RU2659948C1 - Способ получения R-бруцеллёзной сыворотки на кроликах - Google Patents
Способ получения R-бруцеллёзной сыворотки на кроликах Download PDFInfo
- Publication number
- RU2659948C1 RU2659948C1 RU2017108572A RU2017108572A RU2659948C1 RU 2659948 C1 RU2659948 C1 RU 2659948C1 RU 2017108572 A RU2017108572 A RU 2017108572A RU 2017108572 A RU2017108572 A RU 2017108572A RU 2659948 C1 RU2659948 C1 RU 2659948C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- serum
- brucellosis
- blood
- days
- rabbits
- Prior art date
Links
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title claims abstract description 44
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 title claims abstract description 29
- 206010006500 Brucellosis Diseases 0.000 title claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 17
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 16
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 9
- 230000036512 infertility Effects 0.000 claims abstract description 6
- 241000831652 Salinivibrio sharmensis Species 0.000 claims description 13
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 9
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 claims description 7
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims description 6
- 239000005862 Whey Substances 0.000 claims 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 claims 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 claims 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 18
- 241000589567 Brucella abortus Species 0.000 abstract description 12
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 3
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract description 2
- 206010015719 Exsanguination Diseases 0.000 abstract 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 abstract 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 abstract 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 241000589562 Brucella Species 0.000 description 16
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 10
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 10
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- SYTBZMRGLBWNTM-SNVBAGLBSA-N (R)-flurbiprofen Chemical compound FC1=CC([C@H](C(O)=O)C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 SYTBZMRGLBWNTM-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 3
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 3
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 2
- 230000004523 agglutinating effect Effects 0.000 description 2
- 230000003616 anti-epidemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000576973 Homo sapiens Mitochondrial-processing peptidase subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 102100025298 Mitochondrial-processing peptidase subunit beta Human genes 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 238000004500 asepsis Methods 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 230000003749 cleanliness Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940059904 light mineral oil Drugs 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- -1 sodium thiolate Chemical class 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ветеринарии и диагностике инфекционных болезней, а именно бруцеллеза. Предложен способ получения R-бруцеллезной сыворотки на кроликах. Он включает однократное подкожное введение смеси антигена (100 млн КОЕ/мл инактивированной культуры штамма В.abortus 16/4) с адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG, пробное крововзятие на 16-20 день и с 21 по 35 день после гипериммунизации - трех-четырехкратное взятие крови от каждого кролика, из расчета 16-20 мл крови на 1 кг живой массы или тотальное обескровливание (производственное кровопускание). После крововзятия емкость с кровью ставят в термостат при 37°С на 3-4 часа для отделения сыворотки, затем помещают в холодильник при 2-8°С на двое суток для отстаивания сыворотки. Сыворотку от каждого животного сливают в стерильные сосуды, добавляют мертиолат натрия. Затем пробу сыворотки крови подвергают проверке на стерильность, активность и специфичность. Она должна быть стерильной и иметь титр: в пробирочной РА - 1:640-1:1280, в пластинчатой РА - 1:30-1:60 соответственно. Сыворотку консервируют и фасуют. Техническим результатом является снижение трудоемкости процесса, эпидемическая безопасность и увеличение получаемой сыворотки в 2-3 раза. 3 табл.
Description
Изобретение относится к ветеринарии, к диагностике инфекционных болезней, а именно индикации и дифференциации возбудителей бруцеллеза.
Бруцеллез - инфекционная болезнь животных, представляющая большую опасность и для людей.
Возбудители бруцеллеза обладают различной степенью диссоциации и агглютинабельностью, порой полной утратой S-агглютинабельности. Индикация таких культур бруцелл затруднена. В этой связи актуальным является получение эффективной R-бруцеллезной диагностической агглютинирующей сыворотки. Известно, что для индикации и дифференциации возбудителей бруцеллеза в бактериологической диагностике необходима R-бруцеллезная агглютинирующая сыворотка. От уровня ее чувствительности зависит надежность индикации и видовой дифференциации бруцелл. Причем для практики важны простота и безопасность ее получения.
Наиболее близким является способ получения R-бруцеллезной сыворотки на кроликах, включающий 4-кратную внутривенную иммунизацию кроликов живой культурой B.abortus16/4, обескровливание животных через 5-7 дней после последнего введения [1].
Недостатками этого способа являются: трудоемкость процесса (внутривенная иммунизация, кратность введения), эпидемическая опасность, связанная с использованием живой культуры бруцелл вида abortus, небольшой объем выхода конечного продукта за счет получения сыворотки от животного-продуцента только при однократном взятии крови.
Техническим результатом предлагаемого способа изготовления R-бруцеллезной сыворотки является снижение трудоемкости процесса ее изготовления и эпидемической опасности, увеличения выхода конечного продукта.
Техническое решение достигается тем, что способ получения R-бруцеллезной сыворотки на кроликах включает подкожно однократно иммунизацию кроликов суспензией в объеме 1 мл, представляющую собой смесь: антигена (100 млн КОЕ/мл инактивированной культуры штамма В. abortus 16/4) с адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG, на 16-20 день проводят пробное крововзятие, а на 21-35 дни осуществляют трехкратное четырехкратное взятие крови и обескровливание, сыворотку отстаивают, проверяют на стерильность и активность, сыворотка должна иметь титр: в пробирочной РА - 1:640-1:1280, в пластинчатой РА - 1:30-1:60 соответственно, консервируют и фасуют.
Предлагаемый способ получения R-бруцеллезной сыворотки позволяет снизить трудоемкость производственного процесса за счет однократного подкожного введения антигена кроликам, максимально повысить противоэпидемическую безопасность этого процесса за счет использования инактивированной культуры бруцелл штамма В.abortus 16/4. Использование адъюванта MONTANIDE™ ISA 61 VG в смеси с инактивированной культурой бруцелл штамма В.abortus 16/4 позволит стимулировать получение высоких титров антител и повысить количество получаемой сыворотки, минимум в два раза за счет взятия крови от каждого животного-продуцента минимум трех-четырехкратно.
Для иммунизации кроликов использовали инактивированную культуру бруцелл штамма В.abortus 16/4 в дозе 100 млн КОЕ/мл в смеси с адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG.
В качестве адъюванта применяли французский препарат MONTANIDE™ ISA 61 VG, производитель - фирма «SEPPIC». Готовый к использованию масляный адъювант для ветеринарных вакцин для производства эмульсий «вода-в-масле» содержит особое обогащенное светлое минеральное масло и высокоочищенное ПАВ, полученное из маннитола и очищенной олеиновой кислоты растительного происхождения. Препарат MONTANIDE™ ISA 61 VG не содержит компонентов животного происхождения. Рецептуры вакцин с MONTANIDE™ ISA 61 VG вызывают сильный и продолжительный иммунный ответ. По сравнению с традиционными масляными эмульсиями суспензия с MONTANIDE™ ISA 61 VG является устойчивой, стабильной и легковводимой. Для приготовления 100,0 г вакцины обычно необходимо: MONTANIDE™ ISA 61 VG - 60,0 г и водной антигенной среды - 40,0 г, т.е. в соотношении 40 и 60% соответственно. Стабильные эмульсии получаются путем смешивания водной антигенной среды в MONTANIDE™ ISA 61 VG, при комнатной температуре или ниже, при интенсивном перемешивании [3].
