RU2436769C1 - СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ε-N-ТРЕТ-БУТИЛОКСИКАРБОНИЛ-L-ЛИЗИНА - Google Patents
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ε-N-ТРЕТ-БУТИЛОКСИКАРБОНИЛ-L-ЛИЗИНА Download PDFInfo
- Publication number
- RU2436769C1 RU2436769C1 RU2010133881/04A RU2010133881A RU2436769C1 RU 2436769 C1 RU2436769 C1 RU 2436769C1 RU 2010133881/04 A RU2010133881/04 A RU 2010133881/04A RU 2010133881 A RU2010133881 A RU 2010133881A RU 2436769 C1 RU2436769 C1 RU 2436769C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lysine
- copper complex
- tert
- tertbutyloxycarbonyl
- copper
- Prior art date
Links
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Изобретение относится к способу получения ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина, который находит применение в синтезе биологически активных пептидов. Способ заключается в получении сначала медного комплекса ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина из гидрохлорида L-лизина и третбутилпирокарбоната в водно-ацетоновом растворе сульфата меди. Далее полученный медный комплекс без выделения его из реакционной среды обрабатывают при перемешивании водным раствором динатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты и выпавший осадок отделяют фильтрованием. Способ позволяет получать ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизин в одну стадию с хорошими выходами за счет упрощения процесса и исключения трудоемкой операции выделения медного комплекса.
Description
Изобретение относится к пептидной химии, в частности к получению защищенной α, ω-диаминокислоты, такой как лизин в виде производного трет-бутоксикарбонила, а также, следовательно, и к фармацевтической химии.
Эта защищенная аминокислота формулы
является важным полупродуктом синтеза многих биологически активных пептидов, в частности тетрапептида тафцина, обладающего иммуностимулирующей активностью [1], и октреотида синтетического аналога соматостатина [2].
Известно, что наиболее успешный подход к синтезу ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина основан на получении соответствующего медного комплекса L-лизина, с последующим бокированием концевой аминогруппы и разрушением полученного медного комплекса ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина. В промежуточном медном комплексе α-аминогруппа L-лизина находится в связанном состоянии, что позволяет селективно провести бокирование в нужном направлении.
Для получения медного комплекса L-лизина обычно используют основной карбонат меди CuCO3·Cu(ОН)2·H2O [3] либо медный купорос CuSO4·5H2O [4], использование последнего более предпочтительно, так как не требуется нагревание реакционной массы. Полученный медный комплекс L-лизина далее обрабатывают трет-бутилпирокарбонатом и выделяют медный комплекс ε-N-третбутилоксикарбонил-L-лизина фильтрованием [4]. Недостатком данного метода является очень трудоемкая стадия фильтрации, особенно при проведении реакции в больших объемах, из-за мелкого размера кристаллов полученного вещества, что приводит к быстрому забиванию фильтра.
Разрушение медного комплекса осуществляют газообразным сероводородом [5] или тиоацетамидом [6]. Использование сероводорода ограничено из-за его высокой токсичности. Кроме того, определенная трудность возникает при отделение образующегося в результате реакции мелкодисперсного сульфида меди. Известны также методы, основанные на связывании ионов меди в более прочный хелатный комплекс. В частности, используют такие хелатообразующие реагенты, как 8-гидроксихинолин [4], тиозолидин-2-тион [7] или ионообменная смола Na+ Chelex 100 [8]. Применение этих реагентов в данном случае также не желательно из-за их относительно высокой стоимости.
Задачей данного изобретения является упрощение процесса получения, исключением токсичных и дорогостоящих реагентов, а также разработка легко масштабируемого способа производства ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина.
Поставленная техническая задача достигается способом получения ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина, заключающимся в получении сначала медного комплекса ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина из гидрохлорида L-лизина и третбутилпирокарбоната в водно-ацетоновом растворе сульфата меди и далее без выделения его из реакционной среды полученный медный комплекс обрабатывают при перемешивании водным раствором динатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты и отделяют выпавший осадок фильтрованием.
