RU2640261C1 - Штамм А N2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для контроля антигенной и иммуногенной активности и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А - Google Patents
Штамм А N2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для контроля антигенной и иммуногенной активности и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А Download PDFInfo
- Publication number
- RU2640261C1 RU2640261C1 RU2016127971A RU2016127971A RU2640261C1 RU 2640261 C1 RU2640261 C1 RU 2640261C1 RU 2016127971 A RU2016127971 A RU 2016127971A RU 2016127971 A RU2016127971 A RU 2016127971A RU 2640261 C1 RU2640261 C1 RU 2640261C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- virus
- foot
- mouth disease
- type
- Prior art date
Links
- 241000710198 Foot-and-mouth disease virus Species 0.000 title claims abstract description 40
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 title claims abstract description 22
- 208000007212 Foot-and-Mouth Disease Diseases 0.000 title claims abstract description 20
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 title claims abstract description 19
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title abstract description 5
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 62
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims abstract description 16
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 6
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 241001250090 Capra ibex Species 0.000 claims abstract description 3
- 241000700198 Cavia Species 0.000 claims description 7
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 7
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 4
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000699673 Mesocricetus auratus Species 0.000 claims description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 10
- 238000011534 incubation Methods 0.000 abstract description 4
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 30
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 15
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 14
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 14
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 10
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000000254 composite pulse decoupling sequence Methods 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 4
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 3
- 101710197658 Capsid protein VP1 Proteins 0.000 description 3
- 241000710202 Foot-and-mouth disease virus - type A Species 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 101710118046 RNA-directed RNA polymerase Proteins 0.000 description 3
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 3
- 101710108545 Viral protein 1 Proteins 0.000 description 3
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 3
- 238000013081 phylogenetic analysis Methods 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001493546 Suina Species 0.000 description 2
- 101150024766 VP1 gene Proteins 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- GGKNTGJPGZQNID-UHFFFAOYSA-N (1-$l^{1}-oxidanyl-2,2,6,6-tetramethylpiperidin-4-yl)-trimethylazanium Chemical compound CC1(C)CC([N+](C)(C)C)CC(C)(C)N1[O] GGKNTGJPGZQNID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 101710194905 ARF GTPase-activating protein GIT1 Proteins 0.000 description 1
- 102100035959 Cationic amino acid transporter 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100021391 Cationic amino acid transporter 3 Human genes 0.000 description 1
- 101100422538 Escherichia coli sat-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 102100029217 High affinity cationic amino acid transporter 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710081758 High affinity cationic amino acid transporter 1 Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004407 Lactalbumin Human genes 0.000 description 1
- 108090000942 Lactalbumin Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 241001430197 Mollicutes Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108091006503 SLC26A1 Proteins 0.000 description 1
- 108091006231 SLC7A2 Proteins 0.000 description 1
- 108091006230 SLC7A3 Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000027645 antigenic variation Effects 0.000 description 1
- 230000000680 avirulence Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 description 1
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- -1 freon Chemical compound 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000003067 hemagglutinative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000007918 pathogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 210000004777 protein coat Anatomy 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000000601 reactogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000002061 vacuum sublimation Methods 0.000 description 1
- 210000000605 viral structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и касается нового штамма вируса ящура Aphtae epizooticae типа А сем. Picornaviridae, рода Aphtovirus. Охарактеризованный щтамм выделен от больного КРС и получен путем последовательных пассажей на чувствительных гетеро- и гомологичных культурах клеток и депонирован в коллекции ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером штамм ВЯ А №2269/ВНИИЗЖ/2015 (производственный), (контрольный КРС), (контрольный свиной). Представленный штамм репродуцируется в перевиваемых культурах клеток почки сибирского горного козерога (ПСГК-30), IB-RS-2, ВНК-21. В течение 17-24 часов инкубирования урожай вируса в указанных культурах клеток достигает значений 6,75-7,75 lg ТЦД/см. При высокой множественности заражения (1-10 ТЦД/клетка) вызывает ЦПД через 17-24 часов, сохраняя исходные характеристики при пассировании в клеточных культурах на протяжении 5 пассажей. Представленный штамм вируса может быть использован для контроля антигенной и иммуногенной активности и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А. 4 з.п. ф-лы, 1 ил., 7 табл., 7 пр.
Description
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии, в частности к новому штамму вируса ящура Aphtae epizooticae, и может быть использовано для контроля антигенной и иммуногенной активности противоящурных вакцин, а также при разработке и изготовлении средств диагностики и специфической профилактики ящура типа А.
Ящур - высоко контагиозное вирусное заболевание домашних и диких парнокопытных животных. Относится к категории трансграничных болезней, способных преодолевать границы между государствами, вызывать эпизоотии и наносить большой экономический ущерб животноводству.
