RU2551359C9

RU2551359C9 - Nanosize weakly crystalline modification of 4-methyl-n-[3-(4-methylimidazol-1-yl)-5-(trifluoromethyl)phenyl]-3-[(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl)amino]benazamide hydrochloride monohydrate, method for production thereof and pharmaceutical composition based thereon

Info

Publication number: RU2551359C9
Application number: RU2013152842A
Authority: RU
Inventors: Александр Александрович Малин; Олег Ростиславович Михайлов; Николай Александрович Уваров
Original assignee: Общество с ограниченной ответственностью "Мамонт Фарм"
Priority date: 2013-11-28
Filing date: 2013-11-28
Publication date: 2021-08-20
Also published as: RU2551359C1

Abstract

FIELD: chemistry.

SUBSTANCE: invention relates to a novel salt nanosize weakly crystalline modification 4-methyl-N-[3-(4-methylimidazol-1-yl)-5-(trifluoromethyl)phenyl]-3-[(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl)amino]benzamide (nilotinib) hydrochloride monohydrate. Nilotinib is used as an anti leucaemia cytostatic drug during therapy of cancerous diseases. The nanosize weakly crystalline modification is characterised by the following set of interplanar distances (d, E) and respective intensities (I_ot, %) 14.70-27.8%; 12.94-19.4%; 11.43-22.2%; 7.474-26.4; 6.480-25.0%; 6.217-26.4%; 6.040-52.8%; 5.134-19.4%; 4.824-16.7%; 4.489-25.0%; 4.367-25.0%; 4.156-30.6%; 4.092-30.6%; 3.738-30.6%; 3.656-34.7%; 3.528-41.7%; 3.468-44.4%; 3.165-52.8%; 3.053-36.1%; 2.999-100%; 2.869-22.2%; 2.823-69.4%; 2.653-33.3%; 2.524-22.2%; 2.383-22.2%; 2.348-22.2%; 2.203-20.8%; 2.151-22.2%; 2.020-19.4%; 1.932-22.2%; 1.849-26.4%; 1.841-25.0%; 1.763-22.2%, three endothermic effects equal to (97.3±0.4) J/g at temperature of (92.6±0.5)°C, (54.5±0.4) J/g at temperature of (173.7±0.5)°C, (215.6±0.4) J/g at temperature of (273.4±0.5)°C, particle size of less than 150 nm, specific surface area of more than 30 m²/g and powder density in free filling of less than 0.024 g/cm³. A method of producing the modification includes preparing an aqueous solution of 4-methyl-N-[3-(4-methylimidazol-1-yl)-5-(trifluoromethyl)phenyl]-3-[(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl)amino]benzamide hydrochloride monohydrate at 25-100°C, which is then frozen at a rate of not less than 60 degrees/minute, followed by removing the solvent by freeze-drying for 22-27 hours. The invention also relates to a pharmaceutical composition.

EFFECT: disclosed modification 15-20 times higher than the dissolution rate of the known modification A, which means it can be absorbed into the body over a shorter period and has high activity.

3 cl, 8 dwg, 1 tbl, 5 ex

Description

Изобретение относится к органической химии и касается новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида (нилотиниба) гидрохлорида моногидрата, способа ее получения и фармацевтической композиции на ее основе, которая может быть использована в фармацевтической промышленности и медицине в качестве противолейкозного цитостатического препарата при терапии онкологических заболеваний.The invention relates to organic chemistry and relates to a new nanoscale weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidine -2-yl) amino] benzamide (nilotinib) hydrochloride monohydrate, a method for its production and a pharmaceutical composition based on it, which can be used in the pharmaceutical industry and medicine as an antileukemic cytostatic drug in the treatment of cancer.

Известны замещенные пиримидиниламинобензамиды и их фармацевтические приемлемые соли - ингибиторы тирозинкиназ, способы их получения и содержащие их композиции для лечения опухолевых заболеваний и, в частности, лейкемии (Патент RU №2348627 C2 от 04.07.2003 г.).Known substituted pyrimidinylaminobenzamides and their pharmaceutically acceptable salts - tyrosine kinase inhibitors, methods for their preparation and compositions containing them for the treatment of tumor diseases and, in particular, leukemia (Patent RU No. 2348627 C2 from 04.07.2003).

Однако в данном патенте не описаны конкретные соли или гидраты солей или их сольваты. Кроме того, синтезируемые вещества не охарактеризованы на предмет их принадлежности к той или иной полиморфной модификации и не определены параметры получаемых порошков. Эти свойства, в конечном итоге, определяют биологическую активность получаемых субстанций.However, this patent does not describe specific salts or salt hydrates or their solvates. In addition, the synthesized substances have not been characterized for their belonging to one or another polymorphic modification, and the parameters of the resulting powders have not been determined. These properties ultimately determine the biological activity of the resulting substances.

Известны кристаллические соли 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида и их модификации, такие как нилотиниб монофосфат, нилотиниб дифосфат, нилотиниб сульфат, нилотиниб метансульфонат, нилотиниб этансульфонат, нилотиниб бензолсульфонат, нилотиниб n-толуолсульфонат, нилотиниб цитрат, нилотиниб гентизат, нилотиниб малонат, нилотиниб тартрат и другие (WO 2004/005281 A1 от 15.01.2004, RU 2434864 C2 от 18.07.2006), нилотиниб дигидрохлорид (WO 2011/033307 от 24.03.2011), нилотиниб тригидрохлорид (WO 2010/009402 A9 от 21.01.2010), а также их сольваты, гидраты и безводные формы (WO 2007/015870 от 8.02.2007 и WO 2007/015871 от 18.07.2006). Известны кристаллические формы свободного иматиниба основания (US №60/701405 от 20.06.2005 и Патент ЕПВ 013464 B1 от 30.04.2010).Known crystalline salts of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide and their modifications, such as nilotinib monophosphate, nilotinib diphosphate, nilotinib sulfate, nilotinib methanesulfonate, nilotinib ethanesulfonate, nilotinib benzenesulfonate, nilotinib n-toluenesulfonate, nilotinib citrate, nilotinib1 2004, RU 2434864 C2 dated 18.07.2006), nilotinib dihydrochloride (WO 2011/033307 dated 24.03.2011), nilotinib trihydrochloride (WO 2010/009402 A9 dated 21.01.2010), as well as their solvates, hydrates and anhydrous forms (WO 2007 / 015870 from 8.02.2007 and WO 2007/015871 from 18.07.2006). Known crystalline forms of free imatinib base (US No. 60/701405 from 20.06.2005 and Patent EPO 013464 B1 from 30.04.2010).

Однако все эти модификации отличаются от 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата химическим составом.However, all these modifications differ from 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino ] benzamide hydrochloride monohydrate chemical composition.

Известны кристаллические модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида, такие как: А (дигидрат), A^I (моногидрат), A^II (безводный), B (моногидрат), B^I (безводный), S_B (дисольват метанола), S_B ^I (моносольват метанола), C (моногидрат), C^I (безводный), S_C (моносольват метанола), S_E (сольват с диметилформамидом), смеси форм D (безводный) и B (Патент ЕПВ 013464 B1 от 30.04.2010, Заявка ЕПВ 201000145 A1 от 30.06.2010), Т1, Т2, Т3, Т4, Т5, Т6, Т7, Т8, Т9, Т10, Т11, Т12, Т13, Т14, Т15, Т16, Т17, Т18, Т19 (WO 2010/054056 A2 от 14.05.2010), а также дополнительная кристаллическая модификация (WO 2011/086541 A1 от 21.07.2011).Known crystalline modifications of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride , such as: A (dihydrate), A ^I (monohydrate), A ^II (anhydrous), B (monohydrate), B ^I (anhydrous), S _B (methanol disolvate), S _B ^I (methanol monosolvate), C (monohydrate ), C ^I (anhydrous), S _C (methanol monosolvate), S _E (solvate with dimethylformamide), mixtures of forms D (anhydrous) and B (Patent EPO 013464 B1 dated 04/30/2010, EPO application 201000145 A1 dated 06/30/2010) , T1, T2, T3, T4, T5, T6, T7, T8, T9, T10, T11, T12, T13, T14, T15, T16, T17, T18, T19 (WO 2010/054056 A2 dated 05/14/2010), as well as an additional crystalline modification (WO 2011/086541 A1 from 21.07.2011).

Известные кристаллические модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата характеризуются химическими и физико-химическими методами такими, как: определение воды методом К. Фишера, ЯМР, ВЭЖХ, методом рентгенофазового анализа (РФА) - наборами углов 2θ, ° и их интенсивностью (I_от,=I_i/I_max×100, %) или непосредственно рентгенограммами (получение дифрактограмм авторы вышеприведенных патентов проводили на CuKα-излучении); ИК-, КР - спектрометрическими методами анализа, термоаналитическими исследованиями - определенными значениями экзотермических эффектов, температур плавления и зависимостей потери массы от температуры и другими.Known crystalline modifications of nilotinib hydrochloride monohydrate are characterized by chemical and physicochemical methods such as: determination of water by K. Fischer, NMR, HPLC, X-ray phase analysis (XRD) - sets of angles 2θ, ° and their intensity (I _from , = I _i / I _max × 100,%) or directly by X-ray diffraction patterns (the authors of the above patents performed diffraction patterns on CuKα-radiation); IR, Raman - spectrometric methods of analysis, thermoanalytical studies - certain values of exothermic effects, melting temperatures and dependences of weight loss on temperature, and others.

Однако известные кристаллические модификации нилотиниба гидрохлорида хорошо закристаллизованы, о чем свидетельствуют их рентгенограммы.However, the known crystalline modifications of nilotinib hydrochloride are well crystallized, as evidenced by their X-ray diffraction patterns.