Используемая динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты дигидрат используется в виде препарата Трилон Б (водный раствор указанной соли).
Итак, поставленная техническая задача достигается тем, что полученный из гидрохлорида L-лизина и трет-бутилпирокарбоната в водном-ацетоновом растворе сульфата меди медный комплекс ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина без выделения из реакционной массы обрабатывают водным раствором трилона Б. Таким образом, исключается трудоемкая операция выделения промежуточного медного комплекса, при этом из процесса исключены токсичные и дорогостоящие реагенты. Кроме того, данный способ является легко масштабируемым - выход ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина существенно не меняется с увеличением загрузок исходных реагентов.
Бикарбонат натрия, используемый в этом способе, выступает в качестве основания как в случае перевода гидрохлорида аминокислоты в свободную аминокислоту, так и непосредственно в процессе бокирования; что является традиционным для пептидной химии (А.А.Гершкович, В.К.Киберев Синтез пептидов. Реагенты и методы., Киев, Наукова думка, 1987) наряду с такими реагентами, как поташ, гидрооксид натрия и др.
Чистота полученного ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина подтверждена тонкослойной хроматографией на алюминиевой пластинке HPTLC Silica gel 60 F254. Элюент: бутанол/вода/уксусная кислота 2/1/1. Проявление: стандартный раствор нингидрина.
Описываемый способ иллюстрируется следующими примерами, не ограничивающими его.
Экспериментальная часть
Пример 1
В плоскодонной колбе на 500 мл при перемещивании на магнитной мешалке растворяют 18,3 гр (0,1 моль) гидрохлорида лизина в 85 мл воды, затем добавляют 16,8 гр бикарбоната натрия. К полученной суспензии при перемешивании и комнатной температуре приливают раствор 12,4 гр (0,05 моль) медного купороса в 80 мл воды. Реакционную массу перемешивают 30 мин, после чего приливают раствор 29,6 гр (0,13 моль) трет-бутилпирокарбоната в 110 мл ацетона и сразу присыпают 8,4 гр бикарбоната натрия. Полученную массу перемешивают при комнатной температуре 48 часов, разбавляют 60 мл воды и приливают раствор 26 гр (0,07 моль) Трилона Б в 100 мл воды. Перемешивание продолжают в течение суток, фильтруют выпавший осадок на фильтре Шотта и тщательно промывают на фильтре 3 раза по 50 мл этилацетатом. Полученное вещество сушат в вакууме мембранного насоса (15 мм рт.ст.) при 40-50° до постоянного веса. Получают 20,9 гр (84,6%) светло-серого порошка.
ТСХ: Rf (H-Lys-OH HCl)=0.20, Rf (H-Lys(εBoc)-OH)=0.64
PMR (DMSO-d6, 360.13 MHz): δ 6.71 (с, 1Н), 3.10 (т, 1Н), 2.88 (т, 2Н), 1.50-1.75 (м, 2Н), 1.20-1.40 (м, 13Н)
Пример 2
В реактор на 50 л с механической мешалкой помещают 8,8 л воды, прибавляют при перемешивании и комнатной температуре 2000 г (10,95 моль) гидрохлорида лизина, затем присыпают 1841 гр бикарбоната натрия. К полученной суспензии приливают порциями 1359,4 гр (5,44 моль) медного купороса в 8,8 л воды. Реакционную массу перемешивают 30 мин, приливают в 1 прием 3240,8 гр (14,85 моль) трет-бутилпирокарбоната в 12 л ацетона, после чего присыпают 920,4 гр бикарбоната натрия. Полученную массу перемешивают при комнатной температуре 48 часов. Темно-синию суспензию разбавляют 6,5 л воды, после чего к ней приливают раствор 2840 г Трилона Б (7,63 моль) в 11 л воды и перемешивают в течение суток при комнатной температуре. Реакционную массу фильтруют через вязь, отжимают, осадок переносят в емкость, добавляют 5 л этилацетата, перемешивают 5 мин и снова фильтруют и отжимают через вязь. Осадок переносят на фильтр Шотта и промывают 1,5 л этилацетата. Получают 8,4 кг влажного продукта, который сушат на поддоне, периодически измельчая осадок, до постоянного веса. Получают 2368 г (87,8%) светло-серого порошка.
ТСХ: Rf(H-Lys-OH HCl)=0.20, Rf(H-Lys(εBoc)-OH)=0.66
PMR (DMSO-d6, 360.13 MHz): δ 6.71 (с, 1Н), 3.10 (т, 1Н), 2.88 (т, 2Н), 1.50-1.75 (м, 2Н), 1.20-1.40 (м, 13Н)
Таким образом, как видно из вышеприведенных примеров, способ по изобретению отличается простотой, отсутствием токсичных реагентов и пригоден для получения целевого продукта с высоким выходом в полупромышленном масштабе.
Источники информации
1. Патент КНР CN 101550180 А2 0091007, Liquid-phase synthesis of phagocytosis-stimulating tetrapeptide tuftsin, 2009.
2. Патент США US 2004039161, С07К00102, 2004.
3. Biochem. J. V.37, p.515 (1943).
4. Chem. Pharm. Bull. V.47, N10, p.1489 (1999).
5. Justus Liebigs Ann. Chem. V.1973, N9, p.1467 (1973).
6. Int. J.Pept Protein Res. V.19, N2, p.158 (1982).
7. Peptides: Biology and Chemistry, Kluwer Academic: Dordrecht, p.33 (2000).
8. Synth. Commun. V.11, N4, р.303 (1981).
Claims (1)
- Способ получения ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина, заключающийся в получении сначала медного комплекса ε-N-трет-бутилоксикарбонил-L-лизина из гидрохлорида L-лизина и трет-бутилпирокарбоната в водно-ацетоновом растворе сульфата меди и далее без выделения его из реакционной среды полученный медный комплекс обрабатывают при перемешивании водным раствором динатриевой соли этилендиамин-тетрауксусной кислоты и отделяют выпавший осадок фильтрованием.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010133881/04A RU2436769C1 (ru) | 2010-08-13 | 2010-08-13 | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ε-N-ТРЕТ-БУТИЛОКСИКАРБОНИЛ-L-ЛИЗИНА |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010133881/04A RU2436769C1 (ru) | 2010-08-13 | 2010-08-13 | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ε-N-ТРЕТ-БУТИЛОКСИКАРБОНИЛ-L-ЛИЗИНА |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2436769C1 true RU2436769C1 (ru) | 2011-12-20 |
Family
ID=45404319
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010133881/04A RU2436769C1 (ru) | 2010-08-13 | 2010-08-13 | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ε-N-ТРЕТ-БУТИЛОКСИКАРБОНИЛ-L-ЛИЗИНА |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2436769C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103232370A (zh) * | 2013-05-09 | 2013-08-07 | 成都郑源生化科技有限公司 | 一种芴甲氧羰酰天冬氨酸-4-叔丁酯的制备方法 |
| CN111270239A (zh) * | 2020-03-27 | 2020-06-12 | Tcl华星光电技术有限公司 | 含铜酸性蚀刻液循环再生的方法 |
-
2010
- 2010-08-13 RU RU2010133881/04A patent/RU2436769C1/ru active
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| . WIEJAK S. et al. A Large Scale Synthesis of Mono- and Di-urethane Derivatives of Lysine, CHEM. PHARM. BULL. 1999, 47(10), 1489-1490. SCOTT J.W. et al. Improved syntheses of N-(tert-butyloxycarbonyl)-L-lysine and N-(benzyloxycarbonyl)-N-(tert-butyloxycarbonyl)-L-lysine, SYNTH. COMMUN., 1981, 11(4), 303-314. * |
| LIU М.et al. Synthesis of Fmoc-L-Lys(BOC)-OH, JINGXI HUAGONG ZHONGJIANTI, 2009, 39(5), 26-29 (реферат Chem. Abstrs., ACS on STN, 153: 204599). * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103232370A (zh) * | 2013-05-09 | 2013-08-07 | 成都郑源生化科技有限公司 | 一种芴甲氧羰酰天冬氨酸-4-叔丁酯的制备方法 |
| CN111270239A (zh) * | 2020-03-27 | 2020-06-12 | Tcl华星光电技术有限公司 | 含铜酸性蚀刻液循环再生的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Fukuzumi et al. | Chemoselective cyclization of unprotected linear peptides by α-ketoacid–hydroxylamine amide-ligation | |
| TW201639867A (zh) | 胜肽合成方法 | |
| CN103626847A (zh) | 一种小麦胚芽蛋白源锌螯合肽及其制备方法 | |
| CN104861045A (zh) | 环肽化合物gg6f及其制备方法 | |
| RU2436769C1 (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ε-N-ТРЕТ-БУТИЛОКСИКАРБОНИЛ-L-ЛИЗИНА | |
| JP5279378B2 (ja) | 目的タンパク質または目的ペプチドにアミノ酸を導入する方法 | |
| CN103864705A (zh) | 多肽缩合剂1-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3h)-酮及其制备方法 | |
| Sato et al. | Late-stage solubilization of poorly soluble peptides using hydrazide chemistry | |
| CN110128503B (zh) | 一种抗Aβ1-42蛋白聚集的合成多肽及其合成方法、应用与编码该合成多肽的基因 | |
| US8193156B1 (en) | Dipeptides incorporating selenoamino acids with enhanced bioavailability—synthesis, pharmaceutical and cosmeceutical applications thereof | |
| Suárez et al. | Practical and efficient enantioselective synthesis of α-amino acids in aqueous media | |
| NO934834L (no) | 2-amino-6,7-dihydroksy-4-tiaheptasyrederivater, fremstilling og anvendelse av disse | |
| EP2812345B1 (en) | Method of synthesizing peptides, proteins and bioconjugates | |
| US8981049B2 (en) | Aziridine mediated native chemical ligation | |
| EP3398959B1 (en) | Method for preparing lixisenatide | |
| CN110015978A (zh) | O-[2-[[叔丁氧羰基]氨基]乙基]-n-[芴甲氧羰基]-l-酪氨酸的合成方法 | |
| WO2020125045A1 (zh) | 一种罗米地辛的合成方法 | |
| Blatchly et al. | Microscale synthesis and analysis of a dipeptide | |
| CN102311484A (zh) | 一种抑制血管紧张素转移酶的六肽及其制备方法 | |
| JPH05507403A (ja) | ペプチドの製造方法 | |
| CN109912477B (zh) | 一种硒代蛋氨酸氧化物及其制备方法和在合成多肽分子内二硫键中的应用 | |
| So | Novel Synthesis of C-Terminal Photocaged Peptides: Synthetic and Biological Applications | |
| Limbach et al. | Synthesis of β3‐Homophenylalanine‐Derived Amino Acids and Peptides by Suzuki Coupling in Solution and on Solid Support | |
| EP3067430A1 (en) | Method for producing d-form or l-form amino acid derivative having thiol group | |
| CN107935895B (zh) | 化合物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD4A | Correction of name of patent owner | ||
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20170515 |
|
| QB4A | Licence on use of patent |
Free format text: LICENCE Effective date: 20170517 |
|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20180820 |
|
| QC41 | Official registration of the termination of the licence agreement or other agreements on the disposal of an exclusive right |
Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20170517 Effective date: 20180820 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner |