SK10112000A3 - Inhibítory matričných metaloproteináz, spôsoby ich výroby a farmaceutické kompozície na ich báze - Google Patents

Inhibítory matričných metaloproteináz, spôsoby ich výroby a farmaceutické kompozície na ich báze Download PDF

Info

Publication number
SK10112000A3
SK10112000A3 SK1011-2000A SK10112000A SK10112000A3 SK 10112000 A3 SK10112000 A3 SK 10112000A3 SK 10112000 A SK10112000 A SK 10112000A SK 10112000 A3 SK10112000 A3 SK 10112000A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
formula
compounds
phenyl
solvates
amino
Prior art date
Application number
SK1011-2000A
Other languages
English (en)
Inventor
Michael Jonathan Fray
Roger Peter Dickinson
Kevin Neil Dack
Original Assignee
Pfizer Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GBGB9800510.1A external-priority patent/GB9800510D0/en
Priority claimed from GBGB9811843.3A external-priority patent/GB9811843D0/en
Application filed by Pfizer Inc. filed Critical Pfizer Inc.
Publication of SK10112000A3 publication Critical patent/SK10112000A3/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/22—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton having nitrogen atoms of amino groups bound to the carbon skeleton of the acid part, further acylated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C259/00—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C259/04—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups without replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group, e.g. hydroxamic acids
    • C07C259/06—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups without replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group, e.g. hydroxamic acids having carbon atoms of hydroxamic groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C259/00—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C259/12—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. N-hydroxyamidines
    • C07C259/18—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. N-hydroxyamidines having carbon atoms of hydroxamidine groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings
    • C07D317/32—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D317/34—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/07—Optical isomers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/08—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being five-membered, e.g. indane
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Oblasť techniky
Vynález sa týka určitých zlúčenín a ich farmaceutický vhodných solí, ktoré inhibujú matričné metaloproteinázy (MMP), najmä MMP-3, MMP-12 a MMP-13, a farmaceutických kompozícií a spôsobov liečenia na ich báze. Tieto zlúčeniny sú teda užitočné pri liečení savcov trpiacich stavmi, ktoré je možné zmierňovať inhibíciou MMP, najmä MMP-3, MMP-12 a MMP-13.
Doterajší stav techniky
Matričné metaloproteinázy (MMP) tvoria triedu štruktúrne podobných metaloproteináz obsahujúcich zinok, ktoré sa zúčastňujú remodelácie, opravy a degradácie extracelulárnych matričných proteínov, a to ako pri normálnych fyziologických procesch, tak aj patologických stavoch. Pretože MMP majú vysoký deštrukčný potenciál, sú prísne regulované a zlyhanie regulácie MMP môže byť súčasťou radu chorôb a patologických stavov. Ako príklady stavov, pri ktorých sa predpokladá dôležitá rola MMP je možné uviesť prestavbu kostí, implantáciu embrya v delohe, infiltráciu imunitných buniek do miest zápalu, ovuláciu, spermatogenéziu, prestavbu tkanív počas hojenia rán a diferenciáciu orgánov, ku ktorým dochádza v žilných a diabetických vredoch, preležanín, vredov hrubého čreva, napríklad pri ulceróznej kolitis a Crohnovej chorobe, duodenálnych vredov, fibrózy, miestnej invázii nádorov do susedných oblastí, metastatického šírenia nádorových buniek z primárnych na sekundárne miesta, tkanivovej deštrukcie v artritis, kožnej poruchy, ako je dystrofická epidermolysis bulóza, dermatitis herpetiformis alebo stavoch vyvolaných alebo komplikovaných embolickými javmi, ako sú chronické alebo akútne srdečné alebo mozgové infarkty.
Stavy, pri ktorých sa predpokladá účasť MMP-3 a MMP-13 zahŕňajú deštrukciu tkaniva, ako je to pri žilných a diabetických vredoch, preležanín, vredoch hrubého čreva, napríklad pri ulceróznej kolitis a Crohnovej chorobe, duodenálnych vredoch a deštrukcii tkaniva u artritis, kožných porúch, ako je dystrofická epidermolysis bulóza, dermatitis herpetiformis alebo stavy vyvolané alebo komplikované embolickými javmi, ako sú chronické alebo akútne srdečné alebo mozgové infarkty.
Ďalšou dôležitou funkciou určitých MMP je aktivácia iných enzýmov, ako sú iné MMP, vyštiepenim prodomény z ich proteinázovej domény. Niektoré MMP teda regulujú aktivity iných MMP, takže nadprodukcia jednej MMP môže viesť na nadmernú proteolýzu extraceluiárnej matrice inou MMP.
Má sa za to, že nadprodukcia MMP-3 je zodpovedná za patologickú degradáciu tkanív, ktorá je základom radov chorôb a stavov. Napríklad MMP-3 bola nájdená v synoviu a chrupavke pacientov postihnutých osteoartritis a reumatoidnou artritis, čo teda preukazuje účasť MMP-3 na poškodení kĺbov vyvolanom týmito chorobami (pozri K. L. Sirum, C. E. Brinkerhoff, Biochemistry, 1989, 28, 8691; a Z. Gunja-Smith, H. Nagasse, J. F. Woessner, Biochem. J. 1989, 258, 115) . 0 MMP-13 sa tiež predpokladá, že hrá významnú úlohu v patológii osteoartritis a reumatoidný artritis (M. Stahle-Backdahle, B. Sandstedt, K.
Bruce, A. Lindahl, M. G. Jimenez, J. A. Vega, C. Lopez Otin, Lab. Invest., 1997, 76, 717 až 728; a 0. Lindy, Y. T. Konttinen, T. Sorsa, Y. Ding, S. Santavirta, A. Ceponis, C. Lopez Otin, Arthritis Rheum., 1997, 40, 1391 až 1399).
Nadexpresia MMP-3 sa rovnako pokladá za zodpovednú za veľa tkanivových poškodení a chronických stavov alebo chronických rán, ako sú žilné vredy, diabetické vredy a preležaniny (pozri M. Vaalamo, M. Weckroth, P. Puoakkainen, J. Kere, P. Saarinen, J. Lauharanta, U. K. Saarialho-Kere, Brit.
J. Dermatology, 1996, 135, 52 až 59).
Počas hojenia normálnych a chronických rán je MMP-1 exprimovaná migrujúcimi keratinocytmi na okrajoch rany (U. K. Saarialho-Kere, S. 0. Kovacs, A. P. Pentland, J. Clin. Invest.
1993, 92, 2858 až 2866). Existuje dôkaz, na ktorého základe je možné usúdiť, že MMP-1 je nutná na migráciu keratinocytov na matrici kolagénu typu I in vitro, a je celkom inhibovaná prítomnosťou neselektívneho inhibítora MMP, látky SC44463 ( (N4-hydroxy)-Nl-[(1S)-2-(4-metoxyfenyl)metyl-1-((ÍR)metylamíno)karbonyl)]-(2R)-2-(2-metylpropyl)butandiamídu) B.
K. Pilcher, J. A. Dumin, B. D. Sudbeck, S. M. Krane, H. G.
Welgus, W. C. Parks, J. Celí. Biol., 1997, 137, 1 až 13).
Migrácia keratinocytov in vivo je nutná, aby došlo na efektívne zahojenie rán.
Zdá sa, že MMP-2 a MMP-9 hrajú dôležitú úlohu pri hojení rán počas fázy zvýšenej prestavby (MMP-2) a nástupu reepitelizácie (MMP-9) (M. S. Agren, Brit. J. Dermatology,
1994, 131, 634 až 640; T. Salo, M. Mäkänen, M. Kylmäniemi,
Lab. Invest., 1994, 70, 176 až 182). Účinný neselektívny inhibitor MMP BB94 ((2S,3R)-5-metyl-3-{[(1S)-1-(metylkarbamoyl)-2-fenyletyl]karbamoyl}-2-[(2-tienyltio)metyl]hexanohydroxamová kyselina, batimastat) inhibuje inváziu základu membrány endoteliálnymi bunkami, Čím inhibuje angiogenéziu (G. Tarboletti, A. Garofalo, D. Belotti, T. Drudis, P. Borsotti, E. Scanziani, P. D. Brown, R. Giavazzi, J. Natl. Cancer Inst., 1995, 87, 293 až 298). Existuje teda dôkaz, že tento proces vyžaduje aktívny MMP-2 a/alebo 9.
neselektívnych inhibítoroch MMP, ktoré inhibujú MMP 1 a/alebo 2 a/alebo 9, sa teda má za to, že zhoršujú hojenie rán. Ako je už uvedené vyššie, MMP-14 je zodpovedná za aktiváciu MMP-2, a inhibície MMP-14 teda tiež môže viesť na zhoršené hojenie rán.
Predpokladá sa tiež, že produkcia MMP-3 sa tiež zúčastní na poškodení tkaniva pri stavoch, keď dochádza na ulceráciu tračníka (ako je ulcerózny kolotis a Crohnova choroba, pozri S. L. Pender, S. P. Tickle, A. J. Docherty, D. Howie, N. C. Wathen, T. T. MacDonald, J. Immunol., 1997, 158, 1582; C. J.
Bailey, R. M. Hembry, A. Alexander, M. H. Irving., M. E. Grant, C. A. Shuttleworth, J. Clin. Pathol., 1994, 47, 113 až 116) alebo dvanástnika (pozri U. K. Saarialho-Kere, M. Vaalamo, P. Puolakkainen, K. Airola, W. C. Parks, M. L. Karjalainen-Lindsberg, Am. J. Pathol., 1996, 148, 519 až 529). Rovnako je pravdepodobné, že MMP-1 a MMP-2 sú potrebné počas fázy hojenia týchto stavov. Selektívny inhibitor MMP-3 by bol účinnejší ako neselektívny inhibitor.
MMP-3 sa tiež má za to, že sa podiela na chorobách kože, ako je dystrofická epidermolysis bulóza (T. Sato, K. Nomura, I. Hashimoto, Árch. Dermatol. Res., 1995, 287, 428) a dermatitis herpetiformis (K. Airola, M. Vaalamo, T. Reunala, U. K. Saarialho-Kere, J. Invest. Dermatology, 1995, 105, 184 až 189).
Ruprura aterosklerotických plakov, na ktorej sa podieľa MMP-3, môže viesť na srdečný alebo mozgový infarkt (F. Mach et al., Circulation, 1997, 96, 396 až 399). Inhibítory MMP-3 preto môžu byť užitočné pri liečení stavov vyvolaných alebo komplikovaných embolickými fenoménmi, ako je chronický alebo akútny srdečný alebo mozgový infarkt.
O MMP-12 (makrofágovej elastáze) sa predpokladá, že sa podieľa na patológii aterosklerózy, gastrointestinálnych vredov a emfyzému. Napríklad pri rozvíjajúcej sa ateroskleróze v modeli králika je MMP-12 v hojnej miere exprimovaná makrofágovými penovými bunkami (S. Matsumoto et al., Am. J. Pathol. 1998, 153, 109). MMP-12 je tiež hojne exprimovaná makrofágmi v blízkom okolí ubúdajúcej mukosálnej výstelky pri gastrointestinálnych vredoch človeka, ako je to pri pacientoch s ulceróznou kolitis a Crohnovou chorobou (M. Vaalamo et al., Am. J. Pathol., 1998, 152, 1005). Má sa za to, že MMP-12 hrá dôležitú úlohu pri progresii poškodenia pľúc cigaretovým dymom. Pri modeli emfyzému indukovaného cigaretovým dymom boli myši bez génu na MMP-12 odolné proti rozvoju tohto stavu, zatiaľ čo myši divokého typu utrpeli výrazné poškodenie pľúc (R. D. Hautamaki et al., Science, 1997, 277, 2002).
Prehľadné články o MMP je možné nájsť v Zask et al.,
Current Pharmaceutical Design, 1996, 2, 624 až 661; Beckett,
Exp. Opin. Ther. Patents, 1996, 6, 1305 až 1315; a Beckett et al., Drug Discovery Today, sv. 1 (č. 1), 1996, 16 až 26.
Alternatívne názvy rôznych MMP a ich substrátov uvedené v nasledujúcej tabuľke (Zask et al., vyššie).
Tabuľka sú
Enzým Iný názov Preferované substráty
MMP-1 kolagenáza-1; intercticiál- na kolagenáza kolagény I, II, III, VII, X; želatíny
MMP-2 želatináza A; 72kDa želatináza želatíny; kolagény IV V, VII, X; elastín, fibronektín; aktiváty pro-MMP-13
MMP-3 stromelysín-1 proteoglykány; laminín fibronektín; želatíny;
MMP-7 pumpa, matrilysín proteoglykány; laminín fibronektín; želatíny; kolagén IV; elastín; aktiváty pro-MMP-1 a
MMP-8 kolagenáza-2; neutro- filná kolagenáza kolagény I, II, III
MMP-9 želatináza B; 92kDa želatináza želatíny; kolagény IV, V; elastín
MMP-12 makrofágová metaloelastáza elastín; kolagén IV; fibronektín; aktiváty pro-MMP-2 a -3
MMP-13 kolagénáza-3 kolagény I, II, III; želatíny
MMP-14 MT-MMP-1 aktiváty pro-MMP-2 a pro-MMP-13; želatíny
MMP-15 MT-MMP-2 neznáme
MMP-16 MT-MMP-3 aktiváty pro-MMP-2
MMP-17 MT-MMP-4 neznáme
Rad publikácií, vrátane niektorých publikácií citovaných vyššie, opisuje zlúčeniny všeobecného vzorca GENMMP
(GENMMP) kde A je známa ako alfa skupina a XCO predstavuje skupinu, ktorá viaže zinok, ako je zvyšok karboxylovej kyseliny alebo hydroxamovej kyseliny, ako inhibítory MMP.
V prehľadnom článku Beckett et al., citovanom vyššie, sa uvádza, že v polohe P2' je tolerované velké množstvo rôznych skupín, a ani to nemá výrazný vplyv na chovanie týchto zlúčenín.
V medzinárodnej patentovej prihláške WO96/33165 a WO96/33161 (British Biotech Pharmaceuticals Ltd.) sú genericky opísané zlúčeniny všeobecného vzorca GENMMP znázorneného vyššie, kde okrem iného Ρχ' predstavuje prípadne substituovanú fenylalkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti a P3' predstavuje skupinu CHRxRy, kde Rx a Ry predstavujú prípadne substituované fenylové alebo heteroarylové kruhy. 0 týchto zlúčeninách sa uvádza, že sú selektívnymi inhibítormi MMP-3 a MMP-7 vzhladom na ludskú fibroblastovú kolagenázu (MMP-1) a 72kDa želatinázu (MMP-2).
V medzinárodnej patentovej prihláške WO96/16027 (Syntex
Inc. a Agouron Pharmaceuticals Inc.) sú opísané inhibítory MMP všeobecného vzorca GENMMP znázorneného vyššie, kde skupina COX zahŕňa CO2H a CONHOH, Ρχ' predstavuje skupinu R2X, ktorá zahŕňa prípadne substituovanú arylalkylénskupinu s 0 až 4 atómami uhlíka v alkylénovej časti, a P3' predstavuje skupinu (CH2)PR7, kde p predstavuje číslo 0 až 4, pričom keď p nepredstavuje číslo 0, potom R2X predstavuje bifenylalkylskupinu, a R7 predstavuje arylskupinu alebo heteroarylskupinu. Zlúčeniny, kde p predstavuje číslo 0, 2 alebo 2, sú uvedené ako prednostné a zlúčeninám, kde p predstavuje číslo 0 a COX predstavuje skupinu CO2H alebo CONHOH sa dáva prednosť pri inhibícii matrilysínu (to je MMP-7).
Rad zlúčenín z uvedenej patentovej prihlášky WO96/16027 všeobecného vzorca GENMMP bol opísaný skupinou Agouron (2nd Winter Conference on Medicinal and Bioorganic Chemistry, Steamboat Springs, Colorado, USA, január 1997), napríklad kde X predstavuje hydroxyskupinu, P/ predstavuje prípadne 4'substituovanú biarylpropylskupinu, P2' predstavuje izobutylskupinu a P3' predstavuje 4metoxykarbonylfenylskupinu. O týchto zlúčeninách sa uvádza, že majú zlú až strednú MMP-3/MMP-2 selektivitu. Zistilo sa, že použitie alfa-substituentu a nahradenie 4metoxykarbonylfenylového zvyšku 4-metyltiofenylskupinou velmi zvyšuje MMP-3/MMP-2 selektivitu.
V Beckettovom prehľadnom článku (pozri vyššie) je tiež zmienená zlúčenina skupiny Agouron (č. 31 prehľadu) všeobecného vzorca GENMMP, kde X predstavuje hydroxyskupinu, P/ predstavuje bifenylpropylskupinu, P2' predstavuje terc.butylskupinu a P3' predstavuje 4-pyridylskupinu. Táto zlúčenina má takmer rovnaké hodnoty ΚΛ pre MMP-3 a MMP-2, takže nie je selektívna pre MMP-3 vzhľadom na MMP-2.
Medzinárodná patentová prihláška WO95/12603 (Syntex) opisuje zlúčeniny, o ktorých sa uvádza, že sú inhibítormi MMP3 a MMP-7, všeobecného vzorca GENMMP znázorneného vyššie, kde P3' predstavuje substituovaný fenylový zvyšok a Pi' zahŕňa arylalkylskupinu.
Teraz bola vyvinutá skupina zlúčenín inhibujúcich MMP s dobrou aktivitou pre MMP-3, MMP-12 a MMP-13 a dobrou selektivitou pre MMP-3 oproti ostatným MMP, ako MMP-1, 2, 9a 14. Zistilo sa, že v tejto skupine zlúčenín je selektivita pre MMP-3 velmi závislá na konkrétnej kombinácii substituentov Ρχ' a P3', čo je výsledok, ktorý na základe vyššie opísaného doterajšieho stavu techniky nebolo možné predvídať.
Podstata vynálezu
kde
R1 predstavuje vodík, hydroxyskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka alebo alkenylskupinu s 2 až 4 atómami uhlíka;
R2 predstavuje alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovanú fluórom, indolylskupinou, imidazolylskupinou, skupinou SO2-alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, cykloalkylskupinou s 5 až 7 atómami uhlíka alebo prípadne chránenou skupinou OH, SH, CONH2, CO2H, NH2 alebo NHC(=NH)NH2, cykloalkylskupinu s 5 až 7 atómami uhlíka prípadne substituovanou alkylskupinou s 1 alebo benzylskupinu prípadne uhlíka, prípadne až 6 atómami substituovanú alkoxyskupinou s hydroxyskupinou, chránenú až 6 atómami uhlíka, benzyloxyskupinou alebo benzyltioskupinou, pričom prípadné chrániace skupiny skupín OH, SH, CONH2, NH2 alebo NHC(=NH)NH2 sú zvolené zo súboru pozostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, benzylskupiny a alkanoylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a prípadné chrániace skupiny CO2H pozostávajúceho z alkyl skupiny s 1 benzylskupiny;
sú zvolené zo súboru až 6 atómami uhlíka a
R3, R5 a R6 predstavujú každý nezávislo vodík alebo fluór;
R4 predstavuje skupinu CH3, chlór alebo fluór;
X predstavuje
Y predstavuje
Z predstavuje skupinu HO alebo HONH;
priamu väzbu alebo kyslík;
buď skupinu všeobecného vzorca a
(a) 10 kde
R10 predstavuje alkylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, hydroxyalkylskupinu s 2 až 4 atómami uhlíka, karboxyalkylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovej časti alebo (amino alebo dimetylamíno)-alkylskupinu s 2 až 4 atómami uhlíka v alkylovej časti; a
R11 predstavuje fenylskupinu, naftylskupinu alebo pyridylskupinu, prípadne substituovanú až tromi substituentami nezávislo zvolenými z halogénu a metylskupiny;
alebo skupinu všeobecného vzorca b
(b) kde
R14 predstavuje vodík, OH, CH3 alebo halogén;
Ar predstavuje skupinu všeobecného vzorca c, d alebo e r’ rí
R’ R (d) kde
A predstavuje dusík alebo skupinu CR12;
B predstavuje dusík alebo skupinu CR13;
pričom A a B nepredstavujú oba dusík;
R7 a R9 predstavuje každý nezávislo vodík alebo fluór;
R8, R12 a R13 predstavuje každý nezávislo vodík, CN, alkyl skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyalkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alkoxylových častí, (amino alebo dimetylamíno)alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, CONH2, OH, halogén, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, piperazínylkarbonyl skupinu, piperidylskupinu, C(NH2)=NOH alebo C(=NH)NHOH, pričom aspoň dva z R8, R12 a R13 predstavujú vodík;
a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
Alkylskupiny, vrátane alkylových častí alkoxyskupín a alkenylskupín, môžu mať reťazec priamy alebo rozvetvený, v prípade, že to počet atómov uhlíka umožňuje.
Pod pojmom halogén sa rozumie fluór, chlór, bróm alebo jód.
Zlúčeniny podlá vynálezu sú inhibítory MMP a sú zvlášť účinnými a selektívnymi inhibítormi MMP-3, najmä s dobrou selektivitou vzhľadom na MMP-1, 2, 9 a/alebo 14. Niektoré zo zlúčenín podľa vynálezu okrem toho môžu vykazovať inhibičnú aktivitu na MMP-12 a/alebo MMP-13.
R1 prednostne predstavuje vodík, OH, alkylskupinu s 1 až atómami uhlíka alebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka. Vo výhodnejšom uskutočnení R1 predstavuje vodík, OH, npropylskupinu alebo etoxyskupinu. R1 najvýhodnejšie predstavuje vodík.
R2 prednostne predstavuje alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovanú indolylskupinou, alkyltioskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, skupinou SO2~alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, cykloalkylskupinou s 5 až 7 atómami uhlíka, hydroxyskupinou alebo skupinou SH; cykloalkylskupinu s až 7 atómami uhlíka prípadne substituovanú alkylskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka; alebo R2 predstavuje benzylskupinu. Vo výhodnejšom uskutočnení R2 predstavuje alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovanú hydroxyskupinou, skupinou SO2~alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka alebo cykloalkylskupinou s 5 až 7 atómami uhlíka; cyklohexylskupinu substituovanú alkylskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alebo R2 predstavuje benzylskupinu. V ešte výhodnejšom uskutočnení R2 predstavuje cyklohexylmetylskupinu, izopropylskupinu, 1metylcyklohexylskupinu, terc.butylskupinu, skupinu C (CH3) 2SO2CH3, benzylskupinu alebo C(CH3)2OH. R2 ešte výhodnejšie predstavuje izopropylskupinu, terc.butylskupinu alebo benzylskupinu, a najvýhodnejšie terc.butylskupinu.
V prednostnom uskutočnení Z predstavuje skupinu všeobecného vzorca a
(a) kde R10 predstavuje alkylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti alebo hydroxyalkylskupinu sa 2 až 4 atómami uhlíka, a R11 predstavuje fenylskupinu alebo pyridylskupinu, ktoré sú prípadne substituované až tromi substituentami nezávislo zvolenými z halogénu a metylskupiny; alebo Z predstavuje skupinu vzorca
Z výhodnejšie predstavuje skupinu všeobecného vzorca a
(a) kde R10 predstavuje alkylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti alebo hydroxyalkylskupinu sa 2 až 4 atómami uhlíka, a R11 predstavuje fenylskupinu, pyridín-4-ylskupinu alebo pyridín-3ylskupinu; alebo Z predstavuje skupinu vzorca
V ešte výhodnejšom uskutočnení Z predstavuje skupinu všeobecného vzorca a
H ‘R” kde R10 predstavuje CH3, CH2OCH3 alebo CH2OH, a R11 predstavuje fenylskupinu, pyridín-4-ylskupinu alebo pyridín-3-yl-skupinu, alebo Z predstavuje skupinu vzorca
R3 prednostne predstavuje vodík.
R4 prednostne predstavuje fluór, keď Y predstavuje kyslík.
R4 prednostne predstavuje chlór alebo CH3, keď Y predstavuje priamu väzbu.
R5 prednostne predstavuje vodík.
R6 prednostne predstavuje vodík.
Ar prednostne predstavuje skupinu všeobecného vzorca c
R*
R*
kde
A predstavuje skupinu CR12;
B predstavuje skupinu CR13;
R7 a R9 predstavuje každý nezávislo vodík alebo fluór;
R8 a R13 predstavuje každý nezávislo vodík, fluór, chlór, CN, CONH2, CH3 alebo OCH3; a
R12 predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, CN, hydroxyalkylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, (amino alebo dimetylamíno)alkylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, CONH2, OH, halogén, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, piperazínylkarbonylskupinu, piperidylskupinu, C(NHz)NOH alebo C(=NH)NHOH.
Vo výhodnejšom uskutočnení Ar predstavuje skupinu všeobecného vzorca c
(c) kde A predstavuje CR12, B predstavuje CR13 a R7, R8 a R9 predstavujú atómy vodíka.
Ešte výhodnejšie Ar predstavuje skupinu všeobecného vzorca c
R*
kde
A predstavuje skupinu CR12;
B predstavuje skupinu CR13;
R7, R8 a R9 predstavujú atómy vodíka;
R12 predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, CN, hydroxyalkylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, (amino alebo dimetylamíno)alkylskupinu sa 2 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, CONH2, OH, halogén, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, C(NH2)=NOH alebo C(=NH)NHOH; a
R13 predstavuje vodík, OCH3, CN, CONH2, CH3 alebo fluór.
Ešte výhodnejšie Ar predstavuje fenylskupinu, 3metoxyfenylskupinu, 4-kyanofenylskupinu, 3-kyanofenyl-skupinu,
3-karbamoylfenylskupinu alebo 4-hydroxyamidíno-fenylskupinu. Najvýhodnejšie Ar predstavuje fenylskupinu alebo 3metoxyfenylskupinu.
Prednosť sa dáva zlúčeninám, kde substituenty majú význam uvedený v príkladoch, pozri:
R1 predstavuje vodík, hydroxyskupinu, n-propylskupinu alebo etoxyskupinu;
R2 terc.butylskupinu, izopropylskupinu alebo benzylskupinu;
Z predstavuje skupinu všeobecného vzorca
kde
R10 predstavuje CH3, CH2OCH3 alebo CH2OH, a R11 predstavuje fenylskupinu, pyridín-4-ylskupinu alebo pyridín-3-ylskupinu, alebo
Z predstavuje skupinu vzorca
R3 predstavuje vodík;
R4 predstavuje CH3, chlór alebo fluór;
R5 predstavuje vodík;
R6 predstavuje vodík; a
Ar predstavuje fenylskupinu, 3-metoxyfenylskupinu, 4kyanofenylskupinu, 3-kyanofenylskupinu, 3karbamoylfenylskupinu alebo 4-hydroxyamidínofenylskupinu, a ich soliam.
Ďalšiu prednostnú skupinu zlúčenín tvoria zlúčeniny uvedené v príkladoch uskutočnenia a ich soli.
Najväčšia prednosť sa dáva zlúčeninám zvoleným z príkladov 3, 4, 8, 14, 15, 16, 22, 29, 30, 31 a 32 a ich soliam.
Farmaceutický vhodné soli sú odborníkom v tomto odbore dobre známe a zahŕňajú napríklad soli uvedené v dokumentoch citovaných vyššie v doterajšom stave techniky a publikácii Berge et al., J. Pharm. Sci., 66, 1 až 19 (1997). Vhodné adičné soli s kyselinami vznikajú s kyselinami, ktoré tvoria netoxické soli. Ako príklady takých solí je možné uviesť hydrochloridy, hydrobromidy, hydrogensulfáty, fosfáty, trifluóracetáty, glukonáty, hydrojodidy, nitráty, sulfáty, hydrogenfosfáty, acetáty, laktáty, salicyláty, citráty, tartráty, askorbáty, sukcináty, maleáty, fumaráty, glukonáty, formiáty, benzoáty, metansulfonáty, etansulfonáty, benzensulfonáty a p-toluénsulfonáty.
Farmaceutický vhodné adičné soli s bázami sú odborníkom v tomto odbore rovnako dobre známe a zahŕňajú napríklad soli uvedené v dokumentoch citovaných vyššie v doterajšom stave techniky. Také soli môžu vznikať s bázami, ktoré tvoria netoxické soli. Ako príklady takých solí je možné uviesť soli s hliníkom, vápnikom, lítiom, horčíkom, draslíkom, sodíkom a zinkom a soli netoxických amínov, ako dietylamínu.
Určité zlúčeniny všeobecného vzorca I sa môžu vyskytovať vo forme geometrických izomérov. Zlúčeniny všeobecného vzorca I, okrem centier znázornených vo všeobecnom vzorci I, môžu obsahovať jedno alebo viacej centier asymetrie, takže sa môžu vyskytovať vo dvoch alebo väčšom počte stereoizomérnych foriem. Do rozsahu vynálezu spadajú všetky individuálne stereoizoméry a geometrické izoméry zlúčenín, okrem centier znázornených vo všeobecnom vzorci I, zahŕňajúce skupinu Z, a ich zmesi.
Ďalej je predmetom vynálezu farmaceutická kompozícia, ktorej podstata spočíva v tom, že obsahuje zlúčeninu alebo soľ podía vyššie uvedených definícií a farmaceutický vhodné adjuvans, riedidlo alebo nosič.
Predmetom vynálezu je tiež zlúčenina alebo sol podía vyššie uvedených definícií na použitie ako liečivo.
Ďalej je predmetom vynálezu použitie zlúčeniny alebo soli podía vyššie uvedených definícií na výrobu liečiva na liečenie stavu sprostredkovaného jednou matričnou metaloproteinázou alebo väčším počtom matričných metaloproteináz, najmä MMP-3 a/alebo MMP-12 a/alebo MMP-13.
Predmetom vynálezu je tiež spôsob liečenia stavu sprostredkovaného jednou matričnou metaloproteinázou alebo väčším počtom matričných metaloproteináz, najmä MMP-3 a/alebo MMP-12 a/alebo MMP-13.
Pojem liečenie zahŕňa rovnako profylaxiu a zmierňovanie symptómov stavov sprostredkovaných MMP.
Ďalej sú predmetom vynálezu spôsoby výroby zlúčenín podlá vynálezu, ktoré sú opísané ďalej a v príkladoch uskutočnenia. Odborníkovi bude zrejmé, že zlúčeniny podlá vynálezu je možné získať aj inými spôsobmi ako spôsobmi opísanými v tomto texte, prispôsobením spôsobov opísaných v nasledujúcej časti a/alebo prispôsobením o sebe známych spôsobov. Vhodné vodítko pre syntézu, transformácie funkčných skupín, použitie chrániacich skupín atď. je možné napríklad nájsť v Comprehensive Organic Transformations, R. C. Larock, VCH Publishers, Inc. (1989), Advanced Organic Chemistry, J. March, Wiley Interscience (1985), Designing Organic Synthesis, S. Warren, Wiley Interscince (1978), Organic Synthesis - The Disconnection Approach, S. Warren, Wiley Interscience (1982), Guidebook to Organic Synthesis, R. K. Mackie and D. M. Smith, Longman (1982), Protective Group in Organic Synthesis, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, John Wiley and Sons Inc. (1991) a P. J. Kocienski, Protecting Group, Georg Thieme Verlag (1994).
V nasledujúcom opise spôsobov výroby majú substituenty význam uvedený v súvislosti so zlúčeninami všeobecného vzorca I, pokiaľ nie je uvedené inak.
Spôsob 1
Zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde X predstavuje hydroxyskupinu, je možné získať cez zodpovedajúce zlúčeniny všeobecného vzorca II
R
Ar (II)
X,
R1 O R1 kde Xi predstavuje skupinu transformovatelnú na karboxyskupinu za podmienok, ktoré nevedú na zásadnú transformáciu zostávajúcich častí zlúčeniny všeobecného vzorca II. Ako vhodné príklady takých skupín je možné uviesť skupinu CO2 (terc.butyl alebo metyl). terc.Butylskupinu je možné štiepiť reakciou s kyselinou, ako chlorovodíkom alebo trifluóroctovou kyselinou (TFA) vo vhodnom rozpúšťadle, ako bezvodom dichlórmetáne alebo dioxáne, pri vhodnej teplote, ako 0 až 20 °C. Metylester je možné hydrolyzovať hydroxidom, ako hydroxidom litným, vo vhodnom rozpúšťadlovom systéme, ako zmesi tetrahydrofuranu a vody, s výhodou pri teploste miestnosti.
Zlúčeniny všeobecného vzorca II je možné pripravovať spôsobmi známymi v tomto odbore, ktoré sú napríklad opísané v preparatívnych postupoch, napríklad kopuláciou vhodného amínového derivátu a derivátu kyseliny, ktoré sú dostupné za použitia známych chemických spôsobov.
Spôsob 2
Zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde X predstavuje skupinu NHOH, je možné získať zo zodpovedajúcich zlúčenín všeobecného vzorca I, kde X predstavuje hydroxyskupinu, tak, že sa zlúčenina všeobecného vzorca I, kde X predstavuje hydroxyskupinu, nechá reagovať s hydroxylamínom, ako hydroxylamínom generovaným zo soli hydroxylamínu, ako hydrochloridu, vhodnou bázou, ako terciárnym amínom, napríklad diizopropyletylamínom, vo vhodnom rozpúšťadle, ako N,Ndimetylformamidu (DMF), a kopulačným činidlom, ako N[(dimetylamíno)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridín-l-lmetylén]-Nmetyl-metaniniumhexafluórfosfát-N-oxidom (HATU, čo je činidlo opísané v Tet. Letts. (1994) 35, 2279), pri vhodnej teplote, ako 0 až 20 °C.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde X predstavuje hydroxyskupinu, je možné pripraviť obvyklými spôsobmi a spôsobmi opísanými v tomto texte.
Spôsob 3
Zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde X predstavuje skupinu NHOH, je možné získať zo zodpovedajúcich zlúčenín všeobecného vzorca I, kde X predstavuje hydroxyskupinu tak, že sa zlúčenina všeobecného vzorca I, kde X predstavuje hydroxyskupinu, nechá reagovať s O-allylhydroxylamínom, ako 0allylhydroxylamínom generovaným zo soli O-allylhydroxyl-amínu, ako hydrochloridu, vhodnou bázou, ako terciárnym amínom, ako diizopropyletylamínom, vo vhodnom rozpúšťadle, ako N,Ndimetylformamide (DMF) alebo dichlórmetáne, a kopulačným činidlom, napríklad činidlom na kopuláciu peptidov, ako je 7azabenzotriazol-1yloxytris(pyrrolidíno)fosfoniumhexafluórfosfát (PyAOP), pri vhodnej teplote, ako 0 až 20 °C. V tomto stupni sa získa zlúčenina všeobecného vzorca III
R (III)
Ar
CH
R
O R’
Tento kopulačný spôsob je všeobecne opísaný v Tet. Letts. (1994), 35, 2279. Zlúčeninu všeobecného vzorca III je možné previesť na zlúčeninu všeobecného vzorca I, kde X predstavuje skupinu NHOH reakciou s mravenčanom amónnym za prítomnosti vhodného katalyzátora, ako octanu bis(trifenylfosfín)palladnatého, vo vhodnom rozpúšťadle, ako vodnom etanole, pri vhodnej teplote, ako teplote spätného toku vodného etanolu.
Spôsob 4
Zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde X predstavuje skupinu NHOH a R1 predstavuje hydroxyskupinu, je možné pripravovať reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca IV
O
Ar (IV)
CH.
CH s hydroxylamínom, napríklad generovaným zo soli hydroxylamínu, ako hydrochloridu, vhodnou bázou, ako metoxidom sodným, vo vhodnom rozpúšťadle, ako metanole.
Zlúčeniny všeobecného vzorca IV je možné získať obvyklými postupmi, ako sú napríklad postupy uvedené v preparatívnych postupoch.
Spôsob 5
Zlúčeniny všeobecného vzorca I je možné získať zo zlúčenín všeobecného vzorca V
krížovou kopuláciou so zlúčeninou všeobecného vzorca VI
Ar (VI) kde X2 predstavuje chránenú kyselinu, napríklad vo forme terc.butylesteru alebo metylesteru a LG predstavuje skupinu odstupujúcu pri krížovej kopulácii, ako jód, bróm alebo skupinu OSO2CF3. Krížovú kopulačnú reakciu je možné uskutočňovať za prítomnosti katalyzátora, ako octanu bis(trio-tolyl)-fosfinpalladnatého, za použitia vhodnej bázy, ako trietyl-amínu, vo vhodnom rozpúšťadle, ako acetónitrile alebo DMF, pri vhodnej teplote, ako 50 až 150 °C. Tento typ reakcie je všeobecne opísaný v Heck, Tet. Letts. (1984) 25, 2271 a rade iných článkov.
Zlúčeniny všeobecného vzorca V je možné pripraviť obvyklými spôsobmi, ako sú ich adaptácie opísané v preparatívnych postupoch.
Zlúčeniny všeobecného vzorca VI je možné pripraviť obvyklými spôsobmi, ako sú ich adaptácie opísané v preparatívnych postupoch a spôsobmi opísanými v nasledujúcich článkoch: Synthesis (1984), 709; J. Chem. Soc. Perkin Trans I (1977) 1841; J. Org. Chem. (1994) 59, 6095; tam isto (1979) 44, 4444 a Tet. Letts. (1997) 38, 1749.
Produktom tejto reakcie je zmes zlúčenín všeobecného vzorca Vila a Vllb
(VHb) kde X2 má význam uvedený pri všeobecnom vzorci V.
Zlúčeniny všeobecného vzorca Vila a Vllb je možné previesť na zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde X predstavuje hydroxyskupinu, redukciou olefinické väzby za použitia obvyklých postupov, ako je hydrogenácia za prítomnosti katalyzátora, alebo reakciou s diimídom, ktorý je možné generovať napríklad z p-toluénsulfonylhydrazidu, a deprotekciou chráneného zvyšku kyseliny X2.
Odborníkom v tomto odbore bude zrejmé, že pri syntéze zlúčenín podía vynálezu je možné obvyklými postupmi dosiahnúť iné režimy ochrany a následnú deprotekciu, ako je to napríklad opísané v publikáciách Greene a Wuts a Kocienski uvedených vyššie.
Pokiaľ je to žiaduce alebo potrebné, prevedie sa zlúčenina všeobecného vzorca I na svoju farmaceutický vhodnú sol. Farmaceutický vhodné soli zlúčenín všeobecného vzorca I je možné účelne pripravovať tak, že sa zmiesia roztoky zlúčeniny všeobecného vzorca I a podía potreby požadované kyseliny alebo bázy. Soľ je možné z roztoku vyzrážať a zhromaždiť filtráciou alebo iným spôsobom, ako odparením rozpúšťadla.
Určité zlúčeniny podľa vynálezu je možné prevádzať na iné určité zlúčeniny podľa vynálezu za použitia spôsobov známych z literatúry.
Zlúčeniny podlá vynálezu sú dostupné spôsobmi opísanými v tomto opise a príkladoch uskutočnenia alebo ich vhodným prispôsobením za použitia o sebe známych spôsobov. Poradie stupňov syntetických transformácií zmieňovaných v tomto texte je možné s ohľadom na účelnosť meniť. Najúčelnejšie poradie reakčných stupňov syntézy danej cieľovej zlúčeniny bude odborník v odbore chémie schopný stanoviť na základe svojho úsudku a skúseností.
Separáciu a čistenie zlúčenín podľa vynálezu a ich solí je možné uskutočňovať za použitia obvyklých postupov, napríklad frakčnou kryštalizáciou alebo chromatografiou, napríklad vysokotlakovou kvapalinovou chromatografiou stereizomérnej zmesi zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej vhodnej soli alebo derivátu. Individuálne enantioméry zlúčenín všeobecného vzorca I je možné pripravovať zo zodpovedajúcich opticky čistých medziproduktov alebo optickým štiepením tak, že sa racemická zlúčenina všeobecného vzorca I podrobí vysokotlakovej kvapalinovej chromatografii na vhodnom chirálnom nosiči, alebo vo vhodnom prípade, frakčnou kryštalizáciou diastereoizomérnych solí vznikajúcich reakciou racemickej zlúčeniny s vhodnou opticky aktívnou bázou alebo kyselinou.
Zlúčeniny všeobecného vzorca I a ich soli je možné človeku podávať samotné, ale obvykle sa budú podávať v zmesi s farmaceutický vhodným riedidlom alebo nosičom zvoleným s ohľadom na zamýšľaný spôsob podávania a štandardnú farmaceutickú prax. Tieto látky je napríklad možné podávať perorálne, vrátane sublinguálneho podávania, vo forme tabliet, ktoré obsahujú také excipienty, ako škrob alebo laktózu, alebo vo forme toboliek alebo ovulí, do ktorých môžu byť plnené samotné alebo v zmesi s excipientami, alebo vo forme elixírov, roztoku alebo suspenzií obsahujúcich aromatizačné a farbiace činidlá. Zlúčeniny podľa vynálezu a ich soli je možné spracovávať do kapsulí alebo tabliet na cielenú dodávku do tračníka alebo dvanástnika, čo je umožnené opozdeným rozpustením takej kapsule alebo tablety po určitej dobe po perorálnom podaní. Rozpustenie sa môže riadiť citlivosťou formulácie na baktérie, ktoré sa nachádzajú v dvanástniku alebo tračníku, takže pred dosiahnutím cieľovej oblasti gastrointestinálneho traktu nedochádza na žiadne podstatné rozpustenie. Zlúčeniny podľa vynálezu a ich soli je možné podávať parenterálnymi injekciami, napríklad intravenózne, intramuskulárne alebo subkutánne. Pri parenterálnom podávaní sa najvýhodnejšie používajú sterilné vodné roztoky alebo suspenzie, ktoré môžu obsahovať aj iné látky, napríklad dostatočné množstvo soli alebo glukózy na izotonizáciu roztoku s krvou. Zlúčeniny podľa vynálezu a ich soli je možné tiež podávať topicky, vo forme sterilných krémov, želé, suspenzií, lotiónov, mastí, zásypov, sprejov, obväzov so začleneným liečivom alebo transdermálnych náplastí. Napríklad je ich možné zapracovávať do krémov obsahujúcich vodné alebo olejové emulzie polyetylénglykolov alebo kvapalného parafínu, alebo do mastí pozostávajúcich z bieleho voskového mäkkého parafínového základu, alebo ako hydrogél s celulózou alebo polyakrylátovými derivátmi alebo inými modifikátormi viskozity, alebo ako suché prášky alebo kvapalné spreje alebo areosoly s butanom/propanom, HFA alebo CFC, ako propelenty, alebo ako obväzy so začleneným liečivom, ako sú tylové obväzy, gázové obväzy impregnované bielym mäkkým parafínom alebo polyetylénglykolmi alebo krycích materiálov na báze hydrogélov, hydrokoloidov, alginátov alebo filmov. Zlúčeniny podľa vynálezu a ich soli je možné tiež podávať intraokulárne vo forme očných kvapiek obsahujúcich vhodné pufre, modifikátory viskozity (napríklad deriváty celulózy), konzervačné látky (napríklad benzalkoniumchlorid, BZK) a činidlá na nastavenie tonicity (napríklad chlorid sodný). Také formulačné postupy sú v tomto odbore dobre známe.
Všetky prostriedky môžu tiež obsahovať vhodné stabilizátory a konzervačné činidlá.
Na orálne a parenterálne podávanie človeku bude denná dávka zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej soli ležať v rozmedzí od 0,001 do 20, prednostne od 0,01 do 20, výhodnejšie od 0,1 do 10, a najvýhodnejšie od 0,5 do 5 mg/kg, pričom môže byť podaná vo forme jedinej dávky alebo niekoľkých dielčích dávok. Tablety a tobolky budú teda obsahovať 0,1 až 500, prednostne 50 až 200 mg účinnej zlúčeniny, pričom je možné podať jednu, dve alebo viac takých foriem, podľa toho ako je to vhodné.
Na topické podávanie človeku s chronickými ranami bude denná dávka zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej soli v suspenzii alebo inej formulácii ležať v rozmedzí od 0,01 do 50 mg/ml, prednostne od 0,3 do 30 mg/ml.
Presnú dávku, ktorá je nejvhodnejšia pre jednotlivého pacienta v každom prípade stanoví ošetrujúci lekár a táto dávka bude závisieť na veku, hmotnosti a odpovedi konkrétneho pacienta. Vyššie uvedené dávkové rozmedzia je nutné chápať ako priemerné hodnoty, ktoré v jednotlivých prípadoch môžu samozrejme byť prekročené smerom dole aj hore tak, aby to nepredstavovalo únik z rozsahu tohto vynálezu.
Skúšobný postup
Schopnosť zlúčenín inhibovať štiepenie rôznych fluórogénnych peptidov prostredníctvom MMP 1, 2, 3, 9, 12, 13 a 14 je opísaná ďalej.
Stanovenia pre MMP 2, 3, 9 a 14 sú založené na pôvodnom protokole opísanom v Knight et al., Fed. Euro. Giochem. Soc., 296 (3), 263 až 266, 1992, ktorý je mierne modifikovaný ďalej opísaným spôsobom.
Inhibícia MMP-1 (i) Príprava enzýmu
Katalytická doména MMP-1 bola pripravená v laboratóriách Pfizer Central Research. Zásobný roztok MMP-1 (ΙμΜ) sa počas 20 minút pri 37 °C aktivuje amínofenylmerkuryacetátom (ΑΡΜΑ) pri konečnej koncentráci lmM. MMP-1 sa potom zriedi skúškovým pufrom Tris-HCl (50mM Tris, 200mM chlorid sodný, 5mM chlorid vápenatý, 20μΜ síran zinočnatý a 0,05% Brij 35, pH 7,5) na koncentráciu lOnM. Konečná koncentrácia enzýmu, ktorý sa používa pri skúške, je lnM.
(ii) Substrát
Pri tejto skúške sa použije fluórogénny substrát Dnp-Proβ-cyklohexyl-Ala-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys-(N-Me-Ala)-NH2 podía pôvodného opisu v Bickett et al., Anál. Biochem., 212, 58 až 54, 1993. Konečná koncentrácia substrátu použitého pri skúške je ΙΟμΜ.
(iii) Stanovenie inhibície enzýmu
Skúšaná zlúčenina sa rozpustí v dimetylsulfoxide a vzniknutý roztok sa zriedi skúškovým pufrom tak, aby koncentrácia dimetylsulfoxidu bola nižšia ako 1 %. Skúšaná zlúčenina a enzým sa pridajú do každej z jamôk 96 jamkovej platni a pred prídavkom substrátu nechajú ekvilibrovať 15 minút pri 37 °C v orbitálnej trepačke. Platne sa potom inkubujú 1 hodinu pri 37 °C a stanoví sa fluorescencia (štiepenie substrátu) za použitia fluórimetra (Fluostar, BMG Lab Technologies, Aylesbury, UK) s excitáciou pri vlnovej dĺžke 355 nm a emisiou pri vlnovej dĺžke 440 nm. Účinnosť inhibície sa zistí z dosiahnutého množstva štiepeného substrátu za použitia rôznych koncentrácií skúšanej zlúčeniny a z výslednej krivky závislosti odpovedi na dávke sa vypočíta hodnota IC50 (koncentrácia inhibítora potrebná na 50% inhibíciu enzymatickej aktivity).
Inhibícia MMP-2, MMP-3 a MMP-9 (i) Príprava enzýmu
Katalytické domény MMP-2, MMP-3 a MMP-9 boli pripravené v laboratóriách Pfizer Central Research. Zásobné roztoky MMP-2, MMP-3 alebo MMP-9 (ΙμΜ) sa aktivujú prídavkom amínofenylmerkuryacetátu (ΑΡΜΑ). V prípade MMP-2 a MMP-9 sa pridá ΑΡΜΑ v konečnej koncentrácii lmM a nasleduje jednohodinová inkubácia pri 37 °C. MMP-3 sa aktivuje prídavkom 2mM ΑΡΜΑ, hneď potom nasleduje trojhodinová inkubácia pri 37 °C. Enzýmy sa potom zriedia skúškovým pufrom Tris-HCl (lOOmM Tris, lOOmM chlorid sodný, lOmM chlorid vápenatý, a
0,16% Brij 35, pH 7,5) na koncentráciu lOnM. Konečná koncentrácia enzýmu, ktorý sa používa pri skúške, je lnM.
(ii) Substrát
Pri tejto skúške sa použije fluórogénny substrát Mca-ArgPro-Lys-Pro-Tyr-Ala-Nva-Trp-Met-Lys(Dnp)-NH2 (Bachem Ltd., Essex, UK) podľa pôvodného opisu v Nagase et al., J. Biol. Chem., 269 (33), 20952 až 20957, 1994. Tento substrát je zvolený vzhľadom na to, že má rýchlosť hydrolýzy v rovnováhe vzhľadom na MMP-2 (kkat/km = 54 000 s^1) , MMP-3 (kkat/km =
400 s1M1) a MMP-9 (kkat/km = 55 300 s-1M1) . Konečná koncentrácia substrátu použitého pri skúške je 5μΜ.
(iii) Stanovenie inhibície enzýmu
Skúšaná zlúčenina sa rozpustí v dimetylsulfoxide a vzniknutý roztok sa zriedi skúškovým pufrom tak, aby koncentrácia dimetylsulfoxidu bola nižšia ako 1 %. Skúšaná zlúčenina a enzým sa pridajú do každej z jamôk 96 jamkovej platni a pred prídavkom substrátu nechajú ekvilibrovať 15 minút pri 37 °C v orbitálnej trepačke. Platne sa potom inkubujú 1 hodinu pri 37 °C a stanoví sa fluorescencia za použitia fluórimetra (Fluostar, BMG Lab Technologies, Aylesbury, UK) s excitáciou pri vlnovej dĺžke 328 nm a emisiou pri vlnovej dĺžke 393 nm. Účinnosť inhibície sa zistí z dosiahnutého množstva štiepeného substrátu za použitia rôznych koncentrácií skúšanej zlúčeniny a z výslednej krivky závislosti odpovedi na dávke sa vypočíta hodnota IC50 (koncentrácia inhibítora potrebná na 50% inhibíciu enzymatickej aktivity).
Inhibícia MMP-12 (i) Príprava enzýmu
Použije sa katalytická doména MMP-12 (200 pg/ml). MMP-12 sa zriedi skúškovým pufrom Tris-HCl (50mM Tris, 200mM chlorid sodný, 5mM chlorid vápenatý, 20pM síran zinočnatý a 0,02% Brij 35, pH 7,4) na koncentráciu 240 ng/ml. Konečná koncentrácia enzýmu, ktorý sa používa pri skúške, je 60 ng/ml.
(ii) Substrát
Pri tejto skúške sa použije fluórogénny substrát Dnp-ProCha-Gly-Cys(me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH2. Konečná koncentrácia substrátu použitého pri skúške je 10pM.
(iii) Stanovenie inhibície enzýmu
Skúšaná zlúčenina sa rozpustí v dimetylsulfoxide a vzniknutý roztok sa zriedi skúškovým pufrom tak, aby koncentrácia dimetylsulfoxidu bola nižšia ako 1 %. Skúšaná zlúčenina a enzým sa pridajú do každej z jamôk 96 jamkovej platni a pred prídavkom substrátu nechajú ekvilibrovať 15 minút pri 37 °C v orbitálnej trepačke. Platne sa potom inkubujú 2 hodiny pri teplote miestnosti a stanoví sa fluorescencia (štiepenie substrátu) za použitia fluórimetra s excitáciou pri vlnovej dĺžke 360 nm a emisiou pri vlnovej dĺžke 460 nm. Účinnost inhibície sa zistí z dosiahnutého množstva štiepeného substrátu za použitia rôznych koncentrácií skúšanej zlúčeniny a z výslednej krivky závislosti odpovedi na dávke sa vypočíta hodnota IC50 (koncentrácia inhibítora potrebná na 50% inhibíciu enzymatickej aktivity).
Inhibícia MMP-13 (i) Príprava enzýmu
Humánny rekombinantný MMP-13 bol pripravený v PanVera Corporation (Madison, Winconsin, USA) a charakterizovaný v laboratóriách Pfizer Central Research. Zásobný roztok MMP-13 (s koncentráciou 1,9 mg/ml) sa počas 2 hodín pri 37 °C aktivuje 2mM ΑΡΜΑ. MMP-13 sa potom zriedi skúškovým pufrom Tris-HCl (50mM Tris, 200mM chlorid sodný, 5mM chlorid vápenatý, 20μΜ síran zinočnatý a 0,02% Brij 35, pH 7,5) na koncentráciu 5,3nM. Konečná koncentrácia enzýmu, ktorý sa používa pri skúške, je l,3nM.
(ii) Substrát
Pri tejto skúške sa použije fluórogénny substrát Dnp-ProCha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys-(NMA)-NH2. Konečná koncentrácia substrátu použitého pri skúške je ΙΟμΜ.
(iii) Stanovenie inhibície enzýmu
Skúšaná zlúčenina sa rozpustí v dimetylsulfoxide a vzniknutý roztok sa zriedi skúškovým pufrom tak, aby koncentrácia dimetylsulfoxidu bola nižšia ako 1 %. Skúšaná zlúčenina a enzým sa pridajú do každej z jamôk 96 jamkovej platni. Reakcia sa zaháji tak, že sa do každej jamky pridá substrát. Intenzita fluorescencie sa stanoví za použitia fluórimetra pre platne s 96 jamkami (Cytofluór II; PerSeptive Biosystems, Inc., Framingham, MA, USA) s excitáciou pri vlnovej dĺžke 360 nm a emisiou pri vlnovej dĺžke 460 nm. Účinnosť inhibície sa zistí z dosiahnutého množstva štiepeného substrátu za použitia rôznych koncentrácií skúšanej zlúčeniny a z výslednej krivky závislosti odpovedi na dávke sa vypočíta hodnota IC50 (koncentrácia inhibítora potrebná na 50% inhibíciu enzymatickej aktivity).
Inhibícia MMP-14 (i) Príprava enzýmu
Katalytická doména MMP-14 pochádza od Prof. Tschesche z katedry biochémie chemickej fakulty Bielefeldské univerzity v SRN. Zásobný roztok enzýmu s koncentráciou ΙΟμΜ sa aktivuje po prídavku trypsínu (5 pg/ml) (Sigma, Dorset, UK) 20 minút pri 25 °C. Aktivita trypsínu sa potom neutralizuje prídavkom sójového inhibítora trypsínu (50 pg/ml, Sigma, Dorset, UK) a potom sa zásobný roztok enzýmu zriedi skúškovým pufrom TrisHCl (lOOmM Tris, lOOmM chlorid sodný, lOmM chlorid vápenatý, 0,16% Brij 35, pH 7,5) na koncentráciu lOnM. Konečná koncentrácia enzýmu, ktorý sa používa pri skúške, je lnM.
(ii) Substrát
Pri tejto skúške sa ako fluórogénny substrát použije McaPro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2 (Bachem Ltd., Essex, UK) podlá pôvodného opisu vo Will et al., J. Biol. Chem., 271 (29), 17119 až 17123.
Stanovenie inhibície enzýmu sa uskutočňuje postupom, ktorý je opísaný na stanovenie inhibície MMP-2, MMP-3 a MMP-9.
Údaje uskutočnenia 0 aktivite niektorých sú uvedené v nasledujúcej zlúčenín z tabulke: (nM) x=14 x=9 príkladov 3/2* sel
Pr. č. x=3 x=2 IC5o inhibítora MMP-x x=l x=12 x=13
1 101 10803 85 107
2 13, 5 1269 6000 130 5650 1908 94
* selektivita pre MMP-3 oproti MMP-2
Zlúčeniny z príkladov 6, 8, 9, 14, 15 a 22 vykazujú hodnoty MMP-3 IC50 v rozmedzí 8 až 65nM a selektivitu MMP3/MMP-2 v rozmedzí od 195 do 930.
Vynález je bližšie objasnený v nasledujúcich príkladoch uskutočnenia a preparatívnych postupoch. Tieto príklady a postupy majú výhradne ilustratívny charakter a rozsah vynálezu v žiadnom ohlade neobmedzujú. V nich uvádzané teploty tavenia boli stanovené za použitia otvorených sklenených kapilár a Gallenkampovho bodotaviča a sú nekorigované. Spektrá nukleárnej magnetickej rezonancie (NMR) boli zaznamenané za použitia spektrometrov Varian Unity Inova-400, Varian Unity Inova-300 alebo Bruker AC300, a sú uvádzané v dieloch na milión dielov od tetrametylsilanu. Hmotnostné spektrá (MS) boli získané za použitia hmotnostných spektrometrov Finnigan Mat. TSQ 7000 a Fisons Inštrument Trio 1000. Uvádzané vypočítané a stanovené ionty sa vzťahujú na izotop s najnižšou hmotnosťou. Infračervené spektrá (IR) boli namerené na transformačnom infračervenom spektrometri Nicolet Magna 550. Pod pojmom mžiková chromatografia sa rozumie chromatografia na stĺpci silikagélu (Kieselgel 60, 39 až 63 μπι, E. Merck, Darmstadt. Na chromatografiu na tenkej vrstve boli použité dosky so silikagélom Kieselgel 60 F254 od firmy E. Merck a zlúčeniny boli vizualizované UV svetlom, 5% vodným manganistanom draselným alebo Dragendorffovým činidlom (prestriekané vodným dusitanom sodným). Pod pojmom hexan sa rozumejú hexany (v kvalite pre HPLC) s teplotou varu 65 až 70 °C. Pojmom éter sa označuje dietyléter. Pod pojmom kyselina octová sa rozumie ladová kyselina octová. l-Hydroxy-7-aza-lH1,2,3-benzotirazol (HOAt), N-[(di-metylamíno)-1H-1,2,3triazólo[4,5-b]pyridin-i-ylmetylén]-Nmetylmetaniniumhexafluórfosfát-N-oxid (HATU) a 7-azabenzotriazol-l-yloxytris(pyrrolidíno)fosfóniumhexafluórfosfát (PyAOP) pochádzajú od firmy PerSeptive Biosystems U. K. Ltd. Skratkou DIPE je označovaný diizoproyléter. Silikagél s obrátenými fázami pre mžikovú chromatotrafiu bol získaný od firmy Fluka (Fluka 100, Cie, 40 až 63 pm) . Pod pojmom pentan sa rozumie n-pentan v kvalite pre HPLC (teplota varu 35 až 37 °C) .
Upozornenie:
V ďalej uvedených preparatívnych postupoch sú opísané určité deriváty 4-amínobifenylu. 4-Amínobifenyl je známym ľudským karcinogénom. S jeho analógmi je teda nutné zachádzať opatrne. Pozri hlavné publikácie: Yuta, K., Jurs, P. C., J. Med. Chem. (1981), 24(3), 241 až 251; You, Z., Brezzell, M. D., Das, S. K., Hooberman, B. H., Sinsheimer, J. E., Mutat. Res. (1994), 320 (1-2), 45 až 58; Hecht, S. S. et al., J. Med. Chem. (1979), 22 (8), 981 až 987.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1 (3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amíno}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]hexánová kyselina
HO
Trifluóroctová kyselina (5 ml) sa počas 5 minút pod atmosférou dusíka pri 20 °C prikvapká do miešanéhu roztoku terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-metyl- (4fenyl)fenyl]hexanoátu z preparatívneho postupu 3 (285 mg, 0,47 mmol) v bezvodom dichlórmetáne (5 ml) . Vzniknutý roztok sa 4 hodiny mieša a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v toluéne a toluénový roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku (dvakrát). Zvyšok sa trituruje s éterom. Získa sa bezfarebná pevná látka (210 mg, 82 %) s teplotou tavenia 160 až 162 °C (z etylacetátu). Rf 0,17 (hexan/éter/kyselina octová, 50 : 50 : 1). Retenčná doba HPLC 7,3 min (silanizovaný silikagél (5 pm) Phenomenex Magellen, zmes acetonitrilu, vody a trifluór-octovej kyseliny v pomere 70 : 30 : 0,1, 1 ml/min, detekcia UV (220 nm)) δΗ (400 MHz, CD3OD) (vymeniteľné vodíky vymenené len čiastočne) 1,02 (9H, s), 1,44 (3H, d, J = 7 Hz), 1,52 (4H, m),
2.16 (3H, s), 2,37 (1H, dd, J = 4 a 15 Hz), 2,50 (2H, m), 2,60 (1H, dd, J = 9 a 15 Hz), 2,84 (1H, m), 4,37 (1H, d, J = 10
Hz), 4,99 (1H, pentet, J = 7 Hz) , 6,94 (1H, d, J = 8 Hz), 7,00 (2H, sad, J = 8 Hz, prekrývanie), 7,13 (1H, t, J = 7 Hz),
7.16 (2H, t, J = 7 Hz), 7,23 (4H, t, J = 7 Hz), 7,29 (1H, t, J = 7 Hz), 7,38 (2H, t, J = 7 Hz), 7,72 (1H, br d), 8,45 (1H, br d)
LRMS (termosprej) m/z 543 (MH+)
FTIR vmax (KBr disk) 3290, 2980, 2930, 1707, 1661, 1633, 1553, 700 cm'1
Nájdené: C 75,22, H 7,73, N 6,16, C34H42N2O4 vypočítané C 75,25, H 7,80, N 5,16 %
Príklad 2 (2R)-2-{3-[3-Chlór-(4-fenyl)fenyl]propyl}-N1-[(1S)-2,2dimetyl-1-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-(N4hydroxy)butandiamíd
a) Hydrochlorid O-allylhydroxylamínu (17 mg, 0,152 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri 0 °C pridá k miešanému roztoku (3R)-6-[3-chlór-4-fenyl)fenyl]-3-({[(1S)-2,2-di-metyl-l40 ({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)hexánovej kyseliny (z preparatívneho postupu 4) (66 mg, 0,117 mmol) a diizopropyletylamínu (78 pl, 0,456 mmol) v bezvodom dichlórmetáne (1 ml). Do vzniknutej zmesi sa v jednej dávke pridá 7-azabenzotriazol-lyloxytris(pyrrolidíno)fosfóniumhexafluórfosfát (79 mg, 0,152 mmol). Reakčná zmes sa 2 hodiny mieša pri 0 °C, nechá zahriať na teplotu miestnosti a po ďalšej 1 hodine naleje do etylacetátu (25 ml). Etylacetátová zmes sa postupne premyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (2 x 10 ml) a nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (2 x 10 ml) . Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Pevný zvyšok sa suspenduje v éteri (3 ml) a suspenzia sa prefiltruje. Získa sa (2R)-2-{3-[3-chlór-(4-fenyl)fenyl]propyl}-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]-(N4-3-propenyloxy)butandiamíd (58 mg, 82 %) vo forme bielej pevnej látky.
Rf 0,45 (etylacetát : hexán, 2 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,98 (9H, s), 1,46 (3H, d, J = 6,5 Hz),
1,48 (4H, m), 2,17 (IH, m), 2,39 (IH, m), 2,50 (2H, m), 2,74 (IH, m), 4,13 (IH, d, J = 8 Hz), 4,29 (2H, d, J = 6 Hz), 5,06 (IH, pentet, J = 6,5 Hz), 5,29 (2H, br d), 5,87 (2H m a br d, prekrývanie), 6,45 (IH, br s), 6,97 (IH, d, J = 8 Hz),
7,19 (7H, komplex), 7,35 (5H, komplex), 8,36 (IH, br s). LRMS (termosprej) m/z = 618 (MH+, slabý).
b) Miešaná zmes (2R)—2—(3—[3-chlór-(4-fenyl)fenyl]propyl)-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-(N4-3propenyloxy)butandiamídu (56 mg, 0,091 mmol) a mravenčan amónny (59 mg, 0,94 mmol) v zmesi etanolu a vody (4 : 1, 4 ml) sa pod atmosférou dusíka zahrieva k spätnému toku, čím sa získa bezfarebný roztok. K tomuto roztoku sa pridá octan bis (trifenylfosfín)palladnatý (3,4 mg, 0, 00465 mmol). Reakčná zmes sa 40 minút zahrieva k spätnému toku a potom ochladí. Hnedý roztok sa zriedi etylacetátom (25 ml) a etylacetátová zmes sa premyje nasýteným vodným roztokom sodným (2 x 10 ml) , vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cie, 40 až 63 pm, elúcia zmesí metanolu a vody v pomere 5 : 1). Získa sa (2R)-2-{3-[3-chlór-(4fenyl)fenyl]propyl}-N1-[(1S)-2,2-dimetyl-1-({[(1R)-1fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]-(N4-hydroxy)butandiamíd (46 mg, 88 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky s teplotou tavenia 107 až 109 °C
Rf 0,43 (silanizovaný silikagél Cie, zmes metanolu a vody v pomere 5 : 1) δΗ (400 MHz, CD3OD) 0,98 (9H, s), 1,39 (3H, d, J = 6,5 Hz),
1,47 (4H, m), 2,13 (IH, dd, J = 6 a 14 Hz), 2,31 (IH, dd, J = a 14 Hz), 2,48 (2H, m), 2,85 (IH, m), 4,32 (IH, s), 4,96 (IH, q, J = 6,5 Hz), 6,80 (IH, d, J = 8 Hz), 7,11 (4H, komplex), 7,22 (3H, komplex), 7,32 (5H, komplex). LRMS (termosprej) m/z = 578 (MH+ slabý), 562 (MH+ - O) Nájdené: C 67,79, H 6,90, N 7,19, C33H40CIN3O4.0,5 H2O vypočítané C 67,51, H 7,04, N 7,16 %
Príklad 3
Nl-[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino]karbonyl)-propyl]-(N4-hydroxy)-(2R)-2-{3-[3metyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}-butandiamíd
a) Hydrochlorid O-allylhydroxylamínu (295 mg, 2,69 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri 0 °C pridá k (3R)-3-({[(1S)-2,2dimetyl-1-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-metyl-4-fenyl)fenyl]hexánovej kyseline (z príklade 1) (974 mg, 1,79 mmol) a diizopropyletylamínu (1,56 ml, 8,97 mmol) v bezvodom dimetylformamide (25 ml). Do vzniknutej zmesi sa v jednej dávke pridá 7-azabenzotriazol-lyloxytris(pyrrolidíno)fosfóniumhexafluórfosfát (1,4 g, 2,69 mmol). Výsledná zmes sa nechá zahriať na teplotu miestnosti a po ďalších 4,25 hodiny naleje do etylacetátu (500 ml). Etylacetátová zmes sa premyje nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným (2 x 200 ml). Vodné premývacie lúhy sa extrahujú etylacetátom (2 x 100 ml) . Spojené organické roztoky sa vysušia síranom sodným a skoncentrujú za zníženého tlaku. Pevný zvyšok sa suspenduje v éteri (3 ml). Výsledná suspenzia sa prefiltruje. Po prekryštalizovaní z etylacetátu sa získa Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amíno}karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}-(N4-3-propenyloxy)butandiamíd (640 mg, 60 %) vo forme bielej pevnej látky.
Rf 0,31 (etylacetát/hexan, 1 : 1)
δΗ (400 MHz, CDC13), 1,00 (9H, s), 1,48 (3H, d, J = 6,5 Hz) ,
1,56 (4H, M), 2,22 (3H, s) , 2,42 (1H, m) , 2,52 (3H, m), 2,80
(1H, m), 4,20 (1H, d, J = 8 Hz), 4,29 (2H, d, J = 5 Hz) ,
5,07 (1H pentet, J = 6,5 Hz), 5,28 (2H, br), 5,90 (1H, m) ,
6,13 (1H, br s), 6, 61 (lh, br d), 6,95 (1H, d, J = 8 Hz),
7,00 (1H, d, J = 8 Hz) , 7,25 (8H, komplex), 7,38 (2H, t, J = 7
Hz) , 8,69 (1H, br s) .
LRMS (termosprej) m/z = 598 (MH+, slabý), 542 (MH2 + - allyloxy,
pík bázy).
b) Miešaná zmes Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[ (ÍR)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[3-metyl-(4fenyl)fenyl]propyl}-(N4-3-propenyloxy)butandiamídu (794 mg, 1,32 mmol) a mravenčanu amónneho (419 mg, 6,64 mmol) v zmesi etanolu a vody v pomere 4 : 1 (25 ml) sa pod atmosférou dusíka zahrieva k spätnému toku, čím sa získa bezfarebný roztok. K tomuto roztoku sa pridá octan bis(trifenylfosfín)palladnatý (40 mg, 0,066 mmol). Reakčná zmes sa 90 minút zahrieva k spätnému toku a potom ochladí. Hnedý roztok sa zriedi etylacetátom (250 ml) a etylacetátová zmes sa premyje nasýteným vodným chloridom sodným (2 x 100 ml), vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cis, elúcia zmesí metanolu a vody v pomere 5 : 1) a potom trituráciou so zmesou metanolu a diizopropyléteru. Získa sa Nl-[(1S)-2,2dimetyl-1-({[(ÍR)-1-fenyl-etyl]amino)karbonyl)propyl]-(N4hydroxy)-(2R)—2—{3—[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]propylJbutandiamíd (440 mg, 59 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky s teplotou tavenia 114 až 116,5 °C.
Rf 0,23 (silanizovaný silikagél Cis, metanoi : voda, 5 : 1)
δΗ (400 MHz, DMSO-ds) 0,85 (9H, s) , 1, 24 (3H, d, J = 7 Hz),
1, 31 (1H, m) , 1,44 (3H, m ), 1,98 (1H, dd, J = 7 a 13 Hz),
2, 11 (1H, m, a 3H, prekrývanie), 2,42 (2H, m), 2,77 (1H, m) ,
4, 26 (1H, d, 10 Hz), 4,87 (1H, pentet, J = 7 Hz) , 6, 91 (1H,
d, J = 8 Hz) , 6,97 (2H, s a d, J = 8 Hz, prekrývanie), 7,18
(7H, komplex), 7,29 (1H, r, J = 6 Hz), 7,35 (2H, t, J = 8
Hz), 7,64 (1H, br d), 8,23 (1H, br d), 8,44 (1H, s), 10,28 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 558 (MH+, slabý), 542 (MH+ - O) FTIR Vn,av (KBr disk) 3290, 2970, 2930, 1643, 1540, 700 cm-1 Nájdené: C 72, 60, H 8,02, N 7,31, C34H43N3O4.0,25 H2O vypočítané C 72,63, H 7,80, N 7,47 %
Príklad 4
Nl-[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino}karbonyl)-propyl]-(2R)-2-[3-(3-fluór-4fenoxyfenyl)propyl]-(N4-hydroxy)-butandiamíd
N-[(Dimetylamíno)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridín-lylmetylén]-N-metylmetaniniumhexafluórfosfát-N-oxid (740 mg, 1,95 mmol) sa pri 0 °C pod atmosférou dusíka pridá k miešanému roztoku (3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-fluór-4fenoxyfenyl)hexánovej kyseliny (z preparatívneho postupu 5) (731 mg, 1,30 mmol) a diizopropyletylamínu (220 μΐ, 1,30 mmol) v bezvodom dimetylformamide (10 ml). Po 25 minútach sa k vzniknutej zmesi pridá hydrochlorid hydroxylamínu (271 mg,
3,90 mmol) a potom diizopropyletylamín (880 μΐ, 5,20 mmol). Výsledná zmes sa 16 hodín mieša pri 20 °C a naleje do etylacetátu (150 ml). Etylacetátová zmes sa premyje fosfátovým pufrovacím roztokom (pH 7, 3 x 50 ml) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml), vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prekryštalizuje zo zmesi dichlórmetánu a diizopropyléteru, čím sa získa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bezfarebnej pevnej látky (275 mg, 24 %). Vzorka tejto látky (130 mg) sa ďalej prečistí preparatívnou vysokotlakovou kvapalinovou chromatografiou (stĺpec Phenomenex Magellan Cie, 150 x 20 mm, 5 pm, 20 ml/min acetonitril:vodný fosfátový pufor (8,3mM, pH 7,2), 1 : 1, retenčná doba 13,5 min) a potom trituruje s diizopropyléterom, odfiltruje a suší za vákua pri 50 °C. Získa sa 50 mg bielej pevnej látky s teplotou tavenia 136 až 137 °C.
Rf 0,39 (dichlórmetán : metanol : koncentrovaný vodný amoniak = 90 : 10 : 1)
δΗ (4 00 MHz, CD3OD) 1,02 (9H, s) , 1,42 (3H, d, J = 7 Hz),
1,48 (3H, m), 1,58 (1H, m), 2,16 (1H, dd, J = 6 a 14 Hz),
2,34 (1H, dd, J = 8 a 14 Hz) , 2, ,40 (21 H, m) , 2,86 ( 1H, m) ,
4,34 (1H, s), 4,99 (1H, q, J = 7 Hz) , 6,86 (4H, m ), 6,94
(1H, d, J = 11,5 Hz) , 7,04 (1H, t, J = 7 Hz), 7 ,12 (1H, t, J =
7 Hz) , 7,18 (2H, t, J = 7 Hz) , 7,27 (4H, m) .
LRMS (termosprej) m/z = 535 (MH+ - HNCO) FTIR vmax (KBr disk)
3290, 2970, 2930, 1644, 1508, 1490, 1220, 700 m“1
Nájdené: C 68,14, H 6,94, N 7,21, C33H40FN3O5.0,25 H2O vypočítané C 68,08, H 7,01, N 7,22 %
Príklad 5
Nl-[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino}karbonyl)-propyl]-(N4-hydroxy)-(2R)-2-[3-(3metyl-4-fenoxyfenyl)propyl]-butandiamíd
N-[(Dimetylamíno)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridín-1ylmetylén]-N-metylmetaniniumhexafluórfosfát-N-oxid (655 mg,
1,72 mmol) sa pri 20 °C pod atmosférou dusíka pridá k miešanému roztoku (3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-6-(3-metyl-4fenoxyfenyl)hexánovej kyseliny (z preparatívneho postupu 6) (640 mg, 1,15 mmol) v bezvodom dimetylformamíde (5 ml). Po 25 minútach sa k vzniknutej zmesi pridá hydrochlorid hydroxylamínu (239 mg, 3,44 mmol) a potom diizopropyletylamín (792 μΐ, 4,60 mmol). Výsledná zmes sa 48 hodín mieša pri 20 °C a naleje do etylacetátu (150 ml) . Etylacetátová zmes sa premyje fosfátovým pufrovacím roztokom (3 x 50 ml) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml) , vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Surový produkt sa prečistí mžikovou chromatografiou. Najprv sa uskutoční chromatografia za použitia zmesi dichlórmetánu, metanolu a koncentrovaného vodného amoniaku v pomere 90 : 10 : 1, čím sa získa žltý olej. Tento olej sa podrobí ďalšiemu prečisteniu mžikovou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetánu a metanolu v pomere 95 : 5, čím sa získa oranžový olej. Po vykryštalizovaní zo zmesi dichlórmetánu a diizopropyléteru sa získa zlúčenina uvedená v nadpise (25 mg, 4 %).
Rf 0,27 (dichlórmetan : metanol, 90 : 10) δΗ (300 MHz, CDC13) 0,98 (9H, s), 1,31 (3H, d, J = 7 Hz) ,
1,60 (4H, m), 2,16 (3H, s), 2,24 (1H, m), 2,47 (3H, m), 2,82 (1H, m), 4,17 (1H, d, J = 9 Hz), 5,05 (1H, pentet, J = 7
Hz), 6,31 (1H, br d), 6,77 (1H, d, J = 8 Hz), 6,85 (2H, d, J = 8 Hz), 6,97 (1H, s), 7,02 (1H, t, J = 8 Hz), 7,22 (9H, komplex), 9,50 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 573 (M+, slabý), 531 (MH+ - O).
Príklad 6
Nl-[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino)karbonyl)- propyl]-(3S)-etoxy-(2R)-2-[3-(3fluór-4-fenoxyfenyl)propyl]-(N4-hydroxy)butandiamíd
N-[(Dimetylamíno)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridin-1ylmetylén]-N-metylmetaniniumhexafluórfosfát-N-oxid (88 mg,
0,232 mmol) sa pri 0 °C pod atmosférou dusíka pridá k miešanému roztoku (2S,3R)-3-([(1S)-2,2-dimetyl-l-([(ÍR)-1fenyletyl]amínokarbonyl)propyl]amínokarbonyl)-2-etoxy-6- (3fluór-4-fenoxyfenyl)hexánovej kyseliny (z preparatívneho postupu 8) (94 mg, 0,155 mmol) a diizopropyletylamínu (54 μΐ, 0,31 mmol) v bezvodom dimetylformamíde (2,5 ml). Po 45 minútach sa k vzniknutej zmesi pridá hydrochlorid hydroxylamínu (32 mg, 0,465 mmol) a potom diizopropyletylamín (81 μΐ, 0,465 mmol). Výsledná zmes sa 5 hodín mieša pri 0 °C a potom naleje do etylacetátu (50 ml) . Etylacetátová zmes sa premyje fosfátovým pufrovacím roztokom (pH 7, 3 x 30 ml) a nasýteným vodným chloridom sodným (30 ml) , vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetánu, metanolu a koncentrovaného vodného amoniaku v pomere 95 : 5 : 0,5 ako elučného činidla. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bezfarebnej peny (43 mg, 34 %).
Rf 0,32 (dichlórmetan : metanol : koncentrovaný vodný amoniak
v pomere 95 : 5 : 0, 5)
δΗ (400 MHz, CD3OD) 1,04 (9H, s) Z 1,12 (3H, t, J = 7 Hz),
1,32 (lh, m) , 1/42 (3H, d, J = 7 Hz) , 1,46 (2H, m) , 1,53
(1H, m), 2,42 (1H, dt, J = 14 a 7 Hz) , 2,54 (1H, ddd, J =
7, 9 a 14 Hz), 2,74 (1H, dt, J = 10 a 7,5 Hz), 3,32 (1H, čiastočne zatienený píkom CHD2OD) , 3,49 (1H, dq, J = 10 a 7 Hz), 3,69 (1H, d, J = 10 Hz), 4,39 (1H, s), 5,00 (1H, q, J = 7 Hz), 6,84 (4H, komplex), 6,92 (1H, dd, J = 12 a 2 Hz),
7,04 (lh, t, J = 8 Hz), 7,14 (3H, komplex), 7,26 (4H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 606 (MH+ - O), 533 (pík bázy, MNa+ (Ph (CH3)CHNH2) HRMS (pozitívny iontový elektrosprej) Nájdené: m/z 644,3113 C3sH44FNaN3O6 vypočítané 644,3112.
Nájdené: C 66, 79, H 7,05, N 6,66, C3sH44FN3O6.0,5 H2O vypočítané C 66,65, H 7,17, N 6,66 %
Príklad 7 (2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino}- karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-6-[(3metyl-4-fenyl)fenyl]-2-propylhexanová kyselina
.V/Ό H1C CH,
Spôsobom opísaným v príklade 1 sa tert.butyl-(2S,3R)-3({ [ (IS)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-metyl-(4-fenyl)fenyl]-2-propylhexanoát (z preparatívneho postupu 13) (360 mg,
0,56 mmol) nechá reagovať s trifluóroctovou kyselinou v bezvodom dichlórmetáne. Získa sa zlúčenina uvedná v nadpise (163 mg, 50 %, po prekryštalizovaní z metanolu) . Z matečných lúhov sa získa druhá frakcia kryštálov (45 mg, 14 %, po prekryštalizovaní z metanolu). Teplota tavenia 212 až 215 °C (po prekryštalizovaní z metanolu) δΗ (400 MHz, DMSO-de) 0/77 (3H, t, J = 6 Hz) , 0,92 (9H, s),
1,13 (1H, m), 1,29 (3H, d, J = 6,5 Hz a 3H, m, prekrývanie),
1, 61 (4H, m), 2,13 (3H, s), 2 ,35 (2H, m), 2,45 (1H, m), 2,66
(1H, br t, J = 8 Hz) , 2,60 (1H, dd, J = 9 a 15 Hz), 4,34
(1H, d, J = 9 Hz) , 4,90 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 6,89 (1H,
d, J = 7 Hz), 6,97 (2H, s a d, J = 8 Hz, prekrývanie) 7,25 (7H, komplex), 7,31 (1H, t, J = 7 Hz), 7,39 (2H, m), 7,94 (1H, br d), 8,29 (1H, br d), 11,66 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 586 (MH+) FTIR vmax (KBr disk) 1710,
1630, cm-1
Nájdené: C 72,60, H 8,14, N 4,59, C37H48N2O4.0, 33 MeOH.1,25 H2O vypočítané C 72,62, H 8,45, N 4,54 %
Príklad 8
Nl-[(1S)-2,2-Dimetyl-l-< { [ (ÍR)-1fenyletyl]amino)karbonyl)-propyl]-(N4-hydroxy)-(2R)-2-{3-[3metyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}-(3S)-propylbutandiamíd
Spôsobom opísaným v príklade 4 sa reakciou (2S,3R)-3({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]-2-propylhexanovej kyseliny (z príkladu 7, 130 mg, 0,22 mmol) s hydrochloridom hydroxylamínu (45,9 mg, 0,66 mmol) počas doby 5 hodín pri 20 °C a po rovnakom spracovaní a triturácii surového produktu s éterom získa zlúčenina uvedená v nadpise (64 mg, 49 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky.
Rf 0,31 (dichlórmetán : metanol : koncentrovaný vodný amoniak,
90 : 10 : D
δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,74 (3H, t, J = 6,5 Hz), 0,92 (9H,
s), 1,03 (1H, m), 1,16 (2H, m), 1,24 (3H, d, J = 7,5 Hz a
1H, m, prekrývanie), 1,37 (3H, m), 1,44 (1H, m), 2,12 (3H,
s a 1H, m, prekrývanie), 2,33 (1H, m), 2,44 (1H, m), 2,61
(1H, m), 4,31 (1H, d, J = 9 Hz), 4,89 (1H, pentet, J = 7,5 Hz), 6,88 (1H, d, J = 8 Hz), 6,95 (1H, s), 6,97 (1H, d, J = 8 Hz), 7,13 (3H, m), 7,22 (4H, m), 7,30 (1H, t, J = 8 Hz),
7,38 (2H, t, J = 8 Hz), 7,88 (1H, br d), 8,18 (1H, br d),
8,73 (1H, br s), 10,28 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 556 (pík bázy, MNH4 + - HCONHOH)
Nájdené: C 72,14, H 8,18, N 6,85, C37H49N3O4.0, 75 H2O vypočítané C 72, 46, H 8,30, N 6,85 % FTIR vmax (KBr disk) 3290, 2970, 2930, 1637, 1530, 700 cm-1
Príklad 9 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino}karbonyl)propyl]-(2R)-2-[3-(3-fluór-4-fenoxyfenyl)propyl]butandiamíd
Metoxid sodný (35 mg, 0,67 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri teplote miestnosti pridá k roztoku bezvodého hydrochloridu hydroxylamínu (45 mg, 0,67 mmol) v bezvodom metanole (1 ml). Výsledná zmes sa 2 hodiny mieša a rýchlo prefiltruje cez vrstvu pomocnej filtračnej látky Arbocel za premývania bezvodým metanolom (1 ml). K filtrátu sa pridá (2R) —2- [ (4S) —
2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-fluór-4fenoxy)fenyl]pentanamíd (z preparatívneho postupu 15, 103 mg,
0,16 mmol) s bezvodým metanolom (1 ml). Výsledná zmes sa 18 hodín mieša pri teplote miestnosti. Vzniknutý roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou, najprv na silanizovanom silikagéli Cis (40 až 63 pm) za použitia zmesi metanolu a vody v pomere 4 : 1 ako elučného činidla a potom na silikagéli s normálnymi fázami za použitia elučného gradientu dichlórmetán : metanol. Získa sa produkt vo forme bezfarebnej pevnej látky (25 mg, 26 %) s teplotou tavenia 90 až 95 °C.
Rf 0,38 (dichlórmetán : metanol, 90 : 10)
5H (300 MHz, CD3OD) 1,03 (9H, s), 1,45 (3H, d, J = 7 Hz),
1,52 (3H, m), 1,66 (IH, m), 2,53 (2H, m), 2,77 (IH, m), 4,02 (lh, d, J = 8 Hz), 4,36 (IH, s), 5,01 (IH, q, J = 7 Hz),
6,87 (4H, komplex), 6,97 (IH, d, J =12 Hz), 7,04 (IH, t, J = 8 Hz), 7,16 (3H, komplex), 7,28 (4H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 533 (pík bázy, MH+ - HONHCO)
Nájdené: C 65, 94, H 6,89, N 6,95, C33H40FN3O6.0, 4 H2O vypočítané C 65,96, H 6,84, N 6,99 %
Príklad 10 (N4,3S) -Dihydroxy-Nl- [ (1S) -2,2-dimetyľľ ({ [ (ÍR) -1-fenyletyl] amino)karbonyl)propy1]-(2R)-{3-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamíd
HONH
Spôsobom opísaným v príklade 9 sa (2R)-2-[(4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentanamíd (z preparatívneho postupu 16, 440 mg,
0,73 mmol) nechá 18 hodín pri teplote miestnosti reagovať s hydroxylamínom. Výsledný roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou na silanizovanom silikagéli Cia (40 až 63 pm) za použitia zmesi metanolu a vody v pomere 4:1a potom 5 : 1 ako elučného činidla. Získa sa bezfarebná pevná látka (339 mg, 81 %) s teplotou tavenia 95 až 97 °C.
Rf 0,16 (dichlórmetán : metanol, 95 : 5) δΗ (300 MHz, CDC13) 0,98 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz) ,
1,65 (3H, m), 1,89 (1H, m), 2,23 (3H, s), 2,58 (2H, br t, J =
Hz), 3,27 (1H, m), 4,15 (1H, d), 4,20 (1H, br s), 5,09 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,32 (1H, br s), 6,20 (1H, br d),
6,98 (1H, d, J = 8 Hz), 7,01 (1H, s), 7,10 (1H, d, J = 8
Hz), 7,31 (10H, komplex), 7,86 (br d), 9,50 (1H, br s).
LRMS (termosprej) MÚZ = 514 (pík bázy, MH+ - HONHCO)
Nájdené: C 70,50, H 7,58, N 7,23, 03^43^05.0,25 H2O vypočítané C 70,62, H 7,58, N 7,27 %
Príklad 11 (2R)-Nl-[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]—2—{3—[3-fluór-(4-fenyl)fenyl]propyl}-(N4hydroxy)butandiamíd
HO
a) Spôsobom opísaným v príklade 2 sa (3R)-3-({[(1S)-2,2dimetyl-ľ({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[(3-fluór-4-fenyl)fenyl]hexanová kyselina (z preparatívneho postupu 17) (426 mg, 0,78 mmol) nechá reagovať s hydrochloridom O-allylhydroxylaminu (128 mg, 1,17 mmol). Surový produkt sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexán : izopropylalkohol a potom trituráciou s éterom a etylacetátom. Získa sa (2R)-Nľ [ (1S) 2,2-dimetyl-1-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino}karbonyl)propyl]—2—{3— [3-fluór-(4-fenyl)fenyl]propyl}-(N4-3-propenyloxy)butandiamíd (260 mg, 55 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia 182 až 186 °C.
Rf 0,32 (hexán : izopropylalkohol, 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,87 (9H, s), 1,26 (3H, d, J = 6,5
Hz), 1,28 (1H, m), 1,43 (3H, m), 1,97 (1H, m), 2,13 (1H, m),
2,50 (2H, m), 2,84 (1H, m), 4,16 (2H, m), 4,27 (1H, d, J = 9 Hz), 4,87 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 5,15 (1H, d, J = 10 Hz),
5,20 (1H, d, J = 17 Hz), 5,85 (1H, m), 6,97 (2H, m),
7,13 (4H, komplex), 7,29 (2H, m), 7,45 (4H, m), 7,65 (1H, br
s), 8,26 (1H, br s), 10,37 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 602 (MH+) .
Nájdené: C 70,91, H 7,33, N 6,84, C36H44FN3O4.0,5 H2O vypočítané C 70,80, H 7,43, N 6,88 % mžikovou chromatografiou dichlórmetan : metanol
b) Spôsobom opísaným v príklade 2 sa za prítomnosti katalyzátora na báze palládia po dobu 2 hodín pri teplote spätného toku (2R)-Nľ [ (1S)-2,2-dimetyľľ ({ [ (ÍR)-ľfenyľ etyl]amino)karbonyl)propyl]-2-{3-[3-fluór-(4-fenyl)fenyl]propyl}-(N4-3-propenyloxy)butandiamíd nechá reagovať s mravenčanom amónnym (110 mg, 1,75 mmol) v zmesi etanolu a vody v pomere 4 : 1 (5 ml) . Po spracovaní sa zvyšok prečistí za použitia elučného gradientu koncentrovaný vodný amoniak a trituráciou s éterom. Získa sa (2R)-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]—2—{3—[3-fluór- (4fenyl)fenyl]propyl}-(N4-hydroxy)butandiamíd (120 mg, 61 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky.
Rf 0,25 (dichlórmetan : metanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-de) 0,87 (9H, s), 1,25 (3H, d, J = 6,5 Hz), 1,31 (1H, m), 1,44 (3H, m), 2,00 (1H, dd, J = 7 a 15
Hz), 2,13 (1H, dd, J = 4 a 15 Hz), 2,48 (2H, m), 2,80 (1H,
m), 4,26 (1H, d, J = 9 Hz), 4,87 (1H, pentet, J = 6,5 Hz),
6,97 (2H, m), 7.06 (1H, m), 7,13 (2H, t, J = 8 Hz), 7,20 (2H, m), 7,30 (2H, m), 7,43 (4H, komplex), 7,66 (1H, br d),
8,23 ( 1H, br d), 8,58 (1H, s), 10,27 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 563 (MH+)
Nájdené: C 70,02, H 7,25, N 7,52 C33H40FN3O4.0,25 H2O vypočítané C 70,00, H 7,21, N 7,42 %
Príklad 12 (3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amíno}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-(2S)-etoxy-6-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]hexánová kyselina
Hydrát hydroxidu litného (30 mg, 0,71 mmol) sa pridá k suspenzii metyl-(2S, 3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l- ({ [ (ÍR) -1fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-2-etoxy-6-[(3metyl-4-fenyl)fenyl]hexanoátu (z preparatívneho postupu 18, 384 mg, 0,64 mmol) v zmesi tetrahydrofuranu a vody v pomere 3 : 2 (10 ml). Výsledná zmes sa 2 hodiny mieša pri teplote miestnosti. Vzniknutý roztok sa okyslí IM kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje etylacetátom (3 x 30 ml) . Spojené extrakty sa vysušia síranom sodným a skoncentrujú za zníženého tlaku. Po triturácii s éterom sa získa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bezfarebnej pevnej látky (196 mg, 52 %) . δΗ (400 MHz, CD3OD) (zameniteľné vodíky sú zamenené len sčasti) 1,02 (9H, s), 1,16 (3H, t, J = 7 Hz), 1,42 (3H, d, J = 7 Hz), 1,52 (3H, m), 1,65 (IH, m), 2,16 (3H, s), 2,50 (2H, m), 2,74 (IH, m), 3,39 (IH, m), 3,58 (IH, m), 3,90 (IH, d, J = 9 Hz), 4,38 (IH, d, J = 9 Hz) , 5,00 (IH, pentet, J = 7 Hz),
6,92 (2H, m), 7,00 (2H, m), 7,20 (7H, komplex), 7,38 (2H, t, J = 7 Hz), 7,86 (IH, br d), 8,35 (IH, br d).
Nájdené: C 73,11, H 7,89, N 4,79, C36H46N2O5.0,25 H20 vypočítané C 73,12, H 7,92, N 4,74 %
Príklad 13
Nl-[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-(3S)-etoxy-(N4-hydroxy)-(2R)-2-{3-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamíd
N-[(Dimetylamino)-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]pyridín-lylmetylén]-N-metylmetaniniumhexafluórfosfát-N-oxid (164 mg, 0,43 mmol) sa pri 0 °C pod atmosférou dusíka pridá k miešanému roztoku (2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-(2)-etoxy-6[ (3-metyl-4-fenyl)fenyl]hexánovej kyseliny (z príkladu 12) (169 mg, 0,29 mmol) a diizopropyletylamínu (50 μΐ, 0,29 mmol) v bezvodom dimetylformamide (3 ml) . Po 60 minútach sa k reakčnej zmesi pridá hydrochlorid hydroxylamínu (60 mg, 0,86 mmol) a potom diizopropyletylamín (81 μΐ, 0,465 mmol). Vzniknutá zmes sa 16 hodín mieša pri 20 °C a zriedi éterom. Éterová zmes sa premyje vodou. Vodná vrstva sa extrahuje éterom (dvomi dávkami) a etylacetátom. Spojené organické roztoky sa premyjú vodou, vysušia síranom sodným a skoncentrujú za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí opakovanou mžikovou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetánu, metanolu a koncentrovaného vodného amoniaku v pomere najprv 97,5 : 2,5 : 0,5 a potom 96 : 4 : 0,5 ako elučného činidla. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bezfarebnej peny (20 mg, 11 %).
Rf 0,25 (dichlórmetán : metanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (300 MHz, CDC13) 0,97 (9H, s), 1,31 (3H, t, J = 7 Hz) , 1,55 (3H, d, J = 7 Hz), 1,71 (3H, m), 1,84 (IH, m), 2,23 (3H, s), 2,65 (2H, m), 2,84 (IH, m), 3,48 (IH, pentet, J = 7 Hz), 7,36 (IH, m), 3,95 (IH, d, J = 7 Hz), 3,98 (IH, d, J = 10 Hz), 5,12 (IH, q, J = 7 Hz) , 6,47 (IH, br d), 7,02 (2H, m), 7,13 (IH, d, J = 8 Hz) , 7,30 (10H, komplex), 9,65 (IH, br s) .
HRMS (pozitívny iontový elektrosprej)
Nájdené: m/z = 624,3403 C36H47NaN3O5 vypočítané 624,3413.
Príklad 14 (3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amíno]karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-6-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]hexanová kyselina
Spôsobom opísaným v príklade 1 sa terc.butyl-(3R)-3({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (z preparatívneho postupu 19) (535 mg, 0,85 mmol) nechá reagovať s trifluóroctovou kyselinou v bezvodom dichlórmetáne po dobu 2 hodín pri teplote miestnosti. Zvyšok sa rozpustí v toluéne, skoncentruje za zníženého tlaku (dvakrát) a prekryštalizuje z etylacetátu. Získa sa bezfarebná pevná látka (387 mg, 80 %) s teplotou tavenia 184 až 186 °C (po prekryštalizovaní z etylacetátu).
Rf 0,47 (hexan : éter : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, CD3OD) (zameniteľné vodíky zamenené len sčasti)
1,03 (9H, s), 1,51 (4H, m), 2,15 (3H, s), 2,36 (1H, dd, J = 5
a 17 Hz), 2,46 (2H , m) , 2,60 (1H, dd, J = 10 a 17 Hz), 2, 82
(1H, m), 3,32 (3H, s) , 3,57 (2H, d, J = 7 Hz), 4,42 (1H, d, J
= 10 Hz), 5,10 (1H, q, J = 7 Hz) , 6, 87 (1H, d, J = 8 Hz), 6, 98
(2H, sad, J = 8 Hz, prekrývanie), 7,22 (8H, komplex), 7, 39
(2H, t, J = 7 Hz), 7,74 (1H, br d), 8,48 (1H, b r d) .
LRMS (termosprej) m/z = 573 (MH+) FTIR vmax (KBr disk) 3300, 2960, 2930, 1711, 1639, 1543, 700 cm-1
Nájdené: C 73, 32, H 7,73, N 4,80, C35H44N2O5 vypočítané: C
73,40, H 7,74, N 4,89 %
Príklad 15 (3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3'-metoxy-2-metylbifén-4-yl)hexánová kyselina
Spôsobom opísaným v príklade 1 sa terc.butyl-(3R)-3({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-(3’-metoxy-2metylbifén-4-yl)hexanoát (z preparatívneho postupu 21) (660 mg, 1,0 mmol) nechá 3 hodiny pri teplote miestnosti reagovať s trifluóroctovou kyselinou v bezvodom dichlórmetáne. Zvyšok sa rozpustí v toluéne a toluénový roztok sa skoncentruje (dvakrát) . Zvyšok sa prekryštalizuje z etylacetátu. Získa sa bezfarebná pevná látka (326 mg, 54 %). Prekryštalizovaním matečných lúhov sa získa ďalších 107 mg (18 %) produktu.
Teplota tavenia 155,5 až 157,5 °C (po prekryštalizovaní z etylacetátu)
Rf 0,34 (hexan : éter : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 ΜΗζ, CD3OD) (zameniteľné vodíky zamenené len sčasti) 1,03 (9H, s), 1,51 (4H, m), 2,16 (3H, s), 2,37 (IH, dd, J = 5 a 17 Hz), 2,47 (2H, m), 2,59 (IH, dd, J = 10 a 17 Hz), 2,83 (IH, m), 3,32 (3H, s), 3,57 (2H, d, J = 7 Hz) , 3,80 (3H, s),
4,43 (IH, d, J = 10 Hz) , 5,10 (IH, q, J = 7 Hz), 6,77 (IH, s),
6,80 (IH, d, J = 7 Hz), 6,87 (2H, : m) , 6,97 (2H, m), 7,16 (3H,
m) , 7 ,28 (3H, m), 7,74 (IH, br d), 8,50 (IH, br d) .
LRMS (termosprej) m/z = 603 (MH+)
FTIR Vmax (KBr disk) 3300, 2960 , 2930, 1711, 1640, 1545,
1217, 1211, 700 cm-1
Nájdené: C 71,77, H 7,69, N 4,61, C36H46N2O6 vypočítané: C
71,73, H 7,69, N 4,65 %
Príklad 16 (2R)-Nl-[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-2-{3-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]propyl}(Ν-4-hydroxy)butandiamíd
a) Spôsobom opísaným v príklade 2 sa (3R)-3-({[(1S)-2,2dimetyľľ ({ [ (1S) -2-metoxy-lfenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-6-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]hexánová kyselina (z príkladu 14) (347 mg, 0,61 mmol) nechá reagovať s hydrochloridom O-allylhydroxylamínu (81 mg, 0,73 mmol). Po prečistení surového produktu mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 2 : 1 ako elučného činidla a následnou trituráciou éterom a etylacetátom sa získa (2R)-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]-2-{3-[(3metyl-4-fenyl)fenyl]propyl}(N4-3-propenyloxy)butandiamíd (306 mg, 80 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia
117 až 120 °C.
Rf 0,28 (hexan : etylacetát, 1 : 2) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1, 40 - 1,70 (4H, komplex),
2,20 (3H, s, a 1H, m, prekrývanie), 2,34 - 2,60 (3H, komplex), 2,76 (1H, m), 3,36 (3H, s), 3,63 (2H, d, J = 5 Hz), 4,28 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,34 (2H, d, J = 6 Hz), 5,12 (1H, dt, J = 7,5 a 5 Hz), 5,30 (2H, m), 5,90 (1H, m), 6,44 (1H, d, J = 7,5 Hz a 1H, br s, prekrývanie), 6,94 (1H, m), 6,98 (1H, s), 7,08 (1H, d, J = 7 Hz), 7,18 - 7,38 (8H, komplex), 7,40 (2H, m), 8,50 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 628 (MH+)
b) Miešaná zmes (2R)-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1S)-2metoxy-l-fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]-2-{3-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]propyl}(N4-3-propenyloxy)butandiamídu (300 mg, 0,4 8 mmol) a mravenčanu amónneho (300 mg, 4,76 mmol) sa rozpustí v horúcej zmesi etanolu a vody v pomere 4 : 1, 6 ml). K výslednému bezfarebnému roztoku sa pridá roztok octanu palladnatého (4 mg, 0,018 mmol) a trifenylfosfínu (9,6 mg, 0,037 mmol) v zmesi etanolu a vody v pomere 4 : 1 (2 ml) .
Reakčná zmes sa 60 minút zahrieva k spätnému toku a potom ochladí. Vzniknutý hnedý roztok sa zriedi etylacetátom (100 ml) a etylacetátová zmes sa premyje nasýteným vodným chloridom sodným (2 x 50 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cie (40 až 63 pm) , elúcia zmesi metanolu a vody v pomere 4 : 1) a potom trituráciou s diizopropyléterom. Získa sa (2R)-Nl-[(IS)-2,2dimetyl-1-({[(IS)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]—2—{3—[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]propyl}-(Ν-4-hydroxy)butandiamíd (226 mg, 80 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia 92 až 96 °C.
Rf 0,57 (dichlórmetán : metanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, CH3OD) 1,02 (9H, s), 1,40 - 1,68 (4H, m), 2,17 (3H, s), 2,20 (1H, m), 2,36 (1H, m), 2,48 (2H, m), 2,86 (1H, m), 3,30 (3H, s), 3,58 (2H, d, J = 6,5 Hz), 4,40 (1H, s), 5,10 (1H, t, J = 6,5 Hz), 6,88 (1H, m), 6,98 (2H, m), 7,10 - 7,36 (8H, komplex), 7,39 (2H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 588 (MH+)
Nájdené: C 70, 95, H 7,85, N 7,00, C35H45N3O5.0,25 H2O vypočítané C 70,98, H 7,74, N 7,09 %
Príklady 17 a 18 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(IS)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[4-(4-kyanofenyl)-3metylfenyl]propyl]butandiamíd a (N4,3S)-dihydroxy-Nl-[(IS)2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]- (2R) 2-{3-[4-(4-hydroxyamídino)fenyl-3-metylfenyl]propyl}butandiamíd
CN
HONH
CN
OH
ο
Spôsobom opísaným v príklade 9 sa (2R)—5—{[4—(4— kyanofenyl)-3-metyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2, dimetyl-5-oxo-l,3dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]pentanamíd (z preparátívneho postupu 22) (384 mg, 0,62 mmol) nechá 18 hodín pri teplote miestnosti reagovať s hydroxylamínom. Výsledný roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cie (40 až 63 pm), elúcia zmesí metanolu a vody v pomere 70 : 30 a potom 80 : 0), pri ktorej sa získajú dve frakcie. Prvý eluovaný produkt bol identifikovaný ako (N4,3S)-dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino)karbonyl)propyl] — (2R)—2—(3 — [4 — (4 — kyanofenyl)-3-metylfenyl]propylJbutandiamíd,
Rf 0,38 (dichlórmetán : metanol, 90 : 10), po triturácii s diizopropyléterom vo forme bielej pevnej látky (115 mg, 31 %) s teplotou tavenia 103 až 109 °C.
δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,92 (9H, s), 1,25 (1H, m), 1,26 (3H, d, J = 7,5 Hz), 1,40 - 1,54 (3H, m), 2,14 (3H, s), 2,40 (1H, m), 2,44 (1H, m), 2,70 (1H, m), 3,76 (1H, t, J = 7,5 Hz), 4,34 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,90 (1H, pentet, J = 7,5 Hz), 5,24 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,98 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,10 (3H, m), 7,20 (2H,m), 7,46 (2H, d, J = 8 Hz), 7,58 (1H, d, J = 9,5 Hz), 7,82 (2H, d, J = 8 Hz), 8,26 (1H, d, J = 7,5 Hz), 8,80 (1H, br s), 10,56 (1H, br s) .
LRMS (termosprej) m/z = 538 (pík bázy, M+ - HONHCO)
Nájdené: C 69,26, H 7,15, N 9,10, C35H42N4O5. 0, lEtOAc. 0,4H2O vypočítané C 69,16, H 7,15, N 9,11 %
Druhý eluovaný produkt bol identifikovaný ako (N4,3S)dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino} karbonyl) propyl] - (2R)—2—{3—[4—(4— hydroxyamídíno)fenyl-3-metylfenyl]propylJbutandiamíd,
Rf 0,20 (dichlórmetán : metanoi, 90 : 0) vo forme bielej pevnej látky (84 mg, 21 %) s teplotou tavenia 131 až 135 °C. δΗ (400 MHz, DMSO-de) 0,90 (9H, s), 1,24 (1H, m, a 3H, d, J = 7 Hz, prekrývanie), 1,38 - 1,58 (3H, m), 2,16 (3H, s), 2,40 (1H, m), 2,44 (1H, m), 2,58 (1H, m),. 3,76 (1H, t, J = 7 Hz),
4,34 (1H, d, J = 10,5 Hz), 4,90 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,24 (1H, d, J = 7 Hz), 5,80 (2H, s), 6,96 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,04 - 7,20 (3HZ m), 7,21 (2H, m), 7,46 (2H, d, J = 8 Hz),
7,58 (1H, d, J = 10,5 Hz), 7,70 (2H, d, J = 8 Hz), 8,24 (1H, d, J = 7 Hz), 8,80 (1H, br s), 9,60 (1H, s), 10,58 (1H, br s). LRMS (termosprej) m/z = 632 (MH+)
Nájdené: C 64,86, H 7,21, N 10,28, C35H45N5O6.0,1CH3OH. 0, 9H2O vypočítané C 64,74, H 7,31, N 10,75 %
Príklad 19 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]-amino)karbonyl)propyl]-(2R)—2—{3—[4—(3-kyanofenyl)3-metylfenyl]propylJbutandiamíd
HONH
Metoxid sodný (43 mg, 0,80 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri teplote miestnosti pridá k roztoku bezvodého hydrochloridu hydroxylamínu (56 mg, 0,80 mmol) v bezvodom metanole (1 ml). Vzniknutá zmes sa 2,5 hodiny mieša a rýchlo prefiltruje cez vrstvu pomocnej filtračnej látky Arbocel za premývania bezvodým metanolom (1 ml) . K prefiltrovanej zmesi sa pri 4 °C pridá (2R)-5-{[4-(3-kyanofenyl)-3-metyl]fenyl}-2-[(4 S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-pentanamíd (z preparatívneho postupu 24) (123 mg, 0,20 mmol) v bezvodom metanole (1 ml) . Reakčná zmes sa 15 minút mieša, potom nechá zahriať na teplotu miestnosti a mieša ďalších 9 hodín. Vzniknutý roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cie (40 až 63 pm) za použitia zmesi metanolu a vody v pomere 3 : 1 ako elučného činidla. Zvyšok sa azeotropicky odparí s etanolom a potom s etylacetátom a trituruje s diizopropyléterom. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme nekryštalickej pevnej látky (58 mg, 48 %) bez určitej teploty tavenia.
Rf 0,11 (dichlórmetan, metanol a koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-de) 0,92 (9H, s), 1,24 (1H, m a 3H, d, J = 7 Hz, prekrývanie), 1,38 - 1,54 (3H, m), 2,14 (3H, s), 2,40 (1H, m), 2,48 (1H, m), 2,70 (1H, m), 3,76 (1H, t, J = 7,5 Hz), 4,34 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,90 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,22 (1H, d,
J = 7,5 Hz), 6,98 (1H, d, J = 7 Hz), 7,02 (2H, m), 7,14 (3H,
m), 7,22 (2H, d, J = 7 Hz), 7,58 (1H, d, J = 9,5 Hz), 7,60 (2H, d, J = 5 Hz), 7,72 ( 1H, s), 7,80 (1H, m), 8,26 (1H, d, J = 7 Hz), 8,80 (1H, brs), 10,56 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 599 (MH+) , 538 (pík bázy, M+ HONHCO)
Nájdené: C 69,12, H 7,20, N 9,04, C35H42N4O5.0, 5 H2O vypočítané C 69,17, H 7,13, N 9,22 %
Príklad 20 (2R)—2—{3—[4-(3-Karbamoylfenyl)-3-metylfenyl]propyl}(N4,3S)-dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]amino}-karbonyl)propyl]butandiamíd
Spôsobom opísaným v príklade 19 sa (2R)-5-{[4-(3karbamoylfenyl)-3-metyl]fenyl}-2-[(4 S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]pentanamíd (z preparatívneho postupu 26) (126 mg, 0,20 mmol) nechá pri teplote miestnosti po dobu 13 hodín reagovať s hydroxylamínom. Výsledný roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cis (40 až 63 pm) ) za použitia zmesi metanolu a vody v pomere 3 : 2 ako elučného činidla. Zvyšok sa azeotropicky odparí s etanolom a potom etylacetátom a trituruje s dietyléterom. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bielej pevnej látky (74 mg, 60 %) s teplotou tavenia 85 až 100 °C.
Rf (dichlórmetán, metanol a koncentrovaný vodný amoniak, 90 :
: 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,94 (9H, s), 1,24 (1H, m a 3H, d, J = 7
Hz, prekrývanie), 1,43 ( 3H, m), 2, 14 (3H, s), 2,40 (1H, m) ,
2,50 (1H, m), 2,70 (1H, m), 3,76 (1H, t, J = 7 Hz) , 4,36 (1H,
d, J = 10 Hz), 4,90 (1H, pentet, J = 7 Hz) , 5,24 (1H, d, J =
7,5 Hz) , 6,98 (1H, d, J = 7 Hz), 7,02 (2H, m), 7,14 (3H, m) ,
7,20 (2H, m), 7,34 (1H, s), 7,40 (1H, d, J = 7 Hz) , 7,46 (1H,
d, J = 7 Hz), 7,58 (1H, d, J = 10 Hz) , 7,80 (1H, s), 7,82 (1H,
d, J = 7 Hz) , 7,98 (1H, s), 8,26 (1H, d, J = 7 Hz) , 8,90 (1H,
s) , 10,60 (1H, s) .
LRMS (termosprej) m/z = 617 (MH+)
Nájdené: C 65,35, H 7,29, N 8,57, C35H44N4O6.1,33 H20 vypočítané C 65,61, H 7,35, N 8,74 %
Príklad 21 (3R)-3-[({({[(1S)-2-Metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)[(1S) -2-metyl]-1-propyl}amino)karbonyl]-6-[3-metyl-(4fenyl)fenyl]-hexánová kyselina
Spôsobom opísaným v príklade 1 sa terc.butyl-(3R)-3[({({[(1S)-2-metoxy-1-fenyletyl]amino}karbonyl)-[(1S)-2metyl]-1-propylJamíno)karbonyl]-6-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (z preparatívneho postupu 28) (700 mg, 1,14 mmol) 4 hodiny pri teplote miestnosti nechá reagovať s trifluóroctovou kyselinou v bezvodom dichlórmetáne. Zvyšok sa azeotropicky odparí s toluénom (dvakrát) a prekryštalizuje z dietyléteru. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bezfarebnej pevnej látky (506 mg, 79 %) s teplotou tavenia 141 až 144 °C.
Rf 0,28 (pentan : etylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,83 (3H, d, J = 8 Hz) , 0,85 (3H, d, J = 8 Hz), 1,36 (1H, m), 1,48 ( 3H, m), 1,94 (1H, oktet, J = 8 Hz), 2,18 (3H, s), 2,22 (1H, m), 2,42 (3H, m), 2,76 (1H, m),
3,20 (3H, s), 3,44 (2H, d, J = 7,5 Hz), 4,20 (1H, t, J = 8
Hz), 5,00 (1H, q, J = 7,5 Hz), 6,94 (1H, m), 7,00 (2H, m),
7,12 - 7,38 (8H, komplex), 7,40 (2H, m), 7,90 (1H, d, J = 8
Hz), 8,02 (1H, d, J = 7,5 Hz), 12,04 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 559 (MH+)
Nájdené: C 72,86, H 7,52, N 5,04, C34H42N2O5 vypočítané C 73,09, H 7,58, N 5,01 %
Príklad 22 (3R)-3-({[({[(1S)-Metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)-(1S)-2fenyletyl]amino)karbonyl)-6-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]-hexánová kyselina
Spôsobom opísaným v príklade 1 sa terc.butyl-(3R)-3({[({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)-(1S)-269 fenyletyl]amino}karbonyl)-6-[3-metyl(4-fenyl)fenyl]hexanoát (z preparatívneho postupu 30) (920 mg, 1,39 mmol) nechá 4 hodiny pri teplote miestnosti reagovať s trifluóroctovou kyselinou v bezvodom dichlórmetane. Zvyšok sa azeotropicky odparí s toluénom (dvakrát) a prekryštalizuje z dietyléteru. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bezfarebnej pevnej látky (665 mg, 79 %) s teplotou tavenia 152 až 157 °C.
Rf 0,27 (pentan, etylacetát a kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 1,30 - 1,50 (4H, m), 2,16 (3H, s), 2,18 (1H, m), 2,30 (1H, m), 2,42 (2H, m), 2,62 (1H, m), 2,84 (1H, m), 2,98 (1H, m), 3,18 (3H, s), 3,38 (2H, d, J = 6 Hz), 4,60 ( 1H, dt, J = 6 a 8,5 Hz), 4,98 (1H, q, J = 8 Hz), 6,94 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,12 - 7,38 (13H, komplex), 7,40 (2H, m), 8,08 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,20 (1H, d, J = 8 Hz), 12,05 (1H, br s). LRMS (termosprej) m/z = 607 (MH+)
Nájdené: C 75,02, H 6,96, N 4,63, C38H42N2O5 vypočítané C 75,22, H 6,98, N 4,62 %
Príklad 23
Hydrochlorid (3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-{[(ÍR)-1-(4-pyridyl)etylamíno]karbonyl}propyl]amino]karbonyl)-6-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]hexánovej kyseliny
Plynný chlorovodík sa pri 0 °C vedie roztokom terc.butyl(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-{[(ÍR)-1-(4-pyridyl)etylamíno]karbonyl}propyl]amino}karbonyl)-6-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]hexanoátu (z preparatívneho postupu 31) (285 mg,
0,47 mmol) v dioxane (15 ml) pod atmosférou dusíka až do jeho nasýtenia. Vzniknutý roztok sa 3 hodiny mieša pri 0 °C a potom skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa trituruje s dietyléterom, čím sa získa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bielej pevnej látky (390 mg, 88 %) s teplotou tavenia 132 °C (za rozkladu).
Rf 0,16 (etylacetát : hexan : kyselina octová, 75 : 25 : 1) δΗ (400 MHz, CD3OD) 1,06 (9H, s), 1,50 (4H, m a 3H, d, J % 7 Hz, prekrývanie), 2,16 (3H, s), 2,40 - 2,60 (3H, m), 2,64 (1H, m), 2,90 (1H, m ), 4,32 (1H, d, J = 10 Hz), 5,16 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,86 (1H, m), 6,98 (2H, m), 7,21 (2H, m), 7,30 (1H, m), 7,40 (2H, m), 7,90 (1H, d, J = 10 Hz), 7,96 (2H, d, J = 8 Hz), 8,56 (2H, d, J = 8 Hz), 8,90 (1H, d, J = 7 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 544 (MH+)
Nájdené: C 65,43, H 7,28, N 6,72, C33H41N3O4. HCl. 1,5 H20 vypočítané C 65,28, H 7,47, N 6,92 %
Príklad 24
Nl-[(1S)-2,2-Dimetyl-l-([(ÍR)-1-(3-pyridyl)etylamíno]karbonyl) propyl] -(N4-hydroxy)-(2R)-2-{3-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamíd
a) Spôsobom opísaným v príklade 2 sa (3R)-3-({[(1S)-2,2dimetyl-l-{[(ÍR)-1-(3pyridyl)etylamíno]karbonyl}propyl]amino}karbonyl)-6-[(3-metyl4-fenyl)fenyl]hexánová kyselina (z preparatívneho postupu 32) (330 mg, 0,57 mmol) nechá reagovať s hydrochloridom 0allylhydroxylamínu (76 mg, 0,68 mmol). Surový produkt sa prečistí prekryštalizovaním z horúceho etylacetátu. Získa sa Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-{[(ÍR)-1-(3pyridyl)etylamíno]karbonyl)propyl]-(N4-propenyloxy)-(2R)-2-{3[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamíd (219 mg, 64 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia 187 až 189 °C.
Rf 0,21 (etylacetát)
5« ( 400 MHz, C (MSO-de) 0,90 ( 9H, s; U 1, 32 (3H, d, r J = 7, 5 Hz) ,
1,42 (4H, m), 2,04 (1H, m), 2,16 (3H, s), 2,18 (1H, m) t 2,46
(2H, m) , 2,86 (1H, m), 4,20 (2H, m) , 4,28 (1H, d, J = 9 Hz) ,
4,96 (1H, m), 5,20 (2H, m), 5,88 (1H, m), 6,94 (1H, m) Z 7,00
(2H, m), 7,18 (1H, m), 7,26 (2H, m) , 7,32 (1H, m), 7,4 0 (2H,
m), 7,60 (1H, m), 7,70 (1H, m) , 8, ,38 ( 1H, m), 8, 40 (1H, d, , J =
7,5 Hz), 8,48 (1H, s), 10,85 (1H, s) .
LRMS (APCI) m/ z = 599 (MH+)
b) Spôsobom opísaným v príklade 2 sa Nl—[(1S)—2,2— dimetyl-1-([(ÍR)-1-(3-pyridyl)etylamíno]karbonyl)propyl]- (N4propenyloxy)-(2R)-2-{3-[3-metyl-(4fenyl)fenyl]propylJbutandiamíd (219 mg, 0,37 mmol) po dobu
1,25 hodiny pri teplote spätného toku nechá reagovať s mravenčanom amónnym (230 mg, 3,66 mmol) v zmesi etanolu a vody v pomere 4 : 1 (8 ml) za prítomnosti palládiového katalyzátora. Po spracovaní sa zvyšok prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Ci8 (40 až 63 pm) ) za použitia zmesi metanolu a vody v pomere 4 : 1 ako elučného činidla, a trituráciou s diizopropyléterom. Získa sa Nl—[ (1S) —
2,2-dimetyl-l-([(ÍR)-1-(3-pyridyl)etylamíno]karbonyl)propyl]72 (Ν4-hydroxy)-(2R)-2-{3-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamíd (122 mg, 60 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia 112 až 114 °C.
Rf 0,33 (silanizovaný silikagél Cis, metanol : voda, 5 : 1) δΗ (400 MHz, CD3OD) 1,01 (9H, s), 1,46 (3H, d, J = 7 Hz), 1,40 - 1,64 (4H, m), 2,16 (3H, s), 2,20 (1H, m), 2,36 (1H, m), 2,50 (2H, m), 2,88 (1H, m), 4,32 (1H, s), 5,02 (1H, q, J = 7 Hz),
6,92 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,18 (1H, m), 7,22 (2H, m), 7,32
(1H, m), 7,40 (2H, m) , , 7,72 (lH,m), 8,28 (lH,m), 8,48 (1H, s).
LRMS (termosprej) m/z = 559 (MH+)
Nájdené: C 70,13, H 7,83, N 9,48, C33H42N4O4.9, 33H2O. 0, 33DIPE
vypočítané C 70,20 , H 7,80, N 9,63 %
Pri klad 25
(N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-(4pyridyl)-etyl]amino}karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[3-metyl-(4fenyl)- fenyl]propylJbutandiamíd
(R)- ( + )-1-(4-Pyridyl)etylamín sa pripraví spôsobom opísaným v J. Amer. Chem. Soc., 1973, 95, 811, prekryštalizovaním soli racemického amínu s kyselinou (-)vínnou, [a]D20 = -16,7° (c = 0,20, H20) . Volná báza sa získa tak, že sa tartrátová sol rozpustí v prebytku vodného hydroxidu sodného nasýteného chloridom sodným a vzniknutý roztok sa niekolkorát extrahuje dichlórmetánom. Volná báza sa použije bezprostredne, bez ďalšieho prečistenia.
a) 7-Azabenzotriazol-lyloxytris(pyrrolidíno)fosfoniumhexafluórfosfát (208 mg, 0,40 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri 0 °C pridá k miešanému roztoku (2R)-N-[(1S)-1-(karboxy)-2,2-dimetylpropyl]-2-[(4S)2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentanamídu (z preparatívneho postupu 33) (198 mg,
0,40 mmol), (R)-(+)-1-(4-pyridyl)etylamínu (49 mg, 0,40 mmol) a kolidínu (53 pl, 0,40 mmol) v bezvodom dichlórmetáne (4 ml). Po 1 hodine sa vzniknutý roztok 3 hodiny mieša pri 20 °C. Reakčná zmes sa naleje do etylacetátu (100 ml) a vody (100 ml) . Aby sa dosiahlo oddelenie fáz, pridá sa k zmesi chlorid sodný. Vrstvy sa oddelia a organická vrstva sa premyje 5% vodným hydrogénuhličitanom sodným (2 x 75 ml) , pričom sa pridáva ďalší pevný chlorid sodný. Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexan : etylacetát 5 : 1 až 1 : 5 a výsledný produkt sa trituruje s diizopropyléterom. Získa sa (2R)-2-[(4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-(4-pyridyl)etyl]amino]karbonyl)propyl]-5-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentanamíd (104 mg, 43 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia 167 až 170 °C.
Rf 0,10 (hexan : etylacetát, 1 : 3) δΗ (400 MHz, DMSO-de) 0,92 (9H, s), 1,34 (3H, d, J = 7 Hz) ,
1,45 (3H, s a 2H , m, prekrývanie) , 1,56 (3H, s a 1H, m,
prekrývanie), 1,72 - 1, 82 (1H, m), 2,14 (3H, s), 2,40 - 2,60
(2H, m), 2,98 (1H, m) , 4,40 (1H, d, J = 9 Hz), 4,46 (1H, d, J
= 9 Hz) , 4,90 (1H, pentet, J = 7 Hz; ), 6,94 (1H, m), 7,00 (2H,
m), 7,20 (2H, d, J = 5, 5 Hz) , 7,30 ( 3H, m), 7,40 (2H, m), 7,86
(1H, d, J = 9 Hz) , 8,30 (2H, d, J = 5,5 Hz), 8,58 (1H, d, J =
Hz) .
LRMS (termosprej) m/z = 600 (MH+)
Nájdené: C 69, 04, H 7,31, N 6,68, C36H45N3O5.1,2H2O. 0,13EtOAc vypočítané C 69,32, H 7,71, N 6,64 %
b) Spôsobom opísaným v príklade 19 sa (2R)-2-[(4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-(4-pyridyl)etyl]amino)karbonyl)propyl]-5-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentanamíd (zo stupňa a) (86 mg, 0,14 mmol) 18 hodín pri teplote miestnosti nechá reagovať s hydroxylamínom. Vzniknutý roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cie (40 až 63 μ)) za použitia zmesi metanolu a vody v pomere 3 : 1 ako elučného činidla. Zvyšok sa azeotropicky odparí s etanolom a potom s etylacetátom a trituruje s diizopropyléterom. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bielej pevnej látky (45 mg, 56 %) s teplotou tavenia 100 až 110 °C.
Rf 0,10 (dichlórmetan : metanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,92 (9H, s), 1,26 (1H, m a 3H, d, J = 7
Hz, prekrývanie) f 1,36 - U □0 (3H, m), 2,10 (3H, s), 2,40 (1H,
m) , 2,48 (1H, m) r 2,48 (1H, m), 2,70 (1H, m), 3, 80 (1H, t, J =
7,5 Hz), 4,34 ( 1H , d, J = 9,5 Hz), 4,88 (1H, pentet, J = 7
Hz) , 5,24 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,90 (1H, m), 6,98 (2H, m),
7,20 (2H, d, J = 5,5 Hz) , 7,28 (3H, m), 7,40 (2H, m), 7, 60
(IH, d, J = 9,5 Hz), 8,32 (2H, d, J = 5,5 Hz), 8,42 (IH, d, J = 7 Hz), 8,80 (IH, s), 10,60 (IH, br s).
Nájdené: C 67,88, H 7,44, N 9,42, C33H42N4O5.0,5H2O vypočítané C 67, 90, H 7,43, N 9,06 %
Príklad 26 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-(3-pyridyl)etyl]amino]karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]propyl}butandiamíd
(R)-(+)-1-(3-Pyridyl)etylamín sa pripraví spôsobom opísaným v J. Amer. Chem. Soc., 1973, 95, 811, prekryštalizovaním soli racemického amínu s kyselinou (-)vínnou, [a]D 20 = -20,1° (c = 1,67, H2O) . Voľná báza sa získa tak, že sa tartrátová sol rozpustí v prebytku vodného hydroxidu sodného nasýteného chloridom sodným a vzniknutý roztok sa niekoľkorát extrahuje dichlórmetánom. Voľná báza sa použije bezprostredne bez ďalšieho prečistenia.
a) Spôsobom opísaným v príklade 25 (a) sa (2R)-N-[(1S)-1(karboxy)-2,2-dimetylpropyl]-2-[(4 S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3dioxolan-4-yl]-5-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]pentanamíd (z preparatívneho postupu 33) (86 mg, 0,14 mmol), nechá 3 hodiny pri teplote miestnosti reagovať s (R)—(+)—1—(3— pyridyl)etylamínovou voľnou bázou (49 mg, 0,40 mmol). Po rovnakom spracovaní a triturácii s diizopropyletyléterom sa získa (2R)-2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N[(1S)-2,2-dimetyl-l-({ [ (ÍR)-(3-pyridyl)etyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]pentanamíd (165 mg, 69 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia 172 až 176 °C.
Rf 0,10 (hexán : etylacetát, 1 : 3) δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,92 (9H, s), 1,35 (3H, d, J = 7,5 Hz),
1,45 (2H, m a 3H, s, prekrývanie), 1,55 (1H, m a 3H, s,
prekrývanie), 1,75 (1H, m), 2,12 (3H, s), 2 , 38 - 2,58 (2H, m),
2,95 (1H, m), 4,35 (1H, , d, J = 10 Hz), 4, 45 (1H, d, J = 9,5
Hz), 4,98 (1H, pentent, J = 7,5 Hz) , 6, 94 (1H, m), 7,00 (2H,
m) , 7,10 (1H, m) , 7,25 (2H, m), 7,35 (1H, m) , 7,40 (2H, m),
7,68 (1H, d, J = 8 Hz) , 7,82 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,32 (1H,
m), 8,45 (1H, s), 8,55( 1H, d, J = = 7,5 Hz) .
LRMS (termosprej) m/z = 600 (MH+)
b) Spôsobom opísaným v príklade 19 sa (2R)—2—[(4S)—2,2— dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-(3-pyridyl)etyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-metyl-4fenyl) fenyl] pentanamíd (zo stupňa a) (142 mg, 0,24 mmol) po dobu 17 hodín pri teplote miestnosti nechá reagovať s hydroxylamínom. Výsledný roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cig (40 až 63 pm)) za použitia elučného gradientu metanol : voda 60 : 40 až 80 : 20. Získaná žltohnedá pevná látka sa znovu prečistí chromatografiou s obrátenými fázami za použitia zmesi metanolu a vody v pomere 75 : 25 ako elučného činidla. Produkt sa azeotropicky odparí s etanolom a etylacetátom a trituruje s diizopropyléterom. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bielej pevnej látky (50 mg, 36 %) s teplotou tavenia 85 až 95 °C.
Rf 0,11 (dichlórmetan : metanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,90 (9H, s), 1,25 (1H, m), 1,30 (3H, d, J = 7 Hz), 1,36 - 1,55 (3H, m), 2,15 (3H, s), 2,40 (2H, m),
2,70 (1H, m), 3,78 (1H, t, J = 7,5 Hz), 4,30 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,94 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,24 (1H, d, J = 7,5 Hz),
6,90 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,12 (1H, m), 7,20 - 7,38 (3H, m),
7,40 (2H, m), 7,60 (2H, m), 8,32 (1H, m), 8,38 (1H, d, J = 7 Hz), 8,50 (1H, s), 8,82 (1H, br s), 10,55 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 514 (pík bázy, M+ - HONHCO)
Nájdené: C 67,52, H 7,44, N 9,52, C33H42N4O5.0, 67 H2O vypočítané C 67,57, H 7,44, N 9,55 %
Príklad 27 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-({ [(1S) -2-hydroxy-1fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[3-metyl-(4fenyl)fenyl]propylJbutandiamíd
a) Spôsobom opísaným v príklade 25(a) sa (2R) -N-[(1S)-1(karboxy)-2,2-dimetylpropyl]-2-[(4 S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3dioxolan-4-yl]-5-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]pentanamíd (z preparatívneho postupu 33) (150 mg, 0,30 mmol), nechá 3 hodiny pri teplote miestnosti reagovať s (S)-(+)-2-fenylglycinolom (41 mg, 0,30 mmol). Výsledná zmes sa naleje do etylacetátu (75 ml) a premyje 0,5M vodným dihydrogénfosforečnanom sodným (2 x 50 ml) (aby sa dosiahlo rozdelenie fáz, pridá sa chlorid sodný). Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Olejovitý zvyšok sa trituruje s dietyléterom. Získa sa (2R)-2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1S)-2-hydroxy-lfenyletyl]amino}-karbonyl)propyl]-5-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentanamíd (80 mg, 43 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia 206 až 209 °C.
Rf 0,33 (hexán : etylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,95 (9H, s), 1,42 (2H, m a 3H, s, prekrývanie), 1,56 (1H, m a 3H, s, prekrývanie), 1,75 (1H, m),
2,16 (3H, s), 2,48 (2H, m), 2,95 (1H, m), 3,55 (2H, m), 4,40 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,48 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,75 (1H, t, J = 5,5 Hz), 4,84 (1H, q, J = 7 Hz), 6,94 (1H, m), 7,00 (2H, m),
7,10 (3H, m), 7,20 (2H, m), 7,30 (3H, m), 7,40 (2H, m), 7,80 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,32 (1H, d, J = 7 Hz) .
LRMS (termosprej) m/z = 615 (MH+)
Nájdené: C 71,46, H 7,53, N 4,59, C37H4GN2O6.9,33H2O vypočítané C 71,59, H 7,58, N 4,51 %
b) Spôsobom opísaným v príklade 19 sa (2R)-2-[(4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(1S)-2-hydroxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)-propyl]-5- [ (3metyl-4-fenyl)fenyl]pentanamíd (zo stupňa a) (66 mg, 0,11 mmol) po dobu 17 hodín pri teplote miestnosti nechá reagovať s hydroxylamínom. Výsledný roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cig (40 až 63 pm) ) za použitia elučného gradientu metanol : voda 60 : 40 až 80 : 20. Zvyšok sa azeotropicky odparí s etanolom a potom s etylacetátom a trituruje s diizopropyléterom. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme žltohnedej pevnej látky (35 mg, 54 %) s teplotou tavenia 80 až 90 °C.
Rf 0,06 (dichlórmetán : metanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,92 (9H, s), 1,22 (1H, m), 1,30 - 1,55 (3H, m), 2,15 (3H, s), 2,40 (2H, m), 2,68 (1H, m), 3,56 (2H, m), 3,78 (1H, t, J = 7,5 Hz), 4,38 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,75 (1H, m), 4,82 (1H, q, J = 7,5 Hz), 5,22 (1H, d, J = 7,5 Hz),
6,90 (1H, m), 7,00 (2H, m), 7,15 (3H, m), 7,20 - 7,38 (5H, m),
7,40 (2H, m), 7,58 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,20 (1H, d, J = 7,5
Hz), 8,80 (1H, br s), 10)58 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 529 (pík bázy, M+ - HONHCO)
Nájdené: C 67,91, H 7,71, N 6,58, C34H43N3O6.0,67H20.0,25DIPE vypočítané C 67,99, H 7,69, N 6,70 %
Príklad 28 (N4,3S) -Dihydroxy-Nl [ (1S) -2,2-dimetyľľ ({ [ (ÍR) -2,3-dihydro-lH-inden-ľyl] amino} karbonyl) propyl] - (2R) -2-{ 3 - [3-metyl- (4fenyl)fenyl]propylJbutandiamíd
a) Spôsobom opísaným v príklade 25(a) sa (2R)-N-[ (1S)-1(karboxy) -2,2-dimetylpropyl] -2- [ (4S) -2,2-dimetyľ5-oxo-l, 3dioxolan-4-yl]-5-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]pentanamíd (z preparatívneho postupu 33) (150 mg, 0,30 mmol), nechá 3 hodiny pri teplote miestnosti reagovať s (R)-(-)-1-amínoindanom (40 mg, 0,30 mmol). Výsledná zmes sa naleje do etylacetátu (75 ml) a premyje 0,5M vodným dihydrogénfosforečnanom sodným (2 x 50 ml) a 5% vodným hydrogénuhličitanom sodným (50 ml) (aby sa dosiahlo rozdelenie fáz, pridá sa chlorid sodný). Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Olejovitý zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexan : etylacetát 10 : 1 až 2 : 1 a potom trituruje s dietyléterom. Získa sa (2R)—2—[(4S)—
2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-2,3-dihydro-lH-inden-l-yl]amino]karbonyl)propyl]-5[(3-metyl-4-fenyl)-fenyl]pentanamíd vo forme bielej pevnej látky (135 mg, 74 %).
Rf 0,76 (hexan : etylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1)
ÓH (4 ioo mhz, cdci3: ) 1,02 (9H, s), 1,55 (3H z s) , 1,60 (3H, s) ,
1, 65 - 2,00 (5H, komplex), 2,20 (3H, s) , 2, 60 (1H, m) , 2,66
(3H, m), 2,86 (1H, m), 2,95 (1H, m) , 4 ,20 (1H, d, J = 10 Hz) ,
4,54 (1H, d, J = 7 Hz), 5,42 (1H, q, J = 8 Hz) , 5,82 (1H, d, J
= 7 Hz), 6,62 (1H, d, J = 8 Hz), 7,00 - 7,40 (12H, komplex). Nájdené: C 74,06, H 7,61, N 4,47, C^H^Os. 0,33 EtOAc vypočítané C 73,81, H 7,66, N 4,38 %
b) Spôsobom opísaným v príklade 19 sa (2R)-2-[ (4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-2,3-dihydro-lH-inden-l-yl]amino]-karbonyl)propyl]-5[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]pentanamíd (zo stupňa a) (105 mg, 0,17 mmol) po dobu 17 hodín pri teplote miestnosti nechá reagovať s hydroxylamínom. Výsledný roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cig (40 až 63 pm) ) za použitia elučného gradientu metanoi : voda 60 : 40 až 85 : 15. Zvyšok sa azeotropicky odparí s etanolom a potom s etylacetátom a trituruje s diizopropyléterom. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme žltohnedej pevnej látky (60 mg, 60 %) s teplotou tavenia 100 až 120 °C.
Rf 0,10 (dichlórmetan : metanoi : koncentrovaný vodný amoniak, : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,92 (9H, s), 1,26 (1H, m), 1,42 - 1,60 (3H, m), 1,65 (1H, m), 2,15 (3H, s), 2,22 (1H, m), 2,40 - 2,62 (2Η, m), 2,72 (2H, m), 2,80 (1H, m), 3,80 (1H, t, J = 8 Hz),
4,30 (1H, d, J = 9,5 Hz), 5,25 (2H, m), 6, 90 - 7, 45 (12H, komplex), 7,62 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,20 (1H, d, J = 8,5 Hz),
8,80 (1H, s), 10,58 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 526 (pík bázy, MH+ - HONHCO)
Nájdené: C 70, 94, H 7,50, N 6,81, C35H43N3O5.0,33 H20 vypočítané C 71,05, H 7,44, N 7,10 %
Príklad 29 (N4,3S) -Dihydroxy-Nl- [ (1S) -2,2-dimetyľľ ({ [ (1S) -2-metoxy-1fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[3-metyl-(4fenyl)fenyl]propylJbutandiamíd
a) Spôsobom opísaným v príklade 25(a) sa (2R)-N-[ (1S)-1(karboxy)-2,2-dimetylpropyl]-2-[(4 S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3dioxolan-4-yl]-5-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]pentanamíd (z preparatívneho postupu 33) (198 mg, 0,40 mmol), nechá 3 hodiny pri teplote miestnosti reagovať s (1S)-2-metoxy-lfenyletylamínom (61 mg, 0,40 mmol). Výsledná zmes sa naleje do etylacetátu (75 ml) a premyje 0,5M vodným dihydrogénfosforečnanom sodným (2 x 50 ml) a 5% vodným hydrogénuhličitanom sodným (50 ml) (aby sa dosiahlo rozdelenie fáz, pridá sa chlorid sodný). Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Olejovitý zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexan : etylacetát 4 : 1 až 1 : 1 a potom trituruje s dietyléterom. Získa sa (2R)-2-[(4S)-2,2-di-metyl5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1S)-2metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentanamíd vo forme bielej pevnej látky (172 mg, 68 %) .
Rf 0,53 (hexan : etylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1)
ÓH ( 400 MHz, CDC13) 1,02 (9H , s), 1,50 (3H, s), 1, 55 (3H, s) ,
1,54 (2H, m), 1,90 (2H, m) , 2,20 (3H, s), 2,60 (3H, m) , 3, 30
(3H, s) , 3,60 (2H, d, J = 5 Hz), 4,28 (1H, d, J = 9 Hz) , 4,50
(1H, d, J = 6 Hz) , 5, 10 (1H, dt, J = 5 a 7 Hz) , 6, 36 (1H, d, J
= 7 Hz), 6,50 (1H, d, J = 9 Hz), 6,98 (1H, d, J = 8 Hz) , 7,01
(1H, s), 7,10 (1H, d, J = £ i Hz), 7,15 - 7,36 (8H, kompl ex) ,
7,40 (2H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 629 (MH+) , 651 (MNa+) .
Nájdené: C 72,41, H 7,76, N 4,50, C38H48N20g vypočítané C 72,49, H 7,72, N 4,48 %
b) Spôsobom opísaným v príklade 9 sa (2R)-2-[(4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino}-karbonyl)propyl]-5-[(3metyl-4-fenyl)fenyl]pentanamíd (zo stupňa a) (142 mg, 0,22 mmol) po dobu 17 hodín pri teplote miestnosti nechá reagovať s hydroxylamínom. Výsledný roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cia (40 až 63 μπι) ) za použitia zmesi metanolu a vody v pomere 3 : 1 ako elučného činidla. Zvyšok sa azeotropicky odparí s etanolom a potom s etylacetátom a trituruje s diizopropyléterom. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bielej pevnej látky (109 mg, 82 %) s teplotou tavenia 100 až 110 °C.
Rt 0,07 (dichlórmetán : metanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-de) 0,90 (9H, s), 1,20 (IH, m), 1,30 - 1,50 (3H, m), 2,10 (3H, s), 2,38 (IH, m), 2,44 (IH, m), 2,65 (IH,
m), 3,17 (3H, s), 3,45 (2H, d, J = 7,5 Hz), 3,75 (IH, t, J = 8
Hz), 4,40 (IH, d, J = 9,5 Hz), 5,00 (IH, q, J = 7,5 Hz), 5,22 (IH, d, J = 8 Hz), 6,90 (IH, d), 6,98 (2H, m), 7,15 (3H, m),
7,25 (4H, m), 7,35 (IH, m), 7,40 (2H, m), 7,58 (IH, d, J = 9,5 Hz), 8,35 (IH, d, J=7,5 Hz), 8,80 (lH,br s), 10,58 (lH,br s). LRMS (termosprej) m/z = 575 (MH+) , 514 (M+ - HONHCO)
Nájdené: C 68,71, H 7,64, N 6,65, θ35Η45Ν3θ6.0, 5 H2O vypočítané C 68,60, H 7,57, N 6,86 %
Príklad 30 (N4,3S) -Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino) karbonyl) propyl] -(2R)-2-{3-[3'-metoxy-2-metylbifén-4-yl)propyl}butandiamíd
a) Spôsobom opísaným v príklade 25 (a) sa (2R)-N-[(IS) -1(karboxy)-2,2-dimetylpropyl]-2-[(4 S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3dioxolan-4-yl]-5-[(3'-metoxy-2-metylbifén-4yll)propyl]pentanamíd (z preparatívneho postupu 34) (150 mg,
0,28 mmol), nechá 2,5 hodiny pri teplote miestnosti reagovať s (R)-1-fenyletylamínom (35 μΐ, 0,28 mmol). Výsledná zmes sa naleje do etylacetátu (75 ml) a premyje 0,5M vodným dihydrogénfosforečnanom sodným (2 x 50 ml) a 5% vodným hydrogénuhličitanom sodným (50 ml) (aby sa dosiahlo rozdelenie fáz, pridá sa chlorid sodný). Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Olejovitý zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 35 : 65 ako elučného činidla.
Získa sa (2R)-2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N( (IS)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino} karbonyl )propyl]-5-[(3'-metoxy-2-metylbifén-4-yl)propyl]pentanamíd vo forme bielej pevnej látky (133 mg,76 %).
Rf 0,49 (hexan : etylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1) δΗ (300 MHz, CDC13) 1,00 (9H, s), 1,40 - 1, 60 (11H, komplex), 1,62 (1H, m), 1,90 (1H, m), 2,21 (3H, s), 2,60 (3H, m), 3,80 (3H, s), 4,18 (1H, d, J = 9 Hz), 4,45 (1H, d, J = 7 Hz), 5,05 (1H, pentet, J = 7,5 Hz), 5,85 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,50 (1H, d, J = 9 Hz), 6,84 (3H, m), 7,00 (2H, m), 7,14 (1H, d, J = 9,5 Hz), 7,18 - 7,40 (6H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 646 (MNH/)
b) Spôsobom opísaným v príklade 19 sa (2R)-2-[(4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]-5-[(3'-metoxy-2metylbifén-4-yl)propyl]pentanamíd (zo stupňa a) (133 mg, 0,21 mmol) po dobu 18 hodín pri teplote miestnosti nechá reagovať s hydroxylamínom (59 mg, 0,85 mmol). Výsledný roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cis (40 až 63 pm) ) za použitia elučného gradientu metanol : voda 3 : 1 až 4 : 1 a potom trituráciou s diizopropyléterom. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bielej pevnej látky (57 mg, 45 %) s teplotou tavenia 98 až 100 °C.
Rf 0,20 (dichlórmetán : metanol, 95 : 5)
δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,92 (9H, s), 1,18 - 1,30 (1H, m), 1,25
(3H, d, J = 7,5 Hz), 1,38 - 1,58 ( 3H, m), 2,15 (3H, s), 2,40
(1H, m) , 2,46 (1H, m) , 2,70 (1H, m), 3,76 (4H, m), 4,35 (1H,
d, J = 9,5 Hz), 4,90 (1H, pentet, J = 7,5 Hz), 5,22 (1H, d, J
= 8 Hz) , 6,75 - 7,40 (12H, komplex), 7,58 (1H, d, J = 9,5 Hz) ,
8,26 (1H, d, J = 7,5 Hz), 8,80 (1H, s), 10,58 (1H, s).
LRMS (termosprej) m/z = 621 (MNH4 +)
Nájdené: C 69,17, H 7,55, N 6,87, C3sH45N30g. 0,2 H2O vypočítané C 69,22, H 7,53, N 6,92 %
Príklad 31 (N4,3S)-Dihydroxy-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl]amino)karbonyl)propyl]-(2R)-2-{3-[(3'-metoxy-2metylbifén-4-yl)propyl]Jbutandiamíd
a) Spôsobom opísaným v príklade 25 (a) sa (2R)-N-[(1S)-1(karboxy)-2,2-dimetylpropyl]-2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3dioxolan-4-yl]-5- [ (3’-metoxy-2-metylbifén-4yll)propyl]pentanamíd (z preparatívneho postupu 34) (220 mg,
0,42 mmol) nechá 2,5 hodiny pri teplote miestnosti reagovať s (1S)-2-metoxy-l-fenyletylamínom (63 mg, 0,42 mmol). Výsledná zmes sa naleje do etylacetátu (75 ml) a premyje 0,5M vodným dihydrogénfosforečnanom sodným (2 x 50 ml) a 5% vodným hydrogénuhličitanom sodným (50 ml) (aby sa dosiahlo rozdelenie fáz, pridá sa chlorid sodný). Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexan : etylacetát 30 : 70 až 60 : 40. Získaná biela pevná látka sa znovu prečistí mžikovou chromatografiou (Sorbsil Οθο (20 až 40 pm) ) za použitia zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 35 : 65 ako elučného činidla. Získa sa (2R)-2-[(4 S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,288 dimetyl-1-({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl] amino}karbonyl)propyl]-5-[(3'-metoxy-2-metylbifén-4-yl)propyl]pentanamíd vo forme bielej pevnej látky (191 mg, 69 %).
Rf 0,37 (hexan : etylacetát, 1 : D
δΗ (400 MHz, CDC13) 1,00 (9H , s), 1,50 (3H, s), 1,55 (3H, s) ,
1,65 (2H, m), 1,86 (2H, m), 2,20 (3H, s) , 2,60 (3H, m) , 3,35
(3H, s), 3,60 (2H, d, J = 5 Hz), 3,80 (3H, s), 4,25 (1H, d, J
= 9 Hz), 4,45 (1H, d, J = 6 Hz), 5,10 (1H, dt, J = 5 a 7,5 Hz), 6,35 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,50 (1H, d, J = 9 Hz), 6,80 6,92 (3H, m), 6,96 - 7,04 (2H, m), 7,15 - 7,35 (6H, komplex). LRMS (termosprej) m/z = 659 (MH+)
b) Spôsobom opísaným v príklade 19 sa (2R)-2-[(4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({ [ (1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3'metoxy-2-metylbifén-4-yl)propyl]pentanamíd (zo stupňa a) (191 mg, 0,29 mmol) po dobu 17 hodín pri teplote miestnosti nechá reagovať s hydroxylamínom. Výsledný roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou (silanizovaný silikagél Cig (40 až 63 pm) ) za použitia elučného gradientu metanol : voda 60 : 40 až 70 : 30 a potom trituráciou s diizopropyléterom. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bielej pevnej látky (81 mg, 44 %) s teplotou tavenia 82 až 89 °C.
Rf 0,40 (dichlórmetán : metanol, 90 : 10) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,90 (9H, s), 1,20 (1H, m), 1,40 (3H,
m), 2,15 (3H, s), 2,38 (1H, m), 2,45 (1H, m), 2,70 (1H, m),
3,20 (3H, s), 3,44 (2H, d, J = 7 Hz), 3,76 (4H, m), 4,38 (1H, d, J = 9,5 Hz), 5,00 (1H, q, J = 7 Hz), 5,21 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,78 (1H, s), 6,80 (1H, d, J = 8 Hz), 6,88 (2H, m), 7,00 (2H, m), 7,14 (3H, m), 7,24 (2H, m), 7,32 (1H, t), 7,58 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,32 (1H, d, J = 7 Hz), 8,80 (1H, br s), 10,58 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 634 (MH+)
Nájdené: C 67,47, H 7,52, N 6,55, C36H47N3O7.0, 4 H2O vypočítané C 67,46, H 7,52, N 6,56 %
Príklad 32 (2R)-Nl-[(lS)-2,2-Dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-(N4-hydroxy)-2-{3-[3'-metoxy-2-metylbifén-4-yl]propylJbutandiamíd
HO
OCH;
a) Spôsobom opísaným v príklade 2 sa (3R)-3-({[(1S)-2,2dimetyl-1-({[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-(3'-metoxy2-metylbifén-4-yl)-hexánová kyselina (z príkladu 15) (603 mg,
1,0 mmol) nechá reagovať s hydrochloridom O-allylhydroxylamínu (134 mg, 1,2 mmol). Surový produkt sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexan : etylacetát 1 : 1 až 1 : 2 a potom opakovane mžikovou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetánu, metanolu a koncentrovaného vodného amoniaku v pomere 95 : 5 : 0,5 ako elučného činidla. Získa sa (2R)-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]-amino)karbonyl)propyl]-2-{3-[3'metoxy-2-metylbifén-4-yl]-propyl}-(N4-3propenyloxy)butandiamíd (397 mg, 60 %) vo forme bezfarebnej peny. Teplota tavenia 76 až 79 °C.
Rf 0,35 (hexán : etylacetát, 1 : 2)
δΗ (300 MHz, DMSO-ds) 0,92 (9H, s), 1,42 (4H, m), 2,01 (IH,
dd, J = 7 a 15 Hz), 2,15 (3H, s a IH, m, , prekrývanie) , 2,44
(IH , m), 2,55 (IH, m), 2,84 (IH, m) , 3,20 (3H, s), 3,47 (2H,
d, J = 8 Hz) , 3,77 (3H, s), 4,2 0 (2H, m) , 4,35 (IH, d, J =
10 Hz), 5,02 (IH, q, J = 7 Hz) , 5,19 ( IH, d, J = 10 Hz) ,
5,4 0 (IH, d, J = 17 Hz), 5,87 (IH, m), 6,78 (IH, s), 6, 84
(IH, d, J = 8 Hz), 6,90 (2H, m), 7,00 (2H, m), 7,23 (6H, m),
7,70 (IH, br d, J = 10 Hz), 8,32 (IH, br d, J = 7 Hz), 10,85 (IH, br s) .
LRMS (termosprej) m/z = 658 (pík bázy MH+) , 680 (MNa+) vmax (KBr disk) 3310, 2970, 2930, 1640, 1537, 1481, 700 cm'1. Nájdené: C 70, 89, H 7,85, N 6,27, C39H51N3O6 vypočítané C 71,21, H 7,81, N 6,39 %
b) Spôsobom opísaným v príklade 2 sa (2R)-Nl-[(1S)-2,2dimetyl-1-({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amíno}karbonyl)propyl]-2-{3-[3'-metoxy-2-metylbifén-4-yl]-propyl}(N4-3-propenyloxy)butandiamíd (380 mg, 0,58 mmol) 1 hodinu pri teplote spätného toku nechá reagovať s mravenčanom amónnym (366 mg, 5,80 mmol) v zmesi etanolu a vody v pomere 4 : 1 (10 ml) za prítomnosti palládiového katalyzátora. Po spracovaní sa zvyšok prečistí mžikovou chromatografiou s obrátenými fázami (silanizovaný silikagél Cig (40 až 63 pm) ) za použitia zmesi metanolu a vody v pomere 4 : 1 ako elučného činidla. Získa sa (2R)-Nl-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl] amino] karbonyl) propyl] -(N4-hydroxy)—2—{3—[3'-metoxy2-metylbifén-4-yl]propyl}-butandiamíd (260 mg, 73 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky s teplotou tavenia 166 až 168 °C.
Rf 0,29 (tlc s reverznými fázami, metanol : voda, 4 : 1) δΗ (300 MHz, metanol-dj 1,03 (9H, s), 1,51 (4H, m), 2,16 (3H, s a IH, m, prekrývanie), 2,35 (IH, dd, J = 8 a 13 Hz), 2,48 (2H, m), 2,87 (IH, m), 3,33 (3H, s), 3,58 (2H, d, J = 7 Hz),
4,40 (1Η, s), 5,10 (1H, t, J = 7 Hz), 6,92 (1H, s), 6,80 (1H, d, J = 8 Hz), 6,89 (2H, br d, J = 8 Hz), 6,97 (1H, s), 6,98 (1H, d, J = 8 Hz), 7,15 (3H, m), 7,27 (3H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 618 (MH+) FTIR vmax (KBr disk) 3290, 3240, 2960, 2930, 1644, 1531, 1481, 1226, 703 cm1.
Nájdené: C 69,06, H 7,80, N 6,65, Ο36Η47Ν3Ο6.0,5 H2O vypočítané C 68,99, H 7,72, N 6,70 %
Preparatívny postup 1
Hydrochlorid butanamídu (2S)-amíno-3,3-dimetyl-N-[(ÍR)-1-fenyletyl]-
a)
CH, u r O CH,
Λ Htl ” „>C4°Y ; «70
O CH,
a) Hydrochlorid N-(dimetylamínopropyl)-N’-etylkarbodiimídu (35,47 g, 185 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri 4 °C pridá k miešanej zmesi N-[(lS)-2,2-dimetyl-lkarboxy)propyl]karbamátu (34,7 g, 150 mmol) (Fluka Chemicals; J. Pospisek, K. Blaha, Coll. Czech. Chem. Commun., 1997, 42, 1069 až 1076) a hydrátu 1-hydroxy-l,2,3-benzotriazolu (22,3 g, 165 mmol) v bezvodom dichlórmetáne (350 ml) . Po 1 hodine sa k vzniknutej zmesi pridá (R)-(1-fenyl)etylamín (19,14 g, 158 mmol) a potom N-metylmorfolín (16,7 g, 165 mmol). Po ďalších 30 minútach sa reakčná zmes nechá zahriať miestnosti a po 17 hodinách pri teplote skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozdelí medzi etylacetát (400 ml) a vodu (400 ml) . Organická vrstva sa premyje postupne 5% vodnou kyselinou citrónovou (2 x 400 ml) a na teplotu miestnosti nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným (500 ml) , vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa trituruje s diizopropyléterom, odfiltruje a vysuší. Získa sa (2S)-terc. (butoxykarbonyl)amíno-3,3-dimetyl-N-[(ÍR)-1fenyletyl]butanamíd (47,5 g, 94 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky s teplotou tavenia 166 až 169 °C.
Rf 0,7 (hexán : éter : kyselina octová, 30 : 70 : 1)
5h (400 MHz, CDC13) 0,97 (9H, s), 1,39 (9H, s), 1,45 (3H, d,
J = 7 Hz), 3,73 (IH, br d), 5,04 (IH, pentet, J =7 Hz),
5,15 (IH, br s), 5,84 (IH, br d), 7,26 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 335 (MH+) FTIR vmax (KBr disk) 3340, 3280, 2980, 1713, 1696, 1642, 1179, 700 cm1
Nájdené: C 68,30, H 9,08, N 8,39, C19H30N2O3 vypočítané C 68,23, H 9,04, N 8,38 %
b) (2S)-terc. (Butoxykarbonyl)amíno-3,3-dimetyl-N-[(ÍR)1-fenyletyl]butanamíd (46,4 g, 139 mmol) sa rozpustí v zmesi bezvodého dichlórmetánu (600 ml) a dioxanu (150 ml). Vzniknutý roztok sa ochladí na 4 °C a za miešania sa ním vedie chlorovodík, dokiaľ nevznikne nasýtený roztok. Po štvorhodinovom miešaní pri 4 °C sa roztok skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa trituruje s éterom a odfiltruje sa zlúčenina uvedená v nadpise (30,8 g, 100 %).
Rf 0,46 (hexán : izopropylalkohol : koncentrovaný amoniak, 80 : 20 : 1) δΗ (400 MHz, dg-DMSO) 1,03 (9H, s), 1,37 (3H, d, J = 7 Hz) ,
3,50 (IH, d, J = 8 Hz), 4,94 (IH, pentet, J = 7 Hz), 7,24 (IH, t, J = 8 Hz), 7,33 (2H, t, J = 8 Hz), 7,39 (2H, d, J = 8 Hz),
8,10 (3H, br s), 8,88 (IH, br d).
LRMS (termosprej) m/z = 235 (MH+) FTIR vmax (KBr disk) 2960,
1674, 1557, 1505, 700 cm'1
Nájdené: C 61,98, H 8,71, N 10,09, C14H22N2O.HCI.H2O vypočítané C 62,09, H 8,56, N 10,34 %
Preparatívny postup 2 terc.Butyl- (3R) -3- ({ [ (1S) -2,2-dimetyľľ ({ [ (ÍR) -1-fenyletyl] amino}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)hex-5-enoát
N-(Dimetylamínopropyl)-N'-etylkarbodiimíd (4,21 g, 22,0 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri 4 °C pridá k miešanej zmesi (2R)-2-[2-(terc.butoxy)-2-oxoetyl]pent-4-enovej kyseliny (A.
L. Castelhano, S. L. Bender, J. G. Deal, S. Horner, T. J. Liak, Z. Yuan, WO96/16027, 1996) (3,80 g, 17,8 mmol) a 1hydroxy-7-azabenzotriazolu (2,49 g, 18,3 mmol) v bezvodom dimetylformamide (60 ml) . Po 1 hodine sa k reakčnej zmesi pridá hydrochlorid (2S)-amíno-3,3-dimetyl-N-[(ÍR)-1fenyletyl]butanamídu (z preparatívneho postupu 1) (5,10 g,
18,8 mmol) a potom diizopropyletylamín (2,42 g, 19,2 mmol). Po ďalších 30 minútach sa reakčná zmes nechá zahriať na teplotu miestnosti. Po 17 hodinách pri teplote miestnosti sa reakčná zmes skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa rozdelí medzi etylacetát (400 ml) a vodu (400 ml) . Vodná vrstva sa nasýti hydrogénuhličitanom sodným a extrahuje etylacetátom (2 x 100 ml) . Spojené organické roztoky sa skoncentrujú za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v éteri (500 ml) a éterový roztok sa premyje vodou (3 x 200 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa trituruje s pentanom, suspenzia sa prefiltruje a produkt sa vysuší. Získa sa terc.butyl-(3R)-3-({ [ (1S) -2,2-dimetyľľ (í [ (1R)-1f enyletyl]amino)karbonyl)propyl]amino)karbonyl)hex-5-enoát (6,70 g, 88 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky s teplotou tavenia 123 až 126 °C.
Rf 0,16 (hexan : izopropylalkohol, 98 : 2) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,97 (9H, s), 1,39 (9H, s), 1,46 (3H, d, J = 7 Hz), 2,06 (1H, dt, 13 a 6,5 Hz), 2,09 (1H, m), 2,31 (1H, dd, J = 15 a 3 Hz), 2,71 (1H, m), 2,77 (1H, m), 4,14 (1H, d, J = 10 Hz), 4,90 (1H, d, J = 10 Hz), 4,94 (1H, d, J = 15 Hz),
5,05 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,42 (1H, m), 5,95 (1H, br d),
6,36 (1H, br d), 7,26 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 431 (MH+) FTIR vmax (KBr disk) 2635,
2098, 1733, 1640, 1540, 1363, 1153, 696 cm1
Nájdené: C 69, 30, H 8,96, N 6,54, C25H38N2O4 vypočítané C 69, 74, H 8,90, N 6,51 %
Preparatívny postup 3 terc.Butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]-amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl) -6-[3-metyl(4-fenyl)-fenyl]hexanoát
a) Zmes octanu palladnatého (52 mg, 0,23 mmol) a tri-(2metylfenyl)fosfínu (141 mg, 0,46 mmol) v bezvodom acetonitrile (10 ml) sa sonikuje 1 minútu pri teplote miestnosti, dokiaľ nevznikne krémovo zafarbená suspenzia. Táto suspenzia sa pod atmosférou dusíka Pasteurovou pipetou pridá k miešanému roztoku terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)—2,2-dimetyl-l-({[(1R)—1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)hex-5-enoátu (z preparatívneho postupu 2) (861 mg, 2,0 mmol), 3-metyl-4fenylbrombenzénu (M. Bombert, J. C. Pernert, J. Amer. Chem. Soc., 1926, 48, 1372 až 1384 a ďalej pozri preparatívny postup 19B) (1,32 g, 5,34 mmol) a trietylamínu (1,28 ml, 9,29 mmol) v bezvodom acetonitrile (15 ml). Výsledná zmes sa premyje dusíkom, potom 24 hodín zahrieva k spätnému toku a naleje do etylacetátu (200 ml). Etylacetátový roztok sa premyje nasýteným vodným chloridom sodným (2 x 100 ml), vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu dichlórmetán : etylacetát. Získa sa prevažne terc.butyl(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-di-metyl-l-({[{1R)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino]-karbonyl)-6-[3-metyl(4-fenyl)fenyl]hex-5-enoát vo forme bezfarebnej peny (1,91 g, 69 %) . Podľa 1H NMR sú v produkte tiež prítomné dva alkénové izoméry, (5Z) a (4E). Táto zmes sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň b nižšie).
Rf 0,52 (dichlórmetán : etylacetát, 9 : 1) δΗ (400 MHz, CDCI3) (pre (5E) izomér). 1,00 (9H, s), 1,47 (3H, d, J = 7 Hz), 2,26 (1H, m), 2,40 (2H, m), 2,60 (1H, dd, J = 9 a 15 Hz), 2,71 (1H, m), 4,20 (1H, d, J = 9 Hz), 5,02 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,04 (2H, m), 6,35 (1H, d, J = 14 Hz), 6,51 (1H, br d), 7,19 (11H, komplex), 7,36 (2H, t, J = 8 Hz).
b) Roztok terc.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-di-metyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]amino}-karbonyl)-696 [3-metyl-(4-fenyl)fenyl]hex-5-enoátu (1,91 g, 3,2 mmol) v etanole (80 ml) sa 16 hodín hydrogenuje za prítomnosti 10% palládia na uhlíku (120 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 ’C. Reakčná zmes sa prefiltruje cez vrstvu pomocnej filtračnej látky Arbocel a filtrát sa skoncentruje. Získa sa terc.butyl(3R) -3- ({ [ (1S) -2,2-dimetyl-l- ({ [ (ÍR) -1-fenyletyl] amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (2,07 g, 108 %) vo forme bezfarebnej peny, ktorá sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia (pozri príklad 1).
Rf 0,52 (dichlórmetán : etylacetát, 9 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,99 (9H, s), 1,38 (9H, s), 1,47 (3H, d, J = 7 Hz), 1,52 (4H, komplex), 2,20 (3H, s), 2,29 (1H, m), 2,53 (4H, m), 4,16 (1H, d, J = 9 Hz), 5,05 (1H, pentet, J = 7 Hz),
5,97 (1H, br d), 6,42 (1H, br d), 6,93 (1H, d, J = 8 Hz), 6,98 (1H, s), 7,07 (1H, d, J = 8 Hz), 7,23 (8H, komplex), 7,36 (2H, t, J = 7 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 599 (MH+)
Nájdené: C 75, 86, H 8,44, N 4,60, C38H5oN204 vypočítané C 76, 22, H 8,42, N 4,68 %
Príklad 33/
Preparatívny postup 4 (3R)-6-[3-Chlór-4-fenyl)fenyl]-3-({[ (1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-l-fenyletyl]amíno}karbonyl)propyl]amíno}karbonyl)hexánová kyselina
CH.
a) Zmes octanu palladnatého (24 mg, 0,1 mmol) a tri-(2metylfenyl)fosfínu (61 mg, 0,2 mmol) v bezvodom acetonitrile (1 ml) sa sonikuje 1 minútu pri teplote miestnosti, dokiaľ nevznikne krémovo zafarbená suspenzia. Táto suspenzia sa pod atmosférou dusíka Pasteurovou pipetou pridá k miešanému roztoku terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amíno}karbonyl)propyl]amíno}karbonyl)hex-5-enoátu (z preparatívneho postupu 2) (861 mg, 2,0 mmol), (3-chlór-4fenyl)fenyltrifluórmetansulfonátu (z preparatívneho postupu 9) (740 mg, 2,2 mmol) a trietylamínu (420 μΐ, 3,0 mmol) v bezvodom acetonitrile (3 ml) . Výsledná zmes sa premyje dusíkom, potom 22 hodín zahrieva k spätnému toku, hneď potom sa k nej pridá ďalšie množstvo (3-chlór-4fenyl)fenyltrifluórmetansulfonátu (200 mg, 0,59 mmol), trietylamínu (420 μΐ, 3,0 mmol), octanu palladnatého (35 mg, 0,145 mmol) a tri-(2-metylfenyl)fosfínu (89 mg, 0,29 mmol) a v zahrievaní sa pokračuje ďalších 8 hodín. Potom sa reakčná zmes naleje do etylacetátu (100 ml). Etylacetátový roztok sa premyje nasýteným vodným chloridom sodným (2 x 50 ml) , vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi toluénu a etylacetátu v pomere 9 : 1 ako elučného činidla. Získa sa prevažne terc.butyl-(3R,5E)-6-[3-chlór-(4-fenyl)fenyl]-3({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amíno}karbonyl)propyl]amíno}karbonyl)hex-5-enoát vo forme bezfarebnej peny (936 mg, 76 %) . Podlá XH NMR sú v produkte tiež prítomné dva alkénové izoméry, (5Z) a (4E). Táto zmes sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň b nižšie). Rf 0,14 (toluén : etylacetát, 10 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) (pre <5E) izomér). 0,96 (9H, s), 1,37 (9H, s), 1,45 (3H, d, J = 6,5 Hz), 2,29 (IH, m), 2,36 (IH, dd, J % 3 a 15 Hz), 2,45 (IH, m), 2,61 (IH, dd, J = 9 a 15 Hz), 2,73 (IH, m), 4,16 (IH, d, J = 9,5 Hz), 5,02 (IH, pentet, J = 6,5 Hz), 5,85 (IH, br d), 6,09 (IH, dt, J = 6,5 a 15 Hz), 6,32 (IH, d, J = 15 Hz), 6,č9 (IH, br d), 7,18 (8H, komplex), 7,37 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 617 (MH+)
b) Zmes terc.butyl-(3R,5E)-6-[3-chlór-(4-fenyl)-fenyl]-3({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]amino)karbonyl)hex-5-enoátu (936 mg, 1,52 mmol) a p-toluénsulfonylhydrazidu (1,41 g, 7,60 mol) v toluéne (15 ml) sa 4 hodiny pod atmosférou dusíka zahrieva k spätnému toku, potom ochladí a zriedi éterom (150 ml). Éterová zmes sa premyje vodou (50 ml), 0,5M kyselinou chlorovodíkovou (50 ml) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexán : etylacetát. Získa sa terc.butyl(3R)-6-[3-chlór-4-fenyl)fenyl]-3-({[(1S)-2,2-di-metyl-l({ [(ÍR) -1-fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]amino)karbonyl)hexanoát (701 mg, 74 %) vo forme bezfarebnej peny.
Rf 0,36 (hexán : etylacetát, 5 : 1) δΗ (400 MHz, CDCI3) 1,03 (9H, s), 1,43 (OH, s), 1,52 (3H, d, J = 7 Hz), 1,43 - 1,70 (4H, komplex), 2,32 (IH, ), 2,60 (4H, m), 4,18 (IH, d, J = 9 Hz), 5,09 (IH, pentet, J = 7 Hz), 5,95 (IH, br d), 6,47 (IH, br d), 7,03 (IH, d, J = 8 Hz), 7,23 (7H, komplex), 7,42 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 620 (MH+)
c) terc.Butyl-(3R)-6-[3-chlór-4-fenyl)fenyl]-3-({[(1S)2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]amino]karbonyl)hexanoát (665 mg, 1,07 mmol) sa rozpustí v bezvodom dioxáne (30 ml). Výsledný roztok sa pod atmosférou dusíka ochladí v kúpeli z ladu a vody a po dobu 15 minút sa ním až do nasýtenia vedie plynný chlorovodík. Reakčný roztok sa 3 hodiny mieša a potom skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa trikrát rozpustí v toluéne a toluénový roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa bezfarebná živica, ktorá po pridaní hexánu a etylacetátu vykryštalizuje. Biela pevná látka sa prekryštalizuje zo zmesi etylacetátu a diizopropyléteru. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (325 mg, 54 %) s teplotou tavenia 154 až 155,5 °C (po prekryštalizovaní zo zmesi etylacetátu a diizopropyléteru).
δΗ (400 MHz, CD3OD) (zrejmá len čiastočná zámena signálov NH amidu) 1,03 (9H, s), 1,43 (3H, d, J = 6,5 Hz), 1,48 (2H, m),
1,52 (2H, m), 2,39 (1H, dd, J = 3 a 14 Hz), 2,53 (2H, m), 2,61 (1H, dd, J = 9 a 14 Hz), 2,86 (1H, m), 4,36 (1H, s), 5,00 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 7,03 (1H, d, J = 9 Hz) , 7,17 (7H, komplex), 7,36 (5H, komplex), 7,76 (0,5H, br d), 8,47 (0,8H, br d) .
LRMS (termosprej) m/z = 562 (MH+)
Nájdené: C 70,29, H 6,98, N 4,91, C33H39CIN2O4 vypočítané C 70,38, H 6,98, N 4,98 %
100
Príklad 34/
Preparativny postup 5 (3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-fluór-4fenoxyfenyl)hexánová kyselina
a) Zmes octanu palladnatého (20 mg, 0,08 mmol) a tri-(2metylfenyl)fosfínu (50 mg, 0,16 mmol) sa pod atmosférou dusíka pridá k miešanému roztoku terc.butyl-(3R)-3-({ [ (1S)-2,2dimetyl-1-({[(ÍR)-1fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]amino]karbonyl)hex-5-enoátu (z preparatívneho postupu 2) (700 mg, 1,63 mmol), 3-fluór-4fenoxybrombenzénu (z preparatívneho postupu 10) (479 mg, 1,79 mmol) a trietylamínu (340 μΐ, 2,43 mmol) v bezvodom acetonitrile (3 ml) . Výsledná zmes sa premyje dusíkom, potom 14 hodín zahrieva k spätnému toku, hneď potom sa k nej pridá
101 ďalšie množstvo octanu palladnatého (20 mg, 0,08 mmol) a tri(2-metylfenyl) fosfínu (50 mg, 0,16 mmol) a v zahrievaní sa pokračuje ďalších 9 hodín. Potom sa reakčná zmes ochladí a naleje do etylacetátu (100 ml). Etylacetátový roztok sa premyje nasýteným vodným chloridom sodným (2 x 50 ml) , vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi toluénu a etylacetátu v pomere 9 : 1 ako elučného činidla. Získa sa prevažne terc.butyl-(3R,5E)- -3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[ (ÍR)1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-fluór4-fenoxyfenyl)hex-5-enoát vo forme bezfarebného oleja (949 mg) . Podľa XH NMR sú v produkte tiež prítomné dva alkénové izoméry, (5Z) a (4Ξ). Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň b nižšie).
Rf 0,24 (hexán : etylacetát, 3 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) (pre (5E) izomér). 10,2 (9H, s), 1,40 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 6 Hz), 2,26 (1H, m), 2,40 (2H, m), 2,64 (1H, dd, J = 9 a 17 Hz), 2,74 (1H, m), 4,23 (1H, d, J = 10 Hz), 5,06 (1H, pentet, J = 6 Hz), 5,98 (1H, m), 6,02 (1H, br
d), 6,30 (1H, d, J = 15 Hz), 6,50 (1H, br d), 6,94 (3H, m),
7,07 (2H, komplex), 7,27 (8H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 617 (MH+)
b) Roztok terc.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6(3-fluór-4-fenoxyfenyl)hex-5-enoátu (949 mg, 1,53 mmol), mravenčanu amónneho (474 mg, 7,51 mmol) a 10% palládia na uhlíku (100 mg) v metanole (10 ml) sa 16 hodín mieša pri 20 °C a potom prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel. Filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v etylacetáte a etylacetátový roztok sa premyje nasýteným vodným chloridom sodným, vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa terc.butyl-(3R)-3102 ({ [ (1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR) -1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-fluór-4fenoxyfenyl)hexanoát (876 mg, 92 %) vo forme bezfarebnej peny,
ktorá sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho
prečistenia.
Rf 0,29 (hexan : etylacetát, 3 : 1)
δΗ (400 MHz, CDCI3) 0,98 (9H, s), 1,26 (1H, m), 1,37 (9H, s),
1,44 (3H, m), 1,46 (3H, d, J = 6,5 Hz), 2,23 (1H, m), 2,40
(2H, m), 2,52 (2H, m), 4,32 (1H, d, J = 10 Hz), 5,08 (1H,
pentet, J = 6,5 Hz), 6, 48 (1H, br d) , 6,58 (1H , br d), 6,74
1H, d, J = 8 Hz) , 6,87 (3H, m), 7,01 (1H, t, J = 7 Hz), 7,19
(8H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 619 (MH+)
c) Trifluóroctová kyselina (2 ml) sa počas 5 minút pod atmosférou dusíka pri 20 °C prikvapká k miešanému roztoku terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-(3-fluór-4fenoxyfenyl)hexanoátu (876 mg, 1,41 mmol) v bezvodom dichlórmetane (6 ml). Výsledný roztok sa 16 hodín mieša a potom skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa dvakrát rozpustí v toluéne a skoncentruje a potom prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexánu, etylacetátu a kyseliny octovej v pomere 72 : 25 : 1 ako elučného činidla. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme žltej živice (784 mg, 98 %) .
Rf 0,21 (hexan : etylacetát : kyselina octová, 75 : 25 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,96 (9H, s), 1,40 (3H, m), 1,47 (3H, d, J = 7 Hz), 1,58 (1H, m), 2,42 (3H, m), 2,68 (2H, m), 4,32 (1H, d, J = 10 Hz), 5,04 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,35 (1 H, br d),
6,73 (1H, d, J = 6 Hz), 6,82 (2H, m), 6,89 (2H, d, J = 8 Hz), 7,01 (1H, t, J = 6 Hz), 7,11 (1H, d, J = 8 Hz), 7,20 (7H, komplex).
103
LRMS (APCI) m/z = 563 (MH+)
Príklad 35/
Preparatívny postup 6 (3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-(3-metyl-4-fenoxyfenyl)hexánová kyselina
104
a) Zmes octanu palladnatého (20 mg, 0,08 mmol) a tri-(2metylfenyl)fosfínu (50 mg, 0,16 mmol) sa pod atmosférou dusíka pridá k miešanému roztoku terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2dimetyl-1-({[(1R)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)hex-5-enoátu (z preparatívneho postupu 2) (578 mg, 1,23 minol), 1-jód-3-metyl4-fenoxybenzénu (z preparatívneho postupu 11) (384 mg, 1,35 mmol) a trietylamínu (300 μΐ, 2,14 mmol) v bezvodom acetonitrile (3 ml) . Výsledná zmes sa premyje dusíkom, potom hodín zahrieva k spätnému toku, ochladí a naleje do etylacetátu (100 ml) . Etylacetátový roztok sa premyje nasýteným vodným chloridom sodným (2 x 50 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 9:1a potom 4 : 1 ako elučného činidla. Získa sa prevažne terc.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6(3-metyl-4-fenoxyfenyl)hex-5-enoát vo forme oranžovej peny (615 mg) . Podľa 1H NMR sú v produkte spolu s alkénovou východzou látkou (10 %) tiež prítomné dva alkénové izoméry, (5Z) a (4E). Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň b nižšie) .
Rf 0,5 (hexán : etylacetát, 3:1) δΗ (300 MHz, CDC13) (pre (5E) izomér) 1,02 (9H, s), 1,26 (9H,
s) , 1,50 (3H, d, J = 7 Hz) , 2, 19 (3H, s), 2,29 (1H, m) , 2, 44
(2H, m) , 2, 63 (1H, m), 2,74 (1H , m ), 4 ,19 (1H, d, J = = 10 Hz ) ,
5,04 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5, 91 (1H, br d), 6,00 C LH, dt, J
= 16 a 8 Hz) , 6,35 (1H, d, J = 16 Hz) , 6,51 (1H, br d), 6/ 80
(1H, d, J = 9 Hz), 6,87 (2H, d, J = 9 Hz), 7,06 (2H, m) , 7, 26
(8H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 613 (MH+)
b) Roztok terc.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-di-metyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}-karbonyl)-6(3-metyl-4-fenoxyfenyl)hex-5-enoátu (615 mg, 1,0 mmol), mravenčanu amónneho (310 mg, 4,9 mmol) a 10% palládia na uhlíku (65 mg) v metanole (8 ml) sa 16 hodín mieša pri 20 °C a potom prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel. Filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v etylacetáte a etylacetátový roztok sa premyje nasýteným vodným chloridom sodným, vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2105 dimetyľľ ({ [ (ÍR) -1-fenyletyl] amino) karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3-mety1-4fenoxyfenyl)hexanoát (550 mg, 90 %) vo forme peny, ktorá sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.
Rf 0,5 (hexán : etylacetát, 3 : 1) δΗ (300 MHz, CDC13) 1,03 (9H, s), 1,41 (9H, s), 1,33 - 1,60
(4H, m, zatienený inými pikami), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 2,16
(3H, s), 2,30 (IH, m), 2,48 (2H, m) , 2,57 (2H, m), 4,26 (IH,
d, J = 9 Hz), 5,10 (IH, pentet, J = 7 Hz) , 6,22 (IH, br d),
6, 44 (IH, br d) , 6,77 (IH, d, J = 9 Hz) , 6, 86 (3H, m), 6,99
(2H, m), 7,26 (7H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 615+)
c) Trifluóroctová kyselina (2,5 ml) sa počas 5 minút pod atmosférou dusíka pri 20 °C prikvapká k miešanému roztoku terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({ [(1R)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-(3-metyl-4fenoxyfenyl)hexanoátu (550 mg, 0,9 mmol) v bezvodom dichlórmetáne (5 ml) . Výsledný roztok sa 1 hodinu mieša a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa zriedi kyselinou chlorovodíkovou (2M) a extrahuje troma dávkami etylacetátu. Spojené organické roztoky sa premyjú nasýteným vodným chloridom sodným, vysušia síranom horečnatým a skoncentrujú za zníženého tlaku. K zvyšku sa pridajú dve dávky toluénu a toluénový roztok sa odparí. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme žltej živice (640 mg), ktorá je znečistená toluénom a trifluóroctovou kyselinou.
Rf 0,18 (dichlórmetán : metanol, 99 : 1)
δΗ (300 MHz, CDCI3) 0, 99 (9H, s), 1,44 (3H, m), 1,50 (3H, d, J
= 7 Hz), 1,57 (IH, m) , 2,15 (3H, s) , 2,43 (3H, m), 2,71 (2H,
m), 4,43 (IH, d, J = 10 Hz), 5,06 (IH, pentet, J = 7 Hz) , 6, 77
(2H, m), 6,84 (2H, d, J = 8 Hz) , 6, 93 (IH, s), 7,00 (IH, t, J
106 = 8 Hz), 7,10 (8H, komplex), 7,46 1H, d, J = 10 Hz), 7,74 (2H, br s) .
LRMS (termosprej) m/z = 558 (MH+)
Preparatívny postup 7
Metyl-(2S,3R)-3-karboxy-2-etoxy-hex-4-enoát
CH, O
CH, O
OH O CH, ÓH O CH, «/VyY“’ —
b)
CH,CH/° ° CH’
c)
d)
OU .O O
CH,CH,
OH
a) n-Butyllítium (23,0 ml, 2,5M v hexáne, 57,5 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri -78 °C prikvapká k miešanému roztoku diizopropylamínu (9,63 ml, 69,0 mmol) v bezvodom tetrahydrofuráne (10 ml) . Reakčná nádoba sa na 10 minút umiestni do kúpela z ľadu a vody a potom znovu ochladí na -78 °C. K zmesi sa pridá tetrahydrofurán (10 ml) a potom prikvapká roztok (S)-diizopropylmalátu (6,0 g, 27,0 mmol) v bezvodom tetrahydrofuráne (20 ml) . Reakčná zmes sa nechá zahriať na -20 °C, 8 hodín mieša, znovu ochladí na -78 °C a prikvapká sa k nej čerstvo predestilovaný allyljodid (2,75 mg, 30 mmol) . Reakčná zmes sa nechá zahriať na -40 °C, 36 hodín mieša a naleje do ľadovo chladnej 5% vodnej kyseliny citrónovej (150 ml) . Vzniknutá zmes sa extrahuje etylacetátom (3 x 150 ml) . Spojené organické roztoky sa premyjú nasýteným
107 vodným chloridom sodným, vysušia síranom horečnatým a skoncentrujú za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 80 : 20 ako elučného činidla. Získa sa (2S,3R)- a (2S, 3S)-izopropyl-2-hydroxy-3-(2-propyloxykarbonyl)-5-hexanoát (5,42 g, 76 %) (14 : 1) vo forme svetlo žltého oleja.
Rf 0,63 (hexan : etylacetát, 1 : 1)
óH (400 MHz, CDCI3) (prevažuj úci izomér) 1,19 (6H, m) , 1,26
(6H, m), 2,39 (1H, m), 2,58 (1H, m), 2,87 (1H, m) , 3,14 (1H,
d, J = 6,5 Hz, OH) , 4,19 (1H, m), 4,98 (1H, m), 5, 07 (2H , m),
5,13 (1H, d, J = 15 Hz), 5,79 (1H , m); (piky, ktoré je možné
prisúdiť menšinovému izoméru) 2,29 (1H, m), 2,50 (1H, m) , 2,78
(1H, m), 3,06 (1H, d), 4,40 (1H, m).
LRMS (termosprej) m/z =276 (MNH4 +) , 259 (MH+) .
b) Etyltrifluórmetansulfonát (1,45 ml, 11,2 mmol) sa pridá k zmesi (2S,3R)- a (3S,3S)-izopropyl-2-hydroxy-3-(2propyloxykarbonyl)-5-hexanoátu (14 : 1) (1,45 g, 5,6 mmol) a
2,6-diterc.butyl-4-metylpyridínu (2,88 g, 14,0 mmol). Vzniknutá zmes sa pod atmosférou dusíka 5,5 hodiny mieša pri 45 °C, 18 hodín pri 20 °C a 24 hodín pri 45 °C, ochladí, umiestni na krátký stĺpec silikagélu a eluuje etylacetátom. Filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa ďalej prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 85 : 15 ako elučného činidla. Získa sa (2S,3R)-izoporpyl-2-etoxy-3-(2-propyl-oxykarbonyl)-5-hexenoát (627 mg, 39 %).
Rf 0,62 (hexan : etylacetát, 70 : 30) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,13 (3H, t, J = 7,5 Hz), 1,17 (6H, m),
1,24 (6H, m), 2,24 /1H, dt, J = 13 a 6,5 Hz) , 2,36 (1H, dt, J
= 13 a 6, 5 Hz) , 2,83 (1H, m) , 3,38 (1H, dq, J = 9,5 a 7,5 Hz),
3,62 (1H, J = 9,5 a 7,5 Hz) , 3,92( 1H, d, J = 8 Hz), 5,02 (4H,
m) , 5, 70 (1H, m) .
108
LRMS (termosprej) m/z = 304 (MNH4 +) , 287 (MH+) ·
c) Zmes (2S,3R)-izopropyl-2-etoxy-3-(2-propyloxykarbonyl)-5-hexenoátu (500 mg, 1,75 mmol) a hydrátu hydroxidu litného (154 mg, 3,67 mmol) v zmesi metanolu a vody v pomere 1 : 1 (6 ml) sa 22 hodín mieša pri teplote miestnosti pod atmosférou dusíka a potom skoncentruje za zníženého tlaku. Podlá NMR reakcia ešte nie je dokončená, takže sa k zvyšku pridá ďalší hydrát hydroxidu litného (154 mg, 3,67 mmol) a zmes metanolu a vody v pomere 1 : 1 (6 ml) . Výsledná zmes sa 20 hodín zahrieva na 50 °C, ochladí a skoncentruje za zníženého tlaku. K zvyšku sa pridá toluén a toluénová zmes sa odparí. Tento postup sa niekoľkorát opakuje. Zvyšok sa vysuší za vákua za prítomnosti peliet hydroxidu sodného a použije sa ho v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.
δΗ (400 MHz, CD3OD) 1,15 (3H, t, J = 7,5 Hz), 2,26 (1H, m),
2,40 (1H, m), 2,46 (1H, m), 3,35 (1H, dq, J = 9,5 a 7,5 Hz), 3,45 (1H, dq, J = 9,5 a 7,5 Hz), 3,72 (1H, d, J = 7 Hz), 4,94 (2H, čiastočne zatienený pikom HOD), 5,84 (1H, m).
d) K miešanej suspenzii (2S,3R)-2-etoxy-3-(prop-3enyl)butandioátu dvojlitného (393 mg, zo stupňa c) v bezvodom tetrahydrofuráne (2,6 ml) sa pod atmosférou dusíka pri 0 °C prikvapká anhydrid trifluóroctovej kyseliny (2,62 ml). Výsledná zmes sa 4 hodiny mieša a skoncentruje za zníženého tlaku. K zvyšku sa pridá toluén a toluénová zmes sa skoncentruje. Tento postup sa niekoľkorát opakuje. Výsledná živica sa pri 0 °C rozpusti v bezvodom metanole (2 ml). Roztok sa cez noc nechá zahriať na teplotu miestnosti a potom skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozdelí medzi nasýtený vodný dihydrogéncitran sodný a etylacetát. Vodná vrstva sa extrahuje dvoma dávkami etylacetátu. Spojené organické roztoky sa premyjú nasýteným vodným chloridom
109 sodným, vysušia síranom sodným a skoncentrujú za zníženého tlaku. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (220 mg) vo forme svetlo žltého oleja. Hlavnou nečistotou, ktorá je zrejmá z 1H NMR, je pravdepodobne (2S,3S)-izomér.
Rf 0,3 (dichlórmetán : metanoi : kyselina octová, 95 : 5 : 1) δΗ (400 MHz, CD3OD) 1,16 (3H, t, J = 7,5 Hz), 2,32 (1H, m),
2,44 (1H, m) , 2,95 (1H, m), 3,42 (1H, dq, J = 9,m5 a 7,5 Hz),
3, 68 (m) , 3,74 (3H, s) , 4,01 (1H, d, J = 6 Hz) , 4,94 (2H, m),
5,74 (1H, m) .
Príklad 36/
Preparatívny postup 8 (2S,3R)-3-([(lS)-2,2-Dimetyl-l-([(ÍR)-1-fenyletyl]aminokarbonyl )propyl]amínokarbonyl)-2-etoxy-6-(3-fluór-4fenoxyfenyl)hexánová kyselina
110
a) Hydrochlorid N-(dimetylamíncpropyl)-N'-etylkarbodiimídu (214 mg, 1,12 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri 0 °C pridá k miešanej zmesi metyl-(2S,3R)-3-karboxy-2etoxyhex-4-enoátu (z preparatívneho postupu 7) (210 mg, 0,97 mmol) a l-hydroxy-7-azabenzotriazolu (139 mg, 1,02 mmol) v bezvodom dimetylformamide (4 ml). Po 1 hodine sa k vzniknutej zmesi pridá hydrochlorid (2S)-amíno-3,3-dimetyl-N-[(ÍR)-1fenyletyl]butanamídu (z preparatívneho postupu 1) (276 mg,
1,02 mmol) a potom diizopropyletylamín (0,18 pl, 1,02 mmol). Po ďalších 30 minútach sa reakčná zmes nechá zahriať na teplotu miestnosti. Po 17 hodinách pri teplote miestnosti sa reakčná zmes skoncentruje za zníženého tlaku a rozdelí medzi etylacetát (50 ml) a vodu (50 ml) . Vodná vrstva sa nasýti hydrogénuhličitanom sodným a extrahuje etylacetátom (2 x 20 ml) . Spojené organické roztoky sa skoncentrujú za zníženého tlaku a zvyšok sa rozpustí v éteri (50 ml). Éterový roztok sa premyje vodou (3 x 20 ml), vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexanu a etylacetátu v pomere 60 : 40 ako elučného činidla. Získa sa metyl-(2S,3R)-3({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-2-etoxyhex-5enoát (181 mg, 43 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky (podlá 1H NMR jediný diastereomer) s teplotou tavenia 131 až 134 °C.
Rf 0,4 (hexan : etylacetát, 1 : 1)
111 δΗ (300 MHz, CDC13), 1,00 (9Η, s), 1,22 (3Η, t, J = 7 Hz) ,
1,49 (3H, d, J = 6, 5 Hz), 2,31 (IH, dt, 14 a 8 Hz), 2,51 (IH, dt, 14 a 6,5 Hz), 2,68 (IH, m), 3,42 (IH, dq, J = 16 a 7 Hz), 3,66 (IH, dq, J = 16 a 7 Hz), 3,69 (3H, s), 4,05 (IH, d, J = 5
Hz) , 4,13 (IH, d, J = 9 Hz), 5,04 (IH, d, J = 10 Hz) , 5, 07
(IH, d, J = 18 Hz), 5,14 (IH, pentet, J = = 7 Hz) , 5,70 (IH,
dddd, J = 6, 7, 10 a 18 Hz) , 6,42 (IH, br d) , 7,29 (5H,
komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 433 (MH+)
b) Zmes octanu palladnatého (12 mg, 0,05 mmol) a tri-(2metylfenyl)fosfínu (30 mg, 0,10 mmol) v bezvodom acetonitrile (1 ml) sa sonikuje 1 minútu pri teplote miestnosti, dokiaľ nevznikne krémovo zafarbená suspenzia. Táto suspenzia sa pod atmosférou dusíka Pasteurovou pipetou pridá k miešanému roztoku metyl-(2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({ [ (ÍR) -1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-2-etoxyhex-5enoátu (415 mg, 0,96 mmol), 3-fluór-4-fenoxybrombenzénu (z preparatívneho postupu 10) (400 mg, 1,5 mmol) a trietylaminu (280 pl, 2,0 mmol) v bezvodom acetonitrile (1 ml). Výsledná zmes sa premyje dusíkom, potom 16 hodín zahrieva k spätnému toku, ochladí a naleje do etylacetátu (70 ml) . Etylacetátový roztok sa premyje 5% vodnou kyselinou chlorovodíkovou (20 ml), nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu dichlórmetán : etylacetát. Získa sa prevažne metyl(2S,3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-2-etoxy-6-(3fluór-4-fenoxyfenyl)hex-5-enoát vo forme svetlo žltej peny (359 mg, 69 %). Podľa 1H NMR sú v produkte tiež prítomné dva alkénové izoméry, (5Z) a (4E). Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň c)
112
Rf 0,36 (dichlórmetán : etylacetát, 10 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) (pre (5E) izomér). 1,01 (9H, s), 1,16 (3H, t, J = 7 Hz), 1,49 (3H, d, J = 6,5 Hz), 2,48 (1H, m), 2,68 (1H, m), 2,80 (1H, m), 3,26 (1H, m), 3,69 (1H, m a 3H, s, prekrývanie), 4,06 (1H, d, J = 4 Hz), 4,15 (1H, d, J = 9,5 Hz), 5,10 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 6,03 (1H, dt, 16 a 18 Hz),
6,36 (1H, d, J = 16 Hz), 6,42 (1H, br d), 6,95 (3H, m), 7,01 (1H, d, J = 8 Hz), 7.09 (3H, m), 7,22 (1H, m), 7,28 (6H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 636 (MNH4 +)
c) Roztok metyl-(2S,3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-2etoxy-6-(3-fluór-4-fenoxyfenyl)hex-5-enoátu (350 mg, 0,566 mmol) v etanole (15 ml) sa 16 hodín hydrogenuje za prítomnosti 10% palládia na uhlíku (60 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C a potom prefiltruje cez pomocnú filtračú látku Arbocel. Filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v cyklohexane a odparí. Tento postup sa dvakrát opakuje. Získa sa metyl-(2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[ (ÍR)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-2-etoxy-6-(3fluór-4-fenoxyfenyl)hexanoát (368 mg, 105 %) vo forme bezfarebnej peny, ktorá sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.
Rf 0,29 (hexan : etylacetát, 2 : 1)
ÓH (4 00 Ml· lz, CDCI3) 1,01 (9H, s), 1,19 (3H, t, J = 7 Hz), 1,49
(3 H, d, J = 6,5 Hz), 1,61 (3H, m), 1,75 (1H, m), 2,58 (3H, m),
3, 41 (1H, dq, J = 10 a 7 Hz), 3,61 (1H, dq, J = 10 a 7 Hz),
3, 70 (3H, s), 3,99 (1H, d, J = 5 Hz), 4,15 (1H, d, J = 9 Hz),
5, 12 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 6,38 (1H, br d), 6,83 (1H, d, J
= 10 Hz) , 6,87 (1H, d, J = 12 Hz), 6,93 (4H, m), 7,0 3 (1H, t,
J = 9,5 Hz), 7,20 (1H, m), 7,29 (6H, komplex). LRMS (termosprej) m/z = 638 (MNH4 +)
113
d) Hydrát hydroxidu litného (116 mg, 2,83 mmol) sa pridá k roztoku metyl-(2S, 3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyľľ ({[(ÍR)-1fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-2-etoxy-6-(3fluór-4-fenoxyfenyl)hexanoátu (368 mg, 0,566 mmol) v zmesi metanolu a vody v pomere 10 : 1 (5 ml) . Reakčná zmes sa 2 hodiny mieša pri teplote miestnosti. Vzniknutý roztok sa neutralizuje 5% vodnou kyselinou citrónovou a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozdelí medzi etylacetát (100 ml) a 5% vodnú kyselinu citrónovú (20 ml) , premyje nasýteným vodným chloridom sodným (20 ml) , vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu dichlórmetan : metanol 20 : 1 až 10 : 1. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (62 mg, 18 %) vo forme bezfarebného skla a určitej zmesnej frakcie. Tieto frakcie sa spoja a znovu prečistia mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu etylacetát :
1. Získa sa hexán : kyselina octová 33 : 66 : 1 až 50 zlúčenina uvedená v nadpise (37 mg, 11 %) vo forme bielej pevnej látky. Teplota tavenia 185 až 187 °C
Rf 0,23 (éter : hexán : kyselina octová, 70 : 30 : 1) δΗ (400 MHz, CD3OD) (NB niektoré posuny sú závislé na koncentrácii) 1,02 (9H, s), 1,15 (3H, t, J = 7 Hz), 1,44 (3H, d, J = 7 Hz), 1,56 (3H, m), 1,69 (1H, m), 2,54 (2H, m), 2,68 (1H, m), 3,35 (1H, dq, J = 10 a 7 Hz), 3,66 (1H, dq, J = 10 a
Hz), 4,31 (1H, s), 5,02 (1H, q, J = 7 Hz), 6,87 (4H, m),
6,96 (1H, d, J = 12 Hz), 7,02 (1H, t, J = 7 Hz), 7,13 (1H, m),
7,19 (2H, t, J = 7 Hz), 7,28 (4H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 607 (MH+) FTIR vmax (KBr disk) 3330, 2980, 1643, 1593, 1508, 1493, 1217, 700 cm1
114
Preparatívny postup 9 (3-Chlór-4-fenyl)fenyltrifluórmetánsulfonát ci
HO
Cl «W
Anhydrid trifluórmetansulfonovej kyseliny (755 μΐ, 4,45 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri 0 °C počas 2 minút prikvapká k roztoku (3-chlór-4-fenyl)fenolu (759 mg, 3,71 mmol) (WO 97/20815) a bezvodého pyridínu (785 μΐ, 9,65 mmol) v bezvodom dichlórmetáne. Vzniknutá zmes sa 1,5 hodiny mieša pri 0 °C, potom 2,5 hodiny pri 20 °C a naleje do zmesi éteru a hexánu (200 ml, 50 : 50) . Výsledná zmes sa prefiltruje a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexánu a éteru v pomere 20 : 1 ako elučného činidla. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bezfarebného oleja (1062 mg, 85 %) , ktorý počas niekoľkodňového zotrvania pri teplote miestnosti vykryštalizuje. Teplota tavenia: 43 až 44 °C
Rf 0,27 (hexan) δΗ (300 MHz,CDC13) 7,27 (1H, dd, J=8 a 2 Hz) , 7,29 (7H, br s). LRMS (EI) m/z = 336 (M+)
Preparatívny postup 10
3-Fluór-4-fenoxybrombenzén
F
OH
F
115
Vodný hydroxid sodný (5,5 ml, IM, 5,5 mmol) sa pridá k zmesi 4-bróm-2-fluórfenolu (0,96 g, 5,0 mmol) a difenyl jodoniumbromidu (1,99 g, 5,5 mmol) vo vode (20 ml). Výsledná zmes sa 4 hodiny zahrieva k spätnému toku, ochladí a zriedi éterom. Zriedená zmes sa prefiltruje. Organická fáza sa premyje nasýteným vodným chloridom sodným, vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Tmavo oranžový olejovitý zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia hexánu ako elučného činidla. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme oranžového oleja (1,2 g, 90 %).
Rf 0,36 (hexan) δΗ (400 MHz, CDC13) 6,90 (3H, m), 7,06 (1H, m), 7,20 (1H, m),
7,30 (3H, m) .
Preparatívny postup 11
1-jód-3-metyl-4-fenoxybenzén
Vodný hydroxid sodný (33 ml, IM, 33 mmol) sa pridá k zmesi 4-jód-2-metylfenolu (7,0 g, 29,9 mmol) a difenyljodoniumbromidu (11,89 g, 32,9 mmol) vo vode (120 ml). Výsledná zmes sa 4 hodiny zahrieva k spätnému toku, ochladí a extrahuje etylacetátom (4 x 100 ml). Spojené extrakty sa premyjú nasýteným vodným chloridom sodným, vysušia síranom horečnatým a skoncentrujú za zníženého tlaku. Tmavo oranžový olejovitý zvyšok sa prečistí opakovanou mžikovou chromatografiou za použitia hexánu ako elučného činidla pre prvý stĺpec a potom pentánu ako elučného činidla pre druhý
116 stĺpec. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme oranžového oleja (7,84 g, 84 %).
Rf 0,78 (hexan) δΗ (400 MHz, CDC13) 2,23 (3H, s), 6,65 (1H, d, J = 9 Hz), 6,94 (2H, m), 7,10 (1H, m), 7,32 (2H, m), 7,47 (1H, d, J = 9 Hz),
7,59 (1H, s).
LRMS (termosprej) m/z = 310 (MH+)
Preparatívny postup 12 terc.Butyl-(2S,3R)-3-karboxy-2-propylhex-5-enoát
tetrahydrofuráne (3 ml) ochladí na -7 0 °C
a) n-Butyllítium (2,2 ml, 2,5M v hexane, 5,6 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri -5 °C prikvapká k miešanému roztoku diizopropylamínu (0,73 m, 1 5,6 mmol) v bezvodom
Po 1 hodine sa vzniknutý roztok a pridá sa k nemu N,N'dimetylpropylénmočovina (DMPU) (3 ml) . K výslednej zmesi sa počas 15 minút, keď sa teplota udržuje na -70 ’C, prikvapká roztok (2R) -2-[2-(terc.butoxy)-2-oxoetyl]pent-4-énovej kyseliny (535 mg, 2,5 mmol) v bezvodom tetrahydrofuráne (6 ml) . Výsledná zmes sa 1 hodinu mieša, hneď potom sa k nej prikvapká 1-jódpropan (680 mg, 4,0 mmol). Reakčná zmes sa 1
117 hodinu mieša pri -70 °C, potom 2 hodiny pri -40 °C, nechá sa zahriať na 0 °C a pridá sa k nej metanol. Vzniknutá zmes sa rozdelí medzi 5% vodnú kyselinu citrónovú (150 ml) a éter (200 ml) . Organická vrstva sa premyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (75 ml) a vodou (3 x 200 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa svetlo žltý olej. Po prečistení mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexánu, etylacetátu a kyseliny octovej v pomere 80 : 20 : 2 ako elučného činidla sa získa (2R,3R)- a (2R,3S)-3-[(2metylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexánová kyselina (472 mg,
%) vo forme bezfarebného oleja (pomer diastereomérov 97 : 3).
Rf 0,31 (hexán : etylacetát : kyselina octová, 80 : 20 : 2) δΗ (400 MHz, CDCI3) (pre 2R,3R izomér) 0,92 (3H, r, J = 7,5 Hz), 1,34 (2H, m), 1,45 (9H, s), 1,58 (2H, m), 2,39 (2H, t, J = 7 Hz), 2,60 (1H, dt, J = 6 a 8 Hz), 2,74 (1H, dt, 6 a 7,5 Hz), 5,06 (1H, d, J = 10 Hz), 5,10 (1H, d, J = 17 Hz), 5,74 (1H, ddt, J = 17, 10 a 7,5 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 256 (slabý, M+) , 200 (pík bázy,
MH+ - t-Bu) FTIR vmax (film) 2970, 1730, 1370, 1250, 1160 cm-1
b) Zmes (2R,3R)- (2R,3S)-3-[(2-metylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexánovej kyseline (97 : 3, zo stupňa a) (3,05 g, 11,9 mmol) sa rozpustí v bezvodom tetrahydrofuráne (35 ml) . Tento roztok sa počas 30 minút pri -70 °C prikvapká k miešanému roztoku lítiumdiizopropylamídu (z n-butyllitia (19,2 ml, 2,5M v diizopropylamínu (7,0 ml, 50 tetrahydrofuráne (25 ml). Reakčná zmes sa nechá zahriať na teplotu -10 °C, 30 minút mieša, počas 2 hodín nechá zahriať na °C, znovu ochladí na -70 °C a injekčnou striekačkou sa k nej rýchlo pridá metanol (15 ml) . Výsledná zmes sa nechá zahriať na teplotu miestnosti a rozdelí medzi 5% vodnú kyselinu hexánoch, mmol)) v
mmol) a bezvodom
118 citrónovú (150 ml) a éter (200 ml) . Organická vrstva sa premyje 5% vodnou kyselinou chlorovodíkovou (50 ml) a vodou (3 x 200 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Svetlo žltý olejovitý zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradienta hexán : etylacetát : kyselina octová. Získa sa (2R,3S)- a (2R,3R)3- [ (2-metyl-prop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexánová kyselina (3,05 g, 100 %) vo forme bezfarebného oleja (pomer diastereomérov 58 : 42).
Rf 0,31 (hexán : etylacetát : kyselina octová, 80 : 20 : 2)
Stereochémia týchto dvoch izomérov sa stanoví nasledujúcim postupom: Zmes (2R,3S)- a (2R,3R)-3-[(2-metylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexánovej kyseliny (v pomere 1 : 3) v etanole sa hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku za tlaku 0,3 MPa a potom zmiesi s chlorovodíkom v zmesi suchého dichlórmetánu a dioxanu (4 °C,
h). Získa sa zmes (2R,3S)- a (2R, 3R)-2,3-diprop-lylbutandiovej kyseliny (v pomere 1 : 1), ktorá je známa z literatúry (Bull. Chem. Soc., Francúzsko, 1975, 2189). Skúmanie protónového NMR spektra (acetón-d6) ukáže δΗ 2,70 (2H, m, CHCO2H, hlavný izomér) a δΗ (2H, m, CHCO2H, menšinový izomér).
c) Roztok (2R,3S)- a (2R,3R)-3-[(2-metylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexánovej kyseliny (3,04 g, 11,9 mmol) (pomer diastereomérov 58 : 42) a hydrogénuhličitan cesný (2,30 g, 11,9 mmol) vo vode (35 ml) a acetonitrilu (90 ml) sa minút mieša pri 20 °C a potom odparí za zníženého tlaku. Zvyšok sa štyrikrát rozpustí v toluéne a odparí. Výsledná živica sa suší 30 minút za vysokého vákua a potom rozpustí v bezvodom N,N-dimetylacetamíde (50 ml). K vzniknutému roztoku sa pridá jódmetan (3,41 g, 24 mmol), roztok sa mieša 17 hodín
119 pri 20 °C a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozdelí medzi éter (250 ml) a vodu (250 ml) . Organická vrstva sa premyje vodou (3 x 200 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa zmes metyl-(2R,3S)a (2R,3R)-3-[(2-metyl-prop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-lyl)hexanoátu vo forme žltého oleja (3,0 g, 94 %) .
Chromatografia na tenkej vrstve za použitia zmesi pentanu a éteru v pomere 10 : 1 ako elučného činidla ukáže dve škvrny produktov o Rf 0,41 a 0,30.
d) Zmes metyl-(2R,3S)- a (2R,3R)-3-[(2-metylprop-2yl) oxykarbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexanoátu zo stupňa c) sa rozdelí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi pentanu a étera v pomere 20 : 1 a potom 10 : 1, čím sa získajú dve frakcie. Produkt eluovaný ako prvý bol identifikovaný ako metyl-(2R, 3S)-3-[(2-metylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-lyl)hexanoát (1,78 g, 56 %, Rf 0,41 (pentan : éter, 10 : 1)) vo forme‘bezfarebného oleja.
δΗ (400 MHz, CDCI3) 0,87 (3H, t, J = 7 Hz), 1,30 (3H, m), 1,46
(9H, s), 1,56 (1H, m), 2,23 (1H, m), 2,34 (1H, m), 2,54 (1H,
dt, 3 a 10 Hz) , 2, 69 (1H, 4 ,5 a 10 Hz), 3,66 (3H, s), 5, 00
(1H, d, J = 10 Hz) , 5,04 (1H, d, J= 17 Hz), 5,72 (1H, ddt, J =
17, 10 a 7 Hz). C15H26O4 vypočítané C 66,61, H 9,77,
Nájdené: C 66, 64, H 9,69 % FTIR vmax (KBr disk) 2970, 1730,
1370, 1150 cm-1
Produkt eluovaný ako druhý bol identifikovaný ako metyl(2R,3R)-3-[(2-metylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-lyl)hexanoát (760 mg, 24 %, Rf 0,30 (pentan : éter, 10 : 1)) vo
forme bezfarebného oleja.
óH (400 MHz, CDCI3) 0,90 (3H, t, J = 7 Hz), 1,27 (1H, m), 1,35
(1H, m), 1,45 (9H, s) , 1,55 (2H, m) , 2,36 (2H, m) , 2,58 (1H,
dt, J = 5 a 9 Hz), 2,71 (1H, dt, 5 a 9 Hz), 3,66 (3H, s), 5, 02
120 (IH, d, J = 10 Hz), 5,08 (IH, d, J % 16 Hz), 5,76 (IH, m). C15H26O4 vypočítané C 66, 70, H 9,81,
Nájdené: C 66,64, H 9,69 % FTIR vmax (KBr disk) 2970, 1730,
1370, 1160 cm1
e) Zmes metyl-(2R,3S)-3-[(2-metylprop-2-yl)oxy-karbonyl]2-(3-propen-l-yl)hexanátu (1,49 g, 5,51 mmol) a bezvodého jodidu litného (11 g, 82 mmol) v bezvodom pyridíne (50 ml) sa hodín pod atmosférou dusíka zahrieva k spätnému toku, ochladí a naleje do 20% vodnej kyseliny citrónovej (500 Ml) . Výsledná zmes sa extrahuje etylacetátom (250 ml). Organická vrstva sa premyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (2 x 150 ml), vodou (3 x 250 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa trituruje s hexánom, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Surový produkt sa prečistí opakovanou mžikovou chromatografiou (prvý stĺpec sa eluuje zmesou dichlórmetánu, metanolu a kyseliny octovej v pomere 80 : 20 : 2 a druhý stĺpec sa eluuje gradientom hexán : etylacetát : kyselina octová). Získa sa (2R,3S)-3-[(2metylprop-2-yl)oxy-karbonyl]-2-(3-propen-l-yl)hexánová kyselina (788 mg, 56 %) vo forme bezfarebného oleja.
Rf 0,3 (hexán : etylacetát : kyselina octová, 80 : 20 : 2) δΗ (400 MHz, CDCI3) 0,91 (3H, t, J = 7 Hz) , 1,35 (3H, m), 1,47 (9H, s), 1,62 (IH, m), 2,26 (IH, dt, J = 10 a 7,5 Hz), 2,38 (IH, dt, J = 7,5 a 10 Hz), 2,58 (IH, dt, J = 3 a 10 Hz), 2,70 (IH, dt, 5 a 9 Hz), 5,04 (IH, d, J = 10 Hz), 5,08 (IH, d, J =
Hz), 5,76 (IH, ddt, J = 18, 10 a 7,5 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 257 (slabý, MH+)
Nájdené: C 65, 30, H 9,44, Ci4H24O4 vypočítané C 65, 60, H 9,44 %
121
Preparatívny postup 13 terc.Butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]-amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-metyl(4-fenyl)-fenyl](2S)-propylhexanoát
a) Spôsobom opísaným v preparátívnom postupe 2 sa (2R,3S)-3-[(2-metylprop-2-yl)oxykarbonyl]-2-(3-propen-lyl) hexánová kyselina (380 mg, 1,48 mmol) nechá po dobu 1 hodiny pri 4 °C a potom 72 hodín pri 20 °C reagovať s hydrochloridom (2S)-amíno-3,3-dimetyl-N-[(ÍR)-1-fenyletyl]butanamídu (z preparatívneho postupu 1, 441 mg, 1,62 mmol).
Výsledná zmes sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa rozdelí medzi etylacetát (100 ml) a vodu (100 ml) . Vodná vrstva sa nasýti hydrogénuhličitanom sodným a extrahuje etylacetátom (2 x 100 ml). Spojené organické roztoky sa skoncentrujú za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v éteri (500 ml) a éterový roztok sa premyje vodou (3 x 200 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa trituruje s pentanom. Produkt sa odfiltruje a
122 vysuší. Získa sa terc.butyl-(2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-2(1-propyl)hex-5-enoát (579 mg, 80 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky s teplotou tavenia 180 až 183 °C.
Rf 0,51 (hexán : izopropylalkohol, 90 : 10) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,84 (3H, t, J = 7,5 Hz), 1,02 (9H, s), 1,22-1,50 (4H, m), 1,45 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 2,08 (1H, m), 2,22 (1H, m), 2,34 (1H, dt, J = 4 a 10 Hz), 2,52 (1H, dt, J = 3 a 10 Hz), 4,18 (1H, d, J = 9 Hz), 4,72 (1H, d, J =
9,5 Hz), 4,85 (1H, d, J = 16,5 Hz), 5,09 (1H, pentet, J = 7
Hz), 5,53 (1H, ddt, J = 9,5 Hz), 6,03 (1H, br d), 6,24 (1H, br
d), 7,26 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 473 (MH+) FTIR vmax (KBr disk) 3320, 2970, 2930, 1725, 1640, 1540, 1370, 1150, 700 cm-1 Nájdené: C 71,09, H 9,46, N 6,10, C28H44N24O4 vypočítané C
71,15, H 9,38, N 5,93 %
b) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 3 sa terc.butyl-(2S,3R)-3-(([(lS)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino] karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-2-(1-propyl)hex-5enoát (543 mg, 1,15 mmol) nechá reagovať s 3-metyl-4fenylbrombenzénom (356 mg, 1,44 mmol) za katalýzy paládiom v zmesi bezvodého acetonitrilu a dimetylformamidu v pomere 2 : 5 (7 ml) . Reakčná zmes sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa naleje do etylacetátu (100 ml) . Etylacetátová zmes sa premyje vodou (2 x 100 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexán : etylacetát. Získa sa prevažne terc.butyl-(2S,3R,5E)-3-({[(1S)2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-metyl-(4fenyl)fenyl]-2-(1-propyl)hex-5-enoát vo forme bezfarebnej živice (460 mg, 63 %). Podlá *H NMR sú v zmesi tiež prítomné
123 dva alkénové izoméry, (5Z) a (4E). Získaná zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri c).
Rf 0,46 (hexan : etylacetát, 3 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) (pre (5E) izomér) 0,87 (3H, t, J % 7 Hz) ,
1,03 (9h, s), 1,32 (2H, m) , 1,46 (9H, s, 3H, d, J = 7 Hz a 2H,
m, prekrývanie), 2,22 (3H, s) , 2,34 (1H, m), 2,48 (2H, m) ,
2,60 (1H, m), 4,19 (1H, d, J = 9 Hz), 4,93 (1H, pentet, J = 7
Hz), 5,85 (1H, br d), 6 , 05 (1H, dt, J = 14 a 7 Hz), 6,35 (1H,
d J=14 Hz), 6,27 (lH,br d), 7,20 (11H, komplex), 7,37 (2H, m) .
LRMS (termosprej) m/z = 639 (MH+)
c) terc.Butyl-(2S,3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR) 1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino)karbonyl)—6—[3— metyl(4-fenyl)fenyl]-2-(1-propyl)hex-5-enoát (437 g, 0,68 mmol) v etanole (50 ml) sa 17 hodín hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Reakčná zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa podrobí mžikovej chromatografii za použitia elučného gradientu hexan : etylacetát. Získa sa terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino)karbonyl)-propyl]amino)karbonyl)-6[3-metyl-(4-fenyl)fenyl](2S)-pro-pylhexanoát (395 mg, 62 %) vo forme bezfarebnej peny.
Rf 0,38 (hexan : etylacetát, 3 : 1)
δΗ (400 MHz, CDCI3) 0,85 (3H, t, J = 7 Hz) , 1,03 (9H, s) , 1,26
(4H, m), 1,37 (9H, s), 1,48 (4H, m a 3H, d, J = 7 Hz,
prekrývanie), 2,20 (3H, s), 2,29 (1H, m), 2,48 (4H, m) , 4,24
(1H, d, J = 9 Hz) , 5, 10 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,02 (1H , br
d), 6,29 (1H, br d), 6, 94 (1H, d, J = 8 Hz), 6,98 (1H, s),
124
7,09 (1H, d, J = 8 Hz), 7,24 (7H, komplex), 7,32 (1H, d, J = 7
Hz), 7,39 (2H, t, J = 7 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 641 (MH+)
Nájdené: C 76,71, H 8,97, N 4,35, C4iH56N2O4 vypočítané C 76, 84, H 8,81, N 4,37 %
Preparatívny postup 14 (2R)-2-[(4S)-2,2-Dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(IS)2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4-enamíd
a) Zmes izopropyl-(2S, 3R)- a (2S,3S)-2-hydroxy-3-(2propyloxykarbonyl)-5-hexenoátu (6,28 g, 24,3 mmol) (pomer izomérov 14 : 1) (z preparatívneho postupu 7, stupňa a) a hydroxidu draselného (4,09 g, 72,9 mmol) v zmesi dioxánu a vody (50 ml, 5 : 2) sa 18 hodín pod atmosférou dusíka zahrieva na 90 °C, potom ochladí a zriedi vodou (200 ml). Vodná zmes sa nechá prejsť stĺpcom ionexu (Dowex 50X8, 300 g), pričom elúcia sa uskutočňuje vodou tak dlho, dokiaľ v eluáte nie je prítomná žiadna dvojsýtna kyselina. Eluát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v etanole a etanolický roztok sa odparí. Tento postup sa uskutoční dvakrát a ďalej ešte dvakrát za použitia éteru. Produkt sa vysuší za vákua. Získa sa
125 (2S,3R)-2-hydroxy-3-(prop-3-en-l-yl)butandiová kyselina (voskovitá žltá pevná látka, 4,85 g, nad 100 %, ktorá obsahuje etanol a éter) ako hlavná zložka zmesi izomérov v pomere 8 : 1. Táto zmes sa použije priamo v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.
δΗ (300 MHz, CDC13) 2,47 (1H, dt, J = 7,5 a 15,5 Hz), 2,60 (1H, m), 3,00 (1H, dt, J = 4 a 6 Hz), 4,26 (1H, d, J = 4 Hz), 5,09 (1H, d, J=10 Hz), 5,15 (1H, d, J = 18 Hz), 5,83 (1H, m).
b) Surová dvojsýtna kyselina zo stupňa a) sa pri teplote miestnosti rozpustí v zmesi dimetylformamidu (36 ml) a 2,2dimetoxypropanu (133 ml). K vzniknutému roztoku sa pridá hydrát p-toluénsulfonovej kyseliny (231 mg) . Výsledná zmes sa
2,5 dňa zahrieva na 30 °C, hneď potom sa z nej za zníženého tlaku odparí rozpúšťadlo. Získa sa olej (7,5 g), ktorý obsahuje (4S)-4-[(15)-l-karboxybut-3-enyl]-2,2-dimetyl-l,3dioxolan-5-on, ako hlavnú zložku, a ďalej dimetyl-formamíd a p-toluénsulfónovú kyselinu.
δΗ (400 MHz, CDCI3) 1,53 (3H, s), 1,60 (3H, s), 2,47 (1H, dt,
J = 7,5 a 15,5 Hz), 2,71 (1H, dt, J = 7,5 a 15,5 Hz), 3,00 (1H, m), 4,30 (1H, d, J = 4 Hz), 5,12 (1H, d, J = 10 Hz), 5,16 (1H, d, J = 16 Hz), 5,80 (1H, m).
c) Dávka surového (4S)-4-[(15)-l-karboxybut-3-enyl]-2,2dimetyl-1,3-dioxolan-5-óna zo stupňa b) (podľa NMR obsahuje 1,54 g, 7,19 mmol) a l-hydroxy-7-aza-lH-l,2,3-benzotriazolu (1,09 g, 7,55 mmol) v bezvodom dichlórmetáne (30 ml) sa zmiesi pod atmosférou dusíka. Výsledná zmes sa ochladí na 0 °C a pridá sa k nej hydrochlorid N-(dimetylamínopropyl)-N'etylkarbodiimídu (1,60 g, 8,27 mmol). Vzniknutá zmes sa 1,5 hodiny mieša pri 0 °C a pridá sa k nej hydrochlorid (2S) — amíno-3,3-dimetyl-N-[(ÍR)-1-fenyletyl]butanamídu (z preparatívneho postupu 1) (2,15 g, 7,55 mmol) a potom
126 diizopropyletylamín (1,37 ml, 7,55 mmol). Po ďalších 45 minútach sa reakčná zmes nechá zahriať na teplotu miestnosti a po 3 hodinách pri teplote miestnosti rozdelí medzi etylacetát (200 ml) a vodný fosfátový pufor (pH 7, 100 ml) . Organická vrstva sa premyje hydrogénuhličitanom sodným a vodným chloridom sodným, vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Výsledná pena po prídavku éteru vykryštalizuje. Odfiltruje sa biela pevná látka (1,89 g). Po prekryštalizovaní zo zmesi etylacetátu a hexánu sa získa (2R) 2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l, 3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2dimetyl-1-({((ÍR)-1-fenyletyl]amíno)karbonyl)propyl]pent-4enamíd vo forme bielej pevnej látky (1,30 g, 42 %, ako jediný diastereomér) s teplotou tavenia 178 až 180 °C.
Rf 0,25 (dichlórmetan : éter, 90 : 10)
δΗ (300 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1,48 (3H, d, J = 7 Hz) , 1,51
(3H, s) , 1,56 (3H, s), 2,47 (1H, dt, 15 a 7,5 HZ ), 2,58 (1H,
dt, 15 a 7,5 Hz), 2,70 (1H, dt, J = 11 a 5 Hz), 4, 15 (1H, d, J
= 9 Hz) , 4,50 (1H, d, J = 5 Hz), 4,99 (1H, d, J = 10 Hz) , 5,08
(2H, m) , 5,67 (1H, m) , 5, 67 (1H, br d) , 6,45 (1H, br d), 7,27
(5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 431 (MH+)
Preparatívny postup 15 (2R)-2-[ (4S)-2,2-Dimetyl-5-oxo-l, 3-dioxolan-4-yl]-N-[ (1S)2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amíno]karbonyl)propyl]-5[(3-fluór-4-fenoxy)fenyl]pentanamíd
127
a) Zmes octanu paladnatého (17 mg, 0,075 mmol) a tri-(2metylfenyl)fosfínu (46 mg, 0,15 mmol) v bezvodom acetonitrile (2 ml) sa 1 minútu sonikuje pri teplote miestnosti, dokiaľ nevznikne krémovo zafarbená suspenzia. Táto suspenzia sa pod atmosférou dusíka Pasteurovou pipetou pridá k miešanému roztoku (2R)-2-[(4S)-2,2-dimety1-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino) karbonyl) propyl] pent-4-enamídu (650 mg, 1,5 mmol), l-bróm-3-fluór-4-fenoxybenzénu (z preparatívneho postupu 10) (587 mg, 2,26 mmol) a N-etylmorfolínu (348 μΐ, 3,0 mmol) v bezvodom acetónitrile (2,5 ml). Výsledná zmes sa premyje dusíkom, potom 16 hodín zahrieva k spätnému toku, ochladí a naleje do etylacetátu (100 ml). Etylacetátový roztok sa premyje 5% vodnou kyselinou chlorovodíkovou (30 ml), nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml) , vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu dichlórmetan : éter. Získa sa prevažne (2R, 5E)-2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]-5-(3-fluór-4fenoxyfenyl)pent-4-enamíd vo forme svetlo žltej peny (210 mg, 22 %) . Podľa 1H NMR sú v produkte tiež prítomné alkénové izoméry. Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň c)
128 δΗ (400 MHz, CDC13) (pre (5E) izomér) 1,00 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 1,53 (3H, s), 1,58 (3H, s), 2,65 (1H, m), 2,77 (2H, m), 4,18 (1H, d, J = 9 Hz), 4,56 (1H, d, J = 5 Hz), 5,03 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,88 (1H, br d), 6,01 (1H, dt, 16 a 7 Hz), 6,43 (1H, d, J = 16 Hz), 6,58 (1H, br d), 6,94 (4H, m), 7,08 (2H, m), 7,20 (2H, m), 7,24 (5H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 618 (MH+) , 542 (M+- (CH3) 2CO2) .
b) Roztok (2R, 5E)-2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l, 3-dioxolan4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino]karbonyl)propyl]-5-(3-fluór-4-fenoxyfenyl)pent-4enamídu (210 mg, 0,34 mmol) v zmesi etanolu a etylacetátu v pomere 5 : 1 (10 ml) sa 3 hodiny hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (20 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C.
Výsledná zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa (2R) -2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2dimetyl-1-({[(ÍR)-1-fe-nyletyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3fluór-4-fenoxy)fenyl]pentanamíd (103 mg, 49 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky, ktorá sa použije pri postupe podlá príkladu 9 bez ďalšieho prečistenia.
Rf 0,71 (dichlórmetan : metanol, 90 : 10) δΗ (400 MHz, CDCI3) 1,03 (9H, s), 1,50 ((3H, d, J = 7 Hz) , l, 52 (3H, s), 1,57 (3H, s, a 2H, m, prekrývanie), 1,85 (2H, m, , 2,58 (3H, m), 4,16 (1H, d, J = 10 Hz), 4,45 (1H, d, J = 8 Hz), 5,06 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,92 (1H, br d), 6,55 (1H, br d), 6,84 (1H, d, J = 8 Hz), 6,94 (3H, m), 7,06 (1H, t, J = 7 Hz), 7,26 (8H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 619 (MH+)
129
Preparatívny postup 16 (2R)-2-[(4S)-2,2-Dimetyl-5-oxo-1,3-dioxolan-4-yl]-N-[ (1S)2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]-5[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]pentanamíd
a) Spôsobom opísaným v príklade 15 b) sa (2R) —2 — [ (4S)—
2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4-enamíd (z preparatívneho postupu 14) (860 mg, 2,0 mmol) nechá 16 hodín pri teplote spätného toku za katalýzy paládiom v acetonitrile reagovať s l-bróm-3-metyl-4-fenylbenzénom (740 mg, 3,0 mmol). Potom sa reakčná zmes ochladí a rozdelí medzi etylacetát (3 x 50 ml) a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný (50 ml) . Spojené organické roztoky sa vysušia síranom sodným a skoncentrujú za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu dichlórmetán : metanol 97,5 : 2,5. Získa sa prevažne (2R,5E)-2-[(4S)-2,2130 dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-1({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]pent-4-enamíd vo forme žltohnedej peny (480 mg, 40 %) . Podľa *H NMR sú v produkte tiež prítomné alkénové izoméry. Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň b)
Rf 0,59 (dichlórmetan : metanol, 95 : 5) δΗ (400 MHz, CDCI3) (pre (5E) izomér). 1,03 (9H, s), 1,48 (3H, d, J = 7 Hz), 1,54 (3H, s), 1,59 (3H, s), 2,25 (3H, s), 2,71 (1H, dt, J = 15 a 7,5 Hz), 2,77 (1H, q, J = 6 Hz), 2,85 (1H, dt, J = 15 a 7,5 Hz), 4,18 (1H, d, J = 9 Hz), 4,58 (1H, d, J = 5 Hz), 5,03 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,87 (1H, br d), 6,13 (1H, dt, 16 a 7 Hz), 6,52 (1H, d, J = 16 Hz), 6,58 (1H, br d), 7,23 (10H, komplex), 7,38 (3H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 521 (M+-(CH3) 2CO2) .
b) Roztok (2R,5E)-2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l, 3-dioxolan4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino} karbonyl) propyl] -5-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]-pent-4enamídu (480 mg, 0,80 mmol) v etanole (20 ml) sa 4 hodiny hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (48 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Vzniknutá zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa (2R)-2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3dioxolan-4-yl] -N- [ (1S) -2,2-dimetyľľ ({ [ (ÍR) -1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-5-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentanamíd (440 mg, 92 %) vo forme krémovo zafarbenej pevnej látky, ktorá sa použije pri postupe podľa príkladu 10 bez ďalšieho prečistenia.
LRMS (termosprej) m/z = 526 (MH+)
Rf 0,53 (dichlórmetan : metanol, 95 : 5) .h (400 MHz, CDCI3) 1,03 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz) , 1,53 (3H, s), 1,58 (3H, s), 1,64 (2H, m), 1,87 (2H, m), 2,46 (3H,
131
m), 4,20 (1H, d, J = 10 Hz), 4,47 (1H, d, J = 5 Hz) , 5, 07 (1H,
pentet, J = 7 Hz), 5,99 (1H, br d) ) z 6, 55 (1H, br d), 7,00 (1H,
d, J = 8 Hz), 7,04 (1H, s), 7,13 (1H, d, J = 8 Hz) , 7,29 (5H,
komplex), 7,40 (2H, m).
LRMS (termosp •rej) m/z = 600 (MH+) Z 523 (pík bázy, M+-
(CH3)2CO2) .
P r í k 1 a d 37 /
P r e p a r a t í v n y P 0 s t u P 17
(3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amíno}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-[(3-fluór-4-fenyl)fenyl]hexánová kyselina
a) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 3a) (za použitia l-bróm-3-fluór-4-fenylbenzénu namiesto l-bróm-3132 metyl-4-fenylbenzénu) a b) sa získa terc.butyl-(3R,5E)-3({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-6-[3-fluór-4fenyl)fenyl]hex-5-enoát vo forme bezfarebnej živice. Podlá XH NMR produkt tiež obsahuje dva alkénové izoméry, (5Z) a (4E). Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni.
Rf 0,23 (hexan : etylacetát, 3 : 1) .h (400 MHz, CDCI3) (pre (5E) izomér). 0,96 (9H, s), 1,39 (9H,
s), 1,47 (3H, d, J = 6,5 Hz), 2,28 (1H, dt, J = 14 a 7 Hz),
2,37 (1H, dd, J = 4 a 15 Hz), 2,44 (1H, m), 2,62 (1H, dd, J = 8 a 15 Hz), 2,73 (1H, m), 4,16 (1H, d, J = 9 Hz), 5,03 (1H, pentet, J = 6,5 Hz), 5,88 (1H, br d), 6,06 (1H, dt, J = 7,5 a
Hz), 6,33 (1H, d, J = 15 Hz), 6,48 (1H, br d), 7,06 (2H,
m), 7,19 (5H, m), 7,30 (1H, m), 7,39 (2H, t, J = 8 Hz), 7,48 (2H, d, J = 8 Hz) .
LRMS (termosprej) m/z = 602 (MH+)
b) terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl Jamíno) karbonyl) propyl lamíno) karbonyl) -6-[3-fluór-(4fenyl)fenyl]hexanoát (702 mg, 72 %) vo forme bezfarebnej peny. Rf 0,28 (hexan : etylacetát, 3 : 1) •H (400 MHz, CDCia) 1,00 (9H, s), 1,37 (9H, s), 1,46 (3H, d, J = 7 Hz), 1,50 (3H, m), 1,61 (1H, m), 2,28 (1H, m), 2,55 (4H,
m), 4,16 (1H, d, J = 9 Hz), 5,06 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,90 (1H, br d), 6,42 (1H, br d), 6,89 (2H, m), 7,22 (7H, komplex),
7,40 (2H, t, J = 7 Hz), 7,48 ( 2H, d, J = 7 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 603 (MH+) C37H47FN2O4 vypočítané C
73, 66, H 7,88, N 4,64,
Nájdené: C 73,73, H 7,86, N 4,65 %
c) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 1 sa terc.butyl-(3R)-3- ({ [ (1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino)karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-6-[3-fluór-(4133 fenyl)fenyl]hexanoát 4 hodiny pri 20 °C nechá reagovať s trifluóroctovou kyselinou. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (470 mg, 80 %) s teplotou tavenia 165 až 168 °C (po triturácii s diizopropyléterom).
Rf 0,38 (éter : hexan : kyselina octová, 70 : 30 : 1) h (400 MHz, DMSO-dg) 0,87 {9H, s), 1,43 (3H, d, J = 7 Hz),
1,42 (4H, m), 2,20 (1H, dd, J = 3 a 15 Hz), 2,44 (3H, m), 2,75
(1H, m) , 4,27 (1H, d, J = 10 Hz), 4,89 (1H, pentet, J = 7 Hz),
6,97 (2H, m), 7,16 (5H, komplex), 7,32 (2H, m), 7,45 (4K, m),
7,65 (1H, br d) , 8,27 (1H, br d), 11,97 (1H , br s) . C33H39FN2O4
vypočítané C 72,52, H 7,24, N 5,09,
Nájdené: C 72,50, H 7,19, N 5,12 % FTIR vmax (KBr disk) 3300, 3070, 3030, 2965, 1710, 1633, 1543, 764, 700 cm“1
Preparatívny postup 18
Metyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-(2S)-etoxy-6-[(3-metyl4-fenyl)fenyl]hexanoát
a) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 15 a) sa metyl-(2S,3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl] amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-2-etoxyhex-5-enoát
134 (415 mg, 0,96 mmol) (z preparatívneho postupu 8a) (396 mg,
0,92 mmol) nechá 16 hodín pri teplote spätného toku reagovať s l-bróm-3-metyl-4-fenylbenzénom (340 mg, 1,37 mol) za katalýzy paládiom v acetónitrile. Výsledná zmes sa ochladí a naleje do etylacetátu (70 ml) . Etylacetátová zmes sa premyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (20 ml) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexán : etylacetát. Získa sa prevažne metyl-(2S,3R,5E)-3-({ [(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1fenyletyl]-amino)karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-(2S)-etoxy-6[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]hex-5-enoát vo forme žltej peny (415 mg, 75 %) . Podlá *H NMR produkt tiež obsahuje dva alkénové izoméry, (5Z) a (4E). Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň b).
Rf 0,51 (hexán : etylacetát, 1 : 1) ,H (400 MHz, CDC13) (pre (5E) izomér). 1,02 (9H, s), 1,26 (3H, t, J = 7 Hz), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 2,24 (3H, s), 2,55 (IH, m), 2,73 (IH, m), 2,82 (IH, m), 3,45 (IH, pentet, J = 7 Hz), 3,69 (IH, m a 3H, s, prekrývanie), 4,11 (IH, d, J = 4 Hz),
4,14 (IH, d, J = 10 Hz), 5,12 (IH, pentet, J = 7 Hz), 6,14 (IH, dt, 16 a 8 Hz), 6,46 (IH, d, J = 16 Hz), 6,50 (IH, br d),
7,24 (11H, komplex), 7,40 (3H, m).
b) Roztok metyl-(2S,3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino)karbonyl)propyl]amino}karbo-nyl)(2S)-etoxy-6-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]hex-5-enoátu (415 mg,
0,70 mmol) v etanole (20 ml) sa 2 hodiny hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (40 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Vzniknutá zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v cyklohexane a odparí (dvakrát). Získa sa metyl-(2R,3S)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1135 fenyletyl] amino} karbonyl) propyl] amino} karbonyl) - (2S) -etoxy-6(3—fluór-4-fenoxyfenyl)hexanoát (384 mg, 91 %) vo forme bezfarebnej peny, ktorá sa pri postupe podlá príkladu 12 použije bez ďalšieho prečistenia.
Rf 0,48 (hexan : etylacetát, 1 : 1)
h (400 MHz, CDC13) 1,01 (9H, s), 1,14 (3H, t, J = 7 Hz), 1,49
(3H, d, J = 7 Hz), 1,65 (3H, m), 1,80 (1H, m), 2,24 (3H, s),
2,60 (3H, m), 3,40 (1H, dt, J = 16 a 8 Hz), 3,62 (1H, m) , 3,70
(3H, s), 4,01 (1H, d, J = 5 Hz), 4,15 (1H, d, J = 9 Hz), 5,13
(1H, pentet, J = 7 Hz), 6,41 (1H, br d), 6,92 (1H, d, J = 9
Hz) , 7,00 (1H, d, J = 7 Hz), 7,03 (1H, s), 7,11 (1H, d, J = 7
Hz) , 7,29 (7H, komplex), 7,30 (3H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 602 (MH+)
Preparatívny postup 19A terc.Butyl-(3R)-3-({[(IS)-2,2-dimetyl-l-({[(IS)-2-metoxy-lfenyletyl] amino) karbonyl) propyl]amino)karbonyl)-6-[3-metyl- (4fenyl)fenyl]hexanoát
136
a) N-(dimetylamínopropyl)-N'-etylkarbodiimíd (2,298 g, 12 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri 0 °C pridá k miešanej zmesi (2R)-2-[(2-terc.butoxy)-2-oxoetyl]pent-4-énovej kyseliny (2,13 g, 10 mmol), benzylesteru L-terc.leucínu (2,834 g, 11 mmol)
(N. Moss et al., J . Med. Chem. 1996, 39, 2178), N-
metylmorfolínu (2,40 ml, 22 mmol) a hydrátu 1-
hydroxybenzotriazolu (1,836 g, 12 mmol) v bezvodom
dichlórmetáne (50 ml) Výsledná zmes sa nechá pomaly bez
odstavenia chladiaceho kúpeľa zahriať na teplotu miestnosti. Po 20 hodinách sa reakčná zmes naleje do etylacetátu (250 ml), premyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (2 x 100 ml), nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným (2 x 70 ml) a vodným chloridom sodným (70 ml) , vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Olejovitý zvyšok po prídavku pentánu vykryštalizuje. Pevná látka sa odfiltruje a vysuší. Získa sa terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l(benzyloxykarbonyl)propyl]amíno}karbonyl)hex-5-enoát (4,068 g, 97 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky s teplotou tavenia 55 až 57 °C.
Rf 0,37 (hexán : etylacetát, 10 : 1) h (300 MHz, CDC13) 0,95 (9H, s), 1,42 (9H, s), 2,15 (IH, dt, 16 a 6,5 Hz), 2,39 (2H, m), 2,59 (IH, d, J = 10 Hz), 2,68 (2H, m), 4,50 (IH, d, J = 10 Hz), 5,00 (IH, d, J = 10 Hz), 5,04 , (IH, d, j = 17 Hz), 5,13 (IH, d, J = 12 Hz), 5,19 (IH, d, J =
Hz), 5,71 (IH, m), 6,35 (IH, br d), 7,34 (5H, komplex).
í
I
137
LRMS (termosprej) m/z = 418 (MH+)
b) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 3 a) sa terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l(benzyloxykarbonyl)propyl]amino)karbonyl)hex-5-enoát (1,855 g,
7,5 mmol) za katalýzy paládiom 16,5 hodiny pri teplote spätného toku v acetonitrile nechá reagovať s 3-metyl-4fenylbrombenzénom (1,855 g, 7,5 mmol) za prítomnosti Netylmorfolínu, ako bázy. Po spracovaní sa produkt prečistí opakovanou mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexanu a éteru v pomere 4 : 1 (prvý stĺpec) a toluénu a éteru v pomere 20 : 1 (druhý stĺpec) ako elučného činidla. Získa sa prevažne terc.butyl-(3R,5E)-3-(([(lS)-2,2-dimetyl-1(benzyloxykarbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-metyl-(4fenyl)fenyl]-hex-5-enoát vo forme svetlo žltej živice (2,205 g, 75 %) . Podlá XH NMR produkt tiež obsahuje dva alkénové izoméry, (5Z) a (4E) . Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň c).
.h (400 MHz, CDC13) 0,95 (9H, s), 1,42 (9H, s), 2,26 (3H, s),
2,35 (1H, m), 2,45 (1H, dd, 3 a 17 Hz), 2,54 (1H, dt, J = 15 a 6,5), 2,69 (1H, dd, J = 9 a 17 Hz), 2,77 (1H, m), 4,52 (1H, d, J = 10 Hz), 4,97 (1H, d, J = 12 Hz), 5,06 (1H, d, J = 12 Hz),
6,16 (1H, dt, J = 18 a 7 Hz), 6,42 (2H, m), 7,29 (13H, komplex).
c) Roztok terc.butyl-(3R,5E)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l(benzyloxykarbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-[3-metyl- (4fenyl)fenyl]hex-5-enoát (2,205 g, 3,78 mmol) v zmesi etanolu a vody v pomere 10 : 1 (44 ml) sa 6 hodín hydrogenuje pri teplote miestnosti za tlaku 0,3 MPa za prítomnosti 10% paládia na uhlíku. Výsledná zmes sa za dôkladného premývania etanolom prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel. Filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v toluéne
138 a toluénový roztok sa odparí (trikrát). Zvyšok sa rozpustí v éteri a éterový roztok sa odparí (dvakrát). Zvyšok sa rozpustí v éteri a po prídavku hexánu sa vyzráža ako olej. Po odstránení rozpúšťadla za zníženého tlaku sa získa terc.butyl(3R)-3-({ [(1S)-2,2-dimetyl-l-arboxy)propyl]amino]- karbonyl)6-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (1,817 g, 97 %) vo forme bezfarebnej peny s teplotou tavenia 51 až 56 °C.
Rf 0,38 (hexán : éter : kyselina octová, 50 : 50 : 1)
h (400 MHz, DMSO-dg) 0,94 (9H, s) , 1,37 (9H, s a 1H, m,
prekrývanie), 1,50 3H, m), 2,17 (3H, s), 2,23 (1H, m), 2,39
(1H, dd, J = 10 a 15 Hz), 2,53 (2H, m), 2,86 (1H, m), 4,10
(1H, d, J = 10 Hz), 7,05 (3H, m), 7,29 (3H, m), 7,40 (2H, t, J
= 8 Hz), 7,90 (1H, br d).
LRMS (termosprej) m/z = 513 (ΜΝΗΛ )
d) 7-Azabenzotriazol-l-
yloxytris(pyrrolidíno)fosfoniumhexafluórfosfát (522 mg, 1,0 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri 0 °C pridá k miešanému roztoku terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l(karboxy)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-metyl-(4fenyl)fenyl]hexoátu (496 mg, 1,0 mmol), (1S)-2-metoxy-lfenyletylamínu (151 mg, 1,0 mmol) (J. Amer. Chem. Soc., 1995, 117, 10885) a kolidínu (267 1, 2,0 mmol) v bezvodom dichlórmetáne (5 ml) . Po 1 hodine sa vzniknutý roztok mieša 2,75 hodiny pri 20 °C. Výsledná zmes sa naleje do etylacetátu (70 ml) a etylacetátové zmes sa premyje postupne 5% kyselinou citrónovou (2 x 50 ml), nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným (2 x 50 ml) a chloridom sodným (50 ml) . Organický roztok sa vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 3 : 1 ako elučného činidla. Získa sa terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2dimetyl-1-({[(1S)-2-metoxy-l139 fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino)karbonyl)-6-[3-metyl-(4fenyl)fenyl]hexanoát (537 mg, 85 %) vo forme bezfarebnej peny. Rf 0,16 (hexán : etylacetát, 4 : 1) h (400 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), 1,40 (9H, s a IH, m,
prekrývanie), 1,55 (2H, m), 1,68 (IH, m), 2,23 (3H, s) , 2,32
(IH, m), 2,55 (4H, m), 3,33 (3H, s), 3,62 (2H, d, J = 5 Hz) ,
4,28 (IH, d, J = 9 Hz), 5,12 (IH, dt, J = 8 a 5 Hz) , 6, 35 (IH,
br d), 6,44 (IH, br d), 6,96 (IH, d, J = 8 Hz) , 7,00 (IH, s) ,
7,10 (IH, d, J = 8 Hz), 7,26 (8H, komplex), 7,39 (2H, m) .
LRMS (termosprej) m/z = 630 (MH+) FTIR ν^χ (KBr disk) 3320, 2930, 1729, 1643, 1543, 1370, 1157 a 700 cm“1
Preparatívny postup 19B terc.Butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-[3-metyl(4-fenyl)fenyl]hexanoát
140
a) 3-Metyl-4-fenylbrombenzén sa alternatívne syntetizuje takto: Zmes 5-bróm-2-jódtoluénu (5,01 g, 16,9 mmol), fenylborónovej kyseliny (2,26 g, 18,5 mmol), octanu paladnatého (190 mg, 0,85 mmol), trifenylfosfínu (440 mg, 1,68 mmol) a 2M vodného uhličitanu sodného (25 ml) v acetóne (60 ml) sa odplyní a 18 hodín zahrieva k spätnému toku. Reakčná zmes sa potom ochladí a rozdelí medzi éter (200 ml) a vodu (100 ml). Organická vrstva sa premyje vodným roztokom chloridu sodného (100 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Žltý olejovitý zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia hexánu ako elučného činidla. Získa sa 3-metyl-4-fenylbrombenzén (3,298 g, 79 %) .
b) Roztok 3-metyl-4-fenylbrombenzénu (12,36 g, 50,0 mmol) v bezvodom tetrahydrofurane (30 ml) sa pod atmosférou dusíka za miešania mechanickým miešadlom pri teplote spätného toku prikvapká k suspenzii horčíkových hoblín (1,33 g, 50 mmol) v bezvodom tetrahydrofurane (23 ml) obsahujúcej kryštál jódu. Po dokončení prídavku sa reakčná zmes zriedi bezvodým tetrahydrofuranom (55 ml) a v zahrievaní sa pokračuje 1 hodinu. Roztok arylmagnéziumbromidu sa nechá schladnúť na teplotu miestnosti, hneď potom sa injekčnou striekačkou pod atmosférou dusíka pri -40 °C prikvapká k roztoku anhydridu glutarovej kyseliny (6,27 g, 55 mmol) v bezvodom tetrahydrofurane (125 ml) . Po 90 minútach pri -40 °C sa zmes nechá zahriať na 0 °C a pridá sa k nej kyselina chlorovodíková (IM, 250 ml). Vzniknutá zmes sa extrahuje éterom (500 ml),
141 premyje vodným roztokom chloridu sodného (200 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetánu a metanolu v pomere 95 : 5 ako elučného činidla. Získa sa 5-(3-metyl-4-fenyl)fenyl-5-oxopentanová kyselina vo
forme svetlo hnedého oleja (8,6 g, 60 %), ktorý následne
vykryštalizuje.
Teplota tavenia 91 až 9 4 °C.
Rf 0,26 (dichlórmetán : metanol, 95 : 5)
•h (400 MHz, CDC13) 2,11 (2H, pentet, J = 7 Hz) , 2,33 (3H, s),
2,50 (2H, t, J = 7 Hz), 3,11 (2H, t, J = 7 Hz) , 7,31 (3H, m),
7,42 (3H, m), 7,84 (1H, d, J = 8 Hz) , 7, 90 (1H, s) .
LRMS (termosprej) m/z = 283 (MH+)
Nájdené: C 76, 49, H 6,48, Ci8Hi8O3 vypočítané C 76,57, H 6,43 %
c) Trietylsilán (1,4 ml, 8,75 mmol) sa počas 2 minút pod atmosférou dusíka pri 0 °C prikvapká k miešanému roztoku 5—(3— metyl-4-fenyl)fenyl-5-oxopentanovej kyseliny (1,0 g, 3,5 mmol) v trifluóroctovej kyseline (5 ml) . Vzniknutá zmes sa nechá zahriať na teplotu miestnosti, 2 hodiny mieša a naleje do vody (20 ml) . Vodná zmes sa extrahuje dichlórmetánom (3 x 15 ml) . Spojené organické roztoky sa premyjú vodným roztokom chloridu sodného, vysušia síranom horečnatým a skoncentrujú za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetánu a metanolu v pomere 95 : 5 ako elučného činidla. Získa sa zmes [5-(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentánovej kyseliny a trietylsilanolu v pomere 3 : 1 (1,1 g). Táto zmes sa rozpustí v hexáne (5 ml) a k vzniknutému roztoku sa pridá hydrogénuhličitan sodný (290 mg,
3,5 mmol). Výsledná zmes sa mieša cez noc pri tpelote miestnosti a skoncentruje za zníženého tlaku. Pevný zvyšok sa trituruje s etylacetátom a odfiltruje sa [5-(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentanoát (820 mg, 80 %). Táto látka sa zmiesi s
142 chlorovodíkovou kyselinou a po extrakcii rozpúšťadlom sa získa voľná kyselina vo forme viskóznej bezfarebnej živice.
H (400 MHz, CDC13) 1,74 (4H, m), 2,27 (3H, s), 2,43 (2H, m), 2,65 (2H, m),7,06 (1H, d, J = 8 Hz), 7,11 (1H, s), 7,16 (1H, d, J = 8 Hz), 7,33 (3H, m), 7,42 (2H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 286 (MNH/)
Nájdené: C 80,40, H 7,59, C18H20O2 vypočítané C 80, 56, N 7,51 %
d) Oxalylchlorid (3,1 ml, 35,5 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri -10 ’C prikvapká k miešanému roztoku [5-(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentanovej kyseliny (6,80 g, 25,3 mmol) v bezvodom dichlórmetáne (60 ml) . K vzniknutej zmesi sa pridá dimetylformamíd (2 kvapky). Po 10 minútach sa reakčná zmes nechá zahriať na teplotu miestnosti. Výsledný roztok sa po 5 hodinách skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v bezvodom toluéne a toluénový roztok sa skoncentruje za zníženého tlaku (dvakrát). Zvyšok sa rozpustí v hexáne (150 ml), roztok sa 17 hodín nechá stáť a potom prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel, pričom sa filtračný koláč premýva väčším množstvom hexánu. Filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa 5-[ (3-metyl-4-fenyl)fenyl]pentanoylchlorid (7,1 g, 97 %).
H (400 MHz, CDCia) 1,77 (4H, m), 2,26 (3H, s), 2,63 (2H, t, J = 6,5 Hz), 2,95 (2H, t, J = 6,5 Hz), 7,06 (1H, d, J = 8 Hz), 7,10 (1H, s), 7,36 (5H, m). Roztok n-butyllítia (9,92 ml, 2,5M v hexánoch, 24,8 mmol) sa počas 15 minút pod atmosférou dusíka pri -70 °C prikvapká k roztoku 4-(S)-benzyloxazolidín2-ónu (4,39 g, 24,8 mmol) v bezvodom tetrahydrofuráne (70 ml). Vzniknutá zmes na 30 minút nechá zahriať na -50 °C, znovu ochladí na -70 °C a počas 15 minút sa k nej prikvapká roztok [5-(3-metyl-4-fenyl)fenyl]-pentanoylchloridu (7,1 g, 24,8 mmol) v bezvodom tetrahydrofuráne (10 ml). Po 1 hodine sa zmes nechá zahriať na 0 °C, hneď potom sa k nej rýchlo pridá 20%
143 vodný chlorid amónny (75 ml). Výsledná zmes sa 15 minút mieša a potom extrahuje etylacetátom (250 ml) . Organická fáza sa premyje vodou (3 x 250 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu 20 : 1 až 2 : 1. Získa sa 4-(S)-benzyl-3-{[5-(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentanoyl}oxazolidín-2-ón (9,66 g, 91 %) vo forme bezfarebného oleja.
Rf 0,4 (pentan : etylacetát, 3 : 1) h (300 MHz, CDC13) 1,79 (4H, m), 2,28 (3H, s), 2,70 (2H, m),
2,79 (1H, dd, J = 10 a 13 Hz), 3,01 (2H, m) , 3,32 (1H, dd, J =
3 a 13 Hz), 4,19 (2H, m), 4,70 (1H, m) , 7,06-7,43 (13H,
komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 445 (MNH4 +) FTIR Vmax (KBr disk) 2930,
1784, 1700, 1387, 1350, 1211, 702 cm'1.
Nájdené: C 75,43, H 6,65, N 3,08, C28H29NO3.0,3CH2CI2 vypočítané C 75, 03, H 6,59, N 3,C9 %
e) Roztok hexametyldisilazídu sodného (31,3 ml, IM v tetrahydrofuráne, 31,3 mmol) sa počas 30 minút pri -75 °C prikvapká k miešanému roztoku 4-(S)-benzyl-3-{[5-(3-metyl-4fenyl)fenyl]pentanoyl}oxazolidín-2-ónu (13,39 g, 31,3 mmol) v bezvodom tetrahydrofuráne (100 ml). K vzniknutej zmesi sa po 1 hodine počas 20 minút prikvapká roztok terc.butylbromacetátu(4,95 ml, 33,5 mmol) v bezvodom tetrahydrofuráne (10 ml). Počas prídavku sa teplota udržuje pod -70 °C. Potom sa reakčná zmes 2 hodiny mieša pri tejto teplote, nechá zahriať na -50 °C a za rýchleho miešania sa k nej pridá 20% vodný chlorid amónny (150 ml). Vzniknutá zmes sa nechá zahriať na 10 °C a naleje do zmesi etylacetátu (400 ml) a vody (200 ml). Organická fáza sa oddelí, premyje vodou (3 x 250 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia
144 elučného gradientu pentan : éter 20 : 1 až 1 : 1. Získa sa terc.butyl-(3R)—[(4—(S)-4-benzyl-2-oxo-l,3-oxazolidín-3yl)karbonyl]-6-(3-metyl-4-fenyl)fenyl)hexanoát vo forme
bezfarebného oleja (10,4 g, 61 %) •
Rf 0,6 (pentan : éter, 1 : 1)
h (300 MHz, CDC13) 1,45 (9H, s), 1,58 (1H, m) , 1,74 (3H, m),
2,27 (3H, s), 2,51 (1H, dd, J = 5 a 18 Hz) , 2,65 » (2H, m), 2,80
(2H, m), 3,38 (1H, dd, J = 3 a 15 Hz) , 4,16 (2H, d, J = 5 Hz),
4,25 (1H, m), 4,68 (1H, m), 7,04 (1H, d, J = 8 Hz), 7,08 (1H,
s), 7,14 (1H, d, J = 8 Hz) , 7,35 (10H, komp( Lex) .
LRMS (termosprej) 1 n/z = 542 (MH+) , 560 (MNH4 + )
Nájdené: C 74,55, H 7,40, N 2, 44, C34H39NO5. 0,1 éter. 0,2
EtOAc vypočítané C 74,60, H 7,40, N 2, 47 % FTIR vmax (KBr disk)
2980, 2930, 1780, 1725, 1700, 138! 8, 13 50, i: 157, 7 68, 702 cm'1
f) 30% vodný peroxid vodíka (12,75 ml, 114 mmol) sa pri 0 °C prikvapká k roztoku terc.butyl-(3R)-[(4-(S)-4-benzyl-2oxo-1,3-oxazolidín-3-yl)karbonyl]-6-(3-metyl-4fenyl)fenyl)hexanoátu (10,3 g, 19,0 mmol) v zmesi tetrahydrofuránu a vody v pomere 3 : 1 (400 ml) . K vzniknutej zmesi sa v jednej dávke pridá monohydrát hydroxidu litného (1,595 g, 38,0 mmol). Reakčná zmes sa 2 hodiny mieša pri 0 °C a 1 hodinu pri 20 ’C, znovu ochladí na 0 °C a počas 15 minút sa k nej prikvapká siričitan sodný (15,56 g, 123,5 mmol) vo vode (80 ml). Výsledná zmes sa 2,5 hodiny rýchlo mieša pri 0 °C, hneď potom sa jej pH 2M kyselinou chlorovodíkovou nastaví na 6. Vzniknutá zmes sa skoncentruje na polovičný objem, okyslí 2M kyselinou chlorovodíkovou na pH 2 a extrahuje dichlórmetánom (400 ml a 2 x 200 ml) . Spojené extrakty sa vysušia síranom horečnatým a skoncentrujú za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu pentan : éter 15 : 1 až 1 : 4. Získa sa
145 terc.butyl-(3R)-3- (karboxy)-6-(3-metyl-4-fenyl)fenyl)hexanoát (7,05 g, 97 %) vo forme bezfarebného oleja.
Rf 0,5 (pentan : éter : kyselina octová, 30 : 70 : 1) h (300 MHz, CDCla) 1,45 (9H, s), 1,63 (1H, m), 1,77 (4H, m),
2,26 (3H, m), 2,42 (dd, J = 5 a 17 Hz), 2,65 (3H, m), 2,87 (1H, m), 7,06 (2H, m), 7,15 (1H, d, J = 8 Hz), 7,34 (5H, m). LRMS (termosprej) m/z = 400 (MNH/)
[]D = +12,9° (c=0,716, metanoi, 25 ’C)
FTIR vraax (film) 2980, 2930, 1730, 1705, 1485, 1368, 1157, 764, 702 cm“1
Nájdené: C 74,96, H 8,06. C24H30O4.0,1H2O vypočítané C 75,01, H
7,92 %
g) Hydrochlorid N-(dimetylamínopropyl)-N'-etylkarbodiimídu (3,50 g, 18,26 mmol) sa pod atmosférou dusíka pri 4 °C pridá k miešanej zmesi hydrochloridu (2S)-amíno-3,3dimetyl-N-[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]butanamídu (z preparatívneho postupu la) (6,78 g, 17,43 mmol s obsahom 1 mol. ekv. dioxánu), terc.butyl-(3R)-3-(karboxy)-6-(3-metyl-4fenyl)fenyl)hexanoátu (6,35 g, 16,6 mmol), hydrátu 1-hydroxy1,2,3-benzotriazolu (2,80 g, 20,75 mmol) a diizopropyletylamínu (5,9 ml, 34,03 mmol) v bezvodom dichlórmetáne (82 ml). Po 2 hodinách sa reakčná zmes nechá zahriať na teplotu miestnosti a po 17 hodinách pri teplote miestnosti naleje do etylacetátu (600 ml) . Etylacetátová zmes sa postupne premyje 5% kyselinou citrónovou (2 x 250 ml), nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným (2 x 250 ml) a vodným chloridom sodným (200 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v éteri a éterový roztok sa odparí. Získa sa terc.Butyl-(3R)-3-({[(1S)2,2-dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl]amino]karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-[3-metyl-(4146 fenyl)fenyl]hexanoát (10,35 g, 99 %) vo forme bezfarebnej peny.
Nájdené: C 73, 99, H 8,31, N 4,51, C39H52N2O5.0, 04EtOAc vypočítané C 74,38, H 8,34, N 4,43 %
Preparatívny postup 20
4-jód-l-(3-metoxyfenyl)-2-metylbenzén
a) Roztok 2-bróm-5-nitrotoluénu (40,0 g, 185 mmol) v 1,2dimetoxyetane (600 ml) sa pod atmosférou dusíka pri teplote miestnosti pridá k tetrakis(trifenylfosfín)paládiu(0) (9,77 g,
9,25 mmol). K vzniknutej zmesi sa pridá roztok 3metoxyfenylboronové kyseliny (31,5 g, 207 mmol) v etanole (150 ml) a potom 2M vodný uhličitan sodný (800 ml). Reakčná zmes sa za rýchleho miešania mechanickým miešadlom 18 hodín zahrieva k spätnému toku, potom ochladí a rozdelí medzi etylacetát a vodu. Organická fáza sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí chromatografiou na stĺpci silikagélu za použitia zmesi hexánu a etylacetátu najprv v pomere 98 : 2 a potom 95 : 5 ako elučného činidla. Získa sa 1-(3-metoxyfenyl)-2-metyl-4-nitrobenzén (40,55 g, 90 %) .
147 η (400 MHz, CDCla) 2,38 (3H, s), 3,85 (3H, s), 6,83 (1H, s),
6,88 (1H, d, J = 8 Hz), 6,96 (1H, d, J = 8 Hz), 7,38 (2H, m), 8,02 (1H, d, J = Hz), 8,14 (1H, s).
LRMS (termosprej) m/z = 261 (MNH4 +)
b) 1-(3-Metoxyfenyl)-2-metyl-4-nitrobenzén (23,4 g, 96 mmol) sa rozpustí v zmesi etanolu a etylacetátu v pomere 3 : 1 (470 ml). Vzniknutý roztok sa hydrogenuje 2 hodiny za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (2,3 g) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Reakčná zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel za premývania etylacetátom. Filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa 4-amíno-l-(3-metoxyfenyl)-2metylbenzén (20,8 g, 100 %) vo forme ružovohnedého oleja.
Rf 0,06 (hexan : etylacetát, 90 : 10) h (400 MHz, CDCla) 2,22 (3H, s), 3,65 (2H, br s), 3,84 (3H,
s), 6,59 (2H, m), 6,87 (3H, m), 7,04 (1H, d, J = 8 Hz), 7,28 (1H, m) .
c) Miešaný roztok 4-amíno-l-(3-metoxyfenyl)-2metylbenzénu (5,0 g, 23,4 mmol) a jódu (2,97 g, 25,8 mmol) v toluéne (120 ml) sa zahreje na 50 °C a pridá sa k nemu roztok izoamylnitritu (3,46 ml, 25,8 mmol) v toluéne (50 ml). Výsledná zmes sa 2 hodiny zahrieva na 90 °C, ochladí a za zníženého tlaku sa z nej odstráni toluén. Zvyšok sa rozpustí v dichlórmetáne. Dichlórmetanový roztok sa premyje nadbytkom 5% vodného disiričitanu sodného, aby sa odstránil jód. Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí opakovanou mžikovou chromatografiou, pričom prvý stĺpec sa eluuje gradientom hexan : etylacetát, počínajúc čistým hexanom; a druhý stĺpec sa eluuje hexanom. Získa sa 4-jód-l-(3-meto-xyfenyl)-2-metylbenzén vo forme svetlo oranžového oleja (5,63 g, 74 %).
Rf 0,49 (hexan : etylacetát, 90 : 10)
148
h (400 MHz, CDC13) 2,23 (3H, s) , 3,84 (3H, s), 6,81 (1H, s) ,
6,86 (1H, d, J = 8 Hz) , 6, 90 (1H, d, J = 8 Hz), 6,95 (1H, d, J
= 8 Hz), 7,32 (1H, t, J = 8 Hz) , 7,55 (1H, d, J = 8 Hz) , 7,47
(1Η, s) .
tívny postup 21 terc.Butyl-(3R)-3- ({ [(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-l— fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-(3'-metoxy2-metylbifén-4-yl)hexanoát
a) Spôsobom opísaným v preparátívnom postupe 3a sa terc.butyl-(3R)-3-({[ (1S)-2,2-dimetyl-l(benzyloxykarbonyl)propyl]amino)karbonyl) hex-5-enoát (2,085 g, 5,0 mmol) za katalýzy paládiom pri teplote spätného toku za použitia N-etylmorfolinu ako bázy, v acetonitrile, po dobu
14,5 hodiny nechá reagovať s 4-jód-l-(3-metoxyfenyl)-2-metyl149 benzénom (z preparatívneho postupu 20) (889 mg, 2,13 mmol).
Výsledná zmes sa spracuje a produkt sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexánu a etylacetátu ako elučného činidla. Získa sa prevažne terc.butyl-(3R,5E)-3({[(1S)-2,2-dimetyl-l-(benzyloxykarbonyl)propyl]amíno}karbonyl)-6-(3'-metoxy-2-metylbifén-4-yl)hex-5-enoát vo forme svetlo žltej živice (1,043 g, 80 %). Podlá XH NMR produkt tiež obsahuje dva alkénové izoméry, (5Z) a (4E). Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň b).
•H (400 MHz, CDC13) 0,95 (9H, s), 1,43 (9H, s), 2,26 (3H, s) ,
2, 36 (1H, m) , 2,45 (1H, dd, 3 a 17 Hz) , 2,55 (1H , dt, J = 14 a
7) , 2,68 (1H , dd, J = 9 a 17 Hz) , 2,77 (1H, m), 3, 80 (3H, s) ,
4, 50 (1H, d, J = 10 Hz), 4,97 (1H, d, J = 12 Hz) , 5,07 ' (1H , d,
J = 12 Hz), 6,16 (1H, d t, J = = 18 a 7 H z), 6,40 (2H, m) , 6, 85
(3H, m), 7,30 (9H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 614 (MH+)
b) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 19c sa terc.butyl-(3R,5E)-3-({[(lS)-2,2-dimety1-1(benzyloxykarbonyl)propyl]amino}karbonyl)-6-(3'-metoxy-2metylbifén-4-yl)-hex-5-enoát (1,040 g, 1,69 mmol) hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku. Získa sa terc.butyl(3R)—3—({[(lS)-2,2-dimetyl-l-(karboxy)propyl]amino}karbonyl)6-(3'-metoxy-2-metylbifén-4-yl)hexanoát (664 g, 75 %) vo forme bezfarebnej peny.
Rf 0,33 (hexan : ét er : kyselina octová , 50 : 50 : D
•H (400 MHz, Cl DC13) 1,02 (9H, s), 1,42 (9H, s), 1/47 (1H, m) ,
1, 66 (2H, m), 1,77 (1H, m), 2,25 (3H, s), 2,37 (1H, m) , 2,63
(3 H, m) , 3,83 (3H, s) , 4,48 (1H, d, J = 10 Hz), 6,43 (1H / br
d) , 6,87 (3H, m) , 7,03 (2H, m), 7,13 (1H, d, J = 8 1 Hz) , 7,28
(1H, m) .
LRMS (termosprej) m/z = 526 (MH+)
150
c) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 19d sa terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-(karboxy)propyl]amino]karbonyl)-6-(3'-metoxy-2-metylbifén-4-yl)hexanoát (660 mg, 1,26 mmol) nechá reagovať s (1S)-2-metoxy-lfenyletylamínom (190 mg, 1,260 mmol). Po vyššie opísanom spracovaní a mžikovej chromatografii za použitia zmesi hexanu a etylacetátu v pomere 3 : 1 ako elučného činidla. Získa sa terc.butyl - (3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl] amino}karbonyl)propyl]amino]karbonyl)-6-(3'-metoxy2-metylbifén-4-yl)hexanoát (672 mg, 81 %) vo forme bezfarebnej peny.
Rf 0,16 (hexan : etylacetát, 4 : 1)
.h (400 MHz, CDCI3) 1, 02 (9H, s), 1,40 (9H, s a 1H, m,
prekrývanie), 1,55 (2H, m) , 1,68 (1H, m) , 2,23 (3H, s), 2,33
(1H, m), 2,56 (4H, m), 3,33 (3H, m), 3,82 (3H, s), 4,29 (1H,
d, J = 9 Hz) , 5,13 (1H, dt, J = 8 a 5 Hz) 1 , 6,35 (1H, br d),
6,45 (1H, br d), 6,86 ( :3H, m), 6,96 (1H, d, J = 8 Hz), 7,00
(1H, s), 7,10 (1H, d, J = 8 Hz), 7,26 (6H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 659 (MH+)
Nájdené: C 72,15, H 8,21, N 4,17, C40H54N2O6.1/2H2O vypočítané C 71,93, H 8,30, N 4,19 %
Preparatívny postup 22 (2R)-5-{[4-(4-Kyanofenyl)-3-metyl]fenyl}-2-[(4S)2,2,dimetyl-5-oxo-1,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-1({[(ÍR)-1-fenyletyl)amino]karbonyl)propyl]pentanamíd
151
a) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 15a sa (2R)2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2dimetyl-1-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-pent-4enamíd (z preparatívneho postupu 14) (430 mg, 1,0 mmol) za katalýzy paládiom pri teplote spätného toku v acetónitrile po dobu 16 hodín nechá reagovať s 1-(4-kyanofenyl)-4-jód-2metylbenzénom (z preparatívneho postupu 23) (479 mg, 1,5 mmol). Reakčná zmes sa ochladí a rozdelí medzi etylacetát (3 x 30 ml) a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný (30 ml) . Spojené organické roztoky sa vysušia síranom sodným a skoncentrujú za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetánu a metanolu v pomere 97,5 : 2,5 ako elučného činidla. Získa sa prevažne (2R,4E)-5-{ [4-(4-kyanofenyl)-3-metyl]fenyl}-2-[(4 S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-pent-4-enamíd vo forme žltohnedej peny (403 mg, 65 %) . Podľa 1H NMR produkt
152 tiež obsahuje alkénové izoméry. Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň b).
Rf 0,41 (dichlórmetán : metanol, 95 : 5) δΗ (400 MHz, CDC13) (pre (4E) izomér). 1,00 (9H, s), 1,46 (3H, d, J = 7,5 Hz), 1,54 (3H, s), 1,59 (3H, s), 2,20 (3H, s), 2,70 (1H, m), 2,81 (2H, m), 4,20 (1H, d, J = 9 Hz), 4,60 (1H, d, J = 4,5 Hz), 5,04 (1H, pentet, J = 7,5 Hz), 5,82 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,62 (1H, dt, 16 a 7 Hz), 6,50 (1H, d, J = 16 Hz), 6,58 (1H, d, J = 9 Hz), 7,10 (1H, d, J = 8 Hz), 7,15-7,30 (7H, m),
7,38 (2H, d, J = 8 Hz), 7,70 (2H, d, J = 8 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 564 (MH+ - acetón), 547
b) Roztok (2R,4E)-5-{[4-(4-kyanofenyl)-3-metyl]-fenyl}-2[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2dimetyl-1-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-pent-4enamídu (403 mg, 0,65 mmol) v etanole (70 ml) sa 5,5 hodiny hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (40 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Vzniknutá zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa (2R)-5-{[4-(4-kyanofenyl)-3metyl]fenyl}-2-[(4 S)-2,2,dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]pentanamíd (384 mg, 61 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky, ktorá sa použije pri postupe podľa príkladu 17 bez prečistenia.
δΗ (400 MHz, CDCI3) 1,00 (9H, s), 1,48 (3H, d, J = 7 Hz), 1,50 (3H, s), 1,55 (3H, s), 1,62 (2H, m), 1,68 (2H, m), 2,20 (3H,
s), 2,60 (3H, m), 4,18 (1H, d, J = 9,5 Hz), 4,45 (1H, d, J = 6
Hz), 5,08 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,86 (1H, d, J = 7 Hz), 6,50 (1H, d, J = 9,5 Hz), 7,00-7,10 (3H, m), 7,15-7,30 (5H, m),
7,40 (2H, d, J = 7,5 Hz), 7,70 (2H, d, J = 8,5 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 624 (MH+), 641 (MNH4 +)
153
Preparatívny postup
1-(4-Kyanofenyl)-4-jód-2-metylbenzén
a) Zmes 2-bróm-5-nitrotoluénu (7,05 g, 32,67 mmol), 4kyanofenylborónovej kyseliny (Tet. Lett. 1993, 34, 8237) (6,0 g, 40,83 mmol), fluoridu cesného (11,02 g, 72, 53 mmol) a tri(2-metylfenyl)fosfínu (1,0 g, 3,27 mmol) v 1,2dimetoxyetane (240 ml) sa 40 minút mieša pod atmosférou dusíka pri teplote miestnosti, hneď potom sa k nej pridá tris(dibenzylidenacetón)dipaládium (1,5 g, 1,63 mmol). Reakčná zmes sa 10 minút mieša pri teplote miestnosti, 4 hodiny zahrieva na 80 °C, ochladí a rozdelí medzi etylacetát a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný. Organická fáza sa oddelí, premyje vodou, vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa surový 1-(4-kyanofenyl)-2-metyl-4nitrobenzén (9,78 g), ktorý sa použije bez ďalšieho prečistenia.
Rf 0,89 (dichlórmetan) δΗ (300 MHz, CDC13) 2,35 (3H, s), 7,35 (1H, d, J = 8 Hz), 7,45 (2H, d, J = 8 Hz), 7,68 (2H, d, J = 8 Hz), 8,10 (1H, d, J = 8 Hz), 8,18 (1H, s).
154
b) 1-(4-Kyanofenyl)-2-metyl-4-nitrobenzén (9,7 g, 40,76 mmol) sa rozpustí v zmesi metanolu a dichlórmetánu v pomere 1 : 1 (400 ml) . Vzniknutý roztok sa 18 hodín hydrogenuje za prítomnosti palédia na uhlíku (970 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Reakčná zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexan : etylacetát 20 : 1 až 1 : 1. Získa sa 4amíno-1-(4-kyanofenyl)-2-metylbenzén (2,5 g, 30 %) vo forme hnedého oleja.
Rf 0,20 (hexan : etylacetát, 3 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 2,20 (3H, s), 3,75 (2H, br s), 6,60 (2H, m), 7,00 (1H, d, J = 8 Hz), 7,40 (2H, d, J = 8 Hz), 7,66 (2H, d, J = 8 Hz) .
LRMS (termosprej) m/z = 226 (MNH4 +)
c) Suspenzia 4-amíno-l-(4-kyanofenyl)-2-metylbenzénu (250 mg, 1,2 mmol) v koncentrovanej kyseline chlorovodíkovej (1,3 ml) a vode (1,6 ml) sa počas 10 minút pri 0 °C zmiesi s roztokom dusitanu sodného (183 mg, 2,65 mmol) vo vode (1 ml). Výsledná zmes sa 20 minút mieša, hneď potom sa k nej počas 10 minút pridá roztok jodidu draselného (840 mg, 5,06 mmol) vo vode (2 ml) . Vzniknutá zmes sa 2 hodiny zahrieva na 90 °C, ochladí a extrahuje dichlórmetánom (3 x 30 ml). Spojené organické extrakty sa premyjú 5% vodným disiričitanom sodným (4 x 30 ml), aby sa odstránil jód. Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexan : etylacetát 20 : 1 až 10 : 1. Získa sa l-(4kyanofenyl)-4-jód-2-metylbenzén vo forme bielej pevnej látky (263 mg, 69 %).
Rf 0,62 (hexan : etyl acetát, 4 : 1)
155 δΗ (300 MHz, CDC13) 2,20 (3Η, s), 6,92(1H, d, J = 8 Hz), 7,40 (2H, d, J = 8 Hz), 7,60 (1H, d, J = 8 Hz), 7,68 (1H, s), 7,74 (2H, d, J = 8 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 319 (MH+)
Preparatívny postup 24 (2R)-5-{[4-(3-Kyanofenyl)-3-metyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]pentanamíd
a) Octan paladnatý (12,2 mg, 0,050 mmol) sa pod atmosférou dusíka pridá k miešanému roztoku (2R)-2-[ (4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({ [ (ÍR) -1-fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]pent-4-enamídu (z preparatívneho postupu 14) (430 mg, 1,0 mmol), l—(3— kyanofenyl)-4-jód-2-metylbenzénu (z preparatívneho postupu 25) (457 mg, 1,50 mmol), tri-(2-metylfenyl) fosfínu (30 mg, 0,10
156 mmol) a N-etylmorfolínu (190 1, 1,5 mmol) v bezvodom acetonitrile (3 ml). Reakčná zmes sa premyje dusíkom, 14 hodín zahrieva k spätnému toku, ochladí a rozpustí v etylacetáte (100 ml). Etylacetátový roztok sa premyje vodou (100 ml), 0,5M vodným dihydrogénfosforečnanom sodným (50 ml) a nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným (50 ml). Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexán : etylacetátu 3 : 1 až 1 : 1. Získa sa prevažne (2R,4E)-5-{[4-(3-kyanofenyl)-3-metyl]fenyl}-2[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2dimetyl-1-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]pent-4enamíd vo forme žltohnedej peny (385 mg, 62 %) . Podľa TH NMR produkt tiež obsahuje alkénové izoméry. Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň b).
Rf 0,27 (dichlórmetán : etyl acetát, 10 : 1) δΗ (400 MHz, CDCla) (pre (4E) izomér). 1,01 (9H, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 1,55 (3H, s), 1,60 (3H, s), 2,20 (3H, s), 2,70
(IH, m) , 2,82 (2H, m), 4,18 (IH, d, J = 8 ,5 Hz) , 4, 58 (IH, d,
J = 5 Hz), 5,04 (IH, pentet, J = 7 Hz), 5, 84 (IH, d, J = 7
Hz) , 6,16 (IH, dt, 16 a 7 Hz), 6,50 (IH, d, J = 16 Hz), 6,58
(IH, d, J = 8,5 Hz), 7,05 (IH, d, J = 8 Hz) , 7,10 -7,40 (8H,
komplex), 7,54 (2H, m), 7,62 (IH, m).
LRMS (termosprej) m/z = 639 (MNH4 +)
Nájdené: C 72,88, H 7,05, N 6,63, C38H43N3O5.0,25H2O vypočítané C 72,88, H 7,00, N 6,71 %
b) Roztok (2R,4E)-5-{[4-(3-kyanofenyl)-3-metyl]-fenyl}-2[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S) -2,2dimetyl-1-({[(ÍR)-1—fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]-pent-4enamídu (359 mg, 0,58 mmol) v etanole (35 ml) sa 6 hodín hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (35 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Výsledná zmes sa prefiltruje cez
157 pomocnú filtračnú latku Arbocel a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa azeotropicky odparí s etylacetátom a potom s dietyléterom. Olejovitý zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexán : etylacetát 5 : 1 až 1 : 1, potom trituráciou s pentanom a vykryštalizuje. Získa sa (2R)-5-{[4-(3-kyanofenyl)-3metyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2-dimetyľ5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N[ (1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]pentanamíd bielej pevnej látky, ktorá sa príkladu 19.
Rf 0,40 (hexán : etyl acetát, 1 : δΗ (400 MHz, CDC13) 1,02 (9H, s), (3H, s), 1,58 (3H, s), 1,64 (2H, s), 2,60 (3H, m), 4,20 (IH, d, J
7,5 Hz), 5,08 (IH, pentet, J = 7
6.50 (IH, d, J = 9,5 Hz), 6,987.50 (2H, m), 7,55 (IH, s), 7,60 LRMS (termosprej) m/z = 641 (MNH/ Nájdené: C 72, 99, H 7,36, N 6,75, H 7,27, N 6,74 % (139 mg, 38 %) vo forme použije pri postupe podlá
1,52 (3H, d, J = 7 Hz), 1,55
m) , 1,90 (2H, m), 2,20 (3H,
= 9, .5 Hz) , 4,46 (IH, d, J =
Hz) , 5,86 (IH, d, J = 7 Hz) ,
7,08 (3H, m), 7,20 (5H, m) ,
(IH, m) .
)
C38H4sN30s vypočítané C 73,17,
Preparatívny postup
158
a) Roztok 2-bróm-5-nitrotoluénu (8,82 g, 40,83 mmol) v
1,2-dimetoxyetane (150 ml) sa pod atmosférou dusika pri teplote miestnosti pridá k roztoku tetrakis(trifenylfosfín)paládia(0) (2,35 g, 2,04 mmol) v 1,2dimetoxyetane (100 ml). K vzniknutej zmesi sa pridá roztok 3kyanofenylborónovej kyseliny (J. Med. Chem., 1997, 40, 4208 (9,0 g, 61,25 mmol) v etanole (45 ml). Výsledná zmes sa 10 minút mieša, hneď potom sa k nej pridá 2M vodný uhličitan sodný (234 ml) . Reakčná zmes sa 18 hodín zahrieva k spätnému toku, ochladí a rozdelí medzi etylacetát a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný. Organická fáza sa premyje vodou, vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa trituruje s dietyléterom. Získa sa 1-(3-kyanofenyl)-
2-metyl -4-nitrobenzén (8,48 g, 87 %) vo forme hnedej pevnej
látky.
Rf 0,74 (hexan : etyl acetát, 1 : D
δΗ (300 MHz, CDCI3) 2,35 (3H, s), 7, 38 (1H, d , J = 8 Hz) ,
7,52-7, 68 (3H, m), 7, 75 (1H, d, J = 8 Hz) , 8,15 (1H, d, J = 8
Hz), 8,20 (1H, s).
LRMS (termosprej) m/z = 239 (MH+)
b) 1-(3-Kyanofenyl)-2-metyl-4-nitrobenzén (3,0 g, 12,61 mmol) a dihydrát chloridu cínatého sa suspendujú v etanole (30 ml) . Vzniknutá suspenzia sa 30 minút zahrieva na 70 °C, a neutralizuje prídavkom Vzniknutá zmes sa ochladí, naleje hydrogénuhličitanu dichlórmetánom (3 na lad sodného. x 50 ml).
extrahuje
Spojené organické vrstvy sa vysušia síranom sodným a skoncentrujú za zníženého tlaku. Získa sa 4-amíno-l-(3-kyanofenyl)-2-metylbenzén (1,8 g, 69 %) vo forme žltého oleja.
Rf 0,36 (hexan : etyl acetát, 2 : 1) δΗ (300 MHz, CDC13) 2,20 (3H, s), 3,75 (2H, br s), 6,60 (2H, m), 7,00 (1H, d, J = 8 Hz), 7,42-7,60 (4H, m).
159
c) Suspenzia 4-amíno-l-(3-kyanofenyl)-2-metylbenzénu (2,5 g, 12,0 mmol) v koncentrovanej kyseline chlorovodíkovej (13 ml) a vode (16 ml) sa počas 10 minút pri 0 °C zmiesi s roztokom dusitanu sodného (1,83 g, 26,5 mmol) vo vode (10 ml). Vzniknutá zmes sa 20 minút mieša, hneď potom sa k nej počas 10 minút pridá jodid draselný (8,40 g, 50,6 mmol) vo vode (20 ml). Reakčná zmes sa 2 hodiny zahrieva na 80 °C, potom ochladí a extrahuje dichlórmetánom. Spojené organické extrakty sa premyjú nadbytkom 5% vodného disiričitanu sodného, aby sa odstránil jód. Organický roztok sa vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexán : etylacetát 20 : 1 až 10 : 1. Získa sa 1-(3-kyanofenyl)-4-jód2-metylbenzén vo forme bielej pevnej látky (1,105 g, 29 %).
Rf 0,67 (hexán : etyl acetát, 4 : 1) δΗ (300 MHz, CDC13) 2,20 (3H, s), 6,90 (1H, d, (J = 8 Hz),
7,45-7,75 (6H, komplex).
LRMS (APCI) m/z = 319 (MH+)
Preparatívny postup 26 (2R) -5-{[4-(3-Karbamoylfenyl)-3-metyl]fenyl]-2-[(4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino}karbonyl)propyl]pentanamíd
160
CONH,
a) Octan paladnatý (10,4 mg, 0,042 mmol) sa pod atmosférou dusíka pridá k miešanému roztoku (2R)—2—[(4S)—2,2— dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-dimetyl-l({[(ÍR)-1-fenyletyl]amino]karbonyl)propyl]pent-4-enamídu (z preparatívneho postupu 14) (366 mg, 0,85 mmol), l—(3— karbamoylfenyl)-4-jód-2-metylbenzénu (z preparatívneho postupu 27) (300 mg, 0,89 mmol), tri-(2-metylfenyl) fosfínu (27 mg,
0,09 mmol) a N-etylmorfolínu (115 1, 0,89 mmol) v bezvodom acetonitrile (3 ml). Reakčná zmes sa premyje dusíkom, 3 hodiny zahrieva k spätnému toku, pridá sa k nej ďalší octan paladnatý (10,4 mg, 0,042 mmol), v refluxovaní sa pokračuje 60 minút. Ďalšie dávky octanu paladnatého (10,4 mg, 0,042 mmol) sa pridávajú v 60 minútových intervaloch po dobu refluxu 8 hodín. Potom sa reakčná zmes ochladí a zriedi acetónitrilom (10 ml). Acetónitrilová zmes sa za premývania etylacetátom (100 ml) prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel. Filtrát sa premyje 0,5% vodným hydrogénuhličitanom sodným (50 ml), vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu dichlórmetán : etylacetátu 10 : 1 až 1 : 1. Získa sa (2R,4E)-5-{[4-(3-karbamoylfenyl)-3-metyl] fenyl}-2-[(4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N-[(1S)-2,2-di-metyl-l({[(ÍR)-l-fenyletyl]amínc}karbonyl)propyl]pent-4-enamíd vo forme žltej peny (175 mg, 32 %) .
Rf 0,20 (dichlórmetán : etyl acetát, 1 : 1)
161 δΗ (400 MHz, CDC13) 1,02 (9Η, s), 1,50 (3H, d, J = 7 Hz), 1,54 (3H, s), 1,60 (3H, s), 2,20 (3H, s), 2,70 (1H, m), 2,78 (1H, m), 2,78 (1H, m), 2,88 (1H, m), 4,22 (1H, d, J = 8,5 Hz), 4,60 (1H, d, J = 5,5 Hz), 5,04 (1H, pentet, J = 7 Hz), 5,94 (2H, br s), 6,00 (1H, d, J = 7 Hz), 6,12 (1H, dt, J = 16 a 7 Hz), 6,48 (1H, d, J = 16 Hz), 6,82 (1H, d, J = 8,5 Hz), 7,08 (1H, d, J =
7,5 Hz), 7,14 (1H, m), 7,18-7,36 (5H, komplex), 7,40-7,52 (3H,
m), 7,60 (1H, s), 7,80 (1H, d, J = 7,5 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 657 (MNH4 +)
Nájdené: C 70, 59, H 7,16, N 6,42, C38H45N3O6.0,2EtOAc vypočítané C 70, 89, H 7,14, N 6,39 %
b) Roztok (2R,4E)-5-{[4-(3-karbamoylfenyl)-3metyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N[(1S)-2,2-dimetyl-l-({[(ÍR)-1-fenyletyl]amíno)karbonyl)propyl]pent-4-enamídu (160 mg, 0,25 mmol) v etanole (50 ml) sa 8 hodín hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (25 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Výsledná zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa azeotropicky odparí s etylacetátom a potom s dietyléterom. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexan : etylacetát 5 : 1 až 1 : 3 a potom azeotropickou destiláciou s dietyléterom. Získa sa (2R)-5-{[4-(3-karbamoylfenyl)-3metyl]fenyl}-2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-N[ (1S)-2,2-dimetyl-l-({[(1R)-1fenyletyl]amíno}karbonyl)propyl]pentanamíd (82 mg, 51 %) vo forme bielej pevnej látky, ktorá sa použije pri postupe podlá príkladu 20.
Rf 0,17 (hexan : etyl acetát, 1 : 3) δΗ (400 MHz, DMSO) 0,92 (9H, s), 1,30 (3H, d, J = 7 Hz), 1,401,60 (9H, komplex), 1,78 (1H, m), 2,15 (3H, s), 2,40-2,60 (2H, m), 2,98 (1H, m), 4,38 (1H, d, J = 9 Hz), 4,46 (1H, d, J = 9
162
Hz) , 4,92 (1H, pentet, J = 7 Hz), 6,98 (1H, d, J = 7,5 Hz) ,
7,02 (2H, m), 7,12 (3H, m), 7,20 (2H, m), 7,30 i (1H, br s) ,
7,40 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,50 (1H, t, J = 7,5 Hz) , 7,80 (3H,
m) , 8 ,00 1H, br s), 8,40 (1H, d, J > = 7 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 664 (MNa+)
Nájdené: C 70,26, H 7,59, N 6,36, C38H47N3O6.0,25EtOAc vypočítané C 70,56, H 7,44, N 6,33 %
Preparativny postup 27
1-(3-Karbamoylfenyl)-4-jód-2-metylbenzén
Hydroxid draselný (1,21 g, 21,6 mmol) sa pridá k roztoku 1-(3-kyanofenyl)-4-jód-2-metylbenzénu (1,27 g, 4,0 mmol) v etanole (50 ml) . Vzniknutá zmes sa 16 hodín zahrieva k spätnému toku, ochladí a zriedi vodou (100 ml). Vodná zmes sa extrahuje etylacetátom (3 x 50 ml). Spojené organické extrakty sa vysušia síranom sodným a skoncentrujú za zníženého tlaku, čím sa získa surový produkt (1,08 g). Tento surový produkt (540 mg) sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu dichlórmetán : nasýtený metanolický amoniak 100 : 2,5 až dichlórmetán : etylacetát 1 : 1 až dichlórmetán : etylacetát : kyselina octová 100 : 100 : 4 a potom azeotropicky odparí s etanolom, etylacetátom a dietyléterom. Získa sa 1-(3-karbamoylfenyl)-4-jód-2-metylbenzén (310 mg, 46 %) vo forme žlutohnedej pevnej látky s teplotou tavenia 138 až 141 ’C.
163
Rf 0,40 (dichlórmetán : etylacetát : kyselina octová, 50 : 50
: 2,5)
δΗ (400 MHz, DMSO) 2, 18 (3H, s), 7, 00 (1H, d, J = 8 Hz) , 7,38
(1H, br s), 7,48 (2H , m), 7,62 (1H , d, J = 8 Hz), 7,72 (1H,
s), 7,80 1H, s), 7,86 (1H, d, J = 8 Hz), 8,00 (1H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 355 (MNH4 +)
P r e p a r a t í v n y postu p 28
terc.Butyl-(3R)-3-[({({[(IS)-2-metoxy-l-fenyletyl]amíno}karbonyl)-[(IS)-2-metyl]-1-propyl}amino)karbonyl]-6-[3-metyl(4-fenyl)fenyl]hexanoát ο ο
164
a) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 19a sa Nterc.butoxykarbonyl-L-valín (868 mg, 4,0 mmol) nechá 72 hodín reagovať s (1S)-2-metoxy-l-fenyletylamínom (604 mg, 4,0 mmol). Reakčná zmes sa skoncentruje za zníženého tlaku a rozdelí medzi etylacetát (200 ml) a vodu (200 ml). Organická vrstva sa premyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (100 ml), nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným (100 ml) , vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa trituruje s diizopropyléterom, suspenzia sa prefiltruje a produkt sa vysuší. Získa sa (2S)-terc.(butoxykarbonyl)amíno-N[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]-3-metylbutanamíd (1,11 g, 79 %) vo forme bezfarebnej pevnej látky s teplotou tavenia 112 až 113 °C.
Rf 0,71 (dichlórmetan : metanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,96 (6H, d, J = 7 Hz), 1,45 (9H, s), 2,18 (1H, m), 3,35 (3H, s), 3,64 (2H, m), 3,92 (1H, m), 5,00 (1H, br s), 5,18 (1H, m), 6,60 (1H, m), 7,32 (5H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 351 (MH+)
b) (2S)-terc.(Butoxykarbonyl)amíno-N-[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl] -3-metylbutanamíd (1,11 g, 3,17 g) sa rozpustí v zmesi bezvodého dichlórmetánu (15 ml) a dioxánu (15 ml) . Vzniknutý roztok sa ochladí na 4 °C a za miešania sa ním vedie plynný chlórovodík, dokiaľ nevznikne nasýtený roztok. Tento roztok sa 4 hodiny mieša pri 4 °C a potom skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa azeotropicky odparí s dichlórmetánom. Získa sa hydrochlorid (2S)-amíno-N-[ (1S)-2metoxy-l-fenyletyl]-3-metylbutanamídu (948 mg, 104 %) vo forme svetlo žltej peny.
δΗ (400 MHz, CDC13) 0,95 (3H, d, J = 7,5 Hz), 1,00 (3H, d, J =
7,5 Hz), 2,20 (1H, m), 3,15 (3H, s), 3,56 (1H, m), 3,66 (1H,
165
m), 4,02 (1H, m), 5,10 (1H, m), 7,20-7,35 (3H, m), 7,40 (2H, d, J = 8 Hz), 7,90 (3H, br s), 8,18 (1H, d, J = 7,5 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 251 (MH+)
c) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 2 sa (2R)-2[2-(terc.butoxy)-2-oxoetyl]pent-4-énová kyselina (646 mg, 3,02 mmol) nechá 1 hodinu pri 4 °C a potom 18 hodín pri 20 °C reagovať s hydrochloridom (2S)-amíno-N-[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl]-3-metylbutanamídu (zo stupňa b) (908 mg, 3,17 mmol). Výsledná zmes sa odparí za zníženého tlaku a rozdelí medzi etylacetát (100 ml) a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný (100 ml) . Vrstvy sa oddelia a vodná vrstva sa reextrahuje etylacetátom (100 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušia síranom horečnatým a skoncentrujú za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetánu a metanolu v pomere 98 : 2 ako elučného činidla. Získa sa terc.butyl-(3R)-3-({[({[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl] amino } karbonyl) -(1S)-2-metyl-lpropyl]amino)karbonyl)hex-5-enoát (1,08 g, 80 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia 155 až 157 °C.
Rf 0,36 (dichlórmetan : metanol, 95 : 5)
δΗ (4 00 MHz, CDC13) 0,94 (3H, d, J = 7 Hz) , 0, 97 (3H, d, J = 7
Hz ) , 1,40 (9H, s), 2,15 (2H, m), 2,35 (2H, m), 2,65 (2H, m),
3, 15 (3H, s), 3,65 (2H, d, J = 5 Hz) , 4,26 (1H, t, J = 7,5
Hz ), 4,96 (1H, d, J = 9 Hz), 5,00 (1H, d, J = 18 Hz), 5,15
166 (1H, dt, J = 5 a 7 Hz), 5,66 (1H, m), 6,26 (1H, d, J = 7,5
Hz), 6,55 (1H, d, J = 7 Hz), 7,30 (5H, m).
LRMS (termosprej) m/z = 447 (MH+)
d) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 15a sa terc.butyl-(3R)-3-({[({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amíno}karbonyl)-(1S)-2-metyl-l-propyl]amino)karbonyl)hex-5-enoát (zo stupňa c) (1,08 g, 2,42 mmol) nechá za katalýzy paládiom pri teplote spätného toku v acetónitrile 18 hodín reagovať s 4jód-2-metyl-l-fenylbenzénom (z preparatívneho postupu 29) (1,07 g, 3,63 mmol). Reakčná zmes sa ochladí a zriedi etylacetátom (200 ml) . Etylacetátová zmes sa premyje postupne 5% vodnou kyselinou citrónovou (50 ml) , nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným (50 ml) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml), vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu dichlórmetán : etylacetát 30 : 1 až 3 : 1. Získa sa terc.butyl-(3R,5E)-3(([({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)-(1S)-2-metyl1-propyl]amino}karbonyl)-6-[3-metyl-(4-fenyl)-fenyl]hex-5enoát vo forme svetlo hnedej peny (980 mg, 66 %) .
Rf 0,35 (dichlórmetán : etylacetát, 4 : 1)
δΗ (400 MHz, CDCI3) 0, 96 (3H, d, J = 7 Hz), 0,98 (3H, d, J = 7
Hz), 1,40 (9H, s), 2,18 (IH, m), 2,22 (3H, s), 2,36 (IH, m),
2,40-2,58 (2H, m), 2,66 (IH, m), 2,75 (IH, m), 3,35 (3H, s),
3,62 (2H, d, J = 4,5 Hz) , 4,30 (IH, t, J = 7,5 Hz) , 5,12 (IH,
dt, J = 4,5 a 7 Hz), 6, 10 (IH, m), 6 ,36 (IH, d, J = 7 Hz),
6,40 (IH, d, J = 16 Hz), 6,55 (IH, d, J = 7,5 Hz) , 7,10 (2H,
m), 7,20-7,38 (9H, komplex), 7,40 (2H, m).
Nájdené: C 74,43, H 7,85, N 4,57, C38H48N2O5 vypočítané C 74,48, H 7,90, N 4,57 %
e) Roztok terc.butyl-(3R,5E)-3-({[({[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl] amino}karbonyl)-(1S)-2-metyl-l-propyl]amino}karbonyl)-6-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]hex-5-enoátu (zo stupňa d) (930 mg, 1,51 mmol) v etanole (50 ml) sa 17 hodín hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (75 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Reakčná zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu pentan : etylacetát 10 : 1 až 2 : 1 a
167 trituráciou s dietyléterom. Získa sa terc.butyl-(3R)-3(([({[ (1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl) -(1S)-2-metyl1-propyl]amino]karbonyl)-6-[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]hexanoát (748 mg, 81 %) vo forme bezfarebnej peny, ktorá sa použije pri postupe podlá príkladu 21.
Rf 0,35 (pentan : etylacetát, 2 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 0,95 (3H, d, J = 7 Hz) , 0,98 (3H, d, J = 7
Hz), 1,40 (9H, s), 1,42 (1H, m) , 1, 60 (2H, m) , 1,70 (1H, m) ,
2,18 (1H, m) , 2,22 (3H, s) , 2, 38 (1H, m) 1, 2,45-2,66 (4H,
komplex), 3,32 (3H, s), 3,60 (2H, d, J = 4,5 Hz), 4,28 (1H, t,
J = 7,5 Hz), 5,15 (1H, dt r J = 4,5 a 7 Hz) , 6,30 (1H, d, J =
7,5 Hz) , 6,55 (1H, d, J - 7 Hz) , 6,98 (1H, d, J = 8 Hz), 7,00
(1H, s), 7,10 (1H, d, J = 8 Hz), 7,20-7,36 (8H, komplex), 7,40
(2H, m).
Nájdené: C 74,39, H 7,24 1, N 4,59, C38H50N2O5 vypočítané C 74 ,32,
H 8,27, N 4,61 %
P r e p a r a t í vny postup 29
4-jód-2-metyl-l-fenylbenzén
a) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 25a sa 2bróm-5-nitrotoluén (15 g, 69,4 mmol) nechá 16 hodín za použitia paládia ako katalyzátora a 2M vodného uhličitanu sodného ako bázy pri teplote spätného toku v dimetoxyetane
168 reagovať s fenylboronovou kyselinou. Reakčná zmes sa ochladí a oddelená organická vrstva sa zriedi dietyléterom. Dietyléterová zmes sa premyje vodou (dvakrát), vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi hexánu a etylacetátu v pomere 95 : 5 ako elučného činidla. Získa sa 2metyl-4-nitro-l-fenylbenzén vo forme žltej pevnej látky (12,7 g, 86 %).
Rf 0,33 (hexan : etylacetát, 95 : 5) δΗ (300 MHz, CDC13) 2,40 (3H, s), 7,20-7, 50 (6H, komplex),
8,10 (1H, d, J = 8 Hz), 8,15 (1H, s).
b) 2-Metyl-4-nitro-l-fenylbenzén (12,7 g, 60 mmol) sa rozpustí v etanole (260 ml) a 2 hodiny hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (1,27 g) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Reakčná zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel za premývania etylacetátom. Filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Získa sa 4-amíno-2-metyl-lfenylbenzén (10,49 g, 95 %) vo forme bledo ružovo hnedého oleja.
δΗ (400 MHz, CDCI3) 2,20 (3H, s), 3,60 (2H, br s), 6,60 (2H, m), 7,05 (1H, d, J = 8 Hz), 7,30 (3H, m), 7,40 (2H, m).
c) Miešaný roztok 4-amíno-2-metyl-l-fenylbenzén (10,49 g, 57,2 mmol) v dijódmetane (100 ml) sa počas 5 minút zmiesi s izoamylnitritom (27 ml, 200,2 mmol). Reakčná zmes sa 45 minút zahrieva na 75 °C, potom 1 hodinu na 65 °C, ochladí a skoncentruje za zníženého tlaku (95 °C/4000 Pa) . Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia hexánu ako elučného činidla. Získa sa 4-jód-2-metyl-l-fenylbenzén (11,6 g, 66 %) vo forme oleja.
Rf 0,33 (hexan)
169 δΗ (400 MHz, DMSO-de) 2,20 (3H, s), 6,98 (1H, d, J = 8 Hz) ,
7,30 (2H, m), 7,35 (1H, m), 7,45 (2H, m), 7,60 (1H, d, J = 8 Hz), 7,70 (1H, s).
Preparatívny postup 30 terc.Butyl-(3R)-3-({[({[(1S)-2-metoxy-l-fenyletyl]amino}karbonyl)-(1S)-2-fenyletyl]amino)karbonyl)-6-[3-metyl-(4fenyl)fenyl]hexanoát o
170
a) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 19a sa Nterc.butoxykarbonyl-L-fenylalanín (1,06 mg, 4,0 mmol) nechá 72 hodín reagovať s (1S)-2-metoxy-l-fenyletylamínom (604 mg, 4,0 mmol). Reakčná zmes sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa rozdelí medzi etylacetát (200 ml) a vodu (200 ml) . Organická vrstva sa premyje 5% kyselinou citrónovou (100 ml), nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným (100 ml), vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Produkt sa trituruje s diizopropyléterom, odfiltruje a vysuší. Získa sa (2S)-terc.(butoxykarbonyl)-amíno-N-[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl]-3-fenylpropanamíd (1,28 g, 81 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia 133 až 134 °C.
Rf 0,76 (dichlórmetán : metanol : koncentrovaný vodný amoniak, 90 : 10 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,40 (9H, s), 3,02 (1H, dd, J = 7 a 13
Hz), 3,16 (1H, dd, J = 6 a 13 Hz), 3,22 (3H, s), 3,40 (1H, m), 3,56 (1H, dd, J = 4,5 a 10 Hz), 4,38 (1H, m), 5,05 (2H, m), 6,45 (1H, d, J = 8 Hz), 7,18-7,36 (10H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 399 (MH+)
b) (2S)-terc.(Butoxykarbonyl)amíno-N-[(1S)-2-metoxy-lfenyletyl]-3-fenylpropanamíd (1,28 g, 3,2 mmol) sa rozpustí v zmesi bezvodého dichlórmetánu (15 ml) a dioxanu (15 ml) . Vzniknutý roztok sa ochladí na 4 °C a za miešania sa ním vedie plynný chlorovodík, dokial nevznikne nasýtený roztok. Tento roztok sa 4 hodiny mieša pri 4 °C a potom skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa azeotropicky odparí s dichlórmetánom. Získa sa hydrochlorid (2S)-amíno-N-[(1S)-2metoxy-l-fenyletyl]-3-fenylpropanamídu (1,11 g, 103 %) vo forme svetlo žltej peny.
δΗ (400 MHz, CDCI3) 3,08 (1H, dd, J = 13 a 10 Hz), 3,20 (3H,
s), 3,32 (2H, m), 3,50 (1H, dd, J = 7,5 a 6,5 Hz), 4,44 (1H,
171
m), 5,00 (1H, m), 7,18 (1H, m), 7,20 (2H, m), 7,25 (7H, komplex), 7,64 (1H, d, J = 8 Hz), 7,80 (3H, br s).
LRMS (termosprej) m/z = 299 (MH+)
c) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 2 sa (2R)-2[2-(terc.butoxy)-2-oxoetyl]pent-4-enová kyselina (658 mg, 3,07 mmol) nechá 1 hodinu pri 4 °C a potom 18 hodín pri 20 °C reagovať s hydrochloridom (2S)-amíno-N-[(IS)-2-metoxy-lfenyletyl] -3-fenylpropanamídu (zo stupňa b) (1,08 g, 3,23 mmol). Výsledná zmes sa skoncentruje za zníženého tlaku a rozdelí medzi etylacetát (100 ml) a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný (100 ml) . Vrstvy sa oddelia a vodná vrstva sa reextrahuje etylacetátom (100 ml). Spojené organické vrstvy sa vysušia síranom horečnatým a skoncentrujú za zníženého tlaku. Zvyšok sa trituruje s diizopropyléterom. Získa sa terc.butyl-(3R)-3-({[({[(IS)-2-metoxy-lfenyletyl] amino] karbonyl)-(IS)-2-fenyletyl]amino}karbonyl)hex-5-enoát (1,35 g, 85 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia 122 až 125 °C.
Rf 0,47 (dichlórmetán : metanol, 95 : 5) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,40 (9H, s), 2,12 (1H, m), 2,26-2,40 (2H, m), 2,50-2,60 (2H, m), 3,00 (1H, dd, 8,5 a 14 Hz), 3,19 (1H, dd, 5,5 a 14 Hz), 3,20 (3H, s), 3,36 (1H, dd, 4,5 a 9,5 Hz), 3,50 (1H, dd, 4,8 a 9,5), 4,65 (1H, q, J = 7,5 Hz), 4,94-5,04 (3H, m), 5,60 (1H, m), 6,37 (2H, m), 7,18-7,35 (10H, komplex). LRMS (termosprej) m/z = 495 (MH+)
d) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 15a sa terc.butyl-(3R)-3-({[({[(IS)-2-metoxy-l-fenyletyl]amíno}karbonyl)-(IS)-2-fenyletyl]amino]karbonyl)hex-5-enoát (zo stupňa c) (1,35 g, 2,73 mmol) nechá za katalýzy paládiom pri teplote spätného toku v acetonitrile 18 hodín reagovať s 4jód-2-metyl-l-fenylbenzénom (z preparatívneho postupu 29)
172 (1,21 g, 4,09 mmol). Reakčná zmes sa ochladí a zriedi etylacetátom (200 ml). Etylacetátová zmes sa premyje 5% vodnou kyselinou citrónovou (50 ml) , nasýteným vodným hydrogénuhličitanom sodným (50 ml) a nasýteným vodným chloridom sodným (50 ml), vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu dichlórmetán : etylacetát 50 : 1 až 5 : 1. Získa sa terc.butyl-(3R,5E)-3({[({[ (1S) -2-metoxy-ľfenyletyl] amino) karbonyl) - (1S) -2fenyletyl]amino}karbonyl)-6-[3-metyl-(4-fenyl)-fenyl]hex-5enoát vo forme svetlo hnedej peny (1,1 g, 61 %).
Rf 0, 35 (dichlórmetán : etylacetát, 5 : 1)
δ« (400 MHz, CDCI3) 1, ,40 (9H, s), 2,22 (3H, s), 2,34 (IH , m) ,
2, 40-2, 56 (2H, m), 2, 56-2,75 (2H, m), 3,00 (IH, dd, J = 7,5 a
14 Hz) , 3,19 (IH, dd, J = 6 a 14 Hz), 3,20 (3H, s), 3, 35 (IH,
dd , J = = 4,5 a 10 Hz) , 3,50 (IH, dd, J = 4,5 a 10 Hz) , 4,65
d H, q, J = 7,5 Hz), 5,00 (IH, dt, J = 4,5 a 7,5 Hz) , 6,06
(1 H, dt , J = 7 a 14 Hz), 6,34 (IH, d, J = 7,5 Hz), 6, 38 (IH,
d, J = 14 Hz), 6,44 (IH, d, J = 7,5 Hz), 7,10-7 , 38 (16H,
komplex), 7,40 (2H, m).
Nájdené: C 76,10, H 7,27, N 4,20, C42H48N2O5 vypočítané C 76, 33, H 7,32, N 4,24 %
e) Roztok terc.butyl-(3R,5E)-3-({[({[(1S)-2-metoxy-ľ fenyletyl]amino}karbonyl)-(1S)-2-fenyletyl]amino}karbonyl)-6[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]hex-5-enoátu (1,03 g, 1,56 mmol) v etanole (100 ml) sa 18 hodín hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (125 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Reakčná zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu pentan : etylacetát 10 : 1 až 2 : 1 a trituráciou s dietyléterom.
Získa sa terc.butyl-(3R)-3-({[({[(1S)-2-metoxy-l173 fenyletyl]amino}karbonyl)-(1S)-2-fenyletyl]amino)karbonyl)-6[3-metyl-(4-fenyl)fenyl]-hexanoát (980 mg, 95 %) vo forme bezfarebnej peny, ktorá sa použije pri postupe podía príkladu 22.
Rf 0,35 (pentan : etyl acetát, 2 : 1) δΗ (400 MHz, CDC13) 1,40 (9H, s), 1,42 (1H, m), 1,48-1,70 (3H,
m), 2,20 (3H, s), 2,38 (1H, m), 2,56 (4H, m) , 3,00 (1H, dd, J
= 8 a 13 Hz), 3,20 (3H, s a 1H, dd J = 5,5 a 13 Hz,
prekrývanie), 3,36 (1H, dd, J = 5 a 9 Hz) , 3,50 (1H, dd, J = 5
a 9 Hz), 4,65 (1H, q, J = 8 Hz) , 5,00 (1H, dt, J = 5 a 8 Hz),
6,38 (2H, d, J = 8 Hz), 6,95 (1H, d, J = 8 Hz), 7,00 (1H, s), 7,10 (1H, d, J = 8 Hz), 7,14-7,35 (13H,komplex), 7,40 (2H, m). Nájdené: C 76, 03, H 7,70, N 4,25, C42H50N2O5 vypočítané C 76,10, H 7,60, N 4,23 %
Preparatívny postup 31 terc.Butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l-{[(ÍR)-1-(4pyridyl)-etylamino]karbonyl}propyl]amino}karbonyl)-6-[(3metyl-4-fenyl)fenyl]hexanoát
174
Spôsobom opísaným v príklade 25a sa terc.butyl-(3R)-3({ [ (1S)-1-(karboxy)-2,2-dimetylpropyl]amino)karbonyl)-6-[(3metyl-4-fenyl)fenyl]hexanoát (z preparatívneho postupu 19c) (497 mg, 1,0 mmol) nechá 2,5 hodiny pri teplote miestnosti reagovať s (R)-(+)-1-(4-pyridyl)etylamínom (122 mg, 1,0 mmol). Po vyššie opísanom spracovaní sa získa terc.butyl-(3R)-3({ [ (1S)-2,2-dimetyl-l-{[(ÍR)-1-(4pyridyl)etylamino]karbonyl}propyl]amino]karbonyl)-6-[(3-metyl-
4-fenyl)fenyl]hexanoát (4 60 mg, 77 %) vo forme bielej pevnej
látky.
Rf 0,21 (hexán : etyl acetát, 1 : 2)
δΗ (400 MHz, CDC13) 1,01 (9H, s), 1,40 (9H, s), 1,45 (3H, d, J
= 7,5 Hz), 1,50-1,65 ( 4H, m), 2,22 (3H, s), 2,38 (1H, m),
2,50-2,65 (4H, m), 4,20 (1H, d, J = 9 Hz) , 5,04 (1H, pentet, J
= 7,5 Hz) , 6,15 (1H, d, J = 7,5 Hz), 6,45 (1H, d, J = 9 Hz) ,
7,00 (2H, m), 7,14 (3H, m), 7,30 (3H, m), 7,38 (2H, m), 8,45
(2H, d, J = 7,5 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 600 (MH+)
P ríklad 38/
P r e p a r a tívny postup 32
(3R)-3-({[(1S)-2,2-Dimetyl-l-{[(ÍR)-1-(3-pyridyl)etylamino]karbonyl}propyl]amino}karbonyl)-6-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]hexánová kyselina
175
a) Spôsobom opísaným v príklade 25a sa terc.butyl-(3R)-3({[(1S)-1-(karboxy)-2,2-dimetylpropyl]amino}karbonyl)-6-[(3metyl-4-fenyl)fenyl]hexanoát (z preparatívneho postupu 19c) (497 mg, 1,0 mmol) nechá 2,5 hodiny pri teplote miestnosti reagovať s (R)-(+)-1-(3-pyridyl)etylamínom (122 mg, 1,0 mmol). Po vyššie opísanom spracovaní a prečistení mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexan : etylacetát 4 : 1 až 100% etylacetát sa získa terc.butyl-(3R)3- ({[(1S)-2,2-dimetyl-l-{[(ÍR)-1-(3pyridyl)etylamino]karbonyl}propyl]amino]karbonyl)-6-[(3-metyl4- fenyl)fenyl]hexanoát (537 mg, 89 %) vo forme bezfarebnej peny.
Rf 0,33 (etylacetát) δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,90 (9H, s), 1,02 (3H, d, J = 7,5 Hz), 1,34 (9H, s), 1,20-1,34 (4H, m), 2,14 (3H, s), 2,20 (1H, m),
2,30-2,50 (3H, m), 2,80 (1H, m), 4,30 (1H, d, J = 9,5 Hz),
4,95( 1H, pentet, J = 7,5 Hz), 6,92 (1H, d, J = 8 Hz), 7,00 (2H, m), 7,18 (1H, m), 7,24 (2H, m), 7,32 (1H, m), 7,40 (2H,
m), 7,60 (1H, d, J = 8 Hz), 7,75 (1H, d, J = 9,5 Hz), 8,35 (1H, m), 8,42 (1H, d, J = 7,5 Hz), 8,46 (1H, s).
LRMS (termosprej) m/z = 600 (MH+)
b) Roztokom terc.butyl-(3R)-3-({[(1S)-2,2-dimetyl-l{[(ÍR)-1-(3-pyridyl)etylamino]karbonyl}propyl]amino}karbonyl)6-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]hexanoátu (285 mg, 0,47 mmol) v dioxane (15 ml) sa pod atmosférou dusíka pri 0 °C vedie plynný
176 chlorovodík, dokiaľ nevznikne nasýtený roztok. Tento roztok sa 3 hodiny mieša pri 0 °C a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v metanole (3 ml) . K metanolickému roztoku sa pridá dietyléter (3 ml) . Výsledná zmes sa prefiltruje a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v metanole (3 ml) a k metanolickému roztoku sa pridá toluén (3 ml) . Zvyšok sa skoncentruje za zníženého tlaku. K zvyšku sa pridá dietyléter (5 ml) a vzniknutý roztok sa sonikuje. Získa sa biela pevná látka, ktorá sa odfiltruje a vysuší. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bielej pevnej látky (338 mg, 65 %) .
Rf 0,06 (etyl acetát : hexan : kyselina octová, 50 : 50 : 1)
δΗ (4 00 MHz, CDjOD) 1,02 (9H, s), 1,40-1,60 (4H, m) , 1,54 (3H,
d, J = 7,5 Hz) , 2, 1 6 (3H, s), 2,30-2,58 (3H, m) , 2, 62 (1H, m) ,
2, 90 (1H, m), 4,20 (1H, m), 5,15 (1H, pen tet, J = 7,5 Hz) ,
6, 90 (1H, d, J = 8 Hz), 6,98 (2H, m), 7,22 (2H, d, J = 8 Hz) ,
7, 32 (1H, m), 7,40 (2H, d, J = 8 Hz) , 7,80 (1H, m) , 7,85 (1H,
d, J = 9,5 Hz) , 8,50 (2H, m), 8,80 (2H, m) •
LRMS (termosprej) m/z = 544 (MH+)
Nájdené: C 65,78, H 7,26, N 6,72, C33H41N3O4. HCI. 1,25H2O
vypočítané C 65,74, H 7,63, N 6,7 6 %
P r e p a r a t í v n y p o s tup 33
(2R) -N- [ (1S)-1-(Karboxy)-2,2-dimetylpropyl]-2-[(4S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]pentanamíd
177
a) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 2 sa (4S)—4— [(ÍR)-l-karboxybut-3-enyl]-2,2-dimetyl-l,3-dioxolan-5-on (z preparatívneho postupu 14b) (2,39 g, 11,20 mmol) nechá 1 hodinu pri 4 °C a potom 17 hodín pri 20 °C reagovať s hydrochloridom benzylesteru L-terc.leucinu (3,03 g, 11,76 mmol). Reakčná zmes sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa rozpustí v etylacetáte (200 ml). Etylacetátový roztok sa premyje 0,5M vodným dihydrogénfosforečnanom sodným (2 x 200 ml), 5% nasýteným hydrogénuhličitanom sodným (200 ml) a vodou, vysuší síranom horečnatým a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexán : etylacetát 10 : 1 až 1 : 1. Získa sa (2R) -N.- [ (1S) -1- [ (benzyloxy) karbonyl] -2,2-dimetylpropyl] -2[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]pent-4-enamíd (4,06 g, 87 %) vo forme bielej pevnej látky s teplotou tavenia 67 až 70 °C.
Rf 0,30 (hexán : dietyléter, 1 : 1) δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,95 (9H, s), 1,45 (3H, s), 1,54 (3H,
s), 2,30 (1H, m), 2,45 (1H, m), 3,00 (1H, m), 4,02 (1H, d, J = 8 Hz), 4,50 (1H, d, J= 8 Hz), 4,85 (1H, d, J = 8 Hz), 5,00 (1H, d, J = 16 Hz), 5,10 (2H, s), 5,60 (1H, m), 7,34 (5H, m), 8,12 (1H, d, J = 8 Hz).
LRMS (termosprej) m/z = 418 (MH+)
Nájdené: C 66,13, H 7,50, N 3,36, C23H3iNOg vypočítané C 66,17,
H 7,48, N 3,35 %
178
b) Octan paladnatý (58 mg, 0,24 mmol) sa pod atmosférou dusíka pridá k miešanému roztoku (2R)—N—[(1S)—ΙΕ (benzyloxy)karbonyl]-2,2-dimetylpropyl]-2-[{4 S)-2,2-dimetyl5-oxo-l, 3-dioxolan-4-yl]pent-4-enamídu (2,0 g, 4,8 mmol), 4jód-2-metyl-l-fenylbenzénu (z preparatívneho postupu 29) (2,1 g, 7,20 mmol) a N-etylmorfolinu (920 1, 7,20 mmol) v bezvodom acetónitrile (15 ml). Výsledná zmes sa premyje dusíkom a potom zahrieva k spätnému toku. Vzhľadom na vyzrážanie paládia sa k nej pridá octan paladnatý (58 mg, 0,24 mmol) a v refluxovaní sa pokračuje. Po ďalších 2 hodinách sa k nej pridá ďalších 58 mg octanu paladnatého a po ďalších 2 hodinách tri(2metylfenyl)fosfin (304 mg, 1,0 mmol) a octan paladnatý (58 mg, 0,24 mmol). Reakčná zmes sa 2 hodiny zahrieva k spätnému toku, hneď potom sa k nej pridá znova tri(2-metylfenyl)fosfín (304 mg, 1,0 mmol) a octan paladnatý (58 mg, 0,24 mmol). Reakčná zmes sa 8 hodín zahrieva k spätnému toku, ochladí a zriedi etylacetátom (200 ml) a vodou (200 ml) . Výsledná zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel, aby sa odstránilo paládium. Vrstvy sa oddelia a organická vrstva sa premyje vodou (2 x 100 ml), vysuší síranom sodným a skoncentruje za zníženého tlaku. Surový produkt sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu dichlórmetan : etylacetát 50 : 1 až 15 : 1. Výsledná žltá živica sa ďalej prečistí mžikovou chromatografiou za použitia elučného gradientu hexan : dietyléter 10 : 1 až 1 : 1 a trituráciou so zmesou pentánu a dietyléteru. Získa sa (2R,4E)N-{(1S)-1-[(benzyloxy)karbonyl]-2,2-dimetyl-propyl}-2-[(4S)2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3-metyl-4fenyl)fenyl]pent-4-enamíd vo forme bielej pevnej látky (710 mg, 25 %) s teplotou tavenia 115 až 118 °C.
Rf 0,30 (hexan : etylacetát, 1 : 1) δΗ (300 MHz, CDC13) 0,96 (9H, s), 1,54 (3H, s), 1,60 (3H, s),
2,24 (3H, s), 2,65-2,90 (3H, m), 4,50 (1H, d, J = 9,5 Hz),
179
4,60 (1Η, d, J = 7,5 Hz), 5,0 (1H, d, J = 9,5 Hz), 5,3 (1H, d, J = 9,5 Hz), 6,20 (1H, m), 6,44 (1H, d, J = 9,5 Hz), 6,52 (1H, d, J = 16 Hz), 7,10-7,42 (13H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 584 (MH+)
Nájdené: C 73, 96, H 7,02, N 2,41, Ο36Η4ιΝΟ6 vypočítané C 74,08, H 7,08, N 2,40 %
c) Roztok (2R,4E)-N-{(1S)-1-[(benzyloxy)karbonyl]-2,2dimetylpropyl}-2-[(4 S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5[ (3-metyl-4-fenyl)fenyl]pent-4-enamídu (1,24 g, 2,12 mmol) v etanole (150 ml) sa 6 hodín hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (100 mg) za tlaku 0,3 MPa pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel a filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa azeotropicky odparí s dietyléterom. Získa sa (2R)-N[(1S)-1-(karboxy)-2,2-dimetylpropyl]-2-[(4 S)-2,2-dimetyl-5oxo-1,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3-metyl-4-fenyl)fenyl]pentanamíd (1,08 g, 103 %) vo forme bezfarebnej peny.
Rf 0,40 (hexán : etylacetát : kyselina octová, 50 : 50 : 1)
δΗ (400 MHz, DMSO-dg) 0,95 (9H, s), 1,45 (3H, s), 1,55 (3H,
s) , 1,50-1,66 (3H, m), 1,80 (1H, m), 2,20 (3H, s), 2,50 (1H,
m), 2,60 (1H, m), 3,00 (1H, m), 4,15 (1H, d, J = 8 Hz), 4,50
(1H , d, J = 8 Hz), 7,05 (3H , m), 7,30 (3H , m) , 7,40 (2H, m) ,
7,95 (1H, d, J = 8 Hz).
Nájdené: C 69,50, H 7,69, N 2,69, Ο2θΗ37ΝΟ6. 0,3H3O vypočítané C 69,52, H 7,56, N 2,80 %
Preparativny postup 34 (2R)-N-[(1S)-1-(Karboxy)-2,2-dimetylpropyl]-2-[(4 S)-2,2dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5-[(3'-metoxy-2-metyl-bifén4-yl)propyl]pentanamíd
180
a) Spôsobom opísaným v preparatívnom postupe 15a sa (2R)— N-[(1S)-1-[(benzyloxy)karbonyl]-2,2-dimetylpropyl]-2-[(4S)2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]pent-4-enamíd (z preparatívneho postupu 33a) (1,0 g, 2,4 mmol) za katalýzy paládiom pri teplote spätného toku v acetonitrile po dobu 16 hodín nechá reagovať s 4-jód-l-(3-metoxyfenyl)-2-metylbenzénom (z preparatívneho postupu 20) (1,16 g, 3,59 mmol). Reakčná zmes sa ochladí a rozdelí medzi etylacetát (3 x 75 ml) a nasýtený vodný hydrogénuhličitan sodný (75 ml) . Spojené organické roztoky sa vysušia síranom sodným a skoncentrujú za zníženého tlaku. Zvyšok sa prečistí mžikovou chromatografiou za použitia zmesi dichlórmetánu a dietyléteru v pomere 97,5 : 2,5 ako elučného činidla. Získa sa (2R,4E)-{(1S)-ΙΕ (benzyloxy)karbonyl]-2,2-dimetylpropyl}-2-[(4S)-2,2-dimetyl5-oxo-l, 3-dioxolan-4-yl]-5-[(3'-metoxy-2-metylbifén-4yl)propyl]pent-4-enamíd vo forme pevnej látky (1,08 mg, 74 %) . Podlá XH NMR produkt tiež obsahuje alkénové izoméry. Táto zmes alkénov sa použije v nasledujúcom stupni (pozri stupeň b).
181
Rf 0,44 (dichlórmetán : dietyléter, 95 : 5) δΗ (400 MHz, CDCI3) (pre (4E) izomér). 0,95 (9H, s), 1,52 (3H,
s), 1,60 (3H, s), 2,25 (3H, s), 2,54-2,90 (3H, m), 3,80 (3H,
s), 4,50 (IH, d, J = 9,5 Hz), 4,60 (IH, d, J = 5 Hz), 4,98 (IH, d, J = 12 Hz), 5,07 (IH, d, J = 12 Hz), 6,20 (IH, m),
6,45 (IH, d, J = 9 Hz), 6,50 (IH, d, J = 16 Hz), 6,86 (3H, m), 7,12-7,40 (9H, komplex).
LRMS (termosprej) m/z = 613 (MH+) , 630 (MNH4 +)
b) Roztok (2R, 4E)-{(1S)-1-[(benzyloxy)karbonyl]-2,2dimetylpropyl}-2-[(4 S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3-dioxolan-4-yl]-5[(3'-metoxy-2-metyl-bifén-4-yl)propyl]pent-4-enamíd (534 mg, 0,87 mmol) v etanole (75 ml) sa 5,75 hodiny hydrogenuje za prítomnosti 10% paládia na uhlíku (50 mg) za tlaku 0,3 MPa pri 20 °C. Reakčná zmes sa prefiltruje cez pomocnú filtračnú látku Arbocel, filtrát sa skoncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa azeotropicky odparí s etylacetátom. Získa sa (2R)-N-[(1S)1-(karboxy)-2,2-dimetylpropyl]-2-[(4S)-2,2-dimetyl-5-oxo-l,3dioxolan-4-yl]-5-[(3'-metoxy-2-metylbifén-4yl)propyl]pentanamíd (384 mg, 61 %) vo forme bielej pevnej látky, ktorá sa použije pri postupe podľa príkladu 30 a 31 bez prečistenia.
δΗ (400 MHz, DMSO-d6) 0,96 (9H, s) , 1,45 (3H, s) , 1,55 (3H,
s) , 1,50-1,65 (3H, m), 1,80 (IH, m) , 2,20 (3H, s) , 2,50 (IH,
m) , 2,60 (IH, m), 2,96 (IH, m), 3 ,78 (3H, s ), 4, 15 (IH, d, J =
9 Hz), 4,50 i (IH, d, J = 9 Hz) , 6,85 » (3H, m) , 7, 00 (IH, m) ,
7, 05 (2H, m), 7,32 (IH, t, J = 8 Hz) , 7,96 (IH, d, J = 9 Hz) ,
12,50 (IH, br s).
182 kde

Claims (38)

  1. PATENTOVÉ
    NÁROKY
    1. Zlúčeniny všeobecného vzorca I
    R1 predstavuje vodík, hydroxyskupinu, alkylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka alebo alkenylskupinu sa 2 až 4 atómami uhlíka;
    R2 predstavuje alkylskupinu s 1 až prípadne substituovanú fluórom, imidazolylskupinou, skupinou SO2~alkyl s
    6 atómami uhlíka indolylskupinou,
    1 až 4 atómami uhlíka, cykloalkylskupinou s 5 až 7 atómami uhlíka alebo prípadne chránenou skupinou OH, SH, CONH2, CO2H, NH2 alebo NHC(=NH)NH2, cykloalkylskupinu s 5 až 7 atómami uhlíka prípadne substituovanou alkylskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alebo benzylskupinu prípadne substituovanú prípadne chránenú hydroxyskupinou, alkoxyskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, benzyloxyskupinou alebo benzyltioskupinou, pričom prípadné chrániace skupiny skupín OH, SH, CONH2, NH2 alebo NHC(=NH)NH2 sú zvolené zo súboru pozostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, benzylskupiny a alkanoylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a prípadné chrániace skupiny skupiny CO2H sú zvolené zo súboru pozostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a benzylskupiny;
    183
    R3, R5 a R6 predstavujú každý nezávisle vodík alebo fluór;
    R4 predstavuje skupinu CH3, chlór alebo fluór;
    X predstavuje skupinu HO alebo HONH;
    Y predstavuje priamu väzbu alebo kyslík;
    Z predstavuje buď skupinu všeobecného vzorca a
    A.
    (a) kde
    R10 predstavuje alkylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, hydroxyalkylskupinu s 2 až 4 atómami uhlíka, karboxyalkylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkylovej časti alebo (amino alebo dimetylamino)-alkylskupinu s 2 až 4 atómami uhlíka v alkylovej časti; a
    R11 predstavuje fenylskupinu, naftylskupinu alebo pyridylskupinu, prípadne substituovanú až tromi substituentmi nezávisle zvolenými z halogénu a metylskupiny;
    alebo skupinu všeobecného vzorca b (b) kde
    R14 predstavuje vodík, OH, CH3 alebo halogén;
    184
    Ar predstavuje skupinu všeobecného vzorca c, d alebo e (d) (e) kde
    A predstavuje dusík alebo skupinu CR12;
    B predstavuje dusík alebo skupinu CR13;
    pričom A a B nepredstavujú oba dusík;
    R7 a R9 predstavuje každý nezávisle vodík alebo fluór;
    R8, R12 a R13 predstavuje každý nezávisle vodík, CN, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyalkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alkoxylových častí, (amino alebo dimetylamíno)alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, CONH2, OH, halogén, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, piperazinylkarbonylskupinu, piperidylskupinu, C(NH2)=NOH alebo C(=NH)NHOH, pričom aspoň dva z R8, R12 a R13 predstavujú vodík;
    a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
    185
  2. 2. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podlá nároku 1, kde R1 predstavuje vodík, OH, alkylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka alebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  3. 3. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podlá akéhokolvek z predchádzajúcich nárokov, kde R2 predstavuje alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovanú indolylskupinou, alkyltioskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, skupinou SO2-alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka, cykloalkylskupinou s 5 až 7 atómami uhlíka, hydroxyskupinou alebo skupinou SH; cykloalkylskupinu s 5 až 7 atómami uhlíka prípadne substituovanú alkylskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka; alebo R2 predstavuje benzylskupinu; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  4. 4. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokolvek z predchádzajúcich nárokov, kde Z predstavuje skupinu všeobecného vzorca a (a) kde R10 predstavuje alkylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti alebo hydroxyalkylskupinu s 2 až 4 atómami uhlíka, a R11 predstavuje fenylskupinu alebo pyridylskupinu, ktoré sú prípadne substituované až tromi substituentmi nezávisle zvolenými z halogénu a metylskupiny; alebo Z predstavuje skupinu vzorca a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
    186
  5. 5. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podía akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R3 predstavuje vodík; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  6. 6. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podía akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R4 predstavuje fluór, keď Y predstavuje kyslík, a R4 predstavuje chlór alebo CH3, keď Y predstavuje priamou väzbu; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  7. 7. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R5 predstavuje vodík; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  8. 8. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podlá akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R6 predstavuje vodík; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  9. 9. Zlúčeniny predchádzajúcich všeobecného vzorca kde
    A predstavuje skupinu
    B predstavuje skupinu všeobecného vzorca I
    CR12;
    CR13;
    podľa akéhokoľvek z predstavuje skupinu (c)
    R7 a R9 predstavuje každý nezávisle vodík alebo fluór;
    187
    R8 a R13 predstavuje každý nezávisle vodík, fluór, chlór, CN, CONH2, CH3 alebo OCH3; a
    R12 predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, CN, hydroxyalkylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, (amino alebo dimetylarnino)alkylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, CONH2, OH, halogén, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, piperazinylkarbonylskupinu, piperidylskupinu, Ο(ΝΗ2)ΝΟΗ alebo C(=NH)NHOH;
    a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  10. 10. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podlá akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R1 predstavuje vodík, OH, npropylskupinu alebo etoxyskupinu; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  11. 11. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R2 predstavuje alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovanú hydroxyskupinou, skupinou SO2-alkyl s 1 až 4 atómami uhlíka alebo cykloalkylskupinou s 5 až 7 atómami uhlíka; cyklohexylskupinu substituovanú alkylskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alebo R2 predstavuje benzylskupinu; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  12. 12. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podlá akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde Z predstavuje skupinu všeobecného vzorca a (a)
    188 kde R10 predstavuje alkylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti alebo hydroxyalkylskupinu sa 2 až 4 atómami uhlíka, a R11 predstavuje fenylskupinu, pyridín-4-ylskupinu alebo pyridín-3ylskupinu; alebo Z predstavuje skupinu vzorca a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  13. 13. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde Ar predstavuje skupinu všeobecného vzorca c
    R' (C) kde A predstavuje CR12, B predstavuje CR13 a R7, R8 a R9 predstavujú atómy vodíka; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  14. 14. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R1 predstavuje vodík; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  15. 15. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R2 predstavuje cyklohexylmetylskupinu, izopropylskupinu, 1metylcyklohexylskupinu, terc.butylskupinu, skupinu
    189
    9 ·
    C (CH3) 2SO2CH3, benzylskupinu alebo C(CH3)2OH; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  16. 16. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde Z predstavuje skupinu všeobecného vzorca a (a) kde R10 predstavuje CH3, CH2OCH3 alebo CH2OH, a R11 predstavuje fenylskupinu, pyridín-4-ylskupinu alebo pyridín-3-ylskupinu, alebo Z predstavuje skupinu vzorca a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  17. 17. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde Ar predstavuje skupinu všeobecného vzorca c (c) kde
    A predstavuje skupinu CR12;
    190
    B predstavuje skupinu CR13;
    R7, R8 a R9 predstavujú atómy vodíka;
    R12 predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, CN, hydroxyalkylskupinu sa 2 až 6 atómami uhlíka, (amino alebo dimetylamíno)alkylskupinu sa 2 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, CONH2, OH, halogén, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxymetylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, C(NH2)=NOH alebo C(=NH)NHOH; a
    R13 predstavuje vodík, OCH3, CN, CONH2, CH3 alebo fluór;
    a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  18. 18. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podlá akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R2 predstavuje izopropylskupinu, terc.butylskupinu alebo benzylskupinu; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  19. 19. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde Z predstavuje skupinu vzorca a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
    191
  20. 20. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podlá akéhokolvek z predchádzajúcich nárokov, kde Ar predstavuje fenylskupinu, 3metoxyfenylskupinu, 4-kyanofenylskupinu, 3-kyanofenylskupinu, 3-karbamoylfenylskupinu alebo 4-hydroxyamídinofenylskupinu; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  21. 21. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov, kde R2 predstavuje terc.butylskupinu; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  22. 22. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokolvek z predchádzajúcich nárokov, kde Ar predstavuje fenylskupinu alebo 3-metoxyfenylskupinu; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  23. 23. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa akéhokolvek z predchádzajúcich nárokov, kde
    R1 predstavuje vodík, hydroxyskupinu, n-propylskupinu alebo etoxyskupinu;
    R2 terc.butylskupinu, izopropylskupinu alebo benzylskupinu;
    Z predstavuje skupinu všeobecného vzorca
    192 kde
    R10 predstavuje CH3, CH2OCH3 alebo CH2OH, a R11 predstavuje fenylskupinu, pyridín-4-ylskupinu alebo pyridín-3-ylskupinu, alebo
    Z predstavuje skupinu vzorca
    R3 predstavuje vodík;
    R4 predstavuje CH3, chlór alebo fluór;
    R5 predstavuje vodík;
    R6 predstavuje vodík; a
    Ar predstavuje fenylskupinu, 3-metoxyfenylskupinu, 4kyanofenylskupinu, 3-kyanofenylskupinu, 3karbamoylfenylskupinu alebo 4-hydroxyamídinofenylskupinu;
    a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  24. 24. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa nároku 1, ako sú v podstate definované v tomto texte s odkazom na príklady uskutočnenia; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  25. 25. Zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa nároku 1, zvolené zo zlúčenín z príkladov 3, 4, 8, 14, 15, 16, 22, 29,
    193
    30, 31 a 32; a ich farmaceutický vhodné soli alebo solváty všetkých týchto látok.
  26. 26. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje zlúčeninu podľa akéhokoľvek z predchádzajúcich nárokov alebo jej farmaceutický vhodnú sol alebo solvát niektorej z týchto látok v zmesi s kompatibilným adjuvans, riedidlom alebo nosičom.
  27. 27. Zlúčenina podľa akéhokoľvek z nárokov 1 až 25 na použitie ako liečivo.
  28. 28. Použitie zlúčeniny podľa akéhokoľvek z nárokov 1 až 25 na výrobu liečiva na liečenie stavu sprostredkovaného MMP, najmä MMP-3 a/alebo MMP-12 a/alebo MMP-13.
  29. 29. Spôsob liečenia stavu sprostredkovaného jednou matričnou metaloproteinázou alebo väčším počtom matričných metaloproteináz, najmä MMP-3 a/alebo MMP-12 a/alebo MMP-13, vyznačujúci sa tým, že sa pri ňom podáva účinné množstvo zlúčeniny podía akéhokoľvek z nárokov 1 až 25 alebo farmaceutická kompozícia podľa nároku 26.
  30. 30. Spôsob výroby zlúčenín podľa nároku 1, kde X predstavuje hydroxyskupinu, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa transformáciu zlúčeniny všeobecného vzorca
    II
    R O
    R (II)
    X
    194 kde Xi predstavuje skupinu transformovateľnú na karboxyskupinu, a ostatné substituenty majú význam uvedený v nároku 1, ako je hydrolýza zlúčeniny všeobecného vzorca II, kde Xi predstavuje skupinu C02 (terc.butyl alebo metyl).
  31. 31. Spôsob výroby zlúčenín podía nároku 1, kde X predstavuje skupinu NHOH a R1, R2, R3, R4, R5, R6, Y, Ar a Z majú význam uvedený v nároku 1, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca I podía nároku I, kde X predstavuje hydroxyskupinu, s hydroxylamínom alebo derivátom hydroxylamínu.
  32. 32. Spôsob výroby zlúčenín podía nároku 1, kde X predstavuje skupinu NHOH a R1, R2, R3, R4, R5, R6, Y, Ar a Z majú význam uvedený v nároku 1, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca I podía nároku I, kde X predstavuje hydroxyskupinu, s 0allylhydroxylamínom alebo jeho solí za prítomnosti činidla na kopulácii peptidov za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca III a následnú reakciu s mravenčanom amónnym za prítomnosti vhodného katalyzátora.
    195
  33. 33. Spôsob výroby zlúčenín podlá nároku 1, kde X predstavuje skupinu NHOH a R1, R2, R3, R4, R5, R6, Y, Ar a Z majú význam uvedený v nároku 1, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa reakciu zlúčeniny všeobecného vzorca IV s hydroxylamínom alebo jeho solí.
  34. 34. Spôsob výroby zlúčenín podlá nároku 1, kde X predstavuje skupinu OH a R1, R2, R3, R4, R5, R6, Y, Ar a Z majú význam uvedený v nároku 1, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa krížovú kopuláciu zlúčeniny všeobecného vzorca V
    196 kde X2 predstavuje chránenú kyselinu, napríklad vo forme skupiny SO2CH3 alebo C02 (terc.butyl), a LG predstavuje skupinu odstupujúcu pri krížovej kopulácii, ako jód, bróm alebo skupinu OSO2CF3, a R1, R2, R3, R4, R5, R6, Y, Ar a Z majú význam uvedený v nároku 1, za prítomnosti katalyzátora, za vzniku zlúčeniny alebo zlúčenín všeobecného vzorca Vila a/alebo Vllb
    R4, R5, R6, Y, Ar a Z majú význam uvedený v nároku 1; a následnú redukciu olefinického zvyšku a deprotekciu chráneného zvyšku kyseliny X2.
  35. 35. Zlúčeniny všeobecného vzorca II kde Xi, R1, R2, R3, R4, R5, R6, Y, Ar a Z majú význam uvedený v nároku 30; a ich soli a solváty všetkých týchto látok.
    197 (III)
  36. 36. Zlúčeniny všeobecného vzorca III kde R1, R2, R3, R4, R5, R6, Y, Ar a Z majú význam uvedený v nároku 32; a ich soli a solváty všetkých týchto látok.
  37. 37. Zlúčeniny všeobecného vzorca IV (IV) kde R1, R2, R3, R4, R5, R6, Y, Ar a Z majú význam uvedený v nároku 33; a ich soli a solváty všetkých týchto látok.
  38. 38. Zlúčeniny všeobecného vzorca Vila alebo Vllb .Ar nároku 34; a ich soli a solváty všetkých týchto látok.
SK1011-2000A 1998-01-09 1998-12-23 Inhibítory matričných metaloproteináz, spôsoby ich výroby a farmaceutické kompozície na ich báze SK10112000A3 (sk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB9800510.1A GB9800510D0 (en) 1998-01-09 1998-01-09 Therapeutic agents
GBGB9811843.3A GB9811843D0 (en) 1998-06-02 1998-06-02 Therapeutic agents
PCT/EP1998/008565 WO1999035124A1 (en) 1998-01-09 1998-12-23 Matrix metalloprotease inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK10112000A3 true SK10112000A3 (sk) 2002-02-05

Family

ID=26312925

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1011-2000A SK10112000A3 (sk) 1998-01-09 1998-12-23 Inhibítory matričných metaloproteináz, spôsoby ich výroby a farmaceutické kompozície na ich báze

Country Status (37)

Country Link
US (1) US6350907B1 (sk)
EP (1) EP1047665B1 (sk)
JP (1) JP3621884B2 (sk)
KR (1) KR100385662B1 (sk)
CN (1) CN1284942A (sk)
AP (1) AP1059A (sk)
AR (1) AR014270A1 (sk)
AT (1) ATE252547T1 (sk)
AU (1) AU736511B2 (sk)
BG (1) BG104575A (sk)
BR (1) BR9813719A (sk)
CA (1) CA2317604C (sk)
CO (1) CO4990971A1 (sk)
CZ (1) CZ20002459A3 (sk)
DE (1) DE69819206T2 (sk)
DK (1) DK1047665T3 (sk)
DZ (1) DZ2701A1 (sk)
EA (1) EA002971B1 (sk)
ES (1) ES2209244T3 (sk)
HN (1) HN1998000199A (sk)
HR (1) HRP20000460A2 (sk)
HU (1) HUP0101300A3 (sk)
IL (1) IL136889A0 (sk)
IS (1) IS5531A (sk)
MA (1) MA26594A1 (sk)
NO (1) NO20003506D0 (sk)
NZ (1) NZ504683A (sk)
OA (1) OA11435A (sk)
PA (1) PA8466101A1 (sk)
PE (1) PE20000176A1 (sk)
PL (1) PL342763A1 (sk)
PT (1) PT1047665E (sk)
SI (1) SI1047665T1 (sk)
SK (1) SK10112000A3 (sk)
TN (1) TNSN99002A1 (sk)
TR (1) TR200001909T2 (sk)
WO (1) WO1999035124A1 (sk)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6352976B1 (en) 1998-12-31 2002-03-05 Aventis Pharmaceuticals Inc. Selective inhibitors of MMP-12
CA2356919A1 (en) * 1998-12-31 2000-07-13 Michael J. Janusz Selective inhibitors of mmp-12
JP2001055327A (ja) * 1999-06-11 2001-02-27 Fuji Chemical Industries Ltd 新規なヒドロキサム酸誘導体を含む医薬
US6452041B1 (en) 2000-10-16 2002-09-17 Pfizer Inc. Olefination process to itaconate and succinate derivatives
GB0025310D0 (en) * 2000-10-16 2000-11-29 Pfizer Ltd Process
PL365024A1 (en) * 2001-02-16 2004-12-27 Allelix Neuroscience, Inc. Thiophene substituted amine derivatives as glyt-1 inhibitors
GB0126389D0 (en) * 2001-11-02 2002-01-02 Pfizer Ltd Wafer
PA8578101A1 (es) * 2002-08-13 2004-05-07 Warner Lambert Co Derivados de heterobiarilo como inhibidores de metaloproteinasa de la matriz
US20040138103A1 (en) * 2002-11-07 2004-07-15 Procyte Corporation Compositions containing peptide copper complexes and metalloproteinase inhibitors and methods related thereto
AU2003300076C1 (en) 2002-12-30 2010-03-04 Angiotech International Ag Drug delivery from rapid gelling polymer composition
US7786121B2 (en) * 2003-08-23 2010-08-31 Vernalis (Oxford) Limited Derivatives of hydroxamic acid as metalloproteinase inhibitors
JP2010506147A (ja) * 2006-09-29 2010-02-25 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 関節リウマチを有する患者のための疾患進行のリスク評価
CN104788333B (zh) * 2015-03-19 2017-03-22 中国医科大学 2‑取代‑9,10‑蒽醌类化合物、制备方法及其用途

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5892112A (en) 1990-11-21 1999-04-06 Glycomed Incorporated Process for preparing synthetic matrix metalloprotease inhibitors
GB9215665D0 (en) 1992-07-23 1992-09-09 British Bio Technology Compounds
US5672583A (en) 1992-11-25 1997-09-30 Merck & Co., Inc. Carboxy-peptidyl derivatives as antidegenerative active agents
US5714491A (en) 1993-04-27 1998-02-03 Celltech Therapeutics Limited Peptidyl derivatives as metalloproteinase inhibitors
GB9308695D0 (en) 1993-04-27 1993-06-09 Celltech Ltd Peptidyl derivatives
GB9320660D0 (en) 1993-10-07 1993-11-24 British Bio Technology Inhibition of cytokine production
UA48121C2 (uk) 1993-11-04 2002-08-15 Сінтекс (С.Ш.А.) Інк. Інгібітори матричних металопротеаз і фармацетична композиція на їх основі
US6037472A (en) * 1993-11-04 2000-03-14 Syntex (U.S.A.) Inc. Matrix metalloprotease inhibitors
DK0822186T3 (da) 1994-01-20 2000-06-26 British Biotech Pharm L-tert-leucin-2-pyridylamid
ATE185798T1 (de) 1994-01-22 1999-11-15 British Biotech Pharm Metalloproteinaseinhibitoren
ATE181055T1 (de) 1994-05-28 1999-06-15 British Biotech Pharm Succinyl hydroxamsäure-, n-formyl-n-hydroxy- aminocarbonsäure- und succinsäureamid-derivate und ihre verwendung als metalloprotease- inhibitoren
US5461746A (en) * 1995-01-17 1995-10-31 Tdw Delaware, Inc. Magnetic cleaning pig
US5691381A (en) 1995-04-18 1997-11-25 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Hydroxamic and carbocyclic acids as metalloprotease inhibitors
GB9507799D0 (en) * 1995-04-18 1995-05-31 British Biotech Pharm Metalloproteinase inhibitors
JPH11504646A (ja) 1995-05-10 1999-04-27 カイロサイエンス・リミテッド 金属プロテアーゼとｔｎｆの放出を抑制するペプチド化合物およびその治療的使用
DE69627483T2 (de) 1995-05-10 2004-04-01 Darwin Discovery Ltd., Slough Peptidartige stoffe, die metalloproteinasen und die tnf-freisetzung hemmen, und ihre therapeutische verwendung
GB9513331D0 (en) 1995-06-30 1995-09-06 British Biotech Pharm Matrix metalloproteinase inhibitors
US5917090A (en) * 1995-06-30 1999-06-29 British Biotech Pharmaceuticals Ltd. Matrix metalloproteinase inhibitors
US5840974A (en) * 1996-12-04 1998-11-24 Britisch Biotech Pharmaceuticals, Ltd. Metalloproteinase inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
CA2317604A1 (en) 1999-07-15
HRP20000460A2 (en) 2001-06-30
NZ504683A (en) 2002-06-28
ES2209244T3 (es) 2004-06-16
AR014270A1 (es) 2001-02-07
DE69819206D1 (de) 2003-11-27
TR200001909T2 (tr) 2000-12-21
AP9901436A0 (en) 1999-03-31
EP1047665A1 (en) 2000-11-02
BG104575A (en) 2001-02-28
SI1047665T1 (en) 2004-02-29
NO20003506L (no) 2000-07-07
PA8466101A1 (es) 2000-05-24
CA2317604C (en) 2004-12-21
HUP0101300A2 (hu) 2001-08-28
JP3621884B2 (ja) 2005-02-16
OA11435A (en) 2004-04-28
EA002971B1 (ru) 2002-12-26
AP1059A (en) 2002-04-22
KR20010033990A (ko) 2001-04-25
WO1999035124A1 (en) 1999-07-15
DK1047665T3 (da) 2004-02-02
IS5531A (is) 2000-06-13
DZ2701A1 (fr) 2003-09-01
IL136889A0 (en) 2001-06-14
MA26594A1 (fr) 2004-12-20
EA200000628A1 (ru) 2001-02-26
ATE252547T1 (de) 2003-11-15
JP2002500215A (ja) 2002-01-08
HUP0101300A3 (en) 2002-11-28
AU2277699A (en) 1999-07-26
NO20003506D0 (no) 2000-07-07
EP1047665B1 (en) 2003-10-22
PL342763A1 (en) 2001-07-02
KR100385662B1 (ko) 2003-05-28
US6350907B1 (en) 2002-02-26
CO4990971A1 (es) 2000-12-26
HN1998000199A (es) 2000-11-03
TNSN99002A1 (fr) 2005-11-10
CZ20002459A3 (cs) 2001-12-12
AU736511B2 (en) 2001-07-26
PT1047665E (pt) 2004-01-30
BR9813719A (pt) 2000-10-17
CN1284942A (zh) 2001-02-21
PE20000176A1 (es) 2000-03-10
DE69819206T2 (de) 2004-04-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7410984B2 (en) Compounds
US5736559A (en) Biphenyl derivatives, pharmaceutical compositions containing these compounds and processes for preparing them
US9302984B2 (en) Aryl-phenyl-sulfonamido-cycloalkyl compounds and their use
EP0931788A2 (en) Metalloprotease inhibitors
JPH0660144B2 (ja) シクロアルキル置換されたグルタルアミド抗高血圧剤
WO1998010763A1 (en) Thrombin inhibitors
PL198032B1 (pl) Pochodne amidów, sposób ich wytwarzania, ich zastosowanie oraz zawierające je kompozycje farmaceutyczne
AU2011306396A1 (en) Matrix metalloproteinase inhibitors
SK174899A3 (en) Urokinase inhibitors
SK10112000A3 (sk) Inhibítory matričných metaloproteináz, spôsoby ich výroby a farmaceutické kompozície na ich báze
US4873253A (en) Phenylalanine derivative and proteinase inhibitor
SK284127B6 (sk) Cyklické deriváty amidov acylaminokyselín substituované tioskupinou a spôsob ich prípravy
JP5186384B2 (ja) メタロプロテイナーゼインヒビターとしての（２，５−ジオキソイミダゾリジン−１−イル）−ｎ−ヒドロキシ−アセトアミド
US8153647B2 (en) Aryl- and heteroaryl-ethyl-acylguanidine derivatives, their preparation and their application in therapeutics
JP2002515411A (ja) プロテアーゼ阻害剤
KR20060023544A (ko) 벤즈아미드 니트릴 유도체
US6248743B1 (en) Butadiene derivatives and process for preparing thereof
US7223758B2 (en) Pyridazine derivative, pharmaceutical composition thereof, its pharmaceutical use, and process for its preparation
MXPA00006761A (en) Matrix metalloprotease inhibitors
HRP960260A2 (en) Hover boat
JP2011528689A (ja) メタロプロテアーゼ阻害剤としてのアリールスルホンアミドダイマー