RU2808368C1 - Method of modeling asherman's syndrome in rats - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine; experimental obstetrics; gynecology.

SUBSTANCE: uterine horns are opened along the entire length, from the funnels to the unpaired part of the uterus. Curettage of the entire endometrium is performed, then hemostasis is performed. In the opened uterine horns, 2 silicone catheters with a diameter of 2 mm are installed: catheter N1 is a drainage catheter with holes, catheter N2 is solid, serving to keep the horn cavity open and prevent overgrowth. After inserting the catheters, the horn incision is sutured with a blanket suture, and after the drainage of the discharge has stopped, the N1 drainage catheters are removed, and the N2 catheters removed through the counter-aperture are cut so that 2–3 cm remain outside the abdominal cavity; 3 days after the operation, the N2 catheters are removed.

EFFECT: method allows to completely eliminate fertility with sufficiently deep and thorough curettage, and accordingly accurately evaluate the therapeutic effect of the medicinal products and the methods of treating of this syndrome.

1 cl, 22 dwg

Description

Изобретение относится к экспериментальной хирургии. Предложен способ моделирования синдрома Ашермана, отличающийся тем, что выскабливается и удаляется весь эндометрий маточных рогов. Операция проводится следующим образом: вскрытие маточных рогов вдоль по всей длине, от воронок до непарной части матки (в которой имплантации не происходит), проводится кюретаж всего эндометрия, затем выполняется гемостаз, и последующее ушивание разреза обвивным швом (также обладающим гемостатическими свойствами). Модель используется для изучения методов лечения синдрома Ашермана, позволяя полностью исключить фертильность при достаточно глубоком и тщательном кюретаже.The invention relates to experimental surgery. A method for modeling Asherman's syndrome is proposed, characterized in that the entire endometrium of the uterine horns is scraped and removed. The operation is carried out as follows: opening of the uterine horns along the entire length, from the funnels to the unpaired part of the uterus (in which implantation does not occur), curettage of the entire endometrium is performed, then hemostasis is performed, and subsequent suturing of the incision with a wrapping suture (also having hemostatic properties). The model is used to study treatment methods for Asherman's syndrome, allowing complete elimination of fertility with sufficiently deep and thorough curettage.

Синдром Ашермана, или внутриматочные синехии - это патологическое состояние, характеризующееся образованием спаек и выростов эндометрия с его склерозом и фиброзом. Заболевание известно также как синдром Фритча, травматическая атрофия эндометрия или склероз эндометрия. Предлагаемая модель соотносится с тяжелой степенью синдрома Ашермана: сращения плотные, состоят из склерозированной соединительной ткани, заполняют более 75% полости матки, блокируют устья маточных труб, дно матки.Asherman's syndrome, or intrauterine synechiae, is a pathological condition characterized by the formation of adhesions and outgrowths of the endometrium with its sclerosis and fibrosis. The disease is also known as Fritsch syndrome, traumatic endometrial atrophy, or endometrial sclerosis. The proposed model correlates with a severe degree of Asherman's syndrome: the adhesions are dense, consist of sclerotic connective tissue, fill more than 75% of the uterine cavity, block the mouth of the fallopian tubes, and the fundus of the uterus.

Актуальность: синдром Ашермана возникает у женщин всех рас с одинаковой частотой. После выскабливания полости матки у родивших женщин риск возникновения заболевания составляет 25%. Неразвивающаяся, или замершая беременность, чаще приводит к возникновению данной патологии и составляет до 30% случаев.Background: Asherman syndrome occurs in women of all races with equal frequency. After curettage of the uterine cavity in women who have given birth, the risk of developing the disease is 25%. A non-developing or frozen pregnancy more often leads to the occurrence of this pathology and accounts for up to 30% of cases.

В связи с широкой распространенностью и недостаточной эффективностью лечения синдрома Ашермана в последние годы предлагались новые методы лечения этого синдрома, включая клеточную терапию (патент RU 2725006 С2). Из литературных источников известны следующие способы моделирования ВМС у лабораторных животных:Due to the widespread and insufficient effectiveness of treatment for Asherman's syndrome, in recent years new methods of treating this syndrome have been proposed, including cell therapy (patent RU 2725006 C2). The following methods for modeling IUDs in laboratory animals are known from the literature:

• «химический», когда в полость рогов матки с помощью шприца вводят различные повреждающие химические агенты, разрушающие эндометрий• “chemical”, when various damaging chemical agents are introduced into the cavity of the uterine horns using a syringe, destroying the endometrium

[1-5];[1-5];

• «физический», когда с помощью жесткого предмета (металлическая игла, кюретка, шпатель) проводят выскабливание внутренней поверхности рогов матки [6-9];• “physical”, when using a rigid object (metal needle, curette, spatula) the inner surface of the uterine horns is scraped [6-9];

• «инфекционный», когда в полость рогов матки вводят липополисахариды (ЛПС) клеточной стенки бактерий, что приводит к локальному воспалительному процессу и повреждению эндометрия [10].• “infectious”, when lipopolysaccharides (LPS) from the bacterial cell wall are introduced into the cavity of the uterine horns, which leads to a local inflammatory process and damage to the endometrium [10].

Согласно литературным данным, все способы оказывают стабильное повреждение эндометрия, приводят к формированию внутриматочных спаек, что приводит к значительному снижению репродуктивной функции у животных.According to the literature, all methods cause stable damage to the endometrium and lead to the formation of intrauterine adhesions, which leads to a significant decrease in reproductive function in animals.

Однако эндометрий склонен быстро и, главное, полноценно регенерировать, причем даже наличие сформировавшихся спаек в большинстве случаев не приводит к бесплодию, так что создать полноценную модель ВМС у экспериментальных животных крайне трудно, бесплодия добиться удается только у части животных. У всех прочих животных (от 30 до 60% в зависимости от метода) рождается меньше детенышей (чаще всего от 2 до 10). Поэтому в последние годы имеется устойчивая тенденция к созданию сочетанных многокомпонентных способов моделирования ВМС. Например, сочетания механического выскабливания с введением ЛПС [11].However, the endometrium tends to quickly and, most importantly, fully regenerate, and even the presence of formed adhesions in most cases does not lead to infertility, so it is extremely difficult to create a full-fledged IUD model in experimental animals; infertility can only be achieved in some animals. All other animals (from 30 to 60% depending on the method) have fewer babies (most often from 2 to 10). Therefore, in recent years there has been a steady trend towards the creation of combined multicomponent methods for modeling the IUD. For example, a combination of mechanical curettage with the introduction of LPS [11].

Для решения данной проблемы нами предложена чисто механическая модель синдрома Ашермана, включающая хирургическое удаление всего эндометрия маточных рогов, отличающаяся тем, что в маточных рогах просто не остается ни одного участка здорового эндометрия, для чего проводят вскрытие маточных рогов вдоль по всей длине, от воронок до непарной части матки (в которой имплантации не происходит), кюретаж всего эндометрия, гемостаз, и последующее ушивание разреза обвивным швом.To solve this problem, we have proposed a purely mechanical model of Asherman's syndrome, including surgical removal of the entire endometrium of the uterine horns, characterized in that there simply is not a single section of healthy endometrium left in the uterine horns, for which purpose the uterine horns are opened along the entire length, from the funnels to unpaired part of the uterus (in which implantation does not occur), curettage of the entire endometrium, hemostasis, and subsequent suturing of the incision with a blanket suture.

Предложенная модель синдрома Ашермана позволяет полностью исключить фертильность при достаточно глубоком и тщательном кюретаже, и соответственно точно оценивать лечебный эффект препаратов и методов для лечения данного синдрома.The proposed model of Asherman's syndrome makes it possible to completely exclude fertility with sufficiently deep and thorough curettage, and accordingly accurately evaluate the therapeutic effect of drugs and methods for treating this syndrome.

Предложенная модель синдрома Ашермана у крыс характеризуется повреждением эндометрия, снижением эндометриальных желез, развитием фиброза и формированием фиброзных спаек, что характерно для клинической картины данного заболевания у людей. Полученная модель синдрома Ашермана у крыс является состоятельной, так как в отличие от прочих разновидностей, дававших при проверке восстановление фертильности почти у трети прооперированных в сроки от четырех месяцев после операции обеспечивается стопроцентное бесплодие пожизненно. Краткий протокол:The proposed model of Asherman's syndrome in rats is characterized by damage to the endometrium, reduction of endometrial glands, development of fibrosis and the formation of fibrous adhesions, which is typical for the clinical picture of this disease in humans. The resulting model of Asherman's syndrome in rats is consistent, since, unlike other varieties that, when tested, restored fertility in almost a third of those operated on within four months after surgery, one hundred percent infertility is ensured for life. Brief protocol:

Используются половозрелые самки крыс линии Wistar (возраст 4-6 мес.) Нанесение травмы эндометрия выполняли под общим наркозом:Mature female Wistar rats (age 4-6 months) are used. Endometrial trauma was performed under general anesthesia:

• Премедикация:• Premedication:

Атропин 10 мкг/кг Atropine 10 mcg/kg

Димедрол 10 мг/кг Diphenhydramine 10 mg/kg

Дроперидол 100 мкг/кг Droperidol 100 mcg/kg

• Собственно, наркоз:• Actually, anesthesia:

Золетил 7,5 мг/кг Zoletil 7.5 mg/kg

Рометар 0,05-0,1 мл/кг Rometar 0.05-0.1 ml/kg

После наркотизации, нанесения офтальмогеля на роговицу и обработки передней брюшной стенки (сбривание волос, обработка антисептиком) (Фигура 1, 2) - на передней брюшной стенке производилось послойное рассечение кожи, ПЖК, белой линии живота (лапаротомия). Длина разреза - 5 см. (Фигура 3, 4).After anesthesia, application of ophthalmogel to the cornea and treatment of the anterior abdominal wall (hair shaving, antiseptic treatment) (Figure 1, 2), a layer-by-layer dissection of the skin, pancreas, and white line of the abdomen (laparotomy) was performed on the anterior abdominal wall. The length of the cut is 5 cm (Figure 3, 4).

При помощи электрокоагулятора обеспечивался гемостаз поверхностных сосудов. Края раны, укрытые стерильными салфеткам, разведены в стороны ранорасширителем (Фигура 5, 6).Using an electrocoagulator, hemostasis of superficial vessels was ensured. The edges of the wound, covered with sterile napkins, are spread apart with a retractor (Figure 5, 6).

Далее произведен осмотр брюшной и тазовой полостей. Петли кишок не раздуты, перистальтика активна, серозная оболочка не изменена. Мочевой пузырь расположен по средней линии, кпереди от матки. Матка расположена по средней линии, правильной формы, патологические образования не обнаружены. Правый маточный рог - форма не изменена, диаметр равен 4 мм. Правый яичник - без особенностей. Левый маточный рог имеет правильную форму, диаметр - 4 мм. Левый яичник - без патологии (Фигура 7, 8).Next, the abdominal and pelvic cavities were examined. The intestinal loops are not distended, peristalsis is active, the serous membrane is not changed. The bladder is located in the midline, anterior to the uterus. The uterus is located in the midline, regular in shape, no pathological formations were detected. The right uterine horn - the shape is not changed, the diameter is 4 mm. The right ovary is without features. The left uterine horn has the correct shape, diameter - 4 mm. The left ovary is without pathology (Figure 7, 8).

В рану выводились поочередно рога матки. При помощи скальпеля и микрохирургических ножниц, отступив на 3 мм от тела матки, рога вскрывались продольным разрезом, не доходя 3 мм до яйцевода. Микрокюреткой производилось выскабливание эндометрия по всей длине рога. Обеспечение гемостаза (Фигура 9, 10).The horns of the uterus were removed one by one into the wound. Using a scalpel and microsurgical scissors, moving 3 mm from the body of the uterus, the horns were opened with a longitudinal incision, not reaching 3 mm to the oviduct. A microcurette was used to scrape the endometrium along the entire length of the horn. Ensuring hemostasis (Figure 9, 10).

Во вскрытые рога матки устанавливались по 2 силиконовых катетера диаметром 2 мм: катетер №1 с многочисленными отверстиями для выполнения функции дренажа, катетер №2 - сплошной, служащий для несмыкания роговой полости в начальный репаративный период для предотвращения ее зарастания. После введения катетеров рога ушивались обвивным швом при помощи атравматического материала 7.0 Prolene на колющей игле (Фигура 11, 12, 13).Two silicone catheters with a diameter of 2 mm were installed into the opened uterine horns: catheter No. 1 with numerous holes to perform the drainage function, catheter No. 2 - solid, used to not close the horny cavity during the initial reparative period to prevent its overgrowth. After insertion of the catheters, the horns were sutured with a blanket suture using atraumatic material 7.0 Prolene on a stabbing needle (Figure 11, 12, 13).

Далее произведено орошение брюшной и тазовой полостей теплым физиологическим раствором (0,9% NaCl). Излишки раствора удалялись при помощи стерильных салфеток.Next, the abdominal and pelvic cavities were irrigated with warm saline solution (0.9% NaCl). Excess solution was removed using sterile wipes.

На передней брюшной стенке выполнялись контрапертуры, через которые выводились катетеры «наружу» (Фигура 14, 15, 16).Counter-openings were made on the anterior abdominal wall, through which the catheters were brought out “outside” (Figure 14, 15, 16).

Края раны у базального отдела рогов матки фиксировали к брюшине передней брюшной стенки при помощи узловых швов атравматическим материалом 7.0 Prolene на колющей игле - формирование трубчатой стомы.The edges of the wound at the basal part of the uterine horns were fixed to the peritoneum of the anterior abdominal wall using interrupted sutures with atraumatic material 7.0 Prolene on a piercing needle - the formation of a tubular stoma.

Контроль гемостаза. Катетеры дополнительно были фиксированы одиночным швом к передней брюшной стенке (Фигура 17, 18, 19).Hemostasis control. The catheters were additionally fixed with a single suture to the anterior abdominal wall (Figure 17, 18, 19).

С целью профилактики послеоперационных инфекционных осложнений внутрибрюшинно вводили антибиотик широкого спектра (Цефтриаксон 10 мг/кг). Контроль гемостаза. Послойное ушивание лапаротомной раны узловым швом. После прекращения отхождения отделяемого дренажные катетеры №1 удаляется, а выведенные через контрапертуру катетеры №2 обрезаются до длины примерно 2-3 сантиметра снаружи брюшной полости, сворачиваются и укладываются во временный подкожные карманы, также ушиваемый поверх катетеров, для предотвращения контаминации. Обработка послеоперационной раны метрогиловым гелем во избежание погрызов швов. Катетеры удаляются спустя трое суток после операции.To prevent postoperative infectious complications, a broad-spectrum antibiotic (Ceftriaxone 10 mg/kg) was administered intraperitoneally. Hemostasis control. Layer-by-layer suturing of a laparotomy wound with an interrupted suture. After the discharge of the discharge ceases, drainage catheters No. 1 are removed, and catheters No. 2, withdrawn through the counter-aperture, are cut to a length of approximately 2-3 centimeters outside the abdominal cavity, rolled up and placed in temporary subcutaneous pockets, also sutured over the catheters, to prevent contamination. Treating the postoperative wound with Metrogyl gel to avoid gnawing on the sutures. Catheters are removed three days after surgery.

Наблюдение в течение 12 месяцев после операции продемонстрировало полное отсутствие фертильности.Follow-up for 12 months after surgery demonstrated a complete absence of fertility.

КОММЕНТАРИИ:COMMENTS:

Фигуры 1 и 2. Обработка передней брюшной стенки.Figures 1 and 2. Treatment of the anterior abdominal wall.

Фигуры 3,4. Послойное рассечение тканей ПБС.Figures 3,4. Layer-by-layer dissection of PBS tissues.

Фигуры 5, 6. Ревизия брюшной полости.Figures 5, 6. Revision of the abdominal cavity.

Фигуры 7, 8. Продольное рассечение рогов матки.Figures 7, 8. Longitudinal dissection of the uterine horns.

Фигуры 9, 10. Выскабливание эндометрия микрокюреткой.Figures 9, 10. Curettage of the endometrium with a microcurette.

Фигуры 11-13. Введение в просвет рогов силиконовых катетеров.Figures 11-13. Introduction of silicone catheters into the lumen of the horns.

Фигуры 14-16. Формирование контрапертуры на передней брюшной стенке.Figures 14-16. Formation of a contraperture on the anterior abdominal wall.

Фигуры 17-21. Формирование стом.Figures 17-21. Formation of stomas.

Фигура 22. Наложение кожного шва.Figure 22. Skin suture.

Claims (1)

Способ моделирования синдрома Ашермана на крысах, отличающийся тем, что вскрывают маточные рога вдоль по всей длине, от воронок до непарной части матки, проводят кюретаж всего эндометрия, затем выполняют гемостаз, во вскрытые рога матки устанавливают по 2 силиконовых катетера диаметром 2 мм: катетер N1 - дренажный катетер с отверстиями, катетер N2 - сплошной, служащий для несмыкания и предотвращения зарастания полости рога, после введения катетеров разрез рогов ушивают обвивным швом, при этом после прекращения отхождения отделяемого дренажные катетеры N1 удаляют, а выведенные через контрапертуру катетеры N2 обрезают так, чтобы снаружи брюшной полости оставалось 2-3 см, через 3 суток после операции катетеры N2 удаляют.A method for modeling Asherman's syndrome in rats, characterized in that the uterine horns are opened along the entire length, from the infundibulum to the unpaired part of the uterus, curettage of the entire endometrium is performed, then hemostasis is performed, 2 silicone catheters with a diameter of 2 mm are installed in the opened uterine horns: catheter N1 - drainage catheter with holes, catheter N2 - solid, used to open and prevent overgrowth of the horn cavity, after insertion of the catheters, the incision of the horns is sutured with an entwining suture, and after the discharge of the discharge has stopped, drainage catheters N1 are removed, and catheters N2 brought out through the counter-aperture are cut so that 2-3 cm remained outside the abdominal cavity; 3 days after the operation, N2 catheters are removed.