RU2704133C2 - Применение lactobacillus paracasei для усиления восстановления разнообразия кишечной микрофлоры после дисбактериоза - Google Patents
Применение lactobacillus paracasei для усиления восстановления разнообразия кишечной микрофлоры после дисбактериоза Download PDFInfo
- Publication number
- RU2704133C2 RU2704133C2 RU2016144443A RU2016144443A RU2704133C2 RU 2704133 C2 RU2704133 C2 RU 2704133C2 RU 2016144443 A RU2016144443 A RU 2016144443A RU 2016144443 A RU2016144443 A RU 2016144443A RU 2704133 C2 RU2704133 C2 RU 2704133C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- paracasei
- strain
- subject
- cncm
- faecalis
- Prior art date
Links
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 title claims abstract description 61
- 208000027244 Dysbiosis Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- 230000007140 dysbiosis Effects 0.000 title claims abstract description 38
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 title claims abstract description 25
- 208000036649 Dysbacteriosis Diseases 0.000 title abstract description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 title description 5
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 title description 3
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 claims abstract description 49
- LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N n-(2-chloroethyl)-n-nitrosomorpholine-4-carboxamide Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)N1CCOCC1 LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 49
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 33
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims abstract description 29
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 claims abstract description 23
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims abstract description 13
- 210000005027 intestinal barrier Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 230000007358 intestinal barrier function Effects 0.000 claims abstract description 6
- 230000005945 translocation Effects 0.000 claims abstract description 5
- 241000605059 Bacteroidetes Species 0.000 claims abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 90
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 13
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 13
- 229930186147 Cephalosporin Natural products 0.000 claims description 5
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 claims description 5
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 claims description 5
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 claims description 5
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 claims description 5
- 229940124587 cephalosporin Drugs 0.000 claims description 5
- 150000001780 cephalosporins Chemical class 0.000 claims description 5
- 229940124307 fluoroquinolone Drugs 0.000 claims description 5
- 150000002960 penicillins Chemical class 0.000 claims description 5
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 19
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 abstract description 13
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002688 persistence Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 27
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 27
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 27
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 23
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 23
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 20
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 19
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 18
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 16
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 16
- 241000894007 species Species 0.000 description 14
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 13
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 11
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 11
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 11
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 11
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 10
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 8
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 8
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 7
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 230000036541 health Effects 0.000 description 6
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 description 6
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 108091093088 Amplicon Proteins 0.000 description 4
- 241000304138 Enterococcus faecalis V583 Species 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 4
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 4
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 238000012175 pyrosequencing Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 description 4
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 description 4
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 4
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 229960002227 clindamycin Drugs 0.000 description 3
- KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N clindamycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@H](C)Cl)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 3
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 2
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 2
- 208000019359 Enterococcus faecalis infection Diseases 0.000 description 2
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 208000036209 Intraabdominal Infections Diseases 0.000 description 2
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 2
- 241000218587 Lactobacillus paracasei subsp. paracasei Species 0.000 description 2
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 2
- 241000736262 Microbiota Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- ZYFVNVRFVHJEIU-UHFFFAOYSA-N PicoGreen Chemical compound CN(C)CCCN(CCCN(C)C)C1=CC(=CC2=[N+](C3=CC=CC=C3S2)C)C2=CC=CC=C2N1C1=CC=CC=C1 ZYFVNVRFVHJEIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000192142 Proteobacteria Species 0.000 description 2
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 2
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 2
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 235000021045 dietary change Nutrition 0.000 description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 2
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 description 2
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 2
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 2
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 2
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 241001156739 Actinobacteria <phylum> Species 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N Betaine Natural products C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 241001112695 Clostridiales Species 0.000 description 1
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 description 1
- 206010011409 Cross infection Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 description 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O N,N,N-trimethylglycinium Chemical compound C[N+](C)(C)CC(O)=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000016571 aggressive behavior Effects 0.000 description 1
- 235000020194 almond milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000020244 animal milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 235000008452 baby food Nutrition 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000020197 coconut milk Nutrition 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000009982 effect on human Effects 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000020251 goat milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 239000011487 hemp Substances 0.000 description 1
- 235000020196 hemp milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000007366 host health Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 235000015141 kefir Nutrition 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 description 1
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 235000013615 non-nutritive sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 235000020195 rice milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 235000020254 sheep milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000021391 short chain fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004666 short chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000002264 triphosphate group Chemical class [H]OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])O* 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/127—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using microorganisms of the genus lactobacteriaceae and other microorganisms or enzymes, e.g. kefir, koumiss
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C11/00—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions
- A23C11/02—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins
- A23C11/10—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins containing or not lactose but no other milk components as source of fats, carbohydrates or proteins
- A23C11/103—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins containing or not lactose but no other milk components as source of fats, carbohydrates or proteins containing only proteins from pulses, oilseeds or nuts, e.g. nut milk
- A23C11/106—Addition of, or treatment with, microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
- A23C19/06—Treating cheese curd after whey separation; Products obtained thereby
- A23C19/061—Addition of, or treatment with, microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C21/00—Whey; Whey preparations
- A23C21/02—Whey; Whey preparations containing, or treated with, microorganisms or enzymes
- A23C21/026—Whey; Whey preparations containing, or treated with, microorganisms or enzymes containing, or treated only with, lactic acid producing bacteria, bifidobacteria or propionic acid bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/16—Agglomerating or granulating milk powder; Making instant milk powder; Products obtained thereby
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/165—Paracasei
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
- A23V2400/249—Thermophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/51—Bifidobacterium
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к медицине. Предложено применение штамма Lactobacillus paracasei CNCM I-3689 для восстановления численности Bacteroidetes у субъекта с дисбактериозом, вызванным или являющимся следствием лечения антибиотиками, применение его для ускорения снижения Enterococcus faecalis в микрофлоре кишечника у субъекта с дисбактериозом, вызванным или являющимся следствием лечения антибиотиками указанного субъекта, и для предотвращения транслокации E. faecalis через кишечный барьер у субъекта. Технический результат состоит в реализации заявленных назначений и в снижении живучести патогенной E. Faecalis в кишечнике по сравнению с контролем. 3 н. и 4 з.п. ф-лы, 3 ил.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к области пробиотиков. В частности, изобретение касается применения Lactobacillus paracasei (L. paracasei) для восстановления разнообразия кишечной микрофлоры (микробиоты) у субъекта. В предпочтительном воплощении настоящее изобретение касается применения Lactobacillus paracasei subsp. paracasei для ускорения снижения Enterococcus faecalis в микрофлоре кишечника у субъекта с дисбактериозом (дисбиозом) кишечника.
Уровень техники
Согласно определению, составленному совместно экспертами Продовольственной и сельскохозяйственной организации ООН и Всемирной организации здравоохранения (FAO/WHO) в Рекомендации по вопросам здравоохранения и питательных свойств сухого молока с живыми молочнокислыми бактериями в 2001 г., пробиотиками являются "живые микроорганизмы, которые при введении в достаточных количествах приносят пользу для здоровья хозяина". Пробиотические бактерии были описаны среди видов, относящихся к родам Lactobacillus, Bifidobacterium, Streptococcus и Lactococcus, которые обычно используются в молочной промышленности. Считается, что пробиотики действуют на уровне кишечной микрофлоры, препятствуя развитию патогенных микроорганизмов и/или действуя более непосредственно на иммунную систему.
Оппортунистические бактериальные инфекции, ответственные за связанные со здравоохранением инфекции (HAIs), вносят значительный вклад в смертность и заболеваемость пациентов, а также в расходы на здравоохранение как в развитых, так и в развивающихся странах (WHO, 2008). Желудочно-кишечный тракт (ЖКТ) является резервуаром для условно-патогенных микроорганизмов, которые извлекают выгоду из нарушения баланса кишечной микрофлоры или дисбактериоза, вторгаясь и заражая восприимчивых пациентов. Лечение антибиотиками оказывает вредное воздействие на разнообразие кишечной микрофлоры и способствует распространению условно-патогенных бактерий у человека, включая Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium или Clostridium difficile.
Приобретая устойчивость к антибиотикам и другие патогенные признаки, колонизирующие и/или инвазивные изоляты Е. faecalis с множественной лекарственной устойчивостью, которые вызывают серьезные внутрибольничные инфекции, составляют семь адаптированных к больнице комплексов, обозначаемых как клональные комплексы энтерококков высокого риска (High-Risk Enterococcal Clonal Complexes, HiRECCs). Пролиферация и живучесть HiRECCs в GIT является главным фактором риска возникновения устойчивой к ванкомицину энтерококковой (VRE) инфекции, подчеркивая потребность в лучшем понимании биологических и биохимических факторов, задействованных при колонизации GIT Е. faecalis. Изоляты, принадлежащие к HiRECC-2, являются одной из наиболее распространенных причин инфекций Е. faecalis в США и в ряде европейских стран. Некоторые штаммы Е. faecalis приобрели патогенные черты и могут вызывать тяжелые инфекции. Так, они могут колонизировать GIT и/или проходить через барьер кишечного эпителия и попадать в кровоток. Более того, Enterococcus spp. способствуют внебольничным внутрибрюшным инфекциям и входят в число десяти наиболее часто выделяемым микроорганизмов при связанных со здравоохранением инфекциях (HCAI). Поэтому снижение пролиферации и живучести Е. faecalis, особенно HiRECCs, в GIT снижает риск возникновения не только инфекций GIT, но и внутрибрюшных инфекций.
Как видно из вышеизложенного, существует потребность в альтернативах или дополнениях к антибиотикам для лечения или профилактики инфекции Е. faecalis.
"Кишечная микрофлора (микробиота)" означает популяцию микроорганизмов, обитающих в кишечнике любого организма, принадлежащего к царству животных (людей, животных, насекомых и т.д.). Хотя состав микрофлоры у каждого индивида уникален (от 60 до 80 видов бактерий являются общими для более чем 50% выборочной совокупности из общего числа 400-500 различных видов бактерий у индивида), она всегда выполняет аналогичные основные физиологические функции и имеет прямое воздействие на здоровье человека:
- способствует перевариванию некоторых продуктов питания, которые желудок и тонкий кишечник не в состоянии переварить (в основном неусвояемые волокна);
- способствует выработке некоторых витаминов (B и K);
- защищает от агрессии со стороны других микроорганизмов, поддерживая целостность слизистой оболочки кишечника;
- играет важную роль в должном развитии иммунной системы;
- здоровая, разнообразная и сбалансированная микрофлора кишечника играет ключевую роль в обеспечении надлежащего функционирования кишечника.
Принимая во внимание то, что микрофлора кишечника играет важную роль в нормальном функционировании организма и выполняет различные функции, она иногда считается "органом". Однако это "приобретенный" орган, так как младенцы рождаются стерильными; то есть колонизация кишечника начинается с рождения и развивается впоследствии.
Степень нарушения микрофлоры кишечника после таких расстройств, как изменение рациона, лечение антибиотиками и инвазия экзогенных микробов, а также скорость и степень восстановления до состояния перед расстройством, определяется как "устойчивость микрофлоры". Устойчивость микрофлоры варьирует у разных людей и при различных расстройствах у одного индивида.
Из вышеизложенного очевидно, что существует также важная потребность в средствах повышения устойчивости микрофлоры.
Все возрастающая совокупность данных показывает, что пробиотики или трансплантация фекальной микрофлоры предотвращает или лечит целый ряд заболеваний, в том числе кишечные инфекции. Такие подходы также связаны с усилением клиренса VRE из кишечника у мышей.
Сущность изобретения
Вне ожидания, авторы изобретения обнаружили, что бактерии вида Lactobacillus paracasei способны стимулировать восстановление разнообразия кишечной микрофлоры и/или уменьшать нагруженность штаммами Е. faecalis in vivo.
Соответственно, предметом настоящего изобретения является применение Lactobacillus paracasei для повышения устойчивости микрофлоры кишечника. В частности, настоящее изобретение касается применения Lactobacillus paracasei для повышения разнообразия кишечной микрофлоры у субъекта. В предпочтительном воплощении настоящее изобретение касается применения штамма Lactobacillus paracasei для ускорения снижения Enterococcus faecalis в микрофлоре кишечника у субъекта с вызванным антибиотиками дисбактериозом кишечника.
Другие аспекты настоящего изобретения предусматривают применение Lactobacillus paracasei для предотвращения, уменьшения или лечения дисбактериоза кишечника; и/или профилактики заболеваний, вызванных патогенами, присутствующими в желудочно-кишечном тракте; и/или повышения уровня короткоцепочечных жирных кислот у субъекта.
Изобретением также предусмотрены композиции, содержащие Lactobacillus paracasei, для применения в соответствии с настоящим изобретением.
Раскрытие сущности изобретения
В настоящем описании выражение "сохранить разнообразие микрофлоры" применяется для выражения того, что видовое разнообразие (видовое богатство и/или равномерность распределения видов) микрофлоры у индивида не должно существенно изменяться или пострадать, особенно в случае дисбактериоза. В частности, сохранение многообразия микрофлоры могло бы способствовать быстрейшему выздоровлению субъекта в случае риска дисбактериоза или избежать ухудшения дисбактериоза. Выражения "повышение разнообразия микрофлоры", "способствовать восстановлению разнообразия микрофлоры", "лечение/снижение/уменьшение дисбактериоза" и т.д. должны означать повышение видового разнообразия (видового богатства и/или равномерности распределения видов) микрофлоры у индивида. Методы расчета видового разнообразия, видового богатства и равномерности распределения видов известны в данной области и включают, без ограничения, индекс Симпсона, индекс разнообразия Симпсона и обратный индекс Симпсона, индекс Чао и индекс Шеннона.
Кроме того, "ускорить повышение разнообразия кишечной микрофлоры", "способствовать восстановлению разнообразия микрофлоры кишечника", "способствовать возврату к исходному/нормальному/здоровому разнообразию микрофлоры", "ускорить снижение/уменьшение/исчезновение дисбактериоза" и т.д. применяются для выражения того, что разнообразие (богатство и/или равномерность) микрофлоры у лиц с дисбак-териозом кишечника после лечения антибиотиками возрастает статистически быстрее у лиц, принимающих пробиотический штамм, чем у контрольных лиц, не принимающих его, так что структура микрофлоры через три недели после лечения антибиотиками будет статистически ближе к структуре до указанного лечения у тех лиц, которые принимают пробиотический штамм, чем у контрольных лиц, не принимающих его. При этом термин "дисбактериоз" служит для обозначения изменения разнообразия комменсальных видов микрофлоры по сравнению со здоровой или общей популяцией и должен означать уменьшение полезных микроорганизмов и/или увеличение патобионтов (патогенных или потенциально патогенных микроорганизмов) и/или уменьшение общего видового разнообразия микрофлоры. Многие факторы могут нанести вред полезным представителям кишечной микрофлоры, вызывая дисбактериоз, в том числе применение антибиотиков, психологический и физический стресс, радиация и изменения рациона. Применение антибиотиков является наиболее распространенной и значительной причиной крупных изменений нормальной микрофлоры. Так, в настоящем изобретении термин "вызванный антибиотиками дисбиоз" относится к дисбактериозам, вызванным антибиотиками, и включает усиление чрезмерного роста условно-патогенных бактерий, включая Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium или Clostridium difficile.
В настоящем изобретении термин "молочная композиция" служит для обозначения композиций на основе молока, пригодных для потребления животными, в частности, для потребления людьми.
В настоящем изобретении термин "молоко" охватывает растительное или животное молоко, как-то, без ограничения, соевое, миндальное молоко, молоко из полбы, овса, конопли, кокосовых орехов, риса, козье, овечье или коровье молоко.
В настоящем изобретении термин "x% (вес/вес)" считается эквивалентным "x г на 100 г".
В настоящем изобретении ссылка на бактериальный штамм или вид должна охватывать и бактерии, происходящие из него, причем данные бактерии сохраняют способность к снижению кишечного дисбактериоза у субъекта, предпочтительно у субъекта с вызванным антибиотиками дисбактериозом. Для оценки этой способности можно использовать ту же модель, что описана в приведенных ниже примерах. Штаммы, происходящие из родительского штамма, которые можно использовать в соответствии с настоящим изобретением, включают мутантные штаммы и генетически трансформированные штаммы. Эти мутанты или генетически трансформированные штаммы могут представлять собой штаммы, у которых один или несколько эндогенных генов исходного штамма подверглись мутации, к примеру, чтобы модифицировать некоторые метаболические свойства (напр., способность сбраживать сахара, кислотоустойчивость, выживание при прохождении через желудочно-кишечный тракт, их свойства после подкисления или выработку ими метаболитов). Они также могут представлять собой штаммы, полученные при генетической трансформации исходного штамма для вставки одного или нескольких нужных генов, например, для того, чтобы придать данным генетически трансформированным штаммам дополнительные физиологические признаки или способность к экспрессии белков, представляющих терапевтический или вакцинный интерес, которые желательно вводить через данные штаммы. Эти мутанты или генетически трансформированные штаммы могут быть получены из исходного штамма стандартными методами случайного или направленного мутагенеза и генетической трансформации бактерий или же с помощью метода, известного как "перетасовка генома". В настоящем описании штаммы, мутанты и варианты, происходящие из исходного вида или штамма и сохраняющие способность к поддержанию или увеличению разнообразия кишечной микрофлоры у субъекта, страдающего вызванным антибиотиками дисбактериозом, должны рассматриваться как охваченные ссылкой на указанный родительский вид или штамм, напр., выражения "Lactobacillusparacasei" и "штамм CNCM I-3689" должны охватывать и происходящие из них штаммы, мутанты и варианты.
В настоящем изобретении термин "пищевая добавка" служит для обозначения продуктов, полученных из таких соединений, которые обычно используются в пищевых продуктах, но имеют вид таблеток, порошков, капсул, микстуры или любой другой формы, которая обычно не связана с питанием, но оказывает благотворное влияние на здоровье.
В настоящем изобретении термин "функциональный продукт" служит для обозначения пищевых продуктов, оказывающих благотворное влияние на здоровье наряду с обеспечением питательными веществами. В частности, пищевые добавки и функциональные продукты могут оказывать физиологическое действие - для профилактики, облегчения или лечения заболевания, к примеру, хронического заболевания.
В настоящем изобретении термин "ферментированная молочная" или "кисломолочная" относится к композиции, полученной из молочного продукта или молочной композиции, соответственно, при подкисляющем действии по меньшей мере одной молочнокислой бактерии, которая может содержаться в закваске, культуре или заквасочной культуре.
В настоящем изобретении термин "можно есть ложкой" служит для обозначения твердых или полутвердых продуктов, которые можно потреблять при помощи ложки или другой утвари.
В настоящем изобретении выражения "ускорить снижение Е. faecalis", "уменьшить нагруженность Е. faecalis", "способствовать уменьшению Е. faecalis" и т.д. применяются для выражения того, что содержание Е. faecalis в микрофлоре у лиц с дисбактериозом кишечника после лечения антибиотиками уменьшается быстрее у тех, кто принимает пробиотический штамм, чем у контрольных лиц, не принимающих его.
Применение Lactobacillus paracasei
Настоящим изобретением предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, более предпочтительно штамма CNCM I-3689, для поддержания или увеличения разнообразия кишечной микрофлоры у субъекта, предпочтительно у субъекта, страдающего дисбактериозом кишечника.
Соответственно, в одном воплощении настоящего изобретения предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, более предпочтительно штамма CNCM I-3689, для предотвращения или уменьшения дисбактериоза кишечника у субъекта. Штамм CNCM I-3689 L. paracasei subsp. paracasei депонирован, в соответствии с Будапештским договором, в CNCM (Национальная коллекция культур микроорганизмов, 25 rue du Docteur Roux, Париж) 9 ноября 2006 г. Этот штамм описан в международной патентной заявке WO 2009/130423.
В предпочтительном воплощении дисбактериоз кишечника вызван или возник после лечения субъекта антибиотиками. Вызванный антибиотиками дисбактериоз, как правило, характеризуется возрастанием Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium и/или Clostridium difficile в желудочно-кишечном тракте. Вне ожидания авторы изобретения обнаружили, что L. paracasei не только способствует разнообразию кишечной микрофлоры у субъекта, но также уменьшает содержание условно-патогенного Enterococcus faecalis в желудочно-кишечном тракте. Соответственно, настоящим изобретением предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, более предпочтительно штамма CNCM I-3689, для снижения или ускорения уменьшения Enterococcus faecalis. В альтернативном воплощении настоящим изобретением предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689, для предотвращения транслокации Enterococcus faecalis через кишечный барьер и/или для профилактики внутрибрюшной инфекции, вызванной Enterococcus faecalis. В другом воплощении настоящим изобретением предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689, для снижения или ускорения снижения устойчивых к лекарствам энтерококков, предпочтительно HiRECCs, после лечения антибиотиками. Соответственно, в одном воплощении изобретением предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689, для снижения или ускорения снижения устойчивых к антибиотикам Е. faecalis, как правило, в кишечнике. Обычно данные Е. faecalis устойчивы к одному или нескольким антибиотикам, выбранным из пенициллинов, цефалоспоринов, фторхинолонов, аминогликозидов и гликопептидов.
Предпочтительно субъект страдает дисбактериозом кишечника. В предпочтительном воплощении дисбактериоз кишечника вызван или возник после лечения субъекта антибиотиками. Предпочтительно Enterococcus faecalis находится в желудочно-кишечном тракте, более предпочтительно в кишечнике.
Композиции
В следующем аспекте настоящего изобретения предусмотрены композиции, содержащие L.paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамм CNCM I-3689, для применения в соответствии с настоящим изобретением.
Соответственно, в предпочтительном воплощении настоящего изобретения предусмотрены штаммы L paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамм CNCM I-3689, в виде композиции для перорального введения. В такой композиции данный штамм может применяться в виде целых бактерий, которые могут быть живыми или мертвыми. С другой стороны, данный штамм может применяться в виде бактериального лизата. Предпочтительно бактериальные клетки присутствуют в виде живых и жизнеспособных клеток.
В соответствии с настоящим изобретением, композиция может быть в любой форме, подходящей для перорального введения. Это включает в себя, к примеру, твердые, полутвердые, жидкие формы и порошки. Предпочтительны полутвердые композиции типа йогуртов и жидкие композиции типа напитков.
Композиция предпочтительно содержит по меньшей мере 1⋅106 колониеобразующих единиц (к.о.е.), по меньшей мере 1⋅107 колониеобразующих единиц (к.о.е.) или предпочтительно по меньшей мере 1⋅108 к.о.е. на грамм массы L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, предпочтительно штамма CNCM I-3689. Предпочтительно композиция по изобретению также содержит вплоть до 1011, более предпочтительно по меньшей мере 1010 и наиболее предпочтительно по меньшей мере 109 колониеобразующих единиц (к.о.е.) L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, предпочтительно штамма CNCM I-3689, на грамм (г) композиции по изобретению.
Композиции также могут содержать и другие штаммы Lactobacillus и/или другие штаммы бактерий, чем штаммы, приведенные выше, в частности такие пробиотические штаммы, как штаммы Streptococcus thermophilus, Bifidobacterium и Lactococcus.
Композиции могут представлять собой фармацевтические композиции или пищевые композиции. В соответствии с предпочтительным воплощением композиция представляет собой пищевую композицию типа пищевого продукта (включая и функциональные пищевые продукты) или пищевой добавки.
Пищевые композиции, которые можно использовать в соответствии с изобретением, включают молочные композиции, предпочтительно кисломолочные композиции. Ферментированные композиции могут иметь вид жидкости или же сухого порошка, полученного при высушивании ферментированной жидкости. Примеры молочных композиций включают ферментированное молоко и/или ферментированную сыворотку в застывшем, перемешанном или питьевом виде, сыр и йогурт. Ферментированный продукт также может представлять собой ферментированный растительный продукт типа ферментированной сои, злаков и/или фруктов в застывшем, перемешанном или питьевом виде. Пищевые композиции, которые можно использовать в соответствии с изобретением, также включают детское питание, детские молочные смеси и смеси для продолжающих. В предпочтительном воплощении ферментированный продукт представляет собой свежий продукт. Свежий продукт, который не подвергался сильной термообработке, имеет то преимущество, что бактериальные штаммы присутствуют в живом виде.
Особенно предпочтительно, чтобы композиция по изобретению представляла собой молочную композицию, в частности кисломолочную композицию.
Предпочтительно молочная композиция по изобретению содержит или получена (в частности, путем ферментации) из композиции, содержащей от 30 до 100% (вес/вес) молока, более предпочтительно от 50 до 100% молока и еще более предпочтительно от 70 до 100% молока. Также предпочтительно молочная композиция по изобретению содержит или получена (в частности, путем ферментации) из композиции, в основном состоящей из молока или состоящей только из молока, предпочтительно из коровьего молока.
Предпочтительно молочная композиция по изобретению содержит или получена (в частности, путем ферментации) из композиции, содержащей либо обезжиренное, либо не обезжиренное молоко, либо то и другое. Предпочтительно молоко находится в жидком, порошкообразном и/или концентрированном виде. В одном воплощении данное молоко может быть обогащено или усилено другими компонентами молока или другими питательными веществами, такими, без ограничения, как витамины, минералы, микроэлементы или другие микронутриенты.
Кисломолочные композиции получают из молочной композиции по изобретению при подкисляющем действии по меньшей мере одной молочнокислой бактерии, которая может содержаться в закваске, культуре или заквасочной культуре. Более предпочтительно кисломолочные композиции по изобретению получают при подкисляющем действии по меньшей мере одного, двух, трех, четырех, пяти, шести, семи или больше штаммов молочнокислых бактерий. Соответственно, "кисломолочная композиция" содержит по меньшей мере один, два, три, четыре, пять, шесть, семь или больше штаммов молочнокислых бактерий.
Способы получения кисломолочных продуктов типа йогурта или их эквивалентов хорошо известны в данной области. Как правило, кисломолочные продукты получают путем культивирования прошедшего термообработку (напр., пастеризацию) обезжиренного и/или не обезжиренного молока с подходящими микроорганизмами, обеспечивающими снижение pH. Выбор подходящих микроорганизмов (напр., термофильных молочнокислых бактерий) находится в компетенции специалиста.
Молочные композиции, в частности, кисломолочные композиции по изобретению, необязательно могут дополнительно содержать вторичные ингредиенты, как-то фрукты, овощи, пищевые и некалорийные подсластители, крупы, ароматизаторы, крахмал, загустители, консерванты или стабилизаторы. Предпочтительно молочная композиция, в частности кисломолочная композиция по изобретению, должна содержать вплоть до 30% (вес/вес) таких вторичных ингредиентов, напр., до 10%, 15%, 20%, 25% (вес/вес).
Предпочтительно молочная композиция по изобретению представляет собой кисломолочную композицию, более предпочтительно кисломолочную композицию, которая содержит, в основном содержит или же состоит из молока, которое подвергалось термообработке, по меньшей мере эквивалентной пастеризации, а предпочтительно такая термообработка проводится перед получением молочной композиции или кисломолочной композиции.
Предпочтительно молочная композиция по изобретению представляет собой ферментированную молочную композицию, более предпочтительно кисломолочную композицию, которая содержит более 0,3 г свободной молочной кислоты на 100 г массы, более предпочтительно изобретением предусмотрены кисломолочные композиции, содержащие более 0,7 г или 0,6 г свободной молочной кислоты на 100 г массы. Предпочтительно молочная композиция по изобретению представляет собой ферментированную молочную композицию, более предпочтительно кисломолочную композицию, которая имеет содержание белка, по меньшей мере эквивалентное тому молоку, из которого она получена.
Предпочтительно молочная композиция по изобретению представляет собой ферментированную молочную композицию, более предпочтительно кисломолочную композицию, которая имеет значение pH, равное или меньше 5, более предпочтительно между 3,5 и 4,5.
Предпочтительно молочная композиция по изобретению представляет собой ферментированную молочную композицию, более предпочтительно кисломолочную композицию, которая имеет вязкость менее 200 мПа⋅с, более предпочтительно менее 100 мПа⋅с и наиболее предпочтительно менее 60 мПа⋅с при 10°C, при скорости сдвига в 64 с-1. В одном воплощении молочная композиция по изобретению представляет собой питьевую ферментированную молочную композицию, более предпочтительно кисломолочный напиток, такой, без ограничения, как йогурт, кефир и т.д. В альтернативном воплощении молочная композиция по изобретению представляет собой ферментированную молочную композицию, более предпочтительно кисломолочную композицию, которую можно есть ложкой.
Также предпочтительно молочная композиция, в частности ферментированная молочная композиция по изобретению или продукт по изобретению может храниться при температуре от 1°C до 10°C.
Одна порция молочной композиции, в частности ферментированной молочной композиции по изобретению, более предпочтительно кисломолочной композиции или продукта по изобретению предпочтительно составляет около 50 г, 60 г, 70 г, 75 г, 80 г, 85 г, 90 г, 95 г, 100 г, 105 г, 110 г, 115 г, 120 г, 125 г, 130 г, 135 г, 140 г, 145 г, 150 г, 200 г, 300 г или 320 г или же примерно 1 унцию, 2 унции, 3 унции, 4 унции, 5 унций, 6 унций или 12 унций по весу.
Предпочтительно молочная композиция, в частности ферментированная молочная композиция по изобретению, более предпочтительно кисломолочная композиция по изобретению содержит по меньшей мере 106, более предпочтительно по меньшей мере 107 и наиболее предпочтительно по меньшей мере 108 колониеобразующих единиц (к.о.е.) L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, предпочтительно штамма CNCM I-3689 по изобретению на 1 грамм (г) композиции по изобретению.
Терапевтическое применение
Предметом настоящего изобретения также является применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, предпочтительно штамма CNCM I-3689 или композиции, как определено выше, для изготовления лекарственного средства для поддержания или повышения разнообразия кишечной микрофлоры; и/или для профилактики или лечения дисбактериоза кишечника. Настоящим изобретением предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 для изготовления лекарственного средства для уменьшения или снижения или ускорения снижения Enterococcus faecalis. В альтернативном воплощении настоящего изобретения предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 для получения лекарственного средства для предотвращения транслокации Enterococcus faecalis через кишечный барьер и/или для профилактики внутрибрюшных инфекций Enterococcus faecalis. В следующем воплощении настоящего изобретения предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 для изготовления лекарственного средства для уменьшения или ускорения снижения устойчивых к лекарствам энтерококков, предпочтительно HiRECCs, после лечения антибиотиками. Соответственно, в одном воплощении изобретения предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689, для изготовления лекарственного средства для уменьшения или ускорения снижения устойчивых к антибиотикам Е. faecalis, как правило, в кишечнике. Как правило, такие Е. faecalis устойчивы к одному или нескольким антибиотикам, выбранным из пенициллинов, цефалоспоринов, фторхинолонов, аминогликозидов и гликопептидов.
Предметом настоящего изобретения также является применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, предпочтительно штамма CNCM I-3689 или же композиции, как определено выше, для профилактики или лечения дисбактериоза кишечника.
Настоящим изобретением предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 для лечения вызванных Enterococcus faecalis инфекций. В альтернативном воплощении настоящего изобретения предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 для лечения или предотвращения транслокации Enterococcus faecalis через кишечный барьер и/или для лечения или профилактики внутрибрюшного заражения Enterococcus faecalis. В следующем воплощении настоящего изобретения предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 для лечения устойчивых к лекарствам энтерококков, предпочтительно HiRECCs, после лечения антибиотиками. Соответственно, в одном воплощении изобретения предусмотрено применение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689, для лечения устойчивых к антибиотикам Е. faecalis, как правило, в кишечнике. Как правило, такие Е. faecalis устойчивы к одному или нескольким антибиотикам, выбранным из пенициллинов, цефалоспоринов, фторхинолонов, аминогликозидов и гликопептидов.
Предметом настоящего изобретения также является способ поддержания или повышения разнообразия кишечной микрофлоры; и/или профилактики или лечения дисбактериоза кишечника, который включает введение данному субъекту терапевтически эффективного количества L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, как определено выше, предпочтительно штамма CNCM I-3689 или композиции, как определено выше.
Определение терапевтически эффективного количества хорошо известно специалистам в данной области, особенно в свете приведенного здесь подробного описания.
Предметом настоящего изобретения также является способ изготовления лекарственного средства для поддержания или повышения разнообразия кишечной микрофлоры; и/или для профилактики или лечения дисбактериоза кишечника, который включает введение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 по меньшей мере в один фармацевтически приемлемый разбавитель, носитель или наполнитель. Настоящим изобретением предусмотрен способ изготовления лекарственного средства для уменьшения или ускорения снижения Enterococcus faecalis, который включает введение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 по меньшей мере в один фармацевтически приемлемый разбавитель, носитель или наполнитель. В альтернативном воплощении настоящего изобретения предусмотрен способ изготовления лекарственного средства для предотвращения транслокации Enterococcus faecalis через кишечный барьер и/или для профилактики внутрибрюшного заражения Enterococcus faecalis, который включает введение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 по меньшей мере в один фармацевтически приемлемый разбавитель, носитель или наполнитель. В следующем воплощении настоящего изобретения предусмотрен способ изготовления лекарственного средства для уменьшения или ускорения снижения устойчивых к лекарствам энтерококков, предпочтительно HiRECCs, после лечения антибиотиками, который включает введение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 по меньшей мере в один фармацевтически приемлемый разбавитель, носитель или наполнитель. Соответственно, в одном воплощении изобретения предусмотрен способ изготовления лекарственного средства для уменьшения или ускорения снижения устойчивых к антибиотикам Е. faecalis, как правило, в кишечнике, который включает введение L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 по меньшей мере в один фармацевтически приемлемый разбавитель, носитель или наполнитель. Как правило, такие Е. faecalis устойчивы к одному или нескольким антибиотикам, выбранным из пенициллинов, цефалоспоринов, фторхинолонов, аминогликозидов и гликопептидов.
Предпочтительно субъект для описанных выше лекарственных средств, применений и/или способов страдает дисбактериозом кишечника, а также предпочтительно дисбактериоз вызван или возник после лечения субъекта антибиотиками. Предпочтительно Enterococcus faecalis при описанных выше лекарственных средствах, применениях и/или способах находится в желудочно-кишечном тракте, более предпочтительно в кишечнике.
Дозировка
В одном воплощении настоящего изобретения предусмотрено потребление или введение дозы от 108 до 1011 колониеобразующих единиц (к.о.е.) L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689; предпочтительно от 108 до 109, более предпочтительно от 109 до 1010 колониеобразующих единиц (к.о.е.), а в альтернативном воплощении от 1010 до 1011 колониеобразующих единиц (к.о.е.) L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 для описанных здесь применений и способов. В другом воплощении предусмотрено по меньшей мере 1, 2, 3 или 4 дозы за период времени в 24 часа. Также предпочтительно, чтобы ежедневная схема дозировки сохранялась по меньшей мере в течение 1, 2, 3, 4, 5, 6 или 7 дней, а в альтернативном воплощении по меньшей мере в течение 1,2, 3, 4, 5, 6 или 7 недель.
Соответственно, в одном воплощении настоящего изобретения предусмотрено ежедневное потребление или введение по меньшей мере 1, 2, 3 или 4 порций молочной композиции, в частности ферментированной молочной композиции по изобретению, более предпочтительно кисломолочной композиции по изобретению. Каждая порция может потребляться или вводиться по отдельности или же может потребляться или вводиться по несколько порций за один раз. Каждая из таких порций может потребляться во время приема пищи или между приемами пищи (напр., в качестве закуски, после спортивных мероприятий и т.д.).
Одна порция молочной композиции, в частности ферментированной молочной композиции по изобретению, более предпочтительно кисломолочной композиции по изобретению предпочтительно составляет около 50 г, 60 г, 70 г, 75 г, 80 г, 85 г, 90 г, 95 г, 100 г, 105 г, 110 г, 115 г, 120 г, 125 г, 130 г, 135 г, 140 г, 145 г, 150 г, 200 г, 300 г или 320 г или же примерно 1 унцию, 2 унции, 3 унции, 4 унции, 5 унций, 6 унций или 12 унций по весу.
Предпочтительно композиция по изобретению содержит по меньшей мере 106, более предпочтительно по меньшей мере 107 и наиболее предпочтительно по меньшей мере 108 колониеобразующих единиц (к.о.е.) L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, еще более предпочтительно штамма CNCM I-3689 по изобретению на 1 грамм (г) композиции по изобретению. Также предпочтительно композиция по изобретению содержит по меньшей мере 1011, более предпочтительно по меньшей мере 1010 и наиболее предпочтительно по меньшей мере 109 колониеобразующих единиц (к.о.е.) бактерий L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, более предпочтительно штамма CNCM I-3689 на 1 грамм (г) композиции по изобретению.
Например, в одном воплощении настоящего изобретения предусмотрено ежедневное потребление по меньшей мере 2 или по меньшей мере 3 порций по 100 г или по 125 г кисломолочного продукта, содержащего по меньшей мере от 107 до 108 колониеобразующих единиц (к.о.е.) L. paracasei, предпочтительно подвида paracasei, более предпочтительно штамма I-3689 на 1 г продукта. В другом воплощении указанный суточный уровень потребления сохраняется на протяжении по меньшей мере 1, 2, 3, 4 и более недель.
Настоящее изобретение станет более понятным из дальнейшего описания, которое следует ниже, в котором приведены примеры, иллюстрирующие способность L. paracasei уменьшать дисбактериоз in vivo.
Краткое описание фигур
На фиг. 1 представлена схема, на которой приведена последовательность экспериментов.
На фиг. 2 представлена кинетика и уровни, определенные путем селективного высева общей популяции энтерококков из мышей, получавших суточную дозу в 0,1 мл 0,9% солевого раствора (контроль) или 109 к.о.е. пробиотического штамма в 0,1 мл 0,9% солевого раствора при введении через желудочный зонд (А); кинетика и уровни Е. faecalis штамма V583 исходно (В) и уровни Е. faecalis штамма V583 через 11 дней после прекращения приема антибиотика, что соответствует D21 (С). Эксперименты проводились в трех повторах.
На фиг. 3 представлена относительная численность представителей Actinobacteria, Bacteroidetes, Firmicutes и Proteobacteria в день 0 ("исходно"; фиг 3А) и в день 21 (забой; фиг 3В) у мышей, получавших суточную дозу в 0,1 мл 0,9% солевого раствора (контроль "C") или 109 к.о.е. пробиотического штамма (L. rhamnosus "L.r" или L. paracasei "L.p") в 0,1 мл 0,9% солевого раствора при введении через желудочный зонд.
ПРИМЕРЫ
Методы
Культивирование бактерий
Е. faecalis штамма V583 культивировали в среде М17 с добавлением 0,5% глюкозы (GM17) и собирали центрифугированием через 1 ч после достижения стационарной фазы. Бактериальные клетки дважды промывали 0,9% солевым раствором и хранили в виде сухого замороженного осадка при -80°C. Этот штамм принадлежит к СС2 и был первым устойчивым к ванкомицину изолятом, о котором сообщалось в США (Sahm et al., 1989).
Пробиотические штаммы культивировали в среде MRS и собирали, как описано выше.
По крайней мере за два дня до введения замороженные бактерии суспендировали в солевом растворе и проводили высев серийных разведений на агаровые чашки с GM17 или MRS для определения количества бактерий в осадке.
Модель колонизации Е. faecalis на мышах
Эксперименты на мышах проводили на лишенных определенных патогенов 6-8-недельных самцах мышей CF-1 (Harlan, USA). В каждой клетке размещали по 5 мышей и давали им автоклавированный корм и воду ad libitum.
Они ежедневно получали дозу в 109 к.о.е. пробиотического штамма в 0,1 мл 0,9% солевого раствора через желудочный зонд с помощью стальной питательной трубки (Ecimed). Группе Lr вводили Lactobacillus rhamnosus CNCM I-3690, а группе Lp - Lactobacillus paracasei CNCM I-3689. Животные из контрольной группы получали 0,1 мл 0,9% солевого раствора таким же способом. Через одну неделю лечения пробиотиками им вводили подкожно клиндамицин в дозе 1,4 мг/день раз в день в течение трех дней. Через день вводили 1010 колониеобразующих единиц (к.о.е.) Е. faecalis (устойчивых к ванкомицину энтерококков, отмеченных "VRE") штамма V583 в 0,1 мл 0,9% солевого раствора через желудочный зонд с помощью стальной питательной трубки (Ecimed).
Статистический анализ
Различия в количества бактерий анализировали с помощью теста Манна-Уитни (GraphPad). Различия считались значимыми при p<0,05.
Анализ микрофлоры
Брали образцы кала в D0 (исходный уровень) и D21 (забой). Экстрагировали ДНК по методике Godon et al. (Godon, 1997). Для пиросеквенирования амплифицировали участок V3-V5 гена 16S рРНК с помощью эубактериальных праймеров с тегами key (Lifesequencing S.L., Valencia, Испания) на основе схемы Sim et al., 2012. Реакции ПЦР проводили при 20 нг метагеномной ДНК, по 200 мкМ каждого из четырех дезоксинуклеозидтрифосфатов, 400 нМ каждого праймера, 2,5 ед. полимеразы FastStart HiFi в соответствующем буфере с MgCl2 от производителя (Roche, Mannheim, Германия), 4% 20 г/мл BSA (Sigma, Dorset, Великобритания) и 0,5 М бетаина (Sigma). Термический цикл состоял из начальной денатурации при 94°C в течение 2 мин с последующими 35 циклами из денатурации при 94°C в течение 20 секунд, отжига при 50°C в течение 30 секунд и наращивания при 72°C в течение 5 минут. Ампликоны объединяли в одной пробирке в эквимолярных концентрациях. Общую смесь ампликонов дважды подвергали очистке (AMPure ХР kit, Agencourt, Takeley, Великобритания), а очищенный пул снова подвергали количественному анализу методом PicoGreen (Quant-iT, PicoGreen DNA assay, Invitrogen). После этого ампликон отправляли на сервис пиросеквенирования фирмы Life Sequencing S.L. (Valencia, Испания), где проводили EmPCR, после чего проводили одностороннее пиросеквенирование на приборе 454 Life Sciences GS FLX+ (Roche) по методике Roche Amplicon Lib-L. Биоинформационный анализ проводили при помощи QIIME v. 1.6 (Caporaso, 2010). Данные относили к 50 образцам после фильтрации в соответствии со следующими критериями качества: размер от 500 до 1000 нт, качество выше 25 в окне из 50 пар оснований, не допускается рассогласования в последовательностях праймеров и штрихкода, а также отсутствие полимеров более чем в 6 нт. Остающиеся прочтения группировали в операционные таксономические единицы (OTU), определяемые по степени идентичности в 97% с помощью cd-hit (Li, 2006), и для каждого OTU проводили совмещение репрезентативных последовательностей и таксономическую привязку по базе данных Greengenes v_13_08.
Результаты
Штамм CNCM I-3689 L. paracasei способствует восстановлению разнообразия состава микрофлоры и очищению кишечника от устойчивых к ванкомицину Е. faecalis V583
Используя модель колонизации Е. faecalis, мышам ежедневно вводили перорально два пробиотических штамма L. paracasei CNCM I-3689 и L. rhamnosus CNCM I-3690, начиная за 1 неделю до лечения антибиотиками и вплоть до 2 недель после прекращения лечения антибиотиками и инокуляции VRE. Определяли общий уровень популяции энтерококков и VRE путем селективного высева. Кинетики и уровни популяции энтерококков, а также кинетики укоренения штамма VRE Е. faecalis были близкими у контрольных и получавших пробиотики мышей (А и В). Напротив, клиренс VRE значительно отличался у мышей, получавших штамм L. paracasei CNCM I-3689, по сравнению с контрольными и получавшими L. rhamnosus CNCM I-3690 мышами (В). У половины мышей, получавших L. paracasei, VRE не обнаруживались через 11 дней после прекращения обработки антибиотиками, что соответствует D21 всего эксперимента, а у другой половины уровень VRE существенно снижался по сравнению с контрольными мышами (С).
В целом эти результаты показывают, что введение L. paracasei CNCM I-3689 значительно уменьшает живучесть патогенных Е. faecalis в кишечнике. Принимая во внимание, что уменьшение колонизации кишечника или носительства после лечения антибиотиками может ограничить риски заражения и распространения VRE, L. paracasei CNCM 1-3689 является перспективным кандидатом для усиления клиренса VRE. L. paracasei CNCM I-3689 может быть частью стратегии усиления кишечного клиренса условно-патогенных микроорганизмов без применения антибиотиков после вызванного антибиотиками дисбактериоза. Чтобы выявить эффекты обработки клиндамицином + инокуляции VRE, а также введения L. paracasei CNCM I-3689 на структуру микрофлоры, проводили 454 пиросеквенирования вариабельных участков V3-V5 бактериального гена 16S рРНК в образцах кала, собранных у мышей в день D0 (исходный уровень) и D21 ("восстановление"). Анализ микрофлоры в образцах кала, взятых в D0 и D21, показал, что обработка клиндамицином приводила к резкому изменению состава микрофлоры, с преобладанием Firmicutes и в меньшей степени Proteobacteria в контрольных образцах.
Напротив, наблюдалось некоторое восстановление Bacteroidetes в группе L. paracasei (фиг. 2), а также в группе L. rhamnosus.
Claims (7)
1. Применение штамма Lactobacillus paracasei CNCM I-3689 для восстановления численности Bacteroidetes у субъекта с дисбактериозом, вызванным или являющимся следствием лечения антибиотиками указанного субъекта.
2. Применение штамма Lactobacillus paracasei CNCM I-3689 для ускорения снижения Enterococcus faecalis в микрофлоре кишечника у субъекта с дисбактериозом, вызванным или являющимся следствием лечения антибиотиками указанного субъекта.
3. Применение штамма Lactobacillus paracasei CNCM I-3689 для предотвращения транслокации Enterococcus faecalis через кишечный барьер у субъекта.
4. Применение по п. 2 или 3, где данные Enterococcus faecalis устойчивы к антибиотикам, выбранным из пенициллинов, цефалоспоринов, фторхинолонов, аминогликозидов и гликопептидов.
5. Применение по п. 2 или 3, где данные Enterococcus faecalis входят в состав клонального комплекса энтерококков высокого риска.
6. Применение Lactobacillus paracasei по любому из пп. 1-3, где данный штамм находится в принимаемой внутрь композиции.
7. Применение Lactobacillus paracasei по любому из пп. 1-3, где данный штамм находится в ферментированном молочном продукте.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/IB2014/060741 WO2015159124A1 (en) | 2014-04-15 | 2014-04-15 | Use of lactobacillus paracasei for promoting intestinal clearance of opportunistic pathogens after antibiotic dysbiosis |
| IBPCT/IB2014/060741 | 2014-04-15 | ||
| PCT/IB2015/052752 WO2015159240A1 (en) | 2014-04-15 | 2015-04-15 | Use of lactobacillus paracasei for promoting recovery of the intestinal microbiota diversity after dysbiosis |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2016144443A RU2016144443A (ru) | 2018-05-15 |
| RU2016144443A3 RU2016144443A3 (ru) | 2018-12-07 |
| RU2704133C2 true RU2704133C2 (ru) | 2019-10-24 |
Family
ID=50685996
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016144443A RU2704133C2 (ru) | 2014-04-15 | 2015-04-15 | Применение lactobacillus paracasei для усиления восстановления разнообразия кишечной микрофлоры после дисбактериоза |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US10548928B2 (ru) |
| EP (1) | EP3166619B1 (ru) |
| CN (1) | CN106604736B (ru) |
| BR (1) | BR112016023754A2 (ru) |
| CA (1) | CA2945427A1 (ru) |
| ES (1) | ES2838048T3 (ru) |
| RU (1) | RU2704133C2 (ru) |
| WO (2) | WO2015159124A1 (ru) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018220416A1 (en) * | 2017-05-31 | 2018-12-06 | Compagnie Gervais Danone | Lactobacillus paracasei strain capable of improving the immune response to a viral-bacterial coinfection |
| WO2019216662A1 (ko) | 2018-05-09 | 2019-11-14 | 주식회사 고바이오랩 | 락토바실러스 파라카제이 균주 및 그 용도 |
| CN110959865B (zh) | 2018-09-30 | 2021-07-09 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 可调节胃肠道菌群平衡的副干酪乳杆菌k56的新应用 |
| CN110964658B (zh) * | 2018-09-30 | 2021-07-06 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 一种具有免疫调节功能的副干酪乳杆菌et-22 |
| US11274275B2 (en) | 2018-09-30 | 2022-03-15 | Inner Mongolia Yili Industrial Group Co., Ltd. | Lactobacillus paracasei ET-22 and use thereof |
| US11641411B2 (en) | 2019-08-29 | 2023-05-02 | Textron Systems Corporation | Interfacing modules of a munition to a standard munition network |
| CN112869167A (zh) * | 2019-11-29 | 2021-06-01 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 副干酪乳杆菌k56提升肠道细菌感染抗性和肠道免疫力的应用 |
| CN113355252A (zh) * | 2020-03-06 | 2021-09-07 | 南京卫岗乳业有限公司 | 一种副干酪乳杆菌及其应用 |
| KR20220164594A (ko) * | 2020-04-08 | 2022-12-13 | 소마젠 인크 | 미생물총 내 항생제 유발 불균형에 대한 조성물 및 방법 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2213969C2 (ru) * | 2001-07-06 | 2003-10-10 | Уральский НИИ охраны материнства и младенчества | Способ прогнозирования неблагоприятного течения антибиотикзависимого дисбактериоза кишечника энтерококковой этиологии у новорожденных детей |
| WO2007140621A1 (en) * | 2006-06-09 | 2007-12-13 | Nutravital Inc. | Probiotic compositions and uses thereof |
| US20080206380A1 (en) * | 2004-09-24 | 2008-08-28 | Kazunari Ushida | Preventing Agent Against Drug-Resistant Bacterial Infection |
| EP2348102A1 (en) * | 2010-01-22 | 2011-07-27 | Farmapros S.p.A. | Lactobacillus paracasei strain PC201, and compositions and uses thereof |
| WO2013079994A1 (en) * | 2011-12-01 | 2013-06-06 | Compagnie Gervais Danone | Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, as an agent for inhibiting listeria monocytogenes in vivo infection |
| RU2501850C2 (ru) * | 2008-04-18 | 2013-12-20 | Компани Жервэ Данон | Штамм lactobacillus paracasei subspecies paracasei, обладающий антимикробными и иммуномодулирующими свойствами, и пищевой продукт на его основе |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1972208A1 (en) * | 2007-03-16 | 2008-09-24 | Kirin Holdings Kabushiki Kaisha | Composition for improving intestinal microflora |
| WO2011141762A1 (en) * | 2010-05-12 | 2011-11-17 | Compagnie Gervais Danone | Synergistic fermentation of lactobacillus rhamnosus and lactobacillus paracasei subsp paracasei |
-
2014
- 2014-04-15 WO PCT/IB2014/060741 patent/WO2015159124A1/en active Application Filing
-
2015
- 2015-04-15 ES ES15726317T patent/ES2838048T3/es active Active
- 2015-04-15 US US15/303,418 patent/US10548928B2/en active Active
- 2015-04-15 BR BR112016023754A patent/BR112016023754A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2015-04-15 CA CA2945427A patent/CA2945427A1/en not_active Abandoned
- 2015-04-15 EP EP15726317.9A patent/EP3166619B1/en active Active
- 2015-04-15 CN CN201580022867.XA patent/CN106604736B/zh active Active
- 2015-04-15 RU RU2016144443A patent/RU2704133C2/ru active
- 2015-04-15 WO PCT/IB2015/052752 patent/WO2015159240A1/en active Application Filing
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2213969C2 (ru) * | 2001-07-06 | 2003-10-10 | Уральский НИИ охраны материнства и младенчества | Способ прогнозирования неблагоприятного течения антибиотикзависимого дисбактериоза кишечника энтерококковой этиологии у новорожденных детей |
| US20080206380A1 (en) * | 2004-09-24 | 2008-08-28 | Kazunari Ushida | Preventing Agent Against Drug-Resistant Bacterial Infection |
| WO2007140621A1 (en) * | 2006-06-09 | 2007-12-13 | Nutravital Inc. | Probiotic compositions and uses thereof |
| RU2501850C2 (ru) * | 2008-04-18 | 2013-12-20 | Компани Жервэ Данон | Штамм lactobacillus paracasei subspecies paracasei, обладающий антимикробными и иммуномодулирующими свойствами, и пищевой продукт на его основе |
| EP2348102A1 (en) * | 2010-01-22 | 2011-07-27 | Farmapros S.p.A. | Lactobacillus paracasei strain PC201, and compositions and uses thereof |
| WO2013079994A1 (en) * | 2011-12-01 | 2013-06-06 | Compagnie Gervais Danone | Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, as an agent for inhibiting listeria monocytogenes in vivo infection |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2945427A1 (en) | 2015-10-22 |
| US20170028001A1 (en) | 2017-02-02 |
| BR112016023754A2 (pt) | 2017-08-15 |
| EP3166619B1 (en) | 2020-09-23 |
| RU2016144443A (ru) | 2018-05-15 |
| EP3166619A1 (en) | 2017-05-17 |
| WO2015159124A1 (en) | 2015-10-22 |
| US10548928B2 (en) | 2020-02-04 |
| CN106604736A (zh) | 2017-04-26 |
| WO2015159240A1 (en) | 2015-10-22 |
| RU2016144443A3 (ru) | 2018-12-07 |
| CN106604736B (zh) | 2021-01-29 |
| ES2838048T3 (es) | 2021-07-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2704133C2 (ru) | Применение lactobacillus paracasei для усиления восстановления разнообразия кишечной микрофлоры после дисбактериоза | |
| Sen | Role of probiotics in health and disease–A review | |
| Toma et al. | Probiotics as functional food: microbiological and medical aspects | |
| CN106794207A (zh) | 使用罗伊氏乳杆菌在生命早期恢复微生物群生态失调 | |
| KR102146429B1 (ko) | 비피도박테리움 아니말리스 아종 아니말리스 균주 | |
| US20170028000A1 (en) | Use of lactobacillus rhamnosus for promoting recovery of the intestinal microbiota diversity after dysbiosis | |
| BR112012011315B1 (pt) | Formulação que compreende cepa de bifidobactéria probiótica | |
| CN109069555B (zh) | 面向新生儿的用于改善脑功能的组合物 | |
| CA2810698A1 (en) | Aryl hydrocarbon receptor-activating probiotics for preventing inflammation | |
| Hickson | Examining the evidence for the use of probiotics in clinical practice | |
| JP5816273B2 (ja) | 経上皮抵抗の改善に用いるためのプロバイオティクス株 | |
| JP7261867B2 (ja) | 骨格筋遅筋化用組成物 | |
| JP2016505239A (ja) | ヘリコバクター・ピロリ感染症の治療用のストレプトコッカス・サーモフィルス株 | |
| JP5997769B2 (ja) | Ｈ．ピロリ株の上皮細胞への付着を阻害することが可能な新規のｌ．ブルガリクス株 | |
| CN110982731A (zh) | 一株具有益生特性的太空诱变植物乳杆菌st20-71及其应用 | |
| RU2546253C2 (ru) | Способ получения персонифицированного аутопробиотического продукта и способ лечения синдрома раздраженной кишки с использованием этого продукта | |
| Sherwani | Probiotics in processed dairy products and their role in gut microbiota health | |
| CN106102755B (zh) | 用于产生视黄酸的试剂 | |
| CN115137074A (zh) | 婴幼儿用排便促进剂 | |
| Stavropoulou et al. | Functions of the human intestinal microbiota in relation to functional foods | |
| Irokanulo et al. | Probiotics for Gastrointestinal Health and General Wellbeing. | |
| US20220218767A1 (en) | Blood glucose control and anti-obesity probiotics compositions in a specific selection and ratio | |
| US20230248787A1 (en) | Probiotic strain selected by targeted in vivo enrichment to aid with healthy lactose digestion | |
| GUIDESI | INTEGRATED APPROACH TO THE SELECTION OF NEW PROBIOTICS FOR HUMAN APPLICATION | |
| US20200384044A1 (en) | Method of detecting functional gastrointestinal disorder by measuring gastric flora occupancy, and gastric flora improving agent |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner |