SK343592A3 - Hide liming and drenching process using enzymes - Google Patents

Abstract

The invention relates to a process for the production of pelts ready for tanning, from hides and skins, using proteolytic and lipolytic enzymes in the beam house, wherein in at least one of the part-steps in the beam house consisting of a) the lime in the pH range 11.5 - 14 and the b) bate in the pH range 5 - 11.5 in the aqueous liquors corresponding to these part-steps, alkaline lipases (E.C.3.1.3.) with an activity optimum in the pH range 9 - 11 are employed.

Description

Oblast technikyTechnical field

Vynález se t ý k á zpúsobu výroby holin, pripravených k vyčinšní, zejména enzymatický doplneného loužení a morení, pri nichž se užíva alkalických lipáz, s výhodou v kombinaci s oroteolytickými enzymy.The invention relates to a process for the production of clearings prepared for the preparation of, in particular enzymatically supplemented leaching and pickling, using alkaline lipases, preferably in combination with oroteolytic enzymes.

Dosavadní stav t s c n n i k yThe prior art t s n n i k y

Ed. H. 0. Rehm , zsjména v kombinaci sEd. H. 0. Rehm, especially in combination with

Cí 1 sne použití enzýmu pri výrube usní začalo se zavedením enzymatické moŕicí lázne Or. utto Róhmem r. 1907 podie 0E 200 519. Od táto doby je čím dále časteji, zsjména s ohledem na šetrení životního prostredí navrhováno ooužití proteáz pri rôznych dílčíeb postupoch v lunárne 3 velmi často jsou enzymy také skutečne využívaný, jak je zrejmé napríklad z publikace E. Pfleioerer a R. Reiner, 3iotschnology, str. 729 - 743, VCil 1930. Taká arnylázy, proteázami mají své použití pri morení, napríklad podie US č. 4 273 326. Současná použití lipázy a arnylázy ve forme pankreatinu za prítomnosti kyseliny desoxycholová je známo z maďarského patentového spisu č. 3325,The use of the enzyme in the manufacture of leather began with the introduction of an enzymatic pickling bath. Or. utto Róhmem r. 1907 according to 0E 200 519. Since then, it has increasingly been proposed, particularly with regard to environmental conservation, to use proteases in various sub-processes in the lunar 3 very often the enzymes are also actually used, as is evident, for example, from E. Pfleioerer et al. Reiner, 3 iotschnology, p. Such arnylases, proteases have their use in pickling, for example as described in U.S. Pat. The simultaneous uses of pancreatin lipase and arnylase in the presence of desoxycholic acid are known from Hungarian patent no. 3325.

Onom. Abstr. 77, 7341 k. Os pŕirozené, že se použití lipáz navrhuje zvlášte k odstránení tuku z kôží a kožek, zejména v pŕípadech materiálu s vysokým obsahem tuku, jako je tomu u vepŕové kuže a ovčích kožek a u rôzných odpadových materiálu. Použití k odstránení tuku bylo popsáno napríklad v publikacícn L. H. Posorske, 0. Am. Oil Chem. Soc., 61, (11), 1753 - 1760, 1934, K. Yeshodna a další, Leather Sci (i-ladras) 25 ( 2 ), 77 - 36, 1973, Chem. Abstr. 39, 199o97,About him. Abstr. 77, 7341 b. It is natural to use lipases in particular to remove fat from hides and skins, especially in the case of high-fat material such as pork skins and sheep skins and various waste materials. The use for fat removal has been described, for example, in L. H. Posorske, 0 Am. Oil Chem. Soc., 61, (11), 1753-1760, 1934, K. Yeshodna et al., Leather Sci (i-ladras) 25 (2), 77-36, 1973, Chem. Abstr. 39, 199o97

T. Hielsen, Fette, Seifen, Ansehrichm. 37 (1), 15 - 19,T. Hielsen, Fette, Seifen, Ansehrichm. 37 (1), 15-19,

1935, kde se prípadne pcpisují také nepfíznivé účinky, napríklad na piklcvaná a o d v á p n δ n é ovčí holiny, napríklad také v publikacích A. Vulliermet a další, Technicuir 16 (4)1935, where adverse effects are also described, for example, on plucked and defective sheepwoods, for example also in A. Vulliermet et al., Technicuir 16 (4).

- 76, 1932, Chem. Abstr. 97, 57467 q, Chem. Abstr. 32, 113205g. V posledním literárním údaji se enzymatická odbourávání tuku provádi pomoci lipáz nebo enzymatických prostŕedku, které lipázu obsahují, pri pH nižším než 3, s vý-f hodou v mírne kyselé oblasti.76, 1932, Chem. Abstr. 97, 57467 q, Chem. Abstr. 32, 113205g. In the latest literature, enzymatic fat breakdown is carried out by lipases or enzymatic compositions containing lipase at a pH of less than 3, preferably in a slightly acidic range.

V publikaci Biotechnology, Ed. H. 3. Renm, sv. 7a, str.Biotechnology, Ed. H. 3. Renm, Vol. 7a, p.

644 se uvádí, že mikrobiálni a pankreatické lipázy E.C.3.1.1.3 není možno užívat k propírání vzhledem k velká nestálosti tčchto enzýmu za alkalických podmínek bez onledu na cenu enzýmu. Proti soolečnámu použití lipázy a proteázv mluví pŕedsvším to, že proteázy mohou odbourávat bílkoviny, pŕičemž lipázy mají bílkovinnou povahu.644 states that microbial and pancreatic lipases E.C.3.1.1.3 cannot be used for laundering due to the high volatility of these enzymes under alkaline conditions without the cost of the enzyme. In particular, the protease use of lipase and proteases is that proteases can degrade proteins, whereas lipases are proteinaceous.

V posledné dobe jsou navrhovaný enzymatická zmčkčovací postupy pro kuže a kožky. Pri techto postupecn obsahují zrnekčovací lázneRecently enzymatic softening procedures for hides and skins have been proposed. In these steps, they contain granulating baths

A) lipázy s optimem účinnosti v oblasti pH 9 až 11,A) lipases with optimum efficiency in the pH range 9 to 11,

3) proteázy s účinností v oblasti pH 9 až 11 a(3) proteases with a pH range of 9 to 11; and

C) povrchové aktivní látky, pŕičemž hodnota pH celé zmekčovací lázne je 9 až 11, jak je popsáno napríklad v OE 39 22 743.3.C) surfactants, wherein the pH of the entire softening bath is 9 to 11, as described, for example, in OE 39 22 743.3.

Jako zvlášte vhodné k tomuto účelu se uvádšjí enzymy z kmeňu Aspergillus, zejména z nškterých, geneticky pozmenených kmeňu, muže být užitá napríklad alkalická lipáza z kmene Aspergillus oryzae, který byl získán rekombinací, tato lipáza má optimum účinnosti v rozmezí pH 9 až 11. Použit je možno také lipázu, bežne dodávanou pod obcnooním názvem LIP3LA5E 133 T (Havo Industri Λ/S, DK 2333, Bagsvaerd.Especially suitable for this purpose are enzymes from the Aspergillus strain, in particular from some genetically altered strains, for example, an alkaline lipase from the Aspergillus oryzae strain obtained by recombination may be used, this lipase having an optimum efficiency in the range of pH 9-11. such lipase, commercially available under the trade name LIP3LA5E 133 T (Havo Industrii / S, DK 2333, Bagsvaerd.

Zpracování materiálu s vysokým obsahem tuku, napríklad veprových kúží, ovčích kožek, odpadových materiálu a podobná je však stále ješte zatíženo velkými problémy. jde zejména o skutečnost, že tyto materiály jsou nedostatečnš louženy v celé tlouštce a získané holiny nejsou dostatečnč čisté, takže docnází ke tvorbe nežádoucích vápenatých mýdel, které u hotových materiálu mohou vsst ke špinení.However, the processing of high-fat materials such as pig hides, sheepskins, waste materials and the like is still subject to major problems. in particular the fact that these materials are insufficiently leached throughout their thickness and the obtained clearings are not sufficiently pure so that they produce undesirable calcium soaps which may result in spotting in the finished materials.

Také pri morení .holin, bohatých na tuk vznikají velké obtíže vzhledem k tomu, že vrstva tukových materiálu ve forme filmu, uloženého na povrchu bráni prúniku enzýmu pri morení a tím současne hraní také optimálnímu rozvolnéní zpracovávaných materiálu.Also, in the fat-rich pickling, great difficulties arise, since the film-like layer of fat deposits on the surface prevents the enzyme from leaking during the pickling, and at the same time also plays an optimum loosening of the processed materials.

