CZ299794B6 - Analogy kamptothecinu, zpusob jejich prípravy a farmaceutické prostredky obsahující tyto analogy - Google Patents

Abstract

Analog kamptothecinu obecného vzorce I nebo II. Jejich použití pri výrobe farmaceutických prostredku pro lécení protinádorových onemocnení.

Description

Analogy kamptothecinu. způsob jejich přípravy a farmaceutické prostředky obsahující tyto analogy

Oblast techniky

Předmětný vynález se týká analogů kamptothecinu, způsobu jejich přípravy, farmaceutických prostředků obsahujících tyto analogy a použití uvedených analogů pro přípravu protinádorového léčiva.

Dosavadní stav techniky

Kamptothecin je přírodní sloučenina, která byla poprvé izolována z listů a z kůry čínské rostliny 15 camptotheca acurninata (Wall a kol., J. Amer. Chem. Soe. 88, str. 3888. 1966). Kamptothecin je pentacyklieká sloučenina tvořená indolizinof 1,2-b]chínolínovýin fragmentem (kruhy A, B, C a D) kondenzováním s a-hydroxylaktonem se šesti členy (kruh E). Atom uhlíku v poloze 20. který nese a hydroxyskupinu. je asymetrický a dodává molekule schopnost stáčet rovinu polarizovaného světla. Přírodní forma kamptothecinu má na atomu uhlíku 20 absolutní konfiguraci

2(.) „S.

Kamptothecin ajeho analogy mají antiproliferativní účinky na četné linie rakovinových buněk, včetně buněčných linií lidských nádorů střev, plic a prsů (M. Suffness a kol.: The Alkaloids Chemistry and Pharmacology. Bross A.. Svazek 25, str. 73, Academie Press, 1985). Předpokládá se, že antiproliferativní účinek kamptothecinu souvisí s jeho inhibiční aktivitou na DNA topoizomerázu I.

Kamptothecin a některé jeho analogy nejsou rozpustné ve vodě, a proto je jejich podávání parenterální cestou obtížné. Byly připraveny ve vodě rozpustné deriváty kamptothecinu, ve kterých kruhy A a B mají solitvorné substituenty (například dokumenty US 4 981 968, US 5 049 668, EP 540 099). Tyto produkty mají však v porovnání s deriváty nerozpustnými vc vodě snížený antinádorový účinek. Byly připraveny také jiné deriváty kamptothecinu rozpustné ve vodě, přičemž hydroxylová skupina v poloze 20 je esterifikována kyselinou mající solitvornou skupinu, jako například glyeinem (například dokument US 4 943 579 a WO 96/02546). Tyto deriváty

3? označují pracovníci v oboru jako ..proléčivovc formy“, jelikož nejsou biologicky aktivní jako takové, ale stávají se biologicky aktivními teprve po metabolizační fázi probíhající po podání pacientovi. Proléčivové formy a-hydroxyl akto nových analogů kamptothecinu vykazují dobry' antinádorový účinek v případě zvířat a klinicky, jsou však spojeny se škodlivými vedlejšími účinky, jako je výskyt závažných průjmů, které mohou ohrožovat život pacienta. Je proto důležité

-ío vyvinout ve vodě rozpustné analogy kamptothecinu, které by byly účinnější a které by byly lépe snášeny.

Dále se zjistilo, že přítomnost α-hydroxylaktonu je absolutním požadavkem jak pro in vivo, tak pro in vitro aktivitu kamptothecinu (Camptotheeins: New Anticancer Agents, Putmcsil M. a kok, str, 27. CKC Press, 1995; Wall M. a kol.. Cancer Res, 55, str. 753, 1995; Hertzberg a kol.. J. Med. Chem. 32, str. 715, 1982; a Crow a kol., J. Med. Chem. 35, str. 4160, 1992).

- I CZ 299794 Bó

Podstata vynálezu

Nyní bylo zjištěno, že β--hydroxy laktony se sedmí členy mají biologickou aktivitu srovnatelnou 5 nebo větší než et -hydroxylakton (PCT přihláška číslo PR 96/00980, zveřejněná jako

WO 97/00876). Předmětný vynález se týká nových derivátů této třídy analogů kamptotheeinu, vc kterých β-hydroxylakton se sedmi členy nahrazuje přirozený cx-hydroxylakton kamptotheeinu. β-Hydroxylaktonem se míní lakton obsahující další atom uhlíku mezi atomem uhlíku karboxylové skupiny a α-atomem uhlíku nesoucím hydroxylovou skupinu v a-hydroxylaktonu.

io

v raeemické nebo v enantiomerní formě nebo v jakékoliv kombinaci těchto forem, přičemž

R| představuje Cj-Cř, alkylovou skupinu, C₂-C_o alkeny lovou skupinu, Cý-Cý alkyny lovou skupinu, C|-C_f) halogenalkylovou skupinu, C|-C<, alkoxy-(C|-C₍₁)alkylovou skupinu nebo C,-C₆ aIkyl(Ct-C₆)thioalkylovou skupinu,

R₂, R; a R₄ na sobě nezávisle představují atom vodíku, atom halogenu, Ci Cj, halogenalkylovou skupinu, Cj-Cj, alkylovou skupinu, C₂-C₆ alkenylovou skupinu, kyanoskupinu. Cj-C₆ kyanoalkylovou skupinu, nitroskupinu. Cj Cj, nitroalky lovou skupinu, amidoskupinu, Cr Cj, aniidoalkýlovou skupinu, hydrazinoskupinu, C_t-C₆ hydrazinoalkylovou skupinu, azidoskupinu, Cj-C_ťl azidoal kýlovou skupinu, skupinu (CU_?)_tnNR₆ř<₇- (CHA.OR,,. (CHtK.SR^ (CTT)_jnCCTR₆, (CH₂)_mNR_f,C(O)Rs, (CH₂)_ntC((W (CIT)_mOC(O)R«, 0(0 l₂)_mNR,R₇. OC(O)NR₆R₇,

0C(O)(CH_?)_mC0₂R₍₎ nebo (CH₂)„1N-X], OC(O)[N=X], {CH_:)_nlOC(O)[N-X], kde [N=X J znamená 4- až 7-clennou heteroeykliekou skupinu obsahující atom dusíku, který je členem heteroeyklické skupiny a X znamená zbylé členy, které jsou nutné k doplnění heterocyklickě skupiny , volené ze souboru zahrnujícího atom kyslíku, síry, skupinu Cll_2l skupinu CH, atom dusíku, skupinu NR₉ aCORio, nebo R₂, R< a R₄ představují na sobe nezávisle arylovou nebo nižší aryl30 alkylovou skupinu, které jsou popřípadě substituované jedním až čtyřmi substituenty na arylové nebo heterocyklické části, přičemž tyto substituenty jsou voleny ze souboru zahrnujícího C|-C₆ alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskupinu, aminoskupinu. C|-C₆ alkylaminoskupinu. CjC_f, halogenalkylovou skupinu, C|—C_ř, hydroxyalkylovou skupinu. C|-C_f, alkoxyskupinu a Ci-<?_ť, alkoxy~(C|-Cft)alkylovou skupinu nebo R₂ a R₄ vytvářejí spolu dohromady řetězec se 3 nebo 4 členy, ve kterém jsou prvky řetězce voleny ze souboru zahrnujícího skupinu CH. skupinu CH₂, atom kyslíku, síry a dusíku a skupinu NR₉,

Rs představuje atom vodíku, atom halogenu, Cj-C₍₎ halogenalkylovou skupinu, Cý-Cj, alkylovou skupinu. Cj Cj, alkoxyskupinu, Cj-Cj, alkoxy-(Cj-C₆)alkýlovou skupinu, Cý-Cj, alkyl-(C_r40 Cjjthioalky lovou skupinu, Cy Cý cykloalkylovou skupinu, Cjr C₇ cykloalkyl-(C|-C_ft) alkylovou skupinu, kyanoskupinu. Cj-C₆ kyanoalkylovou skupinu, Cj-C_fl alkylsulfonyHíj-CjJalkylovou, C|- C_ft hydroxyalkylovou skupinu, nitroskupinu, skupinu (CH₂)_mC(O)R_x. skupinu (CH₂)_mNR_f,C(O)R₈. (CH₂)_niNR₆R₇. skupinu ((:Η₂)_ιηΝ(ίΤΪ)₂(€Η₂)_ηΝΚ_{,Κ₇. skupinu (CH₂)_mOC(O)R₈, skupinu (CH₂)_mOC(O)NR_óR₇, skupinu (CH₂)_mS(O)_qR_t i, skupinu (CH₂)_mP(O)R|₂Ri3, skupinu (CH₂)₂P(S)R₁₂Rb nebo skupinu (CII₂)_n[N=XJ, skupinu 0C(O)[N=XC skupinu (CH₂)_mOC(O)[N-X], ary lovou nebo ary!(C]-C_ó)alkylovou skupinu, kterc jsou případně substituované jedním až čtyřmi substituenty na ary love nebo heteroarylové části, přičemž tyto substituenty jsou voleny ze souboru zahrnujícího C|- C₍> alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskupinu, aminoskupinu, C₍ C₆ alkylaminoskupinu. C_r-C₆ halogenalkytovou skupinu. C|-C_{, hydroxyalkylovou skupinu, C|-C₆ alkoxyskupinu a C|-C₆ alkoxy--(Cj—C₆) alkylovou skupinu.

io R_f, a R? představují na sobě nezávisle atom vodíku, C]-C₆ alkylovou skupinu. C|-C₆ hydroxyalky lovou skupinu, Ci-Ο, alkyl(Cj-Cň) aminoalkylovou skupinu, C|-C₆ aminoalkylovou skupinu, C3-C7 cykloalkylovou skupinu, C3-C7 cykloalkyl(C_t—C7) alkylovou skupinu, C<, alkenylovou skupinu, C₍-C₆ alkoxy—(C ,—C₆) alkylovou skupinu, C|-C₆ halogenalkylovou skupinu, arylovou nebo ary HC|-Cf,)alkylovou skupinu, které jsou případně substituované jedním až čtyřmi substituenty na arylové části, přičemž tyto substituenty jsou voleny ze souboru zahrnujícího C,C<, alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskupinu. aminoskupinu, C|-C₆ alkylaminoskupinu, Cj—C_ň halogenalkylovou skupinu, C|—C₆ hydroxyalkylovou skupinu. C|-C<, alkoxyskupinu a (?,Co alkoxyjC 1 -C₆) alkylovou skupinu.

Rs představuje atom vodíku. Ci-C₆ alkylovou skupinu, C|--C_ft hydroxyalkylovou skupinu, aminoskupinu. C|-C₆ alkylaminoskupinu, C|-C_fi alkyl(C_T—C_(>) aminoalkylovou skupinu, C|-C₍₎ aminoalkylovou skupinu, CVC₇ cykloalkylovou skupinu. C\-C₇ cykloalkyl(C|-C_ťf) alkylovou skupinu, C₂ -Co alkeny lovou skupinu, C_t-C₆ alkoxyskupinu skupinu, C|-C₆ alkoxy (C|-C₆) alkylovou skupinu, C|-C_{, halogenalkylovou skupinu, arylovou skupinu nebo aryl (C1—C_ť,)alkylo25 vou skupinu, které jsou případně substituované jedním až čtyřmi substituenty na ary lové Části, přičemž tyto substituenty jsou voleny ze souboru zahrnujícího C|-C₆ alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskupinu. aminoskupinu, U|-C, alkylaminoskupinu, C_rCo halogenalkylovou skupinu, C,-C_Ď hydroxyalkylovou skupinu, C,-C₆ alkoxyskupinu a C\—alkoxy-(C|-C Jatky lovou skupinu.

R<> představuje atom vodíku. C]-C₆ alkylovou skupinu, C|-C₆ halogen-jCj CJ alkylovou skupinu, arylovou skupinu nebo arylovou skupinu substituovanou jedním nebo více substituenty vybranými zc souboru zahrnujícího C|-C₆ alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskupinu, aminoskupinu. Cj-C_f, alkylaminoskupinu, C|--C_ft halogenalkylovou skupinu. C_r-C₆ hydroxy35 alkylovou skupinu. C|-C<, alkoxyskupinu a C|-C₆ alkoxy—(C|—C₆) alkylovou skupinu,

R10 představuje atom vodíku, C|—C₆ alkylovou skupinu, C|-C₆ halogenalkylovou skupinu, C_tCf, alkoxyskupinu, arylovou skupinu nebo arylovou skupinu substituovanou jedním nebo více substituenty vybranými ze souboru zahrnujícího CC₆ alkylovou skupinu, C|-C₆ halogcnalkylo40 vou skupinu, C_r C₍₁ hydroxyalkylovou skupinu a C|-C₆ alkoxyjC 1—C₆) alkylovou skupinu,

Ru představuje CrC₆ alkylovou skupinu, arylovou skupinu, skupinu (CHJ_mOR|₄, skupinu (Cl fJmSR,4. skupinu (CH₂)₂NR₁₄R,₅ nebo skupinu (CHJ_inlN=X],

R,₂ a R|í představují na sobě nezávisle C,-C_ft alkylovou skupinu, arylovou skupinu, C,-C₆ alkoxyskupinu, aryloxyskupinu nebo aminoskupinu.

Ru a R,s představují na sobě nezávisle atom vodíku, C|—C_o alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu,

Rtf, představuje atom vodíku nebo skupinu OR?i,

R1 ? představuje skupinu OR* nebo skupinu NR₆R₇.

- j CZ 299794 B6

Rik a R_1q představují na sobě nezávisle atom vodíku, atom halogenu, C|-C₆ alkylovou skupinu, C|-C₆ alkoxyskupinu nebo hydroxylovou skupinu,

R₂d představuje atom vodíku nebo atom halogenu,

R^i představuje atom vodíku, C|-C₆ alkylovou skupinu, skupinu CHO nebo skupinu C(O)(CH₂)_mCH_?,

R_p představuje atom vodíku nebo snadno odštěpitelnou skupinu vybranou ze souboru zahrnuj íio čího skupiny obecného vzorce -C(O)-A-NR22R.’,, kde A představuje C|-C₆ alkylenovou skupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem, která je popřípadě substituovaná skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího volnou, ester i fi kovanou nebo na sůl převedenou hydroxylovou skupinu, alom halogenu, volnou, esterifikovanou nebo 11a sůl převedenou karboxylovou skupinu, aminoskupinu, mono-(Ci-C(,) alkylaminoskupinu a dí-<C|—C₆) alkylaminoskupinu a R₂₂ a R_;1 na sobě nezávisle představují atom vodíku, Cj-Cg alkylovou skupinu, C|-C₆ hydroxyalkýlovou skupinu, C, C<, alkyl(C|-C₆) aminoalkýlovou skupinu, C|-C₆ aminoalkylovou skupinu. L\-C? cykloalkylovou skupinu, C -C- cykloalkyl-^CrQ,) alkylovou skupinu, C₂-C_/f alkenylovou skupinu. C_t C₍, alkoxy-fCi-Cí,) alkylovou skupinu, C |—C<, halogenalkylovou skupinu nebo arylovou nebo aryl(C]-C_(i) alkylovou skupinu, které jsou případné substituované na ary lové částí jedním až čtyřmi substituenty, přičemž tyto substituenty jsou vybrané ze souboru zahrnujícího C'|-C₆ alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskuptnu. aminoskupinu, C| -C₆ alkylaminoskupinu, C_rC₍₁ halogenalkylovou skupinu. C|- C<, hydroxyal kýlovou skupinu. C,-C₆ alkoxyskupinu a C,-C₆ alkoxy(Ci-C₍₁) alkylovou skupinu nebo R₂₂ a R₂j spolu vytvářejí případně substituovaný pětičlenný. šestičlenný nebo sedmičlenný kruh, který' popřípadě obsahuje další heteroatom ze souboru zahr25 nujícího atom kyslíku, dusíku nebo síry, m je cclc číslo od 0 do 6.

n je 1 nebo 2, q je celé číslo od 0 do 2, [N=X] představuje 4-- až 7-člennou heterocyklickou skupinu, přičemž X znamená zbyle členy, které jsou nutné k doplnění uvedené heterocyklické skupiny, jež jsou vybrané ze souboru zahrnu35 jícího atom kyslíku, síry; skupinu CH₂, skupinu CH, atom dusíku, skupinu MC a skupinu COR10, přičemž pokud R_P znamená atom vodíku, ÍC a R.j spolu tvoří tříčlenný nebo čtyřčlenný řetězec, přičemž arylovou skupinou, samostatnou nebo jako součástí jiné skupiny, se vždy rozumí mono41) cyklická, bieyklieká nebo trieyklická skupina obsahující alespoň jeden aromatický kruh, přičemž každý z těchto kruhů obsahuje maximálně 7 členů, nebo jejich farmaceuticky vhodné soli.

