RU2757874C1 - Средство с комплексным фармакологическим эффектом для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней (варианты) - Google Patents
Средство с комплексным фармакологическим эффектом для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней (варианты) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2757874C1 RU2757874C1 RU2019134718A RU2019134718A RU2757874C1 RU 2757874 C1 RU2757874 C1 RU 2757874C1 RU 2019134718 A RU2019134718 A RU 2019134718A RU 2019134718 A RU2019134718 A RU 2019134718A RU 2757874 C1 RU2757874 C1 RU 2757874C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- methylphenol
- meso
- treatment
- diisobornyl
- rac
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
- A61K31/05—Phenols
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармакологии и касается применения мезо- и рацемической формы 2,6-ди(1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-экзо-2-ил)-4-метилфенола в качестве средств для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней. Мезо-форма представляет собой 2-{(1S,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-6-{(1R,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенол, рацемическая форма - 2,6-ди{(1S,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенол и 2,6-ди{(1R,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенол. Технический результат состоит в расширении арсенала средств для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней, а также в усилении фармакологической активности за счет стереоспецифичности действия изомеров и за счет наличия у них комплекса фармакологических свойств (антирадикальной, гемореологической, антитромбоцитарной, антитромбогенной и нейропротекторной активности, увеличения мозгового кровотока), что также обеспечивает повышение эффективности лечения указанных заболеваний. 2 н.п. ф-лы, 7 табл., 7 пр.
Description
Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и касается средств для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней.
Производные c бицикло[2.2.1]гептановой структурой, к которым относятся камфора и ее производные, изоборнилфенолы, обладают физиологическими свойствами и находят применение в медицине [О.И. Киселев, Химиопрепараты и химиотерапия гриппа, Росток, Санкт Петербург, 2012, 272 с.; М. Д. Машковский, Лекарственные средства, 16-е изд., Новая Волна, Москва, 2012, 1216 с. M. Cirri, P. Mura, P. Corvi Mora, Int. J. Pharm., 2007, 340, 84].
Известно, что 2,6-диизоборнил-4-метилфенол (2,6-ди(1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-экзо-2-ил)-4-метилфенол) обладает широким спектром фармакологической активности: антирадикальной, антиоксидантной, нейропротекторной, противоишемической, ретинопротекторной и другими видами действия [Патенты РФ № 2347561; 2351321; 2406488; 2406487; Морфология. 2011. Т. 140. № 6. С.43-47; Neuroscience and Behavioral Physiology. 2012. Vol. 42. No. 9. Р. 1019-1023; Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2014. Т. 157. № 2. С. 173-176; Медицинские науки. Фундаментальные исследования. 2014. № 7. С. 790-794; Key Engineering Materials. 2016. Vol. 683. Р. 469; Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2018. Т. 165. № 5. С. 601-604].
Задачей изобретения является исследование фармакологической активности структурных изомеров: 2-{(1S,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-6-{(1R,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенола − мезо-форма и 2,6-ди{(1S,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}фенол и 2,6-ди{(1R,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенола – рацемическая форма.
Изобретение представлено в вариантах.
Технический результат состоит в расширении арсенала средств для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней, а также в усилении фармакологической активности за счет стереоспецифичности действия индивидуальных стереоизомеров, что обеспечивает повышение эффективности лечения заболеваний.
Технический результат достигается тем, что средство для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней (по первому варианту) выделено из смеси диастереомеров 2,6-ди(1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-экзо-2-ил)-4-метилфенола в виде мезо-формы − 2-{(1S,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-6-{(1R,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенол с химической чистотой более 98%.
Технический результат достигается тем, что средство для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней (по второму варианту) выделено из смеси диастереомеров 2,6-ди(1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-экзо-2-ил)-4-метилфенола в виде рацемической формы – 2,6-ди{(1S,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенол и 2,6-ди{(1R,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенол с химической чистотой более 98%.
Научно обосновано, что заявленные средства обладают антирадикальной, гемореологической, антитромбоцитарной и антитромбогенной активностью, увеличивают мозговой кровоток, а также обладают нейропротекторной активностью.
Механизм действия биологически активных веществ обычно заключается в их соединении со специфическими рецепторами. Каждый рецептор обладает характерной пространственной структурой участка, взаимодействующего с биологически активным веществом, и их структуры должны соответствовать друг другу по принципу ключ-замок. Поэтому у большинства лекарственных препаратов существует тесная взаимосвязь между пространственной структурой и фармакологической активностью, то есть стереоспецифичность действия. Различное фармакологическое воздействие форм изомеров, а также различная степень их действия и наличие побочных эффектов необходимо учитывать при создании нового лекарственного средства.
Введение терпенового заместителя в ароматическое ядро фенолов осуществляется с использованием реакции алкилирования Фриделя-Крафтса при взаимодействии 4-метилфенола с камфеном [Патент РФ № 2485090]. Применение в качестве алкилирующего агента бициклического монотерпена камфена, независимо от его оптической чистоты, приводит к образованию смеси стереоизомеров 2,6-диизоборнил-4-метилфенола. Индивидуальные диастереомеры мезо- и рац-формы с de >97% получены в результате дополнительного разделения путем кристаллизации [Патент РФ № 2502719].
Нами разработаны условия для выделения из смеси диастереомеров 2,6- диизоборнил-4-метилфенола мезо-формы − 2-{(1S,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-6-{(1R,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенол (далее мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол или мезо-1) с химической чистотой более 98% и рацемической формы – 2,6-ди{(1S,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенол и 2,6-ди{(1R,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенол (далее рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол или рац-2) с химической чистотой более 98%.
Фармакологические свойства полученных индивидуальных структурных изомеров 2,6-диизоборнил-4-метилфенола в литературе не описаны и не следуют явным образом из известного уровня техники. Авторами изобретения проведены научно-исследовательские и экспериментальные работы и осуществлена оценка комплекса фармакологических свойств и эффектов каждого соединения, выделенного из смеси диастереомеров 2,6-ди(1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-экзо-2-ил)-4-метилфенола.
Нами выполнена оценка токсичности соединений мезо-1 и рац-2 на белых беспородных мышах. Острую токсичность образцов в каждой дозе исследовали на 10 беспородных мышах (5 самок и 5 самцов массой 18−22 г). Животных наблюдали в течение 14 суток, в течение первых суток - наблюдение постоянное. Для определения показателя острой токсичности LD50 использовали пробит-анализ по методу Литчфилда-Вилкоксона. Средняя смертельная доза (LD50) для соединений мезо-1 и рац-2 при введении в желудок не выявлена: введение этих соединений в дозе 5 г/кг не вызывало летального исхода ни у одного животного, что позволило отнести изученные вещества к 4-му классу опасности [ГОСТ 12.1.007–76, Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности, 1977].
Антирадикальную активность изомеров мезо-1 и рац-2 оценивали по их способности взаимодействовать с DPPH. В видимой области спектра DPPH в органических растворителях имеет максимум поглощения в диапазоне длин волн 515-520 нм, который прогрессивно уменьшается и исчезает при переходе соединения в нерадикальную форму. Кинетическую кривую изменения оптической плотности контрольной и опытных проб записывали на спектрофотометре «Varian Cary 50» (США) сразу после смешивания раствора DPPH (0.25 ммоль) с растворителем (контрольная проба) или раствором исследуемого соединения (0.25 ммоль) (опытные пробы) в соотношении 1:1 по объему. Таким образом, конечные концентрации DPPH и исследуемого вещества в пробах составляли 0.125 ммоль. В качестве растворителя использовали этанол. Для количественной оценки антирадикальной активности применили показатель эффективного времени (ET50%) - время, за которое происходит уменьшение исходной оптической плотности на 50%.
В результате сравнительного исследования антирадикальной активности в тесте DPPH индивидуальных изомеров мезо-1 и рац-2 установлено, что ET50% (мезо-1) = 5.88±0.46, ET50% (рац-2) = 9.42±0.54.
Эксперименты по изучению гемореологических свойств мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол проводили на 25 крысах-самцах Вистар массой 250−300 г. Животные были разделены на группы: 5 животных получили внутрижелудочно крахмальную слизь (контроль), 5 животных получили внутрижелудочно пентоксифиллин (400 мг/кг, группа Pph); 5 животных получили внутрижелудочно мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (100 мг/кг, группа мезо-1) и 5 животных получили внутрижелудочно рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (100 мг/кг, группа рац-2). Соединения и эквиобъемное количество крахмальной слизи (1 мл) вводили внутрижелудочно через зонд за один час до забора крови. Влияние соединений на вязкость крови оценивали с использованием модели гипервязкости крови in vitro. Кровь забирали из общей сонной артерии под эфирным наркозом. В качестве стабилизатора использовали 3.8% раствор цитрата натрия в соотношении с кровью 1:9. Вязкость крови измеряли на ротационном вискозиметре АКР-2 в диапазоне скоростей сдвига от 5 с−1 до 300 с-1 до и после инкубации образцов при температуре 20.0±0.4 °С в течение 60 минут.
Спонтанную агрегацию эритроцитов исследовали с помощью модифицированного метода [Габриэлян Э.С., Акопов С.Э. Клетки крови и кровообращение. Ереван: Айастан, 1985. 399 с.; Плотников М.Б., Алиев О.И., Маслов М.Ю. и др. Эксперим. и клинич. фармакология. 1999. № 6. С. 45–47]. Для установления интенсивности фотометрического сигнала использовали микроколориметр МКМФ-1, с графической регистрацией на графопостроителе Н306. Критерием агрегационной активности эритроцитов служил полупериод агрегации Т1/2 – время, за которое величина фотометрического сигнала снижается в два раза.
Эксперименты по изучению антитромбоцитарной активности проводили на крысах-самцах Вистар массой 250−280 г. Животные были разделены на группы: 5 животных получили внутрижелудочно крахмальную слизь (контроль), 5 животных получили внутрижелудочно пентоксифиллин (400 мг/кг, группа Pph); 5 животных получили внутрижелудочно мезо-2,6-диизоборнил4-метилфенол (100 мг/кг, группа мезо-1), 5 животных получили внутрижелудочно рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (100 мг/кг, группа рац-2). Препараты и эквиобъемное количество крахмальной слизи (1 мл) вводили внутрижелудочно через зонд за один час до забора крови. Кровь забирали из общей сонной артерии под эфирным наркозом. В качестве стабилизатора использовали 3.8% раствор цитрата натрия в соотношении с кровью 1 : 9.
Получение богатой (БТП) и бедной (БеТП) тромбоцитами плазмы и подсчет числа тромбоцитов проводили по стандартному методу [Баркаган З.С., Момот А.П. Основные методы лабораторной диагностики нарушений системы гемостаза. – Барнаул, 1998. С. 10–11]. Из проб крови получали плазмы БТП и БеТП соответственно на центрифуге РС-6 при 400 g и 1800 g. В полученной БТП подсчитывали количество тромбоцитов микроскопическим методом при фазовом контрасте в камере Горяева. Агрегацию тромбоцитов в богатой тромбоцитами плазме (БТП) определяли нефелометрическим методом [Born G.V.R. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal // Nature. 1962. Vol. 194, № 4832. P. 927–929].
Так как в норме число тромбоцитов в крови у крысы колеблется в широких пределах − от 430 000 до 1 млн в 1 мм3 − после определения числа тромбоцитов в БТП проводили стандартизацию числа тромбоцитов, для чего БПТ разводили необходимым количеством БеТП до 400±30 тыс. тромбоцитов в 1 мм3 в пробе [Закревская А.Л. Тромбоциты крыс как модель исследования ингибиторов агрегации // Патологическое функционирование системы гемостаза. Л., 1990. С. 46–54; Западнюк И.П., Западнюк В.И., Захария Е.А. Лабораторные животные. – Киев, 1974. 303 с.]. Агрегацию тромбоцитов оценивали в стандартизованной плазме на приборе АТ-02, агрегатограммы регистрировали с помощью самописца Reсorder 2210.
После добавления индуктора агрегации (АДФ в конечной концентрации 4⋅10-6 М) регистрировали изменение уровня оптической плотности БТП. В качестве критерия агрегационной активности тромбоцитов использовали показатель степени агрегации (в %), характеризуемый изменением оптической плотности БТП после добавления в кювету индуктора агрегации. При этом за 100% принимали величину оптической плотности БеТП, а за 0% − величину оптической плотности БТП.
Эксперименты по изучению антитромбогенной активности фенолов мезо-1 и рац-2 проводили на 20 крысах-самцах Вистар массой 220‒240 г. Животные были разделены на группы: 5 животных получили внутрижелудочно крахмальную слизь (контроль), 5 животных получили внутрижелудочно пентоксифиллин (400 мг/кг, группа (Pph); 5 животных получили внутрижелудочно мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (100 мг/кг, группа мезо-1), 5 животных получили внутрижелудочно рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (100 мг/кг, группа рац-2). Соединения и эквиобъемное количество крахмальной слизи (1 мл) вводили внутрижелудочно через зонд в течение трех суток. На третьи сутки эксперимента – через 1 час после последнего введения животных наркотизировали (тиопентал натрия в дозе 60 мг/кг внутрибрюшинно), выделяли левую общую сонную артерию и воспроизводили модель внутрисосудистого тромбоза [Максименко А.В., Тищенко Е.Г. Антиоксидантная биотерапия для защиты сосудистой производными супероксиддисмутазы и каталазы // Цитология. 1999. Т. 41, № 9. С. 821–822]. На отпрепарированную сонную артерию накладывали манжеточные датчики и регистрировали величину кровотока по сосуду с помощью электромагнитного расходомера крови MFV-1100 (Nihon Kohden, Япония). Затем под сонную артерию подкладывали полоску фильтровальной бумаги и полоску полиэтиленовой пленки. Сверху на эту артерию накладывали полоску фильтровальной бумаги, на которую наносили 1 каплю 10% раствора FeCl2. Измеряли величину кровотока в артерии, время от момента нанесения хлорида железа на левую сонную артерию до полной остановки кровотока в ней (время образования тромба). Кроме того, производили расчет снижения кровотока относительно исходной величины кровотока в процентах. Массу тромба оценивали гравиметрическим методом.
Статистическую обработку проводили с помощью пакета программного обеспечения «Statistica 6.0». Рассчитывали среднее значение, стандартную ошибку, для выявления межгрупповых различий использовали t-критерий Стьюдента.
Результаты исследований гемореологической активности соединений мезо-1 и рац-2 представлены в примерах 1, 2 и таблицах 1, 2.
Пример 1. Инкубирование крови в течение 60 мин при температуре 20.0±0.4 °С приводило к значимому повышению вязкости крови при скоростях сдвига 5 с-1, 10 с-1, 50 с-1, 100 с-1 и 300 с-1 на 30, 17, 26, 27 и 13% соответственно (табл. 1, контроль).
У опытных крыс в группе, получавшей пентоксифиллин, вязкость крови до инкубации была достоверно ниже, чем в контроле при скоростях сдвига 5, 10 и 50 с-1 на 10%, 19% и 4% соответственно. Инкубирование крови крыс этой группы в течение 60 мин при температуре 20.0±0.4 °С приводило к повышению вязкости крови при скоростях сдвига 5 с-1, 10 с-1, 50 с-1, 100 с-1 и 300 с-1 на 8, 11, 12, 9 и 8% соответственно. После инкубации вязкость крови при скоростях сдвига 5 с-1, 10 с-1, 50 с-1, 100 с-1, 300 с-1 была ниже, чем в контроле на 26, 20, 18, 18 и 8% соответственно (табл. 1). Таким образом, на модели гипервязкости крови in vitro пентоксифиллин ограничивает возрастание вязкости крови в широком диапазоне скоростей сдвига.
У опытных крыс, получавших препарат мезо-1, до инкубации вязкость крови была ниже, чем в контроле при скоростях сдвига 5 с-1, 10 с-1 и 50 с-1 на 12%, 11% и 7% соответственно. Инкубирование крови крыс этой группы в течение 60 мин при температуре 20.0±0.4 °С приводило к повышению вязкости крови при скоростях сдвига 5 с-1, 10 с-1, 50 с-1, 100 с-1 и 300 с-1 на 8, 9, 8, 7 и 4% соответственно. После инкубирования вязкость крови была ниже, чем в контроле при скоростях сдвига 5 с-1, 10 с-1, 50 с-1, 100 с-1 и 300 с-1 на 28, 17, 21, 19 и 8% соответственно (табл. 1). Таким образом, на модели гипервязкости крови in vitro мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол ограничивает возрастание вязкости крови в широком диапазоне скоростей сдвига. Выраженность гемореологической активности мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола несколько превосходит таковую у прототипа − пентоксифиллина.
У опытных крыс в группе, получавшей препарат рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол, исходные значения вязкости крови при скоростях сдвига 5 с-1, 10 с-1, 50 с-1 были ниже на 14, 11 и 7% соответственно, чем в контроле. Инкубирование крови крыс этой группы в течение 60 мин при температуре 20.0±0.4 °С приводило к повышению вязкости крови во всем диапазоне исследуемых скоростей сдвига на 17, 12, 12, 13 и 9%. После инкубирования вязкость крови крыс этой группы была ниже, чем в контроле при скоростях сдвига 5 с-1, 10 с-1, 50 с-1, 100 с-1 и 300 с-1 на 22, 15, 18, 15 и 4% соответственно (табл. 1). Таким образом, на модели гипервязкости крови in vitro рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол ограничивает возрастание вязкости крови в широком диапазоне скоростей сдвига. Выраженность гемореологической активности рац-2 сопоставима с таковой у прототипа − пентоксифиллина.
Пример 2. Полупериод агрегации эритроцитов у крыс контрольной группы составил 20.7±2.1 с. Инкубирование крови в течение 60 мин при температуре 20.0±0.4 °С приводило к уменьшению полупериода агрегации эритроцитов на 35% (табл. 2, контроль). Таким образом, на модели гипервязкости крови in vitro в контрольной группе установлено уменьшение полупериода агрегации эритроцитов, что свидетельствовало об усилении агрегации эритроцитов.
Инкубирование крови у крыс, получавших пентоксифиллин или препараты мезо-1 и рац-2, в течение 60 мин при температуре 20.0±0.4 °С не вызывало значимых сдвигов в значении полупериода агрегации эритроцитов (табл. 2). Значение полупериода агрегации эритроцитов по сравнению с показателем контрольной группы после инкубации представлено в таблице 2. Анализ полученных данных показывает, что на модели гипервязкости крови in vitro наиболее значимо предотвращает усиление агрегации эритроцитов пентоксифиллин. Выраженность гемореологической активности диастереомеров мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола сопоставима с таковой у прототипа – пентоксифиллина.
Таблица 1. Влияние внутривенной 10-минутной инфузии винпоцетина (4 мг/кг, Vinp) и подкожного введения масленого раствора мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола (100 мг/кг, мезо-1) и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола (100 мг/кг, рац-2) на динамику мозгового кровотока (МК, мл/мин) и системного артериального давления (САД, мм рт.ст.)
Примечание: × – р < 0.05 по сравнению с исходными значениями;
* – р < 0.05 по сравнению с группой контроля.
Таблица 2. Влияние однократного внутрижелудочного введения пентоксифиллина (400 мг/кг, Pph), мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола (100 мг/кг, мезо-1), рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола (100 мг/кг, рац-2) на агрегацию эритроцитов до (1) и через 1 ч после инкубации при комнатной температуре (20.0±0.4 °С) (2)
Примечание: × − р < 0.05 по сравнению с исходными значениями;
* – р < 0.05 по сравнению с группой контроля.
Результаты исследований антитромбоцитарной активности изомеров мезо-1 и рац-2 представлены в примере 3 и таблице 3.
Пример 3. В контрольной группе животных амплитуда АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов в стандартизованной плазме составила 27±1% (табл. 3, контроль).
После однократного внутрижелудочного введения пентоксифиллина в дозе 400 мг/кг амплитуда АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов в стандартизированной плазме составила 18±1%, что на 33% ниже показателя у крыс контрольной группы (табл. 3, Pph). Таким образом, пентоксифиллин в дозе 400 мг/кг внутрижелудочно однократно обладает выраженной антиагрегантной активностью.
После однократного внутрижелудочного введения рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола (100 мг/кг, рац-2) в дозе 100 мг/кг амплитуда АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов в стандартизованной плазме составила 17±1% (табл. 3, рац-2). Амплитуда агрегации тромбоцитов была на 37% ниже, чем в контроле и была близка к значению показателя у крыс, получавших пентоксифиллин. Тем самым рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол показывает выраженную антиагрегантную активность.
После однократного внутрижелудочного введения мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола в дозе 100 мг/кг амплитуда АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов в стандартизованной плазме составила 16±1% (табл. 3, мезо-1). Амплитуда агрегации тромбоцитов была на 41% ниже, чем в контроле и была близка к значению показателя у крыс в группе, получавших прототип – пентоксифиллин. Таким образом, мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол обнаруживает выраженную антиагрегантную активность.
Таблица 3. Влияние введения препаратов на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов* и на снижение кровотока в сонной артерии в течение 90 минут и массу тромба через сутки после аппликации хлорида железа**
Примечание: * − однократного внутрижелудочного введения пентоксифиллина (400 мг/кг, Pph), мезо-2,6-изоборнил-4-метилфенола (100 мг/кг, мезо-1), рац-2,6-изоборнил-4-метилфенола (100 мг/кг, рац-2); ** − трехкратное внутрижелудочное введение указанных препаратов; × – р < 0.05 по сравнению с группой контроля.
Результаты исследований антитромбогенной активности изомеров мезо-1 и рац-2 представлены в примере 4 и таблице 3.
Пример 4. В контрольной группе животных исходная величина кровотока в сонной артерии составляла 5.3±0.5 мл/мин. После аппликации железа хлорида на поверхность сонной артерии у всех животных происходило полное прекращение кровотока по сосуду. Среднее время полной остановки кровотока до нуля составило 20±2 минуты. Масса тромба, определяемая через сутки после аппликации хлорида железа, составила 1.2±0.2 мг (табл. 3, контроль).
У опытных крыс в группе, получавшей пентоксифиллин, исходное значение величины кровотока составляло 6.5±0.5 мл/мин, что достоверно на 22% превосходило показатель контрольной группы. К концу периода наблюдения (90 мин с момента аппликации хлорида железа) происходило снижение кровотока в сонной артерии на 34±9%. На следующие сутки в просвете сонной артерии не выявлено тромбов ни у одного животного (табл. 3, Pph).
Таким образом, пентоксифиллин в дозе 400 мг/кг внутрижелудочно вызывает повышение кровотока по сравнению с группой контрольных животных и обладает выраженной антитромбогенной активностью.
У опытных крыс, получавших мезо-2,6-изоборнил-4-метилфенол, исходное значение величины кровотока составляло 7.5±0.8 мл/мин, что было на 42% выше, чем показатель контрольной группы. К концу периода наблюдения (90 мин с момента аппликации хлорида железа) происходило снижение кровотока в сонной артерии на 11±10%. На следующие сутки в просвете сонной артерии не выявлено тромбов ни у одного животного (табл. 3, группа мезо-1).
Таким образом, мезо-2,6-изоборнил-4-метилфенол в дозе 100 мг/кг внутрижелудочно способствует повышению кровотока по сравнению с группой контрольных животных и обладает выраженной антитромбогенной активностью.
У опытных крыс группы, получавших рац-2,6-изоборнил-4-метилфенол, исходное значение величины кровотока составляла 7.1±0.6 мл/мин, что было на 34% выше, чем показатель контрольной группы. К концу периода наблюдения (90 мин с момента аппликации хлорида железа) происходило снижение кровотока в сонной артерии на 13±8%. Через сутки у двух животных из пяти были обнаружены тромбы в просвете сонной артерии. Средняя масса тромба составила 0.02±0.02 мг, что было на 98% ниже, чем в контроле (табл. 3, группа рац-2).
Таким образом, рац-2,6-изоборнил-4-метилфенол в дозе 100 мг/кг внутрижелудочно обеспечивает повышение кровотока по сравнению с группой контрольных животных и обладает выраженной антитромбогенной активностью.
Изомеры мезо-2,6-изоборнил-4-метилфенол и рац-2,6-изоборнил-4-метилфенол могут быть использованы для лечения больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями для уменьшения повышенной вязкости крови, спонтанной агрегации эритроцитов, а также снижения агрегационной способности тромбоцитов и внутрисосудистого тромбообразования.
Эксперименты по изучению влияния однократного парентерального введения винпоцетина, мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола на динамику мозгового кровотока и системного артериального давления проводили на 36 крысах-самцах Вистар массой 320−380 г. Животные были разделены на 4 групп: 10 животным подкожно вводили 1 мл миндального масла (контроль), 6 животным проводили 10-минутную внутривенную инфузию винпоцетина (5 мг/кг) (Vinp); 10 животным подкожно вводили мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (100 мг/кг) в виде раствора в 1 мл миндального масла (мезо-1) и 10 животным подкожно вводили рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (100 мг/кг) в виде раствора в 1 мл миндального масла (рац-1).
Для проведения эксперимента животных наркотизировали (тиопентал натрия в дозе 100 мг/кг внутрибрюшинно) и в отпрепарированную правую бедренную артерию имплантировали катетер для измерения системного артериального давления. Системное артериальное давление регистрировали с помощью датчика полиграфа «Салют», сигнал которого усиливали рН-метром рН-340, с непрерывной записью на самописце КСП-4. Отпрепарировывали левую общую сонную артерию и перевязывали наружную сонную артерию. На общую сонную артерию накладывали манжеточный датчик и регистрировали величину мозгового кровотока с помощью электромагнитного расходомера крови MFV-1100 (Nihon Kohden, Япония).
Эксперименты по изучению влияния курсового внутрижелудочного введения винпоцетина, мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола на мозговой кровоток проводили на 20 крысах-самцах Вистар массой 220−240 г. Животные были разделены на 4 группы: 5 животных получили внутрижелудочно крахмальную слизь (контроль), 5 животных получили внутрижелудочно винпоцетин (45 мг/кг) (Vinp); 5 животных получили внутрижелудочно мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (100 мг/кг) (мезо-1) и 5 животных получили внутрижелудочно рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (100 мг/кг) (рац-2).
Препараты и эквиобъемное количество крахмальной слизи (1 мл) вводили внутрижелудочно через зонд ежедневно однократно в течение 3-х суток. На третьи сутки эксперимента через 1 час после последнего введения животных наркотизировали (тиопентал натрия в дозе 100 мг/кг внутрибрюшинно), выделяли левую общую сонную артерию и перевязывали наружную сонную артерию. На общую сонную артерию накладывали манжеточный датчик и регистрировали величину мозгового кровотока с помощью электромагнитного расходомера крови MFV-1100 (Nihon Kohden, Япония).
Статистическую обработку проводили с помощью пакета программного обеспечения «Statistica 6.0». Рассчитывали среднее значение, стандартную ошибку, для выявления межгрупповых различий использовали t-критерий Стьюдента.
Результаты исследований влияния винпоцетина и мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола на мозговой кровоток представлены в примерах 5 и 6, таблице 4.
Пример 5. В контрольной группе величина мозгового кровотока в течение 1 часа была стабильной; в последующие 30 мин наблюдения отмечена незначительная тенденция к снижению мозгового кровотока. Со стороны системного артериального давления наблюдалась тенденция к снижению в течение опыта, что, очевидно, отражает условия эксперимента (наличие операционной травмы и использование наркоза) (табл. 4, контроль).
Исходное значение мозгового кровотока у крыс в группе, получавших винпоцетин (Vinp) составило 7.5±0.2 мл/мин. К 5-10 мин внутривенной инфузии винпоцетина мозговой кровоток слабо возрастал (на 4–5%) и через 5 мин после окончания инфузии (15 мин) значительно увеличивался и сохранялся на повышенном уровне (на 15–31%) до конца эксперимента. Данные изменения носили статистически достоверный характер, как по сравнению с исходным значением, так и по отношению к показателю контрольной группы (табл. 4, группа Vinp).
Исходное значение системного артериального давления у крыс группы Vinp составило 114±3 мм рт.ст. К 5 и 10 минуте инфузии отмечена выраженная гипотензивная реакция системного артериального давления, через 5 мин после окончания инфузии (на 15 минуте опыта) показатель оставался сниженным на 11%. Эти изменения носили статистически значимый характер по сравнению с контролем. С 30 по 90 мин эксперимента системное артериальное давление находилось на уровне значений этого показателя в контрольной группе (табл. 4).
Таким образом, внутривенная инфузия винпоцетина в дозе 4 мг/кг вызывает значимое повышение мозгового кровотока и выраженное транзиторное снижение САД во время инфузии и временно сохраняется после ее завершения.
Исходное значение мозгового кровотока у крыс в группе мезо-1 составило 7.7±0.3 мл/мин. Начиная с 5 мин после введения мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола и до конца наблюдения, отмечен рост мозгового кровотока со стабилизацией на повышенном, по сравнению с исходным, уровне в период наблюдения с 45 до 90 мин опыта. В период с 60 по 90 мин значения мозгового кровотока у крыс группы мезо-1 достоверно превосходили значения этого показателя в контрольной группе (табл. 4, мезо-1).
Исходное значение системного артериального давления у крыс в группе мезо-1 составило 111±3 мм рт.ст. В течение всего периода наблюдения достоверных изменений показателя не выявлено.
Таким образом, подкожное введение масляного раствора мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола в дозе 100 мг/кг повышает мозговой кровоток, не вызывая снижение системного артериального давления.
Исходное значение мозгового кровотока у крыс в группе рац-2 составило 7.5±0.3 мл/мин. Начиная с 5 мин после введения рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола и до конца наблюдения, отмечен рост мозгового кровотока со стабилизацией на повышенном, по сравнению с исходным, уровне в период с 45 до 90 мин опыта. В период с 60 по 90 мин значения мозгового кровотока у крыс группы рац-2 достоверно превосходили значения этого показателя в контрольной группе (табл. 4, рац-2).
Исходное значение системного артериального давления у крыс в группе рац-2 составило 113±3 мм рт.ст. В течение всего периода наблюдения достоверных изменений показателя не выявлено.
Таблица 4. Влияние внутривенной 10-минутной инфузии винпоцетина (4 мг/кг, Vinp) и подкожного введения масленого раствора мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола (100 мг/кг, мезо-1) и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола (100 мг/кг, рац-2) на динамику мозгового кровотока (МК, мл/мин) и системного артериального давления (САД, мм рт.ст.)
Примечание: × – р < 0.05 по сравнению с исходными значениями; * – р < 0.05 по сравнению с группой контроля.
Таким образом, подкожное введение масляного раствора рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола в дозе 100 мг/кг повышает мозговой кровоток, не вызывая снижение системного артериального давления.
Пример 6. У крыс в контрольной группе после курсового внутрижелудочного введения крахмальной слизи значение мозгового кровотока составляло 5.0±0.5 мл/мин.
У крыс в группе, получавших винпоцетин, после курсового внутрижелудочного введения винпоцетина в дозе 45 мг/кг значение мозгового кровотока составляли 7.1±0.5 мл/мин, что достоверно на 42% превосходило показатель контрольной группы. Таким образом, трехкратное внутрижелудочное введение винпоцетина в дозе 45 мг/кг вызывает значимое увеличение мозгового кровотока.
У крыс в группе, получавших мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол, после курсового внутрижелудочного введения данного препарата в дозе 100 мг/кг значение мозгового кровотока составляли 7.0±0.5 мл/мин, что было на 40% выше, чем показатель контрольной группы. Таким образом, трехкратное внутрижелудочное введение мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола в дозе 100 мг/кг вызывает значимое увеличение мозгового кровотока; эффект по выраженности не уступает эффекту винпоцетину.
У крыс в группе, получавших рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол, после курсового внутрижелудочного введения данного препарата в дозе 100 мг/кг значение мозгового кровотока составляли 6.8±0.5 мл/мин, что было на 36% выше, чем показатель контрольной группы. Таким образом, трехкратное внутрижелудочное введение рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола в дозе 100 мг/кг вызывает значимое увеличение мозгового кровотока; эффект по выраженности не уступает эффекту винпоцетину.
Изомеры мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол могут быть использованы для лечения нарушений мозгового кровообращения у больных с сосудистыми заболеваниями головного мозга.
Эксперименты по оценке нейропротекторных эффектов проводили на 96 беспородных крысах-самках массой 200–230 г с использованием модели тотальной транзиторной ишемии головного мозга. Модель тотальной транзиторной ишемии головного мозга воспроизводили по методу W.A. Pulsineli [Pulsinelli W.A., Brierley J.B. A new model of bilateral hemispheric ischemia in the unanesthetized rat // Stroke. 1979. Vol. 10, № 3. P. 267–272] в нашей модификации. За 1 сутки до моделирования тотальной транзиторной ишемии головного мозга у наркотизированных крыс (этаминал-натрий 60 мг/кг внутрибрюшинно) производили термокоагуляцию обеих вертебральных артерий на уровне первого шейного позвонка. Через 24 ч под эфирным наркозом на обе общие сонные артерии накладывали окклюдеры на 30 мин. Состоятельность модели оценивали по побледнению видимой части сосудистой оболочки глаза, расширению зрачков, развитию гипервентиляции. В случае развития апноэ использовали искусственную вентиляцию легких (аппарат АИД–2). Реперфузию проводили снятием окклюдеров, после чего рану ушивали. Крысы контрольной группы получали внутрижелудочно 1 мл 1%-ой крахмальной слизи, животные опытных групп – мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол в дозе 100 мг/кг в 1 мл крахмальной слизи один раз в сутки в течение 7 дней (группа мезо-1) и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол в дозе 100 мг/кг в 1 мл крахмальной слизи один раз в сутки в течение 7 дней (группа рац-2). Первое введение осуществляли через 1 час после создания модели ишемии.
Оценку функционального состояния высшей нервной деятельности на 1-е, 3-и, 5-е и 7-е сутки после создания модели тотальной транзиторной ишемии головного мозга проводили по шкале Stroke-index [McGraw C.P. Experimental cerebral infarction effects of pentobarbital in Mongolian gerbils // Arch. Neurol. 1977. Vol. 34, № 6. P. 334–336] в нашей модификации по следующим показателям: спонтанная двигательная активность (нормальная, повышенная или сниженная, отсутствие), расстройства походки (скованность, шаткость, замедленность движений, нарушение ориентации), рефлексы отдергивания хвоста, обеих передних и задних лап, реакция на звук, тремор, судороги, тонус мышц туловища и конечностей (нормальный, повышенный, отсутствие), признаки птоза (отсутствие, односторонний, двусторонний). Каждый показатель оценивали в баллах: 0 баллов – норма; 1 балл – умеренно выраженные изменения; 2 балла – резко выраженные изменения.
Неврологический дефицит животного оценивали суммой баллов по всем показателям. Кроме того, в каждой группе крыс определяли долю животных с тяжелыми неврологическими расстройствами (6 баллов и более), с нарушениями средней тяжести (3–5 баллов) и с легкими изменениями (до 2 баллов). Выживаемость животных регистрировали на 1-е, 3-и, 5-е и 7-е сутки после тотальной транзиторной ишемии головного мозга.
По завершению экспериментов эвтаназию животных вызывали передозировкой эфирного наркоза.
Статистическую обработку результатов проводили стандартными методами с применением t-критерия Стъюдента и критерия χ2 с помощью пакета программ Statistica for Windows 6.0.
Результаты исследований нейропротекторной активности мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола представлены в примере 7, таблицах 5−7.
Пример 7. В контрольной группе в течение первых суток после эпизода тотальной транзиторной ишемии головного мозга погибло 36% животных. К третьим суткам эксперимента в контрольной группе погибло 43% животных (табл. 5).
У животных контрольной группы неврологический дефицит в первые сутки после эпизода тотальной транзиторной ишемии головного мозга составил 7.0±0.8 балла, к третьим суткам – 4.8±0.5 балла, к пятым суткам – 5.2±0.8 балла и к седьмым суткам – 3.5±0.6 балла (табл. 6).
Таблица 5. Влияние курсового (7 суток) внутрижелудочного введения мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола (100 мг/кг) и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (100 мг/кг) на смертность животных (%) после тотальной транзиторной ишемии головного мозга
Примечание: * – р < 0.05 по сравнению с группой контроля.
Таблица 6. Влияние курсового (7 суток) внутрижелудочного введения мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола (100 мг/кг) и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (100 мг/кг) на средний балл неврологического дефицита крыс после тотальной ишемии головного мозга
Примечание: × − р < 0.05 по сравнению с группой контроля.
В первые сутки количество животных с тяжелой степенью неврологического дефицита (более 6 баллов) составило 70%, со средней степенью (3–5 баллов) – 20%, с легкой степенью (менее 2 баллов) – 10%. К третьим суткам количество животных с тяжелой степенью неврологического дефицита снизилось до 43.3%, а со средней и легкой степенью повысилась соответственно до 36.7 и 20.0%. К пятым суткам эксперимента в контрольной группе количество животных с тяжелой степенью неврологического дефицита составило 40.0%, средней – 33.3%, а с легкой степенью возросло до 26.7%. К седьмым суткам наблюдения количество животных с тяжелой степенью неврологического дефицита продолжало снижаться и составило 20.0%, со средней степенью не изменилось, а с легкой степенью увеличилось до 46.7% (табл. 7).
Таблица 7. Влияние курсового введения 4-метил-2,6-диизоборнилфенола на выраженность неврологического дефицита у крыс после тотальной ишемии головного мозга (% от общего числа животных в группе)
Примечание: * − тяжелая степень неврологического дефицита (более 6 баллов), средняя степень (3–5 баллов), легкая степень (менее 2 баллов); × − р < 0.05 по сравнению с группой контроля.
В первые сутки после эпизода тотальной транзиторной ишемии головного мозга в группе крыс, получавших мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (мезо-1), погибло 9% животных, что было в 4 раза ниже контрольного показателя. К третьим суткам эксперимента в опытной группе погибло 15% животных, что было достоверно ниже контроля (р<0.05) (табл. 5).
У животных опытной группы неврологический дефицит в первые сутки после эпизода тотальной транзиторной ишемии головного мозга составил 5.9±0.6 балла, к третьим суткам – 4.0±0.5 балла, к пятым – 2.6±0.5 балла, к седьмым суткам – 1.9±0.5 балла (табл. 6). Достоверность между контрольной и опытной группами выявились к 5-м и 7-м суткам.
К первым суткам количество опытных животных с тяжелой степенью неврологического дефицита (более 6 баллов) составило 33.3%, со средней степенью (3–5 баллов) – 57.6%, с легкой степенью (менее 2 баллов) – 9.1% (табл. 7). К третьим суткам в опытной группе количество животных с тяжелой степенью неврологического дефицита снизилось до 24.2%, средней – 39.4% и значительно возросло число крыс с легкой степенью (36.4%). К пятым суткам эксперимента прогрессивно снижалось количество крыс с тяжелой и средней степенью неврологического дефицита до 9.1 и 30.3% соответственно, а с легкой степенью увеличилось до 60.6%. К седьмым суткам наблюдения в опытной группе тяжелого неврологического дефицита не выявлено не у одного животного, со средней степенью возросло незначительно до 33.3%, а количество крыс с легкой степенью составило 66.7%. По показателю степени неврологического дефицита основные различия между контрольной и опытной группами наблюдались на 1-е, 5-е и 7-е сутки после эпизода тотальной транзиторной ишемии головного мозга.
Таким образом, внутрижелудочное введение мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенола в дозе 100 мг/кг в течение 7 суток крысам, перенесшим тотальную транзиторную ишемию головного мозга, приводит к повышению выживаемости животных, уменьшению среднего балла неврологического дефицита, возрастанию числа животных со средней и легкой степенью неврологического дефицита и снижению числа животных с тяжелой степенью неврологического дефицита.
В первые сутки после эпизода тотальной транзиторной ишемии головного мозга в группе крыс, получавших рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол (рац-2), погибло 11% животных, что было в 3 раза ниже контрольного показателя. К третьим суткам эксперимента в опытной группе погибло 21% животных, что было достоверно ниже контроля (р<0.05) (табл. 5).
У животных опытной группы неврологический дефицит в первые сутки после эпизода тотальной транзиторной ишемии головного мозга составил 6.0±0.8 балла, к третьим суткам – 4.1±0.4 балла, к пятым – 2.7±0.4 балла, к седьмым суткам – 2.0±0.3 балла (табл. 6). Достоверность между контрольной и опытной группами выявились к 5-м и 7-м суткам.
К первым суткам количество опытных животных с тяжелой степенью неврологического дефицита (более 6 баллов) составило 36.4%, со средней степенью (3–5 баллов) – 57.6%, с легкой степенью (менее 2 баллов) – 6.0% (табл. 7). К третьим суткам в опытной группе количество животных с тяжелой степенью неврологического дефицита снизилось до 27.3%, средней – 42.4% и значительно возросло число крыс с легкой степенью (30.3%). К пятым суткам эксперимента прогрессивно снижалось количество крыс с тяжелой и средней степенью неврологического дефицита до 15.2 и 30.3% соответственно, а с легкой степенью увеличилось до 54.5%. К седьмым суткам наблюдения в опытной группе тяжелого неврологического дефицита не выявлено не у одного животного, со средней степенью возросло незначительно до 33.3%, а количество крыс с легкой степенью составило 66.7%. По показателю степени неврологического дефицита основные различия между контрольной и опытной группами наблюдались на 1-е, 5-е и 7-е сутки после эпизода тотальной транзиторной ишемии головного мозга.
Таким образом, внутрижелудочное введение рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенола в дозе 100 мг/кг в течение 7 суток крысам, перенесшим тотальную транзиторную ишемию головного мозга, приводит к повышению выживаемости животных, уменьшению среднего балла неврологического дефицита, возрастанию числа животных со средней и легкой степенью неврологического дефицита и снижению числа животных с тяжелой степенью неврологического дефицита.
Изомеры мезо-2,6-диизоборнил-4-метилфенол и рац-2,6-диизоборнил-4-метилфенол могут быть использованы для лечения последствий цереброваскулярных болезней.
Claims (2)
1. Применение мезо-формы 2,6-ди(1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-экзо-2-ил)-4-метилфенола − 2-{(1S,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-6-{(1R,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенола в качестве средства для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней.
2. Применение рацемической формы 2,6-ди(1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-экзо-2-ил)-4-метилфенола – 2,6-ди{(1S,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенол и 2,6-ди{(1R,2S,4S)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил}-4-метилфенол в качестве средства для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019134718A RU2757874C1 (ru) | 2019-10-30 | 2019-10-30 | Средство с комплексным фармакологическим эффектом для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней (варианты) |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019134718A RU2757874C1 (ru) | 2019-10-30 | 2019-10-30 | Средство с комплексным фармакологическим эффектом для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней (варианты) |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2757874C1 true RU2757874C1 (ru) | 2021-10-22 |
Family
ID=78289645
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019134718A RU2757874C1 (ru) | 2019-10-30 | 2019-10-30 | Средство с комплексным фармакологическим эффектом для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней (варианты) |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2757874C1 (ru) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2537636A (en) * | 1946-03-09 | 1951-01-09 | Firestone Tire & Rubber Co | Stabilization of rubber and rubbery polymers and the stabilized products |
RU2502719C2 (ru) * | 2011-07-06 | 2013-12-27 | Учреждение Российской академии наук Институт химии Коми научного центра Уральского отделения РАН | 2,6-диизоборнилфенолы |
-
2019
- 2019-10-30 RU RU2019134718A patent/RU2757874C1/ru active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2537636A (en) * | 1946-03-09 | 1951-01-09 | Firestone Tire & Rubber Co | Stabilization of rubber and rubbery polymers and the stabilized products |
RU2502719C2 (ru) * | 2011-07-06 | 2013-12-27 | Учреждение Российской академии наук Институт химии Коми научного центра Уральского отделения РАН | 2,6-диизоборнилфенолы |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
НАЗМУТДИНОВА Е.Е. и др.: "Определение посторонних примесей в субстанции диборнола методом ВЭЖХ", Journal of Siberian Federal University. Chemistry 3 (2010 3), 260-267. * |
СУКРУШЕВА О.В. Функциональные производные терпенофенолов. Авто диссертации на соискание учёной степени кандидата химических наук. Сыктывкар, 2016, 23 с.. * |
СУКРУШЕВА О.В. Функциональные производные терпенофенолов. Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата химических наук. Сыктывкар, 2016, 23 с.. ЧУКИЧЕВА И.Ю. Закономерности алкилирования фенолов монотерпеноидами и направленный синтез терпенофенолов. Автореферат диссертации на соискание учёной степени доктора химических наук. Сыктывкар, 2013, 48 с.. НАЗМУТДИНОВА Е.Е. и др.: "Определение посторонних примесей в субстанции диборнола методом ВЭЖХ", Journal of Siberian Federal University. Chemistry 3 (2010 3), 260-267. * |
ЧУКИЧЕВА И.Ю. Закономерности алкилирования фенолов монотерпеноидами и направленный синтез терпенофенолов. Авто диссертации на соискание учёной степени доктора химических наук. Сыктывкар, 2013, 48 с.. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE69223157T2 (de) | Sauerstoff-substituierte derivate von nucleophil-stickstoffoxid-addukten und ihre verwendung als stickstoffoxid-donor-prodrugs | |
Murphy et al. | The antioxidant potential of propofol (2, 6-diisopropylphenol) | |
RU2159231C2 (ru) | 2,4-ДИСУЛЬФОНИЛ-α-ФЕНИЛ-ТРЕТ-БУТИЛНИТРОН, ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ СОЛИ, ЕГО ФОРМА СВОБОДНОЙ КИСЛОТЫ ИЛИ СОЛЕВАЯ ФОРМА, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ | |
US5556870A (en) | Use of leflunomide for inhibiting interleukin 1 beta | |
US5547970A (en) | Use of leflunomide for inhibiting tumor necrosis factor alpha | |
RU2391979C2 (ru) | ДИГИДРОБРОМИД 2-(3,4-ДИГИДРОКСИФЕНИЛ)-9-ДИЭТИЛАМИНОЭТИЛИМИДАЗО[1,2-a] БЕНЗИМИДАЗОЛА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ЕГО ОСНОВЕ | |
RU2757874C1 (ru) | Средство с комплексным фармакологическим эффектом для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, коррекции нарушений мозгового кровообращения, лечения последствий цереброваскулярных болезней (варианты) | |
Chukicheva et al. | Composition and properties of the reaction products of p-cresol with camphene | |
US3836639A (en) | Use of aromatic glyoxals,their hydrates and bisulfite addition salts in reducing blood platelet aggregation | |
US5547971A (en) | Use of leflunomide for inhibiting interleukin 8 | |
CN105367582B (zh) | 银杏内酯b衍生物及其在药物中的应用 | |
RU2555335C9 (ru) | Средство для лечения сердечно-сосудистых заболеваний | |
Budić et al. | The effects of different anesthesia techniques on free radical production after tourniquet-induced ischemia-reperfusion injury at children's age | |
KR101788658B1 (ko) | 신규 히드록시 홍화황색소 a의 의약용 정제염 | |
EP0444199A1 (en) | Ascorbic acid derivatives | |
JPS6258336B2 (ru) | ||
DE3512629C2 (de) | s-Triazolo[1,5-a]pyrimidine und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
Al-Wabli et al. | Synthesis, in-vivo and in-vitro anti-inflammatory evaluation of some novel coumarin derivatives | |
RU2663836C1 (ru) | L-Энантиомер 2-этил-6-метил-3-гидроксипиридиния гидроксибутандиоата, обладающий церебропротекторной активностью | |
AU674550B2 (en) | Platelet aggregation inhibitor | |
EP0113235B1 (en) | Antithrombotic and/or antihypertensive compositions | |
JPS6144870A (ja) | 不飽和脂肪酸アミド誘導体およびこれを含有する血小板凝集抑制剤 | |
SU839544A1 (ru) | Средство,обладающее антиагрега-циОННОй АКТиВНОСТью | |
JP7487953B2 (ja) | 血管拡張剤およびその用途 | |
US4400396A (en) | Antithrombotic treatment with organic amine sulfites and bisulfites |