SK323792A3 - Camptothecin derivatives, method of producing the same, pharmaceutical compositions containing same, their use and intermediate products - Google Patents

Description

Camptothecin, prírodný cytotoxický alkaloid je inhibítor topoizomerázy a účinná protinádorová látka. Prvýkrát bola izolovaná z listov a kôry čínskej rastliny Camptotheca accuminata a opísaná v publikácii Valí a ďalší, J. Am. Chem. Soc., 88, 3888 (1966).

Camptothecin je tvorený kondenzovaným systémom kruhov, a to chinolínovými kruhmi A a B, kondenzovanými na pyrolidínový kruh C, ktorý je ďalej kondenzovaný na alfa-pyridónový kruh D, ktorý je kondenzovaný ešte na laktónový kruh E.

Táto látka obsahuje v polohe 20 asymetrický atóm uhlíka, takže sú možné dve enantiomérne formy. Prírodné sa vyskytujúca zlúčenina má vyššie znázornenú konfiguráciu S.

Cytotoxické látky sa často používajú na spomalenie rastu alebo na potlačenie rastu nádorov. Cytotoxická účinnosť

- 2 Camptothecinu je pravdepodobne spôsobená schopnosťou tejto látky spôsobiť inhibíciu topoizomerázy. Funkcia topoizomerázy bola podrobnejšie vysvetlená v publikáciách A. Lehninger, Principles of Biochemistry, 813, Vorth Publudhes, New York 1982, L. F. Liu, DNA Topoisoraerases, CRC Critical Rewiew in Biochemistry, 1 až 24, 15, 1983 a H. Vosberg, DNA Topoisomerases: Enzymes that Control DNA Conformation, Current Topics in Microbiology and Immunology, 19, Springer-Verlag, Berlín, 1985. Zvlášť bolo dokázané, že Camptothecin je účinný pri liečbe leukémie (L-1210) a niektorých tuhých nádorov u laboratórnych zvierat, ako bolo opísané napríklad v publikáciách Chem. Rev. 23, 385, 1973 a Cancer Treat. Rep., 60,

1007, 1967.

Nanešťastie sa nevyplnili úplne nádeje, ktoré boli kladené do použitia Camptothecinu ako veľmi účinnej protinádorovej látky. Camptothecin je totiž v podstate nerozpustný v z fyziologického hľadiska prijateľných vodných prostrediach a je nutné ho modifikovať tak, aby bol dostatočne rozpustný na parenterálne podávanie, ktoré je pri nádorovej liečbe výhodné. Rozpustnosť je možné zvýšiť tvorbou sodnej soli, to znamená otvorením laktónového kruhu pôsobením hydroxidu sodného, ako bolo opísané v publikácii F. M. Muggia a ďalší, Cancer Chemotherapy Reports, pt. 1, 56, č. 4, 515, 1972. Avšak v publikácii M. C. Vani a ďalší, J. Med. Chem. 23, 554, 1980 sa uvádza, že alfa-hydroxylaktónová časť kruhu E je úplne nevyhnutná pre protinádorovú účinnosť.

V danej, oblasti techniky sú známe pokusy o modifikáciu a o tvorbu derivátu Camptothecinu za účelom zlepšenia rozpustnosti tejto- látky vo vode. Napriek tomu, že rad týchto derivátov bol účinný in vitro a in vivo u laboratórnych zvierat v prípade leukémie L-1210, pri chronických pokusoch na živočíšnych modeloch s implantovanými tuhými nádormi nebolo možné dosiahnuť uspokojivé výsledky.

V publikácii Miyasaka a ďalší, US patentový spis č. 4 399 282 sa uvádza skupina Camptothecinových derivátov, substituovaných v polohe 7 rôznymi skupinami, napríklad hydroxymetylovou a alkoxymetylovou skupinou. Okrem toho v US patentovom spise č. 4 399 276 toho istého autora sú opísané Camptothecin-7-aldehyd a niektoré príbuzné aldehydové deriváty, ako acetály, oxímy a hydrazóny. V poslednom čase bol v US patentovom spise č. 4 943 579, Vishnuvajjala a ďalší, opísaný rad vo vode rozpustných Camptothecinových derivátov so substituentmi na kruhu A, podobné deriváty boli opísané aj v európskom patentovom spise č. 321 122, Boehm a ďalší. Ďalšie príklady derivátu Camptothecinu sú opísané v US patentovom spise č. 4 473 692 a 4 545 880, oba Miyasaka a ďalší a v publikácii V. Kingsbury a ďalší, J. Med. Chem. 34, 98, 1991. V žiadnej z týchto publikácií sa neuvádzajú zlúčeniny, ktoré by mali vyšší protinádorový účinok než Camptothecin.

Vani a spolupracovníci uvádzajú v publikácii M. C. Vani a ďalší, J. Med. Chem. 29, 2358, 1986 a 30, 2317, 1987, že 10,ll-metyléndioxycamptothecin je účinnejší než nesubstituovaný Camptothecin. Avšak rozpustnosť tejto látky vo vode je rovnako nízka ako rozpustnosť Camptothecinu, čo podstatne obmedzuje klinické využitie tejto látky.

Teraz boli nájdené nové, vo vode rozpustné analógy Camptothecinu, ktoré majú dobrý inhibičný účinok proti topoizomeráze I in vitro a veľmi dobrý protinádorový účinok in vivo.

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoria vo vode rozpustné deriváty Camptothecinu všeobecného vzorca I

kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

i) r! a R² znamenajú nezávisle na sebe atóm vodíka, (C^g) alkyl, (C₃_₇)cykloalkyl, (C₃_₇) cykloalkyl (C^_ g) alkyl, (C₃_g)alkenyl, hydroxy(C^_g)alkyl alebo (^_ ₆) aikoxy (q. ₆) aikyi, ii) R·*· znamená atóm vodíka, (C-£_g) alkyl, (C^y) cykloalkyl, (C₃_₇)cykloalkyl(C-_L_g)alkyl, (C₃_g)alkenyl, hydroxy(C^_g)alkyl alebo (C-£_g)alkoxy(C-£_g)alkyl a

O O

R znamená skupinu -COR , v ktorej •a

R ³ znamená atóm vodíka, (C^_g)alkyl, perhalogén(Ci_g)alkyl, (C₃_₇)cykloalkyl, (C₃_₇)cyklo•alkyl(C₁_g)alkyl, (C₃_g)alkenyl, hydroxy(C-£_g)alkyl, (C^_g)alkoxyskupinu, (C^_g)alkoxy (C-_L_g) alkyl, alebo iii) R¹ a R² tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, nasýtenú 3 až 7-člennú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca IA

(IA) kde

Y znamená atóm kyslíka, síry alebo skupinu SO, SO2, CH2 alebo NR^, v ktorej

R^ znamená atóm vodíka, (C^g)alkyl, perhalogén(C₁_g)alkyl, aryl, substituovaný aryl,

-•- v ktorom substituentom je jedna alebo väčš-í počet skupín zo skupiny (C^ g)alkyl, atóm halogénu, nitroskupina, aminoskupina, (C-£_g)alkylaminoskupina, perhalogén(C-£_g) alkyl, hydroxy(C^_g)alkyl, (C₁_g)alkoxyskupina (C^_g)alkoxy(C-^g)alkylová skupina, alebo R^ znamená skupinu -C0r5, v ktorej r5 znamená atóm vodíka, (C-^_g)alkyl, perhalogén(C-|i _g)alkyl, (C-£_g)alko- 5 -xyskupinu, aryl, prípadne substituovaný jedným alebo väčším počtom substituentov zo skupiny (C^_g)alkyl , perhalogén(C₁_g)alkyl, hydroxy (C-£_g)alkyl alebo (C-^_g)alkoxy(^Cl-6)^alkY¹’ ako aj farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.

Soli, prijateľné z farmaceutického hľadiska zahrnujú napríklad soli s anorganickými kyselinami, ako hydrochloridy, sulfáty, fosfáty, hydrogénfosfáty, hydrobromidy a dusičnany alebo soli s organickými kyselinami, ako acetáty, maláty, maleáty, fumaráty, vínany, jantarany, citráty, laktáty, metánsulfonáty, p-toluénsulfonáty, palmoáty, salicyláty a stearáty. Soli iných kyselín, napríklad oxaláty nemusia byf prijateľné z farmaceutického hľadiska avšak je možné ich využif ako medziprodukty na získanie zlúčenín podľa vynálezu a ich solí, prijateľných z farmaceutického hľadiska.

Laktónový kruh, kruh E, môže byť otvorený hydroxidom alkalického kovu alebo kovu alkalických zemín, napríklad hydroxidom sodným alebo hydroxidom vápenatým za vzniku soli zodpovedajúcej zlúčeniny všeobecného vzorca I s otvoreným kruhom E s alkalickým kovom alebo s kovom alkalických zemín. Vzhľadom na lepšiu rozpustnosť vo vode je možné zlúčeninu s otvoreným kruhom E s výhodou čistiť bežným prekryštalizovaním. Potom je možné formu s otvoreným kruhom E použiť aj ako medziprodukt na získanie zlúčeniny všeobecného vzorca I, napríklad pôsobením kyseliny, ako kyseliny chlorovodíkovej, čím môže byť získaná čistená zlúčenina všeobecného vzorca I.

Ako už bolo vyššie uvedené, obsahuje Camptothecin asymetrický atóm uhlíka v polohe 20, takže sú možné dve jeho enantiomérne formy, R a S. Vynález zahrnuje obe enantiomérne formy a tiež akékoľvek kombinácie týchto dvoch foriem. Tam, kde nie je uvedená v štruktúrnom vzorci špecifická konfigurácia v polohe 20, rozumie sa, že vzorec predstavuje obe enantiomérne formy a ich zmesi. Pokiaľ nie je uvedené inak, podľa uznávaného názvoslovia znamená označenie (R,S) racemickú zmes, v ktorej sú v približne rovnakom množstve priv predpokladu, že dvojitá ktorý je viazaný na atóm tomné formy R a S, zatiaľ čo označenie (R) a (S) označuje v podstate čisté enantioméry R a S. Vynález zahrnuje aj ďalšie formy zlúčenín všeobecného vzorca I, napríklad solváty, hydráty, polymorfné formy a podobne.

Zlúčeniny podľa vynálezu je možné využiť na inhibíciu topoizomerázy typu I v bunkách cicavcov tak, že sa cicavcom podá množstvo zlúčenín všeobecného vzorca I, schopné spôsobiť inhibíciu uvedeného enzýmu. Týmto spôsobom je možné liečiť nádory cicavcov tak, že sa cicavcovi, ktorý nádorom trpí, podá protinádorovo účinné množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca I.

Podstatu vynálezu tvoria aj farmaceutické prostriedky, ktoré obsahujú zlúčeniny všeobecného vzorca I ako svoju účinnú zložku, okrem toho tvorí podstatu vynálezu aj spôsob výroby zlúčenín všeobecného vzorca I a spôsob výroby nových chemických medziproduktov, použitých pri syntéze, ako aj tieto nové medziprodukty.

Pod pojmom nižší sa v prípade alkylových a alkoxylových skupín rozumejú zvyšky s 1 až 6 atómami uhlíka a v prípade alkenylových skupín zvyšky s 3 až 6 atómami uhlíka za väzba nevychádza z atómu uhlíka, dusíka. Pod pojmom perhalogén sa rozumie, že všetky atómy uhlíka v príslušnej skupine sú nahradené atómami halogénu, ide teda napríklad o trifluórmetyl v prípade nižšieho perhalogénalkylového zvyšku. Pod pojmom aryl sa rozumie fenyl alebo naftyl.

Zvlášť výhodnými zlúčeninami všeobecného vzorca I sú 1 2 tie látky, v ktorých R a R nezávisle: znamenajú

i) nezávisle--na sebe atóm vodíka, (C^_₄)alkyl, (Cj y)cykloalkyl, (C37)cykloalkyl(C₁₄)alkyl, (C3_₄) alkenyl, hydroxy(C₁_₄)alkyl, (C^₄)alkoxy(C^_₄)alkyl, alebo spoločne s atómom dusíka tvoria aziridín, azetidín, pyrolidín, piperidín, hexametylénimín, imidazolidín, pyrazolidín, izoxazolidín, piperazín, N-metylpiperazín, homopiperazín, N-metylhomopiperazín, tiazolidín, izotiazolidín, morfolín alebo tiomorfolín.

