RU2659211C2 - Способ измерения концентрации циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности в сыворотке крови человека - Google Patents
Способ измерения концентрации циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности в сыворотке крови человека Download PDFInfo
- Publication number
- RU2659211C2 RU2659211C2 RU2016149602A RU2016149602A RU2659211C2 RU 2659211 C2 RU2659211 C2 RU 2659211C2 RU 2016149602 A RU2016149602 A RU 2016149602A RU 2016149602 A RU2016149602 A RU 2016149602A RU 2659211 C2 RU2659211 C2 RU 2659211C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- density lipoproteins
- blood
- ldl
- modified low
- circulating modified
- Prior art date
Links
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 title claims abstract description 41
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 title claims abstract description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 title description 13
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 18
- 239000000910 agglutinin Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims abstract description 4
- 101710186708 Agglutinin Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 101710146024 Horcolin Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 101710189395 Lectin Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 101710179758 Mannose-specific lectin Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 101710150763 Mannose-specific lectin 1 Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 101710150745 Mannose-specific lectin 2 Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 claims abstract 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 6
- 102000006410 Apoproteins Human genes 0.000 abstract description 5
- 108010083590 Apoproteins Proteins 0.000 abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 abstract description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 9
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 7
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 6
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 6
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 5
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 5
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 5
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- 208000037260 Atherosclerotic Plaque Diseases 0.000 description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 4
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 4
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 4
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 4
- 102100040202 Apolipoprotein B-100 Human genes 0.000 description 3
- 108010008150 Apolipoprotein B-100 Proteins 0.000 description 3
- 230000000923 atherogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 3
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 3
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 2
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- 101150000595 CLMP gene Proteins 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 101710093554 Galactose-specific lectin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 1
- 239000008118 PEG 6000 Substances 0.000 description 1
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 1
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 1
- 229920002584 Polyethylene Glycol 6000 Polymers 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 108010062497 VLDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001840 cholesterol esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000013213 extrapolation Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010071584 oxidized low density lipoprotein Proteins 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 102000014452 scavenger receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010078070 scavenger receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 108010004486 trans-sialidase Proteins 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и клинической биохимии и может быть использовано в лабораторной диагностике для определения циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности (цмЛПНП) с диагностическими и терапевтическими целями. Способ количественного определения содержания циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности в крови больных включает измерение уровня десиалированного апобелка В-100 методом иммуноферментного анализа с использованием агглютинина рицина РКА 120, связывающегося с терминальной галактозой в десиалированном апобелке В-100. 2 пр.
Description
Изобретение относится к медицине и клинической биохимии и может быть использовано в лабораторной диагностике для определения циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности (цмЛНП) с диагностическими и терапевтическими целями.
Одним из наиболее ранних проявлений атеросклеротического поражения является аккумуляция липидов клетками интимы артерий человека. Показано, что основным источником липидов являются липопротеиды низкой плотности (ЛНП) [1-4]. Обнаруженные в крови человека модифицированные ЛНП (мЛНП), обладающие пониженным, по сравнению с нативными липопротеидами, содержанием сиаловой кислоты, были названы "десиалированными" ЛНП. Именно десиалированные липопротеиды, в отличие от нативных, вызывают аккумуляцию липидов (в частности, эфиров холестерина) в клетках интимы артерий человека и макрофагах, т.е. являются атерогенными [5-6]. К настоящему времени убедительно экспериментально доказано существование в крови человека цмЛНП, обладающих атерогенными свойствами [7-10]. Известно, что цмЛНП содержат апобелок В-100. Этот апопротеин имеет большое сходство с плазминогеном - белком, который участвует в процессе тромбообразования. Большая концентрация цмЛНП с Апо В-100 в крови говорит о значительном риске атеросклеротических поражений. В клетках-потребителях холестерина существуют рецепторы для цмЛНП. Взаимодействие рецепторов с цмЛНП происходит с помощью Апо В-100, после чего цмЛНП путем эндоцитоза поглощается клеткой. Поскольку ЛНП являются также гликопротеинами, в их состав (а именно в состав апобелка В-100) входят также манноза, галактоза, фруктоза, глюкоза, глюкозамин и сиаловая кислота. Десиалирование Апо В-100 осуществляется присутствующей в крови человека транс-сиалидазой, переносящей сиаловую кислоту между гликоконъюгатами липопротеидов, гликопротеидов и ганглиозидов плазмы и клеток крови. Таким образом, учитывая важную патогенетическую роль цмЛНП в атеросклерозе, остается актуальной разработка наиболее информативных и в то же время относительно простых, доступных для клинических лабораторных исследований способов определения цмЛНП. В настоящее время в лабораторной практике недостаточно доступных для рутинных исследований методов определения содержания атерогенных цмЛНП в сыворотке крови человека. Более того, многие предлагаемые способы не учитывают как сложность фракционного состава ЛНП, так и многофакторный, многостадийный характер их модификации, начальным звеном которой является именно процесс десиалирования.