Výrazem nižší v souvislosti s alkylovou skupinou, s alkylthioskupinou a s alkoxyskupinou se vždy míní uhlovodíková skupina s přímým nebo s rozvětveným řetězcem obsahující I až 6 atomů uhlíku, jako je methylová, ethylová, propylová, izopropylová, butylová nebo terc-butylová skupina, mclhyllhioskupina, ethylthioskupina, methoxyskupina nebo ethoxyskupina. V souvislosti s alkenylovou a s alkynylovou skupinou se výrazem „nižší míní skupina se 2 až 6 atomy uhlíku a s alespoň jednou dvojnou nebo trojnou vazbou, jako je například vinylová, allylová, izopropenylová. pentenylová, hexenylová, elhynylová, propynylová a butynylová skupina. Výrazem cykloalkylová skupina se vždy míní cyklická skupina se 3 až 7 atomy uhlíku, jako je eyklopropylová, cyklobutylová, cyklopcntylová nebo cyklohexylová skupina. Výrazem arylová skupina se vždy míní monocyklická, dicyklícká nebo trieyklická skupina s alespoň jedním aromatickým kru55 hem, přičemž každý kruh obsahuje maximálně 7 členů, jako je například fenylová, naftylová,

-4CZ 299794 B6 anthracylová, bifenylová nebo indenylová skupina. Výrazem halogen se míní atom chloru, bromu, jodu nebo fluoru. Skupiny odpovídající výrazům halogenalkylová, kyanoalkylová, nitroalkylová, amidoalkylová, hydrazinoalkylová, azidoalkylová, arvlalkylová, hydroxyalkylová, alkoxyalkylová, a alkylthioalky lová a alkylsulťony laiky lová, přičemž se alkylovým nebo alkoxypodílem vždy míní shora charakterizovaný nižší alky lový nebo alkoxypodíl. jsou popřípadě substituovány jednou až třemi skupinami ze souboru zahrnujícího atom halogenu, kyanoskupinu. nitroskupinu, amidoskupinu hydrazinoskupinu, azidoskupinu, arylovou skupinu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu, alkylthioskupinu nebo sulfonylalkylovou skupinu, přičemž se alkylovým nebo alkoxypodílem vždy míní shora charakterizovaný nižší alkylový nebo alkoxypodíl. Nižší alkylaminoskupina může obsahovat jednu nebo dvě nižší alkylové skupiny a jde například o skupinu NHCIE, NHCIECTC, N(CH0? nebo NCCIhXCHiCH;). Výrazem volná, esterífikovaná nebo na sul proveditelná hydroxylová skupina se vždy míní hydroxy lová skupina, skupiny OCOR_?fí. OR₂₇ a skupina alkoholátové soli.

Sloučeniny podle vynálezu mají dvě možné enantiomemí formy, to znamená mohou mít ..R” a ,,S konfiguraci. Vynález zahrnuje tyto dvč enantiomemí formy a jakékoliv kombinace těchto forem, včetně ,.RS^L‘ racemických směsí. Pro zjednodušení, pokud není ve strukturním vzorci vyznačena žádná specifická konfigurace, vždy se rozumí, že tento vzorec zahrnuje obě možné enantiomemí formy a jejich směsi.

Příklady substituovaných kamptolhecinů. používaných podle tohoto vynálezu jako výchozí látky, jsou popsány v literatuře (dokumenty US 4 473 692, 4 604 463, 4 894 956. 5 162 532. 5 395 939, 5 3 15 00, 5 264 579. 5 258 516, 5 254 690. 5 212 317 a 5 341 745, PCT přihlášky WO 92/07856, US 94/06451, US90/05172, US92/04611, US93/10987, US91/09598, EP 94/03058 a EP 95/00393 a zveřejněné EP přihlášky EP 325 247, 495 432, 321 122 a 540 099).

Sloučeniny obsahující oxazinový kruh sc připravují tak, že β-hydroxy laktonová sloučenina obecného vzorce D

O (D), kde R; představuje hydroxy lovou skupinu, R₄ představuje atom vodíku a R_h R₂, R<. Rpj a R₂₍> mají shora uvedený význam, reaguje s primárním aminem za podmínek Mannichovy reakce za vzniku β-hydroxylaktonové sloučeniny obecného vzorce la o

R₂0 OH (la).

kde R|, R₂. Rs. R<>. Říš. Rn a R₂o mají shora uvedený význam.

- 5 CZ 299794 B6

Tento způsob spočívá v udržování výchozí látky v přítomnosti primárního aminu, jako je benzylamin, a formaldehydu v kyselém rozpouštědle, jako je kyselina octová nebo propionová, při teplotě 30 až 80 °C, po dobu 0,5 až 5 hodin. Alternativně lze suspenzi výchozí látky v kyselině octové s tri-N-substituovaným hexahydrotriazinem, jako je hexahydro-l,3,5-trimethyltriazin, 1,3.5-triethylhexahydrotriazin nebo 1,3,5-tribenzylhexahydrotriazin, zahřívat na teplotu 30 až 80 °C po dobu 0,5 až 5 hodin.

lakton obecného vzorce la se otvírá popřípadě v zásaditém prostředí, čímž po neutralizaci vzniká sloučenina obecného vzorce Ila

(Ha), kde R|. R_?, R₅, 1%. R_n, Ris, Rn a R₂₍₁ mají shora uvedený význam, R|₍₁, znamená skupinu OR₂|. kde R₂| znamená atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu a R_i7 znamená skupinu OI% nebo HNR₍₁ a IC znamená atom vodíku, nižší alkylovou skupinu, eykloal kýlovou skupinu, nižší alkyl15 cykloalkylovou skupinu, nižší alkeny lovou skupinu, nižší alkyl—nižší alkoxyskupinu nebo ary lovou skupinu nebo nižší alkylarylovou skupinu.

uvedená sloučenina obecného vzorce D nebo la se popřípadě acyluje. s výhodou derivátem skupiny C(())-A-N-R₂₂R₂3, definovaným výše, čímž vznikají β-hydroxylaktonovc sloučeniny obecného vzorce lb, to je sloučenin) vzorce l, kde 1% znamená jinou skupinu než je atom vodíku (proléčivová forma podle vynálezu), stejným způsobem jako lakton v obecném vzorci la se může otevřít lakton v obecném vzorci lb, za vzniku hydroxykyseliny obecného vzorce Ilb.

Při shora li vedených procesech se skupiny R₂, R₂, R₄ a Rs mohou popřípadě chránit o sobě známými způsoby (Greene T., Protec ti ve Groups in Organic Synthesis, 10 až 86, John Wiley & Sons. 1981). Pokud alespoň jedna ze skupin R₂₂ a R₂₂ znamená atom vodíku, nebo podíl obsahující alespoň jednu skupinu, která je chemicky nekompatibilní s acylačním procesem, jako je

3o například primární aminoskupina nebo sekundární aminoskupina, je nutno použít chránící skupiny. která je odolná vůči acylačním podmínkám. Chránící skupinou, běžně používanou pro aminy, je tcrc-butyloxykarbonylová skupina (BOC). Acylaění reakce se pak provádí shora uvedeným způsobem, načež se chránící skupina odštěpí, například zpracováním trifluoroctovou kyselinou v případě skupiny BOC. čímž se získá sloučenina obecného vzorce I nebo II. Používání chraňi35 cích skupin jc pracovníkům v oboru samo o sobě známé (pro další příklady se odkazuje na shora uvedenou publikaci (Greene T., Protective Groups in Organic Synthesis, 10 až 86. John Wiley & Sons, 1981)).

-6CZ 299794 Bó

Sloučeniny obecného vzorce D se připravují následujícím způsobem:

sloučenina obecného vzorce M

(M), kde R|. a R|u mají shora uvedený význam a R₂₍₎ znamená atom vodíku nebo atom halogenu, se spojí s 2-halogen- 3-chinolínmethanolem obecného vzorce N

(N), kde R₂. Ri, Rj a R> mají shora uvedený význam a X znamená atom halogenu, za vzniku sloučeni niny obecného vzorce O

O (O), kde R|. R₂, Rj. R₄, Rj, K_x. R^. R_2o a X mají shora uvedený význam, a sloučenina obecného vzorce O se cyklizuje za vzniku sloučeniny obecného vzorce D.

Při shora uvedených procentech se skupiny R_s, R₂, Rj a R₄ mohou popřípadě chránit známými způsoby (Greene T„ Protective Groups in Organic Synthesis, 10 až 86. John Wiley X Sons, 1981). Vytváření sloučeniny obecného vzorce O ze sloučenin obecného vzorce M a N sc provádí způsobem, který je pracovníkům v oboru známý pod označením Mitsunobova reakce (Mitsunobu O. a kol., Synthesis. str. 1, 1981). Hydroxylová skupina sloučeniny obecného vzorce N se nahra20 zuje nukleofílem, jako je sloučenina obecného vzorce M nebo její deprotonovaný derivát, a to reakcí s fosfinem, například trifenylfosfinem, a azodikarboxylátovým derivátem, například diethyldiazodikarboxylátem, v aprotickém rozpouštědle, například v tetrahydrofuranu nebo v N.Ndimethylformamidu. Cyklizace sloučeniny obecného vzorce O se $ výhodou provádí v přítomnosti palladia jakožto katalyzátoru (například v přítomnosti octanu palladnatého) za bazických podmínek (například v přítomnosti alkalického octanu, popřípadě kombinovaného s katalyzátorem fázového přenosu, jako je například tetrabutylamoniumbromid), v aprotickém rozpouštědle, jako je například acetonitril nebo Ν,Ν-dimethyl formamid, při teplotě 50 až 120 °C (R. Grigg a kol,, Tetrahedron 46. str. 4003, 1990).

-7CZ 299794 B6

Sloučeniny obecného vzorce M se mohou připravovat způsobem, při kterém se

karbony lová skupina pyridinu obecného vzorce
.N.	^R24
Y í 1
R20 1	Z
R^O kde R| a R2o mají shora uvedený význam a kde R24	znamená atom halogenu nebo nižší alkoxy-

skupinu, chrání aeetalovou skupinou za vzniku sloučeniny obecného vzorce F

kde R,. R_?1) a R₃₄ mají shora uvedený význam a kde Za Z' znamenají na sobě nezávisle nižší io alkylovou skupinu nebo spolu dohromady vytvářejí nasycený uhlovodíkový řetězec se 2 až 4 členy;

- do sloučeniny obecného vzorce F se zavádí hydroxy methy lová skupina za vzniku sloučeniny obecného vzorce G

kde R|. R?4, 7 a 7' mají shora uvedený význam;

poté se alkoholová skupina sloučeniny obecného vzorce G chrání za vzniku sloučeniny obecného vzorce H

(H),

- 8 CZ 299794 B6 kde R|, R20. R₂₄, 2 a Z' mají shora uvedeny význam a R₂? znamená skupinu chránící alkoholovou skupinu;

acetalová skupina sloučeniny obecného vzorce 11 se odštěpí za vzniku sloučeniny obecného 5 vzorce I'

(Γ).

kde R_h R_:o. K₂₄. a R₂s mají shora uvedený význam;

sloučenina obecného vzorce Γ reaguje s funkeionalizovaným alkylačním činidlem za vzniku tn β-hydroxyesteru obecného vzorce J

kde R|. R₂₍i. R.>4 a R_2S mají shora uvedený význam a R,₇, R_lři a R,u mají význam uvedený u sloučeniny obecného vzorce lí;

- chránící skupina R₂í sloučeniny obecného vzorce J se odštěpí za vzniku sloučeniny obecného vzorec K

(Kb kde K,, Rtx. Rk. K₂₍, a R₂₄ mají shora uvedený význam a R_n znamená skupinu OR_ft. nebo NHR_Ó a K. znamená atom vodíku, nižší alkylovou skupinu, cykl oalkyl o vou skupinu, nižší alkyl—cyklo2ti alkylovou skupinu, nižší alkenylovou skupinu, nižší alkyl nižší alkoxyskupinii nebo arylovou nebo nižší alkylarylovou skupinu;

-9C.7. 299794 Bó sloučenina obecného vzorce K se cyklizuje za vzniku sloučeniny obecného vzorce L

kde R|, R^, Rn, Rio a R- mají shora uvedeny význam a konečně se skupina R₂₄ sloučeniny 5 obecného vzorce L převádí na karbony lovou skupinu za vzniku sloučeniny obecného vzorce M

kde Ri, Rix, R_N a R20 mají shora uvedený význam

Karbony lová skupina 4-acyl-2-halogenpyridinu (připrav i tel né ho například způsobem, který popsal Lammaltina J. L.. J. Ileterocyclic Chem. 20, str. 553, 1983) se s výhodou chrání aeetalovou skupinou, s výhodou cyklickou acetalovou skupinou, způsoby, jež jsou odborníkovi známé (Greene T.. Proteetive Groups in Organic Synthesis, 10 až 86, John Wiley & Sons. 1981), Takto získaný meziprodukt reaguje s alkoholátem sodným nebo draselným v aprotickém rozpouštědle (například v acetonitrilu) nebo v alkoholu, od kterého je alkoholát odvozen, při teplotě 0 až

100 °C za účelem získání sloučeniny obecného vzorce F. Sloučenina obecného vzorce F se lithiuje v poloze 3 reakcí s aryl lithiem nebo alkyl lithiem (například mešity I lithiem) v etherovém rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, při teplotě -100 až 0 °C. K takto získanému líthiovanému meziproduktu se přidává formylační elektrofil, jako je například N.N-dimethylformamid, a získaný aldehyd reaguje po hydrolýze s redukčním činidlem, jako je například borhydrid sodný, za vzniku sloučeniny obecného vzorce G. Chránění alkoholové skupiny sloučeniny obecného vzorce G se provádí za podmínek, které jsou pracovníkům v oboru známé, a to za vzniku sloučeniny obecného vzorce H. Jakožto příklad skupin, chránících alkoholovou skupinu, se uvádějí skupiny vytvářející ethery' (například skupina methylová, methoxymethylová, tetrahydropyranylová. 2-methoxyethoxymethylová, benzyloxymethylová. terc.-butylová a benzylová, (substituo25 váné nebo nesubstituované)) a estery (například formiát. acetát a izobutyrát), Další příklady skupin chránících primární hydroxylovou skupinu jsou uvedeny ve shora citované publikaci (Greene T„ Proteetive Groups in Organic Synthesis, 10 až 86. John Wiley & Sons, 1981). Odstraňování chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce H. pro získání sloučeniny obecného vzorce I', se provádí za selektivních podmínek, udržujících integritu skupiny R>₅. například zpracováním za kyselých podmínek (například kyselinou trifluoroctovou). Selektivní podmínky pro zavádění a odstraňování chránící skupiny jsou pracovníkům v oboru známé (Greene T., Proteetive Groups in Organic Synthesis. 10 až 86, John Wiley & Sons, 1981). Reakci sloučeniny

- 10CZ 299794 R6 obecného vzorce I' s funkcionalizovaným alky lačním činidlem za vzniku β hydroxy esteru obecného vzorce J je možné provést pomocí lithiumenolátu nebo zinkového derivátu esteru karboxylové kyseliny v bezvodém aprotíckém rozpouštědle, například v tetrahydrofuranu. Chránící skupina R₂₅ sloučeniny obecného vzorce J se odštěpuje za vzniku sloučeniny obecného vzorce > K za podmínek odstraňování chránící skupiny, které jsou pracovníkům v oboru známé. Například, jestliže R₂₅ znamená benzylovou skupinu, působí se na alkoholový roztok sloučeniny obecného vzorce J po přidání palladiového katalyzátoru vodíkem o tlaku 0,05 až 1 MPa. Cyklizaee takto získané sloučeniny obecného vzorce K se může provádět za kyselých podmínek (například zpracováním trifluoroctovou kyselinou, nebo plynným chlorovodíkem rozpuštěným v bezKi vodém rozpouštědle, jako je například methylenchlorid nebo dioxan), čímž se získá β-hydroxylaktonový sedmičlenný kruh, jako ve sloučenině obecného vzorce L. Sloučenina obecného vzorce L se může převádět na pyridony obecného vzorce M. například reakcí s teplou kyselinou chlorovodíkovou nebo reakcí s trimethylsilyljodidcm.