Výhodnú skupinu zlúčenín podľa vynálezu predstavujú tie ii) η 9.

látky všeobecného vzorca I, v ktorých R a R spoločne tvoria heterocyklickú skupinu, a to aziridinovú, azetidinovú, pyrolidinovú, piperidinovú, hexametylénimínovú, imidazolidínovú, pyrazolidinovú, izoxazolidinovú, piperazinovú, N-metylpiperazinovú, homopiperazinovú, N-metylhomopiperazinovú, tiazolidinovú, izotiazolidinovú, morfolinovú alebo tiomorfolinovú skupinu.

Ďalej sú výhodné zlúčeniny, v ktorých n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

i) R³· a R^z nezávisle znamenajú atóm vodíka, (^,4) alkyl, alebo hydroxy(C-£_₄)alkyl,

2 3 ii) R^3- znamená atóm vodíka a R znamená skupinu -COR , kde

R^ znamená perhalogén(C^_4)alkyl, alebo iii) R a R tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý su viazané azetidinovú, pyrolidinovú, piperidinovú, morfolinovú, tiomorfolínovú alebo piperazinovú skupinu, prípadne substituovanú na atóme dusíka (0^4)alkylom, fenylom, prípadne substituovaným jedným alebo väčším počtom perhalogén(C₁_4)alkylových, alebo (Ci_4)alkoxyskupín; alebo skupinu -COR^, kde r5 znamená (0^_4)alkoxyskupinu.

Špecifickými zlúčeninami podľa vynálezu sú nasledujúce zlúčeniny:

7-dimetylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,’

7-dimetyláminomeťyléii-lO , ll-metyléndioxy-20 (S) -camptothecin,

7-dimetylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-dimetylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-morfolinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-morfolinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-pyrolidinome-tylén-10 , ll-etyléndioxy-20 (R, S) -camptothecin,

7-piperidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-piperidinometylén-lO,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)camptothecin,

7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin ,

7-dietylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-dietylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-dietylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-N-metyletanolaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)camptothecin, ·

7-N-metyletanolaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)camptothecin,

7-dietanolaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, ... ¹

7-dietanolaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-azetidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-azetidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-tiomorfolinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

- 9 7-azetidinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-metyléndioxy-20(S)camptothecin,

7-trifluóracetamidometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-trifluóracetamidometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin ,

7-aminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin.dihydrochlorid,

7-aminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecindihydrochlórid,

7-terc.butyloxykarbonylpiperazinometylén-10,ll-etyléndioxy20 (S)-camptothecin,

7-piperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin vo forme soli s kyselinou trifluóroctovou,

7-(α,a,a-trifluór-m-tolyl)piperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-(2-metoxyfenylpiperazino)metylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin a ... ¹ 7-fenylpiperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin , a soli a solváty týchto látok, prijateľné z farmaceutického hľadiska.

Výhodnou zlúčeninou je 7-(4-metylpiperazinometylén)10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin, a soli a solváty tejto látky, prijatelné z farmaceutického hladiska.

Výhodné sú zlúčeniny v konfigurácii S.

Jednou skupinou výhodných zlúčenín všeobecného vzorca I sú zlúčeniny všeobecného vzorca I ’

kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

R^la a R^2a znamenajú

i) nezávisle na sebe atóm vodíka, (C-£_g)alkyl, (^3.7)cykloalkyl, (C^yjcykloalkyl(C₁_g)alkyl, (Cg_g)alkenyl, hydroxy(C₁_₆)alkyl, (C-^gjalkoxy (C^jalkyl, alebo ii) tvoria spoločne s atómom dusíka heterocyklickú skupinu s 3 až 7 atómami všeobecného vzorca IA’

(IA’) kde

Y^a znamená atóm kyslíka, síry, Cl·^, NH alebo N((C₁₆)alkyl) a soli’ týchto látok, prijateľné z farmaceutického hľadiska.

Výhodné sú .soli alkalického kovu alebo kovu alkalických zemín, zodpovedajúce .zlúčenine všeobecného vzorca I, v ktorej kruh E je otvorený, pričom táto sol je získaná pôsobením bázy alkalického kovu alebo kovu alkalickej zeminy na túto zlúčeninu.

Príprava zlúčenín

Spôsobom podľa vynálezu je možné výrobiť zlúčeniny všeobecného vzorca I tak, že sa

a) nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca IV

(IV) kde

X znamená atóm halogénu, so zlúčeninou všeobecného vzorca V

HNR¹R² (V)

-j 9 kde R a R majú význam, uvedený vo vzorci I, alebo sa

b) nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca Ha

2 NRR

- Ί O kde R a-R majú význam, uvedený vo vzorci I, so zlúčeninou všeobecného vzorca III

(III) a prípadne sa v takto získanej zlúčenine uskutoční jeden alebo väčší počet nasledujúcich reakcií:

- 12 i) výsledná zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej soľ alebo chránený derivát sa premení na inú zlúčeninu všeobecného vzorca I a/alebo sa ii) odstráni akákoľvek ochranná skupina alebo skupiny a/alebo iii) sa premení zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej soľ na sol alebo solvát, prijateľný z fyziologického hladiska.

Podlá postupu A je možné pripravil zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa stupňa 2 nasledujúcej schémy I

Schéma I

Schéma I - pokračovanie

V stupni 1 schémy I je možné nechať reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca II, v ktorom X znamená ľahko odštiepitelnú skupinu podľa publikácie J. March, Advanced Organic Chemistry, 3. vydanie, str. 179, John Viley and Sons, New York, 1985, napríklad atóm halogénu, ako atóm chlóru so zlúčeninou všeobecného vzorca III spôsobom podľa US patentového spisu č. 4 894 456, vydaného 16. januára 1990 (Valí a ďalší), čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca IV.

V stupni 2, ktorý je vlastným postupom A podľa vynálezu sa premieňajú zlúčeniny všeobecného vzorca IV na zlúčeniny všeobecného vzorca I tak, že sa odštiepi lahko odštiepitelná skupina X pôsobením zlúčeniny všeobecného vzorca V, v ktorej R a R majú význam, uvedený vo vzorci I. Táto náhrada jednej skupiny druhou sa bežne uskutočňuje v rozpúšťadle, ako je voda, alkanol s 1 až 4 atómami uhlíka, alkyléndiol s 2 až 4 atómami uhlíka, l-hydroxy-2-metoxyetán, dimetylacetamid (DMÁC), N-metylpyrolidinón, dimetylformamid (DMF), tetrahydrofurán (THF) , -dimetylsulfoxid (DMSO) , toluén alebo zmes týchto rozpúšťadiel za prítomnosti prebytku amínu, to znamená prebytku zlúčeniny všeobecného vzorca V, prípadne za prítomnosti bázy, napríklad uhličitanu draselného.

Tento postup je zvlášť vhodný na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom ani jeden zo symbolov R^ alebo R neznamená atóm vodíka.

Podľa ďalšieho všeobecného postupu B je možné pripraviť zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa stupňa 2a nasledujúcej schémy IA:

- Í4 Schéma IA

NR¹ R²

V stupni la sa zlúčenina všeobecného vzorca V nechá reagoval so zlúčeninou všeobecného vzorca II za vzniku zlúceniny všeobecného vzorca IIA, v ktorej R a R maj u význam, uvedený vo všeobecnom vzorci I. Reakciu je možné uskutočňoval za podobných podmienok, aké boli opísané pre všeobecný postup A v stupni 2 schémy IA.

V stupni 2a všeobecného postupu B sa zlúčenina všeobecného vzorca IIA nechá reagoval so zlúčeninou všeobecného vzorca III podobným spôsobom ako v stupni 1A schémy I za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca I.

V špecifickom uskutočnení postupu B je možné získal zlúčeniny všeobecného vzorca I postupom, znázorneným v nasledujúcej schéme IB:

Schéma IB

V stupni lb sa zlúčenina všeobecného vzorca Va, v ktorej Hal znamená atóm halogénu, to znamená fluóru, chlóru, brómu alebo jódu, napríklad trifluóracetamid nechá reagovať so zlúčeninou všeobecného vzorca II v polárnom aprotickom rozpúšťadle, napríklad v acetonitrile za prítomnosti bázy, ktorá je v polárnych aprotických rozpúšťadlách rozpustná, napríklad uhličitanu cézneho v prípade, že rozpúšťadlom je acetonitril, čím-sa získa zlúčenina všeobecného vzorca Ilb.

V stupni ~-2b~ sa.-zlúčenina všeobecného vzorca Ilb nechá reagovať so zlúčeninou všeobecného vzorca III podobným spôsobom ako v stupni 1 schémy I, čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca IVb.

V stupni 3b sa na zlúčeninu všeobecného vzorca Vb pôsobí kyselinou všeobecného vzorca H⁺B, môže ísť o anorganickú kyselinu, napríklad kyselinu chlorovodíkovú, získa sa zlúčenina všeobecného vzorca lb, to znamená soľ zlúčeniny všeobecného vzorca I. Na zlúčeninu všeobecného vzorca lb je mož- 17 né pôsobiť zvyčajným spôsobom zásadou, čím sa získa zodpovedajúca voľná báza. Túto voľnú bázu je potom možné v prípade potreby premeniť zvyčajným spôsobom na soľ, prijateľnú z farmaceutického hľadiska.

Tento postup je zvlášť vhodný na výrobu zlúčenín všeo12 becného vzorca I, v ktorom R a R znamenajú atómy vodíka 9 alebo v ktorom R znamená atóm vodíka.

Zlúčeniny všeobecného vzorca II je možné pripraviť podľa nasledujúcej schémy II:

Schéma II

( VI) acylácia

->

stupeň 1

stupeň 2a '

O ^X\A ( VII ) deacylácia Estupeň 3

V stupni 1 schémy II sa ňechá reagovať zlúčenina vzorca VI s acylačným činidlom, napríklad halogenidom alebo anhydridom alkánkarboxylovej kyseliny s 2 až 5 atómami uhlíka, napríklad acetylchloridom alebo anhydridom kyseliny octovej za prítomnosti slabej bázy, napríklad uhličitanu draselného v polárnom, aprotickom rozpúšťadle, napríklad chloroforme za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca VII, v ktorom Ac znamená acylovú skupinu s 2 až 5 atómami uhlíka.

V stupni 2 sa zlúčenina všeobecného vzorca VII nechá reagovať so zlúčeninou všeobecného vzorca VIII, v ktorom X znamená odštiepiteľnú skupinu, tak ako bola definovaná v prípade zlúčenín všeobecného vzorca IV a Hal znamená atóm halogénu, za prítomnosti halogenidu kovu, napríklad chloridu zinočnatého v polárnom aprotickom rozpúšťadle, napríklad nitrometáne za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca IX. Zlúčeninou všeobecného vzorca VIII môže byť napríklad halogénacetylhalogenid, ako chlóracetylchlorid alebo halogénacetonitril, ako chlóracetonitril.

V stupni 3 sa vytvára zlúčenina všeobecného vzorca II odstránením acylovej skupiny Ac zo zlúčeniny všeobecného vzorca IX deacyláciou známymi postupmi, napríklad spôsobom podľa publikácie T. Green, Protective Groups in Organic Chemistry, kapitola 7, John Viley, New York, 1981. Je napríklad možné zahrievať zlúčeninu všeobecného vzorca IX v koncentrovanej kyseline chlorovodíkovej na teplotu varu pod spätným chladičom a výslednú soľ potom neutralizovať pôsobením bázy, napríklad hydroxidu sodného za vzniku zlúčeniny vzorca II.

V stupni 2a schémy II v prípade, že zlúčeninou všeobecného vzorca VI je etyléndioxyzlúčenina, to znamená, že n = 2, je možné túto látku nechať reagovať priamo so zlúčeninou všeobecného vzorca VIII, bez toho aby bola vopred chránená aminoskupina acyláciou, čím sa získajú zodpovedajúce zlúčeniny všeobecného vzorca II.

. Zlúčeniny všeobecného vzorca II je možné získať aj spôsobom podľa publikácie T. Sugasawa a ďalší, J. Org. Chem. , 44, 578 (-19,79) .

