RU2687609C1 - Гуманизированное антитело к конформационному эпитопу сз компонента комплемента человека - Google Patents
Гуманизированное антитело к конформационному эпитопу сз компонента комплемента человека Download PDFInfo
- Publication number
- RU2687609C1 RU2687609C1 RU2018119953A RU2018119953A RU2687609C1 RU 2687609 C1 RU2687609 C1 RU 2687609C1 RU 2018119953 A RU2018119953 A RU 2018119953A RU 2018119953 A RU2018119953 A RU 2018119953A RU 2687609 C1 RU2687609 C1 RU 2687609C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- complement
- activation
- seq
- monoclonal antibody
- Prior art date
Links
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 title claims abstract description 34
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 abstract description 23
- 230000037361 pathway Effects 0.000 abstract description 16
- 230000004154 complement system Effects 0.000 abstract description 9
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 11
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 101000901154 Homo sapiens Complement C3 Proteins 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 3
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical group C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000392 Zymosan Polymers 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Chemical group OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N phenylalanine group Chemical group N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002086 C-type lectin-like Human genes 0.000 description 1
- 108050009406 C-type lectin-like Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 1
- 102100025680 Complement decay-accelerating factor Human genes 0.000 description 1
- 108090000056 Complement factor B Proteins 0.000 description 1
- 102000003712 Complement factor B Human genes 0.000 description 1
- 102100030886 Complement receptor type 1 Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 102100030386 Granzyme A Human genes 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 206010056328 Hepatic ischaemia Diseases 0.000 description 1
- 101000856022 Homo sapiens Complement decay-accelerating factor Proteins 0.000 description 1
- 101000727061 Homo sapiens Complement receptor type 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001009599 Homo sapiens Granzyme A Proteins 0.000 description 1
- 101000961414 Homo sapiens Membrane cofactor protein Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 102100039373 Membrane cofactor protein Human genes 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 101710177166 Phosphoprotein Proteins 0.000 description 1
- 208000018359 Systemic autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000005784 autoimmunity Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000009429 distress Effects 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000030533 eye disease Diseases 0.000 description 1
- -1 factor D Proteins 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 201000001505 hemoglobinuria Diseases 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 102000057770 human C3 Human genes 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007124 immune defense Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 230000001314 paroxysmal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к области биотехнологии, медицине и иммунологии, в частности к антителу, связывающему компонент С3 комплемента человека и подавляющему активацию системы комплемента по альтернативному пути, и молекулам ДНК, кодирующим его легкую и тяжелую цепи. Гуманизированное антитело к конформационному эпитопу С3 компонента комплемента человека содержит вариабельную область легкой цепи по Seq ID No: 3 и вариабельную область тяжелой цепи по Seq ID No: 4. Гуманизированное моноклональное антитело не связывается с нативным С3, у которого тиоэфирная связь находится внутри молекулы, и не блокирует активацию комплемента по классическому пути. Полученное моноклональное антитело обладает в 4 раза большей ингибирующей активностью по сравнению с разработанным ранее моноклональным антителом hС34. Заявленное антитело может быть использовано для создания лекарственных препаратов, блокирующих альтернативный путь активации системы комплемента. 3 н.п. ф-лы, 4 табл., 2 пр.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности, к антителам, связывающим компонент С3 комплемента человека и подавляющих активацию системы комплемента по альтернативному пути.
Система комплемента играет важную роль в иммунной защите организма, в частности, при аутоиммунных заболеваниях и заболеваниях, связанных с воспалением тканей. Список заболеваний, связанных с активацией комплемента, включает такие аутоиммунные заболевания, как ревматоидный артрит, системная красная волчанка, васкулиты, рассеянный склероз и др. [Ballanti Е., Perricone С., Greco Е. et al. Complement and autoimmunity // Immunol Res, 2013, 56: 477-491], а также повреждения тканей после ишемии и реперфузии, хронический легочный дистресссиндром, тиреоидит, сахарный диабет, ряд глазных заболеваний и многие другие заболевания [Walport M.J. Complement // N Engl J Med 2001, 344:1058-1066]. Система включает более 30 белков, выполняющих регуляторные и иные функции. Так, повышение концентрации его компонентов С3а, С5а, С5b-9, циркулирующих в крови и других жидкостях организма в условиях острого или хронического воспаления, вызывает и поддерживает активацию нейтрофилов, моноцитов, тромбоцитов, клеток эндотелия сосудов.
Система комплемента активируется тремя различными путями: классическим, альтернативным и лектиновым. [Pyz Е., Marshall A.S.J., Gordon S., Brown G.D. C-type lectin-like receptors on myeloid cells // Annals of Medicine, 2009, 38(4):242-251]. Классический путь активируется комплексами антиген-антитело, лектиновый - узнаванием углеводных компонентов лектинами, альтернативный - связыванием С3 с распознаваемыми мотивами на поверхности патогена.
Альтернативный путь (АП) активации относится к одному из факторов врожденного иммунитета и направлен на распознавание и уничтожение патогенов, а также на клиренс клеток, погибших вследствие апоптоза, некроза, и их дериватов [Merle N.S., Church S.E., Fremeaux-Bacchi V., Roumenina L.T. Complement System Part I - Molecular Mechanisms of Activation and Regulation // Front Immunol. 2015, 6: Article 262]. Активация комплемента по альтернативному пути происходит непрерывно за счет медленного спонтанного гидролиза тиоэфирной связи в молекуле С3, в результате которой происходит изменение ее конформации и переход из неактивной формы в биоактивную форму С3(Н2О). Время существования активной формы С3(Н2O) исчисляется миллисекундами, после чего молекула превращается в неактивную форму, обозначаемую C3i, и быстро выводится из организма. Количество измененного С3 в форме С3(Н20) и/или C3i составляет 1-2% от всего циркулирующего С3 и равно приблизительно 1 мкг.
При физиологических условиях в нормальной сыворотке крови существует баланс между белками, участвующими в активации по альтернативному пути, такими как С3, фактор В, фактор D, белок Р, и регуляторными белками, такими как Н-фактор, фактор I, CD35, CD46 и CD55. Однако есть множество причин, приводящих к нарушению этого баланса. В частности, в случае генетических нарушений, связанных с мутациями в генах, ответственных за продукцию хотя бы одного из регуляторных белков, возникает нерегулируемая активация, которая приводит к атаке комплементом собственных клеток, что становится причиной серьезных болезней. Среди них хорошо изучены пароксизмальная ночная гемоглобинурия, атипический гемолитический синдром, возрастная дегенерация сетчатки глаза. Такие болезни относят к комплемент-ассоциированным болезням. Таким образом, нерегулируемая активация комплемента ведет к патологическому воспалению и тяжелым болезням [Holers V.М. Complement and Its Receptors: New Insights Into Human Disease. Annu. Rev. Immunol. 2014. 32:433-59; He S, Atkinson C, Qiao F, Cianflone K, Chen C, Tomlinson S. 2009. A complement-dependent balance between hepatic ischemia/reperfusion injury and liver regeneration in mice. J. Clin. Investig. 119:2304-16; Chen M, Daha MR, Kallenberg CG. The complement system in systemic autoimmune disease. J Autoimmun. 2010; 34:J276-86; Parkes M, Cortes A, van Heel DA, Brown MA. 2013. Genetic insights into common pathways and complex relationships among immune-mediated diseases. Nat. Rev. Genet. 14:661-73; Holers V.M. The spectrum of complement alternative pathway-mediated disease. Immunol. Rew. 2008, V. 223, P. 300-316; Mastellos DC, Ricklin D, Hajishengallis E, Hajishengallis G, Lambris JD. Complement therapeutics in inflammatory diseases: promising drug candidates for C3-targeted intervention. Mol Oral Microbiol. 2016; 31(1):3-17].
Для решения проблемы нерегулируемой активации комплемента в качестве терапевтических средств целесообразно использование искусственных блокаторов комплемента, которые способны прерывать каскад реакций активации на каком-либо из его этапов. Наиболее эффективным представляется блокирование активации альтернативного пути за счет связывания или блокирования активации активного сайта на молекуле С3, который вовлечен во взаимодействие с другими компонентами реакционной цепи на стадии инициации активации, но не экспонирован на нативной молекуле, в организме больного, например, с помощью химерных или гуманизированных антител. При этом прямая нейтрализация С3 компонента является нецелесообразной из-за его высокой концентрации в сыворотке крови.
Известно, что все последовательные превращения С3 и его дочерних компонентов, происходящие в процессе активации альтернативного пути комплемента, сопровождаются конформационными перестройками молекул, что приводит к появлению новых антигенных детерминант, так называемых неоантигенов. Были получены моноклональные антитела к некоторым неоантигенам, способные подавлять активацию альтернативного пути комплемента, в частности, мышиные, химерные и гуманизированные антитела к С3 и С3b и их функциональные фрагменты (WO 2004031240, WO 2013152024, RU 2473563, ЕА 2011101593, WO 2006012621), которые избирательно подавляют альтернативный путь активации комплемента. Однако ни одно из заявленных ранее антител до сих пор не применяется в медицинской практике в связи с недостаточной эффективностью технологии их получения.
Наиболее близкими по технической сущности к заявляемому изобретению являются разработанные ранее авторами мышиные моноклональные антитела СС3-4 и гуманизированные моноклональные антитела hC34, распознающие конформационный эпитоп (неоантиген), который обычно отсутствует в молекуле С3 и появляется при его активации по альтернативному пути. Антитело СС3-4 [RU 2584582, 2016], созданное на основе использования штамма гибридомы мыши, депонированного в коллекции РККК под номером РККК(П)764Д и продуцирующего данное антитело, специфично и с высокой аффинностью связывается с молекулой С3 компонента комплемента человека и блокирует альтернативный путь активации комплемента. Антитело hC34 [RU 2630647, 2017], созданное на основе использования штамма гибридомы мыши, депонированного в коллекции РККК под номером РККК(П)776Д и продуцирующего данное антитело, специфично и с высокой аффинностью связывается с молекулой С3 компонента комплемента человека и блокирует альтернативный путь активации комплемента.
Задачей настоящего изобретения является расширение круга антител к компоненту С3 человека, способных к ингибированию его биологической активности, путем создания нового гуманизированного антитела к конформационному эпитопу С3 компонента комплемента человека, обладающего более высокой ингибирующей активностью, гуманизированного антитела, которое может быть испытано в качестве терапевтического антитела для блокирования нерегулируемой активации системы комплемента по альтернативному пути.
Технический результат достигается созданием моноклонального гуманизированного антитела hC34m, характеризующегося наличием дополнительных мутаций в CDR-участках вариабельной области легкой и тяжелой цепей антитела hC34. Моноклональное антитело hC34m содержит участки, связывающие конформационный эпитоп С3 компонента комплемента человека (CDR-участки) мышиного моноклонального антитела СС3-4, окруженные каркасными участками IgG человека, а также константные области IgG человека; оно специфично и с высокой аффинностью связывается с молекулой С3 компонента комплемента человека и блокирует альтернативный путь активации комплемента. Заявленное антитело по сравнению с антителом hC34 содержит в качестве вариабельной области легкой цепи последовательность по Seq ID No: 3, в которой полярный незаряженный серии в позиции 55 заменен на химически подобный треонин, а глутамин в позиции 91 заменен на аспарагин, и в качестве вариабельной области тяжелой цепи последовательность по Seq ID No: 4, в которой гидрофобный фенилаланин в позиции 104 заменен на гидрофобный же валин. После мутаций достигнутая степень гуманизации составляет 91%.
Полученное моноклональное антитело узнает конформационный эпитоп (неоантиген), который обычно отсутствует в молекуле С3 и появляется при его активации по альтернативному пути. Моноклональное антитело по настоящему изобретению не связывается с нативным С3, у которого тиоэфирная связь находится внутри молекулы, изолированная от ее поверхности петлей, образованной α-цепью фрагмента молекулы и не блокирует активацию комплемента по классическому пути. Полученное моноклональное антитело обладает в 4 раза большей ингибирующей активностью по сравнению с разработанным нами ранее моноклональным антителом hC34 и, следовательно, его использование в качестве активного компонента лекарственного средства экономически более выгодно. Поскольку при введении в организм потребуется меньшее количество заявленного антитела, можно ожидать меньшую иммуногенность и снижение количества побочных эффектов по сравнению с известными антителами.
Сущность и промышленная применимость изобретения иллюстрируются следующими примерами:
Пример 1. Гуманизация вариабельных областей моноклонального антитела hC34m.
1.1. Анализ структуры антител и конструирование гуманизированного антитела к конформационному эпитопу С3-компонента комплемента человека.
Исходя из определенных нами ранее последовательностей аминокислот в вариабельных областях тяжелой (Н) и легкой (L) цепей гуманизированного антитела hC34 для повышения степени гуманизации внесены мутации в CDR-участках вариабельных областей легкой и тяжелой цепи. Места этих мутаций определены с учетом пространственного расположения и с соблюдением химического подобия заменяемых аминокислотных остатков. Так, в вариабельной области легкой цепи полярный незаряженный серии в позиции 55 заменен на химически подобный треонин, а глутамин в позиции 91 заменен на очень похожий аспарагин. В вариабельной области тяжелой цепи гидрофобный фенилаланин в позиции 104 на заменен гидрофобный же валин. После мутаций достигнутая степень гуманизации составляет 91%.
1.2. Получение генов, кодирующих вариабельные участки гуманизированного антитела к конформационному эпитопу С3-компонента комплемента человека, и содержащих их экспрессионных плазмид.
Последовательности ДНК, кодирующие вариабельные фрагменты тяжелой и легкой цепей мышиного моноклонального антитела СС3-4 были получены с помощью ПЦР на матрице кДНК, полученной из гибридомы СС3-4 (описано нами ранее в RU 2584582, 2016).
Последовательности ДНК, кодирующие вариабельные фрагменты тяжелой и легкой цепей гуманизированного антитела hC34 были получены синтетическим путем (описано нами ранее в RU 2630647, 2017).
При проектировании последовательностей триплеты нуклеотидов, кодирующие необходимые аминокислоты выбирались с учетом частоты использования кодонов в геноме китайского хомячка (Cricetulus griseus), представленной в базе codon usage database (kazusa.or.jp).
Последовательность ДНК, кодирующую сигнальный пептид легкой цепи иммуноглобулина мыши - MDFQVQIFSFLLISASVIISRG и последовательность Козак, собирали из синтетических олигонуклеотидов. В качестве источника генов константной части тяжелой и легкой цепей использовали векторы pAL-TA/IGG1const и pAL-TA/IGKconst, созданные нами ранее (RU 2550262). Дальнейшая сборка генов проводилась с помощью перекрывающей ПНР. Для легкой цепи независимо амплифицировали фрагмент, содержащий сигнальный пептид и последовательность Козак, фрагмент вариабельного участка и фрагмент константного участка, при этом использованные праймеры обеспечивали необходимое перекрывание концов соседних последовательностей. Далее цельную конструкцию амплифицировали из полученных фрагментов за два этапа перекрывающего ПЦР, после чего конечный продукт амплификации клонировали в экспрессионный вектор pIRES-DHFR [RU 2550262, 2015] по сайтам рестрикции BamHI и NotI и подтверждали соответствие полученной нуклеотидной последовательности запланированной с помощью секвенирования. Сборку тяжелой цепи проводили аналогичным способом. В первой реакции ПНР объединяли последовательности Козак, сигнального пептида и вариабельной области, а затем присоединяли константную часть тяжелой цепи и клонировали в идентичный экспрессионный вектор так же, как легкую цепь. В результате были получены экспрессионные плазмиды pID/hC34-H и pID/hC34-L2, кодирующие тяжелую и легкую цепи гуманизированного антитела hC34.
Для получения генов, кодирующих легкую цепь заявленного гуманизированного антитела hC34m, был проведен мутагенез с помощью ПЦР. В качестве матрицы использовали плазмиду pID/hC34-L2. Изменения в последовательность нуклеотидов вносили с помощью двух комплементарных праймеров длиной не менее 24 п. о., содержащих необходимые мутации. После проведения ПЦР и удаления исходной плазмиды обработкой рестриктазой DpnI реакционную смесь использовали для трансформации компетентных клеток. Из полученной колонии выделяли плазмиду и определяли наличие необходимых мутаций с помощью секвенирования. Полученную плазмиду обозначили pID/hC34m-L. Для получения генов, кодирующих тяжелую цепь заявленного гуманизированного антитела hC34m, был проведен мутагенез с помощью ПЦР. В качестве матрицы использовали плазмиду pID/hC34-H. Изменения в последовательность нуклеотидов вносили с помощью двух комплементарных праймеров длиной не менее 24 п. о., содержащих необходимую мутацию. После проведения ПЦР и удаления исходной плазмиды обработкой рестриктазой DpnI реакционную смесь использовали для трансформации компетентных клеток. Из полученной колонии выделяли плазмиду и определяли наличие необходимых мутаций с помощью секвенирования. Полученную плазмиду обозначили pID/hC34m-Н.
Нуклеотидные последовательности вариабельных участков легкой и тяжелой цепей заявленного гуманизированного антитела hC34m представлены в Seq ID No: 1 и Seq ID No: 2.
Пример 2. Анализ нейтрализующей активности гуманизированных антител hC34m к конформационному эпитопу С3 человека
Для получения аналитических образцов гуманизированного антитела hC34m культуру клеток НЕK-293 котрансфецировали смесью плазмид, кодирующих тяжелую и легкую цепь антител. В качестве плазмиды, кодирующей тяжелую цепь, использовали pID/hC34m-H, в качестве плазмиды, кодирующей легкую цепь - pID/hC34m-L. Трансфекцию выполняли в 24-луночных микротитровальных планшетах с помощью коммерческого липосомального реагента. Супернатанты для анализа собирали через 5 суток после трансфекции, затем в них определяли концентрацию иммуноглобулинов человека.
Активацию комплемента по альтернативному пути проводили в 20 мМ буфере HEPES (рН 7,2-7,4), содержащем 150 мМ NaCl, 10 мМ ЭГТА, 5 мМ MgCl2, 1 мг/мл БСА (буфер для АПК) путем инкубации сыворотки с активатором АПК зимозаном в 96-луночном планшете для ИФА. В лунки микротитровального планшета вносили по 50 мкл раствора гуманизированных антител hC34m различной концентрации и 100 мкл сыворотки крови здоровых доноров, содержащей 1М ε-аминокапроновой кислоты, разведенной в 10 раз в буфере для АПК. Молярное соотношение антител и антигена С3 в инкубационных пробах варьировало от 1:8 до 1:256. Схема расположения проб на планшете приведена в таблице 1. Планшет инкубировали при 37°С при постоянном перемешивании в течение 10 мин, после чего в ячейки вносили по 10 мкл суспензии зимозана с концентрацией 10 мг/мл, приготовленной в буфере для АПК. Для отрицательного контроля вместо зимозана вносили буфер АПК. Планшет инкубировали 1 час при температуре 37°С при постоянном перемешивании на шейкере. Активацию комплемента останавливали внесением в ячейки 10 мкл раствора, содержащего 0,2 М ЭДТА, 10 мМ PMSF. После остановки активации комплемента в пробах в каждой лунке определяли концентрацию С3а с помощью набора ИФА для определения анафилатоксина С3а комплемента человека (ООО «Цитокин») согласно инструкции производителя.
Для каждой концентрации испытуемого антитела вычисляли ингибирование (в процентах) по формуле:
где ПИ - ингибирующая активность (процент ингибирования);
А - максимальная концентрация С3а в образце, в котором проводилась активация комплемента по альтернативному пути в отсутствии антител hC34m (лунка G1);
X - концентрация С3а в образце, соответствующая определенному соотношению антиген: антитело (лунки B1-F1).
В таблицах 2-4 приведены результаты ингибирующей активности тестируемых субстанций антитела hC34m, полученные по описанной методике.
Как видно из таблиц, для тестируемых субстанций наименьшая концентрация антитела, при которой активация комплемента по альтернативному пути ингибировалась более чем на 90% (ПИ>90%), составляла не более 3,125 мкг/мл, что соответствовало 64-кратному молярному дефициту антитела по отношению к антигену и удовлетворяло установленным требованиям к качеству субстанции.
Таким образом, было получено антитело, обладающее ингибирующей активностью в концентрации по крайней мере в 4 раза меньшей, чем разработанное ранее антитело hC34.
Моноклональное антитело по настоящему изобретению может служить основой для создания лекарственных препаратов, блокирующих альтернативный путь активации системы комплемента, и потребует как минимум в 4 раза меньшего количества активной субстанции, чем ранее разработанные аналоги.
Claims (3)
1. Гуманизированное антитело к конформационному эпитопу С3 компонента комплемента человека, содержащее вариабельную область легкой цепи по Seq ID No: 3 и вариабельную область тяжелой цепи по Seq ID No: 4.
2. Последовательность ДНК, кодирующая легкую цепь гуманизированного антитела по п. 1, представленная на Seq ID No 1.
3. Последовательность ДНК, кодирующая тяжелую цепь гуманизированного антитела по п. 1, представленная на Seq ID No 2.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018119953A RU2687609C1 (ru) | 2018-05-30 | 2018-05-30 | Гуманизированное антитело к конформационному эпитопу сз компонента комплемента человека |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018119953A RU2687609C1 (ru) | 2018-05-30 | 2018-05-30 | Гуманизированное антитело к конформационному эпитопу сз компонента комплемента человека |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2687609C1 true RU2687609C1 (ru) | 2019-05-15 |
Family
ID=66578843
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018119953A RU2687609C1 (ru) | 2018-05-30 | 2018-05-30 | Гуманизированное антитело к конформационному эпитопу сз компонента комплемента человека |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2687609C1 (ru) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009114585A1 (en) * | 2008-03-12 | 2009-09-17 | Imclone Llc | Anti-tyrp1 antibodies |
| US20090280116A1 (en) * | 2007-11-13 | 2009-11-12 | Cogenesys, Inc. | Humanized antibodies against tl1a |
| RU2473563C2 (ru) * | 2007-06-07 | 2013-01-27 | Дженентек, Инк. | АНТИТЕЛА ПРОТИВ C3b И СПОСОБЫ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ СВЯЗАННЫХ С КОМПЛЕМЕНТОМ НАРУШЕНИЙ |
| RU2630647C1 (ru) * | 2016-05-27 | 2017-09-11 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов" Федерального медико-биологического агентства | ГУМАНИЗИРОВАННОЕ АНТИТЕЛО К КОНФОРМАЦИОННОМУ ЭПИТОПУ С3 КОМПОНЕНТА КОМПЛЕМЕНТА ЧЕЛОВЕКА, ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ДНК (ВАРИАНТЫ), ЭКСПРЕССИОННЫЙ ВЕКТОР, СОДЕРЖАЩИЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ДНК (ВАРИАНТЫ), И ШТАММ КЛЕТОК ЯИЧНИКОВ КИТАЙСКОГО ХОМЯЧКА CHO-humC34-ПРОДУЦЕНТ ДАННОГО ГУМАНИЗИРОВАННОГО АНТИТЕЛА |
-
2018
- 2018-05-30 RU RU2018119953A patent/RU2687609C1/ru active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2473563C2 (ru) * | 2007-06-07 | 2013-01-27 | Дженентек, Инк. | АНТИТЕЛА ПРОТИВ C3b И СПОСОБЫ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ СВЯЗАННЫХ С КОМПЛЕМЕНТОМ НАРУШЕНИЙ |
| US20090280116A1 (en) * | 2007-11-13 | 2009-11-12 | Cogenesys, Inc. | Humanized antibodies against tl1a |
| WO2009114585A1 (en) * | 2008-03-12 | 2009-09-17 | Imclone Llc | Anti-tyrp1 antibodies |
| RU2630647C1 (ru) * | 2016-05-27 | 2017-09-11 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов" Федерального медико-биологического агентства | ГУМАНИЗИРОВАННОЕ АНТИТЕЛО К КОНФОРМАЦИОННОМУ ЭПИТОПУ С3 КОМПОНЕНТА КОМПЛЕМЕНТА ЧЕЛОВЕКА, ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ДНК (ВАРИАНТЫ), ЭКСПРЕССИОННЫЙ ВЕКТОР, СОДЕРЖАЩИЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ДНК (ВАРИАНТЫ), И ШТАММ КЛЕТОК ЯИЧНИКОВ КИТАЙСКОГО ХОМЯЧКА CHO-humC34-ПРОДУЦЕНТ ДАННОГО ГУМАНИЗИРОВАННОГО АНТИТЕЛА |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| HACK C. E. et al. "Disruption of the internal thioester bond in the third component of complement (C3) results in the exposure of neodeterminants also present on activation products of C3. An analysis with monoclonal antibodies." The Journal of Immunology, 1988, 141(5): 1602-1609. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2509777C2 (ru) | Анти-mif антитела | |
| JP4804357B2 (ja) | 改変抗ｃｄ５２抗体 | |
| UA128035C2 (uk) | Антитіло, що специфічно зв'язує pd-1, і спосіб його застосування | |
| KR20200037434A (ko) | 수정된 항체 영역 및 그의 용도 | |
| Alexander et al. | The simple design of complement factor H: Looks can be deceiving | |
| US11435346B2 (en) | Antibodies binding to TLR2/TLR4-interacting immunologically active polypeptide | |
| CN107207588A (zh) | 针对tau的抗体和其用途 | |
| TW201302791A (zh) | 抗ｐｓｇｌ－１抗體及其之應用 | |
| US20240067745A1 (en) | Anti-C5 humanized monoclonal antibody with low immunogenicity and low ADCC/CDC function and its application | |
| CA2754945C (en) | Peptides and sirna for modulating inflammation | |
| JP2021513969A (ja) | Ｔｒｅｍまたはｔｒｅｍｌタンパク質を調節するための組成物および使用方法 | |
| TW201307385A (zh) | 胃腸炎症和銀屑病以及哮喘的治療 | |
| JP2021508444A (ja) | ＦｃＲｎに対する増大した親和性および少なくとも１つのＦｃフラグメント受容体に対する増大した親和性を有するＦｃフラグメントを伴う変異体 | |
| RU2009120536A (ru) | Рекомбинантные антитела против васкулярного эндотелиального фактора роста (vegf) | |
| BR112020004846A2 (pt) | anticorpos de cadeia pesada que se ligam a ectoenzimas | |
| KR20220036941A (ko) | 암 및 기타 질환의 치료를 위한 알파3베타1 인테그린 표적화 | |
| CN110022898A (zh) | 用多价Fc化合物治疗炎性疾病的方法 | |
| EA012567B1 (ru) | Нуклеиновая кислота, кодирующая il-32, белок il-32, антитело к il-32 и способы применения белка и антитела | |
| JP2010524475A (ja) | オステオポンチンの機能エピトープ、それと特異的に結合するモノクローナル抗体及び用途 | |
| JP2017505763A (ja) | 生物学的材料およびその治療用途 | |
| US20220144938A1 (en) | Identification and targeting of tumor promoting carcinoma associated fibroblasts for diagnosis and treatment of cancer and other diseases | |
| RU2687609C1 (ru) | Гуманизированное антитело к конформационному эпитопу сз компонента комплемента человека | |
| JP2013048621A (ja) | 免疫関連疾患の治療のための組成物と方法 | |
| RU2741802C2 (ru) | АНТИТЕЛО К Myl9 | |
| RU2630647C1 (ru) | ГУМАНИЗИРОВАННОЕ АНТИТЕЛО К КОНФОРМАЦИОННОМУ ЭПИТОПУ С3 КОМПОНЕНТА КОМПЛЕМЕНТА ЧЕЛОВЕКА, ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ДНК (ВАРИАНТЫ), ЭКСПРЕССИОННЫЙ ВЕКТОР, СОДЕРЖАЩИЙ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ДНК (ВАРИАНТЫ), И ШТАММ КЛЕТОК ЯИЧНИКОВ КИТАЙСКОГО ХОМЯЧКА CHO-humC34-ПРОДУЦЕНТ ДАННОГО ГУМАНИЗИРОВАННОГО АНТИТЕЛА |