RU2560594C2 - Method for thyroid status correction in breeding doe rabbits after first pregnancy in endemic areas by combined application of iodine and selenium - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: invention refers to veterinary science. The method provides administering E-Selen 0.04 ml/kg or Selenolin^® 0.008 ml/kg of doe's body weight intramuscularly six or seven days before a mating. One day before the mating, Monklavit-1, iodine polymer preparation 2.0 ml per head dissolved (1:1) in 5% glucose is given per os with using a needle-free syringe.

EFFECT: using the dosage schedule of the microelements (iodine and selenium) enables the thyroid functional and organic changes ensuring the thyroid homeostasis and increasing the production yield of breeding rabbits from the first kindling that is expressed in increasing the number of infant rabbits in a kindle, preserving and activating a body weight yield.

2 tbl

Description

Изобретение относится к ветеринарии и биологии и может быть использовано для коррекции тиреоидного статуса, повышения продуктивных качеств и реализации генетического потенциала крольчих-первокролок, пребывающих на территории биогеохимических провинций, эндемичных по микронутриентам.The invention relates to veterinary medicine and biology and can be used to correct thyroid status, increase productive qualities and realize the genetic potential of first-rabbit rabbits that are located on the territory of biogeochemical provinces endemic to micronutrients.

Известно кормовое средство для профилактики селеновой и йодной недостаточности у сельскохозяйственных животных и птиц [1], состоящее из стабилизированного крахмальным клейстером селенита натрия и кристаллического йода. Также известна комплексная кормовая микродобавка для кроликов [2], включающая в себя ряд микроэлементов, среди которых имеется йод и селен. Общим недостатком подобных кормовых добавок является их высокая стоимость и необходимость длительного применения, что при несоблюдении дозировки может привести к интоксикации. Кроме того, не учитывались индивидуальные особенности фармакокинетики препаратов йода и селена.Known feed for the prevention of selenium and iodine deficiency in farm animals and birds [1], consisting of stabilized with starch paste sodium selenite and crystalline iodine. A complex feed microadditive for rabbits is also known [2], which includes a number of trace elements, among which there is iodine and selenium. A common disadvantage of such feed additives is their high cost and the need for long-term use, which, if the dosage is not followed, can lead to intoxication. In addition, the individual characteristics of the pharmacokinetics of iodine and selenium preparations were not taken into account.

Наиболее близким к заявленному является способ повышения плодовитости и молочной продуктивности крольчих парентеральным введением селенсодержащих препаратов [3] (прототип), однако он не подразумевает компенсацию дефицита йода.Closest to the claimed is a way to increase the fertility and milk productivity of rabbits by parenteral administration of selenium-containing drugs [3] (prototype), however, it does not imply compensation for iodine deficiency.

В промышленных и фермерских кролиководческих комплексах особенно остро стоит вопрос поддержания надлежащего уровня эндокринной и, как следствие, репродуктивной функции племенных крольчих первого окрола, увеличения численности крольчат в помете, снижения отхода молодняка в первые месяцы жизни и реализации их генетического потенциала. Исследования по изучению реактивности тканевых кластеров щитовидной железы крольчих на фоне комплексного применения препаратов йода и селена до настоящего времени не проводились.In industrial and farm rabbit-breeding complexes, the issue of maintaining the proper level of endocrine and, as a result, the reproductive function of breeding rabbits of the first round, increasing the number of rabbits in the litter, reducing the young growth in the first months of life and realizing their genetic potential is especially acute. Studies on the reactivity of tissue clusters of rabbit thyroid gland against the background of the complex use of iodine and selenium preparations have not yet been conducted.

Задача изобретения - коррекция тиреоидного статуса и повышение продуктивных качеств племенных крольчих первого окрола с помощью сочетанного применения препаратов йода и селена.The objective of the invention is the correction of thyroid status and increase the productive qualities of breeding rabbits of the first round using the combined use of iodine and selenium preparations.

Технический результат достигается за счет того, что крольчихам за шесть-семь суток до случки внутримышечно вводят препараты «Е-селен» в дозе 0,04 мл/кг или «Селенолин^®» в дозе 0,008 мл/кг массы тела животного и непосредственно за сутки до случки с помощью шприца без иглы per os задается разведенный (1:1) в 5% растворе глюкозы йодполимерный препарат «Монклавит-1» в дозе 2,0 мл на голову.The technical result is achieved due to the fact that rabbits are injected intramuscularly with E-selenium at a dose of 0.04 ml / kg or Selenolin ^® at a dose of 0.008 ml / kg of body weight of an animal and immediately per day six to seven days before mating. before mating, using a syringe without a needle, per os is diluted (1: 1) in a 5% glucose solution with the Monclavit-1 iodopolymer in a dose of 2.0 ml per head.

С целью реализации задачи были сформированы контрольная и две опытные группы крольчих-аналогов в возрасте шести месяцев по пять голов в каждой (n=15).In order to accomplish the task, a control and two experimental groups of rabbit-analogs were formed at the age of six months, five animals each (n = 15).

Контрольная группа животных не подвергалась воздействию препаратов йода и селена. Крольчихам опытных групп за шесть-семь суток до планируемой случки внутримышечно вводили: I опытная группа - препарат «Е-селен» в дозе, 0,04 мл/кг; II опытная группа - препарат «Селенолин^®» в дозе 0,008 мл/кг массы тела животного. Препарат «Е-селен» является комплексом витамина E (токоферол ацетат) и неорганической формы селена, представленной селенитом натрия. «Селенолин^®» - лечебно-профилактический препарат, в отличие от «Е-селена» его основой является селеноорганическое соединение ДАФС-25 (диацетофенонилселенид). Непосредственно за сутки до случки крольчихам всех опытных групп с помощью шприца без иглы per os задавался разведенный (1:1) 5% раствором глюкозы йодполимерный препарат «Монклавит-1» в дозе 2,0 мл на голову.The control group of animals was not exposed to iodine and selenium preparations. The rabbits of the experimental groups were injected intramuscularly six to seven days before the planned mating: I experimental group - the preparation “E-selenium” at a dose of 0.04 ml / kg; II experimental group - the drug "Selenolin ^® " at a dose of 0.008 ml / kg of animal body weight. The drug "E-selenium" is a complex of vitamin E (tocopherol acetate) and the inorganic form of selenium represented by sodium selenite. "Selenolin ^® " is a therapeutic and prophylactic drug, in contrast to E-selenium, its basis is the organo-selenium compound DAFS-25 (diacetophenonyl selenide). Immediately one day before mating, rabbits of all experimental groups were injected with a syringe without a needle per os diluted (1: 1) with 5% glucose solution iodopolymer drug Monclavit-1 in a dose of 2.0 ml per head.

Экспериментальная часть включала в себя комплекс цито-гистологических, морфометрических, морфобиохимических, химико-аналитических исследований и статистическую обработку полученного цифрового материала. Забор материала для исследований осуществляли у самок всех исследуемых групп, поствитально при убое с хозяйственной целью. Экспериментальная часть работы была выполнена в соответствии с протоколами «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей» и законодательством Российской Федерации (Национальный стандарт ГОСТ Р 53434-2009).The experimental part included a complex of cyto-histological, morphometric, morphobiochemical, chemical-analytical studies and statistical processing of the obtained digital material. Material for research was taken from females of all the studied groups, postvital during slaughter for economic purposes. The experimental part of the work was performed in accordance with the protocols of the "European Convention for the Protection of Vertebrate Animals used for Experimental and Other Scientific Purposes" and the legislation of the Russian Federation (National Standard GOST R 53434-2009).

Материалом исследования служила щитовидная железа, пробы стабилизированной крови и ее сыворотки от крольчих всех исследуемых групп.The study material was the thyroid gland, samples of stabilized blood and its serum from rabbits of all studied groups.

Гистологические пробы подвергали тривиальным методам фиксации и окрашивания гематоксилин-эозином. Световую микроскопию осуществляли при помощи микроскопа Micros MSD 500 (Австрия), оснащенного цифровой камерой. Материал для цитоморфологических исследований фиксировали в 2,5% охлажденном растворе глютарового альдегида на фосфатном буфере (pH 7,4). После общепринятой подготовки и дегидратации, материал заключали в смесь эпон-аралдит и на ультратоме LKB V (Швеция) изготавливали срезы толщиной 0,07-0,08 мкм. Электронную микроскопию производили на микроскопе JEM-7А (Япония). Определение концентраций оТ₄, оТ₃ и ТТГ в сыворотке крови осуществляли методом твердофазного иммуноферментного анализа на спектрофотометре Multiscan Labsystems (Финляндия) с использованием стандартных наборов реагентов. Морфологические и биохимические исследования крови проводили на анализаторах Exigo 17 (Швеция) и Stat Fax 1904+ (США). Химико-аналитическое исследование количественного содержания селена в сыворотке крови осуществляли усовершенствованным флуориметрическим методом [4], на спектрофлуориметре SOLAR CM-2203 (Беларусь). Морфометрию гистоструктур щитовидной железы проводили при помощи лицензионной программы Тест Морфо - 4.0. Статистическую обработку данных результатов исследований осуществляли с применением пакета прикладных программ Statistica 8 и Microsoft Excel.Histological samples were subjected to trivial methods of fixation and staining with hematoxylin-eosin. Light microscopy was carried out using a Micros MSD 500 microscope (Austria) equipped with a digital camera. The material for cytomorphological studies was fixed in a 2.5% chilled solution of glutaraldehyde on phosphate buffer (pH 7.4). After conventional preparation and dehydration, the material was enclosed in an epon-araldite mixture and sections 0.07-0.08 μm thick were made on an LKB V ultratome (Sweden). Electron microscopy was performed on a JEM-7A microscope (Japan). Determination of concentrations of OT ₄ , OT ₃ and TSH in blood serum was carried out by enzyme-linked immunosorbent assay on a Multiscan Labsystems spectrophotometer (Finland) using standard reagent kits. Morphological and biochemical blood tests were performed on Exigo 17 analyzers (Sweden) and Stat Fax 1904+ (USA). A chemical-analytical study of the quantitative content of selenium in the blood serum was carried out by an improved fluorimetric method [4], using a SOLAR CM-2203 spectrofluorimeter (Belarus). Thyroid histostructure morphometry was performed using the Morpho Test 4.0 licensed program. Statistical processing of data from research results was carried out using the software package Statistica 8 and Microsoft Excel.

Щитовидная железа крольчих всех изучаемых групп имеет типичное строение, с поверхности покрыта капсулой, которая, отдавая соединительнотканные трабекулы, васкуляризированные сетью сосудов гемомикроциркуляторного русла (ГМЦР), делит ее паренхиму на дольки. Паренхима долек железы представлена структурно-функциональными единицами-фолликулами, выстланными одним слоем тироцитов.The thyroid gland of rabbits of all studied groups has a typical structure, it is covered with a capsule on the surface, which, giving back connective tissue trabeculae, vascularized by the network of blood vessels of the hemomicrocirculatory bed (GMCR), divides its parenchyma into lobules. The parenchyma of the lobules of the gland is represented by structurally functional units-follicles lined with a single layer of thyrocytes.

Рисунок ткани щитовидной железы крольчих контрольной группы носит выраженный мозаичный характер. Фолликулы и тиреоидный эпителий вариативны как по форме, так и по размеру. Сосудистое русло инъецировано. Морфологические особенности структур железы позволяют говорить о наличии в ней двух типов кластеров: органотипичных нормофункциональных и с признаками гипофункции.The tissue pattern of the thyroid gland of rabbits of the control group is pronounced mosaic. Follicles and thyroid epithelium are variable in both shape and size. The vascular bed is injected. Morphological features of the structures of the gland suggest the presence of two types of clusters in it: organotypic normofunctional and with signs of hypofunction.

Морфофункциональная реактивность каждого морфотипа интерпретировалась раздельно, но с учетом морфологической общности тканей железы. Системный анализ цифрового массива данных позволил выявить функциональные потенции отдельно взятых кластеров.The morphofunctional reactivity of each morphotype was interpreted separately, but taking into account the morphological community of the gland tissues. System analysis of the digital data array revealed the functional potentials of individual clusters.

В кластерах с органотипичной морфологией фолликулы овоидной формы (128,88±6,224 мкм) заполнены слоистым, бледно-розовым коллоидом отмечаются единичные резорбтивные вакуоли. Тироциты имеют низкопризматическую форму (16,28±0,335 мкм), цитоплазма слабооксифильна, ядра сферические (8,68±0,163 мкм), гипохромные, содержат одно или два ядрышка.In clusters with organotypic morphology, ovoid follicles (128.88 ± 6.224 μm) are filled with a layered, pale pink colloid; single resorptive vacuoles are noted. Thyrocytes have a low prismatic shape (16.28 ± 0.335 μm), the cytoplasm is weakly oxyphilic, spherical nuclei (8.68 ± 0.163 μm), hypochromic, contain one or two nucleoli.

Структуры микрорайонов с морфологическими признаками гипофункции органа гетеротипичны. Фолликулы округлой формы (162,45±2,843 мкм), наполнены, коллоид слоистый, интенсивно окрашен в красно-розовые тона. Тироциты уплощенные (18,27±0,356 мкм), цитоплазма слабооксифильна, ядра веретеновидные (8,19±0,208 мкм), гиперхромные, границы клеток не просматриваются.The structures of microdistricts with morphological signs of organ hypofunction are heterotypic. The follicles are round in shape (162.45 ± 2.843 μm), filled, the colloid is layered, intensively colored in red-pink tones. Thyrocytes are flattened (18.27 ± 0.356 μm), the cytoplasm is weakly oxyphilic, spindle-shaped nuclei (8.19 ± 0.208 μm), hyperchromic, cell boundaries are not visible.

Рисунок ткани щитовидной железы крольчих I опытной группы носит мозаичный характер, однако менее явный в сравнении с контрольной группой. Кластеры с признаками гипофункции не выявляются. Фолликулы округло-овальной формы (61,35±3,213 мкм), заполнены бледно-розовым гомогенным коллоидом. Тироциты имеют низкопризматическую форму (16,35±0,585 мкм), цитоплазма слабооксифильна, ядра овоидной формы (10,39±0,275 мкм), базофильные с участками просветления, содержат одно, реже два ядрышка.The tissue pattern of the thyroid gland of rabbits of the first experimental group is mosaic in nature, but less pronounced in comparison with the control group. Clusters with signs of hypofunction are not detected. Follicles are round-oval in shape (61.35 ± 3.213 μm), filled with a pale pink homogeneous colloid. Thyrocytes have a low prismatic shape (16.35 ± 0.585 μm), the cytoplasm is weakly oxyphilic, ovoid nuclei (10.39 ± 0.275 μm), basophilic with areas of enlightenment, contain one, less often two nucleoli.

Рисунок ткани щитовидной железы крольчих II опытной группы - ячеистый, размерные градации фолликулов сглажены. Кластеры с признаками гипофункции равно, как и в I опытной группе, не обнаруживаются. Фолликулы округлой формы (87,38±2,481 мкм), частичного наполнения, коллоид зернистый, интенсивно розового цвета. Тироциты низкопризматические (15,38±0,593 мкм), цитоплазма выражено оксифильна, ядра округло-овальной формы (7,97±0,371 мкм), гиперхромные, структуры ядрышек не визуализируются.Pattern of thyroid tissue of rabbits of rabbits of the II experimental group is cellular, dimensional gradations of follicles are smoothed. Clusters with signs of hypofunction, as well as in the experimental group I, are not detected. Follicles rounded (87.38 ± 2.481 μm), partially filled, granular colloid, intensely pink. Low prismatic thyrocytes (15.38 ± 0.593 μm), the cytoplasm is expressed oxyphilic, round-oval-shaped nuclei (7.97 ± 0.371 μm), hyperchromic, nucleolus structures are not visualized.

По результатам гематологических и биохимических исследований крови всех групп животных отклонений от референсных значений нормы для кроликов не выявлено. Во всех опытных группах установлен стимулирующий гемопоэтический эффект, выразившийся в увеличении концентрации гемоглобина и количества эритроцитов на единицу объема крови, также выявлена активизация пластического обмена веществ в организме, характеризующаяся увеличением общего белка и альбумина.According to the results of hematological and biochemical studies of the blood of all groups of animals, deviations from the reference values of the norm for rabbits were not detected. In all experimental groups, a stimulating hematopoietic effect was established, expressed in an increase in the concentration of hemoglobin and the number of red blood cells per unit volume of blood, and activation of plastic metabolism in the body, characterized by an increase in total protein and albumin, was also detected.

Таблица 1Table 1 Сывороточные концентрации тиреоидных и тиреостимулирующего гормонов в контрольной и опытных группахSerum concentrations of thyroid and thyroid-stimulating hormones in the control and experimental groups ГормоныHormones Контрольная группаControl group I опытная группаI experimental group II опытная группаII experimental group ТТГ, мкМЕ/млTSH, μme / ml 0,32±0,0050.32 ± 0.005 0,14±0,0050.14 ± 0.005 0,13±0,0050.13 ± 0.005 оТ4, нмоль/лoT4, nmol / l 15,73±0,21815.73 ± 0.218 53,39±1,065*53.39 ± 1.065 * 59,65±0,338*59.65 ± 0.338 * оТ3, нмоль/лoT3, nmol / l 1,20±0,0171.20 ± 0.017 2,86±0,038*2.86 ± 0.038 * 2,35±0,054*2.35 ± 0.054 * Примечание: * - статистически достоверные отличия по сравнению с контрольной группой животных (р≤0,001)Note: * - statistically significant differences compared with the control group of animals (p≤0.001)

Концентрации тиреоидных гормонов во всех опытных группах имеют ярко выраженную статистически достоверную потенцию к росту (табл.1), так, в I опытной группе концентрация оТ₄ возросла на 70%, а оТ₃ - на 58%, во II опытной группе - оТ₄ на 74%, а оТ₃ - на 49%, в сравнении с контрольной группой. Концентрации ТТГ значительно понижались: в I опытной группе на 44%, во II опытной группе на 41%, в сравнении с контрольной группой.Concentrations of thyroid hormones in all experimental groups have a pronounced statistically significant potential for growth (Table 1), for example, in the first experimental group the concentration of OT ₄ increased by 70%, and OT ₃ - by 58%, in the II experimental group - OT ₄ by 74%, and OT ₃ - by 49%, compared with the control group. TSH concentrations decreased significantly: in the first experimental group by 44%, in the second experimental group by 41%, in comparison with the control group.

Таблица 2table 2 Сравнительные количественные характеристики рождаемости, сохранности и интенсивности прироста живой массы крольчатComparative quantitative characteristics of the birth rate, safety and intensity of growth of live weight of rabbits ПоказателиIndicators ГруппыGroups Контрольная группаControl group I - опытная группаI - experimental group II - опытная группаII - experimental group Количество крольчат, полученных от 100 крольчих, (гол)The number of rabbits obtained from 100 rabbits, (goal) 503503 576*576 * 634*634 * Среднее количество крольчат в помете, (гол)The average number of rabbits in the litter, (goal) 5,05,0 5,75.7 6,36.3 Увеличение количества крольчат в помете, %The increase in the number of rabbits in the litter,% -- 14,514.5 26,026.0 Падеж, (гол)Case, (goal) 9494 3838 1717 Количество крольчат к отбивке, (гол)The number of rabbits to beating, (goal) 409409 538*538 * 617*617 * Сохранность, %Preservation,% 81,381.3 93,4*93.4 * 97,3*97.3 * Живая масса крольчат к отбивке, (кг)Live weight of rabbits to beating, (kg) 0,73±0,0170.73 ± 0.017 0,87±0,0140.87 ± 0.014 0,95±0,0160.95 ± 0.016 Живая масса крольчат в возрасте 3 мес, (кг)Live weight of rabbits at the age of 3 months, (kg) 2,86±0,0442.86 ± 0.044 3,33±0,030*3.33 ± 0.030 * 3,61±0,057*3.61 ± 0.057 * Примечание: * - статистически достоверные отличия по сравнению с контрольной группой животных (р≤0,001)Note: * - statistically significant differences compared with the control group of animals (p≤0.001)

