RU2460781C2

RU2460781C2 - Immunobiological antiallergic agent (versions) and lactobacillus acidophilus strain used for production of immunobiological antiallergic agent

Info

Publication number: RU2460781C2
Application number: RU2009102951/10A
Authority: RU
Inventors: Татьяна Олеговна Голикова (RU); Татьяна Олеговна Голикова; Владимир Андрианович Алёшкин (RU); Владимир Андрианович Алёшкин; Станислав Степанович Афанасьев (RU); Станислав Степанович Афанасьев; Аделаида Михайловна Амерханова (RU); Аделаида Михайловна Амерханова; Халил Мингалиевич Галимзянов (RU); Халил Мингалиевич Галимзянов; Владимир Михайлович Лахтин (RU); Владимир Михайлович Лахтин; Александр Васильевич Куяров (RU); Александр Васильевич Куяров; Олег Васильевич Рубальский (RU); Олег Васильевич Рубальский; Андрей Владимирович Алешкин (RU); Андрей Владимирович Алешкин; Таисия Кириловна Костина (RU); Таисия Кириловна Костина
Original assignee: Общество с ограниченной ответственностью "ИнноПроб" (ООО "ИнноПроб"); Татьяна Олеговна Голикова; Владимир Андрианович Алёшкин; Станислав Степанович Афанасьев; Аделаида Михайловна Амерханова; Халил Мингалиевич Галимзянов; Владимир Михайлович Лахтин; Александр Васильевич Куяров; Олег Васильевич Рубальский; Андрей Владимирович Алешкин; Таисия Кириловна Костина; Максим Станиславович Афанасьев; Денис Станиславович Афанасьев; Евгений Олегович Рубальский
Priority date: 2009-01-29
Filing date: 2009-01-29
Publication date: 2012-09-10
Also published as: RU2009102951A

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: immunobiological antiallergic agent (versions) contains microorganisms of the strain Lactobacillus acidophilus No. 222, collection number, deposited in the State Collection of Microorganisms of Normal Microflora (SCNM) of Federal State Research Institution Gabrichevskiy Moscow Research Institution of Epidemiology and Microbiology of Federal Service for Supervision of Consumer Rights and Human Welfare, applicable for prevention and treatment of skin defects, dermatitis, an allergic disease, a pseudoallergic disease either non-morbid, or combined with a disease of infectious aethiology, intestinal disbacteriosis. The agent contains a biomass in a cultivation medium or a supernatant of a microorganism biomass of said strain prepared by cultivation, as well as target additives. The agent is presented in the form of suspension, or cream, or ointment, or paste, or mask. The strain Lactobacillus acidophilus No. 222, collection number, is deposited in the State Collection of Microorganisms of Normal Microflora (GKNM) of Federal State Research Institution Gabrichevskiy Moscow Research Institution of Epidemiology and Microbiology of Federal Service for Supervision of Consumer Rights and Human Welfare, and aims at preparing the immunobiological antiallergic agent.

EFFECT: more efficient antiallergic action of the immunobiological agent on the basis of lactobacilli.

6 cl, 5 ex

Description

Изобретение относится к медицине и фармацевтической промышленности и может быть использовано в производстве и использовании медицинских иммунобиологических препаратов и биологически активных добавок к пище.The invention relates to medicine and the pharmaceutical industry and can be used in the production and use of medical immunobiological preparations and biologically active food additives.

Известно противоаллергическое действие молочнокислых бактерий, преимущественно лактобацилл (Weid Т., Ibnou-Zekri N., Pfeifer A. Novel probiotics for the management of allergic inflammation // Digestive and liver disease: official journal of the Italian Society of Gastroenterology and the Italian Association for the Study of the Liver. - 2002. - Vol.34, №2. - P.25-28), которое обусловлено снижением уровня специфических IgE в сыворотке крови (Peng S., Lin J.Y., Lin M.Y. Antiallergic effect of milk fermented with lactic acid bacteria in a murine animal model // Journal of agricultural and food chemistry. - 2007. - Vol.55, №13. - P.5092-5096) при стимуляции лактобациллами синтеза регуляторных цитокинов: штаммы Lactobacillus plantarum CCRC 12944, Lactobacillus acidophilus CCRC 14079, Lactobacillus rhamnosus CCRC 10940, Lactobacillus paracasei subsp. paracasei CCRC 14023, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CCRC 12297, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CCRC 14007 и Lactobacillus deldrueckii subsp. bulgaricus CCRC 14069 стимулировали синтез лимфоцитами интерферона-γ (US патент, номер публикации 2004/0047849 A1, C12N 1/20); штамм Lactobacillus paracasei KW 3110 стимулировал синтез лимфоцитами интерлейкина-12 и интерлейкина-4 (ЕР патент 1634600 A1, A61K 35/74, А61Р 11/02, 11/06, 17/00, 27/02, 37/08, A23L 1/30, C12N 1/20); синтез спленоцитами и мононуклеарами периферической крови интерферона-γ стимулировал штамм Lactobacillus paracasei GM-080 (US патент, номер публикации 2005/0214271 A1; US патент 6994848 В2, А61К 45/00, C12N 1/20).The antiallergic effect of lactic acid bacteria, mainly lactobacilli, is known (Weid T., Ibnou-Zekri N., Pfeifer A. Novel probiotics for the management of allergic inflammation // Digestive and liver disease: official journal of the Italian Society of Gastroenterology and the Italian Association for the Study of the Liver. - 2002. - Vol. 34, No. 2. - P.25-28), which is due to a decrease in the level of specific IgE in serum (Peng S., Lin JY, Lin MY Antiallergic effect of milk fermented with lactic acid bacteria in a murine animal model // Journal of agricultural and food chemistry. - 2007. - Vol. 55, No. 13. - P.5092-5096) when stimulated by lactobacilli synthesis of regulatory cytokines: strains of Lactobacillus plantarum CCRC 12944, Lactobacillus acidophilus CCRC 14079, Lactobacillus rhamnosus CCRC 10940, Lactobacillus paracasei subsp. paracasei CCRC 14023, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CCRC 12297, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus CCRC 14007 and Lactobacillus deldrueckii subsp. bulgaricus CCRC 14069 stimulated lymphocyte synthesis of interferon-γ (US patent, publication number 2004/0047849 A1, C12N 1/20); strain Lactobacillus paracasei KW 3110 stimulated the synthesis of interleukin-12 and interleukin-4 by lymphocytes (EP patent 1634600 A1, A61K 35/74, A61P 11/02, 11/06, 17/00, 27/02, 37/08, A23L 1 / 30, C12N 1/20); synthesis of interferon-γ by splenocytes and peripheral blood mononuclear cells stimulated the strain Lactobacillus paracasei GM-080 (US patent, publication number 2005/0214271 A1; US patent 6994848 B2, A61K 45/00, C12N 1/20).

