RU2708241C1 - Способ исследования ротовой жидкости - Google Patents
Способ исследования ротовой жидкости Download PDFInfo
- Publication number
- RU2708241C1 RU2708241C1 RU2019110938A RU2019110938A RU2708241C1 RU 2708241 C1 RU2708241 C1 RU 2708241C1 RU 2019110938 A RU2019110938 A RU 2019110938A RU 2019110938 A RU2019110938 A RU 2019110938A RU 2708241 C1 RU2708241 C1 RU 2708241C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- oral
- fluid
- preparation
- oral cavity
- periodontal pockets
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к исследованию ротовой жидкости. Способ исследования ротовой жидкости включает ее сбор и центрифугирование, приготовление препарата и последующее его изучение. При этом кроме секрета слюнных желез отбирают микрофлору и продукты их жизнедеятельности, содержимое пародонтальных карманов, десневую жидкость, десквамированный эпителий, продукты распада мигрирующих в полость рта лейкоцитов, для чего в процессе отбора промывают межзубные промежутки, пародонтальные карманы посредством ирригатора полости рта с использованием соответствующих насадок для очистки и промывания объектов полости рта, всю полученную жидкость от одного пациента отводят в отдельную стерильную емкость, центрифугируют 30 секунд при скорости 600 об/мин, отделяют осадок и размещают его ровным тонким слоем на предметном стекле и немедленно изучают с помощью фазово-контрастной микроскопии. Изобретение обеспечивает возможность изучения гистологического препарата с обогащенной цитологической картиной. 1 з.п. ф-лы, 12 ил.
Description
Изобретение относится к области стоматологии, а точнее к способам исследования ротовой жидкости и может быть использовано для изготовления из нее гистологического препарата и его последующего исследования картиной.
Известен способ исследования ротовой жидкости, включающий ее сбор с использованием коллекторов, содержащих хлопковый тампон из стоматологической (хирургической) ваты. Хлопковый тампон помещают под язык на 10 минут без стимуляции слюноотделения. После того как тампон пропитается слюной, его помещают в коллектор, закрываемый герметично пластмассовой пробкой, коллектор опечатывают и направляют с сопроводительной документацией в лабораторию в сумке-холодильнике (см. Приказ Минздравсоцразвития РФ от 27 января 2006 г. № 40 «Об организации химико-токсикологических исследований при аналитической диагностике наличия в организме человека алкоголя, наркотических средств, психотропных и других токсических веществ»).
Недостаток этого технического решения - количество жидкости ограничено, клетки в мазках идентифицируются единичные, поэтому способ мало информативен, и не дает представление о состоянии ротовой полости.
Известен также способ исследования ротовой жидкости, включающий ее сбор и центрифугирование, приготовление препарата и последующее его исследование (см. RU № 2432620, МПК G09B 23/28, 2010). Забор жидкости осуществляют утром, натощак, до чистки зубов. Центрифугируют в течение 10 минут при скорости 3000 об/мин. Для определения физико-химических параметров ротовой жидкости использовались методики, адаптированные в стоматологии для изучения ротовой жидкости (Питаева А.Н., Коршунов А.П., Дистель В.А. и др. «Физико-химические методы исследования смешанной слюны в клинической и экспериментальной стоматологии» (учебное пособие) - Омск, 2001).
В результате в препарате - клетки в поле зрения единичны, т.е. препараты малоинформативны. Таким образом, недостаток этого способа – не обеспечивается возможность формирования из ротовой жидкости гистологического препарата с обогащенной цитологической картиной.
Задача, на решение которой направлено изобретение, выражается в обеспечении возможности изучения гистологического препарата с обогащенной цитологической картиной, сформированного из ротовой жидкости.
Технический результат, проявляющийся при решении поставленной задачи, выражается в обеспечении возможности изучения гистологического препарата с обогащенной цитологической картиной, сформированного из ротовой жидкости.
Для решения поставленной задачи способ исследования ротовой жидкости, включающий ее сбор и центрифугирование, приготовление препарата и последующее его изучение, отличается тем, что кроме секрета слюнных желез отбирают микрофлору и продукты их жизнедеятельности, содержимое пародонтальных карманов, десневую жидкость, десквамированный эпителий, продукты распада мигрирующих в полость рта лейкоцитов, для чего в процессе отбора промывают межзубные промежутки, пародонтальные карманы посредством ирригатора полости рта с использованием соответствующих насадок для очистки и промывания объектов полости рта, при этом всю полученную жидкость от одного пациента отводят в отдельную стерильную емкость, затем центрифугируют 30 секунд при скорости 600 об/мин, отделяют осадок и размещают его ровным тонким слоем на предметном стекле, и немедленно изучают с помощью фазовоконтрастной микроскопии.
Кроме того, при наличии ортодонтических конструкций и/или искусственных коронок и/или мостовидных протезов и/или имплантатов, в процессе отбора ротовой жидкости используют соответствующие насадки для их очистки.
Сопоставительный анализ признаков заявленного решения с признаками прототипа и аналогов свидетельствует о соответствии заявленного решения критерию «новизна».
Совокупность признаков формулы изобретения обеспечивает возможность формирования из ротовой жидкости гистологического препарата с обогащенной цитологической картиной, при этом признаки отличительной части формулы изобретения решают следующие функциональные задачи.
Признаки «…кроме секрета слюнных желез отбирают микрофлору и продукты их жизнедеятельности, содержимое пародонтальных карманов, десневую жидкость, десквамированный эпителий, продукты распада мигрирующих в полость рта лейкоцитов…» обеспечивают обогащение ротовой жидкости дополнительными компонентами, позволяющими, при необходимости, расширить набор диагностических признаков, не только в отношении ротовой полости, но и других систем организма.
Признаки «…в процессе отбора промывают межзубные промежутки, пародонтальные карманы посредством ирригатора полости рта с использованием соответствующих насадок для очистки и промывания объектов полости рта…» обеспечивают промывку тонкой струей воды под давлением и зачистку в ротовую жидкость материала с зубов и других объектов полости рта и, тем самым, обогащение ротовой жидкости.
Признак «…всю полученную жидкость от одного пациента отводят в отдельную стерильную емкость…» обеспечивает «привязку» отобранного материала ротовой полости к конкретному пациенту, что позволяет изучить динамику изменения состава ротовой жидкости.
Признак, указывающий, что материал ротовой жидкости «центрифугируют 30 секунд при скорости 600 об/мин», обеспечивает сохранность в исследуемом материале структуры клеток. Осадок при таких условиях центрифугирования представляют только живые клетки, которые в мазке наблюдаются в большом количестве. Морфология клеток соответствует реальной их прижизненной структуре в полости рта.
Признаки, указывающие, что «отделяют осадок и размещают его ровным тонким слоем на предметном стекле», обеспечивают подготовку препарата к исследованию.
Признаки, указывающие, что подготовленный препарат «немедленно изучают с помощью фазовоконтрастной микроскопии» обеспечивает возможность использования полученного материала для изучения состояния ротовой полости и анализа динамики реакции слизистой рта на установку брекетов, имплантатов, зубных протезов различного химического состава или лечения, что расширяет спектр диагностических возможностей и обеспечивает проведение своевременной профилактики реакций отторжения или аллергических проявлений.
Признаки, указывающие, что «при наличии ортодонтических конструкций и/или искусственных коронок и/или мостовидных протезов и/или имплантатов, в процессе отбора ротовой жидкости используют соответствующие насадки для их очистки», повышают эффективность зачистки ротовой полости и эффективность концентрирования материала с поверхности ротовой полости в ротовой жидкости.
На фиг.1 - фиг.4 показаны этапы сбора ротовой жидкости, при этом на фиг.1 процедура установки фиксирующего держателя; на фиг.2 показана промывка и зачистка ротовой полости; на фиг.3 показан отбор ротового материала из ротовой полости; на фиг.4 показано помещение материала в пробирку, для последующего центрифугирования; на фиг.5 – фиг.6 показаны соскоб со слизистой оболочки рта пациента группы исследования с посттравматическими дефектами челюстей, при этом на фиг.5 показан препарат без фиксации; на фиг.6 показан фазовый контраст после фиксации и центрифугирования; на фиг. 7 – фиг.12 показан соскоб со слизистой оболочки рта, при этом на фиг.7 показан митоз эпителиоцита; на фиг.8 и 9 показаны дендритные клетки; на фиг.10 и 11 показаны макрофаги; на фиг.12 показан эпителиоцит.
Для реализации способа используют известные средства: ирригатор полости рта (аппарат, формирующий тонкую струю воды, под давлением), насадки для очистки языка, для промывания пародонтальных карманов, насадки для очистки ортодонтических конструкций (брекетов), насадки для очистки искусственных коронок и мостовидных протезов, насадки для очистки имплантатов. Кроме того, используют другие известные средства: шпатель, слюноотсос, скребок, стерильные пробирки, фиксирующий держатель челюстей. Кроме того, для мягкого центрифугирования используют исследовательскую центрифугу, например, К1015. Для изучения препаратов и изготовления иллюстраций используют микроскоп, например, Olympus Bx51 c фотокамерой DP25.
1 этап - сбор ротовой жидкости. Техника забора материала для исследования из ротовой полости предусматривает:
- установку фиксирующего держателя, обеспечивающего не смыкание челюстей (фиг.1);
- промывку полости рта и объектов в нем посредством ирригатора полости рта, а также зачистку объектов в полости рта с использованием соответствующих, вышеупомянутых насадок (фиг.2);
- сбор материала из полости рта посредством слюноотсоса (фиг.3), также, для забора материала, используем шпатель и скребок;
- помещение материала в пробирку (фиг.4).
Материал забирают из ротовой полости с помощью ирригатора полости рта, формирующим тонкую струю воды, которая под давлением промывает межзубные промежутки от зубного налета, а также пародонтальные карманы, язык, очищают (если такие присутствуют) ортодонтические конструкции (брекеты), искусственные коронки, мостовидные протезы, имплантаты.
Центрифугирование материала производится на малых оборотах, без разрушения клеток - по нашим данным сохранность в исследуемом материале структуры клеток обеспечивается на скорости 600 об/мин в течение 30 секунд.
Всю полученную жидкость центрифугируют при названных режимах и, таким образом, в осадке получают обогащенный концентрат, состоящий из клеток эпителия, лейкоцитов и микроорганизмов. Осадок при таких условиях центрифугирования представляют только живые клетки, которые в мазке наблюдаются в большом количестве. Морфология клеток соответствует реальной их прижизненной структуре в полости рта, так как сохраняется целостность мембраны, органелл в цитоплазме, которые при больших оборотах образуют субклеточные фракции.
Полученный обогащенный осадок, состоящий из клеток эпителия и лейкоцитов, а также микроорганизмов, наносят на предметное стекло и шпателем, покровным стеклом, или предметным стеклом распределяют материал по предметному стеклу и немедленно изучают с помощью фазовоконтрастной микроскопии. Количество клеток в поле зрения превышает таковое при обычном изготовлении мазка. Для изготовления иллюстраций используют микроскоп Olympus Bx51 c фотокамерой DP25. Техника микроскопирования предусматривает анализ препарата без покровного стекла с предварительным высушиванием и нанесением иммерсионного масла для работы с наибольшим увеличением под иммерсионным объективом. В рассматриваемых объектах идентифицируются ядра, фигуры митоза, отростки клеток, содержимое цитоплазмы, включая везикулы и контаминированные организмы.
Комментарии к фотографиям (микрофото. Ув. Х400.1): на фиг.5 показана клетка живая, в цитоплазме идентифицируются микроорганизмы; на фиг.6 в поле зрения наблюдается большее количество клеток, идентифицируются ядерные эпителиоциты с контаминацией микроорганизмами; на фиг.7 показан митоз эпителиоцита; на фиг.8 и 9 показаны дендритные клетки; на фиг.10 и 11 показаны макрофаги; на фиг.12 показан эпителиоцит контаминированный микроорганизмами. Наличие контаминированных микроорганизмов позволяет оценить инфекционный процесс, уровень микробного обсеменения, барьерные свойства эпителиальных пластинок слизистой рта и клеточный состав. Количество слущенных клеток эпителия с микробами дает представление о защитных свойствах эпителия. Клетки мигранты и их количество могут дать представление об уровне защитных реакций и при больших количествах свидетельствуют о возможности отторжения имплантатов.
Достоинства способа:
- имеет низкую стоимость, доступен любой клинике с любым бюджетом;
- информативен, дает полное представление о состоянии ротовой полости;
- на основе данных содержимого осадка можно прогнозировать исход патологического процесса и своевременно влиять на ключевые события патогенеза и проводить профилактику осложнений;
- от момента забора материала для диагностики до результатов анализа затрачивается времени не более 10 минут;
- простота выполнения не требует специального обучения и приобретения навыков диагностических манипуляций;
- дает возможность многократного забора диагностического материала;
- неинвазивность и травмобезопасность как для пациента, так и врача (исключает инфицирование через кровь ВИЧ и гепатитом С), а также и другими социально значимыми инфекциями.
Claims (2)
1. Способ исследования ротовой жидкости, включающий ее сбор и центрифугирование, приготовление препарата и последующее его изучение, отличающийся тем, что кроме секрета слюнных желез отбирают микрофлору и продукты их жизнедеятельности, содержимое пародонтальных карманов, десневую жидкость, десквамированный эпителий, продукты распада мигрирующих в полость рта лейкоцитов, для чего в процессе отбора промывают межзубные промежутки, пародонтальные карманы посредством ирригатора полости рта с использованием соответствующих насадок для очистки и промывания объектов полости рта, при этом всю полученную жидкость от одного пациента отводят в отдельную стерильную емкость, затем центрифугируют 30 секунд при скорости 600 об/мин, отделяют осадок и размещают его ровным тонким слоем на предметном стекле и немедленно изучают с помощью фазово-контрастной микроскопии.
2.Способ по п.1, отличающийся тем, что при наличии ортодонтических конструкций, и/или искусственных коронок, и/или мостовидных протезов, и/или имплантатов в процессе отбора ротовой жидкости используют соответствующие насадки для их очистки.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019110938A RU2708241C1 (ru) | 2019-04-12 | 2019-04-12 | Способ исследования ротовой жидкости |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2019110938A RU2708241C1 (ru) | 2019-04-12 | 2019-04-12 | Способ исследования ротовой жидкости |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2708241C1 true RU2708241C1 (ru) | 2019-12-05 |
Family
ID=68836363
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2019110938A RU2708241C1 (ru) | 2019-04-12 | 2019-04-12 | Способ исследования ротовой жидкости |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2708241C1 (ru) |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20090024058A1 (en) * | 2005-03-22 | 2009-01-22 | Inverness Medical Switzerland Gmbh | Device for Sampling Oral Fluid |
WO2015173698A1 (en) * | 2014-05-13 | 2015-11-19 | Koninklijke Philips N.V. | Nozzle for oral irrigator device including a dynamic nozzle actuator with responsive materials |
RU2571327C2 (ru) * | 2010-07-26 | 2015-12-20 | МакНЕЙЛ-ППС, ИНК. | Устройство и способы отбора и анализа образцов текучей среды из полости рта |
RU2648765C1 (ru) * | 2017-02-17 | 2018-03-28 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский университет) | Способ качественного определения стоматологического статуса пациента с воспалением слизистой оболочки альвеолярного отростка челюсти по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости |
-
2019
- 2019-04-12 RU RU2019110938A patent/RU2708241C1/ru active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20090024058A1 (en) * | 2005-03-22 | 2009-01-22 | Inverness Medical Switzerland Gmbh | Device for Sampling Oral Fluid |
RU2571327C2 (ru) * | 2010-07-26 | 2015-12-20 | МакНЕЙЛ-ППС, ИНК. | Устройство и способы отбора и анализа образцов текучей среды из полости рта |
WO2015173698A1 (en) * | 2014-05-13 | 2015-11-19 | Koninklijke Philips N.V. | Nozzle for oral irrigator device including a dynamic nozzle actuator with responsive materials |
RU2648765C1 (ru) * | 2017-02-17 | 2018-03-28 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский университет) | Способ качественного определения стоматологического статуса пациента с воспалением слизистой оболочки альвеолярного отростка челюсти по содержанию биомаркеров в ротовой жидкости |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2708241C1 (ru) | Способ исследования ротовой жидкости | |
Pedrinha et al. | Impact of irrigation protocols with some chelators and mechanical agitation on intratubular decontamination | |
RU68273U1 (ru) | Заборник содержимого зубодесневой борозды или кармана для цитологического исследования | |
Ballal et al. | DETERMINATION OF ABO BLOOD GROUPING FROM DENTINE AND PULP. | |
Galván-Pacheco et al. | Evaluation of in vitro biofilm elimination of Enterococcus faecalis using a continuous ultrasonic irrigation device | |
KR101672804B1 (ko) | 모든 바이오샘플을 분리하는데 적용할 수 있는 전 자동 원심분리기용 튜브 | |
RU2643107C1 (ru) | Способ локальной иммунокоррекции у стоматологических ортопедических пациентов | |
RU2737492C1 (ru) | Способ забора дентинной жидкости зуба | |
Goodey et al. | Observations on Entamoeba gingivalis from the human mouth, with a note on the trichomonad flagellate Tetratrichomonas buccalis n. sp | |
RU2299437C1 (ru) | Способ исследования состояния пародонта | |
Kramer | An examination of dentine for A and B blood-group antigens by the mixed agglutination technique | |
JP2023526727A (ja) | 最近生存している歯科用細胞片の生体内試験のシステムおよび方法 | |
RU2647782C2 (ru) | Способ забора биологической жидкости из полого органа | |
RU2342956C1 (ru) | Способ забора десневой жидкости | |
Shukurovna | Methods for Determining Saliva Viscosity in Children with Heart Defects | |
Dwyer | How to obtain and interpret corneal cytology samples. | |
JP5320183B2 (ja) | 顎顔面インプラント治療のための骨質検査方法 | |
RU2709817C1 (ru) | Состав стоматологический и способ его применения | |
RU2696777C1 (ru) | Состав стоматологический и способ его применения | |
RU59260U1 (ru) | Стоматологический исследовательский комплекс | |
Bennett et al. | Observations on the permeability of human calcified dental tissues to penicillin | |
Blair, DM, Weber, MC & Clarke | Macroscopic and microscopic methods in the diagnosis of intestinal bilharziasis | |
Kotelban | Influence of drinking water quality on the dental health of children living in bukovyna region | |
Modaresi et al. | The Effect of Intracanal Medication with Calcium Hydroxide on Recovering E. Faecalis from Root Canals after Obturation of Root Canal System | |
Mohammed et al. | Detection of Second Canals in Mesial Root of Maxillary First Molars Using Different Evaluation Methods (In Vitro Study) |