Экспериментально установлено, что при использовании схемы комбинированного применения препаратов микроэлементов (йода и селена) в щитовидной железе происходят функциональные и органические изменения, позволяющие реализовать тиреоидный гомеостаз и повысить продуктивные качества племенных крольчих первого окрола, что выражается в увеличении численности крольчат в помете, сохранности и активизации прироста их живой массы (табл.2).It was experimentally established that when using the combined use of micronutrient preparations (iodine and selenium) in the thyroid gland, functional and organic changes occur that allow the implementation of thyroid homeostasis and increase the productive qualities of the first rabbit rabbits, which is expressed in an increase in the number of rabbits in the litter, preservation and activation growth in their live weight (table 2).

Таким образом, для коррекции тиреоидного статуса племенных крольчих первого окрола и повышения их продуктивных возможностей необходимо за шесть-семь суток до случки внутримышечно ввести препарат «Е-селен» в дозе 0,04 мл/кг или «Селенолин^®» в дозе 0,008 мл/кг массы тела животного и непосредственно за сутки до случки с помощью шприца без иглы per os задать разведенный (1:1) в 5% растворе глюкозы йодполимерный препарат «Монклавит-1» в дозе 2,0 мл на голову.Thus, to correct the thyroid status of breeding rabbits of the first round and increase their productive capabilities, it is necessary to inject the drug E-selenium at a dose of 0.04 ml / kg or Selenolin ^® at a dose of 0.008 ml / intramuscularly six to seven days before mating. kg of the animal’s body weight and immediately the day before mating, using a syringe without a needle per os, set the Monclavit-1 iodine-polymer preparation diluted (1: 1) in a 5% glucose solution at a dose of 2.0 ml per head.

Источники информацииInformation sources

1. Патент РФ №2164758, A23K 1/16, A23K 1/175, 2001.1. RF patent No. 2164758, A23K 1/16, A23K 1/175, 2001.

2. Патент РФ №2159557, A23K 1/16, 2000.2. RF patent No. 2159557, A23K 1/16, 2000.

3. Патент РФ №2445772, A01K 67/02, A61K 33/04, 2010.3. RF patent No. 2445772, A01K 67/02, A61K 33/04, 2010.

4. Anipko V.V., Maryakhina V.S., Abramova L.L. Definition of selenium concentrations change in a blood after application of selenium preparations by fluorometric technique // «Topic problem of biophotonics» III international symposium, 16-22 July, 2011., St-Peterburg - Nizhniy Novgorod, Russia, 2011. P.77-78.4. Anipko V.V., Maryakhina V.S., Abramova L.L. Definition of selenium concentration change in a blood after application of selenium preparations by fluorometric technique // “Topic problem of biophotonics” III international symposium, 16-22 July, 2011., St-Petersburg - Nizhniy Novgorod, Russia, 2011. P.77 -78.

Claims (1)

Способ коррекции тиреоидного статуса племенных крольчих-первокролок в эндемичных зонах путем комбинированного применения йода и селена, заключающийся в том, что крольчихам за шесть-семь суток до случки внутримышечно вводят препараты «Е-селен» в дозе 0,04 мл/кг или «Селенолин^®» в дозе 0,008 мл/кг массы тела животного, причем непосредственно за сутки до случки с помощью шприца без иглы per os задается разведенный (1:1) в 5% растворе глюкозы йодполимерный препарат «Монклавит-1» в дозе 2,0 мл на голову. A method for correcting the thyroid status of pedigree first-rabbit rabbits in endemic areas by the combined use of iodine and selenium, which means that rabbits are injected intramuscularly with E-selenium at a dose of 0.04 ml / kg or Selenolin six to seven days before mating. ^® "at a dose of 0.008 ml / kg of animal’s body weight, and immediately the day before mating, using a syringe without a needle per os, a diluted (1: 1) in a 5% glucose solution Monclavit-1 iodine-polymer preparation in a dose of 2.0 ml is set on the head.