4 ') _t 56.6 (OCH 3).

Príklad 43Example 43

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3aP,4β,4ββ,7β,7aa,8ap)]-8a-[[1S, 7R,9R]- 2,8 -dioxa-9-metyl-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejAcid preparation [1R- (Ια, 3αP, 4β, 4ββ, 7β, 7aa, 8αp)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] - 2,8-dioxa-9-methyl-bicyclo [3.4.0] - non-7-yl-oxy-methyl] 4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methane s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 120 mg medziproduktu 87, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 20 ml vysušeného dichlórmetánu, bolo pridaných v atmosfére dusíka a pri teplote 0 °C 100 μΐ kyseliny trifluóroctovej. Vzniknutá reakčná zmes bola po 5 minútach zriedená 100 ml dichlórmetánu a premytá postupne 100 ml vody a 100 ml soľanky a potom bola vysušená síranom horečnatým a zahustená.To a solution of 120 mg of intermediate 87, as described above, in 20 ml of dried dichloromethane, was added under a nitrogen atmosphere at 0 ° C, 100 μ 0 of trifluoroacetic acid. After 5 minutes, the reaction mixture was diluted with 100 mL of dichloromethane and washed sequentially with 100 mL of water and 100 mL of brine, then dried over magnesium sulfate and concentrated.

Získaný surový materiál bol rozpustený v 15 ml zmesi tetrahydrofurán-metanol (objem/objem, 2:1) a reagovaný s 5 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej. Po ukončení reakcie bola zmes zriedená vodou (100 ml) a vytrepaná 2 x dichlórmetánoin.The obtained crude material was dissolved in 15 mL of tetrahydrofuran-methanol (v / v, 2: 1) and treated with 5 mL of a 1 M hydrochloric acid solution. After completion of the reaction, the mixture was diluted with water (100 mL) and extracted with 2 x dichloromethane.

Oddelená organická fáza bola vysušená síranom horečnatým a získaná látka olej ovitej konzistencie bola prečistená preparatívnou chromatografiou na tenkej vrstve za použitia silikagélu a zmesi acetón-hexány (1:3) ako elučného činidla.The separated organic phase was dried over magnesium sulphate and the resulting oily consistency was purified by preparative thin layer chromatography using silica gel and acetone-hexanes (1: 3) as eluent.

Bolo získaných 62 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny. Výťažok 73 %.62 mg of the title compound are obtained as a white foam. Yield 73%.

δ (¹H, CDCI3): 9,79 (s, 1 H, CHO), 6,06 (dd, 1H, H2, J=1,2 a 3,3 Hz), 5,56 (m, 1H, H4'), 4,65-4,65 (m, 2H, H3'), 4,3-4,0 (m, 3H, H7'+8aCH₂+Hľ), 3,50 (d, 1H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,18 (dq, 1H, H9’, J=6₍3 a 9 Hz), 2,72 (m, 1H, H6'), 2,62 (t, 1H, H1, J=3 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,6 (CHO), 175,2 (COOH), 148,3 (C3), 136,3 (C5¹), 130,6 (C2), 119,15 (C4’>, 101,5(07'), 86,5 (ď).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.79 (s, 1H, CHO), 6.06 (dd, 1H, H2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 5.56 (m, 1 H, H 4 '), 4.65-4.65 (m, 2H, H 3'), 4.3-4.0 (m, 3H, H 7 '+ 8aCH ₂ + H 1'), 3.50 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9 Hz), 3.18 (dq, 1H, H 9 ', J = 6 ₍ 3 and 9 Hz), 2.72 (m, 1H, H 6'), 2.62 (t, 1H, H1) , J = 3 Hz); δ ⁽¹³ C, CDCl3): 204.6 (CHO), 175.2 (COOH), 148.3 (C 3), 136.3 (C 5 ^1), 130.6 (C 2) , 119.15 (C4 ', 101.5 (07'), 86.5 (d ')).

180180

Príklad 44Example 44

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(Ια,33β,4β,4ap,7β,7aa, 8aβ)]-8a-[[1S,7R,9RJ-2,8-dioxa-9-metyl-bicyklo[3.4.0]-non7-yl-oxy-metyl]- 4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (Ια, 33β, 4β, 4αp, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [[1S, 7R, 9RJ-2,8-dioxa-9-methyl-bicyclo [3.4.0] -non-7-yloxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanes- indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 50 mg zlúčeniny, pripravenej a opísanej v rámci uvedeného príkladu 43, v 5 ml metanolu, bolo pridaných 1,09 ml 0,0966 M roztoku hydroxidu sodného a vzniknutá reakčná zmes bola po dobu 15 minút miešaná a potom bolo rozpúšťadlo odparené do sucha.To a solution of 50 mg of the compound prepared and described in Example 43 in 5 mL of methanol was added 1.09 mL of 0.0966 M sodium hydroxide solution, and the resulting reaction mixture was stirred for 15 minutes and then the solvent was evaporated to dryness. .

Zvyšok bol rozpustený v 1 ml vody a potom bol lyofilizovaný.The residue was dissolved in 1 mL of water and then lyophilized.

Nie sú žiadne údaje o množstve, ani o forme, žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.There is no indication of the amount or form of the desired title compound.

δ (¹H, DMSO-d6): 9,78 (s, 1 H, CHO), 5,80 (bd, 1H, H2, J=3,6 Hz), 5,64 (bs, 1H, H4'), 4,6-4,4 (m, 2H, H3'), 4,1 (dd, 1 H, H7’, J=2,7 ai 9,.3 Hz), 4,05-3,90 (m, 2H, Hľ+8aCH₂), 3,56 (d, 1H, 8aCH2, J=9,6 Hz), 3,06 (dq, 1H, H9', J=6,3 a 8,7 Hz); δ (¹³C, DMS0-d6): 215,9 (CHO), 183,9 (C00“), 160,9 (03), 146,1 (C5'),δ ⁽¹ H, DMSO-d 6): 9.78 (s, 1H, CHO), 5.80 (bd, 1H, H2, J = 3.6 Hz), 5.64 (bs, 1 H, H-4 ' ), 4.6-4.4 (m, 2H, H 3 '), 4.1 (dd, 1 H, H 7', J = 2.7 and 19.3 Hz), 4.05-3.90 (m, 2H, H '+ 8aCH ₂ ), 3.56 (d, 1H, 8aCH ₂ , J = 9.6 Hz), 3.06 (dq, 1H, H 9', J = 6.3 and 8.7 Hz) ); δ ( ¹³ C, DMSO-d6): 215.9 (CHO), 183.9 (C00 '), 160.9 (03), 146.1 (C5'),

137,2 (C2), 128,3 (C4’), 110,9 (C7'), 95,7 (ď).137.2 (C2), 128.3 (C4 '), 110.9 (C7'), 95.7 (d ').

Príklad 45Example 45

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3aβ,4β,4ηβ,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[[1S, 7R,9R]-dioxa-9-metyl-cis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxymetyl ]- 4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl- 3-(1metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3αβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] -Dioxa-9-methyl-cis-bicyclo [3.4.0] -non- 7-yl-oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a - (1H) -carboxylic acid

K roztoku 100 mg medziproduktu 87, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho autoklávu trepaní pri tlaku 0,140 MPa vodíka pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla bol získaný zvyšok rozpustený v 15 ml zmesiTo a solution of 100 mg of intermediate 87 prepared above in 15 ml of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere, and the resulting mixture was shaken at 50 psi of hydrogen at 50 psi hydrogen for introduction into a Parr autoclave. at room temperature for 1 hour. After filtering off the catalyst and evaporating the solvent, the obtained residue was dissolved in 15 ml of the mixture

181181

tetrahydrofurán-metanol (objem/objem, 2:1) a potom reagovaný s 5 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej.tetrahydrofuran-methanol (v / v, 2: 1) and then treated with 5 mL of a 1 M hydrochloric acid solution.

Po skončení reakcie bolo k zmesi pridaných 100 ml dichlórmetánu a 100 ml vody a organická a vodná fáza boli oddelené .After completion of the reaction, 100 ml of dichloromethane and 100 ml of water were added to the mixture, and the organic and aqueous phases were separated.

Organická fáza bola vysušená síranom horečnatým a zahustená až na látku olej ovitej konzistencie, ktorá bola prečistená pomocou preparatívnej chromatografie na tenkej vrstve, za použitia zmesi hexán-acetón (objem/objem, 3:1) ako elučného činidla.The organic phase was dried over magnesium sulfate and concentrated to an oily substance which was purified by preparative thin layer chromatography, eluting with hexane-acetone (v / v, 3: 1).

Bolo získaných 20 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme priehľadnej látky olej ovitej konzistencie. Celkový výťažok 30 %.20 mg of the title compound was obtained as a clear oil. Total yield 30%.

δ (1 H, CDCI₃): 9,86 (s, 1H, CHO), 6,05 (dd, 1H, H2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,07 (dd, 1H, H7', J=3 a 5,4 Hz), 4,33 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 3,90 (m, 1H, H3)', 3,69 (m, 1H, H3’), 3,61 (dd, 1H, Hľ, J=8,1 a 9 Hz), 3,39 (dq, 1H, H9', J=6 a 9 Hz), 3,28 (d, 1H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 2,6-2,4 (m, 2H, H5'+H1), 2,32 (m, 1H, CH(CH₃)2)·δ (1H, CDCl ₃ ): 9.86 (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1H, H 2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.07 (dd, 1H, H7 ', J = 3 and 5.4 Hz), 4.33 (d, 1 H, 8aCHa _2, J = 9.6 Hz), 3.90 (m, 1H, H3)', 3.69 (m, 1H, H 3 '), 3.61 (dd, 1H, H 1', J = 8.1 and 9 Hz), 3.39 (dq, 1H, H 9 ', J = 6 and 9 Hz), 3.28 (d 1 H, 8aCH ₂ , J = 9.6 Hz), 2.6-2.4 (m, 2H, H 5 '+ H 1), 2.32 (m, 1H, CH (CH ₃ ) 2) ·

Príklad 46Example 46

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ap,7β,7aa,8aP)]-8a-[[1S, 4R,7R,9R]-2,8-dioxa-4,9-dimetyl-6-hydroxy-cis-bicyklo[3.4.0] -non- 7-yl-oxy-metyl ] - 4-f o.rmyl-4,4a ,5,6,7,7a,8,8aoktahyd.ro-7- metyl - 3- (l-metyletyl) -1,4-metán-s - indacén-3a(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4β, 4β, 7β, 7aa, 8aP)] - 8α - [[1S, 4R, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4,9-dimethyl-6-hydroxy -cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yl-oxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8aoctahydro-7-methyl- 3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 90 mg medziproduktu 89b), ktorého príprava je opísaná vyššie, v 25 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola hydrogenovaná za tlaku 0,28 MPa vodíka, pri teplote miestnosti, po dobu 45 minút.To a solution of 90 mg of intermediate 89b) described above in 25 ml of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere and the resulting mixture was hydrogenated under 50 psi of hydrogen at a temperature of room, for 45 minutes.

Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla do sucha bol získaný zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na silikagéli, za použitia zmesi dichlórmetán-etylacetát (10:1) ako elučného činidla.After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, the residue was subjected to flash chromatography on silica gel, eluting with dichloromethane-ethyl acetate (10: 1).

Bolo získaných 60 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlú60 mg of the title compound are obtained

- 182 ceniny .- 182 stamps.

δ (ΊΗ, CDCI₃): 9,74 (s, 1 H. CHO), 6,08 (dd, 1 H. H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,53 (d, 1H, H-7', J=2,1 Hz), 4,09 (d, 1 H, 8a-CHa, J=9,6 Hz), 4,02 (dd, 1H, Ha-3', J=7,5 a 8,4 Hz), 3,84 (dd, 1H, H-ľ, J=7,8 a 9 Hz), 3,74 (dd, 1H, H-6', J=2,1 a 5,1 Hz), 3,60 (d, 1H, 8a-CHb, J=9,3 Hz), 3,42 (dq, 1 H, H-9', J=6 s 9 Hz), 3,34 (t, 1 H, Hb-3', J=8,7 Hz), 2,66 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz).δ (ΊΗ, CDCl ₃ ): 9.74 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.53 (d 1 H, H-7 ', J = 2.1 Hz), 4.09 (d, 1H, 8a-CHa, J = 9.6 Hz), 4.02 (dd, 1H, Ha-3', J = 7.5 and 8.4 Hz), 3.84 (dd, 1H, H-1 ', J = 7.8 and 9 Hz), 3.74 (dd, 1H, H-6', J = 2) , 1 and 5.1 Hz), 3.60 (d, 1H, 8a-CHb, J = 9.3 Hz), 3.42 (dq, 1H, H-9 ', J = 6 with 9 Hz) 3.34 (t, 1H, H-3 ', J = 8.7 Hz), 2.66 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz).

Príklad 47Example 47

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(la,3aP,4β,4ap,7β,7aa, 8aβ)]- 8a-[[1S,4R,6S,7R,9R]-2,8-dioxa-4,9-dimetyl-6-hydroxycis-bicyklo[3.4.0]-non-7-yl-oxy-metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7, 7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-sindacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (1a, 3aP, 4β, 4ap, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8a - [[1S, 4R, 6S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-4,9-dimethyl 6-hydroxycis-bicyclo [3.4.0] non-7-yloxy-methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7, 7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3 - (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacen-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 258 mg zlúčeniny, pripravenej a opísanej v rámci uvedeného príkladu 46, v 20 ml metanolu, bolo po kvapkách pridaných 4,98 ml 0,103 M vodného roztoku hydroxidu sodného. Po 15 minútach bolo zo vzniknutej zmesi odstránených za zníženého tlaku rozpúšťadla a zvyšok bol rozpustený v 10 ml vody a potom bol Lyofilizovaný.To a solution of 258 mg of the compound prepared and described in Example 46 in 20 mL of methanol was added dropwise 4.98 mL of a 0.103 M aqueous sodium hydroxide solution. After 15 minutes the solvent was removed under reduced pressure and the residue was dissolved in 10 mL of water and then lyophilized.

Bolo získaných 250 mg, v nadpise uvedenej zlúčeniny.250 mg of the title compound were obtained.

δ (¹ H, (CD₃)₂SO): 9,77 (s,1H, CHO), 5,79 (d, 1H, H-2, J=3_f6 Hz), 4,29 (d, 1H, H-7', J=1,8 Hz), 3,94-3,8 (m, 2H, 8a-CHa a Ha-3'), 3,67 (t, 1H, H-ľ, J=8,4 ® Hz), 3,55-3,25 (m, 3H, 8a-CHb, H-6', H-9'), 3,14 (t, 1 H, Hb-3', J=8,4 Hz), 2,54 (t,δ ( ¹ H, (CD ₃ ) ₂ SO): 9.77 (s, 1H, CHO), 5.79 (d, 1H, H-2, J = 3 _f 6 Hz), 4.29 (d, 1H, H-7 ', J = 1.8 Hz), 3.94-3.8 (m, 2H, 8a-CHa and Ha-3'), 3.67 (t, 1H, H-1 ', J = 8.4 Hz), 3.55-3.25 (m, 3H, 8a-CHb, H-6 ', H-9'), 3.14 (t, 1H, Hb-3 ', J = 8.4 Hz), 2.54 (t,

1H, H-1, J=3,6 Hz).1H, H-1, J = 3.6Hz).

Príklad 48Example 48

Príprava kyseliny [ÍR- (la,3aβ,4β,4αβ,7β,7aa,8aβ)]-8a-[((2,Acid preparation [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [((2,

3,6-trídeoxy-3-etylamino-3-N,4-0-karbonyl^-D-alopyranosyl)oxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-mety1-3 (1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej3,6-tri deoxy-3-ethylamino-3-N, 4-0-carbonyl -D-allopyranosyl) oxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a- octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 180 mg medziproduktu 96, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 30 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknú183To a solution of 180 mg of intermediate 96 described above in 15 ml of ethyl acetate was added 30 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere to give183.

tá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho autoklávu trepaná pri teplote miestnosti a tlaku 0,140 MPa po dobu 2 hodín.the reaction mixture was shaken at room temperature and 10 psi for 2 hours after being introduced into a Parr autoclave.

Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla do sucha bol získaný zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu, za použitia zmesi hexán-etylacetát (1:1) ako elučného činidla.After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, the residue was purified by flash chromatography on silica gel, eluting with hexane-ethyl acetate (1: 1).

Bolo získaných 70 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny (v čistej forme), označenej GM-233039X.70 mg of the title compound (pure form), designated GM-233039X, was obtained.

δ (¹H, CDCI₃): 9,76 (s, 1 H, CHO), 6,05 (dd, 1 H, H-2, J=3,0 a 1,2 Hz), 4,64 (dd, 1H, H-ľ, J=5,7 a 3,3 .Hz), 4,11 (m, 2H, H-3', H-4'), 4,04 (d, 1H, H-8a, J=9,3 Hz), 3,62 (dq, 1H, H-5', J=8,4 a 6,0 Hz), 3,51 (d, 1H, H-8a, J=9,3 Hz), 3,49 (m, 1H, CH2-CH3), 3,13 (m, 1H, CH2-CH₃), 2,62 (t, 1 H, H-1, J=3,6 Hz), 2,32 (m, 1H, CH(CH₃)₂), 1,15 (t, 3H, CH3, J=7,2 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,4 (CHO), 175,7 (COOH), 157,6 (N-COO), 148,3 (C-3), 130,5 (C-2), 97,2 (C-ľ),δ ⁽¹ H, _CDCl3): 9.76 (s, 1H, CHO), 6.05 (dd, 1 H, H-2, J = 3.0 and 1.2 Hz), 4.64 ( dd, 1H, H-1 ', J = 5.7 and 3.3 Hz), 4.11 (m, 2H, H-3', H-4 '), 4.04 (d, 1H, H- Δa, J = 9.3 Hz), 3.62 (dq, 1H, H-5 ', J = 8.4 and 6.0 Hz), 3.51 (d, 1H, H-8a, J = 9 , 3 Hz), 3.49 (m, 1 H, CH 2 CH 3), 3.13 (m, 1 H, CH 2 CH _3), 2.62 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz), 2.32 (m, 1 H, CH _{(CH3) 2),} 1.15 (t, 3H, CH3, J = 7.2 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.4 (CHO), 175.7 (COOH), 157.6 (N-COO), 148.3 (C-3), 130.5 (C-2), 97 , 2 (C-1 '),

74,2 (C-4'), 73,4 (8a-CH₂), 69,4 (C-5'), 51,2 (C-N).74.2 (C-4 '), 73.4 _(8a-CH2), 69.4 (C-5'), 51.2 (CN).

Príklad 49Example 49

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3aP,4β,4aP,7β,7aa,8aP)]-8a-[(2,3anhyd.ro-6-deoxy-4-0-metyl -β-D-manopyranosyloxy)metyl ] - 4fo.rmyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3- (l-metyletyl) -Preparation of acid [1R- (Ια, 3aP, 4β, 4aP, 7β, 7aa, 8aP)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-methyl-β-D-manopyranosyloxy) methyl] - 4-methyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -

1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 140 mg medziproduktu 50, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 20 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 100 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí. Vzniknutá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho autoklávu trepaná pri tlaku vodíka 0,105 MPa a teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odstránení katalyzátora a odparení rozpúšťadla do sucha bol získaný zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (20:1) ako elučného činidla.To a solution of 140 mg of intermediate 50 described above in 20 ml of ethyl acetate was added 100 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere. The resulting reaction mixture was shaken at 50 psi of hydrogen at room temperature for 1 hour after being introduced into a Parr autoclave. After removal of the catalyst and evaporation of the solvent to dryness, the residue was purified by flash chromatography on silica gel using hexane-ethyl acetate (20: 1) as eluent.

Príslušné frakcie boli spojené a rozpúšťadlo bolo potom odparené.Appropriate fractions were combined and the solvent was evaporated.

Bolo získaných 85 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme peny.85 mg of the title compound was obtained as a foam.

184 δ Ch, CDCI3): 9,76 (s, 1H, CHO), 6,08 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,74 (s, 1H, H-ľ), 3,63 a 4,13 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9_r3 Hz), 3,48 (m, 4H, H-4' a 4'OMe), 2,26 (d,· 1H, H-2', J=3,9 Hz), 3,19 (m, 1H, H-5’), 3,13 (d, 1H, H-3', J=3,9 Hz), 3,06 (d, 1H, H-4', J= 8,7 Hz), 2,74 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,8 (CHO), 175,6 (CO₂H), 148,2 (C-3), 130,8 (C-2), 98,0 (C-ľ), 76,5 (C-4'), 74_{3 (8aCH₂), 74,4 (C-3a), 72,5 (C-5’), 65,6 (C-8a), 59,0 (C-4), 58,2 (4'-OMe), 53,6 (C-2'), 50,3 (C-3'), 46,4 (C-1).184 δ (CDCl3): 9.76 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.74 (s, 1H, H-I '), 3.63 and 4.13 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9 _y 3 Hz), 3.48 (m, 4 H, H-4' and 4'OMe), 2.26 ( d, 1H, H-2 ', J = 3.9 Hz), 3.19 (m, 1H, H-5'), 3.13 (d, 1H, H-3 ', J = 3.9 Hz), 3.06 (d, 1H, H-4 &apos;, J = 8.7 Hz), 2.74 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.8 (CHO), 175.6 (CO ₂ H), 148.2 (C-3), 130.8 (C-2), 98.0 (C-1 ') , 76.5 (C-4 '), 74 _{3 (8aCHa _2), 74.4 (C-3), 72.5 (C-5'), 65.6 (C-8), 59.0 (C-4), 58.2 (4'-OMe), 53.6 (C-2 '), 50.3 (C-3'), 46.4 (C-1).

Príklad 50Example 50

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(Ια,3a0,4β,4a0,7β,7aa, 8aβ)]-8a-[(2,3-anhydro-6-deoxy-4-0-metyl-β-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (Ια, 3a0,4β, 4a0,7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-methyl-β-D-manopyranosyloxy)] methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3 (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1 H ) carboxylate

K roztoku, pripravenému rozpustením 310 mg zlúčeniny, pripravenej a opísanej vo vyššie uvedenom príklade 49, v 10 ml metanolu, bolo pridaných 6,69 ml 0,0976 M vodného roztoku hydroxidu sodného a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 2 hodín.To a solution prepared by dissolving 310 mg of the compound prepared and described in Example 49 above in 10 mL of methanol was added 6.69 mL of a 0.0976 M aqueous sodium hydroxide solution, and the resulting mixture was stirred at room temperature for 2 hours. .

Po odstránení rozpúšťadla bol zvyšok rozpustený v 2 ml vody a následne lyofilizovaný.After removal of the solvent, the residue was dissolved in 2 ml of water and then lyophilized.

Bolo získaných 324 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej tuhej látky.324 mg of the title compound was obtained as a white solid.

• δ C H, CDCI3): 9,87 (s, 1 H, CHO), 5,98 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,69 (s,Δ C H, CDCl 3): 9.87 (s, 1H, CHO), 5.98 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.69 (s,

1H, H-ľ), 3,85 a . 4,07 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9,6 Hz), 3,47 (s, 3H, 4'-OMe), 3,26 (d, 1H, H-2', J=3,9 Hz), 3,19 (dq, 1 H, H-5’, J=5,7 a 9 Hz), 3,12 (d, 1H, H-3', J=3,9 Hz), 2,97 (dd, 1H, H-4’, J=0,6 a 8,7 Hz), 2,66 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz); δ (¹¾. CDCI3): 209,6. (CHO), 178,6 (CO₂H), 152,4 (C-3), 130,2 (C-2), 100,1 (Cľ), 78,2 (C-4*), 77,9 (8aCH₂), 73,8 (C-3a), 73,9 (C-5‘), 65,6 (C-8a), 59,2 (C-4),1H, H-1 ', 3.85 and. 4.07 (2d, 2H, 8aCHa _2, J = 9.6 Hz), 3.47 (s, 3H, 4'-OMe), 3.26 (d, 1 H, H-2 ', J = 3, 9 Hz), 3.19 (dq, 1H, H-5 ', J = 5.7 and 9 Hz), 3.12 (d, 1H, H-3', J = 3.9 Hz), 2 97 (dd, 1H, H-4 ', J = 0.6 and 8.7 Hz), 2.66 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz); δ ⁽¹ ¾. CDCl3): 209.6. (CHO), 178.6 (CO ₂ H), 152.4 (C-3), 130.2 (C-2), 100.1 (Cl -), 78.2 (C-4 *), 77, 9 ₍₂ 8aCHa), 73.8 (C-3), 73.9 (C-5 '), 65.6 (C-8), 59.2 (C-4),

58,2 (4'-OMe), 54,6 (C-2'), 51,9 (C-3'), 46,4 (C-1).58.2 (4'-OMe), 54.6 (C-2 '), 51.9 (C-3'), 46.4 (C-1).

Príklad 51Example 51

Príprava kyseliny [lR-(lα,3aβ,4β,4aβ,7β,7aα,8aβ)]-8a-[(2,3epitio-4-O-metyl-2,3,6-trideoxy^-D-manopyranosyloxy)metyl]4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahyd.ro-7-metyl-3 - (l-metyl185 etyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(2,3epithio-4-O-methyl-2,3,6-trideoxy-4-D-manopyranosyloxy) methyl 4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methyl-185 ethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

Zmes 0,67 mmol medziproduktu 52, ktorého príprava je opísaná vyššie, 3,37 mmol 5,5-dimetyl-2-tiol-2-tioxo-l,3,2dioxafosforinanu¹) a 4,02 mmol trietylamínu v 5 ml vysušeného dimetylformamidu, bola zahrievaná pri teplote 100 °C po dobu 48 hodín. Po ochladení bola táto reakčná zmes naliata do vodného éteru. Organická fáza bola odparená a zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (30:1) ako elučného činidla.A mixture of 0.67 mmol of intermediate 52, as described above, 3.37 mmol of 5,5-dimethyl-2-thiol-2-thioxo-1,3,2-dioxaphosphorinan ¹ ) and 4.02 mmol of triethylamine in 5 ml of dried dimethylformamide was heated at 100 ° C for 48 hours. After cooling, the reaction mixture was poured into aqueous ether. The organic phase was evaporated and the residue was purified by flash chromatography using dichloromethane-methanol (30: 1) as eluent.

Bolo získaných 180 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.180 mg of the title compound are obtained.

® δ (¹H, CDCI3): 9,77 (s, 1 H, CHO), 6,08 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4r95 (d, 1H, H-ľ, J=1,8 Hz), 4,15 a 3,65 (d,d, 1H, 1 H, 8a-CH2), J= 9,3 Hz), 3,33 (d, 1 H, H-4', J= 8,7 Hz), 3,18 (m, 1H, H-5’),3,14 (m, 2H, H-2’ a H-3'), 2,70 (m, 1 H, H-1),2,30 (m, 1H, CH(CH3)2); δ (¹³C, CDCI3): 204,7 (CHO), 175,6 (CO2H),148,3 (0-3),130,7 (C-2),98,5 (C-1'), 79,1 (C-4'), 74,1 (8a-CH₂), 73,5 (C5·). 46,6 (C-1 ),35,6 (C-2'),35,2 (C-3'),27,5 (CH(CH₃)₂).Δ ( ¹ H, CDCl 3): 9.77 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4r95 (d, 1H, H-1 ', J = 1.8 Hz), 4.15 and 3.65 (d, d, 1H, 1H, 8a-CH2), J = 9.3 Hz), 3.33 (d, 1 H, H-4 ', J = 8.7 Hz), 3.18 (m, 1H, H-5'), 3.14 (m, 2H, H-2 'and H-3'), 2 70 (m, 1H, H-1), 2.30 (m, 1H, CH (CH 3) 2); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.7 (CHO), 175.6 (CO 2 H), 148.3 (0-3), 130.7 (C-2), 98.5 (C-1 '), 79.1 (C-4 '), 74.1 _(8a-CH2), 73.5 (C5 ·). 46.6 (C-1), 35.6 (C-2 '), 35.2 (C-3'), 27.5 (CH (CH ₃ ) ₂ ).

R. S. Edmundson, Tetrahedron, 21, 2379 (1965).R. S. Edmundson, Tetrahedron, 21, 2379 (1965).

Príklad 52Example 52

Príprava kyseliny [lR-(lα,3aβ,4β,4aβ₎7β,7aα,8aβ)]-8a-[(2,3anhydro-6-deoxy-4-0-propyl-β-D-manopyranosyloxy)metyl]- 4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-Preparation of [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ ₎ 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(2,3anhydro-6-deoxy-4-O-propyl-β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -

1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 400 mg medziproduktu 65, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 100 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 200 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola trepaná po predložení do Parrovho autoklávu pri tlaku 0,140 MPa vodíka, pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha.To a solution of 400 mg of intermediate 65 prepared above in 100 ml of ethyl acetate was added 200 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere, and the resulting mixture was shaken after being placed in a Parr autoclave at 50 psi hydrogen. at room temperature for 1 hour. After filtering off the catalyst, the solvent was evaporated to dryness.

Zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia najskôr dichlórmetánu a potom zmesi dichlórinetán-metanol (25:1) ako elučných činidiel.The residue was purified by flash column chromatography on silica gel using dichloromethane first and then dichloroethane-methanol (25: 1) as eluents.

186186

Bolo získaných 300 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.300 mg of the title compound were obtained as a white foam.

δ (¹ H, CDCI3): 9,76 (s, 1 H, CHO), 6,08 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,72 (s, 1H, H-ľ), 4,13 a 3,65 (2d, 2H, 8a-CH2, J=9 Hz), 3,67 (m, 1H, H-5'), 3,44 (m, 1H, H-4'), 3,25 á 3,12 (2d, 2H, H-2', H-3', J=4,2 Hz), 3,20 (m, 2H, OCH2CH2CH3), 2,74 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,8 (CHO), 175,8 (CO₂H), 130,8 (C-2), 148,2 (C-3), 98,0 (C-ľ), 74,9 (C-4'), 74,3 (C-8aCH₂), 72,6 (C-5*), 72,4 (OCh^C^CH^, C-4'), 65,6 (C-8a), 59,0 (C-3), 54,2 (C-2'), 50,3 (C-3’), 18,6 (C-6').δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.76 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.72 (s , 1H, H-1 ', 4.13 and 3.65 (2d, 2H, 8a-CH 2, J = 9 Hz), 3.67 (m, 1H, H-5'), 3.44 (m, 1H, H-4 '), 3.25 and 3.12 (2d, 2H, H-2', H-3 ', J = 4.2 Hz), 3.20 (m, 2H, OCH 2 CH 2 CH 3), 2 74 (t, 1H, H-1, J = 3.9Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.8 (CHO), 175.8 (CO ₂ H), 130.8 (C-2), 148.2 (C-3), 98.0 (C-1 ') , 74.9 (C-4 '), 74.3 _(C-2 8aCHa), 72.6 (C-5 *), 72.4 (s ^ C ^ CH, C-4'), 65 6 (C-8a), 59.0 (C-3), 54.2 (C-2 '), 50.3 (C-3'), 18.6 (C-6 ').

Príklad 53Example 53

Príprava sodnej soli kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4aP,7β,7aa, 8ηβ)]-8η-[(2,3-anhydro-6-deoxy-4-0-propyl^-D-manopyranosyloxy)mety1]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of sodium salt of [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αP, 7β, 7αa, 8ηβ)] - 8η - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-propyl-4-D-manopyranosyloxy) methyl ] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3 (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) carboxylate

K roztoku 400 mg zlúčeniny, pripravenej a opísanej v rámci vyššie uvedeného príkladu 52, v 30 ml vysušeného metanolu, bolo po kvapkách pridaných 8,15 ml 0,0976 M roztoku hydroxidu sodného pri teplote miestnosti a vzniknutá reakčná zmes bola miešaná po dobu 1 hodiny. Po odparení rozpúšťadla do sucha bol získaný zvyšok vo forme tuhej látky rozpustený v minimálnom množstve vody (10 až 15 ml) a takto pripravený roztok bol potom lyofilizovaný.To a solution of 400 mg of the compound prepared and described in Example 52 above in 30 mL of dried methanol was added dropwise 8.15 mL of 0.0976 M sodium hydroxide solution at room temperature, and the resulting reaction mixture was stirred for 1 hour. . After evaporation of the solvent to dryness, the residue obtained as a solid was dissolved in a minimum amount of water (10 to 15 ml) and the solution was then lyophilized.

Bolo získaných 417 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej tuhej látky.417 mg of the title compound was obtained as a white solid.

δ (¹ H, CDCI3): 9,89 (s, 1 H, CHO), 5,97 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,70 (s, 1H, H-ľ), 4,09 a 3,86 (2d, 2H, 8a-CH2, J=9,7Hz), 3,70 (m, 1H, H-5’), 3,44 (m, 1H, H-4'), 3,24 a 3,12 (2d, 2H, H-2' a H-3’, J= 4 Hz), 3,20 (m, 2H, OCH2CH2CH3), 2,65 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 209,6 (CHO), 178,38 (CO₂Na), 152,4 (C-3), 130,1 (C-2), 100,1 (C-ľ), 77,9 (OCH₂CH.₂CH₃ C-4'), 76,6 (C-4'), 73,5 (C-5'), 73,1 (C-8a-CH₂), 66,6 (C-3'), 18,9 (C-6').δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.89 (s, 1H, CHO), 5.97 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.70 (s 1H, H-1 '), 4.09 and 3.86 (2d, 2H, 8a-CH2, J = 9.7 Hz), 3.70 (m, 1H, H-5'), 3.44 (m , 1H, H-4 '), 3.24 and 3.12 (2d, 2H, H-2' and H-3 ', J = 4 Hz), 3.20 (m, 2H, OCH 2 CH 2 CH 3), 2, 65 (t, 1H, H-1, J = 3.9Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 209.6 (CHO), 178.38 (CO ₂ Na), 152.4 (C-3), 130.1 (C-2), 100.1 (C-1 ') , 77.9 (OCH ₂ CH ₂ CH ₃ C-4 '), 76.6 (C-4'), 73.5 (C-5 '), 73.1 (C-8a-CH ₂ ), 66.6 (C-3 &apos;), 18.9 (C-6 &apos;).

187187

Príklad 54Example 54

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3πβ,4β,4ηβ,7β,7aa,8αβ)]-8a-[(2,3anhydro-4-0-benzyl-6-deoxy-β-D-manopyranosyloxy)metyl]- 4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-ok:tahydro-7-metyl-3- (1-metyletyl) -Preparation of [1R- (Ια, 3πβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8αβ)] - 8α - [(2,3anhydro-4-O-benzyl-6-deoxy-β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-ok: tahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -

1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K suspenzii 22 ml hydridu sodného v 5 ml vysušeného dimetylformamidu, bol pridaný po kvapkách roztok 200 mg medziproduktu 63, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 7 ml vysušeného dimetylformamidu. Vzniknutá reakčná zmes bola miešaná pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny a po neutralizácii s 1 M roztokom 1 M kyseliny chlorovodíkovej bolo pridaných 30 ml etylacetátu.To a suspension of 22 ml of sodium hydride in 5 ml of dried dimethylformamide was added dropwise a solution of 200 mg of intermediate 63, as described above, in 7 ml of dried dimethylformamide. The resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hour and after neutralization with 1 M 1 M hydrochloric acid solution, 30 ml ethyl acetate was added.

Organická fáza bola po oddelení premytá vodou a soľankou, vysušená síranom horečnatým bezvodým a potom bola prefiltrovaná a vysušená do sucha.After separation, the organic phase was washed with water and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, and then filtered and dried to dryness.

Zvyšok bol spracovaný rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (50:1) a (35:1) ako elučného činidla.The residue was flash chromatographed on a silica gel column using dichloromethane-methanol (50: 1) and (35: 1) as eluent.

Bolo získaných 150 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.150 mg of the title compound were obtained as a white foam.

δ (¹ H, CDCI3): 9,86 (s, 1 H. CHO), 7,31 (m, 5H, PhCH2O), 6,08 (dd, 1H. H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,75 (d, 1H, OCH2Ph, J= 11,4 Hz), 4,73 (s, 1H, H-ľ), 4,56 (d, 1H, OCt^Ph, J= 11,4 Hz), 4,17 a 3,62 (2d, 2H, 8a-CH2. ^Hz). ³·³² a 3,14 (2d, 2H, H-3’ a H-2', J=3,7 Hz), 3,30 (m, 2H, H-4', H-5j, 2,71 (t, 1H, H-1); δ (1³C, CDCI3): 204,9 (CHO), 175,8 (COOH), 137,2, 128,14. 128,11 (6CPh), 148,3 (C-3), 130,8 (C-2), 98,0 (C-ľ), 74,4 (C8a-CH2), 74,3 (C-4j, 72,6 (OCH₂Ph), 72,5 (C-5‘), 65,5 (C-8a), 54,0 (C-2'), 50,3 (C-3’), 18,6 (C-6').δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.86 (s, 1H, CHO), 7.31 (m, 5H, Ph CH 2), 6.08 (dd, 1H. H-2, J = 1.2 and 3 3 Hz), 4.75 (d, 1H, OCH 2 Ph, J = 11.4 Hz), 4.73 (s, 1H, H-1 '), 4.56 (d, 1H, OCt 2 Ph, J = 11.4 Hz), 4.17 and 3.62 (2d, 2H, 8a-CH2. ^Hz ). ³ · ³² and 3.14 (2d, 2H, H-3 'and H2', J = 3.7 Hz), 3.30 (m, 2H, H-4, H-5j, 2.71 (t, 1 H, H-1); δ (1 ³ C, CDCl3): 204.9 (CHO), 175.8 (COOH), 137.2, 128.14. 128.11 (6CPH), 148, 3 (C-3), 130.8 (C-2), 98.0 (C-1 '), 74.4 (C8a-CH2), 74.3 (C-4j, 72.6 (OCH ₂ Ph)) 72.5 (C-5 '), 65.5 (C-8a), 54.0 (C-2'), 50.3 (C-3 '), 18.6 (C-6').