Ze svrchu uvedeného DE patentového soisu č. 39 22 743.0 vyplývá, že mají být užitý zejména určité lipázy, které jsou účinná v oblasti pH 9 až 11. Vzhledem k tomu, že tyto snzymy podie údaju výrobca mají optimum svého účinku obvykle pri pil 10 až 11, není obvykle možná postup provádet v nižší časti uvedeného rozmezí a postup je obvykle prováden v jeho horní části. Prekročení uvedeného rozmezí pH obvykle nemá žádné podstatné výsledky, avšak čím více se pH vzdaluje svrchu uvedenému rozmezí, je nutno počítat se sníženou účiností a taká se sníženou stabilitou použitého enzýmu, což musí být bráno v úvahu.From the above-mentioned DE patent specification no. 39 22 743.0 suggests that certain lipases, which are effective in the pH range 9 to 11, are to be used in particular. Since these enzymes, according to the manufacturer's specification, have an optimum effect, usually at 10 to 11, the lower part of said range, and the procedure is usually carried out at its upper part. Exceeding said pH range usually does not produce any significant results, but as the pH farther away from the above range, reduced efficacy and thus reduced stability of the enzyme used must be considered, which must be taken into account.

Podstata vynálezuSUMMARY OF THE INVENTION

Hyní bylo neočekávanš zjišťäno, že k uvedenému postupu je možno užít i lipázy, jejichž optimum účinku leží mnohem dele v alkalické obl35ti.Unexpectedly, it has been found that lipases, the optimum effect of which is much longer in the alkaline area, can be used in the process.

Podstatu vynálezu tedy tvorí zpúsob výroby holin, pripravených k vyčinení, z kúží a kožek, pri ooužití oroteolytických a lioolytických enzýmu, zpúsob spočíva v tom, že se alespoň v jednom částečném stupni zpracování v luhárnš užijí vAccordingly, the present invention provides a process for the production of ready-to-tear gums from hides and skins using oroteolytic and lioolytic enzymes, the method comprising the use of at least one partial processing step in

a) luzích o pH 11,5 až 14, zejména 12 až 13,5 a zvlášte až 13 a(a) bases having a pH of 11.5 to 14, in particular 12 to 13.5 and particularly up to 13;

b) močidlec'n v oblasti pH 5 až 11,5, s výhodou 7 až 9,5 a zvlášte 3 až 9 v adpovídajících vodních lázních alkalické lipázy E.C.3.1.3, jejicnž optimum účinku leží v rozmezí pH 9 až 11, s výhodou 10 až 11.b) ureas in the pH range 5 to 11.5, preferably 7 to 9.5 and especially 3 to 9 in the corresponding water bath of alkaline lipase EC3.1.3, the optimum effect of which lies in the range of pH 9 to 11, preferably 10 to 11.

Učinnost je zvlášte vyjádŕena v tom prípade, že se uvedená lipázy uži j í v enzymatická kombinaci EK spolu s neutrálními, poprípade alkalickými oroteázami P, které odpovídají príslušnému stupni zpracování. 3de s výhodou o bežne užívaná proteázy k uvedenému účelu. Loužením se rozumí znárný postup, p ŕ i n e n ž d o c h á z í k nabobtnání oovrchových vrstev ku že a k uvolnení, poprípade odstránení ohlúpô a pesíkú za púsobení alkalických loužicícn chemických látek, postup je popsán napríklad v publikacích F. Stather, Gerbereichemie und Gerbereitechnologie, str, 166 - 199, Akadémie-Verlag 1967 a UUmann/s Encyklopédia of Industrial Chemistry 5.vydání, sv. Λ15, str.The efficacy is particularly expressed when said lipases are used in the EC enzymatic combination together with neutral or alkaline orotases P corresponding to the respective processing step. This is preferably a commonly used protease for this purpose. By leaching is meant a well-known process whereby swelling of the surface layers occurs and the loosening and / or removal of flakes and polishes by the action of alkaline leaching chemicals is described, for example, in F. Stather, Gerbereichemie und Gerbereitechnologie, p. , 166-199, Akadémie-Verlag 1967 and UUmann / s Encyclopedia of Industrial Chemistry 5th edition, vol. 15, p.

259 - 232, VCH 1990. Podie provedení postupu múže být luh složsn z látek, které púsobí uvolnční cnlupú nebo látek, které dovolí zachovaní chluoú. Loužení se obvykle provádí v oblasti pH 12 až 13, lázní je buď tak zvaný hydroxylový luh, obsahující zejména nydroxid vápenatý^ hydroxid alkalického kovu, amoniak a poprípade další hydroxidy kovú alkalických zemin, nebo múže jít o tak zvaný sulfidový luh, jenož základními složkarni jsou sirníky alkalických kovú nebo kovú alkalických zemin, poprípade ve smési s dalšími zásaditými sloučeninami alkalických kovú nebo kovú alkalických zemin.259-232, VCH 1990. According to an embodiment of the process, the liquor may be comprised of substances which act to release the hair or substances that allow the preservation of fluids. The leaching is usually carried out in a pH range of 12 to 13, the bath being either a so-called hydroxyl liquor, containing in particular calcium hydroxide, alkali metal hydroxide, ammonia and possibly other alkaline earth metal hydroxides, or it may be a so-called sulphide liquor. alkali metal or alkaline earth metal sulfides, optionally mixed with other basic alkali metal or alkaline earth metal compounds.

Zpusob podie vynálezu navazuje na známe postupy, tak jak bvly popsány napríklad v Ullmann s Encyclopedia of Industrial Chemistry, 5. vydaní, sv. 15Λ, str. 259 - 232, VCH (1993), Ullmann's Enzyklopädie der Techn. Chemie, 4. vydání, sv. 16, str. 119 až 123, Verlag Chemie 1973, 3. vydání, sv. 11 str. 609, Urban a Schv/arzsnbsrg.The method according to the invention follows the known procedures as described, for example, in Ullmann with Encyclopedia of Industrial Chemistry, 5th edition, Vol. 15Λ, p. 259-232, VCH (1993), Ullmann's Enzyklopädie der Techn. Chemistry, 4th edition, Vol. 16, p. 119 to 123, Verlag Chemie 1973, 3rd edition, vol. 11 p. 609, Urban and Schv / arzsnbsrg.

Luh múže obsahovať 50 až 250, s výhodou 50 až 150 ¾ vody, vztažano na hmotnosť zpracovávané kôže.The liquor may contain 50 to 250, preferably 50 to 150 µl of water, based on the weight of the skin to be treated.

Loužení materiálu trvá obvykle 12 až 56 hodin, s výhodou 16 až 20 hodin.The leaching of the material usually takes 12 to 56 hours, preferably 16 to 20 hours.

Pri odvápnení a morení, které se provádí v luhárnš po loužení dochází k neutralizaci kôží a kožek a k jejich enzymatickému zoracování. Kôže a kožky se pri tomto postupu nejprve promyji a pak se dále zpracovávají , s výhodou pôsobením slabých kyselín, napríklad organických kyselín, jako kyseliny mléčné, mravenčí, octové, máselné, propionová nebo pôsobením dikarboxylových kyselín a také se zbavují vápniku pôsobením slabé kyselých anorganických sloučenin, jako jsou hydrogensiŕičitan sodný, kyselina sulfoftalová, síran amónny nebo také kyselina uhličitá. Obecne je pri odvápnení materiálu zapotí ebí dbát toho, aby pi i konečném zpracování pred pôsobením enzýmu v moridle bylo dosaženo pŕízniváho rozmezí píl. Pro pankreatické enzymy leží toto rozmezí mezi pil 7,5 až 3,2. Hásletíující morení slouží k odstránení zbytkú epidermis a zbytkô chlupô a k dalšímu uvolnení kúže. Zoravidla se po určitá dobe pŕidávají k enzymatickému moridlu zejména enzymy pankreatického komplexu. K enzymúm pankreatického komplexu je možno oŕičíst také lipázy, jichž se využíva podie 0E 37 04 465. Účelnou teplotou pri močení je teolota v rozmazí 32 až 37 °C. Morení obvykle trvá 1 až 3 hodiny.The descaling and pickling, which is carried out in the leaching after the leaching, neutralizes the hides and skins and their enzymatic observation. The hides and skins are first washed and then further processed, preferably by treatment with weak acids, for example organic acids such as lactic, formic, acetic, butyric, propionic or dicarboxylic acids, and also de-calcium by weak acidic inorganic compounds. , such as sodium bisulfite, sulfophthalic acid, ammonium sulfate or else carbonic acid. In general, when decalcifying the material, care should be taken to ensure that a favorable sawing range is achieved even before the enzyme is treated in the mordant. For pancreatic enzymes, this range is between 7.5 and 3.2. Sickling pickling is used to remove residual epidermis and hair residues and to further relax the skin. In particular, the pancreatic complex enzymes are added to the enzymatic mordant for a period of time. The enzymes of the pancreatic complex also include lipases which are used according to OE 37 04 465. An advantageous temperature during urination is that theolysis is in the range of 32-37 ° C. Pickling usually takes 1 to 3 hours.

Enzymatické smčsi s výhodou obsahují zvláštč v prípade enzymatických komoinací ješte sekvestrační činidlo známeho typu pro zábranu tvorby vápenatých mýdsl.The enzymatic compositions preferably contain, in the case of enzymatic comoinations, a sequestering agent of known type to prevent the formation of calcium soaps.

Mimoto se ukázalo,, že je vhodné pridať taká emulgační činidla ES, aby bylo dosaženo zvláštč dobré smulgace tukô. Množství použité láznč odpovidá množství, která bylo uvedeno pro loužení.In addition, it has been found appropriate to add EC emulsifiers in order to obtain particularly good fat emulsification. The amount of bath used corresponds to the amount stated for leaching.

<lď <i Iii 1 i ο<l <<i Iii 1 i ο

Alkalické lipázy ALAlkaline lipases AL

V souladu s bežnými definicemi enzymĹi jde u lipáz, užívaných v prúbéhu zpusobu podie vynálezu o esterázy, které hydrolyzují glycerolestery nasycených alifatických kyselín ve vodném prostredí E.C. 3.i.i.3. Ke štepení triglyceridú s výhodou dochází v ooloze 1,3. Ha rozdíl :od lipáz, používaných pri známých pestopech, které mají rozmezí optimálni účinnosti oŕi pH :6 až 9 mají lipázy, použitá pri orovádení zpusobu podie vynálezu rozmezí optimálního účinku, napríklad v prípade štepení olivového oleje nebo trihutyrinu v rozmezí pH 9 až 11. Alkalická lipázy tohoto typu byly vyvinutý špeciálne pro prúmysl mycích prostŕedkú. Jde o enzymy mikrobiálního púvodu. Potenciálními zdroji pro tyto, poprípade geneticky pozmenené kmeny mikroorganismú, schooné produkovať uvedená lipázy jsou zejména houby a baktérie. Uškteré alkalické lipázy jsou napríklad produkovány kmeny Pseudomonas.In accordance with conventional enzyme definitions, the lipases used in the present invention are esterases which hydrolyze glycerol esters of saturated aliphatic acids in an aqueous E.C. 3.i.i.3. Triglyceride cleavage preferably occurs in oolosion of 1.3. In contrast to the lipases used in known pesticides having an optimum pH range of 6 to 9, the lipases used in the process according to the invention have an optimum effect range, for example in the case of cleavage of olive oil or trihutyrin in the pH range 9 to 11. Alkaline lipases of this type have been developed specifically for the detergent industry. These are enzymes of microbial origin. Potential sources for these possibly genetically altered strains of microorganisms that are capable of producing said lipases are in particular fungi and bacteria. For example, some alkaline lipases are produced by Pseudomonas strains.

Dále pad3jí v úvahu čeledi Rhizopus, Candida a Chrombacterium jako čeledi, vhodná pro produkci lipázy tohoto typu. Ďalšími dôležitými oroducenty lipázy jsou čeledi Geotrichium, Aspsrgillus, ilucor, Penicillium, Corynebacterium, Propionibacterium a Achromobacter. Zvlášte je možno uvést Rhizopus arrhizus a Rh. oryzae, Candida cylindracea, Chromobacterium viscosum, Geotrichium candidum, Mucor mieni, Mucor pusillus, Penicillium rpqueforti a P. cyclopium, Corynobacterium acne, Propionibacterium shermanii, Achromobacter lipolyticum, Aspergillus niger a zvlášte Aspergillu oryzae. Zvlášte vhodná jsou taká nákteré geneticky pozmenená kmeny, napríklad rekombinací získaný kmeň Aspergillus orazae, produkuje alkalickou lipázu s vyjadreným optimem účinku v rozmezí pH 9 až 11. Dále je možno uvést lipázu, bčžná dodávanou pod nazvemRhizopus, Candida and Chrombacterium are suitable for producing lipase of this type. Other important lipase orodatives are the families Geotrichium, Aspsrgillus, ilucor, Penicillium, Corynebacterium, Propionibacterium and Achromobacter. Particular mention may be made of Rhizopus arrhizus and Rh. oryzae, Candida cylindracea, Chromobacterium viscosum, Geotrichium candidum, Mucor mieni, Mucor pusillus, Penicillium rpqueforti and P. cyclopium, Corynobacterium acne, Propionibacterium shermanii, Achromobacter lipolyticum, Aspergillus nigerlu, and in particular Aspergillus nigerlu. Particularly suitable are certain genetically altered strains, for example the recombinantly obtained strain Aspergillus orazae, produces an alkaline lipase with an expressed optimum effect in the range of pH 9 to 11. Further, a lipase, commonly marketed under the name

Lipolase TM 30 T (Novo Industri A/S, D'K 2300 Oagsvaerd, Dánsko ).Lipolase TM 30 T (Novo Industri A / S, D'K 2300 Oagsvaerd, Denmark).

Účinnost lipáz se obvykle provádí na olivovém oleji jako na substrátu, k určení se rovnéž užívá triacetin a tributyrin,Lipase activity is usually performed on olive oil as a substrate, triacetin and tributyrin are also used to determine

Ί postupy jsou popsány v publikacích H. Sémériva a další, 3iochemistry 10, 2143, 1971, Pharmaceutical Enzymes, ed.Procedures are described in H. Semeriva et al., 3iochemistry 10, 2143, 1971, Pharmaceutical Enzymes, ed.

R. Ruyssen a A·» Lauuers 1973 , FIP.R. Ruyssen and A. Lauuers 1973, FIP.

V pripadá, že se účinnost na štepení tuku vyjadrí v kilojednotkách lipázy KLCA, pracuje se za standardních podmínek pri teplote 40 °C pri pH 5,5 pri použití tributyrinu jako substrátu, tak jak je uvedeno ve svrchu uvedené publikaci !-1. Sémériva a dalších.If fat cleavage efficiency is expressed in kilo-units of KLCA lipase, it is operated under standard conditions at 40 ° C at pH 5.5 using tributyrin as a substrate as described in the above-mentioned publication -1. Semeriva and others.

Pro účely vynálezu se účinnost lipázy udáva v jednotkách LCA, které jsou však meŕeny pri pH 9,5. Pri provádšní zpúsobu podie vynálezu se postupuje tak, že se pri pH 9,5 v lázni zajistí účinnost lioázy v rozmezi 100 až 10 000, s výhodou 2030 sž 4000 LCA na kg zpracovávané kuže.For purposes of the invention, lipase activity is reported in LCA units, but measured at pH 9.5. In the process according to the invention, the pH of the bath is 100 to 10,000, preferably 2030 to 4000 LCA, per kg of skin to be treated, at a pH of 9.5 in the bath.

Proteolytické enzymy PProteolytic enzymes

Použití proteáz v luzích o pH v rozmezi 9 až 13 pri dosažení dostatečnáho proteolytického účinku je známe. Ode o neutrálni proteázy E.C.3.4.24 a zejména o alkalická proteá zy E.C.3.4.21, popsané napríklad v publikacích Kirk-Othmer,The use of proteases in pH 9 to 13 ranges to achieve a sufficient proteolytic effect is known. From the neutral proteases E.C.3.4.24 and in particular the alkaline proteases E.C.3.4.21, described, for example, in Kirk-Othmer,

3. vyd., str. 199 až 202, 0. i.'iley 1990, Ullmann s Encyclopedia of Industrial Chemistry, sv. A9, str. 409 až 414, VCH 1937, L. Keay, Process 3ioche:nistry 17 až 21, 1971.3rd ed., P. 199-202, 1990, Ullmann, Encyclopedia of Industrial Chemistry, Vol. A9, p. 409-414, VCH 1937, L. Keay, Process 3chech., Rev. 17-21, 1971.

Tyto oroteázy je možno uvést jako:These orotases are:

alkalické proteázy, jejicnž optimum účinku leží priblíž ne v rozmezi pH 3,5 až 13. K tento enzynún náleží alkalická bakteriálni oroteázy, včtšinou serinového typu a alkalické proteázy z hub. Pŕedevším je nutno uvést proteázy z rúznýcn rouú Bacillus, napríklad jednotlivých kmenú 3. subtilis, 3. licneniformis, 3. firmus, 3? alca lophilus, 3. polymyxa, 3. messntericus, dále mohou tyto proteázy produkovať nškteré kmeny čeledi Streptomyces, napríklad S. alcalopnilus. Vhodná pracovní teplota pri použití bakteriálni ch alkalických proteáz je obecne v rozmezí 40 až 60 °C, v prípade proteáz z hub v rozmezí 20 až 40 °C. Z alkalických proteáz, produkovaných houbami je možno uvést napríklad enzymy z Aspergillus, napríklad Δ. oryzae, z rúzných kmeňu Penicillium, jako P. cyanofulvum nebo z Paecilomyces persicinus. Účinnost alkalických proteáz z hub je optimálni prevažne v rozmezí pH 3,0 až 11,3. Je možno zpravidla vycházet z použití enzymatická účinnosti v roz mezi 3000 až 10 000 L’onl e í n-Volhardovýcn jednotek LVE na 1 g enzýmu.alkaline proteases, the optimum effect of which is close to the pH range of 3.5 to 13. This enzyme includes alkaline bacterial oroteases, mostly of the serine type and alkaline proteases from fungi. Particular mention should be made of proteases from various Bacillus strains, for example of individual strains of 3. subtilis, 3. licneniformis, 3. firmus, 3. alca lophilus, 3. polymyxa, 3. messntericus, furthermore, these proteases can produce some strains of the Streptomyces family, for example S. alcalopnilus. A suitable working temperature using bacterial alkaline proteases is generally in the range of 40 to 60 ° C, and in the case of fungal proteases in the range of 20 to 40 ° C. The alkaline proteases produced by fungi include, for example, Aspergillus enzymes, e.g. oryzae, from various Penicillium strains, such as P. cyanofulvum or from Paecilomyces persicinus. The efficacy of alkaline proteases from fungi is optimally predominantly in the pH range of 3.0 to 11.3. As a rule, it can be assumed to use enzymatic activity in the range of between 3000 and 10,000 LVE / volt LVE units per g of enzyme.