2-Halogen-3-chinolinmelhanoly obecného vzorce N se mohou získat z acetanilidů obecného vzorce P

kde R₂. R₂ a R.₍ mají význam uvedený u sloučenin obecného vzorce 1 a II. Při níže popsaném způsobu se skupiny R₂, K. a mohou popřípadě chránit o sobě známými způsoby (Greene T.,

Proteetion Groups in Organic Synthesis, 10 až 86, John Wiley & Sons, 1981).

Sloučeniny obecného vzorce N se pak mohou získat následujícími způsoby: aniliny obecného vzorce P sc N-acetykijí reakcí s acctylačním činidlem, jako je například acetanbydrid. Takto získané acetanilidy reagují při teplotě 50 až 100°C, s výhodou pří teplotě 75 °C, s reakčním činidlem, které je odborníkům známé jako Vilsmeyerovo činidlo (získané působením fosfory 1oxychloridu na N,N dimethylformamid při teplotě 0 až 10 °C) za vzniku odpovídajícího 2 ehlor-3-chinolinkarbaldchydu (například podle Meth-Cohn a kol., J. Chem, Soc., Perkin Trans, I, str. 1520, 1981; Meth-Cohn a kol., T Chem. Soc., Perkin Trans. 1. str. 2509, 1981; a Nakasimhan a kol.. J. Am. Chem. Soc, 112. str. 443 I, 1990). Chlor v poloze 2 2—chlor—3—cliinolinkarb30 aldehydů se může nahradit atomem jodu nebo bromu zahříváním produktu v inertním rozpouštědle, jako je například aeetonítril, v přítomnosti soli jodu nebo bromu (například jodidu sodného nebo tetrabutylamoniumbromidu). Pro katalýzu této konverze může být nutné přidal stopu kyseliny. například koncentrované kyseliny chlorovodíkové, 2-Halogen-3 ehinolinkarbaldehydy se snadno redukují na odpovídající 2-halogen-3-chinolinmethanoiy obecného vzorce N za podmí35 nek, které jsou odborníkům v dané oblasti známé, jako je reakce v alkoholovém rozpouštědle (například v methanolu) s borhydridem sodným při teplotě 0 až 40 °C.

Sloučeniny obecného vzorce N se také mohou získat následujícím způsobem: aniliny obecného vzorce P, definované výše. se acylují reakcí s nitrilem (jako je například chloracetonitril nebo to propionitril) v přítomnosti chloridu boritého a jiné Lewisovy kyseliny, jako je například chlorid hlinitý, chlorid titaničitý nebo diethylaluminiumchlorid. v aprotickém rozpouštědle nebo ve směsi aprotických rozpouštědel a následnou hydrolýzou (Sugasawa T. a kol., J. Am. Chem. Soc. 100, str. 4842, 1978). Takto získaný meziprodukt poté reaguje s ethyhnalonylehloridem v aprotickém rozpouštědle, jako je například aeetonitril, v přítomnosti báze. jako je například triethylamin, a následně s alkalickým alkoholem, jako je například methylát sodný v methanolu, za vzniku 2liydroxy 3 chinolinkarboxylátu substituovaného v poloze 4. Získaný 2-hydroxy-3-chinolinkarboxylát se převádí na 2 chlor 3-chinolinkarboxylát zpracováním fosfory loxychloridcm.

- 11 C7. 299794 Bó

Jestliže poloha 4 chinolínu nese chlormethylovou skupinu, může sc provádět nukleofilni substituce reakcí se sekundárním aminem, jako je například dimethvlamín, N-methylpiperazin, morfolin nebo piperidin, Ethy 1--2--chlor-3--chinolinkarboxylát se pak redukuje diizobutylaluminiumhydridem v aprotickém rozpouštědle, jako je například methylenchlorid, za vzniku 2 chlor- 35 chinolinmethanolu obecného vzorce N. Analogy meziproduktové sloučeniny (N) jsou popsány v literatuře, zejména v PCT přihlášce číslo 95/05427.

Některé sloučeniny podle vynálezu sc mohou připravovat ve formě farmaceuticky vhodných solí, a to o sobě známými způsoby. Jakožto vhodné soli se příkladně, bez záměru na jakékoli omezení, io uvádějí soli s anorganickými kyselinami, jako jsou hydrochlorid. sulfát, fosfát, difosfát, hydrobromid a nitrát, nebo s organickými kyselinami, jako jsou acetát, ínaleát, fumarát, tartarát, sukcinát, citrát, laktát, methansulfonát, p toluensulfonát, pamoát, salicylát, oxalát a stearát. Vynález se také týká použitelných solí s bázemi, jako jsou hydroxid sodný nebo draselný. Další farmaceuticky vhodné soli jsou známé z literatury (například „Pharmaceutical Salts J. Pharm. Sci. 66, str. 1,

1977).

Sloučeniny podle vynálezu mají užitečné farmakologieké vlastnosti. Sloučeniny podle vynálezu mají inhibiční účinky na topoizornerázu 1 a/nebo 11 a antinádorové účinky. Ze stavu techniky je známo, žc sloučeniny podle vynálezu mají anliparazitickc a/nebo antivirové účinky. Sloučeniny zo podle vynálezu mají tedy různé terapeutické využití. Experimentální část objasňuje farmakologické vlastnosti sloučenin podle vynálezu.

Sloučeniny podle vynálezu mohou u pacienta, například u savce, včetně člověka, například inhibovat topoizornerázu typu I a/nebo II, a to podáváním terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce 1 nebo II danému pacientovi.

Sloučeniny podle vynálezu mají antinádorové účinky. Může se jich proto používat pro léčení nádorů, například nádorů exprimujících topoizornerázu, a to podáváním terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I nebo II. Příklady nádorů nebo rakoviny zahrnují rakovino nu jícnu, žaludku, střev, konečníku, ústní dutiny, hltanu, hrtanu, plic, tlustého střeva, prsu, děložního hrdla, děložní sliznice. vaječníku, prostaty, varlat, močového měchýře, ledvin, jater, pankreatu. kostí, pojivových tkání, kůže, očí, mozku a centrálního nervového systému, jakož také rakovinu štítné žlázy, leukémii. Ilodginovu nemoc, lymfoni a příbuzná onemocnění Hodginovy nemoci a mnohotný myelom.

Sloučeniny podle vynálezu se mohou používat pro léčbu parazitiekých infekcí prostřednictvím inhibice krevních bičíkoveů (například trypanosomiázové nebo leishmaniózové infekce) nebo prostřednictvím inhibice plasmodia (například při malárii), může se jich však také používat pro léčbu virových infekcí a nemocí.

Pro tyto své vlastnosti jsou sloučeniny obecného vzorce I a II vhodné pro farmakologické účely.

Vynález se proto také týká sloučenin obecného vzorce I a II a jejich farmaceuticky vhodných adičních solí s minerálními nebo s organickými kyselinami, jakož také farmaceutických prostředků, které obsahují jako účinnou látku alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I nebo II.

Vynález se proto také týká farmaceutických prostředků obsahujících sloučeninu obecného vzorce I a II nebo její adiční sůl s farmaceuticky vhodnou kyselinou a farmaceuticky vhodný nosič volený podle způsobu podání (jako je například podání perorální. Íntravenózní, intraperitoneální, intramuskulámí, transdermální nebo subkutánní). Farmaceutický prostředek (například terapcu50 lický prostředek) může mít formu pevnou, kapalnou, formu liposomu nebo může mít formu Iipidických micek

Farmaceutické prostředky mohou mít pevnou formu, jako jsou například prášky, pilulky, granule, tablety, liposomy, želatinové kapsle nebo čípky. Pilulky, tablety nebo želatinové kapsle sc mohou potahovat povlaky, které jsou schopny chránit sloučeninu před působením žaludeční kyseliny s

nebo enzymů v žaludku po dostatečně dlouhou dobu. aby prostředek prošel v nestrávené formě do tenkého střeva. Sloučenina se také může podávat lokálně, například do místa nádoru, Sloučenina se také může podávat ve formě s trvalým uvolňováním (například prostředek s trvalým uvolňováním nebo infuzní pumpa). Pro výrobu farmaceutických prostředků se může používat vhod5 nýeh nosičů, jako jsou například fosforečnan vápenatý, stearan horečnatý, mastek, sacharidy, laktóza. dextrin, škrob, želatina, celulóza, methylcehilóza. natriumkarboxymethylcefulóza, polyvinylpyrrolidin nebo vosk. Farmaceutické prostředky obsahující sloučeniny podle vynálezu mohou mít také kapalnou formu, jako jsou například roztoky , emulze, suspenze nebo prostředky s trvalým uvolňováním. Jakožto vhodné kapalné nosiče se příkladně uvádějí voda, organická roz10 pouštědla. jako jsou například glyeerol nebo glykoly. například polyethylenglykol. a jejich směsi v různých podílech ve vodě.

Vynález se také týká použití sloučenin obecného vzorce I nebo 11. charakterizovaných shora, pro přípravu léčiv k inhibici to po i zorné rázy' a zvláště topoizomerázy typu I nebo typu II, léčiv urče15 nýeh pro léčení nádorů, parazitických infekcí a virových onemocnění.

Dávky sloučenin podle vynálezu pro léčbu zmíněných nemocí a poruch se řídí způsobem podávání, věkem, hmotnostní a stavem ošetřovaných jedinců a stanovuje je vždy lékař. Takové množství se označuje jako „množství terapeuticky účinné“.

Pokud není uvedeno jinak, používají se všechny výrazy ve svém obvyklém významu.

Následující příklady praktického provedení vynález blíže objasňují, nijak jej však neomezují.

Příklady provedení vynálezu

Příprava I 50

5-Ethyl-4,5 -dihydro-5-hydroxy-IH oxepino-|3',4^ř:6.7]--indolizino—[ 1.2-b]ehinolin-3,15(411.131 [)dion

I .a.

4-Etliy 1—3,4—dihydroxy— 1E! pyrano-[3^F,4':6.7]indolizino-[ 1,2-bJchinolin-l4(4HJ2H)on

Borhydrid sodný (14 g, 370 mmol) se přidá po částech do suspenze (S)-(+)kamptotheeinLi (14 g, 40 mmol, připravitelného z obchodně dostupných produktů, například společnosti Aldrich io Chemical Co., (Milwaukee, Wl) v methanolu (750 ml) a získaná reakční směs se opatrně zahřeje na teplotu 55 °C za získání čirého roztoku, který se míchá po dobu 16 hodin při teplotě místnosti.

Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku, zbytek se vyjme do vody (250 ml), neutralizuje se přidáním kyseliny octové (21 ml) a nechá sc v klidu po dobu dvou hodin při teplotě 4 °C, Získaná suspenze se zfiltruje, promyje se postupně studenou vodou, acetonem a diethyletherem, čímž se získá žádaný produkt po vysušení za sníženého tlaku v podobě bílé pevné látky o teplotě tání 280 °C.

Eb.

8-Fomiyloxymethyl-7-propionyliiidolizino-| 1,2-bjehinolin- 9( 11 H)on

Roztok metajodistanu sodného (14 g, 65 mmol) ve vodě (140 ml) se přidá po kapkách do suspenze 4-ethyl-3,4-dihydroxy-l H-pyrano-[3'.4';ó.7]indolizino-[ l,2-b]ehinolin-14(4H,l2H)onu (13.4 g. 38 mmol) v ledové kyselině octové (720 ml) a získaný roztok se míchá po dobu jedné hodiny při teplotě místnosti. Reakční směs se vlije do směsi ledu a vody (650 ml) a získaná sus- 15 CZ 299794 B6 penze se míchá po dobu půl hodiny, /filtruje se a promyje se postupně vodou, izopropy{alkoholem a diethyletherem, čímž se získá žádaný produkt po vysušení za sníženého tlaku v podobě světle žluté pevné látky o teplotě tání vyšší než 200 °C (d).

l.C.

tere- BufyI—β-ethy 1—β- hydro\\ÍH8h\dro\yrnethy!--9-o\o( 11H) indoli/ino- [ 1,2-b]chinoI in-Ί-yl)propionát ío Suspenze zinku (6,5 g, 100 mmol) míchaná magnetickým rníchadlem v bezvodém diethyletheru (50 ml) v prostředí argonu se aktivuje přidáním po kapkách chlortrimethylsilanu (0,75 ml. 5,7 mmol). V míchání se pokračuje po dobu 15 minut při teplotě místnosti, načež se reakční směs zahřeje na teplotu zpětného toku. Zahřívací lázeň se odstraní a terc.-butylbromacetát (15 ml. 100 mmol) se přidá po kapkách rychlostí, která zajistí udržení teploty zpětného toku. Vrátí se externí zahřívání a v zahřívání se pokračuje po dobu jedné hodiny. Získaný etherový roztok činidla Reforntalsky se nechá ochladit na teplotu okolí a převede sc kanylou do suspenze 8-formyloxymethyl· 7-propionylindolizino-[ 1,2-bjchinolin—9( 1 IH)onu (1.6 g, 4,7 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (40 ml) v prostředí argonu. Reakční směs se míchá pod zpětným chladičem po dobu jedné hodiny, nechá se ochladit na teplotu místnosti a reakce se ukončí přidáním nasyceného roztoku chloridu amonného (100 ml) a extrahuje se chloroformem (3 x 100 ml). Spojené chloroformové extrakty se vysuší síranem sodným, odpaří se a zbytek se čistí chromatografií na silikagelovém sloupci za použití jako elučního činidla systému I až 2 % methanol/tnethylenchlorid, čímž se získá 0.64 g žádaného produktu (31 % teorie) v podobě světle žluté pevné látky o teplotě tání 146 až 149 °C.

NMR-1H (CDCb): 0,93 (t, 3H): 1,37 (s, 9H); 1,99 (m, 211); 2,97 (dd, 2H); 3,5 (se, IH); 5.10 (s.2H): 5.24 (s. 2H); 7,40 (s, 1H); 7,59 (t. IH); 7,83 (l, IH): 7,90 (d, IH); 8.20 (d. III); 8.34 (s, IH).

NMR-C13 (CDCb,): 8,18; 27,90; 34,59; 45,34; 49,91; 58,55; 77.39; 82,42; 100.52; 127,67; 127,97; 128,10; 128,64; 129,44; 129,79: 130.42; 130,99; 142,86; 148,69; 152.75; 155,16; 162,38; 172,24.

I.d.

3?

5-Ethyl 4.5-díhydro-5 hydroxy-1 H-oxepino-j3'.4'.6,71indolizmo-| 1.2—bjchinolin 3,15(41l,13H)dion terc-Butyl -β-elhyl-β-hydroxy-β-(8-hydroxymethyl-9-oxo-J 11H) -indolizino-f 1,2-bjchino4d lin 7-yl)propionát (1,45 g. 3,32 mmol) se rozpustí v bezvodém methylenchloridu (25 ml) a zpracuje se nasyceným roztokem chlorovodíku v methylenchloridu (100 ml). Získaná reakční směs se udržuje na teplotě -20 °C po dobu 16 hodin. Sraženina se odfiltruje, promyje se methanolem a vysuší se za sníženého tlaku, čímž se získá 662 mg žádaného produktu (55 % teorie) v podobě žluté pevné látky o teplotě tání vyšší než 300 °C.