Príklad 55Example 55

Príprava kyseliny [lR-(lα,3aβ,4β,4aβ,7β,7aα,8aβ)]-8a-[(2,3anhydro-6-deoxy^-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5, 6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-sindacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(2,3anhydro-6-deoxy-4-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanesindacene-3a- (1H) -carboxylic acid

188188

K suspenzii 75 mg vysušeného hydridu sodného v 5 ml vysušeného dimetylformamidu, bol pridaný v atmosfére dusíka roztok 500 mg medziproduktu 66, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 ml vysušeného dimetylformamidu. Vzniknutá reakčná zmes bola miešaná v atmosfére dusíka po dobu 3 hodín a potom bola reakcia skončená pridaním vody a zneutralizovaním zmesi 0,5 M vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej na pH 6,6 až 7,0.To a suspension of 75 mg of dried sodium hydride in 5 ml of dried dimethylformamide, a solution of 500 mg of intermediate 66, prepared as described above, in 5 ml of dried dimethylformamide was added under a nitrogen atmosphere. The resulting reaction mixture was stirred under a nitrogen atmosphere for 3 hours and then quenched by the addition of water and neutralized with 0.5 M aqueous hydrochloric acid to pH 6.6 to 7.0.

Potom bola reakčná zmes zahustená a získaný zvyšok bol vytrepaný v zmesi (100 ml) voda-etylacetát (1:1). Po oddelení oboch .fáz bola vodná fáza vytrepaná 2 x 20 ml etylacetátu a organické fázy boli spojené a po spracovaní so soľankou boli vysušené síranom horečnatým, prefiltrované a za vákua zahustené na látku sirupovitej konzistencie, ktorá bola prečistená rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu, za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (40:1) ako elučného činidla .The reaction mixture was then concentrated and the residue was taken up in a mixture (100 mL) of water-ethyl acetate (1: 1). After separation of the two phases, the aqueous phase was extracted with 2 x 20 ml of ethyl acetate and the organic phases were combined and after treatment with brine, dried over magnesium sulphate, filtered and concentrated in vacuo to a syrup-like material which was purified by flash chromatography on silica gel. dichloromethane-methanol (40: 1) as eluent.

Bolo získaných 172 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny , vo forme bielej peny.172 mg of the title compound were obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,76 (s, 1 H, CHO), 6,09 (dd, 1H, H-12, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,77 (s, 1H, H-ľ), 3,61 a 4,21 (2d, 2H, 8aCH2, J=9 Hz), 3r60 (d, 1H, H-4', J=8,7 Hz), 3,21 (dq, 1H, H-5’, J=9 a 6 Hz), 3,16 a 3,27 (2d, 2H, H.2'a i H-3’ J=3,6 Hz), 2,70 (t, 1H, H-1); δ (¹³C, CDCI3): 205,5 (CHO), 174,6 (CO2H), 148,4 (C-3), 130,8 (C-2), 97,8 (C-ľ), 74,1 (8aCH₂), 73,9 (C-4'), 73,7 (C-3a), 67,2 (C5'), 65,5 (C-8a), 59,0 (C-4), 56,5 (C-2¹), 50,4 (C-3’), 46,5 (C-1).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.76 (s, 1H, CHO), 6.09 (dd, 1 H, H-12, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.77 (s, 1H, H-1 ', 3.61 and 4.21 (2d, 2H, 8aCH 2, J = 9 Hz), 3r 60 (d, 1H, H-4', J = 8.7 Hz), 3.21 ( dq, 1H, H-5 &apos;, J = 9 and 6 Hz), 3.16 and 3.27 (2d, 2H, H2 ' and H-3 &apos; J = 3.6 Hz), 2.70 ( t, 1H, H-1); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 205.5 (CHO), 174.6 (CO 2 H), 148.4 (C-3), 130.8 (C-2), 97.8 (C-1 '), 74 1, 8 (CH ₂ ), 73.9 (C-4 '), 73.7 (C-3a), 67.2 (C-5'), 65.5 (C-8a), 59.0 (C-4) ), 56.5 (C-2 ^1), 50.4 (C-3 '), 46.5 (C-1).

Príklad 56Example 56

Príprava kyseliny [ÍR-(la,3a3,4β,4aP,7β,7aa,8ap)]-8a-[(2,3anhydro-4,6-dideoxy-4-fluór-β-ϋ-talopyranosyloxy)metyl]-4formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahyd.ro-7-metyl-3- (1-metyletyl) -Preparation of [1R- (1a, 3a3,4β, 4aP, 7β, 7aa, 8ap)] - 8α - [(2,3anhydro-4,6-dideoxy-4-fluoro-β---talopyranosyloxy) methyl] -4-formyl -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -

1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovej1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 130 mg medziproduktu 68, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 30 ml etylacetátu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 100 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho au189To a solution of 130 mg of intermediate 68 described above in 30 ml of ethyl acetate was added 100 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere and the resulting reaction mixture was submitted to Parr au189 under nitrogen.

toklávu trepaná pri tlaku vodíka 0,105 MPa, pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny.shake at a hydrogen pressure of 0.105 MPa at room temperature for 1 hour.

Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla do sucha bol zvyšok spracovaný rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1) a zmesi dichlórmetán-metanol (20:1) ako elučných činidiel.After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, the residue was flash chromatographed on a silica gel column using hexane-ethyl acetate (4: 1) and dichloromethane-methanol (20: 1) as eluents.

Bolo získaných 82 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.82 mg of the title compound was obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,79 (s, 1H, CHO), 6,08 (dd, 1H, H-2, J= 1,2 a 3,6 Hz), 5,13 (s, 1 H, H-ľ), 4,75 a 4,58 (2dq, 1H, H-5', J5-F=48,3 Hz, J=6,6 Hz, J=3,9 Hz), 4,18 a 4,11 (2d, 1 H, H-4', J=3,9 Hz a J4-F=23,1 Hz ), 4,07 a 3,61 (2d, 2H, 8aCH2, J=9,3 HZ), 3,77 (m, 2H, H-2' a H-3'), 2,67 (t, 1H, H-1); δ (¹³C, CDCI3): 204,6 (CHO), 175,3 (CO2H), 148,2 (C-3), 130,7 (C-2), 101,7 (C-ľ), 90,2 (d, C-4', Jc4'-F~ 157 Hz), 80,3 (d, C-5', Jc5'-F= 21,4 Hz), 74,3 (C-8aCH₂),δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.79 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 5.13 (s, 1 H, H-1 ', 4.75 and 4.58 (2dq, 1H, H-5', J 5 -F = 48.3 Hz, J = 6.6 Hz, J = 3.9 Hz), 4, 18 and 4.11 (2d, 1H, H-4 ', J = 3.9 Hz and J4-F = 23.1 Hz), 4.07 and 3.61 (2d, 2H, 8aCH2, J = 9) 3H2), 3.77 (m, 2H, H-2 'and H-3'), 2.67 (t, 1H, H-1); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.6 (CHO), 175.3 (CO 2 H), 148.2 (C-3), 130.7 (C-2), 101.7 (C-1 '), 90 2 (d, C-4 ', J C 4'-F ~ 157 Hz), 80.3 (d, C-5', J C 5'-F = 21.4 Hz), 74.3 (C-8aCH ₂ ) .

73.4 (C-3a), 65,4 (C-8a), 58,9 (C-4), 55,9 (C-2'), 55,1 (d, C-3', Jc3'-F⁼⁶>³ Hz),73.4 (C-3a), 65.4 (C-8a), 58.9 (C-4), 55.9 (C-2 '), 55.1 (d, C-3', J 3 '-F) ^{6 => 3} Hz);

16.4 (d, C-6', J_C6'-F= 21 Hz).16.4 (d, C-6 &apos;, J _C & apos _; 6-F = 21 Hz).

Príklad 57Example 57

Príprava kyseliny [lR-(la,3a3,4p,4a3,7p,7aa,8ap)]-8a-[(2,3anhydro-6-deoxy-4-0- (2-metoxyety'l) -β-D-manopyranosyloxy) metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1metyle tyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)- karboxylovejPreparation of [1R- (1a, 3a3,4p, 4a3,7p, 7aa, 8ap)] - 8a - [(2,3anhydro-6-deoxy-4-O- (2-methoxyethyl)) - β-D- manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 140 mg medziproduktu 69, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 50 ml etylacetátu bolo pridaných v atmosfére dusíka 70 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí. Vzniknutá reakčná zmes bola potom po predložení do Parrovho autoklávu trepaná pri tlaku 0,140 MPa vodíka a pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla do sucha, bol získaný zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia najskôr dichlórmetánu a potom zmesi dichlórmetán-metanol (40:1) ako elučných činidiel.To a solution of 140 mg of intermediate 69 described above in 50 ml of ethyl acetate was added 70 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere. The resulting reaction mixture was then shaken under 50 psi of hydrogen at room temperature for 1 hour after being introduced into a Parr autoclave. After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, the residue was purified by flash column chromatography on silica gel using dichloromethane first and then dichloromethane-methanol (40: 1) as eluents.

Bolo získaných 74 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.74 mg of the title compound was obtained as a white foam.

190 δ (1 Η, CDCI₃): 9,78 (s, 1 Η, CHO), 6,08 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,74 (s,· 1H, H-ľ), 4,23 a 3,60 (2d, 2H, 8a-CH2, J=9 Hz), 3,86-3,50 (m, 4H, OCH2CH2OCH₃), 3,38 (s, 3H, CH₃OCH₂CH₂O), 3,30 a 3,13 (2d, 2H, H-2* a H-3', J=3,9 Hz), 3,26-3,22 (m, 2H, H-4'a H-5'), 2,68 (t, 1 H, H-1, J=3,7 Hz); δ (13c, CDCI₃): 204,8 (CHO), 175,2 (COOH), 148,3 (C-3), 130,8 (C-2),190 δ (1 Η, CDCl ₃ ): 9.78 (s, 1 Η, CHO), 6.08 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.74 (s, 1H, H-1 '), 4.23 and 3.60 (2d, 2H, 8a-CH 2, J = 9 Hz), 3.86-3.50 (m, 4H, OCH 2 CH 2 OCH ₃ ), 3 38 (s, 3H, CH ₃ OCH ₂ CH ₂ O), 3.30 and 3.13 (2d, 2H, H-2 * and H-3 ', J = 3.9 Hz), 3.26- 3.22 (m, 2H, H-4 ' and H-5 &apos;), 2.68 (t, 1H, H-1, J = 3.7 Hz); δ (13c, CDCl ₃ ): 204.8 (CHO), 175.2 (COOH), 148.3 (C-3), 130.8 (C-2),

97,9 (C-1 j, 74,2 (C-8aCH₂), 72,4 (C-5'), 71,7 a 69,9 (OCH₂CH₂OCH₃), 54,1 (C-2j, 50,3 (C-3 j, 46,5 (CH₃OCH₂CH₂), 18,5 (C-6j.97.9 (C-1, 74.2 (C-8aCH ₂ ), 72.4 (C-5 '), 71.7 and 69.9 (OCH ₂ CH ₂ OCH ₃ ), 54.1 (C -2j, 50.3 (C-3j, 46.5 (CH ₃ OCH ₂ CH ₂ )), 18.5 (C-6j).

Príklad 58Example 58

Príprava kyseliny [lR-(la,3ap,4p,4ap,7p,7aa,8ap)]-8a-[(2,3anhydro-6-deoxy-4-0-(2-merylpropy1)-β-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3α, 4α, 4α, 7α, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(2,3-hydrohydro-6-deoxy-4-O- (2-merylpropyl) -β-D-manopyranosyloxy)] methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) carboxylate

K roztoku 0,14 mmol medziproduktu 70, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 30 ml etylacetátu bolo v atmosfére dusíka pridaných 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí. Vzniknutá reakčná zmes bola potom po predložení do Parrovho autok'lávu trepaná pri tlaku 0,175 MPa vodíka a pri teplote miestnosti po dobu 30 minút.To a solution of Intermediate 70 (0.14 mmol) described above in 30 mL of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere. The resulting reaction mixture was then shaken under 50 psi of hydrogen at room temperature for 30 minutes after being introduced into a Parr autoclave.

Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla do sucha, bol získaný zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (40:1) ako elučného činidiel.After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, the residue was purified by flash chromatography using dichloromethane-methanol (40: 1) as eluent.

δ (1 H, CDCI₃): 9,76 (s, 1H, CHO), 6,09 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3,3 Hz), 4,73 (s, 1 H, H-1 j, 4,12 a ^: 3,65 (2d, 2H, 8a-CH2, J=9,3 Hz), 3,49 (m, 1H, H-5’), 3,22 (m, 3H, H-2'a CH2-O), 3,13 (m, 2H, H-3'a H-4'), 2,75 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,33 (m, 1H, CH(CH3)2); δ (¹³C, CDCI3): 204,8 (CHO), 176,0 (CO₂H), 148,2 (C-3), 130,8 (C-2), 98,0 (C-ľ), 77,6 (C-1), 75,2 (C^'), 74,3 (8a-CH₂),δ (1H, CDCl ₃ ): 9.76 (s, 1H, CHO), 6.09 (dd, 1H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.73 (s, 1H, H-1 ', 4.12 and ^: 3.65 (2d, 2H, 8a-CH2, J = 9.3 Hz), 3.49 (m, 1H, H-5'), 3.22 (m, 3H, H-2 ' and CH2-O), 3.13 (m, 2H, H-3 ' and H-4 &apos;), 2.75 (t, 1H, H-1, J = 3, 9 Hz), 2.33 (m, 1H, CH (CH 3) 2); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.8 (CHO), 176.0 (CO ₂ H), 148.2 (C-3) ), 130.8 (C-2), 98.0 (C-1 '), 77.6 (C-1), 75.2 (C-1'), 74.3 (8a-CH ₂ ),

72,9 (C-3a), 72,6 (C-5'), 65,6 (C-8a), 59,0 (C-4), 54,1 (C-2j, 50,4 (C-3’), 46,4 (C-1), 41,7 (C-4a), 41,3 (C-7a):72.9 (C-3a), 72.6 (C-5 '), 65.6 (C-8a), 59.0 (C-4), 54.1 (C-2j), 50.4 (C) -3 '), 46.4 (C-1), 41.7 (C-4a), 41.3 (C-7a):

Príklad 59Example 59

Príprava kyseliny [lR-(lα,3aβ_>4β,4aβ,7β,7aα,8aβ)]-8a-[(2,3anhydro-6 -deoxy-4-O-(1-metyletyl)karbonyl-β-D-manopyranosylPreparation of [1R- (1α, 3αβ _> 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(2,3anhydro-6-deoxy-4-O- (1-methylethyl) carbonyl-β-D-manopyranosyl)

191 oxy)metyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-oktahyd.ro-7-metyl-3(l-metyletyl) -1,4-metán-s-.indacén-3a- (1H) -karboxylovej191 oxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-. indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 140 mg medziproduktu 71, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 20 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 120 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí. Vzniknutá reakčná zmes bola potom po predložení do Parrovho autoklávu trepaná pri tlaku 0,140 MPa vodíka a pri teplote miestnosti po dobu 1 hodiny.To a solution of 140 mg of intermediate 71 described above in 20 ml of ethyl acetate was added 120 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere. The resulting reaction mixture was then shaken under 50 psi of hydrogen at room temperature for 1 hour after being introduced into a Parr autoclave.

Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla do sucha, bol získaný zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexán-etylacetát (4:1) a zmesi dichlórmetán-metanol (20:1) ako elučných činidiel .After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, the residue was purified by flash column chromatography on silica gel using hexane-ethyl acetate (4: 1) and dichloromethane-methanol (20: 1) as eluents.

Bolo získaných 103 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny, vo forme bielej peny.103 mg of the title compound are obtained as a white foam.

δ (1H, CDCI₃): 9,74 (s, 1H, CHO), 6,09 (dd, 1 H, H-2, J= 1,5 a 3,6 Hz), 4,78 (s, 1H, H-ľ), 4,66 (d, 1H, H-4', J=9 Hz), 4,10 a 3,60 (2d, 2H, 8aCH₂, J=9 Hz), 3,42 (dq, 1 H, H-5', J=9 a 3 Hz), 3,15 (s, 2H, H-2' a H-3’), 2,78 (m, 1H, H-1), 2,58 (m, 1H, 4'-OCOCHMe₂); δ (¹³C, CDCI3): 204,9 (CHO), 176,1, 175,.9 (C0₂H a 4'OCOR), 148,2 (C-3), 130,9 (C-2), 97,9 (C-ľ), 74,5 (C-8aCH₂),δ (1H, CDCl ₃ ): 9.74 (s, 1H, CHO), 6.09 (dd, 1H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.78 (s, 1H, H-1 ', 4.66 (d, 1H, H-4', J = 9 Hz), 4.10 and 3.60 (2d, 2H, 8aCH ₂ , J = 9 Hz), 3.42 (dq, 1H, H-5 ', J = 9 and 3 Hz), 3.15 (s, 2H, H-2' and H-3 '), 2.78 (m, 1H, H-1) 2.58 (m, 1H, 4'-OCOCHMe ₂ ); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.9 (CHO), 176.1, 175, .9 (CO ₂ H and 4'OCOR), 148.2 (C-3), 130.9 (C-2) , 97.9 (C-1 '), 74.5 (C-8aCH ₂ ),

72,6 (C-3a), 71,4 (C^'), 67,8 (C-5'), 66,0 (C-8a), 59,0 (C-4), 18,5 a 18,8 (2CH₃ of.ď-OCOCHMe?).72.6 (C-3a), 71.4 (C-4 '), 67.8 (C-5'), 66.0 (C-8a), 59.0 (C-4), 18.5 and 18.8 (2CH _{3 of} ? -OCOCHMe?).

