RU2680539C2 - Способ активации хелперных т-клеток и композиция для применения в данном способе - Google Patents
Способ активации хелперных т-клеток и композиция для применения в данном способе Download PDFInfo
- Publication number
- RU2680539C2 RU2680539C2 RU2014104572A RU2014104572A RU2680539C2 RU 2680539 C2 RU2680539 C2 RU 2680539C2 RU 2014104572 A RU2014104572 A RU 2014104572A RU 2014104572 A RU2014104572 A RU 2014104572A RU 2680539 C2 RU2680539 C2 RU 2680539C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hla
- peptide
- drb1
- cancer
- molecule
- Prior art date
Links
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 103
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 68
- 230000004913 activation Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 20
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 245
- 101150084041 WT1 gene Proteins 0.000 claims abstract description 234
- 102000040856 WT1 Human genes 0.000 claims abstract description 228
- 108700020467 WT1 Proteins 0.000 claims abstract description 228
- 102100040485 HLA class II histocompatibility antigen, DRB1 beta chain Human genes 0.000 claims abstract description 168
- 108010039343 HLA-DRB1 Chains Proteins 0.000 claims abstract description 168
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 68
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims abstract description 46
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims abstract description 33
- 108010029618 HLA-DPB1*05:01 antigen Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 108010076599 HLA-DPB1*09:01 antigen Proteins 0.000 claims abstract description 18
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 108010083312 T-Cell Antigen Receptor-CD3 Complex Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 76
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 69
- 108010024996 HLA-DRB1*04:05 antigen Proteins 0.000 claims description 19
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 12
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 11
- PFBPIHUEFUNOIS-DVQPEGLTSA-N (2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-carbamimidamido-2-[[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]amino]pentanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]hexanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](Cc1c[nH]cn1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@H](Cc1ccc(O)cc1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]cn1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]cn1)C(O)=O PFBPIHUEFUNOIS-DVQPEGLTSA-N 0.000 claims description 7
- 208000019691 hematopoietic and lymphoid cell neoplasm Diseases 0.000 claims description 7
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 6
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 claims description 6
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 claims description 6
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 claims description 6
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 6
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 6
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 claims description 6
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 claims description 6
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 6
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 claims description 6
- 208000002495 Uterine Neoplasms Diseases 0.000 claims description 6
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 6
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 claims description 6
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 102100031618 HLA class II histocompatibility antigen, DP beta 1 chain Human genes 0.000 abstract description 5
- 108010045483 HLA-DPB1 antigen Proteins 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 102210010945 HLA-DRB1*0901 Human genes 0.000 description 62
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 31
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 30
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 22
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 21
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 20
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 17
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 12
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 12
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 11
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 11
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 11
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 9
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 9
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 9
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 7
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 7
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 7
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 7
- 101800000324 Immunoglobulin A1 protease translocator Proteins 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 5
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 5
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 5
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 5
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 5
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 5
- 101001100327 Homo sapiens RNA-binding protein 45 Proteins 0.000 description 4
- 102100038823 RNA-binding protein 45 Human genes 0.000 description 4
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 3
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 3
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 3
- 208000034176 Neoplasms, Germ Cell and Embryonal Diseases 0.000 description 3
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 3
- 201000003115 germ cell cancer Diseases 0.000 description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 3
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 210000004910 pleural fluid Anatomy 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 2
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- 108010029657 HLA-DRB1*04:01 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 101000621309 Homo sapiens Wilms tumor protein Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 1
- 108700025700 Wilms Tumor Genes Proteins 0.000 description 1
- 208000008383 Wilms tumor Diseases 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 238000009640 blood culture Methods 0.000 description 1
- KQNZDYYTLMIZCT-KQPMLPITSA-N brefeldin A Chemical compound O[C@@H]1\C=C\C(=O)O[C@@H](C)CCC\C=C\[C@@H]2C[C@H](O)C[C@H]21 KQNZDYYTLMIZCT-KQPMLPITSA-N 0.000 description 1
- JUMGSHROWPPKFX-UHFFFAOYSA-N brefeldin-A Natural products CC1CCCC=CC2(C)CC(O)CC2(C)C(O)C=CC(=O)O1 JUMGSHROWPPKFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 102000046004 human WT1 Human genes 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 238000002826 magnetic-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 201000008026 nephroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008823 permeabilization Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
- G01N33/5047—Cells of the immune system
- G01N33/505—Cells of the immune system involving T-cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4748—Tumour specific antigens; Tumour rejection antigen precursors [TRAP], e.g. MAGE
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/82—Translation products from oncogenes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001152—Transcription factors, e.g. SOX or c-MYC
- A61K39/001153—Wilms tumor 1 [WT1]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464452—Transcription factors, e.g. SOX or c-MYC
- A61K39/464453—Wilms tumor 1 [WT1]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55516—Proteins; Peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к активации хелперных Т-клеток, которые специфичны к пептиду WT1, и может быть использовано в медицине для индукции иммунного ответа против WT1-экспрессирующей злокачественной опухоли. Способ активации хелперных Т-клеток включает приведение антиген-презентирующей клетки, положительной по меньшей мере по одной из HLA-DRB1*1501, HLA-DPB1*0901 и HLA-DPB1*0501, в контакт с пептидом WT1 с SEQ ID NO: 2, способным связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, HLA-DPB1*0901 и HLA-DPB1*0501. Изобретение позволяет получить хелперные Т-клетки, экспрессирующие комплекс TCR-CD3, который распознает комплекс пептида WT1 и молекулы HLA, выбранной из HLA-DRB1*1501, HLA-DPB1*0901 и HLA-DPB1*0501. 4 н. и 15 з.п. ф-лы, 10 ил., 4 пр.
Description
Область техники
Настоящее изобретение относится к способу активации хелперных Т-клеток, включающему добавление пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам и, посредством этого, активации хелперных Т-клеток, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501, и композиции для этого, фармацевтической композиции для лечения и/или профилактики рака путем активации хелперных Т-клеток и им подобных.
Предшествующий уровень техники
Ген WT1 (ген опухоли Вильмса 1) был идентифицирован как ген, ответственный за опухоль Вильмса, которая представляет собой почечный рак у детей (непатентные документы 1 и 2). WT1 представляет собой транскрипционный фактор, имеющий цинковую пальцевую структуру. В начале, ген WT1 считали геном, подавляющим опухоль. Однако последующие стадии (непатентные документы 3, 4, 5 и 6) показали, что ген WT1 скорее функционирует в качестве онкогена в гематопоэтических опухолях и солидных формах рака.
Было показано, что Т-лимфоциты, специфичные для пептида WT1 (CTL), могут быть индуцированы стимуляцией in vitro мононуклеарных клеток периферической крови пептидом WT1, и такой CTL повреждает раковые клетки, такие как гематопоэтические опухолевые клетки и клетки солидного рака, которые эндогенно экспрессируют WT1. CTL распознает пептид WT1 в виде формы комплекса, в котором пептид WT1 связывается с молекулой класса I MHC (главного комплекса тканевой совместимости). Поэтому, такой пептид WT1 отличается в зависимости от подтипов класса I MHC (патентный документ 1, непатентный документ 7 и патентные документы 2, 3 и 4).
Существование хелперных Т-клеток, специфичных для ракового антигена, важно для эффективной индукции CTL (непатентный документ 8). Хелперные Т-клетки индуцируются и активируются путем распознавания комплекса молекулы класса II MHC и антигенного пептида на антиген-презентирующих клетках. Активированные хелперные Т-клетки продуцируют цитокин, такой как IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, или интерферон для содействия росту, дифференциации или созреванию В-клетки. Активированные хелперные Т-клетки выполняют функцию содействия росту, дифференциации или созреванию других субпопуляций Т-клеток (например, клетки Tc и TD). Таким образом, Т-клетки несут функцию активации иммунной системы содействием росту или активации В-клеток или Т-клеток. Поэтому, считается полезным усиление функции хелперных Т-клеток посредством антигенного пептида, связывающего класс II MHC (хелперного пептида) при иммунотерапии рака, для увеличения эффекта противораковой вакцины (непатентный документ 9). К настоящему времени, только пептид, связывающийся с молекулой HLA-DRB1*0401 (непатентный документ 10), пептид, связывающийся с молекулой HLA-DRB1*0405, и пептид, связывающийся с молекулой HLA-DRB1*1502 (патентный документ 5), были обнаружены в качестве хелперного пептида. Поэтому, имеется потребность в обнаружении пептидов, каждый из которых связывается с молекулой HLA-DRB1*1501, HLA-DRB1*0901 или HLA-DRB1*0501.
Кроме того, было показано, что среди хелперных пептидов, имеется перспективный хелперный пептид, который может связываться с множеством молекул класса II MHC и индуцировать хелперные Т-клетки (непатентные документы 11 и 12). Однако было очень трудно идентифицировать перспективный хелперный пептид, который связывается с тремя или более типами молекул класса II MHC, и оказывает достаточный эффект.
Патентный документ 1: WO 2003/106682
Патентный документ 2: WO 2005/095598
Патентный документ 3: WO 2007/097358
Патентный документ 4: международная заявка на патент № PCT/JP2007/074146
Патентный документ 5: WO 2005/045027
Непатентный документ 1: Daniel A. Haber et al., Cell. 1990 Jun 29;61(7):1257-69.
Непатентный документ 2: Call KM et al., Cell. 1990 Feb 9;60(3):509-20.
Непатентный документ 3: Menke AL et al., Int Rev Cytol. 1998;181:151-212. Review.
Непатентный документ 4: Yamagami T et al., Blood. 1996 Apr 1;87(7):2878-84.
Непатентный документ 5: Inoue K et al., Blood. 1998 Apr 15;91(8):2969-76.
Непатентный документ 6: Tsuboi A et al., Leuk Res. 1999 May;23(5):499-505.
Непатентный документ 7: Oka Y et al., Immunogenetics. 2000 Feb;51(2):99-107.
Непатентный документ 8: Gao FG et al., Cancer Res. 2002 Nov 15;62(22):6438-41.
Непатентный документ 9: Zeng G, J Immunother. 2001 May;24(3):195-204
Непатентный документ 10: Knights AJ et al., Cancer Immunol Immunother. 2002 Jul;51(5):271-81.
Непатентный документ 11: Sotiriadou R et al., Br J Cancer. 2001 Nov 16;85(10):1527-34.
Непатентный документ 12: Hural JA et al., J Immunol. 2002 Jul 1;169(1):557-65
Описание изобретения
Проблемы, подлежащие решению изобретением
Проблемы, решаемые изобретением, представляют собой: предоставление способа активации хелперных Т-клеток пептидом WT1, который способен связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DRB1*0901 или молекулой HLA-DRB1*0501, и композиции для достижения этого, а также фармацевтической композиции для лечения и/или профилактики рака путем активации хелперных Т-клеток и тому подобного.
Средства для решения указанных проблем
В результате интенсивных исследований в связи с описанной выше ситуацией, заявитель обнаружил, что среди пептидов WT1, которые связываются с молекулой HLA-DRB1*0405 и молекулой HLA-DRB1*1502, пептид WT1, имеющий аминокислотную последовательность: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His, также связывается с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DRB1*0901 и молекулой HLA-DRB1*0501. Таким образом, было создано настоящее изобретение.
Настоящее изобретение предоставляет:
(1) способ активации хелперных Т-клеток, включающий добавление пептида WT1 к антиген-презентирующей клетке и, посредством этого, активацию хелперных Т-клеток, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501;
(2) способ по п.(1), где пептид WT1 способен связываться, по меньшей мере, с двумя из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501;
(3) способ по п.(1) или (2), где пептид WT1, кроме того, способен связываться с молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*1502;
(4) способ по любому из пп.(1)-(3), где пептид WT1 способен связываться, по меньшей мере, с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DRB1*0901, молекулой HLA-DRB1*0501, молекулой HLA-DRB1*0405 и молекулой HLA-DRB1*1502;
(5) способ по любому из пп.(1)-(4), где пептид WT1 представляет собой пептид, содержащий аминокислотную последовательность: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His (SEQ ID NO: 2);
(6) способ по любому из пп.(1)-(5), где добавление пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам осуществляется добавлением пептида WT1, добавлением вектора экспрессии, содержащего полинуклеотид, кодирующий пептид WT1, или добавлением клеток, включающих вектор экспрессии;
(7) композиция для активации хелперных Т-клеток добавлением пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам, содержащим пептид WT1, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501;
(8) способ лечения или профилактики рака у субъекта, включающий добавление пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам и, посредством этого, активацию хелперных Т-клеток, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501;
(9) фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака активацией хелперных Т-клеток добавлением пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам, содержащим пептид WT1, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501;
(10) антитело, специфически связывающееся с пептидом WT1, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501;
(11) способ определения присутствия или количества пептида WT1 у любого из HLA-DRB1*1501-положительного, HLA-DRB1*0901-положительного и HLA-DRB1*0501-положительного субъекта, включающий:
(а) взаимодействие анти-WT1 антитела с образцом от субъекта; и
(b) определение присутствия или количества анти-WT1 антитела, специфически связывающегося с пептидом WT1, содержащимся в образце;
(12) способ лечения или профилактики рака, включающий добавление пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам и, посредством этого, активацию хелперных Т-клеток, и введение субъекту активированных хелперных Т-клеток, где пептид WT1 способен связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DRB1*0901 или молекулой HLA-DRB1*0501;
(13) фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака, содержащая хелперные Т-клетки, активированные добавлением пептида WT1, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501;
(14) способ определения присутствия или количества WT1-специфичных хелперных Т-клеток у любого из HLA-DRB1*1501-положительного, HLA-DRB1*0901-положительного и HLA-DRB1*0501-положительного субъекта, включающий:
(а) взаимодействие комплекса пептида WT1 антитела и молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 или молекулы HLA-DRB1*0501 с образцом от субъекта; и
(b) определение присутствия или количества хелперных Т-клеток, распознающих комплекс, содержащийся в образце; и
(15) способ определения присутствия или количества WT1-специфичных хелперных Т-клеток у HLA-DRB1*1501-положительного, HLA-DRB1*0901-положительного, HLA-DRB1*0501-положительного, HLA-DRB1*0405-положительного или HLA-DRB1*1502-положительного субъекта, включающий:
(а) стимуляцию мононуклеарных клеток периферической крови, инвазивных лимфоцитов, опухолевых клеток, клеток в асцитической жидкости, клеток в плевральной жидкости, клеток в спинномозговой жидкости, клеток костного мозга или клеток лимфоузлов пептидом WT1; и
(b) определение продукции цитокина или реакции хелперных Т-клеток,
где присутствие или увеличение количества продуцируемого цитокина или реакции хелперных Т-клеток указывает на присутствие или количество WT1-специфических хелперных Т-клеток.
Эффекты изобретения
Настоящее изобретение предоставляет способ активации хелперных Т-клеток пептидом WT1, который связывается с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DRB1*0901, молекулой HLA-DRB1*0501; молекулой HLA-DRB1*0405 и молекулой HLA-DRB1*1502, и композицию для этого, а также фармацевтическую композицию для лечения и/или профилактики рака активацией хелперных Т-клеток и тому подобное. Поэтому можно активировать in vivo и in vitro хелперные Т-клетки у субъекта, имеющего любую из таких молекул II класса MHC, для лечения и профилактики рака. Ввиду того, что 90% населения Японии охвачено пятью типами подклассов II класса MHC, хелперные Т-клетки могут активироваться для лечения и/или профилактики рака у очень широкого диапазона субъектов.
Краткое описание фигур
На фиг.1 показан график, который представляет количество IFN-γ, продуцируемого клетками ТА28.1. На чертеже продольная ось представляет концентрацию IFN-γ (пкг/мл). Графики соответствуют «случаю культивирования мононуклеарных клеток периферической крови от HLA-DRB1*1501-положительного субъекта в отсутствие пептида WT1», «случаю культивирования клеток ТА28.1 в присутствии пептида WT1 (черные столбцы)», «случаю культивирования мононуклеарных клеток периферической крови от HLA-DRB1*1501-положительного субъекта в отсутствие пептида WT1», «случаю культивирования мононуклеарных клеток периферической крови от HLA-DRB1*1501-отрицательного субъекта в присутствии пептида WT1», соответственно, начиная слева.
На фиг.2 показан график, представляющий количества IFN-γ, IL-4 и IL-10, продуцируемые клетками ТА28.1. На чертеже продольная ось представляет концентрацию (пкг/мл). Графики соответствуют величинам IFN-γ, IL-4 и IL-10, начиная слева.
На фиг.3 показан график, представляющий количества IFN-γ, IL-4 и IL-10, продуцируемые клетками Е15.2. На чертеже продольная ось представляет концентрацию (пкг/мл). Графики соответствуют величинам IFN-γ, IL-4 и IL-10, начиная слева.
На фиг.4 представлена продукция IFN-γ и IL-17 HLA-DPB1*0501/*0501-положительными мононуклеарными клетками. На чертеже горизонтальная ось представляет IFN-γ, а продольная ось представляет IL-17. На фиг.4а представлены клетки без стимуляции пептидом WT1, а на фиг.4b представлены клетки, стимулированные пептидом WT1.
На фиг.5 показан график, который представляет рост Т-клеток ТА28.1. На чертеже продольная ось представляет имп/мин (×104). Графики соответствуют «случаю совместного культивирования клеток ТА28.1 с мононуклеарными клетками периферической крови без пульсирующего воздействия пептидом WT1», «случаю совместного культивирования клеток ТА28.1 с мононуклеарными клетками периферической крови с пульсирующим воздействием пептидом WT1 (черные столбцы)», «случаю культивирования клеток ТА28.1 с мононуклеарными клетками периферической крови при пульсирующем воздействии пептидом WT1 в присутствии антитела против I класса МНС», «случаю совместного культивирования клеток ТА28.1 с мононуклеарными клетками периферической крови с пульсирующим воздействием пептидом WT1 в присутствии анти-HLA-DR антитела (заштрихованные столбцы)», «случаю совместного культивирования клеток ТА28.1 с мононуклеарными клетками периферической крови с пульсирующим воздействием пептидом WT1 в присутствии анти-HLA-DQ антитела», «случаю совместного культивирования клеток ТА28.1 с мононуклеарными клетками периферической крови с пульсирующим воздействием пептидом WT1 в присутствии анти-HLA-DP антитела», начиная слева.