II je možné pripraviť patentového spisu č. 4 schémy I je zrejmé, že

Zlúčeniny-- všeobecného vzorca spôsobom podľa vyššie uvedeného US 894, 456, stĺpec 11, od r. 30. Zo konfigurácia asymetrického atómu uhlíka v zlúčenine všeobecného vzorca III bude určovať aj konfiguráciu výsledných produktov všeobecného vzorca I. Racemickú zlúčeninu všeobecného vzorca III je možné deliť na enantioméry spôsobom podľa US patentového spisu č. 5 053 512 (Vani a ďalší).

Nové medziprodukty všeobecných vzorcov II, IIA a IV sú taktiež súčasťou podstaty vynálezu.

Podľa ďalšieho všeobecného postupu D je možné premieňal zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa vynálezu na iné zlúčeniny podľa vynálezu bežnými postupmi.

Je napríklad možné alkyloval zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorých aspoň jeden zo symbolov R a R znamená atóm vodíka zvyčajným spôsobom. Reakciu je možné uskutočnil pri použití vhodného alkylačného činidla, napríklad alkylhalogenidu, alkyltosylátu alebo dialkylsulfátu. Alkylačnú reakciu je možné uskutočňoval v organickom rozpúšťadle, napríklad v amide, ako dimetylformamide, alebo v éteri, napríklad tetrahydrofuráne, s výhodou za prítomnosti bázy. Vhodnou bázou je napríklad hydrid alkalického kovu, ako hydrid sodíka, ďalej je možné použil uhličitany alkalických kovov, napríklad metoxid sodný alebo alkoxidy alkalických kovov, napríklad metoxid, etoxid alebo terc.butoxid sodíka alebo draslíka. Alkylačnú reakciu je možné uskutočňoval pri teplote v rozmedzí 25 až 100 °C.

Zlúčeninu všeobecného vzorca I, v ktorom aspoň jeden zo symbolov R a R znamená atóm vodíka je možné premenil na inú zlúčeninu všeobecného vzorca I aj redukčnou alkyláciou. Redukčnú alkyláciu príslušným aldehydom alebo ketónom je možné uskutočnil za použitia bórhydridu kovu alkalických zemín alebo kyánu bórhydridu. Reakciu je možné uskutočniť vo vodnom alebo nevodnom reakčnom prostredí, bežne v alkohole, napríklad metanole alebo etanole alebo éteri, napríklad dioxárie alebo tetrahydrofuráne, prípadne v prítomnosti vody. Reakčná teplota sa pohybuje v rozmedzí 0 až 100, s výhodou 5 až 50 'C'.' -- - ’

Zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom aspoň jeden zo symbolov R^3- a R^ znamená nižšiu alkenylovú skupinu je možné premenil na zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R^ alebo R^z znamená nižší alkyl. Redukciu je možné uskutočnil vodíkom za prítomnosti katalyzátora na báze kovu, napríklad Raneyovho niklu alebo ušľachtilého kovu, ako paládia, platiny, oxidu platiny alebo rodia, zvyčajne na nosiči, napríklad na aktívnom uhlí. Reakciu je možné uskutočnil v rozpúšťadle, napríklad v alkohole ako etanole pri teplote v rozmedzí -10 až +50 °C, s výhodou 20 až 30 °C.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I, v ktorom R znamená hydroxyalkyl, je tiež možné pripraviť redukciou zlúčeniny 9 všeobecného vzorca I, v ktorom R znamená skupinu všeobecného vzorca -COR , v ktorej R znamená nižšiu alkoxyskupinu. Redukciu je možné ľahko uskutočniť za použitia vhodného redukčného činidla na báze hydridu, napríklad lítiumalumíniumhydridu alebo lítiumtrietylbórhydridu vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad éteri, ako dietyléteri, tetrahydrofuráne alebo dioxáne alebo v uhľovodíku, napríklad toluéne. Reakcia zvyčajne dobre prebieha pri teplote v rozmedzí -78 až 100, s výhodou približne 0 C.

Podľa ďalšieho všeobecného postupu E je možné pripraviť zlúčeninu všeobecného vzorca I alebo jej sol tak, že sa z chráneného derivátu všeobecného vzorca I alebo jeho soli odstráni ochranná skupina alebo skupiny.

Ide o to, že v niektorom z predchádzajúcich stupňov prípravy zlúčenín všeobecného vzorca I alebo jeho soli môže byť potrebné a/alebo žiadúce chrániť jednu alebo väčší počet reakčných kupín v molekule, aby nedochádzalo k nežiadúcim vedlajším reakciám.

Ochranné skupiny, použité pri výrobe zlúčenín všeobecného vzorca I môžu byť použité zvyčajným spôsobom, napríklad tak, ako je uvedené v publikácii Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J. F. V. McOmie, Plénum Press 1973 alebo Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora V. Greene, John Viley änď Sons, 1981.

Bežné ochranné skupiny na aminoskupine sú napríklad aralkylové skupiny, ako benzyl, difenylmetyl alebo trifenylmetyl a acylové skupiny, napríklad N-benzyloxykarbonyl alebo terc.butoxykarbonyl. Zlúčeniny všeobecného vzorca I, v kto1 2 rom aspoň jeden zo symbolov R a R znamená atóm vodíka je teda možné pripraviť odstránením ochranných skupín zo zodpovedajúcich chránených zlúčenín.

Hydroxyskupiny je možné chrániť napríklad aralkylovými skupinami, ako sú benzyl, difenylmetyl alebo trifenylmetyl, acylovými skupinami, ako je acetyl, ochrannými skupinami, ktoré obsahujú kremík, ako sú trimetylsilyl alebo terc.butyldimetylsilyl alebo vo forme tetrahydropyránových derivátov .

Ochranné skupiny je možné odstrániť zvyčajnými postupmi. Napríklad aralkylovú skupinu, ako benzylovú skupinu, je možné odštiepiť hydrogenolýzou za prítomnosti katalyzátora, napríklad paládia na aktívnom uhlí, acylovú skupinu, napríklad N-benzyloxykarbonylovú skupinu je možné odstrániť hydrolýzou, napríklad pôsobením bromovodíka v kyseline octovej alebo redukciou, napríklad katalytickou hydrogenáciou a ochranné skupiny s obsahom kremíka je možné odstrániť napríklad pôsobením fluoridového iónu alebo hydrolýzou v kyslom prostredí, tetrahydropyránové skupiny je možné odštiepiť hydrolýzou v kyslom prostredí.

Je zrejmé, že v priebehu vyššie uvedených postupov A až D môže byť potrebné chrániť niektoré skupiny tak, ako bolo opísané. To znamená, že vo všetkých týchto postupoch môže byť nutné zaradiť reakčný stupeň, v ktorom sa odstránia ochranné skupiny z chráneného derivátu všeobecného vzorca I alebo z niektorej z jeho solí.

To znamená, že v prípade potreby je možné uskutočniť v priebehu ktoréhokolvek zo všeobecných postupov A až D v ľubovolnom poradí niektorú z nasledujúcich reakcií:

i) odstránenie akýchkoľvek ochranných skupín a ii) premenu zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej soli na soľ, prijateľnú z farmaceutického hľadiska.

V prípade, _.že jé žiadúce izolovať zlúčeninu vynálezu vo forme solí,' napr í k ľad-.vo forme adičnej soli s kyselinou, je toto možné dosiahnuť tak, že sa na voľnú bázu všeobecného vzorca I pôsobí príslušnou kyselinou, s výhodou v ekvivalentnom množstve alebo kreatinín sulfátom vo výhodnom rozpúšťadle, napríklad vodnom etanole.

Hoci je tento postup uvedený ako posledný hlavný stupeň pri výrobe požadovaných látok, je možné ho použiť v priebehu výroby zlúčenín podľa vynálezu aj v rôznych medzistupňoch na zavedenie požadovaných skupín. Je zrejmé, že vo viacstupňo22 vých postupoch je teda nutné voliť poradie jednotlivých reakcií tak, aby reakčnými podmienkami neboli v molekule ovplyvnené tie skupiny, ktorých prítomnosť je žiadúca v molekule výsledného produktu.

Biologická účinnosť zlúčenín všeobecného vzorca I je s najväčšou pravdepodobnosťou spojená s enantiomérom S, zatiaľ čo enantiomér R má len malú alebo nemá vôbec žiadnu účinnosť. To znamená, že enantiomér S zlúčeniny všeobecného vzorca I je všeobecne výhodnejší než zmes uvedených enantiomérov, napríklad racemická zmes. Avšak v prípade, že je požadovaný enantiomér R, napríklad pre kontrolné pokusy alebo na syntézu ďalších zlúčenín, je možné ho ľahko pripraviť vyššie uvedenými postupmi za použitia enantioméru R zlúčeniny všeobecného vzorca III, pripraveného podľa vyššie uvedeného US patentového spisu č. 5 053 512.

Zlúčeninu všeobecného vzorca I, pripravenú podľa reakčnej schémy I, IA alebo IB je možné čistiť bežnými postupmi, napríklad chromatografiou, destiláciou alebo kryštalizáciou.

Inhibičná účinnosť proti topoizomeráze in vitro

V nasledujúcej tabuľke A je uvedená inhibičná účinnosť zlúčenín všeobecného vzorca I proti topoizomeráze typu I. Skúška bola uskutočnená spôsobom podľa publikácie Hsiang Y. a ďalší, J. Biol. Chem., 260, 14873 až 14878, 1985 a je v dobrej korelácii s protinádorovým účinkom inhibítorov topóizomerázy na živočíšnych modeloch. Opis skúšky pre camptotheci’n 'a,, jého - analógy bol opísaný napríklad v publikácii Hsiang' ...a ďalší, Cancer Research, 49, 4385 až 4389, 1989 a tiež Jaxel a ďalší, Cancer Research, 49, 1465 až 1469, 1989.

Tie zlúčeniny, v ktorých je možné dokázať účinnosť až v koncentrácii vyššej než 2000 nM (sú označené + v tabuľke A) sú považované za slabo až stredne účinné, zatiaľ čo látky s účinnosťou nižšou než 500 nM (sú označované ++++ v tabulke A) sú veľmi účinné. Ako IC^g je označená taká koncentrácia zlúčeniny všeobecného vzorca I, pri ktorej 50 % substrátu

DNA je zachytených topoizomerázou I.

Tabuľka A

Inhibičná účinnosť zlúčenín vzorca I proti topoizomeráze

Príklad č. izomérna forma relatívna IC^q^X

2	S	++++
6	S	++++
11	S	++++
1	R,S	++++
17	R,S	++++
5	R,S	++++
4	S	+++
9	R,S	+++
10	R,S	+++
13	R,S	+++
16	R,S	++
7	R,S	++
15	R,S	++
16	R,S	++
19	R,S	++
8	R,S	+

Zlúčeniny všeobecného vzorca IV majú aj dobrý inhibičný účinok na topoizomerázu I.

Štepy ľudských nádorov

V posledných rokoch boli transplantované štepy ludských nádorov ako cudzorodé transplantáty do bezsrstých myší a tieto’ živočíšne modely sú teraz široko používané na stanovenie protinádorového účinku rôznych chemických látok, ako bolo opísané v Giovanella B. .. C. , Stehlin Jr. , J. S. Shepard R. C. a Villiams Jr., L. J.: Correlation between response to chemotherapy of human tumors in patients and in nude mice, Cancer 52:1146 až 1152, 1983, Boven E. a Vinograd B., Eds. The Nude Mouse in Oncology Research, CRC Press, Inc., Boca Raton, FL, 1991 a Fiebig H. H., Comparison of Tumor response in nude mice and in patients, Human Tumor Xenografts in Anticancer Drug Development, Vinograd B., Peckam N. J. a Pine24 do H. M., Eds. E. S. 0. Monographs, Springer, Heidelberg, 25, 1988.

