RU2812611C1

RU2812611C1 - Композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 и их фармацевтическое применение, включая противоопухолевые эффекты

Info

Publication number: RU2812611C1
Application number: RU2023106966A
Authority: RU
Inventors: Шо ВАН; Ли ФУ; Ян Лю; Минмин ЛУ; Жунсинь ЛИНЬ; Вэньфэй ФУ; Сюэ ФЭН
Original assignee: Далянь Фушэн Нэчурал Медсин Дивелопмент Ко., Лтд.
Priority date: 2020-08-25
Filing date: 2021-08-20
Publication date: 2024-01-30

Abstract

Группа изобретений относится к области медицинской химии и касается композиции, содержащей гинзенозид Rg3 и гинзенозид Rg5, способа ее получения, а также ее применения в производстве лекарств, пищевых продуктов и товаров для здоровья, предназначенных для повышения иммунитета. Способ получения композиции включает следующие этапы: (1) смешивание женьшеня обыкновенного с лекарственными материалами традиционной китайской медицины; (2) приготовление отвара из смеси, полученной на этапе (1), в воде несколько раз, а затем сбор и объединение отваров; (3) добавление осветляющего агента в отвар, полученный на этапе (2), тщательное перемешивание, настаивание и фильтрацию; (4) сушку фильтрата, приготовленного на этапе (3), с получением сухого вещества; (5) добавление водного раствора этанола к сухому веществу, полученному на этапе (4), нагревание до растворения, фильтрацию и осуществление процесса низкотемпературной кристаллизации; (6) сушку кристаллов, полученных на этапе (5). При этом лекарственные материалы традиционной китайской медицины выбраны из групп, состоящих из одного или нескольких из следующих лекарственных средств: корневище куркумы, аризема с желчью и корень стемоны, а массовое соотношение женьшеня обыкновенного и лекарственных материалов традиционной китайской медицины составляет от 1:100 до 100:1. Предлагается также композиция для повышения иммунитета, содержащая композицию, полученную указанным выше способом, и фармацевтически приемлемый или пищевой носитель, а также применение указанной выше композиции при приготовлении лекарственных средств для повышения иммунитета и способ повышения иммунитета, включающий введение эффективного количества такой композиции нуждающемуся в этом индивидууму. Композиция по изобретению обладает высокой эффективностью в повышении иммунитета, способ ее получения прост и пригоден для промышленного производства. 5 н. и 11 з.п. ф-лы, 18 табл.

Description

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к области медицинской химии. В частности, изобретение включает композицию из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 и способ ее получения, а также ее применение в производстве лекарств, пищевых продуктов и товаров для здоровья, предназначенных для повышения иммунитета, усиления противоопухолевого эффекта, снижения резистентности к противоопухолевым препаратам направленного действия, смягчения токсических и побочных эффектов лучевой терапии и химиотерапии, или улучшения эффекта борьбы с утомляемостью.

Предшествующий уровень техники

Panax ginseng (женьшень обыкновенный) относится к роду Panax семейства Araliaceae. Он широко используется в Китае, Корее и Японии уже более 2000 лет. Его основное назначение - профилактика заболеваний и продление продолжительности жизни. Согласно данным в классическом труде Шень-нуна по лекарственным препаратам, женьшень обыкновенный обладает терапевтическим действием: питает пять внутренних органов, успокаивает нервы, успокаивает разум, нормализует сердцебиение из-за испуга, устраняет зло, улучшает зрение и интеллект, способствует контролю массы тела и увеличению продолжительности жизни. Современные медицинские исследования показали, что основные функции и эффекты Panax ginseng включают регуляцию центральной нервной системы, противораковое и противоопухолевое действие, регуляцию иммунных функций, антидиабетическое действие, улучшение функции печени, облегчение сердечно-сосудистых и цереброваскулярных расстройств, антиартериосклеротические эффекты, регуляцию кровяного давления, облегчение климактерических расстройств, снижение остеопороза, а также уменьшение утомляемости, антиокислительное, а также омолаживающее действие, и т.д.

Являясь основными эффективными компонентами Panax ginseng, гинзенозид Rg3 и гинзенозид Rg5 обладают хорошими профилями безопасности и были разработаны в качестве противоопухолевых пероральных препаратов для клинического применения, и были проведены углубленные исследования их лекарственных форм для инъекций.

Однако авторы настоящего изобретения обнаружили, что в предшествующем уровне техники либо исследуются фармакологические эффекты Panax ginseng путем тестирования одного или нескольких экстрагированных и очищенных гинзенозидов, в которых количества гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 часто относительно близки, либо изучаются смеси и экстракты различных видов материалов традиционной китайской медицины (включая Panax ginseng), в которых содержание гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 обычно не определяется. Основываясь на многолетнем опыте исследований в традиционной китайской медицине и современной медицине, авторы изобретения разработали способ получения композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, который не только прост, требует мягких производственных условий, но также имеет множество форматов для широкого применения. Было получено большое количество эффективных композиций из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, которые могут широко использоваться для повышения иммунитета, обеспечения противоопухолевых эффектов, снижения резистентности к противоопухолевым препаратам, уменьшения токсических и побочных эффектов, вызванных лучевой терапией и химиотерапией, и достижения эффектов против утомляемости и т.д., и имеют широкие перспективы применения в области приготовления лекарств, пищевых продуктов и товаров для здоровья и т.д.

Краткое изложение сущности изобретения

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 по настоящему изобретению обладает высокой эффективностью в повышении иммунитета, обеспечении противоопухолевого действия, снижении резистентности к противоопухолевым препаратам, уменьшении токсических и побочных эффектов, вызванных лучевой терапией и химиотерапией, и обеспечении снижения утомляемости. Это также обеспечивает новый подход к разработке новых лекарств для лечения этих заболеваний. Настоящее изобретение пролило новый свет на разработку новых применений в лекарствах, пищевых продуктах или продуктах для здоровья с целью лечения, регуляции и облегчения таких заболеваний.

Для достижения вышеуказанных целей настоящее изобретение обеспечивает композицию из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, соответствующий способ получения и его применение.

В частности, указанный гинзенозид Rg3 представляет собой гинзенозид с конформацией S-типа, или гинзенозид с конформацией R-типа, или смесь этих двух типов гинзенозида Rg3 в любом соотношении.

В частности, в указанной композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 массовое отношение гинзенозида Rg3 к гинзенозиду Rg5 составляет 1-99:1-99.

В частности, указанная композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 представляет собой смесь Panax ginseng и других материалов традиционной китайской медицины, приготовленных с использованием специфического способа, и процентное отношение гинзенозида Rg3 к гинзенозиду Rg5 по массе в смеси компонентов традиционной китайской медицины составляет от 1% до 100%.

В частности, указанная композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 также включает комплекс из смеси Panax ginseng и других материалов традиционной китайской медицины, приготовленных с использованием специфического способа, и фармацевтически приемлемых носителей, обработанных и сформированных как физическими, так и химическими способами.

В частности, для фармацевтически приемлемых носителей, включая, без ограничения указанными, α-, β- или γ-циклодекстрин или их производные, массовое отношение смеси компонентов традиционной китайской медицины к носителю составляет от 1:1 до 1:100, предпочтительно 1:10, более предпочтительно 1:5, еще более предпочтительно 1:2, и еще более предпочтительно 1:1.

В частности, фармацевтически приемлемые носители обычно признаются специалистами в области медицины как подходящие для этой цели и в качестве неактивных ингредиентов в фармацевтических средствах. Подборку фармацевтически приемлемых носителей можно найти в Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd edition, под редакцией Wade and P. J. Weller, опубликованном American Pharmaceutical Association, Вашингтон и The Pharmaceutical Press, Лондон, 1994. Пищевые добавки - это непитательные вещества, которые специально добавляют в пищевые продукты в небольших количествах для улучшения внешнего вида, вкуса, текстуры или свойств продуктов при хранении. Соответствующие пищевые добавки можно найти в Национальном стандарте безопасности пищевых продуктов Китая и Стандартах использования пищевых добавок.

В частности, указанный носитель содержит вспомогательные вещества, такие как крахмал и вода, любриканты, такие как стеарат магния, дезинтегранты, такие как микрокристаллическая целлюлоза, наполнители, такие как лактоза; связующие агенты, такие как прежелатинизированный крахмал и декстрин, подсластители, антиоксиданты, консерванты, ароматизаторы, красители и специи.

В частности, указанное лекарственное средство может существовать в лекарственных формах в виде таблеток, капсул, пилюль, порошка, гранул, сиропа, раствора, эмульсии, инъекции, спрея, аэрозоля, геля, крема, припарки, лейкопластыря или пластыря.

В частности, указанные пищевые продукты могут существовать в таких формах пищевых продуктов, как молочные продукты, кондитерские изделия, напитки, печенье, чайные листья и сопутствующие продукты, вино и тому подобное.

В частности, указанные продукты здорового питания могут существовать в форме таблеток, капсул, пилюль, порошка, гранул, сиропа, раствора, эмульсии, спрея, аэрозоля, геля, крема, припарки, лейкопластыря или пластырей, или в формах пищевых продуктов, таких как молочные продукты, кондитерские изделия, напитки, печенье, чай и сопутствующие товары, вино и тому подобное.

При этом массовое отношение компонентов традиционной китайской медицины к циклодекстринам или их производным в указанном комплексе составляет 1:1-100.

В частности, указанный циклодекстрин представляет собой α-, β- или γ-циклодекстрин; указанные производные циклодекстрина представляют собой гидроксиэтил-α-циклодекстрин, 2,6-диметил-α-циклодекстрин, 2,3,6-триметил-α-циклодекстрин, 2,6-диэтил-α-циклодекстрин, 2,3,6-триэтил-α-циклодекстрин, мальтозил-α-циклодекстрин или сульфобутилэфир-β-циклодекстрин, пара-толуолсульфонилхлорид (Р-TsCl) замещенный β-циклодекстрин, замещенный в 6 положении β-ЦД пара-толуолсульфонат (β-циклодекстрин-6-ОТs), 2-оксогидроксипропил-β-циклодекстрин, однозамещенный во 2 положении пара-толуолсульфонат (2-β-циклодекстрин-2-ОТs), β-циклодекстрин пара-толуолсульфонат (тозил-β-ЦД) и PCL-(Тos) 7-β-CD, и звездообразные макромолекулы β-циклодекстрина.

Более конкретно, первый аспект настоящего изобретения обеспечивает способ получения композиции, содержащей гинзенозид Rg3 и гинзенозид Rg5, который включает следующие стадии:

(1) смешивание Panax ginseng с материалами традиционной китайской медицины;

(2) отваривание смеси, полученной на этапе (1), несколько раз с водой, а затем сбор и объединение отваров;

(3) добавление осветляющего агента в отвар, полученный на этапе (2), тщательное перемешивание, настаивание и фильтрацию;

(4) сушку фильтрата, полученного на этапе (3), с получением сухого вещества;

(5) добавление водного раствор этанола к сухому веществу, полученному на этапе (4), нагревание до растворения, фильтрацию и проведение процесса низкотемпературной кристаллизации;

6) сушку кристаллов, полученных на этапе (5).

При этом указанный материал традиционной китайской медицины не является Panax ginseng. Предпочтительно, в способе первого аспекта изобретения указанные материалы традиционной китайской медицины выбраны из группы из одного или нескольких из следующих лекарственных средств, включая шелковицу, жареные плоды померанца, корень пиона белый, плоды цитрона пальчатого, корневище лотоса орехоносного, жареные незрелые плоды померанца, орех гинкго, чашечки цветков хурмы восточной, лист борца Кузнецова, стручок лотоса, кору айланта высочайшего, ветки туи восточной, кожуру граната обыкновенного, кизил лекарственный, чернильный орех, корневище блетиллы, белый аконит, плоды мелии, корень трихозанта, кодонопсис мелковорсистый, ирис пурпурный, артемизию однолетнюю, шипы гледичии китайской, плоды фенхеля, плоды кохии веничной, косточки персика, плоды абрикоса китайского, траву эпимедиума, кутикулу куриного желудка, корень эйхманнии, диоскорею супротивную, корень горечавки крупнолистной, корень аденофоры, пиррозию язычную, шалфей многокорневищный, семена ипомеи, семена пажитника, семена долихоса пурпурного, плоды периллы, корневище пинеллии, корневище коптиса китайского, плоды псоралеи лещинолистной, кору бархата китайского, корневище хохлатки, плоды канариума белого, эклипту простертую, папайю, траву портулака, цитрон, соломоцвет двузубый, малину сахалинскую, горец многоцветковый, кору ясеня носолистного, трахикарпус Форчуна, семя лотоса, траву репешка волосистого, зеленую сливу, квасцы, околоплодник мака, терминалию хебулу, шиповник гладкий, кровохлебку лекарственную, миндаль обыкновенный, околоплодник мандарина, гардению жасминовидную, плоды бирючины блестящей, переработанный корневой клубень ремании клейкой, корень шлемника, корневище тростника, корень астрагала, корневище куркумы, кору шелковицы, корень офиопогона, семена бетелевой пальмы, ладан-сырец, стебель спатолобуса, корневище атрактилодеса большеголового, кору дерезы, дягиль китайский, копченые незрелые плоды абрикоса японского, побеги ячменя обыкновенного, листья мушмулы японской, семена плосковеточника восточного, корицу, корень спаржи, мирру-сырец, корень платикодона, перотис индийский, обработанный вторичный корень аконита, цветы хризантемы, корень горькуши, корень стемоны, корневище ежеголовника, кору эвкоммии, кожуру плодов мандарина, ревень лекарственный, околоплодник бетелевой пальмы, гастродию высокую, корень ложнозвездчатки, корень пиона лекарственного, цветы девясила, черноголовку обыкновенную, семена повилики японской, дринарию Форчуна, корень куркумы, аризему с желчью, корень стемоны, траву одуванчика монгольского, солодку, корневище клопогона, хохлатку Бунге, марену сердцелистную, корень линдеры, кору корня элеутерококка тонкостебельного, корень аконита, оклоплодник личи, плоды эмблики лекарственной, корневище беламканды, листья вайды, плоды эводии, цветы сафлора, корневище сыти, лимонник китайский, семена зизифуса настоящего, плоды боярышника и корень воробейника.

Более предпочтительно, указанные лекарственные материалы традиционной китайской медицины выбраны из группы из одного или нескольких из следующих лекарственных средств, включая корень куркумы, аризему с желчью, корни стемоны, цветы хризантемы, корень горькуши, лимонник китайский, корневище ежеголовника, корневище атрактилодеса большеголового, плоды эмблики, семя ипомеи, кору бархата китайского, плоды псоралеи лещинолистной, семена долихоса пурпурного, копченые незрелые плоды абрикоса японского, плоды периллы, шалфей многокорневищный, пиррозию язычную, диоскорею супротивную, корень эйхманнии, корень горечавки крупнолистной, корень аденофоры, корневище коптиса китайского, семена пажитника, корневище хохлатки, зеленую сливу, кору эвкоммии, кожуру плодов мандарина, семена зизифуса настоящего, орех гинкго, кожуру граната обыкновенного, косточки персика, корневище блетиллы, семена повилики японской, плоды боярышника, корень пиона белый, ветки туи восточной, корень ложнозвездчатки, корень пиона лекарственного, плоды фенхеля, артемизию однолетнюю, чернильный орех, корень трихонзата, кодонопсис мелковорсистый, плоды мелии, кизил лекарственный, незрелые плоды померанца, стручок лотоса, шелковицу, кутикулу куриного желудка, плоды померанца, кору айланта, борец Кузнецова, астру ромашковую, шипы гледичии китайской, плоды кохии веничной, корневище пинеллии, корень и корневище ревеня, гастродию высокую, цветы девясила и черноголовку обыкновенную.

Предпочтительно, в способе из первого аспекта настоящего изобретения массовое соотношение женьшеня обыкновенного к лекарственным материалам традиционной китайской медицины составляет от 1:100 до 100:1, например, 1:90-100, 1:45-55, 10:8-12, 45-55:1 или 90-100:1, предпочтительно 1:100, 1:50, 10:10, 50:1 или 100:1.

Предпочтительно, в способе из первого аспекта настоящего изобретения количество приготовлений отваров составляет 2-5 раз, предпочтительно 3 раза. Каждый раз после завершения приготовления отваров собирают отвар для последующего использования. Если требуется больше отвара путем добавления воды, берут остаток от фильтра после сбора отвара и снова добавляют воду для приготовления отвара до тех пор, пока не будет завершено последнее приготовление отвара путем добавления воды, а затем объединяют полученный отвар с ранее собранными отварами.

Предпочтительно, в способе из первого аспекта настоящего изобретения масса воды, используемой для каждого отвара, в 2-100 раз, предпочтительно в 2-80 раз и более предпочтительно в 2-50 раз превышает общую массу женьшеня обыкновенного и лекарственных материалов традиционной китайской медицины.

Предпочтительно, в способе из первого аспекта настоящего изобретения время приготовления каждого отвара составляет 1-36 часов, предпочтительно 2-24 часа и более предпочтительно 5-12 часов.

Предпочтительно, в способе из первого аспекта настоящего изобретения температура для каждого приготовления отвара составляет 90-100°C, предпочтительно 95-100°C, например, отвар поддерживают в состоянии кипения. Приготовление отвара осуществляют в плотно закрытом контейнере.

Предпочтительно, в способе из первого аспекта настоящего изобретения осветляющий агент является приемлемым осветляющим агентом в фармацевтической и/или пищевой промышленности, таким как натуральный осветляющий агент. Такие осветляющие агенты имеются в продаже, такие как осветлители ZTC1+1. Добавляемое количество осветлителя ZTC1+1 составляет 200-800 ppm, т.е. конечную концентрацию реагента.

Предпочтительно, в способе из первого аспекта настоящего изобретения время настаивания составляет 4-48 часов, предпочтительно 4-24 часов и более предпочтительно 8-12 часов.

Предпочтительно, в способе из первого аспекта настоящего изобретения концентрация водного раствора этанола, используемого для кристаллизации, составляет 40-90% (об./об.), предпочтительно 50-80% (об./об.). Более предпочтительно, масса водного раствора этанола в 2-500 раз, и более предпочтительно в 10-100 раз превышает массу сухого вещества, полученного путем сушки фильтрата, извлеченного на этапе (3).

Предпочтительно, в способ из первого аспекта изобретения также может быть включен этап детекции, следующий за этапом (6). Например, содержание такого компонента, как гинзенозид Rg3 и/или гинзенозид Rg5, определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Второй аспект настоящего изобретения обеспечивает композицию, содержащую гинзенозид Rg3 и гинзенозид Rg5, которая приготовлена способом из первого аспекта настоящего изобретения. При этом гинзенозид Rg3 может быть гинзенозидом Rg3 S-типа или гинзенозидом Rg3 R-типа, или смесью двух вышеуказанных конформаций.

Предпочтительно, в композиции из второго аспекта настоящего изобретения массовое отношение гинзенозида Rg3 к гинзенозиду Rg5 составляет 1-99:1-99.

Предпочтительно, в композиции из второго аспекта настоящего изобретения процентное содержание от общей массы гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в композиции составляет от 1% до 100%, предпочтительно от 2% до 99%, например, от 98,0% до 100% или от 98,0% до 99%.

Предпочтительно, в композиции из второго аспекта настоящего изобретения массовое отношение гинзенозида Rg3 к гинзенозиду Rg5 составляет от 1:99 до 99:1.

Третий аспект настоящего изобретения обеспечивает комплексный состав, который включает композицию из второго аспекта изобретения и носитель, приемлемый в фармацевтической или пищевой промышленности.

Предпочтительно, в комплексном составе из третьего аспекта настоящего изобретения массовое отношение композиции из второго аспекта настоящего изобретения к носителю, приемлемому в фармацевтической или пищевой промышленности, составляет от 1:1 до 1:100.

Предпочтительно, комплексный состав из третьего аспекта настоящего изобретения может быть фармацевтической композицией, которая включает композицию из второго аспекта настоящего изобретения и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтически приемлемый носитель включает α-, β- или γ-циклодекстрин или их производные, но не ограничивается ими. Предпочтительно, указанная фармацевтическая композиция может существовать в лекарственных формах в виде таблеток, капсул, пилюль, порошка, гранул, сиропа, раствора, эмульсии, инъекции, спрея, аэрозоля, геля, крема, припарки, лейкопластыря или пластыря.

Предпочтительно, комплексный состав из третьего аспекта настоящего изобретения может представлять собой пищевую композицию, которая может существовать в формах пищевых продуктов, таких как молочные продукты, кондитерские изделия, напитки, печенье, чай и сопутствующие продукты, вино и тому подобное.

Предпочтительно, комплексный состав из третьего аспекта настоящего изобретения может представлять собой композицию продуктов для здоровья, которые могут существовать в формах таблеток, капсул, пилюль, порошка, гранул, сиропа, раствора, эмульсии, спрея, аэрозоля, геля, крема, припарки, лейкопластыря или пластыря, или в виде пищевых продуктов, таких как молочные продукты, кондитерские изделия, напитки, печенье, чай и сопутствующие продукты, вино и тому подобное.

Четвертый аспект настоящего изобретения обеспечивает применение композиции из второго аспекта настоящего изобретения в производстве лекарств, пищевых продуктов и товаров для здоровья для повышения иммунитета, усиления противоопухолевых эффектов, снижения резистентности к противоопухолевым лекарственным средствам, ослабления токсических и побочных эффектов лучевой терапии и химиотерапии, или улучшения эффекта снижения утомляемости. Соответственно, пятый аспект настоящего изобретения обеспечивает способ повышения иммунитета, усиления противоопухолевого эффекта, ослабления резистентности к противоопухолевым лекарственным средствам направленного действия, смягчения токсических и побочных эффектов, вызванных лучевой терапией и химиотерапией, или улучшения эффекта снижения утомляемости, включающий применение композиции из второго аспекта настоящего изобретения в эффективном количестве у индивидуумов, которые нуждаются в композиции.

При этом предпочтительно индивидуумами являются люди, и эффективная доза для людей может быть рассчитана путем преобразования эффективной дозы, полученной в результате экспериментов на животных, в эквивалентную дозу для людей.

По сравнению с известным уровнем техники настоящее изобретение обладает следующими очевидными преимуществами:

Способ получения композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 по настоящему изобретению прост и пригоден для промышленного производства. Указанная композиция обладает очевидными эффектами повышения иммунитета, усиления противоопухолевого эффекта, снижения резистентности к противоопухолевым препаратам направленного действия, смягчения токсических и побочных эффектов, вызванных лучевой терапией и химиотерапией, или улучшения эффекта снижения утомляемости, и имеет хорошие перспективы для применения.

1. Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 по изобретению имеет уникальную формулу, высокий профиль безопасности и контролируемое качество;

2. Композиция по настоящему изобретению выявляет новые фармацевтические ценности, и серия экспериментальных исследований доказала, что композиция обладает эффектами повышения иммунитета, усиления противоопухолевого эффекта, снижения резистентности к противоопухолевым препаратам направленного действия, смягчения токсических и побочных эффектов, вызванных лучевой терапией и химиотерапией, или улучшения эффекта снижения утомляемости, с определенным лечебным эффектом;

3. Композиция по настоящему изобретению обладает следующими преимуществами: она проста в приготовлении и требует мягких производственных условий, имеет низкую стоимость и имеет множество рецептур для широкого применения;

4. Продукт по настоящему изобретению имеет богатый источник сырья, низкую цену, безопасное клиническое применение, простой процесс приготовления и может быть приготовлен в различных лекарственных формах; кроме того, дозировка невелика, а использование удобно. Следовательно, его легко популяризировать.

Подробное описание изобретения

Полезные эффекты композиций, представленных в настоящем изобретении, дополнительно описаны ниже с использованием конкретных вариантов осуществления. Эти примерные варианты осуществления являются только иллюстративными и не представляют собой какого-либо ограничения объема настоящего изобретения. Специалистам в данной области техники следует понимать, что детали и формы технического предложения по настоящему изобретению могут быть изменены или заменены без отступления от идей формулировки и сферы применения настоящего изобретения. Однако все эти модификации и замены подпадают под сферу охраны настоящего изобретения.

Примерные варианты осуществления 1-180: Приготовление композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Конкретный технологический процесс является следующим: смесь женьшеня обыкновенного и другого сырья отваривают в воде три раза, объединяют водный раствор и концентрируют смесь до отношения неочищенный препарат/вода 1:5 (об./об.), поддерживают температуру на уровне 60-80°C, добавляют осветлитель ZTC1+1-II (его можно приобрести у Wuhan Zheng Tian Cheng Biological Science & Technology Co., Ltd.) до конечной концентрации 500 ppm, равномерно перемешивают, дают отстояться, фильтруют, сушат фильтрат, добавляют раствор этанола для растворения при 60°C, охлаждают после фильтрации, отделяют кристаллы на водяной бане со льдом, собирают осадок и сушат до получения готового продукта. Содержание каждого компонента определяют методом ВЭЖХ.

Женьшень обыкновенный соответственно взвешивают с различными неочищенными лекарственными средствами в соответствии с массами, описанными в таблице 1, а затем смешивают и экстрагируют в соответствии с вышеуказанным способом и параметрами, описанными в таблице 2 для приготовления. Данные испытаний полученного готового продукта представлены в таблице 3.

Таблица 1. Соотношение сырьевых материалов и массы готового продукта в примерном варианте осуществления 1-180

Серийный номер композиции	Другие сырьевые материалы	Масса женьшеня обыкновенного (г)	Масса других сырьевых материалов (г)	Количество готовых продуктов (г)
1 (или A)	Корень куркумы	100	1	3,2
2 (или B)		100	10000	23,6
3 (или C)		100	5000	8,1
4 (или D)	Аризема с желчью	100	100	6,2
5 (или E)		100	10000	22,0
6 (или F)		100	5000	7,9
7 (или G)	Корень стемоны	100	1	3,1
8 (или H)		100	10000	22,5
9 (или I)		100	5000	7,8
10	Цветы хризантемы	100	1	2,8
11		100	10000	19,3
12		100	5000	6,4
13	Корень горькуши	100	100	6,0
14		100	10000	21,8
15		100	5000	7,7
16	Лимонник китайский	100	1	3,3
17		100	10000	22,9
18		100	5000	7,9
19	Корневище ежеголовника	100	1	3,7
20		100	10000	22,9
21		100	5000	8,5
22	Корневище атрактилодеса большеголового	100	100	6,6
23		100	10000	21,9
24		100	5000	7,7
25	Эмблика лекарственная	100	1	3,3
26		100	10000	22,5
27		100	5000	7,9
28	Семена ипомеи	100	1	3,0
29		100	10000	23,1
30		100	5000	8,0
31	Кора бархата китайского	100	100	6,4
32		100	10000	23,4
33		100	5000	8,2
34	Плоды псоралеи лещинолистной	100	1	3,2
35		100	10000	22,8
36		100	5000	8,3
37	Семена долихоса пурпурного	100	1	2,9
38		100	10000	23,3
39		100	5000	7,7
40	Копченые незрелые плоды абрикоса китайского	100	100	6,9
41		100	10000	22,8
42		100	5000	8,3
43	Плоды периллы	100	1	3,8
44		100	10000	22,8
45		100	5000	8,2
46	Шалфей многокорневищный	100	1	3,8
47		100	10000	24,0
48		100	5000	9,3
49	Пиррозия язычная	100	100	7,4
50		100	10000	22,0
51		100	5000	7,9
52	Диоскорея супротивная	100	1	4,5
53		100	10000	24,9
54		100	5000	8,8
55	Сухое корневище ремании	100	1	4,7
56		100	10000	26,7
57		100	5000	10,3
58	Корень горечавки крупнолистной	100	100	6,1
59		100	10000	21,8
60		100	5000	8,3
61	Корень аденофоры прямой	100	1	4,2
62		100	10000	25,6
63		100	5000	8,7
64	Корневище коптиса китайского	100	1	3,7
65		100	10000	25,0
66		100	5000	9,3
67	Пажитник сенной	100	100	5,3
68		100	10000	18,6
69		100	5000	4,6
70	Корневище хохлатки	100	1	3,9
71		100	10000	24,8
72		100	5000	9,0
73	Абрикос китайский	100	1	3,6
74		100	10000	22,8
75		100	5000	7,3
76	Кора эвкоммии	100	100	6,4
77		100	10000	21,2
78		100	5000	8,9
79	Кожура мандарина	100	1	4,2
80		100	10000	23,6
81		100	5000	8,9
82	Семена зизифуса настоящего	100	1	4,5
83		100	10000	25,9
84		100	5000	7,4
85	Орех гинкго	100	100	6,7
86		100	10000	21,5
87		100	5000	6,4
88	Кожура граната обыкновенного	100	1	1,7
89		100	10000	23,1
90		100	5000	8,4
91	Косточки персика	100	1	4,9
92		100	10000	23,3
93		100	5000	8,8
94	Блетилла полосатая	100	100	6,0
95		100	10000	22,8
96		100	5000	7,7
97	Семена повилики японской	100	1	3,0
98		100	10000	22,4
99		100	5000	7,7
100	Боярышник перистонадрезан-ный	100	1	3,2
101		100	10000	23,1
102		100	5000	8,2
103	Корень пиона белый	100	100	6,3
104		100	10000	22,9
105		100	5000	7,0
106	Листья плосковеточника восточного	100	1	3,0
107		100	10000	22,7
108		100	5000	7,6
109	Ложнозвездчатка разнолистная	100	1	3,4
110		100	10000	23,4
111		100	5000	8,2
112	Корень пиона лекарственного	100	100	6,9
113		100	10000	22,4
114		100	5000	7,5
115	Сухие плоды фенхеля обыкновенного	100	1	3,6
116		100	10000	22,0
117		100	5000	7,4
118	Артемизия однолетняя	100	1	3,2
119		100	10000	23,3
120		100	5000	8,4
121	Галлы китайские	100	100	6,0
122		100	10000	22,2
123		100	5000	7,8
124	Корень трихозанта	100	1	3,2
125		100	10000	22,5
126		100	5000	7,7
127	Кодонопсис мелковорсистый	100	1	3,3
128		100	10000	23,9
129		100	5000	8,8
130	Плоды мелии	100	100	6,6
131		100	10000	22,6
132		100	5000	7,4
133	Плоды кизила	100	1	3,6
134		100	10000	22,1
135		100	5000	7,2
136	Померанец	100	1	3,9
137		100	10000	23,9
138		100	5000	8,1
139	Стручок лотоса	100	100	6,1
140		100	10000	22,1
141		100	5000	7,0
142	Шелковица	100	1	3,3
143		100	10000	22,7
144		100	5000	7,1
145	Кутикула куриных желудков	100	1	3,5
146		100	10000	23,0
147		100	5000	8,5
148	Плоды померанца	100	100	6,7
149		100	10000	22,5
150		100	5000	7,5
151	Кора айланта	100	1	3,2
152		100	10000	22,8
153		100	5000	7,3
154	Борец Кузнецова	100	1	3,9
155		100	10000	23,5
156		100	5000	8,3
157	Астра ромашковая	100	100	6,4
158		100	10000	22,6
159		100	5000	7,7
160	Шипы гледичии китайской	100	1	3,1
161		100	10000	22,6
162		100	5000	7,1
163	Плоды кохии веничной	100	1	3,7
164		100	10000	23,3
165		100	5000	8,0
166	Пинеллия тройчатая	100	100	6,4
167		100	10000	22,5
168		100	5000	7,5
169	Ревень лекарственный	100	1	3,9
170		100	10000	22,5
171		100	5000	7,9
172	Гастродия высокая	100	1	3,1
173		100	10000	23,8
174		100	5000	8,0
175	Цветы девясила	100	100	6,5
176		100	10000	22,9
177		100	5000	7,4
178	Черноголовка обыкновенная	100	1	3,7
179		100	10000	22,2
180		100	5000	7,0

Таблица 2. Параметры способа приготовления образца для примерных вариантов осуществления 1-180

Серийный номер композиции	Количество воды (мл)	Время настаивания (часы)	Содержание этанола (%)	Количество этанола (мл)
1	4000	8	50	200
2	400000	8	50	2000
3	250000	8	60	1000
4	8000	12	60	200
5	400000	12	70	2000
6	200000	12	70	1000
7	5000	24	80	200
8	500000	24	80	2000
9	250000	24	80	1000
10	4000	8	50	200
11	400000	8	50	2000
12	250000	8	60	1000
13	8000	12	60	200
14	400000	12	70	2000
15	200000	12	70	1000
16	5000	24	80	200
17	500000	24	80	2000
18	250000	24	80	1000
19	4000	8	50	200
20	400000	8	50	2000
21	250000	8	60	1000
22	8000	12	60	200
23	400000	12	70	2000
24	200000	12	70	1000
25	5000	24	80	200
26	500000	24	80	2000
27	250000	24	80	1000
28	4000	8	50	200
29	400000	8	50	2000
30	250000	8	60	1000
31	8000	12	60	200
32	400000	12	70	2000
33	200000	12	70	1000
34	5000	24	80	200
35	500000	24	80	2000
36	250000	24	80	1000
37	4000	8	50	200
38	400000	8	50	2000
39	250000	8	60	1000
40	8000	12	60	200
41	400000	12	70	2000
42	200000	12	70	1000
43	5000	24	80	200
44	500000	24	80	2000
45	250000	24	80	1000
46	4000	8	50	200
47	400000	8	50	2000
48	250000	8	60	1000
49	8000	12	60	200
50	400000	12	70	2000
51	200000	12	70	1000
52	5000	24	80	200
53	500000	24	80	2000
54	250000	24	80	1000
55	4000	8	50	200
56	400000	8	50	2000
57	250000	8	60	1000
58	8000	12	60	200
59	400000	12	70	2000
60	200000	12	70	1000
61	5000	24	80	200
62	500000	24	80	2000
63	250000	24	80	1000
64	4000	8	50	200
65	400000	8	50	2000
66	250000	8	60	1000
67	8000	12	60	200
68	400000	12	70	2000
69	200000	12	70	1000
70	5000	24	80	200
71	500000	24	80	2000
72	250000	24	80	1000
73	4000	8	50	200
74	400000	8	50	2000
75	250000	8	60	1000
76	8000	12	60	200
77	400000	12	70	2000
78	200000	12	70	1000
79	5000	24	80	200
80	500000	24	80	2000
81	250000	24	80	1000
82	4000	8	50	200
83	400000	8	50	2000
84	250000	8	60	1000
85	8000	12	60	200
86	400000	12	70	2000
87	200000	12	70	1000
88	5000	24	80	200
89	500000	24	80	2000
90	250000	24	80	1000
91	4000	8	50	200
92	400000	8	50	2000
93	250000	8	60	1000
94	8000	12	60	200
95	400000	12	70	2000
96	200000	12	70	1000
97	5000	24	80	200
98	500000	24	80	2000
99	250000	24	80	1000
100	4000	8	50	200
101	400000	8	50	2000
102	250000	8	60	1000
103	8000	12	60	200
104	400000	12	70	2000
105	200000	12	70	1000
106	5000	24	80	200
107	500000	24	80	2000
108	250000	24	80	1000
109	4000	8	50	200
110	400000	8	50	2000
111	250000	8	60	1000
112	8000	12	60	200
113	400000	12	70	2000
114	200000	12	70	1000
115	5000	24	80	200
116	500000	24	80	2000
117	250000	24	80	1000
118	4000	8	50	200
119	400000	8	50	2000
120	250000	8	60	1000
121	8000	12	60	200
122	400000	12	70	2000
123	200000	12	70	1000
124	5000	24	80	200
125	500000	24	80	2000
126	250000	24	80	1000
127	4000	8	50	200
128	400000	8	50	2000
129	250000	8	60	1000
130	8000	12	60	200
131	400000	12	70	2000
132	200000	12	70	1000
133	5000	24	80	200
134	500000	24	80	2000
135	250000	24	80	1000
136	4000	8	50	200
137	400000	8	50	2000
138	250000	8	60	1000
139	8000	12	60	200
140	400000	12	70	2000
141	200000	12	70	1000
142	5000	24	80	200
143	500000	24	80	2000
144	250000	24	80	1000
145	4000	8	50	200
146	400000	8	50	2000
147	250000	8	60	1000
148	8000	12	60	200
149	400000	12	70	2000
150	200000	12	70	1000
151	5000	24	80	200
152	500000	24	80	2000
153	250000	24	80	1000
154	4000	8	50	200
155	400000	8	50	2000
156	250000	8	60	1000
157	8000	12	60	200
158	400000	12	70	2000
159	200000	12	70	1000
160	5000	24	80	200
161	500000	24	80	2000
162	250000	24	80	1000
163	4000	8	50	200
164	400000	8	50	2000
165	250000	8	60	1000
166	8000	12	60	200
167	400000	12	70	2000
168	200000	12	70	1000
169	5000	24	80	200
170	500000	24	80	2000
171	250000	24	80	1000
172	4000	8	50	200
173	400000	8	50	2000
174	250000	8	60	1000
175	8000	12	60	200
176	400000	12	70	2000
177	200000	12	70	1000
178	5000	24	80	200
179	500000	24	80	2000
180	250000	24	80	1000

Таблица 3. Содержание композиции из Примерных вариантов осуществления 1-180

Серийный номер композиции	Содержание Rg3 и Rg5 в композиции	Доля каждого компонента в композиции (%)
Серийный номер композиции	Содержание Rg3 и Rg5 в композиции	S-Rg3	R-Rg3	Rg5
1	98,1%	1	98	1
2	2,2%	1	1	98
3	11,6%	98	1	1
4	98,0%	98	1	1
5	2,4%	1	98	1
6	10,7%	1	98	1
7	98,3%	1	1	98
8	2,3%	98	1	1
9	10,1%	1	1	98
10	98,2%	1	98	1
11	3,1%	1	1	98
12	11,8%	98	1	1
13	97,3%	97	2	1
14	3,3%	1	98	1
15	10,9%	1	98	1
16	98,1%	1	1	98
17	2,7%	98	1	1
18	10,0%	1	1	98
19	98,1%	2	96	2
20	2,7%	1	1	98
21	11,4%	98	1	1
22	98,6%	98	1	1
23	2,6%	1	98	1
24	10,4%	2	95	3
25	98,4%	1	1	98
26	3,2%	98	1	1
27	10,8%	1	1	98
28	97,9%	1	98	1
29	2,6%	1	1	98
30	11,8%	98	1	1
31	97,8%	98	1	1
32	2,4%	3	96	1
33	10,4%	1	98	1
34	98,9%	1	1	98
35	2,5%	98	1	1
36	10,7%	1	1	98
37	98,8%	1	98	1
38	2,5%	1	1	98
39	11,6%	98	1	1
40	98,3%	98	1	1
41	2,6%	2	97	1
42	10,8%	1	98	1
43	98,5%	1	1	98
44	2,4%	98	1	1
45	10,1%	1	1	98
46	98,4%	3	96	1
47	2,2%	1	1	98
48	11,4%	98	1	1
49	98,1%	97	1	2
50	2,5%	1	98	1
51	10,6%	1	98	1
52	98,6%	1	1	98
53	2,8%	98	1	1
54	10,6%	1	1	98
55	98,4%	1	98	1
56	2,8%	1	1	98
57	11,2%	96	1	3
58	98,3%	97	1	2
59	2,6%	1	98	1
60	10,7%	1	98	1
61	98,7%	1	1	98
62	2,4%	98	1	1
63	10,2%	1	1	98
64	98,6%	1	97	2
65	2,4%	1	1	98
66	11,4%	98	1	1
67	98,5%	98	1	1
68	2,7%	1	95	4
69	10,7%	1	98	1
70	98,5%	1	1	98
71	2,8%	98	1	1
72	10,8%	1	1	98
73	98,7%	2	93	5
74	2,5%	1	1	98
75	11,4%	98	1	1
76	98,6%	98	1	1
77	2,1%	1	97	2
78	10,8%	1	98	1
79	98,4%	1	1	98
80	2,6%	98	1	1
81	10,2%	1	1	98
82	98,3%	0	99	1
83	2,6%	1	1	98
84	11,5%	98	1	1
85	98,8%	98	1	1
86	2,4%	1	98	1
87	10,8%	5	94	1
88	98,5%	1	1	98
89	2,5%	98	1	1
90	11,2%	1	1	98
91	98,1%	1	98	1
92	2,6%	1	1	98
93	11,0%	98	1	1
94	98,4%	98	1	1
95	2,3%	1	97	2
96	10,4%	1	98	1
97	98,5%	1	1	98
98	2,3%	98	1	1
99	10,3%	1	1	98
100	98,5%	1	96	3
101	2,1%	1	1	98
102	11,3%	98	1	1
103	97,6%	98	1	1
104	2,4%	1	98	1
105	10,5%	1	98	1
106	97,8%	1	1	98
107	2,8%	97	1	2
108	10,3%	1	1	98
109	98,4%	1	98	1
110	3,8%	1	2	97
111	11,5%	98	1	1
112	98,5%	98	1	1
113	2,5%	1	98	1
114	10,4%	1	98	1
115	97,6%	1	1	98
116	2,8%	98	1	1
117	10,5%	1	1	98
118	97,5%	1	98	1
119	2,4%	2	2	96
120	11,3%	98	1	1
121	98,4%	98	1	1
122	2,5%	1	98	1
123	10,8%	1	98	1
124	98,5%	1	1	98
125	2,6%	98	1	1
126	10,5%	1	1	98
127	97,9%	1	96	3
128	2,5%	1	1	98
129	11,4%	98	1	1
130	98,8%	98	1	1
131	2,8%	1	98	1
132	10,5%	1	98	1
133	98,4%	1	1	98
134	2,5%	98	1	1
135	10,5%	1	1	98
136	98,5%	1	97	2
137	2,3%	1	1	98
138	11,7%	98	1	1
139	97,8%	98	1	1
140	2,8%	1	95	4
141	10,5%	1	98	1
142	98,3%	1	1	98
143	2,8%	98	1	1
144	10,4%	1	1	98
145	98,0%	1	98	1
146	2,6%	1	1	98
147	11,0%	98	1	1
148	98,1%	98	1	1
149	2,5%	1	98	1
150	10,8%	3	92	5
151	98,7%	1	1	98
152	2,2%	98	1	1
153	10,4%	1	1	98
154	98,8%	1	98	1
155	2,6%	1	1	98
156	11,7%	98	1	1
157	98,2%	98	1	1
158	2,4%	3	93	4
159	11,6%	1	98	1
160	98,8%	1	1	98
161	2,7%	96	3	1
162	10,1%	1	1	98
163	98,3%	1	98	1
164	2,5%	1	1	98
165	11,7%	98	1	1
166	98,8%	98	1	1
167	2,1%	1	92	7
168	10,2%	1	98	1
169	98,5%	1	1	98
170	2,3%	98	1	1
171	10,6%	1	1	98
172	97,1%	1	98	1
173	2,4%	1	1	98
174	11,8%	98	1	1
175	98,8%	98	1	1
176	2,7%	4	96	0
177	10,1%	2	97	1
178	98,9%	1	1	98
179	2,1%	93	1	6
180	10,5%	1	1	98

Примерные варианты осуществления 181-198: Получение композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 и композиции циклодекстринов.

Берут композицию из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, приготовленную в соответствии со способом, описанным в Примерных вариантах осуществления 1-180, и готовят композицию при массовом отношении, описанном в таблице 4, и в соответствии со следующей процедурой: (1) непосредственно добавляют ее в раствор циклодекстрина или раствор производного циклодекстрина; (2) непосредственно добавляют ее в раствор циклодекстрина или раствор производного циклодекстрина и тщательно перемешивают в течение 1-24 часов; (3) непосредственно добавляют ее в раствор циклодекстрина или раствор производного циклодекстрина и нагревают в течение 10-120 минут; (4) непосредственно добавляют ее в раствор циклодекстрина или раствор производного циклодекстрина и обрабатывают ультразвуком в течение 10-120 минут; (5) непосредственно добавляют ее к порошку циклодекстрина или порошку производного циклодекстрина и измельчают в течение 10-120 минут; или (6) добавляют композицию из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 к порошку циклодекстрина или к порошку производного циклодекстрина, тщательно перемешивают и просеивают.

Таблица 4. Отношение сырьевого материала и способ приготовления по Примерным вариантам осуществления 181-198

Примерный вариант осуществления №	Масса композиции (содержание в граммах) (Гинзенозид Rg3: гинзенозид Rg5)	Количество циклодекстрина в граммах	Способ приготовления
Примерный вариант осуществления 181	100 (98,1%) (2:98)	100	1) Непосредственно добавляют
Примерный вариант осуществления 182	100 (98,1%) (2:98)	10000	2) Перемешивают 1 час
Примерный вариант осуществления 183	100 (98,1%) (2:98)	500	3) Нагревают 10 минут
Примерный вариант осуществления 184	100 (98,1%) (2:98)	1000	4) Обрабатывают ультразвуком 10 минут
Примерный вариант осуществления 185	100 (98,1%) (2:98)	2000	5) Перемалывают 10 минут
Примерный вариант осуществления 186	100 (98,1%) (2:98)	3000	6) Тщательно перемешивают и просеивают 10 минут
Примерный вариант осуществления 187	100 (98,1%) (2:98)	4000	1) Непосредственно добавляют
Примерный вариант осуществления 188	100 (98,1%) (2:98)	3500	2) Перемешивают 12 часов
Примерный вариант осуществления 189	100 (98,1%) (2:98)	4500	3) Нагревают 120 минут
Примерный вариант осуществления 190	100 (98,1%) (2:98)	1500	4) Обрабатывают ультразвуком 120 минут
Примерный вариант осуществления 191	100 (10,7%) (1:99)	100	1) Непосредственно добавляют
Примерный вариант осуществления 192	100 (10,7%) (1:99)	10000	2) Перемешивают 1 час
Примерный вариант осуществления 193	100 (10,7%) (1:99)	500	3) Нагревают 10 минут
Примерный вариант осуществления 194	100 (10,7%) (1:99)	1000	4) Обрабатывают ультразвуком 10 минут
Примерный вариант осуществления 195	100 (2,3%) (99:1)	100	1) Непосредственно добавляют
Примерный вариант осуществления 196	100 (2,3%) (99:1)	10000	2) Перемешивают 1 час
Примерный вариант осуществления 197	100 (2,3%) (99:1)	500	3) Нагревают 10 минут
Примерный вариант осуществления 198	100 (2,3%) (99:1)	1000	4) Обрабатывают ультразвуком 10 минут

Вспомогательные вещества в Примерных вариантах осуществления 181-198 представлены выбранными циклодекстринами, и другие циклодекстрины и производные циклодекстрина пригодны для использования в настоящем изобретении. Примеры включают: (1) α-гидроксипропил циклодекстрин, (2) гидроксиэтил-α-циклодекстрин, (3) 2,6-диметил-α-циклодекстрин, (4) 2,3,6-триметил-α-циклодекстрин, (5) 2,6-диэтил-α-циклодекстрин, (6) 2,3,6-триэтил-α-циклодекстрин, (7) мальтозил-α-циклодекстрин, (8) сульфобутиловый эфир β-циклодекстрина, (9) пара-толуолсульфонилхлорид (Р-TsCl) замещенный β-циклодекстрин, (10) замещенный в 6 положении β-ЦД пара-толуолсульфонат (β-циклодекстрин-6-ОТs), (11) 2-оксогидроксипропил-β-циклодекстрин, (12) однозамещенный в 2 положении пара-толуолсульфонат (2-β-циклодекстрин-2-ОТs), (13) β-циклодекстрин-пара-толуолсульфонат (тозил-β-ЦД) и (14) PCL-(Tos) 7-β-ЦД, звездообразная макромолекула β-циклодекстрина.

Примерный вариант осуществления 199: Приготовление таблеток из композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Готовят таблетки из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в соответствии со следующими соотношениями:

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 (оба в массовом отношении 2:98)	500 г
Крахмал	480 г
Тальк	1% (10 г)
Магния стеарат	1% (10 г)

Берут соответствующие количества композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, приготовленной способом, указанным в Примерных вариантах осуществления 1-180, добавляют в нее крахмал в вышеуказанных отношениях, тщательно перемешивают и готовят смесь в виде гранул, затем добавляют тальк и магния стеарат, тщательно перемешивают, а затем прессуют смесь в 10 000 таблеток.

Примерный вариант осуществления 200: Приготовление гранул из композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Готовят гранулы композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в соответствии со следующими соотношениями:

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 (оба в массовом отношении 98:2)	100 г
Микрокристаллическая целлюлоза	10000 г

Берут соответствующее количество композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, приготовленной способом, описанным в Примерных вариантах осуществления 1-180, добавляют к ней микрокристаллическую целлюлозу в вышеуказанных соотношениях, тщательно перемешивают и готовят смесь в виде гранул, и фасуют по 10 000 пакетиков.

Примерный вариант осуществления 201: Приготовление капсул из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Готовят капсулы из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в соответствии со следующими соотношениями:

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 (оба в массовом отношении 2:98)	250 г
Крахмал	2500 г

Берут соответствующее количество композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, приготовленной способом, описанным в Примерных вариантах осуществления 1-180, добавляют к ней крахмал в вышеуказанных соотношениях, тщательно перемешивают и фасуют по 10 000 капсул.

Примерные варианты осуществления 202-205: Приготовление капсул из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Берут соответствующее количество композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, добавляют к ней крахмал в соответствии с массовыми соотношениями, указанными в таблице 5, тщательно перемешивают, а затем фасуют по 10 000 капсул.

Таблица 5. Соотношение сырьевых материалов в Примерных вариантах осуществления 202-205

Примерный вариант осуществления, №	Масса композиции (г) (Гинзенозид Rg3: гинзенозид Rg5)	Вспомогательное вещество (крахмал, г)	Массовое отношение сырьевого материала к вспомогательному веществу
Примерный вариант осуществления 202	500 (2:98)	500	1:1
Примерный вариант осуществления 203	50 (10:90)	5000	1:100
Примерный вариант осуществления 204	250 (25:75)	2500	1:10
Примерный вариант осуществления 205	250 (50:50)	5000	1:20

Сырьевым материалом, описанным в таблице, может быть композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 из Примерных вариантов осуществления 1-180.

Примерный вариант осуществления 206-209: Приготовление гранул из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5.

Берут соответствующее количество композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, добавляют к ней микрокристаллическую целлюлозу в соответствии с массовыми отношениями, описанными в таблице 6, тщательно перемешивают и готовят гранулы, затем фасуют их на 10 000 пакетиков.

Таблица 6. Соотношения сырьевых материалов в Примерных вариантах осуществления 206-209

Примерный вариант осуществления, №	Масса композиции (г) (Гинзенозид Rg3: гинзенозид Rg5)	Вспомогательное вещество (Микрокристаллическая целлюлоза, г)	Массовое отношение сырьевого материала к вспомогательному веществу
Примерный вариант осуществления 206	1000 (2:98)	1000	1:1
Примерный вариант осуществления 207	250 (10:90)	25000	1:100
Примерный вариант осуществления 208	2500 (25:75)	25000	1:10
Примерный вариант осуществления 209	2500 (50:50)	50000	1:20

Сырьевым материалом, описанным в таблице, может быть композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в Примерных вариантах осуществления 1-180.

Примерный вариант осуществления 210: Приготовление таблеток из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 (оба в массовом отношении 98:2)	500 г
Крахмал	380 г
Экстракт солодки	100 г
Тальк	1% (10 г)
Магния стеарат	1% (10 г)

Берут соответствующее количество композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, добавляют в нее крахмал в вышеуказанных соотношениях, тщательно перемешивают и готовят смесь в виде гранул, затем добавляют тальк и магния стеарат, тщательно перемешивают, а затем прессуют смесь в 10 000 таблеток. При этом композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в этом примерном варианте осуществления может быть заменена композицией из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 из Примерного варианта осуществления 1-180.

Примерный вариант осуществления 211: Приготовление гранул из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Готовят гранулы из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в соответствии со следующими соотношениями:

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 (оба в массовом отношении 2:98)	250 г
Экстракт солодки	250 г
Микрокристаллическая целлюлоза	24500 г

Берут соответствующее количество композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, добавляют ее к вышеупомянутому порошку экстракта в вышеуказанных соотношениях, тщательно перемешивают, добавляют микрокристаллическую целлюлозу и тщательно перемешивают; а затем готовят смесь в виде гранул и фасуют по 10 000 пакетиков. При этом композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в этом примерном варианте осуществления может быть заменена композицией из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 из Примерного варианта осуществления 1-180.

Примерный вариант осуществления 212: Приготовление капсул из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 (оба в массовом отношении 2:98)	250 г
Экстракт солодки	250 г
Экстракт луковицы рябчика усатого	250 г
Экстракт листьев падуба широколистного	250 г
Крахмал	1000 г

Берут соответствующее количество композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, добавляют ее к вышеупомянутому порошку экстракта, тщательно перемешивают, добавляют в нее крахмал и тщательно перемешивают; а затем фасуют по 10 000 капсул. При этом композиция гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в этом примерном варианте осуществления может быть заменена композицией гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 из Примерного варианта осуществления 1-180.

Примерный вариант осуществления 213: Приготовление таблеток из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 (оба в массовом отношении 2:98)	500 г
Крахмал	480 г
Экстракт корневища анемаррены асфоделовой	500 г
Тальк	1% (10 г)
Магния стеарат	1% (10 г)

Берут соответствующее количество композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, добавляют к ней вышеупомянутый порошок экстракта в вышеуказанных соотношениях, тщательно перемешивают и добавляют крахмал, тщательно перемешивают и готовят смесь в виде гранул, затем добавляют тальк и магния стеарат, тщательно перемешивают, а затем прессуют смесь в 10 000 таблеток. При этом композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в этом примерном варианте осуществления может быть заменена композицией из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, приготовленной в Примерном варианте осуществления 1-180.

Примерный вариант осуществления 214: Приготовление гранул из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 (оба в массовом отношении 10:90)	1000 г
Экстракт корня норичника	500 г
Экстракт лофатерума стройного	500 г
Микрокристаллическая целлюлоза	10000 г

Берут соответствующее количество композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, добавляют ее к вышеупомянутому порошку экстракта в вышеуказанных соотношениях, тщательно перемешивают, добавляют микрокристаллическую целлюлозу и тщательно перемешивают; а затем готовят смесь в виде гранул и фасуют в 10000 пакетиков. При этом композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в этом примерном варианте осуществления может быть заменена композицией из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, приготовленной в Примерном варианте осуществления 1-180.

Примерный вариант осуществления 215: Приготовление порошкового напитка из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Готовят порошковый напиток из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в соответствии со следующими соотношениями:

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 (оба в массовом отношении 10:90)	1000 г
Сахарная пудра	5000 г

Берут соответствующее количество композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, добавляют к ней вышеупомянутый порошок экстракта, тщательно перемешивают, а затем готовят смесь в виде гранул и фасуют в 10 000 пакетиков. При этом композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в этом примерном варианте осуществления может быть заменена композицией гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, приготовленной в Примерном варианте осуществления 1-180.

Примерный вариант осуществления 216: Приготовление прессованных кондитерских таблеток из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5

Готовят таблетки для напитка из композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в соответствии со следующими соотношениями:

Берут соответствующее количество композиции из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, добавляют к ней вышеупомянутый порошок экстракта, тщательно перемешивают и готовят из нее гранулы и прессуют в таблетки, затем готовят 10 000 таблеток. При этом композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 в этом примерном варианте осуществления может быть заменена композицией из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, приготовленной в Примерном варианте осуществления 1-180.

Примерный тест 1. Усиливающий иммунитет эффект гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 у мышей

1. Экспериментальные материалы

1.1 Лекарственные средства и реагенты

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 производится компанией Dalian Fusheng Natural Drugs Development Co., Ltd. Содержание Rg3 и Rg5 определяли методом ВЭЖХ, соответственно. Подробности см. в Таблице 7.

Таблица 7. Список композиций, использованных в Примерном тесте 1

Серийный номер композиции	Содержание Rg3 и Rg5 в композиции	Доля каждого компонента в композиции
Серийный номер композиции	Содержание Rg3 и Rg5 в композиции	s-Rg3	R-Rg3	Rg5
A	98,1%	1	98	1
B	2,2%	1	1	98
C	11,6%	98	1	1
D	98,0%	98	1	1
E	2,4%	1	98	1
F	10,7%	1	98	1
G	98,3%	1	1	98
H	2,3%	98	1	1
I	10,1%	1	1	98

Препарат положительного контроля: пероральный раствор Пидотимода (Сучжоуская фармацевтическая фабрика корпорации Jiangsu Wuzhong Pharmaceutical Group Corporation, содержание активного ингредиента: 10 мл/400 мг, номер серии: 2014091211).

1.2 Экспериментальные животные

Мыши Куньмин в возрасте 6-8 недель, с массой тела 18-22 г, были приобретены в Центре экспериментальных животных Даляньского медицинского университета с сертификатом качества №: SCXK (13) 2013-0003.

2. Экспериментальный метод

2.1 Группы и лечение

В общей сложности 290 здоровых мышей-самцов, как упоминалось выше, подвергали акклиматизации в течение 4 дней, прежде чем их случайным образом распределяли в 29 групп в соответствии с массой тела, включая группу отрицательного контроля, группу положительного контроля, и экспериментальную группу с гинзенозидной композицией; и животные в последней группе были дополнительно разделены на группу с высокой дозой, группу со средней дозой и группу с низкой дозой, соответственно. Животным из группы положительного контроля давали пидотимод (50 мг/кг), животным из группы с низкой дозой гинзенозидной композиции давали гинзенозидную композицию в низкой дозе (36 мг/кг), животным из группы со средней дозой давали гинзенозидную композицию в средней дозе (72 мг/кг), животным из группы с высокой дозой давали высокую дозу гинзенозидной композиции (144 мг/кг), а животным из группы отрицательного контроля давали тот же объем воды. Лекарства и воду вводили один раз в день в течение 30 дней подряд.

2.2 Эксперименты и результаты

2.2.1 Тест на трансформацию лимфоцитов селезенки мыши, индуцированную ConA

Через 1 час после последней дозы селезенки животных каждой группы асептически иссекали для приготовления суспензии спленоцитов. После разбавления суспензии спленоцитов до концентрации 3×10⁶ клеток/мл суспензию спленоцитов делили на 2 аликвоты. Каждую из аликвот переносили в два 24-луночных культуральных планшета, соответственно, в объеме 1 мл/лунку, а затем в лунку добавляли 75 мкл раствора ConA (a), а другую лунку использовали в качестве контроля (b), планшеты культивировали при 37°C в течение 72 часов. Тиазолиловый синий (MTT) добавляли за 4 часа до окончания культивирования. После инкубации добавляли кислый изопропанол и измеряли оптическую плотность (ABS) каждого раствора при 570 нм после тщательного перемешивания. Пролиферативную активность рассчитывали по формуле (пролиферативная активность = ABSa-ABSb). Каждую группу доз тестируемого образца сравнивали с отрицательной контрольной группой. Результаты эксперимента приведены в таблице 1.

2.2.2 Определение жизнеспособности NK-клеток

Через 1 час после последней дозы селезенки животных каждой группы асептически иссекали для приготовления суспензии спленоцитов. После того как эритроциты лизировали стерильной водой для инъекций, суспензию клеток разбавили 1% ледяной уксусной кислотой. Затем, после доведения концентрации суспензии спленоцитов до 2×10⁷ клеток/мл, суспензию спленоцитов добавляли в 96-луночный планшет для культивирования. Для каждого животного лунки были разделены на реакционные лунки (суспензия спленоцитов и суспензия клеток YAC-1 по 100 мкл каждая; соотношение эффектора и мишени составляло 50:1); лунки естественного высвобождения (суспензия клеток YAC-1 и культуральная среда по 100 мкл каждая) и лунки максимального высвобождения (суспензия клеток YAC-1 и 1% NP40 по 100 мкл каждая). Для каждого из вышеуказанных образцов был подготовлен набор пробирок в трех экземплярах. 96-луночный планшет инкубировали при 37°C в инкубаторе с 5% СО₂ в течение 4 часа. Затем, после добавления матричного раствора LDH и 1 моль/LHCl, растворы в каждой параллельной лунке объединяли и измеряли поглощение (ABS) при 490 нм. Затем рассчитывали жизнеспособность NK-клеток. Жизнеспособность NK-клеток (%) = (Поглощение в реакционной лунке – Поглощение в лунке с естественным высвобождением)/ (Поглощение в лунке максимальным высвобождением – Поглощение в лунке с естественным высвобождением). Результаты эксперимента приведены в таблице 8.

Таблица 8. Влияние гинзенозидной композиции на жизнеспособность NK-клеток и способность к ConA-индуцированной пролиферации лимфоцитов (x ± s)

Группа		Применяемая доза (мг/кг)	Жизнеспособность NK-клеток (%)	Способность к пролиферации (×10^-2)
Группа отрицательного контроля		--	34,14±5,68	9,04±3,81
Группа положительного контроля		50	42,57±7,31	27,97±11,45
Композиция A	Группа с низкой дозой	36	64,14±5,40	44,27±5,52
	Группа со средней дозой	72	70,04±8,32	50,14±9,59
	Группа с высокой дозой	144	76,53±7,33	58,69±11,23
Композиция B	Группа с низкой дозой	36	75,55±9,15	27,99±8,03
	Группа со средней дозой	72	48,53±10,53	28,61±10,12
	Группа с высокой дозой	144	51,73±8,76	31,99±16,87
Композиция C	Группа с низкой дозой	36	53,56±6,84	33,94±10,60
	Группа со средней дозой	72	55,82±6,29	35,44±11,74
	Группа с высокой дозой	144	57,54±11,97	37,64±13,61
Композиция D	Группа с низкой дозой	36	64,78±5,40	44,32±6,22
	Группа со средней дозой	72	70,54±10,24	50,02±5,24
	Группа с высокой дозой	144	76,84±9,33	58,51±4,98
Композиция E	Группа с низкой дозой	36	45,78±9,15	27,95±7,99
	Группа со средней дозой	72	47,45±10,53	27,33±9,28
	Группа с высокой дозой	144	50,94±8,47	30,52±7,53
Композиция F	Группа с низкой дозой	36	53,78±6,84	33,64±8,57
	Группа со средней дозой	72	55,49±11,29	35,46±10,68
	Группа с высокой дозой	144	57,65±7,97	37,48±9,24
Композиция G	Группа с низкой дозой	36	65,77±5,40	45,68±8,57
	Группа со средней дозой	72	71,65±8,32	51,71±8,53
	Группа с высокой дозой	144	77,95±7,38	59,61±8,64
Композиция H	Группа с низкой дозой	36	43,88±9,15	27,35±9,63
	Группа со средней дозой	72	47,45±9,01	28,96±8,59
	Группа с высокой дозой	144	50,46±5,37	30,57±9,85
Композиция I	Группа с низкой дозой	36	54,14±8,44	34,94±6,87
	Группа со средней дозой	72	56,95±11,29	36,08±10,68
	Группа с высокой дозой	144	58,74±7,97	38,84±12,60

3. Результаты испытания

После стимуляции Т-лимфоцитов ConA бластные клетки будут демонстрировать пролиферативные реакции. Митохондриальная гидролаза в жизнеспособных клетках, особенно в пролиферирующих клетках, разлагает МТТ на сине-фиолетовые кристаллы. Если значение оптической плотности увеличено, это указывает, что способность клеток к пролиферации повышена. Как показано в таблице 1, различия в оптической плотности в группах с высокой, средней и низкой дозами гинзенозидной композиции были выше, чем в группе отрицательного контроля, что указывает, что этот образец может способствовать пролиферации спленоцитов.

После того, как клетки будут убиты NK-клетками, LDH в цитоплазме жизнеспособных клеток будет высвобождаться из клеток, и может вызывать дегидратацию лактата лития, так что NAD восстанавливается до NADH, который, в свою очередь, восстанавливается до хлорида иодонитротетразолия (INT) через переносчик водорода феназин метосульфат (PMS). После получения H+ INT восстанавливается до фиолетового соединения формазана, и значение оптической плотности определяют с помощью ридера микропланшетов. Как показано в Таблице 1, жизнеспособность NK-клеток в группах с высокими, средними и низкими дозами гинзенозидной композиции была значительно выше, чем в группе отрицательного контроля, что свидетельствует о том, что образец может повышать жизнеспособность NK-клеток.

Приведенные выше экспериментальные результаты показали, что все различные дозы композиции гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 могут способствовать пролиферации спленоцитов, повышать жизнеспособность NK-клеток и значительно улучшать иммунную функцию.

Примерный тест 2. Противоопухолевый эффект гинзенозидной композиции в отношении саркомы S180 у мышей

1. Экспериментальные материалы

1.1. Экспериментальные животные и трансплантированные штаммы опухолей

Мыши Куньмин, предоставленные Гуандунским медицинским центром лабораторных животных, с сертификатом №: SCXK2013-005;

Клетки саркомы S180, приобретенные в Гуандунском медицинском центре лабораторных животных.

1.2 Лекарственный препарат

Композиция из гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5 производится компанией Dalian Fusheng Natural Drugs Development Co., Ltd. Содержание Rg3 и Rg5 определяли методом ВЭЖХ, соответственно.

Таблица 9. Список композиций, использованных в Примерном тесте 2

Низкие, средние и высокие дозы исследуемого препарата в 2, 4 и 8 раз превышали клиническую эквивалентную дозу для взрослых (рассчитанную в соответствии с массой тела 60 кг для взрослых), соответственно. Суспензию требуемой концентрации готовили с использованием дважды дистиллированной воды. Приготовленный раствор препарата хранили в холодильнике при температуре 4°C и защищали от света до использования.

Препаратом положительного контроля является циклофосфамид (номер серии: 20130105, Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd.). Для получения клинической эквивалентной дозы для взрослых (рассчитанной в соответствии с массой тела 60 кг у взрослых) необходимую суспензию готовили с двойной дистиллированной водой и хранили в холодильнике при температуре 4°C и защищали от света до использования.

2. Экспериментальный метод

2.1. Группы и лечение

У мышей, инокулированных опухолевыми клетками саркомы 180 (S180) из асцитической жидкости, которые хорошо росли в течение 7 дней, отбирали асцитическую жидкость в асептических условиях, затем разбавляли стерильным физиологическим раствором для доведения количества клеток до 2×10⁶/0,2 мл и хранили на льду до использования.

В общей сложности 300 здоровых мышей Куньмин (половина самцов и половина самок) в возрасте 6-8 недель и с массой тела 18-22 г предварительно содержали в течение 1 недели в экспериментальных условиях. После этого 10 животных были случайным образом отобраны в качестве группы отрицательного контроля, а остальным 290 мышам подкожно инокулировали 0,2 мл суспензии опухолевых клеток S180 в подмышечную впадину левой задней конечности каждой мыши. Через 24 часа после инокуляции мышей взвешивали и случайным образом распределяли в 29 групп, т.е. контрольную группу опухоленосителей, положительную контрольную группу и экспериментальную группу с гинзенозидной композицией. Животные в последней группе были дополнительно разделены на группу с высокой дозой, группу со средней дозой и группу с низкой дозой, соответственно. Начиная со дня разделения на группы, животным в группе с низкой дозой (36 мг/кг), группе со средней дозой (72 мг/кг) и группе с высокой дозой (144 мг/кг) композиции гинзенозидов и группе положительного контроля вводили циклофосфамид в дозе 45 мг/кг через пероральный зонд. Животным в нормальной контрольной группе и модельной группе вводили эквивалентное количество физиологического раствора через пероральный зонд один раз в день.

После моделирования и медикаментозного лечения наблюдали и регистрировали потребление пищи, воды, изменения цвета шерсти, активность, реакцию на стимуляцию, наличие диареи, истощение и гибель мышей в каждой группе в любое время. Применение препаратов было прекращено на 21-й день после перорального введения через зонд. На следующий день мышей умерщвляли путем цервикальной дислокации и взвешивали. Подкожные опухолевые ткани левой задней конечности полностью удаляли и взвешивали с помощью электронных весов после удаления всех неопухолевых тканей, таких как кровь и жир. Уровень ингибирования опухоли рассчитывали по следующей формуле:

Уровень ингибирования опухоли = (средняя масса опухоли в контрольной группе - средняя масса опухоли в группе лечения)/средняя масса опухоли в контрольной группе × 100%

2.2 Данные были выражены в виде среднего значения ± стандартного отклонения (± s). Межгрупповое сравнение данных измерений было подвергнуто одностороннему дисперсионному анализу с использованием статистического программного обеспечения SPASS 13.0. р<0,05 указывает на статистически значимые различия.

3. Результаты эксперимента

3.1 Наблюдение за общим состоянием животных после применения препаратов

После введения мыши во всех группах были живы; у мышей в группе холостого контроля отмечалось нормальное потребление пищи и воды, гибкие движения, быстрая реакция, блестящая шерсть, и у них не было диареи или истощения. Для сравнения, общее состояние мышей в каждой группе доз гинзенозидной композиции было хуже, чем в контрольной группе без препарата. У мышей в группе положительного контроля отмечено плохое потребление пищи и воды, медленные движения, замедленная реакция, выпадение и тусклый цвет шерсти, диарея и истощение. Общее состояние мышей в контрольной группе с опухолями было наихудшим, с небольшим потреблением пищи и активностью, замедленной реакцией, плохим состоянием шерсти и явным истощением.

3.2 Масса трансплантированных опухолей и показатели ингибирования опухоли у мышей в каждой группе показаны в таблице 10.

Таблица 10. Масса трансплантированных опухолей и показатели ингибирования опухоли у мышей в каждой группе.

Группа		Доза мг/кг/сутки	Количество животных Начало/Конец	Масса опухолевых трансплантатов (г) ± S	Уровень ингибирования опухоли %
Холостой контроль		---	10/10	---	---
Контрольная группа опухоленосителей		---	10/10	3,66±0,59	---
Группа положительного контроля		45	10/10	2,45±0,62	33,06
Гинзенозидная композиция A	Группа с низкой дозой	36	10/10	1,76±084,	51,91
	Группа со средней дозой	72	10/10	1,57±0,62	57,1
	Группа с высокой дозой	144	10/10	1,21±1,54	66,94
Гинзенозидная композиция B	Группа с низкой дозой	36	10/10	2,48±0,64	32,24
	Группа со средней дозой	72	10/10	2,36±1,31	35,52
	Группа с высокой дозой	144	10/10	2,26±0,81	38,25
Гинзенозидная композиция C	Группа с низкой дозой	36	10/10	2,15±0,89	41,25
	Группа со средней дозой	72	10/10	2,06±0,98	43,72
	Группа с высокой дозой	144	10/10	1,99±1,04	45,63
Гинзенозидная композиция D	Группа с низкой дозой	36	10/10	1,77±0,69	51,64
	Группа со средней дозой	72	10/10	1,61±1,06	56,01
	Группа с высокой дозой	144	10/10	1,24±1,09	66,12
Гинзенозидная композиция E	Группа с низкой дозой	36	10/10	2,52±0,57	31,15
	Группа со средней дозой	72	10/10	2,39±0,68	34,70
	Группа с высокой дозой	144	10/10	2,29±1,69	37,43
Гинзенозидная композиция F	Группа с низкой дозой	36	10/10	2,14±0,97	41,53
	Группа со средней дозой	72	10/10	2,09±0,86	42,90
	Группа с высокой дозой	144	10/10	2,00±1,24	45,36
Гинзенозидная композиция G	Группа с низкой дозой	36	10/10	1,72±0,76	53,00
	Группа со средней дозой	72	10/10	1,55±0,81	57,65
	Группа с высокой дозой	144	10/10	1,24±0,67	66,12
Гинзенозидная композиция H	Группа с низкой дозой	36	10/10	2,50±0,65	31,69
	Группа со средней дозой	72	10/10	2,39±1,21	34,70
	Группа с высокой дозой	144	10/10	2,29±0,59	37,43
Гинзенозидная композиция I	Группа с низкой дозой	36	10/10	2,15±0,54	41,26
	Группа со средней дозой	72	10/10	2,08±0,58	43,17
	Группа с высокой дозой	144	10/10	1,98±0,89	45,90

Результаты эксперимента показали, что масса трансплантированных опухолей у мышей в опытной группе была значительно ниже, чем у мышей контрольной группы, указывая на то, что гинзенозидные композиции A, B, C оказывали противоопухолевое действие на трансплантированную саркому S180 у мышей, и уровень ингибирования опухоли гинзенозидными композициями A, D, G превышал 50%, что в достаточной степени указывало на то, что гинзенозидные композиции обладали выраженным опухоль-ингибирующим эффектом.

Примерный тест 3: Гинзенозидная композиция снижает резистентность к противоопухолевым препаратам направленного действия

1. Материалы и методы

Клеточная линия холангиокарциномы человека QBC939, приобретенная у Shanghai Hongshun Biological Technology Co., Ltd.

Подробную информацию о гинзенозидной композиции, произведенной компанией Dalian Fusheng Natural Drugs Development Co., Ltd., см. в таблице 11.

Таблица 11. Список композиций, использованных в Примерном тесте 3

2. Экспериментальный метод

2.1 Конструирование линий резистентных к лекарственным средствам раковых клеток

Клеточную линию холангиокарциномы человека QBC939 размораживали и инокулировали во флаконы для культивирования клеток T25, заполненные средой для культивирования клеток, и QBC939/ADM конструировали путем непрерывного увеличения контактной концентрации ADM.

2.2 Анализ CCK-8 для определения цитотоксичности химиотерапевтических агентов

Клетки были разделены на группу холостого контроля с нулевым значением, нормальную контрольную группу и 9 экспериментальных групп, каждая из которых включала 100 мкл по 80 мкг/мл гинзенозидной композиции для культивирования клеток.

Контрольная группа (группа химиотерапевтических препаратов): в каждую лунку добавляли по 100 мкл культуральной среды, содержащей химиотерапевтические препараты. Химиотерапевтические препараты включали препараты направленного действия афатиниб (400 мкг/мл), церитиниб (1000 мкг/мл) и эрлотиниб (200 мкг/мл). Для каждого препарата было использовано шесть повторных лунок.

Экспериментальная группа (химиотерапевтические препараты + средства традиционной китайской медицины): в каждую лунку добавляли по 100 мкл питательной среды, содержащей химиотерапевтические препараты + гинзенозидную композицию, а именно афатиниб (400 мкг/мл) + гинзенозидная композиция (80 мкг/мл), церитиниб (1000 мкг/мл) + гинзенозидная композиция (80 мкг/мл), и эрлотиниб (200 мкг/мл) + гинзенозидная композиция (80 мкг/мл). Для каждого препарата было использовано шесть повторных лунок.

3. Результаты эксперимента

Цитотоксические эффекты химиотерапевтических препаратов выявляли через 24 часа. Результаты показали, что значение ОП (поглощения) клеток в экспериментальной группе было значительно ниже, чем в контрольной группе, что свидетельствует, что жизнеспособность клеток в экспериментальной группе была значительно ниже, чем в контрольной группе, и цитотоксическое действие химиотерапевтических препаратов на клетки в экспериментальной группе было значительно сильнее, чем в контрольной группе, что свидетельствует, что экспериментальная группа с гинзенозидной композицией проявляла эффект отмены лекарственной резистентности. Результаты приведены в таблице 12.

Таблица 12. Значения поглощения в тесте на лекарственную резистентность

Группа	Афатиниб	Церитиниб	Эрлотиниб
Контрольная группа	1,179±0,147	1,304±0,096	1,294±0,131
Композиция A	0,703±0,132	0,611±0,101	0,608±0,122
Композиция B	1,002±0,102	0,924±0,122	0,913±0,135
Композиция C	0,950±0,141	0,840±0,139	0,837±0,095
Композиция D	0,706±0,127	0,613±0,092	0,604±0,134
Композиция E	1,016±0,135	0,914±0,137	0,902±0,127
Композиция F	0,943±0,129	0,856±0,121	0,844±0,131
Композиция G	0,691±0,136	0,573±0,126	0,562±0,134
Композиция H	1,013±0,097	0,930±0,127	0,823±0,098
Композиция I	0,941±0,087	0,852±0,093	0,841±0,096

Примерный тест 4: Эксперимент с гинзенозидной композицией для облегчения побочных эффектов (рвоты) лучевой терапии и химиотерапии

1. Экспериментальные материалы

1.1 Лекарственные средства и реагенты:

Гинзенозидная композиция представляет собой порошок от белого до коричневато-желтого цвета, производимый компанией Dalian Fusheng Natural Drugs Development Co., Ltd. Содержание активного вещества определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с двумя типами детекторов и УФ-детектором и с использованием эталонного стандарта Национального института контроля фармацевтических и биологических продуктов в качестве внешнего стандарта. Подробности см. в таблице 13.

Таблица 13. Список композиций, использованных в Примерном тесте 4

Препарат положительного контроля: метоклопрамид для инъекций (фармацевтическая фабрика Тяньцзинь Жэньминь, дозировка: 1 мл/10 мг, номер серии: 14060129);

Каолин (Шанхайский завод реагентов Fengxian Fengcheng, номер серии: 140528);

Приготовление каолина для крыс: 1 г аравийской камеди взвешивали и добавляли к 100 мл дистиллированной воды, затем помещали на магнитную мешалку и перемешивали до полного растворения; затем брали соответствующее количество каолина, просеянного через сито 80 меш, и медленно добавляли в вышеуказанный раствор при перемешивании, позволяя ему образовать тестообразную форму. Затем его перемешивали в шприце объемом 5 мл до полного заполнения шприца; затем продвигали стержень плунжера, чтобы получить маленькие палочки с очень гладкими краями, по форме напоминающие обычный корм; затем палочки помещали в сушилку, заполненную частицами синего силикагеля, и давали им высохнуть для последующего использования.

1.2 Экспериментальные животные:

Самцы крыс линии Вистар с массой тела 200-220 г были приобретены в Центре экспериментальных животных Даляньского медицинского университета с сертификатом качества №: SCXK (13) 2013-0002.

2. Экспериментальный метод

Крысы - это грызуны, у которых нет рвотных реакций. Пикацизм (расстройство пищевого поведения) у крыс после вестибулярной стимуляции эквивалентен рвотной реакции у других животных, которую можно рассматривать как типичный симптом морской болезни у крыс.

2-1. Выращивание крыс для акклиматизации

Перед началом эксперимента крыс содержали для акклиматизации, то есть крысам одновременно давали обычный корм и каолиновый корм в таком же количестве. Два вида кормов извлекали и взвешивали в определенные моменты времени каждый день, чтобы наблюдать следы укусов на поверхности корма до тех пор, пока крысы почти не переставали грызть каолин, а затем был начат официальный эксперимент.

2-2. Испытание на пикацизм.

Крыс линии Вистар случайным образом распределяли в 29 групп (по 6 крыс в каждой группе), а именно в модельную контрольную группу, группу положительного лекарственного контроля, экспериментальную группу с гинзенозидной композицией, и последнюю группу дополнительно разделяли на три группы, т.е. группы с низкими, средними и высокими дозами.

Крысам в модельной контрольной группе модели вводили физиологический раствор в дозе 10 мл/кг через пероральный зонд; крысам в группе положительного контроля интраперитонеально вводили метоклопрамид в дозе 2 мг/кг; а у крыс в группах с низкой, средней и высокой дозами гинзенозидной композиции применяли гинзенозидные композиции А-I в дозах 15 мг/кг, 30 мг/кг и 60 мг/кг, соответственно.

Через 30 минут после введения дозы применяли вращательную стимуляцию с использованием устройства для вращательной стимуляции, модифицированного на основе центрифуги, чтобы вызвать морскую болезнь, со скоростью вращения 100 оборотов в минуту, и вращали в течение 1 часа.

У крыс каждой группы наблюдали проявления пикацизма в виде поедания каолина, и потребление обычного корма и каолина регистрировали в течение 24 часов после прекращения вращательной стимуляции.

3. Результаты испытания

Все данные были выражены в виде среднего значения ± стандартного отклонения (X ± S), а программное обеспечение медицинской статистики PPMS использовали для дисперсионного анализа и теста на значимость путем сравнения значений P.

Статистические результаты потребления обычного рациона и каолина приведены в таблице 14.

Таблица 14. Влияние гинзенозидных композиций на индуцированный вращением пикацизм у крыс (X ± s, n=6)

Группа		Потребление каолина (г)	Потребление пищи (г)
Группа холостого контроля		0,601±0,097	12,96±1,03
Группа положительного контроля		0,404±0,131	23,97±1,16
Гинзенозидная композиция A	Группа с низкой дозой	0,347±0,073	22,13±1,67
	Группа со средней дозой	0,321±0,101	24,96±1,90
	Группа с высокой дозой	0,314±0,042	26,92±1,52
Гинзенозидная композиция B	Группа с низкой дозой	0,473±0,064	14,29±1,36
	Группа со средней дозой	0,439±0,093	15,37±1,91
	Группа с высокой дозой	0,413±0,065	16,48±0,93
Гинзенозидная композиция C	Группа с низкой дозой	0,381±0,082	17,13±2,71
	Группа со средней дозой	0,369±0,094	18,52±1,94
	Группа с высокой дозой	0,362±0,113	20,67±0,99
Гинзенозидная композиция D	Группа с низкой дозой	0,347±0,072	22,43±1,63
	Группа со средней дозой	0,319±0,061	25,32±1,84
	Группа с высокой дозой	0,310±0,057	26,67±1,57
Гинзенозидная композиция E	Группа с низкой дозой	0,464±0,119	14,03±1,73
	Группа со средней дозой	0,428±0,070	15,88±0,91
	Группа с высокой дозой	0,415±0,054	16,93±1,22
Гинзенозидная композиция F	Группа с низкой дозой	0,384±0,077	17,81±1,53
	Группа со средней дозой	0,377±0,113	18,59±1,04
	Группа с высокой дозой	0,365±0,085	20,14±1,01
Гинзенозидная композиция G	Группа с низкой дозой	0,346±0,090	22,38±1,73
	Группа со средней дозой	0,325±0,041	25,52±1,86
	Группа с высокой дозой	0,318±0,086	26,27±1,42
Гинзенозидная композиция H	Группа с низкой дозой	0,469±0,044	14,63±1,27
	Группа со средней дозой	0,435±0,082	15,27±0,84
	Группа с высокой дозой	0,410±0,059	16,84±1,27
Гинзенозидная композиция I	Группа с низкой дозой	0,383±0,105	17,35±1,65
	Группа со средней дозой	0,379±0,064	19,46±1,21
	Группа с высокой дозой	0,360±0,097	20,74±0,98

Результаты эксперимента показали следующее.

Основным побочным эффектом лучевой терапии и химиотерапии была рвота, что нашло отражение в пикацизме в виде поедания каолина крысами. В каждой из групп доз гинзенозидной композиции пикацизм у крыс в виде поедания каолина был значительно подавлен, и количество потребляемого каолина было значительно снижено по сравнению с группой холостого контроля (P <0,05, P <0,01). В каждой группе доз гинзенозидной композиции лечение позволило значительно увеличить потребление пищи крысами. Результаты вышеуказанных экспериментов показали, что гинзенозидная композиция проявляет значительный эффект в виде облегчения рвоты, вызванной лучевой терапией и химиотерапией. Следовательно, композиция имеет хорошие перспективы для клинического применения.

Примерный тест 5: Эффект гинзенозидной композиции против утомляемости

1. Экспериментальные материалы

1.1 Лекарственные средства и реагенты

Набор для анализа супероксиддисмутазы, Jiancheng Biotechnology Co., Ltd.

Композиция гинзенозида Rg3 и гинзенозида Rg5, номер серии: 20120316, была произведена компанией Dalian Fusheng Natural Drugs Development Co., Ltd. Содержание Rg3 и Rg5 определяли методом ВЭЖХ, соответственно, с использованием эталонного стандарта, предоставленного Национальным институтом контроля фармацевтических и биологических продуктов.

Таблица 17. Список композиций, использованных в Примерном тесте 6

1.2 Экспериментальные животные:

Бестимусные мыши BALB/C, массой тела 26-28 г, в возрасте 6 недель, были приобретены у Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.

2. Экспериментальный метод

2.1. Группы и лечение:

В общей сложности 280 отобранных мышей-самцов сначала выдерживали в течение 8 недель, выдерживали для акклиматизации в течение 1 недели, а затем в течение 1 недели подвергали подготовке к физическому испытанию.

Крысы были случайным образом распределены в 28 групп в соответствии с массой тела, включая контрольную группу и экспериментальные группы с гинзенозидной композицией, и животные в последней группе были дополнительно разделены на группу с высокой дозой, группу со средней дозой и группу с низкой дозой, соответственно.

Животным в контрольной группе давали обычный физиологический раствор; животным в группе с низкой дозой гинзенозидной композиции давали низкую дозу гинзенозидной композиции (3,2 мг/кг); животным в группе со средней дозой давали среднюю дозу гинзенозидной композиции (6,4 мг/кг); а животным в группе с высокой дозой давали высокую дозу гинзенозидной композиции (12,8 мг/кг). Препарат вводили один раз в день в течение 30 дней подряд.

2.3 Эксперименты и результаты

Тест истощающего плавания

Размер плавательного бассейна составил 185 см × 73 см × 58 см, глубина 30 см, когда животные плавали, а температура воды составляла 27 ± 1°C. Бестимусных мышей помещали в плавательный бассейн, и регистрировали временной интервал от входа в воду для плавания до момента истощения. Стандартом оценки истощения является явное нарушение движений у мышей, при этом голова погружается в воду и не поднимается над поверхностью воды в течение 8 секунд.

Определение активности супероксиддисмутазы

Активность SOD в крови является важным показателем способности организма бороться с усталостью. Его можно использовать для оценки индекса утомления.

Таблица 18. Истощающее плавательное испытание и перечень данных по SOD

Группа	Доза (мг/кг)	Продолжительность плавания (с)	Активность СОД (Ед,/мл)
Группа холостого контроля	——	91,21±6,4	60,56±6,4
Композиция A	12,8	119,0±3,1	93,7±4,1
	6,4	113,4±2,1	90,3±5,9
	3,2	106,2±2,2	87,2±4,3
Композиция B	12,8	95,1±5,3	75,7±6,2
	6,4	94,8±2,7	74,6±2,8
	3,2	93,0±3,4	73,4±5,4
Композиция C	12,8	101,3±6,5	83,3±6,3
	6,4	98,2±3,3	81,5±4,7
	3,2	96,5±4,7	80,7±5,5
Композиция D	12,8	119,2±3,6	93,8±3,4
	6,4	113,1±4,1	90,4±1,6
	3,2	105,8±5,9	87,7±5,6
Композиция E	12,8	95,7±5,8	75,8±6,5
	6,4	94,4±3,2	74,7±3,5
	3,2	93,9±3,1	73,3±5,7
Композиция F	12,8	101,6±5,0	83,5±4,6
	6,4	98,2±3,4	81,7±3,4
	3,2	96,8±3,1	80,3±6,8
Композиция G	12,8	119,9±2,4	93,9±5,7
	6,4	113,6±5,6	90,5±5,3
	3,2	106,4±2,3	87,8±3,9
Композиция H	12,8	95,4±4,5	75,7±3,9
	6,4	94,0±4,8	74,6±4,2
	3,2	93,1±4,5	73,6±3,0
Композиция I	12,8	101,6±3,7	83,2±5,8
	6,4	98,2±4,0	81,3±4,1
	3,2	96,5±4,7	80,4±3,1

Данные в этой таблице показали, что продолжительность истощающего плавания мышей в группах, получавших гинзенозидную композицию, была значительно больше, чем в контрольной группе, и активность SOD была значительно выше, чем в группе исчерпывающего плавания, со значительной разницей, указывающей на то, что гинзенозидная композиция обладает заметным эффектом против усталости.

Claims

1. Способ получения композиции, содержащей гинзенозид Rg3 и гинзенозид Rg5, который включает следующие этапы:

(1) смешивание женьшеня обыкновенного с лекарственными материалами традиционной китайской медицины;

(2) приготовление отвара из смеси, полученной на этапе (1), в воде несколько раз, а затем сбор и объединение отваров;

(4) сушку фильтрата, приготовленного на этапе (3), с получением сухого вещества;

(5) добавление водного раствора этанола к сухому веществу, полученному на этапе (4), нагревание до растворения, фильтрацию и осуществление процесса низкотемпературной кристаллизации;

(6) сушку кристаллов, полученных на этапе (5);

при этом лекарственные материалы традиционной китайской медицины выбраны из групп, состоящих из одного или нескольких из следующих лекарственных средств: корневище куркумы, аризема с желчью и корень стемоны, а массовое соотношение женьшеня обыкновенного и лекарственных материалов традиционной китайской медицины составляет от 1:100 до 100:1.

2. Способ по п. 1, в котором массовое соотношение женьшеня обыкновенного и лекарственных материалов традиционной китайской медицины составляет от 1:100 до 100:1, например 1:90-100, 1:45-55, 10:8-12, 45-55:1 или 90-100:1.

3. Способ по п. 1, в котором количество приготовлений отваров составляет 2-5 раз, предпочтительно 3 раза.

4. Способ по п. 1, в котором масса воды, используемой для каждого приготовления отвара, в 2-100 раз, предпочтительно в 2-80 раз превышает общую массу женьшеня обыкновенного и лекарственных материалов традиционной китайской медицины.

5. Способ по п. 1, в котором время каждого приготовления отвара составляет 1-36 часов, предпочтительно 2-24 часа.

6. Способ по п. 1, в котором температура каждого отвара составляет 90-100°C, предпочтительно 95-100°C.

7. Способ по п. 1, в котором осветляющим агентом является осветляющий агент ZTC1+1.

8. Способ по п. 7, в котором конечная концентрация после добавления осветляющего агента ZTC1+1 составляет 200-800 ppm.

9. Способ по п. 1, в котором период настаивания составляет 4-48 часов, предпочтительно 4-24 часа.

10. Способ по п. 1, в котором водный раствор этанола, используемый для кристаллизации, представляет собой 40-90% (об./об.) водный раствор этанола.

11. Композиция, включающая гинзенозид Rg3 и гинзенозид Rg5, полученная способом по любому из пп. 1-10.

12. Композиция для повышения иммунитета, содержащая композицию по п. 11 и фармацевтически приемлемый или пищевой носитель.

13. Композиция по п. 12, в которой массовое соотношение композиции по п. 11 и фармацевтически приемлемого или пищевого носителя составляет от 1:1 до 1:100.

14. Композиция по п. 12, представленная в форме таблеток, капсул, пилюль, порошка, гранул, сиропа, раствора, эмульсии, спрея, аэрозоля, геля, крема, припарки, лейкопластыря или пластыря, или в форме пищевых продуктов, таких как молочные продукты, кондитерские изделия, напитки, печенье, чай и сопутствующие товары, вино и тому подобное.

15. Применение композиции по п. 11 при приготовлении лекарственных средств для повышения иммунитета.

16. Способ повышения иммунитета, включающий введение эффективного количества композиции по п. 11 нуждающемуся в этом индивидууму.