RU2741110C2 - Однодоменные антитела, направленные против внутриклеточных антигенов - Google Patents
Однодоменные антитела, направленные против внутриклеточных антигенов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2741110C2 RU2741110C2 RU2018120245A RU2018120245A RU2741110C2 RU 2741110 C2 RU2741110 C2 RU 2741110C2 RU 2018120245 A RU2018120245 A RU 2018120245A RU 2018120245 A RU2018120245 A RU 2018120245A RU 2741110 C2 RU2741110 C2 RU 2741110C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- administration
- sdab
- seq
- use according
- subject
- Prior art date
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 43
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 43
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 43
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 title claims description 10
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 title description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 35
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 35
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 34
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 34
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 claims abstract description 30
- 101900297506 Human immunodeficiency virus type 1 group M subtype B Reverse transcriptase/ribonuclease H Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000011161 development Methods 0.000 claims abstract description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 22
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 14
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 7
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 claims description 6
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 claims description 6
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 6
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 6
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 claims description 6
- 229940097496 nasal spray Drugs 0.000 claims description 6
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims description 6
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 6
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 claims description 5
- 238000002663 nebulization Methods 0.000 claims description 5
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 claims description 5
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 abstract description 17
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 abstract description 17
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 abstract description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 47
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 46
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 42
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 33
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 33
- 101150010086 VP24 gene Proteins 0.000 description 31
- 102000011730 Arachidonate 12-Lipoxygenase Human genes 0.000 description 28
- 108010076676 Arachidonate 12-lipoxygenase Proteins 0.000 description 28
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 description 27
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 24
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 20
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 14
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 14
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 14
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 12
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 12
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 12
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 11
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 11
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 11
- 201000011001 Ebola Hemorrhagic Fever Diseases 0.000 description 10
- -1 for example Chemical class 0.000 description 10
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 10
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 10
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 9
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 8
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 8
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 8
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 7
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 7
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 description 7
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 description 7
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 6
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 6
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 5
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 5
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 5
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 239000000306 component Substances 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 4
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 4
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 3
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- 102000029797 Prion Human genes 0.000 description 3
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 3
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 3
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 238000012933 kinetic analysis Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 3
- ZAWXOCUFQSQDJS-VIFPVBQESA-N (3s)-8-hydroxy-3-methyl-3,4-dihydro-2h-benzo[a]anthracene-1,7,12-trione Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC=C2C(=O)C2=C1C=CC1=C2C(=O)C[C@@H](C)C1 ZAWXOCUFQSQDJS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 2
- 101100239628 Danio rerio myca gene Proteins 0.000 description 2
- 208000030820 Ebola disease Diseases 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 description 2
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 2
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 2
- 101001064864 Homo sapiens Polyunsaturated fatty acid lipoxygenase ALOX12 Proteins 0.000 description 2
- 241000713340 Human immunodeficiency virus 2 Species 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 102000042838 JAK family Human genes 0.000 description 2
- 108091082332 JAK family Proteins 0.000 description 2
- 102000003820 Lipoxygenases Human genes 0.000 description 2
- 108090000128 Lipoxygenases Proteins 0.000 description 2
- 101150039798 MYC gene Proteins 0.000 description 2
- 101710127861 Membrane-associated protein VP24 Proteins 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 102000009516 Protein Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108010009341 Protein Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 2
- 108010017324 STAT3 Transcription Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000001712 STAT5 Transcription Factor Human genes 0.000 description 2
- 108010029477 STAT5 Transcription Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100024040 Signal transducer and activator of transcription 3 Human genes 0.000 description 2
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 101100459258 Xenopus laevis myc-a gene Proteins 0.000 description 2
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N cimetidine Chemical compound N#CNC(=N/C)\NCCSCC1=NC=N[C]1C CCGSUNCLSOWKJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001380 cimetidine Drugs 0.000 description 2
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 2
- VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N curcumin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(\C=C\C(=O)CC(=O)\C=C\C=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-FCXRPNKRSA-N 0.000 description 2
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 2
- 235000003869 genetically modified organism Nutrition 0.000 description 2
- 102000050179 human ALOX12 Human genes 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 2
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 2
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- CRDNMYFJWFXOCH-YPKPFQOOSA-N (3z)-3-(3-oxo-1h-indol-2-ylidene)-1h-indol-2-one Chemical class N/1C2=CC=CC=C2C(=O)C\1=C1/C2=CC=CC=C2NC1=O CRDNMYFJWFXOCH-YPKPFQOOSA-N 0.000 description 1
- VFUAJMPDXIRPKO-LQELWAHVSA-N (e)-3-(6-bromopyridin-2-yl)-2-cyano-n-[(1s)-1-phenylethyl]prop-2-enamide Chemical compound N([C@@H](C)C=1C=CC=CC=1)C(=O)C(\C#N)=C\C1=CC=CC(Br)=N1 VFUAJMPDXIRPKO-LQELWAHVSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.NCC(O)=O IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 125000001572 5'-adenylyl group Chemical group C=12N=C([H])N=C(N([H])[H])C=1N=C([H])N2[C@@]1([H])[C@@](O[H])([H])[C@@](O[H])([H])[C@](C(OP(=O)(O[H])[*])([H])[H])([H])O1 0.000 description 1
- 125000001417 5'-guanylyl group Chemical group C=12N=C(N([H])[H])N([H])C(=O)C=1N=C([H])N2[C@@]1([H])[C@@](O[H])([H])[C@@](O[H])([H])[C@](C(OP(=O)(O[H])[*])([H])[H])([H])O1 0.000 description 1
- CQBHSRLUQDYPBU-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxy-9,10-dioxoanthracene-1-sulfonamide Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC=C2C(=O)C2=C1C=CC=C2S(=O)(=O)N CQBHSRLUQDYPBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000002198 Annona diversifolia Nutrition 0.000 description 1
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 1
- 102000009515 Arachidonate 15-Lipoxygenase Human genes 0.000 description 1
- 108010048907 Arachidonate 15-lipoxygenase Proteins 0.000 description 1
- 102000001381 Arachidonate 5-Lipoxygenase Human genes 0.000 description 1
- 108010093579 Arachidonate 5-lipoxygenase Proteins 0.000 description 1
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 1
- XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N Atorvastatin Natural products C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- QAGYKUNXZHXKMR-UHFFFAOYSA-N CPD000469186 Natural products CC1=C(O)C=CC=C1C(=O)NC(C(O)CN1C(CC2CCCCC2C1)C(=O)NC(C)(C)C)CSC1=CC=CC=C1 QAGYKUNXZHXKMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000011727 Caspases Human genes 0.000 description 1
- 108010076667 Caspases Proteins 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- IHTCCHVMPGDDSL-ZJNDIJRCSA-N Cucurbitacin A Natural products O=C([C@@](O)(C)[C@H]1[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@]1(C)CC(=O)[C@]1(CO)[C@H]2CC=C2C(C)(C)C(=O)[C@H](O)C[C@@H]12)/C=C/C(OC(=O)C)(C)C IHTCCHVMPGDDSL-ZJNDIJRCSA-N 0.000 description 1
- IHTCCHVMPGDDSL-IVNGUWCNSA-N Cucurbitacin A Chemical compound C([C@H]1[C@]2(C)C[C@@H](O)[C@@H]([C@]2(CC(=O)[C@]11CO)C)[C@@](C)(O)C(=O)/C=C/C(C)(C)OC(=O)C)C=C2[C@H]1C[C@H](O)C(=O)C2(C)C IHTCCHVMPGDDSL-IVNGUWCNSA-N 0.000 description 1
- 101710095468 Cyclase Proteins 0.000 description 1
- 102100024457 Cyclin-dependent kinase 9 Human genes 0.000 description 1
- BZKFMUIJRXWWQK-UHFFFAOYSA-N Cyclopentenone Chemical class O=C1CCC=C1 BZKFMUIJRXWWQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100077740 Cyprinus carpio map2k2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 206010061819 Disease recurrence Diseases 0.000 description 1
- 101000606317 Drosophila melanogaster Protein patched Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 102000013446 GTP Phosphohydrolases Human genes 0.000 description 1
- 102100029974 GTPase HRas Human genes 0.000 description 1
- 102100030708 GTPase KRas Human genes 0.000 description 1
- 102100039788 GTPase NRas Human genes 0.000 description 1
- 108091006109 GTPases Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100039939 Growth/differentiation factor 8 Human genes 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 101000933320 Homo sapiens Breakpoint cluster region protein Proteins 0.000 description 1
- 101000721661 Homo sapiens Cellular tumor antigen p53 Proteins 0.000 description 1
- 101000980930 Homo sapiens Cyclin-dependent kinase 9 Proteins 0.000 description 1
- 101000584633 Homo sapiens GTPase HRas Proteins 0.000 description 1
- 101000584612 Homo sapiens GTPase KRas Proteins 0.000 description 1
- 101000744505 Homo sapiens GTPase NRas Proteins 0.000 description 1
- 101000950669 Homo sapiens Mitogen-activated protein kinase 9 Proteins 0.000 description 1
- 101001005602 Homo sapiens Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 11 Proteins 0.000 description 1
- 101000984753 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase B-raf Proteins 0.000 description 1
- 101000946843 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 101710203526 Integrase Proteins 0.000 description 1
- 102000012330 Integrases Human genes 0.000 description 1
- 108010061833 Integrases Proteins 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 108010055717 JNK Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000019145 JUN kinase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 241000282838 Lama Species 0.000 description 1
- 102000001291 MAP Kinase Kinase Kinase Human genes 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 108060006687 MAP kinase kinase kinase Proteins 0.000 description 1
- 101150010110 Map3k8 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100023482 Mitogen-activated protein kinase 14 Human genes 0.000 description 1
- 102100037809 Mitogen-activated protein kinase 9 Human genes 0.000 description 1
- 102100025207 Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 11 Human genes 0.000 description 1
- 102100025180 Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 12 Human genes 0.000 description 1
- 102100026907 Mitogen-activated protein kinase kinase kinase 8 Human genes 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 101001009089 Mus musculus Tyrosine-protein kinase HCK Proteins 0.000 description 1
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 1
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 1
- 108010056852 Myostatin Proteins 0.000 description 1
- 206010029113 Neovascularisation Diseases 0.000 description 1
- 108091092724 Noncoding DNA Proteins 0.000 description 1
- 102000005650 Notch Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010070047 Notch Receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000001388 Opportunistic Infections Diseases 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 1
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 1
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000004005 Prostaglandin-endoperoxide synthases Human genes 0.000 description 1
- 108090000459 Prostaglandin-endoperoxide synthases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N Resveratrol Natural products OC1=CC=CC(C=CC=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150001535 SRC gene Proteins 0.000 description 1
- 108010044012 STAT1 Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 108010081691 STAT2 Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004265 STAT2 Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010019992 STAT4 Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000005886 STAT4 Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010011005 STAT6 Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000013968 STAT6 Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- 241000555745 Sciuridae Species 0.000 description 1
- 102100027103 Serine/threonine-protein kinase B-raf Human genes 0.000 description 1
- 102100029904 Signal transducer and activator of transcription 1-alpha/beta Human genes 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000007451 Steroid Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010085012 Steroid Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 102100034922 T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain Human genes 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 1
- LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N Trans-resveratrol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 1
- 101150077651 VP35 gene Proteins 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 208000028227 Viral hemorrhagic fever Diseases 0.000 description 1
- 102000006757 Wnt Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010047118 Wnt Receptors Proteins 0.000 description 1
- INAPMGSXUVUWAF-GCVPSNMTSA-N [(2r,3s,5r,6r)-2,3,4,5,6-pentahydroxycyclohexyl] dihydrogen phosphate Chemical class OC1[C@H](O)[C@@H](O)C(OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O INAPMGSXUVUWAF-GCVPSNMTSA-N 0.000 description 1
- NUEVMWXZKGBDPT-UHFFFAOYSA-N [4-[[4-(hexylcarbamoyl)-2-naphthalen-1-yl-1,3-oxazol-5-yl]methyl]phenyl] dihydrogen phosphate Chemical compound CCCCCCNC(=O)C=1N=C(C=2C3=CC=CC=C3C=CC=2)OC=1CC1=CC=C(OP(O)(O)=O)C=C1 NUEVMWXZKGBDPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003070 absorption delaying agent Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- BIIVYFLTOXDAOV-YVEFUNNKSA-N alvocidib Chemical compound O[C@@H]1CN(C)CC[C@@H]1C1=C(O)C=C(O)C2=C1OC(C=1C(=CC=CC=1)Cl)=CC2=O BIIVYFLTOXDAOV-YVEFUNNKSA-N 0.000 description 1
- 229950010817 alvocidib Drugs 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 230000007416 antiviral immune response Effects 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 1
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N celecoxib Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=CC(C(F)(F)F)=NN1C1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000590 celecoxib Drugs 0.000 description 1
- 108091092356 cellular DNA Proteins 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000000546 chi-square test Methods 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 229940109262 curcumin Drugs 0.000 description 1
- 235000012754 curcumin Nutrition 0.000 description 1
- 239000004148 curcumin Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N diferuloylmethane Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C=CC(=O)CC(=O)C=CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 VFLDPWHFBUODDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- MQHNKCZKNAJROC-UHFFFAOYSA-N dipropyl phthalate Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=CC=C1C(=O)OCCC MQHNKCZKNAJROC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 150000002333 glycines Chemical class 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 239000004030 hiv protease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 229960001936 indinavir Drugs 0.000 description 1
- CBVCZFGXHXORBI-PXQQMZJSSA-N indinavir Chemical compound C([C@H](N(CC1)C[C@@H](O)C[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H]2C3=CC=CC=C3C[C@H]2O)C(=O)NC(C)(C)C)N1CC1=CC=CN=C1 CBVCZFGXHXORBI-PXQQMZJSSA-N 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000035990 intercellular signaling Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 description 1
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- XTYDRDGSHBFNRY-IRXDYDNUSA-N methyl (2S)-2-[[(2S)-2-[[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]carbamoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]-3-(1-methylimidazol-4-yl)propanoate Chemical compound COC(=O)[C@H](Cc1cn(C)cn1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)Nc2cc(cc(c2)C(F)(F)F)C(F)(F)F)C(C)C XTYDRDGSHBFNRY-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 108090001035 mitogen-activated protein kinase kinase kinase 12 Proteins 0.000 description 1
- 101150069859 mos gene Proteins 0.000 description 1
- MNPXTRXFUMGQLK-UHFFFAOYSA-N n-[5-(furan-2-yl)-1,3,4-oxadiazol-2-yl]-2-phenylquinoline-4-carboxamide Chemical compound C=1C(C=2C=CC=CC=2)=NC2=CC=CC=C2C=1C(=O)NC(O1)=NN=C1C1=CC=CO1 MNPXTRXFUMGQLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 229960000884 nelfinavir Drugs 0.000 description 1
- QAGYKUNXZHXKMR-HKWSIXNMSA-N nelfinavir Chemical compound CC1=C(O)C=CC=C1C(=O)N[C@H]([C@H](O)CN1[C@@H](C[C@@H]2CCCC[C@@H]2C1)C(=O)NC(C)(C)C)CSC1=CC=CC=C1 QAGYKUNXZHXKMR-HKWSIXNMSA-N 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- RJMUSRYZPJIFPJ-UHFFFAOYSA-N niclosamide Chemical compound OC1=CC=C(Cl)C=C1C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1Cl RJMUSRYZPJIFPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001920 niclosamide Drugs 0.000 description 1
- YCWSUKQGVSGXJO-NTUHNPAUSA-N nifuroxazide Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C(=O)N\N=C\C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1 YCWSUKQGVSGXJO-NTUHNPAUSA-N 0.000 description 1
- 229960003888 nifuroxazide Drugs 0.000 description 1
- 239000002687 nonaqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000001668 nucleic acid synthesis Methods 0.000 description 1
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 1
- 108010068338 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- DCWXELXMIBXGTH-QMMMGPOBSA-N phosphonotyrosine Chemical class OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(OP(O)(O)=O)C=C1 DCWXELXMIBXGTH-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- WKSAUQYGYAYLPV-UHFFFAOYSA-N pyrimethamine Chemical compound CCC1=NC(N)=NC(N)=C1C1=CC=C(Cl)C=C1 WKSAUQYGYAYLPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000611 pyrimethamine Drugs 0.000 description 1
- 239000012557 regeneration buffer Substances 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 229940016667 resveratrol Drugs 0.000 description 1
- 235000021283 resveratrol Nutrition 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 229960002539 ruxolitinib phosphate Drugs 0.000 description 1
- JFMWPOCYMYGEDM-XFULWGLBSA-N ruxolitinib phosphate Chemical compound OP(O)(O)=O.C1([C@@H](CC#N)N2N=CC(=C2)C=2C=3C=CNC=3N=CN=2)CCCC1 JFMWPOCYMYGEDM-XFULWGLBSA-N 0.000 description 1
- 229960001852 saquinavir Drugs 0.000 description 1
- QWAXKHKRTORLEM-UGJKXSETSA-N saquinavir Chemical compound C([C@@H]([C@H](O)CN1C[C@H]2CCCC[C@H]2C[C@H]1C(=O)NC(C)(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)C=1N=C2C=CC=CC2=CC=1)C1=CC=CC=C1 QWAXKHKRTORLEM-UGJKXSETSA-N 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 235000004400 serine Nutrition 0.000 description 1
- 150000003355 serines Chemical class 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002195 soluble material Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009092 tissue dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000007998 vessel formation Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/42—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum viral
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1002—Coronaviridae
- C07K16/1003—Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 [SARS‐CoV‐2 or Covid-19]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1036—Retroviridae, e.g. leukemia viruses
- C07K16/1045—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1036—Retroviridae, e.g. leukemia viruses
- C07K16/1045—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV
- C07K16/1072—Regulatory proteins, e.g. tat, rev, vpt
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0069—Oxidoreductases (1.) acting on single donors with incorporation of molecular oxygen, i.e. oxygenases (1.13)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y113/00—Oxidoreductases acting on single donors with incorporation of molecular oxygen (oxygenases) (1.13)
- C12Y113/11—Oxidoreductases acting on single donors with incorporation of molecular oxygen (oxygenases) (1.13) with incorporation of two atoms of oxygen (1.13.11)
- C12Y113/11031—Arachidonate 12-lipoxygenase (1.13.11.31), i.e. lipoxygenase-type-12
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6854—Immunoglobulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/22—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from camelids, e.g. camel, llama or dromedary
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/14011—Filoviridae
- C12N2760/14111—Ebolavirus, e.g. Zaire ebolavirus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/14011—Filoviridae
- C12N2760/14111—Ebolavirus, e.g. Zaire ebolavirus
- C12N2760/14122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/08—RNA viruses
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/902—Oxidoreductases (1.)
- G01N2333/90241—Oxidoreductases (1.) acting on single donors with incorporation of molecular oxygen, i.e. oxygenases (1.13)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/91—Transferases (2.)
- G01N2333/912—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
- G01N2333/91205—Phosphotransferases in general
- G01N2333/91245—Nucleotidyltransferases (2.7.7)
- G01N2333/9125—Nucleotidyltransferases (2.7.7) with a definite EC number (2.7.7.-)
- G01N2333/9128—RNA-directed DNA polymerases, e.g. RT (2.7.7.49)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2469/00—Immunoassays for the detection of microorganisms
- G01N2469/10—Detection of antigens from microorganism in sample from host
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2469/00—Immunoassays for the detection of microorganisms
- G01N2469/20—Detection of antibodies in sample from host which are directed against antigens from microorganisms
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биохимии, в частности к однодоменному антителу sdAb к обратной транскриптазе вируса иммунодефицита человека типа 1, способному специфически связываться с антигеном вируса иммунодефицита человека типа 1, а также к его применению для лечения вируса иммунодефицита человека типа 1, для предотвращения развития вируса иммунодефицита человека типа 1, а также к его применению для предотвращения рецидива вируса иммунодефицита человека типа 1. Также раскрыт выделенный полипептид, способный специфически связываться с антигеном обратной транскриптазы вируса иммунодефицита человека типа 1. Изобретение позволяет эффективно осуществлять лечение вируса иммунодефицита человека типа 1. 5 н. и 15 з.п. ф-лы, 10 ил., 4 табл., 5 пр.
Description
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] Данная заявка заявляет приоритет по предварительной заявке на патент США №62/249868, поданной 2 ноября 2015, содержание которой включено в данное описание посредством ссылки в полном объеме.
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
[0002] Данная заявка подана вместе с перечнем последовательности в текстовом формате вместо бумажной копии. Перечень последовательностей предоставляется в виде файла под названием "sequence listing.txt," созданного 27 октября 2016, и имеющего размер 58 килобайт. Информация в электронном формате перечня последовательностей включена в данный документ посредством ссылки в полном объеме.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0003] Использование однодоменных антител (sdAb) в качестве отдельных антигенсвязывающих белков или в качестве антигенсвязывающего домена в более крупном белке или полипептиде дает ряд существенных преимуществ перед использованием обычных антител или фрагментов антител. Преимущества sdAb включают: для связывания антигена с высоким сродством и высокой селективностью требуется только один домен; sdAb могут быть экспрессированы из одного гена и не требуют посттрансляционной модификации; sdAb являются высокостабильными при действии денатурирующих агентов или условий, включая тепло, рН и протеазы; sdAb являются недорогими при создании; и sdAb могут получить доступ к мишеням и эпитопам, недоступным обычным антителам.
[0004] Существует ряд заболеваний или патологических состояний, таких как вирусные инфекции или рак, которые вызваны аберрантными внутриклеточными или трансмембранными компонентами, такими как нуклеотиды и белки. Устранение аберрантных компонентов может быть использовано для предотвращения или лечения заболеваний, или патологических состояний. Существует ряд фармакологических соединений, доступных для лечения таких заболеваний, но эти соединения могут быть неэффективными, не доставляемыми или токсичными для незатронутых клеток.
[0005] Другие способы лечения включают использование терапевтических белков или агентов, которые содержат экзогенную нацеливающую последовательность, так что терапевтический агент может быть распознан рецепторами на клеточной мембране, позволяя терапевтическому агенту преодолевать клеточную мембрану и проникать в клетку. Когда терапевтический агент находится внутри клетки, терапевтический агент может взаимодействовать с компонентом-мишенью для лечения заболевания. Однако использование экзогенной последовательности нацеливания может ограничивать тип клеток, на которые нацелен терапевтический агент, и увеличивать стоимость изготовления терапевтического агента.
[0006] По вышеизложенным причинам существует потребность в композициях и способах лечения или профилактики заболевания, которые не полагаются на экзогенные целевые последовательности или химические составы для проникновения в клетку и которые эффективны при нацеливании только на пораженные клетки в организме.
[0007] Данное изобретение относится к однодоменным антителам (sdAb), белкам и полипептидам, содержащим sdAb. SdAb направлены против мишеней, которые вызывают патологическое состояние или болезнь. Изобретение также включает нуклеиновые кислоты, кодирующие sdAb, белки и полипептиды, и композиции, содержащие sdAb. Изобретение включает применение композиций, sdAb, белков или полипептидов для профилактических, терапевтических или диагностических целей. Изобретение также включает применение моноклональных антител, направленных против sdAb по изобретению.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0008] Данное изобретение направлено на sdAb, применяемые для лечения или профилактики патологического состояния, или заболевания. Один из вариантов осуществления относится к однодоменному антителу (sdAb) к обратной транскриптазы вируса иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1). В одном аспекте sdAb обратной транскриптазы ВИЧ-1 содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 27. Изобретение также включает способ лечения заболевания, предотвращения развития заболевания или предотвращения рецидива заболевания у субъекта с применением sdAb к обратной транскриптазы ВИЧ-1 путем введения эффективного количества sdAb к обратной транскриптазы ВИЧ-1 субъекту, нуждающемуся в этом. Субъект может представлять собой млекопитающее, такое как человек. sdAbk обратной транскриптазе ВИЧ-1 можно вводить в комбинации с одним или более соединениями, такими как, например, ингибитор протеазы. Введение эффективного количества sdAbк обратной транскриптазе ВИЧ-1 субъекту, нуждающемуся в этом, может осуществляться путем внутривенного введения, внутримышечного введения, перорального приема, ректального введения, энтерального введения, парентерального введения, внутриглазного введения, подкожного введения, трансдермального введения, введения в виде глазных капель, введения в виде назального спрея, введения путем ингаляции или распыления, местного применения и введения в качестве имплантируемого лекарственного средства.
[0009] В другом варианте осуществления изобретение относится к выделенному полипептиду, имеющему аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 27. В другом варианте осуществления изобретение включает антитело, направленное против полипептида SEQ ID NO: 27.
[0010] Также предполагается, что изобретение включает способ измерения уровней sdAbк обратной транскриптазе ВИЧ-1 в образце от субъекта, причем способ включает этапы: а) создания мышиного моноклонального антитела, направленного против одного или более доменов полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 27; b) получения образца от субъекта; с) проведения количественного иммуноанализа с мышиным моноклональным антителом и образцом для определения количества sdAb у субъекта; таким образом измеряя количество sdAb у субъекта. В одном аспекте количественный иммунологический анализ включает иммуноферментный анализ (ИФА), анализ специфического мечения аналита и повторного захвата (SALRA), жидкостную хроматографию, масс-спектрометрию, сортировку клеток на проточном цитометре, или их комбинацию.
[0011] Другой вариант осуществления изобретения относится к sdAbк VP24 вирусуЭбола. В одном аспекте sdAbк VP24 вирусуЭбола содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 55. Изобретение также включает способ лечения заболевания, предотвращения развития заболевания или предотвращения рецидива заболевания у субъекта с применением sdAbк VP24 вирусуЭбола путем введения эффективного количества sdAbк VP24 вирусуЭбола субъекту, нуждающемуся в этом. Субъектом может представлять собой млекопитающее, такое как человек. sdAbк VP24 вирусуЭбола можно вводить в комбинации с одним или более соединениями, такими как, например, ингибитор протеазы. Введение эффективного количества sdAbк VP24 вирусуЭбола субъекту, нуждающемуся в этом, может осуществляться путем внутривенного введения, внутримышечного введения, перорального приема, ректального введения, энтерального введения, парентерального введения, внутриглазного введения, подкожного введения, трансдермального введения, введения в виде глазных капель, введения в виде назального спрея, введения путем ингаляции или распыления, местного применения и введения в качестве имплантируемого лекарственного средства.
[0012] В другом варианте осуществления изобретение относится к выделенному полипептиду, имеющему аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 55. В другом варианте осуществления изобретение включает антитело, направленное против полипептида SEQ ID NO: 55.
[0013] Также предполагается, что изобретение включает способ измерения уровней sdAbк VP24 вирусуЭбола в образце от субъекта, причем способ включает этапы: а) создания мышиного моноклонального антитела, направленного против одного или более доменов полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 55; b) получения образца от субъекта; с) проведения количественного иммуноанализа с мышиным моноклональным антителом и образцом для определения количества sdAb у субъекта; таким образом измеряя количество sdAb у субъекта. В одном аспекте количественный иммунологический анализ включает ИФА, SALRA, жидкостную хроматографию, масс-спектрометрию, сортировку клеток на проточном цитометре, или их комбинацию.
[0014] Еще один вариант осуществления изобретения относится к sdAbк арахидонат-12-липоксигеназе (ALOX12). В одном аспекте sdAbк ALOX12 содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 51 или SEQ ID NO: 52. Изобретение также включает способ лечения заболевания, предотвращения развития заболевания или предотвращения рецидива заболевания у субъекта с применением sdAb к ALOX12 путем введения эффективного количества sdAbк ALOX12 субъекту, нуждающемуся в этом. Субъектом может представлять собой млекопитающее, такое как человек. sdAb к ALOX12 можно вводить в комбинации с одним или более соединениями. Введение эффективного количества sdAbк ALOX12 субъекту, нуждающемуся в этом, может осуществляться путем внутривенного введения, внутримышечного введения, перорального приема, ректального введения, энтерального введения, парентерального введения, внутриглазного введения, подкожного введения, трансдермального введения, введения в виде глазных капель, введения в виде назального спрея, введения путем ингаляции или распыления, местного применения и введения в качестве имплантируемого лекарственного средства.
[0015] В другом варианте осуществления изобретение относится к выделенному полипептиду, имеющему аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 51 или SEQ ID NO: 52. В другом варианте осуществления изобретение включает антитело, направленное против полипептида SEQ ID NO: 49, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 51 или SEQ ID NO: 52.
[0016] Также предполагается, что изобретение включает способ измерения уровней sdAbк обратной транскриптазе ВИЧ-1 в образце от субъекта, причем способ включает этапы: а) создания мышиного моноклонального антитела, направленного против одного или более доменов полипептида, содержащего аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 27; b) получения образца от субъекта; с) проведения количественного иммуноанализа с мышиныммоноклональным антителом и образцом для определения количества sdAb у субъекта; таким образом измеряя количество sdAb у субъекта. В одном аспекте количественный иммунологический анализ включает ИФА, SALRA, жидкостную хроматографию, масс-спектрометрию, сортировку клетокна проточном цитометре, или их комбинацию.
ГРАФИЧЕСКИЕ МАТЕРИАЛЫ
[0017] Эти и другие признаки, аспекты и преимущества данного изобретения станут более понятными в отношении нижеследующего описания, прилагаемой формулы изобретения и сопроводительных графических материалов, на которых:
На фиг. 1 и 2 представлены результаты ИФА с использованием ВИЧ 1-9 sdAbк OT (обратной транскиптазе) ВИЧ-1 (SEQ ID NO: 27);
На фиг. 3 и 4 представлены результаты ИФА с использованием серийных разведений ВИЧ1-9 sdAbк OT ВИЧ-1 (SEQ ID NO: 27);
На фиг. 5-8 представлены результаты ИФА с использованием VP24-5 sdAbк VP24 вирусуЭбола (SEQ ID NO: 55); и
На фиг. 9 и 10 представлены результаты ИФА с использованием серийных разведений VP24-5 sdAbк VP24 вирусуЭбола (SEQ ID NO: 55);
ОПИСАНИЕ
[0018] Используемые в данном документе следующие термины и их варианты имеют значения, приведенные ниже, если иное значение явно не предусмотрено контекстом, в котором используется этот термин.
[0019] Используемые в данном документе формы единственного числа включают ссылки на множественное число, если из контекста явно не следует иное.
[0020] Термин «антигенная детерминанта» относится к эпитопу на антигене, распознаваемому антигенсвязывающей молекулой (такой как sdAb или полипептид по изобретению), и, в частности, антигенсвязывающим сайтом антигенсвязывающей молекулы. Термины «антигенная детерминанта» и «эпитоп» также могут использоваться взаимозаменяемо. Аминокислотная последовательность, которая может связываться с, которая имеет аффинность по отношению к и/или которая обладает специфичностью по отношению к специфической антигенной детерминанте, эпитопу, антигену или белку, называется, как «против» или «направлена против» антигенной детерминанты, эпитопа, антигена или белка.
[0021] Используемый в данном документе термин «содержать» и варианты термина, такие как «содержащий» и «содержит», не предназначены для исключения других добавок, компонентов, целых или стадий.
[0022] Предполагается, что описанные в данном документе sdAb, полипептиды и белки могут содержать так называемые «консервативные» аминокислотные замены, которые обычно могут быть описаны как аминокислотные замены, в которых аминокислотный остаток заменен другим аминокислотным остатком аналогичной химической структуры и которые мало или практически не влияют на функцию, активность или другие биологические свойства полипептида. Консервативные аминокислотные замены хорошо известны в данной области техники. Консервативные замены представляют собой замены, в которых одна аминокислота в следующих группах (а)-(е) замещена другой аминокислотой в пределах одной и той же группы: (а) малые алифатические, неполярные или слабополярные остатки: Ala, Ser, Thr, Pro и Gly; (b) полярные, отрицательно заряженные остатки и их (незаряженные) амиды: Asp, Asn, Glu и Gln; (с) полярные, положительно заряженные остатки: His, Arg и Lys; (d) большие алифатические, неполярные остатки: Met, Leu, Ile, Val и Cys; и (е) ароматические остатки: Phe, Tyr и Trp. Другие консервативные замены включают: Ala на Gly или на Ser; Arg на Lys; Asn на Gln или на His; Asp на Glu; Cys на Ser; Gln на Asn; Glu на Asp; Gly на Ala или на Pro; His на Asn или на Gln; Ile на Leu или на Val; Leu на Ilr или на Val; Lys на Arg, на Gln или на Glu; Met на Leu, на Tyr или на Ile; Phe на Met, на Leu или на Tyr; Ser на Thr; Thr на Ser; Trp на Tyr; Tyr на Trp; и/или Phe на Val, на Ile или на Leu.
[0023] Используемый в данном документе термин «домен» обычно относится к глобулярной области цепи антитела и, в частности, к глобулярной области антитела с тяжелой цепью или к полипептиду, который по существу состоит из такой глобулярной области.
[0024] Аминокислотная последовательность и структура sdAb обычно состоят из четырех каркасных областей или «FR», которые называются «каркасная область 1» или «FR1»; «каркасная область 2» или «FR2»; «каркасная область 3» или «FR3» и «каркасная область 4» или «FR4», соответственно. Каркасные области прерываются тремя определяющими комплементарность областями или «CDR», которые называются «область определения комплементарности 1» или «CDR1»; «область определения комплементарности 2» или «CDR2» и «область определения комплементарности 3» или «CDR3», соответственно.
[0025] Используемый в данном документе термин «гуманизированноe sdAb» означает sdAb, которое имеет один или более аминокислотных остатков в аминокислотной последовательности встречающейся в природе последовательности VHH, замененных одним или более аминокислотными остатками, которые встречаются в соответствующем положении в VH-домене обычного 4-цепного антитела человека. Это может быть выполнено способами, хорошо известными в данной области техники. Например, FR sdAbs могут быть заменены вариабельными FR человека.
[0026] Используемый в данном документе термин «выделенная» нуклеиновая кислота или аминокислота, означает что они были отделены от, по меньшей мере, одного другого компонента, с которым они обычно связаны, такого как их источник или среда, другая нуклеиновая кислота, другой белок/полипептид, другой биологический компонент или макромолекула, или загрязнитель, примесь или второстепенный компонент.
[0027] Термин «млекопитающее» определяется как индивидуум, принадлежащее к классу «Mammalia» (Млекопитающие), и включает, без ограничения, людей, домашних и сельскохозяйственных животных, а также вальерных, спортивных и домашних животных, таких как коровы, лошади, овцы, собаки и кошки.
[0028] Используемый в данном документе термин «фармацевтически приемлемый носитель» предназначен для включения любых и всех растворителей, дисперсионных сред, покрытий, антибактериальных и противогрибковых агентов, изотонических агентов и агентов, замедляющих абсорбцию, и т.п., совместимых с фармацевтическим введением. Подходящие носители описаны в последнем издании Remington'sPharmaceuticalSciences, стандартного справочного текста в данной области техники. Предпочтительные примеры таких носителей или разбавителей включают, но не ограничиваются ими, воду, физиологический раствор, растворы Рингера, раствор декстрозы, PBS (забуференный фосфатом физиологический раствор) и 5% человеческий сывороточный альбумин. Также могут быть использованы липосомы, катионные липиды и неводные носители, такие как нелетучие масла. Использование таких сред и агентов для фармацевтически активных веществ хорошо известно в данной области техники. За исключением того, что любые обычные среды или агент несовместимы с терапевтическим агентом, как определено выше, предполагается использование его в композиции по данному изобретению.
[0029] «Количественный иммунологический анализ» относится к любым средствам измерения количества антигена, присутствующего в образце, с использованием антитела. Методы для проведения количественного иммунологического анализа включает, без ограничения, фермент-связанный иммуносорбентный анализ (ИФА), анализ специфического мечения аналита и повторного захвата (SALRA), жидкостную хроматографию, масс-спектрометрию, сортировку клетокна проточномцитометре и тому подобное.
[0030] Термин «раствор» относится к композиции, содержащей растворитель и растворимое вещество, и включает настоящие растворы и суспензии. Примеры растворов включают твердые, жидкие или газообразные вещества, растворенные в жидкости, а также частицы или мицеллы, суспендированные в жидкости.
[0031] Термин «специфичность» относится к числу различных типов антигенов или антигенных детерминант, с которыми может связываться конкретная антигенсвязывающая молекула или антигенсвязывающая белковая молекула. Специфичность антигенсвязывающего белка может быть определена на основе аффинности и/или авидности. Аффинность, представленная константой равновесия для диссоциации антигена с антигенсвязывающего белка (KD), является мерой для силы связывания между антигенной детерминантой и антигенсвязывающим сайтом на антигенсвязывающем белке: чем меньше значение KD, тем сильнее сила связи между антигенной детерминантой и антигенсвязывающей молекулой (альтернативно, аффинность также может быть выражена как константа аффинности (KA), которая равна 1/KD). Как будет понятно специалисту в данной области техники, аффинность может быть определена в зависимости от конкретного представляющего интерес антигена. Авидность является мерой силы связывания между антигенсвязывающей молекулой и антигеном. Авидностьсвязана как с аффинностью между антигенной детерминантой и ее сайтом связывания антигена с антигенсвязывающей молекулой, так и с числом сайтов связывания, присутствующих на антигенсвязывающей молекуле. Специфическое связывание антигенсвязывающего белка с антигеном или антигенной детерминантой может быть определено любым известным способом, таким как, например, анализ Скатчарда и/или анализы конкурентного связывания, такие как радиоиммунологический анализ (RIA), иммуноферментный анализ (EIA) и сэндвич-конкурентный анализ.
[0032] Используемый в данном документе термин «рекомбинантный» относится к использованию методов генной инженерии (например, клонирования и амплификации), используемых для получения sdAb по изобретению.
[0033] «Однодоменное антитело», «sdAb» или «VHH» можно в целом определить, как полипептид или белок, содержащий аминокислотную последовательность, которая состоит из четырех каркасных областей, разделенных тремя определяющими комплементарность областями. Это представлено как FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4.SdAb по изобретению также включает полипептид или белок, который содержит аминокислотную последовательность sdAb. Как правило, sdAb продуцируются представителями семейства верблюдовые, такими как ламы, но также могут синтетически создаваться с использованием методик, которые хорошо известны в данной области техники. Используемые в данном документе, вариабельные домены, присутствующие во встречающейся в природе тяжелой цепи антител, также будут называться «доменами VHH», чтобы отличать их от вариабельных доменов тяжелой цепи, которые присутствуют в обычных 4-цепочечных антителах, называемых «VH» и от вариабельных доменов легкой цепи, которые присутствуют в обычных 4-цепочечных антителах, называемых «доменами VL». «VHH » и « sdAb» используются в данном документе взаимозаменяемо. Нумерация аминокислотных остатков sdAb или полипептида соответствует общей нумерации для доменов VH, Kabatetal. ("Sequence of proteins of immunological interest," US Public Health Services, NIH Bethesda, MD, Publication No. 91).Согласно этой нумерации, FR1 sdAb содержит аминокислотные остатки в положениях 1-30, CDR1 sdAb содержит аминокислотные остатки в положениях 31-36, FR2 sdAb содержит аминокислоты в положениях 36-49, CDR2 sdAb содержит аминокислотные остатки в положениях 50-65, FR3 sdAb содержит аминокислотные остатки в положениях 66-94, CDR3 sdAb содержит аминокислотные остатки в положениях 95-102, a FR4 sdAb содержит аминокислотные остатки в положениях 103-113.
[0034] Термин «синтетический» относится к получению путем химического или ферментативного синтеза in vitro.
[0035] Используемый в данном документе термин «мишень» относится к любому компоненту, антигену или фрагменту, который распознается sdAb. Термин «внутриклеточная мишень» относится к любому компоненту, антигену или фрагменту, присутствующему внутри клетки.«Трансмембранная мишень» представляет собой компонент, антиген или фрагмент, который находится внутри клеточной мембраны. «Внеклеточная мишень» относится к компоненту, антигену или фрагменту, который расположен снаружи клетки.
[0036] Используемая в данном документе «терапевтическая композиция» означает вещество, которое предназначено для терапевтического эффекта, такое как фармацевтические композиции, генетические материалы, биологические вещества и другие вещества. Генетические материалы включают вещества, предназначенные для прямого или косвенного генетического терапевтического эффекта, такие как генетические векторы, генетические регуляторные элементы, генетические структурные элементы, ДНК, РНК и тому подобное. Биологические вещества включают вещества, которые являются живым веществом или получены из живого вещества, предназначенные для терапевтического эффекта.
[0037] Используемые в данном документе фразы «терапевтически эффективное количество» и «профилактически эффективное количество» относятся к количеству, которое обеспечивает терапевтическое преимущество при лечении, профилактике или лечении заболевания или явного симптома заболевания. Терапевтически эффективное количество может лечить заболевание или патологическое состояние, симптом заболевания или предрасположенность к заболеванию с целью исцеления, лечения, смягчения, облегчения, изменения, исправления, улучшения или воздействия на болезнь, симптомы болезни или предрасположенности к болезни. Конкретное количество, которое является терапевтически эффективным, может быть легко определено практикующим врачом и может варьировать в зависимости от факторов, известных в данной области техники, таких как, например, тип заболевания, история и возраст пациента, стадия заболевания и введение других терапевтических агентов.
[0038] Данное изобретение относится к однодоменным антителам (sdAb), которые направлены против вирусных и внутриклеточных компонентов, а также белкам и полипептидам, содержащим sdAb и нуклеотидам, кодирующим белки и полипептиды. Изобретение также может относиться к sdAb, которые направлены против межклеточных, трансцеллюлярных и внеклеточных мишеней или антигенов. Изобретение также включает нуклеиновые кислоты, кодирующие sdAb, белки и полипептиды, и композиции, содержащие sdAb. Изобретение включает применение композиций, sdAb, белков или полипептидов для профилактических, терапевтических или диагностических целей.
[0039] SdAb имеют ряд уникальных структурных характеристик и функциональных свойств, которые делают sdAb очень выгодными для применения в качестве функциональных антигенсвязывающих доменов или белков. SdAb функционально связываются с антигеном в отсутствие вариабельного домена легкой цепи и могут функционировать как единая относительно небольшая функциональная антигенсвязывающая структурная единица, домен или белок. Это отличает sdAb от доменов обычных антител, которые сами по себе не функционируют как антигенсвязывающий белок или домен, и их необходимо объединить с обычными фрагментами антител, такими как антигенсвязывающие фрагменты (Fab) или одноцепочечные вариабельные фрагменты (ScFv) для связывания антигена.
[0040] SdAb можно получить с использованием способов, хорошо известных в данной области техники. Например, один способ получения sdAb включает (а) иммунизацию представителя семейства Верблюдовые одним или более антигенами, (b) выделение периферических лимфоцитов из иммунизированного представителя семейства Верблюдовые, получение тотальной РНК и синтез соответствующих комплементарных ДНК (кДНК), (с) конструирование библиотеки фрагментов кДНК, кодирующих домены VHH, (d) транскрибирование кДНК домена, кодирующего домен VHH, полученного на стадии (с) в матричную РНК (мРНК) с использованием ПНР, преобразованиемРНК в формат рибосомального дисплея, и выбор домена VHH с помощью рибосомального дисплея, и (е) экспрессию домена VHH в подходящем векторе и, необязательно, очистку экспрессированного домена VHH.
[0041] Другим способом получения sdAb по изобретению является получение нуклеиновой кислоты, кодирующей sdAb, с использованием методик синтеза нуклеиновых кислот с последующей экспрессией нуклеиновой кислоты in vivo или in vitro. Кроме того, sdAb, полипептиды и белки по изобретению могут быть получены с использованием синтетических или полусинтетических методик получения белков, полипептидов или других аминокислотных последовательностей.
[0042] SdAb по изобретению обычно связываются со всеми природными или синтетическими аналогами, вариантами, мутантами, аллелями, частями и фрагментами мишени или, по меньшей мере, с такими аналогами, вариантами, мутантами, аллелями, частями и фрагментами мишени, которые содержат одну или более антигенных детерминант или эпитопов, которые по существу являются такими же, как антигенная детерминанта или эпитоп, с которыми sdAb по изобретению связываются в мишени дикого типа. SdAb по изобретению могут связываться с такими аналогами, вариантами, мутантами, аллелями, частями и фрагментами с аффинностью и/или специфичностью, которые являются такими же или выше, или ниже, чем аффинность и специфичность, с которыми sdAb по изобретению связываются с мишенью дикого типа. В объем данного изобретения также предполагается, что sdAb по изобретению связываются с некоторыми аналогами, вариантами, мутантами, аллелями, частями и фрагментами мишени, но не с другими. Кроме того, sdAb по изобретению может быть гуманизированным и может быть моновалентным или многовалентным и/или мультиспецифичным. Кроме того, sdAb по изобретению могут связываться с фосфорилированной формой белка-мишени, а также с нефосфорилированной формой белка-мишени. sdAb могут быть связаны с другими молекулами, такими как альбумин или другие макромолекулы.
[0043] Кроме того, в объем изобретения входит то, что sdAb являются многовалентными, то есть sdAb может иметь два или более белка или полипептида, которые направлены против двух или более различных эпитопов мишени. В таком многовалентном sdAb белок или полипептид могут быть направлены, например, на те же эпитопы, по существу эквивалентные эпитопы или различные эпитопы. Различные эпитопы могут быть расположены на одной и той же цели или могут быть на двух или более разных мишенях.
[0044] Также предполагается, что последовательность одного или более sdAb по изобретению может быть соединена или объединена с одной или более линкерными последовательностями. Линкером может быть, например, белковая последовательность, содержащая комбинацию серинов, глицинов и аланинов.
[0045] В объем изобретения также входит применение частей, фрагментов, аналогов, мутантов, вариантов, аллелей и/или производных sdAb по изобретению, если они пригодны для описанных применений.
[0046] Поскольку sdAb по изобретению в основном предназначены для терапевтического и/или диагностического применения, они направлены против мишеней млекопитающих, предпочтительно человека. Однако возможно, что описанные в данном документе sdAb будут перекрестно-реактивными с мишенями других видов, например, мишенями из одного или более других видов приматов или других животных (например, мыши, крысы, кролика, свиньи или собаки), и, в частности, на животных моделях заболеваний и расстройств, ассоциированных с заболеванием, ассоциированным с мишенями.
[0047] В другом аспекте изобретение относится к нуклеиновой кислоте, которая кодирует sdAb по изобретению. Такая нуклеиновая кислота может быть, например, в виде генетической конструкции.
[0048] В другом аспекте изобретение относится к хозяину или клетке хозяину, которые экспрессируют или способны экспрессировать sdAb по изобретению и/или которые содержат нуклеиновую кислоту, кодирующую sdAb по изобретению. Последовательности sdAb могут быть использованы для вставки в геном любого организма для создания генетически модифицированного организма (ГМО). Примеры включают, но не ограничиваются ими, растения, бактерии, вирусы и животные.
[0049] Изобретение также относится к способам получения или создания sdAb, нуклеиновых кислот, кодирующих sdAb, клеток-хозяев, экспрессирующих или способных экспрессировать такие sdAb, продуктам и композициям, содержащим sdAb по изобретению.
[0050] Изобретение также относится к использованию и применению sdAb, нуклеиновых кислот, кодирующих sdAb, клеткам-хозяевам, продуктам и композициям, описанным в данном документе. Такой продукт или композиция может представлять собой, например, фармацевтическую композицию для лечения или профилактики заболевания, или продукт, или композицию для диагностического применения. SdAb можно применять в различных анализах, например, анализах ИФА и масс-спектрометрических анализах для измерения уровней sdAb в сыворотке и ткани.
[0051] В другом аспекте нуклеиновая кислота, кодирующая один или более sdAb по изобретению, может быть введена в геном организма для лечения или профилактики заболеваний.
[0052] Данное изобретение в целом относится к sdAb, а также к белкам или полипептидам, содержащим или по существу состоящим из одного или более таких sdAb, которые могут быть применены для профилактических, терапевтических и/или диагностических целей.
[0053] Способы и композиции, подробно описанные в данном изобретении, могут быть использованы для лечения заболеваний, описанных в данном документе, и могут быть использованы с любой дозировкой и/или рецептурой, описанными в данном документе или другими известными, а также с любым способом введения, описанным в данном документе или другим способом, известным специалисту в данной области техники.
[0054] SdAb по изобретению могут применяться для лечения и профилактики заболеваний, вызванных вирусами или аберрантными клеточными белками. SdAb по данному изобретению также можно применять для лечения и профилактики заболеваний. SdAb по изобретению можно применять для лечения заболеваний, при которых происходит сверхэкспрессия внутриклеточной молекулы. Они также могут быть применены для лечения вирусных инфекций путем нацеливания на внутриклеточные вирусные белки в инфицированных клетках. Блокирование продуцирования вирусных белков, таких как, например, обратная транскриптаза ВИЧ-1, может блокировать жизненный цикл вируса.
[0055] SdAb по изобретению могут также нацеливаться на внутриклеточные вирусные белки, такие как VP24 вируса Эбола и, таким образом, блокировать способность Эбола прекращать антивирусную иммунную реакцию хозяина.
[0056] SdAb по изобретению можно применять с одним или более соединениями. Например, sdAb по изобретению можно применять с ингибиторами JAK/STAT такими как, например, куркумин, ресвератрол, кукурбитацин А, В, Е, I, Q, флавопиридол, деокситетрангомицин, производные циклопентенона, N-ацилгомосерин лактон, производные индирубина, мейзоиндиго, тирфостины, платиносодержащими соединениями (например, IS3-295), пептидомиметиками, антисмысловымиолигонуклеотидами, S3I-201, производными фосфотирозиновыхтрипептидов, ингибиторами протеазы ВИЧ (например, нелфинавир, индинавир, саквинавир и риторнавир), JSI-124, XpYL, Ac-pYLPQTV-NH2, ISS 610, CJ-1383, пириметамином, метформином, атипримодом, S3I-M2001, STX-0119; производным N-[2-(1,3,4-оксадиазолил)]-4 хинолинкарбоксамида, S3I-1757, LY5; 5,8-диоксо-6(пиридин-3-иламино)-5,8,-дигидро-нафтален-1-сульфонамидом, витацинстином, статиком, STA-21, LLL-3, LLL12, XZH-5, SF-1066, SF-1087, 17о, криптотанзиноном, FLL32, FLL62, С188-9, BP-1108 и BP-1075, галиеллактоном, JQ1, 5, 15 DPP, WP1066, никлозамидом, SD1008, нифуроксазидом, криптотанзиноном, BBI хиноном и руксолитиниб фосфатом. Одно или более соединений могут увеличивать терапевтический ответ и повысить эффективность sdAb по изобретению. Кроме того, эффективность sdAb может быть увеличена путем объединения их с пептидами, пептидомиметиками и другими лекарственными средствами, такими как, например, циметидин, аторвастатин, целекоксиб, метформин и циметидин, но не ограничиваясь ими.
[0057] Также предполагается, что один или более sdAb по изобретению могут быть объединены или sdAb по изобретению могут быть объединены с другими sdAb.
[0058] Предполагается, что некоторые sdAb по изобретению могут проникать через клеточную мембрану и проникать в клетку без помощи дополнительных нацеливающих белковых последовательностей на sdAb и без помощи экзогенных соединений, которые направляют sdAb на связывание с рецепторами клеточной поверхности и пересечение клеточной мембраны.
[0059] После проникновения через клеточную мембрану эти sdAb могут быть нацелены на трансмембранные или внутриклеточные молекулы, или антигены. Этими мишенями могут быть, например, белки, углеводы, липиды, нуклеиновые кислоты, мутированные белки, вирусные белки и прионы. Мишени sdAb могут функционировать как ферменты, структурные белки клетки, внутриклеточные части молекул клеточной мембраны, молекулы в мембранах органелл, любые типы молекул РНК, любые области ДНК или хромосомы, метилированные или неметилированные нуклеиновые кислоты, частично собранные молекулы в рамках механизма синтеза клетки, вторичные молекулы-мессенджеры и молекулы в механизмах сигналинга клеток. Мишени могут включать все молекулы в цитоплазме, ядре, органеллах и клеточной мембране. Молекулы, предназначенные для секреции или размещения в клеточной мембране, могут быть подвержены нацеливанию в цитоплазме перед выходом из клетки.
[0060] Мишени sdAb могут быть у людей, животных, растений, грибов, паразитов, протестов, бактерий, вирусов, прионов, прокариотических клеток и эукариотических клеток. Некоторые примеры межклеточных и внутриклеточных сигнальных молекул и белковых групп, на которые могут быть нацелены sdAb по изобретению, представляют собой: онкогенные продукты, гормоны, цитокины, факторы роста, нейромедиаторы, киназы (включая тирозинкиназу, серинкиназу и треонинкиназу), фосфатазы, убиквитин, циклические нуклеотиды, циклазы (аденилил и гуанилил), G белки, фосфодиэстеразы, суперсемействоГТФаз, иммуноглобулины (антитела, фрагменты Fab, связывающие домены, sdAb), суперсемейство иммуноглобулинов, инозитолфосфатные липиды, стероидные рецепторы, кальмодулин, группа CD (например, CD4, CD8, CD28, и т.д.), транскрипционные факторы, TGF-бета, ФНО-альфа и бета, суперсемействолигандов TNF, сигнальные молекулы рецептора notch, сигнальные молекулы рецептора hedgehog, сигнальные молекулы рецептора Wnt, сигнальные молекулы toll-подобного рецептора, каспазы, актин, миозин, миостатин, 12-липоксигеназа, 15-липоксигеназа, суперсемействолипоксигеназ, обратная транскриптаза, вирусы и их белки, амилоидные белки, коллаген, G-белковые рецепторы, мутированные нормальные белки, прионы, Ras, Raf, Мус, Src, BCR/ABL, MEK, Erk, Mos, Tpl2, MLK3, TAK, DLK, MKK, р38, MAPK, MEKK, ASK, SAPK, JNK, BMK, MAP, JAK, PI3K, циклооксигеназы, STAT1, STAT2, STAT3, STAT4, STAT5a, STAT5b, STAT6, Мус, р53, BRAF, NRAS, KRAS, HRAS и хемокины.
[0061] ВИЧ представляет собой ретровирус, который вызывает синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД) у людей. СПИД приводит к прогрессивному отказу иммунной системы инфицированного человека, что приводит к развитию угрожающих жизни оппортунистических инфекций и рака. Среднее время выживания после заражения ВИЧ оценивается в 9-11 лет без лечения
[0062] ВИЧ передается как одноцепочечный, положительно направленный, РНК-вирус с липидной мембраной. При входе в клетку-мишень вирусный РНК-геном подвергается обратной транскрипции в двухцепочечную ДНК с помощью кодированной вирусом обратной транскриптазы (ОТ), которая переносится вместе с вирусным геномом в вирусной частице. ОТ представляет собой РНК-зависимую ДНК-полимеразу, а также имеет активность рибонуклеазы Н. Полученная вирусная ДНК затем импортируется в ядро клетки-хозяина и интегрируется в клеточную ДНК с помощью кодированных вирусом интеграз и ко-факторов хозяина. После интегрирования вирус может стать скрытым в течение нескольких месяцев или лет. Альтернативно, вирус можно транскрибироваться, продуцируя новые РНК-геномы и вирусные белки, которые упаковываются и высвобождаются из клетки в виде новых вирусных частиц.
[0063] Описаны два типа ВИЧ: ВИЧ-1 и ВИЧ-2. ВИЧ-1 более вирулентен, более патогенный и является причиной большинства ВИЧ-инфекций во всем мире. ВИЧ-2 в основном ограничивается Западной Африкой.
[0064] sdAbк ОТ ВИЧ были разработаны для нацеливания на обратную транскриптазу ВИЧ-1. sdAbк ОТ ВИЧ-1 может успешно лечить людей, инфицированных ВИЧ, самостоятельно или в сочетании с другими ретровирусными агентами. Используя известные в данной области техники способы рекомбинантный белок обратной транскриптазы ВИЧ-1 (CreativeBiomart, Ширли, штат Нью-Йорк) (SEQ ID NO: 1) использовали для получения sdAb, которые нацелены против или могут связываться с эпитопом ОТ ВИЧ -1.
[0065] Белковая последовательность, используемая для иммунизации верблюда рекомбинантным белком обратной транскриптазы ВИЧ-1 (SEQ ID NO: 1), представляла собой
[0066] В результате иммунизации было получено и скринировано несколько sdAb. Последовательности ДНК sdAbк OT ВИЧ-1 приведены ниже:
[0090] Аминокислотные последовательности sdAbк OT ВИЧ-1 представлены ниже:
[0095] ВИЧ 1 -27 (SEQ ID NO: 29):
[0102] ВИЧ1-11 (SEQ ID NO: 36):
[0103] ВИЧ1-13 (SEQ ID NO: 37):
[0104] ВИЧ1-23 (SEQ ID NO: 38):
[0105] ВИЧ1-24 (SEQ ID NO: 39):
[0106] ВИЧ1-25 (SEQ ID NO: 40):
[0107] ВИЧ1-31 (SEQ ID NO: 41):
[0108] ВИЧ1-38 (SEQ ID NO: 42):
[0109] ВИЧ1-39 (SEQ ID NO: 43):
[0110] Одно или более мышиных моноклональных антител могут быть получены против одного или более доменов sdAbк ОТ ВИЧ-1 по изобретению. Мышиное моноклональное антитело может быть получено способами, которые известны специалисту в данной области техники, например, мышиное моноклональное антитело может быть получено при помощи мышиной гибридомы. Мышиное моноклональное антитело можно использовать в диагностических анализах, например, антитело можно использовать в иммунологическом анализе, таком как анализ ИФА или масс-спектрометрии, чтобы измерить количество sdAbк OT ВИЧ-1, присутствующего в образце от пациента.
[0111] SdAb также создавали против рекомбинантной арахидонат-12-липоксигеназы (ALOX12). ALOX12 также известен как 12-липоксигеназа тромбоцитарного типа, арахидонатжислород-12-оксидоредуктаза, дельта 12-липоксигеназа, 12-дельта-липоксигеназа, С-12-липоксигеназа, синтазалейкотриена А4 и синтаза LTA4. ALOX12 представляет собой фермент липоксигеназы, который участвует в метаболизме арахидоновой кислоты. ALOX12 участвует в развитии и осложнениях индуцированного диетой и/или генетически индуцированного диабета, дисфункции жировых клеток/ткани и ожирения. Считалось, что ALOX12 регулирует сокращение сосудов, расширение, давление, ремоделирование и ангиогенез. Ингибирование ALOX12 предотвращает развитие образования кровеносных сосудов и, таким образом, ALOX12 является мишенью для снижения неоваскуляризации, которая способствует атеросклерозу, стеатогепатиту и другим артритам и раковым заболеваниям. Повышенные количества ALOX12 могут способствовать развитию болезни Альцгеймера.
[0112] В данном изобретении представлены sdAb, белки и полипептиды, которые направлены против белка ALOX12.
[0113] Предполагается, что sdAbк ALOX12 и полипептиды по изобретению могут быть применены для профилактики и/или лечения заболеваний и расстройств, связанных с ALOX12 и/или опосредованных ими, таких как диабет, дисфункция жировых клеток, ожирение, атеросклероз, стеатогепатит, артрит и рак.
[0114] Рекомбинантный белок ALOX12 человека использовали для получения sdAb, которые направлены против или могут связываться с эпитопом АLОХ12. Для получения sdAbк ALOX12 рекомбинантный ALOX12 человека экспрессировали в Escherichiacoli и использовали в качестве целевого антигена.
[0115] Последовательность рекомбинантного белка ALOX12 (SEQ ID NO: 44), используемая для иммунизации верблюдов, представляла собой:
[0116] В результате иммунизации было получено и скринировано несколько sdAb. Последовательности ДНК sdAb приведены ниже:
[0121] Белковые последовательности созданных sdAbk ALOX являются следующими:
[0126] Одно или более мышиных моноклональных антител могут быть получены против одного или более доменов sdAbк ALOX12 по изобретению. Мышиное моноклональное антитело может быть получено способами, которые известны специалисту в данной области техники, например, мышиное моноклональное антитело может быть получено при помощи мышиной гибридомы. Мышиное моноклональное антитело можно использовать в диагностических анализах, например, антитело можно использовать в иммунологическом анализе, таком как анализ ИФА или масс-спектрометрии, чтобы измерить количество sdAbк ALOX12, присутствующего в образце от пациента.
[0127] Эбола, также известная как вирусная болезнь Эбола (EVD) и геморрагическая лихорадка Эбола (EHF), представляет собой вирусную геморрагическую лихорадку людей и других приматов, вызванную эболавирусом. Болезнь имеет высокий риск смерти, убивая от 25 до 90 процентов инфицированных, обычно через шесть-шестнадцать дней после появления симптомов.
[0128] Эбола препятствует правильному функционированию врожденной иммунной системы инфицированного человека. Белки Эбола ослабляют реакцию иммунной системы на вирусные инфекции, препятствуя способности клеток продуцировать и реагировать на белки-интерфероны, такие как интерферон-альфа, интерферон-бета и интерферон-гамма. Структурные белки Эбола, VP24 и VP35, играют ключевую роль в этом вмешательстве.
Белок V24 блокирует продуцирование антивирусных белков клеткой-хозяином. Ингибируя иммунные реакции хозяина, Эбола быстро распространяется по всему телу.
[0129] Как описано в данном документе, sdAbк VP24 были разработаны для нацеливания на белок VP24 Эбола. sdAbк VP24 может успешно лечить людей, инфицированных болезнью Эбола, самостоятельно или в сочетании с другими ретровирусными агентами. Способы, хорошо известные в данной области техники, использовали рекомбинантный белок VP24 (SEQ ID NO: 53) для получения sdAb, которые направлены против эпитопа VP24 или могут связываться с ним.
[0130] Последовательность рекомбинантного белка VP24 (SEQ ID NO: 53), используемая для иммунизации верблюда, представляла собой:
[0131] В результате иммунизации был получен один sdAbк VP24-VP24_5, и подвергся скринингу для связывания с VP24. Последовательность ДНК VP24_5 (SEQ ID NO: 54) представляет собой:
[0132] Ниже продемонстрирована аминокислотная последовательность sdAb VP24_5 (SEQ ID NO: 55), в которой подчеркнуты CDR:
[0133] Одно или более мышиных моноклональных антител могут быть получены против одного или более доменов sdAbк VP24 по изобретению. Мышиное моноклональное антитело может быть получено способами, которые известны специалисту в данной области техники, например, мышиное моноклональное антитело может быть получено при помощи мышиной гибридомы. Мышиное моноклональное антитело можно использовать в диагностических анализах, например, антитело можно использовать в иммунологическом анализе, таком как анализ ИФА или масс-спектрометрии, чтобы измерить количество sdAbк VP24, присутствующего в образце от пациента.
ПРИМЕРЫ
ПРИМЕР 1: СОЗДАНИЕ SDAB
[0134] SdAb получали от верблюда, который был иммунизирован несколькими белками, включая ALOX12 (SEQ ID NO: 44), VP24 (SEQ ID NO: 53) и обратную транскриптазу ВИЧ-1 (SEQ ID NO: 1).
[0135] Используя стандартные методики, библиотека фагового дисплея была построена с использованием вектора pCDisplay-3M (CreativeBiogene, Ширли, штат Нью-Йорк) и вспомогательный фаг M13K07 (NewEnglandBiolabs, Ипсвич, штат Массачусетс). Одиночные клоны sdAb подтверждали с помощью ИФА, а последовательности ДНК и белка определяли с использованием стандартных методов.
ПРИМЕР 2: ВИЧ1-9 (SEQ ID NO: 27) SDAB СВЯЗЫВАЕТ ОБРАТНУЮ ТРАНСКРИПТАЗУ ВИЧ-1 И VP-24 ЭБОЛЫ
[0136] Эксперименты по связыванию с белками проводили на Biacore 3000 (GeneralElectricCompany, Фейрфилд, штат Коннектикут) при 25°C. Буфер для анализа содержал 10 мМ буфера HEPES (рН 7,4), 150 MMNaCl, 3 мМ ЭДТА, 0,05% Р20. Буфер регенерации содержал 10 мМ глицина HCl, рН 1,75, а иммобилизационный буфер содержал 10 мМ ацетата натрия, рН 5,0. Скорость потока, используемая для захвата лиганда, составляла 5 мкл/мин. Скорость потока, используемая для анализа кинетики, составляла 30 мкл/мин.
[0137] Лиганды, используемые для эксперимента по связыванию белка, представляли собой ВИЧ1-9 (SEQ ID NO: 27) и STAT3-VHH 14 (SEQ ID NO: 56). Лиганды были непосредственно иммобилизованы аминным связыванием (EDC/NHS) в единицах ответа (RU) 1200 и 550 на проточной ячейке 2 и 4, соответственно, сенсорного чипа СМ5. Проточная ячейка 1 оставалась пустой и использовалась для вычитания фона. Незанятые сайты на чипе СМ5 были блокированы 1 М этаноламином. Для анализа связывания аналит rВИЧ-1 (SEQ ID NO: 1) пропускали через сенсорный чип. Связывание аналита с лигандом контролировалось в реальном времени. Константу аффинности (Kd=kd/ka) рассчитывали по наблюдаемой скорости «on» (ka) скорости «off» (kd), как представлено в таблице 1.
[0138] Отрицательным контролем экспериментов по связыванию белка представлял собой sdAbK STAT3 - VHH 14 (SEQ ID NO: 56):
[0139] Анализ хи-квадрат (χ2) был проведена между фактической сенсограммой и сенсограммой, генерируемой программным обеспечением BIAnalysis, для определения точности анализа. Значение χ2 в пределах 1-2 считается точным, а ниже 1 считается очень точным.
[0140] Полный кинетический анализ проводили при концентрациях аналита, как указано в таблице 2, с 2-х кратным серийным разведением максимальной концентрации аналита. sdAbк ОТ ВИЧ1-9 связывали как аналиты ВИЧ-1, так и VP24 вируса Эбола.
ПРИМЕР 3: ВИЧ1-9 (SEQ ID NO: 27) SDAB СВЯЗЫВАЕТ ОБРАТНУЮ ТРАНСКРИПТАЗУ ВИЧ-1 ВИФА
[0141] Два различных образца ВИЧ1-9 sdAbк ОТ ВИЧ-1 (SEQ ID NO: 27) оценивали в концентрации 1 мкг/мл по схеме шахматной доски кконцентраций покрывающего антигена, антитела 2° и HRP (пероксидаза хрена) в ИФА. Покрывающий антиген представлял собой рекомбинантную ОТ ВИЧ-1 (CreativeBioMart) (SEQ ID NO: 1) в концентрации 0,5, 0,025 и 0,125 мкг/мл на лунку. Вторичные антитела представляли собой биотинилированные кроличьи анти-ламовые антитела, разведенные 1:5000 и 1:10000, HRP, разведенная в соотношении 1:25000 и 1:50000. Отношение сигнал-шум > 20 были замечены с несколькими концентрациями. Результаты ИФА представлены на фиг. 1 и 2.
[0142] Три комбинации были выбраны для оценки серии разведений ВИЧ 1-9 sdAbк ОТ ВИЧ-1 (SEQ ID NO: 27) (1 мкг/мл к 0,0001 мкг/мл).
[0143] Результаты представлены на фиг. 3 и 4. Используемые два препарата ВИЧ 1-9 sdAbк OT ВИЧ-1 (SEQ ID NO: 27) имели очень сходные результаты. Результаты с 0,5 мкг/мл покрывающего буфера, антитела 2° в разведении 1:5000 и HRP в разведении 1:50000 продемонстрировали связывание ВИЧ1-9 sdAbк OT ВИЧ-1 (SEQ ID NO: 27) с ОТ ВИЧ-1 (SEQ ID NO: 1) с наибольшим отношением сигнал-шум и немного меньшим значением для холостой пробы.
ПРИМЕР 4: SDAB VP24-5 (SEQ ID NO: 55) СВЯЗЫВАЕТ VP24
[0144] Эксперименты по связыванию с белками выполняли, как описано в примере 2. Лиганды, используемые для связывания белка, представляли собой VP24-5 (SEQ ID NO: 55) и STAT3-VHH 14 (SEQ ID NO: 56).Лиганды были непосредственно иммобилизованы аминным связыванием (EDC/NHS) в единицах ответа (RU) 427 и 550 на проточной ячейке 2 и 4, соответственно, сенсорного чипа СМ5. Проточная ячейка 1 оставалась пустой и использовалась для вычитания фона. Незанятые сайты на чипе СМ5 были блокированы 1 М этаноламином. Для анализа связывания аналиты VP24 (SEQ ID NO: 53) пропускали через сенсорный чип и наблюдали в реальном времени. Константу аффинности (Ko=kd/ka) рассчитывали по наблюдаемой скорости «on» (ka) скорости «off» (kd), как представлено в таблице 3.
[0145] Полный кинетический анализ проводили при различных концентрациях аналита, с 2-х кратным серийным разведением максимальной концентрации аналита, как представлено в таблице 4.
ПРИМЕР 5: SDAB VP24-5 (SEQ ID NO: 55) СВЯЗЫВАЕТ VP24 МИШЕНЬВИРУСАЭБОЛАВИФА
[0146] Два различных образца VP24-5 sdAbк VP24 вируса Эбола (SEQ ID NO: 55) оценивали в концентрации 1 мкг/мл по схеме шахматной доски концентраций покрывающего антигена, антитела 2° и HRP (пероксидаза хрена) в ИФА. Покрывающий антиген представлял собой рекомбинантный VP24 вируса Эбола (CreativeBioMart) (SEQ ID NO: 53) в концентрации 0,5, 0,025 и 0,125 мкг/мл на лунку. Вторичные антитела представляли собой биотинилированные кроличьи анти-ламовые антитела, разведенные 1:5000 и 1:10000. HRP использовали в разбавлении 1:10000 и 1:25000. Результаты ИФА представлены на фиг. 5 и 6. Отношение сигнал-шум было низким, и анализ повторяли с более высокими концентрациями.
[0147] АнализИФАповторялис 1 и 0,5 мкг/мл VP24-5 sdAbк VP24 вирусаЭбола (SEQ ID NO: 55). Рекомбинантный VP24 (SEQ ID NO: 53) использовали в концентрации 0,5 или 1 мкг/мл на лунку. Вторичные антитела представляли собой биотинилированные кроличьи анти-ламовые антитела, разведенные 1:1000, 1:4000, 1:10000 и 1:10000. HRP использовали в разбавлении 1:25000 и 1:50000. Результаты ИФА представлены на фиг. 7 и 8.
[0148] Три комбинации были выбраны для оценки серии разведений VP24-5 sdAbк VP24 вируса Эбола (SEQ ID NO: 55) (1 мкг/мл к 0,0001 мкг/мл).
[0149] Результаты представлены на фиг. 9 и 10. Два использованных препарата VP24-5 sdAb против VP24 вируса Эбола (SEQ ID NO: 55) имели очень похожие результаты и продемонстрировали связывание VP24-5 sdAbк VP24 вируса Эбола (SEQ ID NO: 55) с рекомбинантный VP24 (SEQ ID NO: 53).
[0150] Хотя данное изобретение было подробно описано со ссылкой на некоторые предпочтительные варианты осуществления, возможны другие варианты осуществления. Стадии, раскрытые для данных способов, например, не предназначены для ограничения, и они не предназначены для указания того, что каждый шаг является необходимым для данного способа, но вместо этого являются только примерными шагами. Следовательно, объем прилагаемой формулы изобретения не должен ограничиваться описанием предпочтительных вариантов осуществления, содержащихся в данном раскрытии. Все цитируемые в данном документе ссылки включены в качестве ссылок в полном объеме.
Claims (20)
1. Однодоменное антитело sdAb к обратной транскриптазе вируса иммунодефицита человека типа 1, способное специфически связываться с антигеном вируса иммунодефицита человека типа 1, содержащее аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 27.
2. Применение однодоменного антитела sdAb по п.1 для лечения вируса иммунодефицита человека типа 1, включающее введение эффективного количества sdAb субъекту, нуждающемуся в этом.
3. Применение по п.2, отличающееся тем, что субъектом является млекопитающее.
4. Применение по п.3, отличающееся тем, что млекопитающим является человек.
5. Применение по п.2, отличающееся тем, что однодоменное антитело sdAb вводят в комбинации с одним или более соединениями.
6. Применение по п.5, отличающееся тем, что одно или более соединений представляет собой ингибитор протеазы.
7. Применение по п.2, отличающееся тем, что введение эффективного количества однодоменного антитела sdAb субъекту, нуждающемуся в этом, включает внутривенное введение, внутримышечное введение, пероральное введение, ректальное введение, энтеральное введение, парентеральное введение, внутриглазное введение, подкожное введение, трансдермальное введение, введение в виде глазных капель, введение в виде назального спрея, введение путем ингаляции или распыления, местное введение и введение в качестве имплантируемого лекарственного средства.
8. Применение однодоменного антитела sdAb по п.1 для предотвращения развития вируса иммунодефицита человека типа 1, включающее введение эффективного количества sdAb субъекту, нуждающемуся в этом.
9. Применение по п.8, отличающееся тем, что субъектом является млекопитающее.
10. Применение по п.9, отличающееся тем, что млекопитающим является человек.
11. Применение по п.8, отличающееся тем, что однодоменное антитело sdAb вводят в комбинации с одним или более соединениями.
12. Применение по п.11, отличающееся тем, что одно или более соединений представляет собой ингибитор протеазы.
13. Применение по п.8, отличающееся тем, что введение эффективного количества однодоменного антитела sdAb субъекту, нуждающемуся в этом, включает внутривенное введение, внутримышечное введение, пероральное введение, ректальное введение, энтеральное введение, парентеральное введение, внутриглазное введение, подкожное введение, трансдермальное введение, введение в виде глазных капель, введение в виде назального спрея, введение путем ингаляции или распыления, местное введение и введение в качестве имплантируемого лекарственного средства.
14. Применение однодоменного антитела sdAb по п.1 для предотвращения рецидива вируса иммунодефицита человека типа 1, включающее введение эффективного количества sdAb субъекту, нуждающемуся в этом.
15. Применение по п.14, отличающееся тем, что субъектом является млекопитающее.
16. Применение по п.15, отличающееся тем, что млекопитающим является человек.
17. Применение по п.14, отличающееся тем, что однодоменное антитело sdAb вводят в комбинации с одним или более соединениями.
18. Применение по п.17, отличающееся тем, что одно или более соединений представляет собой ингибитор протеазы.
19. Применение по п.14, отличающееся тем, что введение эффективного количества однодоменного антитела sdAb субъекту, нуждающемуся в этом, включает внутривенное введение, внутримышечное введение, пероральное введение, ректальное введение, энтеральное введение, парентеральное введение, внутриглазное введение, подкожное введение, трансдермальное введение, введение в виде глазных капель, введение в виде назального спрея, введение путем ингаляции или распыления, местное введение и введение в качестве имплантируемого лекарственного средства.
20. Выделенный полипептид, способный специфически связываться с антигеном обратной транскриптазы вируса иммунодефицита человека типа 1, содержащий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 27.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201562249868P | 2015-11-02 | 2015-11-02 | |
US62/249,868 | 2015-11-02 | ||
PCT/US2016/060134 WO2017079314A2 (en) | 2015-11-02 | 2016-11-02 | Single domain antibodies directed against intracellular antigens |
Related Child Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019126152A Division RU2742247C2 (ru) | 2015-11-02 | 2016-11-02 | Однодоменные антитела, направленные против внутриклеточных антигенов |
RU2019126220A Division RU2742248C2 (ru) | 2015-11-02 | 2016-11-02 | Однодоменные антитела, направленные против внутриклеточных антигенов |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2018120245A RU2018120245A (ru) | 2019-12-02 |
RU2018120245A3 RU2018120245A3 (ru) | 2020-05-13 |
RU2741110C2 true RU2741110C2 (ru) | 2021-01-22 |
Family
ID=58634379
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018120245A RU2741110C2 (ru) | 2015-11-02 | 2016-11-02 | Однодоменные антитела, направленные против внутриклеточных антигенов |
RU2019126152A RU2742247C2 (ru) | 2015-11-02 | 2016-11-02 | Однодоменные антитела, направленные против внутриклеточных антигенов |
RU2019126220A RU2742248C2 (ru) | 2015-11-02 | 2016-11-02 | Однодоменные антитела, направленные против внутриклеточных антигенов |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019126152A RU2742247C2 (ru) | 2015-11-02 | 2016-11-02 | Однодоменные антитела, направленные против внутриклеточных антигенов |
RU2019126220A RU2742248C2 (ru) | 2015-11-02 | 2016-11-02 | Однодоменные антитела, направленные против внутриклеточных антигенов |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US10195277B2 (ru) |
EP (1) | EP3371215A4 (ru) |
JP (2) | JP6918005B2 (ru) |
KR (1) | KR20180069064A (ru) |
CN (2) | CN113512112A (ru) |
AR (1) | AR106556A1 (ru) |
AU (1) | AU2016349876B2 (ru) |
BR (1) | BR112018008840B1 (ru) |
CA (1) | CA3002239A1 (ru) |
IL (1) | IL258742B (ru) |
MX (1) | MX2018005154A (ru) |
RU (3) | RU2741110C2 (ru) |
TW (1) | TWI746473B (ru) |
WO (1) | WO2017079314A2 (ru) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20170267784A1 (en) | 2014-10-23 | 2017-09-21 | Singh Molecular Medicine, Llc | Single domain antibodies directed against intracellular antigens |
EP3916014A4 (en) * | 2019-07-24 | 2022-10-26 | Korea Basic Science Institute | SINGLE DOMAIN ANTIBODIES TARGETED AGAINST AVSS3 INTEGRIN |
CN111234019B (zh) * | 2020-01-16 | 2022-06-24 | 佛山汉腾生物科技有限公司 | 抗ctla-4纳米抗体、药物组合物及其应用 |
CN111184864B (zh) * | 2020-01-20 | 2022-01-14 | 武汉大学 | Alox12特异性抑制剂在制备治疗非酒精性脂肪肝病和/或ⅱ型糖尿病的药物中的应用 |
CN113214392B (zh) * | 2020-12-30 | 2022-07-01 | 中国人民解放军海军军医大学 | 抗水母毒素纳米抗体ky031、制备方法及用途 |
CN115414482A (zh) * | 2022-07-13 | 2022-12-02 | 同济大学 | Stat3信号通路抑制剂的应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1991005066A1 (en) * | 1989-10-05 | 1991-04-18 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, U.S. Department Of Commerce | Monoclonal antibodies to segments of hiv-1 reverse transcriptase |
RU2352579C2 (ru) * | 2004-08-06 | 2009-04-20 | Био-Рад Пастер | Модифицированные пептиды вич-1 и их применение для обнаружения антител против вич |
WO2012175741A2 (en) * | 2011-06-23 | 2012-12-27 | Ablynx Nv | Techniques for predicting, detecting and reducing aspecific protein interference in assays involving immunoglobulin single variable domains |
Family Cites Families (53)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5004697A (en) | 1987-08-17 | 1991-04-02 | Univ. Of Ca | Cationized antibodies for delivery through the blood-brain barrier |
DE69334095T2 (de) | 1992-07-17 | 2007-04-12 | Dana-Farber Cancer Institute, Boston | Verfahren zur intrazellulären Bindung von zielgerichteten Molekülen |
FR2706486B1 (fr) | 1993-06-16 | 1995-09-01 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Séquences nucléiques, vecteurs les contenant, compositions pharmaceutiques et utilisations thérapeutiques. |
US5645836A (en) * | 1995-04-14 | 1997-07-08 | Research Development Foundation | Anti-AIDS immunotoxins |
JP2003531570A (ja) | 1999-07-27 | 2003-10-28 | アブジェニックス インク. | 神経障害に関連したポリペプチド蓄積を阻害する方法および組成物 |
AU7089600A (en) * | 1999-08-30 | 2001-03-26 | U.S. Army Medical Research Institute Of Infectious Diseases | Monoclonal antibodies and vaccines against epitopes on the ebola virus glycoprotein |
CN1184484C (zh) | 1999-12-20 | 2005-01-12 | 恩益禧电子股份有限公司 | 用来精确测量阻抗的装置及方法 |
DE10019157A1 (de) | 2000-04-18 | 2001-11-15 | Stefan Duebel | Verfahren zum Einbringen von Liganden in lebende Zellen |
US7943129B2 (en) | 2000-05-26 | 2011-05-17 | National Research Council Of Canada | Single-domain brain-targeting antibody fragments derived from llama antibodies |
US20020155127A1 (en) * | 2000-06-02 | 2002-10-24 | Danher Wang | Genetic vaccine against human immunodeficiency virus |
US20040052762A1 (en) | 2001-09-10 | 2004-03-18 | Hua Yu | Stat3 agonists and antagonists and therapeutic uses thereof |
JP2002253239A (ja) * | 2001-02-27 | 2002-09-10 | Jo Chiba | ヒト免疫不全ウイルスの逆転写酵素の活性を阻害するポリペプチドをコードする遺伝子およびその利用 |
RU2186106C1 (ru) * | 2001-03-29 | 2002-07-27 | Вирусологический центр Научно-исследовательского института микробиологии | Штамм гибридных клеток э4/n-6g5 животных mus musculus l., продуцирующих моноклональные антитела к вирусу эбола |
US7371849B2 (en) * | 2001-09-13 | 2008-05-13 | Institute For Antibodies Co., Ltd. | Methods of constructing camel antibody libraries |
WO2003055527A2 (en) * | 2002-01-03 | 2003-07-10 | Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw | Immunoconjugates useful for treatment of tumours |
GB0226727D0 (en) | 2002-11-15 | 2002-12-24 | Medical Res Council | Intrabodies |
AU2003219277A1 (en) | 2002-03-14 | 2003-09-29 | Medical Research Council | Intracellular antibodies |
WO2003086276A2 (en) * | 2002-04-05 | 2003-10-23 | Selective Genetics, Inc. | Compositions and methods for portal specific gene delivery and treatment of infection |
US20060034845A1 (en) | 2002-11-08 | 2006-02-16 | Karen Silence | Single domain antibodies directed against tumor necrosis factor alpha and uses therefor |
RU2455312C2 (ru) * | 2002-11-08 | 2012-07-10 | Аблинкс Н.В. | Однодоменные антитела, направленные против фактора некроза опухолей альфа, и их применение |
AU2003286003B2 (en) | 2002-11-08 | 2011-05-26 | Ablynx N.V. | Stabilized single domain antibodies |
WO2004041865A2 (en) | 2002-11-08 | 2004-05-21 | Ablynx N.V. | Stabilized single domain antibodies |
GB0226729D0 (en) | 2002-11-15 | 2002-12-24 | Medical Res Council | Intracellular antibodies |
US7638122B2 (en) | 2003-03-07 | 2009-12-29 | University Of South Florida | Stat3 antagonists and their use as vaccines against cancer |
JP2004315394A (ja) * | 2003-04-14 | 2004-11-11 | Japan Science & Technology Agency | レストンエボラウイルスに対するモノクローナル抗体及びこれを用いたレストンエボラウイルスの検出方法 |
WO2005009224A2 (en) * | 2003-07-24 | 2005-02-03 | The Curators Of The University Of Missouri | Methods and compositions for evaluation and modulations of fertility |
WO2005052002A2 (en) | 2003-11-20 | 2005-06-09 | Massachusetts Institute Of Technology | Single-domain antibodies and uses thereof |
US20060147997A1 (en) * | 2004-11-30 | 2006-07-06 | Virosys Pharmaceuticals, Inc. | PenetraBodies: receptor-mediated targeted delivery of functionally-active human antibody fragments into cytosol for the treatment of chronic infections and diseases |
CN103254309B (zh) | 2005-05-18 | 2017-09-26 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 针对肿瘤坏死因子α的改进的纳米体TM |
DE102005023617A1 (de) | 2005-05-21 | 2006-11-23 | Aspre Ag | Verfahren zum Mischen von Farben in einem Display |
US20100143371A1 (en) | 2006-10-31 | 2010-06-10 | Zhenping Zhu | Intrabodies |
US20100166734A1 (en) * | 2006-12-20 | 2010-07-01 | Edward Dolk | Oral delivery of polypeptides |
EP2008666A1 (en) | 2007-06-29 | 2008-12-31 | Institut Pasteur | Use of VHH antibodies for the preparation of peptide vectors for delivering a substance of interest and their applications |
KR20090001043A (ko) * | 2007-06-29 | 2009-01-08 | 주식회사 에스엔피 제네틱스 | Alox12 및 alox15 다형성과 아스피린 유도성천식과의 연관성 |
KR20090001043U (ko) | 2007-07-26 | 2009-02-02 | 김기인 | 공간 보호 책상 |
WO2009033091A1 (en) | 2007-09-06 | 2009-03-12 | City Of Hope | Treatment of th17-mediated autoimmune disease via inhibition of stat3 |
CA2699385A1 (en) * | 2007-09-14 | 2009-03-19 | Ventana Medical Systems, Inc. | Prostate cancer biomarkers |
EP2281005B1 (en) * | 2008-04-03 | 2013-11-20 | Vib Vzw | Single domain antibodies capable of modulating bace1 activity |
WO2009150539A2 (en) * | 2008-06-10 | 2009-12-17 | Institut Pasteur | Variable domains of camelid heavy-chain antibodies directed against androctonus autralis hector toxins |
EP2143735A1 (en) | 2008-07-10 | 2010-01-13 | Institut Pasteur | Variable domains of camelid heavy-chain antibodies directed against glial fibrillary acidic proteins |
US20100136584A1 (en) * | 2008-09-22 | 2010-06-03 | Icb International, Inc. | Methods for using antibodies and analogs thereof |
US20100092470A1 (en) | 2008-09-22 | 2010-04-15 | Icb International, Inc. | Antibodies, analogs and uses thereof |
WO2010037402A1 (en) * | 2008-10-02 | 2010-04-08 | Dako Denmark A/S | Molecular vaccines for infectious disease |
UY32920A (es) * | 2009-10-02 | 2011-04-29 | Boehringer Ingelheim Int | Moleculas de unión biespecíficas para la terapia anti-angiogénesis |
WO2011051327A2 (en) | 2009-10-30 | 2011-05-05 | Novartis Ag | Small antibody-like single chain proteins |
WO2011163423A2 (en) | 2010-06-22 | 2011-12-29 | University Of Central Florida Research Foundation, Inc. | Methods and compositions for cell permeable stat3 inhibitor |
EA035012B1 (ru) * | 2012-10-18 | 2020-04-17 | Рокфеллер Юниверсити (Дзе) | Нейтрализующие анти-вич-антитела широкого спектра действия |
CA2922698C (en) | 2013-08-29 | 2023-01-03 | City Of Hope | Cell penetrating conjugates comprising non-cell penetrating antibodies covalently attached to one or more phosphorothioate nucleic acids |
EP2873680A1 (en) | 2013-11-13 | 2015-05-20 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Oligopeptide and methods for producing conjugates thereof |
EP2873679A1 (en) | 2013-11-13 | 2015-05-20 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Camelid single-domain antibody directed against amyloid bêta and methods for producing conjugates thereof |
EP2899208A1 (en) | 2014-01-28 | 2015-07-29 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Camelid single-domain antibody directed against phosphorylated tau proteins and methods for producing conjugates thereof |
ES2731876T3 (es) | 2014-10-23 | 2019-11-19 | Singh Molecular Medicine Llc | Anticuerpos de dominio sencillo contra antígenos intracelulares |
CN104829710A (zh) * | 2015-03-26 | 2015-08-12 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 | 一种抗埃博拉病毒的免疫球蛋白F(ab′)2及其制备方法 |
-
2016
- 2016-10-31 TW TW105135273A patent/TWI746473B/zh active
- 2016-11-02 CN CN202110795272.5A patent/CN113512112A/zh not_active Withdrawn
- 2016-11-02 AU AU2016349876A patent/AU2016349876B2/en not_active Ceased
- 2016-11-02 CN CN201680063523.8A patent/CN108350064B/zh active Active
- 2016-11-02 RU RU2018120245A patent/RU2741110C2/ru active
- 2016-11-02 CA CA3002239A patent/CA3002239A1/en not_active Abandoned
- 2016-11-02 RU RU2019126152A patent/RU2742247C2/ru active
- 2016-11-02 RU RU2019126220A patent/RU2742248C2/ru active
- 2016-11-02 US US15/342,032 patent/US10195277B2/en active Active
- 2016-11-02 KR KR1020187015132A patent/KR20180069064A/ko unknown
- 2016-11-02 JP JP2018543026A patent/JP6918005B2/ja active Active
- 2016-11-02 BR BR112018008840-4A patent/BR112018008840B1/pt active IP Right Grant
- 2016-11-02 MX MX2018005154A patent/MX2018005154A/es unknown
- 2016-11-02 US US15/342,044 patent/US10369223B2/en active Active
- 2016-11-02 AR ARP160103341A patent/AR106556A1/es unknown
- 2016-11-02 WO PCT/US2016/060134 patent/WO2017079314A2/en active Application Filing
- 2016-11-02 EP EP16862887.3A patent/EP3371215A4/en not_active Withdrawn
-
2018
- 2018-04-16 IL IL258742A patent/IL258742B/en unknown
-
2019
- 2019-06-18 US US16/444,380 patent/US11214626B2/en active Active
-
2021
- 2021-07-20 JP JP2021119218A patent/JP7186266B2/ja active Active
- 2021-11-22 US US17/532,750 patent/US20220089783A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1991005066A1 (en) * | 1989-10-05 | 1991-04-18 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, U.S. Department Of Commerce | Monoclonal antibodies to segments of hiv-1 reverse transcriptase |
RU2352579C2 (ru) * | 2004-08-06 | 2009-04-20 | Био-Рад Пастер | Модифицированные пептиды вич-1 и их применение для обнаружения антител против вич |
WO2012175741A2 (en) * | 2011-06-23 | 2012-12-27 | Ablynx Nv | Techniques for predicting, detecting and reducing aspecific protein interference in assays involving immunoglobulin single variable domains |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
NICOLA GARGANO et al., Inhibition of murine leukaemia virus retrotranscription by the intracellular expression of a phage-derived anti-reversetranscriptase antibody fragment, Journal of General Virology, 1997, Vol.78, pp.2591-2599. * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2741110C2 (ru) | Однодоменные антитела, направленные против внутриклеточных антигенов | |
US9546211B2 (en) | Single domain antibodies directed against TNF-alpha | |
KR20190096390A (ko) | Il-11 항체 | |
US20120107317A1 (en) | Use of cytoplasmic c-myc for regulating immune responses | |
CN114025785B (zh) | 慢性炎症和病毒感染的诊断和治疗 | |
CA2969635A1 (en) | Method for the treatment of idiopathic pulmonary fibrosis | |
EP3134733A1 (en) | Compositions and methods for treating subjects with immune-mediated diseases | |
RU2810002C2 (ru) | Однодоменные антитела, направленные против внутриклеточных антигенов | |
US20240043562A1 (en) | Musk activation | |
KR20220113346A (ko) | 칸디다에 대한 항체 및 이의 용도 |