RU2450836C1 - Combined ointment composition for reducing intensity of local skin hyperpigmentation - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine, pharmaceutics.

SUBSTANCE: invention refers to pharmaceutics and medicine, and concerns a combined ointment composition for reducing the intensity of local skin hyperpigmentation containing hydroquinone, 13-cys-retinoic acid (isotertinoine), antioxidants, emulsion wax, vaseline oil, glycerine, ethanol and water.

EFFECT: preparing the combined ointment compositions for reducing the intensity of local skin hyperpigmentation.

1 dwg, 5 tbl, 1 ex

Description

Изобретение относится к медицине и касается создания мазевой композиции, содержащей две активные фармацевтические субстанции с дерматотропным отбеливающим эффектом, предназначенной для ослабления интенсивности очаговых гиперпигментаций кожи - первичных (веснушки, старческие пигментные пятна, актиническая меланодермия и др.) и вторичных, возникающих после воспалительных поражений кожи, таких как: дерматиты (в том числе фотодерматиты), ожоги, пузырные дерматозы, псориаз, атопический дерматит и нейродермит, васкулиты, угри, склеродермия, вторичные сифилиды, фурункулы, чесотка, грибковые заболевания.The invention relates to medicine and relates to the creation of an ointment composition containing two active pharmaceutical substances with a dermatotropic whitening effect, intended to attenuate the intensity of focal hyperpigmentation of the skin - primary (freckles, senile age spots, actinic melasma, etc.) and secondary arising after inflammatory skin lesions such as: dermatitis (including photodermatitis), burns, cystic dermatosis, psoriasis, atopic dermatitis and neurodermatitis, vasculitis, acne, scleroderma, secondary syphilis, boils, scabies, fungal diseases.

Известно, что пигментация кожи обусловлена пигментом меланином, образующимся в меланоцитах кожи из аминокислоты тирозина под действием ключевого фермента синтеза меланина - тирозиназы [1]. Гранулы пигмента (меланосомы, являющиеся специальными клеточными органеллами) передаются окружающим меланоцит кератиноцитам; транспорт меланосом к кератиноцитам является важной, критической, ступенью в пигментации кожи [1]. На представительство меланинсодержащих клеток в коже (меланоцитов и кератиноцитов), функциональную активность меланоцитов, эффективность передачи меланосом в кератиноциты и другие факторы, определяющие интенсивность пигментации кожи, могут влиять инсоляция, кожные и внутренние заболевания, травмы кожи и косметические вмешательства, химические (профессиональные и бытовые), инфекционные, токсические воздействия и др. Таким образом, пигментация кожи (чаще очаговая) может достигать значительной степени, становясь причиной возникновения проблем не только медицинского, но и косметического и в связи с этим психологического характера. Для разрешения этой проблемы издавна предпринимались поиски средств, способных осветлить кожу.It is known that skin pigmentation is caused by the pigment melanin, which is formed in skin melanocytes from the tyrosine amino acid under the action of a key enzyme in the synthesis of melanin - tyrosinase [1]. Pigment granules (melanosomes, which are special cellular organelles) are transmitted to keratinocytes surrounding melanocytes; transport of melanosomes to keratinocytes is an important, critical step in skin pigmentation [1]. The representation of melanin-containing cells in the skin (melanocytes and keratinocytes), the functional activity of melanocytes, the efficiency of transfer of melanosomes to keratinocytes and other factors determining the intensity of skin pigmentation can be affected by insolation, skin and internal diseases, skin injuries and cosmetic interventions, chemical (professional and domestic ), infectious, toxic effects, etc. Thus, skin pigmentation (often focal) can reach a significant degree, causing problems not only medical, but also cosmetic and in this regard psychological in nature. To solve this problem, a search has been undertaken for a long time for agents that can lighten the skin.

Основными путями уменьшения пигментации кожи являются снижение продукции меланина и отшелушивание рогового слоя. В качестве одного из эффективных дерматотропных отбеливающих соединений известен гидрохинон (1,4-бензендиол). Обнаруженное более 50 лет назад свойство гидрохинона (ГХ) уменьшать пигментацию кожи обусловлено подавлением образования меланина за счет блокирования окисления тирозина до 3,4-дигидроксифенилаланина (ДОФА) и, возможно, ингибирования синтеза ДНК и РНК в меланоцитах [2]. В связи с этим препараты, содержащие ГХ (до 10%), нашли свое применение в дерматологии и косметологии. Позднее обнаружили, что комбинирование в составе одной композиции для наружного применения ГХ с одним из ретиноидов (синтетических аналогов витамина А) - полностью трансретиноевой кислотой (международное непатентованное название - третиноин) - в значительной степени усиливает отбеливающий эффект.The main ways to reduce skin pigmentation are to reduce the production of melanin and exfoliate the stratum corneum. As one of the effective dermatotropic whitening compounds, hydroquinone (1,4-benzenediol) is known. The property of hydroquinone (GC) to reduce skin pigmentation, discovered more than 50 years ago, is due to the suppression of the formation of melanin by blocking the oxidation of tyrosine to 3,4-dihydroxyphenylalanine (DOPA) and, possibly, the inhibition of DNA and RNA synthesis in melanocytes [2]. In this regard, preparations containing GC (up to 10%) have found their application in dermatology and cosmetology. Later, it was found that combining GC with one of the retinoids (synthetic analogs of vitamin A) in one composition for external use - completely transretinoic acid (the international non-proprietary name is tretinoin) - significantly enhances the whitening effect.

Так, например, известны отбеливающие композиции, содержащие 2-5% гидрохинона, 0,05-0,1% ретиноевой кислоты (третиноина) и около 0,1% дексаметазона [3]. Композиции содержит кортикостероиды, длительное использование которых наружно нежелательно из-за множества реакций (истончение кожи, возможность возникновения повышенного оволосения, угри и др.).So, for example, bleaching compositions containing 2-5% hydroquinone, 0.05-0.1% retinoic acid (tretinoin) and about 0.1% dexamethasone are known [3]. The composition contains corticosteroids, prolonged use of which is apparently undesirable due to a variety of reactions (thinning of the skin, the possibility of increased hair growth, acne, etc.).

Известен также депигментирующий препарат, содержащий ретиноид адапален и гидрохинон в физиологическом носителе [4].Also known depigmenting drug containing retinoid adapalene and hydroquinone in a physiological carrier [4].

Наиболее близким по медицинским показаниям и технической сущности к заявляемому составу является препарат, содержащий гидрохинон, ретиноевую кислоту (третиноин) и ацетонид флуоцинолона [5].Closest to the medical indications and technical nature of the claimed composition is a preparation containing hydroquinone, retinoic acid (tretinoin) and fluocinolone acetonide [5].

Принципиальным отличием заявляемой композиции является использование в ее составе в качестве ретиноида 13-цис-ретиноевой кислоты (международное непатентованное название - изотретиноин). Использование в отбеливающем наружном средстве 13-цис-ретиноевой кислоты (13цРК) предпочтительнее вследствие ее меньшей токсичности. Так, в литературе имеются сведения о том, что она обладает меньшими местно-раздражающими свойствами, чем полностью трансретиноевая кислота, и меньшими (в 4-8 раз) тератогенными эффектами [6].The fundamental difference between the claimed composition is the use in its composition as a retinoid of 13-cis-retinoic acid (the international non-proprietary name is isotretinoin). The use of 13-cis-retinoic acid (13cRK) in the external bleaching agent is preferable due to its lower toxicity. So, in the literature there is evidence that it has less locally irritating properties than fully transretinoic acid, and less (4-8 times) teratogenic effects [6].

В соответствии с изобретением описывается комбинированная мазевая композиция, уменьшающая или устраняющая локальные гиперпигментации кожи, содержащая ретиноид-13-цис-ретиноевую кислоту (изотретиноин) и гидрохинон, в качестве жировой фазы мазевой основы - вазелиновое масло, в качестве эмульгатора - эмульсионный воск, а также спирт этиловый, глицерин, воду и антиоксиданты при следующем соотношении компонентов, мас.%:In accordance with the invention, a combination ointment composition is described that reduces or eliminates local hyperpigmentation of the skin, containing retinoid-13-cis-retinoic acid (isotretinoin) and hydroquinone, liquid paraffin, vaseline oil, emulsifying wax as an emulsifier, and ethyl alcohol, glycerin, water and antioxidants in the following ratio of components, wt.%:

ГидрохинонHydroquinone 1,0-2,51.0-2.5 13-цис-ретиноевая кислота13-cis retinoic acid 0,05-0,10.05-0.1 Пиросульфит натрияSodium pyrosulfite 0,05-0,50.05-0.5 БутилгидрокситолуолButylhydroxytoluene 0,01-0,10.01-0.1 БутилгидроксианизолButylhydroxyanisole 0,01-0,10.01-0.1 Воск эмульсионныйEmulsion Wax 4,0-10,04.0-10.0 Масло вазелиновоеVaseline oil 2,0-10,02.0-10.0 ГлицеринGlycerol 5,0-15,05.0-15.0 Этанол (спирт этиловый) 95%Ethanol (ethyl alcohol) 95% 5,0-15,05.0-15.0 Вода очищеннаяPurified water до 100,0up to 100.0

Технология приготовления мазиOintment Technology

1. Необходимое количество воды помещают в реактор и нагревают до температуры 80°С. Затем в воду высыпают навеску пиросульфита натрия и растворяют его. После растворения пиросульфита натрия в воду загружают навеску гидрохинона и растворяют его.1. The required amount of water is placed in a reactor and heated to a temperature of 80 ° C. Then a portion of sodium pyrosulfite is poured into the water and dissolved. After dissolution of sodium pyrosulfite, a portion of hydroquinone is loaded into water and dissolved.

2. Параллельно в емкость с отвешенными эмульсионным воском и вазелиновым маслом добавляют навески предварительно измельченных бутилгидрокситолуола (БОТ) и бутилгидроксианизола (БОА) и полностью расплавляют их, нагревая при температуре 75-80°С. После растворения БОТ и БОА в смесь добавляют порошок 13-цис-ретиноевой кислоты и тщательно ее перемешивают с помощью рамной мешалки.2. At the same time, weighed portions of pre-ground butyl hydroxytoluene (BOT) and butyl hydroxyanisole (BOA) are added to a container with weighed emulsion wax and liquid paraffin and completely melt them by heating at a temperature of 75-80 ° С. After the BOT and BOA are dissolved, 13-cis-retinoic acid powder is added to the mixture and it is thoroughly mixed using a frame mixer.

3. В разогретую воду (не ниже 80°С), в которой растворены пиросульфит натрия и гидрохинон, опускают головку гомогенизатора, включают его (8-10 тыс.об/мин) и при активном перемешивании смеси медленно, тонкой струйкой добавляют расплав жировых компонентов мази с БОТ, БОА и 13-цис-ретиноевой кислотой. После смешивания всех компонентов препарата засекают 2-5 минут [в зависимости от объема изготавливаемой мази (от 200 до 1000 г)] и окончательно гомогенизируют мазь. Через 2-5 минут в реактор добавляют смесь этанола и глицерина и дополнительно перемешивают в течение 2 минут.3. In the heated water (not lower than 80 ° C), in which sodium pyrosulfite and hydroquinone are dissolved, lower the head of the homogenizer, turn it on (8-10 thousand rpm) and with active stirring of the mixture slowly add a melt of fat components with a thin stream ointments with BOT, BOA and 13-cis-retinoic acid. After mixing all the components of the preparation, they are timed for 2-5 minutes [depending on the volume of the ointment made (from 200 to 1000 g)] and the ointment is finally homogenized. After 2-5 minutes, a mixture of ethanol and glycerol is added to the reactor and further stirred for 2 minutes.

4. В связи с тем, что мазь содержит неустойчивые ингредиенты (гидрохинон и 13-цис-ретиноевая кислота), разрушение которых усиливается при повышенных температурах, полученную мазь следует принудительно охладить. После охлаждения мази до 35-40°С ее передают на участок фасовки.4. Due to the fact that the ointment contains unstable ingredients (hydroquinone and 13-cis-retinoic acid), the destruction of which intensifies at elevated temperatures, the resulting ointment should be forced to cool. After cooling the ointment to 35-40 ° C, it is transferred to the packaging site.

Мазь должна храниться в сухом месте при температуре от 2 до 8°С. Замораживание не допускается.The ointment should be stored in a dry place at a temperature of 2 to 8 ° C. Freezing is not allowed.

Примеры изготовления конкретных композицийExamples of the manufacture of specific compositions

Пример 1.Example 1

В реактор 1 отмеривают 64,55 л очищенной воды, нагревают ее до температуры 70°С. Включают двигатель рамной мешалки и добавляют последовательно 0,2 кг пиросульфита натрия и 1 кг гидрохинона. Перемешивают до растворения при вращении рамной мешалки.64.55 L of purified water is measured in the reactor 1, it is heated to a temperature of 70 ° C. The engine of the frame mixer is turned on and 0.2 kg of sodium pyrosulfite and 1 kg of hydroquinone are added sequentially. Stir until dissolved by rotating the frame stirrer.

В реактор 2 отвешивают 8 кг эмульсионного воска, 6 кг вазелинового масла, по 0,05 кг бутилгидрокситолуола и бутилгидроксианизола и расплавляют смесь при температуре 78-80°С. В последнюю очередь в разогретую смесь добавляют 0,05 кг 13-цис-ретиноевой кислоты. Перемешивают до полного растворения ингредиентов.8 kg of emulsion wax, 6 kg of liquid paraffin, 0.05 kg of butylhydroxytoluene and butylhydroxyanisole are weighed into reactor 2, and the mixture is melted at a temperature of 78-80 ° C. Lastly, 0.05 kg of 13-cis-retinoic acid is added to the heated mixture. Stir until the ingredients are completely dissolved.

С помощью роторно-пульсационного аппарата проточного типа смешивают компоненты двух реакторов до получения мази, в которую постепенно добавляют смесь 10 кг этилового спирта и 10 кг глицерина. В дальнейшем мазь гомогенизируют, охлаждают до комнатной температуры и фасуют в алюминиевые тубы.Using a flow-type rotary pulsation apparatus, the components of the two reactors are mixed until an ointment is obtained, into which a mixture of 10 kg of ethyl alcohol and 10 kg of glycerol is gradually added. Subsequently, the ointment is homogenized, cooled to room temperature and Packed in aluminum tubes.

Аналогично получены все мази, состав которых приведен в таблице 1.Similarly received all ointments, the composition of which is shown in table 1.

Таблица 1Table 1 Составы отбеливающей мазиBleaching Ointment Formulations Наименование компонентовName of components Количество компонента в примере, %The number of components in the example,% 1one 22 33 4four 55 ГидрохинонHydroquinone 1,01,0 2,02.0 2,52.5 1,01,0 2,02.0 13-цис-ретиноевая кислота13-cis retinoic acid 0,050.05 0,050.05 0,050.05 0,10.1 0,10.1 Пиросульфит натрияSodium pyrosulfite 0,20.2 0,20.2 0,20.2 0,20.2 0,20.2 БутилгидрокситолуолButylhydroxytoluene 0,050.05 0,050.05 0,050.05 0,050.05 0,050.05 БутилгидроксианизолButylhydroxyanisole 0,050.05 0,050.05 0,050.05 0,050.05 0,050.05 Воск эмульсионныйEmulsion Wax 8,08.0 8,08.0 8,08.0 8,08.0 8,08.0 Масло вазелиновоеVaseline oil 6,06.0 6,06.0 6,06.0 6,06.0 6,06.0 ГлицеринGlycerol 1010 1010 1010 1010 1010 Этанол 95%Ethanol 95% 1010 1010 1010 1010 1010 Вода очищеннаяPurified water до 100up to 100 до 100up to 100 до 100up to 100 до 100up to 100 до 100up to 100

Доклинические исследованияPreclinical Studies

Исследования показали, что заявляемый препарат обладает специфической фармакологической дерматотропной активностью. Оценка осветляющего эффекта депигментирующих средств представляет определенные трудности, проводится, в основном, визуально и позволяет характеризовать отбеливающую активность таких препаратов, как «высокую» или «низкую». В настоящей заявке представлены результаты исследований, позволяющих оценить депигментирующий эффект объективно, с применением методов доказательной медицины, на основе оригинальной методики подсчета общей площади пигментных гранул в эпидермисе в пересчете на поле зрения микроскопа [7].Studies have shown that the claimed drug has a specific pharmacological dermatotropic activity. Evaluation of the brightening effect of depigmenting agents presents certain difficulties; it is carried out mainly visually and allows one to characterize the whitening activity of such drugs as “high” or “low”. This application presents the results of studies that allow you to evaluate the depigmenting effect objectively, using evidence-based medicine methods, based on the original methodology for calculating the total area of pigment granules in the epidermis in terms of the microscope field of view [7].

Цель исследования, оценка специфической фармакологической активности снижающих пигментацию кожи мазевых композиций.The purpose of the study, the assessment of the specific pharmacological activity of ointment compositions that reduce skin pigmentation.

Материалы и методыMaterials and methods

Эксперимент 1.Experiment 1.

Работа выполнена на беспородных морских свинках обоих полов с черными ушами с массой тела 250-300 г и мышах популяции C57BL/6. На наружную сторону обоих ушек и на лишенную волосяного покрова межлопаточную область спины морских свинок, а также на хвост мышей ежедневно в течение 14 суток наносили различные варианты депигментирующих мазей в дозе 0,5 г/сут/жив. Животных каждого вида разделили на 4 группы -3 экспериментальных (в зависимости от состава препарата) и 1 контрольную (табл.2).The work was performed on outbred guinea pigs of both sexes with black ears with a body weight of 250-300 g and mice of the C57BL / 6 population. On the outside of both ears and on the hairless interscapular region of the back of guinea pigs, as well as on the tail of mice, various variants of depigmenting ointments were applied daily for 14 days at a dose of 0.5 g / day / live. Animals of each species were divided into 4 groups — 3 experimental (depending on the composition of the drug) and 1 control (Table 2).

Таблица 2table 2 Эксперимент 1. Распределение животных на группыExperiment 1. The distribution of animals into groups №№ группNo. of groups Группы животныхGroups of animals Пол животныхAnimal sex Кол-во животных в группеThe number of animals in the group Доза в г/жив.Dose in g / alive. Морские свинкиGuinea pigs 1one Интактный контрольIntact control самкиfemales 66 -- самцыmales 66 22 1%ГХ1% GC самкиfemales 66 0,50.5 самцыmales 66 33 0,1% 13цРК0.1% 13tsRK самкиfemales 66 0,50.5 самцыmales 66 4four 1%ГХ+0,1%13цРК (по примеру 4)1% GC + 0.1% 13cRK (as in example 4) самкиfemales 66 0,50.5 самцыmales 66 МышиMice 1one Интактный контрольIntact control самкиfemales 66 -- самцыmales 66 22 1%ГХ1% GC самкиfemales 66 0,50.5 самцыmales 66 33 0,1% 13цРК0.1% 13tsRK самкиfemales 66 0,50.5 самцыmales 66 4four 1% ГХ+0,1% 13цРК (по примеру 4)1% GC + 0.1% 13cRK (as in example 4) самкиfemales 66 0,50.5 самцыmales 66

Эксперимент 2.Experiment 2.

Работа выполнена на морских свинках обоих полов с темными ушками с массой тела 250-300 г.На кожу наружной стороны обоих ушек ежедневно в течение 14 суток наносили различные составы предлагаемой комбинированной мазевой композиции в дозе 0,25 г/жив./сут. Животных разделили на 4 группы - 3 экспериментальные (в зависимости от концентраций субстанций в препарате) и 1 контрольную (табл.3).The work was performed on guinea pigs of both sexes with dark ears with a body weight of 250-300 g. Various formulations of the proposed combined ointment composition at a dose of 0.25 g / live / day were applied to the skin of the outer side of both ears daily for 14 days. The animals were divided into 4 groups - 3 experimental (depending on the concentration of substances in the preparation) and 1 control (Table 3).

Таблица 3Table 3 Эксперимент 2. Распределение животных на группыExperiment 2. The distribution of animals into groups №№ группNo. of groups Группы животныхGroups of animals Пол животныхAnimal sex Кол-во животных в группеThe number of animals in the group Доза в г/жив.Dose in g / alive. 1one Интактный контрольIntact control самкиfemales 55 -- самцыmales 55 4four 1% ГХ+0,05% 13цРК (по примеру 1)1% GC + 0.05% 13cRK (as in Example 1) самкиfemales 55 0,250.25 самцыmales 55 55 2% ГХ+0,05% 13цРК (по примеру 2)2% GC + 0.05% 13cRK (as in example 2) самкиfemales 55 0,250.25 самцыmales 55 66 2,5% ГХ+0,05% 13цРК (по примеру 3)2.5% GC + 0.05% 13cRC (according to example 3) самкиfemales 55 0.250.25 самцыmales 55

Содержание животных и выведение их из эксперимента осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу МЗ СССР от 12.08.1977 г. №755). Взятие участка кожи из зоны аппликаций препарата производили через сутки после окончания нанесения исследуемых вариантов депигментирующих мазей. Фиксацию взятых фрагментов кожи проводили в 10% растворе формалина. Под микроскопом Axiostar 2 (Zeiss) изучали срезы, окрашенные гематоксилином и эозином, и неокрашенные срезы, т.е. заключенные в канадский бальзам сразу после депарафинирования.Keeping animals and removing them from the experiment was carried out in accordance with the "Rules for the work using experimental animals" (Appendix to the order of the Ministry of Health of the USSR dated 12.08.1977, No. 755). The skin area was taken from the application zone of the preparation a day after the end of the application of the studied variants of depigmenting ointments. The fixation of skin fragments was carried out in a 10% formalin solution. Under an Axiostar 2 microscope (Zeiss), hematoxylin and eosin stained sections and unpainted sections, i.e. prisoners in canadian balm immediately after dewaxing.

Морфометрическому исследованию подвергались неокрашенные гистологические препараты. Измерения проводили на пигментированных участках эпидермиса, в которых все слои содержали пигмент. С помощью цифрового микроскопического комплекса «МИКМЕД-2-1600-3» (Россия) и аппаратно-программного комплекса «ДиаМорф» (Россия) подсчитывали общую площадь пигментных гранул в эпидермисе в поле зрения микроскопа (объектив ×40). Процесс состоял из следующих этапов: получение изображения с помощью цифрового фотоаппарата, проведение бинарной сегментации изображения для выделения пигментных гранул, измерение суммарной площади гранул. Статистическую обработку результатов проводили с помощью параметрических методов вариационной статистики (наименьшие квадраты разностей, t-критерий Стьюдента) с использованием программного обеспечения Microsoft Excel. Статистически значимыми считали результаты с уровнем вероятности не менее 95% (в таблицах обозначены звездочкой).Unpainted histological specimens were examined morphometrically. The measurements were carried out on pigmented areas of the epidermis, in which all layers contained pigment. Using the MIKMED-2-1600-3 digital microscopic complex (Russia) and the DiaMorf hardware and software complex (Russia), the total area of pigment granules in the epidermis was calculated in the field of view of the microscope (lens × 40). The process consisted of the following steps: obtaining an image using a digital camera, conducting binary image segmentation to highlight pigment granules, measuring the total granule area. Statistical processing of the results was carried out using parametric methods of variation statistics (least squares of differences, Student t-test) using Microsoft Excel software. Results with a probability level of at least 95% were considered statistically significant (indicated by an asterisk in the tables).

Результаты исследованияResearch results

Эксперимент 1.Experiment 1.

Проведенные доклинические исследования показали, что все исследованные препараты (1% ГХ, 0,1% 13цРК и 1,0% ГХ+0,1% 13цРК) при ежедневных, в течение 2-х недель аппликациях на окрашенную кожу животных обладают выраженной депигментирующей активностью, приводя к достоверному снижению уровня пигментации кожи лабораторных животных (табл.4, рис.1).Conducted preclinical studies showed that all investigated drugs (1% GC, 0.1% 13cRK and 1.0% GC + 0.1% 13cRK) with daily application for 2 weeks on colored skin of animals have a pronounced depigmentation activity , leading to a significant decrease in the level of skin pigmentation in laboratory animals (Table 4, Fig. 1).

Таблица 4Table 4 Степень пигментации кожи лабораторных животных в норме и при воздействии депигментирующих мазей (суммарная площадь гранул пигмента в поле зрения микроскопа, мкм²)The degree of pigmentation of the skin of laboratory animals is normal and when exposed to depigmenting ointments (total area of pigment granules in the field of view of the microscope, μm ² ) Кожа ушных раковин морских свинокThe skin of the ears of guinea pigs Группы животныхGroups of animals СамкиFemales СамцыMales Интактный контрольIntact control 3467,20±172,053467.20 ± 172.05 2646,45±75,692646.45 ± 75.69 1%ГХ1% GC 974,78±35,22*974.78 ± 35.22 * 1252,08±43,66*1252.08 ± 43.66 * 0,1%13цРК0.1% 13tsRK 881,35±33,84*881.35 ± 33.84 * 638,69±32,68*638.69 ± 32.68 * 1% ГХ+0,1% 13цРК (по примеру 4)1% GC + 0.1% 13cRK (as in example 4) 493,46±22,18*493.46 ± 22.18 * 200,99±16,01*200.99 ± 16.01 * Кожа межлопаточной области спины морских свинокSkin of the interscapular region of the back of guinea pigs Интактный контрольIntact control 1259,12±84,951259.12 ± 84.95 919,46±69,37.919.46 ± 69.37. 1%ГХ1% GC 318,12±14,02*318.12 ± 14.02 * 244,14±17,06*244.14 ± 17.06 * 0,1%13цРК0.1% 13tsRK 313,03±11,27*313.03 ± 11.27 * 226,48±17,74*226.48 ± 17.74 * 1% ГХ+0,1% 13цРК (по примеру 4)1% GC + 0.1% 13cRK (as in example 4) 181,27±16,09*181.27 ± 16.09 * 174,38±28,07*174.38 ± 28.07 * Кожа хвоста мышейMouse tail skin Интактный контрольIntact control 148,37±13,6148.37 ± 13.6 121,85±12,7121.85 ± 12.7 1%ГХ1% GC 57,05±4,8*57.05 ± 4.8 * 63,88±7,1*63.88 ± 7.1 * 0,1%13цРК0.1% 13tsRK 50,35±4,2*50.35 ± 4.2 * 71,15±10,0*71.15 ± 10.0 * 1% ГХ+0,1% 13цРК (по примеру 4)1% GC + 0.1% 13cRK (as in example 4) 31,12±3,1*31.12 ± 3.1 * 30,29±3,8*30.29 ± 3.8 * * вероятность различий с интактной группой составляет 95%(р≤0,05).* the probability of differences with the intact group is 95% (p≤0.05).

Наиболее выраженной активностью в отношении снижения пигментации кожи на всех модельных объектах обладала комбинированная мазевая композиция, содержащая ГХ и 13цРК.The most pronounced activity in reducing skin pigmentation in all model objects was possessed by a combined ointment composition containing GC and 13cRC.

Эффект от применения отбеливающих препаратов на всех изученных моделях оказался соизмеримым, однако, учитывая больший исходный уровень пигментации кожи, легкость нанесения мази и высокую реактивность, кожа ушных раковин беспородных морских свинок может рассматриваться как оптимальная модель для изучения депигментирующих средств.The effect of the use of bleaching preparations on all the studied models was comparable, however, given the greater initial level of skin pigmentation, ease of application of ointment and high reactivity, the skin of the ears of outbred guinea pigs can be considered as the optimal model for the study of depigmenting agents.

Эксперимент 2.Experiment 2.

Интерфолликулярный эпидермис кожи ушек интактных самцов и самок морских свинок представлен многослойным плоским ороговевающим эпителием, состоящим из четырех слоев (рис.2,а). Аппликации всех использованных мазевых композиций вызывали утолщение клеточного эпидермиса за счет шиповатого и зернистого слоев, разрыхление рогового слоя, в дерме - отек, расширение и полнокровие сосудов, увеличение представительства клеточных элементов (рис.2,б).The interfollicular epidermis of the skin of the ears of intact males and females of guinea pigs is represented by a multilayer squamous keratinizing epithelium, consisting of four layers (Fig. 2, a). Applications of all used ointment compositions caused a thickening of the cellular epidermis due to the prickly and granular layers, loosening of the stratum corneum, in the dermis - swelling, vasodilation and plethora, and an increase in the number of cellular elements (Fig. 2, b).

Пигментация кожи снизилась под воздействием всех исследованных вариантов комбинированной мазевой композиции, что доказано достоверным снижением суммарной площади гранул пигмента в поле зрения микроскопа по сравнению с показателями интактных животных (табл.5). Морфологические проявления раздражающего воздействия препарата на кожу нарастали пропорционально повышению концентрации ГХ.Skin pigmentation decreased under the influence of all the studied variants of the combined ointment composition, which was proved by a reliable decrease in the total area of the pigment granules in the microscope field of view as compared with indicators of intact animals (Table 5). Morphological manifestations of the irritating effect of the drug on the skin increased in proportion to an increase in the concentration of GC.

Представленные в таблице данные объективно отражают степень депигментирующей дерматотропной активности экспериментальных препаратов. При использовании мазей, содержащих 0,05% 13цРК, доза-эффект отбеливания для гидрохинона наблюдался в диапазоне 1-2% у самок и 1-2,5% у самцов. Принимая во внимание известные раздражающие свойства ГХ и их дозозависимость, сочли целесообразным в заявляемой композиции использовать невысокие концентрации этого соединения, т.к. из таблицы 5 видно, что и при 1% концентрации ГХ в композиции депигментирующий эффект объективно выражен сильно (пигментация кожи уменьшается в 5-6 раз). Меньшее по сравнению с полностью трансретиноевой кислотой раздражающее действие 13цРК, входящей в состав заявляемой композиции, также уменьшает нежелательные проявления воспалительного процесса.The data presented in the table objectively reflect the degree of depigmenting dermatotropic activity of experimental preparations. When using ointments containing 0.05% 13cRK, the dose-effect of whitening for hydroquinone was observed in the range of 1-2% in females and 1-2.5% in males. Taking into account the known irritating properties of GC and their dose dependence, it was considered appropriate to use low concentrations of this compound in the inventive composition, since Table 5 shows that even at 1% GC concentration in the composition, the depigmentation effect is objectively strongly expressed (skin pigmentation decreases 5-6 times). The less irritating effect of 13cRK, which is part of the claimed composition, compared with completely transretinoic acid, also reduces the undesirable manifestations of the inflammatory process.

Таблица 5Table 5 Общая площадь пигментных гранул эпидермиса кожи ушных раковин морских свинок в поле зрения микроскопа, мкм² The total area of pigment granules of the epidermis of the skin of the ears of the guinea pigs in the field of view of the microscope, μm ² №№ группNo. of groups Группы животныхGroups of animals Площадь пигментных гранулThe area of pigment granules СамкиFemales СамцыMales 1one Интактный контрольIntact control 320,38±13,02320.38 ± 13.02 431,64±18,25431.64 ± 18.25 4four 1%ГХ+0,05% 13цРК (по примеру 1)1% GC + 0.05% 13cRK (as in Example 1) 52,73±5,08*52.73 ± 5.08 * 79,25±9,18*79.25 ± 9.18 * 55 2%ГХ+0,05%13цРК (по примеру 2)2% GC + 0.05% 13cRK (as in example 2) 28,29±2,09*28.29 ± 2.09 * 61,57±7,34*61.57 ± 7.34 * 66 2,5% ГХ+0,05% 13цРК (по примеру 3)2.5% GC + 0.05% 13cRC (according to example 3) 35,22±3,1*35.22 ± 3.1 * 37,56±4,1*37.56 ± 4.1 * * вероятность различий с интактной группой составляет 95% (р≤0,05).* the probability of differences with the intact group is 95% (p≤0.05).

Таким образом, комбинирование двух веществ-синергистов с отбеливающими свойствами в заявляемой депигментирующей композиции позволяет использовать их в невысоких концентрациях, избежать необходимости вводить в состав препарата стероидный гормон и тем самым снизить риск возникновения нежелательных побочных эффектов без ущерба для эффективности препарата. Использование в составе комбинированных лекарственных и косметических средств ингредиентов, обладающих противоположным фармакологическим действием на структурные компоненты кожи, представляется нецелесообразным во избежание столкновения проявлений их дерматотропной активности (так, 13цРК стимулирует пролиферацию кератиноцитов, кортикостероиды ее подавляют, 13цРК стимулирует иммунологические процессы в коже, кортикостероиды их подавляют).Thus, the combination of two synergistic substances with whitening properties in the inventive depigmenting composition allows them to be used in low concentrations, avoiding the need to introduce steroid hormone into the composition of the drug and thereby reduce the risk of unwanted side effects without compromising the effectiveness of the drug. The use of ingredients with combined pharmacological and cosmetic effects on the structural components of the skin seems inappropriate to avoid a collision of the manifestations of their dermatotropic activity (for example, 13cRC stimulates keratinocyte proliferation, corticosteroids suppress it, 13cRC stimulates immunological processes in the skin, and corticosteroids suppress them )

Клинические исследованияClinical researches

Исследования проводили в Научном дерматологическом центре "Ретиноиды", г.Москва, лицензия №17970/9429.The studies were carried out in the Scientific dermatological center "Retinoids", Moscow, license No. 17970/9429.

Комбинированная мазевая композиция описываемого состава обладает отбеливающим действием и предназначена для использования в дерматологической практике с целью ослабления интенсивности или устранения очаговых гиперпигментаций кожи различного генеза - первичных (веснушки, старческие пигментные пятна, актиническая меланодермия и др.) и вторичных, возникающих после воспалительных поражений кожи (дерматиты, ожоги, пузырные дерматозы, псориаз, атопический дерматит, нейродермит, васкулиты, угри, склеродермия и др.).The combined ointment composition of the described composition has a whitening effect and is intended for use in dermatological practice in order to reduce the intensity or eliminate focal hyperpigmentations of the skin of various origins - primary (freckles, senile pigment spots, actinic melasma, etc.) and secondary ones that occur after inflammatory skin lesions ( dermatitis, burns, cystic dermatoses, psoriasis, atopic dermatitis, neurodermatitis, vasculitis, acne, scleroderma, etc.).

ПримерыExamples

1. Б-ной A.M., 30 лет, д-з: угри узловато-кистозные поздние, вторичная послеугревая пигментация. Болен в течение 3 лет; высыпания в виде плотных, крупных, часто абсцедирующих болезненных узлов располагались преимущественно на спине. Предшествующее лечение: аутогемотерапия №10, аевит, активированный уголь, антибиотики, Роаккутан, наружно спиртовые растворы, мазь Ям, фуцидин, Ретасол®. В результате лечения высыпания разрешились, но остались пигментированные поверхностные рубцы на местах высыпаний. Отбеливающую мазь (по примеру 1) применял 2 раза в день на пятна в течение 4 мес с перерывом в связи с интенсивной инсоляцией на время отпуска (выезжал в Индию). По окончании лечения пятна и рубцы стали едва заметными, новые угревые высыпания не появлялись.1. Bnuyu A.M., 30 years old, doctor: late acne, nodosum-cystic, secondary post-acne pigmentation. Sick for 3 years; rashes in the form of dense, large, often abscessed painful nodes were located mainly on the back. Previous treatment: autohemotherapy No. 10, Aevit, activated carbon, antibiotics, Roaccutane, externally alcohol solutions, Yam ointment, fucidin, Retasol®. As a result of the treatment, rashes were resolved, but pigmented superficial scars remained at the rash sites. I used a bleaching ointment (according to Example 1) 2 times a day for spots for 4 months with a break due to intensive insolation during the holidays (I went to India). At the end of treatment, spots and scars became barely noticeable, new acne rashes did not appear.

2. Б-ная Г.К., 24 года, д-з: фолликулярный кератоз. С 7-летнего возраста «гусиная кожа» на плечах, предплечьях, бедрах, голенях; затем появились гнойнички, которые часто травмировала; на местах экскориаций возникла пигментация в виде многочисленных темных пятен. Предшествующее лечение - скинорен, ретинола ацетат и пальмитат, антибиотики, флукостат, мезим, наружно целестодерм, базирон, дифферин, гликолевый пилинг без значительного эффекта. Отбеливающую мазь (по примеру 1) применяла 2 раза в день на пятна в течение 3 мес. По окончании лечения пятна исчезли, новые пятна не появлялись.2. B-naya G.K., 24 years old, doctor: follicular keratosis. From the age of 7, “goosebumps” on shoulders, forearms, hips, legs; then pustules appeared, which often injured; pigmentation in the form of numerous dark spots occurred at the site of excoriation. The previous treatment was skinoren, retinol acetate and palmitate, antibiotics, flucostat, mezim, externally celestoderm, basiron, differential, glycol peeling without significant effect. The bleaching ointment (according to example 1) was applied 2 times a day for spots for 3 months. At the end of treatment, the spots disappeared, new spots did not appear.

3. Б-ная А.В., 56 лет, д-з: вторичная пигментация после ожога борщевиком. Больна 3 месяца, после ожога борщевиком были пузыри, затем язвы на голени и стопе; долгое заживление сопровождалось появлением стойких пигментных пятен, существовавших 2 мес без изменений. Отбеливающую мазь (по примеру 1) применяла 2 раза в день на пятна в течение 1,5 мес. По окончании лечения пятна исчезли.3. B-naya A.V., 56 years old, patient: secondary pigmentation after a burn with a cow parsnip. Sick for 3 months, after a burn with a cow parsnip there were blisters, then ulcers on the lower leg and foot; long healing was accompanied by the appearance of persistent age spots, which existed for 2 months unchanged. The bleaching ointment (according to example 1) was applied 2 times a day for spots for 1.5 months. At the end of treatment, the spots disappeared.

4. Б-ная М.Г., 42 года, д-з: простое лентиго. В течение 2 лет пятно на лице, со временем не менялось. Не лечилась. Отбеливающую мазь (по примеру 1) применяла 2 раза в день на пятно в течение 2 мес. По окончании лечения пятно исчезло.4. B-naya M.G., 42 years old, patient: simple lentigo. For 2 years, the spot on the face has not changed over time. Not treated. The bleaching ointment (according to example 1) was applied 2 times a day on a spot for 2 months. At the end of treatment, the stain disappeared.

5. Б-ной П.В., 31 год, д-з: стойкая вторичная пигментация. 3 года назад по совету косметолога проводилась лазерная шлифовка (дермабразия) кожи лица, после чего возникли пятна на лице, которые по прошествии 3 лет не изменились. Отбеливающую мазь (по примеру 1) применял 2 раза в день на пятна в течение 2 нед, после чего пятна исчезли.5. Bnoy P.V., 31 years old, patient: stable secondary pigmentation. 3 years ago, on the advice of a cosmetologist, laser resurfacing (dermabrasion) of the skin of the face was performed, after which spots appeared on the face, which did not change after 3 years. The bleaching ointment (according to example 1) was applied 2 times a day for spots for 2 weeks, after which the spots disappeared.

Таким образом, комбинированная мазевая отбеливающая композиция, содержащая 13-цис-ретиноевую кислоту и гидрохинон, обладает высокой эффективностью, низкой токсичностью и может использоваться в дерматологической практике.Thus, the combined ointment whitening composition containing 13-cis-retinoic acid and hydroquinone has high efficiency, low toxicity and can be used in dermatological practice.

Рис.1. Меланин (указано стрелками) в эпидермисе (Эп) уха морской свинки (♂) - интактнои (а) и через 14 суток ежедневных аппликаций комбинированной мазевой композиции (б). Д-дерма. Неокрашенные препараты. Ув.: об.: ×63.Fig. 1. Melanin (indicated by arrows) in the epidermis (Ep) of the guinea pig’s ear (♂) is intact (a) and after 14 days of daily applications of the combined ointment composition (b). D-dermis. Unpainted preparations. Uv .: rev .: × 63.

Рис.2. Фрагменты кожи ушной раковины морских свинок (♂) - интактнои (а) и через 14 суток ежедневных аппликаций комбинированной мазевой композиции (0,05% 13цРК и 1% ГХ)- (б). Эп - эпидермис; Д-дерма; меланинсодержащие клетки указаны стрелками. Окраска гематоксилином и эозином. Ув.: а) об. 20; б) об. 10.Fig. 2. Fragments of the skin of the auricle of guinea pigs (♂) - intact (a) and after 14 days of daily applications of the combined ointment composition (0.05% 13cRC and 1% GC) - (b). Ep - epidermis; D-dermis; melanin-containing cells are indicated by arrows. Hematoxylin and eosin stain. Uv .: a) about. twenty; b) about. 10.

ЛитератураLiterature

1. Алексеев А.Г., Банин В.В., Ноздрин В.И. Меланоциты кожи // Морфология. - 2009. - Т. 136, №5. - С.81-89.1. Alekseev A.G., Banin V.V., Nozdrin V.I. Skin melanocytes // Morphology. - 2009. - T. 136, No. 5. - S.81-89.

2. Penney K.B., Smith C.J., Allen J.C. Depigmenting action of hydroquinone depends on disruption of fundamental cell processes // J. Invest. Dermatol. - 1984. - Vol.82, N 4. - P.301-317.2. Penney K.B., Smith C.J., Allen J.C. Depigmenting action of hydroquinone depends on disruption of fundamental cell processes // J. Invest. Dermatol. - 1984. - Vol.82, N 4. - P.301-317.

3. Патент US 3856934, 24.12.1974.3. Patent US 3856934, 12.24.1974.

4. Патент RU 2317066, С2, 18.03.2004.4. Patent RU 2317066, C2, 03/18/2004.

5. Патент RU 2350313, 06.05.2004.5. Patent RU 2350313, May 6, 2004.

6. Kochhar D.M., Penner J.D., Tellone C.I. Comparative teratogenic activities of two retinoids: Effects on palate and limb development // Teratogenesis, Carcinogenesis, and Mutagenesis. - 2005. - Vol.4, N 4. - P.377-387.6. Kochhar D.M., Penner J.D., Tellone C.I. Comparative teratogenic activities of two retinoids: Effects on palate and limb development // Teratogenesis, Carcinogenesis, and Mutagenesis. - 2005. - Vol.4, N 4. - P.377-387.

7. Алексеев А.Г., Жучков С.А. Способ оценки содержания меланина в эпидермисе // Бабухинские чтения в Орле. - Альманах «Ретиноиды». - М.: ЗАО "Ретиноиды", 2007. - С.75-76.7. Alekseev A.G., Zhuchkov S.A. A method for assessing the melanin content in the epidermis // Babukhinsky readings in Orel. - Almanac "Retinoids." - M .: ZAO "Retinoids", 2007. - P.75-76.

Claims (1)

Комбинированная мазевая композиция для местного применения, уменьшающая интенсивность локальных гиперпигментаций кожи, на основе ретиноида и гидрохинона, содержащая в качестве ретиноида 13-цис-ретиноевую кислоту, гидрохинон, пиросульфит натрия, бутилгидрокситолуол, бутилгидроксианизол, воск эмульсионный, масло вазелиновое, глицерин, этанол и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Гидрохинон 1,0-2,5 13-цис-ретиноевая кислота 0,05-0,1 Пиросульфит натрия 0,05-0,5 Бутилгидрокситолуол 0,01-0,1 Бутилгидроксианизол 0,01-0,1 Воск эмульсионный 4,0-10,0 Масло вазелиновое 2,0-10,0 Глицерин 5,0-15,0 Этанол 95% 5,0-15,0 Вода очищенная До 100,0 A combined ointment composition for topical application that reduces the intensity of local hyperpigmentation of the skin, based on retinoid and hydroquinone, containing 13-cis-retinoic acid, hydroquinone, sodium pyrosulfite, butyl hydroxytoluene, butyl hydroxyanisole, emulsion wax, glycerol and paraffin oil in the following ratio of components, wt.%:
Hydroquinone 1.0-2.5 13-cis retinoic acid 0.05-0.1 Sodium pyrosulfite 0.05-0.5 Butylhydroxytoluene 0.01-0.1 Butylhydroxyanisole 0.01-0.1 Emulsion Wax 4.0-10.0 Vaseline oil 2.0-10.0 Glycerol 5.0-15.0 Ethanol 95% 5.0-15.0 Purified water Up to 100.0

Images