Heutrální proteázy s optimem účinnosti v rozmezí pil 6,0 až 9,0. Je nutno uvást predavším neutrálni bakteriálni proteázy, které zoravidla náleží k metalloenzymúm a protsázy z hub, napríklad neutrálni proteázy z rúzných kmeňu Sacillus, jako 3. subtilis, 3. natto a 3. polymyxa, proteázy z rúzných kmenú Pseudomonas nebo Streptomyces a také z Aspergillus, napríklad A. oryzae, A. parasiticus a Penicillium glaucum. Neutrálni proteázy z baktérií vyvíjejí svoji účinnost optimálna pri pracovní teplote v rozmezí 20 až 50 °C, kdežto oŕíznivá pracovní teplota pro neutrálni proteázy z hub leží v rozmezí 35 až 40 °C.Heutral proteases with potency optimum ranging from pI 6.0 to 9.0. In particular, neutral bacterial proteases belonging to metalloenzymes and fungal proteases, for example neutral proteases from various Sacillus strains such as 3rd subtilis, 3rd natto and 3rd polymyxa, proteases from various strains of Pseudomonas or Streptomyces and also Aspergillus , for example A. oryzae, A. parasiticus and Penicillium glaucum. Neutral proteases from bacteria exert their optimum activity at a working temperature in the range of 20 to 50 ° C, while the harsh working temperature for neutral fungal proteases is in the range of 35 to 40 ° C.

Proteolytická účinnost téchto enzymú ss stanoví obvykle podie Anson-hemoglobinové metódy podie publikace H.L. Anson,The proteolytic activity of these enzymes is usually determined by the Anson-hemoglobin method of H.L. Anson,

0. Gsn. Physiol., 22, 79, 1939 nebo také podie Ľóhlein-Volnardovy metódy, která je v modifikaci podie Tegeuy uvedená v Leder 22, 121 až 126, 1971. Jedna Ľóhlein-Volhardova jednotka LVE za standardních oodmínek, to znamená pôsobení 1 hodina pri teplote 37 °C odpovídá tomu množství enzýmu, který vyvolá ve 20 ml filtrátu kaseinu vzestup produktu nydrolýzy, který odpovídá ekvivalentu 5,75 x 10 mi 0, i H nydroxiau sodného. Účinnost proteázy je obvykle 1000 až 60 000 LVE/kg, s výhodou 2000 až 14 000 LVE/kg káže.0. Gsn. Physiol., 22, 79, 1939, or else according to the Löhlein-Volnard method, which is in the Tegeuy modification disclosed in Leder 22, 121-126, 1971. One Löhlein-Volhard unit LVE under standard conditions, i.e., 1 hour at temperature 37 [deg.] C. corresponds to the amount of enzyme which induces an increase in nydrolysis product in 20 ml of casein filtrate corresponding to an equivalent of 5.75 * 10 &lt; 10 &gt; H sodium sodium hydroxide. Protease activity is usually 1000 to 60,000 LVE / kg, preferably 2000 to 14,000 LVE / kg.

Podie účinnosti se užívá pri provádšní zpusobu podie vynálezu množstvi proteázy v rozmszí_0,05 až 0,3, s výhodou 0,1 až 0,25 % hmotnostních, vztaženo na hmotnost výchozí kúže nebo kožky.Depending on the efficacy, the amount of protease used is according to the invention in the range of 0.05 to 0.3, preferably 0.1 to 0.25% by weight, based on the weight of the starting skin or skin.

Ze (syntetických) povrchové aktivníc'n látek je možno použit napríklad bežné emulgátory, zvlažte ty, která se obvykle užívají k emulgaci tuku ve vode, tak jak jsou uvedený napríklad v 03 536 540, DE 394 142, FR 399 935 a FR 913 523. V prvni rade jsou vhodné neionogenní emulgátory, které je možno volit napríklad z následujicích skupín:Of the (synthetic) surfactants, for example, conventional emulsifiers can be used, especially those commonly used to emulsify fat in water, such as are disclosed, for example, in 03 536 540, DE 394 142, FR 399 935 and FR 913 523 First of all, nonionic emulsifiers are suitable and can be selected, for example, from the following groups:

I. Polyglyxolove deriváty (v závorce jsou uvedený použitelné bežné dodávané produkty)I. Polyglyxol derivatives (the usual available products are indicated in brackets)

a)a)

b)b)

c) polyglykoly nasycených alifatických kyselín oolyglykolethery alifatických alkoholú polyglykolethery alkylfenolú ( Ei íUĽPH0R^g) (OEHYDOL*) (EHULGIU 236*. FLLII03L W 100*,(c) polyglycols of saturated aliphatic acids oolyglycol ethers of aliphatic alcohols polyglycol ethers of alkylphenol (EI UUPHPHR ^g ) (OEHYDOL *) (EHULGIU 236 *.

HARLOPHEd,HARLOPHEd.

IGEPAL*)IGEPAL *)

d) ethanolamidopolyglykoletnery alifatických kyselín (C*, FORYL KV/^R (d) ethanolamidopolyglycol ethers of aliphatic acids (C *, FORYL KV / ^R

Ei-ILILGIil)EI-ILILGIil)

II. Deriváty glycerolu pII. Glycerol derivatives p

a) monoglyceridy alifatických kyselín (TEGOilQLS')a) monoglycerides of aliphatic acids (TEGOilQLS ')

b) polyglycerolestery alifatických kyselínb) polyglycerol esters of aliphatic acids

Oále js možno použit aniontová emulgátory, napríklad následujicích typú:In addition, anionic emulsifiers can be used, for example of the following types:

•e• e

III. Sulfáty v z or c 2 R - 0 S 0 i 1 aIII. Sulphates in Z 2 R - O S 0 i 1 a

a) primárni alkoholu a sekundárni sulfáty alifatických (EPPDL DL conc PÉRAMIT ML, TEEPDL)(a) primary alcohols and secondary aliphatic sulphates (EPPDL DL conc PÉRAMIT ML, TEEPDL)

b)b)

c) ethersulfáty alifatických alkoholu ďionoglyceridsulfátyc) aliphatic alcohol ether sulfates diionoglyceride sulfates

b) sulfatační produkty nenasycených olejú a alifatických kyselín(b) sulphation products of unsaturated oils and aliphatic acids

a)a)

b)b)

c)c)

b)b)

e)e)

i) u 1 f o n á t y vzorce R- 5 0 i J a alkylbenzonsulfonáty (A3S, TPS) alkylsulfonát konbenzační produkty alifatických kyselín sulfonované deriváty nafty sulfatační produkty nenasycených alifatických olejú a alifatických kyselín alkylbenzensulfonáty s krátkym retezcern, napríklad kumoly, toluoly nebo xylsnoly.i) u-phthalates of the formula R-50O and alkylbenzone sulfonates (A3S, TPS) alkylsulfonate conjugation products of aliphatic acids sulfonated naphtha derivatives sulfation products of unsaturated aliphatic oils and aliphatic acids with short chain alkylbenzenesulfonates, e.g.

(TEXAPOII Q^R) (VEL) (LEDER0LIMOR DK'IS) (iiARLOPO!l^R,(TEXAPOII Q ^R) (VEL) (LEDER0LIMOR DK'IS) (iiARLOPO? L ^R,

MAiRL0U^R) (MER53LAT^R) (IuEP0NA^R, icepomt^r) (obsaženy v GRASSAi! 3) (GUTISAi! 35^R)MAiRL0U ^R ) (MER53LAT ^R ) (IuEP0NA ^R , icepomt ^r ) (included in GRASSAi! 3) (GUTISAi! 35 ^R )

Mene vhodná jsou kationtové emulgátory, napríklad následujicích typú:Cationic emulsifiers are less suitable, for example of the following types:

ηη

v.in.

Soli s aminy vzorce , í^Hx (SAPAMIN^R, S0R0MIH^R)Salts with amines of formula, ^Hx (SAPAMIN ^R , S0R0MIH ^R )

VIVI

(REPELLAUT^R)(REPELLAUT ^R )

a) amoniová soli(a) ammonium salts

b) pyridiniove soli.b) pyridinium salts.

V tšchto zbytcích znamená R alkylový zbytek o 3 až 24 atomech uhlíku, zbytky R^, R_? a R^ znamenaji alkylové zbytky o až 6 atomecn uhlíku.The times required radicals R is an alkyl radical of 3 to 24 carbon atoms, radicals R, _R? and R ^ are alkyl radicals of up to 6 carbon atoms.

Emulgátory, použitelné oči provádéní zpúsobu podie vynálezu mají hodnotu HL3 (emulze olej ve vode) v rozmezí 3 až 13, s výhodou 9 až 15 3 zvlažte 12 až 15, jak bylo popsano napríklad v Ullmanns Encyklopédie der Techn. Chemie, 4. vyd., sv. 19. S výhodou je možno použít také kombinaci emulgátorú, zejména neiontovýcn a aniontových emulgátorú. Zvlažte je nutno se zmĺnit o kombinacích emulgátorú ES následujících tysú, EO = stupeň ethoxylace.Emulsifiers useful in the process of the invention have an HL3 (oil in water emulsion) value in the range of 3 to 13, preferably 9 to 15, especially 12 to 15, as described, for example, in the Ullmanns Encyclopedia der Techn. Chemie, 4th ed., Vol. 19. A combination of emulsifiers, in particular nonionic and anionic emulsifiers, may also be advantageously used. Especially the EC emulsifier combinations of the following types should be mentioned, EO = degree of ethoxylation.

x % ethoxylátu alifatického alkoholu o 11 až 13 atomech uhlíku s hodnotou EO 6 až 10, s výhodou 3 až 9, y -i sodná soli sulfonátu nasyceného uhlovodíku o 15 až 17 atomech uhlíku, z % ethoxylátu alifatického alkoholu o 16 až 13 atomech uhlíku s 5 až 7 moly kvarternizovaného ethylenoxidu, do 100 % voda, pŕičemž x = 10 až 50 s nmotnostních y = 10 až 50 k nmotnostních z - 1 až 10 nmotnostních.x% of an aliphatic alcohol ethoxylate of 11 to 13 carbon atoms with an EO value of 6 to 10, preferably 3 to 9, γ-1 saturated sodium hydrocarbon sulfonates of 15 to 17 carbon atoms, of the% of ethoxylate of an aliphatic alcohol of 16 to 13 carbon atoms with 5 to 7 moles of quaternized ethylene oxide, up to 100% water, wherein x = 10 to 50 with a weight of y = 10 to 50 to a weight of from 1 to 10 weight.

Obsah emulgátorú v lázni ss pohybuje v závislosti na použitém typu emulgátorú zpravidla v rozmezi 0,1 až 1 % hmôt12 nostní, v závislosti na čerstvé hmotnosti kože nebo kožky nebo na hmotnosti kože nebo kožky v soli. Je dôležité, že pri použití tšchto kombinací nedochází k tvorbe sraženin, které je jinak nutno očekávat. Dále mohou floty obsahovat známá sekvesťační činidla. Sekvestrační činidlo se volí ze skupiny polyfosfátú, fosfonátô, polykarboxylátu, kyseliny etnylendiamintetraoctová EOTA, kyseliny nitriltrioctové, kyseliny diethylentriaminpentaoctové. Obsah sekvestračních čiidel v lázni se môže pohybovat v rozmezi 0 až 0,5, s výhodou 0,05 až 0,15 % hmotnostních, jak je uvedeno v publikaci Kirk-Othmer, Encyclopedia of Chemical Technology,Depending on the type of emulsifier used, the emulsifier content of the DC bath generally ranges from 0.1 to 1% by weight, depending on the fresh weight of the skin or skin or the weight of the skin or skin in the salt. Importantly, the use of these combinations does not produce clots which would otherwise be expected. In addition, the flotation may comprise known sequestering agents. The sequestering agent is selected from the group of polyphosphates, phosphonates, polycarboxylate, ethnylenediaminetetraacetic acid EOTA, nitrilotriacetic acid, diethylenetriaminepentaacetic acid. The content of sequestering agents in the bath may range from 0 to 0.5, preferably 0.05 to 0.15% by weight, as described in Kirk-Othmer, Encyclopedia of Chemical Technology,

3. vyd., sv. 5, str. 344 až 345, J. V/iley 1979.3rd ed., Vol. 5, p. 344-345, J. V / iley 1979.

Pri provádéní zpusobu podie vynálezu je možno postupoval následujicím zpôsobem:In carrying out the process according to the invention, the following process can be carried out:

Použité lipážy odpovídají svrchu uvedenému vymezení, totéž platí o proteázách.The lipases used correspond to the above definition, the same applies to proteases.

Louženíleaching

U zmäkčených koží nebo kožek se na počátku postupu pŕidávají kombinace enzymô nebo enzymy jako takové k odstránení chlupô. Jako výhodné se ukázaly zejména enzymatické kombinace EK s následujícícm složením:In the case of softened hides or skins, enzyme combinations or enzymes per se are added at the beginning of the process to remove hair. Especially enzymatic combinations of EC with following composition proved to be advantageous:

100 - 1000 KLVE100 - 1000 KLVE

0,1 - 5 h hmmrt.0.1 - 5 h hmmrt.

1,0 - 20 % hmôt do 100 ¾ hmôt.1.0 - 20% by weight up to 100 ¾ by weight.

alkalické proteázy z baktérií, napríklad z Sac. subtilis, nebo Bac. licheniformis, lipáza s účinností 5000 Ll)/mg tripolyfosfát sodný síran sodný.alkaline proteases from bacteria such as Sac. subtilis, or Bac. licheniformis, lipase with an efficacy of 5000 µl) / mg sodium tripolyphosphate sodium sulfate.

Celkové množství této smési se pohybuje obvykle v rozmezí 0,05 až 1 % hmotnostní, vztaženo na čerstvou hmotnost kúže nebo' na její hmotnost v soli.The total amount of the composition is generally in the range of 0.05 to 1% by weight, based on the fresh weight of the skin or its weight in salt.

Množství použití floty je 150 + 50 teplota se pohybuje s výhodou približne okolo 20 °C. Luhy s obsahem síry obsahuj! pomerné menší podíl chemických látek, obvykle 0,6 % hmotnostní ch 72¾ hydrogensulfidu sodného a približné 0,2 hmotnostních 60¾ sulfidu sodného a mimoto približné 1,5 ¾ hmotnostních hydrátu oxidu vápenatého, vztaženo na kú ž i pri pH 12,3.The amount of use of the fleet is 150 + 50 and the temperature is preferably about 20 ° C. Sulfur containing liquors contain! a relatively minor proportion of chemicals, usually 0.6% by weight of 72¾ sodium hydrogen sulphide and about 0.2% by weight 60¾ sodium sulphide and, in addition, about 1.5 ¾% calcium oxide hydrate, based on the skin at pH 12.3.

Za téchto podmínek se kúže zpracovává 1,5 hodiny a pak se pridává enzým, zvlášté kombinsce enzýmu EK-II, zpravidla v podílu približné 0,3 % hmotnostních, s výhodou současnš se stejným množstvím hydroxidu vápenatého a pak se kúže krátkou dobu ponechávají v táto lázni za stáleho pohybování kúžemi a pak se kúže v téze lázni ponechaj! ješté 16 hodin za občasného promíchání láznš.Under these conditions, the skin is treated for 1.5 hours and then an enzyme, a particular combination of the enzyme EK-II, is added, generally in a proportion of about 0.3% by weight, preferably simultaneously with the same amount of calcium hydroxide, and then left for a short time. bath while constantly moving the skin and then leave the skin in the same bath! 16 hours with occasional stirring of the bath.

Po vypušténí láznš a po promytí, s výhodou pri použití približné 150 % vody pri teplote 28 °C se získají holiny s velmi dobrou kvalitou. Velmi dobrá je napríklad hladkost a čistota takto zpracovaných holin.After the baths have been drained and washed, preferably using approximately 150% water at a temperature of 28 [deg.] C., very good quality is obtained. The smoothness and purity of the treated soils are very good, for example.

Pri louženíjipŕi némž má být srst zachována se kúže nebo kožky zmékčí obvyklým zpúsobem. Bylo prokázáno, že kúže a kožky, které byly predbšžnš zpracovávány 4 až 20 hodin púsobením alkalické proteázy o pH 8 až ii a pak byly zpracovávány pri téže hodnotš pH 2 až 6 hodin púsobením alkalické lipázy v téže nebo v čerstvé lázni jsou zvlášté dobre pripravený pro následujicí proteolytické odstránení srsti. S výhodou se pojzmékčení zafazuje stupeň, pri némž se v souladu s obsahem DE 30 02 640 užije hydroxid vápenatý spolu s organickými thiosloučeninami a aminy v približné 30 í ^?s·; vody pri pH 12 Pak se provádí stupeň, pri nemž se uvolní srst. Pri použití enzymatické kombinace EK-II podie vynálezu je možno vystačit se sníženým množstvím sulfidu, napríklad 0,4 % hmotnostních hydrogensulfidu sodného o koncentraci 72 ^?s, vztaženo na hmotnosť kúže. Po pomerné krátke dobé, napríklad približné dve hodiny je kúže zcela zbavena ochlupení. Pak se s výhodou pridá ježte 70 % hmotnostních vody společné se 2 ^?s hmotnostními hydroxidu vápenatého a približné 0,3 -s hmotnostními 50¾ hydroxidu sodného a postup se nechá probíhat po dobu približne 14 hodin pri teploté 23 °C za krátkodobého promíchání v určitých časových intervalech. Pak se lázeň vypustí a další zpracováni probíhá obvyklým zpúsobem. Po loužení mu ž e nasledovať odstránení zbytkú svaloviny a štepení kúže.In leaching, in which case the coat is to be maintained with the skin or skin softened in the usual manner. Skins and skins which have been pre-treated for 4 to 20 hours with an alkaline protease at pH 8 to ii and then treated at the same pH for 2 to 6 hours with an alkaline lipase in the same or fresh bath have been shown to be particularly well prepared following proteolytic hair removal. Advantageously, the coating comprises a step in which, in accordance with the content of DE 30 02 640, calcium hydroxide, together with the organic thio compounds and amines, is used in approximately 30% by weight ^. with·; Water at pH 12 The hair release step is then carried out. When using the enzyme combination EK-II according to the invention, a reduced amount of sulphide, for example 0.4% by weight of sodium hydrogen sulphide at a concentration of 72%, is sufficient ^. s, based on the weight of the skin. After a relatively short time, for example about two hours, the skin is completely free of hair. Then preferably 70% by weight of water together with 2 ^? % by weight of calcium hydroxide and about 0.3% by weight of 50¾ by weight of sodium hydroxide, and the procedure is allowed to proceed for approximately 14 hours at 23 ° C with brief stirring at certain time intervals. The bath is then drained and further processing is carried out in the usual manner. Leaching may be followed by removal of residual muscle and splitting of the skin.

Morenímoraine

Materiál, pripravený obvyklým zpusobem, napríklad holiny, zbavené zbytkú svaloviny po štepení se zpravidla nejprve bežným zpôsobem promyji a odvápní. Obvykle stačí pridaní približné 2 % hmotnostních činidla pro odvápnšná, vztaženo na hmotnosť kúže k lázni s objemem približné 50 % pri teploté 30 °C, napríklad ve forme nékteré ze svrchu uvedených kyselín, jako kyseliny uhličité nebo nékteré dikarboxylové kyseliny v kombináci s amonými solemi, prísady se s výhodou pridávají ve dvou podílech po 1 hmotnostním a nechají se účinkovať vždy 10 až 20 minút, čímž dôjde k poklesu pH na približná 3,5. Pro morící lázne platí, že se pŕidává ješte totéž množství vody, s výhodu s teplotou 35 °C a enzymy se pridávají s výhodou ve formé enzymatické kombinace EK.The material prepared in the customary manner, for example, the cleared areas, free of residual muscle after grafting, is generally first washed and decalcified in a conventional manner. Typically, it is sufficient to add about 2% by weight of the descaling agent to the bath of about 50% at 30 ° C, for example in the form of any of the above acids, such as carbonic acid or some dicarboxylic acid in combination with ammonium salts, The additives are preferably added in two portions of 1 weight each and are allowed to act for 10 to 20 minutes each, thereby bringing the pH to about 3.5. For the pickling bath, the same amount of water is added, preferably at a temperature of 35 ° C, and the enzymes are preferably added in the form of an enzyme combination EC.

Zpravidla se užijí enzymatické kombinace EK s následujícím typickým složením:As a rule, enzymatic combinations of EC with the following typical composition are used:

až 1000 KLVE pankreatický komplex enzýmuup to 1000 KLVE pancreatic enzyme complex

0,5 až 5 % hmotnostních alkalická lipáza s účinností 5000 LU/mg0.5 to 5% by weight alkaline lipase with an efficiency of 5000 LU / mg

1,0 až 30 % hmotnostních tripolyfosfát sodný do 100 h hmotnostních síran sodný nebo amonný.1.0 to 30% by weight of sodium tripolyphosphate up to 100% by weight of sodium or ammonium sulphate.

Smés podie vynálezu se užije po odvápnšní a nechá se púsobit pri teploté 30 až 3-5 °C po dobu 20 až 120 minút. Užije· se 0,5 až 2 % této smési, vztaženo na hmotnost zpracovávané holiny.The mixture according to the invention is used after decalcification and is left to operate at 30 to 3-5 ° C for 20 to 120 minutes. 0.5 to 2% by weight of the mixture to be treated is used.

S výhodou se holina zpracovává jednu hodinu pri teplote 33 °C za pohybování kúží, pri pH v rozmezí 3 až 3,5, s výhodou 7,9. Pak se flota vypustí a holiny se promyjí pri použití približne 200 ⁵s vody pri teploté 22 °C za pohybování kúžemi. Pak je možno kúže bšžným zpúsobem zpracovávat piklováním a chromočinäním.Preferably, the ground is treated for one hour at 33 ° C while the skin is moving, at a pH in the range of 3 to 3.5, preferably 7.9. Take a fleet omitted and the pelts are washed using about ⁵ 200 in water at 22 ° C with agitation of the skin. The skins can then be processed in a conventional manner by pickling and chrominating.

Výhody zpúsobu podie vynálezuAdvantages of the method of the invention

Zpusob podie vynálezu je založen na pozorování, že je možno s výhodou použít enzymatické preparáty, které obsahují jednu nebo vétší počet lipáz, jejichž optimum účinku podie udajú výrobce leží v oblasti pH 10 až 11 a to jak v luhu ú pH približné 13, tak v moridle o pH 7 až 9. Zvláštš dobrého účinku je možno dosáhnout pri kombinaci uvedených lipáz s odpovídajícími neutrálními a alkalickými proteázami. Oosáhnout je možno zejména následujících výhod;The method according to the invention is based on the observation that it is advantageous to use enzymatic preparations which contain one or more lipases whose optimum effect according to the manufacturer is in the range of 10 to 11, both in the caustic at a pH of approximately 13 and A particularly good effect can be obtained by combining said lipases with the corresponding neutral and alkaline proteases. In particular, the following advantages may be obtained;

zlepšené uvolnení pigmentového základu, zlepšeného odstránení tuku z holin, nižší výskyt žírných vrásek a menší stažení líce výsledné usne, možnost provést odchlupení za podmínek, pri nichž se užije postupu s malým množstvím sulfidu nebo zcela bez použití sulfidu.improved loosening of the pigment base, improved removal of fat from the clearings, reduced occurrence of mastic wrinkles, and less wrinkling of the resulting leather, the possibility of peeling under conditions using a low sulfide or no sulfide process.

Pfi použití alkalických lipáz v moridle, jehož pH je v oblasti 7 až 9, s výhodou v kombinaci s pankreatickými enzymy je možno pozorovat pfedevším zlepšené uvolnení kúže od jejího podkladu a menší výskyt špiny na kúži.When using alkaline lipases in a stain which has a pH in the range of 7-9, preferably in combination with pancreatic enzymes, an improved release of the skin from the substrate and less dirt on the skin can be observed.

Praktické provedení zpúsobu podie vynálezu bude osvetlená následujicími príklady, která však nemaj í sloužit k omezení rozsahu vynálezu.The practice of the present invention will be illustrated by the following examples, which are not intended to limit the scope of the invention.

Príklady provedení vynálezuDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

Použité prostredky:Means used:

Prostŕedek EK-I: moridlo s obsahem lipázEK-I: lipase-containing stain

100 KLVE % hmôt.100 KLVE% of mass.

% hmôt.% wt.

% hmôt.% wt.

do 100 % hmôt.up to 100% by weight.

komplex pankreatických enzymú, ppancreatic enzyme complex, p

alkalická lipáza, (Lipolase' 100 Talkaline lipase, (Lipolase '100 T

NOVO), 5000 LU/mg tripolyfosfát sodný síran sodný síran amonnýNOVO), 5000 LU / mg sodium tripolyphosphate sodium ammonium sulphate

Prostŕedek EK-II: pomocný luh s obsahem lipázyFormulation EK-II: Auxiliary liquor containing lipase

500 KLVE % hmôt.500 KVA% wt.

do 100 % hmôt.up to 100% by weight.

bakteriálni alkalická proteáza z Qacillus substilis pbacterial alkaline protease from Qacillus substilis p

alkalická lipáza (Lipolase 100 T) síran sodný.alkaline lipase (Lipolase 100 T) sodium sulfate.

Činidlo pro odvápnení na bazi síranu amonného a dikarboxylových kysellin:Descaling agent based on ammonium sulphate and dicarboxylic acids:

emulgátor-kombinace ES:emulsifier-combination ES:

% hmôt h hmôt % hmôt do 100 % hmôt.% wt h wt% wt up to 100 wt%.

ethoxylát alifatického alkoholu o 13 atomecn uhlíku s 8 moly ethylenoxidu sodná sul sulfonátu nasyceného uhlovodíku o 15 atomecn uhlíku .aliphatic alcohol ethoxylate of 13 atomic carbon with 8 moles of ethylene oxide sodium sulphonate of saturated hydrocarbon of 15 atomic carbon.

ethoxylát alifatického aminu o 16 až 10 atomecn uhlíku s 8 moly ethy lsnoxidu, kvarternizovaný voda.aliphatic amine ethoxylate of 16 to 10 carbon atoms with 8 moles of ethylene oxide, quaternized water.

Pokus 1: Výroba mekého materiálu pro svršky bot, moreníExperiment 1: Production of soft material for shoe uppers, pickling

Materiál: Rozštepené holiny skotu s tlouštkou 2,5 mm (údaje jsou vztaženy na hmotnost holiny)Material: Split bovine cattle with a thickness of 2.5 mm (data are based on the weight of the cattle)

Výchozí materiál: 100 kg surová kúže.Starting material: 100 kg raw skin.

Promytí :Wash:

200 % voda, 30 °C, 10 minút pohybovaní kuží - interval, flota se vypustí odvápnéní:200% water, 30 ° C, 10 minutes moving the skin - interval, the flot is released by decalcification:

% voda, 30 °C % činidlo pro odvápnšní, vždy po 10 minútach pohyb kuží +1 % činidlo pro odvápnšní, pohybu kuží v intervalech 20 minút K = pH 8,5, bez barvy.% water, 30 ° C% descaling agent, every 10 minutes skin movement +1% descaling agent, skin movement at 20 minute intervals K = pH 8.5, no color.

Moridlo:stain:

+50 % voda, 35 °C % produkt EK-I, pohyb kúží v intervalech 60 minút flota se vypustí+ 50% water, 35 ° C% product EK-I, movement of the skin at intervals of 60 minutes

Promytí:wash:

200 e200 e

voda, 22 °C, pohyb kiiží v intervalu minút, flota se vypustí.water, 22 ° C, movement of the skin at intervals of minutes, the flotation is released.

Piklování a chramočinení: tyto postupy se provádéjí bežným zpúsobem.Picnicking and chrominating: these procedures are carried out in the usual way.

Analytické údaje:Analytical data:

obsah tuku ve flote obsah tuku v holinefat content in flot fat content in holin

0,6 g/10.6 g / l

0,25¾ hmôt., vztaženo na sušinu0.25% by weight, based on dry matter

Pro srovnání byl proveden obdobný pokus, avšak bez použití lipázy. V tomto prípade bylo dosaženo následujících analytických výsledku:For comparison, a similar experiment was carried out but without using a lipase. In this case, the following analytical results were obtained:

obsah tuku ve flote: obsah tuku v holine:fat content in flot: fat content in holin:

0,4 g/10.4 g / l

0,4 % hmôt., vztaženo na sušinu.0.4 wt.%, Based on dry weight.

Pokus 2: Zpiisob výroby materiálu, vhodného pro výrobu odevu z ovčí kúže.Experiment 2: Method of making a material suitable for producing sheepskin garment.

(Údaje jsou vztaženy na hmotnost holiny.)(Data are based on weight of clearing.)

Výchozí materiál:Starting material:

100 kg nerozštépených ovčích holín (činicí nádoba).100 kg of undrawn sheep boots (tanning pot).

Promytí:wash:

200 % voda, 30 °C pohyb kúžs v intervalech 10 minút flota se vypustí.200% water, 30 ° C movement of the bites at intervals of 10 minutes the flot is drained.

OdvápnšníOdvápnšní

50,0 %50.0%

1,4 % voda, 30 °C, pohyb kúží činidlo pro odvápnšní, pohyb kúží 20 minút, pH 3,6.1.4% water, 30 ° C, descaling agent, 20 minutes, pH 3.6.

Moridlo :Moridlo:

+50,0 % +50,0% voda, 35 °C water, 35 ° C 0,3 % 0.3% emulgátor ES EC emulsifier 1,0 1.0 produkt EK-I, 2 hodiny pH 8,5, teplota 32 °C, flota se vypustí. product EK-I, pH 8.5 for 2 hours, 32 ° C, discarded. pohyb k ú ž í movement to the skin Promytí: wash: 200,0 % 200.0% voda, 22 °C, 10 minút flota se vypustí. water, 22 ° C, 10 min. pohyb kúží, movement of skin,

Piklování a činení: tyto postupy se provádéjí obvyklým zpúsobem.Picnicking and tanning: these procedures are carried out in the usual way.

Analytické údaje:Analytical data:

Obsah tuku ve flote obsah tuku v holineFat content in flot Fat content in holin

9,3 g/19.3 g / l

3,5 % hmôt, vztaženo na sušinu.3.5% by weight, based on dry matter.

Pro srovnání byl týž výchozí produkt zpracováván stejným zpúsobem, avšak bez použití alkalické lipázy, s následujícím výsledkem:For comparison, the same starting product was treated in the same manner, but without the use of an alkaline lipase, with the following result:

Obsah tuku ve flote: 6,1 g/1 obsah tuku v holine 4,9 % hmôt., vztaženona sušinu.Fat content in the flot: 6.1 g / l fat content in the wort 4.9% by weight, based on dry matter.

Pokus 3: Výroba materiálu pro výrobu ošacení z veprové kúže (moridlo)Experiment 3: Production of material for the production of pigskin clothing (mordant)

Materiál: veprové holiny, štepené na 2,0 mm činení, údaje jsou uvedený v hodnotách, vztažených na hmotnost holin.Material: Pigs, split to 2.0 mm tanning, data are given in terms of weight of the clearings.

Promytí:wash:

200 % voda, 30 °C, 10 minút pohy'o kúži, flota se vypustí.200% water, 30 ° C, 10 min.

Odvápnení:decalcification:

% voda, 30 °C % činidlo pro odvápnení, 30 minút pohyb kúži, flota o pH 3,6.% water, 30 ° C% descaling agent, 30 minutes skin movement, pH 3.6 fleet.

Moridlo:stain:

+100,0 % 0<,3 % 1,0% voda, 35 °C, kombinace emulgátorú ES prostŕedek EK-I, 90 minút pohyb kúži, pH = 3,3, teplota 33 °C.+100.0% 0 <, 3% 1.0% water, 35 ° C, EC emulsifier combination EC-I, 90 minutes skin movement, pH = 3.3, temperature 33 ° C.

Promytí:wash:

200200

Piklování a chromočinení:Picnicking and chrominating:

Analytické údaje:Analytical data:

Obsah tuku ve flote obsah tuku v holine voda, 22 °C, 10 minút pohyb kúži, flota se vypustí.Fat content in flot Fat content in clear water, 22 ° C, skin movement for 10 minutes, the flotation is drained.

oba tyto postupy se provádejí obvyklým zpúsobem.both of these processes are carried out in a conventional manner.

13,1 g/113.1 g / l

7,1 h, vztaženo na sušinu.7.1 h, based on dry matter.

Pro srovnání byl proveden ješte pokus, pri némž byl týž výchozí materiál zpracováván stejným zpúsobem, avšak bez použití alkalické lipázy s následujícím výsledkem:For comparison, an experiment was conducted in which the same starting material was treated in the same manner, but without using an alkaline lipase, with the following result:

obsah tuku .ve flote obsah tuku v holinefat content .in flote fat content in holin

10,2 g/1 3,9 %, vztaženo na sušinu.10.2 g / l 3.9% based on dry weight.

Pokus 4: Enzymatické Experiment 4: Enzymatic odstránení srsti z ovčích kožek. removing fur from sheepskins.

Materiál: material: 200,0 % 0,1 200.0% 0.1 voda, 23 °C, neiontový emulgátor na bazi alifatického alkoholu o 13 atomecn uhlíku s 3 moly ethylenoxidu, 20 minút pohyb kúží, 30 minút bez pohybu, 20 minút pohyb kuží, flota se vypustí. water, 23 ° C, a nonionic emulsifier based on an aliphatic alcohol of 13 atomic carbon with 3 moles of ethylene oxide, 20 minutes movement of the skin, 30 minutes without movement, 20 minutes movement of the skin, the fleet is released.

Hlavní mékóící lázeň:Main softening bath:

200,0 % 200.0% voda, 26 °C, water, 26 ° C, 0,2 h 0.2 h enzymatické zmčkčovadlo na bazi protsolytických enzýmu z Bacillus licheniformis, 4000 LVE/g enzyme based plasticizer protsolytic enzymes from Bacillus licheniformis, 4000 LVE / g ' 0,7 % '0,7% uhličitan sodný, pH 9 až 10, 260 minút pohyb kuží, flota ss vypustí. sodium carbonate, pH 9 to 10, 260 minutes movement of the skin, flota DC will be released.