На фиг.6 показан график, который представляет рост Т-клеток Е15.2. На чертеже продольная ось представляет имп/мин (×104). Графики соответствуют «случаю совместного культивирования клеток Е15.2 с мононуклеарными клетками периферической крови от HLA-DPB1*0901-положительного субъекта без пульсирующего воздействия пептидом WT1», «случаю совместного культивирования клеток Е15.2 с мононуклеарными клетками периферической крови от HLA-DPB1*0901-положительного субъекта с пульсирующим воздействием пептидом WT1 (черные столбцы)», «случаю совместного культивирования клеток Е15.2 с мононуклеарными клетками периферической крови от HLA-DPB1*0901-отрицательного субъекта без пульсирующего воздействия пептидом WT1», «случаю совместного культивирования клеток Е15.2 с мононуклеарными клетками периферической крови от HLA-DPB1*0901-отрицательного субъекта с пульсирующим воздействием пептидом WT1», начиная слева.
На фиг.7 показан график, который представляет рост Т-клеток Е15.2. На чертеже продольная ось представляет имп/мин. Графики соответствуют «случаю совместного культивирования клеток Е15.2 с мононуклеарными клетками периферической крови без пульсирующего воздействия пептидом WT1», «случаю совместного культивирования клеток Е15.2 с мононуклеарными клетками периферической крови с пульсирующим воздействием пептидом WT1 (черные столбцы)», «случаю совместного культивирования клеток Е15.2 с мононуклеарными клетками периферической крови с пульсирующим воздействием пептидом WT1 в присутствии антитела против I класса МНС», «случаю совместного культивирования клеток Е15.2 с мононуклеарными клетками периферической крови с пульсирующим воздействием пептидом WT1 в присутствии анти-HLA-DR антитела», «случаю совместного культивирования клеток Е15.2 с мононуклеарными клетками периферической крови с пульсирующим воздействием пептидом WT1 в присутствии анти-HLA-DQ антитела», и «случаю совместного культивирования клеток Е15.2 с мононуклеарными клетками периферической крови с пульсирующим воздействием пептидом WT1 в присутствии анти-HLA-DP антитела (заштрихованные столбцы)», начиная слева.
На фиг.8 показан график, представляющий рост HLA-DPB1*0501/*0501-положительных мононуклеарных клеток. На чертеже горизонтальная ось представляет имп/мин. Графики соответствуют слева направо «случаю без стимуляции пептидом WT1» и «случаю со стимуляцией пептидом WT1».
На фиг.9 представлено, что рост HLA-DPB1*0501/*0501-положительных мононуклеарных клеток подавляется анти-HLA-DP антителами. На чертеже горизонтальная ось представляет имп/мин. Графики соответствуют слева направо «случаю без стимуляции пептидом WT1», «случаю со стимуляцией контрольным пептидом из ВИЧ», «случаю со стимуляцией пептидом WT1», «случаю со стимуляцией пептидом WT1 в присутствии анти-HLA-DR антитела», «случаю со стимуляцией пептидом WT1 в присутствии анти-HLA-DQ антитела» и «случаю со стимуляцией пептидом WT1 в присутствии анти-HLA-DR антитела».
На фиг.10 показан график, который представляет рост Т-клеток Е15.2 в случаях использования различной концентрации пептида WT1. На чертеже продольная ось соответствует имп/мин (×104), а горизонтальная ось представляет концентрацию пептида WT1.
Лучший способ осуществления изобретения
В одном аспекте, настоящее изобретение относится к способу активации хелперных Т-клеток, включающему добавление пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам и, посредством этого, активации хелперных Т-клеток, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501. В настоящем изобретении, пептид WT1 относится к пептиду, состоящему из части аминокислотной последовательности человеческого белка WT1, показанного в SEQ ID NO: 1, пептида, который имеет замещение, модификацию или делецию одной или нескольких аминокислот в аминокислотной последовательности и способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501, или пептид, в котором различные вещества, такие как аминокислота, пептид или его аналог могут быть присоединены на N-конце и/или С-конце пептида. Вещество может быть переработано, например, ферментом в живом организме посредством процесса, такого как внутриклеточная переработка, и, наконец, пептид WT1 становится формой, которая может связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501. Вещество может представлять собой вещество, которое модулирует растворимость пептида WT1 по настоящему изобретению или увеличивает его устойчивость (резистентность к протеазе и т.д.). Альтернативно, оно может представлять собой вещество, которое специфически доставляет пептид WT1 по настоящему изобретению, например, к данной ткани или органу, или увеличивает эффективность захвата антиген-презентирующими клетками или тому подобное. Альтернативно, оно может представлять собой пептид WT1, который ограничивается тем же типом молекулы I класса МНС, что и у субъекта, от которого получены антиген-презентирующие клетки.
Пептид WT1 по настоящему изобретению способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501. Таким образом, пептид WT1 может представлять собой пептид, который способен связываться, по меньшей мер, с двумя из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501, или пептид, который способен связываться с молекулой HLA-DRB1*1501 и/или молекулой HLA-DRB1*0901 и/или молекулой HLA-DRB1*0501, и молекулой II класса HLA, отличной от них, например, пептид, который способен связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*1502, пептид, который способен связываться с молекулой HLA-DRB1*0901, молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*0502, пептид, который способе связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*1502, или пептид, который способен связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DRB1*0901, молекулой HLA-DRB1*0501, молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*1502. Ввиду того, что пептид WT1, имеющий аминокислотную последовательность: Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His (SEQ ID NO: 2) способен связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DRB1*0901 и молекулой HLA-DRB1*0501, молекулой HLA-DRB1*0405 и молекулой HLA-DRB1*1502, предпочтителен пептид WT1, имеющий такую аминокислотную последовательность. В целом, пептид, связывающий II класс MHC. Поэтому, пептид WT1 предпочтительно имеет аминокислотную последовательность, состоящую из 10-25 аминокислот.
Пептид WT1 по настоящему изобретению может быть синтезирован способами, в целом используемыми в настоящей области, или их модификациями. Такие способы описаны, например, в Peptide Synthesis, Interscience, New York, 1966; The Proteins, Vol 2, Academic Press Inc., New York, 1976; Peptide-Gosei, Maruzen Co., Ltd., 1975; Peptide-Gosei No Kiso To Jikken, Maruzen Co., Ltd., 1985; и Iyakuhin No Kaihatsu (Zoku), Vol. 14, Peptide-Gosei, Hirokawa - Book store, 1991.
Пептид WT1 по настоящему изобретению может быть также получен с использованием методик генетической инженерии, основанных на сведениях о нуклеотидной последовательности, которая кодирует пептид WT1. Такие методики генетической инженерии хорошо известны специалисту в данной области.
Антиген-презентирующие клетки относятся к клеткам, таким как дендритные клетки, которые могут представлять пептид WT1 вместе с молекулой II класса МНС хелперных Т-клеток или им подобных. Таким образом, субъект, у которого получены антиген-презентирующие клетки, должен иметь такой же подкласс II класса МНС (например, HLA-DRB1*1501, HLA-DRB1*0901, HLA-DRB1*0501, HLA-DRB1*0405 или HLA-DRB1*1502), как тот, с которым связывается добавленный пептид WT1.
В целом, хелперные Т-клетки активируются распознаванием пептида антигена посредством молекулы II класса МНС на поверхности антиген-презентирующих клеток комплексом TCR-CD3 на поверхности Е-клеток, и стимуляции интегрина на поверхности Т-клеток лигандом интегрина на поверхности антиген-презентирующих клеток. В настоящем изобретении, активация хелперных Т-клеток охватывает не только активацию хелперных Т-клеток, но также индукцию и рост хелперных Т-клеток. Как описано выше, активированные хелперные Т-клетки выполняют функцию активации иммунной системы увеличением индукции, роста или активации В-клеток или Т-клеток. Таким образом, способ активации хелперных Т-клеток по настоящему изобретению может использоваться в качестве адъювантной терапии при лечении рака или ему подобных заболеваний. Альтернативно, хелперные Т-клетки, активированные in vitro с использованием способа по настоящему изобретению, могут использоваться для лечения или профилактики рака или ему подобного заболевания, или могут использоваться в качестве адъювантной терапии при них. Активацию хелперных Т-клеток можно определить измерением количества продуцируемого или секретируемого цитокина, такого как интерферон и интерлейкин, и им подобных.
Добавление пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам может осуществляться непосредственно добавлением пептида WT1, или косвенно добавлением вектора экспрессии, содержащего полинуклеотид, кодирующий пептид WT1, или добавлением клеток, содержащих вектор экспрессии. Вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид, кодирующий пептид WT1, и клетки, содержащие вектор экспрессии, могут быть получены способом, хорошо известным специалисту в данной области.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к композиции для активации хелперных Т-клеток добавлением пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам, содержащим пептид WT1, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501. Когда композиция по настоящему изобретению вводится DRB1*1501, HLA-DRB1*0901 или HLA-DRB1*0501-полоджительному субъекту, иммунная система у субъекта активируется путем активации хелперных Т-клеток у субъекта. Ген WT1 экспрессирован на высоких уровнях при различных формах рака и опухолей, включая гемопоэтические опухоли, такие как лейкоз, миелодиспластический синдром, множественная миелома или злокачественная лимфома, и солидные формы рака, такие как рак желудка, рак ободочной кишки, рак легких, рак молочной железы, зародышевоклеточный рак, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, рак матки, рак шейки матки или рак яичников. Поэтому, композицию по настоящему изобретению можно использовать в качестве адъювантной терапии при лечении или профилактике рака. Альтернативно, хелперные Т-клетки, активированные с использованием композиции по настоящему изобретению, можно использовать, например, в качестве адъюванта при лечении рака.