Однако штаммы разных видов лактобацилл, например: Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus buchneri, Lactobacillus delbrueckii, способны продуцировать гистамин (Garai G., Dueñas M.T., Irastorza A., Moreno-Arribas M.V. Biogenic amine production by lactic acid bacteria isolated from cider // Letters in applied microbiology. - 2007. - Vol.45, №5. - P.473-478; Azcarate-Peril M.A., Altermann E., Hoover-Fitzula R.L., Cano R.J., Klaenhammer T.R. Identification and inactivation of genetic loci involved with Lactobacillus acidophilus acid tolerance // Applied and environmental microbiology. - 2004. -Vol.70, №9. - P.5315-5322; Leuschner RG, Kurihara R, Hammes WP. Effect of enhanced proteolysis on formation of biogenic amines by lactobacilli during Gouda cheese ripening // International journal of food microbiology. - 1998. - Vol.20, №44. - P.15-20). Этот недостаток ограничивает показания к применению средств, содержащих лактобациллы, и препятствует использованию лактобацилл в качестве ингредиентов композиций, перспективных для профилактики и лечения заболеваний, в развитии которых имеет значение уровень гистамина в организме.However, strains of different types of lactobacilli, for example: Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus buchneri, Lactobacillus delbrueckii, are capable of producing histamine (Garai G., Dueñas MT, Irastorza A., Moreno-Arribas MV Biogenic amine production by lactic acid bacteria isolated from cider // applied microbiology. - 2007. - Vol. 45, No. 5. - P.473-478; Azcarate-Peril MA, Altermann E., Hoover-Fitzula RL, Cano RJ, Klaenhammer TR Identification and inactivation of genetic loci involved with Lactobacillus acidophilus acid tolerance // Applied and environmental microbiology. - 2004.-Vol. 70, No. 9. - P.5315-5322; Leuschner RG, Kurihara R, Hammes WP. Effect of enhanced proteolysis on formation of biogenic amines by lactobacilli during Gouda cheese ripening // International journal of food microbiology. - 1998. - Vol.20, No. 44. - P.15-20). This drawback limits the indications for the use of agents containing lactobacilli and prevents the use of lactobacilli as ingredients in compositions that are promising for the prevention and treatment of diseases in the development of which the level of histamine in the body matters.

Ранее не было известно, что производственные штаммы Lactobacillus acidophilus меньше других видов лактобацилл продуцируют гистамин. Кроме того, штаммы Lactobacillus acidophilus способны подвергать гистамин гидролитическому дезаминированию с помощью фермента диаминооксидазы (гистаминазы). При этом соотношение уровня продукции гистамина и уровня его дезаминирования лактобациллами зависит от ряда факторов, в том числе от кислотности, ионного состава и других показателей среды культивирования.It was not previously known that production strains of Lactobacillus acidophilus produce histamine less than other types of lactobacilli. In addition, strains of Lactobacillus acidophilus are able to hydrolyze histamine with the help of the enzyme diamine oxidase (histaminase). At the same time, the ratio of the level of histamine production and the level of its deamination with lactobacilli depends on a number of factors, including acidity, ionic composition and other indicators of the culture medium.

Наиболее близким аналогом заявляемого изобретения - прототипом являются ацидофильные кисломолочные продукты на основе одного штамма Lactobacillus acidophilus NK1 (SU авторское свидетельство 732389, A23C 9/123, C12N 1/20; Ворошилина Н.Н. Микробы вида Lactobacillus acidophilus как основа фармакопейных форм бактерийных препаратов. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. - Москва, 1982. - 22 с.).The closest analogue of the claimed invention is the prototype of acidophilic fermented milk products based on one strain of Lactobacillus acidophilus NK1 (SU copyright certificate 732389, A23C 9/123, C12N 1/20; Voroshilina N.N. Microbes of the species Lactobacillus acidophilus as the basis for pharmacopeia forms of bacterial preparations. Abstract of dissertation for the degree of candidate of medical sciences. - Moscow, 1982. - 22 p.).

