RU2464563C1 - Способ выделения микровезикул эритроцитов - Google Patents
Способ выделения микровезикул эритроцитов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2464563C1 RU2464563C1 RU2011128440/15A RU2011128440A RU2464563C1 RU 2464563 C1 RU2464563 C1 RU 2464563C1 RU 2011128440/15 A RU2011128440/15 A RU 2011128440/15A RU 2011128440 A RU2011128440 A RU 2011128440A RU 2464563 C1 RU2464563 C1 RU 2464563C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- supernatant
- minutes
- microvesicles
- erythrocyte
- red blood
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биологии и медицине. Способ включает забор крови, удаление и промывание эритроцитов, их инкубирование и центрифугирование для получения супернатанта. К супернатанту добавляют хлористый цинк до конечной концентрации 5-10 мМ, перемешивают, оставляют стоять 60 минут при комнатной температуре. Через 60 минут микровезикулы оседают на дно пробирки. Способ дает возможность упростить процесс получения микровезикул. 1 пр.
Description
Предлагаемое изобретение относится к биологии и медицине и может использоваться в опытах in vitro для получения и изучения микровезикул эритроцитов с помощью биохимических и морфологических методов исследования.
В качестве прототипа выбран способ выделения микровезикул эритроцитов из надосадочной жидкости (супернатант), который включает забор крови, промывание эритроцитов, инкубацию отмытых клеток в присутствии кальция и ионофора А 23187, центрифугирование при 1000 g в течение 10 минут для получения супернатанта, ультрацентрифугирование супернатанта при 100000 g в течение 60 минут, получение осадка, содержащего микровезикулы (Allan D., Thomas P., Limbrick A.R. Biochem. J. - 1980. - Vol.188. - P.881-887).
Однако этот способ требует ультрацентрифугирования и дорогостоящего специального оборудования.
Задача предлагаемого изобретения - совершенствование способа.
Технический результат - упрощение процесса получения микровезикул эритроцитов.
Технический результат достигается за счет того, что в способе, включающем забор крови, промывание эритроцитов, их инкубирование и центрифугирование для получения супернатанта, к супернатанту добавляют хлористый цинк до конечной концентрации 5-10 мМ, перемешивают, оставляют на 60 мин при комнатной температуре и получают осадок, содержащий микровезикулы.
Способ осуществляется следующим образом. Кровь от здоровых людей забирают в вакуумные пробирки, содержащие цитрат натрия. Эритроциты трижды промывают физиологическим раствором и инкубируют в безглюкозной среде. Затем эритроциты центрифугируют при 1000 g в течение 10 минут для получения супернатанта. К супернатанту добавляют хлористый цинк до конечной концентрации 5-10 мМ, перемешивают и оставляют пробирки на 60 минут при комнатной температуре для получения осадка с микровезикулами.
Пример. Отмытые эритроциты инкубировали в безглюкозной среде при 37°С в течение 24 ч. После инкубации эритроциты центрифугировали при 1000 g в течение 10 минут. Затем к супернатанту добавляли хлористый цинк до конечной концентрации 5-10 мМ, перемешивали и оставляли на 60 минут при комнатной температуре. Через 60 минут получали осадок с микровезикулами.
Преимуществом предлагаемого способа является простота, доступность, отсутствие необходимости в ультрацентрифугировании и сложном дорогостоящем оборудовании.
Claims (1)
- Способ выделения микровезикул эритроцитов, включающий забор крови, промывание эритроцитов, их инкубирование и центрифугирование для получения супернатанта, отличающийся тем, что к супернатанту добавляют хлористый цинк до конечной концентрации 5-10 мМ, перемешивают, оставляют на 60 мин при комнатной температуре и получают осадок, содержащий микровезикулы.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011128440/15A RU2464563C1 (ru) | 2011-07-08 | 2011-07-08 | Способ выделения микровезикул эритроцитов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2011128440/15A RU2464563C1 (ru) | 2011-07-08 | 2011-07-08 | Способ выделения микровезикул эритроцитов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2464563C1 true RU2464563C1 (ru) | 2012-10-20 |
Family
ID=47145506
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011128440/15A RU2464563C1 (ru) | 2011-07-08 | 2011-07-08 | Способ выделения микровезикул эритроцитов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2464563C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2558776C2 (ru) * | 2013-04-16 | 2015-08-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия" (ФГБОУ ВПО НГСХА) | Способ выделения микровезикул эритроцитов |
| RU2667125C1 (ru) * | 2017-07-13 | 2018-09-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия" | Способ оценки степени образования везикул эритроцитов |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2068265C1 (ru) * | 1992-11-27 | 1996-10-27 | Валентин Анатольевич Лифановский | Способ получения тромбоцитов |
| RU2337677C1 (ru) * | 2007-03-01 | 2008-11-10 | Илья Николаевич Медведев | Способ коррекции повышенной активности кровяных пластинок при метаболическом синдроме |
-
2011
- 2011-07-08 RU RU2011128440/15A patent/RU2464563C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2068265C1 (ru) * | 1992-11-27 | 1996-10-27 | Валентин Анатольевич Лифановский | Способ получения тромбоцитов |
| RU2337677C1 (ru) * | 2007-03-01 | 2008-11-10 | Илья Николаевич Медведев | Способ коррекции повышенной активности кровяных пластинок при метаболическом синдроме |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ALLAN DAVID et al. The isolation and characterization of 60 nm vesicles ('nanovesicles') produced during ionophore A23187-induced budding of human erythrocytes. Biochem J. v.188, 881-887. ЗУБАИРОВ Д.М. ЗУБАИРОВА Л.Д. Микровезикулы в крови функции и их роль в тромбообразовании. - М.: ГЭОТАР-МЕДИА, 2009, с.55-63. ЗУБАИРОВ Д.М. Эндотелиальные микровезикулы-посредники межклеточных взаимодействий в сосудистом секторе, Тромбоз, гемостаз и реология, №2 (46), июнь 2011, с.6-12. ЗАЛЕССКИЙ В.Н. Потенциальная роль микрочастиц клеток крови и синовиальной жидкости в патогенезе ревматических заболеваний // Украïнський ревматологiчний журнал, №4 (26), 2006, с.32-39. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2558776C2 (ru) * | 2013-04-16 | 2015-08-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия" (ФГБОУ ВПО НГСХА) | Способ выделения микровезикул эритроцитов |
| RU2667125C1 (ru) * | 2017-07-13 | 2018-09-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия" | Способ оценки степени образования везикул эритроцитов |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2015274367A1 (en) | Products and methods to isolate mitochondria | |
| CN108795869A (zh) | 一种循环肿瘤细胞阳性富集方法 | |
| CN104195103B (zh) | 一种诱导多能干细胞的培养基及其用途 | |
| CN104694466A (zh) | 间充质干细胞来源的胞外体制备及在急性肺损伤中的应用 | |
| CN109022362A (zh) | 一种高白细胞性白血病pdx模型的建立方法 | |
| CA2926304C (en) | Use of a reagent for the lysis of erythrocytes as well as methods and kits relating thereto | |
| CN104498434A (zh) | 一种大量树突状细胞的制备方法、所得树突状细胞 | |
| RU2464563C1 (ru) | Способ выделения микровезикул эритроцитов | |
| CN105238756A (zh) | 一种脐带血单核细胞的制备方法 | |
| RU2558776C2 (ru) | Способ выделения микровезикул эритроцитов | |
| WO2018166240A1 (zh) | 一种太平洋牡蛎中性多糖及其制备方法和应用 | |
| Wu et al. | Separation and purification of Toxoplasma gondii tachyzoites from in vitro and in vivo culture systems | |
| CN102796669B (zh) | 柔嫩艾美耳球虫裂殖子提取纯化的方法 | |
| CN102492654A (zh) | 一种分离人脐带血干细胞的试剂盒及其使用方法 | |
| NL2034093B1 (en) | Method for separating exosomes from apostichopus japonicus body fluid sample | |
| CN102206678B (zh) | 应用核转染法体外转染猪t淋巴细胞的方法 | |
| TWI662130B (zh) | 分離循環癌細胞之方法 | |
| CN111534476A (zh) | 一种贝类***生***解离和分离的方法 | |
| CN109913411A (zh) | 有效改善骨髓造血微环境的免疫细胞的制备方法 | |
| CN109988745A (zh) | 一种细胞核的提取方法 | |
| CN105505874B (zh) | 一种人脐血来源的调节性巨噬细胞及其分离纯化和培养方法 | |
| Moreno et al. | Cell Culture and Maintenance of the Evolutionary Forms of Trypanosoma cruzi for Studies of Parasitic Biology | |
| RU2606042C1 (ru) | Способ оценки влияния лекарственных веществ на степень везикуляции эритроцитов | |
| WO2017149564A1 (ja) | 細胞増殖法を用いた循環腫瘍細胞の検出・分離取得方法 | |
| US11639490B2 (en) | Device and method for producing and purifying exosomes |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20130709 |