В качестве антигена использовали штамм В.abortus 16/4. Используемый штамм В.abortus 16/4 должен отвечать паспортным данным. Его высевают на одну из питательных сред: эритрит агар, МППГГА. После 2-3-суточного роста бактериальную массу штамма В.abortus 16/4 смывают с поверхности питательной среды фенолизированным физиологическим раствором. Полученную взвесь бруцелл доводят до необходимой концентрации по оптическому стандарту мутности (производитель ФГБУ НЦЭСМП МЗ РФ), сливают через двойной стерильный марлевый фильтр в стерильные колбы и обезвреживают прогреванием на водяной бане при температуре 80°С в течение 60 минут, периодически помешивая. Проверяют на чистоту и стерильность бактериальной массы путем засева на питательные среды [2]. Взвесь штамма В.abortus 16/4, используемой в качестве антигена при гипериммунизации кроликов, должна быть стерильной.
При комнатной температуре интенсивно перемешивают на магнитной мешалке 4 мл взвеси убитой культуры штамма В.abortus 16/4 с добавлением 6 мл адъюванта MONTANIDE™ ISA 61 VG (для получения 10 мл суспензии).
В качестве животных-продуцентов использовали кроликов.
Заявленный результат достигается следующим образом:
Кроликам однократно подкожно вводят 1мл суспензии, представляющей собой смесь антигена (100 млн КОЕ/мл инактивированной культуры штамма В.abortus 16/4) с адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG). На 16-20 день проводят пробное крововзятие. При условии положительной пластинчатой и пробирочной РА с R-антигеном и живыми культурами в R-форме с полученной R сывороткой в разведении не ниже 1:30 осуществляют взятие крови (из ушной вены) в сроки с 21 по 35 день после гипериммунизации, из расчета 16-20 мл крови на 1 кг живой массы. Проводят тотальное взятие крови (производственное кровопускание). Кровь отдельно от каждого кролика берут с соблюдением правил асептики и антисептики в отдельную стерильную емкость. После крововзятия емкость с кровью ставят в термостат при 37°С на 3-4 часа для отделения сыворотки, затем помещают в холодильник при 2-8°С на двое суток для отстаивания сыворотки. Сыворотку от каждого кролика сливают отдельно в стерильные сосуды, обезвреживают добавлением мертиолата натрия до конечной концентрации 1:10000 [5] и фасуют.
Контроль активности и специфичности полученной сыворотки осуществляют в пластинчатой и пробирочной РА с R- и S-антигенами и живыми культурами бруцелл в S- и R-форме. Сыворотка считается качественной, если пластинчатая РА с антигенами и живыми культурами бруцелл в R-.форме будет положительной в разведениях не ниже 1:30 при отрицательном результате РБП и пластинчатой агглютинации с живыми культурами бруцелл в S-форме в разведении 1:10. В пробирочной РА с R-антигеном титр сыворотки должен быть не ниже 1:640, при отрицательном результате РА с единым бруцеллезным антигеном для РА, РСК и РДСК в разведении 1:10. Постановку и учет реакций проводят согласно Наставлению по диагностике бруцеллеза животных [4].
Пробу сыворотки крови отдельно из каждой емкости подвергают проверке на стерильность путем высевов на МПА, МПБ, МППБ под вазелиновым маслом и среду Сабуро.
При условии стерильности и получении положительных результатов серологических реакций сыворотку смешивают в одну емкость для составления серии, консервируют (например, в качестве консерванта мертиолатом натрия в конечной концентрации 1:10000) и расфасовывают.
Пример 1. Определение оптимальной дозы антигена при гипериммунизации кроликов для получения R-бруцеллезной сыворотки (таблица 1)
В целях определения оптимальной дозы антигена при гипериммунизации кроликов инактивированной культурой В.abortus 16/4 в смеси с адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG для получения R-бруцеллезной сыворотки были использованы 3 схемы гипериммунизации кроликов (таблица 1). Для чего из здоровых кроликов, предварительно проверенных на бруцеллез серологическими методами, с отрицательными результатами, сформировали три группы (по 3 кролика в каждой) и гипериммунизировали:
1-я группа - животным ввели однократно подкожно инактивированную культуру В.abortus 16/4 в дозе 50 млн КОЕ/мл в смеси с адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG;
2-я группа - животным ввели однократно подкожно инактивированную культуру В.abortus 16/4 в дозе 100 млн КОЕ/мл в смеси с адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG;
3-я группа - животным ввели однократно подкожно инактивированную культуру В.abortus 16/4 в дозе 200 млн КОЕ/мл в смеси с адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG.