Odstránení srsti: Hair removal: 200,0 % 0,005 % 0,6 - 1,1 % 200.0% 0.005% 0.6 - 1.1% voda, 32 °C, alkalická lipáza, 5000 LU/mg uhličitan sodný, pH 3 až 10, 3 až 4 hodiny pohyb kuží, water, 32 ° C, alkaline lipase, 5000 LU / mg sodium carbonate, pH 3 to 10, 3 to 4 hours movement of the skin, + 2,0 h + 2.0 h proteolytický enzým k odstránení srsti z Aspergillus parasiticus, 4000 LVE/g, 60 minút pohyb kuží, pak ješ.t e 16 až 24 hodin pohyb kíiží 1 min/hod. pH = 9,1, teplota 23 °C, flota se vypustí srst se odastraní. proteolytic enzyme to be removed fur from Aspergillus parasiticus, 4000 LVE / g, 60 minutes movement of the skin, then 16 to 24 hours movement of the skin 1 min / hour pH = 9.1, temperature 23 ° C, flotation discarded the hair is removed.

Promytí:wash:

200 % voda, 26 °C, 10 minút pohyb kúží, flota se vypustí štepení kuže: provádí se bežným zpúsobem pri použití hydroxidu vápenatého po dobu 4 až 3 hodin.200% water, 26 ° C, 10 minutes movement of skin, flotation discard skin splitting: carried out in the usual way using calcium hydroxide for 4 to 3 hours.

Pokus 5: Loužení kúží skotu, 30 až 39 kg (chudé na sulfid) pro výrobu materiálu oro nábytkáŕství.Experiment 5: Leaching of cattle skins, 30 to 39 kg (low in sulphide) for the manufacture of furniture or furniture.

Činení:tanning:

Lázeň pro predbežné mékčení:Pre-softening bath:

150 % voda, 26 °C, 30 minút pohyb kúží, minút klid, flota se vypustí.150% water, 26 ° C, 30 minutes movement of the skin, minutes of peace, the flot is released.

Mäkčeni:staking:

150,0 % voda, 26 °C,150.0% water, 26 ° C,

0,3 h neionogenní tensid,0,3 h non-ionic surfactant,

0,25 % proteolytický enzymatický produkt z Bac. subtilis, 4 400 LVE/g,0.25% proteolytic enzyme product from Bac. subtilis, 4 400 LVE / g,

33¾ hydroxid sodný, pH 9,5 a 10, hodin pohyb kúží, flota se vypustí.33¾ sodium hydroxide, pH 9.5 and 10, movement of the skin for hours, the flotation is released.

Luh:Luh:

150,0 % 0,0¾ 0,2 ’í 1,5¾ + 0,3 % 1,5 % voda, 28 °C,150.0% 0.0¾ 0.2 or 1.5¾ + 0.3% 1.5% water, 28 ° C,

72¾ hydrogensulfid sodný72¾ sodium hydrogen sulphide

60¾ sulfid sodný hydroxid vápenatý o pH 12,3 90 minút pohyb kúží, prostredek EK-II hydroxid vápenatý, pohyb kúží 30 mi nut a pak ješté 16 hodin s pohýbem kúže 2 min/hod, flota se vypustí.60¾ sodium sulphide calcium hydroxide pH 12.3 90 minutes movement of the skin, EC-II calcium hydroxide, movement of the skin for 30 minutes and then for 16 hours with a movement of the skin for 2 min / hour, the flot is discharged.

Promytí:wash:

150,0 %150.0%

Takto zpracovanŕ vyčistené.This treatment is cleaned.

Pokus 6: Loužení hovi prúmysl.Experiment 6: Leaching hovi industry.

Činení :Tanning:

Predbežné mäkčeni:Pre-softening:

150,0 %150.0%

0,1 % voda, 23 °C, 10 minút pohyb kúží, flota se vypustí.0.1% water, 23 [deg.] C., movement of skin for 10 minutes, discarded.

t holiny jsou velmi hladké a dôkladne zícn kúží, 30 až 39 kg pro nábytkársky voda, 26 °C, neionogenní tensid na bazi ethoxylátu tuku z loje, 2 hodiny, vždy 30 minút klid, 30 minút pohyb kuží,t are very smooth and thoroughly cut throat, 30 to 39 kg for furniture water, 26 ° C, nonionic surfactant based on tallow fat ethoxylate, 2 hours, always 30 minutes rest, 30 minutes movement of the skin,

Mekčení:staking:

150,0 % 0,2 0150.0% 0.2 0

0,25 %0.25%

Imunisace:immunization:

o, 0 -í 1,5 % t1.5% t

voda, 23 °C, í neionogenní tensid na bazi ethoxy- >water, 23 ° C, ethoxylated nonionic surfactant

látu alifatického alkoholu, j proteolytický enzymatický produkt J z Bacillus substilis, 4400 LV.E/g, ;aliphatic alcohol acetate, a proteolytic enzyme product J of Bacillus substilis, 4400 LV.E / g;

33% hydroxid sodný do pH 9,5 - 10, f hodin pohyb kúží, I flota se vypustí. I33% sodium hydroxide up to pH 9.5 - 10, movement of the skin for f hours, and the flotation is discarded. I

II

I fI f

voda, 23 °C, ' pomocné činidlo pro loužení na bazi alkanolaminu a organických thiosloucenin,water, 23 ° C, alkanolamine-based leaching aid and organic thio compounds,

1,2 %1.2%

+70,0 %+70,0%

hydroxid vápenatý, 60 min. pohyb kúží, hydrogensulfid sodný, 72¾ prostŕedek EK-II, po 2 hodinách jsou kúže zbavený ochlupení, voda, 20 °C, hydroxid vápenatýcalcium hydroxide, 60 min. movement of the skin, sodium hydrogen sulphide, 72¾ of EK-II, after 2 hours the skin is free of hair, water, 20 ° C, calcium hydroxide

50¾ hydroxid sodný, 14 hodin, pohyb kuží 2 min/nod. , flota se vypustí, další zpracování se provádí obvyklým zpusobem.50¾ sodium hydroxide, 14 hours, skin movement 2 min / nod. , the flotation is omitted, further processing is carried out in the usual manner.

Zpracování zpusobem podie vynálezu pri použití uvedených enzymatických produktújdovoluje vynechat následné loužení. Štepení kúže a celé její zpracování je po 16 až 10 hodinách optimálni.The treatment according to the invention using the enzymatic products allows the subsequent leaching to be omitted. Splitting of the skin and its entire processing is optimal after 16 to 10 hours.

Zastupuje:represents:

7Ψ 3Ý35-í?Z.7Ψ 3Y35-?Z.

Claims (8)

PATÉNTOVÉ H Á R O K YPATÉNTOVÉ HÁ R O KY 1. Zpusob výroby holin, pripravených k vyčinení z kúží a kožek pri použití proteolytických a lipoiytických enzýmu, vyznačuj ící se tím, že se alespon v jednom částečném stupni zpracování v luhárne vA process for the manufacture of clearings prepared for tanning from hides and skins using proteolytic and lipolytic enzymes, characterized in that at least one stage of processing is carried out in the a) luhu o pH 11,5 až 14 a(a) liquor at pH 11,5 to 14; b) moridle v oblasti 5 až 11,5 uži j í v odpovídajicích vodní ch láznícn alkalické lipázy E.C.3.1.3;s optimem účinku pri pH 9 až 11.(b) the mordants in the range 5 to 11,5 use alkaline lipase E.C.3.1.3 in the corresponding water baths with an optimum effect at a pH of 9 to 11. 2. Zoúsob podie nároku 1, vyznaôující se tím, že se alkalické lipázy užijí současné s alkalickými proteázami E.C.3.4.21 nebo neutrálními proteázami E.C.3.4.24.2. A method according to claim 1, wherein the alkaline lipases are used concomitantly with alkaline proteases E.C.3.4.21 or neutral proteases E.C.3.4.24. 3. Zpusob podie nárokú la 2, vyznačující s e tím, že se jako proteázy užijí proteázy pankreatického komplexu.3. A method according to claim 1, wherein the proteases used are proteases of the pancreatic complex. 4. Zpúsob podie nárokú 1 až 3, vyznačující s e tím, že se enzymy použijí společné se známými povrchové aktivníini látkami.4. A process according to any one of claims 1 to 3, wherein the enzymes are used together with known surfactants. 5. Zpusob podie nárokú 1 až 4, vyznačující s e tím, že se postup v luhu a) provádí pri pH v rozmezí 12 až 13,5.5. Process according to claims 1 to 4, characterized in that the process in the liquor a) is carried out at a pH in the range 12 to 13.5. 6. Zpusob podie nároku 1 až 5, vyznačující s e tím, že se morení v moridle b) provádí pri pH v rozmezí B až 9.6. The method according to claim 1, wherein the pickling in the pickling b) is carried out at a pH in the range B to 9. 7. Zpúsob podie nároku 1 až É, vyznačující s e tím, že se enzymy použijí společné se známymi sekvestračními činidly.7. A method according to claim 1, wherein the enzymes are used together with known sequestering agents. 3. Zpúsob podie nároku 1, vyznačující se t í m, že se ke zpracováni užije 50 až 250 % floty.Method according to claim 1, characterized in that 50 to 250% of the fleet is used for processing. 9. Zpúsob poo'le nároku 8, vyznačující se tím, že se ke zpraeování užije 150 + 50 % floty.Method according to claim 8, characterized in that 150 + 50% of the flotation is used for processing. Zastupuje:represents: