SE442952B - Sett att framstella en aktiv substans mot litiasis genom extraktion av malda fron av bonor fran slektet dolichos - Google Patents

Description

7801520-3 2 sätt. Det första består i att man applicerar ett lösningsmedel di- rekt på stenarna genom att det införes t.ex. med en kateter. Denna metod är emellertid vansklig eftersom den på grund av att instrumen- tell hantering erfordras, kan åtföljas av mekanisk skada av väggar- na i uringångarna. Det andra sättet består i att förändra det fy- sikaliska och kemiska urinmediet, i synnerhet pH-värdet på urinen genom oral eller parenteral administrering av lämpliga beredningar.

Den olika sammansättningen hos stenarna gör det nödvändigt att använda olika beredningar och olika behandlingsmetoder. För att lösa fosfathaltiga stenar användes t.eX. för närvarande den kombine- rade terapin som består i att man ger medel, som gör urinen sur och framkallar inüflßïv diures i kombination med strikt diet och antibak- teriella beredningar, något som inte alltid tolereras väl av patien- terna. Bland de många medel, som surgör urin, och som administreras lokalt med en kateter kan nämnas starka oorganiska syror såsom salt- syra, salpetersyra och aqua regia, som är de bästa lösningsmedlen för njurstenar. Effektiviteten därav beror emellertid på koncentra- tionen. I lösningar med en koncentration under 0,0l N sjunker akti- viteten avsevärt (se I. Sücker: Urologie, 5, 1964, sid. 218) och det är omöjligt att använda dessa syror under en längre tidsperiod på grund av att de starkt retar vävnaden.

Användningen av citronsyra enligt F. Albright, H.W. Sukowitch och R. Chute: Journal of the American Medical Association llš, 1959, sid. 2049, var en betydande framgång i undersökningarna beträffande upplösning av stenar i urinorganen. Citronsyra är huvudbeståndsde- len i lösningarna G och M, som föreslås av H.J. Suby (Dissolution of urinary calculi. Journal of Urology 68, 1952, sid. 62). Lös- ningen G innehåller 52,25 g citronsyra, 5,84 g magnesiumoxid och 4,57 g natriumkarbonat per l liter vatten. Lösningen M skiljer sig från lösning G genom högre halt av natriumkarbonat (8,84 g/1); Så- som visat sig vid undersökning av vissa kliniska fall verkar lös- ningarna G och M endast som inhibitorer för tillväxten av urinstenar. Även den kända beredningen Uralit U från Madaus, använd för upplös- ning av njurstenar, urinstenar och urinsyrastenar, innehåller cit- ronsyra, eftersom den är sammansatt av ett hydratiserat komplex av natrium- och kaliumsalter av citronsyran.

En beredning, som visat sig vara effektiv när det gäller att lösa upp stenar, som huvudsakligen består av magnesium- och ammonium- 7801520-3 fosfat, är “Renacidin“, som är en blandning av citron-, glukurin-, malein- och bensen-karboxylsy/rorna samt av laktoner, estrar och salter av nämnda syror. Renacidin administreras i form av en 10%-ig lösning. Komplikationer, som resulterar i exiti, som många gånger sker under den terapeutiska behandlingen med nämnda beredning, har lett till att användningen därav begränsats. vid experiment in vi- vo har man även kunnat visa en ökning av stenmassa, som behandlats med "Renacidin" i sur miljö.

Det framgår således att kända medel mot stenar huvudsakligen innehåller en förening eller några föreningar av kemisk natur.

Bland de läkemedel av växtursprung, som användes för behand- ling av nefrolitiasis hör Madaus Uralit, som innehåller extrakt av krapprot, fräken, gruppen Arnica och glykosider från liljekonvalje och magnesiumfosfat. Beredningen användes preventivt för fall, där mmlæßtawm diagnosticerats. En beredning av växtursprung är även "Rubinex", som innehåller torrextrakt av krapprot. Beredningen är effektiv vid fall av stenar i urinorganen, och i synnerhet vid fall av stenar i urinledarna. Den kan emellertid endast användas i be- gränsad utsträckning, eftersom den ej är förenlig med lever- och gallsjukdomar, samt tarminflammation och ej kan användas för pati- enter med njurinsufficiens.

Enligt uppfinningen àstadkommes ett förfarande för framställ- ning av en aktiv substans mot litiasis, kännetecknat av att malda frön av bönor från släktet Dolichos extraheras med polära lösnings- medel, valda bland etrar, företrädesvis etyleter, estrar, företrä- desvis etylacetat, ketoner, företrädesvis aceton, alkoholer, före- trädesvis med 1-5 kolatomer eller vatten, blandningar därav eller blandningar därav med vatten i godtyckliga proportioner, varefter extraktet eventuellt utsättes för syrahydrolys med en organisk syra vald bland metan- eller etansulfonsyra,klorerad ättiksyra, citron- syra, vinsyra, propionsyra, mjölksyra eller en mineralsyra vald bland svavelsyra, saltsyra, fosforsyra, klorsyra eller blandningar därav i en koncentration av 0,5 - 25%, företrädesvis 1-5%, varefter syra- hydrolysatet eventuellt extraheras ned lösningsmedel, som ej är bland- bara med vatten, företrädesvis etyleter, etylacetat eller en högre alkohol, varefter det neutraliseras med en koncentrerad lösning av hydroxider av alkalimetaller, jordalkalimetaller eller med ammoniak, 7801520-3 företrädesvis med natrium- eller kaliumhydroxid eller natrium- el- 'ler kaliumkarbonat och eventuellt koncentreras.

Extraktionen utföres företrädesvis i temperaturintervallet från rumstemperatur till lösningsmedlets kokpunkt. Speciellt använ- des blandningar av etylalkohol med vatten.

Undersökningar har visat att extraktet har en -avsevärd in- hiberande förmåga på tillväxt av njursten.

Den sura hydrolysen av extraktet utföres vid en temperatur från rumstemperatur upp till reaktionsblandningens kokpunkt, var- vid, när hydrolysen utföres vid rumstemperatur, den varar 0,5 - 14 dagar, under det att vid förhöjda temperaturer reaktionstiden för- kortas till 0,5 - 8 timmar.

Efter avslutad hydrolys filtreras fällningen eller centrifu- geras, och syrahydrolysatet extraheras antingen med organiska lös- ningsmedel, icke blandbara med vatten, såsom etyleter, etylacetat, kloroform eller högre alkoholer eller neutraliseras direkt till pH 4 - 8. Neutraliseringen av syrahydrolysatet utföres med koncentre- rad lösning av hydroxider eller karbonater av alkalimetaller eller jordalkalimetaller eller med amnnniak, i synnerhet ned natrium- el- ler kaliumhydroxid eller--karbonat. Ett klart hydrolysat erhålles med en körsbärsröd-te-färg, som eventuellt indunstas och ned kända kemiska medel skyddas nnt svamptillväxt eller bakterietillväxt.

I Den erhållna aktiva substansen not litiasis enligt uppfin- 'ningen användes för behandling av nefrolitiasis som den är i form av erhållen lösning eller bearbetas till kända former av farmaceu- tiska medel såsom tabletter, dragëer, pulver, kapslar, granulat, siruper, elixir, lösningar, suspensioner, pastor och emulsioner.

Dessa farmaceutiska medel kan innehålla den aktiva substan- sen, framställd med förfarandet enligt uppfinningen, enbart eller i kombination med farmaceutiskt neutrala och vanligen_använda hjälp- substanser och bärare såsom t.ex; askorbinsyra, ättíksyra, etylal- kohol, glycerol, vatten, talk, laktos, saccaros, sorbit, mjölk- socker, mannit, stärkelse, majsstärkelse, polyvinylpyrrolidon, magnesiumstearat, gelatiner, cellulosaderivat, naturliga oljor, vaxer och liknande.

Dessutom kan beredningarna även innehålla lämpliga konser- veringsmedel, stabiliserande medel, vätmedel, sötningsnedel, snak- förbättrande medel, färgnedel, aromatiska medel och liknande. 5 7801520-3 Läkemedel innehållande den aktiva substansen, framställd en- ligt uppfinningen, verkar effektivt, vilket bevisas med farmakolo- giska undersökningar, inte endast för ínhibering av tillväxten av njursten utan även för att lösa upp sådana stenar. Detta gäller i synnerhet fosfatstenar, som utgör 60 % av alla stenar i människoor- ganismen. Denna verkan gör sig gällande vid administrering till råttor och möss såsom experimentdjur vid dagliga doser, uttryckta i torrvikt på 0,01 - 0,5 g/kg kroppsvikt.

Medlet mot litiasis enligt uppfinningen orsakar, när det ad- ministreras till râttor i en daglig dos om 0,01 g, efter en behand- lingstid av 4 - 5 veckor en minskning av fosfatsten av humant ur- sprung, införd tidigare i råttans blåsa ned till l/5 av dess ur- sprungliga volym, och efter 6 veckor orsakar det fullständig upplös- ning av stenen.

De farmakologiska undersökningarna beträffande akut toxicitet och làngtidstoxicitet har visat att medlet mot litiasis enligt upp- finningen, när det användes för behandling av nefrolitiasis, är ett fullständigt ofarligt läkemedel. Dosen LDEO, beräknat med Karbers metod (L. Ther: Pharmakologische Methoden, Stuttgart, 1949) är 4 g/kg, beräknat med torrvikt.

Vid undersökningar på det centrala nervsystemet visar läkemed- let enligt uppfinningen en lugnande verkan, och det sänker kokainir- ritationen till hälften, bestämd enligt den metod, som beskrives av Modrakowski och Rusiecki (Bull. d. l. Acad. pol. d. Science et d. Lettre 42, 797, 1957).

Dessutom orsakar detta läkemedel inte förändringar i det ar- teriella blodtrycket och andningshastigheten på råttor och kattor, och det påverkar inte muskelstyrkan eller mössens jämvikt. Det har en stark diuretisk verkan, mer än 5 gånger större än standarden, och en saluretisk verkan, och det påverkar inte mängden kolibakterier.

Uppfinningen belyses nu närmare med hjälp av några exempel, som emellertid inte begränsar uppfinningens ram.

A. Exempel på framställning av den aktiva substansen enligt uppfinningen med verkan mot litiasis.

Exempel 1 l00 g korn från foderbönan Dolichos biflorus, siktades genom en sikt med en maskvidd av 0,65 mm extraheras med etyleter i en ___... .__~~_ - V, ___ -_..._.._.._.._...'.«- 7801520-3 à Soxhlet-apparat under 5 timmar. Det erhållna eterextraktet torkas över magnesiumsulfat och indunstas därefter, tills 20g produkt er- hålles i form av en gul olja. Det erhållna extraktet suspenderas i 100 g destillerat vatten, och det administreras i denna form till råttor, vars blåsor tidigare försetts med fosfatsten av humant ur- sprung.

Stark verkan konstaterades i form.av inhibering av stentill- växten i jämförelse med kontrollgruppen.

Exempel 2 0 100 g malda frön av Dolichos-bönor siktas genom en sikt med maskvidded 0,65 mm och extraheras med 1000 ml av en blandning av metylalkohol och vatten i förhållandet l:l (beräknat på volymen) vid blandningens kokpunkt under 5 timmar. Värmningen avbrytes, och det hela får stå l5 timmar, varefter extraktet filtreras, och alko- holen avdrives under sänkt tryck vid en temperatur av 50 - 60 °C, varvid återstoden justeras till den ursprungliga volymen med vatten.

Vattenlösningen surgöres därefter med saltsyra till en 5 %-ig lös- ning. Det hela värmes därefter vid 80° C under l timme och får ky- la. Återstoden filtreras. Ett klart syrahydrolysat erhålles med en körsbärröd-te-rosenröd färg, och ett pH-värde på l - l,2, vilket hydrolysat därefter neutraliseras till pH 5,5 med koncentrerad nat- riumhydroxid. Den bildade fällningen filtreras av, och den klara lösningen stabiliseras genom att 0,02 g inhibitor tillsättes. Det erhållna hydrolysatet bearbetas därefter för framställning av ett läkemedel.

Exempel 5 Det förfarande, som beskrevs i exempel 2, upprepas med den skillnaden att för extraktion av de malda bönfröna användes en blandning av etylalkohol och vatten i en proportion 1:1. Det er- hållna hydrolysatet indunstas till l/4 av sin volym.

Exempel 4 Det förfarande, som beskrevs i exempel 2, upprepas men för extraktion av de malda bönfröna användes lO0 ml vatten. Det erhåll- na hydrolysatet indunstas till en torr massa.

¶'Exempel 5 Förfarandet utföres på samma sätt som i exempel 2 men för 780152043 isyrahydrolysen användes fosforsyra. Det erhållna hydrolysatet in- dunstas till 2/5 av volymen.

Exempel 6 Förfarandet utföres såsom i exempel 4 men det erhållna syra- hydrolysatet extraheras med eter, varefter eterextraktet bearbetas som i exempel 1.

Exempel 7 100 g malda frön från den indiska bönan Dolichos, siktas ge- nom en sikt med maskvidden 0,65 mm och extraheras med 500 ml etylace- tat vid rumstemperatur under 7 dagar. Det erhållna extraktet bear- betas såsom beskrives i exempel l eller indunstas etylacetatet under sänkt tryck och återstoden upparbetas med vatten till den ursprung- liga volymen. Vattenlösningen surgöres med 25 %-ig citronsyra till en l0 %-ig vattenlösning och värmes under kokning, och koktemperatu- ren bibehålles 2 timmar. Efter kylning av syrahydrolysatet tillsät- tes 100 g socker och 0,2 g anisolja, varvid den färdiga formen av den farmaceutiska beredningen erhålles, eller utsattes hydrolysatet för ytterligare bearbetning. För detta ändamål extraheras syrahyd- rolysatet med 500 ml kloroform. Efter avdrivning av kloroformen spädes återstoden i 500 ml vatten och neutraliseras med koncentrerad lösning av kaliumkarbonat till pH 6. Den erhållna lösningen bearbe- tas därefter till en önskad farmaceutisk form.

Exempel 8 100 g malda frön av Dolichos-bönor siktas genom en sikt med maskvidden 0,65 mm och extraheras med 500 ml av en blandning av ace- ton-butylalkohol i volymförhållandet 1:4 vid rumstemperatur. Det erhållna extraktet filtreras, varefter lösningsmedlet indunstas. Återstoden spädes med 500 ml vatten och bearbetas till den önskade farmaceutiska formen eller surgöres vattenlösningen med 15 ml av en blandning av mjölksyra och propionsyra i volymförhàllandet 60:40 och får stå vid rumstemperatur under 15 dagar. Den utfällda återstoden filtreras, och syrahydrolysatet extraheras med etylacetat. Det er- hållna extraktet koncentreras i vakuum till torrhet och spädes där- efter med 500 ml vatten och pH-värdet justeras med kalciumhydroxid till 5,5. Fällningen filtreras och den klara lösningen stabiliseras med 0,15 g av hydroxibensoesyraester. Det erhållna hydrolysatet be- arbetas därefter till den önskade farmaceutiska formen. 7801520-3 Exempel 9 Det förfarande, som beskrivas i exempel 8 upprepas med den skillnaden att det erhållna syrahydrolysatet neutraliseras med am- moníumhydroxid.

B. Exempel på beredningar Exempel 10 Lösning.

Följande komponenter blandas: Extrakt enligt exempel l 982,0 viktdelar 50 % sookerlösning 16,0 -"- Mintolja 0,5 -"- Hydroxibensoesyra 15,0 -"- ' Totalt 1.015,5 viktaelaro Exempel ll Suspension.

Hydrolysat enligt exempel 2 5 982,0 viktdelar Glykol 4,8 -"- Natriumsaltet av karboximetylcellulosa 10,2 -"- Blandning av essentiella oljor 0,5 -"- Hydroxibensoesyraester l -"- Totalt 999,0 viktdelar ' Exempel 12 Tabletter.

Torrt hydrolysat från exempel 4 0,500 viktdelar Magnesiumstearat " 0,045 -"- aEtylcellulosa 0,050 ' -"- Talk 0,015 -"- Etylalkohol 9 0,055 f -"- 0 058 -"- Vatten , Totalt 0,700 viktdelar Den torra massan av hydrolysatet vätes med alkohol och blan- das intensivt med de resterande komponenterna, varefter blandning- en granuleras på känt sätt.. lGranulatet pressas till tabletter med en vikt av 0,? g, som ag 7so152n-3 var och en innehåller 0,5 g torr aktiv substans av medlet mot li- tiasis.

Exempel 15 Pasta.

Koncentrerat hydrolysat från exempel 5 600 viktdelar Gelatin 1,8 -"- Agar-agar 2,? -"- ”n” Hydroxibensoesyra 1,5 -"- Hydrolysatet bringas till en gel med agar-agar genom till- sats av glyoerin och blandas därefter med de återstående komponen- terna. Medlet mot litiasis erhålles i form av en pasta, lämplig för oral administrering. *_ , V - -.._ __..___.. ._.. _ .. ._.._.__._.._-......._.-_-._.~_

Claims (6)

7801520-3 S ,*°- i Patentkrav

1. Sätt att framställa en aktiv substans mot litiasis, k ä n n e t e c k n a t av att malda frön av bönor från släktet Dolicbos extraheras med polära lösningsmedel, valda bland etrar, företrädesvis etyleter, estrar, företrädesvis etylacetat, ketoner, företrädesvis aceton, alkoholer före- trädesvis med 1 - 5 kolatomer eller vatten, blandningar därav eller blandningar därav med vatten i godtyckliga proportioner, varefter extraktet eventuellt utsättes för syrahydrolys med en organisk syra vald bland metan- eller etansulfonsyra,klorerad ättiksyra, citronsyra, vinsyra, propionsyra, mjölksyra eller en mineralsyra vald bland svavelsyra, saltsyra, fosforsyra, klorsyra eller blandningar därav i en koncentration av 0,5 = 25 %, företrädesvis 1 - 5 %, varefter syrahydrolysatet eventuellt extraheras med lösnings- medel, som ej är blandbara med vatten företrädesvis etyl- eter, etylacetat eller en högre alkohol, varefter det neu- traliseras med en koncentrerad lösning av hydroxider av alkalimetaller, jordalkalimetaller eller med ammoniak, före- trädesvis med natrium- eller kaliumhydroxid eller natrium- eller kaliumkarbonat och eventuellt koncentreras.

2. Sätt enligt krav 1, k ä n n e_t e c k n a t av att en blandning av vatten med etylalkohol användes.

3. Sätt enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t av att extraktionen av frön utföres i ett temperaturintervall från rumstemperatur till lösningsmedlets kokpunkt.

4. Sätt enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t av att hydrolysen utföres i temperaturintervallet från rumstempera- tur till reaktionsblandningens kokpunkt.

5. Sätt enligt krav 1 och/eller 4, k ä n n e t e c k n a t av att hydrolysen utföres under 0,5 - 8 timmar under förhöjd temperatur.

6. Sätt enligt krav 1 och/eller 4, k ä n n e t e c k n a t att att hydrolysen utföres vid rumstemperatur under 0,5 - 14 "dagar.