RU2396945C2 - Method of obtaining poly-dl-lactide-co-glycolide nanoparticles with incapsulated in them antituberculosis medications - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: invention relates to field of medicine and pharmaceutical industry, namely to method of obtaining poly-DL-lactide-co-glycolide nanoparticles with antituberculosis medications, incapsulated in them, which includes: obtaining lyophilised particles of stable medications, including: stage 1: obtaining lyophilised particles of stable medications, including: stage 2: obtaining lyophilised particles of unstable medications, including: stage 3 combination of lyophilised particles obtained at stages 1 and 2 with obtaining said composition.

EFFECT: claimed is method of obtaining novel nanoparticles.

14 cl, 1 tbl

Description

Область изобретенияField of Invention

Данное изобретение относится к получению поли-DL-лактид-со-гликолидных наночастиц (ПЛГ-НЧ) с активным веществом или веществами (ПТЛС), инкапсулированными в них, где инкапсулированные вещества являются стабильными относительно друг друга. В частности, это изобретение относится к препарату, содержащему первые инкапсулированные активные вещества, которые стабильны, и вторые инкапсулированные активные вещества, которые нестабильны в отношении к указанному первому веществу. Упоминание активных веществ, как подразумевается, включает терапевтические и/или биологически активные вещества. Так, и в качестве примера, наночастицы можно использовать для инкапсулирования противотуберкулезных лекарственных средств (ПТЛС).This invention relates to the production of poly-DL-lactide-co-glycolide nanoparticles (PLG-NP) with the active substance or substances (PTLS) encapsulated in them, where the encapsulated substances are stable relative to each other. In particular, this invention relates to a preparation containing first encapsulated active substances that are stable, and second encapsulated active substances that are unstable with respect to said first substance. Mention of active substances is intended to include therapeutic and / or biologically active substances. So, and as an example, nanoparticles can be used to encapsulate anti-tuberculosis drugs (PTLS).

Предпосылки создания изобретенияBACKGROUND OF THE INVENTION

Необходимость применять многие ПТЛС ежедневно в течение 6-9 месяцев приводит к несоблюдению схемы лечения пациентом, а также к связанной с приемом лекарств гепатотоксичности, что ведет к неудачам терапии. Другим следствием неполного/нерегулярного лечения является появление лекарственной резистентности.The need to use many PTLS daily for 6-9 months leads to non-compliance with the patient's treatment regimen, as well as to drug-related hepatotoxicity, which leads to treatment failure. Another consequence of incomplete / irregular treatment is the emergence of drug resistance.

В нанотехнологии на основе систем доставки лекарственных веществ с использованием биологически разлагаемых полимеров проводились интенсивные исследования в последнее десятилетие. Из нескольких доступных методик получения наночастиц, таких как двойное эмульгирование-выпаривание растворителя, диффузия раствора в масло, микроэмульгирование, осаждение газом, снижающим растворимость, гелификация анионных полисахаридов и т.д., ни одна не является совершенной в отношении размера частиц, эффективности инкапсулирования лекарственного вещества и кинетики высвобождения лекарственного вещества. Кроме того, об инкапсулировании многих лекарственных веществ в одном препарате еще не сообщалось.Intensive research has been carried out in the last decade in nanotechnology based on drug delivery systems using biodegradable polymers. Of the several available techniques for producing nanoparticles, such as double emulsification-evaporation of a solvent, diffusion of a solution into oil, microemulsification, gas-solubility gas deposition, gelation of anionic polysaccharides, etc., none are perfect in terms of particle size, drug encapsulation efficiency substances and kinetics of drug release. In addition, the encapsulation of many drugs in one drug has not yet been reported.

Наиболее широко применяемый метод двойного эмульгирования-выпаривания растворителя включает 2 главные стадии - образование капелек в первичной эмульсии и последующее удаление растворителя из капелек вторичной эмульсии с последующим осаждением полимера. Стабильность частиц, а также кинетика высвобождения лекарственного вещества регулируется путем использования эмульгаторов/стабилизаторов, таких как поливиниловый спирт (ПВС).The most widely used method of double emulsification-evaporation of the solvent includes 2 main stages - the formation of droplets in the primary emulsion and the subsequent removal of the solvent from the droplets of the secondary emulsion, followed by precipitation of the polymer. Particle stability as well as drug release kinetics is controlled by the use of emulsifiers / stabilizers such as polyvinyl alcohol (PVA).

В основном известно, что изониазид (INН), пиразинамид (РZА) и рифампицин (RIF) являются активными веществами или лекарственными веществами, применяемыми для лечения туберкулеза. Так, в патентной заявке № 765/Dеl/2003 предложен способ одновременного или совместного инкапсулирования двух или более из вышеназванных лекарственных веществ, но которые стабильны в отношении друг друга.It is generally known that isoniazid (INH), pyrazinamide (PZA) and rifampicin (RIF) are active substances or medicinal substances used to treat tuberculosis. So, in patent application No. 765 / Del / 2003, a method is proposed for the simultaneous or joint encapsulation of two or more of the above medicinal substances, but which are stable against each other.

Помимо трех вышеназванных лекарственных веществ или активных веществ, известно также, что этамбутол (EMB) является лекарственным средством, которое также используется для лечения туберкулеза. Однако EMB является нестабильным в присутствии INН, РZА или RIF и, в частности, в присутствии INН. Таким образом, было обнаружено, что EMB нельзя было совместно инкапсулировать одновременно с INН, так как любое такое совместное инкапсулирование привело бы к разложению EMB. Так, патентная заявка № 765/Dеl/95 имела полезное применение для совместного инкапсулирования активных веществ или лекарственных веществ, которые были совместимы друг с другом в отношении стабильности. Инкапсулирование EMB до сих пор не было известно.In addition to the above three drugs or active substances, it is also known that ethambutol (EMB) is a drug that is also used to treat tuberculosis. However, EMB is unstable in the presence of INH, PZA or RIF, and in particular in the presence of INH. Thus, it was found that EMB could not be co-encapsulated at the same time as INH, since any such co-encapsulation would degrade EMB. Thus, patent application No. 765 / Del / 95 had useful applications for co-encapsulating active substances or drugs that were compatible with each other with respect to stability. Encapsulation of EMB has not yet been known.

Объекты изобретенияOBJECTS OF THE INVENTION

Цель данного изобретения состоит в предложении композиции и способа получения ПЛГ-НЧ, включающих инкапсулированные активные вещества, которые нестабильны в отношении друг друга.The purpose of this invention is to provide a composition and method for producing PLG-NP, including encapsulated active substances that are unstable with respect to each other.

Другой объект этого изобретения состоит в предложении композиции и способа получения ПЛГ-НЧ с ПТЛС, инкапсулированными в них, и при которых устранены недостатки, связанные с известным уровнем техники, и причем ПТЛС состоят из комбинации или рифампицина (RIF)+изониазид (INH)+пиразинамид (PZA)+этамбутол (EMB), или рифампицин (RIF)+изониазид (INH).Another object of this invention is to propose a composition and method for producing PLG-LF with PTLs encapsulated in them, and in which the disadvantages associated with the prior art are eliminated, and wherein PTLs consist of a combination or rifampicin (RIF) + isoniazid (INH) + pyrazinamide (PZA) + ethambutol (EMB), or rifampicin (RIF) + isoniazid (INH).

Еще один объект этого изобретения состоит в предложении композиции и способа получения ПЛГ-НЧ с ПТЛС, инкапсулированными в них, которые обеспечивают продолжительное и постоянное высвобождение лекарственных средств.Another object of this invention is to provide a composition and method for producing PLG-LF with PTLs encapsulated in them, which provide a continuous and constant release of drugs.

Еще один объект этого изобретения состоит в предложении композиции и способа получения ПЛГ-НЧ с ПТЛС, инкапсулированными в них, которые можно изменять так, чтобы захватить максимум лекарственного вещества.Another object of this invention is to provide a composition and method for producing PLG-LF with PTLS encapsulated in them, which can be changed so as to capture the maximum drug substance.

Дополнительный объект этого изобретения состоит в предложении композиции и способа получения ПЛГ-НЧ с ПТЛС, инкапсулированными в них, которые способны распределить лекарственное(ые) средство(а) равномерно по разным органам, где находятся туберкулезные бактерии.An additional object of this invention is to provide a composition and method for producing PLG-NPs with PTLS encapsulated in them, which are able to distribute the drug (s) evenly to different organs where the tuberculosis bacteria are located.

Еще один дополнительный объект этого изобретения состоит в предложении композиции и способа получения ПЛГ-НЧ с ПТЛС, инкапсулированными в них, которые можно лиофилизировать и воспроизводить для использования в виде композиции для перорального приема.Another additional object of this invention is to propose a composition and method for producing PLG-LF with PTLS encapsulated in them, which can be lyophilized and reproduced for use in the form of compositions for oral administration.

Еще один дополнительный объект этого изобретения состоит в предложении композиции и способа получения ПЛГ-НЧ с ПТЛС, инкапсулированными в них, которые не проявляют гепатотоксичности.Another additional object of this invention is to provide a composition and method for producing PLG-LF with PTLS encapsulated in them that do not exhibit hepatotoxicity.

Краткое описание изобретенияSUMMARY OF THE INVENTION

В соответствии с этим изобретением представлен способ получения поли-DL-лактид-со-гликолидных наночастиц с противотуберкулезными лекарственными средствами, инкапсулированными в них, включающий:In accordance with this invention, a method for producing poly-DL-lactide-co-glycolide nanoparticles with anti-tuberculosis drugs encapsulated in them, comprising:

(I) получение водного раствора стабильных, растворимых в воде лекарственных веществ в DW/NS/PBS (DW-дистиллированная вода, NS-изотоничный раствор, PBS-фосфатный буферный раствор),(I) obtaining an aqueous solution of stable, water-soluble drugs in DW / NS / PBS (DW-distilled water, NS-isotonic solution, PBS-phosphate buffer solution),

(II) получение раствора нестабильных лекарственных веществ в DW/NS/PBS,(II) obtaining a solution of unstable drugs in DW / NS / PBS,

(III) получение раствора полимера и гидрофобного лекарственного вещества в органическом растворителе,(III) obtaining a solution of a polymer and a hydrophobic drug substance in an organic solvent,

(IV) смешивание отдельно растворов со стадий (I) и (II) с растворами со стадии (III) и обработка ультразвуком в условиях холода,(IV) mixing separately the solutions from stages (I) and (II) with the solutions from stage (III) and sonication in cold conditions,

(V) добавление указанной выше эмульсии в водном растворе ПВС и повторную обработку ультразвуком в условиях холода,(V) adding the above emulsion in an aqueous solution of PVA and re-sonication in cold conditions,

(VI) перемешивание эмульсии и центрифугирование ее,(VI) mixing the emulsion and centrifuging it,

(VII) промывание указанных частиц, воспроизведение их эмульсии и лиофилизацию.(Vii) washing said particles, reproducing their emulsion and lyophilizing.

В соответствии с данным изобретением водный раствор гидрофильного лекарственного вещества получают в DW/NS/PBS в соотношении 1:0,1-100 по объемному весу. Раствор полимера получают в органическом растворителе, предпочтительно, дихлорметане (ДХМ), в отношении 1:0,3-1 по объемному весу, содержащем также гидрофобное лекарственное вещество в соотношении 1:0,5-5 по объемному весу. Водный раствор выливают в органический раствор в соотношении 1:5-20 по объему и обрабатывают ультразвуком в течение 45-120 сек при 4°-15°С. Первичную эмульсию выливают в 0,8-2,5% раствор ПВC, содержащий ДХМ:ПВС в соотношении 1:0,5-1,5, обрабатывают в течение 2-5 минут при 4°-15°С и перемешивают в течение 18-30 часов. Перемешиваемую смесь центрифугируют при 8000-12000 об/мин в течение 15-30 мин при 4°-20°С с получением капли осадка и промывают 3-4 раза DW/NS/PBS, снова суспендируют в том же растворе и лиофилизируют. Отношение лекарственного вещества и полимера сохраняют равным 1:1 вес/вес. Таким образом, получают три вида препаратов, т.е. ПЛГ-НЧ, инкапсулирующие RIF+INH+PZA, ПЛГ-НЧ, инкапсулирующие RIF+INH, и ПЛГ-НЧ, инкапсулирующие EMB.In accordance with this invention, an aqueous solution of a hydrophilic drug substance is prepared in DW / NS / PBS in a ratio of 1: 0.1-100 by volume weight. The polymer solution is prepared in an organic solvent, preferably dichloromethane (DCM), in a ratio of 1: 0.3-1 by volume weight, also containing a hydrophobic drug substance in a ratio of 1: 0.5-5 by volume weight. The aqueous solution is poured into the organic solution in a ratio of 1: 5-20 by volume and sonicated for 45-120 seconds at 4 ° -15 ° C. The primary emulsion is poured into a 0.8-2.5% solution of PVA containing DCM: PVA in a ratio of 1: 0.5-1.5, treated for 2-5 minutes at 4 ° -15 ° C and stirred for 18 -30 hours. The stirred mixture is centrifuged at 8000-12000 rpm for 15-30 minutes at 4 ° -20 ° C to obtain a precipitate drop and washed 3-4 times with DW / NS / PBS, again suspended in the same solution and lyophilized. The ratio of drug to polymer is kept at 1: 1 weight / weight. Thus, three types of preparations are obtained, i.e. PLG-LF encapsulating RIF + INH + PZA, PLG-LF encapsulating RIF + INH, and PLG-LF encapsulating EMB.

Было обнаружено, что этамбутол в высокой степени нестабилен в присутствии изониазида. Таким образом, если необходимо инкапсулирование четырех активных веществ или необходимо инкапсулирование двух или более активных веществ, и из которых этамбутол является одним из активных веществ, было бы удобно соинкапсулировать этамбутол в сочетании с другими активными веществами, и применяя способ, который описан в одновременно находящейся на рассмотрении патентной заявке № 765/Del/2003. Однако недостаток, связанный с этим, состоит в том, что из-за его свойств нестабильности этамбутол неизбежно разрушается.Ethambutol was found to be highly unstable in the presence of isoniazid. Thus, if it is necessary to encapsulate four active substances or if it is necessary to encapsulate two or more active substances, of which ethambutol is one of the active substances, it would be convenient to co-encapsulate ethambutol in combination with other active substances, and using the method described in Consideration of Patent Application No. 765 / Del / 2003. However, the disadvantage associated with this is that, due to its instability properties, ethambutol inevitably collapses.

Таким образом, чтобы устранить этот недостаток, этамбутол инкапсулируют отдельно. Такое отдельное инкапсулирование этамбутола также улучшает биодоступность этамбутола при пероральном применении. Еще одним свойством является минимальная подавляющая концентрация (МПК). Было обнаружено, что МПК не достигается при инкапсулировании четырех активных веществ, причем этамбутол является одним из активных веществ. Однако отдельное инкапсулирование этамбутола обеспечивает необходимую МПК.Thus, to eliminate this drawback, ethambutol is encapsulated separately. This separate encapsulation of ethambutol also improves the bioavailability of ethambutol when administered orally. Another property is the minimum inhibitory concentration (IPC). It was found that IPC is not achieved by encapsulating the four active substances, with ethambutol being one of the active substances. However, separate encapsulation of ethambutol provides the necessary IPC.

Способ получения ПЛГ-НЧ с инкапсулированными в них ПТЛС объясняется следующим примером.The method of obtaining PLG-LF with encapsulated in them PTLS is explained by the following example.

ПримерExample

10 мг INH и 10 мг PZA растворяли в 1 мл DW. 10 мг RIF и 30 мг ПЛГ суспендировали в 10 мл ДХМ. Водный раствор добавляли к ДХМ раствору, обрабатывали ультразвуком при 4°С в течение 1 мин и выливали в 1% раствор ПВС (8 мл) с последующей обработкой ультразвуком при 4°С в течение 3 мин. Эмульсию перемешивали в течение 18 часов и центрифугировали при 10000 об/мин в течение 20 мин. Осадок после центрифугирования промывали 3 раза DW и затем снова суспендировали в том же растворе для лиофилизации.10 mg INH and 10 mg PZA were dissolved in 1 ml DW. 10 mg of RIF and 30 mg of PLG were suspended in 10 ml of DCM. The aqueous solution was added to the DCM solution, sonicated at 4 ° C for 1 min and poured into a 1% PVA solution (8 ml), followed by sonication at 4 ° C for 3 min. The emulsion was stirred for 18 hours and centrifuged at 10,000 rpm for 20 minutes. The precipitate after centrifugation was washed 3 times with DW and then again suspended in the same lyophilization solution.

10 мг EMB растворяли в 1 мл DW. 10 мг ПЛГ суспендировали в 10 мл ДХМ. Добавляли водный раствор к ДХМ раствору, обрабатывали ультразвуком при 4°С в течение 1 мин и выливали в 1% раствор ПВС (8 мл) с последующей обработкой ультразвуком при 4°С в течение 3 мин. Эмульсию перемешивали в течение 18 часов и центрифугировали при 10000 об/мин в течение 20 мин. Осадок после центрифугирования промывали 3 раза DW и затем снова суспендировали в том же растворе для лиофилизации.10 mg of EMB was dissolved in 1 ml of DW. 10 mg of PLG was suspended in 10 ml of DCM. An aqueous solution was added to the DCM solution, sonicated at 4 ° C for 1 min and poured into a 1% PVA solution (8 ml), followed by sonication at 4 ° C for 3 min. The emulsion was stirred for 18 hours and centrifuged at 10,000 rpm for 20 minutes. The precipitate after centrifugation was washed 3 times with DW and then again suspended in the same lyophilization solution.

Лиофилизированные частицы снова суспендировали в изотоничном растворе и вводили перорально мышам, и результаты представлены в таблице 1.Lyophilized particles were again suspended in an isotonic solution and administered orally to mice, and the results are shown in Table 1.

Таблица 1
Колониеобразующие единицы (КОЕ) M. Tuberculosis
в органах мышей после лекарственной терапииTable 1
Colony forming units (CFU) M. Tuberculosis
in the organs of mice after drug therapy ГруппыGroups ДозаDose РежимMode Число введений дозыThe number of doses Log КОЕ/орган
Легкие
СелезенкаLog CFU / organ
Lungs
Spleen 1. Не получавшие лечения, контрольные1. Untreated, control -- -- -- 4,97 ±0,074.97 ± 0.07 4,91 ±0,094.91 ± 0.09 2(a) Свободная комбинация из 3-х лекарств2 (a) A free combination of 3 drugs ТерапевтическаяTherapeutic ЕжедневноDaily 2828 2,88 ±0,092.88 ± 0.09 2,85 ±0,062.85 ± 0.06 (b) ПЛГ комбинация из 3-х лекарств(b) PLG combination of 3 drugs ТерапевтическаяTherapeutic Каждые 10 днейEvery 10 days 33 2,75 ±0,062.75 ± 0.06 2,75 ±0,102.75 ± 0.10 (c) ПЛГ комбинация из 3-х
лекарств(c) PLG combination of 3
medicines 1/2 терапевтической1/2 therapeutic Каждые 7 днейEvery 7 days 4four 2,72 ±0,052.72 ± 0.05 2,78 ±0,042.78 ± 0.04 3(a) Свободная комбинация из 4-х лекарств3 (a) A free combination of 4 drugs ТерапевтическаяTherapeutic ЕжедневноDaily 2828 <1,00*<1.00 * <1,00*<1.00 * (b) ПЛГ комбинация из 4-х лекарств(b) PLG combination of 4 drugs ТерапевтическаяTherapeutic Каждые 10 днейEvery 10 days 33 <1,00*<1.00 * <1,00*<1.00 * 4(a) Свободная комбинация из 4-х лекарств4 (a) A free combination of 4 drugs 1/2 терапевтической1/2 therapeutic ЕжедневноDaily 2828 2,67 ±0,142.67 ± 0.14 2,72 ±0,072.72 ± 0.07 (b) ПЛГ комбинация из 4-х лекарств(b) PLG combination of 4 drugs 1/2 терапевтической1/2 therapeutic Каждые 7 днейEvery 7 days 4four <1,00*<1.00 * <1,00*<1.00 * • Значения являются средними арифметическими ± СО, n=5 на группу
• Значения log КОЕ (колониеобразующая единица) являются сравнимыми (Р>0,05) между группами 2 а/b/с и 4(а), которые были, однако, значительно ниже (Р<0,001), чем в группе 1.
• *Указывает неопределяемое число КОЕ на 28 день после заражения и в 1 и 10 раз разведенными гомогенатами тканей.• Values are arithmetic means ± SD, n = 5 per group
• The values of log CFU (colony forming unit) are comparable (P> 0.05) between groups 2 a / b / s and 4 (a), which were, however, significantly lower (P <0.001) than in group 1.
• * Indicates an undetectable number of CFU on day 28 after infection and 1 and 10 times diluted tissue homogenates.

При единственном пероральном введении ПЛГ наночастиц мышам минимальная подавляющая концентрация (МПК для этамбутола = 1,5 мкг/мл) достигалась в плазме только тогда, когда EMB был инкапсулированным и его вводили отдельно. Это важно с точки зрения лечения ТБ, так как, если уровни лекарственного вещества ниже МПК, лечение становится неэффективным. Фактически, когда ПЛГ-НЧ, соинкапсулирующие EMB вместе с 3 другими лекарственными веществами, вводили мышам, уровни EMB в крови были ниже МПК во время периода исследования.With a single oral administration of PLG of nanoparticles to mice, the minimum inhibitory concentration (MIC for ethambutol = 1.5 μg / ml) was achieved in plasma only when EMB was encapsulated and administered separately. This is important in terms of treating TB, because if drug levels are lower than BMD, treatment becomes ineffective. In fact, when PLG-NPs co-encapsulating EMB along with 3 other drugs were administered to mice, blood EMB levels were lower than BMD during the study period.

Кроме того, при сравнении со свободным EMB, биодоступность которого считали равной =1, биодоступность инкапсулированного в ПЛГ-НЧ EMB (одного) была =10,6, тогда как биодоступность инкапсулированного в ПЛГ-НЧ EMB (вместе с другими 3 лекарственными веществами) была =5,1.In addition, when compared with free EMB, the bioavailability of which was considered equal to = 1, the bioavailability of EMB encapsulated in PLG-LF (one) was = 10.6, while the bioavailability of an EMB encapsulated in PLG-LF EMB (along with the other 3 medicinal substances) was = 5.1.

Определение содержания лекарственного вещества в ПЛГ-НЧDetermination of drug content in PLG-LF

Эффективность инкапсулирования лекарственного вещества для ПЛГ-НЧ была, как представлено ниже:The efficacy of encapsulating the drug for PLG-LF was as follows:

RIF - 56,99 ±2,72%RIF - 56.99 ± 2.72%

INH - 66,31 ±5,83%INH - 66.31 ± 5.83%

PZA - 68,02 ±5,58%PZA - 68.02 ± 5.58%

EMB - 43,11 ±4,21%EMB - 43.11 ± 4.21%

ПЛГ-НЧ не были связаны с какой-либо гепатотоксичностью при оценке по билирубину, аланинтрансаминазе и щелочной фосфатазе плазмы крови.PLG-NPs were not associated with any hepatotoxicity as measured by bilirubin, alanine transaminase and alkaline phosphatase in blood plasma.

Claims (14)

1. Способ получения композиции, содержащей поли-DL-лактид-со-гликолидные наночастицы с инкапсулированными в них противотуберкулезными лекарственными средствами, где способ включает следующие стадии:
стадия 1: получение лиофилизированных частиц стабильных лекарственных средств, включая
(i) получение водного раствора водорастворимых стабильных лекарственных средств;
(ii) получение раствора полимера и раствора гидрофобного лекарственного средства в органическом растворителе;
(iii) смешивание раствора со стадии (i) с раствором со стадии (ii) с последующей обработкой полученного раствора ультразвуком при 4-15°С с получением эмульсии;
(iv) добавление полученной эмульсии к водному раствору поливинилового спирта и повторная обработка ультразвуком при 4-15°С;
(v) перемешивание эмульсии и центрифугирование ее;
(vi) промывание указанных частиц, воспроизведение их эмульсии и лиофилизацию;
стадия 2: получение лиофилизированных частиц нестабильных лекарственных средств, включая
(i) получение водного раствора нестабильных лекарственных средств;
(ii) получение раствора полимера в органическом растворителе;
(iii) смешивание раствора со стадии (i) с раствором со стадии (ii) с последующей обработкой ультразвуком при 4-15°С с получением эмульсии;
(iv) добавление полученной эмульсии к водному раствору поливинилового спирта и повторная обработка ультразвуком при 4-15°С;
(v) перемешивание эмульсии и центрифугирование ее;
(vi) промывание указанных частиц, воспроизведение их эмульсии и лиофилизацию;
стадия 3: объединение лиофилизированных частиц, полученных на стадиях 1 и 2 с получением указанной композиции.1. The method of obtaining a composition containing poly-DL-lactide-co-glycolide nanoparticles with anti-tuberculosis drugs encapsulated in them, where the method includes the following stages:
stage 1: obtaining lyophilized particles of stable drugs, including
(i) obtaining an aqueous solution of water-soluble stable drugs;
(ii) obtaining a polymer solution and a solution of a hydrophobic drug in an organic solvent;
(iii) mixing the solution from step (i) with the solution from step (ii), followed by sonication of the resulting solution at 4-15 ° C. to obtain an emulsion;
(iv) adding the resulting emulsion to an aqueous solution of polyvinyl alcohol and repeated sonication at 4-15 ° C;
(v) mixing the emulsion and centrifuging it;
(vi) washing said particles, reproducing their emulsion and lyophilization;
stage 2: obtaining lyophilized particles of unstable drugs, including
(i) obtaining an aqueous solution of unstable drugs;
(ii) obtaining a polymer solution in an organic solvent;
(iii) mixing the solution from step (i) with the solution from step (ii), followed by sonication at 4-15 ° C. to obtain an emulsion;
(iv) adding the resulting emulsion to an aqueous solution of polyvinyl alcohol and repeated sonication at 4-15 ° C;
(v) mixing the emulsion and centrifuging it;
(vi) washing said particles, reproducing their emulsion and lyophilization;
stage 3: the combination of lyophilized particles obtained in stages 1 and 2 to obtain the specified composition. 2. Способ по п.1, где указанную композицию суспендируют с получением суспензии лиофилизированных частиц.2. The method according to claim 1, where the specified composition is suspended to obtain a suspension of lyophilized particles. 3. Способ получения поли-DL-лактид-со-гликолидных наночастиц с инкапсулированным в них этамбутолом, где способ включает следующие стадии:
(i) получение водного раствора этамбутола;
(ii) получение раствора полимера органическом растворителе;
(iii) смешивание раствора со стадии (i) с раствором со стадии (ii) с последующей обработкой ультразвуком при 4-15°С с получением эмульсии;
(iv) добавление полученной эмульсии к водному раствору поливинилового спирта и повторная обработка ультразвуком при 4-15°С;
(v) перемешивание эмульсии и центрифугирование ее;
(vi) промывание указанных частиц, воспроизведение их эмульсии и лиофилизацию.3. A method for producing poly-DL-lactide-co-glycolide nanoparticles with ethambutol encapsulated in them, where the method comprises the following steps:
(i) obtaining an aqueous solution of ethambutol;
(ii) obtaining a polymer solution of an organic solvent;
(iii) mixing the solution from step (i) with the solution from step (ii), followed by sonication at 4-15 ° C. to obtain an emulsion;
(iv) adding the resulting emulsion to an aqueous solution of polyvinyl alcohol and repeated sonication at 4-15 ° C;
(v) mixing the emulsion and centrifuging it;
(vi) washing said particles, reproducing their emulsion and lyophilization. 4. Способ по любому из пп.1 или 3, где указанный органический растворитель представляет собой дихлорметан.4. The method according to any one of claims 1 or 3, wherein said organic solvent is dichloromethane. 5. Способ по любому из пп.1 или 3, причем указанный полимер растворен в указанном растворителе в соотношении 1:0,3-1 в/о.5. The method according to any one of claims 1 or 3, wherein said polymer is dissolved in said solvent in a ratio of 1: 0.3-1 w / v. 6. Способ по любому из пп.1 или 3, причем указанное лекарственное средство растворяют в смеси дистиллированная вода/изотонический раствор/фосфатный буфер в соотношении 1:1-1000 в/о и в дихлорметане в соотношении 1:0,5-5 в/о.6. The method according to any one of claims 1 or 3, wherein said drug is dissolved in a mixture of distilled water / isotonic solution / phosphate buffer in a ratio of 1: 1-1000 w / v and in dichloromethane in a ratio of 1: 0.5-5 v /about. 7. Способ по любому из пп.1 или 3, причем указанные водный и органический растворы смешивают в соотношении 1:5-20 о/о.7. The method according to any one of claims 1 or 3, wherein said aqueous and organic solutions are mixed in a ratio of 1: 5-20 v / v. 8. Способ по любому из пп.1 или 3, причем соотношение указанного лекарственного средства и полимера составляет 1:1 в/в.8. The method according to any one of claims 1 or 3, wherein the ratio of said drug to polymer is 1: 1 w / w. 9. Способ по любому из пп.1 или 3, причем первую обработку ультразвуком проводят в течение 45-120 с, а вторую обработку ультразвуком - в течение 2-5 мин, каждую при 4-15°С.9. The method according to any one of claims 1 or 3, wherein the first sonication is carried out for 45-120 s, and the second sonication is performed for 2-5 minutes, each at 4-15 ° C. 10. Способ по любому из пп.1 или 3, причем указанный поливиниловый спирт имеет концентрацию 0,8-2,5% и соотношение дихлорметан : поливиниловый спирт составляет 1:0,5-1,5.10. The method according to any one of claims 1 or 3, wherein said polyvinyl alcohol has a concentration of 0.8-2.5% and the ratio of dichloromethane: polyvinyl alcohol is 1: 0.5-1.5. 11. Способ по любому из пп.1 или 3, причем центрифугирование осуществляют при 8000-12000 об/мин в течение 15-30 мин при 4-20°С.11. The method according to any one of claims 1 or 3, the centrifugation being carried out at 8000-12000 rpm for 15-30 minutes at 4-20 ° C. 12. Способ по любому из пп.1 или 3, причем указанные частицы промывают 3-4 раза в смеси дистиллированная вода/изотонический раствор/ фосфатный буфер (рН 7,2-7,4) и лиофилизируют.12. The method according to any one of claims 1 or 3, wherein said particles are washed 3-4 times in a mixture of distilled water / isotonic solution / phosphate buffer (pH 7.2-7.4) and lyophilized. 13. Композиция, полученная по п.1, для лечения туберкулеза.13. The composition obtained according to claim 1, for the treatment of tuberculosis. 14. Композиция по п.13, представленная в форме суспензии в изотоническом растворе. 14. The composition according to item 13, presented in the form of a suspension in an isotonic solution.