Недостатком указанного штамма лактобацилл является то, что он может более чем в 1,5 раза повышать содержание гистамина в среде культивирования при высоком показателе кислотности среды, который достигается за счет высокой кислотообразующей активности штамма Lactobacillus acidophilus NK1.The disadvantage of this strain of lactobacilli is that it can increase the histamine content in the cultivation medium by a factor of more than 1.5 with a high acidity index of the medium, which is achieved due to the high acid-forming activity of the strain Lactobacillus acidophilus NK1.

Задачей заявляемого изобретения является повышение эффективности противоаллергического действия иммунобиологических средств на основе лактобацилл.The task of the invention is to increase the effectiveness of the antiallergic action of immunobiological agents based on lactobacilli.

Задача решена тем, что варианты иммунобиологического средства содержат микроорганизмы штамма Lactobacillus acidophilus ГРК-08, коллекционный №222, обладающего критериями противоаллергического действия.The problem is solved in that the variants of the immunobiological agent contain microorganisms of the strain Lactobacillus acidophilus GRK-08, collection No. 222, which has anti-allergic action criteria.

Штамм Lactobacillus acidophilus ГРК-08 получен из содержимого кишечника ребенка, депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры ФГУН МНИИЭМ имени Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора под №222 и характеризуется следующими свойствами:The strain Lactobacillus acidophilus GRK-08 was obtained from the contents of the intestines of a child, deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora of the Federal State Institution of Medical Sciences named after G.N. Gabrichevsky Rospotrebnadzor under No. 222 and is characterized by the following properties:

1. Морфологические свойства1. Morphological properties

Прямые, крупные, длинные, неподвижные, бесспоровые, грамположительные палочки, располагающиеся в мазке попарно или в виде цепочек по две - четыре клетки.Straight, large, long, motionless, indisputable, gram-positive sticks located in a smear in pairs or in the form of chains of two to four cells.

2. Культуральные свойства2. Cultural properties

Микроаэрофил, оптимальные условия для культивирования - анаэробные. Температура культивирования - 34-40°С. На полужидких средах вырастает в течение 16-24 часов, на агаризованных - 48 часов.Microaerophil, optimal conditions for cultivation are anaerobic. The cultivation temperature is 34-40 ° C. On semi-liquid media grows within 16-24 hours, on agarized - 48 hours.

В среды для культивирования для стабилизации свойств штамма можно дополнительно добавлять источники гистамина, ионов Сu¹⁺, Сu²⁺, Со²⁺, Ni²⁺, глюкозы, галактозы, фруктозы, лактозы, маннозы, фракций казеина или гидролизатов фракций казеина, жидкое масло, которое может быть выбрано из ряда: растительное масло, жир рыб, жир морских млекопитающих, минеральное масло, синтетическое масло или их сочетания.In cultivation media, to stabilize the properties of the strain, you can add sources of histamine, Cu ¹⁺ , Cu ²⁺ , Co ²⁺ , Ni ²⁺ , glucose, galactose, fructose, lactose, mannose, casein fractions or casein fractions hydrolysates, liquid oil which can be selected from among: vegetable oil, fish fat, marine mammalian fat, mineral oil, synthetic oil, or combinations thereof.

Сквашивает молоко с образованием плотного ровного тягучего сгустка.It ferments milk with the formation of a dense, even, viscous clot.

На полужидких средах растет равномерно по всему объему, без зоны аэробиоза. Единичные колонии имеют форму шариков диаметром 1-2 мм. При выращивании в течение 16-24 часов число КОЕ/мл лактобацилл составляет 10⁸-10⁹.On semi-liquid media it grows evenly throughout the volume, without an aerobiotic zone. Single colonies are in the form of balls with a diameter of 1-2 mm. When grown for 16-24 hours, the number of CFU / ml of lactobacilli is 10 ⁸ -10 ⁹ .

На поверхности агаризованной МРС в анаэробных условиях через 24 часа роста образуются полупрозрачные однородные белые, выпуклые, круглые колонии с ровными краями. Диаметр колонии - 2-4 мм. Время культивирования - 24-48 часов.On the surface of agarized MPC under anaerobic conditions, after 24 hours of growth, translucent homogeneous white, convex, round colonies with smooth edges are formed. The diameter of the colony is 2-4 mm. The cultivation time is 24-48 hours.

