RU2482546C2 - Method of endothelial dysfunction correction by solution of homoeopathic dilutions of angiotensin ii receptor c-terminal fragment antibodies - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: endothelial dysfunction is induced in experimental Wistar male rats for 28 days by daily intraperitoneal introduction of N-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) 12.5 mg/kg a day. An agent for dysfunction correction is a mixture of solutions of homoeopathic dilutions of angiotensin II receptor C-terminal fragment antibodies - C12, C30, C200. This mixture is introduced at the same time for 28 day intragastrically 2 times a day in a dose of 4.5 ml/kg.

EFFECT: method provides effective endothelial dysfunction correction with eNOS increase.

1 tbl

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и может быть использовано для коррекции N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) - индуцированной эндотелиальной дисфункции.The invention relates to medicine, in particular to experimental cardiopharmacology, and can be used to correct N-nitro-L-arginine methyl ether (L-NAME) - induced endothelial dysfunction.

Из уровня техники известен способ коррекции эндотелиальной дисфункции смесью растворов гомеопатических разведении поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200, описанный в патенте РФ №2306953 C1 (A61K 39/395, 27.09.2007 г.).The prior art method for the correction of endothelial dysfunction with a mixture of solutions of homeopathic dilution of polyclonal rabbit antibodies to endothelial synthase of human nitric oxide - C12, C30, C200, described in RF patent No. 2306953 C1 (A61K 39/395, 09/27/2007).

Недостатком способа является то, что основным механизмом действия смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30, С200 является увеличение количества eNOS, что ограничивает его эффективность.The disadvantage of this method is that the main mechanism of action of a mixture of solutions of homeopathic dilutions of polyclonal rabbit antibodies to endothelial synthase of nitric oxide - C12, C30, C200 is an increase in the number of eNOS, which limits its effectiveness.

Задачей изобретения является создание эффективного способа коррекции N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) - индуцированной эндотелиальной дисфункции, приводящего к устранению эффектов ангиотензина II.The objective of the invention is to provide an effective method for the correction of N-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) - induced endothelial dysfunction, leading to the elimination of the effects of angiotensin II.

Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что на фоне моделирования L-NAME - индуцированной эндотелиальной дисфункции в эксперименте внутрибрюшинным введением лабораторному животному в течение 28 суток блокатора синтеза NO N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) в дозе 12,5 мг/кг/сут, проводится ее коррекция введением смеси растворов гомеопатических разведении антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200, внутрижелудочно, 2 раза в сутки по 4,5 мл/кг (9 мл/кг/сут).The solution of this problem is ensured by the fact that against the background of modeling L-NAME - induced endothelial dysfunction in the experiment by intraperitoneal administration to the laboratory animal for 28 days, the NO synthesis blocker N-nitro-L-arginine methyl ether (L-NAME) at a dose of 12.5 mg / kg / day, its correction is carried out by introducing a mixture of solutions of homeopathic dilution of antibodies to the C-terminal fragment of the angiotensin II receptor - C12, C30, C200, intragastrically, 2 times a day at 4.5 ml / kg (9 ml / kg / day) .

Использование в заявленном способе смеси растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200 приводит к блокаде ангиотензиновых рецепторов - 1 типа и устраняет такие эффекты ангиотензина II, как: превращение оксида азота в пероксинитрат, стимуляция синтеза эндотелина, стимуляция выработки цитокинов и инициация тем самым воспаления в сосудистой стенке, гиперактивация ренинангиотензин альдостероновой системы (РААС), ведущая к формированию эндотелиальной дисфункции, что повышает эффективность коррекции эндотелиальной дисфункции. Кроме того, заявленный способ направлен на расширения арсенала средств, обеспечивающих коррекцию эндотелиальной дисфункции.The use in the claimed method of a mixture of solutions of homeopathic dilutions of antibodies to the C-terminal fragment of the angiotensin II receptor - C12, C30, C200 leads to blockade of angiotensin receptors - type 1 and eliminates the effects of angiotensin II, such as: the conversion of nitric oxide into peroxynitrate, stimulation of endothelin synthesis, stimulation of cytokine production and thereby initiating inflammation in the vascular wall, hyperactivation of the reninangiotensin of the aldosterone system (RAAS), leading to the formation of endothelial dysfunction, which increases the effect of ciency correction of endothelial dysfunction. In addition, the claimed method is aimed at expanding the arsenal of tools for the correction of endothelial dysfunction.

Заявленный способ может быть осуществлен следующим образом.The claimed method can be carried out as follows.

Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar массой 250-300 г. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 12,5 мг/кг/сут. На 29 день от начала эксперимента под наркозом (тиопенталнатрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика TSD104A и аппаратно-программного комплекса МР100, производства Biopac System, Inc., США. Функциональные пробы: эндотелийзависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелийнезависимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.The experiments were carried out on white rats male Wistar line weighing 250-300 g. N-nitro-L-arginine methyl ether (L-NAME) was administered intraperitoneally at a dose of 12.5 mg / kg / day. On the 29th day from the start of the experiment, under anesthesia (thiopental sodium 50 mg / kg), a catheter is inserted into the left carotid artery to record blood pressure (BP), bolus administration of pharmacological agents is carried out in the right femoral vein. Hemodynamic parameters: systolic blood pressure (SBP), diastolic blood pressure (DBP) and heart rate (HR) are measured continuously using the TSD104A sensor and MP100 hardware and software complex, manufactured by Biopac System, Inc., USA. Functional tests: endothelium-dependent vasodilation (ESV) - intravenous administration of acetylcholine (AH) at a dose of 40 μg / kg, endothelium-independent vasodilation (ENZV) - intravenous administration of sodium nitroprusside (NP) at a dose of 30 μg / kg.

Степень развития эндотелиальной дисфункции оценивается с помощью коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение НП к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ.The degree of development of endothelial dysfunction is estimated using the coefficient of endothelial dysfunction (QED), which is the ratio of the area of the triangle above the trend of the reaction of blood pressure recovery in response to the introduction of NP to the area of the triangle above the trend of the reaction of blood pressure recovery in response to the introduction of AH.

При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при р<0,05.When statistical data processing was calculated, the average value, the standard deviation. Differences were considered significant at p <0.05.

Обработка полученных экспериментальных данных при проведении функциональных проб на эндотелийзависимое (ацетилхолин 40 мкг/кг в/в) и эндотелийнезависимое (нитропруссид 30 мг/кг в/в) расслабление сосудов у экспериментальных животных позволили установить, что внутрибрюшинное введение N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) в дозе 12,5 мг/кг, в течение 28 дней вызывает повышение коэффициента эндотелиальной дисфункции до 3,5±0,5 усл. ед. (Таблица), тогда как в контрольной группе (внутрижелудочное введение дистиллированной воды, в дозе 9 мл/кг/сут) он составил 1,2±0,1 усл. ед.Processing the obtained experimental data during functional tests for endothelium-dependent (acetylcholine 40 μg / kg iv) and endothelium-independent (nitroprusside 30 mg / kg iv) vascular relaxation in experimental animals revealed that intraperitoneal administration of N-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) at a dose of 12.5 mg / kg for 28 days causes an increase in the coefficient of endothelial dysfunction to 3.5 ± 0.5 srvc. units (Table), whereas in the control group (intragastric administration of distilled water, at a dose of 9 ml / kg / day), it amounted to 1.2 ± 0.1 srvc. units

В группе животных, где на фоне введения N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) в дозе 12,5 мг/кг, в течение 28 дней внутрижелудочно вводилась смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200 КЭД составил - 1,5±0,2 усл. ед., что достоверно ниже, чем в группе с моделированием патологии.In the group of animals, where against the background of the introduction of N-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) at a dose of 12.5 mg / kg, a mixture of solutions of homeopathic dilutions of polyclonal antibodies to the C-terminal fragment of the angiotensin receptor was intragastrically administered for 28 days II - C12, C30, C200 QED was - 1.5 ± 0.2 srvc. units, which is significantly lower than in the group with modeling of pathology.

Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать коррекцию L-NAMEиндуцированной эндотелиальной дисфункции на фоне введения N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) в дозе 12,5 мг/кг, в течение 28 дней смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200, при внутрижелудочном введении в дозе 9 мл/кг, снижая КЭД до уровня такового в контрольной группе животных - 1,2±0,1 усл. ед.Thus, the obtained results allow us to state the correction of L-NAME-induced endothelial dysfunction on the background of the introduction of N-nitro-L-arginine methyl ether (L-NAME) at a dose of 12.5 mg / kg for 28 days with a mixture of solutions of homeopathic dilutions of antibodies to C -terminal fragment of the angiotensin II receptor - C12, C30, C200, with intragastric administration at a dose of 9 ml / kg, reducing the QED to the level of that in the control group of animals - 1.2 ± 0.1 srvc. units

Динамика показателей АД и коэффициента эндотелиальной дисфункции при моделировании N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) - индуцированной эндотелиальной дисфункции и ее коррекции смесью растворов гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200 в дозе 9 мл/кг/сутDynamics of blood pressure and endothelial dysfunction coefficient in modeling N-nitro-L-arginine methyl ether (L-NAME) - induced endothelial dysfunction and its correction with a mixture of solutions of homeopathic dilutions of antibodies to the C-terminal fragment of angiotensin II receptor - C12, C30, C200 dose of 9 ml / kg / day Группы животныхGroups of animals Функциональная пробаFunctional test САД, мм рт.ст.GARDEN, mmHg ДАД, мм рт.стDBP, mmHg S сосудистой реакции при проведении ЭЗВД с АХ и ЭНВД с НП, усл. ед.S of the vascular reaction during ESVD with AH and ENVD with NP, conv. units КЭД, усл. ед.QED, conv. units Контрольная (ежедневное, внутрижелудочное введение дистиллированной воды 9 мл/кг/сут)Control (daily, intragastric administration of distilled water 9 ml / kg / day) ИсходныеSource 159,2±5,4159.2 ± 5.4 124,2±4,7124.2 ± 4.7   1,2±0,11.2 ± 0.1 АХOH 96,9±6,796.9 ± 6.7 52,0±3,052.0 ± 3.0 3071,2±501,13071.2 ± 501.1 НПNP 113,8±6,1113.8 ± 6.1 55±2,455 ± 2.4 3617,2±560,13617.2 ± 560.1 Получавшие L-NAME (12,5 мг/кг)Receiving L-NAME (12.5 mg / kg) ИсходныеSource 204,8±10*204.8 ± 10 * 164,2±5,9*164.2 ± 5.9 *   3,5±0,5*3.5 ± 0.5 * АХOH 111,3±7,4111.3 ± 7.4 64,7±4,3*64.7 ± 4.3 * 3700,2±536,93700.2 ± 536.9 НПNP 118,2±9,9118.2 ± 9.9 61,4±4,461.4 ± 4.4 11922,8±1838,9*11922.8 ± 1838.9 * L-NAME (12,5 мг/кг) + смесь растворов гомеопатических разведений антител к с-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200 (9 мл/кг/сут.)L-NAME (12.5 mg / kg) + a mixture of solutions of homeopathic dilutions of antibodies to the c-terminal fragment of the angiotensin II receptor - C12, C30, C200 (9 ml / kg / day.) ИсходныеSource 226,8±12,1*226.8 ± 12.1 * 174,4±7,0*174.4 ± 7.0 *   АХOH 114,9±5,5114.9 ± 5.5 67,1±4,8*67.1 ± 4.8 * 5074,7±905,35074.7 ± 905.3 1,5±0,2**1.5 ± 0.2 ** НПNP 124,9±10124.9 ± 10 69,9±8,569.9 ± 8.5 7101,5±1025,8**7101.5 ± 1025.8 ** Примечание: * - р<0,05 в сравнении с контрольной группой; ** - p<0,05 в сравнении с группой L-NAME. САД - систолическое артериальное давление, ДАД - диастолическое артериальное давление, S - площадь над кривой восстановления артериального давления при проведении фармакологических проб, КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункцииNote: * - p <0.05 in comparison with the control group; ** - p <0.05 compared with the L-NAME group. GARDEN - systolic blood pressure, DBP - diastolic blood pressure, S - area above the curve for the restoration of blood pressure during pharmacological tests, QED - coefficient of endothelial dysfunction

Claims (1)

Способ коррекции эндотелиальной дисфункции раствором гомеопатических разведений антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II, характеризующийся тем, что в эксперименте крысам самцам линии Wistar в течение 28 дней индуцируют эндотелиальную дисфункцию ежедневным внутрибрюшинным введением N-нитро-L-аргинин метилового эфира (L-NAME) в дозе 12,5 мг/кг в сутки, при этом в качестве средства для коррекции дисфункции используют смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных антител к С-концевому фрагменту рецептора ангиотензина II - С12, С30, С200, которую вводят в то же время на протяжении 28 дней внутрижелудочно 2 раза в сутки по 4,5 мл/кг. A method for correcting endothelial dysfunction with a solution of homeopathic dilutions of antibodies to the C-terminal fragment of the angiotensin II receptor, characterized in that in the experiment, rats of Wistar males are induced to induce endothelial dysfunction by daily intraperitoneal administration of N-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME) ) at a dose of 12.5 mg / kg per day, while a mixture of solutions of homeopathic dilutions of polyclonal antibodies to the C-terminal fragment of the angiotensin receptor is used as a means for correcting dysfunction II - C12, C30, C200, which is administered at the same time for 28 days intraperitoneally, 2 times a day with 4.5 ml / kg.