SK1012000A3

SK1012000A3 - Alatrofloxacin parenteral compositions

Info

Publication number: SK1012000A3
Application number: SK101-2000A
Authority: SK
Inventors: Robert Mark Guinn; John Francis Lambert; Subramanian Sam Guhan; Stanley Walter Walinsky
Original assignee: Pfizer Prod Inc
Priority date: 1997-08-01
Filing date: 1998-07-23
Publication date: 2000-09-12
Also published as: ATE259827T1; EA002120B1; PL338477A1; TW538043B; JP2001512133A; PT1000086E; HN1998000106A; UY25113A1; CN1265671A; DE69821767D1; YU2500A; BG104105A; NO20000485D0; NZ502249A; TNSN98146A1; PA8456701A1; BR9811580A; HUP0004793A2; AP9801310A0; AU8236898A

Description

Alatrofloxacínové parenterálne kompozície

Oblasť techniky

Predložený vynález sa týka naftyridínového antibiotického alatrofloxacínmezylátu v podstate bez menej polárnych nečistôt, parenteráIných kompozícií tohto alatrofloxacínmezylátu a spôsobu čistenia alatrofloxacínmezylátu.

Doterajší stav techniky

Alatrofloxacínmezylát je mezylátová predlieková sol príbuzného naftyridónového antibiotického trovafloxacínu. Alatrof loxacínmezylát, pripravený bežne dostupnými spôsobmi, sa vyrába vo velmi vysokej čistote. Avšak alatrofloxacínmezylát pripravený týmito bežnými spôsobmi obsahuje nepatrné menej polárne nečistoty, ktoré majú tendenciu sa zrážať z parenterálnych kompozícií po státí počas neurčitého obdobia.

Tieto menej polárne nečistoty nemôžu byt adekvátne odstránené komerčne uskutočnitelnými spôsobmi ako je rekryštalizácia, štandardné chromatografické prostriedky používajúce rýchly silikagél, extrakčné metódy rozpúštadlo/rozpúštadlo alebo spracovanie kremelinou.

Pôvodcovia tohto vynálezu objavili, že nečistoty môžu byt úspešne odstránené spracovaním surového reakčného produktu, tzn. produktu pripraveného ktoroukolvek známou literárnou metódou, s polystyrénovou živicou.

Dosial bolo známe, že chinolínový antibiotický ciprofloxacín tiež obsahuje nečistoty spôsobujúce, že tento produkt je nevhodný pre parenterálne formulácie. Európska patentová publikácia číslo 287 926, publikovaná 26. októbra 1988 opisuje čistenie ciprofloxacínu spracovaním s kremelinou tak, že sa získa produkt, ktorý je vhodný pre parenterálnu formuláciu.

Ako je uvedené hore, spracovanie alatrofloxacínmezylátu kremelinou adekvátne neodstraňuje menej polárne nečistoty.

Antibakteriálna aktivita a syntéza hore uvedeného alatrofloxacínu sú opísané v US patentoch číslo 5 164 402 a 5 229 396 vydaných 17. novembra 1992, respektíve 20. júla 1993, ktorých zverejnenia sú tu začlenené odkazom v ich celistvosti. Predchádzajúce patenty sú postúpené spolu s predloženou prihláškou vynálezu.

Medzinárodná patentová publikácia WO 97/00268 publikovaná 3. januára nárokuje alternatívny postup prípravy alatrofloxacínu. Táto publikácia je tu preto začlenená odkazom v celom rozsahu.

Medzinárodná patentová publikácia WO 97/08191 publikovaná 6. marca 1997 opisuje tretí postup prípravy a polymorfy alatrofloxacínu, toto zverejnenie je tu začlenené odkazom v celom rozsahu. Táto patentová publikácia je postúpená spoločne s predloženou prihláškou.

Medzinárodná patentová publikácia WO 95/19361, publikovaná 20. júla 1995, US patentová prihláška č. 60/021419 prihlásená 9. júla 1996 a medzinárodná patentová prihláška č. PCT/EP9604782 prihlásená 31. októbra 1996, nárokujú nové medziprodukty na prípravu alatrofloxacínu a trovafloxacínu, ktorých zverejnenia sú tu začlenené formou odkazu v celom rozsahu. Predchádzajúce patentové publikácie a aplikácie sú postúpené spoločne s predloženou prihláškou.

US patent číslo 5 475 116, vydaný 12. decembra 1995 a US patent číslo 5 256 791, vydaný 26. októbra 1993, nárokujú rôzne azabicyklohexánové medziprodukty užitočné pri syntéze alatrofloxacínu a trovafloxacínu, ktorých zverejnenia sú tu začlenené formou odkazu v celom ich rozsahu.

Predchádzajúce patenty sú postúpené spoločne s predloženou prihláškou.

US patentová prihláška 08/764 655, prihlásená 2. decembra 1996 sa týka spôsobu liečby infekcií Helicobacter pylori pomocou alatrof loxacínu a trovaf loxacínu, ktorej zverejnenie je tu začlenené odkazom v celej jej celistvosti. Predchádzajúca patentová prihláška je postúpená spoločne s predloženou prihláškou.

Medzinárodná patentová publikácia WO 96/39406, publikovaná 12. decembra 1993, nárokuje novú kryštalickú formu bezvode j 7- ([ Ια, 5α, 6a ] -6-amino-3-azabicyklo[3,1,0] hex-yl) -6f luór-1- (2,4-dif luórf enyl) -1,4-dihydro-4-oxo-l, 8-naftyridín3-karboxylovej kyseliny, sol metánsulfónovej kyseliny, spôsob použitia tejto zlúčeniny pri liečbe bakteriálnej infekcie u cicavcov, najmä človeka, a farmaceutickej zmesi, ktorej zverejnenie je tu začlenené formou odkazu v celom * rozsahu. Predchádzajúca patentová publikácia je postúpená spoločne s predloženou prihláškou.

v

Medzinárodná patentová prihláška PCT/IB 96/00756, prihlásená 29. júla 1996, nárokuje zwitteriónové formy trovafloxacínu, ktoré sú užitočné na podávanie liečiva ako suspenzie, jej zverejnenie je tu začlenené odkazom v úplnej celistvosti. Predchádzajúca patentová publikácia je postúpená spoločne s predloženou prihláškou.

Podstata vynález

Predložený vynález sa týka spôsobu čistenia zlúčeniny vzorca I

zahŕňajúceho spracovanie nečistého reakčného produktu obsahujúceho uvedenú zlúčeninu vzorca I a menej polárne nečistoty s hydrofóbnou živicou.

Tieto menej polárne nečistoty sú definované ich retenčnými časmi pri vysokotlakovej kvapalinovej chromatografii (HPLC) od vstrieknutia vzorky do Hewlett-Packard Model 1100 Šerieš High Pressure Liquid Chromatograph^R elúciou mobilným fázovým roztokom 40% acetonitrilu, 0,05M dihydrogenfosforečnanu draselného (KH₂PO₄ a 3% kyseliny chloristej (obj/ obj) pri prietoku asi 2 ml za minútu na Puresil^R 5 mikrónovom C¹⁸ kremičitom HPLC stĺpci (4,6.150 mm) s 20 mikrolitrovým injekčným objemom a s Hewlett-Packard 1100 Šerieš Dióde Array Detector^R s detektorom nastaveným na záznam pri vlnovej dĺžke 270 nm. HPLC kolóna sa použije pri okolitej teplote (20 až 25C).

Tieto menej polárne nečistoty definované hore uvedenými HPLC podmienkami majú retenčný čas asi 2,1 minút až asi 30 minút. Osobitne nežiadúca menej polárna nečistota má retenčný čas 9 až 12 minút za hore uvedených HPLC podmienok. Hore uvedená nečistota s retenčným časom 9 až 12 minút má vzorec II

(H) tu tiež označovaná ako oligomérna nečistota. Výhodne menej polárne nečistoty po spracovaní obsahujú menej ako 500 ppm, výhodnejšie menej ako 60 ppm, vo vztahu k hmotnosti surového produktu. Najvýhodnejšie sú tieto nečistoty obsiahnuté v množstve menšom ako 20 ppm.

Výhodne je hydrofóbnou živicou zositovaná polystyrénová živica ako je Diaion HP-20^R alebo Aberchrom CG-161^R.

Predložený vynález sa tiež týka zlúčeniny vzorca I

v podstate bez menej polárnych nečistôt, výhodnejšie v podstate bez zlúčeniny vzorca II.

Predložený vynález sa takisto týka parenterálnej kompozície obsahujúcej antibakteriálne účinné množstvo zlúčeniny vzorca I alebo jej farmaceutický akceptovateľnej soli, v podstate bez menej polárnych nečistôt, výhodne v podstate bez zlúčeniny vzorca II, a farmaceutický akceptovateľný nosič. Výhodne je farmaceutický akceptovateľným nosičom voda.

Predložený vynález sa tiež týka parenterálnej kompozície ako je opísaná hore, kde zlúčeninou vzorca I je lyofilizát.

Predložený vynález sa tiež týka farmaceutickej kompozície ako je opísaná hore, kde zlúčenina vzorca I obsahuje asi 10 mg až asi 700 mg, výhodne asi 275 až asi 500 mg zlúčeniny v jednotkovom dávkovacom obalu, výhodne asi 300 mg.

Predložený vynález sa tiež týka zlúčeniny vzorca II

II

Predložený vynález sa tiež týka farmaceutickej kompozície obsahujúcej antibakteriálne účinné množstvo zlúčeniny vzorca II alebo jej farmaceutický akceptovatelnej soli.

Predložený vynález sa takisto týka spôsobu liečby bakteriálnej infekcie zahŕňajúceho podávanie subjektu, ovplyvnenému bakteriálnou infekciou, antibakteriálne účinného množstva zlúčeniny vzorca II.

Predložený vynález sa tiež týka zlúčeniny vzorca III

Predložený vynález sa tiež týka farmaceutickej kompozície obsahujúcej antibakteriálne účinné množstvo zlúčeniny vzorca III alebo jej farmaceutický akceptovatelnej soli.

Predložený vynález sa takisto týka spôsobu liečby bakteriálnej infekcie zahŕňajúceho podávanie subjektu, napadnutému bakteriálnou infekciou, antibakteriálne účinného množstva zlúčeniny vzorca III.

Detailný opis vynálezu

Alatrofloxacín môže byt pripravený tromi spôsobmi, ktoré boli opísané vo vydaných patentoch alebo patentových publikáciách.

Konkrétne alatrofloxacín môže byt pripravený väzbou BOC(L-Ala-L-Ala)-azabicyklohexánu s aktivovaným chinolínom ako je opísané v US patente 5 164 402, vydanom 17. novembra 1992 a US patente 5 229 396, vydanom 20. júla 1993.

Druhá metóda prípravy alatrofloxacínu zahŕňa reakciu BOCL-Ala-L-Ala s chráneným azabicyklohexánnaftyridínovým jadrom ako je opísané v medzinárodnej patentovej publikácii WO 97/00268, publikovanej 3. januára 1997.

Konečne tretí spôsob produkcie alatrofloxacínu zahŕňa väzbu trovafloxacínmezylátu s BOC-L-Ala-L-Ala ako je publikované v medzinárodnej patentovej publikácii WO 97/08191, publikovanej 6. marca 1997.

Zverejnenia každého z hore uvedených patentov alebo patentových publikácií sú tu začlenené formou odkazu v ich úplnosti.

Predchádzajúce patenty a publikácie sú postúpené spoločne s predloženou prihláškou.

Surový alatrofloxacín pripravený ktoroukoívek z hore uvedených metód, obsahuje malé množstvá menej polárnych nečistôt. Konkrétny typ a množstvo nečistoty závisí od použitého postupu a podmienok. Surový alatrofloxacínový liečivý produkt pripravený podlá každého z hore uvedených troch postupov, má charakteristické HPLC chromátogramy, keď sú zaznamenané podía hore uvedených podmienok, ako je znázornené na obr. 1 až 3.

Konkrétne obr. 1 opisuje chromatogram alatrofloxacínmezylátu pripraveného spôsobmi opísanými v Brighty et al., US patent 5 164 402, vydaný 17. novembra 1992 a US patent 5 229 396 vydaný 20. júla 1993.

Približné koncentrácie nečistôt tejto pôvodnej metódy, keď je normalizovaná k známej koncentrácii oligoméru, sú uvedené v nasledujúcej tabuíke 1.

Obr. 2 opisuje HPLC chromatogram alatrofloxacínmezylátu pripraveného spôsobom opísaným v medzinárodnej patentovej publikácii WO 97/00268, publikovanej 3. januára 1997. Približné koncentrácie nečistôt produkovaných touto druhou metódou, keď je normalizovaná voči známej koncentrácii oligoméru, sú uvedené v nasledujúcej tabuíke 2.

Obr. 3 opisuje HPLC chromatogram alatrofloxacínmezylátu pripraveného spôsobmi opísanými v medzinárodnej patentovej publikácii WO 97/08191, publikovanej 6. marca 1997. Priblíž né koncentrácie nečistôt produkovaných touto tretou metódou keď je normalizovaná voči známej koncentrácii oligoméru, sú uvedené v nasledujúcej tabuíke 3.

Ako je stanovené hore, uvedené menej polárne nečistoty sú definované ich retenčným časom od vstreku vzorky v HewlettPackard Model 1100 Šerieš High Pressure Liquid Chromátograph^Rulúciou mobilným fázovým roztokom 40% acetonitrilu, 0,05M dihydrogenfosforečnanu draselného (KH₂PO₄ a 3% kyseliny chloristej (obj/obj) pri prietoku asi 2 ml za minútu na Puresil^R 5 mikrónovom C¹⁸ kremičitom HPLC stĺpci (4,6.150 mm) s 20 mikrolitrovým injekčným objemom a s Hewlett-Packard 1100 Šerieš Dióde Array Detector^R s detektorom nastaveným na záznam pri vlnovej dĺžke 270 nm.

Uvedené menej polárne nečistoty definované hore uvedeným podmienkami majú retenčný čas asi 2,2 minút až asi 30 minút. Jedna osobitne nežiadúca nečistota má retenčný čas 9 až 12 minút (približne 10,5 minút) za hore uvedených podmienok.

Hore uvedená nečistota s retenčným časom 9 až 12 minút má

II

Táto nečistota obsahuje asi 700 ppm reakčného produktu vytvoreného tretou metódou, ktorá je opísaná hore. Absolútne množstvo nečistoty závisí od postupu a použitých podmienok. Po vyčistení táto nečistota obsahuje menej ako asi 100 ppm reakčného produktu, výhodne menej ako 50 ppm, najvýhodnejšie menej ako 20 ppm.

Iné nečistoty majú retenčné časy asi 23,0, 20,1, 13,6, 11,7, 11,0, 10,9, 8,4, 7,6, 7,1, 6,2, 5,5, 5,0, 4,8, 3,9, 3,6, 3,1, 2,8, 2,5 a 2,1 minút, podlá podmienok opísaných hore. Zlúčeniny zodpovedajúce týmto retenčným časom dosial neboli charakterizované vzhladom na ich nízku ppm koncentráciu.

Tieto nečistoty môžu byt odstránené živicovou chromatograf iou elúciou polárnym rozpúšťadlom. Konkrétne sa reakčný produkt rozpustí v malom množstve vody. Rozpustený surový reakčný produkt sa potom pridá do kolóny naplnenej polystyrénovou živicou, ako je hydrátovaná Amberchrom CG-161^R polystyrénová živica (Tosohaas Chemicals, 156 Keystone Drive, Montgomery Wille, PA, 18936), Amberlite^R XAD-4 alebo XAD-16 (Rohm a Haas) alebo Diaion HP-20^R (Mitsubishi Chemical Co.), výhodne hydrátovaná Amberchrom CG-161^R polystyrénová živica.

Polystyrénové živice sú hydrofóbne makroporézne styrénicky založené živice gulôčkového typu, ktoré vytvárajú nepoláme aromatické povrchy na adsorpciu. Bežní odborníci v odbore vedia, že neiónové polymérne živice sú dostupné v rôznych veľkostiach guľôčok, rozmeroch pórov a povrchových plôch, ktoré ovplyvňujú separačné podmienky. Odborníci v odbore tiež vedia, že parametre živíc môžu byt menené, aby sa optimalizovali výsledky pre konkrétne aplikácie.

Hmotnostný pomer surového reakčného produktu (kg) k hmotnosti suchej živice (kg) je od 8 až asi 15 kg surového reakčného produktu na asi 1 kg suchej živice. Výhodne je hmotnostný pomer surového reakčného produktu k hmotnosti živice asi 10 až 12 kg surového reakčného produktu na kg suchej živice.

Pomer objemu eluentu (litre) k hmotnosti surovej liečivej látky (kg) sa mení od 1 do asi 70 litrov rozpúšťadla na kg surovej liečivej látky, výhodne 10 až 40 litrov vody na kg liečivej látky pri okolitej teplote. Najvýhodnejšie asi 25 litrov vody na kg liečivej látky pri okolitej teplote eluuje čistý produkt. Prietok eluentu cez stĺpec je v rozmedzí l až 10 vrstvových objemov za hodinu (tzn. množstvo eluentu vyžadovaného na naplnenie a vyprázdnenie živicovej vrstvy za 1 hodinu). Výhodne je prietok eluentového roztoku 3 až 5 vrstvových objemov za hodinu.

Produkt pripravený spôsobmi hore opísanými je v podstate bez menej polárnych nečistôt a je vhodný na použitie ako parenterálna kompozícia. Vyčistený alatrofloxacínmezylát, kde východiskovými látkami sú surové alatrofloxacínové liečivé produkty pripravené podía hore uvedených troch postupov, majú HPLC chromátogramy, kedf sú zaznamenané podía hore uvedených podmienok, ktoré sú zobrazené na obr. 4 až 6.

Konkrétne obrázok 4 uvádza chromatogram vyčisteného alatrof loxacínmezylátu po živicovom spracovaní, pripravovaného spracovaním surového alatrofloxacínmezylátu, pripraveného podía spôsobov opísaných v Brighty et al. US patent 5 164 402 vydaný 17. novembra 1992 a US patent 5 229 396 vydaný 20. júla 1993. Približná koncentrácia nečistôt po vyčistení, kedf je priradená k známemu množstvu v oligoméru je prezentovaná v nasledujúcej tabuíke 1.

Obrázok 5 opisuje HPLC chromatogram vyčisteného alatrofloxacínmezylátu pripraveného spracovaním surového alatrofloxacínmezylátu pripraveného podía postupov opísaných v medzinárodnej patentovej publikácii WO 97/00268, publikovanej 3. januára 1997.

Približná koncentrácia nečistôt po vyčistení, ked je normalizovaná k známemu množstvu oligoméru, je uvedená v nasledujúcej tabulke 2.

Obrázok 6 opisuje HPLC chromatogram vyčisteného alatrofloxacínmezylátu pripraveného spracovaním alatrofloxacínmezylátu pripraveného postupmi opísanými v medzinárodnej patentovej publikácii WO 97/08191, publikovanej 6. marca 1997. Približná koncentrácia nečistôt po vyčistení, ked sú normalizované k známemu množstvu oligoméru, je uvedená v nasledujúcej tabulke 3.

Tabulka 1

Retenčný čas (min)	Koncentrácia pred sprac, (ppm)	Koncentrácia po sprac, (ppm)
2,1	214	-
2,5	250	1
3,1	197	5
3,6	94	-
3,9	34	-
4,8	16	-
5,0	17	-
5,5	17	-
6,2	83	-
7,6	27	-
9,8	30	-
10,5	8	-
10,9	10	-
20,1	211	-
23,0	29	—

Tabuľka 2

Retenčný čas (min)

Koncentrácia pred sprac, (ppm)

Koncentrácia po sprac, (ppm)

2,1	382
2,5	234
3,1	77	2
5,5	7
6,2	55
7,1	10
7,6	113
8,4	4
9,8	76
11,7	5
13,6	5
20,1	49

Tabuľka 3

Retenčný čas	Koncentrácia pred	Koncentrácia po
(min)	sprac, (ppm)	sprac, (ppm)
2,1	28
2,5	3
2,8	5
3,1	38	5
5,0	5
5,5	124	13
6,2	22
8,4	8
10,5	700
11,0	97
20,1	22

Parenterálne kompozície sú viac ovplyvnené stopovými kontaminantami ako iné farmaceutické kompozície. To je preto, že parenterálne kompozície nech už zriedené alebo rekonštituované, sú dávkovacími formami, ktorých kvalitatívne štandardy sú zjavné vizuálnej inšpekcii. Vizuálna inšpekcia parenterálnych kompozícií môže zaznamenať menej polárne nečistoty až do 10 ppm. Prítomnosť viditelných nečistôt ovplyvňuje vieru verejnosti k bezpečnosti, stabilite a použitiu produktu. Je preto dôležité odstrániť tolko menej polárnych nečistôt z parenteráIných kompozícií, ako je možné, pretože menej polárne nečistoty sú všeobecne menej vodorozpustné a pravdepodobne sa zrážajú z formulácie.

Ďalej väčšina priemyslových krajín vyžaduje, aby parenterálne kompozície prichádzajúce do úvahy na liečbu, dosiahli minimálny štandard pre čistotu a neprítomnosť časticovej kontaminácie za účelom schválenie liečiva.

Minimálny štandard v Spojených štátoch je taký, aby parenterálna kompozícia bola v podstate bez častíc, ktoré môžu byť zistené pri vizuálnej inšpekcii, United States Pharmacopeia, R-246 (1994). United States Pharmacopeia (USP) nevytvára konkretizácie pre minimálne množstvo časticovej látky, tzn. nečistôt, ktoré by vyhovovali tomuto štandardu. USP zaisťuje volajaké testy na vyčíslenie subvizibilných cudzích častíc, ktoré by boli pomocné na kvalifikáciu množstva časticovej látky. Avšak žiadna z týchto skúšok nie je dostatočná, aby vyhovela štandardu, že táto kompozícia by mala byť v podstate bez častíc, ktoré môžu byť zistené vizuálnou inšpekciou.

Hoci žiadna zo skúšok nie je akceptovaná ako skúška potvrdzujúca čistotu kompozície, zákalová analýza je jedným z bežne akceptovaných meraní na kvantifikáciu prítomnosti časticových látok, pozri W. J. Passl et al., Analyst, 105, 512-515 (1980).

Podlá štandardných zákalových meraní je hodnota 0 - 0,45 nefelometrických jednotiek zákalu (NTU) akceptovaná ako roztok bez časticovej látky.

Produkt predloženého vynálezu, keď bol analyzovaný bežným turbidometrickým zariadením, Hellige Turbidimeter (Hellige, Inc. 877 Stewart Avenue, Garden City, New York 11530) rutinne získal zákalové merania nízke 0,3 NTU. Surový východiskový materiál vytvorený spôsobom opísaným v medzinárodnej patentovej publikácii WO 97/08191 získal zákalové miery asi 1,0 NTU.

Obr. 7 ukazuje vzťah zákalu ako funkciu koncentrácie nečistôt (ppm oligoméru vo vzťahu k surovému materiálu). Postup tohto vynálezu zahŕňa všetky kompozície majúce meranie zákalu nižšie ako 0,5 NTU.

Takto vyčistený produkt môže byt formulovaný na parenterálne podávanie (napríklad intravenózne, intramuskulárne alebo subkutánne) cicavcom vrátane človeka, na liečbu bakteriálnych infekcií postupmi dobre známymi odborníkom v odbore alebo dalej opísanými postupmi. Všeobecne môžu byť zlúčeniny vzorca I podávané v dávkach medzi asi 0,5 až asi 16 mg/kg/deň výhodne asi 4 až 7 mg/kg/deň, najvýhodnejšie asi

4,5 mg/kg/deň. Avšak určité zmeny v dávkovaní sa budú nutne vyskytovať v závislosti od stavu subjektu, ktorý bude liečený. Osoba zodpovedná za dávkovanie bude v akomkoívek prípade určovať vhodnú dávku pre jednotlivý subjekt.

Alatrofloxacínmezylát podía tohto vynálezu môže byt podávaný rôznymi rozdielnymi dávkovacími formami, všeobecne sú prítomné terapeuticky účinné zlúčeniny tohto vynálezu v týchto dávkovacích formách v koncentračných hladinách v rozmedzí od asi 0,5 % do asi 70 % (100 % pre lyofilizát) hmotnostných.

Na parenterálne podávanie (intramuskulárne, intraperitoneálne, subkutánne a intravenózne) sa zvyčajne pripravuje sterilný pyrogén neobsahujúci injektovatelný roztok aktívnej látky. Roztoky zlúčeniny vzorca I v podstate bez menej polárnych nečistôt, výhodne zlúčenín vzorca II, môžu byt pripravené v rozpúšťadle ako je sezamový olej, arašídový olej, voda alebo vodný propylénglykol. Výhodným roztokom je netlmený vodný roztok.

Vodné roztoky môžu byt vhodne nastavené a tlmené, kedf je to nutné a kvapalné riedidlo pôsobí izotonicky. Tieto vodné roztoky sú vhodné na intravenózne injekčné účely. Olejové roztoky sú vhodné na intraartikulárne, intramuskulárne a subkutánne injekčné účely.

Príprava všetkých týchto roztokov za sterilných podmienok sa lahko vykonáva štandardnými farmaceutickými technikami dobre známymi odborníkom v odbore. V prípade zvierat môžu byť zlúčeniny podávané intramuskulárne alebo subkutánne v dávkovacích hladinách asi 0,1 až 20 mg/kg/deň, výhodne asi 0,2 až asi 10 mg/kg/deň daných v jednotlivej dávke alebo v troch rozdelených dávkach.

Zlúčeniny vzorca II, kedf sú hydrolyzované in vitro na odstránenie L-Ala-L-Ala-dipeptidovej skupiny, majú tiež antibakteriálne aktivity. Takéto hydrolyzované zlúčeniny majú vzorec III η₂ν

Η

Π

ΌΗ

F

III

Antibakteriálna aktivita zlúčeniny vzorca III môže byt určená metódami dobre známi bežným odborníkom v odbore, ako sú metódy opísané v E. Steers et al. Antibiotics and Chemotherapy, 9, 307 (1959). Zlúčenina vzorca III, ked je skúšaná podía metódy opísanej hore, poskytla minimálnu inhibičnú koncentráciu (MIC) 6,25 gg/ml voči Streptococcus pyrogenes a 12,5 až 25 pg/ml voči početným kmeňom Streptococcus aureus.

Zlúčenina vzorca III môže byt formulovaná konvenčným spôsobom pri použití jedného alebo viacerých farmaceutický akceptovateiných nosičov. Tak môže byt zlúčenina vzorca III formulovaná na orálne, bukálne alebo rektálne podávanie.

Na orálne podávanie môžu mat farmaceutické kompozície zlúčeniny vzorca III formu napríklad tabliet alebo toboliek, pripravených konvenčnými prostriedkami s farmaceutický akceptovateinými excipientmi ako sú napríklad spojivové prostriedky, (napríklad predželatinizovaný kukuričný škrob, polyvinylpyrolidón alebo hydroxypropylmetylcelulóza), plnivá (napríklad laktóza, mikrokryštalická celulóza alebo fosforečnan vápenatý), lubrikanty (napríklad stearan horečnatý, talk alebo silika), dezintegranty (napríklad zemiakový škrob alebo škrobový glykolát sodný), namáčacie prostriedky (napríklad laurylsulfát sodný).

Kvapalné prípravky na orálne podávanie môžu mat formu napríklad roztokov, sirupov alebo suspenzií alebo môžu byt prezentované ako suchý produkt na konštitúciu s vodou alebo inými vhodnými vehikulami pred použitím. Takéto kvapalné prípravky môžu byt pripravené konvenčnými prostriedkami s farmaceutický akceptovateInými aditívami ako sú suspendačné prostriedky (napríklad sorbitolový sirup, metylcelulóza alebo hydrátované jedlé tuky), emulgačné prostriedky (napríklad lecitín alebo arabská guma), nevodné vehikulá (napríklad mandlový olej, olejové estery alebo etylalkohol) a konzervačné látky (napríklad metyl alebo propyl-p-hydroxybenzoáty alebo kyselina sorbová).

Na bukálne podávanie môže mat kompozícia zlúčeniny vzorca III formu tabliet alebo pastiliek formulovaných konvenčným spôsobom.

Zlúčenina vzorca III môže byt takisto formulovaná v rektálnych kompozíciách akú sú čapíky alebo retenčné klystíry, napríklad obsahujúce konvenčné čapíkové bázy ako je kakaové maslo alebo iné glyceridy.

Navrhované dávkovanie zlúčeniny vzorca III na orálne, rektálne alebo bukálne podávanie priemernému dospelému človekovi na liečbu bakteriálnej infekcie je medzi 0,1 až 500 mg/kg/deň, výhodne od asi 0,5 do asi 50 mg/kg/deň aktívnej zložky na dávkovaciu jednotku, ktorá by mala byt podávaná napríklad lx až 4x denne.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Nasledujúce príklady znázorňujú prípravu zlúčeniny a kompozícií tohto vynálezu. Teploty topenia sú nekorigované. NMR údaje sú označované v dieloch na milión (δ) a sú vztiahnuté k deutériovému stabilizačnému signálu z vzorkového rozpúšťadla (deuteriodimetylsulfoxid pokial nie je stanovené inak).

Komerčné reagensy boli použité bez ďalšieho čistenia. DMF sa vzťahuje k Ν,Ν-dimetylformamidu. Chromatografia sa vzťahuje k vysokotlakovej kvapalinovej chromatografii na HewlettPackard model 1100 Šerieš High Pressure Liquid Chromatograph^Reluujúcej s mobilným fázovým roztokom 40% acetonitrilu, 0,05M dihydrogenfosforečnanu draselného (KH₂PO₄) a 3% kyseliny chloristej (obj/obj) pri prietoku asi 2 ml za minútu na Puresil^R 5 mikrónovej C¹⁸ kremičitej HPLC kolóne (4,6.150 mm) s 20 mikrolitrovým injekčným objemom a s Hewlett-Packard 1100 Šerieš Dióde Array Detector^R s detektorom nastaveným na záznam pri vlnovej dĺžke 270 nm. HPLC kolóna sa použije pri okolitej teplote. Teplota miestnosti alebo okolitá teplota sa vzťahuje k 20 až 25’C. Všetky nevodné reakcie boli vykonávané pod atmosférou dusíka pre pohodlie a maximálne výťažky. Koncentrácia pri zníženom tlaku znamená, že sa použije ročná odparka.

Príklad 1

Vsádzkové živicové spracovanie alatrofloxacínmezylátu

Alatrofloxacínmezylát (50 g) obsahujúci približne 700 ppm oligomérnej nečistoty naviac k dalším menej polárnym nečistotám, bol rozpustený v 0,05% vodnej metánsulfónovej kysep line (714 ml) a potom bola pridaná Mitsubishi Diacon HP-20 hydrofóbna živica (50 g). Po miešaní živicovej brečky počas hodín v tme, bola brečka prefiltrovaná a roztok bol analyzovaný vysokotlakovou kvapalinovou chromatografiou (HPLC). (HPLC podmienky boli také, aké sú opísané hore). Sfiltrovaný roztok obsahoval 19 ppm oligomérnej nečistoty pri 80% získanom výťažku alatrofloxacínmezylátu.

Oligomér mal nasledujúce NMR (¹H NMR DMSO dg) S:

9,98(d,lH), 8,79(S,1H), 8,51(s,lH), 8,45(d,lH), 8,16(d,lH),

8,03(d,lH), 7,92(d,lH), 7,76(m,2H), 7,61(m,2H), 7,33(m,lH),

4,18(q,lH), 3,77(q,lH), 3,60(m,8H), 2,54(s,lH), 2,34(s,lH),

2,27(s,3H), l,92(bS,2H), l,72(bs,2H), l,28(d,3H), l,17(d,3H)

Príklad 2

Živicové stĺpcové spracovanie alatrofloxacínmezylátu

Alatrofloxacínmezylát bol rozpustený v 10 až 40 1 vody na kg liečivej látky pri teplote okolia. Roztok bol prefiltrovaný a potom nechaný prechádzať cez (3 až 5 vrstvových objemov za hodinu) stĺpec obsahujúci hydrátovanú Amberchrom CG-161^r polystyrénovú živicu (približne 10 až 12 kg surového reakčného produktu na kg suchej živice). Stĺpec bol premytý vodou (3 1 na kg surového reakčného produktu) a potom eluentom a premývky boli zlúčené. Spracovaný alatrofloxacínmezylátový roztok bol analyzovaný HPLC. Stĺpcové spracovanie s polystyrénovou živicou znížilo hladinu nečistoty vzorca II z 500 ppm na menej ako 30 ppm vztiahnuté na liečivú látku. Navyše bolo liečivo získané v 95% výťažku z živice.

Príklad 3

Izolácia zwitteriónu

Roztok obsahujúci živicou upravený alatrofloxacínmezylát (10 g) (pripravený v príkladoch 1 alebo 2), deionizovanú vodu (154 ml) a etanol (31 ml) bol neutrálizovaný na pH asi

6,5 až 7,5 prídavkom 10% vodného lúhu po kvapkách. Suspenzia bola granulovaná počas 30 minút pri 24’C a potom sfiltrovaná. Potom, ako boli sfiltrované tuhé látky omyté etanolom (30 ml) bol zwitterión vysušený za vákua pri 40°C počas asi 16 hodín. Bol získaný alatrofloxacín (800 g) v 95% výťažku ako biele trapezoidné kryštály.

Príklad 4

Tvorba alatrofloxacínmezylátu

Alatrofloxacínový zwitterión (25 g vlhkého koláča) ako bud vlhký koláč alebo suchý produkt, bol zlúčený s 10% vodným etanolom (242 nl) a potom bola pridaná metánsulfónová kyselina (1,9 ml) do brečky, čím sa nastavilo pH na asi 3,5 až 4,5. Reakčná zmes bola potom zahriata k ref luxu, prefiltrovaná a potom koncentrovaná pri atmosférickom tlaku na približne 1/2 svojho pôvodného objemu. Roztok bol potom ochladený na 0 až 5’C a výsledné tuhé látky boli granulované počas 1 hodiny. Po sfiltrovaní tuhých látok a premytí etanolom (39 ml) bol alatrofloxacínmezylát vysušený počas 24 hodín pri 40’C. Alatrofloxacínmezylát (17,7 g) vhodný na parenterálnu formuláciu bol izolovaný v 90% výťažku.

Príklad 5

Parenterálne kompozície vo fľaštičkách

Alatrofloxacínmezylát (314,46 mg), pripravený podľa príkladu 4, bol rozpustený v minimálnom množstve vody na injekcie, United States Pharmacopeia (WFI). Hodnota pH výsledného roztoku bola nastavená na pH 4 1% hm/hm roztokom kyseliny chlorovodíkovej, National Formulary (NF) vo vode na injekcie a/alebo 1% hm/hm roztokom hydroxidu sodného, Natio23 nal Formulary vo vode na injekcie a zriedený na koncentráciu 7,86 mg/ml. Výsledný roztok (40,12 g) bol sfiltrovaný a naplnený do 40ml fíaštičky a zazátkovaný. Zazátkovaná fíaštička bola sterilizovaná v autokláve pri 115°C počas 15 minút.

Príklad 6

Parenterálna kompozícia v ampulách ·*

Alatrofloxacínmezylát (314,4 mg), pripravený podía prí·. kladu 4, bol rozpustený v minimálnom množstve vody na injekcie, United States Pharmacopeia (WFI). pH výsledného roztoku bolo nastavené na hodnotu 4 pomocou 1% hm/hm roztoku kyseliny chlorovodíkovej, National Formulary (NF) vo vode na injekcie a/alebo 1% hm/hm roztokom hydroxidu sodného, National Formulary, vo vode na injekcie a zriedený na koncentráciu 7,86 mg/ml. Výsledný roztok (40,12 g) bol sfiltrovaný a naplnený do 40ml ampuly a utesnený. Utesnená ampula bola sterilizovaná autoklávom pri 115’C počas 15 minút.

Príklad 7

Lyofilizát •

Alatrofloxacínmezylát (314,46 mg), pripravený podía príkladu 4 a laktóza (500 mg, National Formulary), boli rozpustené v dostatočnom množstve vody na injekcie, United States Pharmacopeia, čím sa získala konečná hmotnosť 10 000 mg. Výsledný roztok bol sfiltrovaný a naplnený do 20ml fíaštičky. Naplnená fíaštička bola lyofilizovaná počas 24 hodín za vákua 0,1 atmosféry a potom bola fíaštička zazátkovaná a utesnená. Utesnená fíaštička bola sterilizovaná spracovaním v autokláve pri 115’C počas 15 minút.

Príklad 8

Izotonická parenterálna kompozícia vo flaštičkách

Dextróza (500 mg, United States Pharmacopeia) a alatrofloxacínmezylát (314,46 mg), pripravený podlá príkladu 4, boli rozpustené v minimálnom množstve vody na injekcie (United States Pharmacopeia) a pH bolo nastavené na hodnotu 4 1% hm/hm roztokom kyseliny chlorovodíkovej (National Formulary) vo vode na injekcie a/alebo 1% hm/hm roztokom hydroxidu sodného vo vode na injekcie (United States Pharmacopeia) a zriedený na koncentráciu 3,14 mg/ml. Výsledný roztok (101,7

g) bol sfiltrovaný a naplnený do 40ml flaštičky a zazátkovaný. Zazátkovaná flaštička bola sterilizovaná v autokláve pri 115°C počas 15 minút.

Príklad 9

Izotonická parenterálna kompozícia v amuplách

Dextróza (500 mg, United States Pharmacopeia) a alatrofloxacínmezylát (314,4 mg), pripravený podlá príkladu 4, boli rozpustené v minimálnom množstve vody na injekcie, (United States Pharmacopeia) a pH bolo nastavené na pH 4 pomocou 1% hm/hm roztoku kyseliny chlorovodíkovej, (National Formulary) vo vode na injekcie a/alebo 1% hm/hm roztokom hydroxidu sodného vo vode na injekcie (United States Pharmacopeia) a zriedený na koncentráciu 3,14 mg/ml. Výsledný roztok (101,7 g) bol sfiltrovaný a naplnený do 100ml ampuly a utesnený. Utesnená ampula bola sterilizovaná v autokláve pri 115°C počas 15 minút.

Príklad 10

Metánsulfonát L-Alanyl-N-[3-[6-[[[3-[6-karboxy-8-(2,4difluórfenyl)-3-fluór-5,8-dihydro-5-oxo-l,8-naftyridín2-y1]-3-azabicyklo[3,1,0]hex-6-yl]amino]karbonyl]-8-(2,4difluórfenyl)-3-fluór-5,8-dihydro-5-oxo-l,8-naftyridín-2yl-[3-azabicyklo[3,1,0]hex-6-yl]-L-alanínu

250ml jednohrdlá banka s gulatým dnom opatrená refluxným chladičom a magnetickou miešacou tyčinkou bola vypláchnutá a potom udržovaná pod atmosférou suchého dusíka. Bol pridaný etylester (Ια,5α,6a)-7-(6-amino-3-azabicyklo[3,1,0]hex-3yl)-1-(2,4-difluórfenyl)-6-fluór-1,4-dihydro-4-oxo-l,8naftyridín-3-karboxylovej kyseliny (2,50 g, 5,62 mmol) (pripravený podlá spôsobu opísaného v Medzinárodnej patentovej publikácii W097/00268), (la,5a,6a)-N-[(1,1-dimetyletoxy)karbonyl]-L-alanyl-N-[3-[8-(2,4-difluórfenyl)-6-karboxy-3-fluór-5,8-dihydro-5-oxo-l,8-naftyridín-2-yl]-3-azabicyklo[3,l,0]hex-6-yl]-L-alanínamid (3,37 g, 5,11 mmol) (pripravený spôsobom opísaným v Medzinárodnej patentovej publikácii WO 97/08191) a 100 ml metylénchloridu do tejto banky, čím sa získala biela brečka. Potom bol pridaný 4-dimetylaminopyridín (0,37 g, 3,07 mmol) a brómtrispyrolidinofosfóniumhexafluórfosfát (2,86 g, 6,14 mmol) do reakčnej zmesi a pomaly bolo pridaných 1,8 ml diizopropylatánamínu (10,2 mmol) počas 30 minút.

Reakčná zmes bola miešaná pri 25 až 30’C cez noc a potom chromatografia na tenkej vrstve [Merck Kieselgel 60 F254 silikové doštičky (5.10 cm), pri použití eluentu hydroxid amónny/metanol/metylénchlorid (1:10:90)] ukázala, že reakcia bola kompletná. Hustá brečka bola sfiltrovaná, filtračný koláč bol premytý metylénchloridom (2.20 ml) a potom vysušený za vákua pri 25 až 30°C, čím sa získalo 4,63 g (83% výťažok) dvojchráneného medziproduktu, prekurzoru zlúčeniny vzorca II.

NMR (CDC1₃)í S

8,58(s,lH), 8,35(s,lH), 8,02(d,J=12,7Hz,1H), 7,96(d,J= 12,5Hz,lH), 7,33(m,2H), 7,05(m,6H), 6,70(m,lH), 5,24(m,lH),

4,39(q,J=7,26Hz,1H), 4,33(q,J=7,26Hz,2H), 4,03(q,J=1,7Hz,

1H), 3,87(m,4H), 3,55(m,4H), 2,66(s,lH), 2,40(s,lH), 1,87 (m,4H), l,41(s,9H) a l,35(m,9H). FABMS: m/z 1086 (MH⁺).

Metánsulfónová kyselina (1,4 ml) a voda (3,1 ml) boli pridané do dvojchráneného medziproduktu (4,63 g, 4,28 mmol) suspendovaného v 135 ml l-metyl-2-pyrolidinónu. Roztok bol vytvorený po zahriatí reakčnej zmesi počas 15 minút na 80 až 85’C a reakcia bola v podstate dokončená po zahrievaní počas ďalších 48 až 58 hodín pri teplote 80 až 85C. Roztok bol ochladený na teplotu miestnosti a pomaly bolo pridaných 270 ml metylénchloridu.

Výsledná brečka bola miešaná počas dvoch dní pri teplote miestnosti a potom sfiltrovaná. Tuhá látka bola vysušená pri zníženom tlaku, čím sa získali 4,0 g surového produktu. Zrnitá tuhá látka bola rozdrvená tíčkom v mažiari a potom suspendovaná 160 ml metylénchloridu. Po miešaní brečky počas 24 hodín pri teplote miestnosti bola tuhá látka prefiltrovaná a potom vysušená na vzduchu, čím sa získala zlúčenina vzorca II ako mezylátová sol (3,20 g 75% výťažok).

¹H NMR (DMSO-d₆): δ

9,98(d,lH), 8,79(s,lH), 8,51(s,lH), 8,45(d,lH), 8,16(d,lH),

8,03(d,J=12,6Hz,1H), 7,92(d,J=12,9Hz,1H), 7,76(m,2H), 7,61 (m,2H), 7,33(m,2H), 4,18(q,J=6,85Hz,lH), 3,77(q,J=7,06Ηζ,1Η), 3,60(m,8H), 2,54(s,lH), 2,34(s,lH), 2,27(s,3H), l,92(s,2H),

- 27 l,72(s,2H), l,28(d,J=6,85Hz,3H) a 1,17(d,J=7,06Hz,3H).

FABMS: m/z 957 (M=CH₃SO₃H).

Príklad 11

Metánsulfonát (Ια,5a,6a)-7-(6-amino-3-azabicyklo[3,1,0]hex-3-yl)-1-(2,4-difluórfenyl)-6-fluór-4-oxo-l,4-dihydro1.8- naftyridín-3-karboxamido]-(la,5a,6a)-3-azabicyklo[3,1,0]hex-3-yl)-1-(2,4-difluórfenyl)-6-fluór-4-oxo-l,4-dihydro-l,8naftyridín-3-karboxylovej kyseliny

Do 20ml banky s guľatým dnom, ktorá bola opatrená refluxným chladičom, magnetickou miešacou tyčinkou a vstupom pre dusík bola pridaná (la,5a,6a)-(2,4-difluórfenyl)-7-[6-[[(1,1-dimetyletoxy)karbonyl]amino]-3-azabicyklo[3,1,0]hex-3-yl)-6fluór-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naftyridín-3-karboxylová kyselina (232 mg, 045 mmol) (pripravená podľa spôsobu opísaného v US patente 5 164 402), trietylamín (1,14 g, 11,3 mmol),

2,0 ml 50% hm/hm roztoku cyklického anhydridu 1-propánfosfónovej kyseliny (1,43 g, 4,50 mmol) v etylacetáte a 10 ml tetrahydrofuránu (THF). Výsledná žltastá suspenzia bola udržovaná pod inertnou atmosférou dusíka.

V samostatnej banke, ktorá bola opatrená magnetickou miešacou tyčinkou a tlakovým vyrovnávacím prídavným lievikom bola pripravená suspenzia etylesteru (la,5a,6a)-7-(6-amino3-azabicyklo[3,1,0]hex-3-yl)-1-(2,4-difluórfenyl)-6-fluór1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naftyridín-3-karboxylovej kyseliny (200 mg, 0,45 mmol) (pripraveného spôsobom opísaným v Medzinárodnej patentovej publikácii W097/00268) v 5 ml THF. Žltá suspenzia obsahujúca trietylamín bola naliata do prídavného lievika a potom pomaly pridaná počas 20 minút do banky obsahujúcej etylester (la,5a,6a)-7-(6-amino-3-azabicyklo[3,l,0]hex-3-yl)-1-(2,4-difluórfenyl)-6-fluór-1,4-dihydro-4-oxo1.8- naftyridín-3-karboxylovej kyseliny. Zmes bola miešaná počas 6 hodín pri teplote miestnosti, keď chromatografie na tenkej vrstve [Merck Kieselgel 60 F₂₅₄ kremičité dosky (5.10 cm), pri použití eluentu metanol/metylénchlorid (1:9)] ukázala, že reakcia bola úplná.

Žltá suspenzia bola naliata do 70 ml vody a pH nastavené na pH 3,0 2M kyselinou chlorovodíkovou. Vodný roztok bol extrahovaný 70 ml metylénchloridu a potom bol metylénchloridový roztok premytý vodou (70 ml). Metylénchlorid bol odstránený pri zníženom tlaku, čím sa získala surová tuhá látka (449 mg), ktorá bola triturovaná 5 ml etanolu počas 6 hodín.

Brečka bola prefiltrovaná, tuhá látka premytá 2 ml etanolu a potom vysušená za vákua počas 18 hodín pri 45^eC, čím sa získalo 304 mg (72% výtažok) dvojchráneného medziproduktu zlúčeniny vzorca III ako biela kryštalická tuhá látka. T.t. 248-251’C.

^ΣΗ NMR (CDC1₃): δ 10,0(d,2H), 8,60(s,lH) 7,33(m,2H)

3,05(m,3H)

1,59(S,9H)

8,35(s,lH), 8,05(d,lH), 4,70(m,lH), 4,36(q,2H),

7,05(m,4H)

2,68(S,1H), 2,23(S,1H), l,86(m,2H), a l,38(t,3H). FABMS: m/z 943 (M⁺).

7,96(d,lH), 3,92(m,3H), l,77(m,2H),

Metánsulfónová kyselina (0,07 ml) a voda (0,16 ml) boli pridané do dvojchráneného medziproduktu (240 mg, 0,25 mmol) suspendovaného v 7 ml l-metyl-2-pyrolidinónu. Reakčná zmes bola zahrievaná počas 50 až 58 hodín pri teplote 80 až 85’C.

Roztok bol potom ochladený na teplotu miestnosti a pomaly bolo pridaných 14 ml metylénchloridu. Výsledná brečka bola miešaná počas 2 dní pri teplote miestnosti a potom sfiltrovaná. Tuhá látka bola vysušená pri zníženom tlaku, čím sa získalo 110 mg surového produktu. Surová tuhá látka bola triturovaná 3 ml zmesi metylénchlorid/metanol (1:1) počas 4 hodín.

Tuhá látka bola vysušená za vákua pri teplote 45’C, čím sa získala zlúčenina vzorca III ako mezylátová sol (105 mg, 45% výťažok). Teplota topenia bola vyššia ako 230“C.

'H NMR zaznamenaná v trifluóroctovej kyseline ukázala absenciu BOC a etylesterových chrániacich skupín a bola konzistentná so štruktúrou zlúčeniny vzorca III.

FABMS: m/z 815 (M-CH₃SO₃H).

Claims

1. Spôsob čistenia zlúčeniny vzorca I vyznačujúci sa t ý m, že sa spracuje nečistý reakčný produkt obsahujúci uvedenú zlúčeninu vzorca I a menej polárne nečistoty, s hydrofóbnou živicou.

2. Spôsob podía nároku 1,vyznačujúci sa tým, že menej polárne nečistoty majú retenčný čas asi 2,1 minút až asi 30 minút.

3. Spôsob podía nároku 1,vyznačujúci sa tým, že menej polárne nečistoty majú retenčný čas asi 9 až asi 12 minút.

4. Spôsob podía nároku 1,vyznačujúci sa tým, že jedna z uvedených menej polárnych nečistôt má vzorec II ;n)

5. Spôsob podlá nároku 1,vyznačujúci sa tým, že uvedené nečistoty po spracovaní obsahujú menej ako 60 ppm vo vzťahu k celkovej hmotnosti vyčisteného produktu .

6. Spôsob podlá nároku 1,vyznačujúci sa tým, že uvedené nečistoty po spracovaní obsahujú menej ako 20 ppm vo vzťahu k celkovej hmotnosti vyčisteného produktu.

7. Spôsob podlá nároku 1,vyznačujúci sa tým, že hydrofóbnou živicou je zositovaná polystyrénová živica.

8. Spôsob podlá nároku 1,vyznačujúci sa tým, že hydrofóbnou živicou je Diaion HP-20^R alebo Amberchrom CG-161^R.

9. Spôsob podlá nároku 3,vyznačujúci sa tým, že hydrofóbnou živicou je Diaion HP-20^R alebo Amberchrom CG-161^R.

10. Zlúčenina vzorca I

F v podstate bez menej polárnych nečistôt.

11. Zlúčenina podlá nároku 10,vyznačujúca s, tým, že uvedená zlúčenina vzorca I je v podstate bez zlú čeniny vzorca II.

12. Parenterálna kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje antibakteriálne účinné množstvo zlúčeniny vzorca I alebo jej farmaceutický akceptovatelnej soli v podstate bez menej polárnych nečistôt a farmaceutický akceptovatelný nosič.

13. Parenterálna kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje antibakteriálne účinné množstvo zlúčeniny vzorca I alebo jej farmaceutický akceptovatelnej soli v podstate bez zlúčeniny vzorca II a farmaceutický akcepto vatelný nosič.

14. Parenterálna kompozícia podlá nároku 10, v y z n a čujúca sa tým, že obsahuje zlúčeninu vzorca I a vodu.

15. Parenterálna kompozícia podía nároku 10, vyznačujúca sa tým, že zlúčenina vzorca I je lyofilizát.

16. Parenterálna kompozícia podía nároku 11, v y z nečujúca sa tým, že zlúčenina vzorca I obsahuje asi 10 mg až asi 700 mg zlúčeniny v jednotkovom dávkovom obale.

17. Parenterálna kompozícia podía nároku 11, v y z nadujúca sa tým, že zlúčenina vzorca I obsahuje asi 275 mg až asi 500 mg zlúčeniny v jednotkovom dávkovom obale.

18. Parenterálna kompozícia podía nároku 10, v y z n a čujúca sa tým, že zlúčenina vzorca I zahŕňa asi 10 mg až asi 700 mg zlúčeniny v jednotkovom dávkovom obale.

19. Parenterálna kompozícia podía nároku 10, vyznačujúca sa tým, že zlúčenina vzorca I zahŕňa asi 275 mg až asi 500 mg zlúčeniny v jednotkovom dávkovom obale

20. Zlúčenina vzorca II t II)

21. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje antibakteriálne účinné množstvo zlúčeniny podlá nároku 20 alebo jej farmaceutický akceptovatelnej soli.

22. Spôsob liečby bakteriálnej infekcie, vyznačujúci sa tým, že sa podáva subjektu postihnutému bakteriálnou infekciou antibakteriálne účinné množstvo zlúčeniny podlá nároku 20.

23. Zlúčenina vzorca III

24. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje antibakteriálne účinné množstvo zlúčeniny podlá nároku 23 alebo jej farmaceutický akceptovatelnej soli.

25. Spôsob liečby bakteriálnej infekcie, vyznačujúci sa tým, že sa podáva subjektu postihnutému bakteriálnou infekciou antibakteriálne účinné množstvo zlúčeniny podlá nároku 23.