RU2527689C2 - Способ коррекции эндотелиальной дисфункции - Google Patents
Способ коррекции эндотелиальной дисфункции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2527689C2 RU2527689C2 RU2011116937/15A RU2011116937A RU2527689C2 RU 2527689 C2 RU2527689 C2 RU 2527689C2 RU 2011116937/15 A RU2011116937/15 A RU 2011116937/15A RU 2011116937 A RU2011116937 A RU 2011116937A RU 2527689 C2 RU2527689 C2 RU 2527689C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibodies
- endothelial
- activated
- angiotensin
- synthase
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к терапии и кардиологии, и касается коррекции эндотелиальной дисфункции. Для этого вводят активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной синтазе оксида азота в сочетании с активированной - потенцированной формой антител к С-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II. Такое сочетанное воздействие обеспечивает эффективную коррекцию функции эндотелия за счет синергетического действия активированных - потенцированных форм антител. 4 н.п. ф-лы, 1 таб., 1 пр.
Description
Изобретение относится к области медицины, в частности кардиофармакологии, и может быть использовано для коррекции эндотелиальной дисфункции.
Из уровня техники известен способ коррекции эндотелиальной дисфункции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека (RU 2306953, C1, A61K 39/395, 2007). Однако недостатком данного изобретения является то, что заявленный способ эффективен при эндотелиальной дисфункции, связанной с низким уровнем эндотелиальной NO-синтазы, и может не обеспечивать терапевтическую эффективность при эндотелиальной дисфункции с нормальной продукцией NO-синтазы.
Изобретение направлено на создание эффективного и безопасного способа коррекции эндотелиальной дисфункции, препятствующего возникновению воспаления стенки сосуда и развития эндотелиальной дисфункции.
Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что в способе коррекции эндотелиальной дисфункции, характеризующемся тем, что в организм вводят одновременно активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной синтазе оксида азота в сочетании с активированной - потенцированной формой антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II.
При этом активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе и активированную - потенцированную форму антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II используют в виде активированного - потенцированного водного или водно-спиртового раствора каждого компонента, активность которого обусловлена процессом последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе в сочетании с внешним механическим воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения.
Причем используют приготовленные в виде единого (комбинированного) лекарственного препарата - одной лекарственной формы смесь различных разведений антител к эндотелиальной NO-синтазе в сочетании со смесью различных разведений антител к - концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II, приготовленных по гомеопатической технологии.
Водные или водно-спиртовые растворы активированных потенцированных форм антител к эндотелиальной синтазе оксида азота и активированных - потенцированных форм антител к С-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II могут быть получены путем многократного последовательного разведения в сочетании с внешним механическим воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения из матричного раствора антител с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.
При этом активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной синтазе оксида азота и активированную - потенцированную форму антител к C-концевому фрагменту ATI рецептора ангиотензина II используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, разведений по гомеопатической технологии.
Заявленный способ может быть использован для коррекции L-Name-индуцированной эндотелиальной дисфункции у крыс самцов линии Wistar на фоне внутрибрюшинного введения L-Name в дозе 12,5 мг/кг путем ежедневного введения 2 раза в сутки по 4,5 мл/кг (9 мл/кг/сут) внутрижелудочно смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота в виде смеси растворов гомеопатических разведений С12, C30, С200 и по 4,5 мл/кг (9 мл/кг/сут) и смеси растворов гомеопатических разведений антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II в виде смеси растворов гомеопатических разведений С12, C30, С200.
Кроме того, активированная - потенцированная форма антител к эндотелиальной синтазе оксида азота и активированная - потенцированная форма антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II используется в виде смеси различных разведений, приготовленных по гомеопатической технологии, преимущественно в виде смеси трех растворов, приготовленных из матричного раствора, разведенного, соответственно, в 10012, 10030 и 100200 раз, что эквивалентно сотенным разведениям С12, C30, С200, приготовленным по гомеопатической технологии.
При коррекции эндотелиальной дисфункции возможно раздельное, но сочетанное и одновременное применение (введение в организм) активированной - потенцированной формы антител к эндотелиальной синтазе оксида азота и активированной - потенцированной формы антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II в виде двух отдельно приготовленных препаратов как в виде растворов, так и в твердых лекарственных формах (таблеток), каждый из которых содержит активированную - потенцированную форму сверхмалых доз антител к эндотелиальной NO-синтазе и, соответственно, активированную - потенцированную форму сверхмалых доз антител к С-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II.
Предложенное сочетание активированных - потенцированных форм антител к эндотелиальной NO-синтазе и к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II в лекарственном средстве (т.е. форм антител к эндотелиальной NO-синтазе и к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II, приготовленных по гомеопатической технологии потенцирования путем многократного разведения и внешнего механического воздействия - неоднократного вертикального встряхивания каждого разведения (см., например, В.Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29), которые обладают активностью, обусловленной технологией потенцирования, в фармакологических моделях и/или клинических методах коррекции эндотелиальной дисфункции) обеспечивает увеличение eNOS, приводит к блокаде ангиотензиновых рецепторов - 1 типа, устраняет эффекты ангиотензина II (превращению оксида азота в пероксинитрат, стимуляции синтез эндотелина, стимуляции выработки цитокинов, в результате чего не возникает воспаления в сосудистой стенке, гиперактивации ренин-ангиотензин альдестероновой системы (РААС)), приводящих к формированию эндотелиальной дисфункции.
Активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе и к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II приготовляют следующим образом. Для приготовления активированной - потенцированной формы действующих компонентов используют моноклональные или, преимущественно, поликлональные антитела, которые могут быть получены по известным технологиям - методикам, описанным, например, в книге: Иммунологические методы, под ред. Г.Фримеля, М., «Медицина», 1987, с.9-33; или, например, в статье Laffly Е., Sodoyer R. Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after. - 2005 - Vol. 14. - N1-2. P.33-55.
Поликлональные антитела могут быть получены активной иммунизацией животных. Для этого по специально разработанной схеме животным делают серию инъекций требуемыми в соответствии с изобретением веществами - антигенами: эндотелиальной NO-синтазой и к С-концевым фрагментом AT1 рецептора ангиотензина II. В результате проведения такой процедуры получают моноспецифические антисыворотки с высоким содержанием антител, которые используют для получения активированных - потенцированных форм. При необходимости проводят очистку антител, присутствующих в антисыворотке, например, методом аффинной хроматографии, путем применения фракционирования солевым осаждением или ионообменной хроматографии.
Моноклональные антитела получают, например, с помощью гибридомной технологии. Причем начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при приготовлении поликлональных антисывороток. Дальнейшие этапы работы предусматривают получение гибридных клеток, продуцирующих клоны одинаковых по специфичности антител. Их выделение в индивидуальном виде проводится теми же методами, что и в случае поликлональных антисывороток.
Предпочтительным для приготовления активированной - потенцированной формы антител к эндотелиальной NO-синтазе и к С-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II является использование поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе и к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II, которые в качестве матричного (первичного) раствора с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, используют для последующего приготовления активированной - потенцированной формы.
Предпочтительной для приготовления каждого компонента является использование смеси трех водно-спиртовых разведений первичного матричного раствора антител, разведенных, соответственно, в 10012, 10030, и 100200 раз, что соответствует сотенным разведениям С12, C30 и С200, приготовленным по гомеопатической технологии.
Поликлональные антитела к эндотелиальной NO-синтазе могут быть получены при использовании в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов адъюванта и цельной молекулы эндотелиальной NO-синтазы следующей последовательности:
1 MGNLKSVGQE PGPPCGLGLG LGLGLCGKQG PASPAPEPSR APAPATPHAP DHSPAPNSPT
61 LTRPPEGPKF PRVKNWELGS ITYDTLCAQS QQDGPCTPRR CLGSLVLPRK LQTRPSPGPP
121 PAEQLLSQAR DFINQYYSSI KRSGSQAHEE RLQEVEAEVA STGTIHLRES ELVFGAKQAW
181 RNAPRCVGRIQWGKLQVFDA RDCSSAQEMF TYICNHIKYA TNRGNLRSAITVFPQRAPGR
241 GDFRIWNSQL VRYAGYRQQD GSVRGDPANV EITELCIQHG WTPGNGRFDV LPLLLQAPDE
301 APELFVLPPE LVLEVPLGAP HTGVVRGPGL RWYALPAVSN MLLEIGGLEF SAAPFSGWYM
361 STEIGTRNLC DPHRYNILED VAVCMDLDTR TTSSLWKDKA AVEINLAVLH SFQLAKVTIV
421 DHHAATVSFM KHLDNEQKAR GGCPADWAWI VPPIYGSLPP VFHQEMVNYI LSPAFRYQPD
481 PWKGSATKGA GITRKKTFKE VANAVKISAS LMGTLMAKRV KATILYASET GRAQSYAQQL
541 GRLFRKAFDP RVLCMDEYDV VSLEHEALVL WTSTFGNGD PPENGESFAA ALMEMSGPYN
601 SSPRPEQHKS YKIRFNSVSC SDPLVSSWRR KRKESSNTDS AGALGTLRFC VFGLGSRAYP
661 HFCAFARAVD TRLEELGGER LLQLGQGDEL CGQEEAFRGW AKAAFQASCE TFCVGEEAKA
721 AAQDIFSPKR SWKRQRYRLS AQAEGLQLLP GLIHVHRRKM FQATVLSVEN LQSSKSTRAT
781 ILVRLDTAGQ EGLQYQPGDHIGISAPNRPG LVEALLSRVE DPPPPTESVA VEQLEKGSPG
841 GPPPSWVRDPRLPPCTVRQA LTFFLDITSP PSPRLLRLLS TLAEEPSEQQ ELETLSQDPR
901 RYEEWKLVRC PTLLEVLEQF PSVALPAPLL LTQLPLLQPR YYSVSSAPNA HPGEVHLTVA
961 VLAYRTQDGL GPLHYGVCST WLSQLKTGDP VPCFIRGAPS FRLPPDPYVP CILVGPGTGI
1021 APFRGFWQER LHDIESKGLQ PHPMTLVFGC RCSQLDHLYR DEVQDAQERG VFGRVLTAFS
1081 REPDSPKTYV QDILRTELAA EVHRVLCLER GHMFVCGDVT MATSVLQTVQ RILATEGDME
1141 LDEAGDVIGV LRDQQRYHEDIFGLTLRTQE VTSRIRTQSF SLQERHLRGA VPWAFDPPGP 1201 DTPGP
Возможно для получения поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе использование в качестве иммуногена (антигена) цельной молекулы эндотелиальной NO-синтазы следующей последовательности:
1 MGNLKSVAQE PGPPCGLGLG LGLGLCGKQG PATPAPEPSR APASLLPPAP EHSPPSSPLT
61 QPPEGPKFPR VKNWEVGSIT YDTLSAQAQQ DGPCTPRRCL GSLVFPRKLQ GRPSPGPPAP
121 EQLLSQARDF INQYYSSIKR SGSQAHEQRL QEVEAEVAAT GTYQLRESEL VFGAKQAWRN
181 APRCVGRIQW GKLQVFDARD CRSAQEMFTYICNHIKYATN RGNLRSAITV FPQRCPGRGD
241 FRIWNSQLVR YAGYRQQDGS VRGDPANVEI TELCIQHGWT PGNGRFDVLP LLLQAPDDPP
301 ELFLLPPELV LEVPLEHPTL EWFAALGLRW YALPAVSNML LEIGGLEFPA APFSGWYMST
361 EIGTRNLCDP HRYNILEDVA VCMDLDTRTT SSLWKDKAAV EINVAVLHSY QLAKVTIVDH
421 HAATASFMKH LENEQKARGG CPADWAWIVP PISGSLTPVF HQEMVNYFLS PAFRYQPDPW
481 KGSAAKGTGI TRKKTFKEVA NAVKISASLM GTVMAKRVKA TILYGSETGR AQS YAQQLGR
541 LFRKAFDPRV LCMDEYDVVS LEHETLWLW TSTFGNGDPP ENGESFAAAL MEMSGPYNSS
601 PRPEQHKSYKIRFNSISCSD PLVSSWRRKR KESSNTDSAG ALGTLRFCVF GLGSRAYPHF
661 CAFARAVDTR LEELGGERLL QLGQGDELCG QEEAFRGWAQ AAFQAACETF CVGEDAKAAA
721 RDIFSPKRSW KRQRYRLSAQ AEGLQLLPGL IHVHRRKMFQ ATIRSVENLQ SSKSTRATIL
781 VRLDTGGQEG LQYQPGDFflG VCPPNRPGLV EALLSRVEDP PAPTEPVAVE QLEKGSPGGP
841 PPGWVRDPRL PPCTLRQALT FFLDITSPPS PQLLRLLSTL AEEPREQQEL EALSQDPRRY
901 EEWKWFRCPT LLEVLEQFPS VALPAPLLLT QLPLLQPRYY SVSSAPSTHP GEIHLTVAVL
961 AYRTQDGLGP LHYGVCSTWL SQLKPGDPVP CFIRGAPSFR LPPDPSLPCILVGPGTGIAP
1021 FRGFWQERLH DIESKGLQPT PMTLVFGCRC SQLDHLYRDE VQNAQQRGVF GRVLTAFSRE
1081 PDNPKTYVQDILRTELAAEV HRVLCLERGH MFVCGDVTMA TNVLQTVQRI LATEGDMELD
1141 EAGDVIGVLR DQQRYHEDIF GLTLRTQEVT SRIRTQSFSL QERQLRGAVP WAFEPPGSDT
1201 NSP
Возможно для получения поликлональных антител к эндотелиальной NO-синтазе использование в качестве иммуногена (антигена) синтетического пептида эндотелиальной NO-синтазы, выбранного, например, из следующих аминокислотных последовательностей:
1192-1195
PWAF
1189-1192:
GAVP
1185-1205:
RHLRGAVPWAF DPPGPDTPGP
1194-1205:
AF DPPGPDTPGP
1186-1196:
HLRGAVPWAF D
1186-1205:
HLRGAVPWAF DPPGPDTPGP
Перед отбором крови за 7-9 дней проводят 1-3 внутривенных инъекций для повышения уровня антител. В процессе иммунизации у кроликов отбирают небольшие пробы крови для оценки количества антител. Максимальный уровень иммунного ответа на введение большинства растворимых антигенов достигается через 40-60 дней после первой инъекции. После окончания первого цикла иммунизации кроликов в течение 30 дней дают восстановить здоровье и проводят реиммунизацию, включающую 1-3 внутривенные инъекции. Для получения антисыворотки из иммунизированных кроликов собирают кровь в центрифужную пробирку объемом 50 мл. С помощью деревянного шпателя удаляют со стенок пробирки образовавшиеся сгустки и помещают палочку в сгусток, образовавшийся в центре пробирки. Кровь помещают в холодильник (температура 4°C) на ночь. На следующий день удаляют сгусток, прикрепившийся к шпателю, и центрифугируют оставшуюся жидкость при 13000g в течение 10 мин. Супернатант (надосадочная жидкость) является антисывороткой. Полученная антисыворотка должна быть желтого цвета. Добавляют к антисыворотке 20% (весовая концентрация) NaN3 до конечной концентрации 0,02% и хранят до использования в замороженном состоянии при температуре -20°C (или без добавления NaN3 - при температуре -70°C). Для выделения из антисыворотки антител к эндотелиальной NO-синтазе производят абсорбцию на твердой фазе в следующей последовательности:
1. 10 мл антисыворотки кролика разбавляют в 2 раза 0,15 М NaCl добавляют 6,26 г Na2SO4, перемешивают и инкубируют 12-16 ч при 4°C;
2. выпавший осадок удаляют центрифугированием, растворяют в 10 мл фосфатного буфера и затем диализуют против того же буфера в течение ночи при комнатной температуре;
3. после удаления осадка центрифугированием раствор наносят на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенную фосфатным буфером;
4. фракцию антител определяют, измеряя оптическую плотность элюата при 280 нм.
Затем производят очистку антител, например, методом аффинной хроматографии путем прикрепления полученных антител к эндотелиальной NO-синтазе, который находится на нерастворимом матриксе с последующим элюированием концентрированными растворами соли.
Полученный, таким образом, буферный раствор поликлональных кроличьих антитела к эндотелиальной NO-синтазе, очищенных на антигене, с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0÷3,0 мг/мл, используют в качестве матричного (первичного) раствора для последующего приготовления активированной - потенцированной формы по гомеопатической технологии.
Поликлональные антитела к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II могут быть получены аналогичным вышеуказанным способом, используя в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов, например, адъювант и C-концевой фрагмент AT1 рецептора ангиотензина II выбираемый, например, из следующей группы:
GKKFK RYFLQLLKYI PPKAKSHSNL STKMSTLSYR PSDNVSSSTK KPAPCFEVE
LNPF FYVFFGKNFK KYFLQLIKYI PPNVSTHPSL TTKMSSLSYR PPENIRLPTK KTAGSFDTE
QLLKYI PPKA
SSLSYR PPENIR
QLIKYI PPNVSTHP
SNL STKMSTLSYR PSDNVSSSTK KPAPCF
Возможно для получения поликлональных антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II использование в качестве иммуногена (антигена) C-концевой фрагмент рецептора ATI ангиотензина II человека с добавленным к N концу Цистеином (C):
CGKKF KRYFL QLLKY IPPKA KSHSN LSTKM STLSY RPSDN VSSST ККРАР CFEVE
Активированную - потенцированную форму каждого компонента готовят путем равномерного уменьшения концентрации в результате последовательного разведения 1 части упомянутого матричного раствора в 9 частях (для десятичного разведения D) или в 99 частях (для сотенного разведения C) или в 999 частях (для тысячного разведения M) нейтрального растворителя с многократным вертикальным встряхиванием ("динамизацией") каждого полученного разведения и использованием отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемой потенции - кратности разведения по гомеопатическому методу (см., например, В.Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с.14-29).
Внешнюю обработку в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.
Например, для приготовления 12-го сотенного разведения C12 одну часть упомянутого матричного раствора антител к эндотелиальной NO-синтазе (или C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II) с концентрацией 3,0 мг/мл разводят в 99 частях нейтрального водного или водно-спиртового растворителя и многократно (10 и более раз) вертикально встряхивают - потенцируют полученное 1-е сотенное C1 разведение. Из 1-го сотенного С1 разведения приготовляют 2-е сотенное разведение С2. Данную операцию повторяют 11 раз, получая 12-е сотенное разведение С12. Таким образом, 12-е сотенное разведение С12 представляет собой раствор, полученный разбавлением последовательно в разных емкостях 12 раз 1-й части исходного матричного раствора антител к эндотелиальной NO-синтазе с концентрацией 3,0 мг/мл в 99 частях нейтрального растворителя, раствор, приготовленный разведением матричного раствора в 100 раз. Аналогичные операции с соответствующей кратностью разведения проводят для получения разведений C30 и С200.
При использовании в качестве биологически активного жидкого компонента смеси различных, преимущественно сотенных, разведений действующего вещества, приготовленных по гомеопатической технологии, каждый компонент состава (например, С12, C30, С200) приготовляют раздельно по описанной выше технологии до их предпоследнего разведения (соответственно, до получения СП, С29, С199) и затем вносят в соответствии с составом смеси в одну емкость по одной части каждого компонента и смешивают с требуемым количеством растворителя (соответственно, с 97 частями для сотенного разведения). При этом получают активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе в сверхмалой дозе, полученной сверхразведением матричного раствора, соответственно, в 10012, 10030 и 100200 раз, эквивалентной смеси сотенных разведений С12, C30 и С200, приготовленных по гомеопатической технологии.
Возможно использование действующего вещества в виде смеси других различных разведений, например, десятичных и/или сотенных, (D20, C30, С100 или С12, C30, С50 и т.д.), приготовленных по гомеопатической технологии, эффективность которых определяют экспериментально.