Príklad 60Example 60

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ap,7β,7aa,8ap)]-8a-[(2,3anhydro-6-deoxy-4-0- (2,2-dimetylprop.ionyl) -β-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl3- (1 -inetyletyl) -1,4-inetán-s-indacén-3a- (1H) -karboxylovejPreparation of Acid [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4αb, 7β, 7αa, 8αp)] - 8α - [(2,3anhydro-6-deoxy-4-O- (2,2-dimethylpropionyl) -β- D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-ethylethyl) -1,4-inethane-s-indacen-3a - (1H) -carboxylic acid

K roztoku 0,21 mmol Medziproduktu 72, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 60 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí. Vzniknutá reakčná zmes, predložená do Parrovho autoklávu, bola trepaná pri tlaku 0,140 MPa vodíka a teplote miestnosti po dobu 30 minút.To a solution of 0.21 mmol of Intermediate 72, as described above, in 60 mL of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere. The resulting reaction mixture, introduced into a Parr autoclave, was shaken under 50 psi of hydrogen at room temperature for 30 minutes.

192192

Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla do sucha, bol získaný zvyšok prečistený rýchlou chromatografiou, za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (40:1) ako elučného činidla.After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, the residue was purified by flash chromatography using dichloromethane-methanol (40: 1) as eluent.

Bolo získaných 101 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .101 mg of the title compound are obtained.

δ (¹ H, CDCI3): 9,75 (s, 1H, CHO), 6,10 (dd, 1 H, H-2, J= 1,2 a 3,3 Hz), 4,80 (s, 1 H, H-ľ), 4,64 (d, 1H, H-4’, J= 9 Hz), 4,11 a 3,70 (2d, 2H, 8a-CH2, J= 9,3 Hz), 3,43 (m, 1Η.Ή-5'), 3,13 (m, 2H, H-2' a H-3'), 2,78 (t, 1H, H-1, J= 3,9 Hz), 2,34 (m, 1H, CH(CH3)2); δ (¹³C, CDCI3): 204,9 (CHO), 177,3 a 176,5 (2xCO2), 148,2 (C-3), 130,9 (C-2), 98,0 (C-ľ), 74,5 (8a-CH₂), 72,6 (C-2), 71,3 (C-5¹), 67,9 (C-4'), 65,7 (C-8a), 59,0 (C-4), 54,3 (C-2¹), 50,1 (C-3'), 46,3 (C-1), 41,8 ( C-4a), 41,3 (C-8), 38,8 (C-^{Bu), 32,0 (C-5), 30,9 (C-7), 18,5 (^lBu).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 6.10 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.3 Hz), 4.80 (s, 1 H, H-1 ', 4.64 (d, 1H, H-4', J = 9 Hz), 4.11 and 3.70 (2d, 2H, 8a-CH 2, J = 9.3 Hz) 3.43 (m, 1H, H-5 '), 3.13 (m, 2H, H-2' and H-3 '), 2.78 (t, 1H, H-1, J = 3, 9 Hz), 2.34 (m, 1H, CH (CH 3) 2); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.9 (CHO), 177.3 and 176.5 (2xCO 2), 148.2 (C-3), 130.9 (C-2), 98.0 (C- I '), 74.5 _(8a-CH2), 72.6 (C-2), 71.3 (C-5 ^1), 67.9 (C-4'), 65.7 (C-8) , 59.0 (C-4), 54.3 (C-2 ^1), 50.1 (C-3 '), 46.3 (C-1), 41.8 (C-4), 41, 3 (C-8), 38.8 (C- ⁽ Bu)), 32.0 (C-5), 30.9 (C-7), 18.5 ( ¹ Bu).

Príklad 61Example 61

Príprava kyseliny [lR-(la,3ap,4p,4ap,7p,7aa,8ap)]-8a-[(2,3anhydro-4-0-benzyloxykarbonyl-6-deoxy-p-D-manopyranosyloxy)metyl ] - 4-f ormyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahyd.ro-7-metyl - 3- (1 metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3α, 4α, 4α, 7α, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(2,3anhydro-4-O-benzyloxycarbonyl-6-deoxy-β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-f ormyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

Roztok 0,22 mmol medziproduktu 73, ktorého príprava je opísaná v 10 ml dichlórmetánu, bol reagovaný pri teplote 0 °C s 0,1 ml kyseliny trifluóroctovej. Po 2 hodinách bola takto pripravená reakčná zmes premytá vodou a oddelená organická fáza bola odparená.A solution of 0.22 mmol of intermediate 73, the preparation of which is described in 10 ml of dichloromethane, was treated at 0 ° C with 0.1 ml of trifluoroacetic acid. After 2 hours, the reaction mixture was washed with water and the separated organic phase was evaporated.

Zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou, za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (40:1) ako elučného činidla.The residue was purified by flash chromatography using dichloromethane-methanol (40: 1) as eluent.

Bolo získaných 60 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .60 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,74 (s, 1H, CHO), 7,37 (m, 5H, Ph), 6,09 (dd, 1H, H-2, J=1r5 s 3,6 Hz), 5,20 (m, 2H, CP^Ph), 4,75 (s, 1H, H-ľ), 4,55 (d, 1H, H-4', J=9 Hz), 4,08 a 3,70 (2d, 2H, 8a-CH2, J⁼9 Hz), 3,47 (m, 1H, H-5'), 3,28 a 3,16 (d,d, 1H, 1H, H-2' a H-3', J=3,6 Hz), 2,79 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,33 (m, 1H, CH(CH3)₂); δ (13_C, CDCI3): 204,8 (CHO), 176,4 (CO₂H), 154,1 (CO3), 148,1 (C-3), 134,6 (Cipso), 130,9 (C-2), 128,8, 128,7, 128,5, 128,4 (Ph), 97,8 (C-ľ),δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.74 (s, 1H, CHO), 7.37 (m, 5H, Ph), 6.09 (dd, 1 H, H-2, J = 3.6 Hz p 1R5 ), 5.20 (m, 2H, CP-Ph), 4.75 (s, 1H, H-1 '), 4.55 (d, 1H, H-4', J = 9 Hz), 4.08 and 3.70 (2d, 2H, 8a-CH2, J ⁼ 9 Hz), 3.47 (m, 1H, H-5 '), 3.28 and 3.16 (d, d, 1H, 1H, H -2 'and H-3', J = 3.6 Hz), 2.79 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.33 (m, 1H, CH (CH 3) ₂ ); δ (13 _C , CDCl 3): 204.8 (CHO), 176.4 (CO ₂ H), 154.1 (CO ₃ ), 148.1 (C-3), 134.6 (Cipso), 130.9 (C-2), 128.8, 128.7, 128.5, 128.4 (Ph), 97.8 (C-1 '),

- 193 -- 193 -

74,5 (8a-CH₂), 72,5 (C-3a), 71,6 (C-5'), 71,1 8C-4j, 70,3 (CH₂Ph), 65,7 (C-8a),74.5 (8a-CH ₂ ), 72.5 (C-3a), 71.6 (C-5 '), 71.1 8C-4j, 70.3 (CH ₂ Ph), 65.7 (C -8a)

58,9 (C-4), 53,9 (C-2'), 50,0 (C-3'), 46,2 (C-1), 41,7 (C-4a), 41,3 (C-7a).58.9 (C-4), 53.9 (C-2 '), 50.0 (C-3'), 46.2 (C-1), 41.7 (C-4a), 41.3 (C-7).

Príklad 62Example 62

Príprava kyseliny [lR-(la,3ap,4p,4ap,7p,7aa,8aP)]-8a-[(2,3anhyd.ro- 6-deoxy-4-oxo - β - D-manopyranosyloxy) metyl ] -4-formyl4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (1α, 3αp, 4β, 4αp, 7β, 7αa, 8αβ)] - 8α - [(2,3-Anhydro-6-deoxy-4-oxo-β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4 -formyl4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4metán-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 0,26 mmol medziproduktu 74, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 30 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 50 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí. Vzniknutá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho autoklávu trepaná pri tlaku 0,185 MPa vodíka a teplote miestnosti po dobu 1,5 hodiny.To a solution of 0.26 mmol of intermediate 74 described above in 30 ml of ethyl acetate was added 50 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere. The resulting reaction mixture was shaken at 50 psi of hydrogen at room temperature for 1.5 hours after being introduced into a Parr autoclave.

Príslušné frakcie boli zhromaždené a odparené.The appropriate fractions were collected and evaporated.

Bolo získaných 38 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .38 mg of the title compound are obtained.

δ (¹ H, CDCI3): 9,72 (s, 1 H, CHO), 6,12 (dd, 1 H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,87 (s, 1H, H-ľ), 4,10 a 3,76 (2d, 2H, 8aCH2, J=9 Hz), 3,83 (q, 1H, H-5', J=6,6 Hz), 3,60 a 3,38 (d,d, 1 H, 1 H, 3'a 2', J=3,9 Hz), 2,82 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz),. 2,36 (m, 1H, CH(CH3)2); δ (¹³C, CDCI3): 204,9 (CHO), 202,9 (CO-4¹), 176,2 (CO2H), 148,2 (C-3), 130,9 (C-2), 96,1 (C-ľ), 76,6 (C-5'), 74,7 (8aCH₂), 72,1 (C-3a), 65,7 (C-8a), 58,9 (C-4), 54,2 a 53,5 (C-2¹ a C-3'), 46,1 (C-1), 41,8 (C-4a), 41_r3 (C-7a).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.72 (s, 1H, CHO), 6.12 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.87 (s 1 H, H-1 ', 4.10 and 3.76 (2d, 2H, 8aCH 2, J = 9 Hz), 3.83 (q, 1H, H-5', J = 6.6 Hz), 3 60 and 3.38 (d, d, 1H, 1H, 3 ' and 2 &apos;, J = 3.9 Hz), 2.82 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz) ,. 2.36 (m, 1H, CH (CH 3) 2); δ ⁽¹³ C, CDCl3): 204.9 (CHO), 202.9 (CO-4 ^1), 176.2 (CO2 H), 148.2 (C-3), 130.9 (C-2), 96.1 (C-1 '), 76.6 (C-5'), 74.7 (8aCH ₂ ), 72.1 (C-3a), 65.7 (C-8a), 58.9 (C -4), 54.2 and 53.5 (C-2 and ^C-1 3 '), 46.1 (C-1), 41.8 (C-4), _r 41 3 (C-7).

Príklad 63Example 63

Príprava kyseliny [1R-(Ια,3ηβ,4β,4ηβ,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[(2,3anhydro-4,6-dideoxy-4-metylén^-D-manopyranosyloxy)metyl]4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)- karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2,3anhydro-4,6-dideoxy-4-methylene-4-D-manopyranosyloxy) methyl] 4-formyl -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

Roztok 0,17 mmol medziproduktu 101, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml dichlórmetánu, bol ponechaný reagovať pri teplote 0 °C s 0,15 ml kyseliny trifluóroctovej. PoA solution of 0.17 mmol of intermediate 101, as described above, in 15 ml of dichloromethane was treated at 0 ° C with 0.15 ml of trifluoroacetic acid. After

194194

hodinách bolo k reakčnej zmesi pridaných 10 ml vody a oddelená organická fáza bola odparená a získaný zvyšok bol rozpustený v 15 ml etanolu a 1,5 ml IM roztoku kyseliny chlorovodíkovej a táto zmes bola miešaná pri teplote 0 °C po dobu 2 hodín.After 10 hours, 10 ml of water was added to the reaction mixture, and the separated organic phase was evaporated and the residue was dissolved in 15 ml of ethanol and 1.5 ml of 1M hydrochloric acid and stirred at 0 ° C for 2 hours.

Po odparení rozpúšťadlo bol zvyšok prečistený chromatograf iou za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (20: 1) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent, the residue was purified by chromatography using dichloromethane-methanol (20: 1) as eluent.

Po odparení príslušných frakcií bolo získaných 24 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.Evaporation of the appropriate fractions gave 24 mg of the title compound.

δ (¹H, CDCi3): 9,75 (s, 1H, CHO), 6,08 (dd, 1H, H-2, J=1,2 a 3r3 Hz), 5,20 a 5,10 (s, s, 1H, 1H, CH2=C), 4,82 (d, 1H, H-1, J=2,1 Hz), 4,42 (m, 2H, H-5' a H-3’), 4,19 a 3,56 (d, d, 1H, 1H, 8a-CH2, J=9,6 Hz), 3,65 (m, 1H, H-2'), 2,63 (t, 1H, H-1, J=3,9 Hz), 2,36 (m, 1H, CH(CH3)2); δ (¹³C, CDCI3): 204,7 (CHO), 175,0 (CO₂H), 148,5 (C-3), 145,6 (C-4'), 130,5 (C-2), 112,1 (CH₂=C),δ ⁽¹ H, CDCl 3): 9.75 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 Hz 3R3), 5.20 and 5.10 (p , s, 1H, 1H, CH 2 = C), 4.82 (d, 1H, H-1, J = 2.1 Hz), 4.42 (m, 2H, H-5 'and H-3') 4.19 and 3.56 (d, d, 1H, 1H, 8a-CH2, J = 9.6 Hz), 3.65 (m, 1H, H-2 &apos;), 2.63 (t, 1H H-1, J = 3.9 Hz), 2.36 (m, 1H, CH (CH 3) 2); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.7 (CHO), 175.0 (CO ₂ H), 148.5 (C-3), 145.6 (C-4 '), 130.5 (C-2) ), 112.1 (CH ₂ = C).

99,5 (C-ľ), 74,0 (8a-CH₂), 73,0 (C-5'), 72,8 (C-3a), 72,2 a 71,6 (C-2¹ a C-3’).99.5 (C-1 '), 74.0 (8a-CH ₂ ), 73.0 (C-5'), 72.8 (C-3a), 72.2 and 71.6 (C-21 ⁾ and C-3 ').

Príklad 64Example 64

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ηβ,4β,4ββ,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[(2,3 anhydro-4-0-terc.butylkarbonyl-6-deoxy-β-D-talopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3(1-metyl-etyl) -1,4-metán-s-.indacén-3a- (1H) -karboxylovejPreparation of acid [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4ββ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-4-O-tert-butylcarbonyl-6-deoxy-β-D-talopyranosyloxy) methyl -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methyl-ethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a- (1H) -carboxylic acid

Zmes 0,1 mmol medziproduktu 103, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 2 m]. vody, bola ponechaná reagovať pri teplote 0 °C s 3 ml kyseliny trifluóroctovej. Po uplynutí 90 minút bola vyššie zmienená zmes naliata do 30 ml zmesi etyléter-voda (1:1). Oddelená organická fáza bola odparená a získaný zvyšok bol prečistený chromatograficky za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (40:1) ako elučného činidla.A mixture of 0.1 mmol of intermediate 103, the preparation of which is described above, at 2 m]. of water, was allowed to react at 0 ° C with 3 mL of trifluoroacetic acid. After 90 minutes, the above mixture was poured into 30 mL of ethyl ether-water (1: 1). The separated organic phase was evaporated and the residue was purified by chromatography using dichloromethane-methanol (40: 1) as eluent.

Bolo získaných 32 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .32 mg of the title compound are obtained.

δ (¹H, CDCI3): 9,77 (s, 1H, CHO), 6,08 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,75 (dd, 1 H, H-4’, J=3,6 a 4,8 Hz), 4,68 (s, 1 H, H-ľ), 4,17 (d, 1 H, 8a-CHa, J=9,3 Hz), 3,66 (m, 2H, 8a-CHb a H-5'), 3,57 (t, 1H, H-3', J=4,2 Hz), 3,17 (d, 1H, H2', J=3,6 Hz), 2,73 (t, 1 H, H-1, J=3,9 Hz), 2,33 (m, 1H, CH(CH3)2); δ (¹³C, CDCI3): 204,.8 (CHO), 178,5 a 175,7 (2xCO₂), 148,3 (C-3), 130,8 (C-2), 97,9δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.77 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.75 (dd, 1 H, H-4 ', J = 3.6 and 4.8 Hz), 4.68 (s, 1H, H-1'), 4.17 (d, 1H, 8a-CHa, J = 9, 3 Hz), 3.66 (m, 2H, 8a-CHb and H-5 '), 3.57 (t, 1H, H-3 &apos;, J = 4.2 Hz), 3.17 (d, 1H) H 2, J = 3.6 Hz), 2.73 (t, 1H, H-1, J = 3.9 Hz), 2.33 (m, 1H, CH (CH 3) 2); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204, .8 (CHO), 178.5 and 175.7 (2xCO ₂ ), 148.3 (C-3), 130.8 (C-2), 97.9.

195 (C-ľ), 74/1 (8a-CH₂), 73,0 (C-3a), 71,5 (C-5’), 66,0 (C-4¹), 65,6 (C-8a), 59,0 (C4), 51,3 (C-2’), 50,7 (C-3¹).195 (C-I '), 74/1 _(8a-CH2), 73.0 (C-3), 71.5 (C-5'), 66.0 (C-4 ^1), 65.6 ( C-8), 59.0 (C-4), 51.3 (C-2 '), 50.7 (C-3 ^1).

Príklad 65Example 65

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια , 3αβ , 4β,4ap,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[(2,3anhydro-4-0- (trans-2-butenyl) -6-deoxy^-D-manopyranosyloxy) metyl]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1metyl-etyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (Ια, 3αβ, 4β, 4αp, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2,3anhydro-4-O- (trans-2-butenyl) -6-deoxy-4-D-manopyranosyloxy) (Methyl) -4-Forms of -4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methyl-ethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a- (1H) -carboxylic acid

Roztok 103 mg medziproduktu 47, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 ml vysušeného dichlórmetánu, bol ponechaný reagovať pri teplote 0 °C so 100 ml kyseliny trifluóroctovej. Po uplynutí 1 hodiny bola uvedená reakčná zmes vytrepaná medzi 50 ml etylacetátu a 50 ml nasýteného vodného roztoku síranu sodného. Oddelená organická fáza bola premytá nasýteným vodným roztokom síranu sodného, vodou a soľankou a potom bola vysušená a odparená.A solution of 103 mg of intermediate 47, as described above, in 5 ml of dried dichloromethane was allowed to react at 0 ° C with 100 ml of trifluoroacetic acid. After 1 hour, the reaction mixture was partitioned between 50 mL of ethyl acetate and 50 mL of saturated aqueous sodium sulfate. The separated organic phase was washed with saturated aqueous sodium sulfate, water and brine, and then dried and evaporated.

Zvyšok bol 2 x chromatografovaný na silikagéli za použitia zmesi hexán-etylacetát (2:1) až (1:1) ako elučného činidla. Bolo získaných 50 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny.The residue was chromatographed twice on silica gel using hexane-ethyl acetate (2: 1) to (1: 1) as eluent. 50 mg of the title compound are obtained.

δ (¹ H, CDCI3): 9,76 (s, 1 H, CHO), 6,08 (dd, 1H, H-2, J=1,5 a 3,6 Hz), 5,825,68 (m, 1 H, CH=CH), 5,62-5,48 (m, 1 H, CH=CH), 4,72 (s, 1 H, H-ľ), 4,2-4,1 (m, 2H, O-CHa-C=C a 8a-CHa), 4,02-3,92 (m, 1H, OCHb-C=C), 3,63 (d, 1 H, 8aCHb, J=9.3 Hz), 3,3-3,15 (m, 3H, H-3’, H-4¹ a H-5’), 3,12 (d, 1H, H-2', J^3,9 Hz), 2,73 (t, 1H, H-ľ, J=3,9 Hz), 1,72 (dd, 3H, H3C-C=C, J=1,2 a 6,6 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,8 (CHO), 175,6 (CO₂H), 148,2 (C-3), 130,8 (C-2), 131,1 aδ ⁽¹ H, CDCl3): 9.76 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1 H, H-2, J = 1.5 and 3.6 Hz), 5,825,68 (m, 1 H, CH = CH), 5.62-5.48 (m, 1H, CH = CH), 4.72 (s, 1H, H-1 '), 4.2-4.1 (m, 2H, O-CHa-C = C and 8a-CHa), 4.02-3.92 (m, 1H, OCHb-C = C), 3.63 (d, 1H, 8aCHb, J = 9.3 Hz) , 3.3-3.15 (m, 3H, H-3 ', 4-H ¹ and H-5'), 3.12 (d, 1 H, H-2 ', J ^ 3.9 Hz); 2.73 (t, 1H, H-1 ', J = 3.9 Hz), 1.72 (dd, 3H, H 3 C-C = C, J = 1.2 and 6.6 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.8 (CHO), 175.6 (CO ₂ H), 148.2 (C-3), 130.8 (C-2), 131.1 and

126,6 (O-CH₂-C=C-CH3), 97,9 (C-ľ), 74,2 (8a-CH₂), 71,2 (O-CH₂-C=C-CH₃),126.6 (O-CH ₂ -C = C-CH 3), 97.9 (C-1 '), 74.2 (8a-CH ₂ ), 71.2 (O-CH ₂ -C = C-CH ₃₎ )

73,5 a 72,5 (C^ľ a C-5').73.5 and 72.5 (C 1 H and C-5 ').

Príkltíd 66Example 66

Príprava kyseliny [lR-(lα,3aβ,4β,4aβ,7β,7aα,8aβ)]-8a-[(2,3anhydro-6-deoxy-4-0-propyl^-D-talopyranosyloxy)metyl] -4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-ok tahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(2,3anhydro-6-deoxy-4-O-propyl-4-D-talopyranosyloxy) methyl] -4-formyl- 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-ocahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3a- (1H) -carboxylic acid

196196

K roztoku 150 mg (0,21 mmol) medziproduktu 104, ktorého príprtiva je opísaná vyššie, v 50 ml etanolu, 10 ml etylacetátu a 1 ml 1 M roztoku kyseliny chlorovodíkovej, bolo v atmosfére dusíka pridaných 30 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí. Vzniknutá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho autoklávu trepaná pri tlaku 0,245 MPa a teplote miestnosti po dobu 3 hodín. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha a zvyšok bol prečistený chromatogra.fiou za použitia zmesi dichlórme tán-metanol (30: 1) ako elučného činidla.To a solution of Intermediate 104 (150 mg, 0.21 mmol), as described above, in 50 mL of ethanol, 10 mL of ethyl acetate, and 1 mL of a 1 M hydrochloric acid solution was added 30 mg of 10% palladium on active carbon under nitrogen. coal. The resulting reaction mixture was shaken at 0.245 MPa at room temperature for 3 hours after being introduced into a Parr autoclave. After filtering off the catalyst, the solvent was evaporated to dryness and the residue was purified by chromatography using dichloromethane / methanol (30: 1) as eluent.

Bolo získaných 60 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .60 mg of the title compound are obtained.

δ (¹ H, CDCI3): 9,83 (s, 1 H, CHO), 6,06 (dd, 1 H, H-2, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,75 (s. 1 H, H-ľ), 4,44 a 3,42 (dd, 2H, 8a-CH2; J=9,3 Hz), 4,37 (t, 1H, H-3', J=2,7 Hz), 4,10 (m, 1H, H-4'), 3,74-3,65 (m, 2H, CH2O), 3,91 (m, 1H, H-5'), 3,19 (m, 1H, H-2'), 2,51 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 204,7 (CHO), 174,9 (CO2H), 148,6 (C-3), 130,4 (C-2), 97,9 (C-ľ), 78,7 (C-4'), 73,9 (8a-CH₂), 73,3 (CH₂O), 69,8 (C-5’), 69,3 (C-3'), 65,3 (C-8a), 59,0 (C-4), 54,6 (C-2'), 47,0 (C-1).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.83 (s, 1H, CHO), 6.06 (dd, 1 H, H-2, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.75 (s 1 H, H-1 ', 4.44 and 3.42 (dd, 2H, 8a-CH 2; J = 9.3 Hz), 4.37 (t, 1H, H-3', J = 2, 7 Hz), 4.10 (m, 1H, H-4 &apos;), 3.74-3.65 (m, 2H, CH2 O), 3.91 (m, 1H, H-5 &apos;), 3.19 (m, 1H, H-2 &apos;), 2.51 (t, 1H, H-1, J = 3.6 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 204.7 (CHO), 174.9 (CO 2 H), 148.6 (C-3), 130.4 (C-2), 97.9 (C-1 '), 78 7 (C-4 '), 73.9 (8a-CH ₂ ), 73.3 (CH ₂ O), 69.8 (C-5'), 69.3 (C-3 '), 65, 3 (C-8a), 59.0 (C-4), 54.6 (C-2 '), 47.0 (C-1).

Príklad 67Example 67

Príprava kyseliny [ ÍR- (Ια , 3ηβ,4β,4ap,7β,7aa,83β)]-8a-[(2,3anhydro-4-azid-6,4-dideoxy^-D-manopyranosyloxy)metyl]-4formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl- 3-(1-metyletyl) -1,4-metán-s-indacén-3a.- (1H) -karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4β, 4β, 7β, 7aa, 83β)] - 8α - [(2,3anhydro-4-azide-6,4-dideoxy-4-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl- 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3α- (1H) -carboxylic acid

Roztok 0,06 mmol medziproduktu 106, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 ml vysušeného dichlórmetánu, bol pri teplote 0 °C ponechaný reagovať so 70 μΐ kyseliny trifluóroctovej. Po uplynutí 2 hodín bola vyššie uvedená reakčná zmes premytá vodou a soľankou.A solution of 0.06 mmol of intermediate 106, as described above, in 5 ml of dried dichloromethane was allowed to react at 70C with 70 μΐ of trifluoroacetic acid. After 2 hours, the above reaction mixture was washed with water and brine.

Po odparení rozpúšťadla bol zvyšok prečistený chromatograf iou za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (30: 1) ako elučného činidla.After evaporation of the solvent, the residue was purified by chromatography using dichloromethane-methanol (30: 1) as eluent.

Bolo získaných 12 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny .12 mg of the title compound are obtained.

δ <¹ H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 6,09 (d, 1H, H-2, J=3,6 Hz), 4,73 (s, 1H, Hδ < ¹ H, CDCl 3): 9.73 (s, 1H, CHO), 6.09 (d, 1H, H-2, J = 3.6 Hz), 4.73 (s, 1H, H

197197

ľ), 4,12 a 3,67 (d, d, 1H, 1H, 8a-CH₂, J=9 Hz), 3,39 (d. 1H, H-4', J=9 Hz), 3,33 a 3,17 (d, d, 1H, 1H, H-2' s H-3', J=3,6 Hz), 3,22 (m, 1H, H-5'), 2,76 (t, 1H, H-1, J=3,6 Hz), 2,34 (m, 1H, CH(CH₃)₂); δ (¹³C, CDCI3): 205,1 (CHO), 175,3 (CO₂H), 148,4 (C-3), 130,8 (C-2), 97,8 (C-ľ), 74,6 (8a-CH₂), 72,7 (C-5'), 68,0 (C-3a), 65,7 (C-8a), 59,0 (C-4), 58,7 (C-4'), 54,4 (C-2'), 50,1 (C-3'), 46,3 (C-1).I '), 4.12 and 3.67 (d, d, 1 H, 1 H, _8a-CH2, J = 9 Hz), 3.39 (d. 1H, H-4', J = 9 Hz), 3 33 and 3.17 (d, d, 1H, 1H, H-2 ' s H-3 &apos;, J = 3.6 Hz), 3.22 (m, 1H, H-5 &apos;), 2.76 (t, 1 H, H-1, J = 3.6 Hz), 2.34 (m, 1 H, CH _{(CH3) 2);} δ ( ¹³ C, CDCl 3): 205.1 (CHO), 175.3 (CO ₂ H), 148.4 (C-3), 130.8 (C-2), 97.8 (C-1 ') , 74.6 _(8a-CH2), 72.7 (C-5 '), 68.0 (C-3), 65.7 (C-8), 59.0 (C-4), 58, 7 (C-4 &apos;), 54.4 (C-2 &apos;), 50.1 (C-3 &apos;), 46.3 (C-1).

Príklad 68Example 68

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3a@,4β,4ηβ,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[(4aly1-2,3-anhydro-6-deoxy-β-D-manopyranosyloxy)metyl]-4formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (Ια, 3α @, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(4α1-2,3-anhydro-6-deoxy-β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl- 4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

Roztok 250 mg medziproduktu 107, ktorého príprava je opisamá vyššie, v 10 ml dichlórmetánu a 0,2 ml kyseliny trifluóroctovej, bol miešaný pri teplote 0 °C po dobu 4 hodín. Reakčná zmes bola odparená potom do sucha a zvyšok bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (50:1) ako elučného činidla.A solution of 250 mg of intermediate 107, the preparation of which is described above, in 10 ml of dichloromethane and 0.2 ml of trifluoroacetic acid was stirred at 0 ° C for 4 hours. The reaction mixture was then evaporated to dryness and the residue was purified by flash chromatography eluting with dichloromethane-methanol (50: 1).

Bolo získaných 140 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej peny.140 mg of the title compound are obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,77 (s, 1 H, CHO), 6,08 (dd, 1H, H-12, J= 1,2 a 3,3 Hz), 5,90 (m, 1H, CH=CH₂), 5,28 (m, 2H, CH=CH₂), 4,75 (s, 1 H, H-ľ), 4,28 (m, 1 H, H-5'), 4,21 (d, 1H, H-19a, J=9,6 Hz), 4,05 (m, 1H, H-4'), 4,05 (m, 1 H, H-4'), 3,60 (d, φ 1H, H-19b, J=9,6 Hz), 3,27, 3,14 (d, d, 1H, 1H, H-2', H-3', J=3,9 Hz), 3,25 (m,δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.77 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1 H, H-12, J = 1.2 and 3.3 Hz), 5.90 (m, 1H, CH = CH ₂ ), 5.28 (m, 2H, CH = CH ₂ ), 4.75 (s, 1H, H-1 '), 4.28 (m, 1H, H-5') 4.21 (d, 1H, H-19a, J = 9.6 Hz), 4.05 (m, 1H, H-4 '), 4.05 (m, 1H, H-4'), 3.60 (d, 1H, H-19b, J = 9.6 Hz), 3.27, 3.14 (d, d, 1H, 1H, H-2 &apos;, H-3 &apos;, J = 3) 9 Hz), 3.25 (m,

2H, CH₂-CH=CH₂), 2,68 (t, 1 H, H-11, J=4.2 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 205,07(CHO),2H, CH ₂ CH = CH _2), 2.68 (t, 1H, H-11, J = 4.2 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 205.07 (CHO),

174,6 (CO₂H), 148,4 (C-13), 133,7 (CH=CH₂), 129,7 (C-12), 118,0 (CH₂=CH), 97,8 (C-ľ), 74,17 (C-19), 74,04 (C-4'), 72,5 (C-5¹), 71,0 (O-CH₂-CH=CH₂), 54,1 (C-2'), 50,2 (C-3'), 27,5 (C-14), 22,7 (C-20), 21,2 (C-15), 18,6 (C-6'), 17,4 (C17).174.6 _(CO2 H), 148.4 (C-13), 133.7 (CH = _CH2), 129.7 (C-12), 118.0 (CH ₂ = CH), 97.8 (C-I '), 74.17 (C-19), 74.04 (C-4'), 72.5 (C-5 ^1), 71.0 (O-CH ₂ -CH = CH _2), 54.1 (C-2 '), 50.2 (C-3'), 27.5 (C-14), 22.7 (C-20), 21.2 (C-15), 18.6 (C-6 &apos;), 17.4 (C17).

Príklad 69Example 69

Príprava kyseliny [lR-(lα₎3aβ,4β,4aβ,7β,7aα,8aβ)]-8a-[(2,3anhydro-6-deoxy-4-0-terc.butoxykarbonylmetyl-β-D-manopyranosyloxy) metyl ] -4-,f ormyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl3- (1-metyl.etyl) -1,4-metán-s-indacén-3a- (1H) -karboxylovejAcid preparation [1R- (1α ₎ 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(2,3anhydro-6-deoxy-4-O-tert-butoxycarbonylmethyl-β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-, formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacen-3a- ( 1H) -carboxylic acid

198198

K roztoku 200 mg medziproduktu 21, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 15 ml vysušeného tetrahydrofuránu, bol pridaný pri teplote 0 °C hydrid sodný (30 mg). Vzniknutá reakčná zmes bola potom miešaná pri teplote 0 °C v prostredí dusíka po dobu 30 minút a potom bolo pridaných 260 μΐ terc.butylbrómacetátu a zmes bola miešaná v atmosfére dusíka pri teplote miestnosti po dobu 3 dní. Potom bola surová zmes ponechaná reagovať s 1 M roztokom chloridu amónneho a bol pridaný etylacetát. Oddelená organická fáza bola premytá vodou a solankou a odparená do sucha.To a solution of 200 mg of intermediate 21 described above in 15 ml of dried tetrahydrofuran was added sodium hydride (30 mg) at 0 ° C. The resulting reaction mixture was then stirred at 0 ° C under nitrogen for 30 minutes, then 260 µL of tert-butyl bromoacetate was added and the mixture was stirred under nitrogen at room temperature for 3 days. The crude mixture was then treated with 1 M ammonium chloride solution and ethyl acetate was added. The separated organic phase was washed with water and brine and evaporated to dryness.

Zvyšok bol hydrogenovaný a potom bol spracovaný štandardnými postupmi. Surový materiál bol prečistený rýchlou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (50:1) ako elučného činidla.The residue was hydrogenated and then worked up by standard procedures. The crude material was purified by flash chromatography using dichloromethane-methanol (50: 1) as eluent.

Bolo získaných 140 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej peny.140 mg of the title compound are obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,74 (s, 1H, CHO), 6,08 (dd, 1H, H-12, J=1,5 a 3,9 Hz), 4,74 (s, 1H, H-ľ), 4,21 (dd, 1H, H-4', J= 3,6 a 6,0 Hz), 4,16 (d, 1H, H-19a, J=9 Hz), 4,12 (s, 2H, CH2,-CO2C(CH3)3), 3,63 (d, 1H, H-19b, J=9 Hz), 3,36, 3,14 (d, d, 1H, 1H, H-2', H-3', J=3,9 Hz), 3,30 (m, 1H, H-5’), 2,71 (t, 1 H, H-11, J=3,9 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 205,7 (CHO), 174,9 (CO2C(CH₃)3), 168,8 (CO₂H), 148,4 (C-13), 130,8 (C-12), 97,8 (C-ľ), 82,2 (C(CH₃)₃), 75,6 (C-4‘), 72,4 (C-5'), 68,2 (OCH₂-CO), 59,0 (C-3), 53,9 (C-2'), 50,3 (C-3'), 27,5 (C-14), 22,7 (C-20), 21,2 (C-15), 18,6 (C-6'), 17,4 (C-17).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.74 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1 H, H-12, J = 1.5 and 3.9 Hz), 4.74 (s, 1 H H-1 ', 4.21 (dd, 1H, H-4', J = 3.6 and 6.0 Hz), 4.16 (d, 1H, H-19a, J = 9 Hz), 4 12 (s, 2H, CH 2, -CO 2 C (CH 3) 3), 3.63 (d, 1H, H-19b, J = 9 Hz), 3.36, 3.14 (d, d, 1H, 1H) H-2 ', H-3', J = 3.9 Hz), 3.30 (m, 1H, H-5 '), 2.71 (t, 1H, H-11, J = 3, 9 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 205.7 (CHO), 174.9 (CO ₂ C (CH ₃ ) 3), 168.8 (CO ₂ H), 148.4 (C-13), 130.8 (C -12), 97.8 (C-1 '), 82.2 (C (CH ₃ ) ₃ ), 75.6 (C-4'), 72.4 (C-5 '), 68.2 (OCH) _2- CO), 59.0 (C-3), 53.9 (C-2 '), 50.3 (C-3'), 27.5 (C-14), 22.7 (C-20) 21.2 (C-15), 18.6 (C-6 '), 17.4 (C-17).

Príklad 70Example 70

Príprava kyseliny [ÍR-(la,3aβ,4β,4αβ,7β,7aa,8a3)]-8a-[(2,3anhydro-6-deoxy-4-0-etyl^-D-manopyranosyloxy)metyl]-4,4a,5, 6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-sindacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7aa, 8a3)] - 8α - [(2,3anhydro-6-deoxy-4-O-ethyl-4-D-manopyranosyloxy) methyl] -4, 4a, 5, 6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanesindacene-3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 290 mg medziproduktu 21, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 5 ml vysušeného dimetylformamidu, bolo pridaných v atmosfére dusíka a pri teplote 0 °C 25 mg hydridu sodného. Vzniknutá reakčná zmes bola potom miešaná pri teplote 0 °C po dobu 30 minút a potom bol k nej pridaný 1To a solution of 290 mg of intermediate 21 described above in 5 ml of dried dimethylformamide was added 25 mg of sodium hydride under nitrogen and at 0 ° C. The resulting reaction mixture was stirred at 0 ° C for 30 minutes and then added at rt

199199

mmol etyljodidu. Po 16 hodinách miešania pri teplote miestnosti bola reakcia skončená a k surovej zmesi bol pridaný 1 M roztok chloridu amónneho a etylacetát.mmol of ethyl iodide. After stirring at room temperature for 16 hours, the reaction was complete and 1 M ammonium chloride solution and ethyl acetate were added to the crude mixture.

Po oddelení bola organická fáza premytá vodou a soľankou, vysušená bezvodým síranom horečnatým a odparená do sucha. Zvyšok bol po hydrogenácii spracovaný štandardnými postupmi a surový materiál bol prečistený rýchlou chromatograf iou za použitia zmesi dichlórmetán-metanol (50: 1) ako elučného činidla.After separation, the organic phase was washed with water and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate and evaporated to dryness. The residue was treated with hydrogenation using standard procedures and the crude material was purified by flash chromatography using dichloromethane-methanol (50: 1) as eluent.

Bolo získaných 180 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny vo forme bielej peny.180 mg of the title compound are obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,73 (s, 1H, CHO), 6,08 (d, 1H, H-12, J=3,3 Hz), 4,73 (s, 1H, Hľ), 4,16 (d, 1H, H-19a, J=9,3 Hz), 3,78, 3,54 (m, m, 1H, 1H, O-CH2-CH3), 3,63 (s, 1H, H-19b, J=9,3 Hz), 3r25, 3,13 (d, d, 1H, 1H, H-2*, H-3', J=3,9 Hz), 3,19 (m, 2H, H-4', H-5'), 2,71 (t, 1H, H-11, J=3,3 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 201,8 (CHO), 175,0 (CO2H), 148,2 ( C-13), 130,7 (C-12), 97,9 (C-ľ), 74,6 (C^j, 74,3 (C-19),δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.73 (s, 1H, CHO), 6.08 (d, 1 H, H-12, J = 3.3 Hz), 4.73 (s, 1 H, H), 4.16 (d, 1H, H-19a, J = 9.3 Hz), 3.78, 3.54 (m, m, 1H, 1H, O-CH2-CH3), 3.63 (s, 1H H-19b, J = 9.3 Hz), 3.15, 3.13 (d, d, 1H, 1H, H-2 ', H-3', J = 3.9 Hz), 3.19 (m 2H, H-4 &apos;, H-5 &apos;), 2.71 (t, 1H, H-11, J = 3.3 Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 201.8 (CHO), 175.0 (CO 2 H), 148.2 (C-13), 130.7 (C-12), 97.9 (C-1 '), 74 Δ (C (j ^, 74.3 (C-19)),

72,5 (C-5j, 54,3 (C-2j, 50,3 (C-3'), 27,5 (C-14), 22,7 (C-20), 21,2 (C-15), 18,6 (C-6j, 17,4 (C-17).72.5 (C-5j), 54.3 (C-2j, 50.3 (C-3 '), 27.5 (C-14), 22.7 (C-20), 21.2 (C- 15), 18.6 (C-6), 17.4 (C-17).

Príklad 71Example 71

Príprava kyseliny [ÍR-(la,3ap,4β,4ηβ,7β,7aa,8ap)]-8a-[(2,3anhydro-6-deoxy-4-0-(2,3-dihydroxypropyl)-β-D-manopyranosyloxy) metyl ]-4-formy1-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3(1-metyletyl) -1,4-metán-s - .indacén-3a- (1H) -karboxylovejPreparation of acid [1R- (1α, 3αp, 4β, 4ηβ, 7β, 7aa, 8αp)] - 8α - [(2,3anhydro-6-deoxy-4-O- (2,3-dihydroxypropyl) -β-D- manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanes-indacen-3a - (1H) -carboxylic acid

K roztoku 700 mg medziproduktu 108, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 100 ml etanolu, bolo pridaných v atmosfére dusíka 350 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí a vzniknutá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho autoklávu trepaná pri teplote miestnosti a tlaku 0,140 MPa vodíka po dobu 1 hodiny. Po odfiltrovaní katalyzátora bolo rozpúšťadlo odparené do sucha a zvyšok bol prečistený chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia dichlórmetánu a zmesi dichlórmetán-metanol (25:1) ako elučných činidiel.To a solution of 700 mg of intermediate 108 prepared above in 100 ml of ethanol was added under a nitrogen atmosphere 350 mg of 10% palladium on charcoal and the resulting mixture was shaken at room temperature and pressure of 0.140 after being introduced into a Parr autoclave. MPa of hydrogen for 1 hour. After filtering off the catalyst, the solvent was evaporated to dryness and the residue was purified by silica gel column chromatography using dichloromethane and dichloromethane-methanol (25: 1) as eluents.

Bolo získaných 425 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny (zmes izomérov 50:50) vo forme bieleho prášku.425 mg of the title compound (50:50 mixture of isomers) was obtained as a white powder.

200 δ (¹Η, CDCI₃): 9,75 (s, 1 Η, CHO), 6,08 (dd, 1 H. H-12, J=1,2 a 3,6 Hz), 4,73 (s, 1H, H-ľ), 3,98 (d, 1H, H-19a, J=9.6 Hz), 3,81 ( d, 1 H, H-19b, J=9,6 Hz), 3,81-3,68 (m, 2H, -OCH^-CHOH v C-4'), 3,55-3,31 (m, 3H, -CHOH-CH2OH v C-4'), 3,30-3,11 (m, 4H, H-2', H-3’, H-4', H-5'), 2,76 (t, 1H, H-11, J=3,6 Hz); δ (13_C, CDCI3): 207,70 (CHO), 178,2 (CO₂H), 150,49 (C-13), 131,44 (C-12), 99,81 (C-ľ), 77,07 a 76,96 (CH-CH₂OH v C-4’), 76,57 (C-19), 73,55 (C-4'), 72,86 a 72,69 (O-CH₂-CHOH v C-4'), 72,24 (C-5'), 55,01 (C-3'), 51,89 (C2'), 23,2 (C-20), 21,6 (C-15), 19,4 (C-6'), 17,9 (C-17).200 δ ( ¹ Η, CDCl ₃ ): 9.75 (s, 1 Η, CHO), 6.08 (dd, 1H, H-12, J = 1.2 and 3.6 Hz), 4.73 (s, 1H, H-1 '), 3.98 (d, 1H, H-19a, J = 9.6 Hz), 3.81 (d, 1H, H-19b, J = 9.6 Hz), 3 , 81-3.68 (m, 2H, -OCH3 -CHOH in C-4 '), 3.55-3.31 (m, 3H, -CHOH-CH2OH in C-4'), 3.30- 3.11 (m, 4H, H-2 ', H-3', H-4 ', H-5'), 2.76 (t, 1 H, H-11, J = 3.6 Hz); δ (13 _C , CDCl 3): 207.70 (CHO), 178.2 (CO ₂ H), 150.49 (C-13), 131.44 (C-12), 99.81 (C-1 ') , 77.07 and 76.96 (CH-CH ₂ OH in C-4 '), 76.57 (C-19), 73.55 (C-4'), 72.86 and 72.69 (O- CH ₂ -CHOH in C-4 '), 72.24 (C-5'), 55.01 (C-3 '), 51.89 (C2'), 23.2 (C-20), 21, 6 (C-15), 19.4 (C-6 '), 17.9 (C-17).

Príklad 72Example 72

Príprava kyseliny [ÍR- (Ια,3ηβ,4β,4ap,7β,7aa,8ηβ)]-8a-[(2,3anhydro-6-deoxy-4-0-(2,3-dimetoxypropyl)-β-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén-3a-(1H)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (Ια, 3ηβ, 4β, 4αp, 7β, 7aa, 8ηβ)] - 8α - [(2,3anhydro-6-deoxy-4-O- (2,3-dimethoxypropyl) -β-D- mannopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (l-methylethyl) -1,4-methano-s-indacene-3a (1H) -carboxylic acid

K roztoku 350 mg medziproduktu 108, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 20 ml vysušeného tetrahydrofuránu, bolo v atmosfére dusíka a pri teplote 0 °C pridaných 40 mg hydridu sodného. K vzniknutej zmesi, ktorá bola miešaná po dobu 30 minút, bolo potom pridaných 0,5 ml metyljodídu a zmes bola miešaná v atmosfére dusíka pri teplote miestnosti po dobu 2 dni. K surovej zmesi bol potom pridaný 1 M roztok chloridu amónneho a etylacetát.To a solution of 350 mg of intermediate 108 described above in 20 ml of dried tetrahydrofuran was added 40 mg of sodium hydride under nitrogen and at 0 ° C. To the resulting mixture, which was stirred for 30 minutes, 0.5 ml of methyl iodide was added and the mixture was stirred under nitrogen at room temperature for 2 days. To the crude mixture was then added 1 M ammonium chloride solution and ethyl acetate.

Oddelená organická vrstva bola premytá vodou a solankou a potom bola vysušená do sucha. Zvyšok bol po hydrogenácii spracovaný štandardnými postupmi a bez ďalšieho predbežného čistenia bolo získaných 225 mg žiadanej, v nadpise uvedenej zlúčeniny (zmes izomérov 50:50), vo forme bielej peny.The separated organic layer was washed with water and brine and then dried to dryness. The residue was subjected to hydrogenation by standard procedures and without further purification, 225 mg of the title compound (50:50 mixture of isomers) was obtained as a white foam.

δ (1 H, CDCI3): 9,75 (s, 1H, CHO), 6,08 (d, 1H, H-12, J=3,3 Hz), 4,73 (d, 1H, Hľ, J=1,5 Hz), 4,18 (d, 1H, H-19b, J=9 Hz), 3,62 (d, 1H, H-19b, J=9 Hz), 3,48 a 3,47(s, s, 3H, 3H, CH₂0Me, CHOMe), 3,36-3,20 (m, 4H, H-2', H-3', H-4', H5'), 2,70 (t, 1H, H-11, J=3,6 Hz); δ (¹³C, CDCI3): 205,2 (CHO), 174,7 (CO2H), 148,4 (C-11), 130,7 (C-12), 97,9 (C-ľ), 79,0 (CHOMe v C-4'), 75,6 a 75,7 (C-4'), 72,4 (C-5'), 71,6 a 71T5 (OCH2-CHOMe v C-4¹), 70,1 a 69,8 (CH2OMe vi C-4'), 59,2, 57,9 a 57,8 (-CHOMe a -CH₂OMe v C-4'), 53,9 a 50,2 (C-2'a 0-33,22,7(0-20),21.2(0-15),18,6(0-63,17,4(0-17).δ (1H, CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 6.08 (d, 1H, H-12, J = 3.3 Hz), 4.73 (d, 1H, H1 ', J) = 1.5 Hz), 4.18 (d, 1H, H-19b, J = 9 Hz), 3.62 (d, 1H, H-19b, J = 9 Hz), 3.48 and 3.47 (s, s, 3H, 3H, CH ₂ Me, CHOMe), 3.36-3.20 (m, 4H, H-2 ', H-3', H-4 ', H5'), 2.70 (t, 1H, H-11, J = 3.6Hz); δ ( ¹³ C, CDCl 3): 205.2 (CHO), 174.7 (CO 2 H), 148.4 (C-11), 130.7 (C-12), 97.9 (C-1 '), 79 , 0 (CHOMe in C-4 '), 75.6 and 75.7 (C-4'), 72.4 (C-5 '), 71.6 and 71T5 (OCH2-CHOMe in C-4 ¹ ) , 70.1 and 69.8 (CH ₂ OMe in C-4 '), 59.2, 57.9 and 57.8 (-CHOMe and -CH ₂ OMe in C-4'), 53.9 and 50.2 (C-2'a 0-33.22.7 (0-20), 21.2 (0-15), 18.6 (0-63.17.4 (0-17)).

201201

Príklad 73Example 73

Príprava kyseliny [ÍR-(Ια,3ap,4β,4a0,7β,7aa,8aP)]-8a-[(2,3anhyd.ro-6-deoxy-4-0- [ (2,3-0-izopropylidén) -2,3-dihydroxypropyl]-β-D-manopyranosyloxy)metyl]-4-formyl-4,4a,5,6,7,7a, 8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacén3a-(1H)-karboxylovejPreparation of acid [1R- (Ια, 3αp, 4β, 4α0,7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O - [(2,3-O-isopropylidene)] -2,3-dihydroxypropyl] -β-D-manopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) 1,4-methano-indacén3a- (1H) -carboxylic acid

K roztoku 250 mg medziproduktu 109, ktorého príprava je opísaná vyššie, v 50 ml etylacetátu, bolo v atmosfére dusíka pridaných 100 mg 10%-ného paládia na aktívnom uhlí. Vzniknutá reakčná zmes bola po predložení do Parrovho autoklávu trepaná pri tlaku 0,140 MPa vodíka a teplote miestnosti po dobu 1 hodiny.To a solution of 250 mg of intermediate 109 prepared above in 50 ml of ethyl acetate was added 100 mg of 10% palladium on charcoal under a nitrogen atmosphere. The resulting reaction mixture was shaken at 50 psi hydrogen at room temperature for 1 hour after being introduced into a Parr autoclave.

Po odfiltrovaní katalyzátora a odparení rozpúšťadla do sucha za použitia zmesi n-hexán-etylacetát (1:1) a dich'lórmetán-inetanol (50:1) ako elučných činidiel.After filtering off the catalyst and evaporating the solvent to dryness, using n-hexane-ethyl acetate (1: 1) and dichloromethane-inethanol (50: 1) as eluents.

Bolo získaných 150 mg, v nadpise uvedenej zlúčeniny (smer izomérov 50:50), vo forme bielej peny.150 mg of the title compound (50:50 isomer direction) was obtained as a white foam.

δ (¹H, CDCI3): 9,75 (s, 1 H, CHO), 6,08 (dd, 1H, H-12, J=1,5 a 3,6 Hz), 4,71 (d, 1H, H-Γ, J=0,9 Hz), 4,29-4,24 (m, 1 H, CHOH v 4’), 4,15-4,01 (m, 3H, H-19a a -OCH2), 3,82-3,49 (m, 4H, H-19b, OCH^-CHOH-CH^O), 3,29 a 3,13 (d, d, 1 H, 1 H, H-2'a H-3’, J=3,9 Hz), 3,27-3,18 (m, 2H, H-4¹ a H-5'), 2,74 (t, 1H, H-11, J=3,6 Hz), 1,41 a 1,35 (d, d, 3H, 3H, (CH3)2C ízopropyiidénu); δ (13C, CDCI3): 204,8 (CHO), 165,7 (CO₂H), 148,2 (C-11), 130,8 (C-12), 97,9 (ΟΙ’), 75,7 a 75,6 (-CHO-CH₂O v C-4'), 74,4 (C^'), 72,8 a 72,4 (C-5'), 72,0 a 71,6 (0-CH₂-0 v C-4'), 54,0 a 53,8 (C-3’), 50,3 (C-2'), 22,6 (C-20), 21,1 (C-15), 18,6(0-6'), 17,4 (C-17).δ ⁽¹ H, CDCl3): 9.75 (s, 1H, CHO), 6.08 (dd, 1 H, H-12, J = 1.5 and 3.6 Hz), 4.71 (d, 1H, H-J, J = 0.9 Hz), 4.29-4.24 (m, 1H, CHOH at 4 '), 4.15-4.01 (m, 3H, H-19a and - OCH 2), 3.82-3.49 (m, 4H, H-19b, OCH 2 -CHOH-CH 2 O), 3.29 and 3.13 (d, d, 1H, 1H, H-2) 'and H-3', J = 3.9 Hz), 3.27-3.18 (m, 2H, H-4 and ^H-1 5 '), 2.74 (t, 1 H, H-11, J = 3.6 Hz), 1.41 and 1.35 (d, d, 3H, 3H, (CH 3) 2 C isopropylidene); δ (13 C, CDCl 3): 204.8 (CHO), 165.7 (CO ₂ H), 148.2 (C-11), 130.8 (C-12), 97.9 (ΟΙ '), 75 , 7 and 75.6 (-CHO-CH ₂ O in C-4 '), 74.4 (C 1'), 72.8 and 72.4 (C-5 '), 72.0 and 71.6 (O-CH ₂ -O in C-4 '), 54.0 and 53.8 (C-3'), 50.3 (C-2 '), 22.6 (C-20), 21.1 (C-15), 18.6 (0-6 '), 17.4 (C-17).

Príklad 74Example 74

Chartikreristiky mikroorganizmu označeného IMI-362.184Chartikreristiky microorganism designated IMI-362.184

Označenie IMI-362.184 je použité pre mutant mikroorganizmu Sordciria araneosa (ATTC 36.386, NRRL 3196), izolovaného po mutagenéze askospór tohto kmeňa s N-metyl-N’-nitro-Nnitrozoguanidínom.The designation IMI-362.184 is used for a mutant of the microorganism Sordciria araneosa (ATTC 36.386, NRRL 3196), isolated after ascospore mutagenesis of this strain with N-methyl-N´-nitro-Nnitrozoguanidine.

202202

Charakteristiky mikroorganizmu IMI-362.184 sú v podstate podobné ako u mikroorganizmu NRRL-3196, opísané v špecifikácii britského patentu číslo 1,162.027 s tým rozdielom, že mikroorganizmus IMI-362.184 produkuje ako hlavný produkt 4 ’-deinetylsordarín za rovnakých podmienok, ktoré boli použité pri produkcii sordarínu podľa NRRL-3196.The characteristics of IMI-362.184 are essentially similar to NRRL-3196 described in British Patent Specification No. 1,162,027, except that IMI-362.184 produces 4'-deinetylsordarin as the main product under the same conditions used to produce sordarin. according to NRRL-3196.

Charakteristiky mikroorganizmu označeného IM1-362.947Characteristics of the micro-organism designated IM1-362.947

Označenie IMI-362.947 je použité pre mutant mikroorganizmu Sordaria araneosa (ATTC 36.386, NRRL 3196), izolovaného po mutagenéze askospór tohto kmeňa s N-metyl-N’-nitro-Nnitrozoguanidínom.The designation IMI-362.947 is used for a mutant of Sordaria araneosa (ATTC 36.386, NRRL 3196), isolated after ascospore mutagenesis of this strain with N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine.

Charakteristiky mikroorganizmu IMI-362.947 sú v podstate podobné ako u mikroorganizmu NRRL-3196, opísané v špecifikácií britského patentu číslo 1,162.027 s tým rozdielom, že mikroorganizmus IMI-362.947 nevytvára na agare ľahko spóry. Tento kmeň sa líši tiež od mikroorganizmu NRRL-3196 tým, že produkuje ako hlavný produkt sordaricín za rovnakých podmienok , ktoré boli použité pri produkcii sordarínu mikrooganizmom NRRL-3196.The characteristics of IMI-362.947 are essentially similar to NRRL-3196 described in British Patent Specification No. 1,162,027, except that IMI-362.947 does not easily spore on agar. This strain also differs from NRRL-3196 in that it produces sordaricin as the main product under the same conditions as used in the production of sordarin by NRRL-3196.

Príklad 76Example 76

Charakteristiky mikroorganizmu označeného NCIMB-40.675Characteristics of the microorganism designated NCIMB-40.675

Mikroorganizmus označený NCIMB-40.675, je aerobický, gram-pozitívny, nepohyblivý mikrób, v tvare nepravidelných tyčiniek, ktorý vytvára žlto sfarbené, priesvitné, guľaté a nedelené konvexné kolónie s priemerom 0,5 mm až 1 mm v prípade, že rastie po dobu 48 hodín pri teplote 28 °C na tryptickom sójovom agare, doplnenom s 2%-ným kvasnicovým extraktom (hmotnosť/objem).The microorganism designated NCIMB-40.675 is an irregular rod-shaped aerobic, gram-positive, immovable microbes that forms yellow-colored, translucent, spherical and undivided convex colonies with a diameter of 0.5 mm to 1 mm when grown for 48 hours. hours at 28 ° C on tryptic soy agar supplemented with 2% yeast extract (w / v).

Uvedený mikroorganizmus rastie dobre až do teplôt 37 °C, ale nie pri teplote 45 °C. Neboli pozorované žiadne metachroinatické okrúhle telieska a uvedený kmeň je voči kataláze pozitívny, voči oxidáze negatívny a nemetabolizuje fer203Said microorganism grows well up to temperatures of 37 ° C, but not at 45 ° C. No metachroinatic round bodies were observed and said strain is catalase positive, oxidase negative and does not metabolize fer203

mentačne glukózu.mentation glucose.

Tento kmeň môže využívať nasledujúce zdroje uhlíka: α-D-glukóza, D-fruktóza, kyselina hydroxyfenyloctová, D-manitol, inetylpyruvát, laktamid, D-trehalóza a sacharóza.This strain can utilize the following carbon sources: α-D-glucose, D-fructose, hydroxyphenylacetic acid, D-mannitol, ethylpyruvate, lactamide, D-trehalose and sucrose.

Zmienený mikroorganizmus môže len v malej miere využívať ako jediný zdroj uhlíka kyselinu D-glukónovú, kyselinu pyrohroznovú a salicín.The microorganism mentioned can only use D-gluconic acid, pyruvic acid and salicin as the only carbon source.

Morfológia kolónií a mikroskopická morfológia je podobná ako u foriem korynobaktérií. Rod Corynobacterium bol vylúčený na základe poznatkov, že peptidoglykan mikroorganizmu NCIMB-40.675 obsahuje ornitin, skôr než mezo-izomér kyseliny 2,6-diaminopimelovej alebo diaminomaslovej. Tento mikroorganizmus obsahuje tiež zmes mastných kyselín s rozvetveným reťazcom, atypických pre druhy Corynobacterium, napríklad kyselinu 12-metyltetradekanovú, 14-metylhexadekanovú a 14-metylpentadekanovú.Colony morphology and microscopic morphology are similar to those of corynobacteria. The genus Corynobacterium has been excluded based on the knowledge that the peptidoglycan of NCIMB-40.675 contains ornithine rather than the meso-isomer of 2,6-diaminopimelic or diaminobutyric acid. The microorganism also contains a mixture of branched chain fatty acids atypical to Corynobacterium species, for example 12-methyltetradecanoic acid, 14-methylhexadecanoic acid and 14-methylpentadecanoic acid.

Prítomnosť a-rozvetvených-β-hydroxylových kyselín nebola potvrdená.The presence of α-branched-β-hydroxyl acids has not been confirmed.

Na základe týchto zistení sa mikroorganizmus veľmi blízko podobá jednému z nasledujúcich rodov aktinobaktérií: Aureobacterium, Curtobacterium alebo Cellulomonas.Based on these findings, the microorganism closely resembles one of the following genera of actinobacteria: Aureobacterium, Curtobacterium or Cellulomonas.

Na objasnenie taxonomických polôh mikroorganizmu NCIMB-40.675, boli porovnané 1100 párové bázy čiastočnej sekvencie 16S rRNA génu s 24 ďalšími druhmi, reprezentovanými skupinou aktinobaktérií a podobných rodov.To elucidate the taxonomic positions of NCIMB-40.675, the 1100 base pairs of the partial sequence of the 16S rRNA gene were compared with 24 other species, represented by a group of actinobacteria and similar genera.

Výsledky týchto analýz naznačujú blízku príbuznosť medzi mikroorganizmom NCIMB-40.675 a rodmi Aureobacterium a Curtobacetrium, ale nie s rodmi Cellulomonas alebo Corynobacterium.The results of these analyzes indicate a close relationship between NCIMB-40.675 and Aureobacterium and Curtobacetrium, but not with Cellulomonas or Corynobacterium.

Oveľa presnejšia identifikácia kmeňa by mohla byť získaná uskutočnením porovnávacích fylogenických analýz rôznych oblastí 16S rRNA génov u druhov Aureobacterium a Curtobacterium, okrem ďalších chemotaxonomických a fyziologických tes tov .Much more accurate strain identification could be obtained by performing comparative phylogenic analyzes of different regions of 16S rRNA genes in Aureobacterium and Curtobacterium species, among other chemotaxonomic and physiological tests.

204204

Príklady farmaceutických prostriedkovExamples of pharmaceutical compositions

1. Konvenčné tablety určené na orálnu aplikáciuConventional tablets for oral administration

Účinná substancia liečiva Mikrokryštalická celulóza Sodná sol krížovo sieťovanej karboxycelulózyActive Substance of the Drug Microcrystalline cellulose Sodium salt of cross-linked carboxycellulose

Magnézium stearátMagnesium stearate

100,0 mg100.0 mg

160,0 mg160.0 mg

20,0 mg mg20.0 mg mg

Účinná zložka liečiva bola premiešaná s mikrokryštalickou celulózou, sodnou soľou krížovo sieťovanej karboxycelulózy a magnézium stearátom a potom bola zlisovaná do tabliet .The active ingredient of the drug was mixed with microcrystalline cellulose, sodium cross-linked carboxycellulose and magnesium stearate and then compressed into tablets.

2. Žuvacia forma tabliet určená na orálnu aplikáciu2. Chewable tablet form intended for oral administration

Účinná substancia liečivaActive substance of the drug

Xylitolxylitol

Príchuť mäty piepornejPeppermint flavor

Aspartamaspartame

Polyvinylpyrolidónpolyvinylpyrrolidone

Magnézium stearátMagnesium stearate

100,0 mg100.0 mg

865,0 mg865.0 mg

5,0 mg5.0 mg

10,0 mg10.0 mg

15,0 mg mg15.0 mg mg

Účinná substancia liečiva, xylitol, aspartam a polyvinylpyrolidón bolo spolu zmiešané a potom boli spracované na granulát, ktorý bol vysušený.The active drug substance, xylitol, aspartame and polyvinylpyrrolidone were mixed together and then processed to a granulate that was dried.

Takto pripravené granuly boli zmiešané s príchuťou mäty piepornej a s magnézium stearátom a potom boli zlisované do tabliet.The granules thus prepared were mixed with peppermint flavor and magnesium stearate and then compressed into tablets.

3. Vodný roztok určený na orálnu aplikáciu3. Aqueous solution for oral administration

Účinná substancia liečivaActive substance of the drug

100,0 mg100.0 mg

Hydroxypropylmetylcelulózahydroxypropyl methylcellulose

Propylhydroxybenzoát sodnýSodium propylhydroxybenzoate

Pomarančová príchuťOrange flavor

150,0 mg150.0 mg

1,0 mg1.0 mg

10,0 mg10.0 mg

205205

Metylhydroxybenzoát sodný Sodium methylhydroxybenzoate 2,0 2.0 mg mg Sodná soľ sacharínu Saccharin sodium 5,0 5.0 mg mg Sacharóza sucrose 800,0 800.0 mg mg Vhodný tlmivý roztok (pufer) Suitable buffer (buffer) pokiaľ stačí if enough Prečistená voda do objemu Purified water to volume 5,0 5.0 ml ml

Účinná substancia liečiva a všetky pomocní zložky sa rozpustia vo väčšej časti prečistenej vody a potom sa premiešajú. Následne sa upraví objem na požadovanú veľkosť a zmes sa znova premieša.The active drug substance and all excipients are dissolved in most of the purified water and then mixed. The volume is then adjusted to the desired size and mixed again.

Vhodným pufrom môže byť dostatočne upravené pH na rozmedzí maximálnej stability.The pH may be suitably adjusted to the maximum stability by a suitable buffer.

4. Nevodná suspenzia určená na orálnu aplikáciu4. Non-aqueous suspension for oral administration

Účinná substancia liečiva Active substance of the drug 100,0 100.0 mg mg Aspartam aspartame 50,0 50.0 mg mg Grapefruitová príchuť Grapefruit flavor 25,0 25.0 mg mg Manitol mannitol 800,0 800.0 mg mg Koloidná forma oxidu kremičitého Colloidal form of silica 10,0 10,0 mg mg

Frakčne destilovaný kokosový olej mlFractionally distilled coconut oil ml

Disperzia účinnej substancie liečiva a manitolu bola pripravená vo väčšej časti frakcionovaného kokosového oleja pomocou vysokoobrátkového, nožnicovými nožmi vybaveného mixéra. Potom boli pridané zvyšné pomocné látky a zmes bola znova rozmiešaná.A dispersion of the active drug substance and mannitol was prepared in most of the fractionated coconut oil using a high-shear, scissor-equipped mixer. The remaining excipients were then added and the mixture stirred again.

Potom bol objem upravený kokosovým olejom na požadované parametre a zmes bola znova premiešaná.Thereafter, the volume was adjusted to the desired parameters with coconut oil and mixed again.

5. Masť na povrchovú aplikáciu5. Ointment for topical application

Účinná substancia liečivaActive substance of the drug

Mäkký biely parafínSoft white paraffin

200,0 mg200.0 mg

9800,0 mg9800.0 mg

Mäkký biely parafín sa roztaví, pridá sa účinná substancia liečiva a táto zmes sa rozmieša. Potom sa zmesThe soft white paraffin is melted, the active drug substance is added and mixed. Then mix

206 mieša tak dlho, pokiaľ nezačne tuhnúť.206 is stirred until it begins to solidify.

6. Injekcie určené na parenterálnu aplikáciu6. Injections for parenteral administration

Účinná substancia liečivaActive substance of the drug

Vhodný tlmivý roztok (pufer)Suitable buffer (buffer)

Vhodný antioxidant (q.d.)Suitable antioxidant (q.d.)

Vhodné chelatačné činidloSuitable chelating agent

Voda pre injekcie do objemuWater for injection in volume

40,0 mg pokiaľ stačí pokiaľ stačí pokiaľ stačí40.0 mg as far as possible as far as possible

2,0 ml2.0 ml

Po rozpustení účinnej substancie liečiva vo väčšej časti vody pre injekcie je možné pridať vodný tlmivý roztok (pufer) tak, aby rozmedzie pH zaručovalo optimum stability. Na zlepšenie stability injekcií je možné pridať vhodné antioxidačné činidlá a chelatačné činidlá. Potom sa injekčný roztok doplní na požadovaný objem vodou pre injekcie a naplní sa do ampúl alebo fľaštičiek a potom sa v autokláve vysterílizuj e.After dissolution of the active drug substance in most of the water for injection, it is possible to add an aqueous buffer (buffer) so that the pH range ensures optimum stability. Suitable antioxidants and chelating agents may be added to improve injection stability. The solution for injection is then made up to the required volume with water for injection and filled into ampoules or vials and then sterilized in an autoclave.

Alternatívne je možné vykonať sterilizáciu fitráciou a potom injekčný roztok aseptický rozplniť.Alternatively, it is possible to perform sterilization by filtration and then fill the solution for injection aseptically.

Antifungálna aktivitaAntifungal activity

Zlúčeniny podľa vzorca (I) boli testované na antifungálnu aktivitu štandardnými metódami in vitro a bola stanovená pre každú zlúčeninu minimálna inhibičná koncentrácia (MIC, pg/ml) pre rôzne, klinicky príbuzné patogény. Výsledky získané u reprezentačných zlúčenín, zahrnutých do vynálezu, sú uvedené nižšie.Compounds of formula (I) were tested for antifungal activity by standard in vitro methods and the minimum inhibitory concentration (MIC, pg / ml) for each, clinically related pathogen was determined for each compound. The results obtained with representative compounds included in the invention are shown below.

Zlúčeniny, uvedené v predloženom vynáleze, sú v terapeuticky použiteľných dávkach v podstate netoxické. Napríklad zlúčenina z príkladu 8, bola účinná v dávke 50 mg/kg (orálna aplikácia) pri ochrane myšacích samcov infikovaných patogénnou pliesňou Candida albicans 4711E.The compounds of the present invention are substantially nontoxic at therapeutically useful doses. For example, the compound of Example 8 was effective at a dose of 50 mg / kg (oral administration) in protecting male mice infected with the pathogenic fungus Candida albicans 4711E.

Hodnoty LD^q sú u zlúčeniny z príkladu 8 pri orálnej aplikácii u myšacích samcov >1000 mg/kg.The LD50 values for Example 8 when administered orally in male mice are > 1000 mg / kg.

207207

>0> 0

MIC v μΐ/τηΐMIC in μΐ / τηΐ

Ú n si r-1 ZZ ΉÚ n si r-1 ZZ Ή

H fX tí CH fX ti C

C υ >o >□ ľ—IC υ>> — — — I

NN

89 ' 89 ' 0.060 0.060 090'0 090'0 CM O O Ó CM O O ABOUT o CO O Ó about WHAT O 0.250 0.250 0.015 0.015 31.00 31.00 31.00 31.00 o q about q 59 1__________________________________________________________________________________ 59 1__________________________________________________________________________________ CO ▼— O WHAT ▼ - ABOUT O o O o 008 008 002 002 to δ it δ to v o it v o O CD O CD O CD O CD o q o q Ó ABOUT ó VI ó VI Ó ABOUT Ó ABOUT ó about ó about x^- x ^- x— x- x— x- X~ X ~ V IN O ABOUT o about o about o about O ABOUT o about O ABOUT O ABOUT ’T m ’T m O ABOUT o about o about o about O ABOUT o about O ABOUT O ABOUT ó about ó about ó about ó about ó about ó VI about VI CO WHAT CO WHAT CM CM VI VI vi vi vi vi V) IN) V) IN) CM CM xr o xr o T“ o T 'o CO o CO o xr o xr o o CO o CO o about o about o about O ABOUT io io o about o about o about o about o about o about ó about ó about ó about ó about ó about ó about CO WHAT CO WHAT o about o about o about o about o about CO WHAT o about o about iD iD T T CM CM CO WHAT CM CM CM CM o about o about o about o about CM I CM I m m T“ T " o about ’T 't T~ T ~ q q o about CD CD CD CD x- x- Ó ABOUT ô about ó about ó about ó about ó about x- x- Λ Λ CO WHAT 001 001 o o o o 001 001 o o o o 500 500 o o o o O q O q O q O q O O O O 6 6 ó about 6 6 ó about 6 6 6 V 6 V T T v in CM CM o about o about o about o about o about O ABOUT r- r- CD CD o about CD CD CO WHAT o about CD CD CM CM CO WHAT o about o about o ó about about o about IO IO q ó q ó ó about ô about ó about ó about xt xt CD CD Ó V Ó V X” X " X“ X " o about x— x- o about O ABOUT O CO CM ABOUT CO CM x^ x ^ o about o about o about o about to it o about O ABOUT CO WHAT o about o about o about o about x- x- o about o about ó about ó about ó about ó about Ó ABOUT Ó V Ó V T“ T " Ó V ABOUT IN ²⁰²⁰ o o o o o q o q .001 .001 X“ o q X "o q CO o o CO o o 004 004 500 500 500 500 250 250 ó VI about VI ó VI about VI o vi about vi ó V) about IN) ó about Ó ABOUT Ó ABOUT Ó ABOUT Ó ABOUT CD CD X“ o o X 'o o 001 001 001 001 001 001 CO o o CO o o o o o o o o o o o q o q o q o q 6 6 ó about ó about ó about ó about ó v ó v CO WHAT CO WHAT o about to it o about o about o about o about o about o about CO WHAT v~ in ~ CD CD CO WHAT o about CD CD o about o about v' in' o about o about O ABOUT o about CD CD O ABOUT CD CD ó about ô about Ó ABOUT ó about Ô ABOUT CO WHAT CO WHAT to it CO WHAT to it to it o about CO WHAT o about CO WHAT x— x- o about x— x- x—· · x- CM CM o about o about o about o about O ABOUT o about r— r- o about to it ó about ó about ó about ó about Ó ABOUT ó about CO WHAT CO WHAT o about CO WHAT x— x- CO WHAT Xt xt o about M* M * o about o about o about CD CD o about o about o about o about CM CM O ABOUT o about o about o ó about about 0.0 0.0 o ó about about o ô o ô Ó ABOUT o ô about about X^- COX ^- CO v CO in WHAT CO WHAT o about o about o about o about O ABOUT o about o about o about IO IO o about CM CM o about CO WHAT O ABOUT CD CD o about o about CM CM to it to it CM CM O ABOUT O ABOUT ó about O ABOUT ó about Ó ABOUT X“ X " Ó ABOUT CO WHAT CO WHAT Λ Λ ĽJ LJ t— t C/) C /) CM CM ĽJ LJ s N with N UJ UJ UJ UJ uj UJ ĽJ CO LJ WHAT <f) <F) UJ UJ UJ UJ CO CO CO CO CO WHAT to it CM CM (0 (0 CO WHAT CD CD CM CM o about o about O ABOUT X— X- CO CM CO CM O ABOUT b- b- b- b- Z FROM CM CM o about M M r- r- Q_ Q_ CO WHAT CO WHAT < < T“ T " CM CM CM CM xf XF O ABOUT CM CM CM CM CO WHAT □ □ tn c tn c V) C V) C ω C ω C <0 c <0 c G3 o G3 o o about ro ro Ξ Ξ E E CZ CZ <3 <3 CO WHAT CO WHAT CO WHAT Ό Ό <3 <3 <3 <3 o about o about U JD U JD o lo about lo Ibic Ibicatu ibic IBIC Q. O Q. O sue sue JO (3 JO (3 D 03 D 03 *O <u *ABOUT <u CO WHAT Φ Φ Q Q <0 <0 Q. Q. CD CD CD CD c C ó about ó about ó about ó about ó about ó about ó about ó about ó i ó i

- 208 -- 208 -

Claims (16)