NMR-1H (DMSO): 0,90 (t, 3H): 1,20 (q, 2H); 3,27 (dd, 2H); 5.29 (s, 211); 5,49 (dd, 211); 7,42 (s, IH): 7,73 (t, 1H); 7,90 (t, 1H); 8,16 (t, 2H); 8,71 (s. IH).

NMR-CI3 (DMSO); 8,45; 36,48; 42.54; 50,68; 61.44; 73,34; 99,78: 122,71: 127,83; 128,15;

128,75; 129,08; 130,07; 130,61: 131,81; 144,66; 148,04; 152.80; 155,91; 159,26; 172,08.

IR (KBr): 761. 1127; 1204; 1285; 1580; 1653, 1757.

- 14C7. 299794 B6

Příprava 2

Štěpení 5-EthyM,5-dihydro-5-hydroxy-l H-oxepino· [3\4':ó,7]—indolizino—[ I „2—b]chinolin—

3,15-(411.13H)dionu

Směs β—ethyI—β hydroxy-(8-hydroxymethy 1 indolizinof 1,2-bJchinolin-9 -(111 l-on-7-yl)propiononové kyseliny (19,5 g. 51 mmol) a L (-)-a-methylbenzylaminu (12,12 g, 100 mmol) v absolutním ethanolu (I litr) se zahřeje k varu, za tepla se zfiltruje a ponechá se v klidu po dobu io 68 hodin. Sraženina se odfiltruje a promyje se ethanolem a etherem, čímž se získá 9,8 g bílé pevné látky. Analýza vysokotlakou kapalinovou chromatografií na chirální stacionární fázi („Chiral HPLC na sloupci Chiral-AGP společnosti Chromtech, Stockholm Švédsko, 100x4 mm, eluční činidlo 2 % acetonitrilu v 10 niM fosfátového pufru za hodnoty pH 6,9, eluční píky v 4,5. a 7.5. minutě) vykazuje dva píky integrující 24 % a 76 % celkové plochy dvou píků. Pevná látka i? se vyjme do 93% ethanolu (350 ml) za teploty zpětného toku a nechá se v klidu 48 hodin. Sraženina se odfiltruje, promyje se ethanolem a etherem, čímž se získá 4,8 g bílé pevné látky, produkující dva píky integrující 9% a 91 % celkové plochy dvou píku za použití chirální HPLC. Pevná látka se vyjme do 50% ethanolu (48 ml) za teploty zpětného toku a ponechá se v klidu po dobu hodin. Sraženina se odfiltruje, promyje se ethanolem a etherem, čímž se získá 2,7 g bílé pevné látky produkující dva píky integrující 3 % a 97 % celkové plochy dvou píků za použití chirální HPLC. Pevná látka se vyjme do 50% ethanolu (22 ml) za teploty zpětného toku a ponechá se v klidu po dobu 48 hodin. Sraženina sc odfiltruje, promyje se ethanolem a etherem, čímž se získá 1,6 g bílé pevné látky produkující dva píky integrující 1 % a 99 % celkové plochy dvou píků za použití chirální HPLC. Výsledná sůl, diastereometrieky obohacená, se vyjme do destilované vody (20 ml) a zpracovává se kyselinou octovou (0,35 ml, 6,4 mmol) po dobu 15 minut. Získaná sraženina se odfiltruje, promyje se vodou, acetonem a etherem, vysuší se ve vakuu při teplotě 80 °C, čímž se získá 1,1 g bílé pevné látky. Tato látka se vyjme do absolutního ethanolu (55 ml), přidá se koncentrovaná kyselina chlorovodíková (11,5N, 11 ml) za získání žlutého roztoku, který se udržuje za míchání pří teplotě okolí po dobu 68 hodin. Takto získaná sraženina se odfiltruje, promyje se vodou, ethanolem a etherem, vysuší se ve vakuu při teplotě 80 °C. čímž se získá 770 mg 5-ethyM.5-dihydro-5-hydroxy-1 H-oxepino-13',4;6,7]indolizino-f 1,2 bjchinolin-3.15 (411,13H)dionu, který je cnantiomemě obohacený . Analýza chirální HPLC (sloupec Chiral-AGP. eluční činidlo 2 až 5% gradient acetonitrilu v 10 mM fosfátového pufru za hodnoty pH 6,9, eluční píky v 15. a 20. minutě) vykazuje enantiomerní nadbytek 98 %. Shora popsaný způsob se ještě jednou opakuje za náhrady (LH-ý-a-methylbenzylaminu D-(+)-a-methyIbenzylamineni. Tímto způsobem se získá další enantiomer 5-ethyM.5-dihydro 5-hydroxy-IH oxepino13'.4' .6.7]-indolizino- [ 1,2-b]chinolin-3,l 5-(411,13 H)- dionu.

Příprava 3

5,12-DiethyM.5-dihydro-5- hydroxy-1 H-oxepint>-[3',426,7J-indolizino-[ 1,2-b]chinolin

3.15-(4HJ3H)dion l ato sloučenina se připravuje podobným způsobem jako podle přípravy I.a.. používá se však 7 ethylkamptothecinu (Sawada a kol., Chem. Pharm. Bull. 39, str. 2574, 1991) místo kamptothecinu. Žádaná sloučenina se získá v podobě živé žluté pevné látky o teplotě tání vyšší než 270 °C.

NMR- IH (DMSO): 0,92 (t, 311): 1,39 (t, 311); 1,93 (q. 211); 3.08 (d, 211); 3,25 (q. 211); 3,51 (d, 214); 5,32 (s. 211); 5,52 (dd. 2H); 7.42 (s, 111); 7,76 (l, IH); 7,89 (t, IH); 8,18 (d, IH); 8,32 (d, IH).

- 15 CZ 299794 B6

NMR-C13 (DMSO): 8.46; 14.15; 22,42; 36.50; 42,54; 49,95; 61,45; 73.35; 99.68; 122.61; 124,27; 126,76; 127.70; 128,27; 129.92; 130,18; 145,17; 145,82; 148.57; 152,15; 155,89; 159,26; 172,08.

Příprava 4

5-Elhy 1-9,10—di fluor 4.5 dihydro 5-hydroxy-1H- oxepino-[3^f.4':6,7]-indo]izino- [ 1,2-bJchinohn-3,15 (4H,l3I!)dion ' io

4.a.

2—Ethyl 2-(2-mcthoxyM-pyridyl> 1,3-dioxolan i? Voda se oddestilovává azeotrop ie kým způsobem (přes noc) za použití Dean Stárkovy aparatury ze směsi 2—chlor—4—propiony Ipyridínu (10 g, 59 mmol). získaného způsobem, který popsal Lamattina J. L. (J. Heterocyclic Chem. 20, str. 553. 1983), ethylenglykolu (20 ml) a p-loluensulionové kyseliny (250 mg) v toluenu (150 ml). Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku, kyselina se neutralizuje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (100 ml)

2o a produkt se extrahuje etherem. Spojené etherové extrakty se promyjí solankou, vysuší se síranem sodným a odpaří se, čímž se získá 13.3 g (96 % teorie) surového produktu, chráněného karbonylovou skupinou, který se zahříváním udržuje na teplotu zpětného toku se 3 ekvivalenty methoxidu sodného v acetonitrilu až do ukončení reakce (hodnoceno chromatografíí v tenké vrstvě na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému terc-bu ty Irnethy loxíd/hexan (TBMO/HX) 50:50): Acetonitrilový roztok se zfiltruje a odpaří. Zbytek se vyjme do etheru, promyje se vodou a solankou, vysuší se síranem sodným a odpaří se, čímž se získá hnědý olej. který' se destiluje (70 až 75 °C. 4 Pa). Získá se 10.7 g (celkový výtěžek jc 81 % teorie) produktu (F) v podobě čirého oleje.

si) 4.b.

2-Ethyl-2-(3-hydroxymethyl· 2-methoxy-4 -pyridyl)-! .3 -dioxolan terč—Butyllilhium (1,7M v pentanu, 100 ml, 170 mmol) se přidá po kapkách za použití kanyly do roztoku brommesitylenu (13 ml. 85 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (300 ml) při teplotě -78 °C v prostředí argonu. Získaná bílá sraženina se míchá při teplotě -78 °C po dobu jedné hodiny, přidá se 2 etby 1-2-(2-methoxy-4-pyridyl)-l.3-dioxolan (10 g, 44,8 mmol) a reakční směs se míchá po dobu 15 minut při teplotě -78 °C, po dobu jedné hodiny při teplotě 0 °C a po dobu jedné hodiny při teplotě okolí. Po opětném ochlazení na teplotu 78 °C sc přidá bezvodý

N.N-dimethylformamid (100 ml) a reakční směs se nechá ohřát na teplotu okolí a míchá se po dobu 16 hodin, načež podle chromatografíe v tenké vrstvě na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému terc-buty Irnethy loxíd/hexan (TBMO/HX) 50:50) se zjišťuje dokonalé spotřebování výchozí látky. Reakce se ukončí přidáním nasyceného roztoku chloridu amonného a reakční směs se extrahuje diethyletherem (200 ml, 50 ml, 50 ml). Spojené extrakty se vysuší síranem sodným a odpaří se, čímž se získá žlutý olej, který' se čistí sloupcovou chromatografíí na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému terc-butylmethyloxid/hexan (TBMO/HX) 0:100 až 5:95 kcluei mesitylenových derivátů pak 20:80 až 50:50 keluování produktu, čímž se získá jako meziprodukt aldehyd (7 g). Aldehyd se rozpustí v methanolu (100 ml) a zpracuje se borhydridem sodným (5 g. 132 mmol) a získaná směs se míchá až do úplného spotřebování aldehydu jakožto meziproduktu (přibližně jednu hodinu), přičemž sc postup reakce sleduje chromatografíí v tenké vrstvě. Rozpouštědlo se odpaří, zbytek se vyjme do etheru, promyje se vodou a solankou, vysuší se a rozpouštědlo se odpaří. Sloupcovou chromatografíí zbytku na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému terč butylmethyloxid/hexan (TBMO/HX) 10:90 až 50:50 se získá 7 g (celkový výtěžek 62 % teorie) produktu (G) v podobě žlutého oleje.

- 16CZ 299794 B6

4.c.

-(3--Benzyloxymethyl--2--methoxy-4--pyridyl)-2--ethyI--1,3·-dioxolan

Roztok 2 ethyl 2 (3 -h>dro.\ymeth\l-2 t)iclho\y 4 pyrid} 1)-1,3 dioxolatui (7 g, 30 mmol) a benzylchloridů (5 ml, 45 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (50 ml) se přidá po kapkách do suspenze hydridu sodného (80% v minerálním oleji, 1,85 g, 61 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (100 ml) a reakční směs sc udržuje zahříváním na teplotě zpětného toku po dobu 16 hodin, ld Reakční směs se nechá vychladnout na teplotu okolí, reakce se ukončí přidáním vody (50 ml) a reakční směs se zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí v diethyletheru (150 ml) a promyje se vodou a solankou, vysuší se a odpaří se. Produkt se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému terč-butylmethyloxid/hexan (TBMO/HX) 5:95 až 20:80 za získání produktu chráněného benzylovou skupinou (H), 9 g (87 % teorie) v podobě čirého oleje.

4.d.

1- (3 Benzyloxy methy l-2-methoxyM-pyridyl)propan-1-on

2- (3-Benzyloxyniethyl-2-melhoxy-4-pyridyl)-2-ethyl-l,3· dioxolan (9 g, 27 mmol) se zpracovává kyselinou trifluoroctovou (10 ml) a vodou (5 ml) na lázni o teplotě 120 °C po dobu tří hodin. Reakční směs se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytky kyseliny se neutralizují přidáním nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, Reakční směs se extrahuje ethe25 rem a produkt se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému terč-butylmethyloxid/hexan (TBMO/HX) 10:90 za získání 5,5 g (70% teorie) produktu (I).

4,e.

terč-Butyl-β-ethyl-β-hydroxy p-(3-benzyloxymethyl-2-methoxy-4-pyridyl)propionát terc-Butylbromaeetát (13 ml. 80 mmol) se přidá po kapkách do suspenze zinku (5,3 g, 80 mmol, aktivováno 6N kyselinou chlorovodíkovou v průběhu 10 sekund, pak promyto postupně vodou do neutrální reakce, acetonem a diethyletherem) v bezvodém tetrahydrofuranu (60 ml) za teploty zpětného toku. Reakční směs se udržuje na teplotě zpětného toku po dobu dalších 10 minut po ukončeném přidávání. Přidá se roztok 1 ·-(3-benzyloxymethyl-2-methoxy-4-pyridyl)propan-1onu (5,8 g, 20 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (20 ml) a reakční směs se míchá za teploty zpětného toku po dobu další jedné hodiny. Reakce se ukončí při teplotě 0 °C přidáním nasycenéw ho roztoku chloridu amonného (100 ml) a reakční směs se extrahuje diethyletherem. Spojené extrakty se vysuší síranem sodným a odpaří se, čímž se získá žlutý olej, který se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému terc-butyImethy 1oxid/hexan (TBMO/HX) 5:95 až 10:90 za získání tere-butylestcru (J) (7 g, 95 % teorie) v podobě čirého oleje.

4.f.

terč Butyl—β-cthyl--β—hydroxy—β -(3-hydroxymethyI-2-methoxy-4-pyridyl)propionát terč—Buty 1—p—ethyl—β •hydroxy-[i-(3 benzyloxyrnethyl-2-methoxy—4—pyrídyDpropionát (1 g.

2,5 mmol) se podrobí hydrogenolýze za tlaku okolí a při teplotě okolí za použití 5% palladia na uhlí jako katalyzátoru (50 mg) a absolutního ethanolu jako rozpouštědla (10 ml). Jakmile je reakce ukončena (šest hodin) katalyzátor se oddělí filtrací a rozpouštědlo se odpaří, čímž se získá 0.7 g (90 % teorie) produktu (K) dostatečně čistého pro následující syntézu.

- 17CZ 299794 B6

4- g.

5- Ethyl-1.5-dihydro-5 hydroxy-9-inethoxyoxepino-|3.4-c]pyridin-3(4H)-on terč Butyl—p—ethyl—β-hydroxy-p-(3-hydroxymethyl-2-methoxy-4-pyridyl)propionát (8,8 g, mmol) se zpracovává kyselinou trifluoroctovou (30 ml) po dobu tří hodin při teplotě okolí. Těkavé složky se odpaří a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému methyienchlorid/inethanol 100:0 až 98:2 za získáni čirého oleje, který po zpracování toluenem poskytuje 5,9 g produktu (L) (89 % teorie) v podobě bílých ío kry stalu o teplotě tání 97 až 98 °C.

4.h.

5-Ethyl-1,5 dihydro-5-hydroxy-oxepino-[3,4-c]pyridin-3.9 (4EI,8I I)-dion

5—Ethyl—1.5—dihydro—5 -hydroxy-9-methoxyoxepino-[3,4-c]pyridin-3(4H)on (0,5 g, 2,1 mmol) se zahříváním udržuje na teplotě zpětného loku po dobu 9 hodin v IN kyselině chlorovodíkové (20 ml). Reakční směs se zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se vysuší přidáním a odpařením toluenu dvakrát a nechá se přes noc za sníženého tlaku v přítomnosti oxidu fosforečného.

2o Získaný olej se rozpustí v bezvodém acetonitrilu (5 ml) a míchá se v prostředí argonu po dobu 24 hodin. Sraženina se odfiltruje a vysuší se, čímž se získá 0,23 g produktu (49 % teorie) v podobě bílé pevné látky (M) o teplotě tání 118 až 119 ^UC.

4.i.

2-Chlor-6.7-difluor-3 -chinolinrncthanol

Používá se způsobu popsaného v literatuře (Meth Cohn a kol., J. Chem. Soc. Pcrkín Trans. 1, str. 1520, 1981; Meth-Cohn a kol., J. Chem. Soc. Perkin Trans. E str. 2509, 1981). 3,4-Difluor50 acetanilid (38 g. 22 mmol) se přidá do Vilsmeyerova reakčního činidla, získaného přidáváním po kapkách fosforyloxyehloridu (103 ml, 1.1 mol) do bezvodého dimclhylfomiamidu (34 ml, 44 mmol), ochlazeného lázní vody a ledu a reakční směs se míchá po dobu půl hodiny v prostředí argonu. Reakční směs se zahříváním udržuje na teplotě 70 °C po dobu 16 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí se reakční směs přidá do směsi ledu a vody (400 ml), která se míchá po dobu dvou hodin, zfiltruje se a promyje se postupně vodou, ethanolem a etherem, čímž se získá 9 g 2-chlor6,7-difluorchinolin-3-karboxaldeliydu v podobě žluté pevné látky o teplotě tání 222 až 224 °C. Tento meziprodukt se zpracovává borhydridem sodným (2 g, 52 mmol) v methanolu (400 ml) pří teplotě okolí po dobu půl hodiny a nadbytek reakčního činidla se rozruší přidáním kyseliny octové (2 ml). Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku, zbytek se vyjme do ethylacetátu a promy4o je sc postupně zředěným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodou a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Organická fáze se vysuší síranem sodným, zfiltruje se a zkoncentruje se. Získaná pevná látka se překrystaluje z 1,2-dichlorethanu, čímž se získá 8 g 2 -ehlor-6,7difluor-3-chinolinniethanolu v podobě béžové pevné látky.

4.j.

5-Ethy 1-8-(2 -chlor-6,7-difluor-3-chinolinmethy 1)-1,5 -dÍhydro-5-hydroxyoxepino-[3,4-clpyridin-3,9-(4H,8H)dion

Diethylazodikarhoxylát (570 ml, 3,6 mmol) se přidá po kapkách v průběhu pěti minut do roztoku

5-ethyl-l,5-dihydro-5-hydroxyoxepino [3.4—c[pyridin- 3,9-{4H,8H)dionu (400 mg,

E79 mmol), získaného v předchozím stupni 4.i. (770 mg, 2,23 mmol) a trifenylfosfinu (934 mg 3,58 mmol) v bezvodém Ν,Ν-dimethylformamidu (45 ml). Reakční směs se míchá v prostředí argonu při teplotě okolí po dobu 16 hodin, zkoncentruje za sníženého tlaku a zbytek se rozpustí v etheru (100 ml). Získaný roztok se promyje solankou (4 x 50 ml), vysuší se síranem sodným

- 18CZ 299794 B6 a odpaří se. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému methylenchlorid/methanol 99:1 až 98:2 za získání 650 mg (66 % teorie) produktu (O) v podobě bílé pevné látky o teplotě tání 165 až 167 ^QC.

4.k.

5- Ethyl-9,10-difluor—4.5- dihydro-5-hydroxy-l 1 l-oxepino-[3'.4':6,7]indolizino-[l ,2-b]chinolin-3,15-(4H, 13H)dion ío 5—Ethyl—8-<2-chlor—6,7—difluor—3—chinolinmethyl)—1,5—dihydro-5 -hydroxyoxepino-[3,4-c]~ pyridin T9-(411,8H)dion (600 mg, 1,1 mmol), tctrabutylamoniumbromid (352 mg. IJ mmol). acetát sodný (359 mg. 4.4 mmol) a acetát palladnatý (98 mg. 0.43 mmol) se rozpustí v bezvodém acetonitrilu (40 ml) a zahříváním se udržuje na teplotě 90 °C v prostředí argonu po dobu 16 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí se bílá sraženina oddělí od červenavcho roztoku. Sraženina se odfiltruje za sníženého tlaku, Surový produkt se suspenduje ve vodě, zfíltruje se a suší se za sníženého tlaku oxidem fosforečným, čímž se získá 250 mg žádaného produktu v podobě béžové pevné látky o teplotě tání vyšší než 250 °C.

NMR-1II (DMSO): 0,91 (t. 3H): 1,87 (m, 2H); 3.08 (d. 111): 3,51 (d, 1H): 4,45 (s, 4H); 5.19 (s, 2H): 5,47 (dd. 211):6,02 (se, III); 7,33 (s, IH); 7,54 (s, 1H); 7,55 (s, IH); 8,43 (s, IH).

NMR-C13 (DMSO); 8,43; 36,47; 42,54; 50,52; 61,43; 64,43; (2C); 73,31; 99,07; 1 12,27; 113,14; 122,00; 124.24; 128,18; 129,74; 144,59; 145,01: 145,33; 147,63; 150,88: 155.88; 159,23; 172.07.

Příprava 5

5-Ethyl—4.5-dihydro-5,10 dihydroxy-1 H oxepino-[3',4';6.7]indolizino-(l.2-bJehinolin-3.15(4H,13H)dion

10-Benzyloxy 5-ethyM,5-dihydro-5-hydroxy-l 1 l-oxcpino [3',4^ř:6.7jindolizino-( 1,2-b]chinolin-3,15-(4H.13H)dion (370 mg, 0.79 mmol) se zpracovává vodíkem za tlaku okolí a při teplotě okolí za použití 10% palladia na uhlí jako katalyzátoru (60 mg) a trifluoroctové kyseliny jako rozpouštědla (15 ml). Jakmile je reakce ukončena (šestnáct hodin) přidá se methylenchlorid (50 ml) a methanol (50 ml) do reakční směsi, katalyzátor se oddělí filtrací a těkavé složky se odpaří za sníženého tlaku, čímž se získá surový žádaný produkt obsahující stopy trifluoroctové kyseliny. Produkt se získá v podobě oranžové pevné látky o teplotě tání vyšší než 150°C (d) dostatečně čisté pro následující syntézu.

NMR-IH (DMSO): 0,89 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,02 (d, IH); 3,45 (d, IH); 5.19 (s, 2H); 5,37 (d. 1H); 5,50 (d, IH); 5,98 (se, IH); 7.26 (s, IH); 7,31 (s, IH); 7,40 (d, IH); 8.00 (d, IH): 8,42 (s, IH); 10,32 (s, 111).

NMR-C13 (DMSO): 8,47; 36,50; 42,61; 50,57; 61,46; 73,35; 98.84; 109,02; 121.83; 123,18;

129,50; 129.85; 130,12; 130.80; 143.39; 145,10; 149,69; 155,97; 156,82; 159,30; 172,1 I.

Příprava 6

5—Ethyl- 9 íluoM,5-dihydro-5-hydroxy-10-mcthoxy-l I l-oxepino [3',4':6,71indolizino-[ 1,2b]chinolin-3,15-(41 f 13H)dion

Tato sloučenina sc připravuje ze 3-fluoM-mclhoxyanilinu způsobem podle stupně 4.i.. 4.j. a 4.k. přípravy 4. Produktem je žlutá pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C.

- 19CZ 299794 B6

NMR-1II (DMSO); 0,89 (t, 311); 1,85 (q, 2H); 3,08 (d. 1H); 3,49 (d. III); 4.00 (s, 311); 5,25 (s, 211); 5,39 (d. IH); 5,51 (d, IH); 6.00 (s. III); 7,32 (s, IH); 7,72 (d. IH); 7,91 (d, IH); 8,58 (s, IH).

NMR-CI3 (DMSO): 8,43; 36,48; 42,51; 50,68; 56.60; 61,42; 73,29; 99.25; 108,68; 113,52; 122.23; 126,33; 129.99; 130.30; 143,79; 144,70; 148.42; 151,18; 153.19; 155,81: 159,20; 172,06.

IR(KBr): 1259; 1503; 1602; 1737.

Příprava 7

9-Chlor-5-ethyM.5-dihydro-5 hydroxy— 10—melhyl— 111-oxepino f3'.4';6,7]indolizino-[1.2b]chinolin-3.l5-(4H, 13H)dion lato sloučenina se připravuje ze 3 -chlor-4-mcthoxyanilinu způsobem podle stupně 4.i,. 4.j. a 4.k. přípravy 4. Produktem je žlutá pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C.

NMR-lll (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 211); 2,55 (s. 3H); 3.07 (ó, IH); 3,45 (d. IH); 5,25 (s, 20 2!I); 5.39 (d, lil); 5,51 (d, 1H); 6,05 (s, IH); 7,39 (s. IH); 8,10 (s, 111); 8,20 (s, IH): 8,60 (s, IH).

NMR-C13 (DMSO): 8.43; 20.20; 36.47; 42,49; 50.67; 61,41; 73,28; 99.87; 122,82; 126,98; 127.99; 129.60; 130,53; 131.08; 135,64; 136.56; 144,39; 147,11; 153,10; 155,85: 159,18; 172,03.

IR(KBr): 1208; 1479; 1606; 1656; 1724.

Příprava 8

8—Ethy! 2,3.4.8.9-tetrahydro-8-hydroxy 10H,121l-[ 1.4]dioxino[2,3-g|oxepino-[3^ř,4':6,7]indolizino-[ 1,2-b]ehinolin-l0.13 (15H)dion lato sloučenina se připravuje ze 3.4-ethylendioxyanilinu způsobem podle stupně 4,i.. 4.j. a 4.k. přípravy 4. Produktem je žlutá pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C\

NMR-lll (DMSO): 0,85 (1. 3H); 1,85 (q, 2H); 3,07 (d, IH); 3.47 (d. 111); 5,25 (s, 211); 5,39 (d. IH); 5,51 (d, 11I); 6.05 (s. lil); 7,39 (s, IH); 8,15(q, IH); 8,25 (q. IH); 8,68 (s, IH).

NMR Cl3 (DMSO): 8,41; 36,45; 42,48; 50,68; 61,40; 73.25; 99.92; 114,44; 115,42; 115,58; 40 122,96; 125,52: 130,53; 131,46; 144.21; 145.25; 142,36; 153,41; 155,85; 159,15; 172,00.

IR(KBr): 1266; 1512; 1581; 1618; 1751.

Příprava 9

7—Ethyl- 7,8-dihydro-7-hydroxy-9H,l 1Η -[ 1,3]dioxolo [4,5-gloxcpino-[3',4':6,7'|indolizino(1,2-blchinolin 9,12-( 14H)dion

Tato sloučenina se připravuje ze 3,4-mcthylendÍoxyanilinu způsobem podle stupně 4.i., 4.j. a 4.k. přípravy 4. Produktem je krčmovitá pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C.

NMR IH (DMSO): 0,85 (t, 311); 1,85 (q, 2H); 3,07 (d, lil); 3,45 (d, IH); 5.20 (s. 211); 5,39 (d, 111); 5,51 (d, 111); 6,00 (s, IH); 6,30 (s, 2H); 7,30 (s. 1H); 7.49 (d, 2H); 8.45 (s. IH).

-20CZ 299794 Bó

NMR-C13 (DMSO): 8.43; 36.49; 42.56; 50,58; 61,42; 73,31; 98,87; 102,75; 103.33; 104,92; 121.76; 125,74; 128,59; 130,33; 145,08; 146,69; 148,78; 150,19; 151,49; 155.90; 159,24; 172,08.

IR(KBr): 1248; 1459; 1606; 1731.

Příprava 10

9-Chlor-5-elhyM.5-dihydro-5-hydroxy-IO-methoxy-lH oxepino—[3\4':6,7]indolizino—f 1,2i o bjehinol i n—3.15-(4 Η, 13 H )dion l ato sloučenina se připravuje ze 3-ehlor l -methoxyanÍlinu způsobem podle stupně 4.i,. 4.j. a 4.k, přípravy 4. Produktem je bílá pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C.

NMR IH (DMSO): 0,85(1. 3H); 1,85 (q, 2H); 3.07 (d, 111); 3,45 (d, 1H); 4,01 (s, 3H); 5,22 (s, 211); 5,39 (d, IH); 5,51 (d, 1H); 6,02 (s, 111); 7.31 (s, IH); 7,68 (s, 1H); 8,20(s, IH); 8,55 (s, IH).

NMR C13 (DMSO): 8.22; 36,27; 42,30; 50,48; 56,69; 61,23; 73.08; 99,16; 107,44; 122,16: 127.12; 128,12; 129.25; 130,02; 130,53; 143.29; 144,37; 151,12; 153.29; 155,71; 158,98; 171.84.

lR(KBr): 1056, 1256; 1483; 1592: 1657; 1747.

Příprava 11

5-Ethyl-4,5-dihydro-5-hydroxy-10-methoxy 1 H-oxepino-[3',4':6,7] indol izino-f 1,2-b]chinolin-3.15-(4H,13H)dion

Tato sloučenina se připravuje ze 4 methoxyanÍlinu způsobem podle stupně 4.i„ 4.j. a 4.k. přípravy 4. Produktem je žlutá pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C.

NMR-111 (DMSO): 0.85 (t, 311); 1.85 (q, 2H); 3,07 (d. IH); 3,45 (d, IH); 3,95 (s, 3H); 5.28 (s, 2H); 5,40 (d. 1H); 5.51 (d. IH); 6,00 (s, 1H); 7,38 (s, IH); 7,51 (d, 2H); 8,07 (d. 111); 8,55 (s, IH).

NMR-C13 (DMSO); 8,45; 36,48; 42.51; 50,64; 55,92; 61,42; 73.33; 99,01: 106,49; 122.02; 123,19; 129.59; 130,20; 130,43; 144.17; 144,94; 150.40; 155,92; 158,31; 159,26; 172.07.

IR(KBr): 1251; 1604; 1655; 1735.

Příprava 12

9,1 l-Diehlor-5-ethyl-4,5-dihydro-5-hydroxy -1 H-oxepino-[3',4';6,7JindoHzina [1,2-b]chinolin-3,15-(4H, 13H)dion

Tato sloučenina se připravuje ze 3,5-dichloranilinu způsobem podle stupně 4.i„ 4.j. a 4.k. přípravy 4. Produktem je žlutá pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C.

NMR IH(DMSO); 0,85 (I, 3H); 1,85 (q. 2H); 3,07 (d. IH); 3,45 (d, l H); 5.30 (s, 2H); 5,41 (d, 111); 5,55 (d. 1H); 6,08 (s. IH); 7,41 (s, III); 8,05 (s. IH); 8,21 (s, IH); 8.91 (s. lil).

NMR 03 (DMSO); 8,39; 36,45; 42,51; 51,03; 61,39; 73,25; 100,62: 123,55; 124.63; 127,60; 128,08; 128.56; 132,06; 132,19; 134,53; 143.77; 148,80; 154,88; 155,82; 159,13; 171,98.

IR(KBr): 1064; 1275; 1586; 1651; 1743.

-21 CZ 299794 Bó

Příprava 13

5-Ethyl-9-fluoM,5-dihydro-5-hydroxy-10-methyE -1 H—oxepino—[3 *.4':6,7] indol izino—[ 1,2— blchinolin- 3,l5-(4H,13lí)dion

Tato sloučenina se připravuje ze 3-fluor-4-mcthylanilinu způsobem podle stupně 4.i., 4.j, a 4.k. přípravy 4. Produktem je žlutá pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C.

io NMR lH (DMSO): 0,89 (t,3H): 1.85 (q, 2H); 2,49 (s. 3H); 3,08 (d. IH). 3,49 (d. III); 5,21 (s. 2H); 5.39 (d. 1H): 5,51 (d, IH): 6,05 (s, 1II); 7,39 (s, IH); 7.87 (d, IH); 8,05 (d, IH); 8.61 ($, IH).

NMR-C13 (DMSO): 8,40; 15.14; 36,45; 42.52; 50,60; 61.41; 73,28; 99,71; 112,00; 122,66;

125,38; 127,66; 129,59; 130,28; 144,49; 147,88: 152,88; 155,85; 159,18; 162,25; 172,02.

IR (KBr): 1054; 1580; 1651; 1760.

Příprava 14

5—Ethyl— 10—fluor 4,5-dihydro-5-hydroxy-l 1 i—oxepino—[3',4':6,7Jindolizino—[ 1,2--blchinolin— 3,15 (4H,l3H)dion

Tato sloučenina se připravuje ze 4-tluoranilinu způsobem podle stupně 4.i., 4.j. a 4,k. přípravy 4. Produktem je bílá pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C.

NMR IH (DMSO): 0,85 (C 311); 1,85 (q, 2H); 3,07 <d, III): 3,45 (d. 1H); 5.29 (s, 2H); 5.39 (d, 1H); 5,55 (d, IH); 6.30 (s, IH); 7,39 (s, III): 7,80 (q, 1H); 7.99 (q, IH); 8,23 (q, 1II): 8,68 so (s, IH).

NMR-Cl3 (DMSO): 8,40; 36.46; 42,48; 50,66: 61.41; 73,31; 99,68; 111,83; 122,75; 128,93; 130.93: 131.22; 131,93; 144.46; 145.27; 152,60; 155,89; 159,21: 172.04.

IR (KBr): 1209; 1589; 1659; 1739.

Příprava 15 ίο 10-Ch1or-5-ethyl-4,5-dihydro-5-hydroxv-l H -oxepino-[3',4':6,7]indolizino-[l ,2 bjchinolin3,15-(411.13H)dion

Tato sloučenina se připravuje zc 4-chloranilinu způsobem podle stupně 4.L. 4.j. a 4.k. přípravy 4. Produktem je žlutá pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C.

NMR-ΙΗ (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,07 (d, IH); 3,47 (d, IH); 5.25 (s, 211); 5,39 (d. lil); 5,51 (d, IH); 6.05 (s, IH); 7,39 (s, IH); 7,89 (d, IH); 8,19 (d, IH); 8.29 (s, IH); 8,67 (s, IH).

NMR-CE3 (DMSO): 8,40; 36,46; 42,47; 50,70; 61,42; 73,31; 100.00; 122.96: 127,31; 127,42; 128.87; 131,11; 132.12; 144,34; 146.53; 153,38: 155.88; 159,20; 172.04.

IR (KBr): 1069; 1483; 1606; 1741.

CZ 299794 Bó

Příprava 16

9-A?hlor-5—ethyl— IO--fluor·-4,5--dihydro-5-hydroxy lH-oxepino-[3^ř.4':6.7]indolizino [1,2—b]chinolin-3J5-(4HJ3H)dion

Tato sloučenina se připravuje z.e 4 -chlor-3-fluoranilinu způsobem podle stupně 4.i., 4.j. a 4.k. přípravy 4. Produktem jc žlutá pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C.

NMR-IH (DMSO): 0,85 (t, 311); 1.85 (q. 2H); 3,07 (d, IH); 3.45 (d, IH); 5,25 (s, 211); 5,39 ío (d, IH); 5.51 (d. 1H): 6,05 (s, 1H); 7,40 (s, 1H); 8,20 (d. 11l); 8,40 (d. 1H); 8,68 (s, 1H).

NMR-C'13 (DMSO): 8,38; 36,47; 42,58; 50.71; 61,40; 73,26; 99.99; 113,59; 123,09; 124,28; 128.74; 130,64; 131,31; 144,13; 145,08; 153.57; 154,13; 155,84; 156.61: 159.14: 172,00.

IR (KBr): 1488: 1583; 1655; 1743.

Příprava 17

2o 5.12—Diethyl—9—fluor—4.5—dihydro—5 hydroxy- 10-mcthoxy-Π1-oxepino-[3',476,7| indol izi no [ 1,2—bjcli inol in—3,15-(4H, 13H)dion

17.a.

2? 5 PluoM-mcthoxy 2-propionylanilin

Tento produkt se získá způsobem, který popsal T. Sugasawa, T. Toyada. M. Adachi a K. Sasakura, J. Am. Chem. Soc. 100, str. 4842 až 4852. 1978. Chlorid boritý (IM v heptanu, 156 ml, 156 mmol) se přidá po kapkách v prostředí argonu pří teplotě 0 °C do roztoku 3-fluor-45o methoxyanilínu (20 g, 142 mmol) v bezvodém methylenchloridu (200 ml). Získaná růžová suspenze se míchá po dobu pěti minut, přidá se propionitril (33 ml, 420 mmol) po kapkách a následně chlorid hlinitý (20,8 g, 156 mmol) po malých částech. Reakční směs sc zahřívá pod zpětným chladičem po dobu tří hodin, ochladí se na 0 °C, hydrolyzuje se opatrně přidáním 2N kyseliny chlorovodíkové (100 ml) a reakční směs se zahříváním udržuje na teplotě zpětného toku po dobu

45 minut. Po ochlazení na teplotu 0 °C se získá sraženina, která se odfiltruje, promyje se methylenchloridem a vyjme se do vody (300 ml). Vodná fáze se alkalizuje na alkalickou hodnotu pH, extrahuje se methylenchloridem a následně ethylacetátem, Organická fáze se vysuší (síranem hořečnatým) a odpaří se, čímž se získá surový produkt, který sc čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém za použití jako eluěního činidla systému ethylacctát/heptan 1:99:1 až 20:80 za získání 15,3 g žluté pevné látky.

NMR-IH (CDCh): 1,20 (t, 3H); 2,92 (q, 2H); 3,83 (s, 3H); 6,2 (s, 2H); 6,40 (d. 2H); 7,32 (d, 211).

IR (KBr): 857; 1148; 1240; 1561; 1583; 1662.

17.b.

Ethyl·—4—ethyl—7—fluor- -2-hydroxy-ó-methoxy-3-ehinolinkarboxylát

Roztok ethylmalony leh loridu (12,9 ml, 100 mmol) v bezvodém acetonitrilu (30 ml) se přidá po kapkách v prostředí argonu a při teplotě 0 °C do roztoku 5-fliior-4-rnethoxy-2-propionylanilinu (15,3 g, 77.5 mmol) a Iriethylaminu (13,9 ml. 100 mmol) v bezvodém acetonitrilu (110 mi). Reakční směs se nechá vrátit na teplotu okolí a roztok ethylátu sodného (připravitelný z 1,8 g,

78 mmol sodíku v 80 ml ethanolu) se kanylou po kapkách přidá v prostředí argonu. Reakční směs se míchá po dobu 12 hodin při teplotě okolí. Reakční směs se vlije do ledově chladné vody (100 ml) a míchá se po dobu dvou hodin, sraženina se odfiltruje a promyje se vodou, ethanolem a etherem. Získá se 19.4 g bílé pevné látky.

NMR-II1 (DMSO): 1.25 (m, 611); 2.78 (q, 2H); 3,92 (s, 311); 4,30 (q, 2H); 7,15 (d. 211); 7,40 (d, 2H); 11.93 (s, lil).

IR (KBr): 1083; 1410; 1521; 1644; 1725.

io I7.c.

Ethyl-2 -ehlor-4 ethyl-7-fluor-6-methoxy-3-chinoIinkarboxylát

Suspenze ethyM-ethyl-7-fluor-2-hydroxy-6-nicthoxy -3-chinoIinkarboxylátu (19,4 g,

0,066 mol) ve fosforylchloridu (243 ml) se zahříváním udržuje na teplotě zpětného toku po dobu šesti hodin. Fosforylehlorid se oddestiluje, Reakční směs se dekantujc do ledově chladné vody a vyjme se do methylenchloridu k rozpuštění. Organická fáze se promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organická fáze se vysuší síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se suspenduje v etheru a nepřevedená výchozí látka (4 g) se odfiltruje. Filtrát se odpaří a zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému ethylacetát/heptan 5:95 až 20:80 za získání 10,9 g bílé pevné látky.

NMR-1H (DMSO): 1.30 (t, 3H); 1,39 (t. 3H); 3,08 (q, 2H); 4,09 (s, 311); 4,49 (q, 2H); 7.64 (d,2H); 7,86 (d, 2H),

IR (KBr): 865; 1016; 1082; 1190; 1224; 1253; 1272; 1508; 1571; 1732.

17.d.

?o 2—Chlor—4—ethyl—7- fluor-6-methoxy-3 -ehinolinmethanol

Roztok ethy 1-2-ehloíM-ethy l-7-f1uor-6 methoxy-3-ehinolinkarboxylátu (10,8 g. 35 mmol) v bezvodém methylenchloridu (200 ml) se zpracuje po kapkách při teplotě okolí v inertním prostředí diizobutylaluminiunihydridem (IM v methylenchloridu 65 ml, 65 mmol) a zahříváním se udržuje na teplotě 40 °C po dobu čtyř hodin. Po ochlazení na teplotu 0 °C se 20% vodný roztok Roehellovy soli (105 ml) a methylenchloridu (200 ml) opatrně přidá a reakční směs se míchá po dobu jedné hodiny, dekantuje se a promyje se třikrát vodou. Organická fáze se vysuší síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se čistí sloupcovou chromatografií na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému ethylacetál/heptan 5:95 až 50:50 za získání 6 g bílé pevné látky.

NMR-1H (DMSO): 1,28 (t, 3H); 3,25 (q, 2H); 4,04 (s, 3H); 4,77 (d, 211); 5,27 (t, IH); 7,55 (d,2H); 7,73 (d,2H).

IR (KBr); 840; 864; 1023; 1232; 1267; 1317; 1444; 1511; 1569.

17.c.

5.12-D i ethyl- 9 fluor-M,5-dihydro-5-hydroxy-10-methoxy •lH-oxepino[3^/,4':6,7Jindolizino5(i | l,2-bjchinolin-3.15 (4H.13H)dion

2-Chlor-4-ethyl-7-fkior-6-metho\y-3-chinol(nmcthanol se kopuluje se sloučeninou (M) podle stupně 4.j. přípravy 4. Získaný kopu lační produkt se cyklizuje způsobem podle stupně 4.k. Získá se žlutá pevná látka o teplotě tání vyšší než 275 °C.

'ŠS

-24Q7. 299794 B6

NMR-11-1 (CF3C00D): 1,07 (m, 311); 1,62 (ni, 311); 2.27 (m, 211); 3,44 (d, 111); 3,54 (rn, 2H); 3,91 (d, IH); 4,25 (s. 3H); 5,60 (d, IH); 5,74 (s. 2H); 5,98 (d, IH); 7,85 (m, IH); 8,16 (m, IH); 8.31 (s, IH),

NMR-C13 (CF3COOD); 9.03; 14.20; 26,68; 38,77; 43,98; 53,79; 58.27; 64,73; 77,93; 106,85; 109,24; 1 10,15; 128,99; 129,20; 131,61; 137,32; 141,23; 144,13; 154,79; 158,32; 160,25; 160,81; 179,30,

IR(KBr): 1013; 1068; 1265; 1466: 1514; 1601; 1655; 1748.

Příprava 18

5—Ethyl—4,5—dihydro—5—hydroxy— 12—methyl— l H-oxepino[3',4':6,7|indolizíno-[ l .2—bjchinolin—

3,15 (4H.13H)dion

Způsobem podle přípravy 17,b„ 17,c. a 17,d. se za použití 2-accty lanilinu získá 2-chloMinelhyl 3-ehinolinmethanol. 2-Chlor-4-methyl-3-chinolinmethanol se kopuluje se sloučeninou (M) podle stupně 4.j. přípravy 4. Získaný kopu lační produkt se eyklizuje způsobem podle stupně

2o 4.k. Získá se žlutá pevná látka o teplotě tání vyšší než 260 °C.

NMR IH (DMSO): 0.87 (t. 3H); 1,87 (q, 2H); 2.78 (s, 3H); 2.80 (d. IH); 3,55 (d. IH); 5,27 (s. 211); 5.42 (d. IH); 5,52 (d. IH); 6,04 (s, IH); 7,39 (s, IH); 7,75 (t, IH), 7,88 (t, IH); 8,13 (d, IH); 8,25 (d. IH).

NMR-C13 (DMSO): 8,23; 36,26; 42,36; 62,00; 73,11; 78,65; 79,13; 79,25; 99,52; 122,36; 12430; 127,67; 129,54; 129,55; 129.56; 140,11; 145,06; 148,07; 152,00; 155,79; 159,09; 171.89.

IR(KBr): 1649; 1751:3404,

Příprava 19 lO-Benzyloxy-5-ethyl 9 fluor 4.5-dihydro-5-liydroxy-l 11 o\epino|3'.4':6.7|indolizino—[ 1,255 bjchinolin—3 J 54411,13ll)dion

Způsobem podle stupně 4.i. se nechává reagovat 3-11 uor 4 melhoxyaeetanilid za získání 2chlor-7-fluor-6-niethoxychinolin-3-karbaldehydu, který se zpracovává nadbytkem bromidu boritého v methylenchloridu při teplotě okolí po dobu 24 hodin. Získá se 2-chlor-7-fluor-640 hydroxychinolin-3-karbaldehyd, který se O-benzylujc v dimethylformamidu v přítomnosti bcnzylbromidu a uhličitanu draselného za získání 6-benzyloxy-2-chlor-7-fluorchinolin-3-karbaldehydu. který se redukuje borhydridem sodným v methanolu, přičemž se získá odpovídající ehinolinmethanol. Chinolinmethanol se kopuluje se sloučeninou (M) podle stupně 4,j. přípravy 4. Získaný kopu lační produkt se eyklizuje způsobem podle stupně 4,k. Získá se žlutá pevná látka o teplotě tání vyšší než 275 °C.

NMR-111 (DMSO): 0,86 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3.05 (d. IH); 5,25 (s, 2H); 5,37 (s. 2H); 5,45 (dd, 2H); 6,05 (s, 111); 7,4 - 7,6 (m, 511); 7,88 (d. IH); 7.95 (d. IH); 8,56 (s. IH).

Příprava 20

5-Ethyl-9-fluoM,5-dihydro-5,10-dihydroxy-l H-oxepino[3',4':6,7]indolizino-[ 1,2-bJ5 chinolin—3,15—(4H, 13H)dion

Benzyloxy 5-cthyI-9-tluor 4.5 dili\dro 5 hydroxv I El- oxepino[3'.4':6,7Jindolizino-[ 1,2b]chino1in—3.15-(4H, 13H)dion podle přípravy 19 (0,79 mmol) se rozpustí ve trifluoroctové kyselině (15 ml) a zpracuje se vodíkem za použití 10% palladia na uhlí (60 mg). Získá sc žlutá io pevná látka o teplotě tání vyšší než 275 °C.

NMR-111 (DMSO); 0,86 (t, 3H); 1,85 (q, 2H); 3,05 (d. IH); 5.25 (s. 2H); 5,37 (s. 2H); 5,45 (dd,2H); 6,05 (s, IH); 7,8 (d. IIi); 7,90 (d, IH); 8,56 (s, IH).

i? Uvedené přípravy jsou základem pro objasnění vynálezu pomocí následujících příkladů.

Příklad I

5-Ethyl-9,10-difiuor-4₁5-dihydro-5-(2-amino 1 H-oxoethoxy)-H Iuaxepinof3', 426,7]indolizino [ 1,2-b]ehinolin-3.15-(411,13H)dion

a.

5 -Ethyl—9.10-difluor-M.5-dihydro-5-(2-(tercbulyloxykarbonylamino)-l-oxoethoxy)-lHoxepino[3'.4';6,7]indolizino-[ 1,2-b]chínolin-3,15-(4H, 13H)dionhydrochlorid

Směs 5—ethyl—9.10-dif1uor-M,5-dihydro-5-hydroxy-l H-oxepino-[3',4':6,7]indolÍ7Íno-[ 1,2-b]chinolin-3,15- (4H.13H)dionu (200 mg, 0,526 mmol, připraveného způsobem podle přípravy 4),

N-Boc-glycinu (185 mg, 0,526 mmol)) a katalytického množství 4-dimethylaminopyridinu (20 mg) v bezvodém pyridinu (10 ml) se zpracovává při teplotě 0 °C a v prostředí argonu dicyklohexylkarbodiimidem (239 mg, 1,16 mmol) a míchá se při teplotě okolí po dobu 48 hodin. Těkavé podíly se odeženou ve vakuu a zbytek sc čistí chromatografií na oxidu křemičitém za použití jako elučního činidla systému 1 % methanolu v chloroformu za získání žádaného meziss produktu (40 mg, 14 % teorie) v podobě žluté pevné látky.

NMR-1H (CDCf); 1,20 (t, 3H); 1,38 (s, 9H); 1,40 - 1.70 (m. 2H); 3,10 (d, 1H); 4,00 (d. 2H);

4.30 (d, 1H); 5,00 (t. 1H); 5.20 (s, 211); 5,30 - 5.90 (dd, 2H); 7.20 (s. 111); 7,50 - 8.10 (rn, 2H);

8.30 (s, III).

b.

5—Ethyl—9,10-dilluor 4.5 diliydro 5 {2 annno-l-oxoetlK)\y) 1 H-oxepino[3',4':6.7jindol izino—[ 1,2-bjch inol i n-3,15-(4H, 13H)dionhydrochlorid

5—Ethyl—9,10-difluor-4.5-dihylro-5-(2-(terc-biityloxykarbony lamino}-1--oxoethoxy--! Hoxepino-[3'.4^f:6,7]indolizino-[1,2-b]ehinolin-3,15-(4H, 13H)dionliydrochlorid, získaný jako meziprodukt podle odstavce a. (40 mg, 0,072 mmol). v methylenchloridu (10 ml) se udržuje na teplotě 0 °C a po kapkách se přidá dioxan nasycený chlorovodíkem (8 ml). Vytvořená žlutá sraženina se míchá po dobu dvou hodin a těkavé podíly se odeženou za vakua. Zbytek se vyjme do vody (5 m 1) a promyje se methylenchloridem (3 x 30 ml). Vodná fáze se zmrazí a lyofilizuje se za získání žádané soli v podobě hygroskopické žluté pevné látky (20 mg. 50 % teorie).

NMR-IH (CDCb): 1,00 (t, 3H); 2,15 (m, IH); 2.30 (m, IH); 3,60 (d. IH); 3,90 (d. IH); 4,15 (s, 211); 5.10 (s, 211); 5,40 (d, 111): 5,70 (d, 2H): 7,40 (s. 1H); 7,80 (rn. 2H); 8,50 (s, 1H).

Příklad 2

5—Ethy 1—9.1 ()-<Ut1nor—4,5—di hydro 5 < 2 amino I -oxoetboxy)-1 H-oxepino[3',4':6,7]indol izino—[ 1.2-b]eh inol in-3,15—(411,13H)dion ío Způsobem podle příkladu I za použití 5—ethyl—9,10—difluor—4.5-dihydro—5—hydroxy—111—oxepino—[3\4':6.7]indolizino—[ l,2-b]ehinolin-3,15-(4H, 13H)dionu a N-Boc-b-alaninu místo NBoe-glycinu se připraví meziprodukt, ze kterého se chránící skupina Boc odstraní zpracováním trifluoroctovou kyselinou v methylenchloridu. Těkavé podíly se odstraní ve vakuu a zbytek se vyjme do methylenchloridu. Získaný roztok se promyje zředěným roztokem hydrogenuh!iěitanu, i? vysuší se a odpaří se. Získá se žlutá pevná látka.

Způsobem podle příkladu I a 2 se mohou připravit další sloučeniny s podobnými výsledky. Takovým způsobem je připravilelná celá třída analogů kamptothecinu ve formě „prodrogy”.

Příklad 3

1,8—Diethy 1—8,9—d i hydro -8-hydroxy-211,1011,12 Η-[ 1,3 ]oxazino| 5.6-fjoxepino- [3 ',4'; 6.7Jindol izino- [ 1,2—b ]ch i nol in— 10,13-( 15H)dion

Suspenze 5-eih\l-4,5-dihydro 5.10 dihydroxy-l11-oxepino-[3'.4':6,7]-indol izino -[ 1,2-b]ehinolin-3,15-(4H, 1311)dionu (84 mg, připraveného způsobem podle přípravy 5) v kyselině octové (2,5 ml) se zpracovává 1.3,5 triethylhexahydrotriazinem (0.5 ml). Reakční směs se míchá při teplotě 70 °C po dobu 30 minut a odpaří se vc vakuu. Zbytek se vyjme do ethanolu, zfiltruje se a promyje se etherem. Získá se pevná látka o teplotě tání vyšší než 275 °C\

NMR-IH (DMSO): 0.87 (t, 311); 1,50 (t, 3H); 1,85 (q. 2H); 2,77 (q. 2H); 3,05 (d, 111); 3,47 (d, lil); 4,37 (s, 2H); 5,00 (s, 2H); 5,22 (s, 2H); 5,45 (dd. 2H); 6,00 (s, 1H); 7,34 (s. IH); 7.36 (d, IH); 7,93 (d. 111); 8,53 (s. IH).

is

NMR-C13 (DMSO): 8,46; 13,48; 36.46; 42.49; 45.49; 46.44; 50,75; 61,43; 73,33; 82,06; 99,02; 112,90; 122,00; 122,98; 125,42; 127,04; 129.04; 130.20; 144.09; 144,97; 149.87: 152,92; 155.98; 172,07.

IR (KBr): 1045; 1215; 1502; 1604; 1657; 1722.

Příklad 4

8-Ethyl-8,9-dihydro-8-hydroxy-l· methyl-2II,10H,12H-[l,3]oxazino[5,6-fjoxepino(3^,,4^f:6,7]indolizino-[ 1,2—b]chinol i η— 10,13-( 15H)dion

Suspenze 5—ethyl—4.5—dihydro—5,10 dihydroxy-1H-oxepino-[3'.4':6,7]--indolizino—[l,2-b|chinolin-3.15-(4H, 13ÍI)dionu (200 mg, připraveného způsobem podle přípravy 5) v kyselině so octové (5 ml) sc zpracovává bexahydro-l,3.5-trimethy!triazinem (110 mg). Reakční směs sc míchá při teplotě 70 °C po dobu 30 minut a odpaří sc vc vakuu. Zbytek se vyjme do ethanolu.

zfiltruje se a promyje se etherem. Získá se pevná látka o teplotě tání vyšší než 275 °C.

- 77 CZ 299794 B6

NMR-IH (DMSO); 0,87 (t, 3H); 1,85 (q, 211); 3,04 (d, IH); 3,48 (d, IH): 4,33 (s, 2H); 4,93 (s, 2H); 5.28 (s. 211); 5.45 (dd, 2H); 6,01 (s. IH); 7.35 (s, IH); 7,38 (d, IH); 7,94 (d. IH); 8.49 (s, IH).

NMR-C13 (DMSO): 8,46; 36,43; 37,85; 42,55; 48.68; 50,79; 61.43; 73.35; 83.82; 99.04; 112,49; 122.04; 123.00; 125.46; 127,14; 129,07; 130.27; 144.99; 149.95; 152,45; 155,99; 172.09.

IR(KBr): 1047; 1058; 1219; 1246; 1295; 1439; 1504; 1604; 1655; 1735.

Příklad 5

8—Ethy 1—8,9 dihydro-8-hydroxy-l-benzy 1 2H.10H, 121Ί—[ 1,3|oxaz.ino[5,6-f|oxepino[3',4':6,7]indolizino [ 1,2-bBhinolin-l0,13-( 15H)dion

Suspenze 5—ethyl—4,5—dihydro—5,10--dihydroxy— l H-oxepino-[3',4':6.7] -indolizino-[1.2-b]chinolin-3,15-(4H,13H)dionu (200 mg, připravitelného způsobem podle přípravy 5) v kyselině octové (5 ml) se zpracovává 1,3,5-tribenzylhexahydrotriazinem (285 mg). Reakční směs sc míchá při teplotě 70 °C po dobu 30 minut a odpaří se ve vakuu. Zbytek sc vyjme do ethanolu, zfiltruje se a promyje se etherem. Získá se pevná látka o teplotě tání vyšší než 275 °C.

NMR-IH (DMSO): 0,85 (t, 311); 1.85 (q, 2H); 3,05 <d. IH); 3,47 (d, 1 H); 3.96 (s, 2H); 4.33 (s. 211); 5,04 (s. 2H); 5,17 (s, 2H); 5,44 (dd. 2H); 6,01 (s, IH); 7.38 (m, 611); 7,42 (d, 1 H); 7,97 (d, IH); 8.42 (s, 111).

NMR Cl3 (DMSO): 8,42; 19,96; 36,45; 42,51; 46,36; 50,78; 55,38; 61,39; 73,31; 99.00; 112.55; 122,01; 123,08; 125,38; 127,09; 127,47; 128,70; 129,14; 130,35; 128,40; 139,19; 144.18; 149,99; 152,84; 155,92; 159,24; 172,05.

.io IR(KBr); 1056; 1205; 1225; 1248; 1504; 1535; 1599; 1655; 1726.

Příklad 6

5? 8-Eihy 1-8,9-dihydro-4-fl uor-8--hydroxy-1-benzy 1-2 H,l OH, 12H-[ 1.3 ]oxazino-[ 5,6-t]oxepino [3',4':6,7Jindolizino-[l,2-b]chinolin-10.13-( 15H)dion

Suspenze 5-ethyl-9-fluor-4.5-dihydro-5,10-d i hydroxy I H-oxepino-[3',4':6,7]indoIizino[l,2-b]ehinolin 3.15-(411,l3H)dionu (200 mg. připraveného způsobem podle přípravy 20) v kyselině octové (5 ml) se zpracovává 1,3,5-tribenzylhexahydrotriazinem (285 mg). Reakční sinčs se míchá při teplotě 70 °C po dobu 30 minut a odpaří se ve vakuu. Zbytek se vyjme do ethanolu. zfiltruje se a promyje se etherem. Získá se pevná látka o teplotě tání vyšší než 250 °C.

NMR-ΠΙ (DMSO): 0,85 (t, 3H); 1,85 (q. 2H); 3,05 (d, IH); 3,48 (d. IH); 3.95 (s, 211); 4,45 (s. 2H); 5,20 (s, 4H); 5,45 (dd, 2H); 6,05 (s. 1H); 7.40 (s, 7H); 7, 90 (d, 111); 8,45 (s, IH).

lR(KBr); 1248; 1451; 1501; 1598; 1657; 1657; 1727.

Farmakologická studie produktů podle vynálezu

Test relaxační aktivity DNA indukované topoizomerázou 1

Všechny reakce se provádějí v 20 μΙ reakčního pufru, který' obsahuje 50 mM I ris-1IC1 (hodnota pH 7,5). 50 mM chloridu draselného. 0,5 mM dithiothreitolu, 10 mM chloridu hořečnatého,

-28C7. 299794 Bó

0,1 mM ethylendiamintetraoctové kyseliny (EDTA), 30 pg/ml albuminu hovězího séra a 300 ng supersvinuté pUC19 (Pharmacia) Biotech, Orsay. Francie) s nepřidanou nebo s přidanou testovanou sloučeninou dané koncentrace. Všechny testované sloučeniny se nejdříve rozpustí v dimethylsulfoxidu (DMSO) nebo ve vodě, v případě sloučenin ve vodě rozpustných, přičemž další ředění se provádí destilovanou vodou. Konečná koncentrace DMSO nepřekračuje I % (objem/objem). Reakce se iniciuje přidáním jednotky DNA topoizomerázy I z čištěného telecího brzlíku (Life Teehnologies/Gibeo-BRL, Paisley, Spojené Království) přičemž je reakce ukončena v průběhu 15 minut při teplotě 37 °C. Reakce se ukončí přidáním 3 μΐ směsi obsahující 1 % dodecyl natři um sul fátu při 1 %, 20 mM EDTA a 500 pg/ml K proteinázy (Boehringer Mannheim, io Meylan. Francie), Po další inkubaci po dobu 30 minut při teplotě 37 °C se přidá 2 μΐ pufru obsahujícího lOmM dinatriumhydrogenfosfátu, 0,3 % bromfenolové modře při 16 % Fieoll do vzorků, které se pak podrobují elektroforéze na agarózových gelech při 1.2 % při I V/cm po dobu 20 hodin v pufru obsahujícím 36 mM Tris-HCI při hodnotě pH 7,8, 30 mM dinatriumhydrogenfosfátu, 1 mM EDTA a 2 pg/ml chlorochinu. Gely se zabarvují 2 pg/ml ethidiumbromidu a foto15 grafují se pod ultrafialovým světlem při 312 nm zařízením spojeným s nábojem (ced) kamerou a fluorescenční intenzita se měří za použití bioProfil analyzátoru obrazu (Vilber Lourmat, Lyon, Francie) se zřetelem na stanovení procenta relaxované DNA.

Při každém testu se supersvinutý plazmid DNA inkubuje samotný nebo s topoizomerázou 1.

Reakce je ukončena v průběhu 15 minut. Pro každou zkoušenou sloučeninu nebo kontrolu (jako kontrola se označuje samotný nosič) se supersvinutý plazmid DNA inkubuje v přítomnosti maximální zvolené koncentrace pro pokus s testovanou sloučeninou nebo s kontrolou bez enzymu nebo v přítomnosti testované sloučeniny v koncentraci 1 μΜ až 200 μΜ nebo kontroly v přítomnosti enzymu. Jak je zřejmé z tabulky I, příklady 3 až 6 inhibují relaxaci aktivity podpořené topoizomerázou I způsobem závislým na koncentraci.

Tabulka i

Mikromolární koncentrace

Příklady	10	50	100	200
Camptothecin	88,7	62,4	52.9	46.9
3	79,7	46,9	33,5	23.2
4	86.2	32,7	35,1	32,1
5	56.2	30,4	28,0	24,2
6	55,6	39,9	38.9	30,0

Průmyslová využitelnost

Prodrogy a analogy kamptotheeinu vhodné pro výrobu léčiv k inhibicí topoizomerázy zvláště typu I nebo 11, pro ošetřování nádorů, parazit i ckých infekcí a virových onemocnění.

Claims (4)

1. PATENTOVÉ NÁROKY v racemické nebo v enantiomerní formě nebo v jakékoliv kombinaci těchto forem, přičemž

   Ri představuje C]-C₆ alkylovou skupinu, C₂-C₆ alkenylovou skupinu, C₂-C_{) alkynylovou io skupinu, Cj-C₆ halogenalkylovou skupinu, C)-C₆ alkoxy (Ci -C₆)alkýlovou skupinu nebo C|—C<, a Iky 1(CC₆)lhioalkylovou skupinu.

