SA519410448B1 - مركب إنسولين معالج بأسيل - Google Patents
مركب إنسولين معالج بأسيل Download PDFInfo
- Publication number
- SA519410448B1 SA519410448B1 SA519410448A SA519410448A SA519410448B1 SA 519410448 B1 SA519410448 B1 SA 519410448B1 SA 519410448 A SA519410448 A SA 519410448A SA 519410448 A SA519410448 A SA 519410448A SA 519410448 B1 SA519410448 B1 SA 519410448B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- compound
- insulin
- receptor
- acid
- human insulin
- Prior art date
Links
- -1 Acylated insulin compound Chemical class 0.000 title claims description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 65
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 11
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 11
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 10
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 10
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 6
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims description 5
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 claims description 5
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims description 2
- 101100516806 Caenorhabditis elegans nog-1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims 1
- 239000011800 void material Substances 0.000 claims 1
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical class N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 98
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 abstract description 25
- 239000008103 glucose Substances 0.000 abstract description 25
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 18
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 18
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 abstract description 13
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 abstract description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 48
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 48
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 48
- GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N (2S,3R)-N-[(2S)-3-(cyclopenten-1-yl)-1-[(2R)-2-methyloxiran-2-yl]-1-oxopropan-2-yl]-3-hydroxy-3-(4-methoxyphenyl)-2-[[(2S)-2-[(2-morpholin-4-ylacetyl)amino]propanoyl]amino]propanamide Chemical compound C1(=CCCC1)C[C@@H](C(=O)[C@@]1(OC1)C)NC([C@H]([C@@H](C1=CC=C(C=C1)OC)O)NC([C@H](C)NC(CN1CCOCC1)=O)=O)=O GHYOCDFICYLMRF-UTIIJYGPSA-N 0.000 description 46
- 229940125797 compound 12 Drugs 0.000 description 45
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 description 35
- 101000976075 Homo sapiens Insulin Proteins 0.000 description 31
- IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N (3S,8S,10R,13S,14S,17S)-17-isoquinolin-7-yl-N,N,10,13-tetramethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-amine Chemical compound CN(C)[C@H]1CC[C@]2(C)C3CC[C@@]4(C)[C@@H](CC[C@@H]4c4ccc5ccncc5c4)[C@@H]3CC=C2C1 IWZSHWBGHQBIML-ZGGLMWTQSA-N 0.000 description 28
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 19
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 19
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- FYZPCMFQCNBYCY-WIWKJPBBSA-N Insulin degludec Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@@H]2NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc3c[nH]cn3)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc3ccccc3)C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc3c[nH]cn3)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](Cc3ccc(O)cc3)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](Cc3ccc(O)cc3)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](Cc3ccc(O)cc3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](Cc2ccccc2)C(=O)N[C@@H](Cc2ccccc2)C(=O)N[C@@H](Cc2ccc(O)cc2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N2CCC[C@H]2C(=O)N[C@@H](CCCCNC(=O)CC[C@H](NC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O)C(O)=O)C(O)=O)NC1=O)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC FYZPCMFQCNBYCY-WIWKJPBBSA-N 0.000 description 18
- 108010050259 insulin degludec Proteins 0.000 description 18
- 229960004225 insulin degludec Drugs 0.000 description 16
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 15
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 101000852815 Homo sapiens Insulin receptor Proteins 0.000 description 10
- 102000047882 human INSR Human genes 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 7
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 7
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 7
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical group Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000003746 Insulin Receptor Human genes 0.000 description 6
- 108010001127 Insulin Receptor Proteins 0.000 description 6
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-diisopropylethylamine Substances CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 6
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 6
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 6
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 6
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 6
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 6
- 101000599951 Homo sapiens Insulin-like growth factor I Proteins 0.000 description 5
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 5
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 4
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ATHHXGZTWNVVOU-UHFFFAOYSA-N N-methylformamide Chemical compound CNC=O ATHHXGZTWNVVOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 4
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O pyridinium Chemical compound C1=CC=[NH+]C=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 3
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010017622 Somatomedin Receptors Proteins 0.000 description 3
- 102000004584 Somatomedin Receptors Human genes 0.000 description 3
- 102000013275 Somatomedins Human genes 0.000 description 3
- 241000375392 Tana Species 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 125000005519 fluorenylmethyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 3
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 3
- 230000002608 insulinlike Effects 0.000 description 3
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol Chemical compound FC(F)(F)C(O)C(F)(F)F BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SYOANZBNGDEJFH-UHFFFAOYSA-N 2,5-dihydro-1h-triazole Chemical compound C1NNN=C1 SYOANZBNGDEJFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RUVRGYVESPRHSZ-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2-azaniumylethoxy)ethoxy]acetate Chemical compound NCCOCCOCC(O)=O RUVRGYVESPRHSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108010004460 Gastric Inhibitory Polypeptide Proteins 0.000 description 2
- 102100039994 Gastric inhibitory polypeptide Human genes 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 101710118538 Protease Proteins 0.000 description 2
- 101150107869 Sarg gene Proteins 0.000 description 2
- 229940123464 Thiazolidinedione Drugs 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N alloxan Chemical compound O=C1NC(=O)C(=O)C(=O)N1 HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 2
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 2
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000002270 exclusion chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 2
- 102000044162 human IGF1 Human genes 0.000 description 2
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PXZWGQLGAKCNKD-DPNMSELWSA-N molport-023-276-326 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)[C@@H](C)O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 PXZWGQLGAKCNKD-DPNMSELWSA-N 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000002821 scintillation proximity assay Methods 0.000 description 2
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 150000001467 thiazolidinediones Chemical class 0.000 description 2
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- 229940053890 zanosar Drugs 0.000 description 2
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 1,4-bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate Chemical compound CCCCC(CC)COC(=O)CC(S(O)(=O)=O)C(=O)OCC(CC)CCCC HNSDLXPSAYFUHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150072531 10 gene Proteins 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004042 4-aminobutyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 1
- RXKGHZCQFXXWFQ-UHFFFAOYSA-N 4-ho-mipt Chemical compound C1=CC(O)=C2C(CCN(C)C(C)C)=CNC2=C1 RXKGHZCQFXXWFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 101100098918 Arabidopsis thaliana TFCA gene Proteins 0.000 description 1
- ZNSMNVMLTJELDZ-UHFFFAOYSA-N Bis(2-chloroethyl)ether Chemical compound ClCCOCCCl ZNSMNVMLTJELDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- 229940124213 Dipeptidyl peptidase 4 (DPP IV) inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101100234002 Drosophila melanogaster Shal gene Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 102000018711 Facilitative Glucose Transport Proteins Human genes 0.000 description 1
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 1
- 108091052347 Glucose transporter family Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010009202 Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000009465 Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 101001034652 Homo sapiens Insulin-like growth factor 1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000610640 Homo sapiens U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000917703 Leia Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 240000000233 Melia azedarach Species 0.000 description 1
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 102400000319 Oxyntomodulin Human genes 0.000 description 1
- 101800001388 Oxyntomodulin Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 241001377010 Pila Species 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 101001110823 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-A Proteins 0.000 description 1
- 101000712176 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-B Proteins 0.000 description 1
- 244000166071 Shorea robusta Species 0.000 description 1
- 235000015076 Shorea robusta Nutrition 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 102100040374 U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Human genes 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 108091005764 adaptor proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035181 adaptor proteins Human genes 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000010426 asphalt Substances 0.000 description 1
- 230000035578 autophosphorylation Effects 0.000 description 1
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- ZXZYMQCBRZBVIC-UHFFFAOYSA-N bis(2-ethylhexyl) phenyl phosphate Chemical compound CCCCC(CC)COP(=O)(OCC(CC)CCCC)OC1=CC=CC=C1 ZXZYMQCBRZBVIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 1
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000001085 differential centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000003603 dipeptidyl peptidase IV inhibitor Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000013265 extended release Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 230000004992 fission Effects 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- WNRQPCUGRUFHED-DETKDSODSA-N humalog Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1.C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 WNRQPCUGRUFHED-DETKDSODSA-N 0.000 description 1
- 229940038661 humalog Drugs 0.000 description 1
- MGXWVYUBJRZYPE-YUGYIWNOSA-N incretin Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 MGXWVYUBJRZYPE-YUGYIWNOSA-N 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000004026 insulin derivative Substances 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 230000004155 insulin signaling pathway Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 238000007477 logistic regression Methods 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- RIVIDPPYRINTTH-UHFFFAOYSA-N n-ethylpropan-2-amine Chemical compound CCNC(C)C RIVIDPPYRINTTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000422 nocturnal effect Effects 0.000 description 1
- 235000020925 non fasting Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- BNJOQKFENDDGSC-UHFFFAOYSA-N octadecanedioic acid Natural products OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O BNJOQKFENDDGSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 229940121365 oxyntomodulin analogues Drugs 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 238000013310 pig model Methods 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N preproglucagon 78-108 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 125000001453 quaternary ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000003653 radioligand binding assay Methods 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013222 sprague-dawley male rat Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000012281 transfemoral cerebral angiography Methods 0.000 description 1
- 238000001323 two-dimensional chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
- A61K47/542—Carboxylic acids, e.g. a fatty acid or an amino acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
يتعلق الاختراع الحالي بمركبات موصوفة تتعلق بعلاج داء السكري diabetes و/أو فرط السكر بالدم hyperglycemia. على نحو أكثر تحديدًا، تتعلق المركبات الموصوفة بمركبات إنسولين معالجة بأسيل acylated insulin compounds تقلل جلوكوز الدم blood glucose، تركيبات صيدلية pharmaceutical compositions تحتوي على هذه المركبات، الاستخدامات العلاجية لهذه المركبات، ومركب وسيط intermediate compound يستخدم لتصنيع مركبات الإنسولين المعالجة بأسيل.
Description
مركب إنسولين معالج بأسيل ACYLATED INSULIN COMPOUND الوصف الكامل
خلفية الاختراع
يتعلق الاختراع الحالي بمجال علاج داء السكري diabetes و/أو فرط السكر بالدم
hyperglycemia يتعلق الاختراع بمركبات تقلل جلوكوز الدم blood glucose تركيبات صيدلية
pharmaceutical compositions تحتوي على هذه المركبات والاستخدامات العلاجية لهذه
5 المركبات.
يمكن أن يعادل العلاج باستبدال الإنسولين Insulin replacement therapy لمرضى السكري بشكل
مثالي بأكبر قدر ممكن نمط إفراز الإنسولين داخلي المنشأ endogenous insulin في الأشخاص
الأصحاء. يمكن فصل الحاجة الفسيولوجية للإنسولين إلى مرحلتين: (أ) مرحلة امتصاص العناصر
الغذائية nutrient absorptive phase التي تتطلب حلقة من الإنسولين للتخلص من ارتفاع جلوكوز 0 الدم المرتبط بالوجبة؛ المعروف أيضًا باسم إنسولين “prandial” insulin " ASF و(ب) مرحلة ما
بعد الامتصاص التي تتطلب توصيل مستدام للإنسولين لتنظيم مخرجات الكبد من الجلوكوز
optimal fasting blood أمثل بالدم pila للحفاظ على معدل جلوكوز hepatic glucose output
“basal” insulin باسم إنسولين 'قاعدي" Lad يعرف cglucose
يمكن أن يضم العلاج الفعال بالإنسولين Effective insulin therapy للأشخاص المصابين بداء السكري بصفة عامة استخدام مجمع لنوعين من صيغ الإنسولين خارجية المتقاًً exogenous
«mealtime prandial insulin سريعة المفعول»؛ إنسولين أكلي بوقت الوجبة insulin formulations
وإنسولين قاعدي أطول Yinka يتم إعطاءه مرة أو مرتان Ug للتحكم في مستويات جلوكوز الدم
بين الوجبات. تتضمن واحدة أو أكثر من خصائص الإنسولين داخلي المنشاً التي يمكن أن تكون
مرغوب فيها للمحاكاة ألفة ارتباط لمستقبلات الإنسولين البشري <human insulin receptors 0 تفضيل الارتباط بمستقبلات الإنسولين البشري عن مستقبل عامل النمو الذي شبيه الانسولين 1
phosphorylation البشري؛ المعالجة بفسفوريل (IGF-1) Insulin-like growth factor 1
لمستقبلات الإنسولين البشري؛ وخفض الجلوكوز في الدم.
ينبغي أن يوفر إنسولين قاعدي خارجي المنشاً exogenous basal insulin مرغوب فيه أيضًا تأثير
ممتد--أي؛ سوف يتحكم في مستويات جلوكوز الدم لعلى الأقل 12 ساعة؛ وعلى نحو مفضل لمدة 4 ساعة أو أطول» دون خطر كبير من نقص سكر الدم 76©(:18اع00:. يكون لبعض أنواع الإنسولين القاعدي مدة تأثير 24 ساعة أو أكثر. يمكن أن يخفض مركب ممتد المفعول؛ دون تغيرات كبيرة في الفاعلية أثناء هذا الوقت؛ خطر نقص سكر الدم الليلي وسمح بتنوع كبير في أوقات تناول الجرعات اليومي دون زيادة خطر نقص سكر الدم لدى المريض. تتضمن خصائص إنسولين قاعدي خارجي المنشاً والتي يمكن أن تكون مرغوب فيها انخفاض معدل تصفية من مجرى الدم bloodstream والثبات الكيميائي عند العديد من التركيزات؛ وهو ما يمكن أن يسهم في تمديد الثبات أثناء مدة التخزين. هناك حاجة إلى علاجات بديلة لداء السكري و/أو فرط السكر بالدم في المرضى الذين بحاجة لذلك. تكون بعض مركبات الإنسولين المعالجة بأسيل acylated insulin compounds معروفة؛ انظر» على سبيل المثال» براءة الاختراع الأمريكية رقم 6.444.641 وبراءة الاختراع الأمريكية رقم 2 لكن يوجد حاجة إلى علاجات بديلة إضافية. يوفر الاختراع الحالي مركب مفيد في علاج داء السكري؛ يخفض هيموجلويين hemoglobin Alc Alc ويخفض مستويات جلوكوز الدم في المرضى الذين بحاجة لذلك. يتم تصنيع المركبات الحالية Lad باستخدام مركب جديد؛ 5 1 الموصوف أدناه . الوصف العام للاختراع يتضمن الاختراع Jad) مركب له الصيغة (الصيغة ]): Nit, ) ad 0 عي HO oF 1 0 ل 1 أ اا لس iil ary بي را ييح 7< زوين زيم < اي ا الست نلا « لاا a on ات د a 8 0 i Hoo oo J ب 1 OF OH و« HN ب G 0/8605 0513 LENYC Xaa A سر ا FUNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTP ب حيث تكون Xaa عبارة عن جلايسين glycine أو أسبارجين asparagine لحمض أميني amino acid 0
يكون المركب له الصيغة 1 عبارة عن مركب إنسولين يتكون من سلسلة )1( بمتوالية الحمض الأميني من المتوالية رقم: 1 وسلسلة (ب) بمتوالية الحمض الأميني من المتوالية رقم: 4 حيث توجد رابطة (gla سلفيد disulfide bond بين سيستين cysteine عند الموضع 6 من المتوالية رقم: وسيستين عند الموضع 11 من المتوالية رقم: 1؛ توجد رابطة داي سلفيد بين سيستين عند الموضع 7 من المتوالية رقم: 1 وسيستين عند الموضع 7 من المتوالية رقم: od توجد رابطة داي سلفيد بين سيستين عند الموضع 20 من المتوالية رقم: 1 ويتم تعديل سيستين عند الموضع 19 من المتوالية رقم: 4؛ ولايسين lysine عند الموضع 29 من السلسلة (ب) (المتوالية رقم: 4) كيميائيًا بواسطة تشكيل رابطة أميد amide bond بين مجموعة إيبسلون- أمينو epsilon-amino group من السلسلة الجانبية للايسين lysine side-chain وكريوكسيلات حرة free carboxylate من حمض 2- [2-(2-أمينو إيثوكسي)إيثتوكسي]أسيتيك (AEEA) 2-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]acetic acid مع «OH-C18-yGlu-yGlu-Lys-(AEEA)- حيث تكون (OH-C18) عبارة عن حمض أوكتاديكانيدايويك coctadecanedioic acid تكون (yGlu) عبارة عن حمض ,1-جلوتاميك L- glutamic acid متصل عبر مجموعة جاما كريوكسيل بسلسلته الجاتبية side-chain gamma carboxyl group وتكون AEEA عبارة عن حمض 2[1-2-(2-أمينو Ss) )إيثوكسي]أسيتيك . 5 تتحتوي البنية أعلاه؛. الصيغة 1 على أكواد حمض أميني من حرف واحد قياسي للوحدات البنائية للحمض الأميني amino acid residues للسلسة 0 و(ب) من الإنسولين؛ باستثناء الوحدة البنائية 9 من السلسلة (ب)؛ التي تكون لايسين؛ حيث تم تمديد بنية الوحدة البنائية للحمض الأميني المذكورة. تتضمن المركبات الحالية كذلك المركب 12 الذي له بنية لها الصيغة 1 وحيث تكون She Xa 0 عن جلايسين لحمض أميني camino acid glycine تتضمن المركبات الحالية كذلك المركب 19؛ الذي له بنية لها الصيغة 1 وحيث تكون Xaa عبارة عن أسبارجين حمض أميني amino acid .asparagine يوفر الطلب الحالي Lad تركيبة صيدلية pharmaceutical composition تشتمل على المركب له الصيغة ]؛ المركب 12 أو المركب 19 وواحد أو أكثر من السواغات المقبولة Waa pharmaceutically acceptable excipients 5 يوفر الطلب الحالي كذلك طريقة لعلاج داء السكري في مريض تشتمل على إعطاء إلى مريض في حاجة لذلك كمية فعالة من المركب الذي له الصيغة
I المركب 12 أو المركب 19 أو تركيبة صيدلية تشتمل على المركب الذي له الصيغة ]؛ المركب 12؛ أو المركب 19. يوفر الطلب الحالي طريقة لعلاج فرط السكر بالدم في مريض تشتمل على إعطاء إلى مريض في حاجة لذلك كمية فعالة من المركب الذي له الصيغة of المركب 12؛ أو المركب 19 أو تركيبة صيدلية تشتمل على المركب الذي له الصيغة oJ المركب 12 أو المركب 19. يوفر الطلب الحالي Lad مركب له الصيغة oJ المركب 12؛ أو المركب 19 للاستخدام في العلاج. يوفر الطلب الحالي كذلك مركب له الصيغة of المركب 12؛ أو المركب 19 للاستخدام في علاج داء السكري أو علاج فرط السكر بالدم. يوفر الطلب الحالي مركب؛ المركب (أ)؛ له الصيغة: MHEo: بل o_o . J . ا 1 " = ; وم Yoyo dani dd ore [7 وميم A 10 . يوفر الطلب الحالي أيضًا استخدام المركب )1( في تصنيع دواء لعلاج داء السكري و/أو فرط السكر بالدم. يوفر الطلب الحالي كذلك استخدام المركب (أ) في تحضير أو تصنيع مركب له الصيغة oT المركب 12؛ أو المركب 19. يكون لمركبات الاختراع الحالي معدل تصفية Und من أنواع الإنسولين المعالجة بأسيل acylated insulins 5 المعروفة؛ مثل الإنسولين ديجلوديك cinsulin degludec وهو ما يمكن أن يحسن التوافر الحيوي؛ يحقق سمات حركية دوائية أكثر GLE في البشر بمرور الوقت و/أو يزيد مدة تأثير المركب في داخل جسم الكائن الحي ٠ أيضاء تظهر مركبات الاختراع الحالي معدل تحلل كيميائي chemical degradation rate منخفض؛ مما يدل على أنها تتسم بزيادة في الثبات الكيميائي» (Sarg أن تحقق عمر تخزين أطول من أنواع الإنسولين المعالجة بأسيل المعروفة؛ مثل الإنسولين ديجلوديك. 0 الوصف التفصيلي يشير المصطلح 'يعالج" أو ze’ كما هو مستخدم هنا إلى إدارة Als ورعاية مريض يعاني من
داء السكري أو فرط السكر بالدم» أو dla مرضية أخرى يتم وصف تناول الإنسولين لها بغريض مكافحة أو تخفيف الأعراض symptoms والمضاعفات الخاصة بتلك الحالات المرضية. يكون
المريض المراد علاجه حيوان؛ وعلى نحو مفضل بشر. كما هو مستخدم هناء يشير المصطلح "كمية فعالة" إلى كمية أو جرعة من مركب الاختراع الحالي أو تركيبة صيدلية تحتوي على مركب الاختراع الحالي؛ والتي عند إعطاء جرعة مفردة أو عدة جرعات منها إلى المريض أو الخاضع للعلاج» سوف تظهر استجابة حيوية أو طبية للتأثير العلاجي therapeutic effect أو التأثير العلاجي المرغوب فيه على نسيج dtissue جهاز بالجسم؛ حيوان؛ كائن ثديي أو بشر يركز عليه الباحث؛ الطبيب البيطري؛ الطبيب البشري أو متخصص طبيب آخر. يمكن أن تتضمن جرعة deja تحميل أولية عالية higher initial loading dose يتبع
0 ذلك جرعة أقل. تشير المصطلحات "المريض؛' "الخاضع "or Dall و'الفرد؛" المستخدمة تبادليًا هناء إلى حيوان؛ على نحو مفضل تشير المصطلحات إلى البشر. في معينة التجسيدات؛ يتسم المريض؛ على نحو مفضل بشرء كذلك بالإصابة بمرض أو اضطراب أو حالة مرضية يمكن أن تستفيد من خفض مستويات الجلوكوز في الدم.
5 يمكن إعطاء التركيبات الصيدلية التي تشتمل على المركب للاختراع الحالي عن طريق غير القناة الهضمية parenterally إلى المرضى الذين بحاجة إلى هذا العلاج. يمكن shal الإعطاء عن طريق غير القناة الهضمية بواسطة الحقن تحت الجلد subcutaneous في العضل intramuscular أو داخل الوريد intravenous بواسطة محقنة syringe اختياربًا محقنة تشبه القلم pen-like csyringe أو حاقن يعمل ميكانيكبًا driven injector ل0160080108. على نحو «day يمكن إجراء
الإعطاء عن طريق غير القناة الهيضمية parenteral administration بواسطة مضخة تسريب .infusion pump توفر تجسيدات الاختراع الحالي تركيبات صيدلية مناسبة للإعطاء إلى مريض تشتمل على إعطاء إلى مريض في dala لذلك كمية فعالة علاجيًا من مركب الاختراع الحالي وواحد أو أكثر من السواغات المقبولة صيدليًا. يمكن تحضير هذه التركيبات الصيدلية بواسطة أي من مجموعة متنوعة
من التقنيات التي تستخدم السواغات التقليدية للمنتجات الصيدلية المعروفة جيدًا في المجال. Remington’s Pharmaceutical Sciences, 21st Edition, University of the Sciences in )
(Philadelphia, Philadelphia, PA, USA (2006) . يمكن استخدام المركبات المذكورة في جوانب الاختراع المحدد بعناصر الحماية في توليفة متزامنة؛ منفصلة أو تتابعية مع واحد أو أكثر من العوامل العلاجية therapeutic agents الإضافية المفيدة لعلاج داء السكري و/أو الحالات المرضية المرتبطة بداء السكري. تتضمن الأمثلة غير الحصرية على العوامل العلاجية الإضافية التي يمكن دمجها مع المركبات المذكورة في جوانب الاختراع المحدد بعناصر الحماية: الإنسولين أو نظائر الإنسولين؛ مركبات باي جوائنيد tbiguanides مركبات سلفونيل ¢sulfonylureas Lys: مركبات ثيازوليدين دايون ¢thiazolidinediones مثبطات inhibitors داي ببتيديل ببتيداز -4 ¢("DPP-4") dipeptidyl peptidase-4 مثبطات نواقل الجلوكوز المعتمدة على الصوديوم (SGLT2) sodium-dependent glucose transporter ؛ مركبات أنكرتين incretin compounds 0 مثل ببتيد يشبه جلوكاجون-1 (GLP-1) glucagon-like-peptide-1 أو نظائر ببتيد يشبه جلوكاجون-1؛ بولي ببتيد متبط معوي (GIP) gastric inhibitory polypeptide أو نظائر بولي ببتيد متبط معوي» أوكسينتومودولين oxyntomodulin أو نظائر أوكسينتومودولين؛ أو توليفات من أي من العوامل السابقة. يمكن إعطاء المركبات المذكورة في جوانب الاختراع المحدد بعناصر الحماية وعامل (عوامل) علاجي إضافي Lie Lf عبر نفس طريقة التوصيل 5 والجهاز مثل حبة دواء مفردة؛ (Agus قرص» أو صيغة قابلة للحقن ¢injectable formulation أو يتم إعطاءها بشكل منفصل إما في نفس الوقت في أجهزة أو طرق توصيل منفصلة؛ أو يتم إعطاءها تتابعيًا. تم إنتاج واحد من مركبات الإنسولين المعالجة بأسيل المذكورة في جوانب الاختراع المحدد بعناصر الحماية » المركب 12( بواسطة معالجة انتقائية بأسيل لمجموعة إيبسلون أمينو LysB29 0 بالإنسولين 8216 (الإنسولين البشري حيث يتم استبدال الحمض الأميني 21 بسلسلة الإنسولين A insulin A chain بجلايسين؛ الإنسولين (A21G مع مركب وسيط من حمض دهني رابط linker- «C18-OtBu-yGlu(OtBu)-yGlu(OtBu)-Lys(Boc)-AEEA-OH :fatty acid intermediate حيث تكون (CI18-OtBu) عبارة عن حمض 18-تيرت-بيتوكسي -18 - أوكسو — أوكتاديكانيدايويك ¢18-tert-butoxy-18-0x0- octadecanedioic acid تكون 610 عبارة عن حمض ,1-جلوتاميك متصل عبر مجموعة جاما كريوكسيل بسلسلته الجانبية؛ وتكون AEEA عبارة عن حمض 2-[2- (2-أمينو إيثوكسي)إيثوكسي]أسيتيك.
حدث إنتاج الجزيء على ثلاث مراحل رئيسية: 1( إنتاج الإنسولين 8216» 2) تخليق المركب الوسيط من الحمض الدهني الرابط» و3) المعالجة بأسيل؛ نزع الحماية؛ التنقية وتبادل الأملاح لعزل المركب 12. يمكن تحضير جزء الإنسولين بالمركبات الحالية بواسطة مجموعة متنوعة من التقنيات المعروفة الصاحب المهارة في المجال مثل من خلال إنتاج جزيء بروتين بادئ precursor protein molecule باستخدام تقنيات الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين Deoxyribonucleic acid (DNA) الناتج عن عودة الارتباط الجيني .recombinant يمكن أن يكون الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين ؛ الذي يتضمن الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين complementary (cDNA) Deoxyribonucleic acid والحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين التخليقي» مزدوج 0 الجديلة أو مفرد الجديلة. يمكن أن تتنوع متواليات التشفير coding sequences التي ol جزيء البروتين البادئ الموصوف هنا ونتيجة لتكرار أو تطابق الكود الوراثي genetic code يمكن إدخال الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين في خلية عائلة لإنتاج البروتين البادئ Uy للاختراع الحالي. تتم إصابة خلية عائلة host cell ملاءمة بالعدوى إما بشكل مؤقت أو بشكل ثابت أو تحويلها باستخدام نظام تعبير لإنتاج البروتين البادئ. يمكن أن تكون الخلايا العائلة host cells خلايا بكتيرية bacterial cells مثل K12 أو سلالات B من «Escherichia coli خلايا فطرية fungal cells مثل WIA خميرة cyeast cells أو خلايا Jie mammalian cells dui خلايا مبيض هامستر صيني -("CHO") Chinese hamster ovary تكون نواقل التعبير الوراثي expression vectors قابلة للنسخ نمطيًا في الكائنات الحية العائلة إما كجسيمات كروموسومية episomes أو كجزءِ مدمج من الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين الكروموسومي العائل. عادة؛ سوف تحتوي نواقل التعبير Shel على مرقمات oli) على سبيل JU تترا سيكلين ctetracycline نيومايسين cneomycin وداي هيدرو فولات رديوسيداز cdihydrofolate reductase للسماح باختيار تلك LIAN المحولة باستخدام متواليات الحمض النووي الريبوزي متقوص الأكسجين المرغوب فيها. يمكن تحضير المركبات الحالية بواسطة مجموعة متنوعة من الإجراءات المعروفة في المجال؛ 5 بالإضافة إلى تلك الطرق الموصوفة أدناه. يمكن دمج خطوات تخليق محددة لكل من الطرق الموصوفة بطرق مختلفة لتحضير المركبات الموصوفة هنا. تم تحضير المركب 19 بطريقة
٠ 9 ٠ ع ع 2 A) : الصلب كما J باستخدام التخلية of) أدناه» المركب
Tage - 2 م T T ; 0 ممق 00 رب و 1 © . لز 1 i 1 3 ٍِ خا لد ال ند اد ا صن اص 0 ص Lo i tog yr 8 “ اساي احص N مد سي N و حاص ّ I 6 8 Ci | 8 0ت ©
DFO Rd
FN ang ع المركب (أ) ابا اا ل لمج رن ا ع الي مي يض تلن بويع 7 1 I< Le Hae EEN ARC i Wo
Feroo AERA ب VGA بي مع * DAFF ERC بي + Soe Sn Ga, HAT,
Even. veins لخر ا ode B LARA, LH i
ESE ان HY Ley, DME fa ل Sethe Friis SNS RENE NR ا ts ad ha! EH ار ااا ااانا ©. DMF fog HE الا ناا Tr Broach Cie, HATS ١ اس ا GRA GE 0 م EDT pa ae
Legos N = 2 TAT,
LR, OME “fe Pla 5.0 ees”
SY ow م ؟ 8 رمي كأ حا ل لصحن حي حي حي مج pt NE o 8 Pada MOG Ya a wf مي م حال 4 HN - LTTE أ a
TYAS دا + NERO Se ممم ممست يف3 قي لاع توا ملح Nilay م ص 7 > © يم و 3 by 8 ل EN 0 A, a in برشي ا لضو د
O 8 ب obo MG ts pe
الرسم التخطيطي لتخليق المركب (أ) (تدل "PS" على دعم بوليمري (polymer support يوجد احتمال لإنتاج المركب (أ) باستخدام طرق طور المحلول solution phase فقط أو في توليفة مع طرق الطور الصلب والتي يمكن أن تكون أكثر قابلية للقياس. يتم إجراء ترافق جزيء الحمض الدهني الرابط مع الإنسولين 8216 في مذيب عضوي organic solvent (/1-ميثيل -2-بيروليدون (DMSO) dimethyl sulfoxide داي ميثيل سلفوكسيد / (NMP) N-methyl-2-pyrrolidone نتيجة لقابلية ذويان الحمض الدهني الرابط الذي أساسه حمض أميني المحمي protected amino 0 بتيرت - بيوتيل أوكسي كريونيل tert-butyloxycarbonyl "502" / إسترات تيرت -بيوتيل tert- tBu’ butyl esters مع ذلك؛ يمكن ابتكار مخططات حماية/نزع الحماية بديلة لجعل الحمض 0 الدهني الرابط قابل للذويان في محلول aqueous solution (Sle للحد من استخدام المذيبات العضوية -organic solvents بالمثل» يزيل AT تحول كيميائي مجموعات الحماية تيرت-بيوتيل أوكسي كربونيل/إسترات تيرت- بيوتيل باستخدام حمض تراي فلورو أسيتيك (TFA) trifluoroacetic acid يمكن ابتكار استراتيجية حماية/نزع الحماية بديلة لظروف الانشطار الأخف. 5 يتم إنتاج المركب (أ) بواسطة Galas ببتيد في الطور الصلب solid-phase peptide يتم خلط فلوربنيل ميثيل أوكسي كريوثيل (OH—(Boc)Lys—(Fmoc)) Fluorenylmethyloxycarbonyl (1430 مجم؛ 3 مللي مول ؛ 2 مكافئ نسبة إلى الراتتج ¢resin رقم كتالوج Novabiochem 2)م)) مع -١ ابيس اي ميثيل أمينو )ميثيلين]- 1-H 2 3-ترايازولو[4» 0-5 ]بيريدنيوم 3-أكسيد هكسا فلورو فوسفات 1-[Bis(dimethylamino)methylene]-1H-1,2,3-triazolo[4,5- (HATU) b]pyridinium 3-oxid hexafluorophosphate 0 )1150 مجم؛ 3 (Ae مول؛ 2 مكافئ نسبة إلى الراتنج؛ رقم كتالوج Oakwood Chemical 023926) وا 7١-داي أيزو بروبيل إيثيل أمين (DIEA) N,N-Diisopropylethylamine )1333 ميكرو لترء 7.6 مللي مول؛ 5 مكافئ) في 10 ملليلتر من داي ميثيل فورماميد (DMF) dimethylformamide لدقيقتين ثم نقلها إلى وعاء يحتوي على راتنج حمض 21-2-(2-أمينو إيثوكسي)إيثوكسي]أسيتيك- 2-11-كلورو تراتيل- 2.11) H-2-[2-(2-aminoethoxy)ethoxylacetic acid-2-chlorotrityl-chloride resin كلوريد 5
RHX- هو Peptides International مللي مول؛ رقم كتالوج 1.52 can مول/ (Me 0.72 can
¢(11074-PI الذي تم تنفخه سابقًا في داي كلورو ميثان (DCM) dichloromethane وغسله مسبقًا
بداي ميثيل فورماميد.
يتم خلط الملاط slurry لمدة 1.5 ساعة؛ ترشيحه ويتم غسل الراتنج جيدًا بداي ميثيل فورماميد
(اختبار Kaiser سلبي). تتم إزالة مجموعة الحماية فلورينيل ميثيل أوكسى كريونيل (Fmoc) fluorenylmethyloxycarbonyl protecting group 5 بواسطة dallas الراتنج بنسبة 720
من بيبريدين 010©:0:06/داي ميثيل فورماميد )10 ملليلتر؛ 30 دقيقة). بعد غسل الراتتنج بداي
ميثيل فورماميد (40 ملليلتر)؛ اختبار Kaiser إيجابي لتوفير راتنج من 11:1 :جآا(80)- 2-[2-
(2- أمينو إيثوكسي)إيثوكسي]|أسيتيك-2-كلورو تراتيل-كلوريد HON-Lys(Boc)- 2-]2-)2-
Me 1.52( aminoethoxy)ethoxylacetic acid -2-chlorotrityl-chloride resin مول نظريًا).
10 يتم تنشيط OtBu~Glu~Fmoc )1297 مجم» 3.0 مللي مول»؛ 2.0 مكافئ»؛ رقم كتالوج Ark Pharma هو (AK-48532 مسبقًا )2 دقيقة) ب 1-[بيس(داي ميثيل أمينو )ميثيلين]- dH 2؛ 3-ترايازولو[4؛ 0-5]بيريدنيوم 3-أكسيد هكسا فلورو فوسفات )1153 مجم؛ 3 مللي مول؛ 2 مكافئ) باستخدام SIN iN أيزو بروييل إيثيل أمين كقاعدة )1333 ميكرو لترء 7.7 مللي مول 0 مكافئ) في 10 ملليلتر من داي ميثيل فورماميد؛ ثم نقله إلى الراتنج. يتم خلط الملاط لمدة 3
5 ساعات؛ ترشيحه؛ وغسل الراتنج جيدًا بداي ميثيل فورماميد (اختبار Kaiser سلبي). تتم إزالة مجموعة الحماية فلورينيل ميثيل أوكسى كريونيل بواسطة معالجة الراتنج بنسبة 720 من بيبريدين/داي ميثيل فورماميد (10 ملليلتر» 30 دقيقة) يتبع ذلك غسل الراتنج بداي ميثيل فورماميد )40 ملليلتر؛ اختبار Kaiser إيجابي). يتم Fmoce-Glu-OtBu (hal ثاني بالراتنج بواسطة تكرار الظروف أعلاه باستخدام وقت إقران مدته 1.5 ساعة.
0 بعد A) آخر مجموعة الحماية فلورينيل ميثيل أوكسى كربونيل؛ يتم تنشيط حمض 18-تيرت- بيتوكسي-18-أوكسو- أوكتاديكانيدايويك )1.13 جم؛ 3.0 (Ale مول؛ 2.0 مكافئ) مسبقًا )2 دقيقة) ب 1-[بيس(داي ميثيل أمينو )ميثيلين]- 1-11» 2» 3-ترايازولو[4» 0-5[بيريدنيوم 3-أكسيد هكسا فلورو فوسفات (1.15 جم؛ 3.0 Ae مول؛ 2.0 مكافئ) باستخدام IN ON أيزو بروييل (ii) أمين كقاعدة )1333 ميكرو لترء 7.7 (Ae مول؛ 5.0 مكافئ) في 10 ملليلتر من داي
5 ميثيل فورماميد؛ ثم نقله إلى الراتنج. يتم خلط الملاط لمدة 3 ساعات؛ ترشيحه؛ وغسل الراتنج جيدًا Vl بداي ميثيل فورماميد ثم بداي كلورو ميثان (اختبار Kaiser سلبي). يتم شطر الحمض الدهني
الرابط المحمي عن الراتنج بواسطة الخلط مع 730 داي كلورو ميثان/هكسا فلورو أيزوبروبانول (HFIP) Hexafluoroisopropanol )20 ملليلتر) لمدة 1 ساعة. تتم تصفية الراتنج بالترشيح وشطفه جيدًا بداي كلورو ميثان. يتم تبخير نواتج الترشيح المجمعة combined filtrates إلى زيت تحت التفريغ. يتم تخفيف الزيت المتبقي بأسيتونيتريل acetonitrile )15 - 20 ملليلتر) وتبخيره تحت التفريغ مرة أخرى إلى زبت. تتم إذابة العينة مرة أخرى بأسيتونيتريل (15 - 20 مليلتر) ويتم تبخيره تحت التفريغ لتشكيل زيت. يبخر تيار خفيف من النيتروجين gentle stream of nitrogen أسيتو نيتريل المتبقي لإعطاء 2.6 جرام من المادة الصلبة اللابلورية الخام crude amorphous solid (نظرتًا = 1.7 جرام). Tas التنقية بإذابة العينة الخام في 5 ملليلتر من داي ميثيل فورماميد و20 ملليلتر من أسيتونيتريل 0 (التي تتضمن عمليات غسل للدورق). ثم تتم إضافة الماء لإعطاء 40 مليلتر من محلول غير رائق hazy solution يعطي 5 ملليلتر من أسيتونيتريل إضافي محلول رائق (إجمالي الحجم يساوي 5 مليلتر (733 مائي). يتم إجراء التنقية بواسطة تحميل العينة على عمود استشراب سائلي عالي الأداء (HPLC) High-performance liquid chromatography ذي طور عكسي شبه pana من سيانو ¢SilaChrom XDB1-CN) semi-prep cyano reversed phase 10 ميكرو مترء 100 5 أنجستروم؛ 2.1 x 25 سم). تتم تصفية العينة عندئذٍ تتابعيًا باستخدام 760-40 تدرج B على مدار 72 دقيقة؛ 15 ملليلتر/ الدقيقة؛ 60 درجة مئوية (المحلول المنظم buffer )1( = 70.1حمض تراي فلورو أسيتيك في الماء والمحلول المنظم (ب) = 70.1حمض تراي فلورو أسيتيك في أسيتو نيتريل). يتم تجميع الأجزاء المحدد بأنها تحتوي على المنتج المرغوب فيه بواسطة الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور 0 العكسي (RP-HPLC) reversed phase High-performance liquid chromatography التحليلي وتجفيفها بالتجميد لإعطاء 1.22 جرام من المنتج (المركب (أ)) كمادة صلبة لا بلورية بيضاء اللون (772 من الجزء النظري؛ 791 نقاء بواسطة الاستشراب BL) عالي الأداء ذي الطور العكسي؛ الوزن الجزيخى (MW) molecular weight الملاحظ = 1114.6 دالتون ¢(Da) Daltons الوزن الجزيئى النظري = 1114.45 دالتون). fas 5 المعالجة بأسيل Acylation بمساعدة 404.9 مجم؛ 0.363 مللي مول؛ 1.32 مكافئات من المركب (أ)؛ التخليق الموصوف coded و 0-(13-سكسيناميديل)-17 HEN NN ميثيل
يورانيوم تترا فلورو بورات O-(N-Succinimidyl)-N,N,N’,N'-tetramethyluronium (TSTU) tetrafluoroborate )91.5 مجم 0.3039 مللي مول؛ 1.1 مكافئ)؛ المذاب في 2.5 ملليلتر من 7«-ميثيل-2-بيروليدون. إلى هذا المحلول تتم إضافة داي أيزو بروبيل إيثيل أمين )192 ميكرو لتر؛ 1.102 Ale مول؛ 4 مكافئ)؛ وتتم حضانة الخليط الناتج عند الغرفة درجة حرارة لمدة 30 دقيقة لإنتاج المركب (أ)-إستر Compound A-OSu ester OSu في /[-ميثيل -2-
بيروليدون وبستخدم مباشرة. أثناء تشكيل المركب 12؛ إلى محلول من الإنسولين 8210 (أو إلى محلول من الإنسولين البشري في حالة المركب 19) (ملح حمض تراي فلورو أسيتيك؛ 1.584 جم؛ 0.276 مللي مول) المذاب في 5 ملليلتر من داي ميثيل سلفوكسيد تتم إضافة 1 8-داي أزا باي سيكلو[5. 4. 0]إنديك- 0 7-ين (DBU) 1,8-Diazabicyclo[5.4.0Jundec-7-ene (495 ميكرو لترء 3.31 مللي مول؛ 12 مكافئ» رقم كتالوج :Aldrich—Sigma 33482). ثم؛ فورًاء تتم إضافة المركب (أ)-إستر OSu أعلاه في 7(-ميثيل-2-بيروليدون. بعد تقليب خليط التفاعل عند درجة حرارة المحيط لمدة 12 دقيقة؛ تتم إضافته إلى خليط من داي Join) إيثر /داي كلورو ميثان/بحمض تراي فلورو أسيتيك (30 : 10 : 0.2 حجم/ tana 200 5 ملليلتر الحجم). يتم عزل ناتج الترسيب الأبيض الناتج بواسطة الطرد المركزي ثم سحقه تحت سطح محلول بداي diethyl ether Jil Jil مرة واحدة. Tas عملية نزع الحماية (إزالة مجموعات تيرت-بيوتيل أوكسي كربونيل و«003) بمعالجة ناتج الترسيب الأبيض من إيثر ether رطب المذكور أعلاه بخليط من حمض تراي فلورو أسيتيك/ تراي أيزوبروييل سيلان (TIS) triisopropylsilane (طعتتهله)/الماء (92.5 : 5.0 : 2.5 tana [ann (LLL 50 0 لمدة 20 دقيقة. إلى الخليط تتم إضافة داي إيثيل إيثر (200 ملليلتر) ويتم تجميع ناتج الترسيب الناتج بواسطة الطرد المركزي. يوضح تحليل الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور العكسي انتهاء خطوة نزع الحماية (712.4 الإنسولين A21G غير المتفاعل reacted A21G-insulin 756.7 منتج معالج بأسيل product B29 لعادارعة-829؛ 713 منتج معالج ببيس- أسيل .(bis-acylated product 5 تبداً التنقية بإذابة المنتج الخام أعلاه في الماء/أسيتو نيتريل (1: 1 حجم/ tana 20 ملليلتر). تتم إزالة إيثر المتبقي بواسطة تسليط تيار خفيف من النيتروجين على سطح الخليط حتى يصبح الحجم
تقريبًا 20 ملليلتر. يتم تخفيف المحلول الناتج بماء Milli-Q )200 ملليلتر) وتحميله على <A10 Zeosphere 120DRP عمود الاستشراب السائلي عالي الأداء التحضيري x 5) C8 25 سم). تتم تصفية العينة تتابعيًا من العمود بتدرج من أسيتو نيتريل )735-20( في الماء (يحتوي على 70.1 حجم/ ana حمض تراي فلورو أسيتيك) على مدار 144 دقيقة عند 28 ملليلتر/ الدقيقة أثناء المراقبة بالاشعة فوق البنفسجية (UV) ultraviolet عند 225 نانو متر و280 نانو متر. يتم تحديد الأجزاء التي تحتوي على المنتج المرغوب فيه بواسطة الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور العكسي (العمود: 018 «Waters 365861661 CSH 4.6 50 ملليمتر) وتجميعها )100 ملليلتر؛ 799.8 بواسطة الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور العكسي). مطياف الكتلة 0 لللتأين الكهربى electrospray mass spectroscopy (25115): طيف غير مشوش deconvoluted سنصاءعم»: الملاحظ: 6.577.1 دالتون؛ المحسوب: 6.578.5 دالتون. في حالة التحويل إلى تبادل ملح حمض الهيدروكلوريك (HCI) hydrochloric acid (طريقة العمود)؛ يتم تخفيف الأجزاء المجمعة أعلاه بالماء إلى 200 ملليلتر وإعادة تحميلها على عمود الاستشراب السائلي عالي الأداء التحضيري ©:©280801. يتم عندئذٍ تغيير المحاليل المنظمة 5 لتصفية التتابعية elution buffers احتوى المحلول المنظم (أ) على 70.01 حمض الهيدروكلوربك في الماء ويكون المحلول المنظم (ب) أسيتو نيتريل. يتم عندئذٍ غسل العمود بثلاثة أحجام عمود من 75 المحلول المنظم (ب) ثم تتم تصفية العينة تتابعيًا باستخدام 770 من المحلول المنظم (ب) أثناء المراقبة 225 نانو متر و280 نانو متر. يتم تجميع العينة في برطمان تجفيف بالتجميد نظيف cclean lyophilization jar تجميدها وتجفيفها 0 بالتجميد للحصول على المركب 12 كمسحوق أبيض )620.5 cane 0.094 مللي مول؛ 734 ناتج إجمالي). يتم تأكيد النقاء بواسطة الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور العكسي التحليلي ووجد أنه 799.9. مطياف الكتلة للتأين الكهربى: طيف غير مشوش: الملاحظ: 3 دالتون؛ المحسوب: 6.578.5 دالتون. في حالة التحويل إلى تبادل ملح حمض الهيدروكلوريك (طريقة الراتنج)؛ تتم إذابة المركب 12 5 (ملح حمض تراي فلورو أسيتيك؛ 102.9 مجم) في الماء/أسيتو نيتريل (1: 1 حجم/ حجم؛ 20 ملليلتر) وإضافته إلى راتنج التبادل ١ لأيوني من كلوريد chloride ion-exchange resin )4.05 جم؛
8 مللي مول من الراتنج / مللي مول من الإنسولين؛ Bio-Rad 1-x8 (رقم الكتالوج 140- 1431(¢ 100-50 شبيكة؛ صورة كلوريد؛ 2.08 Ale مكافئ/ ala جاف؛ 746 رطوية؛ أمونيوم رباعي ¢quaternary ammonium رقم التحكم 2100011742) الذي يتم غسله مسبقًا بقدر 20 ملليلتر من كل من ميثانول cmethanol أسيتو نيتريل» والماء /أسيتو نيتريل (1: 1 حجم/ حجم).
يتم خلط الراتنج والإنسولين عند درجة حرارة الغرفة لمدة 1 ساعة وعندها تتم تصفية الراتنج بالترشيح وغسله بالماء/أسيتو نيتريل (1: 1 حجم/ حجم؛ 20 ملليلتر). يتم دمج ناتج الترشيح ونواتج الغسل» تجميدها وتجفيفها بالتجميد للحصول على المركب 12 كمسدحوق أبيض (89.9 مجم؛ 787 استخلاص تدريجي). يتم تأكيد النقاء بواسطة الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور العكسي التحليلي ووجد أنه 799.9. مطياف الكتلة للتأين الكهربى: طيف غير مشوش:
0 الملاحظ: 6576.7 دالتون؛ المحسوب: 6578.5 دالتون. يمكن استخدام طرق إضافية لتبادل الأملاح Jie (Wad الديلزة dialysis يتم تأكيد معالجة LysB29 بأسيل للمركبات الحالية بواسطة الامتصاص بإندو بروتياز Glu-C Glu-C ع0000001688. تتم إذابة تقريبًا 300 ميكرو جم من المركب 12 أو 9 في 50 مللي مولار من المحلول المنظم من تريس (Tris buffer برقم هيدروجيني alu 8 (1 مجم/ ملليلتر) ثم 5 معالجتها بقدر 20 ميكرو جم من إندو بروتياز Glu-C (رقم كتالوج Worthington Biochemical هو 1.5003605). بعد الحضانة عند درجة حرارة الغرفة saad 17.5 ساعة؛ يتم sha lad] متساوي )200 ميكرو لتر) من خليط التفاعل بقدر 0.1 عيار من حمض الهيدروكلوريك (300 ميكرو تر). يتم تحليل الخليط الناتج )80 ميكرو لتر) بواسطة الاستشراب السائلي liquid chromatography 0 ©1)/مطياف الكتلة (MS) mass spectroscopy (العمود x 4.6 «Waters XBridge C8 150 ملليمترء 5 ميكرو مترء 130 أنجستروم) . وجد أن الشظية التشخيصية «diagnostic fragment B22-30 + المركب (أ)؛ 1944.4 دالتون (في مقابل المحسوب = 1944.3 دالتون). كانت جميع شظايا الامتصاص ©-010 Glu-C digestion fragments الأخرى من المركبات 12 أو 19 خالية من المعالجة بأسيل.
ألفة المستقبل في المعمل
يتم اختبار المركبات 12 و19 والمركبات المقارنة (الإنسولين البشري التخليقي الحيوي biosynthetic human insulin وعامل النمو الذي يشبه الإنسولين 1) في اختبار التقارب الومضي (SPA) scintillation proximity assay لمستقبل الإنسولين البشري human insulin receptor (hIR) ومستقبل عامل النمو الذي يشبه الإنسولين 1 البشري human insulin-like growth factor (hIGF-IR) 1 5 واختبارات الارتباط الترابطي الإشماعي radioligand binding assays التنافسي باستخدام الأغشية membranes التي يتم تحضيرها باستخدام خطوات الطرد المركزي التفارقي من الخلايا الكلوية الجنينية البشرية 293 (293HEK) Human embryonic kidney 293 cells المنقول إليها العدوى بشكل ثابت التي تعبر بشكل فائق عن مستقبل الإنسولين البشري-]؛ مستقبل الإنسولين البشري-ب أو مستقبل عامل النمو الذي يشبه الإنسولين 1 البشري الناتج عن عودة 10 الارتباط الجيني. يتم استخدام ظروف تنظيم الاختبار التي تتكون من 50 ملليمتر من تريس-حمض الهيدروكلوربك؛ برقم هيدروجيني يبلغ 7.5 150 (Ae مولار من كلوريد الصوديوم «(NaCl) sodium chloride 53 (وزن/ حجم) ان بى-40 NP-40 وتحتوي على إما إنسولين (3-[[”*']-يودو تيروزيل- (AM الناتج عن sage الارتباط الجيني البشري human recombinant (3-['*I]-iodotyrosyl- A')-insulin 5 أو [[125]-عامل النمو الذي يشبه الإنسولين 1 البشري الناتج عن عودة الارتباط الجيني. يتم قياس بيانات العدات في الدقيقة (CPM) Counts per minute حسب مجموعات المقارنة من الإنسولين البشري غير المعلم unlabeled human insulin أو عامل النمو الذي يشبه الإنسولين 1 وتخطيطها كنسبة مئوية للتثبيط على المحور و في مقابل تركيز المركب المسجل على المحور x يتم تحديد قيم أقصى تركيز للتثبيط التنصفى half maximal inhibitory (IC50) concentration 0 من تحليل الارتداد اللوجيستي غير الخطي المكون logistic non-linear regression analysis من 4 متغيرات cGeneData) الإصدار 12) وتمثل التركيز الذي odie يتم تثبيط الارتباط المحدد بنسبة 750. إذا كان ضروريًاء يتم تثبيت المتغيرات العليا أو السفلى للمنحنى لتكون 100 أو صفر في المئة؛ على الترتيب؛ لإنتاج منحنى كامل. يتم حساب ثابت الألغة (Ki) affinity constant من dad أقصى تركيز للتثبيط hail) بناءً على المعادلة ثابت الألفة = أقصى تركيز للتثبيط النصفى/ (1 + 1* / يساوي ثابت ألفة الارتباط المتزن) حيث LF يساوي تركيز المركب الترابطي المشع المستخدم في التجربة و يساوي ثابت Ail
الارتباط المتزن (Kd) equilibrium binding affinity constant للمركحب الترابطي المشع 480 الخاص بالمستقبل المناظر؛ المحدد من تحليل الارتباط بالتشبع saturation binding 58 قيم ثابت الألفة المحسوية للمركب 12 هي ثابت الألفة = 7.11 نانو مولار لمستقبل الإنسولين البشري-ا وثابت الألفة = 7.56 نانو مولار لمستقبل الإنسولين البشري-ب (الجدول 1). يكون لكل من المركب 12 والإنسولين البشري ألفة ارتباط لمستقبل الإنسولين T= (gil) ومستقبل الإنسولين البشري-ب أقل من 10 نانو مولار ويكون المركب 12 شديد الانتقائية تجاه مستقبل الإنسولين البشري-اً ومستقبل الإنسولين البشري-ب مقارنة بمستقبل عامل النمو الذي يشبه الإنسولين 1 البشري )<500 ضعف انتقائية لكل منهما)؛ والتي تشبه نسبة الانتفائية تجاه الإنسولين البشري في 0 نفس الاختبارات. قيم ثابت الألفة المحسوية للمركب 19 هي ثابت الألفة = 3.40 نانو مولار لمستقبل الإنسولين البشري-اً وثابت الألفة = 3.45 نانو مولار لمستقبل الإنسولين البشري-ب (الجدول 1). يكون لكل من المركب 19 والإنسولين البشري آلفة ارتباط لمستقبل الإنسولين البشري-ا ومستقبل الإنسولين البشري-ب أقل من 4 نانو مولار ويكون al 19 شديد LAE) تجاه مستقبل الإنسولين gyal 5 ومستقبل الإنسولين البشري-ب مقارنة بمستقبل عامل النمو الذي يشبه الإنسولين 1 البشري (>700 ضعف انتقائية لكل منهما)؛ الأكثر انتقائية من نسبة الانتقائية تجاه الإنسولين البشري في نفس الاختبارات. الجدول 1: ألفة ارتباط الأنواع الفرعية لمستقبل الإنسولين البشري (أ) و(ب) (مستقبل الإنسولين 0 البشري-ا ومستقبل الإنسولين البشري-ب) ومستقبل عامل النمو الذي يشبه الإنسولين البشري-1؛ قيم ثابت الألفة وقيم الخطأً المعياري للمتوسط (SEM) standard error of mean تكون طريقة هندسية يتم التعبير الوراثي عنها بعدد 3 أرقام كبيرة. ثابت الألفة؛ نانو مولار Lhd) معياري هندسي للمتوسط I مسمس سي جم على ع ا الاسم : الإنسولين- | الإنسولين-ب يشبه الإنسولين 1
ا ل ين ااا الا (IR-A) 7.11 7.56 4060 3.40 3.45 2540 0.197 0.257 97.8 عامل النمو الذي | 540 65.9 0.157 يشبه الإنسولين 1 (0.59؛ (3=n (8.8؛ (3=n (0.010؛ (3=n التنشيط الوظيفي للمستقبل يحتوي مستقبل الإنسولين على نطاق كيناز تيروسين داخل الخلايا intracellular tyrosine kinase والذي عند ارتباط المركب الترابطي يعالج بفسفوريل ذاتبًا الوحدات البنائية من تيروسين tyrosine residues 5 الخاصة به للسماح بتعيين البروتينات المهايئة adaptor proteins التي تعمل على حث مسار إرسال إشارات الإنسولين insulin signaling pathways يتم تحديد النشاط الخلوي الوظيفي لحث المعالجة يفسفوريل ذاتبًا للمستقبل receptor auto-phosphorylation على الوحدات البنائية من تيروسين بعد المعالجة بمركب ترابطي للخلايا الكلوية الجنينية البشرية 293التي تعبر بشكل فائق عن مستقبل الإنسولين البشري-أ؛ مستقبل الإنسولين البشري-ب؛ أو مستقبل عامل النمو 0 الذي يشبه الإنسولين 1 البشري؛ كل Leia بقمة لاصقة C9 عند الطرف «TETSQVAPA) C المتوالية رقم: 5). بعد حث الخلايا بتركيزات مختلفة من المركب الترابطي؛ في وسط خالي من ألبيومين medium of albumin 0»010» عند 37 درجة gia لمدة 60 دقيقة (اختبارات مستقبل الإنسولين fm gid) ومستقبل الإنسولين البشري-ب) أو لمدة 30 دقيقة (اختبار مستقبل عامل النمو الذي يشبه الإنسولين 1 البشري)»؛ يتم تحديد مستوى معالجة تيروسين بفسفوريل tyrosine auto- LE phosphorylation بواسطة نطاق كيناز بكل مستقبل بواسطة مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإتزيم ¢(ELISA) enzyme-linked immunosorbent assay حيث يتم احتجاز المستقبل المنشط
activated receptor بواسطة جسم مضاد (RHO 1D4) antibody بعلامة القمة اللاصقة «C9 يتبع ذلك CRASH عن مستوى معالجة تيروسين بفسفوريل tyrosine phosphorylation بقدر من مترافق بيروكسيداز (ad peroxidase conjugate حار مضاد لفسفو تيروسين canti-phosphotyrosine الجسم المضاد 4G10™-HRP 5 يتم الإبلاغ عن الفاعلية الوظيفية كتركيز يوضح نصف أقصى استجابة half-maximal response (EC50) نسبة إلى أقصى تركيز فعال (100 نانو مولار) لمجموعة المقارنة الموجبة؛ الإنسولين البشري (اختبارات) مستقبل الإنسولين البشري-اً ومستقبل الإنسولين البشري-ب المعالج بفسفوريل أو 10 نانو مولار لمجموعة المقارنة الموجبة اختبار مستقبل عامل النمو الذي يشبه الإنسولين 1 البشري المعالج بفسفوريل. يتم تحديد قيم نصف أقصى استجابة من تحليل الارتداد اللوجيستي غير 0 الخطي المكون من 4 متغيرات (13 Screener 1101). إذا كان ضروريًا؛ يتم ضبط المتغيرات العليا أو السفلى للمنحنى لتكون 100 أو صفرء؛ على الترتيب. يتم توضيح القيم المبلغ عنها لنصف أقصى استجابة كمتوسط هندسي وخطاً معياري هندسي للمتوسط؛ بعدد من التحديدات المستقلة المحددة بواسطة "0" (الجدول 2). يوضح المركب 12 تنشيط الصور المتشاكلة لمستقبل الإنسولين-ا و مستقبل الإنسولين-ب البشري. تكون فاعلية المركب 12 والإنسولين البشري تجاه الصور المتشاكلة لمستقبل الإنسولين- و مستقبل الإنسولين-ب أقل من 40 نانو مولار. يكون المركب 12 حوالي 1300 مزةٍ أكثر قوة عند مستقبل الإنسولين البشري-اً ومستقبل الإنسولين البشري-ب من عامل النمو الذي يشبه الإنسولين 1 والتي تكون أكبر من نسبة الانتقائية تجاه الإنسولين البشري في نفس الاختبارات. يوضح المركب 19 تنشيط الصور المتشاكلة لمستقبل الإنسولين-ا و مستقبل الإنسولين-ب 0 البشري. تكون فاعلية المركب 19 والإنسولين البشري تجاه الصور المتشاكلة لمستقبل الإنسولين- و مستقبل الإنسولين-ب أقل من 25 نانو مولار. يكون المركب 19 حوالي 400 مرة أكثر قوة عند مستقبل الإنسولين البشري-ا ومستقبل الإنسولين البشري-ب من عامل النمو الذي يشبه الإنسولين ١1 والتي تكون أكبر من نسبة الانتقائية تجاه الإنسولين البشري في نفس الاختبارات. وبالمقارنة؛ تكون انتقائية الإنسولين البشري تجاه مستقبل الإنسولين-ا و مستقبل الإنسولين -ب مقارنة بعامل 5 النمو الذي يشبه الإنسولين 1 تقريبًا 200 ضعف. الجدول 2: تنشيط الأنواع الفرعية لمستقبل الإنسولين البشري )1( و(ب) (مستقبل الإنسولين
— 0 2 — T= (gpl ومستقبل الإنسولين البشري-ب) ومستقبل عامل النمو الذي يشبه الإنسولين البشري-1 نصف أقصى استجابة نانو مولار Las) معياري هندسى للمتوسط؛ 0 مستقبل J لإنسولين - مستقبل J لإنسولين - عامل النمو الذي الا i 5 ب يشبه الإنسولين 1 34.1 379 49900 المركب 12 (3=n 3.2) (7=n 2.5) =a (17300؛ (4=n 234 13.7 7170 المركب 19 (7=n <1940) (3=n 1.47) (7=n 6.34) =a 1.53 1.83 351 الإنسولين البة مدا ات اس |)110 (4=n عامل النمو الذي | 116 427 0.939 يشبه الإنسولين 1 (611 (3=n (29؛ (3=n (0.146؛ (4=n تقييم الفاعلية في داخل جسم الكائن الحي في نموذج جرذ لداء السكري من النوع 1 تتم دراسة تأثيرات المركبات 2 1 و9 1 في نموذ z داء السكري بجرذ معالج بستريتوزوتوسين (STZ) streptozotocin 5 يتم الحصول على ذكور جرذان «Sprague-Dawley وزن الجسم 400- جرام من Indiana «Indianapolis «<Envigo بعد التأقلم لأسبوع (Lu يتم تخدير الجرذان بأيزو فلوران isoflurane وأعطيت حقنة مفردة من Zanosar® (رقم المنتج 89256« Teva Parenteral Medicines 40 مجم/ كجم؛ في الوريد). يتم استخدام الجرذان في الدراسات بعد 3 أيام من حفن ¢Zanosar يتم استخدام فقط الحيوانات بجلوكوز دم في حالة عدم الصيام بين 400- 0 550 ملليجرام/ ديسيلتر في هذه الدراسات. يتم توزيع الجرذان في مجموعات لتوفير تباين قابل للمقارنة في جلوكوز الدم ووزن الجسم؛ يتم توزيع الجرذان عشوائيًا. يتم قياس جلوكوز الدم باستخدام مقياس الجلوكوز Accu-Chek Aviva Accu-Chek Aviva glucometer (عطءمة). يتم إعطاء الجرذان المعالجة بستريتوزوتوسين جرعة مفردة تحت single subcutaneous Mall (SC) 5 من منتج الاختبار أو المادة الناقلة (محلول Sle طبيعي معقم Sterile Normal Saline
70.9 وزن/ حجم من محلول كلوريد الصوديوم) ٠ يتم تجميع عينات الدم لقياسات الجلوكوز بواسطة نزف الذيل. تستطيع الحيوانات الوصول للطعام shally بحرية على مدار التجرية. يتم إرسال عينات البلازما Plasma samples من هذه الدراسات لتحليل مستويات المركب. كما هو موضح في الجدول 3. يكون للمركب 12 فعالية في خفض الجلوكوز لمدة على الأقل 24 ساعة عند جرعة تساوي 100 نانو مول/ كجم. يوضح الجدول 3 قيم المركب 9 عند نقاط زمنية مختلفة أثناء التقييم . يكون للمركب 19 أيضًا فاعلية في خفض الجلوكوز لمدة على الأقل 24 ساعة عند جرعة تساوي 0 نانو مول/ كجم. الجدول 3: فاعلية المركب 12 في داخل جسم call الحي مجموعة متوسط جلوكوز ملليجرام/ ديسيلتر + الخطأ المعياري للمتوسط =n) 5) الزمن | المادة الناقلة | المركب 12 | المركب 12 | المركب 12 | المركب 12 (ساعات) (12.5 نانو | (25 نانو | (50 نانو | (100 نانو [se كجم) | مول/ كجم) | مول/ كجم) | مول/ كجم) 490 508 486 501 489 + 2.78 + 19.8 + 16.4 + 13.3 + 6.10 1 504 535 499 501 414 + 26.0 + 259 + 31.1 + 21.8 + 7.15 2 480 496 360 384 123 + 16.3 + 25.7 + 48.1 + 66.3 + 9.29 4 512 450 249 122 84.9 + 35.1 + 21.0 + 91.3 + 338 + 10.4 500 393 209 74.5 70.5 + 343 + 67.9 + 82.6 + 8.92 + 6.36 498 473 308 95.9 73.0 + 16.6 + 45.5 + 62.5 + 20.7 + 6.13 561 527 412 121 73.9 + 18.5 + 36.4 + 553 + 12.9 + 11.3
12 584 586 513 261 84.9 ww] wes wre en] 18 553 532 499 420 114 a] wee] sn] sed we 24 488 539 481 344 162 ب IE I I 36 #601 591 589 598 591 EE 48 508 551 517 510 504 رم ل ا الصا 72 553 564 557 555 550 ad wn] en we an 36 19300 19100 16500 12400 7480 ساعة | + 197 = 358 + 1096 + 831 + 488 المساحة Ji المنحنى * لا يتم قياس القيم أعلاه 601 لأنها قراءات مرتفعة عما يسمح به مقياس الجلوكوز الجدول 4: فاعلية المركب 19 في داخل جسم الكائن الحي مجموعة الزمن | المادة | المركب 19 ١ المركب 19 | لمركب 19 ١ المركب 19 (ساعات) | الناقلة | (12.5 نانو | (25 نانو | (50 نانو | (100 نانو مول/كجم) |مول/كجم) | مول/ كجم) | مول/ كجم) 510 513 520 530 546 + + 10.0 + 20.8 + 15.1 + 16.8 EEEEN
23.1 + 11.8 + 25.5 + 17.8 + +
TE I I PY
242 302 367 518 522 2 30.7 + 584 + 38.0 + 21.2 + + 21.9 74.2 100 109 292 442 4 4.00 + 21.0 + 25.7 + 77.9 + + 26.4 59.7 63.8 81.8 204 404 6.06 + 7.15 + 4.79 + 67.6 + + 18.6 69.1 73.0 113 230 418 559 + 10.7 + 14.5 + 73.3 + + 36.9 63.8 150 224 324 443 10 532 + 46.5 + 13.2 + 77.9 + + 39.2 93.5 157 386 595 548 12
BEEN
27.6 97.7 356 513 573 546 18 538 + 102 + 233 + 9.04 + + 36.3 190 503 536 553 519 24 59.8 + 269 + 24.4 + 21.1 + + 24.8 576 566 590 *601 600 36
IEEE I اا 499 537 510 550 | 498 48 27.5 + 174 + 193 + 20.2 + + 204
BEES ESS 22.2 36 18700 | 18100 154000 12700 7840 del | + 471 | + 718 + 240 + 1240 + 557 المساحة أسفل المنحنى *القيم أعلاه 601 لا يتم قياس لأنها قراءات مرتفعة عما يسمح به مقياس الجلوكوز تقييم صفاء العقار في نموذج خنزير لداء السكري من النوع 1 يتم وضع ذكور خنزير قزم Yucatan مصابة بداء السكري (مستحث بألوكسان (alloxan ‘ مستأصلة الغدد التناسلية بموضع دخول وعائي vascular access مهياً سابقًا في حمالات للتفييد وتسهيل الوصول إلى منافذ الدخول الوعائي vascular access ports الخاصة بها (مجهزة لأخذ عينات الدم) وفحصها للكشف عن كونها سالكة. يتم وضع الحيوانات عشوائيًا في مجموعات العلاج treatment groups وإعادتها إلى حظائرها. بعد تجميع عينتي دم عند ball القاعدي (-30 وصفر دقيقة)؛ يتم حقن الحيوانات بمنتج الاختبار عند 1.8 نانو مول/ كجم؛ تحت الجلد في 0 الخاصرة (صفر دقيقة) بمحقنة إنسولين insulin syringe (إبرة 0.3 ملليلتر 16/5"( يتاح لجميع حيوانات الدراسة الوصول لماء نظيف عذب حتى الشبع على مدار مدة تجميع الدم المتبقية. يتم تجميع عينات الدم التتابعية (2.0 ملليلتر لكل منها) من كل حيوان عند النقاط الزمنية التالية: -30 0 (مباشرة قبل الجرعة) 1.5 3 6« 12« 18 24 36 42« 48 54؛ 60 و72 ساعة بعد إعطاء الجرعات تحت الجلد subcutaneous dosing يتم عندئذٍ منع الطعام عن جميع 5 حيوانات الدراسة طوال الليل ولا تتم إطعامها مرة (AT حتى بعد 24 ساعة من تجميع العينة. وعند هذا الوقت؛ تتم إطعام الحيوانات 300 جرام من النظام الغذائي 8-9 ويتم إعطاءها 0.2 وحدة/ كجم 1008 يتم منع الطعام عنها مرة أخرى حتى بعد 60 ساعة من تجميع العينة ثم تتلقى 300 جرام من النظام الغذائي 5-9 و0.2 وحدة/ كجم .Humalog وتعود إلى نظام الطعام وتناول الإنسولين المداوم الخاص بها بعد 72 ساعة من تجميع العينات. يتم إبقاء عينات الدم (مضاد تخثر anticoagulant لا يوجد [المصل]) عند درجة حرارة المحيط
لعلى الأقل 30 دقيقة لكن ليس أكثر من 2 ساعة للسماح بالتخثر. يتم تحديد تركيزات الجلوكوز بالمصل باستخدام جهاز تحليل AU480 Clinical Chemistry مميكن. يتم شحن جزءِ متساوي لأجل الحركيات الدوائية (PK) pharmacokinetics للتحليل. يتم تمثيل البيانات كمتوسط /+- الخطأً المعياري للمتوسط ما لم يحدد خلاف ذلك. يتم حساب تغير مستوى الجلوكوز عن الخط القاعدي بواسطة طرح قيمة الجلوكوز عند كل نقطة زمنية من قيمة الجلوكوز عند الخط القاعدي. يتم حساب القيمة عند الخط القاعدي من متوسط قيم الجلوكوز عند -0.5 وصفر دقيقة. يتم تجميع العينات من أجل الحركيات الدوائية/الديناميكية الدوائية (PD) Pharmacodynamics حتى 72 ساعة بعد الجرعة. يتم قياس تركيزات المركب 12 ببلازما خنزير (K3EDTA) بواسطة الاستشراب السائلي/مطياف 0 الكتلة في محاليل 02 (NY clthaca) يتم ترسيب المركب 12 (IP) immunoprecipitated Getic من 100 ميكرو لتر من أجزاء متساوية من البلازما/المصل باستخدام جسم أحادي النسيلة بايوتين مضاد للإنسولين (Fitzgerald #10R-1134E) anti-insulin-biotin monoclonal antibody وخرزات مغناطيسية مغلفة بستريتافيدين Invitrogen M-) streptavidin-coated magnetic beads 0). بعد خطوات الغسل؛ تمت تصفية الصور المتغيرة من الإنسولين تتابعيًا من معقدات مناعيًا 5 بمساعدة أسيتو نيتريل حمضي acidic acetonitrile (5: 20: 80 حمض فورميك formic 0 ]/أسيتو نيتريل/الماء ). بعد التصفية التتابعية؛ يتم حقن 10 ميكرو لتر من ناتج التصفية التتابعية على مقياس طيف كتلي mass spectrometer لتحليل الاستشراب السائلي/مطياف الكتلة. يشتمل نظام الاستشراب السائلي/مطياف الكتلة على استشراب سائل (NCS-3500RS) Dionex 2D-nanoUPLC ومقياس 0 طيف كتلي Thermo Q/Exactive Plus يتم تحقيق الوضوح بواسطة استشراب ثنائي الأبعاد باستخدام أعمدة احتجاز تتابعية serial trap columns تتكون من عمود مسبق صغير Thermo Thermo micro-precolumn )160454( وعمود x 0.3( Acclaim PepMap-100 C18 5 ملليمترء 5 ميكرو متر (dp وعمود تحليلي 018 Thermo Easy Spray PepMap )75 ميكرو متر X 15 سم؛ 5 ميكرو متر 00)؛ (Allg يتم تشغيل كل منها عند 60 درجة مئوية. 5 يتم تشغيل مقياس طيف كتلي في أيون موجب «positive ion نمط «(Easy Spray) nanoESI وبعد مراقبة انتقالات أيونات المادة المنتجة/المنتج للمركب 12: 1316.600 > 586.854. يتم
— 6 2 — التحقق من الاختبارات لقياس التركيزات المختلفة للإنسولين عبر نطاق من 0.25 إلى 50 نانو جم/ يتم تقييم الحركيات الدوائية للمركب 12 في ذكور خنزير Yucatan المستحثة بالإصابة بالسكري يعد إعطاء ات تحت الجلد مفردة تبلغ 1.8 نانو مول/ كجم من المركب 2. يتم تحضير عينة إنسولين ديجلوديك بطريقة مشابهة للمركب 12 aig استخدامها كعينة مقارنة في هذه الدراسة. يتم توضيح بعض متغيرات الحركيات الدوائية للمركب 12 والإنسولين ديجلوديك في الجدول 5. يكون معدل التصفية للمركب 12 3-2 مرة أبطأ من معدل التصفية للإنسولين ديجلوديك؛ مما يمكن أن يؤدي إلى سمات الحركيات الدوائية أكثر استواءًا وزيادة مدة تأثير المركب 12 في داخل جسم الكائن الحي في البشر . 0 الجدول 5: متوسط متغيرات الحركيات الدوائية للمركب 12 والإنسولين ديجلوديك في ذكور خنزير Yucatan مستحثة بالإصابة بالسكري بعد جرعات مفردة تحت Single Subcutaneous Mall Doses (نانو (بيكو (ملليلتر/ المركبات الإحصائيات (ساعة*نانو مول (ساعة) | (ساعة) | مول/ ساعة/ مول/ لتر) كجم) (A كجم) متوسط المرك Lal | 15 10 12510 78.3 23.8 ° ]1.8 12 المعياري 3 8 692 774 4.64 متوسط الإنسولين : 18 ؟ 13 12 881 23.5 87.8 ديجلوديك 3 10 4 830 39.8 المعيارىي الاختصارات: Tip = عمر النصف»؛ ...7 = الزمن إلى أقصى تركيز» ...© = أقصى تركيز بالبلازماء AUCH = المساحة تحت المنحنى من صفر إلى ما لا CL/F alg = الصفاء/ 5 التوافر الحيوي 5=N) للمركب 12؛ 6=N للإنسولين ديجلوديك)
تقييم الثبات الكيميائي يتم تحضير العينات بواسطة إذابة مسحوق مجفف بالتجميد freeze-dried powder من المركبات 2 و19 في 20 A مولار من هيدروكسيد الصوديوم (NaOH) sodium hydroxide عند تركيز مستهدف يبلغ تقريبًا 6 مللي مولار. تتم عندئذٍ ديلزة هذا المحلول مقابل 10 Ale مولار من تريس مما ينتج عنه تركيز خام يبلغ 5.6 (Me مولار. يتم عندئذٍ استخدام هذا المحلول الخام stock solution لتحضير المحاليل عند التركيزات المستهدفة التي تحتوي على 10 مللي مولار من coms [ane 9 ملليلتر من جليسرول 1:2©:01ع8» 3.15 مجم/ ملليلتر من «-كريزول em-cresol و4 زنك zine لكل هكسامر إنسولين insulin hexamer (أساس مولاري)؛ عند رقم هيدروجيني يبلغ 0 7.5. كانت التركيزات المستهدفة U200 )200 وحدة/ ملليلتر؛ والتي تكافئ 1.2 مللي مؤولار)؛ 0 )2.4 مللي مولار)؛ 11600 )3.6 مللي مولار) و7800 (4.8 مللي مولار). كانت التركيزات الفعلية للمحاليل ضمن 0.1 مللي مولار من مستويات التركيز المستهدفة. يتم تحضير العينات المقارنة؛ الإنسولين ديجلوديك بنفس الطريقة كعينات المركبات 12 و19 لدراسات الثبات. لدراسات الثبات المستخدمة؛ يتم تحميل العينات في خرطوشات معالجة بالسيليكون 5116001260 cartridges 5 سعة 3 ملليلتر عند أحجام ملء تبلغ تقريبًا 1.5 ملليلتر. يتم وضع كباسات الخرطوشات cartridge plungers للقضاء على حيز الرأس في الخرطوشة. يتم عندئذٍ وضع الخرطوشات عند 30 درجة Asie يتم إخضاع العينات إلى الظروف "المستخدمة” بواسطة توصيل إيرة ودفع 10-5 ميكرو لتر تقريبًا كل 2 يوم. يتم إجراء التحليل بواسطة استشراب الطور العكسي (الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور العكسي) واستشراب استبعاد الحجم size exclusion (SEC) chromatography | 0 على العينات عند نقطة زمنية أولية dag أيام إضافية مختلفة من التخزين؛ كما هو مذكور تفصيلًا في الجداول أدناه. لدراسات ثبات التخزين عند السكون؛ يتم تحميل العينات في خرطوشات سعة 3 ملليلتر عند أحجام ملء تبلغ 1.5 ملليلتر أو قارورات زجاجية سعة 0.3 ملليلتر عند أحجام ملء تبلغ Lid 0.2 ملليلتر. يتم عندئذٍ وضع الخرطوشات أو القارورات عند 30 درجة مثوية. يتم إجراء التحليل 5 بواسطة استشراب الطور العكسي (الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور العكسي) واستشراب استبعاد الحجم على العينات عند نقطة زمنية أولية وبعد abl إضافية مختلفة من التخزين؛ كما هو
— 8 2 — مذكور تفصيلًا فى الجداول أدناه. تكون متغيرات الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور العكسي كما يلي: (1) الأدوات: كاشف 07 الاشعة فوق البنفسجية بمساعدة الاستشراب السائلي وفرن عمودي tcolumn oven )2( العمود: ¢SymmetryShield RP18 3.5 um 11186000179 SN01593532014028 )3( درجة حرارة العمود: 60 درجة مثوية؛ )4( 4. يكون الطور المتحرك: A = 70.085 حمض تراي فلورو أسيتيك في الماء» aan A 0 . 085 = B تراي فلورو أسيتيك في أسيتو Joys ¢ )5( التدرج؛ بتدفق يبلغ 0.9 ملليلتر/ الدقيقة؛ كما يلي: الزمن B/ A (دقيقة) 30000000 100000000 ااا 0003 00 ااا eo 400] 610 620 38.20 I (1) I 38.30 41.30 ]900 ]10 لا يكون لتركيز المركب 12 من U200 إلى UB00 تأثير كبير على الثبات كما هو محدد بواسطة 0 الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور العكسي أو استشراب استبعاد الحجم. يتم توضيح الثبات الكيميائي للمركب 12 في دراسة الثبات المستخدمة عند 30 درجة مثئوية (البيانات على مدار 110 يوم) في الجدول 6. يتم توضيح الثبات الكيميائي للمركب 12؛ المركب 19 والإنسولين ديجلوديك المقارن جميعها عند تركيز 200 فى دراسة للثبات عند السكون؛ فى الجدول 7 يتم توضيح الثبات الكيميائي للإنسولين ديجلوديك عند 30 درجة مئوية في دراسة للثبات عند السكون في الجدول 8. يكون متوسط معدل التحلل للذروة الرئيسية للمركب 12 عند أربعة تركيزات مختلفة 70.064 في الأسبوع؛ ويوضح في الجدول 6. يكون هذا المعدل أقل 8-7 مرات عن معدل التحلل للذروة الرئيسية للإنسولين ديجلوديك 3 الذي يكون 49 0 / 3 وبوضح في الجدول 8 . يوضح الجدول 7
— 9 2 — مقارنة مباشرة لصيغ 10200 للمركب 2 1 ¢ المركب 9 1 والإنسولين ديجلوديك في نفس النقاط الزمنية. في المقارنة المباشرة الموضحة في الجدول 7 يكون معدل التحلل للمركب 12 أكثر من أريع مرات أقل من الإنسولين ديجلوديك ويكون معدل التحلل للمركب 19 أكثر من مرتين أقل من الإنسولين ديجلوديك. يمكن أن يؤدي معدل التحلل الكيميائي chemical degradation rate المنخفض الذي أظهرته المركبات 12 و19 إلى زيادة عمر تخزين المركبات الحالية. الجدول 6: الذروة الرئيسية المئوية للمركب 12 عند 30 درجة الحرارة كما تمت مراقبته بواسطة الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور العكسي ro 0 ]983 983 ]983 983 متوسط معدل | 0.064 التحلل J) الأسبوع) الجدول 7: الذروة الرئيسية المئوية للمركب 12؛ المركب 19 والإنسولين ديجلوديك عند 30 درجة 0 الحرارة كما تمت مراقبته بواسطة الاستشراب lad) عالي الأداء ذي الطور العكسي الزمن (الأيام) | المركب 12 المركب 19 الإنسولين ديجلوديك 200[ 200[ 200[ 0 )383 0 389 742000 ا I) 0-0-7 900079 ا معدل التحلل J7) 0.145 0.255 0.602 الأسبوع)
— 0 3 — الجدول 8: الذروة الرئيسية المئوية للإنسولين ديجلوديك عند 30 درجة الحرارة كما تمت مراقبته بواسطة الاستشراب السائلي عالي الأداء ذي الطور العكسي كرد 944000 اد sr 56 ااا توسط مع 3 )1 المتواليات البنية العامة للسلسلة (أ) (المتوالية رقم: 1) GIVEQCCTSICSLYQLENYCXaa حيث تكون Xan عند الموضع 21 من المتوالية رقم: 1 عبارة عن 6 أو N السلسلة (أ) للمركب 12 (المتوالية رقم: 2) GIVEQCCTSICSLYQLENYCG 0 السلسلة )7( للمركب 19 (المتوالية رقم: 3( GIVEQCCTSICSLYQLENYCN السلسلة (ب) للمركبات 12 و19 (المتوالية رقم: 4) FVNQHLCGSHLVEALYLVCGERGFFYTPKT القمة اللاصقة C9 عند الطرف © (المتوالية رقم: 5) TETSQVAPA 5
Claims (1)
- — 1 3 — عناصر الحماية1. مركب له الصيغة NH, ب LO 0 af Oo H : :HO. ooo rnb rn Nn AL 1 Bn, HED SN ا رأ 1 ١١ أ أoo. 0 0 ضح ام OF OH و ردير - GIVEQCCTSICSLYQLENYC 38 0 7 / ! 1 / FVNQHLCGSHLVEALYLVYCGERGFFEYTP~ N 7 Cua تكون Xaa عبارة عن جلايسين glycine أو أسبارجين asparagine لحمض أمينى amino.acid 5 2. المركب Gg لعنصر الحماية 1ء حيث تكون Xaa عبارة عن جلايسين لحمض أمينى amino.acid glycine 3 المركب Gg لعنصر الحماية 1 حيث تكون Xaa عبارة عن أمينو حمض أسبارجين amino.acid asparagine4. تركيبة صيدلية pharmaceutical composition تشتمل على المركب By لأي واحد من عناصر 0 الحماية 3-1 وواحد أو أكثر من السواغات المقبولة pharmaceutically acceptable Ga ca.excipients5. مركب له الصيغة: عمقي من i 1 J 9.9 i o O :ّ 0 bh nS 1 1 : 0 Nog 1 لد اله امنا أن قن اداه ا اد ذا 2 rs HO A 50لاله الهيلة السعودية الملضية الفكرية ا Sued Authority for intallentual Property RE .¥ + \ ا 0 § 8 Ss o + < م SNE اج > عي كي الج TE I UN BE Ca a ةا ww جيثة > Ld Ed H Ed - 2 Ld وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها of سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. Ad صادرة عن + ب ب ٠. ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > فهذا ص ب 101١ .| لريا 1*١ v= ؛ المملكة | لعربية | لسعودية [email protected]
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201762511690P | 2017-05-26 | 2017-05-26 | |
| PCT/US2018/033418 WO2018217573A1 (en) | 2017-05-26 | 2018-05-18 | Acylated insulin compound |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA519410448B1 true SA519410448B1 (ar) | 2021-11-17 |
Family
ID=62528889
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA519410448A SA519410448B1 (ar) | 2017-05-26 | 2019-10-31 | مركب إنسولين معالج بأسيل |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US10400021B2 (ar) |
| EP (1) | EP3630165A1 (ar) |
| JP (1) | JP6665349B2 (ar) |
| KR (1) | KR102271057B1 (ar) |
| CN (1) | CN110691608B (ar) |
| AR (1) | AR112353A1 (ar) |
| AU (1) | AU2018273777B2 (ar) |
| BR (1) | BR112019021668A2 (ar) |
| CA (1) | CA3065078C (ar) |
| CL (1) | CL2019003259A1 (ar) |
| CO (1) | CO2019012964A2 (ar) |
| CR (1) | CR20190523A (ar) |
| DO (1) | DOP2019000296A (ar) |
| EA (1) | EA038073B1 (ar) |
| EC (1) | ECSP19083930A (ar) |
| IL (1) | IL270813B2 (ar) |
| JO (1) | JOP20190273A1 (ar) |
| MA (1) | MA49310A (ar) |
| MX (1) | MX2019014086A (ar) |
| PE (1) | PE20191836A1 (ar) |
| PH (1) | PH12019502655A1 (ar) |
| SA (1) | SA519410448B1 (ar) |
| TW (1) | TWI672315B (ar) |
| WO (1) | WO2018217573A1 (ar) |
| ZA (1) | ZA201906955B (ar) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW202039438A (zh) | 2018-12-11 | 2020-11-01 | 法商賽諾菲公司 | 胰島素接合物 |
| JP2022542301A (ja) | 2019-07-31 | 2022-09-30 | イーライ リリー アンド カンパニー | リラキシン類似体およびその使用方法 |
| WO2021136296A1 (zh) * | 2019-12-30 | 2021-07-08 | 甘李药业股份有限公司 | 胰岛素衍生物 |
| PE20230832A1 (es) | 2020-05-15 | 2023-05-19 | Lilly Co Eli | Compuestos de insulina acilada de accion temporal prolongada |
| TW202409070A (zh) | 2022-05-18 | 2024-03-01 | 美商普羅托莫科技公司 | 芳族含硼化合物及相關胰島素類似物 |
| WO2024051787A1 (zh) * | 2022-09-09 | 2024-03-14 | 北京惠之衡生物科技有限公司 | 一种长效酰化胰岛素衍生物及其应用 |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2306905A1 (en) * | 1997-10-24 | 1999-05-06 | Eli Lilly And Company | Fatty acid-acylated insulin analogs |
| US6444641B1 (en) | 1997-10-24 | 2002-09-03 | Eli Lilly Company | Fatty acid-acylated insulin analogs |
| JP4463814B2 (ja) * | 2003-08-05 | 2010-05-19 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | 新規のインスリン誘導体 |
| US20080171695A1 (en) | 2005-02-02 | 2008-07-17 | Novo Nordisk A/S | Insulin Derivatives |
| WO2009022006A1 (en) | 2007-08-15 | 2009-02-19 | Novo Nordisk A/S | Insulins with an acyl moiety comprising repeating units of alkylene glycol containing amino acids |
| US9150633B2 (en) * | 2007-08-15 | 2015-10-06 | Novo Nordisk A/S | Insulin analogues with an acyl and alkylene glycol moiety |
| MX2010009850A (es) * | 2008-03-18 | 2010-09-30 | Novo Nordisk As | Analogos de insulina acilados y etabilizados contra proteasas. |
| EP2376520B1 (en) * | 2008-12-19 | 2014-02-12 | Indiana University Research&Technology Corporation | Insulin analogs |
| CN105188736A (zh) | 2013-03-20 | 2015-12-23 | 诺和诺德股份有限公司 | 胰岛素给药方案 |
| EP2991672A1 (en) * | 2013-04-30 | 2016-03-09 | Novo Nordisk A/S | Novel administration regime |
| AR099569A1 (es) * | 2014-02-28 | 2016-08-03 | Novo Nordisk As | Derivados de insulina y los usos médicos de estos |
-
2017
- 2017-06-16 JO JOP/2019/0273A patent/JOP20190273A1/ar unknown
-
2018
- 2018-05-11 AR ARP180101254 patent/AR112353A1/es unknown
- 2018-05-11 TW TW107116025A patent/TWI672315B/zh active
- 2018-05-18 CR CR20190523A patent/CR20190523A/es unknown
- 2018-05-18 WO PCT/US2018/033418 patent/WO2018217573A1/en active Application Filing
- 2018-05-18 CA CA3065078A patent/CA3065078C/en active Active
- 2018-05-18 EA EA201992272A patent/EA038073B1/ru unknown
- 2018-05-18 BR BR112019021668-5A patent/BR112019021668A2/pt unknown
- 2018-05-18 CN CN201880034670.1A patent/CN110691608B/zh active Active
- 2018-05-18 US US15/983,167 patent/US10400021B2/en active Active
- 2018-05-18 MX MX2019014086A patent/MX2019014086A/es active IP Right Grant
- 2018-05-18 JP JP2019520536A patent/JP6665349B2/ja active Active
- 2018-05-18 KR KR1020197034368A patent/KR102271057B1/ko active Search and Examination
- 2018-05-18 IL IL270813A patent/IL270813B2/en unknown
- 2018-05-18 EP EP18729289.1A patent/EP3630165A1/en active Pending
- 2018-05-18 AU AU2018273777A patent/AU2018273777B2/en active Active
- 2018-05-18 MA MA049310A patent/MA49310A/fr unknown
- 2018-05-18 PE PE2019002403A patent/PE20191836A1/es unknown
-
2019
- 2019-08-01 US US16/529,095 patent/US10597436B2/en active Active
- 2019-10-22 ZA ZA2019/06955A patent/ZA201906955B/en unknown
- 2019-10-31 SA SA519410448A patent/SA519410448B1/ar unknown
- 2019-11-14 CL CL2019003259A patent/CL2019003259A1/es unknown
- 2019-11-19 CO CONC2019/0012964A patent/CO2019012964A2/es unknown
- 2019-11-22 DO DO2019000296A patent/DOP2019000296A/es unknown
- 2019-11-25 PH PH12019502655A patent/PH12019502655A1/en unknown
- 2019-11-25 EC ECSENADI201983930A patent/ECSP19083930A/es unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SA519410448B1 (ar) | مركب إنسولين معالج بأسيل | |
| US20230203121A1 (en) | Incretin Analogs and Uses Thereof | |
| EP3055325B1 (en) | Novel derivative of an insulin analogue | |
| JP7456007B2 (ja) | 長時間作用アシル化インスリン化合物 | |
| AU2020408139B2 (en) | Incretin analogs and uses thereof | |
| EP3921336B1 (en) | Glucagon analog agonists and methods of using the same | |
| WO2024137820A1 (en) | Insulin receptor antagonist | |
| Hoeg-Jensen | Design of insulin variants for improved treatment of diabetes | |
| TW202409070A (zh) | 芳族含硼化合物及相關胰島素類似物 | |
| CZ2014450A3 (cs) | Derivát insulinu s cyklickou strukturou v C-konci B-řetězce |