При потенцировании вместо встряхивания в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять внешнее воздействие ультразвуком, электромагнитным или иным физическим воздействием.
Для проведения экспериментальных исследований были использованы поликлональные антитела, приготовленные по заказу специализированной биотехнологической фирмой.
Пример 1.
Для экспериментального исследования коррекции эндотелиальной дисфункции опыты проводили на белых крысах самцах линии Wistar массой 250-300 г, которые были разделены на 4 группы: 1 группа - контрольная, получала дистиллированную воду 9 мл/кг/сут (ежедневно, внутрижелудочное введение.), 2 группа - получала L-NAME (12,5 мг/кг), 3 группа - получала L-NAME (12,5 мг/кг)+ смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NOS человека - С12, C30, С200 (9 мл/кг/сут), 4 группа - получала L-NAME(12,5 мг/кг)+смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NOS человека - С12, C30, С200 (9 мл/кг/сут.)+смесью растворов гомеопатических разведений антител к C-концевому фрагменту ATi рецептора ангиотензина II - С12, C30, С200 (9 мл/кг/сут).
Эндотелиальную дисфункцию у крыс вызывали (моделировали) путем внутрибрюшинного введения N-нитро-L-аргинин метиловый эфира (L-NAME) в дозе 12,5 мг/кг/сут в течение 28 дней. На 29-й день от начала эксперимента под наркозом (тиопентал-натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика TSD104A и аппаратно-программного комплекса MP 100 производства Biopac System, Inc., США. Функциональные пробы: эндотелий зависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелий независимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.
Степень развития эндотелиальной дисфункции оценивали с помощью коэффициента эндотелиальной дисфункции, являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления артериального давления (АД) в ответ на введение нитропруссида (НП) к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение ацетилхолина (АХ).
При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при p<0,05.
Обработка полученных экспериментальных данных при проведении функциональных проб на эндотелийзависимое (ацетилхолин 40 мкг/кг в/в) и эндотелийнезависимое (нитропруссид 30 мг/кг в/в) расслабление сосудов у экспериментальных животных, позволила установить, что внутрибрюшинное введение L-Name в дозе 12,5 мг/кг в течение 28 дней вызывает повышение коэффициента эндотелиальной дисфункции до 3,5±0,5 усл.ед. (табл. 1), тогда как в контрольной группе животных (внутрижелудочное введение дистиллированной воды, в дозе 9 мл/кг/сут) КЭД составил 1,2±0,1 усл.ед.
В группе животных, которым в течение 28 дней вводили L-Name в дозе 12,5 мг/кг и внутрижелудочно смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, C30, С200 в комплексе с смесью растворов гомеопатических разведений антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II - С12, C30, С200 КЭД составил - 1,8±0,2 усл.ед.
В группе животных, которым в течение 28 дней вводили L-Name в дозе 12,5 мг/кг и внутрижелудочно вводилась смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека (в дозе 9 мл/кг/сут) - С12, C30, С200 в комплексе со смесью растворов гомеопатических разведений антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II (в дозе 9 мл/кг/сут) - С12, C30, С200 КЭД составил - 1,4±0,1, что достоверно ниже, чем в группе животных, которой вводили L-Name, и в группе животных с моно коррекцией смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека в дозе 9 мл/кг - С12, C30, С200.
Таким образом, полученные результаты подтверждают возможность коррекции L-Name-индуцированной эндотелиальной дисфункции у крыс, вызванной введением L-Name в дозе 12,5 мг/кг, путем внутрижелудочного введения смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, C30, С200 в комплексе со смесью растворов гомеопатических разведений антител к C-концевому фрагменту АТХ рецептора ангиотензина II - С12, C30, С200 в дозе 9 мл/кг каждой из них, что выражается в снижении КЭД в данной группе животных до уровня 1,4±0,1 усл.ед., близкого к уровню КЭД в контрольной группе животных - 1,2±0,1 усл.ед.
Полученные данные позволяют сделать вывод о возможности эффективной коррекции эндотелиальной дисфункции и у людей.
| Таблица 1 |
| Динамика показателей АД и коэффициента эндотелиальной дисфункции при моделировании L-Name-индуцированной эндотелиальной дисфункции и ее коррекции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека, в дозе 9 мл/кг - С12, C30, С200 в комплексе со смесью растворов гомеопатических разведений антител к C-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, C30, С200 в дозе 9 мл/кг/сут. | |||||
| Группы животных | Функциональная проба | САД, мм рт.ст. | ДАД, мм рт.ст | S сосудистой реакции при проведении ЭЗВД с АХ и ЭНВД с НП, усл.ед. | КЭД, усл. ед. |
| Контрольная (ежедневное, внутрижелудочное введение дистиллированной воды 9 мл/кг/сут) | Исходные | 159,2±5,4 | 124,2±4,7 | ||
| АХ | 96,9±6,7 | 52,0±3,0 | 3071,2±501,1 | 1,2±0,1 | |
| НП | 113,8±6,1 | 55±2,4 | 3617,2±560,1 | ||
| Получавшие L-NAME (12,5 мг/кг) | Исходные | 204,8±10* | 164,2±5,9* | ||
| АХ | 111,3±7,4 | 64,7±4,3* | 3700,2±536,9 | 3,5±0,5* | |
| НП | 118,2±9,9 | 61,4±4,4 | 11922,8±1838,9* | ||
| L-NAME (12,5 мг/кг)+смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NOS человека - C12, C30, C200 (9 мл/кг/сут) | Исходные | 230,1±8,8* | 175,1±6,4* | ||
| АХ | 116,4±4,0* | 73,5±3,5* | 5826,0±801,2** | 1,8±0,2** | |
| НП | 108,1±4,6 | 60±3,6 | 9628,5±970,1* | ||
| L-NAME(12,5 мг/кг)+смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NOS человека - C12, C30, C200 (9 мл/кг/сут) +смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II - С12, C30, С200 (9 мл/кг/сут) | Исходные | 213,6±4,6* | 166,8±2,7* | ||
| АХ | 116,9±5,5* | 73,3±3,4* | 3295,3±201,4 | 1,4±0,1** | |
| НП | 122,3±4,6 | 70,5±4,5* | 4546,2±299,4** | ||
| Примечание: * - p<0,05 в сравнении с контрольной группой; ** - p<0,05 в сравнении с группой L-NAME. САД - систолическое артериальное давление, ДАД - диастолическое артериальное давление, S - площадь над кривой восстановления артериального давления при проведении фармакологических проб, КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции. | |||||
Claims (5)
1. Способ коррекции эндотелиальной дисфункции, характеризующийся тем, что в организм вводят одновременно активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной синтазе оксида азота в сочетании с активированной - потенцированной формой антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II.
2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной NO-синтазе и активированную - потенцированную форму антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II используют в виде активированного - потенцированного водного или водно-спиртового раствора каждого компонента, активность которого обусловлена процессом последовательного многократного разведения в водном или водно-спиртовом растворителе в сочетании с внешним механическим воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения.
3. Способ по п.2, характеризующийся тем, что водные или водно-спиртовые растворы активированных - потенцированных форм антител к эндотелиальной синтазе оксида азота и активированных - потенцированных форм антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II получены путем многократного последовательного разведения в сочетании с внешним воздействием - вертикальным встряхиванием каждого разведения из матричного раствора антител с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл.
4. Способ по п.1 или 2, характеризующийся тем, что активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной синтазе оксида азота и активированную - потенцированную форму антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II используют в виде смеси различных, преимущественно сотенных, разведений по гомеопатической технологии.
5. Способ по п.1 или 2, характеризующийся тем, что для коррекции L-Name-индуцированной эндотелиальной дисфункции у крыс, вызванной путем введения L-Name в дозе 12,5 мг/кг, используют одновременно активированную - потенцированную форму антител к эндотелиальной синтазе оксида азота в сочетании с активированной - потенцированной формой антител к C-концевому фрагменту AT1 рецептора ангиотензина II в виде смеси растворов гомеопатических разведений C12, C30, C200.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011116937/15A RU2527689C2 (ru) | 2011-04-28 | 2011-04-28 | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011116937/15A RU2527689C2 (ru) | 2011-04-28 | 2011-04-28 | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2011116937A RU2011116937A (ru) | 2012-11-10 |
| RU2527689C2 true RU2527689C2 (ru) | 2014-09-10 |
Family
ID=47321863
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011116937/15A RU2527689C2 (ru) | 2011-04-28 | 2011-04-28 | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2527689C2 (ru) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007067807A1 (en) * | 2005-12-07 | 2007-06-14 | Alacrity Biosciences, Inc. | Tetracyclines for treating ocular diseases and disorders |
| RU2306953C1 (ru) * | 2006-07-14 | 2007-09-27 | Михаил Владимирович Покровский | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - с12, с30, с200 |
-
2011
- 2011-04-28 RU RU2011116937/15A patent/RU2527689C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007067807A1 (en) * | 2005-12-07 | 2007-06-14 | Alacrity Biosciences, Inc. | Tetracyclines for treating ocular diseases and disorders |
| RU2306953C1 (ru) * | 2006-07-14 | 2007-09-27 | Михаил Владимирович Покровский | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - с12, с30, с200 |
Non-Patent Citations (1)
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2011116937A (ru) | 2012-11-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8168182B2 (en) | Method for treating erectile dysfunction | |
| RU2535034C2 (ru) | Лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида | |
| RU2517084C2 (ru) | Способ и средство для ингибирования продукции или усиления элиминации белка р24 | |
| RU2535033C2 (ru) | Лекарственное средство и способ профилактики инфицирования вич, профилактики и лечения заболеваний, вызываемых вич или ассоциированных с вич, в том числе спида | |
| AU2011287292A1 (en) | Combination pharmaceutical composition and methods of treating and preventing the infectious diseases | |
| US20120321672A1 (en) | Method of treating attention deficit hyperactivity disorder | |
| US20130058982A1 (en) | Method of treating Alzheimer's disease | |
| US8703124B2 (en) | Combination pharmaceutical composition and methods of treating diseases or conditions associated with the cardiovascular system | |
| US20120263725A1 (en) | Pharmaceutical composition and methods of treating and preventing the diseases caused by HIV or associated with HIV | |
| RU2527689C2 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции | |
| RU2542403C2 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции | |
| RU2541166C2 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции | |
| RU2191601C1 (ru) | Лекарственное средство и способ лечения эректильных дисфункций | |
| RU2526149C2 (ru) | Способ коррекции эндотелиальной дисфункции | |
| RU2543331C2 (ru) | Лекарственное средство для коррекции эндотелиальной дисфункции | |
| RU2536228C2 (ru) | Лекарственное средство для коррекции эндотелиальной дисфункции | |
| RU2543332C2 (ru) | Лекарственное средство для коррекции эндотелиальной дисфункции | |
| RU2500424C2 (ru) | Лекарственное средство для коррекции эндотелиальной дисфункции | |
| RU2526153C2 (ru) | Способ повышения фармакологической активности действующего вещества лекарственного средства и фармацевтическая композиция | |
| RU2542414C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения эректильных дисфункций и способ лечения эректильных дисфункций | |
| RU2651005C2 (ru) | Способ повышения фармакологической активности активированной-потенцированной формы антител к простатоспецифическому антигену и фармацевтическая композиция | |
| RU2523451C2 (ru) | Способ лечения хронической сердечной недостаточности и фармацевтическая композиция для лечения хронической сердечной недостаточности | |
| RU2531049C2 (ru) | Лекарственное средство для лечения заболеваний предстательной железы и способ лечения заболеваний предстательной железы | |
| RU2525155C2 (ru) | Способ лечения хронической сердечной недостаточности и фармацевтическая композиция для комплексной терапии хронической сердечной недостаточности | |
| RU2502521C2 (ru) | Комплексное лекарственное средство для лечения бактериальных инфекций и способ лечения бактериальных инфекций |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150429 |