Как описано выше, пептид WT1 по настоящему изобретению может представлять собой пептид, который способен связываться, по меньшей мере, с двумя из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501, или пептид, который способен связываться с молекулой HLA-DRB1*1501 и/или молекулой HLA-DRB1*0901 и/или молекулой HLA-DRB1*0501, и молекулой II класса МНС, отличной от них. Таким образом, пока антиген-презентирующие клетки получены у субъекта, положительного по подклассу II класса МНС, с которым может связываться пептид WT1 по настоящему изобретению, может быть получен эффект активации хелперных Т-клеток композиции по настоящему изобретению.
Композиция по настоящему изобретению может содержать, в дополнение к пептиду WT1, например, носитель, эксципиент, добавку или им подобный ингредиент. Ввиду того, что пептид WT1, содержащийся в композиции по настоящему изобретению, активирует хелперный пептид специфично для пептида WT1, композиция может содержать пептид WT1, ограниченный I классом МНС, или может использоваться с эти пептидом.
Способ применения композиции по настоящему изобретению может быть соответствующим образом выбран, в зависимости от таких условий как желательная активация хелперных Т-клеток, состояние антиген-презентирующей клетки. Примеры таких способов включают без ограничения внутрикожное введение, подкожное введение, внутримышечное введение, внутривенное введение, интраназальное введение и пероральное введение, добавление к культуральной среде антиген-презентирующей клетки. Количество пептида WT1, содержащегося в композиции по настоящему изобретению, а также форма, количество раз применения композиции по настоящему изобретению и тому подобное, можно соответствующим образом выбрать, в зависимости от таких условий как желательная активация хелперных Т-клеток, состояние антиген-презентирующей клетки.
В еще одном аспекте, настоящее изобретение относится к композиции для активации хелперных Т-клеток добавлением пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам, содержащим вектор экспрессии, включающий полинуклеотид, кодирующий пептид WT1, клеткам, содержащим вектор экспрессии, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501. Вектор экспрессии, включающий полинуклеотид, кодирующий пептид WT1, и клетки, содержащие вектор экспрессии, описаны выше.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к применению вектора экспрессии, содержащему полинуклеотид, кодирующий пептид WT1, и клеткам, содержащим вектор экспрессии, для получения композиции.
В еще одном аспекте, настоящее изобретение относится к набору для активации хелперных Т-клеток добавлением пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам, содержащему пептид WT1, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501. Предпочтительно, набор применяется в способе активации хелперных Т-клеток. Набор по настоящему изобретению может содержать, в дополнение к пептиду WT1, например, средство для получения антиген-презентирующих клеток, средство для определения активности хелперных Т-клеток или им подобное. В целом, к набору приложено руководство по применению. Путем применения набора по настоящему изобретению, можно эффективно индуцировать хелперные Т-клетки.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к набору для активации хелперных Т-клеток добавлением пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам, содержащим вектор экспрессии, включающему полинуклеотид, кодирующий пептид WT1, или клетки, содержащие вектор экспрессии, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к способу лечения или профилактики рака у субъекта, включающему добавление пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам и, посредством этого, активацию хелперных Т-клеток, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501. Способ по настоящему изобретению представляет собой способ, при котором иммунная система у субъекта активируется активацией хелперных Т-клеток и происходит лечение или предотвращение рака у субъекта. Добавление пептида WT1 к антиген-презентирующим клеткам может осуществляться непосредственно добавлением пептида WT1, или косвенно добавлением вектора экспрессии, содержащего полинуклеотид, кодирующий пептид WT1, или добавлением клеток, содержащих вектор экспрессии.
Как описано выше, хелперные Т-клетки распознают комплекс любой из молекул II класса МНС, в частности, молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 или молекулы HLA-DRB1*0501 и пептида WT1. Поэтому, субъект представляет собой субъекта, имеющего молекулу II класса МНС, с которой связывается пептид WT1, например, HLA-DRB1*1501-положительного, HLA-DRB1*0901-положительного или HLA-DRB1*0501-положительного субъекта. Как описано выше, пептид WT1 по настоящему изобретению может представлять собой пептид, который способен связываться, по меньшей мер, с двумя из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501, или пептид, который способен связываться с молекулой HLA-DRB1*1501 и/или молекулой HLA-DRB1*0901 и/или молекулой HLA-DRB1*0501, и молекулой II класса HLA, отличной от них. Следовательно, в таком случае, можно лечить или предотвратить рак у субъекта, положительного по подклассу II класса МНС, с которым может связываться пептид WT1 по настоящему изобретению. Рак, подлежащий лечению или профилактике, может представлять собой любой рак, и его примеры включают гематопоэтические опухоли, такие как лейкоз, миелодиспластический синдром, множественную миелому или злокачественную лимфому, и солидные формы рака, такие как рак желудка, рак ободочной кишки, рак легких, рак молочной железы, зародышевоклеточный рак, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, рак матки, рак шейки матки или рак яичников. Кроме того, способ по настоящему изобретению можно применять со способом лечения или профилактики рака пептидом WT1, ограниченным I классом МНС, или фармацевтической композиции для него.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака у субъекта активацией хелперных Т-клеток добавлением пептида WT1 к антиген-презентирующей клетке, содержащей пептид WT1, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501. Ген WT1 экспрессирован на высоких уровнях при различных формах рака и опухолей, включая гемопоэтические опухоли, такие как лейкоз, миелодиспластический синдром, множественная миелома или злокачественная лимфома, и солидные формы рака, такие как рак желудка, рак ободочной кишки, рак легких, рак молочной железы, зародышевоклеточный рак, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, рак матки, рак шейки матки или рак яичников. Поэтому, фармацевтическую композицию по настоящему изобретению можно использовать для лечения или профилактики рака.
Как описано выше, пептид WT1 по настоящему изобретению может представлять собой пептид, который способен связываться, по меньшей мере, с двумя из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501, или пептид, который способен связываться с молекулой HLA-DRB1*1501 и/или молекулой HLA-DRB1*0901 и/или молекулой HLA-DRB1*0501, и молекулой II класса HLA, отличной от них. Таким образом, пока антиген-презентирующие клетки получены от субъекта, положительного по подклассу II класса МНС, с которым может связываться пептид WT1 по настоящему изобретению, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может применяться для лечения или профилактики рака.
Когда фармацевтическая композиция по настоящему изобретению вводится, например, HLA-DRB1*1501-положительному, HLA-DRB1*0901-положительному и HLA-DRB1*0501-положительному субъекту, иммунная система может активироваться активацией хелперных Т-клеток пептидом WT1, содержащимся в фармацевтической композиции, посредством этого, осуществляя лечение или профилактику рака. Таким образом, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может применяться вместе со способом лечения или профилактики рака или с другой фармацевтической композицией, предназначенной для того же.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может содержать, в дополнение к пептиду WT1 в качестве активного ингредиента, например, носитель, эксципиент или им подобные ингредиенты. Пептид WT1, содержащийся в фармацевтической композиции по настоящему изобретению, связывается с молекулой II класса МНС на поверхности антиген-презентирующей клетки и активирует хелперные Т-клетки. Поэтому, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может, кроме того, содержать активатор, ростовой фактор, индуктор хелперных Т-клеток или им подобных, или может содержать пептид WT1, ограниченный I классом МНС.
Способ введения фармацевтической композиции по настоящему изобретению может быть соответствующим образом выбран, в зависимости от таких условий как тип заболевания, состояние субъекта или участок-мишень. Примеры таких способов включают без ограничения внутрикожное введение, подкожное введение, внутримышечное введение, внутривенное введение, интраназальное введение и пероральное введение. Количество пептида, содержащееся в фармацевтической композиции по настоящему изобретению, а также в лекарственной форме, количество раз введения и тому подобное фармацевтической композиции по настоящему изобретению может быть соответствующим образом подобрано, в зависимости от таких условий как тип заболевания, состояние субъекта или участок-мишень. Одна доза пептида обычно составляет от 0,0001 мг до 1000 мг, предпочтительно, от 0,001 мг до 1000 мг.
В еще одном аспекте, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака у субъекта путем активации хелперных Т-клеток добавлением пептида WT1 к антиген-презентирующей клетке, содержащей вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид, кодирующий пептид WT1, или клетку, содержащую вектор экспрессии, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501.
В еще одном аспекте, настоящее изобретение относится к применению пептида WT1, вектора экспрессии, содержащего полинуклеотид, кодирующий пептид WT1, или клетку, содержащую вектор экспрессии, для получения фармацевтической композиции.
В еще одном аспекте, настоящее изобретение относится к антителу, специфически связывающемуся с пептидом WT1, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501. Антитело по настоящему изобретению может быть получено средством или способом, известным специалисту в данной области. Антитело по настоящему изобретению может применяться для диагностики различных форм рака, их прогноза или тому подобного.
В еще одном аспекте, настоящее изобретение относится к способу определения присутствия или количества пептида WT1 у HLA-DRB1*1501-положительного, HLA-DRB1*0901-положительного или HLA-DRB1*0501-положительного субъекта, включающему:
(а) взаимодействие анти-WT1 антитела с образцом от субъекта; и
(b) определение присутствия или количества анти-WT1 антитела, специфически связывающегося с пептидом WT1, содержащимся в образце. Например, можно диагностировать рак, его прогноз или тому подобное путем инкубации анти-WT1 антитела с образцом от HLA-DRB1*1501-положительного, HLA-DRB1*0901-положительного или HLA-DRB1*0501-положительного субъекта, или введения анти-WT1 антитела HLA-DRB1*1501-положительному, HLA-DRB1*0901-положительному или HLA-DRB1*0501-положительному субъекту, и определение, например, их положения, участка или количества. Анти-WT1 антитело по настоящему изобретению относится к антителу, которое специфически распознает пептид WT1 по настоящему изобретению. Анти-WT1 антитело может представлять собой моноклональное антитело или поликлональное антитело. Анти-WT1 антитело может быть меченым. В качестве метки, может использоваться известная метка, такая как флуоресцентная метка или радиоактивная метка. Присутствие или количество пептида WT1 можно легко и быстро определить его мечением.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к набору для определения присутствия или количества пептида WT1, содержащего анти-WT1 антитело в качестве существенного компонента.
Кроме того, при определении присутствия или количества пептида WT1, когда пептид WT1 способен связываться с молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*1502, можно определить присутствие или количество пептида WT1 у субъекта с таким подклассом II класса МНС.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения или профилактики рака, содержащей хелперные Т-клетки, активированные пептидом WT1, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501. Лечение или профилактика рака осуществляется индукцией, ростом или активацией В-клеток или Т-клеток активированными хелперными Т-клетками. Таким образом, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению в данном аспекте может использоваться вместе с другим способом лечения или профилактики рака или с фармацевтической композицией, предназначенной для того же. Активация хелперных Т-клеток пептидом WT1 охватывает не только прямую активацию пептидом WT1, но также косвенную активацию вектором экспрессии, содержащим полинуклеотид, кодирующий пептид WT1, или клетку, содержащую веток экспрессии.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может содержать, в дополнение к активированным хелперным клеткам в качестве активного ингредиента, например, носитель, эксципиент или им подобные. Способ введения фармацевтической композиции по настоящему изобретению можно соответствующим образом выбрать, в зависимости от таких условий как тип заболевания, состояние субъекта или участок-мишень. Примеры таких способов включают, без ограничения, внутрикожное введение, подкожное введение, внутримышечное введение, внутривенное введение, интраназальное введение и пероральное введение. Количество хелперных Т-клеток, содержащихся в фармацевтической композиции по настоящему изобретению, а также в лекарственной форме, количество раз введения и тому подобное, фармацевтической композиции по настоящему изобретению, можно соответствующим образом выбрать, в зависимости от таких условий как тип заболевания, состояние субъекта или участок-мишень.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к способу лечения или профилактики рака у субъекта, включающему добавление пептида WT1 к антиген-презентирующей клетке и, посредством этого, активацию хелперных Т-клеток, и введение активированных Т-клеток субъекту, где пептид WT1 способен связываться с любой из молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 и молекулы HLA-DRB1*0501.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к применению пептида WT1 для получения фармацевтической композиции, содержащей активированные Т-клетки.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к способу определения присутствия или количества WT1-специфичных хелперных Т-клеток у любого из HLA-DRB1*1501-положительного, HLA-DRB1*0901-положительного и HLA-DRB1*0501-положительного субъекта, включающий:
(а) взаимодействие комплекса пептида WT1 антитела и молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 или молекулы HLA-DRB1*0501 с образцом от субъекта; и
(b) определение присутствия или количества хелперных Т-клеток, распознающих комплекс, содержащийся в образце. Образец от субъекта может представлять собой любой, пока имеется возможность того, что он содержит лимфоцит. Примеры образцов включают такую биологическую жидкость как кровь или лимфу и ткань. Комплекс пептида WT1 антитела и молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 или молекулы HLA-DRB1*0501 может быть получен, например, в виде тетрамера или пентамера с использованием способа, известного специалисту в данной области, такого как биотин-стрептавидиновый способ. Присутствие или количество хелперных Т-клеток, распознающих такой комплекс, может быть измерено с использованием способа, известного специалисту в данной области. В данном аспекте настоящего изобретения, комплекс может быть меченым. В качестве метки, может использоваться известная метка, такая как флуоресцентная метка или радиоактивная метка. Присутствие или количество пептида WT1 можно легко и быстро определить его мечением. Способ по настоящему изобретению в данном аспекте может использоваться для диагностики рака, его прогноза или тому подобного.
Таким образом, настоящее изобретение также предоставляет композицию для определения присутствия или количества хелперных Т-клеток у любого из HLA-DRB1*1501-положительного, HLA-DRB1*0901-положительного и HLA-DRB1*0501-положительного субъекта, содержащую комплекс пептида WT1 антитела и молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 или молекулы HLA-DRB1*0501.
Кроме того, настоящее изобретение предоставляет набор для определения присутствия или количества хелперных Т-клеток у любого из HLA-DRB1*1501-положительного, HLA-DRB1*0901-положительного и HLA-DRB1*0501-положительного субъекта, содержащий комплекс пептида WT1 антитела и молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 или молекулы HLA-DRB1*0501.
Кроме того, при определении присутствия или количества хелперных Т-клеток, когда пептид WT1 способен связываться с молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*1502 при определении присутствия или количества хелперных Т-клеток, можно определить присутствие или количество хелперных клеток у субъекта с таким подклассом II класса МНС. В таком случае, используется комплекс пептида WT1 и молекулы II класса МНС, с которой связывается пептид WT1.
В еще одном аспекте, настоящее изобретение относится к способу получения хелперных Т-клеток с использованием комплекса пептида WT1 и молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 или молекулы HLA-DRB1*0501, включающему:
(а) взаимодействие образца с комплексом; и
(b) получение хелперных Т-клеток, распознающих комплекс, содержащийся в образце. Комплекс описан выше. Образец может представлять собой любой образец, пока имеется возможность того, что он содержит лимфоцит. Примеры образцов включают образец от субъекта, такой как кровь и клеточная культура. Хелперные Т-клетки, распознающие комплекс, могут быть получены с использованием способа, известного специалисту в данной области, такого как FACS и MACS. Настоящее изобретение обеспечивает возможность культивирования полученных хелперных Т-клеток и использования их для лечения или профилактики различных форм рака.
Таким образом, настоящее изобретение также относится к хелперным Т-клеткам, которые могут быть получены способом получения хелперных Т-клеток с использованием комплекса пептида WT1 и молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 или молекулы HLA-DRB1*0501.
Кроме того, настоящее изобретение относится к набору для получения хелперных Т-клеток, содержащему комплекс пептида WT1 и молекулы HLA-DRB1*1501, молекулы HLA-DRB1*0901 или молекулы HLA-DRB1*0501.
Кроме того, при получении хелперных Т-клеток, когда пептид WT1 способен связываться с молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*1502, можно получить хелперные Т-клетки, распознающие комплекс такого подкласса II класса МНС и пептида WT1. В таком случае, используется комплекс пептида WT1 и молекулы II класса МНС, с которой он связывается.
В другом аспекте, настоящее изобретение относится к способу определения присутствия или количества WT1-специфичных хелперных Т-клеток у любого из HLA-DRB1*1501-положительного, HLA-DRB1*0901-положительного и HLA-DRB1*0501-положительного субъекта, включающему:
(а) стимуляцию мононуклеарных клеток периферической крови, инвазивных лимфоцитов, опухолевых клеток, клеток в асцитической жидкости, клеток в плевральной жидкости, клеток в спинномозговой жидкости, клетки костного мозга или клетки лимфоузлов пептидом WT1; и
(b) определение продукции цитокина или реакции хелперных Т-клеток,
где присутствие или увеличение количества цитокина или реакции хелперных Т-клеток указывает на присутствие или количество, распознающих комплекс, содержащийся в образце WT1-специфичных хелперных Т-клеток. Клетки, такие как мононуклеарные клетки периферической крови, инвазивные лимфоциты, опухолевые клетки, клетки в асцитической жидкости, клетки в плевральной жидкости, клетки в спинномозговой жидкости, клетки костного мозга или клетки лимфоузлов, используемые в способе по настоящему изобретению, могут быть получены у здорового субъекта или пациента, страдающего раком. Путем использования клеток от здорового субъекта, можно определить, страдает ли пациент раком или нет, имеет ли субъект предрасположенность к нему или нет, и тому подобное. Путем использования клеток от пациента, страдающего раком, можно прогнозировать, окажет ли эффект иммунотерапия с применением WT1 у пациента, страдающего раком, или ему подобного, или нет. Стимуляция клеток пептидом WT1 может осуществляться in vitro или in vivo. Ввиду легкости, предпочтительна стимуляция in vitro. Присутствие продукции цитокинов или реакции хелперных Т-клеток, или количество продуцируемых цитокинов или реакции хелперных Т-клеток может определяться известным способом.
Следующие примеры более детально иллюстрируют настоящее изобретение, но их не следует рассматривать как ограничивающие его объем.
Примеры
1. Получение антиген-презентирующих клеток
Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) выделяли из периферической крови, которую брали у здорового донора (HLA-DRB1*1501-положительного, HLA-DRB1*0901-положительного или HLA-DRB1*0501-положительного). РВМС высевали в 6-луночный пластиковый планшет при плотности 1×107 клеток/лунку в 1% сыворотке АВ (Nabi, Miami, FL), среде X-VIVO 15 (Cambrex) и культивировали в течение 2 часов. После культивирования, суспензированные клетки удаляли, и оставшиеся прилипшие клетки культивировали в 1000 МЕ/мл (PeproTech), 1000 МЕ/мл GM-CSF (PeproTech), 1% сыворотке АВ и среде X-VIVO 15. На 2-й и 4-й день, среду меняли и добавляли IL-4 и GM-CSF. На 6-й день к зрелым антиген-презентирующим клеткам добавляли 100 МЕ/мл TNF-α.