Všeobecne je možné uviesť, že si štepy ľudských nádorov uchovávajú nielen histologické, biochemické a antigénne vlastnosti, ale aj chemosenzitivitu pôvodného nádorového tkaniva, ako bolo opísané v druhej z vyššie uvedených publikácií. Dlhodobé štúdie dokázali, že štepy ľudských nádorov si uchovávajú tieto dôležité biologické vlastnosti pôvodného nádoru vrátane biologickej nestálosti, ktorá sa prejavuje u chorých. Velmi dôležité je, že celý rad výskumných pracovníkov dokladá dobrú koreláciu medzi účinkom protinádorových látok u štepov ľudských nádorov a klinickými výsledkami na chorých, ako je tiež uvedené najmä v prvej z vyššie uvedených publikácií.

Skúšky so štepom ľudského kolorektálneho adenokarcinómu HT-29 in vivo

Bezsrsté myšie samice kmeňa NU/NU s hmotnosťou 21 ± 2 g boli použité na modifikáciu skúšky opísanej v publikácii B. C. Giovanella a ďalší, Science, 246, 1046, 1989. Kontrolným a pokusným zvieratám bola podkožné vstreknutá do podlopatkovej oblasti v dni 0 suspenzia 10^ životaschopných nádorových buniek ľudského hrubého čreva HT-29. Po dvoch týždňoch rastu nádora boli podávané účinné látky. V prípade každej z týchto látok bolo použitých niekoľko dávok v závislosti na účinnosti týchto látok proti topoizomeráze I in vitro. Pre každú dávku bolo použitých osem zvierat. Skúmané látky boli' podávané _ľ„buď v 0,1 M acetátovom pufri s pH 5 (prostredie a) alebo v prostredí s obsahom 87,5 % chloridu sodného s fosfátovým pufrom, 12,375 % dimetylsulfoxidu a 0,125 % Tween 80, t.j. polyoxyetylénsorbitanmonooleátu (ICI), toto prostredie bolo označené ako prostredie b. Účinné látky podávané podkožné dvakrát týždenne po dobu 5 týždňov, začínajúc odo dňa 14. Dávky sú uvádzané v mg/kg podľa priemernej hmotnosti zvierat v každej klietke.

- 25 Hmotnosť nádorov bola vypočítaná z dvoch na seba kolmých meraní dotykovým meradlom za použitia vzťahu hmotnosť nádora = dĺžka x šírka^ ± 2 v milimetroch

Pre každé zviera bola sledovaná hmotnosť nádoru v priebehu celého pokusu. Pre každú skupinu boli výsledky vyjadrené ako pomer strednej hmotnosti nádora bezprostredne po piatich týždňoch liečenia, t.j. v 50. dni, a strednej hmotnosti národov tesne pred začiatkom liečenia, t.j. v 14. dni. Výsledky sú uvedené v tabuľke B. Pre každé z nosných prostredí je pomer približne 20, čo znamená, že bez liečenia sa hmotnosť nádora v priebehu pokusu zvýšila približne dvadsaťkrát. Pomer 1 dokazuje zastavenie rastu nádora, pomer nižší ako 1 jeho zmenšovanie. Zlúčeniny 4 a 6 teda spôsobili zastavenie rastu nádora, zlúčeniny 1 a 23 jeho zmenšenie. Kritérium pre protinádorovú účinnosť je aspoň 50% inhibícia rastu nádorov po 5 týždňoch, t.j. v 50. dni, čo zodpovedá pomeru 10 alebo menej.

Tabuľka B

Protinádorová účinnosť in vivo

zlúčenina	mg/kg	hmotnosť nádoru 50.deň/ hmotnosť nádoru 14.deň
kontrola (nosné prostredie)		20,0a, 21,8b
2	. 0,8	l,8b
4 -	7,0	l,3a, l,0b l,0b
6	l.o
11	9,0	0,6a
14	2,0	2,0a
20	1,5	l,5a
22	12,0	1,6a
23	3,0	0,5a

^a 0,IM acetátový pufer, pH 5 ^b 87,5 % roztoku chloridu sodného s fosfátovým pufrom,

12,375 % dimetylsulfoxidu a 0,125 % Tween 80.

Použitie zlúčenín podľa vynálezu

Zlúčeniny všeobecného vzorca I sú účinné proti širokému spektru nádorov cicavcov vrátane človeka, ide napríklad o karcinóm ústnej dutiny a hrtanu vrátane pier, jazyka a ústnej sliznice, o nádory pažeráka, žalúdka, tenkého čreva, hrubého čreva, rekta, pečene a žlčových ciest, slinivky brušnej, hltanu, plúc vrátane karcinómu s výnimkou karcinómu z malých buniek, ďalej o nádory kostí, spojivové tkanivá, kože, hrubého čreva, mliečnej žľazy, kŕčku maternice, maternice, vaječníkov, prostaty, samčej pohlavnej žľazy, močového mechúra, obličiek a ďalších tkanív močovej sústavy, oka, mozgu a centrálneho nervového systému, štítnej žľazy a ďalších žliaz s vnútornou sekréciou, leukémie, lymfocytárnej, granúlocytovej a monocytovej, Hodgkinovej choroby, lymfómu odlišného ako Hodgkinovho typu, násobného myómu a podobne. V priebehu prihlášky sú pojmy nádor, zhubný nádor a nádorové bujnenie používané ako synonymá.

Množstvo zlúčenín všeobecného vzorca I, ktoré je potrebné na potlačenie nádoru sa bude meniť v závislosti na rôznych faktoroch, napríklad na cicavcovi, ktorý má byť liečený a presné množstvo určí lekár alebo veterinár. Je nutné vziať do úvahy stav chorého, spôsob podania, typ farmaceutického prostriedku, hmotnosť, vek a celkový stav chorého, velkosť nádora a typ použitej zlúčeniny. Všeobecne je nutné uviesť, že sa účinná protinádorová dávka pohybuje v rozmedzí 0,1 až' 200, s výnimkou 1 až 100 mg/kg a deň. Celkovú dennú dávku je možné p.odať naraz alebo rozdelene v dvoch až šiestich dávkach denne alebo vo forme vnútrožilovej infúzie. Je však možné použiť aj dávky nižšie alebo vyššie než uvedené rozmedzie v prípade, že je to vhodné alebo nutné.

Napríklad u cicavcov s hmotnosťou 75 kg sa bude denná dávka pohybovať v rozmedzí 75 až 7500 mg denne, typická dávka bude 800 mg denne. V prípade, že má ísť o rozdelené jednotlivé dávky, mohlo by byť podaných 200 mg zlúčeniny všeobecného vzorca I štyrikrát denne.

Farmaceutické prostriedky

Farmaceutické prostriedky podľa vynálezu obsahujú ako svoju zložku zlúčeninu všeobecného vzorca I spolu s prijateľným nosičom a prípadne ďalšie účinné zložky. Nosič musí byť farmaceutický prijateľný, to znamená kompatibilný s ostatnými zložkami a neškodný pre chorého.

Podstatu vynálezu tvoria teda také farmaceutické prostriedky s protinádorovým účinkom, ktoré ako svoju účinnú zložku obsahujú zlúčeninu všeobecného vzorca I a okrem toho nosič, prijatelný z farmaceutického hladiska.

Môže ísť o prostriedky, vhodné na perorálne, rektálne vaginálne, transdermálne alebo parenterálne podanie, vrátane podania podkožného, vnútrosvalového a vnútrožilového, výhodné sú najmä prostriedky na perorálne a parenterálne podanie.

Liekové formy s výhodou obsahujú jednotlivú dávku a môžu byť pripravené bežným spôsobom. Zvyčajne sa postupuje tak, že sa účinná zložka homogénne premieša s kvapalným nosičom alebo jemne práškovým tuhým nosičom a potom sa prípadne produkt spracuje do požadovaného tvaru.

Farmaceutické prostriedky na perorálne podanie môžu byť napríklad kapsuly, tablety a podobne, každá kapsula alebo tableta obsahuje vopred stanovené množstvo účinnej zložky, môže však ísť aj o prášky, granuláty, suspenzie alebo roztoky vo vodnom alebo nevodnom kvapalnom prostredí, ide napríklad o sirupy, elixíry alebo emulzie.

Tabletu je možné pripraviť lisovaním alebo odliatím, tableta prípadne..obsahuje jednu alebo väčší počet pomocných látok. Lisované, tablety sa pripravujú vo vhodnom tabletovacom stroji, lisuje sa zmes účinnej zložky v sypkej forme, napríklad vo forme prášku alebo granulátu s ďalšími zložkami, ako sú spojivá, klzné látky, inertné riedidlá, zmáčadlá alebo dispergačné látky. Odlievané tablety je možné pripraviť vo vhodnom zariadení zo zmesi práškovej účinnej látky a akéhokoľvek vhodného nosiča.

Sirupy alebo suspenzie je možné pripraviť pridaním účinnej látky ku koncentrovanému vodnému roztoku cukru, na28 príklad sacharózy, prípadne s ďalšími prídavnými zložkami. Môže ísť o chuťové látky, látky, spomaľujúce kryštalizáciu cukru alebo zvyšujúce rozpustnosť ďalších zložiek, môže ísť napríklad o viacsýtne alkoholy, ako je glycerol alebo sorbitol.

Prostriedky na rektálne alebo vaginálne podanie môžu byť napríklad čapíky s obsahom bežného nosiča, ako kakaového masla alebo iného základu pre čapíky, napríklad Vithepsolu S55 (Dynamite Nobel Chemical, SRN).

Na transdermálne podanie je možné zlúčeniny podľa vynálezu spracovať na krémy, gély, mazadlá, emulzie alebo masti. Tieto prostriedky môžu byť pripravené za použitia vodného alebo olejového základu a vhodných zahusťovadiel, gélov, emulgátorov, stabilizátorov, dispergačných látok, látok, napomáhajúcich vzniku suspenzie a/alebo farbív.

Prostriedky, vhodné na parenterálne podanie zvyčajne obsahujú sterilný vodný roztok účinnej látky, s výhodou izotonický s krvou príjemcu. Takéto prostriedky môžu obsahovať roztok alebo suspenziu adičnej soli zlúčeniny všeobecného vzorca I, prijateľnú z farmaceutického hladiska a izotonickú s krvou príjemcu. Príkladom zloženia môže byť destilovaná voda, 5% roztok dextrózy v destilovanej vode alebo vo fyziologickom roztoku a adičná sol zlúčeniny všeobecného vzorca I s kyselinou, prijateľná z farmaceutického hladiska a rozpustná v uvedenom rozpúšťadle, napríklad hydrochloride. Môže tiež ísť o koncentrované roztoky alebo prášky, ktoré sú po zriedení rozpúšťadlom vhodným na parenterálne podanie.

Okrem vyšši.e uvedených zložiek môžu farmaceutické prostriedky obsahovať ‘ešte ďalšie zložky, napríklad riedidlá, pufre, chuťové látky, spojivá, zmáčadlá, zahusťovadlá, klzné látky, činidlá, napomáhajúce vzniku suspenzie, konzervačné látky vrátane antioxidačných látok a podobne.

Vynález bude vysvetlený nasledujúcimi príkladmi, ktoré však nemajú slúžiť na obmedzenie jeho rozsahu. Použitie názvoslovia je v súlade s návrhom Journal of the American Chemical Society. Teplota miestnosti je teplota približne 25’C.

- 29 f ·.·

Predmetom vynálezu je aj medziprodukt všeobecného vzorca IV

kde n je 1 alebo 2 a X znamená atóm halogénu.

Medzi ďalšie medziprodukty patria zlúčeniny, vybrané zo skupiny zahrňujúcej:

7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin a 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin.