PATENTOVÉ NÁROKYPATENT CLAIMS 1. Cyklické deriváty všeobecného vzorca I (I) kde Z je tetrahydropyránová skupina a) alebo b)Cyclic derivatives of the general formula I (I) wherein Z is a tetrahydropyran group a) or b) a) ako aj farmaceutický prijateľné soli a solváty, napríklad hydráty týchto zlúčenín alebo ich metabolický labilné deriváty, v ktorých(a) as well as pharmaceutically acceptable salts and solvates, for example, hydrates of these compounds or their metabolically labile derivatives, in which: R¹ znamená atóm vodíka alebo halogénu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka alebo acyloxyskupinu,R ¹ is hydrogen or halogen, hydroxy, C 1 -C 4 alkoxy or acyloxy, 2 32 3 R a R nezávisle znamenajú atóm vodíka, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkoxyalkyl s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti alebo tvoria spoločne s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, skupinu C=0, C=S alebo cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka,R and R independently represent hydrogen, alkyl of 1 to 6 carbon atoms or alkoxyalkyl of 1 to 4 carbon atoms in each moiety or together with the carbon atom to which they are attached form a C = O, C = S or cycloalkyl group of 3 up to 8 carbon atoms, 209209 δ. Ί Ίδ. Ί Ί R⁴ znamená atóm vodíka alebo skupinu CH₂R , v ktorej R je atóm vodíka, hydroxyskupina alebo alkoxyskupinaR ⁴ represents a hydrogen atom or a CH ₂ R group in which R is a hydrogen atom, a hydroxy group or an alkoxy group O s 1 až 4 atómami uhlíka alebo skupina OCOR , v ktorej R® je alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka alebo aryl,O with 1 to 4 carbon atoms or an OCOR group in which R 8 is alkyl of 1 to 4 carbon atoms or aryl, R⁵ a R⁶ nezávisle znamenajú atóm vodíka, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkoxyalkyl s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti alebo tvoria spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, skupinu C=0, C=S alebo cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka, n znamená celé číslo 0 alebo 1,R ⁵ and R ⁶ independently represent hydrogen, C 1 -C 6 alkyl or C 1 -C 4 alkoxyalkyl in each moiety or together with the carbon atom to which they are attached form C = O, C = S or cycloalkyl having 3 to 8 carbon atoms, n is an integer of 0 or 1, X a Y nezávisle znamenajú atóm kyslíka alebo síry alebo skupinu CR⁹R¹® (kde R⁹ a R¹® nezávisle znamenajú vodík, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka alebo alkoxyalkyl s 1 až 4 atómami uhlíka v každej časti alebo tvoria spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, skupinu C=0, C=S, cykloalkyl s 3 až 8 atómami uhlíka alebo skupinu C=CHR¹¹, v ktorej R¹¹ je atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka), alebo v prípade, že X alebo Y znamená atóm kyslíka a n = 0, môžu skupiny -Y-CR R alebo -X-CR²R³ znamenať tiež skupiny -N=CR³- alebo -NR¹²-CR²R³- (kde CR^2, a R³ znamenajú skupinu C=0X and Y independently represent an oxygen or sulfur atom or a CR ⁹ R ¹ ® group (wherein R ⁹ and R ¹ ® independently represent hydrogen, alkyl of 1 to 6 carbon atoms, alkoxy of 1 to 4 carbon atoms or alkoxyalkyl of 1 to 4 atoms in each moiety or together with the carbon atom to which they are attached form C = O, C = S, C 3 -C 8 cycloalkyl or C = CHR ¹¹ in which R ¹¹ is hydrogen or C 1 -C 8 alkyl; or in the case where X or Y represents an oxygen atom and n = 0, the groups -Y-CR R or -X-CR ² R ³ may also be -N = CR ³ - or -NR ¹² - CR ² R ³ - (wherein CR ^2, and R ³ are C = O 1 2 a R znamená alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka alebo acyl 13 13 vzorca COR , kde R znamená alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka) alebo v prípade, že Y znamená atóm kyslíka ti n = 0, môže X znamenať skupinu CR¹¹ (kde R¹¹ má vyššie uvedený význam), viazanú na pyránový kruh dvojitou väzbou,1 2, and R is C 1 -C 4 alkyl or acyl 13 13 of the formula -COR, wherein R is C 1 -C 6 alkyl) or when Y is oxygen the n = 0, X is CR @ ¹¹ (wherein R ¹¹ is as defined above), attached to the pyran ring by a double bond, R¹^ znamená atóm vodíka alebo halogénu, azidoskupinu, alkyl s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka (prípadne substituovanú jednou alebo dvoma hydroxyskupinami alebo jej acetál alebo substituovanú jednou alebo dvoma alkoxyskupínami s 1 až 3 atómami uhlíka), arylalkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, alkenyloxyskupinu s 3 až 6 atómami uhlíka, skupinu OCOR¹®R ( ¹ ) is hydrogen or halogen, azido, (C 1 -C 6) alkyl, hydroxy, (C 1 -C 6) alkoxy (optionally substituted with one or two hydroxy groups or acetal thereof, or substituted with one or two C 1 -C 3 alkoxy groups) ), arylalkoxy having 1 to 4 carbon atoms in the alkoxy moiety, alkenyloxy having 3 to 6 carbon atoms, OCOR ¹ ® -i O (kde R znamená arylalkoxyskupinu s 1 až 4 atómami -i O (wherein R is C 1 -C 4 arylalkoxy) 210 uhlíka v alkylovej časti alebo alkyl s 1 až 10 atómami uhlíka, prípadne obsahujúci jednu alebo dve dvojité väzby) alebo alkoxykarbonylalkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v prvej asi až 4 atómami uhlíka v druhej alkoxylovej časti a210 carbon in the alkyl moiety or alkyl of 1 to 10 carbon atoms, optionally containing one or two double bonds) or alkoxycarbonylalkoxy of 1 to 6 carbon atoms in the first about 4 carbon atoms in the second alkoxy moiety, and R¹⁸ znamená atóm vodíka alebo tvorí R¹⁸ a R¹⁸ spolu s atómom uhlíka, na ktorý sú viazané, skupinu C=0 alebo c=ch₂,R ¹⁸ is H or is R ¹⁸ and R ¹⁸ together with the carbon atom to which they are attached represent a group C = 0 or C = _CH2, R¹⁷ znamená skupinu Cl^R¹⁹, v ktorej R¹⁹ znamená atóm vodíka, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 14 atómami 20 20 uhlíka alebo skupinu OCOR , v ktorej R znamená alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka aR ¹⁷ is a group C ^ R ^19, wherein R ¹⁹ is H, OH, alkoxy having 1 to 14 carbon atoms, 20 20 and OCOR, wherein R is alkyl of 1 to 4 carbon atoms and V znamená atóm kyslíka alebo síry alebo skupinu CH₂ a prerušovaná čiara v skupine a) znamená prípadnú prítomnosť ďalšej väzby.V represents an oxygen or sulfur atom or a CH ₂ group and the dotted line in group a) represents the optional presence of an additional bond. 2. Cyklické deriváty podľa nároku 1, v ktorých Z znamená skupinu kde jeden zo symbolov X alebo Y znamená atóm kyslíka a druhý Q 10 znamena skupinu CR R .The cyclic derivatives of claim 1, wherein Z is a group wherein one of X or Y is an oxygen atom and the other Q 10 is a CR R group. 3. Cyklické deriváty podľa nároku 1 alebo 2, v ktorých n = 0 .Cyclic derivatives according to claim 1 or 2, wherein n = 0. 4. Cyklické deriváty podľa niektorého z nárokov 1 až 3, v ktorých X a Y znamenajú atómy kyslíka a R² a R³ nezávisle znamenajú atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka .The cyclic derivative according to any one of claims 1 to 3, wherein X and Y are oxygen atoms and R ² and R ³ independently represent hydrogen or C 1 -C 4 alkyl. 211211 5. Cyklické deriváty podľa niektorého z nárokov 1 až 3, v ktorých jeden zo symbolov X a Y znamená atóm kyslíka a druhý znamená skupinu CR⁹R¹⁸.The cyclic derivatives of any one of claims 1 to 3, wherein one of X and Y is oxygen and the other is CR ⁹ R ¹⁸ . 6. Cyklické deriváty podľa nároku 5, v ktorých R⁹ znamená atóm vodíka alebo alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka a R¹⁸ znamená atóm vodíka alebo skupina CR⁹R¹⁸ znamená CO alebo C=CHR^lľL .The cyclic derivatives of claim 5, wherein R ⁹ is hydrogen or C 1 -C 4 alkyl and R ¹⁸ is hydrogen or CR ⁹ R ¹⁸ is CO or C = CHR ^{11 '} . 7. Cyklické deriváty podľa nároku 5 alebo 6, v ktorých znamená atóm kyslíka.The cyclic derivative according to claim 5 or 6, wherein it is an oxygen atom. 8. Cyklické deriváty podľa niektorého z nárokov 1 ažCyclic derivatives according to any one of claims 1 to 10 7, v ktorých R¹ znamená atóm vodíka alebo hydroxylovú skupinu a R⁴ znamená metylovú skupinu.7 wherein R ¹ is a hydrogen atom or a hydroxyl group and R ⁴ is a methyl group. 9. Cyklické deriváty podľa nároku 1, v ktorých Z zname- ná skupinu9. A compound according to claim 1, wherein Z is a group CH₃ kde V znamená atóm kyslíka.CH ₃ wherein V represents an oxygen atom. 10. Cyklický derivát podľa nároku 1, kyselina [lR-(la, -3ap,4β,4aβ,7β,7aa,8aβ)]-8a-[[1S,7R,9R]-2,8-dioxa-9-metyl-4metylén-cis-bicyklo[3.4.0]non-7-yloxymetyl]-4-formyl-4,4a,5, -6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-sindacen-3a(lH)-karboxylová a jej farmaceutický prijateľné soli .The cyclic derivative according to claim 1, [1R- (1a, -3ap, 4β, 4aβ, 7β, 7aa, 8aβ)] - 8α - [[1S, 7R, 9R] -2,8-dioxa-9-methyl acid -4-methylene-cis-bicyclo [3.4.0] non-7-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6 -6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1- methylethyl) -1,4-methanesindacen-3a (1H) -carboxylic acid and pharmaceutically acceptable salts thereof. 11. Cyklické deriváty podľa nároku 1, zo skupiny kyselina [lR-(lα,3aβ,4β,4aβ,7β,7aα,8aβ)]-8a-[(2,6-dideoxy-The cyclic derivative according to claim 1, from the group of acid [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(2,6-dideoxy- 3,4-0- :i.zopropylidén^-D-alopyranosyloxy) -metyl] -4-formyl4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4metán-s-indacen-3a(1H)-karboxylová,3,4-O- (i-isopropylidene-4-D-alopyranosyloxy) methyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) ) -1,4metán-p-indacene-3a (1H) -carboxylic acid, 212 kyselina [ÍR-(la,3ap,4β,4aβ,7β,7aa,8aP)]-8a-[[1S ,4R,7R,9R]2,8-díoxa-4,9-dimetyI-cis-bicyklo[3.4.0]non-7-yloxymetyl]4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(1-metyletyl)-1,4-metán-s-indacen-3a(1H)-karboxylová, kyseli na [ÍR-(la,3aβ,4β,4ηβ,7β,7ηα,8ηβ)]-8η-[[15,45,6Ρ,8Κ]2,7-dioxa-4,6-dimetyl-cis-bicyklo[3.4.0]non-8-yloxymetyl]4-formyl-4,4a,5,6,7,7a,8,8a-oktahydro-7-metyl-3-(l-metyletyl)-1,4-metán-s-indacen-3a(1H)-karboxylová, kyselina [ÍR-(lα,3aβ,4β,4aβ,7β,7aα,8aβ)]-8a-[(2,3-anhydro6-deoxy-4-Q-propyl^-D-manopyranosyloxy)-metyl]-4-formyli212 [1R- (1a, 3a, 4a, 4aa, 7a, 7aa, 8aP)] - 8a - [[1S, 4R, 7R, 9R] 2,8-dioxa-4,9-dimethyl-cis-bicyclo [ 3.4.0] non-7-yl oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methane s-indacen-3a (1H) -carboxylic acid, acid to [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4ηβ, 7β, 7ηα, 8ηβ)] - 8η - [[15,45,6Ρ, 8Κ] 2,7-dioxa 4,6-dimethyl-cis-bicyclo [3.4.0] non-8-yloxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,7,7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- ( 1-methylethyl) -1,4-methane-s-indacene-3α (1H) -carboxylic acid [1R- (1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(2,3 -anhydro6-deoxy-4-O-propyl-D-mannopyranosyl ^) methyl] -4-formyl 4,4a,5,6,71, 7a,8,8a-oktahydro- 7-metyl - 3- (1-metyletyl) -1,4metán- s - injdacen-3a (1H) -karboxylová, kyselina [ΪR-(lα,3aβ,4β,4aβ,7β,7aα,8aβ)]-8a-[(2,3-anhydro6-deoxy-4-0-mety1-β-D-manopyranosyloxy)oxymetyl]-4- f ormyl4,4a, 5,6, 17a, 8,8a-oktahydro- 7-metyl-3- (1-metyletyl) -1,4metán-s-indacen-3a(1H)-karboxylová ako aj farmaceutický prijateľné soli týchto kyselín.4,4a, 5,6,71, 7a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4-methanes-injdacen-3a (1H) -carboxylic acid [ΪR- ( 1α, 3αβ, 4β, 4αβ, 7β, 7αα, 8αβ)] - 8α - [(2,3-anhydro-6-deoxy-4-O-methyl-β-D-manopyranosyloxy) oxymethyl] -4-formyl-4,4a, 5,6,17a, 8,8a-octahydro-7-methyl-3- (1-methylethyl) -1,4methane-s-indacen-3a (1H) -carboxylic acid as well as pharmaceutically acceptable salts of these acids. 12. Spôsob výroby cyklických derivátov všeobecného vzorca I podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že saA process for the preparation of cyclic derivatives of the general formula I according to claim 1, characterized in that it is: a) nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca II a) reacting a compound of formula II H (II)H (II) 213 kde213 where R¹ a R⁴ majú význam, uvedený vo vzorci I,R ¹ and R ⁴ are as defined in formula I, RP znamená ochrannú skupinu na karboxylovej skupine,RP stands for a protecting group on the carboxyl group, X a Y majú význam, uvedený vo vzorci I s tou výnimkou, žeX and Y have the meanings given in formula I, except that X a/alebo Y neznamenajú skupinu CR⁹R¹⁸, za vzniku požadovaného cyklického systému s následným odstránením ochrannej skupiny na karboxylovej skupine aleboX and / or Y do not represent CR ⁹ R ¹⁸ , to form the desired cyclic system followed by deprotection at the carboxyl group, or b) pri príprave zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom(b) in the preparation of compounds of formula I in which: OABOUT Z znamená skupinu a) a Y znamená atóm kyslíka, n = 0, R a R znamenajú atómy vodíka a X znamená skupinu CH sa nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca VII (VII) kdeZ is a) and Y is oxygen, n = 0, R and R are hydrogen and X is CH is reacted with a compound of formula VII (VII) wherein R znamená skupinu CHO alebo jej chránený derivát aR is CHO or a protected derivative thereof and RP znamená chránenú karboxylovú skupinu, s dialkyldiazometylfosfátom alebo saRP is a protected carboxyl group, with dialkyldiazomethylphosphate or se c) pri príprave zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom Z znamená skupinu b) a V znamená atóm kyslíka cyklizuje zlúčenina všeobecného vzorca VIIIc) in the preparation of compounds of formula I in which Z represents a group b) and V represents an oxygen atom, cyclizes a compound of formula VIII 214 kde r15íi R!6a _a R17a _maj_a význam, uvedený pre R¹⁵, R¹⁸ a R¹⁷ vo vzorci I alebo ide o chránené deriváty týchto skupín, RP znamená atóm vodíka alebo ochrannú skupinu na karboxylovej skupine,Wherein R 214 R 15 l! 6 _{a, and} R 17 _and j _has the meaning given for R ^15, R ¹⁸ and R ¹⁷ in formula I, or are a protected derivative thereof, RP is hydrogen or a protective group for the carboxyl group, L znamená odštiepiteľnú skupinu, napríklad alkyl- alebo arylsulfonyloxyskupinu aL is a leaving group, such as an alkyl or arylsulfonyloxy group; and 9 9 999 R znamená atóm vodíka alebo znamená OR rovnakú skupinu, ako vo význame L, s následným odstránením akejkoľvek prítomnej ochrannej skupiny alebo saR is hydrogen or OR is the same as L, with subsequent removal of any protecting group present or d) pri príprave zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktoromd) in the preparation of compounds of formula I in which: V znamená atóm síry pôsobí na zlúčeninu všeobecného vzorcaV is a sulfur atom acting on a compound of formula IX (IX)IX (IX) 215 kde215 where R¹⁵, R¹⁶ a R¹⁶ majú význam, uvedený vo vzorci I, donorom síry, potom sa prípadne uskutoční jeden alebo väčší počet nasledujúcich stupňov:R ¹⁵ , R ¹⁶ and R ¹⁶ have the meaning given in formula I by a sulfur donor, then optionally carrying out one or more of the following steps: i) odstráni sa akákoľvek ochranná skupina, ii) zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej chránený derivát sa premení na inú zlúčeninu vzorca I, iii) cyklický derivát všeobecného vzorca I sa izoluje vo forme svojej farmaceutický prijateľnej soli.i) removing any protecting group, ii) converting a compound of formula I or a protected derivative thereof into another compound of formula I, iii) isolating the cyclic derivative of formula I in the form of its pharmaceutically acceptable salt. 13. Cyklické deriváty podľa niektorého z nárokov 1 až 13. A compound according to claim 1 11 na použitie na liečebné účely.11 for medical use. .. 14. Použitie cyklických derivátov podľa niektorého z nároku 1 až 11 na výrobu farmaceutického prostriedku na liečenie hubových infekcií.Use of cyclic derivatives according to any one of claims 1 to 11 for the manufacture of a pharmaceutical composition for the treatment of fungal infections. 15. Farmaceutický prostriedok na liečenie hubových infekcii, vyznačujúci sa tým, že ako svoju účinnú zložku obsahuje derivát podľa niektorého z nárokov 1 až 11 spolu s najmenej jedným fyziologicky prijateľným nosičom alebo pomocnou látkou.Pharmaceutical composition for the treatment of fungal infections, characterized in that it comprises as an active ingredient a derivative according to any one of claims 1 to 11 together with at least one physiologically acceptable carrier or excipient. 16. Spôsob liečenia hubových infekcií, vyznačujúci sa tým, že sa chorým podáva účinné množstvo cyklických derivátov podľa niektorého z nárokov 1 až 11.16. A method of treating fungal infections, comprising administering to the patient an effective amount of a cyclic derivative according to any one of claims 1 to 11.