2. Индукция специфичных для пептида WT1 CD4-положительных Т-клеток
CD4-положительные Т-клетки были выделены из крови, полученной от того же донора, с использованием RosetteSep для разделения CD4 положительных Е-клеток (StemCell). CD4-положительные Т клетки (3×106 клеток) были добавлены к каждой лунке 24-ячеечной планшеты. Они были стимулированы аутологичными антиген-презентирующими клетками (3×105 клеток), с инъекцией 20 мкг/мл пептида WT1 (SEQ ID No:2), и подвергнуты облучению дозой в 25 Грей. На следующий день после стимуляции добавляли 20 Ед/мл IL-2. Аналогично, стимулированные CD4-положительные Т-клетки подвергались стимулированию инъекцией 20 мкг/мл пептида WT1 каждую последующую неделю. Кроме того, в каждый последующий день после второй стимуляции, проводили замену среды на среду, которая содержала IL-2. CD4-положительные Т-клетки, индуцированные за счет трехкратной стимуляции (HLA-DRB1*1501 и HLA-DRB1*0901-положительные Т-клетки, обозначенные соответственно как клетки ТА28.1 и клетки Е15.2,), использовались для последующих экспериментов.
3. Измерение IFN-γ
Клетки ТА28.1 и мононуклеарные клетки периферической крови от субъекта, у которого были получены клетки ТА28.1, культивировали в присутствии 20 мкг/мл пептида WT1 мкг/мл в течение 24 часов. После культивирования, количество IFN-γ в супернатанте определяли с использованием набора ELISA (иммуноферментного анализа). В качестве контроля, использовали мононуклеарные клетки периферической крови от HLA-DRB1*1501-отрицательного субъекта. Результаты показаны на фиг.1. Было подтверждено, что клетки ТА28.1 распознают пептид WT1 специфично для молекулы HLA-DRB1*1501 для увеличения продуцируемого количества IFN-γ (т.е. активации).
Кроме того, при использовании набора ELISA было подтверждено, что клетки ТА28.1 и Е15.2 не продуцируют IL-4 и IL-10. Результаты показаны на фиг.2 и 3. Было подтверждено, что клетки ТА28.1 и Е15.2 представляют собой клетки Th1.
HLA-DRB1*0501/*0501-положительные мононуклеарные клетки использовали для выполнения следующих экспериментов. Клетки суспендировали в среде X-VIVO (1% сыворотка АВ) и добавляли 20 мкг/мл пептида WT1, 10 мкг/мл Брефелдина А и 0,5 мкг/мл CD28/49d. Их инкубировали при 37°С и 5% СО2 в течение 4 часов. В качестве контроля использовали клетки, инкубированные без добавления пептида WT1. После промывания буфером, добавляли анти-CD3-perCP антитело и анти-CD4-APC антитело, и их инкубировали при 4°С в течение 30 минут. После промывания буфером, клетки фиксировали и пермеабилизировали с использованием BD Cytofix/Cytoperm (4°С, 20 минут). После промывания пермеабилизацинно/промывным буфером BD, добавляли анти-INF-γ-FITC (BD, клон: В27) и анти-IL-PE (eBioscience, клон: eBio64DEC17), и их инкубировали при 4°С в течение 30 минут. После промывания буфером, клетки анализировали лазерным сортировщиком клеток по интенсивности их флуоресценции FACSAria. Результаты показаны на фиг.4. Было подтверждено, что HLA-DRB1*0501-положительные мононуклеарные клетки растут и продуцируют IFN-γ и IL-17.
4. Анализ роста
Анализ роста выполняли способом включения [3H]-тимидина. Клетки ТА28.1 (3×104) и мононуклеарные клетки периферической крови (HLA-DRB1*1501-положительные; 1×105 клеток), которые были подвергнуты пульсирующей обработке пептидом WT1 и облучению, культивировали в 96-луночном планшете. После культивирования в течение 80 часов, добавляли 37 кБк/лунку [3H]-тимидина (Amersham Biosciences). Их инкубировали в течение еще 16 часов и измеряли, используя β-сцинтилляционный счетчик. Данные измерений представляли в виде импульсов/минуту (имп/мин). В качестве контроля, использовали мононуклеарные клетки периферической крови без пульсирующей обработки. Кроме того, для подтверждения того, что сигнал активации специфичен для молекулы HLA-DRB1*1501, использовали антитело против I класса МНС, анти-HLA-DR антитело, анти-HLA-DQ антитело и анти-HLA-DP антитело. Результаты показаны на фиг.5. Было подтверждено, что клетки ТА28.1 были активированы сигналом через пептид WT1 и HLA-DRB1*1501 и проявили рост. Кроме того, было подтверждено, что рост был специфичным для HLA-DRB1*1501, потому что она подавлялась анти-HLA-DR антителом.
Аналогичным образом, клетки Е15.2 использовали для выполнения анализа роста. В качестве дополнительного контроля, использовали мононуклеарные клетки периферической крови от HLA-DPB1*0901-отрицательного субъекта. Результаты показаны на фиг. 6 и 7. Было подтверждено, что клетки Е15.2 были активированы сигналом через пептид WT1 и HLA-DPB1*0901 и проявили рост. Кроме того, было подтверждено, что рост был специфичным для HLA-DPB1*0901, потому что она подавлялась анти-HLA-DP антителом.
Кроме того, HLA-DPB1*0501/*0501-положительные мононуклеарные клетки использовали для выполнения анализа роста. В качестве контроля, также использовали мононуклеарные клетки периферической крови от HLA-DPB1*0501-отрицательного субъекта. Результаты показаны на фиг.8 и 9. Было подтверждено, что HLA-DPB1*0501/*0501-положительные мононуклеарные клетки были активированы сигналом через пептид WT1 и HLA-DPB1*0501 и проявили рост. Кроме того, было подтверждено, что рост был специфичным для HLA-DPB1*0501, потому что она подавлялась анти-HLA-DP антителом.
Кроме того, анализ роста клеток Е15.2 был выполнен с различными концентрациями пептида WT1. Концентрация использованного пептида WT1 составляла 0,08, 0,4, 2, 10, 50, 100 или 150 мкг/мл. Результаты показаны на фиг.10. Было подтверждено, что пептиды WT1 стимулируют рост Т-клеток Е15.2 зависимым от концентрации образом.
Промышленная применимость
Настоящее изобретение предоставляет способ активации хелперных Т-клеток пептидом WT1, который способен связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DRB1*0901 и молекулой HLA-DRB1*0501, и композицию для этого, а также фармацевтическую композицию для лечения и/или профилактики рака путем активации хелперных Т-клеток и им подобных. Поэтому, настоящее изобретение может использоваться в областях медицины и подобных областях, например, в областях разработки и получения фармацевтической композиции для профилактики или лечения различных гематопоэтических опухолей и солидных форм рака, которые на высоком уровне экспрессируют ген WT1.
Claims (35)
1. Способ активации хелперных Т-клеток, включающий
приведение антиген-презентирующей клетки в контакт с пептидом WT1 и, таким образом, активацию хелперных Т-клеток, где
(a) пептид WT1 обладает способностью связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DPB1*0901 и молекулой HLA-DPB1*0501, и где пептид WT1 представляет собой пептид, состоящий из аминокислотной последовательности:
Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His (SEQ ID NO: 2); и
(b) антиген-презентирующая клетка является положительной по меньшей мере по одной из молекул, выбранных из HLA-DRB1*1501, HLA-DPB1*0901 и HLA-DPB1*0501; и
(c) хелперные Т-клетки экспрессируют комплекс TCR-CD3, который распознает комплекс пептида WT1 и молекулы HLA, выбранной из HLA-DRB1*1501, HLA-DPB1*0901 и HLA-DPB1*0501.
2. Способ по п.1, где пептид WT1 дополнительно способен связываться с молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*1502.
3. Способ по п.1, в котором стадию приведения антиген-презентирующей клетки в контакт с пептидом WT1 осуществляют путем добавления пептида WT1 к антиген-презентирующей клетке.
4. Способ индукции иммунного ответа у субъекта, страдающего WT1-специфическим злокачественным новообразованием, включающий приведение антиген-презентирующей клетки субъекта в контакт с пептидом WT1 in vivo и, таким образом, активацию хелперных Т-клеток у субъекта, где
(a) пептид WT1 обладает способностью связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DPB1*0901 и молекулой HLA-DPB1*0501 и где пептид WT1 представляет собой пептид, состоящий из аминокислотной последовательности:
Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His (SEQ ID NO: 2); и
(b) антиген-презентирующая клетка является положительной по меньшей мере по одной из молекул, выбранных из HLA-DRB1*1501, HLA-DPB1*0901 и HLA-DPB1*0501; и
(c) хелперные Т-клетки экспрессируют комплекс TCR-CD3, который распознает комплекс пептида WT1 и молекулы HLA, выбранной из HLA-DRB1*1501, HLA-DPB1*0901 и HLA-DPB1*0501.
5. Способ по п.4, где пептид WT1 дополнительно способен связываться с молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*1502.
6. Способ по п.4, в котором стадию приведения антиген-презентирующей клетки в контакт с пептидом WT1 осуществляют путем добавления пептида WT1 к антиген-презентирующей клетке.
7. Способ по п.4, где WT1-специфическое злокачественное новообразование представляет собой гематопоэтическую опухоль или солидный рак.
8. Способ по п.7, где гемопоэтическая опухоль представляет собой лейкоз, миелодиспластический синдром, множественную миелому или злокачественную лимфому.
9. Способ по п.7, где солидный рак представляет собой рак желудка, рак толстой кишки, рак легких, рак молочной железы, рак клеток, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, рак матки, рак шейки матки или рак яичников.
10. Способ индукции иммунного ответа у субъекта, страдающего WT1-специфическим злокачественным новообразованием, включающий приведение антиген-презентирующей клетки субъекта в контакт с пептидом WT1 in vitro и, таким образом, активацию хелперных Т-клеток, и введение активированных хелперных Т-клеток субъекту, где
(a) пептид WT1 способен связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, HLA-DPB1*0901 и молекулой HLA-DPB1*0501, и где пептид WT1 представляет собой пептид, состоящий из аминокислотной последовательности:
Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His (SEQ ID NO: 2); и
(b) антиген-презентирующая клетка является положительной по меньшей мере по одной из молекул, выбранных из HLA-DRB1*1501, HLA-DPB1*0901 и HLA-DPB1*0501; и
(c) хелперные Т-клетки экспрессируют комплекс TCR-CD3, который распознает комплекс пептида WT1 и молекулы HLA, выбранной из HLA-DRB1*1501, HLA-DPB1*0901 и HLA-DPB1*0501.
11. Способ по п.10, где пептид WT1 дополнительно способен связываться с молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*1502.
12. Способ по п.10, где WT1-специфическое злокачественное новообразование представляет собой гематопоэтическую опухоль или солидный рак.
13. Способ по п.12, где гемопоэтическая опухоль представляет собой лейкоз, миелодиспластический синдром, множественную миелому или злокачественную лимфому.
14. Способ по п.12, где солидный рак представляет собой рак желудка, рак толстой кишки, рак легких, рак молочной железы, рак клеток, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, рак матки, рак шейки матки или рак яичников.
15. Способ индукции иммунного ответа у субъекта, страдающего WT1-специфическим злокачественным новообразованием, включающий введение пептида WT1 субъекту, у которого было диагностировано WT1-специфическое злокачественное новообразование, где
(a) пептид WT1 обладает способностью связываться с молекулой HLA-DRB1*1501, молекулой HLA-DPB1*0901 и молекулой HLA-DPB1*0501, и где пептид WT1 представляет собой пептид, состоящий из аминокислотной последовательности:
Lys Arg Tyr Phe Lys Leu Ser His Leu Gln Met His Ser Arg Lys His (SEQ ID NO: 2); и
(b) субъект имеет молекулу HLA, выбранную из HLA-DRB1*1501, HLA-DPB1*0901 и HLA-DPB1*0501.
16. Способ по п.15, где пептид WT1 дополнительно способен связываться с молекулой HLA-DRB1*0405 и/или молекулой HLA-DRB1*1502.
17. Способ по п.15, где WT1-специфическое злокачественное новообразование представляет собой гематопоэтическую опухоль или солидный рак.
18. Способ по п.17, где гемопоэтическая опухоль представляет собой лейкоз, миелодиспластический синдром, множественную миелому или злокачественную лимфому.
19. Способ по п.17, где солидный рак представляет собой рак желудка, рак толстой кишки, рак легких, рак молочной железы, рак клеток, рак печени, рак кожи, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, рак матки, рак шейки матки или рак яичников.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2007-047317 | 2007-02-27 | ||
JP2007047317 | 2007-02-27 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009135802/10A Division RU2009135802A (ru) | 2007-02-27 | 2008-02-27 | Способ активации хелперных т-клеток и композиция для применения в данном способе |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2014104572A RU2014104572A (ru) | 2015-08-20 |
RU2680539C2 true RU2680539C2 (ru) | 2019-02-22 |
Family
ID=39721287
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2014104572A RU2680539C2 (ru) | 2007-02-27 | 2008-02-27 | Способ активации хелперных т-клеток и композиция для применения в данном способе |
RU2009135802/10A RU2009135802A (ru) | 2007-02-27 | 2008-02-27 | Способ активации хелперных т-клеток и композиция для применения в данном способе |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009135802/10A RU2009135802A (ru) | 2007-02-27 | 2008-02-27 | Способ активации хелперных т-клеток и композиция для применения в данном способе |
Country Status (26)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10139395B2 (ru) |
EP (1) | EP2119778B1 (ru) |
JP (2) | JP5225262B2 (ru) |
KR (1) | KR101598228B1 (ru) |
CN (6) | CN104774910B (ru) |
AU (1) | AU2008220031B2 (ru) |
BR (1) | BRPI0808084A2 (ru) |
CA (1) | CA2677075C (ru) |
CY (1) | CY1117150T1 (ru) |
DK (1) | DK2119778T3 (ru) |
ES (1) | ES2559062T3 (ru) |
HK (1) | HK1138321A1 (ru) |
HR (1) | HRP20160020T1 (ru) |
HU (1) | HUE027472T2 (ru) |
IL (1) | IL200161A (ru) |
MX (2) | MX2009009168A (ru) |
MY (2) | MY164867A (ru) |
NZ (3) | NZ599161A (ru) |
PL (1) | PL2119778T3 (ru) |
PT (1) | PT2119778E (ru) |
RU (2) | RU2680539C2 (ru) |
SG (1) | SG177998A1 (ru) |
SI (1) | SI2119778T1 (ru) |
UA (1) | UA101608C2 (ru) |
WO (1) | WO2008105462A1 (ru) |
ZA (1) | ZA200905467B (ru) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101213015B1 (ko) | 2003-11-05 | 2012-12-26 | 인터내셔널 인스티튜트 오브 캔서 이무놀로지 인코퍼레이티드 | Wt1 로부터 유도된 hla-dr 결합성 항원 펩티드 |
AU2006304573B2 (en) | 2005-10-17 | 2012-05-24 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | WT1 HLA class II-binding peptides and compositions and methods comprising same |
EP3117836A1 (en) | 2006-04-10 | 2017-01-18 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | Immunogenic wt-1 peptides and uses thereof |
CN104774910B (zh) | 2007-02-27 | 2018-04-10 | 株式会社癌免疫研究所 | 活化辅助t细胞的方法以及用于该方法的组合物 |
AR076349A1 (es) | 2009-04-23 | 2011-06-01 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Peptido auxiliar del antigeno del cancer |
CA2783550A1 (en) * | 2009-12-08 | 2011-06-16 | Wilson Wolf Manufacturing Corporation | Improved methods of cell culture for adoptive cell therapy |
US8956860B2 (en) | 2009-12-08 | 2015-02-17 | Juan F. Vera | Methods of cell culture for adoptive cell therapy |
ES2849187T3 (es) | 2010-10-05 | 2021-08-16 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Método para activar células T auxiliares |
JP6122779B2 (ja) * | 2011-09-14 | 2017-04-26 | 株式会社癌免疫研究所 | 抗wt1抗体の測定方法 |
CN104136609B (zh) * | 2011-12-14 | 2016-12-07 | 国立大学法人高知大学 | 辅助性t细胞诱导多肽的修饰 |
JP6282598B2 (ja) | 2012-01-13 | 2018-02-21 | メモリアル スローン ケタリング キャンサー センター | 免疫原性wt1ペプチド及びその使用方法 |
EP2896693A4 (en) | 2012-09-12 | 2016-10-12 | Int Inst Cancer Immunology Inc | ANTIGEN SPECIFIC HELPER T CELL RECEPTOR GENES |
JP6530192B2 (ja) | 2012-12-17 | 2019-06-12 | 大塚製薬株式会社 | ヘルパーt細胞の活性化方法 |
US10815273B2 (en) | 2013-01-15 | 2020-10-27 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Immunogenic WT-1 peptides and methods of use thereof |
CN116789792A (zh) | 2013-01-15 | 2023-09-22 | 纪念斯隆凯特林癌症中心 | 免疫原性wt-1肽和其使用方法 |
EP3112378B1 (en) * | 2014-02-26 | 2020-06-24 | Tella, Inc. | Wt1 antigenic polypeptide, and anti-tumor agent containing said polypeptide |
CN108350411B (zh) | 2015-06-25 | 2021-06-22 | 白川利朗 | 口服肿瘤疫苗 |
JP6810877B2 (ja) | 2016-12-26 | 2021-01-13 | 国立大学法人神戸大学 | 経口腫瘍ワクチンと免疫抑制阻害剤との併用によるがん治療 |
KR20220129567A (ko) | 2019-12-31 | 2022-09-23 | 엘릭서젠 쎄라퓨틱스, 인크. | 핵산 및 단백질의 세포 및 조직으로의 온도-기반 일시적 전달 |
KR102647825B1 (ko) * | 2021-07-22 | 2024-03-14 | 서울대학교산학협력단 | 항-hla-dp 단클론 항체 및 이의 용도 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20060121046A1 (en) * | 1998-09-30 | 2006-06-08 | Corixa Corporation (c/o GlaxoSmithKline) | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
RU2005137167A (ru) * | 2003-04-30 | 2006-06-27 | Корикса Корпорейшн (Us) | Композиции и способы для wt1 специфической иммунотерапии |
EP1696027A1 (en) * | 2003-11-05 | 2006-08-30 | International Institute of Cancer Immunology, Inc. | Hla-dr-binding antigen peptide derived from wt1 |
JP2006280324A (ja) * | 2005-04-04 | 2006-10-19 | Ehime Univ | Hlaクラスii拘束性wt1抗原ペプチド |
Family Cites Families (27)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5726288A (en) | 1989-11-13 | 1998-03-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Localization and characterization of the Wilms' tumor gene |
CN1560078B (zh) | 1998-07-31 | 2011-06-22 | 株式会社国际癌症免疫研究所 | 基于癌抑制基因wt1的产物的癌抗原 |
US20030235557A1 (en) | 1998-09-30 | 2003-12-25 | Corixa Corporation | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
CA2349442C (en) | 1998-09-30 | 2012-12-04 | Corixa Corporation | Compositions and methods for wt1 specific immunotherapy |
CA2401070A1 (en) | 2000-02-22 | 2001-08-30 | Corixa Corporation | Compositions and methods for diagnosis and therapy of malignant mesothelioma |
CA2440303C (en) | 2001-03-22 | 2013-03-19 | Haruo Sugiyama | Wt1 modified peptide |
GB0108491D0 (en) | 2001-04-04 | 2001-05-23 | Gendaq Ltd | Engineering zinc fingers |
WO2003002142A1 (en) | 2001-06-29 | 2003-01-09 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Cancer vaccine containing cancer antigen based on tumor suppressor gene wt1 product and cationic liposomes |
US8735357B2 (en) | 2001-09-28 | 2014-05-27 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Method of inducing antigen-specific T cells |
JPWO2003028758A1 (ja) | 2001-09-28 | 2005-01-13 | 治夫 杉山 | 抗原特異的t細胞の誘導方法 |
ATE466084T1 (de) | 2002-06-12 | 2010-05-15 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Hla-a24-restringiertes krebsantigenpeptid |
ES2538486T3 (es) | 2002-09-12 | 2015-06-22 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Preparación de péptidos antigénicos contra el cáncer |
ATE442378T1 (de) | 2002-09-20 | 2009-09-15 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Substituierte wt1-peptide |
US20060217297A1 (en) | 2003-01-15 | 2006-09-28 | Haruo Sugiyama | Dimerized peptide |
ES2478446T3 (es) | 2003-06-27 | 2014-07-22 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Método de selección de pacientes candidatos para la vacuna contra WT1 |
US7488718B2 (en) * | 2003-12-01 | 2009-02-10 | Sloan Kettering Institue For Cancer Research | Synthetic HLA binding peptide analogues and uses thereof |
SI1731605T1 (sl) * | 2004-03-31 | 2010-07-30 | Internat Inst Of Cancer Immunolog Inc | Peptidi antigena karcinoma izvedeni iz WT1 |
AU2006304573B2 (en) | 2005-10-17 | 2012-05-24 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | WT1 HLA class II-binding peptides and compositions and methods comprising same |
CN101336249A (zh) | 2005-11-30 | 2008-12-31 | 株式会社癌免疫研究所 | 新型肽化合物 |
PL1988163T3 (pl) | 2006-02-22 | 2012-11-30 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Ograniczony do hla-a*3303 peptyd wt1 i zawierająca go kompozycja farmaceutyczna |
EP3117836A1 (en) | 2006-04-10 | 2017-01-18 | Sloan Kettering Institute For Cancer Research | Immunogenic wt-1 peptides and uses thereof |
CA2886619A1 (en) | 2006-12-28 | 2008-07-10 | International Institute Of Cancer Immunology, Inc. | Hla-a*1101-restricted wt1 peptide and pharmaceutical composition comprising the same |
CN104774910B (zh) | 2007-02-27 | 2018-04-10 | 株式会社癌免疫研究所 | 活化辅助t细胞的方法以及用于该方法的组合物 |
EP3173480A3 (en) | 2007-03-05 | 2017-08-16 | International Institute of Cancer Immunology, Inc. | Cancer antigen-specific t-cell receptor gene, peptide encoded by the gene, and use of them |
AR076349A1 (es) * | 2009-04-23 | 2011-06-01 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Peptido auxiliar del antigeno del cancer |
ES2849187T3 (es) | 2010-10-05 | 2021-08-16 | Int Inst Cancer Immunology Inc | Método para activar células T auxiliares |
JP6530192B2 (ja) | 2012-12-17 | 2019-06-12 | 大塚製薬株式会社 | ヘルパーt細胞の活性化方法 |
-
2008
- 2008-02-27 CN CN201510102294.3A patent/CN104774910B/zh active Active
- 2008-02-27 US US12/449,765 patent/US10139395B2/en active Active
- 2008-02-27 MX MX2009009168A patent/MX2009009168A/es active IP Right Grant
- 2008-02-27 MX MX2014002596A patent/MX352947B/es unknown
- 2008-02-27 EP EP08712039.0A patent/EP2119778B1/en active Active
- 2008-02-27 CN CN201310009518.7A patent/CN103088103B/zh active Active
- 2008-02-27 PT PT87120390T patent/PT2119778E/pt unknown
- 2008-02-27 AU AU2008220031A patent/AU2008220031B2/en active Active
- 2008-02-27 SG SG2012004180A patent/SG177998A1/en unknown
- 2008-02-27 RU RU2014104572A patent/RU2680539C2/ru active
- 2008-02-27 CN CN201310058504.4A patent/CN103149366B/zh active Active
- 2008-02-27 DK DK08712039.0T patent/DK2119778T3/en active
- 2008-02-27 WO PCT/JP2008/053417 patent/WO2008105462A1/ja active Application Filing
- 2008-02-27 CA CA2677075A patent/CA2677075C/en active Active
- 2008-02-27 KR KR1020097017594A patent/KR101598228B1/ko active IP Right Grant
- 2008-02-27 BR BRPI0808084-4A patent/BRPI0808084A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2008-02-27 JP JP2009501276A patent/JP5225262B2/ja active Active
- 2008-02-27 CN CN201310009095.9A patent/CN103103246B/zh active Active
- 2008-02-27 MY MYPI2013001057A patent/MY164867A/en unknown
- 2008-02-27 NZ NZ599161A patent/NZ599161A/xx unknown
- 2008-02-27 NZ NZ578721A patent/NZ578721A/en unknown
- 2008-02-27 HU HUE08712039A patent/HUE027472T2/en unknown
- 2008-02-27 CN CN201410573477.9A patent/CN104312974B/zh active Active
- 2008-02-27 CN CN200880006096A patent/CN101622344A/zh active Pending
- 2008-02-27 ES ES08712039.0T patent/ES2559062T3/es active Active
- 2008-02-27 MY MYPI20093253A patent/MY158219A/en unknown
- 2008-02-27 NZ NZ599160A patent/NZ599160A/en unknown
- 2008-02-27 RU RU2009135802/10A patent/RU2009135802A/ru unknown
- 2008-02-27 SI SI200831564T patent/SI2119778T1/sl unknown
- 2008-02-27 UA UAA200909812A patent/UA101608C2/ru unknown
- 2008-02-27 PL PL08712039T patent/PL2119778T3/pl unknown
-
2009
- 2009-07-30 IL IL200161A patent/IL200161A/en active IP Right Grant
- 2009-08-05 ZA ZA200905467A patent/ZA200905467B/xx unknown
-
2010
- 2010-05-04 HK HK10104389.9A patent/HK1138321A1/xx unknown
-
2013
- 2013-01-31 JP JP2013017370A patent/JP5714619B2/ja active Active
-
2016
- 2016-01-11 HR HRP20160020TT patent/HRP20160020T1/hr unknown
- 2016-01-20 CY CY20161100054T patent/CY1117150T1/el unknown
-
2018
- 2018-10-18 US US16/163,682 patent/US11555814B2/en active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20060121046A1 (en) * | 1998-09-30 | 2006-06-08 | Corixa Corporation (c/o GlaxoSmithKline) | Compositions and methods for WT1 specific immunotherapy |
RU2005137167A (ru) * | 2003-04-30 | 2006-06-27 | Корикса Корпорейшн (Us) | Композиции и способы для wt1 специфической иммунотерапии |
EP1696027A1 (en) * | 2003-11-05 | 2006-08-30 | International Institute of Cancer Immunology, Inc. | Hla-dr-binding antigen peptide derived from wt1 |
JP2006280324A (ja) * | 2005-04-04 | 2006-10-19 | Ehime Univ | Hlaクラスii拘束性wt1抗原ペプチド |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
GAO P. et al., Tumor vaccination that enhances antitumor T-cell responses does not inhibit the growth of established tumors even in combination with interleukin-12 treatment: the importance of inducing intratumoral T-cell migration, J. IMMUNOTHER., 2000, v.23, n.6, p.643-653. * |
LEE K.H. et al., Increased vaccine-specific T cell frequency after peptide-based vaccination correlates with increased susceptibility to in vitro stimulation but does not lead to tumor regression, J. Immunol., 1999, v.163, n.11, p.6292-6300. * |
LEE K.H. et al., Increased vaccine-specific T cell frequency after peptide-based vaccination correlates with increased susceptibility to in vitro stimulation but does not lead to tumor regression, J. Immunol., 1999, v.163, n.11, p.6292-6300. GAO P. et al., Tumor vaccination that enhances antitumor T-cell responses does not inhibit the growth of established tumors even in combination with interleukin-12 treatment: the importance of inducing intratumoral T-cell migration, J. IMMUNOTHER., 2000, v.23, n.6, p.643-653. * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2680539C2 (ru) | Способ активации хелперных т-клеток и композиция для применения в данном способе | |
US8933038B2 (en) | Method of treating cancer with an HLA-A*3303-restricted WT1 peptide and pharmaceutical composition comprising the same | |
KR101804343B1 (ko) | Wt1 항원성 폴리펩티드 및 상기 폴리펩티드를 포함하는 항종양제 | |
JP2018093870A (ja) | ヘルパーt細胞の活性化方法 | |
AU2013365067B2 (en) | Method for activating helper T cell |