Výhodným medziproduktom je zlúčenina všeobecného vzorca

Ila

kde ‘ · n znaihéná celé číslo 1 alebo 2 a

i) Rl a R^ znamenajú nezávisle na sebe atóm vodíka, (C-^_g)alkyl, (C₃_₇)cykloalkyl, (C₃_₇)cykloalkyl(C₁_g)alkyl, (C₃_g)alkenyl, hydroxy(C-^ g)alkyl alebo (^ci_6)^alkoxy(^ci-6)^alky1, ii) Rl znamená atóm vodíka, (C^_g)alkyl, (C₃_₇)cykloalkyl , (C₃₇)cykloalkyl(C^g)alkyl, (C₃ g)alkenyl, hydroxy(C-^ g)alkyl alebo (C-^ g)alkoxy(C-^ g)alkyl

R znamená skupinu -COR , v ktorej

Q

R^J znamená atóm vodíka, (C^_g)alkyl, perhalogén(C₁_₆)alkyl, (C₃__?)cykloalkyl, (C₃__?)cykloalkyl (C-^ g)alkyl, (C₃_g) alkenyl, hydroxy(C^ójalkyl·, (C₁_g)alkoxyskupinu, (C₁_₆)alkoxy(C₁_g)alkyl, alebo

9 iii) R a R tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, nasýtenú 3 až 7-člennú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca IA

(IA) kde

Y znamená atóm kyslíka, síry alebo skupinu SO, SO2, CH2 alebo NR^, v ktorej

R^ znamená atóm vodíka, (C-_L_g) alkyl, perhalogén(C₁_g)alkyl, aryl, substituo vaný aryl, v ktorom substituentom je jedna alebo väčší počet skupín zo skupiny (C₁_g)alkyl, atóm halogénu, nitroskupina, aminoskupina, (C^_g)alkylaminoskupina, perhalogén(C-^ g) alkyl, hydroxy(C₁_g)alkyl, (C^_g)alkoxyskupina (Ci_g)alkoxy(C^_g)alkylová skupina, alebo R^ znamená skupinu

-COR⁵, v ktorej

R⁵ znamená atóm vodíka, (C^.^alkyl, perhalogén(C-£_g) alkyl, (C₁_g) alkoxyskupinu alebo aryl, prípadne substituovaný

- /jedným alebo väčším počtom substituentov zo skupiny (C-^_g) alkyl, perhalogén(C-£_g)alkyl, hydroxy (C-£_g)alkyl alebo (c₁_₆)aikox_y(c₁_₆)aikyi.

Ďalšími výhodnými medziproduktmi sú zlúčeniny, v ktorých R a R tvoria heterocyklickú skupinu, a to aziridínovú, azetidínovú, pyrolidínovú, piperidinovú, hexametylénimínovú, imidazolidínovú, pyrazolidínovú, izoxazolidínovú, piperazínovú, N-metylpiperazínovú, homopiperazínovú, N-metylizotiazolidínovú, morfolí- 31 homopiperazínovú, tiazolidínovú, novú alebo tiomorfolínovú skupinu.

Medzi medziprodukty podľa vynálezu patrí zlúčenina vše-

kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a X znamená atóm halogénu .

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

7-dimetylaminometylén-10 , ll-metyléndioxy-20 (R, S) camptothecin (zlúčenina 1)

A) 3,4-metyléndioxyacetanilid

17,0 g, 124 mmol bežne dodávaného 3,4-metyléndioxyanilínu a 15,5 g, 136 mmol uhličitanu sodného v 90 ml chloroformu 'sa pri teplote 5 °C zmieša s 0,8 g, 124 mmol acetylchloridu, ktorý ..sa pridáva po kvapkách za miešania. Reakčná zmes sa nechá o_£epliť_;„na teplotu miestnosti a potom sa mieša ešte približne 18 hodín. Potom sa zmes premyje 2 x 50 ml IN kyseliny chlorovodíkovej, organická vrstva sa vysuší síranom horečnatým a rozpúšťadlo sa odparí na hnedú tuhú látku. Po prekryštalizovaní z vody s aktívnym uhlím sa vo výťažku 42,1 % teoretického množstva získa 9,34 g, 3,4-metyléndioxyacetanilidu ako svetlohnedá tuhá látka.

Analýza pre CgHgNO^ vypočítané C 60,33, H 5,06, N 7,82 % nájdené C 60,34, H 5,04, N 7,79 %.

B) 2’-acetylamino-4’,5’-metyléndioxy-2-chlóracetofenón

K zmesi 24,3 g, 178,3 mmol chloridu zinočnatého a 16,1 ml, 202,1 mmol chlóracetylchloridu v 85 ml nitrometánu sa pod dusíkom pri teplote miestnosti za miešania po kvapkách pridá roztok 8,96 g, 50,0 mmol 3,4-metyléndioxyacetanilidu v 15 ml nitrometánu. Zmes sa zahrieva 1,5 hodiny na teplotu varu pod spätným chladičom, potom sa nechá ochladiť na teplotu miestnosti, vleje sa do ľadu, extrahuje metylénchloridom, ktorý sa potom odparí, čím sa získa hnedá tuhá látka. Táto tuhá látka sa nechá prekryštalizovať zo zmesi etylacetátu a hexánu s prísadou aktívneho uhlia, čím sa vo výťažku 6,5 % teoretického množstva získa 831,3 mg 2’-acetylamino4 ’ , 5’-metyléndioxy-2-chlóracetofenónu vo forme žltých kryštálov. ¹H-NMR (CDC1₃): 8,45 (s, 1H), 7,2 (s, 1H), 6,09 (s,

2H) , 4,65 (s, 2H), 2,25 (s, 3H).

C) 3,4-metyléndioxypivaloylanilid

Túto látku je možné získať spôsobom podlá príkladu IA) s tým rozdielom, že sa namiesto acetylchloridu použije ekvivalentné množstvo 2,2-dimetylpropanoylchloridu.

D) 2 ’ -pivalbylam.ino-4 ’ , 5 ’· -metyléndioxyr2-chlóracetof enón

Túto látku je možné získať spôsobom podľa príkladu IB) s tým rozdielom, že sa namiesto 3,4-metyléndioxyacetanilidu použije ekvivalentné množstvo 3,4-metyléndioxypivaloylanilidu.

E) 2’-amino-4’,5’-metyléndioxy-2-chlóracetofenón

K 0,9 g, 3,53 mmol 2’-acetylamino-4’,5’-metyléndioxy-233 chlóracetofenónu alebo ekvivalentnému množstvu 2’-pivaloylamino-4’,5’-metyléndioxy-2-chlóracetofenónu v 60 ml etanolu sa pri teplote 5 °C po kvapkách pridá 12,5 ml, 149,7 mmol koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej. Zmes sa 1 hodinu zahrieva na teplotu varu pod spätným chladičom, potom sa vleje do zmesi 80 ml 2N hydroxidu sodného a 60 g ľadu a premyje sa 3 x 70 ml etylacetátu. Organické roztoky sa spoja a premyjú sa 50 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, vysušia sa bezvodým síranom sodným a odparia vo vákuu na zelenožltú tuhú látku, ktorá sa nechá prekryštalizovať zo zmesi etylacetátu, izopropanolu a hexánu s prísadou aktívneho uhlia, čím sa vo výťažku 52 % teoretického množstva získa 0,39 g, 2’-amino-4’,5’-metyléndioxy-2-chlóracetofenónu. Analýza pre CqHqNO^ vypočítané C 50,60, H 3,77, N 6,56 % nájdené C 50,66, H 3,80, N 6,47 %.

F) 5’(R,S)-1,5-dioxo-(5’-etyl- 5’-hydroxy-2Ή,5 Ή,6’H-6-oxozf O pyrano)[3’,4’-f]delta⁰’ -tetrahydroindolizín a

5’ (S)-1,5-dioxo-(5’-etyl- 5’-hydroxy-2Ή,5 Ή,6Ή-6-οχο/f o pyrano)[3’,4’-f]delta⁰’ -tetrahydroindolizín (zlúčeniny vzorca III)

Tieto látky, ktoré budú ďalej nazývané tricyklický ketón (R,S) a tricyklický ketón (S) alebo spoločne ako zlúčeniny vzorca III sa pripravia spôsobom podľa US patentového spisu č. 5 053 512, Vani a ďalší. Zodpovedajúci enantiomér R je možné pripraviť tým istým spôsobom.

G) 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin

Postupuje sa podľa všeobecného postupu, uvedeného vo vyššie zmienenom patentovom spise Vaniho a ďalších, 2’-amino-4’,5’-metyléndioxy-2-chlóracetofenón sa mieša v 50 ml toluénu pri teplote varu pod spätným chladičom spolu s 256,3 mg, 0,97 mmol tricyklického ketónu (R,S) za použitia Dean-Starkovho zariadenia celkom pol hodiny. Potom sa reak- 34 čná zmes ochladí, tuhá látka sa odfiltruje a premyje sa toluénom a etanolom, čím sa vo výťažku 68,8 % získa 408,5 mg

6-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu.

¹H-300 NMR (DMSO-d₆): 7,72 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,2 (s,

1H), 6,34 (s, 2H), 5,42 (s, 2H), 5,32 (s, 2H), 5,24 (s, 2H), 1,85 (m, 2H), 0,88 (t, 3H).

Hmotnostné spektrum M + 1: vypočítané 441 nájdené 441.

H) 7-dimetylaminometylén-lO,ll-metyléndioxy-20(R,S)camptothecin

K miešanej zmesi 0,11 g, 0,25 mmol 7-chlórmetyl-10,llmetyléndioxy-(R,S)-camptothecinu a 346 mg, 0,5 mmol uhličitanu draselného v 1 ml dimetylformamidu DMF sa pridá 6,1 ml, 0,5 mmol dimetylamínu vo forme roztoku v tetrahydrofuráne s obsahom 3,73 mg dimetylamínu v 1 ml tetrahydrofuránu pri teplote 5 °C. reakčná zmes sa pevne zazátkuje, nechá sa otepliť na teplotu miestnosti, mieša sa približne 15 hodín a potom sa prefiltruje na odstránenie tuhého podielu. Filtrát sa odparí vo vákuu, výsledný tuhý podiel sa rozotrie s acetonitrilom a roztok sa prefiltruje. Filtrát sa odparí vo vákuu na hustý zvyšok, ktorý sa rozpustí v čo najmenšom množstve chloroformu a podrobí sa rýchlej chromatografii na 30 g silikagélu, ktorý sa postupne premýva 250 ml etylacetátu a potom 250 ml zmesi etylacetátu a izopropanolu 9:1 a nakoniec 250 ml etylacetátu a izopropanolu 9:1 a nakoniec 250 ml etylacetátu a.izopropanolu 4:1. Frakcie sa spoja a sledujú chromatógraiiou na-tenkej vrstve za použitia 5% metanolu v etylacetáte, na detekciou ša použije UV-svetlo. Príslušné frakcie sa spoja, odparia a sušia vo vákuu, čím sa vo výťažku 4,7 % získa 6,0 mg 7-dimetylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu. Táto látka bola analyzovaná vo forme svojho acetátu s teplotou topenia vyššou ako 250 ’C. Analýza pre C24H23N3O3·C2H4O2 vypočítané C 61,29, H 5,34, N 8,25 % nájdené C 61,64, H 5,17, N 8,73 %.

I) Forma s otvoreným kruhom E

Zlúčenina zo stupňa H sa spracuje pôsobením ekvivalentného množstva hydroxidu sodného, čím vznikne zodpovedajúca forma s otvoreným kruhom E. V prípade, že sa na túto formu pôsobí ekvivalentným množstvom kyseliny chlorovodíkovej, dôjde opäť k uzavretiu E a znova sa získa zlúčenina zo stupňa H.

Príklad 2

7-dimetylaminometylén-10 , ll-metyléndioxy- 20 (S) -camptothecin

A) 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin

Produkt sa získa spôsobom podľa príkladu 1 s tým rozdielom, že sa v stupni G použije ekvivalentné množstvo tricyklického ketónu S namiesto tricyklického ketónu R,S. Teplota topenia je vyššia než 250 ’C.

B) 7-dimetylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)camptothecin

Tento produkt je možné pripravil spôsobom podlá príkladu 1, stupeň H s tým, rozdielom, že sa namiesto 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(S)camptothecinu, pripraveného podľa príkladu 2, stupeň A.

Teplota tôpenia_jé vyššia než 250 °C.

Hmotnostné spektrum M+l: vypočítané: 450 nájdené: 450.

Príklad 3

7-dimetylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 3)

A) 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin

Túto látku je možné získať spôsobom podlá príkladu s tým rozdielom, že sa v stupňoch A a C použije ekvivalentné množstvo 3,4-etyléndioxyanilínu namiesto 3,4-metyléndioxyanilínu.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou M+l: vypočítané: 455,1009 nájdené: 455,1005.

B) 7-dimetylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)camptothecin

Túto látku je možné pripraviť spôsobom podľa príkladu

1, časť H s tým rozdielom, že sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu namiesto 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou M+l: vypočítané: 464,1821 nájdené: 464,1833.

Príklad 4

7-dimetylaminometylén-lO,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 4)

A) 7-chlórmetyl-lO,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin

Túto látku je možné získať spôsobom podlá príkladu s tým rozdielom, že sa v stupňoch A a C použije ekvivalentné množstvo 3,4-etyléndioxyanilínu namiesto 3,4-metyléndioxyanilínu a. v stupni G sa použije ekvivalentné množstvo tricyklického ketónu S namiesto tricyklického ketónu R,S. Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 455,1009 nájdené: 455,1000.

B) 7-dimetylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin

Túto látku je možné pripraviť spôsobom podľa príkladu

1, stupeň H s tým rozdielom, že sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu namiesto 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 464,1821 nájdené: 464,1811.

Príklad 5

7-morfolinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 5)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo morfolínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,llmetyléndioxy-20 (R, S) -camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň B.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 506,1942 nájdené: 506,1925.

Príklad 6

7-morfolinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 6)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo morfolínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,llmetyléndioxy-20 (R, S) -camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecinu,

- 38 získaného podľa príkladu 4, stupeň B.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 506,1942 nájdené: 506,1929.

Príklad 7

7-pyrolidinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 7)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo pyrolidínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,11metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 490,1978 nájdené: 490,1988.

Príklad 8

7-piperidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 8) . Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo piperidínu.

Nominálne 'hmotnostné ..spektrum M+l:

vypočítané: 490 nájdené: 490.

¹H-300 NMR (DMSO-dg): 7,95 (s, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,29 (s,

1H), 6,35 (s, 2H), 5,49 (s, 2H), 5,41 (s, 2H), 4,85 (široký s, 2H), 1,9 - 0,7 (m, 11H).

Príklad 9

7-piperidinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 9)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo piperidínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,11metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,11-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu, získaného podlá príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 504,2127 nájdené: 504,2129.

Príklad 10

7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)camptothecin (zlúčenina 10)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo 4-metylpiperazínu a namiesto 7-chlórmetyl10,11-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané :-·519,2236' nájdené: 5T9.-2246.

Príklad 11

7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 11)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvi40 valentné množstvo 4-metylpiperazínu a namiesto 7-chlórmetyl10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 4, stupeň A.

Teplota topenia: 261 až 264 °C.

Nominálne hmotnostné spektrum M+l: vypočítané 519 nájdené 519.

Príklad 12

7-dietylaminometylén-lO,ll-metyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 12)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo dietylamínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,llmetyléndioxy- 20 (R , S) -camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(S)camptothecinu, získaného podlá príkladu 2, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 478,1978 nájdené: 478,1963.

Príklad 13

7-dietylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 13)

Postupuj e'-sa^-'podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo dietylamínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,llmetyléndioxy-20 (R , S) -camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-lO,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 492,2134 nájdené: 492,2140.

Príklad 14

7-dietylaminometylén-10 , ll-etyléndioxy-20 (S) -camptothecin (zlúčenina 14)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo dietylamínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,llmetyléndioxy-20 (R , S) -camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 4, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 492,2134 nájdené: 492,2122.

Príklad 15

7-N-metyletanolaminometylén-10 , ll-metyléndioxy-20 (R,S) camptothecin (zlúčenina 15)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo N-metyletanolamínu.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 480,1771 nájdené: 480,1776.

Príklad 16 ;

7-N-metyletanolaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R, S) camptothecin (zlúčenina 16)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo N-metyletanolamínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)

- 42 camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 494,1927 nájdené: 494,1929.

Príklad 17

7-dietanolaminômetylén-lO,ll-etyléndioxy-20(R,S)camptothecin (zlúčenina 17)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo dietanolamínu a namiesto 7-chlórmetyl10.11- metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 524,2024 nájdené: 524,2026.

Príklad 18

7-dietanolamindmetylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 18)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým. rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo dietänolamínu a namiesto 7-chlórmetyl10.11- metylénďÍOxý-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 4, stupeň A.

Teplota topenia: 230 až 233 ’C.

Nominálne hmotnostné spektrum M + 1: vypočítané 524 nájdené 524.

- 43 Príklad 19

7-azetidinometyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)camptothecin (zlúčenina 19)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň

H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo azetidínu.

Teplota topenia: vyššia ako 250 ’C.

Nominálne hmotnostné spektrum M + 1: vypočítané 462 nájdené 462.

Príklad 20

7-azetidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 20)

Produkt je možné pripraviť podobným spôsobom ako v príklade 1 s tým rozdielom, že sa v stupni G namiesto tricyklického ketónu R,S použije ekvivalentné množstvo tricyklického ketónu S a v stupni H sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo azetidínu.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 462,1665 nájdené: 462,1667.

Príklad.21

7-tiomorfolinometýlén-TO,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 21)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo tiomorfolínu a namiesto 7-chlórmetyl10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 4, stupeň A.

Teplota topenia: 249 až 252 °C.

Nominálne hmotnostné spektrum M+l: vypočítané 522 nájdené 522.

Príklad 22

7-azetidinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 22)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo azetidínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,llmetyléndioxy-20 (R, S) -camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,11-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 4, stupeň A.

Teplota topenia: 208 až 210 ’C za rozkladu.

Nominálne hmotnostné spektrum 476,2.

Príklad 23

7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-metyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 23)

Produkt je možné pripravil podobným spôsobom ako v príklade 1 s tým rozdielom, že sa v stupni G namiesto tricyklického ketónu R,S použije ekvivalentné množstvo tricyklického ketónu S a v stupni H sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo 4-metylpiperazínu.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 505,2083 nájdené: 505,2087.

Príklad 24

7-trifluóracetamidometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 24)

A) 2’-amino-4’,5’-metyléndioxy-2-trifluóracetamidoacetofenón

227 mg, 2 mmol trifluóracetamínu sa pridá k roztoku 1,63 g, 5 mmol uhličitanu cézneho v 15 ml bezvodého acetonitrilu pod dusíkom pri teplote miestnosti. Potom sa pridá 2’-amino-4’,5’-metyléndioxy-2-chlóracetofenón a zmes sa umiestni na olejový kúpeľ, predohriaty na 90 °C, kde sa nechá stáť 30 minút. Potom sa reakčná zmes ochladí na teplotu miestnosti a vleje sa priamo na vrstvu 15 g oxidu kremičitého v sintrovanom sklenenom lieviku. Oxid kremičitý sa dvakrát premyje etylacetátom, materiál, použitý na premývanie sa spojí a prchavé zložky sa odparia vo vákuu. Odparok sa rozotrie s dietyléterom, čím sa vo výťažku 86 % získa svetlooranžová tuhá látka, ktorá sa odfiltruje a vysuší vo vákuu. Získa sa celkom 498 mg produktu s teplotu topenia 219 až 220 ’C.

¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆) : 4,44 (d, 2H) , 5,96 (s, 2H) , 6,35 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,40 (bs, 2H), 9,59 (t, 1H).

Nominálne hmotnostné spektrum MH⁺: vypočítané 291 nájdené 291 m/z.

B) 2’-amino-4’,5’-etyléndioxy-2-trifluóracetamidoacetofenón

Produkt je možné pripraviť vyššie uvedeným spôsobom s tým rozdielom, že sa použije namiesto 2’-amino-45’-metyléndioxy- 2-chlóracetof enónu ekvivalentné množstvo 2’-amino4’,5’-etyléndioxy-2-chlóracetofenónu. Vo výťažku 74 % sa získa zelená tuhá látka s teplotou topenia 154 až 155 °C. ¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆): 4,08 (m, 2H), 4,13 (m, 2H), 4,60 (d, 2H), 6,0 (bs, 2H), 6,08 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,60 (t,

1H). Nominálne hmotnostné spektrum MH⁺: vypočítané 305 m/z nájdené 305 m/z.

C) 10,ll-etyléndioxy-7-trifluóracetamidometylén-20(S)camptothecin mg, 0,234 mmol 2’-amino-4’,5’-etyléndioxy-2-tri- 46 fluóracetamidoäcetofenónu, 61 mg, 0,234 mmol tricyklického ketónu (S) a 2,0 ml bezvodého toluénu sa zmieša pod dusíkom pri teplote 60 °C. Pridá sa katalytické množstvo ľadovej kyseliny octovej a monohydrátu kyseliny p-toluénsulfónovej a potom sa reakčná zmes zahreje na teplotu varu pod spätným chladičom, na tejto teplote sa udržuje 16 hodín a potom sa ochladí na teplotu miestnosti. Filtráciou sa oddelí zelenožltá tuhá látka, ktorá sa premyje etanolom a dietyléterom a vysuší sa vo vákuu. Vo výťažku 84 % sa získa 101 mg pro-

duktu	s teplotou topenia 249 “C. ^H-NMR	(300	MHz,DMSO-d6)
0,91	(t, 3H), 1,91 (m, 2H), 4,40 (s,	4H),	4,83 (d, 2H)
5,39	(s, 2H), 5,41 (s, 2H), 6,48 (s,	1H) ,	7,22 (s, 1H)

7,58 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 10,20 (t, 1H).

Nominálne hmotnostné spektrum MH⁺: vypočítané 532 m/z nájdené 532 m/z.

Príklad 25

7-trifluóracetamidometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 25)

Produkt sa pripraví spôsobom podľa príkladu 24 s tým rozdielom, že sa použije ekvivalentné množstvo 2’-amino4’,5’-metyléndioxy-2-trifluór-acetamidoacetofenónu namiesto 2’-amino-4’,5’-etyléndioxy-2-trifluór-acetamidoacetofenónu. Vo výťažku 15 % sa získa zelenožltá tuhá látka s teplotou topenia 238 “C. za rozkladu.

¹H-NMR (300 MHzDMSO-d₆)': 0,91 (t, 3H) , 1,95 (m, 2H) , 4,92 (s, 4H) , 5,38 (5 , ~ 2H)7 5,40 (s, 2H) , 6,28 (s, 2H) , 6,49 (s, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 10,21 (t, 1H) Nominálne hmotnostné spektrum MH⁺: vypočítané 518 m/z nájdené 518 m/z.

Príklad 26

7-aminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 26)

- 47 65 mg, 0,12 mmol 7-trifluóracetamidometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu sa zahrieva na 105 ’C v 2M vodnom roztoku kyseliny chlorovodíkovej v množstve 1,2 ml celkom 20 minút v otvorenej banke. Prchavé zložky sa odparia vo vákuu a odparok sa rozotrie s etylacetátom a roztok sa prefiltruje. odfiltrovaná jasnožltá tuhá látka sa premyje 3 ml etylacetátu, 2 ml etanolu a 2 ml dietyléteru a potom sa suší vo vákuu, čím sa vo výťažku 100 % získa 62 mg produktu s teplotou topenia vyššou ako 300 ’C.

¹H-NMR (300 MHz, DMSO-dg): 0,90 (t, 3H), 1,95 (m, 2H), 4,41 (s, 4H),4,61 (d, 2H), 5,40 (s, 2H), 5,45 (s, 2H), 7,24 (s,

1H), 7,60 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 8,40 (bs, 2H).

Nominálne hmotnostné spektrum MH⁺: vypočítané 436 m/z nájdené 436 m/z.

Príklad 27

7-aminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 27)

Produkt je možné pripraviť spôsobom podľa príkladu 26 s tým rozdielom, že sa použije ekvivalentné množstvo 7-trifluóracetamidometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecinu namiesto 7-trifluóracetamidometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecinu. V kvantitatívnom výťažku sa izoluje zlatožltá tuhá látka s teplotou topenia 270 ’C za rozkladu.

¹H-NMR (300 MHz, DMSO-dg): 0,90 (t, 3H), 1,9 (m, 2H), 4,6 (m, 2H) , 5,40 (s’, 2H) , 5,5 (s, 2H) , 6,3 (s, 2H) , 7,2 (s,

1H), 7,6 (s, lHj,'7,9 (s, 1H), 8,4 (bs, 2H).

Nominálne hmotnostné spektrum MH⁺: vypočítané 422 m/z nájdené 422 m/z.

Príklad 28

7-terc.butyloxykarbonylpiperazinometylén-10,ll-etyléndioxy20 (S) -camptothecin (zlúčenina 28)

K roztoku 35,8 mg, 78,7 x 10 mmol (S)-10,11-etyléndioxy-7-chlórcapmtothecinu, ochladenému na -50 “C sa po a kvapkách pridá 34,6 mg, 186 x 10 mmol terc.butylpiperazínkarboxylátu v 0,45 ml Ν,Ν-dimetylformamidu (DMF). Tmavohnedá reakčná zmes sa mieša pri teplote -50 °C ešte 10 minút a potom sa nechá otepliť na 0 °C. Pridá sa ešte 8 mg, 43 x 10“^ mmol terc. butylpiperazínkarboxylátu v 0,2 ml DMF a zmes sa nechá otepliť na teplotu miestnosti. Potom sa zmes ešte 90 minút mieša, potom sa rozpúšťadlo odparí na rotačnom odparovači, čím sa získa surový produkt ako hnedý odparok. Po čistení chromatografiou na silikagéli pri elúcii 100% etylacetátom sa vo výťažku 58 % získa 20,7 mg produktu ako svetložltá tuhá látka. ¹H-NMR (300 MHz, CDC1₃):

1,04 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,45 (s, 9H), 1,87 (m, 2H), 2,46 (s, 4H) , 3,41 (s, 4H), 3,94 (s, 2H), 4,43 (s, 4H) , 5,29 (s,

2H) , 5,30 (d, 1H, J = 16 Hz), 5,75 (d, 1H, J % 16 Hz), 7,59 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,73 (s, 1H).

Nominálne hmotnostné spektrum M+l: 605.

Príklad 29

Soľ 7-piperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecinu s kyselinou trifluóroctovou (zlúčenina 29) _ o

K roztoku 16,7 mg, 27,6 x 10 mmol 7-terc.butyloxykarbonylpiperazinometyl-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu v bezvodom metylénchloride v množstve 5,0 ml sa pridá 0,5 ml kyseliny trif luóroctovej'. Sýtožltý roztok sa nechá otepliť na teplotu miestnosti a potom sa mieša 14 hodín. Potom sa zmes odparí na rotačnom odparovači a odparok sa čistí HPLC v reverznej fáze (stĺpec Rainin Dynamax 60A) ako elučné činidlo sa použije zmes vody, acetonitrilu, THF a kyseliny trifluóroctovej 49:10:2,5:1, čím sa po zahustení a lyofilizácii hlavnej frakcie, dokázanej UV svetlom, pri 254 nm získa 21,7 mg produktu vo forme žltého prášku.

¹H-NMR (300 MHz, DMSO-dg): 0,88 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,87 (m, 2H) , 2,60 - 2,80 (m, 4H), 3,00 - 3,20 (bs, 4H) , 5,29 (s,

- 49 2Η) , 5,41 (s, 2Η), 6,5 (bs, 1Η), 7,25 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,50 (bs, 2H).

Nominálne hmotnostné spektrum (M+l): 505.

Teplota topenia: 315 °C za rozkladu.

Príklad 30

7- (α , α,a-trifluór—m-tolyl)piperazinometylén-10,11-etyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 30)

Roztok 5,2 mg, 11,4 x 10“^ mmol 7-chlórmetyl-lO,11-metyléndioxy-20(S)-camptothecinu v 200 mikrolitroch bezvodého DMSO sa po kvapkách pridá pri teplote 0 °C k roztoku 10 mik_ α rolitrov, 53 x 10 mmol 7-(α,a,a-trifluór—m-tolyl)piperazínu v 500 mikrolitroch bezvodého toluénu. Tmavohnedá zmes sa nechá otepliť na teplotu miestnosti. Rozpúšťadlo sa odparí na rotačnom odparovači a potom sa za odsávania vo vysokom vákuu, čím sa získa surový produkt, ktorý sa čistí chromatografiou na silikagéli, ako elučné činidlo sa použije 100% etylacetát a potom zmes etylacetátu, chloroformu a metanolu 6:5:1, čím sa vo výťažku 50 % získa 3,7 mg produktu ako svetložltá tuhá látka.

¹H-NMR (200 MHz, DMSO-dg): 0,90 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,95 (q,

2H, J = 7 Hz), 2,60-2,70 (m, 4H), 3,20 - 3,30 (m, 4H),

4,10 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 5,30 (s, 2H), 5,45 (s, 2H), 6,55 (s, 1H), 7,40 (t, 1H, J = 7 Hz), 7,60 (s, 1H), 7,85 (s, 1H).

Nominálne hmotnostné spektrum (M+l): 649.

Príklad 31 ‘

7- (2-metoxyf enylpiperazino)metylén-10 , ll-etyléndioxy-20 (S) camptothecin (zlúčenina 31) α

K roztoku 17,9 mikrolitrov, 102 x 10 mmol 2-metoxyfenylpiperazínu v 1 ml bezvodého toluénu, ochladenému na 0 °C _ o sa pri tej istej teplote pridá roztok 10 mg, 22 x 10 mmol 7-chlórmetyl-10 , ll-etyléndioxy-20 (S)-camptothecinu v 200 mikrolitroch DMSO. Tmavo sfarbená zmes sa 10 minút mieša pri teplote 0 ’C, potom sa nechá otepliť na teplotu miestnosti a pri nej sa mieša ešte 3 hodiny. Potom sa reakčná zmes odparí na rotačnom odparovači a zvyšok rozpúšťadla sa odstráni odsávaním vo vysokom vákuu, čím sa získa surový produkt, ktorý sa čistí chromatografiou na silikagéli, ako elučné činidlo sa použije zmes hexánu a etylacetátu 1:1 a potom zmes etylacetátu, chloroformu a metanolu 6:5:1, čím sa vo výťažku 25 % získa 3,4·mg produktu vo forme žltej tuhej látky.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃): 1,05 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,90 (m, 2H) , 2,75 (bs, 4H), 3,10 (bs, 4H), 3,75 (s, 1H), 3,85 (s, 3H), 4,01 (bs, 2H), 5,35 (s, 1H), 5,30 (d, 1H, J = 18 Hz), 5,35 (s, 1H), 5,75 (d, 1H, J = 18 Hz), 6,80 - 7,00 (m, 4H), 7,60 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,75 (s, 1H).

Nominálne hmotnostné spektrum MH⁺; vypočítané 611 nájdené 611.

Príklad 32

7-fenylpiperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 32) a

K roztoku 15,6 mikrolitrov, 102 x 10 mmol fenylpiperazínu v 1 ml bezvodého toluénu sa pridá roztok 10,6 mg, 22 a x 10 mmol 7-chlórmetyl-lO,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu v 300 mikrolitroch DMSO. Tmavo sfarbená zmes sa 10 minút mieša pri teplote 0 ’C, potom sa nechá otepliť na teplotu miestnosti a pri nej ša mieša ešte 3 hodiny. Potom sa reakčná zmes odparí' na-rotačnom odparovači a zvyšok rozpúšťadla sa odstráni odsávaním vo vysokom vákuu, čím sa získa surový produkt ako tmavý odparok. Čistením na silikagéli za použitia zmesi hexánu a etylacetátu 1:1 a potom zmesi etylacetátu, chloroformu a metanolu 6:5:1 ako elučného činidla sa vo výťažku 30 % získa 3,6 mg produktu vo forme žltej tuhej látky.

¹H-NMR (200 MHz, CDC1₃): 1,00 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,90 (m, 2H), 2,75 (bs, 4H), 3,20 (bs, 4H), 3,75 (s, 1H), 4,05 (s,

2Η), 4,45 (bs, 4Η), 5,35 (s, 2Η), 5,30 (d, 1Η, J = 18 Hz), 5,35 (s, 2H), 5,75 (d, 1H), 6,80 - 7,00 (m, 3H), 7,20 - 7,35 (m, 2H), 7,60 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,80 (s, 1H). Nominálne hmotnostné spektrum (M+l): 581.

Príklad 33

2’-amino-4’,5’-metyléndioxy-2-dimetylaminoacetofenón

2’-amino-4’,5’-metyléndioxy-2-chlóracetofenón, pripravený spôsobom podlá príkladu 1, stupeň B sa nechá reagovať s prebytkom dimetylamínu za podobných podmienok ako v príklade 1, stupeň H, čím sa získa 2’-acetylamino-4’,5’-metyléndioxy-2-dimetylaminoacetofenón, z ktorého sa odstránia ochranné skupiny spôsobom podlá príkladu 1, stupeň E, čím sa získa 2’-amino-4’,5’-metyléndioxy-2-dimetylaminoacetofenón. Nominálne hmotnostné spektrum M+l: vypočítané 223 náj dené 223.

Príklady 34 až 38

Podľa schémy I, IA alebo IB je možné analogickým spôsobom ako v príklade 1 až 32 za použitia príslušných medziproduktov všeobecných vzorcov II, III, IV a V pripraviť aj nasledujúce zlúčeniny všeobecného vzorca I.

Zlúčenina 34

7- (metyl-2-metôxyétyláminometylén) -10 , ll-metyléndioxy20 (R, S) -camptothecin

Zlúčenina 35

7-cyklohexylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R)camptothecin '·*!

- 52 Zlúčenina 36

7-(2-butenyl)aminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)camptothecin

Zlúčenina 37

7-cyklohexylmetylaminometylén-lO,ll-etyléndioxy-20(R)camptothecin a

Zlúčenina 38

7-tiazolidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin

Príklad 39

Farmaceutické prostriedky

A. Transdermálny systém zložka množstvo účinná látka 600,0 mg kvapalný silikón 450,0 mg koloidný oxid kremičitý 25,0 mg

Kvapalný silikón a účinná látka sa zmieša a pridá sa koloidný oxid kremičitý na zvýšenie viskozity. Potom sa materiál dávkuje'do‘'polymérneho laminátu, ktorý sa najskôr zataví teplom a je tvorený nasledujúcimi vrstvami: polyesterovou vrstvou, adhéznou vrstvou, ktorá je v styku s kožou a obsahuje silikónové alebo akrylové polyméry a riadiaca membrána, ktorá je tvorená polyolefinom, napríklad polyetylénom, polyvinylacetátom alebo polyuretánom a nepriepustnou krycou vrstvou z polyesterového laminátu. Opísaný systém 9 tvorí náplast s plochou 10 cm .

B. Tableta na perorálne podanie zložka množstvo účinná látka 200,0 mg škrob 20,0 mg stearan horečnatý 1,0 mg

Účinná látka a škrob sa granulujú za použitia vody a granulát sa vysuší. Pridá sa stearan horečnatý a zmes sa dôkladne premieša. Potom sa zmes lisuje na tablety.

C. Čapíky

zložka	množstvo
účinná látka	150,0 mg
sodná soľ salicylátu
treobromínu	250,0 mg
Vitepsol S55	1725,0 mg

Pomocné zložky sa zmiešajú a roztavia. Potom sa účinná látka disperguje v roztavenej zmesi, zmes sa vleje do foriem na čapíky a nechá sa ochladiť.

D. Injekcie zložka množstvo účinná látka 20,0 mg pufer -..- podľa potreby propylénglykol 0,4 g voda na injekčné podanie 0,6 ml.

Účinná látka a pufer sa rozpustí v propylénglykole pri teplote 50 °C. Potom sa pridá za miešania voda na injekčné podanie a výsledný roztok sa prefiltruje, plní sa do ampúl, ampuly sa zatavia a sterilizujú v autokláve.

E. Kapsuly zložka množstvo účinná látka 200,0 mg laktóza 450,0 mg stearan horečnatý 5,0 mg

Prášková účinná zložka sa zmieša s pomocnými zložkami a plní do želatínových kapsúl.

37- s?/3

Claims (20)

1. ♦ 1 2

   1 9 iii) R a R^x tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, nasýtenú 3 až 7-člennú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca IA kde

   Y znamená atóm kyslíka, síry alebo skupinu SO, SO2, CH₇ alebo NR⁴, v ktorej

   R⁴ znamená atóm vodíka, (C^gjalkyl, perhalogén(C₁_g)alkyl, aryl, substituo vaný aryl, v ktorom substituentom je jedna alebo väčší počet skupín zo skupiny (C-^_g)alkyl, atóm halogénu, nitroskupina, aminoskupina, (C₁_g)alkylaminoskupina, perhalogénCC^_g)alkyl, hydroxy(C₁_g)alkyl, (C₁_g)alkoxyskupina (C-^_g)alkoxy(C^_g)alkylová skupina, alebo R⁴ znamená skupinu

   -COR⁵, v ktorej

   R⁵ znamená atóm vodíka, (C^_g)alkyl, perhalogén(C₁₆) alkyl, (C-^g) alkoxyskupinu alebo aryl, prípadne substituovaný jedným alebo väčším počtom substituentov zo skupiny (C^g)alkyl, perhalogén(C^.gjalkyl, hydroxy(C^_g)alkyl alebo (C-^ g)alkoxy(C_x_g)alkyl.

   1 2 kde R a R majú význam, uvedený vo vzorci I, alebo sa

   b) na zlúčeninu všeobecného vzorca Ila (Ha)

   -i o kde R a R majú význam, uvedený vo vzorci I, pôsobí zlúčeninou všeobecného vzorca III a prípadne sa v takto získanej zlúčenine uskutoční jeden alebo väčší počet nasledujúcich reakcií:

   i) výsledná zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej sol alebo chránený derivát sa premení na inú zlúčeninu všeobecného vzorca I a/alebo sa ii) odstráni akákolvek ochranná skupina alebo skupiny a/alebo iii) sa premení zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej sol na sol alebo solvát, prijateľný z fyziologického hľadiska.

   1 9

   i) R a R nezávisle znamenajú atóm vodíka, (C^_₄)alkyl, alebo hydroxy (C^-^Jalkyl, ii) R znamená atóm vodíka a R znamená skupinu -COR , kde a

   R^J znamená perhalogén(Ci_₄)alkyl, alebo

   -t o iii) R a R tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané azetidínovú, pyrolidínovú, piperidínovú, morfolínovú, tiomorfolínovú alebo piperazínovú skupinu, pripadne substituovanú na atóme dusíka (C₁_₄)alkylom, fenylom, prípadne substituovaným jedným alebo väčším počtom perhalogén (C-£_₄) alkylových, alebo (C-^_₄)alkoxyskupín; alebo skupinu -COR^, kde R⁵ znamená (C₁_₄)alkoxyskupinu.

   -1 o iii) R a R^-6 tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, nasýtenú 3 až 7-člennú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca IA (IA) kde

   Y znamená atóm kyslíka, síry alebo skupinu SO, SO2, CH2 alebo NR⁴, v ktorej

   R⁴ znamená atóm vodíka, (C₁_g)alkyl, perhalo56 gén(C-^_g)alkyl, aryl, substituovaný aryl, v ktorom substituentom je jedna alebo väčší počet skupín zo skupiny (C^g) alkyl, atóm halogénu, nitroskupina, aminoskupina, (C₁_g)alkylaminoskupina, perhalogén(C₁_g)alkyl, hydroxy(C^_g)alkyl, (Cig)alkoxyskupina (C₁_g)alkoxy(C₁_g)alkylová skupina, alebo znamená skupinu

   -COr5, v ktorej

   R^ znamená atóm vodíka, (C-^g)alkyl, perhalogéníC-^ g) alkyl, (C₁₆) alkoxyskupinu, aryl, prípadne substituovaný jedným alebo väčším počtom substituentov zo skupiny (C-_L_g)alkyl, perhalogén(Ci_g)alkyl, hydroxy (C-_L_g)alkyl alebo (C^_g)alkoxyako aj farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.

   1 9

   i) R a R znamenajú nezávisle na sebe atóm vodíka, (C^_g) alkyl, (C₃_₇)cykloalkyl, (C₃_₇)cykloalkyl(C^_g)alkyl, (C₃_g)alkenyl, hydroxy (Cý_g)alkyl alebo (^Cl- ó) ^alkoxY (Ci^aikyl, ii) Rl znamená atóm vodíka, (C-^_g)alkyl, (C-^-y) cykloalkyl, (C₃_₇)cykloalkyl(C₁_g)alkyl, (C₃_g)alkenyl, hydroxy(Cý_g)alkyl alebo (Cý_g)alkoxy(C^g)alkyl a

   R znamená skupinu -COR , v ktorej

   R^ znamená atóm vodíka, (C-^_g)alkyl, perhalogén(Ci_g)alkyl, (C₃_₇)cykloalkyl, (C₃_₇)cykloalkyl(C^g)alkyl, (C₃_g)alkenyl, hydroxy(C-^g)alkyl, (C^_ g) alkoxyskupinu, (C-£_g)alkoxy (C-£_g)alkyl, alebo

   1. Deriváty camptothecinu všeobecného vzorca I kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a
2. 2. Deriváty camptothecinu podľa nároku 1, v ktorých 12

   R a R znamenajú:

   i) nezávisle na sebe atóm vodíka, (C^-^alkyl, (C^ yjcykloalkyl, (C^_γ)cykloalkyl(C^_4)alkyl, (£3,4) alkenyl, hydroxy (C₁_4)alkyl, (C₁_4)alkoxy (C-_L_4)alkyl, alebo ii) spoločne s atómom dusíka tvoria aziridín, azetidín, pyrolidín, piperidín, hexametylénimín, imidazolidín, pyrazolidín, izoxazolidín, piperazín, N-metylpiperazín, homopiperazín, N-metylhomopiperazín, tiazolidín, izotiazolidín, morfolín alebo tiomorfolín.
3. 3. Deriváty camptothecinu podlá nároku 1 alebo 2, v ktorých R a R spoločne tvoria heterocyklickú skupinu, a to aziridinovú, azetidinovú, pyrolidinovú, piperidinovú, hexametylénimínovú, imidazolidínovú, pyrazolidinovú, izoxazolidínovú, piperazinovú, N-metylpiperazínovú, homopiperazínovú, N-metylhomopiperazínovú, tiazolidinovú, izotiazolidínovú, morfolinovú alebo tiomorfolínovú skupinu.
4. 4. Deriváty camptothecinu podľa nároku 1 až 3, v ktorých n znamená celé číslo 1 alebo 2 a
5. 5. Deriváty camptothecinu podľa nároku 1, ktorými sú 7-dimetylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptotheciri,
6. 6. Deriváty camptothecinu podľa nároku 1, ktorou je 7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin, a soli a solváty tejto látky, prijateľné z farmaceutického hladiska.
7. 7. Deriváty sú v konfigurácii camptothecinu podľa nárokov 1 S.

   až 4, ktoré

   7-fenylpiperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, a soli a solváty týchto látok, prijatelné z farmaceutického hladiska.

   7-(2-metoxyfenylpiperazino)metylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin a

   7-(α,a,a-trifluór-m-tolyl)piperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

   7-piperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin vo forme soli s kyselinou trifluóroctovou,

   7-terc.butyloxykarbonylpiperazinometylén-10,11-etyléndioxy20(S)-camptothecin,

   7-aminometylén-lO,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecindihydrochlorid,

   7-aminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin.dihydrochlorid ,

   7-trifluóracetamidometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin ,

   7-trifluóracetamidometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin ,

   7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-metyléndioxy-20(S) camptothecin,

   7-dietanolaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-azetidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7-azetidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-tiomorfolinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-azetidinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

   7-dietanolaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin ,

   7-N-metyletanolaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)camptothecin,

   7-dietylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-dietylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7-dietylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-N-metyletanolaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)camptothecin,

   7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin ,

   7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)camptothecin,

   7-morfolinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-pyrolidinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7-piperidinometylén-lO,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7-piperidinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

   7-morfolinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

   7-dimetylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

   7-dimetylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-dimetylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin ,
8. 8.

   Deriváty camptothecinu všeobecného vzorca I’ kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

   R^^a a R^^a znamenajú

   i) nezávisle na sebe atóm vodíka, (C^_g)alkyl, (C3..7)·· cykloalkyl, (C^ -y) cykloalkyl (C-^ g) alkyl, (Cj_g)alkenyl, hydroxy(C₁₆)alkyl, (C₁_₆)alkoxy(C₁_₆)alkyl, alebo ii) tvoria spoločne s atómom dusíka heterocyklickú skupinu s 3 až 7 atómami všeobecného vzorca IA’ kde

   Y^a znamená atóm kyslíka, síry, CH2, NH alebo N( (Cj. _g)alkyl) a soli týchto látok, prijateľné z farmaceutického hľadiska.
9. 9. Deriváty camptothecinu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 7 na použitie ako liečivo.
10. 10. Sol alkalického kovu alebo kovu alkalických zemín, zodpovedajúca zlúčenine všeobecného vzorca I podľa ktoréhokolvek z nárokov 1 až 7, v ktorej kruh E je otvorený, pričom táto sol je získaná pôsobením bázy alkalického kovu alebo kovu alkalickej zeminy na túto zlúčeninu.
11. 11. Spôsob výroby zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8 alebo jej fyziologicky prijateľnej soli alebo solvátu, vyznačujúci sa tým, že sa

    a) nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca IV kde

    X znamená atóm halogénu, so zlúčeninou všeobecného vzorca V

    HNR¹R² (IV) (V)
12. 12. Farmaceutický prostriedok, s protinádorovým účinkom, vyznačujúci sa tým, že ako svoju účinnú zložku obsahuje zlúčeninu podľa ktoréhokolvek z nárokov 1 až 8, alebo jej soľ alebo solvát, prijateľný z farmaceutického hladiska, a ďalej obsahuje nosič, prijateľný z farmaceutického hľadiska.
13. 13. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 12, vyznačujúci sa tým, že obsahuje 7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(S)camptothecin, alebo jeho soľ alebo solvát, prijateľný z farmaceutického hladiska, a ďalej obsahuje nosič, prijateľný z farmaceutického hľadiska .
14. 14. Použitie zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8 na výrobu liečiva s protinádorovým účinkom.
15. 15. Použitie podľa nároku 14, 7-(4-metylpiperazinometylén)-10 , ll-etyléndioxy-20 (S)-camptothecinu, alebo jeho soli alebo solvátu, prijateľného z farmaceutického hľadiska, na výrobu liečiv s protinádorovým účinkom.
16. 16. Medziprodukt všeobecného vzorca IV
17. 17. Medziprodukt, vybraný zo skupiny zahrňujúcej: 7-chlórmetyl-10 , ll-metyléndioxy-20 (R, S) -camptothecin , 7-chlórmetyl-10 , ll-metyléndioxy-20 (S) -camptothecin, 7-chlórmetyl-10 , ll-etyléndioxy-20 (R, S) -camptothecin a 7-chlórmetyl-10 , ll-etyléndioxy-20 (S) -camptothecin.
18. 18. Medziprodukt všeobecného vzorca Ila kde n

    i) R¹ znamená celé číslo 1 alebo 2 a a R znamenajú nezávisle na sebe atóm vodíka, (C-^_g)alkyl, (C₃_₇)cykloalkyl, (C₃_₇).cykloalkyl(C-_L_₆) alkyl, (C₃_ g) alkenyl, hydroxy (C-£_ g) alkyl alebo (c₁_₆)aikoxy(c₁_₆)aikyi, ii) R¹ znamená atóm vodíka, (C^_g)alkyl, (C₃_₇)cykloalkyl , (C₃_₇)cykloalkyl(C₁_₆)alkyl, (C₃_₆)alkenyl, hydroxy(C₁_g)alkyl alebo (C₁_g)alkoxy(C^_g)alkyl a

    R znamená skupinu -COR , v ktorej a

    R znamena atóm vodíka, (C-_L_g)alkyl, perhalogén(C₁₆)alkyl, (C₃₇)cykloalkyl, (C₃₇)cykloalkyl(C^g)alkyl, (C₃_g)alkenyl, hydroxy(Ci_6)^alkyl, (C₁_g)alkoxyskupinu, (C₁_g)alkoxy(C^_g)alkyl, alebo
19. 19. Medziprodukt podlá nároku 18, v ktorom R a R tvoria heterocyklickú skupinu, a to aziridínovú, azetidínovú, pyrolidinovú, piperidínovú, hexametylénimínovú, imidazolidínovú, pyrazolidínovú, izoxazolidínovú, piperazínovú, N-metylpiperazínovú, homopiperazínovú, N-metylhomopiperazínovú, tiazolidínovú, izotiazolidínovú, morfolínovú alebo tiomorfolínovú skupinu.
20. • 20. Medziprodukt všeobecného vzorca II