Известен способ определения мЛНП [11], отличающийся тем, что, с целью упрощения определения за счет сокращения числа стадий, супернатант после первого центрифугирования крови инкубируют с красителем. После этого проводят электрофоретическое разделение липидов из фракций крови. Способ включает следующие процедуры: к 1 мл сыворотки крови добавляют 40 мл 8% ПЭГ-6000, инкубируют 1 ч при комнатной температуре и центрифугируют 40 мин при 2800 g. Часть полученного супернатанта повторно центрифугируют 40 мин при 25000 g. Осадок промывают 0,25 мл раствора преципитата после первого и второго центрифугирования и используют для электрофоретического исследования. Разделение проводят в геле агарозы на пластинах, при этом в пробах супернатанта после первого центрифугирования определяют модифицированные липопротеиды высокой плотности, а после второго центрифугирования - модифицированные липопротеиды низкой и очень низкой плотности. Недостатком этого способа являются низкая избирательность метода по отношению как к ЛНП в целом, так и к мЛНП, а также трудоемкость и длительность проведения исследования.
Наиболее интенсивно разрабатываемыми методами определения мЛНП являются иммуноферментные тесты с использованием моноклональных антител к мЛНП [12]. Многостадийность, трудоемкость и длительность иммуноферментного теста, выявление только эпитопов, характерных для искусственно модифицированных ЛНП (неспецифичность), а также высокая себестоимость реагентов затрудняет использование их в рутинных исследованиях.
Известен способ экспресс-определения атерогенности крови [13], который состоит в определении множественно модифицированных липопротеидов низкой плотности (ммЛНП) в плазме крови человека путем обработки ее буфером, содержащим поливинилпирролидон 12600±2700, и последующей визуальной регистрацией помутнения по сравнению с контрольной пробой. Наличие помутнения, обусловленной агрегацией ммЛНП, свидетельствует об атерогенности крови. Недостатком этого способа является то, что он выявляет только ммЛНП, которые быстро элиминируются из кровотока при взаимодействии со скавенджер-рецепторами. К тому же ммЛНП связываются с аутоантителами к ним с образованием иммунных комплексов, которые при ряде условий не агрегируются и поэтому у некоторых больных с тяжелым атеросклерозом данный тест дает отрицательный результат.
Известен способ определения минимально модифицированных липопротеидов низкой плотности (Мм-ЛНП) в сыворотке или плазме крови человека [14], который наиболее близок к заявляемому способу по существенным признакам и был выбран в качестве прототипа. При его применении МмЛНП агрегируют из сыворотки или плазмы крови путем обработки буфером, содержащим поливинилпирролидон (ПВП) с мол. массой 12600±2700, при конечной концентрации ПВП от 11,3% до 14,2% в пробе. После инкубации в течение 10 мин измеряют светопоглощение в опытной и контрольной пробах, вычисляют разность и при величине разности более 10 ЕД констатируют атерогенность крови у обследуемого человека за счет повышенного уровня Мм-ЛНП. Этот способ также на лишен недостатков, указанных выше, акцентирован на анализе окисленных ЛНП и не позволяет определить содержание в крови цмЛНП.
Таким образом, существует потребность в способе определения, который лишен вышеуказанных недостатков и обеспечивает условия для количественного определения цмЛНП в крови человека.
Задача решается новым способом, который включает определение уровня цмЛНП путем измерения уровня десиалированного апобелка В-100 в сыворотке крови твердофазным лектин-иммуноферментным методом (ИФА) с использованием агглютинина РКА 120, связывающегося с терминальной галактозой в десиалированном апобелке B-100.
Описание способа определения уровня цмЛНП в сыворотке крови.