Результат РА с сыворотками крови, полученными от кроликов на 21 день после их сенсибилизации (таблица 1). В первой группе РА была положительной в разведении: пробирочной - 1:320, в пластинчатой - 1:20 соответственно; во второй группе была положительной в разведении: пробирочной РА - 1:1280, в пластинчатой -1:60 соответственно; в третьей группе была положительной в разведении: пробирочной РА - 1:1280, в пластинчатой РА - 1:60 соответственно, при отрицательном результате РБП, пластинчатой агглютинации с живыми культурами бруцелл в S-форме в разведении 1:10 и отрицательном результате РА с единым бруцеллезным антигеном для РА, РСК и РДСК в разведении 1:10 во всех группах. По результатам исследования оптимальной схемой гипериммунизации кроликов можно признать схему №2. При ее применении получены высокие титры антител на 21 день после сенсибилизации.
Пример 2. Определение оптимальной схемы гипериммунизации кроликов для получения R-бруцеллезной сыворотки (таблица 2)
В опыте изучили сравнительную эффективность трех схем получения R-бруцеллезной диагностической сыворотки. Для чего из здоровых кроликов, предварительно проверенных на бруцеллез серологическими методами, сформировали три группы (по 3 кролика в каждой):
1-я группа - животным ввели трехкратно с интервалом 7 дней подкожно (п/кожно) инактивированную культуру В.abortus 16/4 в общей дозе 46,5 млрд КОЕ/мл;
2-я группа - животным ввели четырехкратно с интервалом 7 дней внутривенно живую культуру В.abortus 16/4 в общей дозе 90,5 млрд КОЕ/мл.
3-я группа - животным ввели однократно подкожно инактивированную культуру В.abortus 16/4 в дозе 100 млн КОЕ/мл в смеси с адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG в объеме 1 мл.
Кровь от животных в целях получения сыворотки брали на 14, 21, 28, 35 дни после введения антигенов.
Таким образом, из приведенных в таблице данных очевидно, что оптимальной является схема получения R-бруцеллезной диагностической сыворотки, испытанная на животных третьей группы, в которой использовалась однократная подкожная гипериммунизация суспензией инактивированной культуры бруцелл В.abortus 16/4 в смеси с масляным адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG, который позволяет стимулировать получение высоких титров антител. Кроме эпидемической безопасности ее преимущества заключаются в ее высоких титрах при получении в отдаленные сроки после гипериммунизации, а значит, в возможности получения значительного объема сыворотки с высокой активностью за счет многократного (не менее 3-4 раз) взятия крови.
Пример 3. Изучение диагностической активности R-бруцеллезной диагностической сыворотки, полученной от кроликов, гипериммунизированных по разным схемам, через 6 месяцев хранения (таблица 3)
Установлено, что сыворотка, полученная от кроликов по схеме, предусматривающей однократную подкожную гипериммунизацию инактивированной культурой бруцелл В.abortus 16/4 в смеси с масляным адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG, сохранила свою активность (РА в разведении не ниже 1:1280) в течение не менее 6 месяцев после ее получения из крови, взятой через 21, 28, 35 дней после гипериммунизации, в отличие от сыворотки, полученной при однократной внутривенной гипериммунизации живой культурой бруцелл В.abortus 16/4 без адъюванта, потерявшей активность в более ранние сроки - 28-35 дней.
Предлагаемый способ получения R-бруцеллезной сыворотки на кроликах позволяет снизить трудоемкость производственного процесса за счет однократного подкожного введения антигена кроликам, максимально повысить противоэпидемическую безопасность этого процесса за счет использования инактивированной культуры бруцелл штамма В.abortus 16/4. Использование адъюванта MONTANIDE™ ISA 61 VG в смеси с инактивированной культурой бруцелл штамма В.abortus 16/4 позволит стимулировать получение высоких титров антител и повысить количество получаемой сыворотки минимум в два раза за счет взятия крови от каждого животного-продуцента минимум трех-четырехкратно.
Литература
1. Дегтяренко Л.В., Косилов И.А., Ниязов У.Э., Шумилов К.В. Получение R-бруцеллезной сыворотки на кроликах / Профилактика и диагностика болезней животных. Сб.научных трудов. Новосибирск, 1983, с. 103-107.
2. Иванов Н.П. Бруцеллез животных и меры борьбы с ним / Под ред. Т.С. Сайдулдина. - Алматы, 2007. - 433 с.
3. Технический бюллетень MONTANIDE™ ISA 61 VG.
4. Наставление по диагностике бруцеллеза животных. Утв. Департаментом ветеринарии Минсельхоза РФ 29.09.2003 №13-5-02/0850.
5. СП 1.3.3118-13 «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)» от 28 ноября 2013 г.
Claims (1)
- Способ получения R-бруцеллезной сыворотки на кроликах, включающий иммунизацию культурой штамма В. abortus 16/4, крововзятие, получение сыворотки, сыворотку проверяют на стерильность и активность, отличающийся тем, что иммунизацию проводят подкожно однократно в объеме 1 мл, суспензией, представляющей собой смесь антигена (100 млн КОЕ/мл инактивированной культуры штамма В. abortus 16/4) с адъювантом MONTANIDE™ ISA 61 VG, на 16-20 день проводят пробное крововзятие, а на 21-35 дни осуществляют трех-четырехкратное взятие крови и обескровливают, сыворотка имеет титр: в пробирочной РА - 1:640-1:1280, в пластинчатой РА - 1:30-1:60 соответственно, сыворотку консервируют и фасуют.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017108572A RU2659948C1 (ru) | 2017-03-14 | 2017-03-14 | Способ получения R-бруцеллёзной сыворотки на кроликах |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017108572A RU2659948C1 (ru) | 2017-03-14 | 2017-03-14 | Способ получения R-бруцеллёзной сыворотки на кроликах |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2659948C1 true RU2659948C1 (ru) | 2018-07-04 |
Family
ID=62816039
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017108572A RU2659948C1 (ru) | 2017-03-14 | 2017-03-14 | Способ получения R-бруцеллёзной сыворотки на кроликах |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2659948C1 (ru) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2012331C1 (ru) * | 1991-06-27 | 1994-05-15 | Гематологический научный центр РАМН | Раствор для консервирования энзимированных эритроцитов, используемых в изосерологических реакциях |
| RU2049153C1 (ru) * | 1993-12-14 | 1995-11-27 | Институт порошковой металлургии | Устройство для непрерывной цементации и очистки металлических порошков |
| US5747653A (en) * | 1987-07-30 | 1998-05-05 | Centro Nacional De Biopreparados | Method of producing of an antimeningococcic hyperimmune gamma globulin and gamma globulin produced by method |
| SU533102A1 (ru) * | 1972-12-22 | 2000-03-20 | Всесоюзный научно-исследовательский ящурный институт | Способ получения иммунной сыворотки |
| RU2549434C2 (ru) * | 2013-07-30 | 2015-04-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Способ изготовления бруцеллезной диагностической сыворотки |
-
2017
- 2017-03-14 RU RU2017108572A patent/RU2659948C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU533102A1 (ru) * | 1972-12-22 | 2000-03-20 | Всесоюзный научно-исследовательский ящурный институт | Способ получения иммунной сыворотки |