Возбудителем болезни является безоболочечный РНК-содержащий вирус ящура, представитель рода Aphtovirus семейства Picornaviridae. Различают семь серотипов вируса: А, О, С, Азия-1, САТ-1, САТ-2, САТ-3. В пределах каждого типа существует множество генетических и антигенных вариантов вируса [1].
Вирус ящура обладает значительной антигенной изменчивостью штаммов в пределах одного серотипа. Причиной антигенной изменчивости является изменение аминокислотной последовательности в полипептидах вирусных белков, образующих капсид вириона. Изменения, которые сохраняются в следующем поколении, становятся постоянными и отражаются в модификации нуклеотидной последовательности генома вируса.
Сдвиги антигенного спектра, соответствующие обновлению структуры нового полевого штамма, могут варьировать от незначительных, улавливаемых моноклональными антителами, до существенных, регистрируемых с помощью традиционных поликлональных иммуноглобулинов. Существенные изменения антигенных характеристик природного штамма с большой вероятностью вызывают ослабление специфического иммунитета, индуцированного негомологичным антигеном. Они вызывают также затруднения штаммоспецифической диагностики [7].
В результате возникает необходимость создания новых средств диагностики и специфической иммунопрофилактики.
Известны штаммы вируса ящура типа А, использовавшиеся в качестве производственных на территории СССР и Российской Федерации в течение последних 50 лет.
К ним относятся следующие штаммы: А7 №103, выделенный в 1962 году в Куйбышевской области; А7 №2, выделенный в 1965 году в Таджикской ССР; А №717/73, выделенный в 1973 году в Ставропольском крае, штамм вируса ящура А22 №550, выделенный в 1964 году в Азербайджане и используемый в Российской Федерации в качестве производственного при изготовлении средств специфической профилактики и диагностики, применяемых на всей территории России и в странах постсоветсткого пространства.
В 1990-2000-х годах в Центральной Азии и на Ближнем Востоке доминировали две генетические линии вируса ящура типа А: линия А/Иран/96 (к этой генетической группе относится российский производственный штамм А/Армения/98) и А/Иран/2005. Штаммы из группы А/Иран/99 и А/Иран/96 не входят в настоящее время в первоочередной перечень рекомендуемых Всемирной референтной лабораторией МЭБ/ФАО по ящуру вакцинных штаммов, тогда как штамм А/Иран/2005 (А/Турция/06) относится к высоко приоритетным [3, 4, 5, 9].
В 2013 г. на территории РФ регистрировались многочисленные вспышки ящура в Забайкальском крае, Амурской области, а также - впервые за несколько десятилетий - в Карачаево-Черкесской Республике, Краснодарском крае и Кабардино-Балкарской Республике. Все российские изоляты, ответственные за вспышки ящура на Северном Кавказе, принадлежат к генетической линии A Iran-05, сублинии SIS - 10.
Результаты филогенетического анализа свидетельствуют о том, что вспышки болезни в Забайкальском крае и Амурской области были вызваны вирусом ящура типа А, принадлежащим к генетической линии A Sea-97. Эта генетическая линия эндемична в странах Юго-Восточной Азии [8].
В настоящее время в ФГБУ «ВНИИЗЖ» освоено производство противоящурных вакцин из штаммов вируса ящура генетических линий А Iran-05, сублинии SIS - 10 (штамм вируса ящура А №2171/Кабардино-Балкарский/13) и A Sea-97 (штамм вируса ящура А №2187/Кути/13). Недостатком вышеуказанных штаммов является то, что изготовленные на их основе вакцины, обеспечивают эффективную защиту животных только против заражения гомологичным вирусом. Однако необходимо учитывать, что вирус ящура постоянно эволюционирует, появляются новые генетические линии. В 2015 г. широкое распространение на территории Саудовской Аравии, Ирана, Турции получил ящур типа А, генетической линии G-VII А, топотипа Азия [13].
В связи с этим возникла необходимость получить новый производственный штамм из эпизоотического вируса ящура серотипа А для обеспечения безопасности территории России и сопредельных государств от этого возбудителя.
Штамм вируса ящура, относящийся к настоящему изобретению, ранее на территории РФ не встречался.
Задача, на решение которой направлено настоящее изобретение, заключается в расширении арсенала производственных штаммов вируса ящура серотипа А, обладающих высокой инфекционной, антигенной и иммуногенной активностью в нативном виде и сохраняющих антигенную и иммуногенную активность после инактивации, пригодных для контроля антигенной и иммуногенной активности вакцин, изготовления чувствительных и высокоспецифичных диагностических препаратов и высокоиммуногенных вакцин, гомологичных эпизоотическому вирусу.
Указанная задача решена путем получения штамма А №2269/ВНИИЗЖ/2015 (авторское наименование) вируса ящура типа А для контроля антигенной и иммуногенной активности, а также для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А.
Изолят вируса ящура, послуживший источником для получения штамма А №2269/ВНИИЗЖ/2015, был выделен в декабре 2015 года от больных свиней в Республике Армения (экспертиза №2269). Штамм вируса ящура А №2269/ВНИИЗЖ/2015 получен путем последовательных пассажей на чувствительных гетеро- и гомологичных культурах клеток.
Штамм вируса ящура типа А №2269/ВНИИЗЖ/2015 депонирован 01 февраля 2016 года в Коллекцию штаммов микроорганизмов Федерального государственного бюджетного учреждения «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»), под регистрационным номером (авторским наименованием): штамм ВЯ А №2269/ВНИИЗЖ/2015 (производственный), (контрольный КРС), (контрольный свиной).
По сравнению с известными штаммами штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 обладает более высокой инфекционной, антигенной и иммуногенной активностью в нативном виде и после инактивации.
Экспериментально подтверждена возможность использования вируса ящура А №2269/ВНИИЗЖ/2015 для контроля антигенной и иммуногенной активности, а также для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А.
Сущность изобретения пояснена на дендрограмме, отражающей филогенетические взаимоотношения штамма вируса ящура А №2269/ВНИИЗЖ/2015 с эпизоотическими и вакцинными штаммами вируса ящура серологического типа А. Дендрограмма основана на сравнении полных нуклеотидных последовательностей гена VP1.
Сущность изобретения пояснена в перечне последовательностей, в котором:
SEQ ID NO: 1 представляет последовательность нуклеотидов гена белка VP1 штамма А №2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура типа А;
SEQ ID NO: 2 представляет последовательность аминокислот гена белка VP1 штамма А №2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура типа А.
Штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура типа А характеризуется следующими признаками и свойствами.
Морфологические признаки
Штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура типа А относится к семейству Picornaviridae, роду Aphtovirus, серотипу А и обладает морфологическими признаками, характерными для возбудителя ящура: форма вириона икосаэдрическая, размер 23-25 нм. Вирион состоит из молекулы РНК, заключенной в белковую оболочку. Белковая оболочка состоит из 32 капсомеров, расположенных в кубической симметрии.
Антигенные свойства
По своим антигенным свойствам штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура относится к серотипу А. Вирус стабильно нейтрализуется гомологичной антисывороткой. Вирус не проявляет гемагглютинирующей активности (ГА-активности). У переболевших животных в сыворотке крови образуются антитела, выявляемые в иммуноферментном анализе (ИФА) и реакции микронейтрализации (РМН).
При гипериммунизации морских свинок концентрированный антиген из инактивированного вируса ящура типа А №2269/ВНИИЗЖ/2015 индуцирует образование вирусспецифических антител, выявляемых в РСК в разведении 1:40.
Методом нуклеотидного секвенирования была определена первичная структура гена VP1 вируса ящура типа А №2269/ВНИИЗЖ/2015 и выведена первичная структура белка VP1. Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей показал, что штамм вируса ящура типа А №2269/ВНИИЗЖ/2015 значительно отличается от производственных штаммов вируса ящура типа А.
Степень нуклеотидных различий последовательностей штамма А №2269/ВНИИЗЖ/2015 со штаммами вируса ящура серологического типа А составило: А22№550 - 21,49%, А22/Ирак/64 - 21,73%, А/Иран/96 - 22,03%, А/Армения/98 - 22,39%, А/Турция/06 - 22,11%, А/Иран/05 - 22,32%.
Филогенетический анализ показал, что штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 принадлежит к генетической линии G-VII типа А, топотипа Азия.
Антигенное родство штамма ВЯ А №2269/ВНИИЗЖ/2015 с имеющимися производственными штаммами ВЯ типа А исследовано серологическим методом в перекрестной реакции микронейтрализации (РМН). Штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 антигенно отличается от производственных штаммов А22 №550, А/Ирак/64, А/Иран/97, А/Турция/06 (А/Иран/05), А №2187/Кути/13, А №2171/Кабардино-Балкарский/13.
Результаты исследований в РМН представлены в таблице 1. Антигенное соответствие (r1) составило для А22 №550 - 0,01, А/Ирак/64 - 0,01, А/Иран/97 - 0,05, А/Турция/06 - 0,02, А №2187/Кути/13 - 0,01, А №2171/Кабардино-Балкарский/13 - 0,06. При значении r1≥0,3 полевой изолят и производственный штамм являются близкородственными, и вакцина из производственного штамма будет защищать от эпизоотического вируса, при значении r1<0,3 полевой изолят отличается от производственного штамма, и вакцина из данного штамма не защищает от эпизоотического вируса [10, 12].
Биотехнологические характеристики
Штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 репродуцируется в перевиваемых культурах клеток почки сибирского горного козерога (ПСГК-30), культурах перевиваемой линии клеток почки свиньи IB-RS-2, перевиваемых культурах клеток почки сирийского хомячка ВНК-21, и в течение 17-24 часов инкубирования вируса в указанных культурах клеток накапливается от 5,7 до 7,75 lg ТЦД50/см3. При высокой множественности заражения (1-10 ТЦД/клетка) вызывает ЦПД через 17-24 часов, сохраняет исходные характеристики при пассировании в клеточных культурах на протяжении 5 пассажей (срок наблюдения).
Генотаксономическая характеристика
Штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура типа А является РНК-содержащим вирусом с молекулярной массой 7×106Да.
Нуклеиновая кислота представлена одноцепочной линейной молекулой, молекулярной массой 2,8×106Да. Вирион имеет белковую оболочку, состоящую из четырех основных белков VP1, VP2, VP3 и VP4. Липопротеиновая оболочка отсутствует.
Основным антигенным белком является VP1. В вирионе содержится приблизительно 31,5% РНК и 68,5% белка. Вирионная РНК является инфекционной и участвует в образовании белков-предшественников в инфицированных клетках. Предшественники, в свою очередь, расщепляются с образованием более стабильных структурных и неструктурных полипептидов вируса. Из 8 неструктурных полипептидов, накапливающихся в инфицированных клетках, один (VP66a) является РНК-зависимой РНК-полимеразой, участвующей в репликации РНК новых вирионов.
Физические свойства
Масса вириона составляет 8,4×10-18 г. Коэффициент седиментации 146S в градиенте сахарозы. Плавучая плотность 1,45 г/см3.
Устойчивость к внешним факторам
Штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 устойчив к эфиру, хлороформу, фреону, ацетону и другим органическим растворителям и детергентам. Наиболее стабилен при рН 7,2-7,6. Сдвиги рН как в кислую, так и в щелочную сторону ведут к инактивации вируса. Чувствителен к формальдегиду, УФ-облучению, γ-облучению, высоким температурам.
Дополнительные признаки и свойства
Иммуногенная активность - иммуногенен в составе инактивированной вакцины.
Антигенная активность - введение инактивированного антигена морским свинкам индуцирует образование вирусоспецифических антител.
Реактогенность - реактогенными свойствами не обладает.
Патогенность - патогенен для парнокопытных животных, новорожденных мышат, морских свинок.
Вирулентность - вирулентен для естественно-восприимчивых животных при контактном, аэрозольном и парентеральном заражении.
Стабильность - сохраняет исходные биологические свойства при пассировании в чувствительных биологических системах в течение 5 пассажей (срок наблюдения).
Сущность предлагаемого изобретения пояснена примерами его использования, которые не ограничивают объем изобретения.
Пример 1
Вирусный изолят, послуживший источником для получения штамма А №2269/ВНИИЗЖ/2015, был выделен в ФГБУ «ВНИИЗЖ» из проб афтозного материала, полученных в декабре 2015 года от подозреваемых в заболевании ящуром свиней из села Аразап Армавирской области Республики Армения (экспертиза №2269). Пробы афтозного материала поступили в ФГБУ «ВНИИЗЖ» 25 декабря 2015 года.
При выделении вируса с целью получения его однородной популяции, обладающей оптимальными биотехнологическими свойствами, использовали комплекс биологических, вирусологических и биохимических методов, предусмотренных методическими указаниями по выявлению и идентификации штаммов вируса ящура [2].
Биологические и вирусологические методы включали:
Выделение вируса проводили на культуре перевиваемых линиях клеток ПСГК-30, IB-RS-2, ВНК-21 с последующей адаптацией (5 пассажей). Для постановки биопроб на перевиваемых культурах клеток их выращивали на соответствующих питательных средах, в стационарных условиях во флаконах с площадью поверхности 25 см2, отмывали от ростовой среды и заражали 10% суспензией афтозного материала (множественность заражения составляла 1-10 ТЦД50 на клетку), приготовленной в растворе Хенкса с 0,5% гидролизата лактальбумина (ГЛА) и антибиотиками по стандартной рецептуре. Для удаления микрофлоры и балластных клеточных компонентов суспензию обрабатывали 10% хлороформом. После 30-минутного контакта при 37°С во флаконы вносили по 5 см поддерживающей среды и инкубировали при 37°С до появления ЦПД вируса. При наличии ЦПД (округление клеток, повышение их оптической плотности, дегенерация и отделение клеток от стекла) флаконы подвергали замораживанию-оттаиванию, очистке клеточной взвеси хлороформом и центрифугированию при 3000 g в течение 15 мин. Полученный вируссодержащий материал использовали для последующих пассажей и исследования в РСК на наличие вирусного антигена, при этом использовали коммерческие типоспецифические сыворотки, хранящиеся в музее штаммов ФГБУ «ВНИИЗЖ». Вирус считался адаптированным к культурам клеток, если в течение 18-24 часов проявлялось (%) 90-100 ЦПД в монослое.
Вирус, адаптированный к культурам клеток ПСГК - 30, IB-RS-2 и ВНК-21, использовали для получения антигена для РСК.
Результаты адаптации вируса к различным клеточным культурам представлены в таблице 2.
Данные, приведенные в таблице 2, свидетельствуют о высокой адаптационной способности штамма вируса ящура А №2269/ВНИИЗЖ/2015 к использованным клеточным культурам.
Изолированный с помощью перечисленных методов вирусный препарат был исследован в РСК с целью идентификации его типовой принадлежности (таблица 3). Проведена проверка штамма на отсутствие контаминации посторонними вирусами в ПЦР и ОТ-ПЦР.
Приведенные в таблице 3 результаты свидетельствуют о том, что в афтозном материале экспертизы №2269/ВИИЗЖ/2015 выявлен антиген вируса ящура типа А в разведении 1:2 в РСК.
Контаминации бактериальной и грибной микрофлорой, микоплазмами и посторонними вирусами не обнаружено.
Пример 2
Для гипериммунизации морских свинок использовали антиген из штамма А №2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура типа А, репродуцированный в монослойной культуре клеток ПСГК-30. Вируссодержащую суспензию концентрировали в 100 раз добавлением 8-10% полиэтиленгликоля (ПЭГ) м.м. 6000, очищали от балластных примесей добавлением 10% хлороформа. Очищенный вирус инактивировали аминоэтилэтиленимином (АЭЭИ) в концентрации 0,025-0,05% при значении рН 8,0-8,3.
Инактивированный концентрат антигена в смеси с равным объемом масляного адъюванта типа неполного адъюванта Фрейнда вводили морским свинкам в объеме 1,0 см3 внутримышечно. Через 21 и 7 дней иммунизацию повторяли и через 10 дней после последнего введения антигена животных обескровливали. Индивидуальные пробы сыворотки крови проверяли на типовую специфичность и активность в РСК в соответствии с методическими рекомендациями по выявлению и идентификации штаммов вируса ящура [12].
После этого готовили серию штаммоспецифической сыворотки путем смешивания индивидуальных проб сыворотки крови морских свинок одинаковой активности. Штаммовую специфичность серийного препарата определяли в одно- и двусторонних реакциях с гомо- и гетерологичными антигенами.
После консервирования азидом натрия (1:5000) и выдерживания при температуре 4°С в течение 30 дней полученную сыворотку расфасовали во флаконы по 1,0 см3 и лиофилизировали методом сублимации под вакуумом.
Способом, описанным в примере 2, была приготовлена 1 серия гипериммунной сыворотки, характеристика которой представлена в таблице 4.
Данные, приведенные в таблице 4, свидетельствуют о том, что получена диагностическая сыворотка, по специфической активности отвечает требованиям ГОСТа 25384-82.
Пример 3
Для получения антигена для серологических и иммунохимических реакций использовали вирус ящура типа А штамма А №2269/ВНИИЗЖ/2015, адаптированный к культуре клеток перевиваемых линий IB-RS-2. Для адаптации использовали вируссодержащий материал в виде 10% афтозной суспензии. Пассирование проводили в течение 5 последовательных пассажей. Полученный вирус использовали для наработки вирусного сырья. Заражение клеточных культур и сбор вирусного материала проводили по общепринятой методике.
Полученную вируссодержащую суспензию концентрировали в 100 раз добавлением (%) 8-10 ПЭГ. Полученный концентрат инактивировали АЭЭИ, расфасовали во флаконы и лиофилизировали методом сублимации под вакуумом. Данные представлены в таблице 5.
Пример 4
Для изготовления вакцины инактивированной сорбированной типа А №2269/ВНИИЗЖ/2015 вирус ящура репродуцировали при температуре 36-37°С. Через 6-7 часов инкубирования проводили подсчет живых и мертвых клеток с помощью окраски трипановым синим. Если количество живых клеток составляло 15-20%, то инкубирование продолжали еще 2-3 часа. При достижении количества мертвых клеток 90-95% культивирование прекращали и вируссодержащую суспензию контролировали на стерильность и содержание 146S и 75S компонентов. Количество 146S+75S компонентов в суспензии должно составлять не менее 0,5 мкг/см3. Сразу по окончании цикла репродукции вируса, не прекращая термостатирования, в вируссодержащую суспензию добавляли 15-20% раствор АЭЭИ, подкисленный ледяной уксусной кислотой до рН 8,0-8,5. Конечная концентрация АЭЭИ в вируссодержащей суспензии должна быть равной 0,025-0,05%. Инактивацию инфекционности вируса проводили в течение 12-24 часов при 36-37°С и рН 7,2-7,6 с перемешиванием через 5-6 часов в течение 3-5 минут. Остаток АЭЭИ нейтрализовали добавлением тиосульфата натрия.
В теплую суспензию добавляли 10% раствор ПГМГ до концентрации 0,005-0,007% для флокуляции балластных примесей и инактивации возможных контаминантов. Флокулированные балластные примеси подвергали седиментации с последующей декантацией [6].
Пример 5
В таблице 6 приведены результаты культивирования штамма А №2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура типа А в суспензии клеток ВНК-21, из которых следует:
1) штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 имеет время репродукции 15,35±0,58 ч;
2) у штамма А №2269/ВНИИЗЖ/2015 наблюдается накопление вирусспецифического белка в пределах 2,33±0,23 мкг/см3;
3) накопление иммуногенных компонентов (146S+75S) у штамма А №2269/ВНИИЗЖ/2015 - 1,67±0,17 мкг/см3.
Пример 6
Полученный антиген контролировали на авирулентность, содержание вирусспецифического белка, 146S и 75S компонентов вируса и стерильность. Необходимую концентрацию 146S и 75S компонентов в 1 см адсорбированной вакцины получают путем концентрирования антигена ГОА.
Расчетный объем ГОА 3% концентрации добавляют в охлажденную суспензию антигена при работающей мешалке. Перемешивание ведут в течение 30 минут. После седиментации ГОА сливают расчетный объем оставшейся суспензии. Конечная концентрация ГОА должна быть в пределах 1,75±0,30, Р<0,001, мг/см3 n=10, а концентрация 146S и 75S компонентов вируса ящура по меньшей мере 3,0 мкг/см3 готового препарата. Затем в суспензию добавляют дополнительно 10% раствор сапонина до конечной концентрации 0,075%, что соответствует 750,0 мкг сапонина в 1 см3 готовой вакцины. Вакцину расфасовывают в стеклянные или пластиковые флаконы и проводят контроль ее стерильности в соответствии с ГОСТ 28085-89.
Авирулентность и безвредность вакцины проверяют на 5 головах КРС, вводя вакцину сначала под слизистую языка в дозе 2 см3, затем подкожно в дозе 10 см3. Наблюдение за клиническим состоянием животных ведут в течение 5 суток. Авирулентную, безвредную и стерильную вакцину проверяют на иммуногенную активность на КРС.
Пример 7
Контроль иммуногенной и антигенной активности вакцины инактивированной сорбированной из вируса ящура типа А №2269/ВНИИЗЖ/2015 осуществляли следующим образом. Для проверки иммуногенной активности препарата использовали 17 голов КРС массой 200+250 кг, доставленных из благополучных по ящуру зон. Первой группе животных из 5 голов КРС ввели вакцину подкожно в цельном виде. Второй группе животных из 5 голов КРС ввели подкожно разведение вакцины на фосфатно-буферном растворе в соотношении 1:4 и третьей группе из 5 голов в разведении 1:16. Четвертая группа из 2 голов осталась без вакцинации.
Объем прививной дозы составил 2,0 см3. На 21 день после вакцинации у вакцинированных и 2 контрольных голов КРС взяли пробы сыворотки крови и провели контрольное заражение животных введением под слизистую языка суспензии вируса ящура типа А №2269/ВНИИЗЖ/2015 в дозе 104,0 ИД50/0,2 см3.
Данные по иммуногенной активности вакцины в прививной дозе представлены в таблице 7.
Через 8 дней после заражения провели патологоанатомическое исследование КРС. Заболели все контрольные животные, 1 животное, вакцинированное вакциной в разведении 1:4, и 4 животных, вакцинированных разведением вакцины 1:16.
ИмД50 вакцины составила 0,25 см3. Прививная доза вакцины содержала 8 ПД50, что свидетельствует об эффективности препарата. Такая вакцина считается иммуногенной и пригодной для практического применения.
Источники информации
1. Бурдов А.Н., Дудников А.И., Малярец П.В. и др. Ящур / Под ред. А.Н. Бурдова. - М.: Агропромиздат, 1990, 320 с.
2. Методические указания по выявлению и идентификации штаммов вируса ящура / Гусев А.А., Захаров В.М., Шажко Ж.А. [и др.]. Владимир, 2002, 31 с.
3. Пат. РФ №2140452, C12N 7/00, А61К 39/135, G01N 33/569, А61К 39/42, С07К 16/08, 27.10.1999 г.