Наиболее близкую по внешнему виду дифрактограмму рентгенофазового анализа (РФА) имеет рентгеноаморфная модификация 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида, которая характеризуется рентгеноаморфным гало (Патент ЕПВ 013464 B1 от 30.04.2010, заявка ЕПВ 201000145 A1 от 30.06.2010).The diffraction pattern of X-ray phase analysis (XRD) is closest in appearance to the X-ray amorphous modification 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridine-3 -ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride, which is characterized by an X-ray amorphous halo (Patent EPO 013464 B1 from 30.04.2010, application EPO 201000145 A1 from 30.06.2010).

Однако на рентгенограмме аморфной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата отсутствуют дифракционные максимумы. Кроме того, ни одну из рассмотренных модификаций не получают в чистом виде с размером кристаллитов менее 150 нм (в наноразмерном виде). Поэтому полученная нами модификация была названа наноразмерной. Термин «слабо закристаллизованная» был представлен в названии новой модификации в связи с тем, что физико-химические исследования полученной нами соли показали, что уширение дифракционных максимумов 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата связано как раз с уменьшением размера полученных кристаллитов до уровня наноразмерности. Если бы полученный нами порошок был аморфизован, то на термоаналитических кривых четких пиков не было бы. Было бы смещение базовой линии ДСК - кривых, связанных со стеклованием [http://wvm.pslc.ws/russian/dsc.htm].However, there are no diffraction maxima on the X-ray diffraction pattern of the amorphous modification of nilotinib hydrochloride monohydrate. In addition, none of the considered modifications are obtained in pure form with crystallite sizes of less than 150 nm (in nanoscale form). Therefore, the obtained modification was called nanoscale. The term “weakly crystallized” was introduced in the name of the new modification due to the fact that physicochemical studies of the salt obtained by us showed that the broadening of the diffraction maxima of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5 - (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate is associated with a decrease in the size of the obtained crystallites to the level of nanoscale. If the powder obtained by us were amorphized, then there would be no clear peaks on the thermoanalytical curves. There would be a displacement of the DSC baseline - curves associated with glass transition [http://wvm.pslc.ws/russian/dsc.htm].

Рассмотренные выше модификации нилотиниба получают одну из другой «мокрыми методами», варьируя тип растворителей, условия приготовления растворов и эмульсий: изотермических выдержек, охлаждения, нагрева, а также условий выделения из органических растворителей или их смесей различными методами, такими, как кристаллизацией из растворов, заменой растворителей, вакуумной сушкой, сушкой распылением и другими.The above modifications of nilotinib are obtained one of the other by "wet methods", varying the type of solvents, the conditions for the preparation of solutions and emulsions: isothermal holding, cooling, heating, as well as the conditions for isolation from organic solvents or their mixtures by various methods, such as crystallization from solutions, replacement of solvents, vacuum drying, spray drying and others.

Наиболее близким по технической сущности является способ получения модификаций сушкой распылением, заключающимся в том, что готовят раствор в метаноле 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида и подвергают его распылительной сушке при 65°C (Патент ЕПВ 013464 В1 от 30.04.2010, Патент ЕА 016856 В1 от 30.08.2012, WO 2010/054056 А2 от 14.05.2010).The closest in technical essence is a method for obtaining modifications by spray drying, which consists in preparing a solution in methanol 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3- [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride and subjected to spray drying at 65 ° C (Patent EPO 013464 B1 from 30.04.2010, Patent EA 016856 B1 from 30.08.2012, WO 2010/054056 A2 dated 05/14/2010).

Сходство заявляемой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фе-нил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино] бензамида гидрохлорида моногидрата, с известными рентгеноаморфной и кристаллическими модификациями нилотиниба гидрохлорида заключается в идентичности их химических составов.The similarity of the claimed nanoscale weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl ) amino] benzamide hydrochloride monohydrate, with the known X-ray amorphous and crystalline modifications of nilotinib hydrochloride lies in the identity of their chemical compositions.

Отличие заявляемой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фе-нил]-3-[(4-пиридин-3-илпири-мидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата от известных рентгеноаморфной и кристаллических модификаций заключается в различии их физико-химических свойств: определенного набора межплоскостных расстояний (d, Å) (углов 2θ, °) и их интенсивностью (I_от,=I_i/I_max×100, %), определенными значениями 3^х эндотермических эффектов и их температур, размером частиц менее 150 нм, их удельной поверхностью менее 30 м²/г и плотностью порошка в свободной засыпке менее 0,024 г/см³.The difference between the claimed nanoscale weakly crystallized modification 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2 -yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate from the known X-ray amorphous and crystalline modifications lies in the difference in their physicochemical properties: a certain set of interplanar distances (d, Å) (angles 2θ, °) and their intensity (I _from , = I _i / I _max × 100,%), certain values of 3 ^x endothermic effects and their temperatures, particle size less than 150 nm, their specific surface area less than 30 m ² / g and powder density in the free bed less than 0.024 g / cm ³ .

Отличие способа получения заявляемой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата, от известных рентгеноаморфной и кристаллических форм состоит в том, что раствор нилотиниба гидрохлорида при температуре от 25°C до 100°C, замораживают при скорости охлаждения не ниже 60 град/мин и подвергают сублимационной сушке в течение 22-27 часов.The difference in the method of obtaining the claimed nanoscale weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl ) amino] benzamide hydrochloride monohydrate, from the known X-ray amorphous and crystalline forms is that a solution of nilotinib hydrochloride at a temperature of 25 ° C to 100 ° C, freeze at a cooling rate of at least 60 deg / min and freeze-dry for 22- 27 hours.

Отличие заявляемой фармацевтической композиции, обладающая активностью ингибитора протеинкиназы, которая может применяться в качестве противолейкозного цитостатического препарата для терапии онкологических заболеваний, содержащей 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпирими-дин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата, от известной композиции (Патент RU №2434864 C2 от 27.11.2011) состоит в том, что в качестве действующего вещества используется терапевтически эффективное количество наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата.The difference between the claimed pharmaceutical composition having the activity of a protein kinase inhibitor, which can be used as an antileukemic cytostatic drug for the treatment of cancer, containing 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimi-din-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate, from the known composition (Patent RU No. 2434864 C2 from 27.11.2011) consists in the fact that the active substance is used therapeutically an effective amount of a nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate.

Целью изобретения является получение ранее неизвестной наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата, разработка способа ее получения и фармацевтической композиции на ее основе, обладающая активностью ингибитора протеинкиназы, которая может применяться в качестве противолейкозного цитостатического препарата для терапии онкологических заболеваний.The aim of the invention is to obtain a previously unknown nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2 -yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate, the development of a method for its production and a pharmaceutical composition based on it, having the activity of a protein kinase inhibitor, which can be used as an antileukemic cytostatic drug for the treatment of cancer.

Поставленная цель достигнута настоящим изобретением, а именно получением наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата, характеризующейся следующим набором межплоскостных расстояний (d, Å) и соответствующих им интенсивностей (I_от,=I_i/I_max×100, %): 14,70-27,8%; 12,94-19,4%; 11,43-22,2%; 7,474-26,4; 6,480-25,0%; 6,217-26,4%; 6,040-52,8%; 5,134-19,4%; 4,824-16,7%; 4,489-25,0%; 4,367-25,0%; 4,156-30,6%; 4,092-30,6%; 3,738-30,6%; 3,656-34,7%; 3,528-41,7%; 3,468-44,4%; 3,165-52,8%; 3,053-36,1%; 2,999-100%; 2,869-22,2%; 2,823-69,4%; 2,653-33,3%; 2,524-22,2%; 2,383-22,2%; 2,348-22,2%; 2,203-20,8%; 2,151-22,2%; 2,020-19,4%; 1,932-22,2%; 1,849-26,4%; 1,841-25,0%; 1,763-22,2%, а также тремя эндотермическими эффектами, равными: (97,3±0,4) Дж/г при температуре (92,6±0,5)°C, (54,5±0,4) Дж/г при температуре (173,7±0,5)°C, (215,6±0,4) Дж/г при температуре (273,4±0,5)°C, размером частиц менее 150 нм, их удельной поверхностью более 30 м²/г и плотностью порошка в свободной засыпке менее 0,024 г/см³.The goal is achieved by the present invention, namely, by obtaining a nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridine-3- ilpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate, characterized by the following set of interplanar distances (d, Å) and the corresponding intensities (I _from , = I _i / I _max × 100,%): 14.70-27.8% ; 12.94-19.4%; 11.43-22.2%; 7.474-26.4; 6,480-25.0%; 6.217-26.4%; 6,040-52.8%; 5.134-19.4%; 4.824-16.7%; 4.489-25.0%; 4.367-25.0%; 4.156-30.6%; 4.092-30.6%; 3.738-30.6%; 3.656-34.7%; 3.528-41.7%; 3.468-44.4%; 3.165-52.8%; 3.053-36.1%; 2.999-100%; 2.869-22.2%; 2.823-69.4%; 2.653-33.3%; 2.524-22.2%; 2.383-22.2%; 2.348-22.2%; 2.203-20.8%; 2.151-22.2%; 2.020-19.4%; 1.932-22.2%; 1.849-26.4%; 1.841-25.0%; 1.763-22.2%, as well as three endothermic effects equal to: (97.3 ± 0.4) J / g at a temperature of (92.6 ± 0.5) ° C, (54.5 ± 0.4) J / g at a temperature of (173.7 ± 0.5) ° C, (215.6 ± 0.4) J / g at a temperature of (273.4 ± 0.5) ° C, particle size less than 150 nm, their the specific surface area is more than 30 m ² / g and the density of the powder in the free bed is less than 0.024 g / cm ³ .