| US5747653A (en) * | 1987-07-30 | 1998-05-05 | Centro Nacional De Biopreparados | Method of producing of an antimeningococcic hyperimmune gamma globulin and gamma globulin produced by method |
| RU2012331C1 (ru) * | 1991-06-27 | 1994-05-15 | Гематологический научный центр РАМН | Раствор для консервирования энзимированных эритроцитов, используемых в изосерологических реакциях |
| RU2049153C1 (ru) * | 1993-12-14 | 1995-11-27 | Институт порошковой металлургии | Устройство для непрерывной цементации и очистки металлических порошков |
| RU2549434C2 (ru) * | 2013-07-30 | 2015-04-27 | Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт бруцеллеза и туберкулеза животных Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИБТЖ Россельхозакадемии) | Способ изготовления бруцеллезной диагностической сыворотки |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104829712B (zh) | C、d型产气荚膜梭菌抗毒素血清及其制备方法 | |
| CN104530232A (zh) | 鸭病毒性肝炎精制蛋黄抗体的制备方法 | |
| RU2549434C2 (ru) | Способ изготовления бруцеллезной диагностической сыворотки | |
| US3354038A (en) | Serial passaging tissue cultured canine distemper virus to form attenuated vaccine short of virus-antigenicity decreasing passages | |
| RU2659948C1 (ru) | Способ получения R-бруцеллёзной сыворотки на кроликах | |
| US4472378A (en) | Live vaccine for the prevention of salmonellosis in water fowl, a process for making and applying the same | |
| NL8104979A (nl) | Werkwijze voor de bereiding van immunobiologische preparaten, toe te passen bij de diagnose , het voorkomen en/of het behandelen van candida guilliermondii infecties. | |
| RU2639127C2 (ru) | Способ получения бруцеллёзной моноспецифической сыворотки anti-abortus | |
| RU2613901C1 (ru) | Способ получения бруцеллёзной моноспецифической сыворотки anti-melitensis | |
| Trussell | Microagglutination tests with Trichomonas vaginalis | |
| RU2538158C1 (ru) | Способ изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и стафилококкоза крупного рогатого скота | |
| US3470294A (en) | Vaccine for immunization of dogs and foxes against distemper,hepatitis contagiosa and leptospirosis and process for preparing it | |
| Senekjie | Immunologic Studies in Experimental Trypanosoma cruzi Infections: 2. Slide Agglutination and Intradermal Tests. | |
| IQBAL et al. | Immune response of rabbits to hemorrhagic septicemia vaccine formulations adjuvanted with montanide ISA-206, paraffin oil and alum | |
| Nakayama | On the toxin for leukocytes produced by streptococci (streptoleukocidin) | |
| RU2812350C1 (ru) | Способ получения диагностической сыворотки против бруцелл в R-форме | |
| RU2341288C1 (ru) | СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ СВОЙСТВОМ ФОРМИРОВАТЬ КЛЕТОЧНЫЙ ИММУНИТЕТ ПРОТИВ MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS H37 Rv, СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЕГО (ВАРИАНТЫ), РЕКОМБИНАНТНЫЙ ШТАММ И СРЕДСТВО ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА | |
| RU2802251C1 (ru) | Вакцинная композиция для профилактики энзоотического аборта у овец | |
| RU2772751C1 (ru) | Способ получения гипериммунной сыворотки к аденовирусу bovine-10 крупного рогатого скота | |
| RU2288002C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против энтерококковой инфекции нутрий | |
| RU2798283C1 (ru) | Штамм Chlamydia abortus "Chlamydia VNITIBP-21" для производства иммунобиологических лекарственных препаратов | |
| RU2815538C1 (ru) | Способ изготовления вакцины поливалентной против лептоспироза лошадей | |
| Rosenow | Studies in pneumonia and pneumococcus infections | |
| RU2707289C1 (ru) | Способ изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и псевдомоноза крупного рогатого скота | |
| RU2416429C2 (ru) | Способ получения антигенного препарата из бруцелл в l-форме |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20210315 |