Для определения содержания цмЛНП в качестве связывающих молекул используют иммобилизованный в планшетах для ИФА на пластиковую подложку рицин-агглютинин РКА 120 (лектин, биологический лиганд к десиалированным гликопротеидам). Наносят сыворотку крови человека с титрованием в разведениях от 1:300 до 1:4800 и инкубируют в течение 2 часов. После инкубации планшеты отмывают для удаления несвязавшихся белков и связавшиеся с лектином десиалированные липопротеиды проявляют поликлональными антителами против апоВ-100 человека, конъюгированными с пероксидазой или биотином. Параллельно определяют общее содержание ЛНП в тех же образцах сыворотки крови традиционным методом ИФА, для чего сыворотку крови человека в разведении 1:8000 наносят на иммобилизованные на пластиковую подложку поликлональные антитела к апоВ-100 и связавшиеся с антителами липопротеиды проявляют поликлональными антителами против апоВ-100 человека, конъюгированными с пероксидазой или биотином. Рассчитывают содержание цмЛНП, общих ЛНП, и затем долю цмЛНП в общем пуле ЛНП. При содержании цмЛНП более 18% от общего пула ЛНП выносят суждение о наличии в крови повышенного уровня цмЛНП и, следовательно, о предрасположенности к развитию атеросклероза.
Преимуществом и существенным отличием предлагаемого метода по сравнению с известными аналогами является прямое количественное определение цмЛНП, а также определение их доли в общем пуле ЛНП. Вторым преимуществом и существенным отличием предлагаемого метода по сравнению с известными аналогами является использование галактозо-специфического лектина в качестве связывающих молекул, избирательно взаимодействующих исключительно с десиалированными гликопротеидами, в число которых входит дегликозилированный (десиалированный) апоВ-100, являющийся гликопротеидным компонентом цмЛНП.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами его осуществления.
Пример 1. Было проведено измерение содержания цмЛНП и общих ЛНП в 130 образцах сыворотки крови (63 мужчины в возрасте от 27 до 77 лет и 67 женщин в возрасте от 30 до 85 лет) с использованием описанного способа. Количественная диагностика атеросклероза у участников исследования проводилась методом ультразвукового сканирования сонных артерий в режиме высокого разрешения с последующим выявлением атеросклеротических бляшек в бассейне сонных артерий и измерением толщины интимо-медиального комплекса сонных артерий. По результатам ультразвукового исследования 62 участника исследования были отнесены к группе здоровых лиц, то есть не имели атеросклеротических бляшек в бассейне сонных артерий. К группе больных атеросклерозом, то есть имевших атеросклеротические бляшки в бассейне сонных артерий, были отнесены 68 участников исследования. Среди больных атеросклерозом 35 человек имели клинические проявления атеросклероза в форме ишемической болезни сердца. У здоровых лиц доля цмЛНП в общем пуле ЛНП составила в среднем 12,1% (стандартное отклонение 6,7). У больных атеросклерозом доля цмЛНП в общем пуле ЛНП составила в среднем 27,5% (стандартное отклонение 9,3). Содержание цмЛНП не коррелировало ни с одним из традиционных факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний. Эти данные говорят о том, что содержание цмЛНП в сыворотке крови является независимой дискриминантой для диагностики заболеваний атеросклеротического генеза. Методом построения кривых операторского теста было установлено пограничное значение доли цмЛНП в общем пуле ЛНП, которое составило 18% и позволяло наилучшим образом дифференцировать участников исследования по наличию атеросклеротических бляшек в бассейне сонных артерий как инструментального признака атеросклероза.
Пример 2. Была изучена способность нативных ЛНП из крови здоровых доноров вызывать накопление холестерина в первичной культуре моноцитов-макрофагов из крови здоровых доноров. Нативные ЛНП (100 мкг/мл культуральной жидкости) не приводили к увеличению содержания холестерина в клетках. Десиалированные ЛНП, полученные путем обработки нативных ЛНП нейраминидазой, в концентрации 100 мкг/мл культуральной жидкости вызывали 2,4-кратное увеличение содержания холестерина в клетках. Затем исследовали влияние смеси нативных и десиалированных ЛНП (100 мкг/мл культуральной жидкости) на содержание холестерина в клетках при доле десиалированных ЛНП 1%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25% и 50%. Смеси ЛНП, содержащие 1-15% десиалированных ЛНП, не приводили к увеличению содержания холестерина в клетках. Смеси ЛНП, содержащие 20-50% десиалированных ЛНП, приводили к значимому увеличению содержания холестерина в клетках, и этот эффект был дозозависимым. Методом экстраполяции было установлено пограничное значение доли десиалированных ЛНП в общем пуле ЛНП, при котором смесь ЛНП приобретает способность вызывать накопление в клетках, и это значение составило 18%.
Литература
1. Ohlsson, L. Dairy products and plasma cholesterol levels. // Food. Nutr. Res. - 2010. - 54.
2. Forrester, J.S. Redefining normal low-density lipoprotein cholesterol: a strategy to unseat coronary disease as the nation's leading killer. // J. Am. Coll. Cardiol. - 2010. - Vol. 56. - P. 630-636.
3. Feeman, W.E. Cholesterol guidelines. // Ann. Intern. Med. - 1989. - Vol. 111. - P. 1047-1048.
4. Packard, C.J, Shepherd, J. Low density lipoprotein metabolism. // Prog. Clin. Biol. Res. - 1988. - Vol. 255. - P. 117-123.
5. Tertov V.V., Bittolo-Bon G., Sobenin I.A. et al. Naturally occurring modified low density lipoproteins are similar if not identical: more electronegative and desialylated lipoprotein subtractions. Exp Mol Pathol. 1995; 62(3): 166-172.
6. Tertov V.V., Orekhov A.N., Sobenin I.A. и др. Carbohydrate composition of protein and lipid components in sialic acid-rich and -poor low density lipoproteins from subjects with and without coronary artery disease. J Lipid Res. 1993; 34(3): 365-375.
7. Orekhov A.N., Tertov V.V., Mukhin D.N. Desialylated low density lipoprotein - naturally occurring lipoprotein with atherogenic potency. Atherosclerosis. 1991; 86: 153-161.
8. Harada L.M. Carvalho M.D., Passarelli M., Quintao E.C. Lipoprotein desialylation simultaneously enhances the cell cholesterol uptake and impairs the reverse cholesterol transport system: in vitro evidences utilizing neuraminidase-treated lipoproteins and mouse peritoneal macrophages. Atherosclerosis. 1998; 139(1): 65-75.
9. Harada L.M. Carvalho M.D., Passarelli M., Quintao E.C. Lipoprotein desialylation simultaneously enhances the cell cholesterol uptake and impairs the reverse cholesterol transport system: in vitro evidences utilizing neuraminidase-treated lipoproteins and mouse peritoneal macrophages. Atherosclerosis. 1998; 139 (1): 65-75.
10. Lindbohm N., Gylling H., Miettinen Т.Е., Miettinen T.A. Statin treatment increases the sialic acid content of LDL in hypercholesterolemic. Atherosclerosis. 2000; 151(2): 545-550.
11. Карпов P.C., Канская H.B., 1992. Способ определения модифицированных липопротеидов крови (RU 1720015): СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК (я)5 G01N 33/92, ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ ПРИ ГКНТ СССР.
12. Virella G., Derrick MB., Pate V. et al. Development of capture assay for different modification of human low-density lipoprotein // Clinical and Diagnostic Lab. Immunol. - 2005. - V. 12, №1. - P. 68-75.
13. Шойбонов Б.Б., Баронец В.Ю., Панченко Л.Ф., Кубатиев А.А. Способ экспресс-определения атерогенности крови. Патент РФ №2437098 от 20.12.2011 г., Бюл. №35.
14. Шойбонов Б.Б. Способ определения минимально модифицированных липопротеинов низкой плотности в сыворотке или плазме крови человека. Патент РФ №2501013. Официальная публикация патента 10.12.2013.