Поставленная цель достигнута также разработкой способа получения заявляемой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата, который состоит в том, что водный раствор нилотиниба гидрохлорида при температуре от 25°C до 100°C, замораживают при скорости охлаждения не ниже 60 град/мин с последующей сублимационной сушкой в течение 22-27 часов.This goal was also achieved by the development of a method for obtaining the inventive nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidine -2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate, which consists in the fact that an aqueous solution of nilotinib hydrochloride at a temperature of 25 ° C to 100 ° C, freeze at a cooling rate of at least 60 deg / min, followed by freeze drying for 22- 27 hours.

Кроме того, поставленная цель достигнута также предложенной фармацевтической композицией, где в качестве действующего вещества используют ранее не известную наноразмерную слабо закристаллизованную модификацию 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида (нилотиниба) гидрохлорида моногидрата, обладающую активностью ингибитора протеинкиназы, которая может применяться в качестве противолейкозного цитостатического препарата для терапии онкологических заболеваний.In addition, this goal was also achieved by the proposed pharmaceutical composition, where a previously unknown nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide (nilotinib) hydrochloride monohydrate, which has the activity of a protein kinase inhibitor, which can be used as an antileukemic cytostatic drug for the treatment of cancer.

Из патентной и научно-технической литературы не известна наноразмерная слабо закристаллизованная модификация 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида (нилотиниба) гидрохлорида моногидрата, способ ее получения и фармацевтическая композиция на ее основе, обладающая активностью ингибитора протеинкиназы, которая может применяться в качестве противолейкозного цитостатического препарата для терапии онкологических заболеваний.Nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridine-3- ilpyrimidin-2-yl) amino] benzamide (nilotinib) hydrochloride monohydrate, a method for its preparation and a pharmaceutical composition based on it, having the activity of a protein kinase inhibitor, which can be used as an antileukemic cytostatic drug for the treatment of oncological diseases.

Нами обнаружена новая, не известная ранее, наноразмерная слабо закристаллизованная модификация 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата, характеризующаяся индивидуальными, присущими только ей, набором межплоскостных расстояний (d, Å) и соответствующих им интенсивностей (I_отн.=I/I_max×100, %) (табл.1, рис. 4); значениями трех эндотермических эффектов и их температур (рис. 5), размером частиц менее 150 нм, их удельной поверхностью более 30 м²/г и плотностью порошка в свободной засыпке менее 0,024 г/см³, предложены способ ее получения и фармацевтическая композиция на ее основе, обладающая активностью ингибитора протеинкиназы, которая может применяться в качестве противолейкозного цитостатического препарата для терапии онкологических заболеваний.We discovered a new, previously unknown, nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidine -2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate, characterized by an individual, inherent only to it, a set of interplanar distances (d, Å) and the corresponding intensities (I _rel. = I / I _max × 100,%) (Table 1, Fig. . 4); values of three endothermic effects and temperature (Fig. 5), a particle size of less than 150 nm, their specific surface area of 30 m ² / g and a powder density loosed less than 0.024 g / cm ^3, a method for its preparation and pharmaceutical composition on its the basis, which has the activity of a protein kinase inhibitor, which can be used as an antileukemic cytostatic drug for the treatment of cancer.

Заявляемая новая наноразмерная слабо закристаллизованная модификация 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата представляет собой легкий, пушистый порошок от желтоватого до белого цвета.The claimed new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino ] benzamide hydrochloride monohydrate is a light, fluffy yellowish to white powder.

Для пояснения сущности заявляемого технического решения к описанию приложены следующие таблицы и рисунки:To clarify the essence of the proposed technical solution, the following tables and figures are attached to the description:

Таблица 1. Углы 2Θ, межплоскостные расстояния (d, Å) и их интенсивности (I_отн., %) новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата.Table 1. Angles 2Θ, interplanar distances (d, Å) and their intensities (I _rel. ,%) Of a new nanosized weakly crystallized modification 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- ( trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate.

Рис. 1. ЯМР ¹³C (1) и ЯМР ¹H (2) - спектры исходной субстанции нилотиниба гидрохлорида моногидрата (кристаллическая A - модификация).Rice. 1. NMR ¹³ C (1) and NMR ¹ H (2) - spectra of the starting substance of nilotinib hydrochloride monohydrate (crystalline A - modification).

Рис. 2. ЯМР ¹³C (1) и ЯМР ¹H (2) - спектры наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата.Rice. 2. NMR ¹³ C (1) and NMR ¹ H (2) - spectra of nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate.

Рис. 3. Дифрактограмма исходной субстанции нилотиниба гидрохлорида - A - модификация.Rice. 3. Diffractogram of the initial substance of nilotinib hydrochloride - A - modification.

Рис.4. Типичная дифрактограмма наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата - А) и после устранения «шума» при помощи программы «Origin» - Б).Fig. 4. Typical diffraction pattern of a nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate - A) and after eliminating the "noise" using the "Origin" program - B).

Рис. 5. Термограмма исходной субстанции нилотиниба гидрохлорида - A - модификации.Rice. 5. Thermogram of the initial substance of nilotinib hydrochloride - A - modification.

Рис. 6. Типичная термограмма наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата.Rice. 6. Typical thermogram of a nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate.

Рис. 7. Микрофотография наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата, полученная с помощью сканирующей электронной микроскопии.Rice. 7. Micrograph of a nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate, obtained using scanning electron microscopy.

Рис. 8. Микрофотография наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата, полученная с помощью просвечивающей электронной микроскопии.Rice. 8. Micrograph of a nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate, obtained using transmission electron microscopy.

Для идентификации полученного вещества был проведен комплекс физико-химических методов анализа.To identify the substance obtained, a complex of physicochemical methods of analysis was carried out.

Первоначально методами ядерного магнитного резонанса (ЯМР - спектроскопия), определения количества воды методом Карла Фишера и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) была установлена идентичность химических формул исходной субстанции формы А нилотиниба гидрохлорида и полученной из нее новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата.Initially, using nuclear magnetic resonance (NMR - spectroscopy) methods, determining the amount of water by the Karl Fischer method and high performance liquid chromatography (HPLC), the identity of the chemical formulas of the initial substance of form A nilotinib hydrochloride and the new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate obtained from it was established.

Определение химических сдвигов исходной субстанции (модификация А нилотиниба гидрохлорида) и полученного из него вещества было проведено в их насыщенном растворе в дейтерированном диметилсульфоксиде (ДМСО-D₆) на ЯМР-спектрометре высокого разрешения VXR-400 фирмы ʺVARIANʺ (США). Полученные данные приведены на рис. 1 (1) - ЯМР ¹³C спектр, 1 (2) - ЯМР ¹H - спектр и 2 (1) - ЯМР ¹³C спектр, 2 (2) - ЯМР ¹H - спектр, соответственно. Сравнение результатов, представленных рис. 1 (1), рис. 1 (2) (исходная субстанция нилотиниба гидрохлорида - А - модификация), с данными, приведенными на рис. 2 (1), рис. 2 (2) (наноразмерная слабо закристаллизованная модификация нилотиниба гидрохлорида моногидрата), показывает, что ЯМР ¹³C и ЯМР ¹H - спектры исходного и полученного нами вещества практически идентичны [за исключением химических сдвигов, отвечающих за наличие молекул воды в исходной формуле формы A, а именно: 5,7…2,8 ppm рис. 1 (2)], т.е. полученное вещество является 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамидом гидрохлоридом моногидратом.Determination of chemical shifts of the starting substance (modification A of nilotinib hydrochloride) and the substance obtained from it was carried out in their saturated solution in deuterated dimethyl sulfoxide (DMSO-D ₆ ) on a VXR-400 high-resolution NMR spectrometer (VARIAN, USA). The data obtained are shown in Fig. 1 (1) - ¹³ C NMR spectrum, 1 (2) - ¹ H NMR - spectrum and 2 (1) - ¹³ C NMR spectrum, 2 (2) - ¹ H NMR - spectrum, respectively. Comparison of the results presented in Fig. 1 (1), Fig. 1 (2) (the starting substance of nilotinib hydrochloride - A - modification), with the data shown in Fig. 2 (1), Fig. 2 (2) (nanoscale weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate), shows that ¹³ C NMR and ¹ H NMR spectra of the starting material and the substance we obtained are practically identical [with the exception of chemical shifts responsible for the presence of water molecules in the initial formula of Form A, namely: 5.7 ... 2.8 ppm fig. 1 (2)], ie the resulting substance is 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate.

Результаты определения количества воды методом К. Фишера в полученном нами веществе на установке ʺMettler Toledo С 20 coulometric KF titratorʺ показали, что в полученной нами наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата содержится (4,2±0,2) масс. % H₂O. Это значение отвечает наличию одной молекулы воды в химической формуле исследуемого вещества. Наличие незначительного избытка количества воды связано, по нашему мнению, с высокой удельной поверхностью полученного нами вещества и как следствие этого - наличие в порошке адсорбированной воды.The results of determining the amount of water by K. Fischer's method in the substance obtained by us using the Mettler Toledo C 20 coulometric KF titrator showed that the obtained nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate contains (4.2 ± 0.2) wt. % H ₂ O. This value corresponds to the presence of one water molecule in the chemical formula of the investigated substance. The presence of an insignificant excess of the amount of water is associated, in our opinion, with the high specific surface area of the substance obtained by us and, as a consequence, the presence of adsorbed water in the powder.

Хроматографическую подвижность исходной субстанции (форма А нилотиниба гидрохлорида) и полученной из нее наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата определяли методом ВЭЖХ на хроматографе Agilent Tech 1200 с колонкой длиной 150 мм, диаметром 4,5 мм, сорбентом Pronto SIL-120-5-C18 с одновременным детектированием при длинах волн 210,8 и 267,4 нм. В качестве элюента использовали смесь (40%-50%) ацетонитрил - буферный раствор с pH=3 при 42°C и скорости 1 мл/мин. Объем испытуемой пробы составил 2 мкл с концентрацией 1,0 мг/мл. Оказалось, что хроматограммы исходной субстанции (форма A нилотиниба гидрохлорида) и полученной из нее наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата содержат по одному пику основного компонента с характерными временами удерживания 6,380 мин и 6,417 мин, соответственно. Эти величины времен удерживания формы A нилотиниба гидрохлорида и новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата в пределах ошибки определения - 0,3% одинаковы. Содержание основного вещества в исходной субстанции равно 99,86%, а в полученном из нее веществе - 99,77%. Эти эксперименты, проведенные методом ВЭЖХ, свидетельствуют о том, что при модифицировании исходного нилотиниба гидрохлорида распад вещества не происходит.The chromatographic mobility of the starting substance (form A of nilotinib hydrochloride) and the nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate obtained from it was determined by HPLC on an Agilent Tech 1200 chromatograph with a column 150 mm long, 4.5 mm in diameter, and Pronto SIL-120-5-C18 sorbent with simultaneous detection at wavelengths of 210.8 and 267.4 nm. A mixture (40% -50%) of acetonitrile - buffer solution with pH = 3 at 42 ° C and a rate of 1 ml / min was used as an eluent. The volume of the test sample was 2 μl with a concentration of 1.0 mg / ml. It turned out that the chromatograms of the starting substance (form A of nilotinib hydrochloride) and the nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate obtained from it contain one peak of the main component with characteristic retention times of 6.380 min and 6.417 min, respectively. These values of the retention times of form A of nilotinib hydrochloride and the new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate are the same within the determination error of 0.3%. The content of the basic substance in the original substance is 99.86%, and in the substance obtained from it - 99.77%. These HPLC experiments indicate that no decomposition of the substance occurs upon modification of the starting nilotinib hydrochloride.

Таким образом, полученные методами ЯМР-спектроскопии и ВЭЖХ хроматографии экспериментальные результаты однозначно свидетельствуют о том, что полученное вещество является 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамидом гидрохлоридом моногидратом.Thus, the experimental results obtained by NMR spectroscopy and HPLC chromatography unambiguously indicate that the resulting substance is 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate.

Для подтверждения того, что полученное вещество является новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификацией 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамидом гидрохлоридом моногидратом были проведены рентгенофазовый анализ (РФА), термоаналитические исследования, определение размера частиц методами сканирующей и просвечивающей микроскопии, определение удельной поверхности и насыпной массы в свободной засыпке (плотность порошка).To confirm that the obtained substance is a new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridine-3- ilpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate, X-ray phase analysis (XPA), thermoanalytical studies, determination of particle size by scanning and transmission microscopy, determination of specific surface area and bulk density in free bed (powder density) were carried out.

Результаты рентгенофазового анализа (РФА), проведенного на дифрактометре Rigaku D/MAX-2500 (Rigaku, Япония) на CuKα излучении (λ=1,54056 Å), представлены на рис. 3. Там же, для большей наглядности, приведена отредактированная (убрали «шум») с помощью программы «Origin» дифрактограмма. Числовые значения полученных результатов РФА даны в табл. 1. На рис. 4 приведены результаты рентгенофазового анализа исходной субстанции нилотиниба гидрохлорида - формы А. Сравнение результатов, приведенных на рис. 3 и в табл. 1, с данными, представленными на рис. 4, и с литературными источниками [Патент ЕПВ 013464 В1 от 30.04.2010. Патент ЕА 016464 В1 от 30.08.2012, WO 2010/054056 А2 от 14.05.2010, WO 2011/086541 А1 от 21.07.2011] свидетельствует о том, что полученное вещество является не известной ранее новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификацией 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифтор-метил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамидом гидрохлоридом моногидратом, которая характеризуется своим индивидуальным набором дифракционных максимумов (2θ,° или d, Å) и их интенсивностью (I_отн, %) (табл. 1) и отличается от других известных кристаллических модификаций А, A^I, A^II, В, B^I, S_B, S_B ^I С, C^I, S_C, S_E, смеси форм D и В, T1, Т2, Т3, Т4, Т5, Т6, Т7, Т8, Т9, Т10, T11, Т12, Т13, Т14, Т15, Т16, Т17, Т18, Т19, дополнительная кристаллическая модификация, которые характеризуются своими определенными наборами дифракционных максимумов (d, Å) (и/или углов 2θ,°) и их интенсивностью (I_от,=I_i/I_max×100, %) или углов 2θ,°, а также от рентгеноаморфной модификация нилотиниба гидрохлорида, которая характеризуется рентгеноаморфным гало на дифрактограмме.The results of X-ray phase analysis (XRD) carried out on a Rigaku D / MAX-2500 diffractometer (Rigaku, Japan) using CuKα radiation (λ = 1.54056 Å) are shown in Fig. 3. In the same place, for greater clarity, an edited diffractogram (removed the "noise") using the "Origin" program is shown. The numerical values of the obtained XRF results are given in table. 1. In fig. 4 shows the results of X-ray phase analysis of the initial substance of nilotinib hydrochloride - form A. Comparison of the results shown in Fig. 3 and in table. 1, with the data shown in Fig. 4, and with literary sources [Patent EPO 013464 B1 from 30.04.2010. Patent EA 016464 B1 from 08/30/2012, WO 2010/054056 A2 from 05/14/2010, WO 2011/086541 A1 from 07/21/2011] indicates that the substance obtained is a previously unknown new nanoscale weakly crystallized modification of 4-methyl-N - [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoro-methyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate, which is characterized by its individual a set of diffraction maxima (2θ, ° or d, Å) and their intensity (I _rel ,%) (Table 1) and differs from other known crystalline modifications A, A ^I , A ^II , B, B ^I , S _B , S _B ^I C, C ^I , S _C , S _E , mixtures of forms D and B, T1, T2, T3, T4, T5, T6, T7, T8, T9, T10, T11, T12, T13, T14, T15, T16 , T17, T18, T19, additional crystalline modification, which are characterized by their specific sets of diffraction maxima (d, Å) (and / or angles 2θ, °) and their intensity (I _from , = I _i / I _max × 100,%) or angles 2θ, °, as well as from the X-ray amorphous modification of nilotinib hydr chloride, which is characterized by an X-ray amorphous halo in the diffractogram.

Термоаналитические исследования полученной нами не известной ранее новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифтор-метил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамидом гидрохлоридом моногидратом и исходной субстанции нилотиниба гидрохлорида (А - формы) проводили на термоанализаторе STA 449 С Jupiter (NETZSCH) в токе аргона при скорости повышения температуры 10 град/мин. В качестве держателей образцов использовали алюминиевые кюветы. Навески проб составляли 3,2-4,7 мг. Полученные данные приведены на рис. 5 и рис. 6, соответственно. Сравнение результатов, приведенных на рис. 5, с данными, представленными на рис. 6, и с литературными источниками [Патент ЕПВ 013464 В1 от 30.04.2010. Патент ЕА 015856 В1 от 30.08.2012, WO 2010/054056 А2 от 14.05.2010, WO 2011/086541 А1 от 21.07.2011] свидетельствует о том, что полученная нами новая наноразмерная слабо закристаллизованная модификация 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпири-мидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата характеризуется ярко выраженными своими индивидуальными 3^мя эндотермическими эффектами, равными: (97,3±0,4) Дж/г при температуре (92,6±0,5)°С, (54,5±0,4) Дж/г при температуре (173,7±0,5)°С, (215,6±0,4) Дж/г при температуре (273,4±0,5)°С. У известных модификаций, а именно: А, A^I, A^II, В, B^I, S_B, S_B ^I С, C^I, S_C, S_E, смеси форм D и В, T1, Т2, Т3, Т4, Т5, Т6, Т7, Т8, Т9, Т10, T11, Т12, Т13, Т14, Т15, Т16, Т17, Т18, Т19, дополнительной кристаллической модификации и у рентгеноаморфной формы такая совокупность эндотермических эффектов отсутствует.Thermoanalytical studies of the previously unknown new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoro-methyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3 -ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate and the initial substance of nilotinib hydrochloride (A - form) were carried out on an STA 449 С Jupiter (NETZSCH) thermal analyzer in an argon flow at a temperature rise rate of 10 deg / min. Aluminum cuvettes were used as sample holders. Sample weighed amounts were 3.2-4.7 mg. The data obtained are shown in Fig. 5 and fig. 6, respectively. Comparison of the results shown in Fig. 5, with the data shown in Fig. 6, and with literary sources [Patent EPO 013464 B1 from 30.04.2010. Patent EA 015856 B1 from 30.08.2012, WO 2010/054056 A2 dated 14.05.2010, WO 2011/086541 A1 dated 21.07.2011] indicates that the new nanosized weakly crystallized modification 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ilpiri Midin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate is characterized by pronounced their individual effects endothermic 3 ^mja equal to: (97.3 ± 0.4) J / g at a temperature of (92.6 ± 0.5) ° С, (54.5 ± 0.4) J / g at a temperature of (173.7 ± 0, 5) ° C, (215.6 ± 0.4) J / g at a temperature of (273.4 ± 0.5) ° C. The known modifications, namely: A, A ^I , A ^II , B, B ^I , S _B , S _B ^I C, C ^I , S _C , S _E , mixtures of forms D and B, T1, T2, T3, T4 , T5, T6, T7, T8, T9, T10, T11, T12, T13, T14, T15, T16, T17, T18, T19, additional crystalline modification and the X-ray amorphous form does not have such a set of endothermic effects.

Удельную поверхность определяли методом низкотемпературной адсорбции аргона и рассчитывали по БЭТ при измерении количества адсорбированного аргона в одной точке (P/P_s~0,3) (Single Point). Измерения проводили газохроматографическим методом с использованием в качестве газа-носителя гелия. Оказалось, что удельная поверхность полученной нами новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата равна (34±3) м²/г. Расчет среднего диаметра частиц по полученной величине удельной поверхности показал, что размер кристаллитов порошка равен ~122±12 нм.The specific surface area was determined by the method of low-temperature adsorption of argon and was calculated by BET by measuring the amount of adsorbed argon at one point (P / P _s ~ 0.3) (Single Point). The measurements were carried out by gas chromatography using helium as the carrier gas. It turned out that the specific surface area of our new nanosized weakly crystallized modification 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidine -2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate is equal to (34 ± 3) m ² / g. Calculation of the average particle diameter from the obtained specific surface area showed that the size of the powder crystallites is ~ 122 ± 12 nm.

Определение размера частиц порошка новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата проводили на сканирующем электронном микроскопе высокого разрешения LEO Supra 50 VP ( Германия) с ускоряющим напряжением 100 В - 300 кВ, с увеличением от ×12 до ×900000 крат и сверхвысоким разрешением до 1 нм (при 20 кВ) и на просвечивающем электронном микроскопе LEO 912 АВ (фирмы Zeiss, Германия) с катодом на основе LaB₆, с ускоряющим напряжением 120 кВ, увеличением от ×80 до ×500000 крат и разрешением 0,34 нм. Полученные данные приведены на рис. 7 и рис. 8, соответственно. Из полученных данных видно, что полученное вещество представляет собой агломерированный порошок с размером частиц менее 150 нм.Determination of the particle size of the powder of a new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate was carried out on a LEO Supra 50 VP high-resolution scanning electron microscope (Germany) with an accelerating voltage of 100 V - 300 kV, with an increase from × 12 to × 900000 times and an ultra-high resolution up to 1 nm. (at 20 kV) and on a LEO 912 AB transmission electron microscope (Zeiss, Germany) with a cathode based on LaB ₆ , with an accelerating voltage of 120 kV, magnification from × 80 to × 500000 times, and a resolution of 0.34 nm. The data obtained are shown in Fig. 7 and fig. 8, respectively. From the data obtained, it can be seen that the resulting substance is an agglomerated powder with a particle size of less than 150 nm.

Определение плотности порошка новой, не известной ранее наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата проводили прибавлением кристаллитов в откалиброванный по объему сосуд с последующим его взвешиванием. Результаты вычисляли по следующей формуле: ρ_пор.=(m_Σ-m_тара)/V_тары. Оказалось, что плотность порошка новой не известной ранее наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата менее 0,024 г/см³.Determination of the powder density of a new, previously unknown nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate was carried out by adding crystallites to a vessel calibrated in terms of volume, followed by weighing it. The results were calculated using the following formula: ρ _pores. = (m _Σ -m _tare ) / V _tare . It turned out that the density of the powder of a new previously unknown nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate is less than 0.024 g / cm ³ .

Таким образом, экспериментальные результаты рентгенофазового анализа, термоаналитических исследований, определения удельной поверхности, размера частиц и плотности порошка в свободной засыпке однозначно свидетельствуют о том, что полученное нами вещество является не известной ранее, новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификацией 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамидом гидрохлоридом моногидратом. Она характеризуется отличными от других: определенным набором углов 2θ°, межплоскостных расстояний (d, Å) и их интенсивностью (I_от,=I_i/I_max×100, %) - рис. 3, табл.1, индивидуальными, присущими только ей, тремя эндотермическими эффектами: (97,3±0,4) Дж/г при температуре (92,6±0,5)°C; (54,5±0,4) Дж/г при температуре (173,7±0,5)°C: (215,6±0,4) Дж/г при температуре (273,4±0,5)°C - рис. 5, удельной поверхностью более 30 м²/г, размером частиц менее 150 нм (рис. 7 и 8) и плотностью порошка в свободной засыпке менее 0,024 г/см³.Thus, the experimental results of X-ray phase analysis, thermoanalytical studies, determination of the specific surface area, particle size and density of the powder in the free bed unambiguously indicate that the substance obtained by us is a previously unknown, new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3 - (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate. It is characterized by different from others: a certain set of angles 2θ °, interplanar distances (d, Å) and their intensity (I _from , = I _i / I _max × 100,%) - Fig. 3, table 1, individual, inherent only to her, three endothermic effects: (97.3 ± 0.4) J / g at a temperature of (92.6 ± 0.5) ° C; (54.5 ± 0.4) J / g at a temperature of (173.7 ± 0.5) ° C: (215.6 ± 0.4) J / g at a temperature of (273.4 ± 0.5) ° C - fig. 5, with a specific surface of more than 30 m ² / g, a particle size of less than 150 nm (Figs. 7 and 8) and a powder density in the free bed of less than 0.024 g / cm ³ .

Определение активности новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата осуществляли по скорости растворения в дистиллированной воде, подкисленной до pH=40,1 н соляной кислотой. Эксперименты проводили в сравнении с исходной субстанции нилотиниба гидрохлорида (кристаллическая форма А). Такого сорта опыты весьма важны для дальнейшего прогнозирования поведения препарата в биологической среде и усвоения его в организме.Determination of the activity of a new nanosized weakly crystallized modification 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate was carried out according to the rate of dissolution in distilled water acidified to pH = 40.1 with hydrochloric acid. The experiments were carried out in comparison with the initial substance of nilotinib hydrochloride (crystalline form A). Experiments of this kind are very important for further predicting the behavior of the drug in a biological environment and its assimilation in the body.

Определение времени растворения исходной субстанции нилотиниба гидрохлорида (формы А) и полученной из нее новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации в подкисленной дистиллированной воде проводили по следующей методике. Навеску препарата 2 мг помещали при перемешивании магнитной мешалкой при 50 об/мин в 5 мл подкисленной дистиллированной воды и секундомером определяли время растворения. Оказалось, что для исходной субстанции нилотиниба гидрохлорида время растворения в воде составило 40-50 с, а для новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации - 2-3 с, т.е. скорость растворения новой модификации в 15-20 раз выше, чем для известной модификации А.The determination of the dissolution time of the initial substance of nilotinib hydrochloride (form A) and the new nanosized weakly crystallized modification obtained from it in acidified distilled water was carried out according to the following procedure. A 2 mg sample of the preparation was placed under stirring with a magnetic stirrer at 50 rpm in 5 ml of acidified distilled water, and the dissolution time was determined with a stopwatch. It turned out that for the initial substance of nilotinib hydrochloride, the dissolution time in water was 40-50 s, and for the new nanosized weakly crystallized modification - 2-3 s, i.e. the dissolution rate of the new modification is 15-20 times higher than for the known modification A.

Проведенные эксперименты по определению времени растворения в подкисленной до pH=4 дистиллированной воде показали, что новая наноразмерная слабо закристаллизованная модификация нилотиниба гидрохлорида моногидрата более активна по сравнению с исходной субстанцией, что должно повлиять на уменьшение времени всасывания ее в организм, увеличить ее биологическую активность.The experiments carried out to determine the dissolution time in distilled water acidified to pH = 4 showed that the new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate is more active than the original substance, which should affect the decrease in the time of its absorption into the body and increase its biological activity.

Отличиями предложенного способа получения заявляемой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата являются: температура водного раствора нилотиниба гидрохлорида от 25°C до 100°C, скорость замораживания не ниже 60 град/мин и время сублимационной сушки в течение 22-27 часов.The differences of the proposed method of obtaining the claimed nanoscale weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidine-2- yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate are: the temperature of an aqueous solution of nilotinib hydrochloride from 25 ° C to 100 ° C, the freezing rate is not lower than 60 deg / min and the time of freeze drying for 22-27 hours.

Приготовление раствора нилотиниба гидрохлорида при повышенных температурах было использовано для ускорения процесса растворения нилотиниба гидрохлорида.The preparation of a solution of nilotinib hydrochloride at elevated temperatures was used to accelerate the dissolution of nilotinib hydrochloride.

Уменьшение температуры водного раствора нилотиниба гидрохлорида ниже комнатной температуры - 25°C не целесообразно, поскольку требует дополнительных затрат энергии на охлаждение системы.Reducing the temperature of an aqueous solution of nilotinib hydrochloride below room temperature - 25 ° C is not advisable, since it requires additional energy consumption for cooling the system.

Увеличение температуры водного раствора нилотиниба гидрохлорида выше 100°C также не целесообразно из-за необходимости применения специального оборудования.An increase in the temperature of an aqueous solution of nilotinib hydrochloride above 100 ° C is also not advisable due to the need for the use of special equipment.

Уменьшение скорости замораживания ниже 60 град/мин скорость криокристаллизации раствора нилотиниба гидрохлорида уменьшается и приближается к равновесному процессу. Это приводит к получению уже известных модификаций. Новую наноразмерную слабо закристаллизованную модификацию 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата в чистом виде получить не удается.A decrease in the freezing rate below 60 deg / min, the rate of cryocrystallization of the nilotinib hydrochloride solution decreases and approaches the equilibrium process. This results in already known modifications. A new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] it is not possible to obtain benzamide hydrochloride monohydrate in pure form.

Уменьшение времени сублимационной сушки меньше 22 ч приводит к получению невысохшего продукта: «порошок нилотиниба гидрохлорида моногидрата - его замороженный раствор». Система при комнатной температуре плавится, порошок частично растворяется, перекристаллизовывается, образуя известные модификации. Новую наноразмерную слабо закристаллизованную модификацию 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата в чистом виде получить не удается.Reducing the time of freeze drying less than 22 hours leads to the receipt of a non-dried product: "powder of nilotinib hydrochloride monohydrate - its frozen solution." The system melts at room temperature, the powder partially dissolves, recrystallizes, forming known modifications. A new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] it is not possible to obtain benzamide hydrochloride monohydrate in pure form.

Увеличение времени сублимационной сушки нецелесообразно, так как не приводит к увеличению выхода целевого продукта - новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата и лишь удорожает производство.An increase in the freeze drying time is impractical, since it does not lead to an increase in the yield of the target product - a new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3- [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate and only increases the cost of production.

Возможность осуществления предлагаемого изобретения иллюстрируется следующими примерами, но не ограничивается ими.The possibility of carrying out the invention is illustrated by the following examples, but is not limited to them.

Пример 1. 100 мл водного раствора с содержанием исходной субстанции 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида 42 мг (в пересчете на нилотиниб гидрохлорид моногидрат) при комнатной температуре (25°C) наливают в поддон из нержавеющей стали и замораживают его со скоростью 60 град/мин погружением дна поддона в смесь ацетон - сухой лед (T=-78°C). Полученный замороженный продукт на поддоне переносят в сублимационную камеру и подвергают сублимационной сушке при температурах: на конденсаторе -50…-55°C; на продукте -78…+30°C и остаточном давлении в камере (8-6)⋅10^-2 Торр в течение 22 ч. Выход продукта составил 41,5 мг (98,8 масс. %). По данным РФА полученное вещество характеризуется типичной дифрактограммой, представленной на рис. 3, и набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата, представленными в табл. 1. Результаты термоаналитических исследований показывают, что величины трех эндотермических эффектов равны: (97,1±0,4) Дж/г при температуре (92,3±0,5)°С; (54,3±0,4) Дж/г при температуре (173,5±0,5)°С; (216,0±0,4) Дж/г при температуре (273,8±0,5)°С, что совпадает с величинами эндотермических эффектов и их температурами, характерными для новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата. Определение удельной поверхности (S_уд.) полученного порошка показали, что S_уд=30,5 м²/г. По данным сканирующей и просвечивающей электронной микроскопии полученное вещество представляет собой агломерированный порошок с размером частиц менее 150 нм. Определение плотности порошка в свободной засыпке показало, что она равна 0,020 г/см. Результаты физико-химического анализа свидетельствуют о том, что полученное вещество является новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификацией 4-метил-Т-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата.Example 1. 100 ml of an aqueous solution containing the starting substance 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidine- 2-yl) amino] benzamide hydrochloride 42 mg (in terms of nilotinib hydrochloride monohydrate) at room temperature (25 ° C) is poured into a stainless steel tray and frozen at a rate of 60 deg / min by immersing the bottom of the tray in an acetone - dry ice mixture (T = -78 ° C). The resulting frozen product is transferred on a pallet to a sublimation chamber and subjected to freeze-drying at temperatures: on a condenser -50 ... -55 ° C; on the product -78 ... + 30 ° C and residual pressure in the chamber (8-6) ⋅10 ^-2 Torr for 22 hours. The product yield was 41.5 mg (98.8 wt.%). According to XRD data, the resulting substance is characterized by a typical diffractogram shown in Fig. 3, and a set of interplanar distances and their intensities that coincide with the corresponding values for the new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate, presented in table. 1. The results of thermoanalytical studies show that the values of the three endothermic effects are equal: (97.1 ± 0.4) J / g at a temperature of (92.3 ± 0.5) ° C; (54.3 ± 0.4) J / g at a temperature of (173.5 ± 0.5) ° С; (216.0 ± 0.4) J / g at a temperature of (273.8 ± 0.5) ° C, which coincides with the values of endothermic effects and their temperatures characteristic of a new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate. Determination of the specific surface area (S _beats ) of the obtained powder showed that S _beats = 30.5 m ² / g. According to the data of scanning and transmission electron microscopy, the resulting substance is an agglomerated powder with a particle size of less than 150 nm. Determination of the density of the powder in the free filling showed that it is equal to 0.020 g / cm. The results of physicochemical analysis indicate that the resulting substance is a new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-T- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4 -pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate.

Пример 2. 350 г водного раствора с содержанием исходной субстанции 4-метил-N-[3 -(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пири-дин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида 0,1485 г (в пересчете на нилотиниб гидрохлорид моногидрат) при 100°C замораживают со скоростью 3×10² град/мин вливанием раствора в предварительно охлажденный и наполненный жидким азотом (Т_кип=-196°C) поддон из нержавеющей стали. Полученный замороженный продукт на поддоне переносят в сублимационную камеру и подвергают сублимационной сушке при температурах: на конденсаторе -50…-55°C; на продукте 78…+30°C и остаточном давлении в камере (5-6)⋅10^-2 Торр в течение 27 ч. Выход продукта составил 0,1472 г (99,1 масс. %). По данным РФА полученное вещество характеризуется типичной дифрактограммой, представленной на рис. 3, и набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата, представленными в табл. 1. Результаты термоаналитических исследований показывают, что величины трех эндотермических эффектов равны (97,3±0,4) Дж/г при температуре (92,6±0,5)°C; (54,5±0,4) Дж/г при температуре (173,7±0,5)°C; (215,6±0,4) Дж/г при температуре (273,4±0,5)°C, что совпадает с величинами эндотермических эффектов и их температурами, характерными для новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата. Определение удельной поверхности (S_уд.) полученного порошка показали, что S_уд.=32 м²/г. По данным сканирующей и просвечивающей микроскопии полученное вещество представляет собой агломерированный порошок с размером частиц менее 150 нм. Определение плотности порошка в свободной засыпке показало, что она равна 0,024 г/см³. Результаты физико-химического анализа свидетельствуют о том, что полученное вещество является новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификацией 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпирими-дин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата.Example 2. 350 g of an aqueous solution containing the starting substance 4-methyl-N- [3 - (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridine-3- ilpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride 0.1485 g (in terms of nilotinib hydrochloride monohydrate) at 100 ° C is frozen at a rate of 3 × 10 ² deg / min by pouring the solution into pre-cooled and filled with liquid nitrogen (T _bale = - 196 ° C) stainless steel drip tray. The resulting frozen product is transferred on a pallet to a sublimation chamber and subjected to freeze-drying at temperatures: on a condenser -50 ... -55 ° C; on the product 78 ... + 30 ° C and residual pressure in the chamber (5-6) ⋅10 ^-2 Torr for 27 hours. The product yield was 0.1472 g (99.1 wt.%). According to XRD data, the resulting substance is characterized by a typical diffractogram shown in Fig. 3, and a set of interplanar distances and their intensities that coincide with the corresponding values for the new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate, presented in table. 1. The results of thermoanalytical studies show that the values of the three endothermic effects are equal to (97.3 ± 0.4) J / g at a temperature of (92.6 ± 0.5) ° C; (54.5 ± 0.4) J / g at a temperature of (173.7 ± 0.5) ° C; (215.6 ± 0.4) J / g at a temperature of (273.4 ± 0.5) ° C, which coincides with the values of endothermic effects and their temperatures characteristic of a new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate. Determination of the specific surface area (S _beats ) of the obtained powder showed that S _beats. = 32 m ² / g. According to the data of scanning and transmission microscopy, the resulting substance is an agglomerated powder with a particle size of less than 150 nm. Determination of the density of the powder in the free bed showed that it is equal to 0.024 g / cm ³ . The results of physicochemical analysis indicate that the resulting substance is a new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4 -pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate.

Пример 3. 200 г водного раствора с содержанием исходной субстанции 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пири-дин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида 60,0 мг (в пересчете на нилотиниб гидрохлорид моногидрат) при 60°C замораживают со скоростью примерно 10⁵ град/мин резким выливанием тонкого слоя раствора в предварительно охлажденный до температуры -196°C поддон из нержавеющей стали. Полученный на поддоне замороженный продукт переносят в сублимационную камеру и подвергают сублимационной сушке при температурах: на конденсаторе -75…-80°C; на продукте -78…+30°C и остаточном давлении в камере 8-10^-3 Торр в течение 24 ч. Выход продукта составил 59,3 мг (98,8 масс. %). По данным РФА полученное вещество характеризуется типичной дифрактограммой, представленной на рис. 3, и набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата, представленными в табл. 1. Результаты термоаналитических исследований показывают, что величины трех эндотермических эффектов равны (97,5±0,4) Дж/г при температуре (92,7±0,5)°C; (54,6±0,4) Дж/г при температуре (173,8±0,5)°C: (215,4±0,4) Дж/г при температуре (273,2±0,5)°C, что совпадает с величинами эндотермических эффектов и их температурами, характерными для новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата. Определение удельной поверхности (S_уд.) полученного порошка показали, что S_уд.=36 м²/г. По данным сканирующей и просвечивающей микроскопии полученное вещество представляет собой агломерированный порошок с размером частиц менее 150 нм. Определение плотности порошка в свободной засыпке показало, что она равна 0,018 г/см. Результаты физико-химического анализа свидетельствуют о том, что полученное вещество является новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификацией 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпирими-дин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата.Example 3. 200 g of an aqueous solution containing the starting substance 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridine-3- ilpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride 60.0 mg (in terms of nilotinib hydrochloride monohydrate) at 60 ° C is frozen at a rate of about 10 ⁵ deg / min by a sharp pouring of a thin layer of solution into a tray pre-cooled to a temperature of -196 ° C made of stainless steel. The frozen product obtained on the pallet is transferred to a sublimation chamber and subjected to freeze-drying at temperatures: on a condenser -75 ... -80 ° C; on the product -78 ... + 30 ° C and residual pressure in the chamber 8-10 ^-3 Torr for 24 hours. The product yield was 59.3 mg (98.8 wt.%). According to XRD data, the resulting substance is characterized by a typical diffractogram shown in Fig. 3, and a set of interplanar distances and their intensities that coincide with the corresponding values for the new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate, presented in table. 1. The results of thermoanalytical studies show that the values of the three endothermic effects are equal to (97.5 ± 0.4) J / g at a temperature of (92.7 ± 0.5) ° C; (54.6 ± 0.4) J / g at a temperature of (173.8 ± 0.5) ° C: (215.4 ± 0.4) J / g at a temperature of (273.2 ± 0.5) ° C, which coincides with the magnitudes of endothermic effects and their temperatures characteristic of a new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate. Determination of the specific surface area (S _beats ) of the obtained powder showed that S _beats. = 36 m ² / g. According to the data of scanning and transmission microscopy, the resulting substance is an agglomerated powder with a particle size of less than 150 nm. Determination of the density of the powder in the free bed showed that it is equal to 0.018 g / cm. The results of physicochemical analysis indicate that the resulting substance is a new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4 -pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate.

Пример 4. 1500 г водного раствора с содержанием исходной субстанции 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпи-римидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида 0,65 г (в пересчете на нилотиниб гидрохлорид моногидрат) при 80°C замораживают со скоростью примерно 10³ град/мин распылением раствора пневматической форсункой при избыточном давлении 0,7 кг/см² в реактор, наполненный жидким азотом (Т_кип=-196°C). Полученные криогранулы замороженного раствора переносят в поддон из нержавеющей стали и подвергают сублимационной сушке при температурах: на конденсаторе -42…-47°C; на продукте -78…+30°C и остаточном давлении в камере (2-3)⋅10^-2 Торр в течение 26 ч. Выход продукта составил 0,628 г (96,6 масс. %). По данным РФА полученное вещество характеризуется типичной дифрактограммой, представленной на рис. 3, и набором межплоскостных расстояний и их интенсивностями, совпадающих с соответствующими значениями для новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата, представленными в табл. 1. Результаты термоаналитических исследований показывают, что величины трех эндотермических эффектов равны (96,9±0,4) Дж/г при температуре (92,5±0,5)°C; (54,1±0,4) Дж/г при температуре (173,3±0,5)°C; (215,2±0,4) Дж/г при температуре (273,5±0,5)°C, что совпадает с величинами эндотермических эффектов и их температурами, характерными для новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата. Определение удельной поверхности (S_уд.) полученного порошка показали, что S_уд.=35,5 м²/г. По данным сканирующей и просвечивающей микроскопии полученное вещество представляет собой агломерированный порошок с размером частиц менее 150 нм. Определение плотности порошка в свободной засыпке показало, что она равна 0,022 г/см³. Результаты физико-химического анализа свидетельствуют о том, что полученное вещество является новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификацией 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата.Example 4. 1500 g of an aqueous solution containing the starting substance 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpi- rimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride 0.65 g (in terms of nilotinib hydrochloride monohydrate) at 80 ° C is frozen at a rate of about 10 ³ deg / min by spraying the solution with a pneumatic nozzle at an overpressure of 0.7 kg / cm ² in reactor filled with liquid nitrogen (T _bale = -196 ° C). The obtained cryogranules of the frozen solution are transferred into a stainless steel tray and subjected to freeze-drying at temperatures: on a condenser -42 ... -47 ° C; on the product -78 ... + 30 ° C and residual pressure in the chamber (2-3) ⋅10 ^-2 Torr for 26 hours. The product yield was 0.628 g (96.6 wt.%). According to XRD data, the resulting substance is characterized by a typical diffractogram shown in Fig. 3, and a set of interplanar distances and their intensities that coincide with the corresponding values for the new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate, presented in table. 1. The results of thermoanalytical studies show that the values of the three endothermic effects are equal to (96.9 ± 0.4) J / g at a temperature of (92.5 ± 0.5) ° C; (54.1 ± 0.4) J / g at a temperature of (173.3 ± 0.5) ° C; (215.2 ± 0.4) J / g at a temperature of (273.5 ± 0.5) ° C, which coincides with the values of endothermic effects and their temperatures characteristic of a new nanosized weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate. Determination of the specific surface area (S _beats ) of the obtained powder showed that S _beats. = 35.5 m ² / g. According to the data of scanning and transmission microscopy, the resulting substance is an agglomerated powder with a particle size of less than 150 nm. Determination of the density of the powder in the free bed showed that it is equal to 0.022 g / cm ³ . The results of physicochemical analysis indicate that the resulting substance is a new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4 -pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate.

Пример 5. Фармацевтическая композиция. Для приготовления 10,0 г известной композиции (Инструкция по применению препарата Тасигна), включающей в качестве действующего вещества нилотиниба гидрохлорид моногидрат и вспомогательные вещества в соотношении (масс. %):Example 5. Pharmaceutical composition. For the preparation of 10.0 g of a known composition (Instructions for use of the drug Tasigna), which includes nilotinib hydrochloride monohydrate as an active ingredient and excipients in the ratio (wt%):

Нилотиниба гидрохлоридNilotinib hydrochloride моногидрат monohydrate 55,1555.15 Лактоза моногидратLactose monohydrate 39,0339.03 КросповидонCrospovidone 3,983.98 Полоксамер 188Poloxamer 188 0,800.80 Кремний диоксид коллоидныйColloidal silicon dioxide 0,520.52 Магний стеаратMagnesium stearate 0,520.52

5,515 г порошка новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификации нилотиниба гидрохлорида моногидрата смешивают в течение 5 минут в агатовой ступке с вспомогательными веществами: 0,080 г неионогенным поверхностно-активным веществом полоксамером 188 (по BASF Corporetion Webssite Retrieved 2008-12-09 ʺBASF - Product information the chemicals catalog - Pluronicsʺ); 3,903 г лактозы моногидрата (по фармакопее США и Европейской фармакопее), 0,398 г кросповидона (по фармакопее США и Европейской фармакопее), 0.052 г кремния диоксида коллоидного (по фармакопее США и Европейской фармакопее) и 0,052 г магния стеарата (по ТУ 6-09-16-1533-90). Полученную смесь подвергали биологическим методам анализа. Эксперименты проводили на кроликах-самцах массой 2,0-2,5 кг. Для получения надежных результатов в параллельных сериях опытов использовали не менее 5^ти кроликов. Определение времени появления нилотиниба гидрохлорида в крови проводили методом in vivo при пероральном введении композиции с последующим забором плазмы из ушной раковины. Во всех случаях количество вводимого в животное действующего вещества (в пересчете на нилотиниб) составляло 5,0 мг (10,0 мг смеси). Оказалось, что для композиции, содержащей новую наноразмерную слабо закристаллизованную модификацию 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифтор-метил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата, время появления нилотиниба в крови кроликов равно 15±4 мин, а для известной композиции, содержащей в качестве действующего вещества исходный нилотиниб гидрохлорид (форму А) - 26±4 мин.5.515 g of powder of a new nanoscale weakly crystallized modification of nilotinib hydrochloride monohydrate is mixed for 5 minutes in an agate mortar with excipients: 0.080 g of nonionic surfactant Poloxamer 188 (according to BASF Corporetion Webssite Retrieved 2008-12-09 ʺBASF - Product information the chemicals catalog - Pluronicsʺ); 3.903 g of lactose monohydrate (according to the US Pharmacopoeia and the European Pharmacopoeia), 0.398 g of crospovidone (according to the US Pharmacopoeia and the European Pharmacopoeia), 0.052 g of colloidal silicon dioxide (according to the US Pharmacopoeia and the European Pharmacopoeia) and 0.052 g of magnesium stearate (according to TU 6-09- 16-1533-90). The resulting mixture was subjected to biological analysis methods. The experiments were carried out on male rabbits weighing 2.0-2.5 kg. To obtain reliable results, parallel series of experiments using not less than 5 ^five rabbits. Determination of the time of appearance of nilotinib hydrochloride in the blood was carried out by the in vivo method with oral administration of the composition followed by sampling of plasma from the auricle. In all cases, the amount of active substance introduced into the animal (in terms of nilotinib) was 5.0 mg (10.0 mg of the mixture). It turned out that for a composition containing a new nanosized weakly crystallized modification 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoro-methyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3 -ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate, the time of appearance of nilotinib in the blood of rabbits is 15 ± 4 minutes, and for a known composition containing the starting nilotinib hydrochloride (form A) as an active ingredient - 26 ± 4 minutes.

Таким образом, экспериментальные результаты физико-химических методов исследования: рентгенофазового анализа, термоаналитических исследований, определения удельной поверхности, размера частиц и плотности порошка в свободной засыпке однозначно свидетельствуют о том, что полученное нами вещество является, не известной ранее, новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификацией 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамидом гидрохлоридом моногидратом. Она характеризуется отличными от других: определенным набором углов 2θ°, межплоскостных расстояний (d, Å) и их интенсивностью (I_от,=I_i/I_max×100, %) - рис. 3, табл.1, индивидуальными, присущими только ей, тремя эндотермическими эффектами: (97,3±0,4) Дж/г при температуре (92,6±0,5)°C; (54,5±0,4) Дж/г при температуре (173,7±0,5)°C: (215,6±0,4) Дж/г при температуре (273,4±0,5)°C - рис. 5, удельной поверхностью более 30 м²/г, размером частиц менее 150 нм (рис. 7 и 8) и плотностью порошка в свободной засыпке менее 0,024 г/см³.Thus, the experimental results of physicochemical research methods: X-ray phase analysis, thermoanalytical studies, determination of the specific surface area, particle size and powder density in the free backfill unambiguously indicate that the substance obtained by us is, previously unknown, a new nanosized weakly crystallized modification 4 -methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate. It is characterized by different from others: a certain set of angles 2θ °, interplanar distances (d, Å) and their intensity (I _from , = I _i / I _max × 100,%) - Fig. 3, table 1, individual, inherent only to her, three endothermic effects: (97.3 ± 0.4) J / g at a temperature of (92.6 ± 0.5) ° C; (54.5 ± 0.4) J / g at a temperature of (173.7 ± 0.5) ° C: (215.6 ± 0.4) J / g at a temperature of (273.4 ± 0.5) ° C - fig. 5, with a specific surface of more than 30 m ² / g, a particle size of less than 150 nm (Figs. 7 and 8) and a powder density in the free bed of less than 0.024 g / cm ³ .

Кроме того, предлагаемая фармацевтическая композиция с использованием в качестве действующего вещества новой наноразмерной слабо закристаллизованной модификацией 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата отличается улучшенной биодоступностью.In addition, the proposed pharmaceutical composition using a new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4- pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate has improved bioavailability.

Из вышеизложенного можно сделать вывод о том, что заявляемая новая наноразмерная слабо закристаллизованная модификация 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата, способ ее получения и фармацевтическая композиция на ее основе являются новыми и удовлетворяют критериям «изобретательский уровень» и «промышленная применимость».From the above, it can be concluded that the claimed new nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridine- 3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate, a method for its preparation and a pharmaceutical composition based on it are new and meet the criteria of "inventive step" and "industrial applicability".

Таблица 1.Table 1. № п/п^*) Order number ^*) 2θ, °2θ, ° d, Åd, Å I_отн., %^**) I _rel., % ^**) № п/п^*) Order number ^*) 2θ, °2θ, ° d, Åd, Å I_отн., %^**) I _rel. ,% ^**) № п/п^*) Order number ^*) 2θ, °2θ, ° d, Åd, Å I_отн., %^**) I _rel. ,% ^**) 11 6,006.00 14,7014.70 27,827.8 1212 21,3421.34 4,1564.156 30,630.6 2323 33,7233.72 2,6532.653 33,333.3 22 6,826.82 12,9412.94 19,419.4 1313 21,6821.68 4,0924.092 30,630.6 2424 35,5035.50 2,5242.524 22,222.2 33 7,727.72 11,4311.43 22,222.2 14fourteen 23,7623.76 3,7383.738 30,630.6 2525 37,6837.68 2,3832,383 22,222.2 44 11,8211.82 7,4747.474 26,426.4 1515 24,3024.30 3,6563.656 34,734,7 2626 38,2638.26 2,3482,348 22,222.2 55 13,6413.64 6,4806,480 25,025.0 1616 25,2025.20 3,5283.528 41,741,7 2727 40,9040.90 2,2032.203 20,820.8 66 14,2214.22 6,2176,217 26,426.4 1717 25,6425.64 3,4683.468 44,444.4 2828 41,9241.92 2,1512.151 22,222.2 77 14,6414.64 6,0406,040 52,852.8 18eighteen 28,1428.14 3,1653.165 52,852.8 2929 44,7844.78 2,0202,020 19,419.4 8eight 17,2417.24 5,1345.134 19,419.4 1919 29,2029.20 3,0533.053 36,136.1 30thirty 46,9646.96 1,9321.932 22,222.2 9nine 18,3618.36 4,8244.824 16,716.7 20twenty 29,7429.74 2,9992.999 100100 3131 49,1849.18 1,8491,849 26,426.4 10ten 19,7419.74 4,4894.489 25,025.0 2121 31,1231.12 2,8692.869 22,222.2 3232 49,4249.42 1,8411,841 25,025.0 11eleven 20,3020.30 4,3674.367 25,025.0 2222 31,6431.64 2,8232.823 69,469.4 3333 51,7651.76 1,7631,763 22,222.2 ^*) № п/п - номер представлен в соответствии с Рис. 3.
^**) Относительную интенсивность I_отн. рассчитывали относительно сглаженной линии. ^*) Item number - the number is presented in accordance with Fig. 3.
^**) Relative intensity I _rel. was calculated relative to the smoothed line.

Claims

1. Наноразмерная слабо закристаллизованная модификация 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата, характеризующаяся следующим набором межплоскостных расстояний (d, Å) и соответствующих им интенсивностей (I_от, %) 14,70-27,8%; 12,94-19,4%; 11,43-22,2%; 7,474-26,4; 6,480-25,0%; 6,217-26,4%; 6,040-52,8%; 5,134-19,4%; 4,824-16,7%; 4,489-25,0%; 4,367-25,0%; 4,156-30,6%; 4,092-30,6%; 3,738-30,6%; 3,656-34,7%; 3,528-41,7%; 3,468-44,4%; 3,165-52,8%; 3,053-36,1%; 2,999-100%; 2,869-22,2%; 2,823-69,4%; 2,653-33,3%; 2,524-22,2%; 2,383-22,2%; 2,348-22,2%; 2,203-20,8%; 2,151-22,2%; 2,020-19,4%; 1,932-22,2%; 1,849-26,4%; 1,841-25,0%; 1,763-22,2%, а также тремя эндотермическими эффектами, равными (97,3±0,4) Дж/г при температуре (92,6±0,5)°C, (54,5±0,4) Дж/г при температуре (173,7±0,5)°C, (215,6±0,4) Дж/г при температуре (273,4±0,5)°C, размером частиц менее 150 нм, их удельной поверхностью более 30 м²/г и плотностью порошка в свободной засыпке менее 0,024 г/см³.1. Nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino ] benzamide hydrochloride monohydrate, characterized by the following set of interplanar distances (d, Å) and their corresponding intensities (I _from ,%) 14.70-27.8%; 12.94-19.4%; 11.43-22.2%; 7.474-26.4; 6,480-25.0%; 6.217-26.4%; 6,040-52.8%; 5.134-19.4%; 4.824-16.7%; 4.489-25.0%; 4.367-25.0%; 4.156-30.6%; 4.092-30.6%; 3.738-30.6%; 3.656-34.7%; 3.528-41.7%; 3.468-44.4%; 3.165-52.8%; 3.053-36.1%; 2.999-100%; 2.869-22.2%; 2.823-69.4%; 2.653-33.3%; 2.524-22.2%; 2.383-22.2%; 2.348-22.2%; 2.203-20.8%; 2.151-22.2%; 2.020-19.4%; 1.932-22.2%; 1.849-26.4%; 1.841-25.0%; 1.763-22.2%, as well as three endothermic effects equal to (97.3 ± 0.4) J / g at a temperature of (92.6 ± 0.5) ° C, (54.5 ± 0.4) J / g at a temperature of (173.7 ± 0.5) ° C, (215.6 ± 0.4) J / g at a temperature of (273.4 ± 0.5) ° C, particle size less than 150 nm, their specific with a surface of more than 30 m ² / g and a density of the powder in the free bed of less than 0.024 g / cm ³ .

2. Способ получения наноразмерной слабо закристаллизованной модификации 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата приготовлением раствора 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата и его сушкой, отличающийся тем, что готовят водный раствор при 25-100°C указанного соединения, который замораживают при скорости замораживания не ниже 60 град/мин с последующим удалением растворителя сублимационной сушкой в течение 22-27 часов.2. A method of obtaining a nanosized weakly crystallized modification of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl ) amino] benzamide hydrochloride monohydrate by preparing a solution of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl ) amino] benzamide hydrochloride monohydrate and its drying, characterized in that an aqueous solution is prepared at 25-100 ° C of the specified compound, which is frozen at a freezing rate of at least 60 deg / min, followed by removal of the solvent by freeze-drying for 22-27 hours.

3. Фармацевтическая композиция, обладающая свойствами ингибитора протеинкиназы, пригодная для использования в качестве противолейкозного цитостатического препарата для терапии онкологических заболеваний, содержащая терапевтически эффективное количество 4-метил-N-[3-(4-метилимидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-[(4-пиридин-3-илпиримидин-2-ил)амино]бензамида гидрохлорида моногидрата в виде наноразмерной слабо закриcталлизованной модификации по п. 1.3. A pharmaceutical composition having the properties of a protein kinase inhibitor, suitable for use as an antileukemic cytostatic drug for the treatment of cancer, containing a therapeutically effective amount of 4-methyl-N- [3- (4-methylimidazol-1-yl) -5- (trifluoromethyl ) phenyl] -3 - [(4-pyridin-3-ylpyrimidin-2-yl) amino] benzamide hydrochloride monohydrate in the form of a weakly crystallized nanosized modification according to claim 1.