3. Биохимическая активность3. Biochemical activity

Штамм гомоферментативен. Каталазу не продуцирует. Желатину не разжижает. Ферментирует без образования газа глюкозу, галактозу, маннозу, фруктозу, N-ацетилглюкозамин, лактозу, трегалозу, салицин, замедленно ферментирует арабинозу, ксилозу. Штамм не повышает содержание гистамина в среде культивирования. Продуцирует лектины, связывающие в гликоконъюгатах остатки N-ацетил-D-галактозамина с α-связью (GalNAc-α-), D-маннозы с α-связью (Man-α-) и D-маннозы-6-фосфата с α-связью (Man-6Р-α-). Продуцирует биосурфактанты.The strain is homoenzymatic. Catalase does not produce. It does not dilute gelatin. Fermentation without gas formation of glucose, galactose, mannose, fructose, N-acetylglucosamine, lactose, trehalose, salicin, slow-fermented arabinose, xylose. The strain does not increase the histamine content in the culture medium. It produces lectins that bind in the glycoconjugates the residues of N-acetyl-D-galactosamine with the α-bond (GalNAc-α-), D-mannose with the α-bond (Man-α-) and D-mannose-6-phosphate with the α-bond (Man-6P-α-). Produces biosurfactants.

4. Активность кислотообразования4. The activity of acid formation

В процессе культивирования на производственных средах снижает рН до 3,5-4,5. Значение титруемой кислотности при этом составляет 180°Т, а при выращивании в стерильном молоке через 24 часа - 175°Т.In the process of cultivation in production environments reduces the pH to 3.5-4.5. The value of titratable acidity in this case is 180 ° T, and when grown in sterile milk after 24 hours - 175 ° T.

5. Антагонистическая активность5. Antagonistic activity

Штамм антагонистически активен в отношении тест-культур (Shigella flexneri-2 штамма, Shigella sonnei, энтеропатогенной Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Salmonella enterica серовар typhimurium): зона угнетения роста тест-штаммов должна быть не менее 20 мм.The strain is antagonistically active against test cultures (Shigella flexneri-2 strain, Shigella sonnei, enteropathogenic Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Salmonella enterica serovar typhimurium): the growth inhibition zone of the test strains should be at least 20 mm.

6. Устойчивость к антибиотикам6. Resistance to antibiotics

Штамм высокоустойчив к стрептомицину, устойчив к неомицину, канамицину, гентамицину, промежуточно устойчив к тетрациклину, эритромицину.The strain is highly resistant to streptomycin, resistant to neomycin, kanamycin, gentamicin, intermediate resistant to tetracycline, erythromycin.

7. Содержание гуанина и цитозина в ДНК составляет 36 мол.%.7. The content of guanine and cytosine in DNA is 36 mol%.

8. Генотипирование8. Genotyping

ПЦР-анализ подтвердил принадлежность к виду Lactobacillus acidophilus.PCR analysis confirmed the belonging to the species Lactobacillus acidophilus.

Таким образом, штамм Lactobacillus acidophilus ГРК-08 обладает оригинальным сочетанием свойств, обеспечивающих наличие критериев его противоаллергического действия: уникальной биохимической активностью с особенностями регуляции уровня гистамина, продукции лектинов, биосурфактантов, антагонистической активностью в отношении микроорганизмов, интенсивно продуцирующих гистамин, и устойчивостью к антибиотикам. Поэтому он является перспективной основой вариантов иммунобиологического средства, эффективных при аллергическом заболевании, псевдоаллергическом заболевании без сопутствующей патологии или в сочетании с заболеванием инфекционной этиологии, дисбактериозом кишечника. Также подобраны ингредиенты сред для культивирования, целевые добавки, в сочетании стабилизирующие уникальную биохимическую активность микроорганизмов штамма Lactobacillus acidophilus ГРК-08.Thus, the strain of Lactobacillus acidophilus GRK-08 has an original combination of properties that provide the criteria for its antiallergic action: unique biochemical activity with features of regulation of histamine levels, production of lectins, biosurfactants, antagonistic activity against microorganisms that intensively produce histamine antibiotic resistance, and. Therefore, it is a promising basis for the options of an immunobiological agent effective in allergic diseases, pseudo-allergic diseases without concomitant pathology or in combination with a disease of infectious etiology, intestinal dysbiosis. Also selected are the ingredients of the culture media, target additives, in combination, stabilizing the unique biochemical activity of microorganisms of the strain Lactobacillus acidophilus GRK-08.

Варианты иммунобиологического противоаллергического средства содержат микроорганизмы штамма Lactobacillus acidophilus ГРК-08 в виде их биомассы в среде культивирования в количестве 10⁴-10¹⁰ КОЕ/мл или в виде супернатанта, полученного при культивировании микроорганизмов штамма Lactobacillus acidophilus ГРК-08. Среда культивирования может быть выбрана из ряда: казеиново-дрожжевая среда после культивирования лактобацилл, сквашенное молоко, имеющее жирность 0,5-1,5% и рН 5,0-6,8, сквашенное обезжиренное молоко, имеющее рН 5,0-6,8, сквашенное обезжиренное, выпаренное на 10-20% молоко, имеющее рН 5,0-6,8, гидролизатно-молочная среда после культивирования лактобацилл или их смеси. Заявляемое средство может дополнительно содержать целевые добавки в количестве 0,01-95,0 мас.% и быть выполнено в форме суспензии или крема, или мази, или пасты, или маски. Заявляемое средство может содержать целевые добавки, выбранные из ряда: казеин, желатин, агар, глицерин, яичный желток, яичный белок, пектин, целлюлоза, производные целлюлозы, бентонит, каолин, аэросил, меди сульфат, меди глюконат, хинозол, хитозан, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, настой ромашки, воск эмульсионный, комбижир, ланолин, спермацет, вазелин, церезин, вазелиновое масло, искусственный вазелин, пальмитин, гидрированный жир, переэтирифицированный жир, кондитерский жир, пальмовый олеин, пальмовый стеарин, масло оливковое, масло персиковое, масло подсолнечное, масло касторовое, полиэтиленоксид, нипагин, нипазол, микрокаре РМ5, микрокаре IT или их смеси. Заявляемое средство может быть использовано при профилактике и лечении дефектов кожи, дерматита, аллергического заболевания, псевдоаллергического заболевания без сопутствующей патологии или в сочетании с заболеванием инфекционной этиологии, дисбактериозом кишечника.Variants of an immunobiological anti-allergic agent contain microorganisms of the strain Lactobacillus acidophilus GRK-08 in the form of their biomass in the culture medium in an amount of 10 ⁴ -10 ¹⁰ CFU / ml or in the form of a supernatant obtained by culturing microorganisms of the strain Lactobacillus acidophilus GRK-08. The cultivation medium can be selected from the following series: casein-yeast medium after cultivation of lactobacilli, fermented milk having a fat content of 0.5-1.5% and pH 5.0-6.8, fermented skim milk having a pH of 5.0-6 , 8, fermented skim milk, evaporated by 10-20% milk, having a pH of 5.0-6.8, hydrolyzate-milk medium after cultivation of lactobacilli or a mixture thereof. The inventive tool may additionally contain target additives in an amount of 0.01-95.0 wt.% And be made in the form of a suspension or cream, or ointment, or paste, or mask. The inventive tool may contain targeted additives selected from the series: casein, gelatin, agar, glycerin, egg yolk, egg white, pectin, cellulose, cellulose derivatives, bentonite, kaolin, aerosil, copper sulfate, copper gluconate, chinosol, chitosan, root extract licorice, rosehip extract, chamomile infusion, emulsion wax, combination, lanolin, spermaceti, petrolatum, ceresin, petroleum jelly, artificial petrolatum, palmitin, hydrogenated fat, transesterified fat, confectionery fat, palm olein, palm stearin, olive oil Persic layer, sunflower oil, castor oil, polyethylene oxide, Nipagin, Nipasol, Microcars RM5, IT Microcars or mixtures thereof. The inventive tool can be used in the prevention and treatment of skin defects, dermatitis, allergic diseases, pseudo-allergic diseases without comorbidity or in combination with a disease of infectious etiology, intestinal dysbiosis.

Заявляемые варианты иммунобиологического противоаллергического средства являются новыми и в литературе не описаны.The inventive variants of an immunobiological antiallergic agent are new and are not described in the literature.

Техническим результатом заявляемого изобретения является повышение эффективности противоаллергического действия иммунобиологических средств на основе лактобацилл. Повышение эффективности противоаллергического действия при использовании заявляемого изобретения показано при наличии у пациентов аллергического заболевания, псевдоаллергического заболевания без сопутствующей патологии или в сочетании с заболеванием инфекционной этиологии, дисбактериозом кишечника.The technical result of the claimed invention is to increase the effectiveness of the antiallergic action of immunobiological agents based on lactobacilli. An increase in the effectiveness of the antiallergic effect when using the claimed invention is indicated when patients have an allergic disease, a pseudo-allergic disease without a concomitant pathology, or in combination with a disease of infectious etiology or intestinal dysbiosis.

Сущность изобретения поясняется на следующих примерах, показывающих эффективность противоаллергического действия иммунобиологических средств на основе штамма Lactobacillus acidophilus ГРК-08. При этом приведенные в примерах комбинации ингредиентов вариантов заявляемого средства показывают конкретную реализацию заявляемого изобретения, но не ограничивают объем притязаний формулы заявляемого изобретения.The invention is illustrated by the following examples showing the effectiveness of the antiallergic effects of immunobiological agents based on the strain Lactobacillus acidophilus GRK-08. In this case, the examples of combinations of ingredients of variants of the claimed funds show a specific implementation of the claimed invention, but do not limit the scope of claims of the claims of the claimed invention.

Пример 1. В двух группах больных с аллергической крапивницей, в каждой из которых было по 10 пациентов, проводилось сравнение эффективности противоаллергического действия ацидофильного кисломолочного продукта на основе штамма Lactobacillus acidophilus NK1 (в первой группе пациентов) и варианта заявляемого иммунобиологического средства (во второй группе пациентов), содержащего биомассу микроорганизмов штамма Lactobacillus acidophilus ГРК-08 в среде их культивирования (в сквашенном обезжиренном молоке, имеющем рН 5,5), в количестве 10⁸КОЕ/мл и целевые добавки (меди сульфат и экстракт ромашки) в общем количестве 2,0 мас.%. При этом заявляемое иммунобиологическое средство было выполнено в форме суспензии. При проведении исследования критерии наличия противоаллергического средства чаще регистрировались во второй группе пациентов (у 9 больных, 90% случаев), чем в первой группе (у 6 больных, 60% случаев).Example 1. In two groups of patients with allergic urticaria, in each of which there were 10 patients, the effectiveness of the antiallergic effect of the acidophilic fermented milk product based on the Lactobacillus acidophilus NK1 strain (in the first group of patients) and the variant of the claimed immunobiological agent (in the second group of patients) was compared. ) containing the biomass of microorganisms of the strain Lactobacillus acidophilus GRK-08 in the medium of their cultivation (in skimmed skim milk, having a pH of 5.5), in an amount of 10 ⁸ CFU / ml and target additives (copper su lfat and chamomile extract) in a total amount of 2.0 wt.%. In this case, the claimed immunobiological agent was made in the form of a suspension. During the study, the criteria for the presence of antiallergic agents were more often recorded in the second group of patients (in 9 patients, 90% of cases) than in the first group (in 6 patients, 60% of cases).

Пример 2. Пациент Л., 34 года. Диагноз: аллергический дерматит, вызванный съеденной пищей, и дисбактериоз кишечника с высевом Staphylococcus aureus. При лечении пациента использовалось иммунобиологическое противоаллергическое средство, содержащее биомассу микроорганизмов штамма Lactobacillus acidophilus ГРК-08 в среде их культивирования (казеиново-дрожжевая среда после культивирования лактобацилл) в количестве 10⁶ КОЕ/мл, которое назначалось перорально 3 раза в сутки, в течение 14 дней по 5×10⁷ КОЕ Lactobacillus acidophilus ГРК-08. В результате лечения было выявлено наличие критериев противоаллергического и противоинфекционного действия средства: исчезновения зуда, разрешения высыпаний на коже, элиминации Staphylococcus aureus и коррекции микробиоценоза кишечника.Example 2. Patient L., 34 years. Diagnosis: allergic dermatitis caused by food eaten, and intestinal dysbiosis with inoculation of Staphylococcus aureus. The patient was treated with an immunobiological antiallergic agent containing the biomass of microorganisms of the strain Lactobacillus acidophilus GRK-08 in the medium of their cultivation (casein-yeast medium after cultivation of lactobacilli) in the amount of 10 ⁶ CFU / ml, which was administered orally 3 times a day for 14 days 5 × 10 ⁷ CFU of Lactobacillus acidophilus GRK-08. As a result of treatment, the presence of criteria for anti-allergic and anti-infective action of the agent was revealed: the disappearance of itching, the resolution of skin rashes, the elimination of Staphylococcus aureus and the correction of intestinal microbiocenosis.

Пример 3. Пациент Ф., 30 лет. Диагноз: аллергический дерматит, вызванный съеденной пищей, и дисбактериоз кишечника с высевом Staphylococcus aureus. При лечении пациента использовалось иммунобиологическое противоаллергическое средство, содержащее биомассу микроорганизмов штамма Lactobacillus acidophilus ГРК-08 в среде их культивирования (сквашенное обезжиренное молоко, имеющее рН 5,0) в количестве 10⁸ КОЕ/мл, которое назначалось перорально 3 раза в сутки, в течение 14 дней по 5×10⁷ КОЕ Lactobacillus acidophilus ГРК-08. В результате лечения было выявлено наличие критериев противоаллергического и противоинфекционного действия средства: исчезновения зуда, разрешения высыпаний на коже, элиминации Staphylococcus aureus и коррекции микробиоценоза кишечника.Example 3. Patient F., 30 years old. Diagnosis: allergic dermatitis caused by food eaten, and intestinal dysbiosis with inoculation of Staphylococcus aureus. The patient was treated with an immunobiological antiallergic agent containing the biomass of microorganisms of the strain Lactobacillus acidophilus GRK-08 in the medium of their cultivation (fermented skim milk, having a pH of 5.0) in an amount of 10 ⁸ CFU / ml, which was administered orally 3 times a day, for 14 days for 5 × 10 ⁷ CFU of Lactobacillus acidophilus GRK-08. As a result of treatment, the presence of criteria for anti-allergic and anti-infective action of the agent was revealed: the disappearance of itching, the resolution of skin rashes, the elimination of Staphylococcus aureus and the correction of intestinal microbiocenosis.

Пример 4. Пациент Т., 26 лет. Диагноз: аллергический дерматит, вызванный съеденной пищей, и пиодермия с высевом Staphylococcus aureus. При лечении пациента использовались иммунобиологическое противоаллергическое средство, содержащее биомассу микроорганизмов штамма Lactobacillus acidophilus ГРК-08 в среде их культивирования (казеиново-дрожжевая среда после культивирования лактобацилл) в количестве 10¹⁰КОЕ/мл и целевые добавки (меди сульфат) в количестве 0,01 мас.% и выполненное в форме суспензии, которое назначалось перорально 2 раза в сутки, в течение 14 дней по 5×10⁷ КОЕ Lactobacillus acidophilus ГРК-08, а также иммунобиологическое противоаллергическое средство, содержащее супернатант, полученный при культивировании микроорганизмов штамма Lactobacillus acidophilus ГРК-08 в среде их культивирования (казеиново-дрожжевая среда после культивирования лактобацилл), и целевые добавки (вода, глицерин, хитозан) в общем количестве 60,0 мас.% и выполненное в форме суспензии, которое назначалось наружно на поверхность высыпаний 2 раза в сутки в течение 6 дней. В результате лечения было выявлено наличие критериев противоаллергического и противоинфекционного действия средства: исчезновения зуда, разрешения высыпаний на коже и элиминации Staphylococcus aureus.Example 4. Patient T., 26 years old. Diagnosis: allergic dermatitis caused by food eaten, and pyoderma with inoculation of Staphylococcus aureus. The patient was treated with an immunobiological anti-allergic agent containing the biomass of microorganisms of the strain Lactobacillus acidophilus GRK-08 in the medium of their cultivation (casein-yeast medium after cultivation of lactobacilli) in an amount of 10 ¹⁰ CFU / ml and target additives (copper sulfate) in an amount of 0.01 wt. .% and formed in the form of a suspension, which was orally administered 2 times a day during 14 days at 5 × ¹⁰ July CFU Lactobacillus acidophilus GRK-08 and immunobiological antiallergic agent containing supernatant obtained during the cultivation of microorganisms of the strain Lactobacillus acidophilus GRK-08 in the medium of their cultivation (casein-yeast medium after cultivation of lactobacilli), and target additives (water, glycerin, chitosan) in a total amount of 60.0 wt.% and made in the form of a suspension, which was prescribed externally to the surface of the rashes 2 times a day for 6 days. As a result of treatment, the presence of criteria for anti-allergic and anti-infectious action of the agent was revealed: the disappearance of itching, the resolution of skin rashes and the elimination of Staphylococcus aureus.

Пример 5. Пациент О., 28 лет. Диагноз: острая крапивница (псевдоаллергическая), хронический тонзиллит в стадии обострения, носительство Staphylococcus aureus. При лечении пациента использовалось иммунобиологическое противоаллергическое средство, содержащее биомассу микроорганизмов штамма Lactobacillus acidophilus ГРК-08 в среде культивирования (казеиново-дрожжевая среда после культивирования лактобацилл) в количестве 10¹⁰ КОЕ/мл и целевые добавки (меди сульфат, экстракт корня солодки, экстракт шиповника и настой ромашки) в общем количестве 95,0 мас.% и выполненное в форме суспензии, которое назначалось перорально 3 раза в сутки, в течение 10 дней по 5×10⁷ КОЕ Lactobacillus acidophilus ГРК-08. В результате лечения было выявлено наличие критериев противоаллергического и противоинфекционного действия средства: полного разрешения уртикарий, отсутствия свежих высыпаний на коже, элиминации Staphylococcus aureus, купирования обострения хронического тонзиллита в течение 3 дней (предыдущие обострения хронического тонзиллита у пациента продолжались в течение 7-10 дней).Example 5. Patient O., 28 years old. Diagnosis: acute urticaria (pseudo-allergic), chronic tonsillitis in the acute stage, carriage of Staphylococcus aureus. The patient was treated with an immunobiological antiallergic agent containing the biomass of microorganisms of the strain Lactobacillus acidophilus GRK-08 in a cultivation medium (casein-yeast medium after cultivation of lactobacilli) in an amount of 10 ¹⁰ CFU / ml and target additives (copper sulfate, licorice root extract and thorns extract chamomile infusion) in a total amount of 95.0 wt.% and made in the form of a suspension, which was administered orally 3 times a day, for 10 days, 5 × 10 ⁷ CFU of Lactobacillus acidophilus GRK-08. As a result of treatment, the presence of criteria for anti-allergic and anti-infective action of the agent was revealed: full resolution of urticaria, lack of fresh skin rashes, elimination of Staphylococcus aureus, relief of exacerbation of chronic tonsillitis within 3 days (previous exacerbations of chronic tonsillitis in the patient lasted for 7-10 days) .

Claims

1. Иммунобиологическое противоаллергическое средство, использующееся при профилактике и лечении дефектов кожи, дерматита, аллергического заболевания, псевдоаллергического заболевания без сопутствующей патологии или в сочетании с заболеванием инфекционной этиологии, дисбактериозом кишечника, характеризующееся тем, что оно содержит биомассу микроорганизмов штамма Lactobacillus acidophilus, коллекционный № 222, депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры (ГКНМ) ФГУН МНИИЭМ имени Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора, в среде их культивирования в количестве 10⁴-10¹⁰ КОЕ/мл.1. Immunobiological anti-allergic agent used in the prevention and treatment of skin defects, dermatitis, allergic diseases, pseudo-allergic diseases without comorbidity or in combination with infectious etiology diseases, intestinal dysbiosis, characterized in that it contains the biomass of microorganisms of strain Lactobacillus acidophilus, 22 , deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora (GKNM) Federal State Budget Institution MNIIEM named after G.N.Gabrichevsky Rospotrebnadzo RA, in the environment of their cultivation in the amount of 10 ⁴ -10 ¹⁰ CFU / ml.

2. Иммунобиологическое противоаллергическое средство, использующееся при профилактике и лечении дефектов кожи, дерматита, аллергического заболевания, псевдоаллергического заболевания без сопутствующей патологии или в сочетании с заболеванием инфекционной этиологии, дисбактериозом кишечника, характеризующееся тем, что оно содержит биомассу микроорганизмов штамма Lactobacillus acidophilus, коллекционный № 222, депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры (ГКНМ) ФГУН МНИИЭМ имени Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора, в среде их культивирования в количестве 10⁴-10¹⁰ КОЕ/мл и целевые добавки в количестве 0,01-95,0 мас.%, при этом оно выполнено в форме суспензии, или крема, или мази, или пасты, или маски.2. An immunobiological anti-allergic agent used in the prevention and treatment of skin defects, dermatitis, allergic diseases, pseudo-allergic diseases without comorbidity or in combination with infectious etiology diseases, intestinal dysbiosis, characterized in that it contains the biomass of microorganisms of strain Lactobacillus acidophilus, 22 , deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora (GKNM) FGUN MNIIEM named after G.N. Gabrichev Rospotrebnadzor, in the environment of their cultivation in the amount of 10 ⁴ -10 ¹⁰ CFU / ml and target additives in the amount of 0.01-95.0 wt.%, While it is made in the form of a suspension, or cream, or ointment, or paste, or masks.

3. Иммунобиологическое противоаллергическое средство, использующееся при профилактике и лечении дефектов кожи, дерматита, аллергического заболевания, псевдоаллергического заболевания без сопутствующей патологии или в сочетании с заболеванием инфекционной этиологии, дисбактериозом кишечника, характеризующееся тем, что оно содержит супернатант, полученный при культивировании микроорганизмов штамма Lactobacillus acidophilus, коллекционный № 222, депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры (ГКНМ) ФГУН МНИИЭМ имени Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора, в среде их культивирования и целевые добавки, при этом оно выполнено в форме суспензии, или крема, или мази, или пасты, или маски при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Супернатант 5,0-99,99 Целевые добавки Остальное

3. An immunobiological anti-allergic agent used in the prevention and treatment of skin defects, dermatitis, allergic diseases, pseudo-allergic diseases without comorbidity or in combination with infectious etiology diseases, intestinal dysbiosis, characterized in that it contains a supernatant obtained from the cultivation of microorganisms of the Lactobacillus acid strain , collection number 222, deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora (GKNM) FGUN MNIIEM nor G. N. Gabrichevsky Rospotrebnadzor, in the environment of their cultivation and target additives, while it is made in the form of a suspension, or cream, or ointment, or paste, or mask in the following ratio of components, wt.%:
Supernatant 5.0-99.99 Targeted Supplements Rest

4. Иммунобиологическое противоаллергическое средство по п.1, или 2, или 3, отличающееся тем, что оно содержит среду культивирования, выбранную из ряда: казеиново-дрожжевая среда после культивирования лактобацилл, сквашенное молоко, имеющее жирность 0,5-1,5% и рН 5,0-6,8, сквашенное обезжиренное молоко, имеющее рН 5,0-6,8, сквашенное обезжиренное, выпаренное на 10-20% молоко, имеющее рН 5,0-6,8, гидролизатно-молочная среда после культивирования лактобацилл или их смеси.4. The immunobiological anti-allergic agent according to claim 1, or 2, or 3, characterized in that it contains a culture medium selected from the series: casein-yeast medium after cultivation of lactobacilli, skim milk with a fat content of 0.5-1.5% and pH 5.0-6.8, skimmed skim milk having a pH of 5.0-6.8, skimmed skim milk, evaporated by 10-20% milk, having a pH of 5.0-6.8, hydrolyzed milk environment after cultivation of lactobacilli or mixtures thereof.

5. Иммунобиологическое противоаллергическое средство по п.2 или 3, отличающееся тем, что оно содержит целевые добавки, выбранные из ряда:
казеин, желатин, агар, глицерин, яичный желток, яичный белок, пектин, целлюлоза, производные целлюлозы, бентонит, каолин, аэросил, меди сульфат, меди глюконат, хинозол, хитозан, вода, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, настой ромашки, воск эмульсионный, комбижир, ланолин, спермацет, вазелин, церезин, вазелиновое масло, искусственный вазелин, пальмитин, гидрированный жир, переэтирифицированный жир, кондитерский жир, пальмовый олеин, пальмовый стеарин, масло оливковое, масло персиковое, масло подсолнечное, масло касторовое, полиэтиленоксид, нипагин, нипазол, микрокаре РМ5, микрокаре IT или их смеси.5. The immunobiological antiallergic agent according to claim 2 or 3, characterized in that it contains targeted additives selected from the range:
casein, gelatin, agar, glycerin, egg yolk, egg white, pectin, cellulose, cellulose derivatives, bentonite, kaolin, aerosil, copper sulfate, copper gluconate, quinosol, chitosan, water, licorice root extract, rosehip extract, chamomile extract, chamomile wax emulsion, combination, lanolin, spermaceti, petrolatum, ceresin, liquid paraffin, artificial petroleum jelly, palmitin, hydrogenated fat, transesterified fat, confectionery fat, palm olein, palm stearin, olive oil, peach oil, sunflower oil, castor oil, castor oil, castor oil seed, Nipagin, Nipasol, Microcars RM5, IT Microcars or mixtures thereof.

6. Штамм Lactobacillus acidophilus, коллекционный № 222, депонирован в Государственной коллекции микроорганизмов нормальной микрофлоры (ГКНМ) ФГУН МНИИЭМ имени Г.Н.Габричевского Роспотребнадзора, используемый при приготовлении иммунобиологического противоаллергического средства. 6. The strain Lactobacillus acidophilus, collection No. 222, was deposited in the State collection of microorganisms of normal microflora (GKNM) of the Federal State Institution of Medicine and Science named after G.N.