Claims (1)
- Способ количественного определения содержания циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности в крови больных, при котором методом иммуноферментного анализа измеряется уровень десиалированного апобелка В-100, с использованием агглютинина рицина РКА120, связывающегося с терминальной галактозой в десиалированном апобелке В-100.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016149602A RU2659211C2 (ru) | 2016-12-16 | 2016-12-16 | Способ измерения концентрации циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности в сыворотке крови человека |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2016149602A RU2659211C2 (ru) | 2016-12-16 | 2016-12-16 | Способ измерения концентрации циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности в сыворотке крови человека |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2016149602A RU2016149602A (ru) | 2018-06-18 |
| RU2016149602A3 RU2016149602A3 (ru) | 2018-06-18 |
| RU2659211C2 true RU2659211C2 (ru) | 2018-06-28 |
Family
ID=62619487
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2016149602A RU2659211C2 (ru) | 2016-12-16 | 2016-12-16 | Способ измерения концентрации циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности в сыворотке крови человека |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2659211C2 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2755512C1 (ru) * | 2020-10-23 | 2021-09-16 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр терапии и профилактической медицины" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ТПМ" Минздрава России) | Определение степени диссоциации апобелка A-I и способ прогнозирования структурных и функциональных свойств липопротеинов высокой плотности плазмы крови человека, контролирующих основной путь выхода холестерина из макрофагов |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2413952C2 (ru) * | 2009-02-02 | 2011-03-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ определения фракций модифицированных липопротеинов крови |
| RU2501013C1 (ru) * | 2012-07-26 | 2013-12-10 | Батожаб Батожаргалович Шойбонов | Способ определения минимально модифицированных липопротеинов низкой плотности в сыворотке или плазме крови человека |
-
2016
- 2016-12-16 RU RU2016149602A patent/RU2659211C2/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2413952C2 (ru) * | 2009-02-02 | 2011-03-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" | Способ определения фракций модифицированных липопротеинов крови |
| RU2501013C1 (ru) * | 2012-07-26 | 2013-12-10 | Батожаб Батожаргалович Шойбонов | Способ определения минимально модифицированных липопротеинов низкой плотности в сыворотке или плазме крови человека |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| A.N.Orekhov et al. Diagnostic value of immune cholesterol as a marker for atherosclerosis / Journal of Cardiovascular Risk, 1995, vol. 2, N 5, pages 459-466. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2755512C1 (ru) * | 2020-10-23 | 2021-09-16 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр терапии и профилактической медицины" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ТПМ" Минздрава России) | Определение степени диссоциации апобелка A-I и способ прогнозирования структурных и функциональных свойств липопротеинов высокой плотности плазмы крови человека, контролирующих основной путь выхода холестерина из макрофагов |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2016149602A (ru) | 2018-06-18 |
| RU2016149602A3 (ru) | 2018-06-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Pockley et al. | Circulating heat shock protein 60 is associated with early cardiovascular disease | |
| Rahman et al. | IgM antibodies against malondialdehyde and phosphorylcholine are together strong protection markers for atherosclerosis in systemic lupus erythematosus: Regulation and underlying mechanisms | |
| Dambinova et al. | Blood test detecting autoantibodies to N-methyl-D-aspartate neuroreceptors for evaluation of patients with transient ischemic attack and stroke | |
| Litwin et al. | Inflammatory activation in children with primary hypertension | |
| Jung et al. | Risk of macrovascular complications in type 2 diabetes mellitus: endothelial microparticle profiles | |
| JP5903270B2 (ja) | ガレクチン−３の免疫アッセイ | |
| CN103278641A (zh) | 特应性皮炎标记物及其利用技术 | |
| JP4485070B2 (ja) | 全血試料の白血球数を定量する方法 | |
| JP2012530900A (ja) | リポタンパク質特異的アポリポタンパク質を測定する方法 | |
| US11598781B2 (en) | Method for predicting the risk of incidence of chronic kidney disease | |
| Braeckman et al. | Associations between haptoglobin polymorphism, lipids, lipoproteins and inflammatory variables | |
| Çatlı et al. | Serum nesfatin-1 and leptin levels in non-obese girls with premature thelarche | |
| Sato et al. | A newly developed kit for the measurement of urinary liver-type fatty acid-binding protein as a biomarker for acute kidney injury in patients with critical care | |
| Okajima et al. | Rapid assay for plasma soluble E-selectin predicts the development of acute respiratory distress syndrome in patients with systemic inflammatory response syndrome | |
| RU2659211C2 (ru) | Способ измерения концентрации циркулирующих модифицированных липопротеидов низкой плотности в сыворотке крови человека | |
| KR100896396B1 (ko) | 점착성 미세소포의 제거 방법 | |
| WO2012108538A1 (ja) | 急性肺損傷診断方法 | |
| CN111929133A (zh) | 用于生物学检测的gm1神经节苷脂与膜联蛋白v的微粒多肽比例 | |
| WO2018030252A1 (ja) | 尿バイオマーカーを用いたアルツハイマー病の診断補助方法 | |
| WO2012026850A1 (ru) | Способ экспресс-определения атерогенности крови | |
| Abdelkader et al. | Neuropathies in hepatitis C-related liver cirrhosis | |
| RU2623879C2 (ru) | Способ оценки содержания циркулирующих десиалированных липопротеидов низкой плотности | |
| Vanda et al. | The development, fine specificity, and importance of high-avidity antibodies to VAR2CSA in pregnant cameroonian women living in Yaounde, an urban city | |
| JP5891491B2 (ja) | 試料中の総プロテインｓタンパク質量の測定試薬及び測定方法 | |
| Yousef et al. | Study of serum level of interleukin-31 in patients with uremic pruritus |