4. Пат. РФ №2242513, C12N 7/00, А61К 39/135, 20.12.2004 г.
5. Пат. РФ №2451745, C12N 7/00, А61К 39/135, 27.05.2012 г.
6. Промышленный регламент на производство вакцины против ящура типов А, О, С, Азия-1, Сат-1, Сат-2 и Сат-3 инактивированной сорбированной моно- и поливалентной (из вируса, выращенного в клетках ВНК-21): утв. директором ФГУ «ВНИИЗЖ», 11.09.2009. - Владимир, 2009. - 216 с.
7. Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В. и др. Вирусные болезни животных. - М.: ВНИИТИБП, 1998, с. 532-548.
8. Щербаков А.В. Филогенетический анализ изолятов вируса ящура, вызвавших вспышки болезни в России в 2013 году [Текст]: научное издание / А.В. Щербаков, А.М. Тимина, Н.Г. Зиняков // Ветеринария. - 2014. - №7. - С. 22-25.
9. Foot-and-mouth Disease. Situation worldwide and major epidemiological events in 2005-2006 / K. Sumption, J. Lubroth, T. Murrai, S. De La Rocqe // EMPRESS/ Focus on…, 2007, №1, 11 P.
10. OIE. Manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals - 7th Ed. Paris, 2012. - Vol. 1, Chapter 2.1.5. - P. 166-169.
11. OIE. Terrestrial Animal Health Code - 24th Ed., Paris, 2015. - Vol. 2, Chapter 8.8. - P. 455-477.
12. Selection of foot and mouth disease vaccine strains - a review / D.J. Paton, J.-F. Valacher, J. Bergman [et al.] // Rev. Sci. Tech. OIE. - 2005. - Vol. 24(3). - P. 981-993.
13. WRLFMD Quarterly Report 2015 - URL http://www.wrlfmd.org/ref_labs/ref_lab_reports/OIE-FAO.
Claims (5)
1. Штамм вируса ящура Aphtae epizooticae типа А, сем. Picornaviridae, род Aphtovirus, депонированный в коллекцию штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером штамм ВЯ А №2269/ВНИИЗЖ/2015 (производственный), (контрольный КРС), (контрольный свиной) для контроля антигенной и иммуногенной активности и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А, характеризующийся тем, что он получен в течение последовательного пассирования в культурах клеток гомологичного и гетерологичного происхождения, обладающий высокой биологической, антигенной, иммуногенной активностью в нативном виде.
2. Штамм по п. 1, характеризующийся тем, что он получен в течение 5 последовательных пассажей в перевиваемой культуре клеток почки сибирского горного козерога (ПСГК-30) с титром инфекционной активности не менее 6,79 lg ТЦД50/см3, стабилен в течение 5 последовательных пассажей.
3. Штамм по п. 1, характеризующийся тем, что он получен в течение 3 последовательных пассажей в перевиваемой культуре клеток почки свиньи (IB-RS-2) с титром инфекционной активности не менее 6,75 lg ТЦД50/см3, стабилен в течение 5 последовательных пассажей.
4. Штамм по п. 1, характеризующийся тем, что он получен в течение 5 последовательных пассажей в перевиваемой культуре клеток почки сирийского хомячка (ВНК-21) с титром инфекционной активности не менее 7,75 lg ТЦД50/см3, стабилен в течение 5 последовательных пассажей.
5. Штамм по любому из пп. 1-4, характеризующийся тем, что после инактивации он индуцирует в организме морских свинок образование вирусоспецифических антител, выявляемых в РСК в разведениях 1:40.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016127971A RU2640261C1 (ru) | 2016-07-12 | 2016-07-12 | Штамм А N2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для контроля антигенной и иммуногенной активности и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2016127971A RU2640261C1 (ru) | 2016-07-12 | 2016-07-12 | Штамм А N2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для контроля антигенной и иммуногенной активности и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2640261C1 true RU2640261C1 (ru) | 2017-12-27 |
Family
ID=63857407
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016127971A RU2640261C1 (ru) | 2016-07-12 | 2016-07-12 | Штамм А N2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для контроля антигенной и иммуногенной активности и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2640261C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2773659C1 (ru) * | 2021-05-12 | 2022-06-07 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" | Штамм А 2205/G IV вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2140452C1 (ru) * | 1999-03-15 | 1999-10-27 | Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Штамм n 1707 "армения-98" вируса ящура типа a для изготовления диагностических и вакцинных препаратов |
RU2575801C1 (ru) * | 2014-11-18 | 2016-02-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ") | ШТАММ O №2108/ЗАБАЙКАЛЬСКИЙ/2010 ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА О ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЯЩУРА ТИПА О |
-
2016
- 2016-07-12 RU RU2016127971A patent/RU2640261C1/ru active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2140452C1 (ru) * | 1999-03-15 | 1999-10-27 | Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Штамм n 1707 "армения-98" вируса ящура типа a для изготовления диагностических и вакцинных препаратов |
RU2575801C1 (ru) * | 2014-11-18 | 2016-02-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ") | ШТАММ O №2108/ЗАБАЙКАЛЬСКИЙ/2010 ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА О ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЯЩУРА ТИПА О |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
NICK J. KNOWLES et al., Foot-and-Mouth Disease Virus Serotype A in Egypt, Emerging Infectious Diseases, October 2007, Vol. 13, No. 10, pp.1593-1596. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2773659C1 (ru) * | 2021-05-12 | 2022-06-07 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" | Штамм А 2205/G IV вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2593718C1 (ru) | Вакцина инактивированная эмульсионная против ящура типов а, о, азия-1 | |
WO2023045426A1 (zh) | 柯萨奇病毒a16型毒株及其免疫原性组合物和应用 | |
KR19990072201A (ko) | 로타바이러스 항원, 로타바이러스 감염증에 대한백신 및 진단제와 항원 제조방법 | |
RU2451745C2 (ru) | ШТАММ А 2045/КИРГИЗИЯ/2007 ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА А ДЛЯ КОНТРОЛЯ АНТИГЕННОЙ И ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ПРОТИВОЯЩУРНЫХ ВАКЦИН И ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ЯЩУРА ТИПА А | |
RU2603003C1 (ru) | Вакцина инактивированная сорбированная против ящура типов а, о, азия-1 | |
RU2699671C1 (ru) | Вакцина для ранней защиты против ящура типа О инактивированная эмульсионная | |
RU2665849C1 (ru) | Вакцина инактивированная эмульсионная против ящура типа О | |
RU2563522C1 (ru) | ШТАММ О №2102/Забайкальский/2010 ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА О ДЛЯ КОНТРОЛЯ АНТИГЕННОЙ И ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ ПРОТИВОЯЩУРНЫХ ВАКЦИН И ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ЯЩУРА ТИПА О | |
RU2603255C1 (ru) | ШТАММ А N2155/Забайкальский/2013 ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА А ДЛЯ КОНТРОЛЯ АНТИГЕННОЙ И ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ И ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ЯЩУРА ТИПА А | |
RU2640261C1 (ru) | Штамм А N2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для контроля антигенной и иммуногенной активности и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А | |
RU2143921C1 (ru) | Вакцина против ящура типа а и способ ее изготовления | |
RU2242513C1 (ru) | Штамм а (грузия) 1999/№1721 вируса ящура типа а для изготовления диагностических и вакцинных препаратов | |
RU2682876C1 (ru) | Вакцина инактивированная эмульсионная против ящура типа О | |
RU2297452C2 (ru) | Штамм азия-1/таджикистан/2004(1960) вируса ящура типа азия-1 для изготовления диагностических и/или вакцинных препаратов | |
RU2658608C1 (ru) | Штамм О N 2311/Забайкальский/2016 вируса ящура Aphtae epizooticae типа О для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа О | |
RU2526570C2 (ru) | Вакцина против ящура типа а инактивированная сорбированная | |
RU2681815C1 (ru) | Вакцина инактивированная сорбированная против ящура типа А | |
RU2220744C1 (ru) | Вакцина против ящура типа азия-1 и способ ее изготовления | |
RU2553219C1 (ru) | ШТАММ ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА А ДЛЯ КОНТРОЛЯ АНТИГЕННОЙ И ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ И ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ЯЩУРА ТИПА А | |
RU2604200C9 (ru) | ШТАММ А №2166/Краснодарский/2013 ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА А ДЛЯ КОНТРОЛЯ АНТИГЕННОЙ И ИММУНОГЕННОЙ АКТИВНОСТИ И ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ЯЩУРА ТИПА А | |
RU2708326C1 (ru) | Штамм О N2344/Монголия/2017 вируса ящура Aphtae epizooticae типа О для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа О | |
RU2560268C1 (ru) | ШТАММ ВИРУСА ЯЩУРА Aphtae epizooticae ТИПА А ДЛЯ ИЗГОТОВЛЕНИЯ БИОПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ЯЩУРА ТИПА А И ИХ КОНТРОЛЯ | |
RU2140452C1 (ru) | Штамм n 1707 "армения-98" вируса ящура типа a для изготовления диагностических и вакцинных препаратов | |
RU2204599C1 (ru) | Штамм № 1734 "приморский-2000" вируса ящура типа о для изготовления диагностических и вакцинных препаратов | |
RU2294760C2 (ru) | Вакцина инактивированная сорбированная против ящура типа а |