   R₂, R,a a R, na sobě nezávisle představují atom vodíku, atom halogenu, C_t-C₆ halogenalkylovou skupinu, Ct—C\, alkylovou skupinu, C₂-C₆ alkenylovou skupinu, kyanoskupinu, C,-C_ť) kyano1? alkylovou skupinu, nitroskupinu, Ci-C_b nitroalkylovou skupinu, amidoskupinu, Ci-C₆ amidoalkýlovou skupinu, hydrazinoskupinu. C|-C_A hydrazinoalkylovou skupinu, azidoskupinu. Cj-C₆ azidoalkylovou skupinu, skupinu (CH₂)_mNR₆R₇, (CHJ^ORí,, (Cl E)„,SR₍„ (CH3)_mCO₂R₆, (CH₂)_mNR₆C(O)R₈. (CH₂)_mC(O)R₈, (CH₂)_mOC(O)R₈? O(CH₂)_mNR₀R₇. OC(O)NR₍>₇, OC(O)(CI T)_mCO₂R_f, nebo (CH₂)_n[N=X]. OC(O)[N-X]. (CH₂)_tllOC(O)[N-X], kde [N-X]
2. 2o znamená 4- až 7 člennou beterocyklickou skupinu obsahující atom dusíku, který je členem heterocyklické skupiny a X znamená zbylé členy, které jsou nutné k doplnění hcteroeyklieké skupiny, volené ze souboru zahrnujícího atom kyslíku, síry, skupinu CFT, skupinu CH, atom dusíku, skupinu NR<, a CORio, nebo R₂, Ra a R._; představují na sobě nezávisle arylovou nebo nižší arylalkýlovou skupinu, které jsou popřípadě substituované jedním až čtyřmi substituenty na ary lové

   25 nebo hcteroeyklieké části, přičemž tyto substituenty jsou voleny ze souboru zahrnujícího C|-C₍₁ alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskupinu. aminoskupinu, C|-C₆ alkylaminoskupinu. C₍C₆ halogenalkylovou skupinu. Ct—C₆ hydroxyalkylovou skupinu, C|-C₆ alkoxyskupinu a C|-C₆ alkoxy-(C,-C_f,)alkýlovou skupinu nebo Ra a R₄ vytvářejí spolu dohromady řetězec se 3 nebo 4 členy, ve kterém jsou prvky řetězce voleny ze souboru zahrnujícího skupinu CH. skupinu CH₂, .to atom kyslíku, síry a dusíku a skupinu NR₉,

   R₅ představuje atom vodíku, atom halogenu, C|-C₆ halogenalkylovou skupinu, C|-alkylovou skupinu, Ci-C_ň alkoxyskupinu, C]-C₍, alkoxy-^CÁ-CNJalky lovou skupinu. C₍-C₆ alkyl—(CN— Othioal kýlovou skupinu, CX-C₇ cykloalky lovou skupinu. Cr-C₇ cykloalkyHCi-Ct) alkylovou

   35 skupinu, kyanoskupinu, Cj- C_ť, kyanoalkylovou skupinu, Cj-C<, alkylsulfonyl--(C_r C_h)nlkylovou, C|-C₍, hydroxyalkylovou skupinu, nitroskupinu. skupinu (CH₂)_mC(O)R₈. skupinu (CH₂)_tnNR_ftC(O)R₈, (Cl-hKMR^, skupinu (CH₂)₁₁₁N(CH).a(CH₂)₁₁NR₆R7- skupinu (CH_?)_n,OC(O)Rs, skupinu (CH₂)_I11OC(O)NR₆R₇, skupinu (CH₂)_mS(O)_qRn. skupinu (CH₂)_fnP(O)R|₂R| a, skupinu (CH₂)₂P(S)R_I2R|₇, nebo skupinu (CH₂)„[N-X], skupinu

   40 OC(O)[N=X], skupinu (Cn₂)_m()C(O) [N=X), arylovou nebo aryl(Cj-C₍,)alkýlovou skupinu, které jsou případně substituované jedním až čtyřmi substituenty na arylové nebo heteroarylové části, přičemž tyto substituenty jsou voleny ze souboru zahrnujícího C|-C_ťí alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskupinu, aminoskupinu, C|-C_(J alkylaminoskupinu. C’i-C₆ halogenalkylovou sku- 30CZ 299794 B6 pinu, C| €₍, hydroxyalkylovou skupinu. C|-C<, alkoxyskupinu a C_r-C<, alkoxy (C |—C₆) alkylovou skupinu.

   R_ft a R- představují na sobě nezávisle atom vodíku, Ci -C₆ alkylovou skupinu. C|-C₆ hydroxy5 alkylovou skupinu, Ci-C_fl alkyl(Ci-C\) aminoalkylovou skupinu, C|-aminoalkylovou skupinu. C₂ C\ cykloal kýlovou skupinu. C3-C7 cykloalkyl(C 1-C,) alkylovou skupinu, C₂-C₆ alkenylovou skupinu. C|-C₆ alkoxy-(C_]-C₆) alkylovou skupinu, C]-C₆ halogenalkylovou skupinu, ary lovou nebo aryl-(Ci-C₍,)alkylovou skupinu, které jsou případně substituované jedním až čtyřmi substituenty na arylové části, přičemž tyto substituenty jsou voleny ze souboru zahrnujícího Cji(i C₆ alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskupinu. aminoskupinu, C|-C₍, alkylaminoskupinu,

   C'i-C₍, balogenalkylovou skupinu, C,-C₆ hydroxyalkylovou skupinu, Cj-C₆ alkoxyskupinu a Cj C_b alkoxy-(Ci-C_ft) alky lovou skupinu,

   Rs představuje atom vodíku, Cj-C₆ alkylovou skupinu, C,-C₆ hydroxyalky lovou skupinu,

   15 aminoskupinu, C|4?<, alkylaminoskupinu, Cj C<> alkyl(C_rCj,) aminoalkylovou skupinu, Cj-Cj, aminoalkylovou skupinu, Cj-C₇ cykloal kýlovou skupinu, C3-C7 eykIoalkyl(C|-C₆) alkylovou skupinu, C₂-C_ft alkenylovou skupinu, C| -C₍, alkoxyskupinu skupinu, C|-Cj, alkoxy4Ci-C_ft) alkylovou skupinu, Cj-C_ft balogenalkylovou skupinu, arylovou skupinu nebo aryl (Cj-C₆)alkylovou skupinu, které jsou případně substituované jedním až čtyřmi substituenty na arylové

   20 části, přičemž tyto substituenty jsou voleny ze souboru zahrnujícího Cj-C<, alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskupinu. aminoskupinu, C|-C_ř, alkylaminoskupinu, Cj-C\ halogcnalkylovou skupinu. C|-C₆ hydroxyalkylovou skupinu, C₍-Cj> alkoxyskupinu a C|-C_ft alkoxy-(Ci-C(,)alkylovou skupinu,

   25 R<, představuje atom vodíku, C1-C0 alkylovou skupinu, C|—C<> halogen-RCČ-CV) alkylovou skupinu, ary lovou skupinu nebo arylovou skupinu substituovanou jedním nebo více substituenty vybranými ze souboru zahrnujícího Cj-C₆ alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskupinu, aminoskupinu, Cj-Cj, alkylaminoskupinu, C|-C_ft halogcnalkylovou skupinu. Cj-C₍, hydroxyalkylovou skupinu, C1--C₆ alkoxyskupinu a Cj-Cj, alkoxy-(Cj-Cj,) alkylovou skupinu).

   R]_{, představuje atom vodíku, Cj-Cj, alkylovou skupinu, Cj-C₆ balogenalkylovou skupinu, Ci-C_ft alkoxyskupinu, arylovou skupinu nebo arylovou skupinu substituovanou jedním nebo více substituenty vybranými ze souboru zahrnujícího C|-C₆ alkylovou skupinu, C|--C_f, halogenalkylovou skupinu. Cj-Cj, hydroxyalkylovou skupinu a C|—C_ť> alkoxy-^Cj-Cj,) alkylovou skupinu.

   R,i představuje C| C₍₁ alkylovou skupinu, arylovou skupinu, skupinu (CH₂)_mOR₎₄, skupinu (CII₂)_mSR₁₄, skupinu (CH₂)₂NR₎₄Ri5 nebo skupinu (CH₂)_R,[N=X],

   Ri₂ a Ru představují na sobě nezávisle Ci-Cj, alkylovou skupinu, arylovou skupinu, C|-C_Ď

   40 alkoxyskupinu, aryloxyskupinu nebo aminoskupinu,

   Ru a Ris představují na sobě nezávisle atom vodíku, Ci-C_fi alkylovou skupinu nebo arylovou skupinu,

   15 R_]6 představuje atom vodíku nebo skupinu OR_2],

   Rj? představuje skupinu OR₍₎ nebo skupinu NR₆R₇,

   R_í8 a R19 představují na sobě nezávisle atom vodíku, atom halogenu. Cj-Cj, alkylovou skupinu.

   50 C1 —C₆ alkoxyskupinu nebo hydroxylovou skupinu,

   R?<) představuje atom vodíku nebo atom halogenu,

   R_2i představuje atom vodíku. C|-Cj, alkylovou skupinu, skupinu CHO nebo skupinu

   55 C(())(CII₂),_tlCÍl·,

   - 41 CZ 299794 B6

   R_p představuje atom vodíku nebo snadno odštěpitelnou skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího skupiny obecného vzorce -C(Oj-A-NR₂2R2.w kde A představuje C|-C₆ alkylcnovou skupinu s přímým nebo s rozvětveným řetězcem, která je popřípadě substituovaná skupinou vybranou ze ? souboru zahrnujícího volnou, esterifikovanou nebo na sul převedenou hydroxylovou skupinu, atom halogenu, volnou, esterifikovanou nebo na sůl převedenou karboxylovou skupinu, aminoskupinu, mono-íCi-Cb) alkylaminoskupinu a di—(C|—C*> alkylaminoskupinu a R₂₂ a R₂₂ na sobe nezávisle představují atom vodíku, C|^C₆ alkylovou skupinu, C,-C₆ hydroxyal kýlovou skupinu, C|—C₆ alkyl(C|- C_ft) am i noal kýlovou skupinu, Cty—C₆ am i noa (kýlovou skupinu. C--C₇ cykloio alkylovou skupinu, C_?-C₇ cykloalkyl—(Cí—C_b) alkylovou skupinu. C₂ C₆ alkeny lovou skupinu, C| C₆ alkoxy-(Ci C₆) alkylovou skupinu, C|-C₆ halogenalkylovou skupinu nebo arylovou nebo aryI(C|-C₍₁) alkylovou skupinu, které jsou případně substituované na arylové části jedním až čtyřmi substituenty, přičemž tyto substituenty jsou vybrané ze souboru zahrnujícího C’i C\ alkylovou skupinu, atom halogenu, nitroskupinu, aminoskupinu, C|-C₆ alkylaminoskupinu. C|-C₆ halogen15 alkylovou skupinu. C|-C_A hydroxy alky lovou skupinu, C|-C₆ alkoxyskupinu a C|—C₆ alkoxy(C|—C₆) alkylovou skupinu nebo R₂₂ a IC, spolu vytvářejí případně substituovaný pětičlenný, šestičlenný nebo sedmičlenný kruh, který popřípadě obsahuje další heteroatom ze souboru zahrnujícího atom kyslíku, dusíku nebo síry,

   2o m je celé číslo od 0 do 6, n je 1 nebo 2.

   q je celé číslo od 0 do 2, [N—X] představuje 4- až 7-člennou heterocyklickou skupinu, přičemž X znamená zbylé členy, které jsou nutné k doplnění uvedené heteroeyklieké skupiny, jež jsou vybrané ze souboru zahrnujícího atom kyslíku, síry; skupinu C1I₇, skupinu CH, atom dusíku, skupinu NR₉ a skupinu COR_I().

   30 přičemž pokud R_P znamená atom vodíku. R; a R₄ spolu tvoří tříčlenný nebo čtyřčlenný řetězec.

   přičemž ary lovou skupinou, samostatnou nebo jako součástí jiné skupiny, se vždy rozumí monocyklická, bieyklieká nebo tricyklická skupina obsahující alespoň jeden aromatický kruh. přičemž každý z těchto kruhů obsahuje maximálně 7 členů.

   nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.

   2, Analog kamptothecinu podle nároku 1 obecného vzorce 1 nebo 11, kde R| představuje ethylovou skupinu, nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.

   4(1
3. 3. Analog kamptothecinu podle nároku 1 obecného vzorce I nebo II, kde R₅ představuje atom vodíku, C|-C₍, alkylovou skupinu nebo skupinu (CH₂)_mNR₀R₇ nebo (ClhUN^X], která je popřípadě substituovaná C|-C'₆ alkylovou skupinou, nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.

   15 4. Analog kamptothecinu podle nároku 1 obecného vzorce I nebo I!, kde R₂ a R₄ vytvářejí popřípadě substituovaný oxazinový kruh, nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.

   5. Analog kamptothecinu podle nároku I obecného vzorce I nebo II. kde R_P představuje snadno odštěpitelnou skupinu, nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.

   6. Analog kamptothecinu podle nároku 5 obecného vzorce 1 nebo li, kde R_p představuje skupinu C(())—(A|)NR₂₂R₂₂, kde A| představuje skupinu (Cl l₂)_m nebo rozvětvenou C| C<> alkylenovou skupinu a m je celé číslo od 0 do 6, nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl.

   - 3? C'7. 299794 B6

   7. Analog kamptothecinu podle nároku 4 vybraný ze souboru zahrnujícího

   1.8—diethyl—8.9—dihydro—8—hydroxy—211„1011,121Η1,3Joxazino[5.6- f]oxepino[3',4':6.715 indol izino[ 1,2-bjchinolin- 10.13( 15H)dion,

   8—ethyl--8,9--dihydro--8--hydroxy-l-methyl-2IL1011,121 í--[ 1.3Joxazino[5,6-f]oxepino[3',4':6,7Jindolizinof 1.2—bjchinolin— 10.13(15H)dion, io 8—ethyl—8,9-dihydro-8-hydroxy-l-benzyl-2H, 101 l,l2H-[ 1,3 ]oxazino[5,6-f]oxepino[3',4':6,7Jindolizino[l ,2—bjchinolin—10.13( 15H)dion,

   8—ethy I—8,9—dihydro^t—fluor—8—hydroxy—1 —benzyl—2H, 101 Ί. 121 l-(1.3Joxazino[5,6-fjoxepino[3',4':ó,7]indolizino[l,2-bjchinolin-10,13(l 5H)dion nebo jeho farmaceuticky vhodné soli.

   8. Analog kamptothecinu podle nároku 5 vybraný ze souboru zahrnujícího

   2o 5—ethyl -9 J 0 -d i fluor 4,5 dihydro-5-(2-amino-1 -oxoethoxy)-l H-oxepino[3',4':6,7]indolízino(l,2-b]chinolin-3,l5(4H.13If)dion,

   5-ethy 1-9.10 difluor 4,5 -dihydro-5-(2-amino-l-oxopropoxy)-I H-oxepino[3',4':6,7]indol izi no[ 1„2—b jeli i nol in—3.15(4H, 13H)dion.

   nebo jeho farmaceuticky vhodné soli.

   9. Analog kamptothecinu podle nároku 1 obecného vzorce I nebo II nebo jeho farmaceuticky vhodná sůl jakožto léčivo.

   10. I- a rm ace utický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou složku sloučeninu podle nároků 1 až 8.

   11. Použití sloučeniny podle nároků 1 až 8 pro přípravu proti nádorového léčiva.

   12. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce la odpovídající sloučenině obecného vzorce I, kde Ri a R₄ vytvářejí oxazinový kruh podle kteréhokoli z nároků 1,4 nebo 7. vyznačující s c t í m . že se
4. 4o - β-hydroxylaktonová sloučenina obecného vzorce D kde R představuje hydroxylovou skupinu, R₍ představuje atom vodíku a R|. R₂, Rs Ris Riq a R₂₍i mají význam uvedený v nároku 1. 4 nebo 7, reaguje s primárním aminem za podmínek Mannichovy reakce za vzniku β-hydroxylaktonové sloučeniny obecného vzorce la kde R|. R₂, Rs, Ru- R_]ří, R_l9 a R_?o mají význam uvedený v nároku 1,4 nebo 7.

   13. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce lb odpovídající sloučenině obecného vzorce I, kde R_p neznamená atom vodíku podle kteréhokoli z nároků 1 až 8. vyznačující se tím, že se sloučenina obecného vzorce D nebo la (Dý (la), acvluje, výhodně derivátem C(O)-A-N-R₂₂R₂₃, definovaným v nároku 1, za vzniku β-hydroxylaktonové sloučeniny obecného vzorce 1, ve kterém R_p představuje jinou skupinu než atom vodíi5 ku.

   - 74 CZ 299794 B6

   14. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce II podle kteréhokoli z nároků 1 až 8, vyznačující se t í m , že se lakton obecného vzorce I otevírá v zásaditém prostředí, čímž se po neutralizaci získá sloučenina obecného vzorce II ^RP° Rj CR„ o

   (Π), kde R], R₂, Rs, Ry, Rp. Ris. Rio a R₂₍₎ mají význam uvedený v kterémkoli z nároků I až 8, R znamená skupinu OR₂|. kde K₂| představuje atom vodíku nebo Cj-C₆ alkylovou skupinu a R_l? představuje skupinu OR„ nebo NHR₆ a io R₍₁ znamená atom vodíku, C] Cj, alkylovou skupinu, C₂-C₇ cykloalkylovou skupinu, Cj-C₍₎ alkyI-(C₂-C₇) cykloalkylovou skupinu, C₂-C₇, alkenylovou skupinu, Cj-Có alkyl (C | C\.) alkoxyskupinu nebo arylovou skupinu nebo Cj-C₆ alkylarylovou skupinu.