RU2299887C2

RU2299887C2 - Methods for synthesis of aplidine and novel anti-tumor derivatives, methods for their industrial preparing and using

Info

Publication number: RU2299887C2
Application number: RU2003102633/04A
Authority: RU
Inventors: Игнасио РОДРИГЕС (ES); Игнасио РОДРИГЕС; Консепсьон ПОЛАНКО (ES); Консепсьон ПОЛАНКО; Феликс КУЭВАС (ES); Феликс КУЭВАС; Палома МЕНДЕС (ES); Палома МЕНДЕС; Кармен КУЭВАС (ES); Кармен Куэвас; Пилар ГАЛЬЕГО (ES); Пилар ГАЛЬЕГО; Саймон МАНТ (ES); Саймон МАНТ; Игнасио МАНСАНАРЕС (ES); Игнасио МАНСАНАРЕС
Original assignee: Фарма Мар, С.А.
Priority date: 2001-02-15
Filing date: 2001-07-02
Publication date: 2007-05-27
Also published as: GB0103750D0

Abstract

FIELD: organic chemistry, antibiotics, medicine, oncology.

SUBSTANCE: invention relates to novel derivatives of aplidine possessing anti-tumor activity and represented by the general formula:

EFFECT: valuable medicinal property of compound, improved methods of synthesis and preparing.

28 cl, 3 tbl, 121 ex

Description

Настоящее изобретение относится к способам синтеза аплидина и новым противоопухолевым производным, способам их промышленного получения и применения.The present invention relates to methods for the synthesis of aplidine and new antitumor derivatives, methods for their industrial production and use.

Аплидин имеет следующую циклическую структуру с боковой цепью:Aplidine has the following cyclic structure with a side chain:

Дидемнины образуют класс циклических депсипептидов, которые были выделены из различных видов Trididemnum genus (Rinehart, Jr. et al. J, Am. Chem. Soc, 103, 1857-59 (1981), Rinehart, Jr. et al. Science, 212, 933-935 (1981) и обладают противоопухолевой и противовирусной активностями. Из их числа аплидин является одним из наиболее активных природных дидемнинов противоопухолевого действия. Описание выделения и противоопухолевой активности аплидина приведено в патенте США 5.834.586.Didemnins form a class of cyclic depsipeptides that have been isolated from various species of Trididemnum genus (Rinehart, Jr. et al. J, Am. Chem. Soc. 103, 1857-59 (1981), Rinehart, Jr. et al. Science, 212, 933-935 (1981) and have antitumor and antiviral activities, of which aplidine is one of the most active natural antideancer didemnins, and USP 5.834.586 describes the isolation and antitumor activity of aplidine.

Описан ряд синтетических и природных аналогов аплидина (Rinehart, Jr. et al. J. Med. Chem, 1996, 39, 2819-2834), включающий различные модификации боковой цепи при сохранении той же структуры макроцикла.A number of synthetic and natural analogues of aplidine have been described (Rinehart, Jr. et al. J. Med. Chem, 1996, 39, 2819-2834), including various modifications of the side chain while maintaining the same macrocycle structure.

Недавно описана родственная структура дидемнинов, получивших название тамандарины (Fenical, W. et al, J, Org. Chem., 2000, 65, 782-792), выделенных из неидентифицированных соединений асцидий семейства дидемнидовых. Найдено, что эти молекулы отличаются только наличием гидроксиизовалериановой кислоты (Hiv³), вместо гидроксиизовалерилпропионовой кислоты (Hip³). Указанные соединения описаны как высоко активные противовирусные, противоопухолевые и иммунодепрессивные пептиды.A recently described related structure of didemnins, called tamandarins (Fenical, W. et al, J, Org. Chem., 2000, 65, 782-792), isolated from unidentified ascidium compounds of the didemnid family. It was found that these molecules differ only in the presence of hydroxyisovalerianic acid (Hiv ³ ), instead of hydroxyisovalerylpropionic acid (Hip ³ ). These compounds are described as highly active antiviral, antitumor and immunosuppressive peptides.

Настоящее изобретение касается вышеуказанных соединений, получивших название производные аплидина, предназначенных для применения в медицине, в частности, для лечения опухолей. Изобретение касается также фармацевтических препаратов, включающих указанные соединения, предназначенных для лечения опухолей, например, солидных опухолей, и использования соединений при получении лекарственного средства для лечения опухолей. В особенности предпочтительно лечение солидных опухолей, таких как опухоли мочевого пузыря, молочной железы, ободочной или толстой кишки, желудка, печени, nscl = нмрл (немелкоклеточного рака легких), яичника, поджелудочной железы, глотки, предстательной железы, почек, scl = мрл (мелкоклеточного рака легких), ретинобластомы, меланомы, фибросаркомы, хондросаркомы или остеосаркомы, либо лечение лейкоза/лимфом, таких как ALL (промиелоцитный лейкоз), ALL (острый лимфобластический), CML (хронический миелогенный), ALL (В-клеточный), лейкоз (капиллярно-В-клеточный), лейкоз (плазмоклеточный), лимфома (Т-клеточная), лимфома (Т-клеток кожи), лимфома (недифференцируемая), лимфома (В-клеток Беркитта), лимфома (гистиоцитарная), лимфома (В-клеточная), лимфома (асцит Беркитта).The present invention relates to the above compounds, called derivatives of aplidine, intended for use in medicine, in particular for the treatment of tumors. The invention also relates to pharmaceutical preparations comprising the compounds intended for the treatment of tumors, for example, solid tumors, and the use of the compounds in the manufacture of a medicament for the treatment of tumors. Particularly preferred is the treatment of solid tumors, such as tumors of the bladder, breast, colon or colon, stomach, liver, nscl = nmr (non-small cell lung cancer), ovary, pancreas, pharynx, prostate, kidney, scl = mrl ( small cell lung cancer), retinoblastoma, melanoma, fibrosarcoma, chondrosarcoma or osteosarcoma, or treatment of leukemia / lymphomas such as ALL (promyelocytic leukemia), ALL (acute lymphoblastic), CML (chronic myelogenous), ALL (B-cell), leukemia ( capillary b-cell g), leukemia (plasma cell), lymphoma (T-cell), lymphoma (T-skin cells), lymphoma (undifferentiated), lymphoma (Burkitt B cells), lymphoma (histiocytic), lymphoma (B-cell), lymphoma ( ascites burkitt).

Примеры фармацевтических композиций по изобретению включают любые твердые (например, таблетки, пилюли, капсулы, гранулы) или жидкие формы (растворы, суспензии или эмульсии) с подходящей композицией, пригодной для перорального, местного или парентерального введения, и указанные композиции могут содержать чистое соединение или в комбинации с любым носителем или другими фармакологически активными соединениями. При парентеральном введении указанные композиции должны быть стерильными.Examples of pharmaceutical compositions of the invention include any solid (e.g., tablets, pills, capsules, granules) or liquid forms (solutions, suspensions or emulsions) with a suitable composition suitable for oral, local or parenteral administration, and these compositions may contain a pure compound or in combination with any carrier or other pharmacologically active compounds. When administered parenterally, these compositions must be sterile.

Для удобства соединение может быть конъюгировано с белком-носителем или другим подходящим средством для доставки в организм животного или человека. Конъюгация может осуществляться непосредственно между носителем и соединением или косвенно, через подходящий связующий агент.For convenience, the compound may be conjugated to a carrier protein or other suitable vehicle for delivery to an animal or human body. Conjugation can be carried out directly between the carrier and the compound or indirectly, through a suitable coupling agent.

Введение соединения или композиций по настоящему изобретению можно осуществлять любым подходящим способом, таким как внутривенное вливание, пероральный прием препаратов, внутрибрюшинное или внутривенное введение. Заявители предпочитают использовать время вливания до 24 часов, более желательно, 2-12 часов и, наиболее предпочтительно, 2-6 часов. Короткое время вливания, позволяющее проводить лечение, не оставляя в больнице на ночь, особенно желательно. Однако, при необходимости, вливание может длиться 12-24 часа или даже дольше. Вливание можно выполнять с подходящими интервалами, скажем в 2-4 недели. Фармацевтические композиции, содержащие соединение по изобретению, могут доставляться с помощью липосомального или наносферного инкапсулирования, в составах замедленного высвобождения или другими стандартными способами доставки.Administration of a compound or compositions of the present invention can be carried out by any suitable method, such as intravenous infusion, oral administration of drugs, intraperitoneal or intravenous administration. Applicants prefer to use an infusion time of up to 24 hours, more preferably 2-12 hours, and most preferably 2-6 hours. A short infusion time allowing treatment without leaving the hospital overnight is especially desirable. However, if necessary, the infusion can last 12-24 hours or even longer. The infusion can be performed at suitable intervals, say in 2-4 weeks. Pharmaceutical compositions containing a compound of the invention can be delivered by liposomal or nanosphere encapsulation, in sustained release formulations, or other standard delivery methods.

Точная доза соединения изменяется в зависимости от конкретного состава, способа применения, конкретного местонахождения, реципиента и требующей лечения карциномы или опухоли. Другие факторы, такие как возраст, масса тела, пол, диета, время введения, скорость экскреции, состояние реципиента, лекарственные комбинации, реакции чувствительности и тяжесть заболевания, также должны приниматься во внимание. Введение можно осуществлять непрерывно или периодически в пределах максимальной допустимой дозы.The exact dose of the compound varies depending on the specific composition, method of application, specific location, recipient, and requiring treatment of a carcinoma or tumor. Other factors, such as age, body weight, gender, diet, time of administration, rate of excretion, recipient condition, drug combinations, sensitivity reactions, and disease severity should also be taken into account. The introduction can be carried out continuously or periodically within the maximum permissible dose.

Соединения по данному изобретению могут быть использованы с другими лекарственными средствами для обеспечения комбинированной терапии. Дополнительные лекарства могут входить в состав той же композиции, либо предусматриваться в виде отдельной композиции для введения в тот же момент времени или в другое время. Идентичность дополнительного лекарства специально не ограничивается, и подходящие примеры включают:The compounds of this invention can be used with other drugs to provide combination therapy. Additional drugs may be part of the same composition, or provided as a separate composition for administration at the same time or at another time. The identity of the complementary drug is not specifically limited, and suitable examples include:

a) лекарства с антимитотическим действием, в особенности те, которые имеют мишенью элементы цитоскелета, включая модуляторы микротрубочек, такие как таксановые лекарственные средства (такие как таксол, паклитаксел, таксотер, доцетаксел), подофилотоксины или алкалоиды барвинка (винкристин, винбластин);a) drugs with anti-mitotic effects, especially those that target cytoskeletal elements, including microtubule modulators, such as taxane drugs (such as taxol, paclitaxel, taxotere, docetaxel), podophyllotoxins or vinca alkaloids (vincristine, vinblastine);

b) антиметаболитные лекарственные средства, такие как 5-фторурацил, цитарабин, гемцитабин, аналоги пурина, такие как пентостатин, метотрексат);b) antimetabolic drugs such as 5-fluorouracil, cytarabine, gemcitabine, purine analogs such as pentostatin, methotrexate);

c) алкилирующие агенты, такие как азотистые соединения горчицы (такие как циклофосфамид или ифосфамид);c) alkylating agents such as mustard nitrogen compounds (such as cyclophosphamide or ifosfamide);

d) лекарства, нацеленные на ДНК, такие как антрациклиновые лекарства: адриамицин, доксорубицин, фарморубицин или эпирубицин;d) DNA targeting drugs, such as anthracycline drugs: adriamycin, doxorubicin, farmorubicin or epirubicin;

e) лекарственные средства,нацеленные на топоизомеразу, такие как этопозид;e) drugs targeting topoisomerase, such as etoposide;

f) гормоны и агонисты или антагонисты гормонов, такие как эстрогены, антиэстрогены (тамоксифен и родственные соединения) и андрогены, флутамид, лейпрорелин, гозерелин, ципротрон или октреотид;f) hormones and hormone agonists or antagonists such as estrogens, antiestrogens (tamoxifen and related compounds) and androgens, flutamide, leuprorelin, goserelin, cyprotron or octreotide;

g) лекарства, нацеленные на трансдукцию сигнала в опухолевых клетках, включая производные антител, такие как герцептин;g) drugs aimed at signal transduction in tumor cells, including antibody derivatives such as herceptin;

h) алкилирующие лекарственные средства, такие как лекарства на основе платины (цис-платин, карбонплатин, оксалиплатин, параплатин) или нитрозомочевины;h) alkylating drugs, such as platinum-based drugs (cis-platinum, carbonplatinum, oxaliplatin, paraplatin) or nitrosoureas;

i) лекарственные средства, потенциально воздействующие на метастазы опухолей, такие как ингибиторы матриксной металлопротеиназы;i) drugs potentially affecting tumor metastases, such as matrix metalloproteinase inhibitors;

j) средства геновой терапии и антисенсорные средства;j) gene therapy and antisensory agents;

k) терапевтические средства на основе антител; иk) antibody based therapeutics; and

l) другие биологически активные соединения морского происхождения, особенно эктеинасцидины, такие как ЕТ-743.l) other biologically active compounds of marine origin, especially ecteinascidins, such as ET-743.

Один из аспектов настоящего изобретения касается соединений формулы:One aspect of the present invention relates to compounds of the formula:

где:Where:

Х независимо означает -C(R)₂-, -O-, -S- или -NR-, где R независимо означает Н или органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы и их замещенных производных, которые замещены одной или более гетероциклической группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, необязательно защищенной аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;X independently means —C (R) ₂ -, —O—, —S— or —NR—, where R independently means H or an organic group selected from an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group and substituted derivatives thereof, which are substituted by one or more heterocyclic group, alkoxy group, hydroxy group, mercapto group, optionally protected amino group, guanidino group or halogen group;

Х₂ независимо означает CR, О (и R₂ отсутствует), S (и R₂ отсутствует) или N, где R независимо означает Н или органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы и их замещенных производных, которые замещены одной или более гетероциклической группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, необязательно защищенной аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;X ₂ independently means CR, O (and R _{2 is} absent), S (and R _{2 is} absent) or N, where R independently means H or an organic group selected from an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group and substituted derivatives thereof which are substituted by one or more heterocyclic group, alkoxy group, hydroxy group, mercapto group, optionally protected by an amino group, guanidino group or a halogen group;

Y означает -(COR')_nCO-, где n равно 0 или 1 и R' означает органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы и их замещенных производных, которые замещены одной или более гетероциклической группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, необязательно защищенной аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;Y is - (COR ′) _n CO—, where n is 0 or 1 and R ′ is an organic group selected from an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group and substituted derivatives thereof, which are substituted with one or more heterocyclic groups, an alkoxy group, a hydroxy group, a mercapto group, an optionally protected amino group, a guanidino group or a halogen group;

X₁ означает О или S;X ₁ means O or S;

каждый из R₁, R₂ и R₄ независимо означает Н или органическую группу, выбранную из амидогруппы RCONH- или ацильной группы RCO-, где R означает, как указано, алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу и замещенные производные, которые замещены одной или более гетероциклической группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, необязательно защищенной аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой, и R₁ или R₂, когда Х₂ означает N, и R₄ дополнительно могут означать -SO₂R, где R принимает вышеуказанные значения;each of R ₁ , R ₂ and R ₄ independently means H or an organic group selected from an amido group of RCONH - or an acyl group of RCO -, where R means, as indicated, an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group and substituted derivatives, which are substituted by one or more heterocyclic group, alkoxy group, hydroxy group, mercapto group, optionally protected amino group, guanidino group or halogen group, and R ₁ or R ₂ when X ₂ means N, and R ₄ may additionally mean -SO ₂ R, where R accepts above signs cheniya;

или R₁ и R₂ могут образовывать с Х₂ необязательно N-замещенный пролин, N-замещенный пролин аа8 имеет формулуor R ₁ and R ₂ can form optionally N-substituted proline with X ₂ , N-substituted proline aa8 has the formula

где R₃ независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы RSO₂- или ацильной группы RCO-, где R принимает указанные значения, или R₃ означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу и замещенные производные, которые замещены одной или более карбонильной группой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, необязательно защищенной аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;where R ₃ independently means H or an organic group selected from the group RSO ₂ - or an acyl group RCO-, where R is as defined herein, or R ₃ is an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group and substituted derivatives that are substituted with one or more a carbonyl group, a hydroxy group, a mercapto group, an optionally protected amino group, a guanidino group or a halogen group;

или R₁ и R₂ могут образовывать с Х₂ циклоалкильную, арильную или гетероциклическую группу, необязательно замещенную одной или более группами R₃;or R ₁ and R ₂ may form, with X _{2, a} cycloalkyl, aryl or heterocyclic group optionally substituted with one or more R ₃ groups;

или R₁, R₂, Х₂, R₄ и азот, несущий R₄, могут образовывать оксадиазаспироалкан, N-замещенный группой R₅, где R₅ независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы RSO₂- или ацильной группы RCO-, где R означает, как указано, алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и замещенные производные, которые замещены одной или более карбонильной группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;or R ₁ , R ₂ , X ₂ , R _4, and nitrogen carrying R ₄ can form an oxadiazaspiroalkane N-substituted with an R ₅ group, where R ₅ independently is H or an organic group selected from the RSO ₂ - or RCO acyl group -, where R means, as indicated, an alkyl group, an aryl group, an aralkyl group and substituted derivatives which are substituted by one or more carbonyl group, alkoxy group, hydroxy group, mercapto group, amino group, guanidino group or halogen group;

или аа8 является замещенным органической группой, выбранной из группы RSO₂- или ацильной группы RCO-, где R означает, как указано, алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и замещенные производные, которые замещены одной или более карбонильной группой, алкоксигруппой, гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой или галогеновой группой;or aa8 is a substituted organic group selected from the group RSO ₂ - or an acyl group RCO-, where R is, as indicated, an alkyl group, an aryl group, an aralkyl group and substituted derivatives which are substituted by one or more carbonyl group, alkoxy group, hydroxy group, a mercapto group, amino group, guanidino group or halogen group;

и их фармацевтически приемлемых солей.and their pharmaceutically acceptable salts.

Предпочтительные соединения включают те соединения, в которых Х означает -NR-, где R принимает указанные значения. Более предпочтительно, Х означает -NH- или -NMe-, и наиболее желательно, чтобы Х означал -NH-.Preferred compounds include those in which X is —NR—, where R is as defined. More preferably, X is —NH— or —NMe— and most preferably X is —NH—.

Другие предпочтительные соединения включают те соединения, в которых Х означает -О-.Other preferred compounds include those in which X is —O—.

Группа Y предпочтительно означает -COR'CO-, где R₁ означает алкильную группу, в особенности, где R' означает -СНСН₃-.The Y group preferably means —COR′CO—, where R ₁ is an alkyl group, in particular where R ′ is —CHCH ₃ -.

Другие предпочтительные соединения включают те соединения, в которых Y означает -СО-.Other preferred compounds include those compounds in which Y is —CO—.

Ввиду указанных предпочтений предпочтительным классом соединений является тот класс, где Х означает - -NH- или -О- и Y означает -СОСНСН₃СО- или -СО-.In view of these preferences, a preferred class of compounds is that class where X is —NH— or —O— and Y is —CHCHCH ₃ CO— or —CO—.

Предпочтительно R₄ означает метил.Preferably R ₄ is methyl.

Предпочтительно X₁ означает =O.Preferably X ₁ means = O.

Предпочтительно X₂R₁ означает необязательно замещенную аралкилоксигруппу, такую как бензилоксигруппу.Preferably, X ₂ R ₁ is an optionally substituted aralkyloxy group, such as a benzyloxy group.

Другие предпочтительные соединения включают те соединения, в которых X₂R₁ означает необязательно замещенную аминогруппу, более предпочтительно, те, в которых X₂R₁ означает группу -NHR₁, где R₁ означает необязательно замещенную алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу или аралкильную группу, в особенности, алкильную группу или арильную группу, такую как фенильная группа или бутильная группа.Other preferred compounds include those compounds in which X ₂ R ₁ is an optionally substituted amino group, more preferably those in which X ₂ R ₁ is an —NHR ₁ group, where R ₁ is an optionally substituted alkyl group, alkenyl group, aryl group, or an aralkyl group, in particular an alkyl group or an aryl group, such as a phenyl group or a butyl group.

Дополнительные предпочтительные соединения включают те соединения, в которых X₂R₁ означает необязательно замещенную алкильную группу, в особенности, где X₂R₁ означает пропильную группу, изопропильную группу, пентильную группу или группу биотина.Additional preferred compounds include those compounds in which X ₂ R ₁ means an optionally substituted alkyl group, in particular where X ₂ R ₁ means a propyl group, an isopropyl group, a pentyl group or a biotin group.

Группу предпочтительных соединений представляют те соединения, в которых -C(=X₂)R₁R₂ образует необязательно замещенную ацильную группу аминокислоты. Подходящей необязательно замещенной ацильной группой аминокислоты является необязательно замещенный пролин или необязательно замещенный глицин, или необязательно замещенный валин, и, более конкретно, необязательно замещенный пролин означает необязательно замещенный норвалинпролин, необязательно замещенный аланинпролин, Вос-пролин, необязательно замещенный алкилпролин, или необязательно замещенный глицин означает гетероциклически замещенный глицин, или необязательно замещенный валин означает валин, Вос-валин или алкилвалин. Предпочтительно необязательно замещенный пролин означает норвалинпролин, Z-норвалинпролин, аланинпролин, Z-аланинпролин, Вос-аланинпролин, изобутирилпролин или необязательно защищенный D-лактилпролин, или гетероциклически замещенный глицин означает кумаринилглицин, или необязательно замещенный валин означает валин, Вос-валин или изобутирилвалин.A group of preferred compounds are those compounds in which —C (= X ₂ ) R ₁ R ₂ forms an optionally substituted acyl group of an amino acid. A suitable optionally substituted acyl group of an amino acid is optionally substituted proline or optionally substituted glycine, or optionally substituted valine, and more specifically, optionally substituted proline means optionally substituted norvalineproline, optionally substituted alanineproline, Boc-proline, optionally substituted alkylproline, or optionally substituted glycine means heterocyclic substituted glycine, or optionally substituted valine, means valine, Boc-valine or alkyl valine. Preferably, the optionally substituted proline means norvaline proline, Z-norvaline proline, alanine proline, Z-alanine proline, Boc-alanine proline, isobutyryl proline or optionally protected D-lactylproline, or heterocyclic substituted glycine means coumarin glycine, or optionally substituted valine valine or valine valine.

Еще одна группа предпочтительных соединений включает те соединения, в которых X₁ означает S и X₂R₁ означает группу -NHR₁, где R₁ означает необязательно замещенную алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу или аралкильную группу. R₁ предпочтительно означает алкильную группу или арильную группу, более желательно, фенильную группу или бутильную группу.Another group of preferred compounds includes those compounds in which X ₁ is S and X ₂ R ₁ is an —NHR ₁ group, where R ₁ is an optionally substituted alkyl group, alkenyl group, aryl group or an aralkyl group. R ₁ preferably means an alkyl group or an aryl group, more preferably a phenyl group or a butyl group.

R₁ и R₂ могут образовывать с X₂ гетероциклическую группу, необязательно замещенную одной или более группами R₃. Например, гетероциклической группой может быть кумарин.R ₁ and R ₂ can form a heterocyclic group with X ₂ , optionally substituted with one or more R ₃ groups. For example, a heterocyclic group may be coumarin.

Предпочтительные соединения включают те соединения, в которых аа8 замещен органической группой RSO₂-, где R принимает указанные значения, такие как метил.Preferred compounds include those in which aa8 is substituted with an organic group RSO ₂ -, where R is as defined, such as methyl.

R₁, R₂, X₂, R₄ и несущий R₄ азот могут образовывать оксадиазаспироалкан, N-замещенный R₅, где R₅ означает Н. N-замещенный оксадиазаспироалкан предпочтительно означает 6-окса-1,7-диазаспиро[4,4]нонан.R ₁ , R ₂ , X ₂ , R ₄ and nitrogen bearing R ₄ can form an oxadiazaspiroalkane, N-substituted by R ₅ , where R ₅ is H. N-substituted oxadiazaspiroalkane preferably means 6-oxa-1,7-diazaspiro [4, 4] nonan.

Примеры соединений по настоящему изобретению включают:Examples of compounds of the present invention include:

3-[Aip]-Z-дидемнин А,3- [Aip] -Z-didemnin A,

8-[фенилмочевина]дидемнин А,8- [phenylurea] didemnin A,

8-[бутилмочевина]дидемнин А,8- [butylurea] didemnin A,

3-[val]-8-[изобутирил]аплидин,3- [val] -8- [isobutyryl] aplidine,

9-[норвалин]аплидин,9- [norvaline] aplidine,

3-[Hiv]-9-[изобутирил]аплидин,3- [Hiv] -9- [isobutyryl] aplidine,

3-[Val]-9-[изобутирил]аплидин,3- [Val] -9- [isobutyryl] aplidine,

3-[hiv]-8-[изобутирил]дидемнин А,3- [hiv] -8- [isobutyryl] didemnin A,

3-[Hiv]-9-[Ala]аплидин,3- [Hiv] -9- [Ala] aplidine,

3-[Hiv]-9-[Nva]аплидин,3- [Hiv] -9- [Nva] aplidine,

8-[фенилтиомочевина]дидемнин А,8- [phenylthiourea] didemnin A,

8-[кумарин]дидемнин А,8- [coumarin] didemnin A,

8-[бутилтиомочевина]дидемнин А,8- [butylthiourea] didemnin A,

3-[Hiv]-9-[D-Lac]аплидин,3- [Hiv] -9- [D-Lac] aplidine,

8-[метилсульфонил]дидемнин А,8- [methylsulfonyl] didemnin A,

3-[val]-Z-дидемнин А,3- [val] -Z-didemnin A,

3-[Hiv]-8-[Val]дидемнин А,3- [Hiv] -8- [Val] didemnin A,

3-[Hiv]-8-[бутирил]аплидин,3- [Hiv] -8- [butyryl] aplidine,

3-[val]дидемнин А,3- [val] didemnin A,

3-[Hiv]дидемнин А,3- [Hiv] didemnin A,

Z-дидемнин А,Z-didemnin A,

9-[Z-Nva]аплидин,9- [Z-Nva] aplidine,

3-[Hiv]-9-[Z-ala]аплидин,3- [Hiv] -9- [Z-ala] aplidine,

8-[Gly]-9-[кумарин]дидемнин А,8- [Gly] -9- [coumarin] didemnin A,

8-[биотин]дидемнин А,8- [biotin] didemnin A,

3-[Hiv]-7,8-[спиро]-9-[Boc]аплидин,3- [Hiv] -7.8- [spiro] -9- [Boc] aplidine,

3-[Hiv]-Z-дидемнин А,3- [Hiv] -Z-didemnin A,

3-[Hiv]-9-[Z-Nva]аплидин,3- [Hiv] -9- [Z-Nva] aplidine,

7,8-[спиро]-9-[pyr]аплидин,7.8- [spiro] -9- [pyr] aplidine,

3-[Hiv]-9-[lac(OTBDMS)]аплидин,3- [Hiv] -9- [lac (OTBDMS)] aplidine,

3-[Hiv]-9-[Boc-Ala]аплидин,3- [Hiv] -9- [Boc-Ala] aplidine,

7,8-[спиро]-9-[Boc]аплидин,7.8- [spiro] -9- [Boc] aplidine,

3-[Hiv]-8-[Boc-Val]аплидин,3- [Hiv] -8- [Boc-Val] aplidine,

8-[Val]-9-[изобутирил]дидемнин А,8- [Val] -9- [isobutyryl] didemnin A,

3-[Hiv]-8-[гексаноил]дидемнин А,3- [Hiv] -8- [hexanoyl] didemnin A,

3-[Val]-9-[Lac(OTBDMS)]аплидин,3- [Val] -9- [Lac (OTBDMS)] aplidine,

3-[Aip]дидемнин А,3- [Aip] didemnin A,

3-[Hiv]-9-[D-Lac(OTBDMS)]аплидин,3- [Hiv] -9- [D-Lac (OTBDMS)] aplidine,

7,8-[спиро]-9-[изобутирил]аплидин,7.8- [spiro] -9- [isobutyryl] aplidine,

3-[Hiv]-7,8-[спиро]-9-(Pyr]аплидин,3- [Hiv] -7.8- [spiro] -9- (Pyr] aplidine,

3-[Hiv]-7,8-[спиро]-9-[изобутирил]аплидин,3- [Hiv] -7.8- [spiro] -9- [isobutyryl] aplidine,

3-[Hiv]-7,8-[спиро]-9-[акрилоил]аплидин или3- [Hiv] -7.8- [spiro] -9- [acryloyl] aplidine or

[Aip]³-аплидин.[Aip] ^3- aplidine.

Настоящее изобретение касается также соединений, имеющих следующие формулы:The present invention also relates to compounds having the following formulas:

и родственных структур.and related structures.

По одному из особенно предпочтительных вариантов выполнения настоящее изобретение касается способа синтеза с образованием аа3 = [Hiv]³ или [Val]³, либо [Aip]³, являющихся составной частью ряда чрезвычайно эффективных и редких противоопухолевых средств, разработанных и заявленных для клинических испытаний, после того, как они стали доступными в адекватных количествах, и их простейших изомеров, в которых переставлены аминокислотные остатки. Указанный способ является энантио- и стереорегулируемым и быстрым, обладающим преимуществами стандартных способов методик синтеза в фазе раствора.In one particularly preferred embodiment, the present invention relates to a synthesis method with the formation of aa3 = [Hiv] ³ or [Val] ³ or [Aip] ³ , which are an integral part of a number of extremely effective and rare antitumor agents developed and claimed for clinical trials, after they have become available in adequate amounts, and their simplest isomers, in which the amino acid residues are rearranged. The specified method is enantio- and stereo-adjustable and fast, with the advantages of standard methods of synthesis methods in the solution phase.

Предпочтительный вариант настоящего изобретения описывается формулой I, где аа3 независимо означают α-аминокислоты L или D конфигурации. Если используется, Х независимо означает -С(R)₂-, О, S или NR; где R независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы, включающей алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и их производные, замещенные гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой, галогеновой группой. Где R наиболее предпочтительно содержит приблизительно от 1 до 12 атомов углерода, более предпочтительно, приблизительно от 1 до 8 атомов углерода и, еще более желательно, приблизительно от 1 до 6 атомов углерода, наиболее предпочтительно, 1, 2, 3 или 4 атома углерода. Метил, этил и пропил, включая изопропил, являются особенно предпочтительными алкильными группами в соединениях по настоящему изобретению. Где аа3 наиболее предпочтительно означает α-(α'-гидроксиизовалерил)пропионил (Hip), (X=О, Y=-СОСНСН₃СО-) - серию А, или α-(α'-аминоизовалерил)пропионил (Aip) (X=NH, Y=-СОСНСН₃СО-) - серию N или валин (X=NH, Y=-СО-) - серию V, или α-гидроксиизовалерил (X=-O-, Y=-СО-) - серию Н, или N-метилвалин (X=NMe, Y=-СО-) - серию М. Где аа8 независимо означают α-аминокислоты L или D конфигурации, если используются; где X₂ независимо означает CR, О, S или N,A preferred embodiment of the present invention is described by Formula I, wherein aa3 independently represent α-amino acids of L or D configuration. If used, X independently means —C (R) ₂ -, O, S or NR; where R independently means H or an organic group selected from the group consisting of an alkyl group, an aryl group, an aralkyl group and derivatives thereof substituted with a hydroxy group, a mercapto group, an amino group, a guanidino group, a halogen group. Wherein R most preferably contains from about 1 to 12 carbon atoms, more preferably from about 1 to 8 carbon atoms and, even more preferably, from about 1 to 6 carbon atoms, most preferably 1, 2, 3 or 4 carbon atoms. Methyl, ethyl and propyl, including isopropyl, are particularly preferred alkyl groups in the compounds of the present invention. Where aa3 most preferably means α- (α'-hydroxyisovaleryl) propionyl (Hip), (X = O, Y = -COCHCH ₃ CO-) - series A, or α- (α'-aminoisovaleryl) propionyl (Aip) (X = NH, Y = -ССОСН ₃ СО-) - series N or valine (X = NH, Y = -СО-) - series V, or α-hydroxyisovaleryl (X = -O-, Y = -СО-) - series H, or N-methylvaline (X = NMe, Y = —CO—) —M series. Where aa8 independently mean α-amino acids of the L or D configuration, if used; where X ₂ independently means CR, O, S or N,

где R независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы, включающей алкенил, алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и их производные, замещенные гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой, галогеновой группой, где каждый из R₁, R₂, R₃ и R₄ независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы, включающей алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и их производные, замещенные гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой, галогеновой группой. Аа8 может также быть пролиновым остатком, как в формуле II. Где R₃ независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы, включающей алкильную группу, арильную группу, аралкильную группу и их производные, замещенные гидроксигруппой, меркаптогруппой, аминогруппой, гуанидиногруппой, галогеновой группой.where R independently means H or an organic group selected from the group consisting of alkenyl, alkyl group, aryl group, aralkyl group and derivatives thereof substituted with hydroxy group, mercapto group, amino group, guanidino group, halogen group, where each of R ₁ , R ₂ , R ₃ and R ₄ independently mean H or an organic group selected from the group consisting of an alkyl group, an aryl group, an aralkyl group and derivatives thereof substituted with a hydroxy group, a mercapto group, an amino group, a guanidino group, a halogen group. Aa8 may also be a proline residue, as in formula II. Wherein R ₃ independently means H or an organic group selected from the group consisting of an alkyl group, an aryl group, an aralkyl group and derivatives thereof substituted with a hydroxy group, mercapto group, amino group, guanidino group, halogen group.

Где R₃ наиболее предпочтительно может означать пировиноградную кислоту, аралкилоксикарбонильную группу или аминокислоту, либо пептиды. Алкильные группы предпочтительно имеют приблизительно от 1 до 12 атомов углерода, более предпочтительно, приблизительно от 1 до 8 атомов углерода, еще более желательно, приблизительно от 1 до 6 атомов углерода, и, наиболее предпочтительно, 1, 2, 3 или 4 атома углерода. Метил, этил и пропил, включая изопропил, являются особенно предпочтительными алкильными группами в соединениях по настоящему изобретению. Как использовано здесь, термин алкил, если не указано особо, относится как к циклическим, так и нециклическим группам, если даже циклические группы состоят, по меньшей мере, из трех углеродных членов цикла. Предпочтительные аминокислоты означают защищенный или незащищенный D или L глицин, валин, лейцин, изолейцин, фенилаланин, тирозин, триптофан, метионин, цистеин, аспартат, аспарагин, глутаминовую кислоту, глутамин, лизин, аргинин, пролин, серин, треонин, гистидин и гидроксипролин. Предпочтительные пептиды могут быть составлены из вышеуказанных аминокислот.Wherein R _{3 can} most preferably be pyruvic acid, an aralkyloxycarbonyl group or amino acid, or peptides. Alkyl groups preferably have from about 1 to 12 carbon atoms, more preferably from about 1 to 8 carbon atoms, even more preferably from about 1 to 6 carbon atoms, and most preferably 1, 2, 3 or 4 carbon atoms. Methyl, ethyl and propyl, including isopropyl, are particularly preferred alkyl groups in the compounds of the present invention. As used here, the term alkyl, unless otherwise indicated, refers to both cyclic and non-cyclic groups, even if cyclic groups consist of at least three carbon members of the cycle. Preferred amino acids are protected or unprotected D or L glycine, valine, leucine, isoleucine, phenylalanine, tyrosine, tryptophan, methionine, cysteine, aspartate, asparagine, glutamic acid, glutamine, lysine, arginine, proline, serine, threonine, histroline and. Preferred peptides may be composed of the above amino acids.

Кроме того, аа8 и R₄ могут быть связаны через производные 6-оксо-1,7-диазаспиро[4,4]нонана структуры:In addition, aa8 and R ₄ can be linked via derivatives of 6-oxo-1,7-diazaspiro [4,4] nonane structures:

где R₅ наиболее предпочтительно может означать пировиноградную кислоту, аралкилоксикарбонильную группу или аминокислоту, либо пептиды. Алкильные группы предпочтительно имеют приблизительно от 1 до 12 атомов углерода, более предпочтительно, приблизительно от 1 до 8 атомов углерода, еще более желательно, приблизительно от 1 до 6 атомов углерода, и, наиболее предпочтительно, 1, 2, 3 или 4 атома углерода. Метил, этил и пропил, включая изопропил, являются особенно предпочтительными алкильными группами в соединениях по настоящему изобретению. Как использовано здесь, термин алкил, если не указано особо, относится как к циклическим, так и нециклическим группам, если даже циклические группы состоят, по меньшей мере, из трех углеродных членов цикла. Предпочтительные аминокислоты означают защищенный или незащищенный D или L-глицин, валин, лейцин, изолейцин, фенилаланин, тирозин, триптофан, метионин, цистеин, аспартат, аспарагин, глутаминовую кислоту, глутамин, лизин, аргинин, пролин, серин, треонин, гистидин и гидроксипролин. Предпочтительные пептиды могут быть составлены из вышеуказанных аминокислот.where R ₅ most preferably may mean pyruvic acid, an aralkyloxycarbonyl group or amino acid, or peptides. Alkyl groups preferably have from about 1 to 12 carbon atoms, more preferably from about 1 to 8 carbon atoms, even more preferably from about 1 to 6 carbon atoms, and most preferably 1, 2, 3 or 4 carbon atoms. Methyl, ethyl and propyl, including isopropyl, are particularly preferred alkyl groups in the compounds of the present invention. As used here, the term alkyl, unless otherwise indicated, refers to both cyclic and non-cyclic groups, even if cyclic groups consist of at least three carbon members of the cycle. Preferred amino acids are protected or unprotected D or L-glycine, valine, leucine, isoleucine, phenylalanine, tyrosine, tryptophan, methionine, cysteine, aspartate, asparagine, glutamic acid, glutamine, lysine, arginine, proline, serine, threonine, histroline and . Preferred peptides may be composed of the above amino acids.

Как использовано здесь, термин "органическая группа" означает углеводородную группу, подразделяемую на алифатическую группу, циклическую группу или комбинацию из алифатической и циклической групп (например, аралкильные группы). В контексте настоящего изобретения, термин "алифатическая группа" означает насыщенный или ненасыщенный линейный или разветвленный углеводород. Указанный термин используется, например, как охватывающий алкильную, алкенильную и алкинильную группы. Термин "алкильная группа" означает насыщенную линейную или разветвленную углеводородную группу, включающую, например, метил, этил, изопропил, изобутил, трет-бутил, гептил, додецил, октадецил, амил, 2-этилгексил, 2-метилбутил, 5-метилгексил и тому подобные. Термин "алкенильная группа" означает ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную группу с одной или более двойными углерод-углеродными связями, такую как винильная группа. Термин "алкинильная группа" означает ненасыщенную, линейную или разветвленную углеводородную группу с одной или более тройными углерод-углеродными связями. Термин "циклическая группа" означает замкнутую в кольцо углеводородную группу, подразделяемую на алициклическую группу, ароматическую группу или гетероциклическую группу. Термин "алициклическая группа" означает циклическую углеводородную группу, обладающую характеристиками, придающими ей сходство с алифатическими группами. Термин "ароматическая группа" или "арильная группа" означает моно- или полициклическую ароматическую углеводородную группу. Термин "гетероциклическая группа" означает замкнутую в кольцо углеводородную группу, в которой один или более атомов цикла означают элемент, отличный от углерода (например, азот, кислород, серу и т.д.).As used here, the term "organic group" means a hydrocarbon group, divided into an aliphatic group, a cyclic group or a combination of aliphatic and cyclic groups (for example, aralkyl groups). In the context of the present invention, the term “aliphatic group” means a saturated or unsaturated linear or branched hydrocarbon. The term is used, for example, as encompassing alkyl, alkenyl and alkynyl groups. The term “alkyl group” means a saturated linear or branched hydrocarbon group including, for example, methyl, ethyl, isopropyl, isobutyl, tert-butyl, heptyl, dodecyl, octadecyl, amyl, 2-ethylhexyl, 2-methylbutyl, 5-methylhexyl and the like like that. The term “alkenyl group” means an unsaturated, linear or branched hydrocarbon group with one or more carbon-carbon double bonds, such as a vinyl group. The term "alkynyl group" means an unsaturated, linear or branched hydrocarbon group with one or more triple carbon-carbon bonds. The term “cyclic group” means a ring-closed hydrocarbon group, subdivided into an alicyclic group, an aromatic group or a heterocyclic group. The term "alicyclic group" means a cyclic hydrocarbon group having characteristics that make it similar to aliphatic groups. The term “aromatic group” or “aryl group” means a mono- or polycyclic aromatic hydrocarbon group. The term “heterocyclic group” means a ring-closed hydrocarbon group in which one or more atoms of the cycle mean an element other than carbon (for example, nitrogen, oxygen, sulfur, etc.).

Предпочтительные алкоксигруппы в соединениях по настоящему изобретению включают группы, имеющие один или более кислородных мостиков и приблизительно от 1 до 12 атомов углерода, более предпочтительно, приблизительно от 1 до 8 атомов углерода, еще желательней, приблизительно от 1 до 6 атомов углерода, и наиболее предпочтительно 1, 2, 3 или 4 атомов углерода.Preferred alkoxy groups in the compounds of the present invention include groups having one or more oxygen bridges and from about 1 to 12 carbon atoms, more preferably from about 1 to 8 carbon atoms, even more preferably from about 1 to 6 carbon atoms, and most preferably 1, 2, 3 or 4 carbon atoms.

Подходящие гетероароматические группы в соединениях по настоящему изобретению содержат один, два или три гетероатома, выбранных из атомов N, О или S, и включают, например, кумаринил, включая 8-кумаринил, хинолинил, включая 8-хинолинил, пиридил, пиразинил, пиримидил, фурил, пирролил, тиенил, тиазолил, оксазолил, имидазолил, индолил, бензофуранил и бензотиазол. Подходящие гетероалициклические группы в соединениях по настоящему изобретению содержат один, два или три гетероатома, выбранных из атомов N, О или S, и включают, например, группы: тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, пиперидинил, морфолино и пирролидинил.Suitable heteroaromatic groups in the compounds of the present invention contain one, two or three heteroatoms selected from N, O or S atoms, and include, for example, coumarin, including 8-coumarin, quinolinyl, including 8-quinolinyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidyl, furyl, pyrrolyl, thienyl, thiazolyl, oxazolyl, imidazolyl, indolyl, benzofuranyl and benzothiazole. Suitable heteroalicyclic groups in the compounds of the present invention contain one, two or three heteroatoms selected from N, O or S atoms, and include, for example, tetrahydrofuranyl, tetrahydropyranyl, piperidinyl, morpholino and pyrrolidinyl groups.

Подходящие карбоциклические арильные группы в соединениях по настоящему изобретению включают одно- или полиядерные соединения, включающие полиядерные соединения, которые содержат отдельные и/или конденсированные арильные группы. Типичные карбоциклические арильные группы содержат 1-3 отдельных или конденсированных цикла и приблизительно от 1 до 18 атомов углерода в цикле. В особенности предпочтительные карбоциклические арильные группы включают фенил, включая замещенный фенил, такой как 2-замещенный фенил, 3-замещенный фенил, 2,3-замещенный фенил, 2,5-замещенный фенил, 2,3,5-замещенный и 2,4,5-замещенный фенил, где один или более фенильных заместителей означают электронопритягивающую группу, такую как галоген, циано, нитро, алаканоил, сульфинил, сульфонил и тому подобные; нафтил, включая 1-нафтил и 2-нафтил; дифенил; фенантрил и антрацил.Suitable carbocyclic aryl groups in the compounds of the present invention include mononuclear or polynuclear compounds, including polynuclear compounds that contain single and / or fused aryl groups. Typical carbocyclic aryl groups contain 1-3 individual or fused rings and from about 1 to 18 carbon atoms in the ring. Particularly preferred carbocyclic aryl groups include phenyl, including substituted phenyl, such as 2-substituted phenyl, 3-substituted phenyl, 2,3-substituted phenyl, 2,5-substituted phenyl, 2,3,5-substituted and 2,4 , 5-substituted phenyl, where one or more phenyl substituents represent an electron-attracting group such as halogen, cyano, nitro, alacanoyl, sulfinyl, sulfonyl and the like; naphthyl, including 1-naphthyl and 2-naphthyl; diphenyl; phenanthryl and anthracyl.

Необязательно защищенные аминогруппы могут быть защищены с применением известных для указанной цели групп. Подходящие защитные группы для аминов включают карбаматы, амиды и другие защитные группы, такие как алкил-, арилалкил-; сульфо- или галоген- арилалкил-; галогеналкил-, алкилсилилалкил-, арилалкил-, циклоалкилалкил-, алкиларилалкил-, гетероциклоалкил-, нитроарилалкил-, ациламиноалкил-, нитроарилдитиоарилалкил-, дициклоалкилкарбоксамидоалкил-, циклоалкил-, алкенил-, арилалкенил-, нитроарилалкенил-, гетероциклоалкенил-, гетероцикло-, гидроксигетероцикло-, алкилдитио-; алкокси- или галоген-, или алкилсульфиниларилалкил; гетероциклоацил- и другие карбаматы, и алаканоил-, галогеналаканоил-, арилалаканоил-, алкеноил-, гетероциклоацил-, ароил-, арилароил-, галогенароил-, нитроароил- и другие амиды, а также алкил, алкенил, алкилсилилалкоксиалкил, алкоксиалкил, цианоалкил, гетероциклический, алкоксиарилалкил, циклоалкил, нитроарил, арилалкил, алкокси- или гидроксиарилалкил и многие другие группы. Такие группы могут быть необязательно замещены вышеуказанными замещающими группами.Optionally protected amino groups may be protected using groups known for the indicated purpose. Suitable protecting groups for amines include carbamates, amides, and other protecting groups such as alkyl, arylalkyl; sulfo- or halo-arylalkyl-; haloalkyl, alkilsililalkil-, arylalkyl, tsikloalkilalkil-, alkilarilalkil-, heterocycloalkyl-, nitroarilalkil-, atsilaminoalkil-, nitroarilditioarilalkil-, ditsikloalkilkarboksamidoalkil-, cycloalkyl, alkenyl, arylalkenyl-, nitroarilalkenil-, geterotsikloalkenil-, heterocyclo, gidroksigeterotsiklo- alkyldithio; alkoxy- or halogen- or alkylsulfinylarylalkyl; heterocycloacyl- and other carbamates, and alacanoyl-, haloalacanoyl-, arylalacanoyl-, alkenoyl-, heterocycloacyl-, aroyl-, arylaroyl-, halogenaroyl-, nitroaroyl-, alkyloalkylalkylalkylalkylalkylalkylalkyl , alkoxyarylalkyl, cycloalkyl, nitroaryl, arylalkyl, alkoxy or hydroxyarylalkyl and many other groups. Such groups may be optionally substituted with the above substituent groups.

При ссылке здесь на замещенные группы в соединениях по настоящему изобретению имеется в виду конкретный радикал, который может быть замещен по одному или более имеющимся положениям одной или более подходящими группами, например, галогеном, таким как фтор, хлор, бром и иод; циано; гидроксилом; нитро; азидо; алаканоилом, таким как С1-6 алканоильная группа, такая как ацил и тому подобные; карбоксамидо; алкильными группами, включая алкильные группы приблизительно с 1-12 атомами углерода или 1-6 атомами углерода, и более предпочтительно, 1-3 атомами углерода; алкенильной или алкинильной группами, включая группы, имеющие одну или более ненасыщенных связей и приблизительно 2-12 углеродных или 2-6 углеродных атомов; алкоксигруппами, включая указанные группы, имеющие один или более кислородных мостиков и приблизительно 1-12 атомов углерода или 1-6 атомов углерода; арилокси, таким как фенокси; алкилтиогруппами, включая указанные группы, имеющие одну или более простых тиоэфирных связей и приблизительно 1-12 атомов углерода или 1-6 атомов углерода; алкилсульфинильными группами, включая указанные радикалы, имеющие одну или более сульфинильных связей и приблизительно 1-12 атомов углерода или 1-6 атомов углерода; алкилсульфинильными группами, включая указанные радикалы, имеющие одну или более сульфонильных связей и приблизительно 1-12 атомов углерода или 1-6 атомов углерода; аминоалкильными группами, такими как группы, имеющие один или более атомов N и приблизительно 1-12 атомов углерода или 1-6 атомов углерода; карбоциклоарилом с 6 или более атомами, в частности, фенилом (например, R является замещенным или незамещенным дифенильным радикалом); и аралкилом, таким как бензил.When referring here to substituted groups in the compounds of the present invention, a specific radical is meant which may be substituted at one or more existing positions by one or more suitable groups, for example, halogen such as fluorine, chlorine, bromine and iodine; cyano; hydroxyl; nitro; azido; alacanoyl, such as a C1-6 alkanoyl group, such as acyl and the like; carboxamido; alkyl groups, including alkyl groups with about 1-12 carbon atoms or 1-6 carbon atoms, and more preferably 1-3 carbon atoms; alkenyl or alkynyl groups, including groups having one or more unsaturated bonds and about 2-12 carbon or 2-6 carbon atoms; alkoxy groups, including these groups having one or more oxygen bridges and about 1-12 carbon atoms or 1-6 carbon atoms; aryloxy such as phenoxy; alkylthio groups, including these groups having one or more simple thioether bonds and about 1-12 carbon atoms or 1-6 carbon atoms; alkylsulfinyl groups, including these radicals having one or more sulfinyl bonds and about 1-12 carbon atoms or 1-6 carbon atoms; alkylsulfinyl groups, including these radicals having one or more sulfonyl bonds and about 1-12 carbon atoms or 1-6 carbon atoms; aminoalkyl groups, such as groups having one or more N atoms and about 1-12 carbon atoms or 1-6 carbon atoms; carbocycloaryl with 6 or more atoms, in particular phenyl (for example, R is a substituted or unsubstituted diphenyl radical); and aralkyl, such as benzyl.

Как хорошо известно из данной области техники, высокая степень замещения не только допустима, но часто целесообразна. Соединения согласно настоящему изобретению могут быть замещены. В целях упрощения терминологии, используемой в данном описании, термины "группа" и "радикал" применяются для того, чтобы различать химические группы, предусмотренные для замещения или которые могут быть замещены, и соответствующие группы, для которых не предусматривается замещение или которые могут не быть замещенными таким образом. Таким образом, в случае использования термина "группа" для описания химического заместителя подразумевается незамещенная группа и эта группа с атомами О, N или S, например, в цепи, а также как карбонильная группа или другое стандартное замещение. Когда используют термин "радикал" для описания химического соединения или заместителя, подразумевается, что он включает только незамещенную химическую структуру. Например, подразумевается, что выражение "алкильная группа" включает не только насыщенные углеводородные алкильные заместители с полностью открытой цепью, такие метил, этил, пропил, изобутил и тому подобные, но также алкильные заместители, несущие дополнительные заместители, известные из уровня техники, такие как гидрокси, алкокси, амино, карбоксил, карбоксамидо, атомы галогенов, циано, нитро, алкилсульфонил и так далее. Таким образом, "алкильная группа" включает простые эфирные группы, галогеналкилы, спирты, тиолы, карбоксил, амины, гидроксиалкилы, сульфоалкилы и так далее. С другой стороны, выражение "алкильный радикал" ограничивается включением только насыщенных углеводородных алкильных заместителей с полностью открытой цепью, таких как метил, этил, пропил, изобутил и тому подобное.As is well known in the art, a high degree of substitution is not only permissible, but often appropriate. The compounds of the present invention may be substituted. In order to simplify the terminology used in this description, the terms “group” and “radical” are used to distinguish between chemical groups intended for substitution or which may be substituted, and corresponding groups for which substitution is not provided or which may not be substituted in this way. Thus, when the term “group” is used to describe a chemical substituent, an unsubstituted group is meant and this group with O, N or S atoms, for example, in a chain, as well as a carbonyl group or other standard substitution. When the term “radical” is used to describe a chemical compound or substituent, it is intended to include only an unsubstituted chemical structure. For example, the term “alkyl group” is intended to include not only fully open-chain saturated hydrocarbon alkyl substituents, such as methyl, ethyl, propyl, isobutyl and the like, but also alkyl substituents carrying additional substituents known in the art, such as hydroxy, alkoxy, amino, carboxyl, carboxamido, halogen atoms, cyano, nitro, alkylsulfonyl and so on. Thus, an “alkyl group” includes ether groups, haloalkyls, alcohols, thiols, carboxyl, amines, hydroxyalkyls, sulfoalkyls and so on. On the other hand, the expression “alkyl radical” is limited to the inclusion of fully saturated, fully open chain saturated hydrocarbon alkyl substituents such as methyl, ethyl, propyl, isobutyl and the like.

Другие аспекты настоящего изобретения касаются способов синтеза.Other aspects of the present invention relate to synthetic methods.

Способ предусматривает получение фрагмента дидемнина, имеющего структуруThe method involves obtaining a fragment of didemnin having the structure

способ включает сочетание Boc-D-allo-Ileu-OH с литийэнолятом бензилацетата.the method comprises combining Boc-D-allo-Ileu-OH with benzyl acetate lithium enolate.

Карбонильная группа фрагмента дидемнина формулы:The carbonyl group of a didemnin fragment of the formula:

может быть восстановлена с получением фрагмента дидемнина формулы:can be restored to obtain a fragment of didemnin of the formula:

Гидроксильная группа соединения формулы:The hydroxyl group of a compound of the formula:

может быть защищена с получением фрагмента дидемнина, имеющего структуруcan be protected to obtain a fragment of didemnin having the structure

Последующее снятие защитной группы с группы сложного бензилового эфира дает фрагмент дидемнина, имеющий структуруSubsequent deprotection of the benzyl ester group gives a didemnin fragment having the structure

Другой способ по настоящему изобретению для получения фрагмента дидемнина включает сочетание первого реагента, имеющего структуруAnother method of the present invention for producing a didemnin fragment comprises a combination of a first reagent having a structure

и второго реагента, имеющего структуруand a second reagent having the structure

приводящее к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуруleading to the formation of a fragment of didemnin having the structure

где X выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где R означает аминозащитную группу и где R означает гидроксизащитную группу. Удобно, когда Х означает -О- и R означает трет-бутилдиметилсилил или Х означает -NH- и R означает Boc.where X is selected from the group consisting of —O— and —NH—; where R is an amino protecting group and where R is a hydroxy protecting group. Conveniently, when X is —O— and R is tert-butyldimethylsilyl or X is —NH— and R is Boc.

где Х выбирают из группы, включающей -O-, NMe и -NH-; где R означает аминозащитную группу и где R означает Н. Удобно, когда Х означает -О- и R означает Н; или Х означает -NH- и R означает Boc; или Х означает -NMe- и R означает Boc.where X is selected from the group consisting of —O—, NMe and —NH—; where R is an amino protecting group and where R is H. Conveniently when X is —O— and R is H; or X is —NH— and R is Boc; or X is —NMe— and R is Boc.

Способ по настоящему изобретению включает гидролиз фрагмента дидемнина формулы:The method of the present invention includes hydrolysis of a fragment of didemnin of the formula:

приводящий к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуруleading to the formation of a fragment of didemnin having the structure

где Х выбирают из группы, включающей -ОН и -NH₂.where X is selected from the group consisting of —OH and —NH ₂ .

Еще один способ включает гидролиз фрагмента дидемнинаAnother method involves hydrolysis of a didemnin fragment

где Х выбирают из группы, включающей -NH₂ и -NHMe.where X is selected from the group consisting of —NH ₂ and —NHMe.

Разработан еще один способ получения фрагмента дидемнина, способ включает сочетание первого реагента, имеющего структуруAnother method for producing a didemnin fragment has been developed, the method comprising combining a first reagent having the structure

где Х выбирают из группы, включающей -O-, -NMe и -NH-; где Y означает -(СОСНСН₃)_nСО-; где n равно 0 или 1.where X is selected from the group consisting of —O—, —NMe and —NH—; where Y means - (SOSCHN ₃ ) _n CO-; where n is 0 or 1.

Способ, отличающийся тем, что включает гидролиз фрагмента дидемнинаThe method, characterized in that it includes hydrolysis of a fragment of didemnin

где X выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где Y означает -(СОСНСН₃)_nСО-; где n равно 0 или 1.where X is selected from the group consisting of —O— and —NH—; where Y means - (SOSCHN ₃ ) _n CO-; where n is 0 or 1.

Настоящим изобретением представлен еще один способ получения фрагмента дидемнина, способ включает сочетание первого реагента, имеющего структуруThe present invention provides yet another method for producing a didemnin fragment, the method comprising combining a first reagent having a structure

Способ по настоящему изобретению включает снятие защитной группы с группы сложного бензилового эфира фрагмента дидемнина формулыThe method of the present invention includes removing the protective group from the benzyl ester group of a didemnin fragment of the formula

Согласно настоящему изобретению способ получения фрагмента дидемнина включает сочетание первого реагента, имеющего структуруAccording to the present invention, a method for producing a didemnin fragment comprises a combination of a first reagent having a structure

где Х выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где Y означает -(СОСНСН₃)_nСО-; где n равно 0 или 1.where X is selected from the group consisting of —O— and —NH—; where Y means - (SOSCHN ₃ ) _n CO-; where n is 0 or 1.

Способ включает снятие защиты фрагмента дидемнинаThe method includes deprotecting a fragment of didemnin

Еще один способ по настоящему изобретению для получения фрагмента дидемнина включает циклизацию фрагмента формулы:Another method of the present invention for producing a didemnin fragment involves cyclizing a fragment of the formula:

приводящую к образованию аналога дидемнина, имеющего структуруleading to the formation of a didemnin analog having the structure

Способ включает гидролиз аналога дидемнинаThe method includes hydrolysis of a didemnin analog

приводящий к образованию аналога дидемнина, имеющего структуруleading to the formation of a didemnin analog having the structure

Дополнительно разработан способ получения аналога дидемнина, способ включает сочетание первого реагента, имеющего структуруAdditionally, a method for producing a didemnin analog has been developed, the method includes combining a first reagent having a structure

приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуруleading to the formation of a didemnin analog having the structure

Еще один способ включает снятие защиты фрагмента дидемнина формулы:Another method involves deprotecting a fragment of a didemnin formula:

приводящую к образованию фрагмента дидемнина, имеющего структуруleading to the formation of a fragment of didemnin having the structure

Способ получения фрагмента дидемнина включает сочетание фрагмента дидемнина, имеющего структуруA method for producing a didemnin fragment comprises a combination of a didemnin fragment having the structure

Другой способ включает снятие защиты фрагмента дидемнина формулы:Another method involves deprotecting a fragment of a didemnin formula:

Способ по настоящему изобретению для получения аналога дидемнина включает сочетание аналога дидемнина формулы:The method of the present invention for producing a didemnin analog comprises a combination of a didemnin analog of the formula:

с фрагментомwith fragment

где Х выбирают из группы, включающей -О- и -NH-; где Y означает -(COCHCH₃)_nСО-; где n равно 0 или 1.where X is selected from the group consisting of —O— and —NH—; where Y is - (COCHCH ₃ ) _n CO—; where n is 0 or 1.

Способ получения аналога дидемнина включает сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру:A method of obtaining a didemnin analog includes a combination of a didemnin analog having the structure:

и фрагмента, имеющего структуруand a fragment having a structure

где Х выбирают из группы, включающей -О- и -NH-, и R означает изопропил; где Х означает -О- и R означает н-пропил и R означает н-пентил.where X is selected from the group consisting of —O— and —NH—, and R is isopropyl; where X is —O— and R is n-propyl and R is n-pentyl.

Способ по настоящему изобретению для получения аналога дидемнина включает сочетание аналога дидемнина, имеющего структуру:The method of the present invention for producing a didemnin analog includes a combination of a didemnin analog having the structure:

где:Where:

Способ по настоящему изобретению включает снятие защиты аналога дидемнинаThe method of the present invention includes deprotecting a didemnin analog

где:Where:

Разработан способ получения аналога дидемнина, включающий сочетание аналога дидемнина, имеющего структуруA method has been developed for the preparation of a didemnin analog, comprising a combination of a didemnin analog having a structure

Способ дополнительно включает снятие защиты аналога дидемнинаThe method further includes removing the protection of the analog didemnin

Разработан способ получения аналога дидемнина, включающий сочетание аналога дидемнинаA method for producing a didemnin analog has been developed, including a combination of a didemnin analog

и изобутирилхлорида, приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуруand isobutyryl chloride, leading to the formation of a didemnin analog having the structure

где R означает Boc, изобутирил, пирувил или акрилоил.where R is Boc, isobutyryl, pyruvyl or acryloyl.

Способ получения аналога дидемнина включает сочетание аналога дидемнина, имеющего структуруA method of producing a didemnin analog includes a combination of a didemnin analog having a structure

где R означает SO₂Me или Z-Nva.where R is SO ₂ Me or Z-Nva.

Разработан способ по настоящему изобретению, включающий снятие защиты аналога дидемнинаA method of the present invention has been developed, including deprotection of a didemnin analog

где R₂ означает Nva.where R ₂ means Nva.

Составной частью настоящего изобретения является способ получения аналога дидемнина, включающий сочетание аналога дидемнина, имеющего структуруAn integral part of the present invention is a method for producing a didemnin analog, comprising a combination of a didemnin analog having a structure

где R означает Boc, изобутирил или пирувил.where R is Boc, isobutyryl or pyruvyl.

Способ получения аналога дидемнина, включающий сочетание аналога дидемнина, имеющего структуруA method of producing a didemnin analog comprising a combination of a didemnin analog having a structure

и метилсульфонилхлорида, приводящее к образованию аналога дидемнина, имеющего структуруand methylsulfonyl chloride, leading to the formation of a didemnin analog having the structure

Способ получения аналога дидемнина, включает сочетание аналога дидемнина, имеющего структуруA method of obtaining a didemnin analog includes a combination of a didemnin analog having a structure

где Х означает О и S, где R означает бутил и фенил.where X is O and S, where R is butyl and phenyl.

Следует понимать, что все указанные способы являются иллюстрирующими данное изобретение и, по желанию, могут быть модифицированы. В частности, другие защитные группы могут быть применены для защиты аминогрупп или гидроксигрупп. Другие реагенты могут быть использованы для введения намеченных групп. По желанию, можно варьировать заместители при конкретном воплощении общей формулы соединений по данному изобретению и примеры предпочтительных значений заместителей. Модифицированные способы являются составной частью настоящего изобретения.It should be understood that all of these methods are illustrative of the invention and, if desired, can be modified. In particular, other protecting groups may be used to protect amino groups or hydroxy groups. Other reagents may be used to administer the intended groups. If desired, substituents can be varied in a particular embodiment of the general formula of the compounds of this invention and examples of preferred substituent values. Modified methods are an integral part of the present invention.

Для того, чтобы данное описание в необходимом объеме включало все раскрытия приоритетных заявок на патент и для обеспечения права заявленные приоритеты в соответствии с датами подачи, заявители включают в описание в качестве ссылок содержание патентных заявок GB 0016148.9 и GB 0103750.6.In order to ensure that this description to the necessary extent includes all disclosures of priority patent applications and to ensure the right of declared priorities in accordance with the filing dates, applicants include in the description, by reference, the contents of patent applications GB 0016148.9 and GB 0103750.6.

Соединения по настоящему изобретению могут быть получены синтетическими способами. Описанные здесь способы синтеза аплидина и производных могут также быть использованы для синтеза широкого ряда дидемнинов.Compounds of the present invention can be obtained by synthetic methods. The methods for synthesizing aplidine and derivatives described herein can also be used to synthesize a wide variety of didemnins.

Структуры некоторых соединений приведены на фигуре 1:The structures of some compounds are shown in figure 1:

Производные аа3-аплидина являются синтетическими циклическими депсипептидами, структурно подобными аплидину (соединению II) (аа3=Hip, известному так же как дегидродидемнин В), который является природным дидемнином, выделенным из соединений асцидий Aplidium albicans (фигура 1). Полученные молекулы отличаются наличием гидроксиизовалериановой кислоты (Hiv) (соединение I), или валина (соединение V), или метилвалина (соединение VI), или α-(α'-аминоизовалерил)пропионила (Aip) (соединение VII), вместо гидроксиизовалерилпропионового (Hip) (II) звена, которое присутствует во всех других относящихся к классу дидемнина соединениях природного происхождения. Подобие этих двух структур недавно также было обнаружено при сравнении дидемнина В (соединение III), наиболее хорошо известного члена указанного класса депсипептидов, и нового циклического депсипептида, выделенного из неидентифицированных соединений бразильской асцидии семейства дидемнидовых: тамандарина А (соединение IV). Соединения I, V, VI и VII являются неприродными производными дидемнина.Derivatives of aa3-aplidine are synthetic cyclic depsipeptides structurally similar to aplidine (compound II) (aa3 = Hip, also known as dehydrodidemnin B), which is a natural didemnin isolated from ascidium compounds Aplidium albicans (figure 1). The resulting molecules are distinguished by the presence of hydroxyisovaleric acid (Hiv) (compound I), or valine (compound V), or methylvaline (compound VI), or α- (α'-aminoisovaleryl) propionyl (Aip) (compound VII), instead of hydroxyisovalerylpropionic (Hip ) (II) a link which is present in all other compounds of a natural origin belonging to the class of didemnin. A similarity of these two structures has also recently been found when comparing didemnin B (compound III), the most well-known member of the indicated class of depsipeptides, and a new cyclic depsipeptide isolated from unidentified compounds of the Brazilian ascidia of the didemnid family: tamandarin A (compound IV). Compounds I, V, VI, and VII are unnatural derivatives of didemnin.

Структурная гомология между III и IV отражается также на соответствующей им биологической активности. При сопоставлении обоих соединений показано, что IV сохраняет такие же уровни противоопухолевой активности in vitro в клоногенных испытаниях, а также ингибирующие свойства в отношении биосинтеза белка, и является немного более активным in vitro, чем III против карциномы поджелудочной железы. Однако, соединение IV не проявляет совершенно никакой специфичности в отношении какого-либо типа опухолей NCI 60-клеточной панели. Показано, что дидемнин В токсичен при дозах, близких к дозам, требуемым для терапевтического применения, и, похоже, что IV скорее является токсином широкого спектра, чем селективным агентом.Structural homology between III and IV is also reflected in their corresponding biological activity. Comparison of both compounds showed that IV retains the same levels of antitumor activity in vitro in clonogenic trials, as well as inhibitory properties in relation to protein biosynthesis, and is slightly more active in vitro than III against pancreatic carcinoma. However, compound IV shows absolutely no specificity for any type of NCI 60-cell panel tumors. Didemnin B has been shown to be toxic at doses close to those required for therapeutic use, and IV seems to be a wide-spectrum toxin rather than a selective agent.

[Hiv]³-аплидин (I), наоборот, обладает теми же преимуществами, что обнаружены для аплидина (II) в отношении дидемнина В (III), то есть является более специфическим в отношении солидных опухолей, таких как опухоль толстой кишки, хондросаркома или остеосаркома, согласно MTS испытанию. Напротив, [Val]³-аплидин (V) и [MeVal]³-аплидин (VI) являются новыми соединениями, обладающими высоким уровнем противоопухолевой активности in vitro. Наконец, соединения V, VI и VII вызывают, очевидно, по сравнению с исходным аплидином, повышенное образование водородных связей на активном участке, и, таким образом, представляют собой более активные соединения. Вдобавок, существующая замена амидной связи сложноэфирной связью может повышать стабильность циклодепсипептидного ядра.[Hiv] ^3- aplidine (I), on the contrary, has the same advantages as those found for aplidine (II) with respect to didemnin B (III), that is, it is more specific with respect to solid tumors such as a colon tumor, chondrosarcoma or osteosarcoma according to the MTS test. In contrast, [Val] ^3- aplidine (V) and [MeVal] ^3- aplidine (VI) are new compounds with a high level of antitumor activity in vitro. Finally, compounds V, VI, and VII cause, obviously, in comparison with the starting aplidine, increased formation of hydrogen bonds in the active region, and thus represent more active compounds. In addition, the existing replacement of the amide bond with an ester bond can increase the stability of the cyclodepsipeptide core.

Здесь описан основной общий синтез различных серий производных аплидина. В качестве примера на фигуре 2 приведен ретросинтетический анализ.Here, the basic general synthesis of various series of aplidine derivatives is described. As an example, figure 2 shows a retrosynthetic analysis.

Ключевые стадии включают эффективную макроциклизацию линейных предшественников 6, удобный стереоселективный синтез Ist-aa3-Leu-Pro звена (А1) и правого фрагмента D1. Заключительное соединение макроцикла 4 с различными боковыми цепями дает аа3-аа8-аплидин и производные. Надежность данного синтетического подхода успешно доказана при разработке практического синтеза аплидина II (аа3=Hip).Key steps include efficient macrocyclization of linear precursors 6, convenient stereoselective synthesis of the Ist-aa3-Leu-Pro link (A1) and the right fragment D1. The final compound of macrocycle 4 with different side chains gives aa3-aa8-aplidine and derivatives. The reliability of this synthetic approach has been successfully proven in the development of practical synthesis of aplidine II (aa3 = Hip).

Образование макроциклического ядра является основной ключевой стадией во всех сериях. В прежних синтезах дидемнинов достигнута успешная циклизация всех четырех возможных амидных связей. Однако, в настоящей работе, образование связи N(Me)-O(Me)-Tyr и Pro выбрано в качестве момента макроциклизации, что основано на предыдущих разработках, связанных с общим синтезом аплидина II (G.Jou, I.Gonzalez, F.Albericio, P.LLoyd-Williams, E.Giralt., J, Org. Chem. 1997, 62, 354-366 и патент ES-2102322).The formation of a macrocyclic core is the main key stage in all series. In previous syntheses of didemnins, the successful cyclization of all four possible amide bonds was achieved. However, in this work, the formation of the N (Me) -O (Me) -Tyr and Pro bond was chosen as the moment of macrocyclization, which is based on previous studies related to the general synthesis of aplidine II (G. Jou, I. Gonzalez, F. Albericio, P. Lloyd-Williams, E. Giralt., J, Org. Chem. 1997, 62, 354-366 and Patent ES-2102322).

Макроциклическое ядро целевой молекулы разделяется на левое звено тетрапептида Ist-aa3-Leu-Pro A1 и дипептид Boc-Thr-(Z-NMe-OMe-Tyr)-OH D1.The macrocyclic core of the target molecule is divided into the left link of the tetrapeptide Ist-aa3-Leu-Pro A1 and the dipeptide Boc-Thr- (Z-NMe-OMe-Tyr) -OH D1.

Синтез правого фрагмента дипептида D1 уже описан. Однако синтез, схематически изображенный схемой 1, позволяет получать данный промежуточный продукт в килограммовых масштабах. Кислотную функциональность Boc-Thr(ОН)-ОН защищают фенацилбромидом, что дает непосредственно спирт D3, который эстерифицируют с помощью Z-N(Me)-О(Me)-Tyr-ОН, используя DCC в присутствии DMAP, получая D2. Удаление фенацильной группы с помощью Zn в уксусной кислоте дает чистый фрагмент D1.The synthesis of the right fragment of dipeptide D1 has already been described. However, the synthesis, schematically depicted by scheme 1, allows to obtain this intermediate product in kilogram scales. The acid functionality of Boc-Thr (OH) -OH is protected by phenacyl bromide, which gives directly the alcohol D3, which is esterified with Z-N (Me) -O (Me) -Tyr-OH using DCC in the presence of DMAP to give D2. Removal of the phenacyl group with Zn in acetic acid gives a pure D1 fragment.

Получение предшественника A1 для различных серий схематически изображено на схеме 2. Для серий SHPL, SVPL и SMPL первая стадия сочетания Leu-Pro-OBzl (A5) и промышленно выпускаемой кислоты (В1) дает непосредственно спирт A3, готовый для следующего взаимодействия с изостатином (C1). Для синтеза SAPL и SNPL серий, способ отличается от вышеуказанного тем, что В1 означает сложный β-кетоэфир, синтезированный из [α-(α'-гидроксиизовалерил)пропионовой и [α-(α'-аминоизовалерил)пропионовой кислоты, соответственно. Синтез фрагмента В2 (SAPL и SNPL серии) схематически изображен на схеме 3. Гидрогенолиз с превращением В2 в В1 осуществляют непосредственно перед (в одном реакторе) реакцией сочетания с А5.Obtaining the precursor A1 for the various series is shown schematically in Scheme 2. For the SHPL, SVPL, and SMPL series, the first stage of the combination of Leu-Pro-OBzl (A5) and industrially produced acid (B1) gives directly alcohol A3, ready for the next reaction with isostatin (C1 ) For the synthesis of SAPL and SNPL series, the method differs from the above in that B1 is a β-keto ester synthesized from [α- (α'-hydroxyisovaleryl) propionic and [α- (α'-aminoisovaleryl) propionic acid, respectively. The synthesis of fragment B2 (SAPL and SNPL series) is shown schematically in Scheme 3. Hydrogenolysis with the conversion of B2 to B1 is carried out immediately before (in a single reactor) coupling reaction with A5.

Получение полного фрагмента А1 зависит от доступности части, представляющей собой изостатин, который получают из непротеиногенного аминозащищенного Boc-D-аллоизолейцина (С5) в больших количествах. Синтетический способ получения С1 схематически изображен на схеме 4.The preparation of the complete fragment A1 depends on the availability of the isostatin part, which is obtained from nonproteinogenic amino-protected Boc-D-alloisoleucine (C5) in large quantities. A synthetic method for producing C1 is shown schematically in scheme 4.

Активация карбоксильной функциональности Boc-D-allo-Ile карбонилдиимидазолом с последующей конденсацией литийэнолятом бензилацетата дает сложный β-кетоэфир (С4). Стереоселективное восстановление с помощью КВН₄ в метаноле дает С3. Защита вторичной гидроксильной группы в виде простого эфира TBDMS (C2) и гидрогенолиз образовавшегося сложного бензилового эфира дают изостатин (С1).Activation of the carboxyl functionality of Boc-D-allo-Ile by carbonyldiimidazole followed by condensation of benzyl acetate with lithium enolate affords the β-keto ester (C4). Stereoselective reduction using KVN ₄ in methanol gives C3. Protection of the secondary hydroxyl group in the form of a simple TBDMS ether (C2) and hydrogenolysis of the resulting benzyl ester give isostatin (C1).

Последующие стадии получения соединений I, II, V и VII изображены на схеме 5.The subsequent steps for preparing compounds I, II, V, and VII are depicted in Scheme 5.

Связывание фрагментов А1 и D1 с HBTU/HOBt дает линейный предшественник типа 7. Гидрогенолиз Cbz и бензильной защитных групп протекает чисто и спокойно с Pd(OH)₂, что дает 6. Стадия макроциклизации с применением HATU/HOAt дает промежуточный продукт 5 с хорошим выходом (75%). Хлористый водород в диоксане используют для расщепления Вос-защитной группы, приводящего к амину 4. Указанное соединение связывают с Z-NMe-D-Leu-OH, получая 3, которое подвергают гидрогенолизу под воздействием Pd-С. Полученное соединение 2 связывают с Pyr-Pro-ОН боковой цепью, используя DIPCDI, что дает соответствующие соединения.The binding of fragments A1 and D1 to HBTU / HOBt gives a linear precursor of type 7. The hydrogenolysis of Cbz and benzyl protecting groups proceeds cleanly and calmly with Pd (OH) ₂ , which gives 6. The macrocyclization step using HATU / HOAt gives intermediate 5 with a good yield (75%). The hydrogen chloride in dioxane is used to cleave the Boc-protecting group leading to amine 4. This compound is coupled to Z-NMe-D-Leu-OH to give 3, which is subjected to hydrogenolysis under the influence of Pd-C. The resulting compound 2 was coupled to the Pyr-Pro-OH side chain using DIPCDI to give the corresponding compounds.

Интересно, что предшественники типа 2, являющиеся аналогами во всех вышеуказанных отношениях дидемнина А, служат исходными блоками, используемыми в синтезе для построения некоторых рассматриваемых соединений указанного класса, поскольку N-концевая, свободная вторичная аминогруппа является участком присоединения различных ацильных групп к циклическому депсипептиду.Interestingly, type 2 precursors, which are analogues in all of the above relations of didemnin A, serve as the starting blocks used in the synthesis to construct some of the compounds of this class in question, since the N-terminal, free secondary amino group is the site of attachment of various acyl groups to the cyclic depsipeptide.

Более ранними исследованиями (Rinehart et al., J. Med. Chem, 1996, 39, 2819-2834) также обнаружено, что ацильные производные дидемнина A (dA) 3 активны как исходные соединения 2. Для серии aa3 заявителями также обнаружена активность в соединениях 3.Earlier studies (Rinehart et al., J. Med. Chem, 1996, 39, 2819-2834) also found that the acyl derivatives of didemnin A (dA) 3 are active as starting compounds 2. For the aa3 series, applicants also found activity in the compounds 3.

В таблицах 1 и 2 приведены значения IC₅₀, найденные для соединений 1.Tables 1 and 2 show the IC ₅₀ values found for compounds 1.

Таблица 1
Цитотоксичность соединений типа [аа3]-аплидин IC₅₀ (молярная)Table 1
Cytotoxicity of compounds of the type [AA3] -aplidine IC ₅₀ (molar) Соединение/серияCompound / Series Р388P388 А549A549 НТ29NT29 MEL28MEL28 Аплидин (II)/SAPL1Aplidine (II) / SAPL1 1,80Е-101.80E-10 1,80Е-101.80E-10 4,50Е-104,50Е-10 4,50Е-104,50Е-10 [Hiv]³-аплидин(I)/SHPL1[Hiv] ^3- aplidine (I) / SHPL1 4,74Е-104.74E-10 4,74Е-104.74E-10 4,74Е-104.74E-10 4,74Е-104.74E-10 [Val]³-аплидин(V)/SVPL1[Val] ^3- aplidine (V) / SVPL1 1,13Е-101,13E-10 1,13Е-101,13E-10 1,13Е-101,13E-10 1,13Е-101,13E-10 [Aip]³-аплидин(VII)/SNPL1[Aip] ^3- aplidine (VII) / SNPL1 9,01Е-109.01E-10 9,01Е-109.01E-10

Методика: по Berjeron et al., Biochem and Bioph Res, Comm., 1984, 121, 3, 848-854.Methodology: according to Berjeron et al., Biochem and Bioph Res, Comm., 1984, 121, 3, 848-854.

P388 = лимфома мыши. А549 = карцинома легкого человека. НТ29 = карцинома ободочной кишки человека. MEL28 - меланома человека.P388 = mouse lymphoma. A549 = human lung carcinoma. HT29 = human colon carcinoma. MEL28 - human melanoma.

Таблица 2 Значения IC₅₀ (молярная) для семейства аплидинаTable 2 IC ₅₀ Values (Molar) for the Aplidine Family Дидемнин
В9LSAPL1Didemnin
B9LSAPL1 Аплидин SAPL1Aplidine SAPL1 [Hiv]³-Аплидин SHPL1[Hiv] ^3- Aplidine SHPL1 Солидные опухолиSolid tumors ЛинияLine IIIIII IIII II Мочевой пузырьBladder 56375637 2.50E-082.50E-08 3.59E-083.59E-08 9.02E-089.02E-08 Молочная железаBreast МХ-1MX-1 1.54E-061.54E-06 1.67E-071.67E-07 H/AH / a Ободочная или толстая кишкаColon or colon HT-29HT-29 8.07E-088.07E-08 6.87E-076.87E-07 1.02E-081.02E-08 ЖелудокStomach Hs746tHs746t 6.60E-096.60E-09 2.52E-082.52E-08 7.16E-087.16E-08 ПеченьLiver SK-HEP-SK-HEP- 9.21E-089.21E-08 9.44E-089.44E-08 2.66E-072.66E-07 1one НМРЛNSCLC А549A549 1.21E-041.21E-04 2.40E-052.40E-05 H/AH / a ЯичникOvary SK-OV-3SK-OV-3 1.63E-071.63E-07 7.20E-087.20E-08 -- Поджелудочная железаPancreas PANC-1PANC-1 1.52E-101.52E-10 1.7E-071.7E-07 -- ГлоткаPharynx FADUFadu 9.79E-089.79E-08 7.29E-087.29E-08 3.71E-083.71E-08 Предстательная железаProstate PC-3PC-3 9.00E-089.00E-08 5.13-075.13-07 -- Предстательная железаProstate DU-145DU-145 -- -- H/AH / a Предстательная железаProstate LNCAPLncap -- -- 1.46E-081.46E-08 ПочкиKidney 786-O786-o 2.90E-072.90E-07 8.31 E-088.31 E-08 -- МРЛMRL NCl-NCl- -- -- H/AH / a H187H187 РетинобластомаRetinoblastoma Y-79Y-79 -- -- МеланомаMelanoma Mel-28Mel-28 -- -- 4.86E-074.86E-07 ФибросаркомаFibrosarcoma SW 694SW 694 3.28E-063.28E-06 1.49E-061.49E-06 H/AH / a ХондросаркомаChondrosarcoma CHSACHSA -- 3.45E-093.45E-09 ОстеосаркомаOsteosarcoma OSA-FHOSA-FH -- -- 5.89E-095.89E-09

Дидемнин ВDidemnin B АплидинAplidine [Hiv]³-[Hiv] ³ - Лейкозы/лимфомыLeukemia / Lymphoma ЛинияLine 9LSAPL19LSAPL1 SAPL1SAPL1 АплидинAplidine IIIIII SHPL1SHPL1 IIII II ALL (промиелоцитный лейкоз)ALL (promyelocytic leukemia) HL-60Hl-60 1.44Е-071.44E-07 7.89Е-087.89E-08 Н/АON ALL (острый лимфобластический)ALL (acute lymphoblastic) Mott 3Mott 3 5.45Е-075.45E-07 5.95E-075.95E-07 1.77Е-081.77E-08 CML (хронический миелогенный)CML (chronic myelogenous) К562K562 3.31Е-063.31E-06 5.72Е-075.72E-07 5.21Е-075.21E-07 ALL (В-клеточный)ALL (B-cell) CCRF-SBCCRF-SB 6.55E-076.55E-07 4.72Е-074.72E-07 -- Лейкоз (капиллярно-В-кпеточный)Leukemia (capillary-B-keto) Mo-BMo-b -- -- -- Лейкоз (плазмоклеточный)Leukemia (plasma cell) ARH-77ARH-77 -- 1.78Е-071.78E-07 -- Лимфома (Т-клеточная)Lymphoma (T-cell) H9H9 2.13Е-072.13E-07 5.25Е-075.25E-07 Н/АON Лимфома (Т-клеток кожи)Lymphoma (skin T cells) Hut 78Hut 78 3.56Е-083.56E-08 4.47Е-084.47E-08 -- Лимфома (недифференцируемая)Lymphoma (undifferentiated) MC116MC116 8.84Е-098.84E-09 9.21Е-079.21E-07 3.82Е-073.82E-07 Лимфома (В-клеток Беркитта)Lymphoma (Burkitt B cells) RAMOSRAMOS -- -- -- Лимфома (гистиоцитарная)Lymphoma (histiocytic) U-937U-937 1.87Е-071.87E-07 5.62Е-075.62E-07 -- Лимфома (В-клеточная)Lymphoma (B-cell) MoBMob -- -- -- Лимфома (асцит Беркитта)Lymphoma (Burkitt ascites) P3HR1P3HR1 5.58Е-085.58E-08 5.34Е-085.34E-08 -- Методика:Methodology: МТТMTT МТТMTT MTS (новая]MTS (new) Н/А = не активныйN / A = not active

Полученные здесь соединения приведены на схемах 5 и 6. Указанные соединения включают N^α-пропионил-[aa]³-dA, N^α-бутирил-[aa]³-dA, N^α-изобутирил-[aa]³-dA и N^α-пентаноил-[aa]³-dA.The compounds obtained here are shown in Schemes 5 and 6. These compounds include N ^α -propionyl- [aa] ³ -dA, N ^α -butyryl- [aa] ³ -dA, N ^α -isobutyryl- [aa] ³ -dA and N ^α- pentanoyl- [aa] ³ -dA.

Получены аналоги, имеющие два ацильных заместителя после N-концов аа3-dA ядра, для изучения влияния структурных факторов на специфичность в отношении некоторых опухолей. Получены диацильные соединения, изобутирил-Pro-ОН, О-изобутирил-Lac-Pro-ОН, N-бензил-Ala-Pro-ОН, и конденсированы с соединениями типа 2 DIPCDI способом, что дает, соответственно, после снятия защиты и очистки, [аа]³- [изобутирил]⁹-аплидин, [О-изобутирил-Lac]⁹-аплидин, [Ala]⁹-аплидин.Analogues having two acyl substituents after the N-ends of the aa3-dA nucleus were obtained to study the influence of structural factors on specificity for some tumors. Diacyl compounds, isobutyryl-Pro-OH, O-isobutyryl-Lac-Pro-OH, N-benzyl-Ala-Pro-OH, were obtained and condensed with type 2 compounds by the DIPCDI method, which yields, respectively, after deprotection and purification, [aa] ³ - [isobutyryl] ^9- aplidine, [O-isobutyryl-Lac] ^9- aplidine, [Ala] ^9- aplidine.

Предпочтительные производные аплидина: соединения серий: Н, VPreferred aplidine derivatives: compounds of the series: H, V

Соединения также связывают, получая активные соединения:The compounds also bind to give active compounds:

Синтез спироциклических фрагментов схематически представлен на схеме 7. Синтез исходит из ранее описанного соединения 8. Ссылки: a) Seebach, D. et al. J. Am. Chem. Soc. 1983, 105, 5390-5398. b) Genin, M. J. et al. J. Org. Chem. 1993, 58, 2334-2337.The synthesis of spirocyclic fragments is shown schematically in Scheme 7. The synthesis is based on the previously described compound 8. References: a) Seebach, D. et al. J. Am. Chem. Soc. 1983, 105, 5390-5398. b) Genin, M. J. et al. J. Org. Chem. 1993, 58, 2334-2337.

Предпочтительные производные аплидина: соединения серии АPreferred aplidine derivatives: Series A compounds

Спиросоединения также связывают, как в предыдущих сериях, получая активные соединения:Spiro compounds are also linked, as in the previous series, to obtain active compounds:

Спиро = [(5R)-1-(заместитель в позиции 9)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан]^7-9 Spiro = [(5R) -1- (substituent at position 9) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane] ^7-9

(1) Данное соединение описано в литературе: Joc Org. Chem. 2000, 65, 782-792. Их синтез опубликован до их открытия (j): Org. Lett., 2000, vol 0, No. O, A-D.(1) This compound is described in the literature: Joc Org. Chem. 2000, 65, 782-792. Their synthesis was published before their discovery (j): Org. Lett., 2000, vol 0, No. O, A-D.

Методика: по Berjeron et al, Biochem and Bioph Res. Comm., 1984, 121, 3, 848-854Methodology: according to Berjeron et al, Biochem and Bioph Res. Comm., 1984, 121, 3, 848-854

388 = лимфома мыши. А549 = карцинома легкого человека. НТ-29 = карцинома ободочной кишки человека. MEL-28 - меланома человека. DU145 - карцинома предстательной железы человека.388 = mouse lymphoma. A549 = human lung carcinoma. HT-29 = human colon carcinoma. MEL-28 - human melanoma. DU145 - carcinoma of the human prostate gland.

388 = Murine lyrnphoma. А549 - human lung carcinoma. НТ-29 - human colon carcinoma. MEL-28 - human melanoma. DU145 = human prostate carcinoma388 = Murine lyrnphoma. A549 - human lung carcinoma. HT-29 - human colon carcinoma. MEL-28 - human melanoma. DU145 = human prostate carcinoma

Список обозначенийList of Symbols РазноеMiscellaneous AAAA АминокислотаAmino acid IstIsst ИзостатинIsostatin HipHip Гидроксиизовалерилпропионовая кислотаHydroxyisovalerylpropionic acid HivHiv Гидроксиизовалериановая кислотаHydroxyisovaleric acid AipAip Аминоизовалерилпропионовая кислотаAminoisovalerylpropionic acid LacLac Молочная кислотаLactic acid LCLC Жидкостная хроматография (ЖХ)Liquid Chromatography (LC) HPLCHPLC Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)High Performance Liquid Chromatography (HPLC) TLCTLC Тонкослойная хроматография (ТСХ)Thin layer chromatography (TLC) M.p.M.p. Температура плавления (т.пл.)Melting point (mp.) R_t R _t Время удерживанияRetention time Quant.Quant. Количественный выход (кол.)Quantitative yield (count) ESI-MSESI-MS Масс-спектр ионизационного электрораспыленияMass spectrum of ionization electrospray Защитные группыProtective groups BnBn БензилBenzyl BocBoc трет-Бутилоксикарбонилtert-butyloxycarbonyl TBDMSTBDMS трет-Бутилдиметилсилилtert-butyldimethylsilyl ZZ БензилоксикарбонилBenzyloxycarbonyl РасRas ФенилацетилPhenylacetyl РастворителиSolvents THFThf Тетрагидрофуран (ТГФ)Tetrahydrofuran (THF) HexHex ГексанHexane ACNACN АцетонитрилAcetonitrile DCMDCM ДихлорметанDichloromethane EtOAcEtOAc ЭтилацетатEthyl acetate DMFDMF Диметилформамид (ДМФ)Dimethylformamide (DMF) MTBEMTBE Метил-трет-бутиловый эфирMethyl tert-butyl ether Et₂OEt ₂ O Диэтиловый эфирDiethyl ether t-BuOHt-buoh трет-Бутанолtert-butanol TFATFA Трифторуксусная кислотаTrifluoroacetic acid MeOHMeoh МетанолMethanol EtOHEtOH ЭтанолEthanol IPAIPA ИзопропанолIsopropanol РеагентыReagents CDICdi 1,1'-Карбонилдиимидазол1,1'-Carbonyldiimidazole HOBtHobt 1-Гидроксибензотриазол1-hydroxybenzotriazole HBTUHBTU N-оксид N-[(1H-Бензотриазол-1-ил)(диметиламино)N-oxide N - [(1H-Benzotriazol-1-yl) (dimethylamino) метилен]-N-метанаммонийгексафторфосфатаmethylene] -N-methanammonium hexafluorophosphate BOP-C1BOP-C1 Хлорангидрид бис(2-оксо-3-оксазолидинил)Bis (2-oxo-3-oxazolidinyl) chloride фосфиновой кислотыphosphinic acid HATUHatu N-оксид N-[(диметиламино)-1Н-1,2,3,-триазоло[4,5-b]пиридин-1-илметилен]-N-N-oxide N - [(dimethylamino) -1H-1,2,3, -triazolo [4,5-b] pyridin-1-ylmethylene] -N- метилметанаммонийгексафторфосфатаmethyl methanammonium hexafluorophosphate HOAtHOAt 1-Гидрокси-7-аза-бензотриазол1-Hydroxy-7-aza-benzotriazole DCCDCC ДициклогексилкарбодиимидDicyclohexylcarbodiimide DIPCDIDipcdi N,N'-ДиизопропилкарбодиимидN, N'-Diisopropylcarbodiimide TBAFTbaf ТетрабутиламмонийфторидTetrabutylammonium fluoride AcOHAcOH Уксусная кислотаAcetic acid p-TsOHp-TsOH П-толуолсульфоновая кислотаP-toluenesulfonic acid DMAPDMAP 4-Диметиламинопиридин4-dimethylaminopyridine NMMNMM N-МетилморфолинN-methylmorpholine DIPEADipa ДиизопропилэтиламинDiisopropylethylamine TEATea ТриэтиламинTriethylamine TFATFA Трифторуксусная кислотаTrifluoroacetic acid

Общая методикаGeneral methodology

Все работы выполняют в инертной атмосфере аргона. Все растворители имеют реагентную чистоту (используются для обработки) или ВЭЖХ чистоту (используются как растворитель для реакции или очистки). Безводные растворители используют непосредственно в том виде, каком они поступают в продажу. Тетрагидрофуран свеже перегоняют перед применением для удаления стабилизатора. Все остальные реагенты являются промышленно выпускаемыми соединениями наибольшей доступной чистоты. Аналитическую тонкослойную хроматографию (ТСХ) осуществляют на алюминиевых пластинах с силикагелем Merck'a (60, F254), предварительно покрытых флуоресцентным индикатором. Визуализацию осуществляют, используя ультрафиолетовый свет (254 нм), фосфомолибденовую кислоту (5% м/о) в 95% этаноле или ванилин. Протонный или углеродный спектр магнитного резонанса (¹Н, ¹³С-ЯМР) снимают на Varian-300 (300 МГц) спектрометре с Фурье-преобразованием, и химические сдвиги выражают в миллионных долях (м.д.) относительно CHCl₃ в качестве внутреннего стандарта (7,26 м.д. для ¹H и 77,0 для ¹³С). Мультиплеты обозначены как синглет (с), дублет (д), дублет дублетов (дд), дублет триплетов (дт), триплет (т), квартет (кв), мультиплет (м) и уширенный синглет (уш.с), и константы взаимодействия (J) выражены в Гц. Оптические вращения (в градусах) измеряют с помощью Jasco P1020 поляриметра. Масс-спектр ионизационного распыления электронов (ESI-MC) получают на Hewlett Packard Series 1100 MSD. Elemental. Флэш хроматографию на колонке выполняют на Е. Merck силикагеле 60 (240-400 меш) или RP C18 (40-63 мкм), используя системы растворителей, указанные в отдельных экспериментах.All work is performed in an inert atmosphere of argon. All solvents have reagent purity (used for processing) or HPLC purity (used as solvent for reaction or purification). Anhydrous solvents are used directly as they go on sale. Tetrahydrofuran is freshly distilled before use to remove the stabilizer. All other reagents are commercially available compounds of the highest available purity. Analytical thin layer chromatography (TLC) was carried out on aluminum plates with Merck silica gel (60, F254), previously coated with a fluorescent indicator. Visualization is carried out using ultraviolet light (254 nm), phosphomolybdenum acid (5% m / v) in 95% ethanol or vanillin. The proton or carbon magnetic resonance spectrum ( ¹ H, ¹³ C-NMR) is recorded on a Varian-300 (300 MHz) Fourier transform spectrometer, and chemical shifts are expressed in parts per million (ppm) relative to CHCl ₃ as an internal standard (7.26 ppm for ¹ H and 77.0 for ¹³ C). Multiplets are designated as singlet (s), doublet (d), doublet of doublets (dd), doublet of triplets (dt), triplet (t), quartet (q), multiplet (m) and widened singlet (us.s), and constants interactions (J) are expressed in Hz. Optical rotations (in degrees) are measured using a Jasco P1020 polarimeter. Electron Spray Ionization Mass Spectrum (ESI-MC) is acquired on the Hewlett Packard Series 1100 MSD. Elemental. Flash column chromatography was performed on E. Merck silica gel 60 (240-400 mesh) or RP C18 (40-63 μm) using the solvent systems indicated in separate experiments.

Следующие методики описывают синтез промежуточных соединений, полученных на основании аплидина (SAPL), [Aiv]³-аплидин (SNPL), [Hiv]³-аплидин (SHPL), [Val]³-аплидин (SVPL) и [MeVal]³-аплидин (SMPL).The following procedures describe the synthesis of intermediates derived from aplidine (SAPL), [Aiv] ^3- aplidine (SNPL), [Hiv] ^3- aplidine (SHPL), [Val] ^3- aplidine (SVPL) and [MeVal] ³ - aplidine (SMPL).

Пример 1Example 1

Синтез Бензил(4R,5S)-4-(трет-бутоксикарбониламино)-5-метил-3-оксогептаноата (С4)Synthesis of Benzyl (4R, 5S) -4- (tert-butoxycarbonylamino) -5-methyl-3-oxoheptanoate (C4)

К раствору Boc-D-alloIle-OH (15,26 г, 65,9 ммоль) в сухом ТГФ (200 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляют CDI (16,04 г, 98,96 ммоль). Через 15 мин смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 ч. Полученный раствор охлаждают до -78°С и добавляют через канюлю к хорошо перемешиваемому раствору бензиллитийэнолята, охлажденного до -78°С (625 мл, 0,37 М), [полученному добавлением по каплям раствора бензилацетата (33,34 мл) в ТГФ (165 мл) к раствору литийдиизопропиламида (0,36 М) в ТГФ/гекс. 3:1 (642 мл) при -78°С]. Температуру следует поддерживать < -75°С. Реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 60 мин. Затем смеси дают нагреться до -10°С (30 мин), вновь охлаждают до -78°С и гасят насыщенным водн. хлоридом аммония (200 мл), после чего экстрагируют DCM (3×500 мл) при комнатной температуре. Объединенные экстракты промывают последовательно водн. нас. NaHCO₃ (500 мл) и насыщенным раствором соли (200 мл). Сушка (Na₂SO₄) с последующим удалением растворителя дает масло, которое наносят на диоксид кремния С18 и заполняют доверху LC-RPC18 [Lichroprep RFC-18 (40-60 микрон) колонку. Элюирование с использованием градиента ACN-H₂O (60-100% ACN)] дает продукт С4 в виде бесцветного масла (16,7 г, 70%). [α]²⁰ _D - 20,0 (с 1, CHCl₃), ТСХ: Rf=0,32 (Merck, RP-C18, ACN-H₂O 7:3).To a solution of Boc-D-alloIle-OH (15.26 g, 65.9 mmol) in dry THF (200 ml) at 0 ° C. under argon atmosphere was added CDI (16.04 g, 98.96 mmol). After 15 minutes, the mixture was allowed to warm to room temperature and stirred for 16 hours. The resulting solution was cooled to -78 ° C and added via cannula to a well-stirred solution of benzyl lithium enolate cooled to -78 ° C (625 ml, 0.37 M), [obtained by dropwise adding a solution of benzyl acetate (33.34 ml) in THF (165 ml) to a solution of lithium diisopropylamide (0.36 M) in THF / hex. 3: 1 (642 ml) at -78 ° C]. The temperature should be maintained <-75 ° C. The reaction mixture was stirred at -78 ° C for 60 minutes. Then the mixture was allowed to warm to -10 ° C (30 min), cooled again to -78 ° C and quenched with saturated aq. ammonium chloride (200 ml), and then extracted with DCM (3 × 500 ml) at room temperature. The combined extracts were washed successively with aq. us. NaHCO ₃ (500 ml) and brine (200 ml). Drying (Na ₂ SO ₄ ) followed by removal of the solvent gave an oil that was applied to C18 silica and filled to the top of the LC-RPC18 [Lichroprep RFC-18 (40-60 microns) column. Elution using a gradient of ACN-H ₂ O (60-100% ACN)] gives the product C4 as a colorless oil (16.7 g, 70%). [α] ²⁰ _D - 20.0 (s 1, CHCl ₃ ), TLC: Rf = 0.32 (Merck, RP-C18, ACN-H ₂ O 7: 3).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,77 (д, 3Н), 0,94 (т, 3Н), 1,25 (с, 9Н), 1,60 (м, 1Н), 1,90 (м, 2Н), 3,58 (с, 2Н), 4,47 (дд, 1Н), 5,00 (д, 1Н), 5,18 (с, 2Н), 7,35 (уш.с, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.77 (d, 3H), 0.94 (t, 3H), 1.25 (s, 9H), 1.60 (m, 1H), 1, 90 (m, 2H), 3.58 (s, 2H), 4.47 (dd, 1H), 5.00 (d, 1H), 5.18 (s, 2H), 7.35 (br s , 5H).

Пример 2Example 2

Синтез бензилового эфира (3S,4R,5S)-N-(трет-бутоксикарбонил)изостатина (С3)Synthesis of (3S, 4R, 5S) -N- (tert-butoxycarbonyl) isostatin benzyl ester (C3)

С4 (16,7 г, 45,9 ммоль) растворяют в метаноле (690 мл) при 0°С. К перемешиваемому раствору добавляют боргидрид калия (7,43 г, 137,8 ммоль) и через 30 мин реакцию гасят водн. HCl (0,1 Н), до рН 4, и смесь экстрагируют DCM (300 мл). Экстракт промывают последовательно водн. NaHCO₃ (100 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (100 мл). Сушка (Na₂SO₄) с последующим удалением растворителя дает спирт С3 (15,7 г, 93%) в виде бесцветного масла. Rf=0,45 (гекс. - EtOAc 2:1); [α]_D=-9,5 (с 0,76, CHCl₃) ; Rf=0,45 (EtOAc-гекс. 1:2).C4 (16.7 g, 45.9 mmol) was dissolved in methanol (690 ml) at 0 ° C. Potassium borohydride (7.43 g, 137.8 mmol) was added to the stirred solution and after 30 minutes the reaction was quenched with aq. HCl (0.1 N), to pH 4, and the mixture was extracted with DCM (300 ml). The extract was washed successively with aq. NaHCO ₃ (100 ml, sat.) And brine (100 ml). Drying (Na ₂ SO ₄ ) followed by removal of the solvent gave C3 alcohol (15.7 g, 93%) as a colorless oil. Rf = 0.45 (hex. - EtOAc 2: 1); [α] _D = -9.5 (c 0.76, CHCl ₃ ); Rf = 0.45 (EtOAc-hex. 1: 2).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,81 (д, 3Н), 0,90 (т, 3Н), 1,20 (м, 1Н), 1,36 (м, 1Н), 1,40 (с, 9Н), 1,90 (м, 1Н), 2,55 (дд, 1Н), 2,70 (дд, 1Н), 3,20 (д, 1Н), 3,61 (м, 1Н), 3,90 (м, 1Н), 4,40 (д, 1Н), 5,18 (с, 2Н), 7,40 (уш.с, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.81 (d, 3H), 0.90 (t, 3H), 1.20 (m, 1H), 1.36 (m, 1H), 1, 40 (s, 9H), 1.90 (m, 1H), 2.55 (dd, 1H), 2.70 (dd, 1H), 3.20 (d, 1H), 3.61 (m, 1H ), 3.90 (m, 1H), 4.40 (d, 1H), 5.18 (s, 2H), 7.40 (br s, 5H).

Пример 3Example 3

Синтез Boc-(3S,4R,5S)-Ist (TBDMS)-OBn (C2)Synthesis of Boc- (3S, 4R, 5S) -Ist (TBDMS) -OBn (C2)

К раствору С3 (15,7 г, 42,9 ммоль) в сухом ДМФ (65 мл) при 0°С добавляют имидазол (8,77 г, 128,8 ммоль), DMAP (1,57 г, 12,81 ммоль) и TBDMS-C1 (19,42 г, 128,8 ммоль). Реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры в течение ночи, затем распределяют между Et₂O (200 мл) и последовательно водн. HCl (100 мл, 0,1 н), водн. NaHCO₃ (100 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (50 мл). После сушки (Na₂SO₄) и удаления растворителя остаток очищают флэш ЖХ (силикагель, гекс.), получая C2 (19,96 г, 97%).To a solution of C3 (15.7 g, 42.9 mmol) in dry DMF (65 ml) at 0 ° C, imidazole (8.77 g, 128.8 mmol), DMAP (1.57 g, 12.81 mmol) are added. ) and TBDMS-C1 (19.42 g, 128.8 mmol). The reaction mixture was allowed to warm to room temperature overnight, then partitioned between Et ₂ O (200 ml) and successively aq. HCl (100 ml, 0.1 N) aq. NaHCO ₃ (100 ml, sat.) And brine (50 ml). After drying (Na ₂ SO ₄ ) and removal of solvent, the residue was purified by flash LC (silica gel, hex.) To give C2 (19.96 g, 97%).

[α]_D=10,6 (с 1,01, CHCl₃); Rf=0,73 (EtOAc-Гекс. 1:2).[α] _D = 10.6 (c 1.01, CHCl ₃ ); Rf = 0.73 (EtOAc-Hex. 1: 2).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,15 (с, 6Н), 0,82 (с, 9Н), 0,85 (д, 3Н), 0,89 (т, 3Н), 1,18 (м, 1Н), 1,35 (м, 1Н), 1,41 (с, 9Н), 1,77 (м, 1Н), 2,45 (дд, 1Н), 2,60 (дд, 1Н), 3,62 (м, 1Н), 4,20 (м, 1Н), 4,40 (д, 1Н), 5,05 (д, 1Н), 5,15 (д, 1Н), 7,40 (уш.с, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.15 (s, 6H), 0.82 (s, 9H), 0.85 (d, 3H), 0.89 (t, 3H), 1, 18 (m, 1H), 1.35 (m, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.77 (m, 1H), 2.45 (dd, 1H), 2.60 (dd, 1H ), 3.62 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.40 (d, 1H), 5.05 (d, 1H), 5.15 (d, 1H), 7.40 (br.s, 5H).

Пример 4Example 4

Синтез Boc-(3S,4R,5S)-Ist (TBDMS)-OH (Cl)Synthesis of Boc- (3S, 4R, 5S) -Ist (TBDMS) -OH (Cl)

К раствору С2 (10,48 г, 21,8 ммоль) в ТГФ (110 мл), дегазированному и продутому аргоном, добавляют Pd/C 10% (2,096 г, 20 мас. %). Смесь перемешивают в атмосфере Н₂ (1 атм) в течение 16 ч, затем фильтруют через 0,45 мм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении, получая 7,8 г бесцветного масла. Бесцветные кристаллы (6 г, 70%) получают после кристаллизации в ACN при -20°С.

(с 0,594, DCM) [Лит. [α]_D 1,74 (с 2,64, CHCl₃). Synthesis, 1991, 294]; Rf=0,45 (Merck HPTLC, RP-C18, ACN-H₂O 8:2).To a solution of C2 (10.48 g, 21.8 mmol) in THF (110 ml) degassed and purged with argon was added Pd / C 10% (2.096 g, 20 wt.%). The mixture was stirred in an H ₂ atmosphere (1 atm) for 16 hours, then filtered through a 0.45 mm Teflon filter and concentrated under reduced pressure to obtain 7.8 g of a colorless oil. Colorless crystals (6 g, 70%) were obtained after crystallization in ACN at -20 ° C.

(from 0.594, DCM) [Ref. [α] _D 1.74 (c 2.64, CHCl ₃ ). Synthesis, 1991, 294]; Rf = 0.45 (Merck HPTLC, RP-C18, ACN-H ₂ O 8: 2).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,18 (с, 6Н), 0,82 (с, 9Н), 0,85 (д, 3Н), 0,89 (т, 3Н), 1,10-1,20 (м, 2Н), 1,42 (с, 9Н), 1,80 (м, 1Н), 2,50 (м, 2Н), 3,58 (м, 1Н), 4,11 (м, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.18 (s, 6H), 0.82 (s, 9H), 0.85 (d, 3H), 0.89 (t, 3H), 1, 10-1.20 (m, 2H), 1.42 (s, 9H), 1.80 (m, 1H), 2.50 (m, 2H), 3.58 (m, 1H), 4.11 (m, 1H).

Пример 5Example 5

Синтез (2S)-2-трет-Бутил(диметил)силилокси-3-метилмасляной кислоты (SAPLB4)Synthesis of (2S) -2-tert-Butyl (dimethyl) silyloxy-3-methylbutyric acid (SAPLB4)

К перемешиваемому раствору (S)-2-гидрокси-3-метилмасляной кислоты (21,12 г, 181,9 ммоль) в ДМФ (91 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляют имидазол (27,24 г, 400,11 ммоль) и DMAP (6,94 г, 54,56 ммоль). Спустя 5 мин добавляют трет-бутилдиметилхлорсилан (60,31 г, 400,11 ммоль). Смеси дают нагреться до 23°С и перемешивают в течение ночи. Сырую реакционную смесь распределяют между Et₂O (250 мл) и водн. HCl (250 мл, 0,1 н). Органическую фазу промывают последовательно водн. NaHCO₃ (250 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (250 мл), сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая биссилилированный продукт в виде светло-желтого масла. Раствор указанного продукта в ТГФ (100 мл) добавляют по каплям (10 мин) к охлажденному (0°С) раствору КОН (30,47 г, 543 ммоль) в ТГФ/Н₂О (543 мл, 181 мл). Спустя 40 мин реакционную смесь распределяют между Н₂O (300 мл) и Et₂O (500 мл). Водную фазу распределяют между охлажденной (0°С) водн. HCl (200 мл, 3н) и EtOAc (5×250 мл). Объединенные органические экстракты сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая SAPLB4 в виде светло-желтого масла (38,38 г, 91%).Imidazole (27.24 g, 400.11) is added to a stirred solution of (S) -2-hydroxy-3-methylbutyric acid (21.12 g, 181.9 mmol) in DMF (91 ml) at 0 ° C under argon atmosphere. mmol) and DMAP (6.94 g, 54.56 mmol). After 5 minutes, tert-butyldimethylchlorosilane (60.31 g, 400.11 mmol) was added. The mixture was allowed to warm to 23 ° C and stirred overnight. The crude reaction mixture was partitioned between Et ₂ O (250 ml) and aq. HCl (250 ml, 0.1 N). The organic phase is washed successively with aq. NaHCO ₃ (250 ml, sat.) And brine (250 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure to obtain a bis-like product as a pale yellow oil. A solution of the indicated product in THF (100 ml) was added dropwise (10 min) to a cooled (0 ° C) solution of KOH (30.47 g, 543 mmol) in THF / H ₂ O (543 ml, 181 ml). After 40 minutes, the reaction mixture was partitioned between H ₂ O (300 ml) and Et ₂ O (500 ml). The aqueous phase is partitioned between chilled (0 ° C.) aq. HCl (200 ml, 3n) and EtOAc (5 × 250 ml). The combined organic extracts were dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure to give SAPLB4 as a pale yellow oil (38.38 g, 91%).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,02 (м, 6Н), 0,90 (м, 15Н), 2,08 (м, 1Н), 4,06 (д, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.02 (m, 6H), 0.90 (m, 15H), 2.08 (m, 1H), 4.06 (d, 1H).

Пример 6Example 6

Синтез Бензил-(4S)-4-трет-бутил(диметил)силилокси-5-метил-3-оксогексаноата (SAPLB3)Synthesis of Benzyl- (4S) -4-tert-butyl (dimethyl) silyloxy-5-methyl-3-oxohexanoate (SAPLB3)

К раствору (S)-2-(трет-бутилдиметилсилилокси)-3-метилмасляной кислоты (15,31 г, 65,9 ммоль) в сухом ТГФ (200 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляют CDI (16,04 г, 98,96 ммоль). Спустя 15 мин смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 ч. Полученный раствор охлаждают до -78°С и добавляют через канюлю к хорошо перемешиваемому раствору, охлажденному до -78°С, бензиллитийэнолята (625 мл, 0,37 М), [полученному добавлением по каплям раствора бензилацетата (33,34 мл) в ТГФ (165 мл) к раствору литийдиизопропиламида (0,36 М) в ТГФ/гекс. 3:1 (642 мл) при -78°С]. Температуру следует поддерживать < -75°С. Реакционную смесь перемешивают при -78°С в течение 60 мин. Затем смеси дают нагреться до -10°С (30 мин), вновь охлаждают до -78°С и гасят водн. хлоридом аммония (200 мл, нас.), после чего экстрагируют DCM (3×500 мл) при комнатной температуре. Объединенные экстракты промывают последовательно водн. NaHCO₃ (500 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (200 мл). Сушка (Na₂SO₄) с последующим удалением растворителя дает масло, которое наносят слоем на диоксид кремния С18 и заполняют сверху LC-RPC18 [Lichroprep RPC-18 (40-60 микрон) колонку. Элюирование с использованием градиента ACN-H₂O (60-100% ACN)] дает SAPLB3 в виде бесцветного масла (16,1 г, 70%). [α]_D - 25,0 (с 0,5, МеОН); Rf=0,32 (Merck, RP-C18, ACN-H₂O 7:3).To a solution of (S) -2- (tert-butyldimethylsilyloxy) -3-methylbutyric acid (15.31 g, 65.9 mmol) in dry THF (200 ml) at 0 ° C. under argon, CDI (16.04 g 98.96 mmol). After 15 minutes, the mixture was allowed to warm to room temperature and stirred for 16 hours. The resulting solution was cooled to -78 ° C and benzyl lithium enolate (625 ml, 0.37 M) was added through a cannula to a well-stirred solution cooled to -78 ° C. , [obtained by adding dropwise a solution of benzyl acetate (33.34 ml) in THF (165 ml) to a solution of lithium diisopropylamide (0.36 M) in THF / hex. 3: 1 (642 ml) at -78 ° C]. The temperature should be maintained <-75 ° C. The reaction mixture was stirred at -78 ° C for 60 minutes. Then the mixture was allowed to warm to -10 ° C (30 min), cooled again to -78 ° C and quenched with aq. ammonium chloride (200 ml, sat.), and then extracted with DCM (3 × 500 ml) at room temperature. The combined extracts were washed successively with aq. NaHCO ₃ (500 ml, sat.) And brine (200 ml). Drying (Na ₂ SO ₄ ) followed by removal of the solvent gave an oil that was layered on C18 silica and filled on top of the LC-RPC18 [Lichroprep RPC-18 (40-60 microns) column. Elution using a gradient of ACN-H ₂ O (60-100% ACN)] gives SAPLB3 as a colorless oil (16.1 g, 70%). [α] _D - 25.0 (s 0.5, MeOH); Rf = 0.32 (Merck, RP-C18, ACN-H ₂ O 7: 3).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,02 (м, 6Н), 0,92 (м, 15Н), 1,92 (м, 1Н), 3,63 (с, 2Н), 3,80 (с, 2Н), 3,38 (д, 1Н), 5,17 (д, 1Н), 5,20 (д, 1Н), 7,35 (уш.с, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.02 (m, 6H), 0.92 (m, 15H), 1.92 (m, 1H), 3.63 (s, 2H), 3, 80 (s, 2H), 3.38 (d, 1H), 5.17 (d, 1H), 5.20 (d, 1H), 7.35 (br s, 5H).

Пример 7Example 7

Синтез Бензил-(4S)-4-трет-бутоксикарбониламино-5-метил-3-оксогексаноата (SNPLB3)Synthesis of Benzyl- (4S) -4-tert-butoxycarbonylamino-5-methyl-3-oxohexanoate (SNPLB3)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLB3, из Вос-Val-OH (10 г, 46,0 ммоль) получают указанное в заглавии соединение, после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 10:1 - 5:1), в виде масла (6,9 г, 43%).Following the procedure developed for the synthesis of SAPLB3, from Boc-Val-OH (10 g, 46.0 mmol), the title compound is obtained after purification by flash LC (silica gel, hex gradient. EtOAc 10: 1 - 5: 1) as an oil (6.9 g, 43%).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,77 (д, J=7, 3Н), 0,98 (д, J=7 3Н), 1,44 (с, 9Н), 2,22 (м, 1Н), 3,58 (с, 2Н), 4,31 (м, 1Н), 5,03 (м, 1Н), 5,18 (с, 2Н), 7,34 (уш.с, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.77 (d, J = 7, 3H), 0.98 (d, J = 7 3H), 1.44 (s, 9H), 2.22 ( m, 1H), 3.58 (s, 2H), 4.31 (m, 1H), 5.03 (m, 1H), 5.18 (s, 2H), 7.34 (br s, 5H )

ESI-MC Рассчит. для C₁₉H₂₇NO₅: 349,19. Найдено (m/z): 372,1 (M+Na)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₁₉ H ₂₇ NO ₅ : 349.19. Found (m / z): 372.1 (M + Na) ⁺ .

Пример 8Example 8

Синтез Бензил-(2RS,4S)-4-трет-бутил(диметил)силилокси-2,5-диметил-3-оксогексаноата (SAPLB2)Synthesis of Benzyl- (2RS, 4S) -4-tert-butyl (dimethyl) silyloxy-2,5-dimethyl-3-oxohexanoate (SAPLB2)

Сложный эфир SAPLB3 (15,12 г, 41,49 ммоль) в сухом ТГФ (43 мл) добавляют по каплям к раствору литийдиизопропиламина при -78°С [полученному добавлением по каплям бутиллития (1,6 М раствор в гекс.; 31,12 мл, 49,79 ммоль) к диизопропиламину (7,26 мл, 51,86 ммоль) в сухом ТГФ (83 мл) в атмосфере Ar при -78°С в течение 30 мин]. Смесь перемешивают в течение 0,5 ч и затем добавляют иодметан (52,11 мл, 829,8 ммоль). Смеси дают нагреться до 23°С и потом перемешивание продолжают в течение 24 ч. Добавляют дополнительное количество иодметана (2,67 мл, 42 ммоль) и смесь перемешивают еще 24 ч или до исчезновения исходного материала. Затем смесь распределяют между водн. NH₄Cl (50 мл, нас.) и EtOAc (2×200 мл). Органический слой промывают последовательно водн. NaHCO₃ (100 мл, нас.), насыщенным раствором соли (100 мл), сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют, получая желтое масло (12 г). Чистый продукт (SAPLB2) получают после очистки путем ЖХ на диоксиде кремния при градиенте гекс. - Et₂O 100:0 - 100:2 в виде диастереомерной смеси эпимеров на С2 (10 г, 63%).SAPLB3 ester (15.12 g, 41.49 mmol) in dry THF (43 ml) was added dropwise to a solution of lithium diisopropylamine at -78 ° C [obtained by adding dropwise butyl lithium (1.6 M solution in hex .; 31, 12 ml, 49.79 mmol) to diisopropylamine (7.26 ml, 51.86 mmol) in dry THF (83 ml) in an Ar atmosphere at -78 ° C for 30 min]. The mixture was stirred for 0.5 h and then iodomethane (52.11 ml, 829.8 mmol) was added. The mixture was allowed to warm to 23 ° C and then stirring was continued for 24 hours. An additional amount of iodomethane (2.67 ml, 42 mmol) was added and the mixture was stirred for another 24 hours or until the starting material disappeared. Then the mixture was partitioned between aq. NH ₄ Cl (50 ml, sat.) And EtOAc (2 × 200 ml). The organic layer was washed successively with aq. NaHCO ₃ (100 ml, sat.), Brine (100 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated to give a yellow oil (12 g). The pure product (SAPLB2) is obtained after purification by LC on silica with a hex gradient. - Et ₂ O 100: 0 - 100: 2 in the form of a diastereomeric mixture of epimers on C2 (10 g, 63%).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,01 (с, 3Н), 0,02 (с, 3Н), 0,91 (м, 15Н), 1,30 (д, 3Н), 2,01 (м, Н), 4,01 (м, 1Н), 5,10 (д, 1Н), 5,15 (д, 1Н), 7,34 (уш.с, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.01 (s, 3H), 0.02 (s, 3H), 0.91 (m, 15H), 1.30 (d, 3H), 2, 01 (m, H), 4.01 (m, 1H), 5.10 (d, 1H), 5.15 (d, 1H), 7.34 (br s, 5H).

Пример 9Example 9

Синтез Бензил-(2RS,4S)-4-трет-бутоксикарбониламино-2,5-диметил-3-оксогексаноата (SNPLB2)Synthesis of Benzyl- (2RS, 4S) -4-tert-butoxycarbonylamino-2,5-dimethyl-3-oxohexanoate (SNPLB2)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLB2, исходя из SNPLB3 (10 г, 46,0 ммоль) получают указанное в заглавии соединение, после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 10:1 - 5:1), в виде диастереомерной смеси (1:1) эпимеров на С2 (4,4 г, 62%). Rf=0,4 и 0,37 (диоксид кремния, гекс./EtOAc 3:1).Following the procedure developed for the synthesis of SAPLB2, starting from SNPLB3 (10 g, 46.0 mmol), the title compound is obtained after purification by flash LC (silica gel, hex gradient - EtOAc 10: 1 - 5: 1), as diastereomeric mixtures (1: 1) of epimers on C2 (4.4 g, 62%). Rf = 0.4 and 0.37 (silica, hex. / EtOAc 3: 1).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,72 (м, 3Н), 0,86 (м, 3Н), 1,37 (м, 3Н), 1,44 (с, 9Н), 2,22 (м, 1Н), 3,79 (м, 1Н), 4,43 (м, 1Н), 5,02 (м, 1Н), 5,16 (м, 2Н), 7,34 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.72 (m, 3H), 0.86 (m, 3H), 1.37 (m, 3H), 1.44 (s, 9H), 2, 22 (m, 1H), 3.79 (m, 1H), 4.43 (m, 1H), 5.02 (m, 1H), 5.16 (m, 2H), 7.34 (m, 5H) )

ESI-MC Рассчит. для C₂₀H₂₉NO₅: 363,29. Найдено (m/z): 364,1 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₀ H ₂₉ NO ₅ : 363.29. Found (m / z): 364.1 (M + H) ⁺ .

Пример 10Example 10

Синтез Leu-Pro-OBn в виде соли-хлоргидрата (А5)Synthesis of Leu-Pro-OBn as the hydrochloride salt (A5)

В колбу, содержащую Boc-Leu-Pro-OBn (113,8 г, 272 ммоль) добавляют раствор хлористого водорода в диоксане (209 мл, 5,3 н) и перемешивание продолжают в течение 5 ч или до полного превращения по ТСХ (исчезновение исходного материала: Rf=0,47 (гекс. - EtOAc 2:1, диоксид кремния). Раствор концентрируют при пониженном давлении и полученное масло перегоняют с CHCl₃(3×50 мл), CHCl₃-МТВЕ (30 мл - 50 мл), МТВЕ (50 мл) и гекс. (50 мл). Остаток сушат в вакууме (16 ч) для удаления остаточного HCl, получают указанное в заглавии соединение в виде белого твердого вещества. А5 (96,4 г, 100%) используют непосредственно, без дополнительной очистки, на следующей стадии, [α]_D ²² - 85,21 (с=1, CHCl₃).A solution of hydrogen chloride in dioxane (209 ml, 5.3 N) was added to a flask containing Boc-Leu-Pro-OBn (113.8 g, 272 mmol) and stirring was continued for 5 h or until complete conversion by TLC (disappearance starting material: Rf = 0.47 (hex. - EtOAc 2: 1, silicon dioxide). The solution was concentrated under reduced pressure and the resulting oil was distilled with CHCl ₃ (3 × 50 ml), CHCl _3- MTBE (30 ml - 50 ml ), MTBE (50 ml) and hex. (50 ml). The residue was dried in vacuo (16 h) to remove residual HCl to give the title compound as a white solid. A5 (96.4 g, 100%) was used without delay GOVERNMENTAL without further purification in the next stage, [α] _D ²² - 85.21 (c = 1, CHCl _3).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,92 (д, J=7,1, 3Н), 0,96 (д, J=7,1, 3Н), 1,55 (м, 1Н), 1,82-2,14 (м, 5Н), 2,26 (м, 1Н), 3,42 (м, 1Н), 3,90 (м, 1Н), 4,32 (уш.с, 1Н), 4,64 (м, 1Н), 5,01 (д, J=11,5, 1Н), 5,16 (д, J-11,5, 1Н), 7,34 (м, 5Н), 8,40 (уш.с, 3Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.92 (d, J = 7.1, 3H), 0.96 (d, J = 7.1, 3H), 1.55 (m, 1H) 1.82-2.14 (m, 5H), 2.26 (m, 1H), 3.42 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 4.32 (br s, 1H) ), 4.64 (m, 1H), 5.01 (d, J = 11.5, 1H), 5.16 (d, J-11.5, 1H), 7.34 (m, 5H), 8.40 (br s, 3H).

ESI-MC Рассчит. для С₁₈Н₂₆N₂O₃: 318,19. Найдено (m/z): 319,2 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₁₈ H ₂₆ N ₂ O ₃ : 318.19. Found (m / z): 319.2 (M + H) ⁺ .

Пример 11Example 11

Синтез TBDMS-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA4)Synthesis of TBDMS-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA4)

В колбу, содержащую дегазированный раствор SAPLB2 (20 г, 52,88 ммоль) в ТГФ безв. (158 мл), снабженную трубками для ввода-вывода газа, добавляют 10% Pd/C (6,0 г, 30 мас.%) в атмосфере Ar. Затем через смесь пропускают ток водорода в течение 8 ч или до полного превращения, согласно ТСХ (исчезновение исходного материала). Через полученную смесь барботируют Ar для вытеснения водорода и смесь фильтруют в атмосфере Ar на воронке из синтерированного стекла через слой целита в охлажденную колбу (-5°С), содержащую HOBt (7,17 г, 52,88 ммоль) и HBTU (21,0 г, 55,53 ммоль). Добавляют дополнительное количество ТГФ (158 мл) для промывки целита. К смеси добавляют (при -5°С) NMM (5,8 мл, 52,88 ммоль) и спустя 5 мин охлажденный (-5°С) свежеприготовленный раствор, содержащий: А5 (31,96 г, 89,81 ммоль), NMM (16 мл, 145 ммоль) и ДМФ (120 мл). Реакционной смеси дают нагреться до к.т. и перемешивают 14 ч. Сырую реакционную смесь фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. К оставшемуся раствору ДМФ добавляют EtOAc (300 мл) и промывают последовательно водн. HCl (200 мл, 0,1 н), водн. NaHCO₃ (200 мл, нас.) и споласкивают насыщенным раствором соли (300 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Полученный материал наносят на диоксид кремния (EtOAc как растворитель) и хроматографируют на силикагеле, элюируя при градиенте растворителя EtOAc:гекс. 1:5 - 1:1, что дает SAPLA4 (26,8 г, 78%) в виде вязкого бесцветного масла. Указанный продукт является 1:1 смесью диастереомеров, Rf=0,5 (диоксид кремния, гекс./EtOAc 1:1, темно-синий/ванилин).Into a flask containing a degassed solution of SAPLB2 (20 g, 52.88 mmol) in THF bezv. (158 ml) equipped with gas inlet / outlet tubes, add 10% Pd / C (6.0 g, 30 wt.%) In an Ar atmosphere. Then, a stream of hydrogen is passed through the mixture for 8 hours or until complete conversion, according to TLC (disappearance of starting material). Ar was bubbled through the resulting mixture to displace hydrogen, and the mixture was filtered in an Ar atmosphere on a sintered glass funnel through a celite pad into a chilled flask (-5 ° С) containing HOBt (7.17 g, 52.88 mmol) and HBTU (21, 0 g, 55.53 mmol). Additional THF (158 ml) was added to flush celite. To the mixture was added (at -5 ° C) NMM (5.8 ml, 52.88 mmol) and after 5 minutes a chilled (-5 ° C) freshly prepared solution containing: A5 (31.96 g, 89.81 mmol) NMM (16 ml, 145 mmol) and DMF (120 ml). The reaction mixture was allowed to warm to rt. and stirred for 14 hours. The crude reaction mixture was filtered and the solvent was removed under reduced pressure. EtOAc (300 ml) was added to the remaining DMF solution and washed successively with aq. HCl (200 ml, 0.1 N) aq. NaHCO ₃ (200 ml, sat.) And rinsed with brine (300 ml). The organic phase is dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated. The resulting material was applied onto silica (EtOAc as a solvent) and chromatographed on silica gel, eluting with EtOAc: hex solvent gradient. 1: 5 - 1: 1, which gives SAPLA4 (26.8 g, 78%) as a viscous colorless oil. The specified product is a 1: 1 mixture of diastereomers, Rf = 0.5 (silica, hex. / EtOAc 1: 1, dark blue / vanillin).

ИК (пленка, ДСМ) 3295, 3060 и 3040, 2957, 2934, 2880, 2858, 1736, 1634, 1528, 1454, 1387, 1252, 1171, 1070 см^-1.IR (film, DSM) 3295, 3060 and 3040, 2957, 2934, 2880, 2858, 1736, 1634, 1528, 1454, 1387, 1252, 1171, 1070 cm ^-1 .

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,01 (с, 3Н), 0,03 (с, 3Н), 0,85-0,97 (м, 12Н), 0,92 (с, 9Н), 0,93 (с, 9Н), 1,33 (д, J=7,0, 3Н), 1,37 (д, J=7,0, 3Н), 2,40-2,65 (м, 3Н), 1,92-2,28 (м, 4Н), 3,64-3,76 (м, 1Н), 4,69-4,82 (м, 1Н), 5,05 (д, J=11,8, 1H), 5,20 (д, J=11,8, 2H), 6,73 (д, J=8,9, 1Н), 6,98 (д, J=9,0, 1Н), 7,34 (уш.с, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.01 (s, 3H), 0.03 (s, 3H), 0.85-0.97 (m, 12H), 0.92 (s, 9H ), 0.93 (s, 9H), 1.33 (d, J = 7.0, 3H), 1.37 (d, J = 7.0, 3H), 2.40-2.65 (m , 3H), 1.92-2.28 (m, 4H), 3.64-3.76 (m, 1H), 4.69-4.82 (m, 1H), 5.05 (d, J = 11.8, 1H), 5.20 (d, J = 11.8, 2H), 6.73 (d, J = 8.9, 1H), 6.98 (d, J = 9.0, 1H), 7.34 (br s, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ -5,24, -4,81, 15,70, 17,43, 17,57, 18,84, 21,48, 21,61, 18,05, 23,28, 24,43, 24,55, 24,76, 25,68, 28,87, 31,36, 31,77, 41,27, 41,67, 48,68, 48,55, 48,89, 58,71, 66,84, 83,84, 83,29, 128,09, 128,47, 135,40, 169,24, 170,67, 170,89, 171,16, 171,20, 209,11, 211,62. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ -5.24, -4.81, 15.70, 17.43, 17.57, 18.84, 21.48, 21.61, 18.05, 23.28, 24.43, 24.55, 24.76, 25.68, 28.87, 31.36, 31.77, 41.27, 41.67, 48.68, 48.55, 48, 89, 58.71, 66.84, 83.84, 83.29, 128.09, 128.47, 135.40, 169.24, 170.67, 170.89, 171.16, 171.20, 209.11, 211.62.

m/z (FAB) 611,5 [(M+Na)⁺, 15], 589,5 [(M+H)⁺, 100]; m/z (FABHRMS) 589,369 045, C₃₂H₅₂N₂O₆Si требует (М+Н)⁺, 589,367 291m / z (FAB) 611.5 [(M + Na) ⁺ , 15], 589.5 [(M + H) ⁺ , 100]; m / z (FABHRMS) 589.369 045, C ₃₂ H ₅₂ N ₂ O ₆ Si requires (M + H) ⁺ , 589.367 291

Пример 12Example 12

Синтез Boc-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA4)Synthesis of Boc-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA4)

К дегазированному раствору SNPLB2 (2,3 г, 6,32 ммоль) в сухом ТГФ (30 мл) добавляют 10% Pd/C (0,74 г, 16 мас.%) и затем гидрируют при атмосферном давлении в течение 5ч 30 мин или до полного превращения, согласно ТСХ (исчезновение исходного материала). Полученную смесь фильтруют через слой целита и добавляют дополнительное количество ТГФ (20 мл) для промывки целита. К отфильтрованному раствору (при -5°С) добавляют ВОР-Cl (1,77 г, 6,96 ммоль) и NMM (765 мкл, 6,91 ммоль) и спустя 30 мин охлажденный (-5°С) раствор, содержащий: А5 (3,15 г, 8,85 ммоль), NMM (1,88 мл, 8,84 ммоль) и ДМФ (14 мл), полученный за 10 мин до добавления. Реакционной смеси дают нагреться до к.т. и перемешивают 17 ч. Сырую реакционную смесь фильтруют и твердые продукты промывают EtOAc (100 мл). Объединенные органические растворы последовательно промывают водн. KHSO₄ (50 мл, 10%), водн. NaHCO₃ (50 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (50 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме, и полученный материал хроматографируют на силикагеле, элюируя при градиенте растворителя EtOAc:гекс. 1:4 - 1:1, что дает SNPLA4 (750 мг, 20%) в виде белого твердого вещества. Указанный продукт является смесью диастереомеров. Rf=0,26 и 0,17 (диоксид кремния, гекс./EtOAc 1:1).To a degassed solution of SNPLB2 (2.3 g, 6.32 mmol) in dry THF (30 ml) was added 10% Pd / C (0.74 g, 16 wt.%) And then hydrogenated at atmospheric pressure for 5 h 30 min or until complete conversion, according to TLC (disappearance of starting material). The resulting mixture was filtered through a pad of celite and additional THF (20 ml) was added to rinse the celite. To the filtered solution (at -5 ° C) BOP-Cl (1.77 g, 6.96 mmol) and NMM (765 μl, 6.91 mmol) were added and after 30 minutes a cooled (-5 ° C) solution containing A5 (3.15 g, 8.85 mmol), NMM (1.88 ml, 8.84 mmol) and DMF (14 ml) obtained 10 min before addition. The reaction mixture was allowed to warm to rt. and stirred for 17 hours. The crude reaction mixture was filtered and the solids washed with EtOAc (100 ml). The combined organic solutions were washed successively with aq. KHSO ₄ (50 ml, 10%), aq. NaHCO ₃ (50 ml, sat.) And brine (50 ml). The organic phase was dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated in vacuo, and the resulting material was chromatographed on silica gel, eluting with a solvent gradient of EtOAc: hex. 1: 4 - 1: 1, which gives SNPLA4 (750 mg, 20%) as a white solid. The specified product is a mixture of diastereomers. Rf = 0.26 and 0.17 (silica, hex. / EtOAc 1: 1).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,74-1,04 (м, 12Н), 1,31-1,70 (м, 6Н), 1,43 (с, 9Н), 2,01 (м, 3Н), 2,22 (м, 2Н), 3,60 (м, 2Н), 3,77 (м, 1Н), 4,40 (м, 1Н), 4,58 (м, 1Н), 4,69 (м, 1Н), 5,14 (м, 2Н), 6,75 (д, J=8,7, 1Н), 7,04 (д, J=7,8, 1Н), 7,34 (уш.с, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.74-1.04 (m, 12H), 1.31-1.70 (m, 6H), 1.43 (s, 9H), 2.01 (m, 3H), 2.22 (m, 2H), 3.60 (m, 2H), 3.77 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.58 (m, 1H) 4.69 (m, 1H), 5.14 (m, 2H), 6.75 (d, J = 8.7, 1H), 7.04 (d, J = 7.8, 1H), 7 34 (br s, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 16,74, 16,91, 20,22, 21,94, 23,53, 24,80, 25,06, 28,48, 29,14, 41,29, 41,41, 46,98, 49,45, 49,64, 51,26, 59,06, 63,70, 64,27, 67,08, 79,86, 80,10, 128,32, 128,48, 128,74, 135,74, 156,28, 169,15, 169,32, 171,18, 171,91. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 16.74, 16.91, 20.22, 21.94, 23.53, 24.80, 25.06, 28.48, 29.14, 41, 29, 41.41, 46.98, 49.45, 49.64, 51.26, 59.06, 63.70, 64.27, 67.08, 79.86, 80.10, 128.32, 128.48, 128.74, 135.74, 156.28, 169.15, 169.32, 171.18, 171.91.

ESI-MC Рассчит. для C₃₁H₄₇N₃O₇: 573,34. Найдено (m/z): 574,4 [(M+H)]⁺.ESI-MC Calculate. for C ₃₁ H ₄₇ N ₃ O ₇ : 573.34. Found (m / z): 574.4 [(M + H)] ⁺ .

Пример 13Example 13

Синтез Hiv-Leu-Pro-OBn (SHPLA4)Synthesis of Hiv-Leu-Pro-OBn (SHPLA4)

В колбу, содержащую А5 (2,06 г, 4,78 ммоль) в DCM (5 мл) при 0°С, добавляют при перемешивании NMM (506 мг, 5,01 ммоль). Через 15 мин добавляют порциями (2S)-2-гидрокси-3-метилбутановую кислоту (гидроксиизовалериановую кислоту) (487 мг, 4,78 ммоль) и DCC (986 мг, 4,78 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до 23°С и перемешивают 14 ч. Суспензию разбавляют CHCl₃ (25 мл) и распределяют между водн. HCl (10 мл, 1н), водн. NaHCO₃ (10 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (10 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 1:1 - 1:3), получая SHPLA4 (1,13 г, 80%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,46 (гекс. - EtOAc 1:2).To a flask containing A5 (2.06 g, 4.78 mmol) in DCM (5 ml) at 0 ° C, NMM (506 mg, 5.01 mmol) was added with stirring. After 15 minutes, (2S) -2-hydroxy-3-methylbutanoic acid (hydroxyisovalerianic acid) (487 mg, 4.78 mmol) and DCC (986 mg, 4.78 mmol) were added portionwise. The reaction mixture was allowed to warm to 23 ° C and stirred for 14 hours. The suspension was diluted with CHCl ₃ (25 ml) and partitioned between aq. HCl (10 ml, 1n), aq. NaHCO ₃ (10 ml, sat.) And brine (10 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash LC (silica gel, hex. Gradient - EtOAc 1: 1 - 1: 3) to give SHPLA4 (1.13 g, 80%) as a white solid. Rf = 0.46 (hex. - EtOAc 1: 2).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,81, (д, J=7,0, 3H) 0,92 (м, 6Н), 0,97 (д, J=7,0, 3H), 1,42 (м, 1Н), 1,63 (м, 2Н), 2,00 (м, 3H), 2,19 (м, 2Н), 3,60 (м, 1Н), 3,85 (м, 1Н), 3,88 (д, J=4,8, 1H), 4,46 (м, 1Н), 4,80 (м, 1Н), 5,06 (д, J=12,3, 1Н), 5,14 (д, J=12,3, 1Н), 7,32 (м, 5Н), 7,41 (д, J=8,4, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.81, (d, J = 7.0, 3H) 0.92 (m, 6H), 0.97 (d, J = 7.0, 3H) 1.42 (m, 1H), 1.63 (m, 2H), 2.00 (m, 3H), 2.19 (m, 2H), 3.60 (m, 1H), 3.85 ( m, 1H), 3.88 (d, J = 4.8, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.80 (m, 1H), 5.06 (d, J = 12.3, 1H), 5.14 (d, J = 12.3, 1H), 7.32 (m, 5H), 7.41 (d, J = 8.4, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 15,32, 19,08, 21,38, 23,11, 24,41, 24,69, 28,77, 31,31, 40,54, 46,81, 48,20, 58,82, 66,69, 75,76, 127,93, 128,14, 128,37, 135,28, 171,39, 171,95, 173,94. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 15.32, 19.08, 21.38, 23.11, 24.41, 24.69, 28.77, 31.31, 40.54, 46, 81, 48.20, 58.82, 66.69, 75.76, 127.93, 128.14, 128.37, 135.28, 171.39, 171.95, 173.94.

Пример 14Example 14

Синтез Boc-Val-Leu-Pro-OBn (SVPLA4)Synthesis of Boc-Val-Leu-Pro-OBn (SVPLA4)

В колбу, содержащую Вос-валин-ОН (652 мг, 3 ммоль) в DCM (6 мл) при 0°С, добавляют NMM (0,35 мл, 3,15 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин, добавляют порциями А5 (1,065 г, 3 ммоль), HOBt (405 мг, 3,0 ммоль) и DCC (650 мг, 3,15 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до 23°С и перемешивают 14 ч. Суспензию разбавляют DCM (25 мл) и промывают последовательно водн. KHSO₄ (2×10 мл, 10%), водн. NaHCO₃ (2×10 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (10 мл), сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают флэш ЖХ (диоксид кремния, градиент гекс. - EtOAc 2:1 - 1:1), получая SVPIA4 (1,48 г, 93%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,57 (гекс. - EtOAc 1:2).To a flask containing Boc-valine-OH (652 mg, 3 mmol) in DCM (6 ml) at 0 ° C., NMM (0.35 ml, 3.15 mmol) was added. After stirring for 15 minutes, A5 (1.065 g, 3 mmol), HOBt (405 mg, 3.0 mmol) and DCC (650 mg, 3.15 mmol) were added in portions. The reaction mixture was allowed to warm to 23 ° C and stirred for 14 hours. The suspension was diluted with DCM (25 ml) and washed successively with aq. KHSO ₄ (2 × 10 ml, 10%), aq. NaHCO ₃ (2 × 10 ml, sat.) And brine (10 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by flash LC (silica, hex. Gradient - EtOAc 2: 1 - 1: 1) to give SVPIA4 (1.48 g, 93%) as a white solid. Rf = 0.57 (hex. - EtOAc 1: 2).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,83-0,95 (м, 12Н), 1,2-1,4 (м, 1Н), 1,42 (с, 9Н), 1,40-1,51 (м, 1Н), 1,60-1,75 (м, 1Н), 1,82-2,20 (м, 5Н), 3,50-3,60 (м, 1Н), 3,74-3,78 (м, 1Н), 3,91 3,96 (м, 1Н), 4,52-4,57 (с, 1Н), 4,75-4,77 (м, 1Н), 5,04 (уш.с, 1Н), 5,05 (д, J=12,3, 1Н), 5,17 (д, J=12,3, 1Н), 6,60 (д, J=8,4, 1Н), 7,26-7,35 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.83-0.95 (m, 12H), 1.2-1.4 (m, 1H), 1.42 (s, 9H), 1.40 -1.51 (m, 1H), 1.60-1.75 (m, 1H), 1.82-2.20 (m, 5H), 3.50-3.60 (m, 1H), 3 74-3.78 (m, 1H), 3.91 3.96 (m, 1H), 4.52-4.57 (s, 1H), 4.75-4.77 (m, 1H), 5.04 (br s, 1H), 5.05 (d, J = 12.3, 1H), 5.17 (d, J = 12.3, 1H), 6.60 (d, J = 8 4, 1H); 7.26-7.35 (m, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 7,61, 19,19, 21,66, 23,23, 24,43, 24,78, 24,87, 25,55, 28,20, 28,87, 30,91, 33,86, 41,68, 46,73, 48,86, 58,77, 59,74, 66,82, 79,66, 128,08, 128,21, 128,46, 135,47, 155,66, 170,83, 171,33, 171,60. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 7.61, 19.19, 21.66, 23.23, 24.43, 24.78, 24.87, 25.55, 28.20, 28, 87, 30.91, 33.86, 41.68, 46.73, 48.86, 58.77, 59.74, 66.82, 79.66, 128.08, 128.21, 128.46, 135.47, 155.66, 170.83, 171.33, 171.60.

ESI-MC Рассчит. для С₂₈Н₄₃N₃О₆: 517,32. Найдено (m/z): 518,2 [(M+H)]⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₈ H ₄₃ N ₃ O ₆ : 517.32. Found (m / z): 518.2 [(M + H)] ⁺ .

Пример 15Example 15

Синтез Boc-Me-Val-Leu-Pro-OBu (SMPLA4)Synthesis of Boc-Me-Val-Leu-Pro-OBu (SMPLA4)

Следуя методике, разработанной для синтеза SVPIA4, исходя из А5 (1,07 мг, 3,00 ммоль) и Boc-(Me)Val-OH (694 мг, 3,00 ммоль) указанное в заглавии соединение получают в виде белого твердого вещества (1,39 г, 87%), после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 2:1 - 1:1). Rf=0,51 (гекс. - EtOAc 1:2).Following the procedure developed for the synthesis of SVPIA4, starting from A5 (1.07 mg, 3.00 mmol) and Boc- (Me) Val-OH (694 mg, 3.00 mmol), the title compound was obtained as a white solid (1.39 g, 87%), after purification by flash LC (silica gel, hex. Gradient - EtOAc 2: 1 - 1: 1). Rf = 0.51 (hex. - EtOAc 1: 2).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,83-0,91 (м, 12Н), 1,45 (с, 9Н), 1,93-2,03 (м, 4Н), 2,18-2,22 (м, 2Н), 2,76 (с, 3H), 3,40-3,50 (м, 2Н) 3,55-3,62 (м, 1Н), 3,75-3,85 (м, 1Н), 4,00-4,10 (м, 1Н), 4,50-4,60 (м, 1Н), 4,70-4,82 (м, 1Н), 5,07 (д, J=11,2, 1H), 5,24 (д, J=11,2, 1Н), 6,20 (м, 0,5Н), 6,50 (м, 0,5Н), 7,26-7,35 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.83-0.91 (m, 12H), 1.45 (s, 9H), 1.93-2.03 (m, 4H), 2.18 -2.22 (m, 2H), 2.76 (s, 3H), 3.40-3.50 (m, 2H) 3.55-3.62 (m, 1H), 3.75-3, 85 (m, 1H), 4.00-4.10 (m, 1H), 4.50-4.60 (m, 1H), 4.70-4.82 (m, 1H), 5.07 ( d, J = 11.2, 1H), 5.24 (d, J = 11.2, 1H), 6.20 (m, 0.5H), 6.50 (m, 0.5H), 7, 26-7.35 (m, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 18,43, 19,77, 21,53, 23,23, 24,47, 24,77, 25,89, 25,30, 28,85, 41,25, 46,67, 48,51, 58,75, 64,05, 66,79, 128,06, 128,18, 128,44, 135,49, 170,12, 170,80, 171,66. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 18.43, 19.77, 21.53, 23.23, 24.47, 24.77, 25.89, 25.30, 28.85, 41, 25, 46.67, 48.51, 58.75, 64.05, 66.79, 128.06, 128.18, 128.44, 135.49, 170.12, 170.80, 171.66.

ESI-MC Рассчит. для C₂₉H₄₅N₃O₆: 531,33. Найдено (m/z): 532,3 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₉ H ₄₅ N ₃ O ₆ : 531.33. Found (m / z): 532.3 (M + H) ⁺ .

Пример 16Example 16

Синтез Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA3)Hip-Leu-Pro-OBn Synthesis (SAPLA3)

В колбу, содержащую SAPLA4 (15,86 г, 26,97 ммоль), добавляют прозрачный бесцветный раствор тетрабутиламмонийфторида 1М в ТГФ (80,9 мл, 80,9 ммоль) и смесь энергично перемешивают при к.т. 15 мин (или до полной конверсии по ТСХ). Реакцию гасят добавлением Н₂O (4 мл) и силикагеля (50 г). Сырой материал концентрируют и очищают флэш ЖХ (силикагель, град. гекс.:EtOAc 2:1 - 1:1), получая SAPLA3 (12,2 г, 95%) в виде белого твердого вещества (смесь диастереомеров). Rf=0,36 и 0,29 (диоксид кремния, гекс.:CHCl₃:IPA; 1:5:1).In a flask containing SAPLA4 (15.86 g, 26.97 mmol), a clear, colorless solution of 1M tetrabutylammonium fluoride in THF (80.9 ml, 80.9 mmol) was added and the mixture was vigorously stirred at rt. 15 min (or until complete conversion by TLC). The reaction was quenched by addition of H ₂ O (4 ml) and silica gel (50 g). The crude material was concentrated and purified by flash LC (silica gel, hex.: EtOAc 2: 1 - 1: 1) to give SAPLA3 (12.2 g, 95%) as a white solid (mixture of diastereomers). Rf = 0.36 and 0.29 (silica, hex.: CHCl ₃ : IPA; 1: 5: 1).

ИК (пленка, DCM) ν 3450-3293, 3060 и 3040, 2961, 2946, 2883, 2852, 1746, 1632, 1533, 1454, 1357, 1387, 1265, 1173, 1095, 1045, 1018 см^-1.IR (film, DCM) ν 3450-3293, 3060 and 3040, 2961, 2946, 2883, 2852, 1746, 1632, 1533, 1454, 1357, 1387, 1265, 1173, 1095, 1045, 1018 cm ^-1 .

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,71 (д, J=6,8, 3H), 0,81 (д, J=6,6, 3H), 0,88 (д, J=6,5, 3H), 0,91 (д, J=6,5, 3H), 0,94 (д, J=6,5, 3H), 0,99 (д, J=7,1, 3H), 1,07 (д, J=6,5, 3H), 1,36 (д, 6,5, 3H), 1,43-1,52 (м, 2Н), 1,60-1,66 (м, 1Н), 1,93-2,10 (м, 3H), 2,12-2,23 (м, 2Н), 3,53-3,58 (м, 1Н), 3,65 (кв, J=7,1, 1Н), 3,67-3,73 (м, 1Н), 3,89 (кв, J=7,1, 1Н), 3,96 (д, J=4,2, 1Н), 4,22 (д, J=4,1, 1Н), 4,54-4,56 (м, 1Н), 4,58-4,62 (м, 1), 4,69-4,73 (м, 1Н), 5,1 (д, J=12,1, 1H), 5,18 (д, J=12,1, 1H), 6,57 (д, J=8,5, 1H), 6,63 (д, J=8,5, 1H), 7,28-7,38 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.71 (d, J = 6.8, 3H), 0.81 (d, J = 6.6, 3H), 0.88 (d, J = 6.5, 3H), 0.91 (d, J = 6.5, 3H), 0.94 (d, J = 6.5, 3H), 0.99 (d, J = 7.1, 3H ), 1.07 (d, J = 6.5, 3H), 1.36 (d, 6.5, 3H), 1.43-1.52 (m, 2H), 1.60-1.66 (m, 1H), 1.93-2.10 (m, 3H), 2.12-2.23 (m, 2H), 3.53-3.58 (m, 1H), 3.65 (q , J = 7.1, 1H), 3.67-3.73 (m, 1H), 3.89 (q, J = 7.1, 1H), 3.96 (d, J = 4.2, 1H), 4.22 (d, J = 4.1, 1H), 4.54-4.56 (m, 1H), 4.58-4.62 (m, 1), 4.69-4, 73 (m, 1H), 5.1 (d, J = 12.1, 1H), 5.18 (d, J = 12.1, 1H), 6.57 (d, J = 8.5, 1H ), 6.63 (d, J = 8.5, 1H), 7.28-7.38 (m, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 14,06, 14,26, 15,85, 16,48, 20,07, 20,53, 22,02, 22,25, 25,37, 25,46, 29,45, 29,53, 31,59, 32,09, 41,13, 42,29, 49,93, 50,91, 51,02, 59,52, 67,60, 81,02, 128,78, 1,29,2, 169,48, 171,58, 172,17, 209,76. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 14.06, 14.26, 15.85, 16.48, 20.07, 20.53, 22.02, 22.25, 25.37, 25, 46, 29.45, 29.53, 31.59, 32.09, 41.13, 42.29, 49.93, 50.91, 51.02, 59.52, 67.60, 81.02, 128.78, 1.29.2, 169.48, 171.58, 172.17, 209.76.

m/z (FAB) 497,4 [(M+Na)⁺, 12], 475,5 [(M+H)⁺, 100]; m/z (FABHRMS) 497,263 162, C₂₆H₃₈N₂O₆ требует (M+Na)⁺, 497,262 757. Анал. Рассчит. для C₂₆H₃₈N₂O₆: С, 65,82; Н, 8,02; N, 5,91. Найдено: С, 65,97; Н, 8,18; N, 5,76.m / z (FAB) 497.4 [(M + Na) ⁺ , 12], 475.5 [(M + H) ⁺ , 100]; m / z (FABHRMS) 497.263 162, C ₂₆ H ₃₈ N ₂ O ₆ requires (M + Na) ⁺ , 497.262 757. Anal. Calculate. for C ₂₆ H ₃₈ N ₂ O ₆ : C, 65.82; H, 8.02; N, 5.91. Found: C, 65.97; H, 8.18; N, 5.76.

Пример 17Example 17

Синтез Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA3)Aip-Leu-Pro-OBn Synthesis (SNPLA3)

К раствору SNPLA4 (750 мг, 1,30 ммоль) в диоксане (15 мл, безв.) добавляют раствор хлористого водорода в диоксане (39 мл, 5,3 н) и смесь перемешивают 5 ч или до полного превращения по ТСХ (исчезновение исходного материала). Раствор концентрируют при пониженном давлении и полученное масло перегоняют с CHCl₃ (15 мл), МТВЕ (15 мл) и гекс. (15 мл). Остаток сушат в вакууме для удаления остаточного HCl, получают пенистое твердое вещество. SNPLA3 (660 мг, колич.) используют непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.To a solution of SNPLA4 (750 mg, 1.30 mmol) in dioxane (15 ml, anhydrous) was added a solution of hydrogen chloride in dioxane (39 ml, 5.3 n) and the mixture was stirred for 5 h or until complete conversion by TLC (disappearance of the original material). The solution was concentrated under reduced pressure and the resulting oil was distilled with CHCl ₃ (15 ml), MTBE (15 ml) and hex. (15 ml). The residue was dried in vacuo to remove residual HCl to give a foamy solid. SNPLA3 (660 mg, quant.) Is used directly in the next step without further purification.

ESI-MC Рассчит. для C₂₆H₃₉N₃O₅: 473,29. Найдено 474,2 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₆ H ₃₉ N ₃ O ₅ : 473.29. Found 474.2 (M + H) ⁺ .

Пример 18Example 18

Синтез Val-Leu-Pro-OBn (SVPLA3)Synthesis of Val-Leu-Pro-OBn (SVPLA3)

В колбу, содержащую SVPLA4 (215 мг, 0,41 ммоль), добавляют раствор хлористого водорода в диоксане (1,5 мл, 5,3 н) и смесь перемешивают 5 ч или до полного превращения по ТСХ. Раствор концентрируют при пониженном давлении и полученное масло перегоняют с CHCl₃ (5 мл), МТВЕ (5 мл) и гекс. (5 мл). Остаток сушат в вакууме для удаления остаточного HCl, получают пенистое твердое вещество, SVPLA3 (185 мг, колич.) используют непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.In a flask containing SVPLA4 (215 mg, 0.41 mmol), a solution of hydrogen chloride in dioxane (1.5 ml, 5.3 N) was added and the mixture was stirred for 5 h or until complete conversion by TLC. The solution was concentrated under reduced pressure and the resulting oil was distilled with CHCl ₃ (5 ml), MTBE (5 ml) and hex. (5 ml). The residue was dried in vacuo to remove residual HCl, a foamy solid was obtained, SVPLA3 (185 mg, quant.) Was used directly in the next step without further purification.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,86-0,90 (м, 6Н), 1,04 (д, J=6,3, 3Н), 1,12 (д, J=6,3, 3Н), 1,45-1,55 (м, 1Н), 1-60-1,80 (м, 2Н), 1,82-2,11 (м, 2Н), 2,11-2,25 (м, 1Н), 2,25-2,40 (м, 1Н), 3,50-3,70 (м, 1Н), 3,80-3,95 (м, 2Н), 4,52-4,57 (с, 1Н), 4,70-4,85 (м, 1Н), 5,05 (д, J=12, 1Н), 5,20 (д, J=12,3, 1Н), 7,27-7,37 (м, 5Н), 7,91 (м, 1Н), 8,62 (уш.с, 2Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.86-0.90 (m, 6H), 1.04 (d, J = 6.3, 3H), 1.12 (d, J = 6, 3, 3H), 1.45-1.55 (m, 1H), 1-60-1.80 (m, 2H), 1.82-2.11 (m, 2H), 2.11-2, 25 (m, 1H), 2.25-2.40 (m, 1H), 3.50-3.70 (m, 1H), 3.80-3.95 (m, 2H), 4.52- 4.57 (s, 1H), 4.70-4.85 (m, 1H), 5.05 (d, J = 12, 1H), 5.20 (d, J = 12.3, 1H), 7.27-7.37 (m, 5H), 7.91 (m, 1H), 8.62 (br s, 2H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 18,57, 18,79, 21,83, 23,11, 24,50, 24,67, 24,90, 25,34, 28,92, 30,23, 33,25, 40,40, 47,04, 49,46, 49,94, 59,26, 60,02, 66,88, 128,16, 128,27, 128,51, 135,48, 167,54, 170,80, 171,94. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 18.57, 18.79, 21.83, 23.11, 24.50, 24.67, 24.90, 25.34, 28.92, 30, 23, 33.25, 40.40, 47.04, 49.46, 49.94, 59.26, 60.02, 66.88, 128.16, 128.27, 128.51, 135.48, 167.54, 170.80, 171.94.

Пример 19Example 19

Синтез (Me)Val-Leu-Pro-OBn (SMPLA3)Synthesis (Me) Val-Leu-Pro-OBn (SMPLA3)

Следуя методике, разработанной для синтеза SVPLA3, исходя из SMPLA4 (940 мг, 1,94 ммоль) указанное в заглавии соединение (828 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества. Указанный продукт используют непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.Following the procedure developed for the synthesis of SVPLA3, starting from SMPLA4 (940 mg, 1.94 mmol), the title compound (828 mg, quant.) Was obtained as a white solid. The specified product is used directly in the next step without further purification.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,93 (д, J=6,3, 6H), 1,07 (д, J=6,3, 3H), 1,21 (д, J=6,3, 3H), 1,47 (м, 1Н), 1,73 (м, 2Н), 2,00 (м, 3H), 2,23 (м, 1Н), 2,52 (м, 1Н), 2,83 (уш.с, 3H), 3,56-3,65 (м, 2Н), 3,77 (м, 1Н), 4,59 (м, 1Н), 4,66 (м, 1Н), 5,07 (д, J=12,3, 1Н), 5,19 (д, J=12,3, 1Н), 7,27-7,38 (м, 5Н), 7,90 (м, 1Н), 9,11 (м, 0,5Н), 9,61 (м, 0,5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.93 (d, J = 6.3, 6H), 1.07 (d, J = 6.3, 3H), 1.21 (d, J = 6.3, 3H), 1.47 (m, 1H), 1.73 (m, 2H), 2.00 (m, 3H), 2.23 (m, 1H), 2.52 (m, 1H ), 2.83 (br s, 3H), 3.56-3.65 (m, 2H), 3.77 (m, 1H), 4.59 (m, 1H), 4.66 (m, 1H), 5.07 (d, J = 12.3, 1H), 5.19 (d, J = 12.3, 1H), 7.27-7.38 (m, 5H), 7.90 ( m, 1H), 9.11 (m, 0.5H), 9.61 (m, 0.5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 13,98, 18,37, 19,57, 21,33, 22,52, 23,16, 24,74, 28,77, 29,78, 31,54, 32,54, 39,87, 46,75, 50,09, 58,91, 66,85, 122,12, 128,06, 128,24, 128,47, 135,43, 166,22, 170,73, 171,54. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 13.98, 18.37, 19.57, 21.33, 22.52, 23.16, 24.74, 28.77, 29.78, 31, 54, 32.54, 39.87, 46.75, 50.09, 58.91, 66.85, 122.12, 128.06, 128.24, 128.47, 135.43, 166.22, 170.73, 171.54.

ESI-MC Рассчит. для С₂₄Н₃₈CIN₃O₄: 431,2. Найдено (m/z): 432,3 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₄ H ₃₈ CIN ₃ O ₄ : 431.2. Found (m / z): 432.3 (M + H) ⁺ .

Пример 20Example 20

Синтез Boc-Ist (TBDMS)-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA2)Boc-Ist Synthesis (TBDMS) -Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA2)

К раствору SAPIA3 (12,2 г, 25,44 ммоль) в безв. DCM (75 мл) при -5°С в атмосфере Ar добавляют порциями DMAP (0,932 г, 7,6 ммоль), С1 (11,89 г, 30,53 ммоль) и DCC (6,613 г, 32,05 ммоль), выдерживая при этом температуру < -5°С (баня лед-соль). Реакционную смесь перемешивают 14 ч при -5°С и затем фильтруют и концентрируют. Сырой материал перегоняют с ACN, охлаждают (-10°С), фильтруют и концентрируют снова. Полученный продукт растворяют в EtOAc (400 мл) и промывают последовательно водн. KHSO₄ (2×200 мл, 10%), насыщенным раствором соли (200 мл), водн. NaHCO₃ (200 мл, нас.) и споласкивают насыщенным раствором соли (200 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая бесцветное масло, которое хроматографируют на силикагеле, элюируя при градиенте растворителя гекс. - EtOAc 3:1 - 2:1, что дает SAPLA2 (19,35 г, 90%) в виде белой пены (смесь диастереомеров).To a solution of SAPIA3 (12.2 g, 25.44 mmol) in bezv. DCM (75 ml) at -5 ° C in an Ar atmosphere was added in portions of DMAP (0.932 g, 7.6 mmol), C1 (11.89 g, 30.53 mmol) and DCC (6.613 g, 32.05 mmol), withstanding a temperature of <-5 ° C (ice-salt bath). The reaction mixture was stirred for 14 hours at -5 ° C and then filtered and concentrated. The crude material is distilled with ACN, cooled (-10 ° C), filtered and concentrated again. The resulting product was dissolved in EtOAc (400 ml) and washed successively with aq. KHSO ₄ (2 × 200 ml, 10%), brine (200 ml), aq. NaHCO ₃ (200 ml, sat.) And rinse with brine (200 mL). The organic phase was dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure to give a colorless oil, which was chromatographed on silica gel, eluting with hex solvent. - EtOAc 3: 1 - 2: 1, which gives SAPLA2 (19.35 g, 90%) as a white foam (mixture of diastereomers).

ИК (пленка, DCM) ν 3365-3200, 3069, 3038, 2959, 2930, 2882, 2857, 1746, 1688, 1640, 1533, 1456, 1389, 1258, 1171, 1086 см^-1.IR (film, DCM) ν 3365-3200, 3069, 3038, 2959, 2930, 2882, 2857, 1746, 1688, 1640, 1533, 1456, 1389, 1258, 1171, 1086 cm ^-1 .

¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 0,01 (с, 3H), 0,03 (с, 3H), 0,05 (с, 3H), 0,07 (с, 3H), 0,77-1,03 (м, 18Н), 0,84 (с, 9Н), 0,85 (с, 9Н), 1,33 (д, J=7,4, 3H), 1,32-1,36 (м, 2Н), 1,49 (д, J=7,5, 3H), 1,38-1,62 (м, 3H), 1,42 (с, 9Н), 1,44 (с, 9Н), 1,51-1,77 (м, 1Н), 1,88-2,37 (м, 3H), 2,17-2,33 (м, 2Н), 2,47-2,74 (м, 2Н), 3,34-3,72 (м, 1Н), 3,72-3,82 (м, 1Н), 3,99-4,40 (м, 1Н), 4,03-4,16 (м, 1Н), 4,49 (д, J=10,3, 1Н), 4,54-4,59 (м, 1Н), 4,63-4,70 (м, 2Н), 4,75 (д, J=4,5, 1Н), 4,77-4,81 (м, 1Н), 4,95-5,19 (м, 2Н), 5,22 (д, J=5,2, 1Н), 5,32 (д, J=10,5, 1Н), 6,38 (д, J=10,9, 1Н), 6,71 (д, J=7,4, 1Н), 6,76 (д, J=8,4, 1Н), 8,60 (д, J=9,5, 1Н). ¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.01 (s, 3H), 0.03 (s, 3H), 0.05 (s, 3H), 0.07 (s, 3H), 0, 77-1.03 (m, 18H), 0.84 (s, 9H), 0.85 (s, 9H), 1.33 (d, J = 7.4, 3H), 1.32-1, 36 (m, 2H), 1.49 (d, J = 7.5, 3H), 1.38-1.62 (m, 3H), 1.42 (s, 9H), 1.44 (s, 9H), 1.51-1.77 (m, 1H), 1.88-2.37 (m, 3H), 2.17-2.33 (m, 2H), 2.47-2.74 ( m, 2H), 3.34-3.72 (m, 1H), 3.72-3.82 (m, 1H), 3.99-4.40 (m, 1H), 4.03-4, 16 (m, 1H), 4.49 (d, J = 10.3, 1H), 4.54-4.59 (m, 1H), 4.63-4.70 (m, 2H), 4, 75 (d, J = 4.5, 1H), 4.77-4.81 (m, 1H), 4.95-5.19 (m, 2H), 5.22 (d, J = 5.2 , 1H), 5.32 (d, J = 10.5, 1H), 6.38 (d, J = 10.9, 1H), 6.71 (d, J = 7.4, 1H), 6 76 (d, J = 8.4, 1H); 8.60 (d, J = 9.5, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ -5,05, -4,49, 11,83, 12,03, 13,01, 13,51, 13,83, 14,08, 16,92, 17,10, 17,85, 19,14, 19,65, 21,57, 22,09, 22,96, 23,28, 24,36, 24,60, 24,85, 25,73, 26,97, 27,33, 28,35, 28,46, 28,93, 29,09, 29,65, 34,12, 34,16, 40,45, 40,85, 41,18, 42,20, 46,74, 46,16, 47,99, 48,34, 48,90, 49,42, 57,62, 58,81, 58,96, 60,46, 66,62, 66,88, 68,18, 69,69, 78,98, 79,24, 79,84, 82,95, 128,08-128,49, 135,48 135,61, 155,85, 158,27, 157,44, 168,40, 169,07, 170,65, 170,86, 171,42, 171,79, 203,09 205,97. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ -5.05, -4.49, 11.83, 12.03, 13.01, 13.51, 13.83, 14.08, 16.92, 17.10, 17.85, 19.14, 19.65, 21.57, 22.09, 22.96, 23.28, 24.36, 24.60, 24.85, 25.73, 26, 97, 27.33, 28.35, 28.46, 28.93, 29.09, 29.65, 34.12, 34.16, 40.45, 40.85, 41.18, 42.20, 46.74, 46.16, 47.99, 48.34, 48.90, 49.42, 57.62, 58.81, 58.96, 60.46, 66.62, 66.88, 68, 18, 69.69, 78.98, 79.24, 79.84, 82.95, 128.08-128.49, 135.48 135.61, 155.85, 158.27, 157.44, 168 40, 169.07, 170.65, 170.86, 171.42, 171.79, 203.09 205.97.

m/z (FAB) 846,6 [(М+Н)⁺, 15], 746,6 (100); m/z (FABHRMS) 868,516 630, C₄₆H₇₅N₃O₁₀Si требует (M+Na)⁺ 868,511 930m / z (FAB) 846.6 [(M + H) ⁺ , 15], 746.6 (100); m / z (FABHRMS) 868.516 630, C ₄₆ H ₇₅ N ₃ O ₁₀ Si requires (M + Na) ⁺ 868.511 930

Пример 21Example 21

Синтез Boc-Ist (TBDMS)-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA2)Synthesis of Boc-Ist (TBDMS) -Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA2)

В колбу, содержащую SNPLA3 (хлоргидрат) (660 мг, 1,12 ммоль) в DCM (15 мл, безв.) при 0°С добавляют NMM (0,19 мл). Спустя 15 мин добавляют порциями С1 (632 мг, 1,62 ммоль), HOBt (266 мг, 1,73 ммоль) и DCC (331 мг, 1,60 ммоль). Колбе дают нагреться до комнатной температуры и перемешивание продолжают в течение ночи. Сырую реакционную смесь распределяют между DCM (50 мл) и водн. KHSO₄ (2×20 мл, 10%). Органическую фазу промывают последовательно водн. NaHCO₃ (2×20 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (20 мл), сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный белый твердый продукт очищают флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 4:1 - 1:1), получая указанное в заглавии соединение в виде белого твердого вещества (700 мг, 73%, смесь диастереомеров).NMM (0.19 ml) was added to a flask containing SNPLA3 (hydrochloride) (660 mg, 1.12 mmol) in DCM (15 ml, anhydrous) at 0 ° C. After 15 minutes, C1 (632 mg, 1.62 mmol), HOBt (266 mg, 1.73 mmol) and DCC (331 mg, 1.60 mmol) were added in portions. The flask was allowed to warm to room temperature and stirring was continued overnight. The crude reaction mixture was partitioned between DCM (50 ml) and aq. KHSO ₄ (2 × 20 ml, 10%). The organic phase is washed successively with aq. NaHCO ₃ (2 × 20 ml, sat.) And brine (20 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure. The resulting white solid was purified by flash LC (silica gel, hex. Gradient - EtOAc 4: 1 - 1: 1) to give the title compound as a white solid (700 mg, 73%, diastereomer mixture).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,05 (с, 3H), 0,08 (с, 3H), 0,09 (с, 3H), 0,68-1,05 (18Н, м), 0,87 (9Н, с), 1,05-1,85 (12Н, м), 1,42 (9Н, с), 1,85-2,10 (3H, м), 2,11-2,31 (2Н, м), 2,32-2,46 (2Н, м), 2,47-2,60 (м, 2Н), 3,34-3,90 (2Н, м), 3,93-4,30 (2Н, м), 4,50-4,89 (6Н, м), 4,90-5,12 (2Н, м), 5,07 (д, J=12,2, 2Н), 5,18 (д, J-12,2, 2Н), 5,60 (1Н, д, J=9,7), 5,67 (1H, д, J=10,2), 5,89 (1H, д, J=11,2), 6,56 (1H, д, J=7,3), 6,70 (1H, д, J=8,3), 6,76 (1H, д, J=6,8), 6,94 (д, J=6,8, 1H), 7,01-7,19 (м, 1H), 7,32 (уш.с, 5Н), 8,17 (1H, д, J=7,8), 8,28 (д, J=7,8, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.05 (s, 3H), 0.08 (s, 3H), 0.09 (s, 3H), 0.68-1.05 (18H, m ), 0.87 (9H, s), 1.05-1.85 (12H, m), 1.42 (9H, s), 1.85-2.10 (3H, m), 2.11- 2.31 (2H, m), 2.32-2.46 (2H, m), 2.47-2.60 (m, 2H), 3.34-3.90 (2H, m), 3, 93-4.30 (2H, m), 4.50-4.89 (6H, m), 4.90-5.12 (2H, m), 5.07 (d, J = 12.2, 2H ), 5.18 (d, J-12.2, 2H), 5.60 (1H, d, J = 9.7), 5.67 (1H, d, J = 10.2), 5.89 (1H, d, J = 11.2), 6.56 (1H, d, J = 7.3), 6.70 (1H, d, J = 8.3), 6.76 (1H, d, J = 6.8), 6.94 (d, J = 6.8, 1H), 7.01-7.19 (m, 1H), 7.32 (br s, 5H), 8.17 ( 1H, d, J = 7.8), 8.28 (d, J = 7.8, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₄₅H₇₉N₄O₉Si: 844,54. Найдено (m/z): 845,5 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₄₅ H ₇₉ N ₄ O ₉ Si: 844.54. Found (m / z): 845.5 (M + H) ⁺ .

Пример 22Example 22

Синтез Boc-Ist (TBDMS)-Hiv-Leu-Pro-OBn (SHPLA2)Synthesis of Boc-Ist (TBDMS) -Hiv-Leu-Pro-OBn (SHPLA2)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLA2, исходя из SHPLA4 (850 мг, 2,0 ммоль) и С1 (935 мг, 2,4 ммоль) указанное в заглавии соединение получают (1,53 г, 97%) после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 3:1 - 2:1). Rf=0,63 (гекс. - EtOAc 2:1).Following the procedure developed for the synthesis of SAPLA2, based on SHPLA4 (850 mg, 2.0 mmol) and C1 (935 mg, 2.4 mmol), the title compound was obtained (1.53 g, 97%) after purification by flash LC ( silica gel, hex gradient - EtOAc 3: 1 - 2: 1). Rf = 0.63 (hex. - EtOAc 2: 1).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) смесь BocNH ротамеров: δ 0,04 (с, 3H), 0,06 (с, 3H), 0,88 (с, 9Н), 0,78-1,04 (м, 18Н), 1,10-2,80 (м, 11Н), 1,44 (с, 9Н), 1,46 (с, 9Н), 3,57 (м, 2Н), 3,74 (м, 1Н), 3,85 (м, 1Н), 4,03 (м, 1Н), 4,23 (д, J=4,8, 1H), 4,48 (м, 1Н), 4,85 (м, 1Н), 4,90 (д, J=10, 1Н), 5,05 (м, 1Н), 5,20 (д, J=10, 1Н), 5,23 (д, J=10, 1Н), 6,64 (д, J=6,4, 1Н), 6,88 (д, J=8,6, 1Н), 7,32 (м, 5Н), 8,54 (д, J=8,3, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) mixture of BocNH rotamers: δ 0.04 (s, 3H), 0.06 (s, 3H), 0.88 (s, 9H), 0.78-1.04 (m, 18H), 1.10-2.80 (m, 11H), 1.44 (s, 9H), 1.46 (s, 9H), 3.57 (m, 2H), 3.74 ( m, 1H), 3.85 (m, 1H), 4.03 (m, 1H), 4.23 (d, J = 4.8, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.85 (m, 1H), 4.90 (d, J = 10, 1H), 5.05 (m, 1H), 5.20 (d, J = 10, 1H), 5.23 (d, J = 10 , 1H), 6.64 (d, J = 6.4, 1H), 6.88 (d, J = 8.6, 1H), 7.32 (m, 5H), 8.54 (d, J = 8.3, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ -5,14, -4,58, 11,84, 12,97, 17,78, 17,92, 18,98, 21,05, 23,11, 23,49, 25,61, 26,92, 28,36, 28,70, 30,12, 33,68, 38,72, 42,86, 46,51, 48,18, 58,67, 60,24, 66,52, 71,14, 79,40, 82,66, 127,96, 128,01, 128,33, 135,36, 157,30, 169,92, 171,10, 171,69, 171,97. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ -5.14, -4.58, 11.84, 12.97, 17.78, 17.92, 18.98, 21.05, 23.11, 23.49, 25.61, 26.92, 28.36, 28.70, 30.12, 33.68, 38.72, 42.86, 46.51, 48.18, 58.67, 60, 24, 66.52, 71.14, 79.40, 82.66, 127.96, 128.01, 128.33, 135.36, 157.30, 169.92, 171.10, 171.69, 171.97.

ESI-MC: Рассчит. для C₄₂H₇₁N₃O₉: 789,50. Найдено 790,5 (М+Н)⁺.ESI-MC: Calculate. for C ₄₂ H ₇₁ N ₃ O ₉ : 789.50. Found 790.5 (M + H) ⁺ .

Пример 23Example 23

Синтез Boc-Ist (TBDMS)-VaI-Leu-Pro-OBn (SVPLA2)Synthesis of Boc-Ist (TBDMS) -VaI-Leu-Pro-OBn (SVPLA2)

Следуют методике, разработанной для синтеза SNPLA2, исходя из SVPLA3 (хлоргидрат) (1,2 г, 2,64 ммоль), С1 (1,23 г, 3,17 ммоль), DCC (654 мг, 3,17 ммоль), HOBt (464 мг, 3,43 ммоль), NMM (0,35 мл) и DCM (6 мл). Указанное в заглавии соединение получают в виде белого твердого вещества (1,87 г, 89%) после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 3:1 - 2:1).Follow the procedure developed for the synthesis of SNPLA2 based on SVPLA3 (hydrochloride) (1.2 g, 2.64 mmol), C1 (1.23 g, 3.17 mmol), DCC (654 mg, 3.17 mmol), HOBt (464 mg, 3.43 mmol), NMM (0.35 ml) and DCM (6 ml). The title compound was obtained as a white solid (1.87 g, 89%) after purification by flash LC (silica gel, hex. Gradient - EtOAc 3: 1 - 2: 1).

¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 0,07 (уш.с, 6Н), 0,81-0,96 (м, 27Н), 1,11-1,38 (м, 3H), 1,39-1,47 (уш.с, 7Н), 1,51 (уш.с, 3H), 1,58-1,70 (м, 3H), 1,70-1,84 (м, 1Н), 1,86-2,60 (м, 4Н), 2,28-2,58 (м, 2Н), 3,58-3,62 (м, 1Н), 3,62-3,73 (м, 1Н), 3,73-3,90 (м, 1Н), 4,05-4,12 (м, 1Н), 4,13-4,19 (м, 1Н), 4,19-4,23 (м, 1Н), 4,49-4,54 (м, 1Н), 4,77-5,06 (м, 2Н), 5,18 (д, J=12,3, 1H), 5,55 (уш.с, 1Н), 6,44-6,61 (м, 2Н), 7,30-7,35 (м, 5Н), 7,94-7,98 (м, 1Н). ¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.07 (br s, 6H), 0.81-0.96 (m, 27H), 1.11-1.38 (m, 3H), 1 , 39-1.47 (br.s, 7H), 1.51 (br.s, 3H), 1.58-1.70 (m, 3H), 1.70-1.84 (m, 1H) 1.86-2.60 (m, 4H), 2.28-2.58 (m, 2H), 3.58-3.62 (m, 1H), 3.62-3.73 (m, 1H), 3.73-3.90 (m, 1H), 4.05-4.12 (m, 1H), 4.13-4.19 (m, 1H), 4.19-4.23 ( m, 1H), 4.49-4.54 (m, 1H), 4.77-5.06 (m, 2H), 5.18 (d, J = 12.3, 1H), 5.55 ( broad s, 1H), 6.44-6.61 (m, 2H), 7.30-7.35 (m, 5H), 7.94-7.98 (m, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₄₂H₇₂N₄O₈Si: 788,51. Найдено (m/z): 789,5 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₄₂ H ₇₂ N ₄ O ₈ Si: 788.51. Found (m / z): 789.5 (M + H) ⁺ .

Пример 24Example 24

Синтез Boc-Ist (TBDMS)-(Me)Val-Leu-Pro-OBn (SMPLA2)Boc-Ist Synthesis (TBDMS) - (Me) Val-Leu-Pro-OBn (SMPLA2)

В колбу, содержащую SMPLA3 (хлоргидрат) (176 мг, 0,38 ммоль) в DCM (2 мл, безв.) при 0°С добавляют NMM (41 мкл, 0,38 ммоль). Спустя 15 мин добавляют порциями С1 (176 мг, 0,46 ммоль) и DCC (93 мг, 0,46 ммоль). Колбе дают нагреться до комнатной температуры и перемешивание продолжают в течение ночи. Реакционную смесь распределяют между DCM (10 мл) и водн. KHSO₄(2×5 мл, 10%). Органическую фазу промывают последовательно водн. NaHCO₃ (2×5 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (5 мл), сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученный белый твердый продукт очищают флэш ЖХ (диоксид кремния, градиент гекс. - EtOAc 3:1 - 2:1), получая SMPLA2 (127 мг, 42%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,51 (гекс. - EtOAc 1:1).To a flask containing SMPLA3 (hydrochloride) (176 mg, 0.38 mmol) in DCM (2 ml, anhydrous) at 0 ° C was added NMM (41 μl, 0.38 mmol). After 15 minutes, C1 (176 mg, 0.46 mmol) and DCC (93 mg, 0.46 mmol) were added in portions. The flask was allowed to warm to room temperature and stirring was continued overnight. The reaction mixture was partitioned between DCM (10 ml) and aq. KHSO ₄ (2 × 5 ml, 10%). The organic phase is washed successively with aq. NaHCO ₃ (2 × 5 ml, sat.) And brine (5 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure. The resulting white solid was purified by flash LC (silica, gradient hex. EtOAc 3: 1 - 2: 1) to give SMPLA2 (127 mg, 42%) as a white solid. Rf = 0.51 (hex. - EtOAc 1: 1).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ -0,08 (с, 3H), 0,05 (с, 3H), 0,75-0,86 (м, 27Н), 1,00-1,43 (м, 11Н), 1,52-1,65 (м, 1Н), 1,68-1,80 (м, 1Н), 1,83-2,01 (м, 3H), 2,08-2,24 (м, 2Н), 2,40 (м, 2Н), 2,87 (с, 3H), 3,50-3,57 (м, 3H), 3,71-3,76 (м, 1Н), 4,29 (м, 1Н), 4,47-4,63 (м, 4Н), 5,01 (д, J=12,9, 1Н), 5,11 (д, J=12,9, 1Н), 6,41 (д, J=7,8, 0,5H), 6,62 (д, J=7,8, 1Н), 7,01 (д, J=7,8, 0,5H), 7,23-7,28 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ -0.08 (s, 3H), 0.05 (s, 3H), 0.75-0.86 (m, 27H), 1.00-1, 43 (m, 11H), 1.52-1.65 (m, 1H), 1.68-1.80 (m, 1H), 1.83-2.01 (m, 3H), 2.08- 2.24 (m, 2H), 2.40 (m, 2H), 2.87 (s, 3H), 3.50-3.57 (m, 3H), 3.71-3.76 (m, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.47-4.63 (m, 4H), 5.01 (d, J = 12.9, 1H), 5.11 (d, J = 12, 9, 1H), 6.41 (d, J = 7.8, 0.5H), 6.62 (d, J = 7.8, 1H), 7.01 (d, J = 7.8, 0 5H); 7.23-7.28 (m, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,56, 13,57, 13,98, 17,83, 18,87, 19,46, 21,77, 22,94, 23,11, 24,50, 24,71, 24,80, 25,64, 25,76, 25,97, 27,29, 28,18, 28,75, 30,40, 34,18, 39,28, 40,85, 46,58, 48,61, 57,03, 58,65, 62,26, 66,63, 69,21, 78,72, 127,93, 128,05, 128,11, 128,33, 135,42, 155,91, 169,76, 170,48, 171,56, 172,01. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.56, 13.57, 13.98, 17.83, 18.87, 19.46, 21.77, 22.94, 23.11, 24, 50, 24.71, 24.80, 25.64, 25.76, 25.97, 27.29, 28.18, 28.75, 30.40, 34.18, 39.28, 40.85, 46.58, 48.61, 57.03, 58.65, 62.26, 66.63, 69.21, 78.72, 127.93, 128.05, 128.11, 128.33, 135, 42, 155.91, 169.76, 170.48, 171.56, 172.01.

ESI-MC Рассчит. для С₄₃H₇₄N₄O₈Si: 802,53. Найдено (m/z): 825,5 (M+Na)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₄₃ H ₇₄ N ₄ O ₈ Si: 802.53. Found (m / z): 825.5 (M + Na) ⁺ .

Пример 25Example 25

Синтез Ist-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA1)Synthesis of Ist-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA1)

К раствору, содержащему SAPLA2 (19,32 г, 22,8 ммоль) в безв. диоксане (78 мл), добавляют раствор соляной кислоты в безводном диоксане (4,2 н, 220 мл, 924 ммоль). Полученный раствор перемешивают при 21°С в течение 4,30 ч или до полного исчезновения исходного материала (ТСХ). Затем раствор концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в DCM (25 мл) и концентрируют для удаления остаточного HCl. Полученный остаток сушат в вакууме до полного удаления следов свободного HCl (3 ч), получая 17,3 г SAPLA1 (15,1 г, колич.) в виде белой пены (смесь диастереомеров).To a solution containing SAPLA2 (19.32 g, 22.8 mmol) in bezv. dioxane (78 ml), add a solution of hydrochloric acid in anhydrous dioxane (4.2 n, 220 ml, 924 mmol). The resulting solution was stirred at 21 ° C for 4.30 hours or until the starting material (TLC) completely disappeared. Then, the solution was concentrated under reduced pressure. The residue was dissolved in DCM (25 ml) and concentrated to remove residual HCl. The resulting residue was dried in vacuo to completely remove traces of free HCl (3 h), yielding 17.3 g of SAPLA1 (15.1 g, quant.) As a white foam (mixture of diastereomers).

Пример 26Example 26

Синтез Ist-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA1)Synthesis of Ist-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA1)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLA1, исходя из SNPLA2 (700 мг, 0,82 ммоль) получают указанное в заглавии соединение в виде белого твердого вещества (545 мг, колич.), после осаждения Et₂O (смесь диастереомеров).Following the procedure developed for the synthesis of SAPLA1, starting from SNPLA2 (700 mg, 0.82 mmol), the title compound is obtained as a white solid (545 mg, quant.), After precipitation of Et ₂ O (mixture of diastereomers).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,86-1,04 (м, 18Н), 1,02-1,22 (м, 3H), 1,23-1,58 (м, 5Н), 1,60-1,80 (м, 2Н), 1,82-2,01 (м, 3H), 2,24 (м, 2Н), 2,40-2,85 (м, 2Н), 3,24 (м, 1Н), 3,45 (м, 1Н), 3,60 (м, 1Н), 3,70-4,05 (м, 2Н), 4,46 (м, 2Н), 4,47-4,75 (м, 2Н), 5,10 (уш.с, 2Н), 7,34 (уш.с, 5Н), 7,98 (уш.с, 1Н), 8,10 (уш.с, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃₎ δ 0,86-1,04 (m, 18H), 1,02-1,22 (m, 3H), 1,23-1,58 (m, 5H) 1.60-1.80 (m, 2H), 1.82-2.01 (m, 3H), 2.24 (m, 2H), 2.40-2.85 (m, 2H), 3 24 (m, 1H), 3.45 (m, 1H), 3.60 (m, 1H), 3.70-4.05 (m, 2H), 4.46 (m, 2H), 4, 47-4.75 (m, 2H), 5.10 (br.s, 2H), 7.34 (br.s, 5H), 7.98 (br.s, 1H), 8.10 (br. s, 1H).

ESI-MC Рассчит. для С₃₄H₅₄N₄O₇: 630,40. Найдено (m/z): 631,4 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₃₄ H ₅₄ N ₄ O ₇ : 630.40. Found (m / z): 631.4 (M + H) ⁺ .

Пример 27Example 27

Синтез Ist-Hiv-Leu-Pro-OBn (SHPLA1)Synthesis of Ist-Hiv-Leu-Pro-OBn (SHPLA1)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLA1, исходя из SHPLA2 (1,53 г, 1,94 ммоль) получают указанное в заглавии соединение (1,12 г, колич.) в виде белого твердого вещества после осаждения Et₂O.Following the procedure developed for the synthesis of SAPLA1, starting from SHPLA2 (1.53 g, 1.94 mmol), the title compound (1.12 g, quant.) Is obtained as a white solid after precipitation of Et ₂ O.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,86-1,04 (м, 18Н), 1,10-1,22 (м, 3H), 1,42 (м, 2Н), 1,70 (м, 2Н), 1,97 (м, 3H), 2,24 (м, 2Н), 2,83 (м, 1Н), 2,97 (м, 1Н), 3,34 (м, 1Н), 3,61 (м, 1Н), 3,75 (м, 1Н), 3,90 (м, 1Н), 4,56 (м, 2Н), 4,75 (м, 1Н), 5,04 (д, J=11, 1Н), 5,18 (д, J=11, 1Н), 7,34 (уш.с, 5Н), 8,21 (уш.с, 3H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.86-1.04 (m, 18H), 1.10-1.22 (m, 3H), 1.42 (m, 2H), 1.70 (m, 2H), 1.97 (m, 3H), 2.24 (m, 2H), 2.83 (m, 1H), 2.97 (m, 1H), 3.34 (m, 1H) 3.61 (m, 1H), 3.75 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 4.56 (m, 2H), 4.75 (m, 1H), 5.04 ( d, J = 11, 1H), 5.18 (d, J = 11, 1H), 7.34 (br s, 5H), 8.21 (br s, 3H).

ESI-MC Рассчит. для C₃₁H₄₉N₃O₇: 575,36. Найдено (m/z): 576,3. (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₃₁ H ₄₉ N ₃ O ₇ : 575.36. Found (m / z): 576.3. (M + H) ⁺ .

Пример 28Example 28

Синтез Ist-Val-Leu-Pro-OBn (SVPLA1)Synthesis of Ist-Val-Leu-Pro-OBn (SVPLA1)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPLA1, исходя из SVPLA2 (1,87 г, 2,36 ммоль) получают указанное в заглавии соединение (1,40 г, колич.) в виде белого твердого вещества после осаждения Et₂O.Following the procedure developed for the synthesis of SAPLA1, starting from SVPLA2 (1.87 g, 2.36 mmol), the title compound (1.40 g, quant.) Is obtained as a white solid after precipitation of Et ₂ O.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,01 (м, 15Н), 1,01-1,10 (м, 3H), 1,20-1,79 (м, 5Н), 1,81-2,05 (м, 4Н), 2,05-2,15 (м, 2Н), 2,50-2,68 (м, 2Н), 2,82-3,1 (м, 1Н), 3,20-3,35 (м, 1Н), 3,50-3,70 (м, 1Н), 3,80-3,90 (м, 1Н), 4,18-4,30 (м, 1Н), 4,35-4,45 (м, 1Н), 4,45-4,55 (м, 1Н), 4,60-4,70 (м, 1Н), 5,02 (д, J=12,3, 1Н), 5,15 (д, J=12,3, 1Н), 7,28-7,38 (м, 5Н), 7,5 (уш.с, 1Н), 7,9 (уш.с, 3H), 8,15 (уш.с, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.01 (m, 15H), 1.01-1.10 (m, 3H), 1.20-1.79 (m, 5H) 1.81-2.05 (m, 4H), 2.05-2.15 (m, 2H), 2.50-2.68 (m, 2H), 2.82-3.1 (m, 1H), 3.20-3.35 (m, 1H), 3.50-3.70 (m, 1H), 3.80-3.90 (m, 1H), 4.18-4.30 ( m, 1H), 4.35-4.45 (m, 1H), 4.45-4.55 (m, 1H), 4.60-4.70 (m, 1H), 5.02 (d, J = 12.3, 1H), 5.15 (d, J = 12.3, 1H), 7.28-7.38 (m, 5H), 7.5 (br.s, 1H), 7, 9 (br.s, 3H), 8.15 (br.s, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 10,81, 14,67, 18,29, 19,32, 21,48, 23,14, 24,48, 24,76, 25,81, 30,29, 33,41, 40,31, 46,96, 49,35, 59,14, 59,94, 60,67, 66,94, 128,11, 128,32, 128,54, 135,32, 171,58, 171,74, 171,80, 172,57. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 10.81, 14.67, 18.29, 19.32, 21.48, 23.14, 24.48, 24.76, 25.81, 30, 29, 33.41, 40.31, 46.96, 49.35, 59.14, 59.94, 60.67, 66.94, 128.11, 128.32, 128.54, 135.32, 171.58, 171.74, 171.80, 172.57.

ESI-MC Рассчит. для C₃₁H₅₀N₄O₆: 574,35. Найдено (m/z): 575,3 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₃₁ H ₅₀ N ₄ O ₆ : 574.35. Found (m / z): 575.3 (M + H) ⁺ .

Пример 29Example 29

Фенациловый эфир N-трет-бутилоксикарбонилтреонина (D3)N-tert-butyloxycarbonyltreonine phenacyl ester (D3)

К перемешиваемой суспензии Boc-Thr-OH (21,91 г, 0,1 моль) в EtOAc (200 мл) при 0°С добавляют TEA (14 мл, 0,1 моль) и бромацетофенон (19,0 г, 0,1 моль). Реакционной смеси дают нагреться до 20°С, перемешивают 2 дня и затем разбавляют EtOAc (500 мл). После промывания последовательно водн. HCl (200 мл, 0,1 н), Н₂O (100 мл), водн. NaHCO₃ (200 мл, 1 н) и насыщенным раствором соли (200 мл) и сушки (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме, остаток порошкуют с Et₂O и фильтруют. Полученный твердый продукт сушат в темноте, получая D3 (28,6 г, 85%). Rf=0,55 (гекс. - EtOAc 1:1, диоксид кремния); т.пл.=114,2°С; [α]_D ²² -29,4 (с 2, EtOAc).To a stirred suspension of Boc-Thr-OH (21.91 g, 0.1 mol) in EtOAc (200 ml) at 0 ° C was added TEA (14 ml, 0.1 mol) and bromoacetophenone (19.0 g, 0, 1 mol). The reaction mixture was allowed to warm to 20 ° C, stirred for 2 days and then diluted with EtOAc (500 ml). After washing, successively aq. HCl (200 ml, 0.1 n), H ₂ O (100 ml), aq. NaHCO ₃ (200 ml, 1 N) and brine (200 ml) and drying (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated in vacuo, the residue was triturated with Et ₂ O and filtered. The resulting solid was dried in the dark to give D3 (28.6 g, 85%). Rf = 0.55 (hex. - EtOAc 1: 1, silicon dioxide); mp = 114.2 ° C; [α] _D ²² -29.4 (c 2, EtOAc).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 1,31 (д, J=6,6, 3Н), 1,46 (с, 9Н), 3,77 (уш.д, ОН), 4,44 (дд, J=9,6, 1Н), 4,6 (кв, 1Н), 5,34 (д, J=16,5, 1Н), 5,37 (уш.д, ОН) 5,68 (д, J=16,8, 1Н), 7,51 (т, 2Н), 7,65 (т, 1Н), 7,92 (дд, 2Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.31 (d, J = 6.6, 3H), 1.46 (s, 9H), 3.77 (brd, OH), 4.44 (dd, J = 9.6, 1H), 4.6 (q, 1H), 5.34 (d, J = 16.5, 1H), 5.37 (brd, OH) 5.68 ( d, J = 16.8, 1H), 7.51 (t, 2H), 7.65 (t, 1H), 7.92 (dd, 2H).

Пример 30Example 30

N-Бензилоксикарбонил-N,О-диметил-L-тирозин (E1)N-Benzyloxycarbonyl-N, O-dimethyl-L-tyrosine (E1)

К перемешиваемому раствору Z-Tyr-OH (63,24 г, 200 ммоль) в ТГФ (900 мл) при 0°С добавляют порциями тонко измельченный КОН (112,72 г, 2 моль) с последующим добавлением тетрабутиламмонийбисульфата (6,36 г, 10 мас. %). Затем добавляют по каплям за 30 мин диметилсульфат (127,2 мл, 1,33 моль), выдерживая реакционную смесь при температуре ниже 4°С. Реакционную смесь перемешивают дополнительно 30 мин и добавляют Н₂O (950 мл). После перемешивания в течение 5 ч при 0°С реакционную смесь разбавляют диэтиловым эфиром (1500 мл), водный слой отделяют и органический слой экстрагируют водн. NaHCO₃ (2×500 мл, нас.). Объединенные водные слои подкисливают до рН 1 с помощью водн. 1М KHSO₄ и экстрагируют EtOAc (5×500 мл). Органические слои объединяют, сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Остаток осаждают диэтиловым эфиром и фильтруют, получая Е1 в виде белого твердого вещества {53,85 г, 78%).To a stirred solution of Z-Tyr-OH (63.24 g, 200 mmol) in THF (900 ml) at 0 ° C, finely ground KOH (112.72 g, 2 mol) was added in portions, followed by tetrabutylammonium bisulfate (6.36 g , 10 wt.%). Then, dimethyl sulfate (127.2 ml, 1.33 mol) was added dropwise over 30 minutes while maintaining the reaction mixture at a temperature below 4 ° C. The reaction mixture was stirred an additional 30 minutes and H ₂ O (950 ml) was added. After stirring for 5 hours at 0 ° C., the reaction mixture was diluted with diethyl ether (1500 ml), the aqueous layer was separated and the organic layer was extracted with aq. NaHCO ₃ (2 × 500 ml, sat.). The combined aqueous layers were acidified to pH 1 with aq. 1M KHSO ₄ and extracted with EtOAc (5 × 500 ml). The organic layers were combined, dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated. The residue was precipitated with diethyl ether and filtered to give E1 as a white solid (53.85 g, 78%).

[α]_D ²² -57,16 (с 2,23 CHCl₃) (лит.[α]_D -48 (с=2,23 CHCl₃) JACS, 112, 21, 1990).[α] _D ²² -57.16 (c 2.23 CHCl ₃ ) (lit. [α] _D -48 (c = 2.23 CHCl ₃ ) JACS, 112, 21, 1990).

Пример 31Example 31

Фенилациловый эфир О-(бензилоксикарбонил-N,О-диметил-L-тирозил) N-трет-бутилоксикарбонил-L-треонина (D2)O- (benzyloxycarbonyl-N, O-dimethyl-L-tyrosyl) N-tert-butyloxycarbonyl-L-threonine phenylacyl ester (D2)

К раствору D3 (33,72 г, 100 ммоль) в DCM при 0°С добавляют DMAP (3,66 г, 30 ммоль) и Е1 (34,33 г, 100 ммоль). После перемешивания в течение 10 мин при 0°С добавляют DCC (22,7 г, 110 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение ночи. Затем смесь фильтруют и фильтрат концентрируют досуха. Остаток перегоняют с ACN (100 мл), вновь фильтруют и фильтрат концентрируют. Остаток растворяют в EtOAc (200 мл) и распределяют последовательно между водн. KHSO₄ (100 мл, 10%), водн. NaHCO₃ (100 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (100 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Остаток очищают флэш ЖХ (силикагель, градиент EtOAc-гекс.1:4 - 1:2), получая D2 (65,5 г, 98%). [α]_D ²² -39,56 (с 1,06 CHCl₃); Rf=0,55 (EtOAc:гекс.1:1).To a solution of D3 (33.72 g, 100 mmol) in DCM at 0 ° C was added DMAP (3.66 g, 30 mmol) and E1 (34.33 g, 100 mmol). After stirring for 10 min at 0 ° C, DCC (22.7 g, 110 mmol) was added. The reaction mixture was allowed to warm to room temperature and was stirred overnight. The mixture was then filtered and the filtrate was concentrated to dryness. The residue was distilled with ACN (100 ml), filtered again and the filtrate was concentrated. The residue was dissolved in EtOAc (200 ml) and partitioned sequentially between aq. KHSO ₄ (100 ml, 10%), aq. NaHCO ₃ (100 ml, sat.) And brine (100 ml). The organic phase is dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated. The residue was purified by flash LC (silica gel, EtOAc-hex gradient 1: 4 - 1: 2) to give D2 (65.5 g, 98%). [α] _D ²² -39.56 (c 1,06 CHCl _3); Rf = 0.55 (EtOAc: hex. 1: 1).

Пример 32Example 32

О-(Бензилоксикарбонил-N,О-диметил-L-тирозил)-N-трет-бутилоксикарбонил-L-треонин (D1)O- (Benzyloxycarbonyl-N, O-dimethyl-L-tyrosyl) -N-tert-butyloxycarbonyl-L-threonine (D1)

К гомогенному раствору D2 (24,49 г, 38,4 ммоль) в водн. АсОН (211 мл, 90%) при 0°С добавляют порошкообразный Zn (18,65 г, 288,3 ммоль). Полученную смесь перемешивают при 0°С в течение 3 ч до исчезновения исходного материала (по ТСХ). Реакционную смесь фильтруют через целит и промывают EtOAc (200 мл). Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и остаток перегоняют с Et₂O (200 мл) и фильтруют. Фильтрат распределяют последовательно между водн. KHSO₄ (100 мл, 10%) и насыщенным раствором соли (100 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄) и концентрируют, получая масло, которое очищают флэш ЖХ (Lichroprep RPC18, ACN:H₂O 1:1 (800 мл, затем 7:3 (600 мл)], получая D1 (15,53 г, 74%) в виде белого твердого вещества. [α]_D ²⁴ -27,6 (с 2,187, DCM); лит.[α]_D -20,5 (с 2, DCM), JOC, 62, 2, 1997. Rf=0,58 [ACN/H₂O (7:3)].To a homogeneous solution of D2 (24.49 g, 38.4 mmol) in aq. AcOH (211 ml, 90%), Zn powder (18.65 g, 288.3 mmol) was added at 0 ° C. The resulting mixture was stirred at 0 ° C for 3 hours until the starting material disappeared (by TLC). The reaction mixture was filtered through celite and washed with EtOAc (200 ml). The filtrate was concentrated under reduced pressure and the residue was distilled with Et ₂ O (200 ml) and filtered. The filtrate was partitioned sequentially between aq. KHSO ₄ (100 ml, 10%) and brine (100 ml). The organic phase was dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated to give an oil which was purified by flash LC (Lichroprep RPC18, ACN: H ₂ O 1: 1 (800 ml, then 7: 3 (600 ml)] to give D1 (15, 53 g, 74%) as a white solid. [Α] _D ²⁴ -27.6 (s 2.187, DCM); lit. [α] _D -20.5 (s 2, DCM), JOC, 62, 2 1997. Rf = 0.58 [ACN / H ₂ O (7: 3)].

ИК (пленка, DCM) ν 3400, 3050, 2900, 1715, 1613, 1514, 1456, 1402, 1368, 1248, 1165, 1061, 1036 см^-1.IR (film, DCM) ν 3400, 3050, 2900, 1715, 1613, 1514, 1456, 1402, 1368, 1248, 1165, 1061, 1036 cm ⁻¹ .

¹H-ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 1,29 (д, J=6,5, 3H), 1,45 (с, 9Н), 2,74 (с, 3H), 2,75 (с, 3H), 2,76-3,31 (м, 2Н), 3,77 (с, 3H), 4,42-4,52 (м, 1Н), 4,66-4,83 (м, 1Н), 5,01-5,16 (м, 2Н), 5,30-5,53 (м, 2Н), 6,72-6,81 (м, 2Н), 6,95-7,09 (м, 2Н), 7,35 (уш.с, 5Н). ¹ H-NMR (200 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.29 (d, J = 6.5, 3H), 1.45 (s, 9H), 2.74 (s, 3H), 2.75 (s , 3H), 2.76-3.31 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 4.42-4.52 (m, 1H), 4.66-4.83 (m, 1H ), 5.01-5.16 (m, 2H), 5.30-5.53 (m, 2H), 6.72-6.81 (m, 2H), 6.95-7.09 (m , 2H); 7.35 (br s, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 16,44, 16,82, 28,23, 31,71, 31,97, 33,82, 33,68, 55,14, 56,87, 56,75, 60,39, 60,58, 67,51, 67,76, 71,83, 72,47, 80,40, 113,91, 127,59, 128,69, 129,77, 136,42, 156,00, 156,19, 156,71, 158,31, 159,47, 169,78. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃₎ δ 16.44, 16.82, 28.23, 31.71, 31.97, 33.82, 33.68, 55.14, 56.87, 56, 75, 60.39, 60.58, 67.51, 67.76, 71.83, 72.47, 80.40, 113.91, 127.59, 128.69, 129.77, 136.42, 156.00, 156.19, 156.71, 158.31, 159.47, 169.78.

m/z (FAB) 567,1 [(M+Na)⁺, 46], 545,1 [(M+H)⁺, 7], 445,1(100); m/z (FABHRMS) 567,233 280, C₂₈H₃₅N₂O₉ требует (М+Na)⁺567,231 851.m / z (FAB) 567,1 [ (M + Na) +, 46], 545,1 [(M + H ) +, 7], 445.1 (100); m / z (FABHRMS) 567.233 280, C ₂₈ H ₃₅ N ₂ O ₉ requires (M + Na) ⁺ 567.231 851.

Пример 33Example 33

Синтез Boc-Thr(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPL7)Synthesis of Boc-Thr (Z-N (Me) -O (Me) -Tyr) -Ist-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPL7)

В колбу, содержащую HBTU (9,079 г, 23,9 ммоль), HOBt (3,490 г, 22,8 ммоль), SAPLA1 (15,258 г, 22,8 ммоль) и D1 (12,417 г, 22,8 ммоль), вводят через канюлю в атмосфере Ar при -5°С раствор безв. DCM (296 мл) и безв. ДМФ (148 мл). После 5 мин перемешивания добавляют по каплям с помощью шприца DIPEA (15,9 мл, 91,2 ммоль), выдерживая температуру ниже -5°С. Полученную реакционную смесь перемешивают 21 ч при -5°С. Добавляют МТВЕ (300 мл) и KHSO₄ (200 мл, 10%) и образовавшуюся смесь фильтруют и концентрируют до 300 мл. Добавляют дополнительное количество МТВЕ (200 мл), слои разделяют и органическую фазу последовательно обрабатывают водн. KHSO₄ (200 мл, 10%), насыщенным раствором соли (200 мл), водн. NaHSO₄ (200 мл, нас.) и споласкивают насыщенным раствором соли (200 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄) и концентрируют при пониженном давлении, получая желтое масло (30 г). Масло растворяют в МТВЕ и обрабатывают гекс. при перемешивании. Осаждается твердый продукт, добавляют дополнительное количество гекс. Твердый продукт фильтруют, получая SAPL7 (18,33 г, 69% выход) в виде белого твердого вещества. Указанный продукт является смесью двух диастереомеров. Rf=0,80 и 0,59 (гекс.:EtOAc 1:2).Into a flask containing HBTU (9.079 g, 23.9 mmol), HOBt (3.490 g, 22.8 mmol), SAPLA1 (15.258 g, 22.8 mmol) and D1 (12.417 g, 22.8 mmol) are introduced via cannula in Ar atmosphere at -5 ° С solution without. DCM (296 ml) and anv. DMF (148 ml). After 5 minutes of stirring, a DIPEA syringe (15.9 ml, 91.2 mmol) was added dropwise with a temperature below -5 ° C. The resulting reaction mixture was stirred for 21 hours at -5 ° C. MTBE (300 ml) and KHSO ₄ (200 ml, 10%) are added and the resulting mixture is filtered and concentrated to 300 ml. An additional amount of MTBE (200 ml) was added, the layers were separated, and the organic phase was successively treated with aq. KHSO ₄ (200 ml, 10%), brine (200 ml), aq. NaHSO ₄ (200 ml, sat.) And rinsed with brine (200 ml). The organic phase was dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated under reduced pressure to give a yellow oil (30 g). The oil is dissolved in MTBE and treated with hex. with stirring. A solid precipitates, additional hex is added. The solid product was filtered to give SAPL7 (18.33 g, 69% yield) as a white solid. The specified product is a mixture of two diastereomers. Rf = 0.80 and 0.59 (hex.: EtOAc 1: 2).

ИК (пленка, DCM) ν 3350, 2961, 2927, 2893, 1744, 1688, 1638, 1514, 1454, 1368, 1304, 1248, 1171, 1067, 1036 см^-1.IR (film, DCM) ν 3350, 2961, 2927, 2893, 1744, 1688, 1638, 1514, 1454, 1368, 1304, 1248, 1171, 1067, 1036 cm ^-1 .

¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 0,74-0,92 (м, 18Н), 1,05-1,15 (м, 2Н), 1,18-1,20 (м, 2Н), 1,23 (д, J=6,8, 3H), 1,25 (д, J=6,8, 3H), 1,29 (д, J=6,9, 3H), 1,42 (с, 9Н), 1,45 (с, 9Н), 1,50-1,66 (м, 3H), 1,89-2,02 (м, 4Н), 2,17-2,25 (м, 2Н), 2,37-2,42 (м, 1Н), 2,81 (с, 3H), 2,88 (с, 3H), 2,91 (с, 3H), 2,95 (с, 3H), 2,84-2,93 (м, 2Н), 3,17-3,25 (м, 1Н), 3,53-3,59 (м, 1Н), 3,75 (с, 3H), 3,88-3,98 (м, 4Н), 4,49 (д, J=3,1, 1Н), 4,51 (д, J=3,1, 1Н), 4,53-4,57 (м, 1Н), 4,68-4,72 (м, 1Н), 4,96-4,99 (м, 1Н), 5,02-5,33 (м, 4Н), 5,02 (д, J=3,2, 1Н), 5,23 (д, J=3,1, 1Н), 5,26-5,33 (м, 1Н), 5,47 (1д, J=9,5, 1H), 6,74 (д, J=7,8, 2H), 6,77 (д, J=7,7, 2H), 7,08 (д, J=7,7, 2H), 7,17 (д, J=7,5, 1H), 7,21 (д, J=9,5, 1H), 7,23-7,36 (м, 10Н), 7,75 (д, J=7,9, 1H), 7,79 (д, J=8,2, 1H). ¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.74-0.92 (m, 18H), 1.05-1.15 (m, 2H), 1.18-1.20 (m, 2H) 1.23 (d, J = 6.8, 3H), 1.25 (d, J = 6.8, 3H), 1.29 (d, J = 6.9, 3H), 1.42 ( s, 9H), 1.45 (s, 9H), 1.50-1.66 (m, 3H), 1.89-2.02 (m, 4H), 2.17-2.25 (m, 2H), 2.37-2.42 (m, 1H), 2.81 (s, 3H), 2.88 (s, 3H), 2.91 (s, 3H), 2.95 (s, 3H) ), 2.84-2.93 (m, 2H), 3.17-3.25 (m, 1H), 3.53-3.59 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.88-3.98 (m, 4H), 4.49 (d, J = 3.1, 1H), 4.51 (d, J = 3.1, 1H), 4.53-4.57 (m, 1H), 4.68-4.72 (m, 1H), 4.96-4.99 (m, 1H), 5.02-5.33 (m, 4H), 5.02 (d , J = 3.2, 1H), 5.23 (d, J = 3.1, 1H), 5.26-5.33 (m, 1H), 5.47 (1d, J = 9.5, 1H), 6.74 (d, J = 7.8, 2H), 6.77 (d, J = 7.7, 2H), 7.08 (d, J = 7.7, 2H), 7, 17 (d, J = 7.5, 1H), 7.21 (d, J = 9.5, 1H), 7.23-7.36 (m, 10H), 7.75 (d, J = 7 9, 1H); 7.79 (d, J = 8.2, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,95, 13,27, 15,16, 16,47, 17,33, 18,79, 21,28, 23,65, 24,65, 24,72, 27,09, 28,08, 28,93, 31,20, 31,32, 33,62, 33,98, 38,38, 41,01, 47,12, 49,38, 54,96, 55,17, 57,89, 58,83, 60,01, 60,16, 67,18, 71,05, 71,32, 80,34, 81,24, 113,89, 127,51, 128,59, 129,69, 129,77, 135,52, 136,77, 156,93, 158,27, 169,87, 170,62, 171,15, 171,85, 172,39, 204,88. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.95, 13.27, 15.16, 16.47, 17.33, 18.79, 21.28, 23.65, 24.65, 24, 72, 27.09, 28.08, 28.93, 31.20, 31.32, 33.62, 33.98, 38.38, 41.01, 47.12, 49.38, 54.96, 55.17, 57.89, 58.83, 60.01, 60.16, 67.18, 71.05, 71.32, 80.34, 81.24, 113.89, 127.51, 128, 59, 129.69, 129.77, 135.52, 136.77, 156.93, 158.27, 169.87, 170.62, 171.15, 171.85, 172.39, 204.88.

m/z (FAB) 1181,2 [(M+Na)⁺, 20], 1159,2 [(M+H)⁺, 80], 1059,2 (100). Анал. рассчит. C₆₂H₈₇N₅O₁₆: С, 64,30; Н, 7,502; N, 6,05. Найдено: С, 64,14; Н, 7,66; N, 5,95.m / z (FAB) 1181.2 [(M + Na) ⁺ , 20], 1159.2 [(M + H) ⁺ , 80], 1059.2 (100). Anal calculated C ₆₂ H ₈₇ N ₅ O ₁₆ : C, 64.30; H, 7.502; N, 6.05. Found: C, 64.14; H, 7.66; N, 5.95.

Пример 34Example 34

Синтез Boc-Thr(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPL7)Synthesis of Boc-Thr (Z-N (Me) -O (Me) -Tyr) -Ist-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPL7)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL7, исходя из SNPLA1 (150 мг, 0,22 ммоль) и D1 (122 мг, 0,22 ммоль), указанное в заглавии соединение получают в виде белого твердого вещества (130 мг, 51%), после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 2:1 - 1:3) (смесь диастереомеров).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL7, starting from SNPLA1 (150 mg, 0.22 mmol) and D1 (122 mg, 0.22 mmol), the title compound was obtained as a white solid (130 mg, 51%), after purification by flash LC (silica gel, hex. gradient - EtOAc 2: 1 - 1: 3) (mixture of diastereomers).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,74-1,03 (м, 18Н), 1,16-1,37 (м, 10Н), 1,45 (с, 9Н), 1,68 (м, 3H), 1,99 (м, 4Н), 2,22 (м, 2Н), 2,48 (м, 1Н), 2,82 (с, 3H), 2,84-3,10 (м, 2Н), 3,19 (м, 1Н), 3,51-3,69 (м, 2Н), 3,75 (с, 3H), 3,72-4,02 (м, 3H), 4,18 (м, 1Н), 4,50-4,73 (м, 4Н), 5,00-5,27 (м, 5Н), 5,49 (м, 2Н), 6,54 (д, J=9,2, 1Н), 6,78 (д, J=6,8, 2Н), 7,02 (д, J=6,8, 2Н), 7,18 (м, 1Н), 7,23-7,36 (м, 10Н), 7,52 (д, J=6,8, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.74-1.03 (m, 18H), 1.16-1.37 (m, 10H), 1.45 (s, 9H), 1.68 (m, 3H), 1.99 (m, 4H), 2.22 (m, 2H), 2.48 (m, 1H), 2.82 (s, 3H), 2.84-3.10 ( m, 2H), 3.19 (m, 1H), 3.51-3.69 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.72-4.02 (m, 3H), 4 18 (m, 1H), 4.50-4.73 (m, 4H), 5.00-5.27 (m, 5H), 5.49 (m, 2H), 6.54 (d, J = 9.2, 1H), 6.78 (d, J = 6.8, 2H), 7.02 (d, J = 6.8, 2H), 7.18 (m, 1H), 7.23 -7.36 (m, 10H); 7.52 (d, J = 6.8, 1H).

ESI-MC Рассчит. для С₆₂Н₈₈N₆O₁₅: 1156,63. Найдено 1158,3 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₆₂ H ₈₈ N ₆ O ₁₅ : 1156.63. Found 1158.3 (M + H) ⁺ .

Пример 35Example 35

Синтез Boc-Thr(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hiv-Leu-PrO-OBn (SHPL7)Synthesis of Boc-Thr (Z-N (Me) -O (Me) -Tyr) -Ist-Hiv-Leu-PrO-OBn (SHPL7)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL7, исходя из SHPLA1 (1,12 г, 1,94 ммоль) и SAPLD1 (544,6 мг, 1,94 ммоль), указанное в заглавии соединение (1,045 г, 61%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 1:1 - 1:2). Rf=0,46 (гекс. - EtOAc 1:2).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL7, starting from SHPLA1 (1.12 g, 1.94 mmol) and SAPLD1 (544.6 mg, 1.94 mmol), the title compound (1.045 g, 61%) was obtained as white solid after purification by flash LC (silica gel, gradient hex. - EtOAc 1: 1 - 1: 2). Rf = 0.46 (hex. - EtOAc 1: 2).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,74-1,02 (м, 18Н), 1,20 (м, 5Н), 1,40 (м, 3H), 1,46 (с, 9Н), 1,62 (м, 2Н), 1,82-2,20 (м, 3H), 2,20 (м, 2Н), 2,50 (м, 1Н), 2,78 (с, 3H), 2,90 (м, 1Н), 3,20 (м, 1Н), 3,58 (м, 1Н), 3,67 (с, 3H), 3,79 (м, 1Н), 3,88 (м, 1Н), 4,06 (м, 2Н), 4,40 (м, 2Н), 4,82 (м, 2Н), 4,94 (м, 1Н), 4,98 (м, 1Н), 5,08 (м, 1Н), 5,28 (м, 3H), 5,56 (д, J=6,2, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 6,98 (д, J=6,5, 1Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,34 (м, 10Н), 7,52 (д, J=6,2, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.74-1.02 (m, 18H), 1.20 (m, 5H), 1.40 (m, 3H), 1.46 (s, 9H ), 1.62 (m, 2H), 1.82-2.20 (m, 3H), 2.20 (m, 2H), 2.50 (m, 1H), 2.78 (s, 3H) , 2.90 (m, 1H), 3.20 (m, 1H), 3.58 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.79 (m, 1H), 3.88 ( m, 1H), 4.06 (m, 2H), 4.40 (m, 2H), 4.82 (m, 2H), 4.94 (m, 1H), 4.98 (m, 1H), 5.08 (m, 1H), 5.28 (m, 3H), 5.56 (d, J = 6.2, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 6, 98 (d, J = 6.5, 1H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.34 (m, 10H), 7.52 (d, J = 6.2, 1H )

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,27, 13,77, 13,95, 16,75, 17,46, 18,31, 20,78, 20,96, 23,09, 24,35, 24,53, 26,74, 27,93, 28,63, 30,17, 33,76, 39,06, 40,01, 46,69, 48,17, 54,89, 57,04, 57,68, 58,65, 60,20, 60,60, 66,74, 67,08, 68,31, 70,30, 78,49, 79,90, 113,62, 127,36, 127,70, 128,14, 128,18, 128,31, 129,64, 135,19, 136,31, 155,86, 156,61, 158,09, 169,77, 170,70, 171,06, 171,17, 173,78. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃₎ δ 11.27, 13.77, 13.95, 16.75, 17.46, 18.31, 20.78, 20.96, 23.09, 24, 35, 24.53, 26.74, 27.93, 28.63, 30.17, 33.76, 39.06, 40.01, 46.69, 48.17, 54.89, 57.04, 57.68, 58.65, 60.20, 60.60, 66.74, 67.08, 68.31, 70.30, 78.49, 79.90, 113.62, 127.36, 127, 70, 128.14, 128.18, 128.31, 129.64, 135.19, 136.31, 155.86, 156.61, 158.09, 169.77, 170.70, 171.06, 171.17, 173.78.

ESI-MC Рассчит. для C₅₉H₈₃N₅O₁₅: 1101,59. Найдено 1102,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₉ H ₈₃ N ₅ O ₁₅ : 1101.59. Found 1102.7 (M + H) ⁺ .

Пример 36Example 36

Синтез Boc-Thr(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Val-Leu-Pro-OBn (SVPL7)Synthesis of Boc-Thr (Z-N (Me) -O (Me) -Tyr) -Ist-Val-Leu-Pro-OBn (SVPL7)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL7, исходя из SVPLA1 (1,44 г, 2,37 ммоль) и D1 (1,29 г, 2,37 ммоль), указанное в заглавии соединение (1,96 г, 75%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc 2:1 - 1:3). Rf=0,56 (EtOAc).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL7, starting from SVPLA1 (1.44 g, 2.37 mmol) and D1 (1.29 g, 2.37 mmol), the title compound (1.96 g, 75%) was obtained in the form of a white solid after purification by flash LC (silica gel, hex. gradient - EtOAc 2: 1 - 1: 3). Rf = 0.56 (EtOAc).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,83-0,95 (м, 15Н), 1,0-1,22 (м, 4Н), 1,23-1,44 (м, 9Н), 1,60-1,65 (м, 1Н), 1,87-2,01 (м, 4Н), 2,09-2,20 (м, 3H), 2,77 (уш.с, 8Н), 2,84-3,01 (м, 1Н), 3,17-3,24 (м, 1Н), 3,51-3,60 (м, 1Н), 3,73 (с, 3H), 3-80-3,90 (м, 2Н), 4,03-4,15 (м, 1Н), 4,25-4,40 (м, 2Н), 4,40-4,52 (м, 1Н), 4,70-4,80 (м, 2Н), 5,00-5,26 (м, 4Н), 5,34-5,36 (м, 1Н), 5,58 (м, 1Н), 6,75 (д, 2Н, J=7,8), 6,96-7,09 (м, 1Н),7,04 (д, 2Н, J=8,1), 7,04-7,12 (м, 1Н), 7,16-7,20 (м, 1Н), 7,18-7,30 (м, 10Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.83-0.95 (m, 15H), 1.0-1.22 (m, 4H), 1.23-1.44 (m, 9H) 1.60-1.65 (m, 1H), 1.87-2.01 (m, 4H), 2.09-2.20 (m, 3H), 2.77 (br s, 8H) 2.84-3.01 (m, 1H), 3.17-3.24 (m, 1H), 3.51-3.60 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3 -80-3.90 (m, 2H), 4.03-4.15 (m, 1H), 4.25-4.40 (m, 2H), 4.40-4.52 (m, 1H) 4.70-4.80 (m, 2H), 5.00-5.26 (m, 4H), 5.34-5.36 (m, 1H), 5.58 (m, 1H), 6 75 (d, 2H, J = 7.8), 6.96-7.09 (m, 1H), 7.04 (d, 2H, J = 8.1), 7.04-7.12 ( m, 1H), 7.16-7.20 (m, 1H), 7.18-7.30 (m, 10H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,43, 13,63, 17,17, 18,35, 19,21, 21,40, 23,23, 24,49, 24,67, 26,87, 28,10, 28,79, 30,48, 32,11, 33,84, 38,47, 40,37, 41,22, 46,80, 48,61, 55,04, 56,88, 57,95, 58,75, 59,25, 60,82, 66,87, 67,33, 69,40, 70,50, 76,44, 80,45, 113,58, 127,51, 127,74, 127,88, 128,10, 128,25, 128,33, 128,46, 128,72, 129,64, 129,77, 135,35, 136,37, 156,77, 158,29, 169,83, 170,57, 171,3, 171,4, 172,81. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.43, 13.63, 17.17, 18.35, 19.21, 21.40, 23.23, 24.49, 24.67, 26, 87, 28.10, 28.79, 30.48, 32.11, 33.84, 38.47, 40.37, 41.22, 46.80, 48.61, 55.04, 56.88, 57.95, 58.75, 59.25, 60.82, 66.87, 67.33, 69.40, 70.50, 76.44, 80.45, 113.58, 127.51, 127, 74, 127.88, 128.10, 128.25, 128.33, 128.46, 128.72, 129.64, 129.77, 135.35, 136.37, 156.77, 158.29, 169.83, 170.57, 171.3, 171.4, 172.81.

ESI-MC Рассчит. для С₅₉H₈₄N₆O₁₄: 1100,60. Найдено (m/z): 1101,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₉ H ₈₄ N ₆ O ₁₄ : 1100.60. Found (m / z): 1101.7 (M + H) ⁺ .

Пример 37Example 37

Синтез Boc-Thr(N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hip-Leu-Pro-OH (SAPL6)Synthesis of Boc-Thr (N (Me) -O (Me) -Tyr) -Ist-Hip-Leu-Pro-OH (SAPL6)

К раствору SAPL7 (18,33 г, 15,8 ммоль) в ТГФ (без стабилизатора, 500 мл), дегазированному и продутому аргоном, добавляют Pd(OH)₂-C (20% Pd, 7,33 г, 40% м/м). Смесь перемешивают в атмосфере Н₂ (1 атм) в течение 20 ч, затем фильтруют через 0,45 мкм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении, получая белое твердое вещество. Добавляют толуол (30 мл) и вновь концентрируют при пониженном давлении и глубоком вакууме, получая SAPL6 (14,78 г, колич.) в виде белого твердого вещества.Pd (OH) ₂ -C (20% Pd, 7.33 g, 40% m) is added to a solution of SAPL7 (18.33 g, 15.8 mmol) in THF (without stabilizer, 500 ml), degassed and purged with argon. / m). The mixture was stirred under an atmosphere of H ₂ (1 atm) for 20 hours, then filtered through a 0.45 μm Teflon filter and concentrated under reduced pressure to give a white solid. Toluene (30 ml) was added and concentrated again under reduced pressure and deep vacuum to give SAPL6 (14.78 g, quant.) As a white solid.

¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 0,79-1,08 (м, 18Н), 1,09-1,18 (м, 3H), 1,26 (уш.с, 3H), 1,29 (д, J=7,1, 3H), 1,47 (с, 9Н), 1,50-1,66 (м, 3H), 1,84-1,94 (м, 1Н), 1,90-2,28 (м, 4Н), 2,35-2,50 (м, 4Н), 2,30-2,35 (м, 1Н), 2,44-3,18 (м, 4Н), 2,60 (м, 3H), 3,53-3,61 (м, 1Н), 3,77 (с, 3H), 3,88-4,07 (м, 4Н), 4,12-4,72 (м, 4Н), 5,18-5,24 (м, 1Н), 5,24 (уш.с, 1Н), 6,84 (д, J=7,9, 2Н), 7,08 (д, J=8,0, 2Н), 7,13 (д, J=8,2, 1Н), 7,18 (д, J=8,2, 1Н), 7,62-7,68 (уш.с, 1Н). ¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.79-1.08 (m, 18H), 1.09-1.18 (m, 3H), 1.26 (br s, 3H), 1 29 (d, J = 7.1, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.50-1.66 (m, 3H), 1.84-1.94 (m, 1H), 1 90-2.28 (m, 4H), 2.35-2.50 (m, 4H), 2.30-2.35 (m, 1H), 2.44-3.18 (m, 4H) 2.60 (m, 3H), 3.53-3.61 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.88-4.07 (m, 4H), 4.12-4 72 (m, 4H), 5.18-5.24 (m, 1H), 5.24 (br s, 1H), 6.84 (d, J = 7.9, 2H), 7.08 (d, J = 8.0, 2H), 7.13 (d, J = 8.2, 1H), 7.18 (d, J = 8.2, 1H), 7.62-7.68 ( br.s., 1H).

m/z (FAB) 972,7 [(M+K)⁺, 33], 934,9 (М)⁺, 100].m / z (FAB) 972.7 [(M + K) ⁺ , 33], 934.9 (M) ⁺ , 100].

Пример 38Example 38

Синтез Boc-Thr(N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Aip-Leu-Pro-OH (SNPL6)Synthesis of Boc-Thr (N (Me) -O (Me) -Tyr) -Ist-Aip-Leu-Pro-OH (SNPL6)

К раствору SNPL7 (130 мг, 0,11 ммоль) в смеси IPA:Н₂O (2:1, 4 мл: 2 мл), дегазированному и продутому аргоном, добавляют Pd(OH)₂-C (20% Pd, 45 мг, 35% м/м). Смесь перемешивают в атмосфере Н₂ (1 атм) в течение 20 ч, затем фильтруют через 0,45 мкм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении, получая белое твердое вещество. Добавляют IPA (10 мл) и вновь концентрируют при пониженном давлении и глубоком вакууме, получая SNPL6 (100 мг, колич.) в виде белого твердого вещества.To a solution SNPL7 (130 mg, 0.11 mmol) in IPA: H ₂ O (2: 1, 4 ml: 2 ml) degassed and purged with argon, was added Pd (OH) ₂ -C (20% Pd, 45 mg, 35% m / m). The mixture was stirred under an atmosphere of H ₂ (1 atm) for 20 hours, then filtered through a 0.45 μm Teflon filter and concentrated under reduced pressure to give a white solid. IPA (10 ml) was added and concentrated again under reduced pressure and deep vacuum to give SNPL6 (100 mg, quant.) As a white solid.

ESI-MC Рассчит. для C₄₇H₇₆N₆O₁₃: 932,55. Найдено 934,0 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₄₇ H ₇₆ N ₆ O ₁₃ : 932.55. Found 934.0 (M + H) ⁺ .

Пример 39Example 39

Синтез Boc-Thr(N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hiv-Leu-Pro-OH (SHPL6)Synthesis of Boc-Thr (N (Me) -O (Me) -Tyr) -Ist-Hiv-Leu-Pro-OH (SHPL6)

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL6, исходя из SHPL7 (1,045 г, 0,95 ммоль). Указанное в заглавии соединение (825 мг, 99%) получают в виде белого твердого вещества.Follow the procedure developed for the synthesis of SAPL6 based on SHPL7 (1.045 g, 0.95 mmol). The title compound (825 mg, 99%) was obtained as a white solid.

ESI-MC Рассчит.для C₄₄H₇₁N₅O₁₃: 877,50. Найдено 878,5 (М+Н)⁺.ESI-MC Calcd for C ₄₄ H ₇₁ N ₅ O ₁₃ : 877.50. Found 878.5 (M + H) ⁺ .

Пример 40Example 40

Синтез Boc-Thr(N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Val-Leu-Pro-OH (SVPL6)Synthesis of Boc-Thr (N (Me) -O (Me) -Tyr) -Ist-Val-Leu-Pro-OH (SVPL6)

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL6, исходя из SVPL7 (250 мг, 0,23 ммоль). Указанное в заглавии соединение (195 мг, 97%) получают в виде белого твердого вещества.Follow the procedure developed for the synthesis of SAPL6 based on SVPL7 (250 mg, 0.23 mmol). The title compound (195 mg, 97%) was obtained as a white solid.

ESI-MC Рассчит. для C₄₄H₇₂N₆O₁₂: 876,56. Найдено (m/z): 877,5 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₄₄ H ₇₂ N ₆ O ₁₂ : 876.56. Found (m / z): 877.5 (M + H) ⁺ .

Пример 41Example 41

Синтез цикло-N(Ме)-О(Me)-Tyr-O-(Boc-Thr)-Ist-Hip-Leu-Pro (SAPL5)Synthesis of Cyclo-N (Me) -O (Me) -Tyr-O- (Boc-Thr) -Ist-Hip-Leu-Pro (SAPL5)

В охлажденный (-5°С) 5 л реактор, снабженный механической мешалкой, содержащий ACN (3,2 л), добавляют в атмосфере Ar при перемешивании HATU (14,436 г, 37,9 ммоль) и HOAt (5,254 г, 38,6 ммоль). Добавляют SAPL6 (14,77 г, 15,8 ммоль), растворенный в ACN (500 мл). NMM (3,65 мл, 33,18 ммоль) добавляют по каплям с помощью шприца, поддерживая температуру ниже -5°С. Полученной реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают 20 ч. Растворитель упаривают при пониженном давлении. Сырой продукт перегоняют с EtOAc (500 мл) и раствор фильтруют для удаления осадка. Раствор промывают последовательно воды. KHSO₄ (2×500 мл), насыщенным раствором соли (500 мл), водн. NaHCO₃ (500 мл, нас.) и споласкивают насыщенным раствором соли (500 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄) и концентрируют при пониженном давлении, получая желтое твердое вещество (17,52 г), которое очищают флэш-хроматографией (ЖХ) (силикагель, град. гекс.:EtOAc 3:1 - 1:1), получая SAPL5 (9,83 г, 68%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,60 (гекс.:EtOAc 1:3). [α]_D -209,4 (с 0,3, CHCl₃).In a cooled (-5 ° C) 5 L reactor equipped with a mechanical stirrer containing ACN (3.2 L), HATU (14.436 g, 37.9 mmol) and HOAt (5.254 g, 38.6) were added under Ar atmosphere with stirring. mmol). Add SAPL6 (14.77 g, 15.8 mmol) dissolved in ACN (500 ml). NMM (3.65 ml, 33.18 mmol) was added dropwise using a syringe, keeping the temperature below -5 ° C. The resulting reaction mixture was allowed to warm to room temperature and stirred for 20 hours. The solvent was evaporated under reduced pressure. The crude product was distilled with EtOAc (500 ml) and the solution was filtered to remove a precipitate. The solution is washed successively with water. KHSO ₄ (2 × 500 ml), brine (500 ml), aq. NaHCO ₃ (500 ml, sat.) And rinsed with brine (500 ml). The organic phase was dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated under reduced pressure to give a yellow solid (17.52 g), which was purified by flash chromatography (LC) (silica gel, hex.: EtOAc 3: 1 - 1: 1 ), obtaining SAPL5 (9.83 g, 68%) as a white solid. Rf = 0.60 (hex.: EtOAc 1: 3). [α] _D -209.4 (c 0.3, CHCl ₃ ).

ИК (пленка, DCM) ν 3343, 2961, 2927, 2893, 1734, 1640, 1514, 1454, 1368, 1302, 1248, 1167, 1018 см^-1.IR (film, DCM) ν 3343, 2961, 2927, 2893, 1734, 1640, 1514, 1454, 1368, 1302, 1248, 1167, 1018 cm ^-1 .

¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 0,78 (д, J=7,1, 3H), 0,85 (д, J=7,0, 3H), 0,87 (д, J=7,0, 3H), 0,89-0,93 (м, 9Н), 1,10-1,20 (м, 1Н), 1,20 (д, J=6,4, 3H), 1,30 (д, J=6,9, 3H), 1,36 (м, 2Н), 1,40 (м, 2Н), 1,44 (с, 9Н), 1,48-1,72 (м, 2Н), 1,72-1,78 (м, 1Н), 1,83-1,88 (м, 1Н), 2,01-2,17 (м, 3H), 2,27-2,29 (м, 1Н), 2,47-2,53 (м, 1Н), 2,53 (с, 3H), 2,93 (уш.с, 1Н), 3,14-3,19 (м, 2Н), 3,34-3,37 (дд, J₁=14,8, J2=4,l, 1Н), 3,54-3,56 (дд, J₁=10,5, J₂=4,l, 1Н), 3,58-3,63 (м, 1Н), 3,68-3,72 (м, 1Н), 3,78 (с, 3H), 3,94-3,98 (м, 1Н), 3,98 (кв, J=7,5, 1Н), 4,07-4,11 (3д, J=3,8, 1Н), 4,57-4,61 (м, 2Н), 4,77-4,81 (м, 1Н), 4,97-4,98 (кв, J=3,5, 1Н), 5,02 (д, J=10,5, 1Н), 5,18 (д, J=4,2, 1Н), 6,81 (д, J=8,5, 2Н), 7,05 (д, J=8,5, 2Н), 7,19 (д, J=10,2, 1Н), 7,64 (д, J=10,1, 1Н). ¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.78 (d, J = 7.1, 3H), 0.85 (d, J = 7.0, 3H), 0.87 (d, J = 7.0, 3H), 0.89-0.93 (m, 9H), 1.10-1.20 (m, 1H), 1.20 (d, J = 6.4, 3H), 1, 30 (d, J = 6.9, 3H), 1.36 (m, 2H), 1.40 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.48-1.72 (m, 2H), 1.72-1.78 (m, 1H), 1.83-1.88 (m, 1H), 2.01-2.17 (m, 3H), 2.27-2.29 ( m, 1H), 2.47-2.53 (m, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.93 (br.s, 1H), 3.14-3.19 (m, 2H) 3.34-3.37 (dd, J ₁ = 14.8, J2 = 4, l, 1H); 3.54-3.56 (dd, J ₁ = 10.5, J ₂ = 4, l , 1H), 3.58-3.63 (m, 1H), 3.68-3.72 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.94-3.98 (m, 1H ), 3.98 (q, J = 7.5, 1H), 4.07-4.11 (3d, J = 3.8, 1H), 4.57-4.61 (m, 2H), 4 77-4.81 (m, 1H), 4.97-4.98 (q, J = 3.5, 1H), 5.02 (d, J = 10.5, 1H), 5.18 ( d, J = 4.2, 1H), 6.81 (d, J = 8.5, 2H), 7.05 (d, J = 8.5, 2H), 7.19 (d, J = 10 2, 1H); 7.64 (d, J = 10.1, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,56, 14,68, 14,97, 15,27, 16,61, 18,45, 20,64, 23,50, 24,71, 24,78, 26,92, 27,73, 27,94, 31,55, 33,94, 33,94, 38,27, 38,52, 40,64, 46,86, 49,54, 49,65, 55,16, 55,19, 55,84, 57,12, 65,96, 67,30, 71,00, 80,27, 81,41, 114,02, 130,22, 158,53, 168,30, 169,31, 170,12, 170,29, 171,20, 172,38, 204,51. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃₎ δ 11.56, 14.68, 14.97, 15.27, 16.61, 18.45, 20.64, 23.50, 24.71, 24, 78, 26.92, 27.73, 27.94, 31.55, 33.94, 33.94, 38.27, 38.52, 40.64, 46.86, 49.54, 49.65, 55.16, 55.19, 55.84, 57.12, 65.96, 67.30, 71.00, 80.27, 81.41, 114.02, 130.22, 158.53, 168, 30, 169.31, 170.12, 170.29, 171.20, 172.38, 204.51.

m/z (FAB) 938,9 [(M+Na)⁺, 55], 916,9 [(M+H)⁺, 100]; m/z (FABHRMS) 916,532 120, C₄₇H₇₃N₅O₁₃ требует (M+Na)⁺=916,528 300.m / z (FAB) 938.9 [(M + Na) ⁺ , 55], 916.9 [(M + H) ⁺ , 100]; m / z (FABHRMS) 916.532 120, C ₄₇ H ₇₃ N ₅ O ₁₃ requires (M + Na) ⁺ = 916.528 300.

Пример 42Example 42

Синтез цикло-N(Me)-O(Me)-Tyr-O-(Boc-Thr)-Ist-Aip-Leu-Pro (SNPL5)Synthesis of Cyclo-N (Me) -O (Me) -Tyr-O- (Boc-Thr) -Ist-Aip-Leu-Pro (SNPL5)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL5, исходя из SNPL6 (100 мг, 0,11 ммоль), указанное в заглавии соединение (40 мг, 57%) получают в виде белого твердого вещества после флэш ЖХ (силикагель, EtOAc:гекс.4:1 - чистый EtOAc). Rf=0,4 (EtOAc).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL5, starting from SNPL6 (100 mg, 0.11 mmol), the title compound (40 mg, 57%) was obtained as a white solid after flash LC (silica gel, EtOAc: hex. 4: 1 - pure EtOAc). Rf = 0.4 (EtOAc).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,76 (д, J=6,8, 3H), 0,83-0,96 (м, 15Н), 1,10-1,20 (м, 1Н), 1,25 (д, J=6,4, 3H), 1,27 (д, J=6,3, 3H), 1,32 (д, J=6,8, 3H), 1,41 (м, 2Н), 1,44 (с, 9Н), 1,50-1,70 (м, 2Н), 1,99-2,31 (м, 5Н), 2,61 (с, 3H), 2,91-3,04 (м, 1Н), 3,11-3,37 (м, 2Н), 3,48-3,64 (м, 3H), 3,69-3,81 (м, 1Н), 3,80 (с, 3H), 4,18 (м, 2Н), 4,46-4,67 (м, 3H), 4,81 (т, J=10,7, 1H), 5,01 (м, 1Н), 6,85 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3,2H), 7,33 (д, J=8,7, 1Н), 7,65 (д, J=9,2, 1Н), 7,86 (д, J=10,7, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.76 (d, J = 6.8, 3H), 0.83-0.96 (m, 15H), 1.10-1.20 (m, 1H), 1.25 (d, J = 6.4, 3H), 1.27 (d, J = 6.3, 3H), 1.32 (d, J = 6.8, 3H), 1, 41 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.50-1.70 (m, 2H), 1.99-2.31 (m, 5H), 2.61 (s, 3H) 2.91-3.04 (m, 1H), 3.11-3.37 (m, 2H), 3.48-3.64 (m, 3H), 3.69-3.81 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 4.18 (m, 2H), 4.46-4.67 (m, 3H), 4.81 (t, J = 10.7, 1H), 5 01 (m, 1H), 6.85 (d, J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3.2H), 7.33 (d, J = 8.7, 1H), 7.65 (d, J = 9.2, 1H), 7.86 (d, J = 10.7, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₄₇H₇₄N₆O₁₂ 914,54. Найдено (m/z) 915,5 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₄₇ H ₇₄ N ₆ O ₁₂ 914.54. Found (m / z) 915.5 (M + H) ⁺ .

Пример 43Example 43

Синтез цикло-N(Ме)-О(Me)-Tyr-O-(Boc-Thr)-Ist-Hiv-Leu-Pro (SHPL5)Synthesis of Cyclo-N (Me) -O (Me) -Tyr-O- (Boc-Thr) -Ist-Hiv-Leu-Pro (SHPL5)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL5, исходя из SHPL6 (2,45 г, 2,78 ммоль) указанное в заглавии соединение (2,1 г, 88%) получают в виде белого твердого вещества после кристаллизации DCM/н-гептан (1:3). Rf=0,33 (гекс.-EtOAc 1:3).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL5, starting from SHPL6 (2.45 g, 2.78 mmol), the title compound (2.1 g, 88%) was obtained as a white solid after crystallization of DCM / n-heptane (1 : 3). Rf = 0.33 (hex. EtOAc 1: 3).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,04 (м, 18Н), 1,19 (м, 5Н), 1,41 (с, 9Н), 1,42 (м, 2Н), 1,63 (м, 1Н), 1,77 (м, 1Н), 1,90 (м, 1Н), 2,00-2,22 (м, 3H), 2,44 (м, 1Н), 2,58 (с, 3H), 2,95 (м, 1Н), 3,14 (м, 1Н), 3,26 (м, 1Н), 3,36 (м, 1Н), 3,58 (м, 1Н), 3,68 (м, 2Н), 3,78 (с, 3H), 3,96 (м, 1Н), 4,12 (м, 1Н), 4,30 (м, 1Н), 4,61 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 4,94 (м, 1Н), 5,03 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,54 (д, J=7,3, 1Н), 7,69 (д, J=6,4, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.04 (m, 18H), 1.19 (m, 5H), 1.41 (s, 9H), 1.42 (m, 2H ), 1.63 (m, 1H), 1.77 (m, 1H), 1.90 (m, 1H), 2.00-2.22 (m, 3H), 2.44 (m, 1H) 2.58 (s, 3H), 2.95 (m, 1H), 3.14 (m, 1H), 3.26 (m, 1H), 3.36 (m, 1H), 3.58 ( m, 1H), 3.68 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.96 (m, 1H), 4.12 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 4.61 (m, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.94 (m, 1H), 5.03 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H) 7.07 (d, J = 8.3, 2H); 7.54 (d, J = 7.3, 1H); 7.69 (d, J = 6.4, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,38, 14,57, 15,15, 18,11, 18,45, 20,67, 23,40, 24,70, 26,91, 27,89, 30,20, 33,57, 33,90, 38,51, 39,07, 46,62, 48,13, 55,16, 56,05, 56,23, 56,94, 65,67, 68,60, 71,13, 79,41, 80,01, 113,97, 129,69, 130,25, 155,75, 158,49, 168,51, 169,57, 170,24, 170,94, 171,06, 173,59. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.38, 14.57, 15.15, 18.11, 18.45, 20.67, 23.40, 24.70, 26.91, 27, 89, 30.20, 33.57, 33.90, 38.51, 39.07, 46.62, 48.13, 55.16, 56.05, 56.23, 56.94, 65.67, 68.60, 71.13, 79.41, 80.01, 113.97, 129.69, 130.25, 155.75, 158.49, 168.51, 169.57, 170.24, 170, 94, 171.06, 173.59.

ESI-MC: Рассчит. для C₄₄H₆₉N₅O₁₂ 859,49. Найдено (m/z) 860,4 (M+H)⁺.ESI-MC: Calculate. for C ₄₄ H ₆₉ N ₅ O ₁₂ 859.49. Found (m / z) 860.4 (M + H) ⁺ .

Пример 44Example 44

Синтез цикло-N(Me)-O(Me)-Tyr-O-(Boc-Thr)-Ist-Val-Leu-Pro (SVPL5)Synthesis of Cyclo-N (Me) -O (Me) -Tyr-O- (Boc-Thr) -Ist-Val-Leu-Pro (SVPL5)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL5, исходя из SVPL6 (90 мг, 0,1 ммоль), 30 мг (35%) указанного в заглавии соединения получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (диоксид кремния, градиент гекс. - EtOAc от 1:4 до 1:10). Rf=0,35 (EtOAc).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL5, starting from SVPL6 (90 mg, 0.1 mmol), 30 mg (35%) of the title compound was obtained as a white solid after purification by flash LC (silica, hex gradient. EtOAc from 1: 4 to 1:10). Rf = 0.35 (EtOAc).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,85-1,00 (м, 18Н), 1,14-1,38 (м, 8Н), 1,44 (с, 9Н), 1,57 (м, 2Н), 1,76-1,95 (м, 2Н), 2,01-2,21 (м, 2Н), 2,33 (дд, J₁=7,3, J₂=14,7, 1Н), 2,53 (м, 1Н), 3,57 (с, 3H), 3,17 (дд, J₁=10,7, J₂=14.7, 1Н), 3,35 (дд, J₁=4,4, J₂=14,2, 1Н), 3,56 (дд, J₁=3,9, J₂=10,3, 1Н), 3,59-3,77 (м, 4Н), 3,78 (с, 3H), 4,06 (дт, J₁=3,9, J₂=9,3, 1Н), 4,33 (дд, J₁=2, 9, J₂=9,3, 1Н), 4,38 (дд, J₁=6,8, J₂=10,3, 1Н), 4,58 (дд, J₁=5,4, J₂=7,3, 1Н), 4,79 (т, J=10,3, 1Н), 4,98 (д, J=9,3, 1Н), 5,03 (дд, J₁=2,4, J₂=6,3, 1Н), 6,81 (уш.с, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,24 (д, J=9,8, 1Н), 7,54 (д, J=9,8, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.85-1.00 (m, 18H), 1.14-1.38 (m, 8H), 1.44 (s, 9H), 1.57 (m, 2H), 1.76-1.95 (m, 2H), 2.01-2.21 (m, 2H), 2.33 (dd, J ₁ = 7.3, J ₂ = 14, 7, 1H), 2.53 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.17 (dd, J ₁ = 10.7, J ₂ = 14.7, 1H), 3.35 (dd, J ₁ = 4.4, J ₂ = 14.2, 1H), 3.56 (dd, J ₁ = 3.9, J ₂ = 10.3, 1H), 3.59-3.77 (m, 4H), 3.78 (s, 3H), 4.06 (dt, J ₁ = 3.9, J ₂ = 9.3, 1H), 4.33 (dd, J ₁ = 2, 9, J ₂ = 9.3, 1H), 4.38 (dd, J ₁ = 6.8, J ₂ = 10.3, 1H), 4.58 (dd, J ₁ = 5.4, J ₂ = 7.3 , 1H), 4.79 (t, J = 10.3, 1H), 4.98 (d, J = 9.3, 1H), 5.03 (dd, J ₁ = 2.4, J ₂ = 6.3, 1H), 6.81 (br s, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.08 (d, J = 8.3, 2H), 7, 24 (d, J = 9.8, 1H); 7.54 (d, J = 9.8, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,48, 14,50, 15,20, 18,86, 19,44, 21,03, 23,64, 24,83, 24,96, 26,97, 28,01, 28,135, 30,21, 33,53, 33,96, 38,56, 38,61, 41,05, 41,66, 46,84, 48,53, 55,24, 55,51, 56,31, 57,14, 59,75, 65,85, 70,60, 80,52, 114,11, 129,75, 130,33, 156,77, 158,67, 168,53, 170,21, 170,29, 170,73, 171,02, 174,34. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.48, 14.50, 15.20, 18.86, 19.44, 21.03, 23.64, 24.83, 24.96, 26, 97, 28.01, 28.135, 30.21, 33.53, 33.96, 38.56, 38.61, 41.05, 41.66, 46.84, 48.53, 55.24, 55, 51, 56.31, 57.14, 59.75, 65.85, 70.60, 80.52, 114.11, 129.75, 130.33, 156.77, 158.67, 168.53, 170.21, 170.29, 170.73, 171.02, 174.34.

ESI-MC Рассчит. для C₄₄H₇₀N₆O₁₁: 858,51. Найдено (m/z): 859,5 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₄₄ H ₇₀ N ₆ O ₁₁ : 858.51. Found (m / z): 859.5 (M + H) ⁺ .

Пример 45Example 45

Синтез цикло-N(Ме)-О(Me)-Tyr-O-(Thr)-Ist-Hip-Leu-Pro (SAPL4)Synthesis of Cyclo-N (Me) -O (Me) -Tyr-O- (Thr) -Ist-Hip-Leu-Pro (SAPL4)

В колбу, содержащую SAPL5 (8,79 г, 9,6 ммоль) в безв. диоксане (93 мл), добавляют раствор соляной кислоты в безв. диоксане (5,3 н, 122 мл, 647 ммоль). Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 8 ч или до полного исчезновения исходного материала. После завершения взаимодействия раствор концентрируют при пониженном давлении. Остаток разбавляют CHCl₃ (100 мл) и вновь концентрируют. Пенистый сырой продукт упаривают совместно с CHCl₃/гекс., что дает SAPL4 (8,17 г, 100% выход) в виде белого твердого вещества.In a flask containing SAPL5 (8.79 g, 9.6 mmol) in bezv. dioxane (93 ml), add a solution of hydrochloric acid in bezv. dioxane (5.3 n, 122 ml, 647 mmol). The resulting solution was stirred at room temperature for 8 hours or until the starting material completely disappeared. After completion of the reaction, the solution was concentrated under reduced pressure. The residue was diluted with CHCl ₃ (100 ml) and concentrated again. The foamy crude product was evaporated together with CHCl ₃ / hex., Which gives SAPL4 (8.17 g, 100% yield) as a white solid.

m/z (FAB) 838,3 [(M+Na)⁺, 28], 816,3 [(M+H)⁺, 100].m / z (FAB) 838.3 [(M + Na) ⁺ , 28], 816.3 [(M + H) ⁺ , 100].

Пример 46Example 46

Синтез цикло-N(Ме)-O(Me)-Tyr-O-(Thr)-Ist-Aip-Leu-Pro (SNPL4:Synthesis of cyclo-N (Me) -O (Me) -Tyr-O- (Thr) -Ist-Aip-Leu-Pro (SNPL4:

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL4, исходя из SNPL5 (40 мг, 43 мкмоль), указанное в заглавии соединение (36 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества после осаждения Et₂O.Following the procedure developed for the synthesis of SAPL4, starting from SNPL5 (40 mg, 43 μmol), the title compound (36 mg, quant.) Was obtained as a white solid after precipitation with Et ₂ O.

ESI-MC: Рассчит. для C₄₂H₆₅N₅O₁₁ 815,47. Найдено m/z 825,5 (М)⁺.ESI-MC: Calculate. for C ₄₂ H ₆₅ N ₅ O ₁₁ 815.47. Found m / z 825.5 (M) ⁺ .

Пример 47Example 47

Синтез цикло-N(Ме)-О(Me)-Tyr-O-(Thr)-Ist-Hiv-Leu-Pro (SNPL4)Synthesis of cyclo-N (Me) -O (Me) -Tyr-O- (Thr) -Ist-Hiv-Leu-Pro (SNPL4)

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL4, исходя из SHPL5 (500 мг, 0,58 ммоль). Указанное в заглавии соединение (440 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества после осаждения Et₂O.Follow the procedure developed for the synthesis of SAPL4 based on SHPL5 (500 mg, 0.58 mmol). The title compound (440 mg, quant.) Was obtained as a white solid after precipitation of Et ₂ O.

ESI-MC: Рассчит. для С₃₉Н₆₁N₅О₁₀ 759,44. Найдено m/z 760,4 (M+H)⁺.ESI-MC: Calculate. for C ₃₉ H ₆₁ N ₅ O ₁₀ 759.44. Found m / z 760.4 (M + H) ⁺ .

Пример 48Example 48

Синтез цикло-N(Me)-O(Me)-Tyr-O-(Thr)-Ist-Val-Leu-Pro (SVPL4)Synthesis of Cyclo-N (Me) -O (Me) -Tyr-O- (Thr) -Ist-Val-Leu-Pro (SVPL4)

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL4, исходя из SVPL5 (25 мг, 29 мкмоль). Указанное в заглавии соединение (22 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества после совместного упаривания с МТВЕ.Follow the procedure developed for the synthesis of SAPL4 based on SVPL5 (25 mg, 29 μmol). The title compound (22 mg, quant.) Was obtained as a white solid after coevaporation with MTBE.

ESI-MC Рассчит. для С₃₉H₆₂N₆О₉: 758,5. Найдено (m/z): 759,5 [(М+Н)]⁺.ESI-MC Calculate. for C ₃₉ H ₆₂ N ₆ O ₉ : 758.5. Found (m / z): 759.5 [(M + H)] ⁺ .

Пример 49Example 49

Z-N-Метил-D-лейцин (H1)Z-N-Methyl-D-Leucine (H1)

Ref: Coggins, J.R.; Benoiton, N.L. Can. J. Chem 1971, 49, 1968.Ref: Coggins, J.R .; Benoiton, N.L. Can. J. Chem 1971, 49, 1968.

К перемешиваемому раствору Z-D-Leu-OH (10,32 г, 38,9 ммоль) в безв. ТГФ (120 мл) при 0°С в атмосфере Ar добавляют по каплям через шприц иодметан (8,55 мл, 136,1 ммоль). Затем гидрид натрия (4,80 г, 120,6 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) добавляют порциями, поддерживая температуру при 0"С. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч. Следы растворителя удаляют при пониженном давлении и остаток растворяют в EtOAc (120 мл) и экстрагируют водн. NaHCO₃ (300 мл, нас.). Водную фазу промывают EtOAc (2×100 мл). Водную фазу охлаждают, добавляют твердую лимонную кислоту до рН 1-2 и раствор экстрагируют EtOAc (4×250 мл), сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Продукт кристаллизуют в EtOAc-гептан (1:3), получая H1 (7,84 г, 72%) в виде белого твердого кристаллического вещества. Т.пл.: 71-72°С. [α]_D ²⁵ +23 (с 1, EtOH).To a stirred solution of ZD-Leu-OH (10.32 g, 38.9 mmol) in bezv. THF (120 ml) at 0 ° C. under an Ar atmosphere is added dropwise through a syringe of iodomethane (8.55 ml, 136.1 mmol). Then sodium hydride (4.80 g, 120.6 mmol, 60% dispersion in mineral oil) was added portionwise while maintaining the temperature at 0 ° C. The reaction mixture was stirred at room temperature for 24 hours. Traces of the solvent were removed under reduced pressure and the residue dissolved in EtOAc (120 ml) and extracted with aq. NaHCO ₃ (300 ml, sat.). The aqueous phase is washed with EtOAc (2 × 100 ml). The aqueous phase is cooled, solid citric acid is added to pH 1-2 and the solution is extracted with EtOAc ( 4 × 250 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated.The product is crystallized in EtOAc-heptane (1: 3) to give H1 (7.84 g, 7 2%) as a white crystalline solid, mp: 71-72 ° C. [Α] _D ²⁵ +23 (s 1, EtOH).

Пример 50Example 50

Синтез Z-дидемнина A (SAPL3)Synthesis of Z-Didemnin A (SAPL3)

В колбу, содержащую HATU (8,76 г, 23,0 ммоль), HOAt (3,17 г, 23,1 ммоль) SAPL4 (7,09 г, 15,8 ммоль) и H1 (3,486 г, 12,5 ммоль), добавляют безв. DCM (100 мл) и безв. ДМФ (50 мл) в атмосфере Ar и раствор перемешивают при -5°С (ледяная баня). NMM (2,3 мл, 21,0 ммоль) добавляют по каплям через шприц, поддерживая температуру при -5°С. Полученную реакционную смесь перемешивают при -5°С в течение 2 ч, затем оставляют нагреваться до комнатной температуры еще на 14 ч. Растворитель упаривают при пониженном давлении. Сырой продукт перегоняют с EtOAc (100 мл) и раствор фильтруют для удаления некоторого количества осадка. Раствор промывают последовательно водн. KHSO₄ (2×100 мл, 10%), насыщенным раствором соли (100 мл), водн. NaHCO₃ (100 мл, нас.) и споласкивают насыщенным раствором соли (100 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄) и концентрируют при пониженном давлении, получая желтый твердый продукт, который очищают флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс.:EtOAc 2:1 - 1:1), что дает SAPL3 (7,98 г, 89% выход) в виде белого твердого вещества. Rf=0,18 (гекс./EtOAc 1:1).Into a flask containing HATU (8.76 g, 23.0 mmol), HOAt (3.17 g, 23.1 mmol) SAPL4 (7.09 g, 15.8 mmol) and H1 (3.486 g, 12.5 mmol), add bezv. DCM (100 ml) and anv. DMF (50 ml) in an Ar atmosphere and the solution was stirred at -5 ° C (ice bath). NMM (2.3 ml, 21.0 mmol) was added dropwise via syringe while maintaining the temperature at -5 ° C. The resulting reaction mixture was stirred at -5 ° C for 2 hours, then allowed to warm to room temperature for another 14 hours. The solvent was evaporated under reduced pressure. The crude product was distilled with EtOAc (100 ml) and the solution was filtered to remove some precipitate. The solution was washed successively with aq. KHSO ₄ (2 × 100 ml, 10%), brine (100 ml), aq. NaHCO ₃ (100 ml, sat.) And rinsed with brine (100 ml). The organic phase was dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated under reduced pressure to obtain a yellow solid, which was purified by flash LC (silica gel, hex. Gradient: EtOAc 2: 1 - 1: 1) to give SAPL3 (7.98 g, 89% yield) as a white solid. Rf = 0.18 (hex. / EtOAc 1: 1).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,79-1,00 (м, 24Н), 1,10-2,25 (м, 10Н), 1,18 (д, J=6,3, 3H), 1,25 (с, 3H), 1,32 (д, J=6,8, 3H), 2,28-2,34 (м, 1Н), 2,49 (дд, J₁=10,7, J₂=17,0, 1H), 2,54 (с, 3H), 2,83 (с, 3H), 2,95 (м, 1H), 3,02-3,24 (м, 2H), 3,31-3,40 (дд, J₁=3,9, J₂=14,1, 1H), 3,53-3,64 (м, 2Н), 3,65-3,75 (м, 1H), 3,78 (с, 3H), 3,92-4,20 (м, 3H), 4,58 (т, J=4,8, 1H), 4,75-4,85 (м, 3H), 5,00 (м, 1H), 5,12-5,26 (м, 3H), 6,84 (д, J=8,3, 2H), 6,86 (уш.с, 1H), 7,07 (д, J=8,3, 2H), 7,21-7,44 (м, 6Н), 7,92 (д, J=8,3, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.79-1.00 (m, 24H), 1.10-2.25 (m, 10H), 1.18 (d, J = 6.3, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.32 (d, J = 6.8, 3H), 2.28-2.34 (m, 1H), 2.49 (dd, J ₁ = 10 7, J ₂ = 17.0, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.83 (s, 3H), 2.95 (m, 1H), 3.02-3.24 (m, 2H), 3.31-3.40 (dd, J ₁ = 3.9, J ₂ = 14.1, 1H), 3.53-3.64 (m, 2H), 3.65-3.75 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.92-4.20 (m, 3H), 4.58 (t, J = 4.8, 1H), 4.75-4.85 (m, 3H), 5.00 (m, 1H), 5.12-5.26 (m, 3H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 6.86 (br s , 1H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.21-7.44 (m, 6H), 7.92 (d, J = 8.3, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,57, 14,05, 15,18, 16,73, 18,52, 20,83, 22,62, 22,96, 23,66, 24,55, 24,81, 25,03, 25,28, 26,90, 27,86, 28,95, 31,28, 31,81, 33,91, 34,02, 38,51, 38,61, 47,03, 49,61, 55,21, 55,38, 55,50, 57,28, 66,10, 67,65, 67,93, 70,47, 81,44, 114,09, 127,83, 128,46, 129,74, 130,29, 158,60, 168,36, 169,59, 170,28, 171,20, 172,22, 204,80. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.57, 14.05, 15.18, 16.73, 18.52, 20.83, 22.62, 22.96, 23.66, 24, 55, 24.81, 25.03, 25.28, 26.90, 27.86, 28.95, 31.28, 31.81, 33.91, 34.02, 38.51, 38.61, 47.03, 49.61, 55.21, 55.38, 55.50, 57.28, 66.10, 67.65, 67.93, 70.47, 81.44, 114.09, 127, 83, 128.46, 129.74, 130.29, 158.60, 168.36, 169.59, 170.28, 171.20, 172.22, 204.80.

ESI-MC Рассчит. для C₅₇H₈₄N₆O₁₄ 1076,60. Найдено m/z 1077,6 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₇ H ₈₄ N ₆ O ₁₄ 1076.60. Found m / z 1077.6 (M + H) ⁺ .

Пример 51Example 51

Синтез [Aip]³-Z-дидемнина A (SNPL3)Synthesis of [Aip] ³ -Z-Didemnin A (SNPL3)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SNPL4 (35 мг, 41 мкмоль) и H1 (17 мг, 61 мкмоль), указанное в заглавии соединение (36 мг, 81%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc от 1:4 до чист. EtOAc). Rf=0,30 (EtOAc).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL3, starting from SNPL4 (35 mg, 41 μmol) and H1 (17 mg, 61 μmol), the title compound (36 mg, 81%) was obtained as a white solid after flash chromatography ( silica gel, hex gradient - EtOAc from 1: 4 to pure EtOAc). Rf = 0.30 (EtOAc).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,74 (д, J=6,3, 3H), 0,80-1,00 (м, 21Н), 1,10-2,25 (м, 10Н), 1,21 (д, J=5,8, 3H), 1,24 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,3, 3H), 2,61 (с, 3H), 2,86 (с, 3H), 3,12-3,25 (дд, J₁=11,2, J₂=14,1, 1H), 3,27-3,36 (дд, J₁=4,3, J₂=14,1, 1H), 3,52-3,63 (м, 3H), 3,69-3,81 (м, 2Н), 3,80 (с, 3H), 4,09 (м, 3H), 4,47-4,63 (м, 3H), 4,76-4,92 (м, 2Н), 5,00 (м, 1H), 5,08 (м, 1H), 5,18 (с, 2Н), 6,85 (д, J=8,3, 2Н), 6,97 (д, J=6,97, 1H), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,35 (уш.с, 5Н), 7,48 (д, J=8,3, 1H), 7,67 (д, J=8,3, 1H), 7,87 (д, J=10,2, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.74 (d, J = 6.3, 3H), 0.80-1.00 (m, 21H), 1.10-2.25 (m, 10H), 1.21 (d, J = 5.8, 3H), 1.24 (s, 3H), 1.34 (d, J = 6.3, 3H), 2.61 (s, 3H) , 2.86 (s, 3H), 3.12-3.25 (dd, J ₁ = 11.2, J ₂ = 14.1, 1H), 3.27-3.36 (dd, J ₁ = 4.3, J ₂ = 14.1, 1H), 3.52-3.63 (m, 3H), 3.69-3.81 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 4 09 (m, 3H), 4.47-4.63 (m, 3H), 4.76-4.92 (m, 2H), 5.00 (m, 1H), 5.08 (m, 1H) ), 5.18 (s, 2H), 6.85 (d, J = 8.3, 2H), 6.97 (d, J = 6.97, 1H), 7.07 (d, J = 8 , 3, 2H), 7.35 (br s, 5H), 7.48 (d, J = 8.3, 1H), 7.67 (d, J = 8.3, 1H), 7.87 (d, J = 10.2, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₇H₈₅N₇O₁₃: 1075,62. Найдено m/z: 1076,6 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₇ H ₈₅ N ₇ O ₁₃ : 1075.62. Found m / z: 1076.6 (M + H) ⁺ .

Пример 52Example 52

Синтез [Hiv]³-Z-дидемнина A (SHPL3)Synthesis of [Hiv] ³ -Z-Didemnin A (SHPL3)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SHPL4 (116 мг, 0,15 ммоль) и H1 (63 мг, 0,23 ммоль), указанное в заглавии соединение (86 мг, 52%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc от 1:1 до 1:2). Rf=0,27 (гекс. - EtOAc 1:2).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL3, starting from SHPL4 (116 mg, 0.15 mmol) and H1 (63 mg, 0.23 mmol), the title compound (86 mg, 52%) was obtained as a white solid after flash LC purification (silica gel, hex gradient. EtOAc from 1: 1 to 1: 2). Rf = 0.27 (hex. - EtOAc 1: 2).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,80-1,08 (м, 24Н), 1,18 (м, 3H), 1,21 (м, 4Н), 1,58 (м, 2Н), 1,74 (м, 1Н), 1,80-2,42 (м, 6Н), 2,56 (с, 3H), 2,80 (с, 3H), 2,88 (м, 1Н), 3,15 (м, 1Н), 3,32 (м, 1Н) 3,60 (м, 3H), 3,78 (с, 3H), 3,83 (м, 1Н), 3,98 (м, 1Н), 4,42 (м, 1Н), 4,58 (м, 1Н), 4,75 (м, 1Н), 4,84 (м, 1Н), 4,92 (д, J=3,8, 1Н), 5,00 (м, 1Н), 5,20 (м, 2Н), 6,65 (д, J=6,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,34 (м, 5Н), 7,50 (д, J=6,7, 1Н), 7,75 (д, J=7,2, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.80-1.08 (m, 24H), 1.18 (m, 3H), 1.21 (m, 4H), 1.58 (m, 2H ), 1.74 (m, 1H), 1.80-2.42 (m, 6H), 2.56 (s, 3H), 2.80 (s, 3H), 2.88 (m, 1H) , 3.15 (m, 1H), 3.32 (m, 1H) 3.60 (m, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.83 (m, 1H), 3.98 (m , 1H), 4.42 (m, 1H), 4.58 (m, 1H), 4.75 (m, 1H), 4.84 (m, 1H), 4.92 (d, J = 3, 8, 1H), 5.00 (m, 1H), 5.20 (m, 2H), 6.65 (d, J = 6.3, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.34 (m, 5H), 7.50 (d, J = 6.7, 1H), 7.75 (d, J = 7.2, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,58, 14,21, 15,39, 17,64, 18,63, 20,74, 21,88, 22,84, 23,48, 24,22, 24,75, 27,05, 27,84, 29,34, 29,99, 33,42, 33,86, 35,81, 38,52, 39,37, 46,63, 48,14, 55,13, 55,47, 55,53, 55,87, 56,92, 65,68, 67,72, 68,60, 70,61, 79,09, 113,95, 127,71, 127,86, 128,35, 129,63, 130,22, 158,48, 168,46, 169,36, 169,84, 170,29, 170,93, 171,00, 173,73. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.58, 14.21, 15.39, 17.64, 18.63, 20.74, 21.88, 22.84, 23.48, 24, 22, 24.75, 27.05, 27.84, 29.34, 29.99, 33.42, 33.86, 35.81, 38.52, 39.37, 46.63, 48.14, 55.13, 55.47, 55.53, 55.87, 56.92, 65.68, 67.72, 68.60, 70.61, 79.09, 113.95, 127.71, 127, 86, 128.35, 129.63, 130.22, 158.48, 168.46, 169.36, 169.84, 170.29, 170.93, 171.00, 173.73.

ESI-MC Рассчит. для C₅₄H₈₀N₆O₁₃ 1020,58. Найдено m/z 1021,5 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₄ H ₈₀ N ₆ O ₁₃ 1020.58. Found m / z 1021.5 (M + H) ⁺ .

Пример 53Example 53

Синтез [Val]³-Z-дидемнина A (SVPL3)Synthesis of [Val] ³ -Z-Didemnin A (SVPL3)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SVPL4 (20 мг, 25 мкмоль) и SAPLH1 (11 мг, 37,5 мкмоль), указанное в заглавии соединение (19 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (силикагель, градиент гекс. - EtOAc от 1:1 до 1:5). Rf=0,44 (EtOAc).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL3, starting from SVPL4 (20 mg, 25 μmol) and SAPLH1 (11 mg, 37.5 μmol), the title compound (19 mg, 72%) was obtained as a white solid after flash purification LC (silica gel, hex. Gradient - EtOAc from 1: 1 to 1: 5). Rf = 0.44 (EtOAc).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,85-1,06 (м, 21Н), 1,10-1,4 (м, 5Н), 1,16 (д, J=6,6, 3H), 1,50-1,63 (м, 6Н), 1,72-1,87 (м, 2Н), 1,88-2,40 (м, 6Н), 2,58 (с, 3H), 2,86 (с, 3H), 3,17 (дд, J₁=10,5, J₂=14,2, 1Н), 3,36 (дд, J₁=3,9, J2=14,2, 1H), 3,43 (уш.с, 1Н), 3,51-3,72 (м, 4Н), 3,79 (с, 3H), 3,98-4,16 (м, 1Н), 4,40-4,47 (м, 2Н), 4,58 (дд, J₁=5,7, J2=7,8, 1Н), 4,67-4,85 (м, 2Н), 4,80-5,09 (м, 1Н), 5,16 (д, J=12,4, 1H), 5,24 (д, J=12,4, 1H), 6,84 (д, J=8,4, 1Н), 6,90-6,94 (уш.с, 1Н), 7,09 (д, J=8,4, 1Н), 7,28-7,50 (м, 6Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.85-1.06 (m, 21H), 1.10-1.4 (m, 5H), 1.16 (d, J = 6.6, 3H), 1.50-1.63 (m, 6H), 1.72-1.87 (m, 2H), 1.88-2.40 (m, 6H), 2.58 (s, 3H) 2.86 (s, 3H), 3.17 (dd, J ₁ = 10.5, J ₂ = 14.2, 1H), 3.36 (dd, J ₁ = 3.9, J2 = 14, 2, 1H), 3.43 (br s, 1H), 3.51-3.72 (m, 4H), 3.79 (s, 3H), 3.98-4.16 (m, 1H) 4.40-4.47 (m, 2H); 4.58 (dd, J ₁ = 5.7; J2 = 7.8; 1H); 4.67-4.85 (m, 2H); 4 80-5.09 (m, 1H), 5.16 (d, J = 12.4, 1H), 5.24 (d, J = 12.4, 1H), 6.84 (d, J = 8.4, 1H), 6.90-6.94 (br s, 1H), 7.09 (d, J = 8.4, 1H), 7.28-7.50 (m, 6H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,99, 14,37, 15,70, 18,55, 19,82 21,40, 21,99, 22,81, 23,17, 23,98, 24,62, 25,00, 25,24, 27,28, 28,26, 29,93, 30,23, 33,58, 34,10, 36,16, 38,78, 41,98, 47,10, 48,79, 54,73, 55,45, 56,62, 57,40, 59,51, 66,02, 68,18, 70,37, 71,03, 114,30, 128,00, 128,27, 128,72, 129,86, 130,56, 136,49, 158,28, 158,85, 168,75, 169,27, 170,40, 170,75, 171,04, 173,91, 175,03. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.99, 14.37, 15.70, 18.55, 19.82 21.40, 21.99, 22.81, 23.17, 23.98 , 24.62, 25.00, 25.24, 27.28, 28.26, 29.93, 30.23, 33.58, 34.10, 36.16, 38.78, 41.98, 47 , 10, 48.79, 54.73, 55.45, 56.62, 57.40, 59.51, 66.02, 68.18, 70.37, 71.03, 114.30, 128.00 , 128.27, 128.72, 129.86, 130.56, 136.49, 158.28, 158.85, 168.75, 169.27, 170.40, 170.75, 171.04, 173 91, 175.03.

ESI-MC Рассчит. для C₅₄H₈₁N₇O₁₂: 1019,59. Найдено (m/z): 1020,5 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₄ H ₈₁ N ₇ O ₁₂ : 1019.59. Found (m / z): 1020.5 (M + H) ⁺ .

Пример 54Example 54

Синтез дидемнина A (SAPL2)Synthesis of Didemnin A (SAPL2)

К раствору SAPL3 (6,59 г, 6,1 ммоль) в ТГФ (без стабилизатора, 262 мл), дегазированному и продутому аргоном, добавляют Pd(OH)₂-C (20%, 3,29 г, 50% м/м). Смесь перемешивают в атмосфере Н₂ (1 атм) в течение 20 ч, затем фильтруют через 0,45 мкм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении, получая белое твердое вещество. Добавляют CHCl₃ (2×25 мл) и смесь вновь концентрируют при пониженном давлении, получая SAPL2 (5,51 г, 96%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,22 (CHCl₃-трет-BuOH 90:10).To a solution of SAPL3 (6.59 g, 6.1 mmol) in THF (without stabilizer, 262 ml) degassed and purged with argon was added Pd (OH) ₂ -C (20%, 3.29 g, 50% m / m). The mixture was stirred under an atmosphere of H ₂ (1 atm) for 20 hours, then filtered through a 0.45 μm Teflon filter and concentrated under reduced pressure to give a white solid. CHCl ₃ (2 × 25 ml) was added and the mixture was again concentrated under reduced pressure to give SAPL2 (5.51 g, 96%) as a white solid. Rf = 0.22 (CHCl ₃ -t-BuOH 90:10).

¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 0,82-0,92 (м, 24Н), 1,11-1,19 (м, 1Н), 1,22 (д, J=6,9, 3H), 1,32 (д, J=6,8, 3H), 1,30-1,35 (м, 1Н), 1,35-1,63 (м, 6Н), 1,71-1,81 (м, 2Н), 1,93-2,07 (м, 1Н), 2,07-2,18 (м, 2Н), 2,28-2,34 (м, 1Н), 2,49-2,52 (дд, J₁=11, J₂=10,5, 1Н), 2,54 (с, 3H), 2,72 (уш.с, 3H), 2,79 (уш.с, 3H), 2,86-2,94 (уш.с, 1Н), 2,72-2,79 (уш.д, J=10,5, 1H), 3,15-3,18 (дд, J₁=14,5, J₂=10,5, 1Н), 3,33-3,36 (дд, J₁=14,5, J₂=4,5, 1Н), 3,54-3,57 (дд, J₁=10,5, J₂=4,5, 1Н), 3,56-3,61 (м, 1Н), 3,78 (с, 3H), 3,96-4,00 (м, 1Н), 4,03-4,08 (м, 1Н), 4,11-4,80 (уш.с, 1Н), 4,56-4,62 (м, 1Н), 4,68-4,81 (м, 3H), 4,99-5,01 (кв, J=3,5, 1Н), 5,16 (уш.с, 1Н), 6,83 (д, J=8,5, 2Н), 6,95 (уш.с, 1Н), 7,07 (д, J=8,5, 2Н), 7,21-7,25 (уш.с, 1Н), 7,95 (уш.с, 1Н). ¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-0.92 (m, 24H), 1.11-1.19 (m, 1H), 1.22 (d, J = 6.9, 3H), 1.32 (d, J = 6.8, 3H), 1.30-1.35 (m, 1H), 1.35-1.63 (m, 6H), 1.71-1, 81 (m, 2H), 1.93-2.07 (m, 1H), 2.07-2.18 (m, 2H), 2.28-2.34 (m, 1H), 2.49- 2.52 (dd, J ₁ = 11, J ₂ = 10.5, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.72 (br s, 3H), 2.79 (br s, 3H ), 2.86-2.94 (br s, 1H), 2.72-2.79 (br d, J = 10.5, 1H), 3.15-3.18 (dd, J ₁ = 14.5, J ₂ = 10.5, 1H), 3.33-3.36 (dd, J ₁ = 14.5, J ₂ = 4.5, 1H), 3.54-3.57 ( dd, J ₁ = 10.5, J ₂ = 4.5, 1H), 3.56-3.61 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.96-4.00 (m , 1H), 4.03-4.08 (m, 1H), 4.11-4.80 (br.s, 1H), 4.56-4.62 (m, 1H), 4.68-4 81 (m, 3H), 4.99-5.01 (q, J = 3.5, 1H), 5.16 (br s, 1H), 6.83 (d, J = 8.5, 2H), 6.95 (br.s, 1H), 7.07 (d, J = 8.5, 2H), 7.21-7.25 (br.s, 1H), 7.95 (br. s, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,55, 14,95, 15,26, 16,82, 18,56, 20,89, 22,00, 23,08, 23,76, 24,58, 24,85, 25,10, 27,12, 29,35, 29,35, 29,65, 29,69, 31,36, 33,96, 34,14, 38,51, 38,64, 40,14, 55,38, 55,56, 57,31, 66,17, 67,85, 70,58, 80,96, 80,98, 81,57, 114,12, 130,33, 158,63, 168,41, 169,33, 169,70, 170,38, 171,24, 172,28, 172,28, 172,93, 204,83. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.55, 14.95, 15.26, 16.82, 18.56, 20.89, 22.00, 23.08, 23.76, 24, 58, 24.85, 25.10, 27.12, 29.35, 29.35, 29.65, 29.69, 31.36, 33.96, 34.14, 38.51, 38.64, 40.14, 55.38, 55.56, 57.31, 66.17, 67.85, 70.58, 80.96, 80.98, 81.57, 114.12, 130.33, 158, 63, 168.41, 169.33, 169.70, 170.38, 171.24, 172.28, 172.28, 172.93, 204.83.

m/z (FAB) 944,2 [(M+H)⁺, 100].m / z (FAB) 944.2 [(M + H) ⁺ , 100].

Пример 55Example 55

Синтез [Aip]³-дидемнина A (SNPL2)Synthesis of [Aip] ^3- didemnin A (SNPL2)

К раствору SNPL3 (33 мг, 35 мкмоль) в смеси IPA/H₂O (2 мл:1 мл), дегазированному и продутому аргоном, добавляют Pd(OH)₂-C (20%, 20 мг, 60% м/м). Смесь перемешивают в атмосфере Н₂ (1 атм) в течение 20 ч, затем фильтруют через 0,45 мкм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении, получая белое твердое вещество. Добавляют IPA (2×5 мл) и раствор вновь концентрируют при пониженном давлении, получая SNPL2 (32 мг, 97%) в виде белого твердого вещества.To a solution of SNPL3 (33 mg, 35 μmol) in an IPA / H ₂ O mixture (2 ml: 1 ml), degassed and purged with argon, Pd (OH) ₂ -C (20%, 20 mg, 60% m / m) was added ) The mixture was stirred under an atmosphere of H ₂ (1 atm) for 20 hours, then filtered through a 0.45 μm Teflon filter and concentrated under reduced pressure to give a white solid. IPA (2 × 5 ml) was added and the solution was again concentrated under reduced pressure to obtain SNPL2 (32 mg, 97%) as a white solid.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,78 (д, J=6,8, 3H), 0,82-0,92 (м, 21Н), 1,11-2,58 (м, 21Н), 2,41 (с, 3H), 2,62 (с, 3H), 2,75-3,00 (м, 4Н), 3,15-3,18 (дд, J₁=10,7, J₂=14,7, 1H), 3,33-3,36 (дд, J₁=14,5, J₂=4,2, 1H), 3,51-3,78 (м, 3H), 3,78 (с, 3H), 3,92 (м, 1H), 4,01-4,20 (м, 2Н), 4,50 (т, J=4,8, 1H), 4,59 (т, J=6,3, 1H), 4,75-4,91 (м, 2Н), 5,05 (м, 1H), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,70 (д, J=5,8, 1H), 7,78 (д, J=9,7, 1H), 7,89 (д, J=6,3, 1H), 8,14 (д, J=7,8, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.78 (d, J = 6.8, 3H), 0.82-0.92 (m, 21H), 1.11-2.58 (m, 21H), 2.41 (s, 3H), 2.62 (s, 3H), 2.75-3.00 (m, 4H), 3.15-3.18 (dd, J ₁ = 10.7 , J ₂ = 14.7, 1H), 3.33-3.36 (dd, J ₁ = 14.5, J ₂ = 4.2, 1H), 3.51-3.78 (m, 3H) 3.78 (s, 3H), 3.92 (m, 1H), 4.01-4.20 (m, 2H), 4.50 (t, J = 4.8, 1H), 4.59 (t, J = 6.3, 1H), 4.75-4.91 (m, 2H), 5.05 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7 07 (d, J = 8.3, 2H), 7.70 (d, J = 5.8, 1H), 7.78 (d, J = 9.7, 1H), 7.89 (d, J = 6.3, 1H); 8.14 (d, J = 7.8, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₄₉H₇₉N₇O₁₁ 941,58. Найдено m/z 942,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₄₉ H ₇₉ N ₇ O ₁₁ 941.58. Found m / z 942.7 (M + H) ⁺ .

Пример 56Example 56

Синтез [Hiv]³-дидемнина A (SHPL2)Synthesis of [Hiv] ^3- didemnin A (SHPL2)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL2, исходя из SHPL3 (86 мг, 0,08 ммоль), указанное в заглавии соединение (73 мг, 97%) получают в виде белого твердого вещества. Rf=0,36 (CHCl₃/МеОН 95:5).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL2, starting from SHPL3 (86 mg, 0.08 mmol), the title compound (73 mg, 97%) was obtained as a white solid. Rf = 0.36 (CHCl ₃ / MeOH 95: 5).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,02 (м, 24Н), 1,12-2,42 (м, 16Н), 2,54 (с, 3H), 2,64 (с, 3H), 2,95 (м, 1Н), 3,15 (м, 1Н), 3,35 (м, 1Н), 3,52-3,90 (м, 5Н), 3,78 (с, 3H), 4,04 (м, 1Н), 4,38 (м, 1Н), 4,48 (м, 1Н), 4,57 (м, 1Н), 4,88 (м, 1Н), 4,91 (д, J=5,3, 1Н), 5,22 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,54 (д, J=9,2, 1Н), 7,60 (д, J=9,4, 1Н), 8,68 (д, J=6,2, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.02 (m, 24H), 1.12-2.42 (m, 16H), 2.54 (s, 3H), 2.64 (s, 3H), 2.95 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 3.35 (m, 1H), 3.52-3.90 (m, 5H), 3.78 ( s, 3H), 4.04 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.57 (m, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.91 (d, J = 5.3, 1H), 5.22 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3 , 2H), 7.54 (d, J = 9.2, 1H), 7.60 (d, J = 9.4, 1H), 8.68 (d, J = 6.2, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,78, 14,07, 16,13, 17,90, 18,56, 20,98, 21,74, 22,94, 23,60, 24,44, 24,78, 25,06, 27,17, 27,92, 30,09, 33,34, 33,89, 38,71, 40,30, 46,86, 48,22, 54,99, 55,23, 56,97, 57,21, 65,81, 68,53, 70,37, 79,47, 114,03, 129,76, 130,29, 158,57, 168,18, 169,40, 169,86, 170,20, 170,92, 174,16. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.78, 14.07, 16.13, 17.90, 18.56, 20.98, 21.74, 22.94, 23.60, 24, 44, 24.78, 25.06, 27.17, 27.92, 30.09, 33.34, 33.89, 38.71, 40.30, 46.86, 48.22, 54.99, 55.23, 56.97, 57.21, 65.81, 68.53, 70.37, 79.47, 114.03, 129.76, 130.29, 158.57, 168.18, 169, 40, 169.86, 170.20, 170.92, 174.16.

ESI-MC Рассчит. для C₄₆H₇₄N₆O₁₁ 886,54. Найдено m/z 887,2 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₄₆ H ₇₄ N ₆ O ₁₁ 886.54. Found m / z 887.2 (M + H) ⁺ .

Пример 57Example 57

Синтез [Val]³-дидемнина A (SVPL2)Synthesis of [Val] ^3- didemnin A (SVPL2)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL2, исходя из SVPL3 (19 мг, 18 мкмоль), указанное в заглавии соединение (16 мг, 97%) получают в виде белого твердого вещества. Rf=0,36 (CHCl₃/МеОН 95:5).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL2, starting from SVPL3 (19 mg, 18 μmol), the title compound (16 mg, 97%) was obtained as a white solid. Rf = 0.36 (CHCl ₃ / MeOH 95: 5).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ -0,82-1,02 (м, 21Н), 1,85-1,32 (м, 9Н), 1,42-1,83 (м, 7Н), 1,87-2,23 (м, 8Н), 2,34 (уш.с, 3H), 2,60 (уш.с, 1Н), 2,85 (дд, J₁=5,7, J₂=7,8, 1Н), 3,16 (дд, J₁=10,8, J₂=14,2, 1Н), 3,37 (дд, J₁=4,2, J₂=14,2, 1Н), 3,48 (уш.с, 1Н), 3,57-3,68 (м, 4Н), 3,79 (с, 3H), 3,95-4,15 (м, 2Н), 4,45-4,52 (м, 2Н), 4,61 (дд, J₁=4,8, J₂=7,8, 1Н), 4,77 (т, J=9, 9, 1Н), 5,02-5,15 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,4, 1Н), 7,09 (д, J=8,4, 1Н), 7,59-7,62 (м, 2Н), 7,78-7,81 (м, 2Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ -0.82-1.02 (m, 21H), 1.85-1.32 (m, 9H), 1.42-1.83 (m, 7H ), 1.87-2.23 (m, 8H), 2.34 (br.s, 3H), 2.60 (br.s, 1H), 2.85 (dd, J ₁ = 5.7, J ₂ = 7.8, 1H), 3.16 (dd, J ₁ = 10.8, J ₂ = 14.2, 1H), 3.37 (dd, J ₁ = 4.2, J ₂ = 14 , 2, 1H), 3.48 (br.s, 1H), 3.57-3.68 (m, 4H), 3.79 (s, 3H), 3.95-4.15 (m, 2H) ), 4.45-4.52 (m, 2H), 4.61 (dd, J ₁ = 4.8, J ₂ = 7.8, 1H), 4.77 (t, J = 9, 9, 1H), 5.02-5.15 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.4, 1H), 7.09 (d, J = 8.4, 1H), 7.59- 7.62 (m, 2H); 7.78-7.81 (m, 2H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,98, 14,46, 16,14, 18,50, 19,83, 21,50, 22,55, 22,81, 22,95, 23,46, 23,98, 27,33, 28,27, 28,33, 29,94, 33,71, 34,16, 38,94, 41,93, 42,11, 45,72, 47,18, 48,94, 53,64, 55,03, 55,50, 56,72, 57,55, 59,22, 59,56, 66,16, 70,71, 114,36, 118,53, 120,85, 130,02, 130,58, 168,71, 169,74, 170,23, 171,18, 175,10. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.98, 14.46, 16.14, 18.50, 19.83, 21.50, 22.55, 22.81, 22.95, 23, 46, 23.98, 27.33, 28.27, 28.33, 29.94, 33.71, 34.16, 38.94, 41.93, 42.11, 45.72, 47.18, 48.94, 53.64, 55.03, 55.50, 56.72, 57.55, 59.22, 59.56, 66.16, 70.71, 114.36, 118.53, 120, 85, 130.02, 130.58, 168.71, 169.74, 170.23, 171.18, 175.10.

ESI-MC Рассчит. для C₄₆H₇₅N₇O₁₀: 885,56. Найдено (m/z): 856,5 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₄₆ H ₇₅ N ₇ O ₁₀ : 885.56. Found (m / z): 856.5 (M + H) ⁺ .

Пример 58Example 58

Синтез Pyr-Pro-OBn (F2)Synthesis of Pyr-Pro-OBn (F2)

К раствору H-Pro-OBn-HCl (10,0 г, 41,3 ммоль) в безв. ДМФ (50 мл) при 0°С в атмосфере Ar, NMM (4,55 мл, 43,8 ммоль) добавляют по каплям через шприц, поддерживая температуру при 0°С. Затем порциями добавляют HOBt (18,98 г, 124 ммоль). Через 15 мин пировиноградную кислоту (8,61 г, 97,79 ммоль), растворенную в безв. DCM (10 мл), добавляют по каплям через шприц, поддерживая температуру ниже 3°С. Наконец, DCC (22,17 г, 107,46 ммоль), растворенный в DCM (80 мл), добавляют по каплям с помощью компенсационной воронки. Смеси дают нагреться до комнатной температуры (2 ч) и перемешивают еще 12 ч. Реакционную смесь фильтруют для удаления осадка и раствор концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в EtOAc (500 мл) и промывают последовательно водн. KHSO₄ (100 мл, 10%), водн. NaHCO₃ (400 мл, нас.), насыщенным раствором соли (400 мл), сушат (Na₂SO₄) и фильтруют. Остатки растворителя отгоняют при пониженном давлении и остаток перегоняют с ACN (100 мл), охлаждают до -30°С в течение 2 ч и фильтруют для удаления избытка N,N-дициклогексилкарбамида. Полученное коричневое масло (15,82 г) очищают флэш ЖХ (силикагель, град. гекс. - гекс.:EtOAc 2:1), что дает F2 (9,06 г, 66% выход) в виде белого твердого вещества. Rf=0,25 (гекс.:EtOAc 2:1).To a solution of H-Pro-OBn-HCl (10.0 g, 41.3 mmol) in anv. DMF (50 ml) at 0 ° C in an Ar atmosphere, NMM (4.55 ml, 43.8 mmol) was added dropwise through a syringe, maintaining the temperature at 0 ° C. Then, HOBt (18.98 g, 124 mmol) was added in portions. After 15 minutes, pyruvic acid (8.61 g, 97.79 mmol) dissolved in anvil. DCM (10 ml) is added dropwise through a syringe, keeping the temperature below 3 ° C. Finally, DCC (22.17 g, 107.46 mmol) dissolved in DCM (80 ml) was added dropwise using a compensation funnel. The mixture was allowed to warm to room temperature (2 hours) and stirred for another 12 hours. The reaction mixture was filtered to remove a precipitate and the solution was concentrated under reduced pressure. The residue was dissolved in EtOAc (500 ml) and washed successively with aq. KHSO ₄ (100 ml, 10%), aq. NaHCO ₃ (400 ml, sat.), Brine (400 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ) and filtered. The residual solvent was distilled off under reduced pressure, and the residue was distilled with ACN (100 ml), cooled to -30 ° C for 2 hours and filtered to remove excess N, N-dicyclohexylcarbamide. The resulting brown oil (15.82 g) was purified by flash LC (silica gel, deg. Hex. - hex.: EtOAc 2: 1) to give F2 (9.06 g, 66% yield) as a white solid. Rf = 0.25 (hex.: EtOAc 2: 1).

ИК (пленка, DCM) ν 3035, 2956, 2884, 1744, 1717, 1645, 1499, 1443, 1383, 1352, 1273, 1175, 1092 см^-1.IR (film, DCM) ν 3035, 2956, 2884, 1744, 1717, 1645, 1499, 1443, 1383, 1352, 1273, 1175, 1092 cm ^-1 .

¹H-ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 1,75-2,40 (м, 4Н), 2,37 (с, 3H), 2,44 (с, 3H), 3,45-3,82 (м, 2Н), 4,52-4,61 (м, 1Н), 4,88-4,97 (м, 1Н), 5,14-5,15 (м, 2Н), 5,17-5,20 (м, 2Н), 7,34 (уш.с, 5Н). ¹ H-NMR (200 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.75-2.40 (m, 4H), 2.37 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 3.45-3.82 (m, 2H), 4.52-4.61 (m, 1H), 4.88-4.97 (m, 1H), 5.14-5.15 (m, 2H), 5.17-5 20 (m, 2H); 7.34 (br s, 5H).

¹³С-ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 22,11, 25,22, 26,5, 27,10, 28,53, 31,48, 47,53, 44,81, 59,76, 67,02, 67,31, 128,11, 128,64, 135,24, 170,1, 170,2, 198,0. ¹³ C-NMR (50 MHz, CDCl ₃ ) δ 22.11, 25.22, 26.5, 27.10, 28.53, 31.48, 47.53, 44.81, 59.76, 67, 02, 67.31, 128.11, 128.64, 135.24, 170.1, 170.2, 198.0.

m/z (CI) 293 [(M+NH₄)⁺, 100]. Анал. рассчит.C₁₅H₁₇NO₄: С, 65,44; Н, 6,22; N, 5,08. Найдено: С, 65,04; Н, 6,01; N, 5,11.m / z (CI) 293 [(M + NH ₄ ) ⁺ , 100]. Anal calcd. C ₁₅ H ₁₇ NO ₄ : C, 65.44; H, 6.22; N, 5.08. Found: C, 65.04; H, 6.01; N, 5.11.

Пример 59Example 59

Синтез Pyr-Pro-OH (F1)Synthesis of Pyr-Pro-OH (F1)

Раствор F2 (8,63 г, 31,34 ммоль) и палладия на активированном угле (10%, 86 мг, 10% м/м) в дегазированном МеОН (125 мл) помещают в реактор Парра для работы при высоком давлении и продувают газообразным азотом (2×30 фунт/кв. дюйм). Реакционную смесь изолируют в атмосфере водорода (30 фунт/кв. дюйм) и перемешивают при 23°С в течение 4,5 ч. Смесь фильтруют через 0,45 мкм тефлоновый фильтр и концентрируют при пониженном давлении. Остаток (6,29 г) наносят на SiO₂ и заполняют сверху колонку (LC 5,5×10,0 см) и элюируют гекс.:EtOAc 1:2, получая F1 (4,64 г, 80%) в виде белого твердого вещества. Rf=0,22 (гекс.:EtOAc 1:1). [α]_D ²⁰ -92,4 (с 0,12, CHCl₃). Т.пл. 67-69°С.A solution of F2 (8.63 g, 31.34 mmol) and palladium on activated carbon (10%, 86 mg, 10% m / m) in degassed MeOH (125 ml) were placed in a Parr reactor to operate at high pressure and purged with gaseous nitrogen (2 × 30 psi). The reaction mixture was isolated in a hydrogen atmosphere (30 psi) and stirred at 23 ° C. for 4.5 hours. The mixture was filtered through a 0.45 μm Teflon filter and concentrated under reduced pressure. The residue (6.29 g) was applied to SiO ₂ and the column was filled on top (LC 5.5 × 10.0 cm) and hex.: EtOAc 1: 2 was eluted to give F1 (4.64 g, 80%) as white solid matter. Rf = 0.22 (hex.: EtOAc 1: 1). [α] _D ²⁰ -92.4 (c 0.12, CHCl ₃ ). Mp 67-69 ° C.

ИК (пленка, DCM) ν 3450-3000, 2961-2870, 1719, 1643, 1615, 1452, 1354, 1205, 1175, 1094, 1018 см^-1.IR (film, DCM) ν 3450-3000, 2961-2870, 1719, 1643, 1615, 1452, 1354, 1205, 1175, 1094, 1018 cm ^-1 .

¹H-ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 1,85-2,45 (м, 4Н), 2,43 и 2,47 (с, 3H), 3,42-3,85 (м, 2Н), 4,52-4,61 (м, 1Н), 4,88-4,97 (м, 1Н), 7,21-7,40 (уш.с, 1Н). ¹ H-NMR (200 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.85-2.45 (m, 4H), 2.43 and 2.47 (s, 3H), 3.42-3.85 (m, 2H) 4.52-4.61 (m, 1H); 4.88-4.97 (m, 1H); 7.21-7.40 (br s, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 22,03, 25,23, 26,48, 27,00, 28,23, 31,44, 47,57, 48,37, 59,61, 59,39, 162,47, 162,52, 175,04, 176,29, 197,18. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 22.03, 25.23, 26.48, 27.00, 28.23, 31.44, 47.57, 48.37, 59.61, 59, 39, 162.47, 162.52, 175.04, 176.29, 197.18.

m/z (CI) 220 [(M+N₂H₇)⁺, 15], 203 [(M+NH₄)⁺, 100], 186 [(M+H)⁺, 16]. Анал. рассчит. C₈H₁₁NO₄: С, 51,88; Н, 5,99; N, 7,56. Найдено: С, 52,13; Н, 5,85; N, 7,65.m / z (CI) 220 [(M + N ₂ H ₇ ) ⁺ , 15], 203 [(M + NH ₄ ) ⁺ , 100], 186 [(M + H) ⁺ , 16]. Anal calculated C ₈ H ₁₁ NO ₄ : C, 51.88; H, 5.99; N, 7.56. Found: C, 52.13; H, 5.85; N, 7.65.

Пример 60Example 60

Синтез аплидина (SAPL1)Aplidine Synthesis (SAPL1)

К охлажденному (3°С) раствору F1 (4,908 г, 26,5 ммоль) в безв. DCM (40 мл), добавляют, в атмосфере азота, раствор DIPCDI (1,806 мг, 14,3 ммоль) в DCM (10 мл) и раствор перемешивают при 3°С 60 мин. Затем раствор SAPL2 (5,0 г, 5,3 ммоль) в DCM (50 мл) переносят с помощью канюли в первый раствор под давлением азота. После 90 ч (4 дней) при указанной температуре добавляют водн. HCl (50 мл, 0,1 н) и реакционную смесь перемешивают 15 мин. Затем органический слой декантируют и распределяют между KHSO₄ (50 мл, 5%), водн. NaHCO₃ (50 мл, 5%) и насыщенным раствором соли (25 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Полученное светло-желтое твердое вещество очищают флэш ЖХ (Lichroprep RP-18, 40-63 мкм, градиент МеОН:Н₂O: TFA от 70:30:0,1 до 90:10:0,1), что дает SAPL1 (5,4 г, 93%) (смесь ротамеров). Rf=0,40 и 0,28 (DCM:AcOEt, 2:3), 0,52 и 0,45 (CHCl₃-МеОН, 9,5:0,5); [α]_D -95,9 (с 1,8, CHCl₃).To a cooled (3 ° C) solution of F1 (4.908 g, 26.5 mmol) in anv. DCM (40 ml) was added, under nitrogen, a solution of DIPCDI (1.806 mg, 14.3 mmol) in DCM (10 ml) and the solution was stirred at 3 ° C for 60 minutes Then a solution of SAPL2 (5.0 g, 5.3 mmol) in DCM (50 ml) was transferred via cannula into the first solution under nitrogen pressure. After 90 hours (4 days), aq. HCl (50 ml, 0.1 N) and the reaction mixture was stirred for 15 minutes. Then the organic layer was decanted and partitioned between KHSO ₄ (50 ml, 5%), aq. NaHCO ₃ (50 ml, 5%) and brine (25 ml). The organic phase is dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure. The resulting light yellow solid was purified by flash LC (Lichroprep RP-18, 40-63 μm, MeOH: H ₂ O: TFA gradient from 70: 30: 0.1 to 90: 10: 0.1), giving SAPL1 ( 5.4 g, 93%) (mixture of rotamers). Rf = 0.40 and 0.28 (DCM: AcOEt, 2: 3), 0.52 and 0.45 (CHCl ₃ -MeOH, 9.5: 0.5); [α] _D -95.9 (c 1.8, CHCl ₃ ).

¹H-ЯМР (500 МГц, CDCl₃) δ 0,84-0,93 (м, 24Н), 1,16-1,70 (м, 9Н), 1,72-1,81 (м, 1Н), 1,81-1,90 (м, 1Н), 1,90-2,24 (м, 6Н), 2,30-2,39 (м, 1Н), 2,49 (с, 3H) 2,51 (с, 3H), 2,55 (с, 3H), 2,52-2,64 (м, 1Н), 2,85 (уш.с, 1Н), 2,94 (уш.с, 1Н), 3,09 (с, 3H), 3,13 (с, 3H), 3,15-3,18 (м, 1Н), 3,21-3,26 (дд, J₁=15,8, J₂=6,1, 1Н), 3,32-3,36 (дд, J₁=14,5, J₂=4,1, 1Н), 3,54-3,60 (м, 1Н), 3,66-3,72 (м, 1Н), 3,78 (с, 3H), 3,80-3,87 (м, 1Н), 3,96-3,99 (м, 1Н), 4,03-4,11 (м, 2Н), 4,15-4,23 (2кв, J=7,5, 1Н), 4,55-4,57 (2д, J₁=5,5, J₂=2,2, 1Н), 4,59-4,62 (т, 1Н), 4,56-4,64 (дд, J₁=6,5, J₂=2,5, 1Н), 4,68-4,71 (т, 1Н), 4,76-4,81 (т, 1Н), 5,10-5,18 (м, 1Н), 5,17 (д, J=3,5, 1Н), 5,18 (д, J=3,5, 1Н), 5,27-5,31 (м, 2Н), 6,82 (д, J=8,5, 2Н), 6,83 (д, J=8,5, 2Н), 7,05 (д, J=8,5, 2Н), 7,06 (д, J=8,5, 2Н), 7,02 (д, J=7,1, 1Н), 7,16 (д, J=9,5, 1H), 7,17 (д, J=9,5, 1H), 7,59 (д, J=5,5, 1H), 7,77 (д, J=9,5, 1H), 7,83 (д, J=9,4, 1H). ¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.84-0.93 (m, 24H), 1.16-1.70 (m, 9H), 1.72-1.81 (m, 1H) 1.81-1.90 (m, 1H), 1.90-2.24 (m, 6H), 2.30-2.39 (m, 1H), 2.49 (s, 3H) 2, 51 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 2.52-2.64 (m, 1H), 2.85 (br.s, 1H), 2.94 (br.s, 1H) , 3.09 (s, 3H), 3.13 (s, 3H), 3.15-3.18 (m, 1H), 3.21-3.26 (dd, J ₁ = 15.8, J ₂ = 6.1, 1H), 3.32-3.36 (dd, J ₁ = 14.5, J ₂ = 4.1, 1H), 3.54-3.60 (m, 1H), 3 66-3.72 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.80-3.87 (m, 1H), 3.96-3.99 (m, 1H), 4.03 -4.11 (m, 2H), 4.15-4.23 (2q, J = 7.5, 1H), 4.55-4.57 (2d, J ₁ = 5.5, J ₂ = 2 , 2, 1H), 4.59-4.62 (t, 1H), 4.56-4.64 (dd, J ₁ = 6.5, J ₂ = 2.5, 1H), 4.68- 4.71 (t, 1H), 4.76-4.81 (t, 1H), 5.10-5.18 (m, 1H), 5.17 (d, J = 3.5, 1H), 5.18 (d, J = 3.5, 1H), 5.27-5.31 (m, 2H), 6.82 (d, J = 8.5, 2H), 6.83 (d, J = 8.5, 2H), 7.05 (d, J = 8.5, 2H), 7.06 (d, J = 8.5, 2H), 7.02 (d, J = 7.1, 1H), 7.16 (d, J = 9.5, 1H), 7.17 (d, J = 9.5, 1H), 7.59 (d, J = 5.5, 1H), 7, 77 (d, J = 9.5, 1H), 7 83 (d, J = 9.4, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,63, 11,68, 14,11, 14,70, 15,26, 15,30, 16,00, 16,20, 16,88, 16,93, 18,62, 18,85, 20,89, 20,94, 21,62, 21,36, 23,44, 23,57, 23,84, 23,93, 24,66, 24,77, 24,85, 25,02, 26,22, 26,34, 27,09, 27,6, 27,06, 27,30, 27,95, 27,99, 29,33, 29,69, 31,31, 31,37, 33,97, 34,06, 36,02, 36,45, 38,68, 38,76, 41,01, 41,15, 47,00, 48,42, 48,48, 48,86, 49,20, 49,51, 54,65, 54,75, 55,26, 55,58, 55,61, 57,14, 57,27, 57,47, 57,79, 66,24, 67,80, 67,99, 70,34, 70,67, 81,0, 81,52, 114,10, 130,31, 156,0, 158,65, 161,1, 161,60, 168,20, 169,53, 169,59, 170,45, 171,25, 171,80, 171,95, 172,26, 172,33, 197,5, 204,80, 204,85. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.63, 11.68, 14.11, 14.70, 15.26, 15.30, 16.00, 16.20, 16.88, 16, 93, 18.62, 18.85, 20.89, 20.94, 21.62, 21.36, 23.44, 23.57, 23.84, 23.93, 24.66, 24.77, 24.85, 25.02, 26.22, 26.34, 27.09, 27.6, 27.06, 27.30, 27.95, 27.99, 29.33, 29.69, 31, 31, 31.37, 33.97, 34.06, 36.02, 36.45, 38.68, 38.76, 41.01, 41.15, 47.00, 48.42, 48.48, 48.86, 49.20, 49.51, 54.65, 54.75, 55.26, 55.58, 55.61, 57.14, 57.27, 57.47, 57.79, 66, 24, 67.80, 67.99, 70.34, 70.67, 81.0, 81.52, 114.10, 130.31, 156.0, 158.65, 161.1, 161.60, 168.20, 169.53, 169.59, 170.45, 171.25, 171.80, 171.95, 172.26, 172.33, 197.5, 204.80, 204.85.

m/z (FAB) 1132,6 [(M+Na)⁺, 42], 1110,8 [(M+H)⁺, 100].m / z (FAB) 1132.6 [(M + Na) ⁺ , 42], 1110.8 [(M + H) ⁺ , 100].

Пример 61Example 61

Синтез [Aip]³-аплидина (SNPL1)Synthesis of [Aip] ³ -aplidine (SNPL1)

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SNPL2 (10 мг, 10,6 мкмоль) и F1 (10 мг, 54 мкмоль). Указанное в заглавии соединение (8 мг, 68%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=10,5 и 12,0 мин).Follow the procedure developed for the synthesis of SAPL1 based on SNPL2 (10 mg, 10.6 μmol) and F1 (10 mg, 54 μmol). The title compound (8 mg, 68%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isotrate ratio ACN / H ₂ O 85:15 (flow: 7 ml / min, 250 × 21 mm, 270 nm, t _R = 10.5 and 12.0 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,80-1,03 (м, 24Н), 1,11-1,70 (м, 9Н), 1,72-1,81 (м, 1Н), 1,81-1,90 (м, 1Н), 1,90-2,24 (м, 6Н), 2,30-2,39 (м, 1Н), 2,53 (с, 3H) 2,55 (с, 3H), 2,65 (с, 3H), 2,52-2,66 (м, 2Н), 2,94 (м, 1Н), 3,07 (с, 3H), 3,11 (с, 3H), 3,15-3,18 (м, 1Н), 3,22-3,31 (дд, J₁=4,3, J₂=15,1, 1Н), 3,54-3,60 (м, 2Н), 3,67-3,92 (м, 2Н), 3,80 (с, 3H), 3,98 (м, 1Н), 4,13-4,29 (м, 3H), 4,45-4,75 (м, 4Н), 4,81 (т, J=9,7, 1Н), 5,09 (м, 1Н), 5,18 (м, 1Н), 5,26-5,44 (м, 3H), 6,84 (д, J=8,3, 2H), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,30 (д, J=8,3, 1Н), 7,36 (д, J=8,3, 1Н), 7,68 (д, J=9,7, 1Н), 7,87 (д, J=4,3, 1Н), 8,09 (д, J=9,7, 1Н), 8,28 (д, J=10,2, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.80-1.03 (m, 24H), 1.11-1.70 (m, 9H), 1.72-1.81 (m, 1H) 1.81-1.90 (m, 1H), 1.90-2.24 (m, 6H), 2.30-2.39 (m, 1H), 2.53 (s, 3H) 2, 55 (s, 3H), 2.65 (s, 3H), 2.52-2.66 (m, 2H), 2.94 (m, 1H), 3.07 (s, 3H), 3.11 (s, 3H), 3.15-3.18 (m, 1H), 3.22-3.31 (dd, J ₁ = 4.3, J ₂ = 15.1, 1H), 3.54- 3.60 (m, 2H), 3.67-3.92 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.98 (m, 1H), 4.13-4.29 (m, 3H), 4.45-4.75 (m, 4H), 4.81 (t, J = 9.7, 1H), 5.09 (m, 1H), 5.18 (m, 1H), 5 26-5.44 (m, 3H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.30 (d, J = 8.3, 1H), 7.36 (d, J = 8.3, 1H), 7.68 (d, J = 9.7, 1H), 7.87 (d, J = 4.3, 1H ), 8.09 (d, J = 9.7, 1H), 8.28 (d, J = 10.2, 1H).

ESI-MC Рассчит. для С₅₇Н₈₈N₈O₁₄: 1108,64. Найдено (m/z): 1110,3 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₇ H ₈₈ N ₈ O ₁₄ : 1108.64. Found (m / z): 1110.3 (M + H) ⁺ .

Пример 62Example 62

Синтез [Hiv]³-аплидина (SHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ -aplidine (SHPL1)

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SHPL2 (72 мг, 0,081 ммоль) и F1 (75 мг, 0,405 ммоль). Указанное в заглавии соединение (68 мг, 79%) получают в виде белого твердого вещества после очистки флэш ЖХ (Lichroprep RPC18, градиент ACN/H₂O/TFA от 70:30:0,5 до 90:10:0,5). Rf=0,49 (ACN/H₂O/TFA 90:10:1).Follow the procedure developed for the synthesis of SAPL1, starting from SHPL2 (72 mg, 0.081 mmol) and F1 (75 mg, 0.405 mmol). The title compound (68 mg, 79%) was obtained as a white solid after purification by flash LC (Lichroprep RPC18, ACN / H ₂ O / TFA gradient from 70: 30: 0.5 to 90: 10: 0.5) . Rf = 0.49 (ACN / H ₂ O / TFA 90: 10: 1).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,80-1,10 (м, 24Н), 1,12-1,50 (м, 18Н), 1,50-2,30 (м, 6Н), 2,42 (м, 1Н), 2,53 (с, 3H), 2,55 (с, 3H), 2,57 (с, 3H), 2,96-3,40 (м, 3H), 3,05 (с, 3H), 3,10 (с, 3H), 3,63 (м, 5Н), 3,78 (с, 3H), 3,90 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,30 (м, 1Н), 4,63 (м, 1Н), 4,69 (м, 1Н), 4,86 (м, 1Н), 5,02 (д, J=4,8, 1Н), 5,09 (м, 1Н), 5,20 (м, 1Н), 5,30 (м, 1Н), 6,83 (д, J=8,3, 2Н), 6,89 (д, J=6,3, 1Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,29 (д, J=9,7, 1Н), 7,34 (м, 2Н), 7,43 (д, J=5,3, 1Н), 7,74 (д, J=9,7, 1Н), 7,80 (д, J=10,2, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.80-1.10 (m, 24H), 1.12-1.50 (m, 18H), 1.50-2.30 (m, 6H) 2.42 (m, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 2.57 (s, 3H), 2.96-3.40 (m, 3H), 3.05 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 3.63 (m, 5H), 3.78 (s, 3H), 3.90 (m, 1H), 4.01 (m , 1H), 4.30 (m, 1H), 4.63 (m, 1H), 4.69 (m, 1H), 4.86 (m, 1H), 5.02 (d, J = 4, 8, 1H), 5.09 (m, 1H), 5.20 (m, 1H), 5.30 (m, 1H), 6.83 (d, J = 8.3, 2H), 6.89 (d, J = 6.3, 1H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.29 (d, J = 9.7, 1H), 7.34 (m, 2H) 7.43 (d, J = 5.3, 1H); 7.74 (d, J = 9.7, 1H); 7.80 (d, J = 10.2, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 12,06, 14,22, 14,30, 16,49, 16,76, 17,84, 19,17, 21,08, 21,41, 21,54, 22,54, 23,79, 23,94, 24,05, 24,16, 24,82, 24,96, 25,05, 25,98, 26,45, 27,37, 27,57, 28,21, 28,59, 30,31, 30,83, 31,56, 31,62, 33,74, 34,24, 36,02, 36,25, 38,91, 38,96, 39,46, 39,86, 46,92, 48,44, 48,71, 49,06, 54,95, 55,49, 57,16, 57,68, 58,23, 59,13, 66,16, 66,28, 69,10, 70,83, 71,14, 79,12, 114,31, 129,96, 130,12, 130,59, 158,86, 168,69, 168,81, 169,75, 169,82, 170,18, 170,45, 170,52, 170,69, 170,84, 171,21, 171,28, 172,47, 173,17, 174,66, 174,82, 197,63, 201,38. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 12.06, 14.22, 14.30, 16.49, 16.76, 17.84, 19.17, 21.08, 21.41, 21, 54, 22.54, 23.79, 23.94, 24.05, 24.16, 24.82, 24.96, 25.05, 25.98, 26.45, 27.37, 27.57, 28.21, 28.59, 30.31, 30.83, 31.56, 31.62, 33.74, 34.24, 36.02, 36.25, 38.91, 38.96, 39, 46, 39.86, 46.92, 48.44, 48.71, 49.06, 54.95, 55.49, 57.16, 57.68, 58.23, 59.13, 66.16 66.28, 69.10, 70.83, 71.14, 79.12, 114.31, 129.96, 130.12, 130.59, 158.86, 168.69, 168.81, 169, 75, 169.82, 170.18, 170.45, 170.52, 170.69, 170.84, 171.21, 171.28, 172.47, 173.17, 174.66, 174.82, 197.63, 201.38.

ESI-MC Рассчит. для C₅₄H₈₃N₇O₁₄: 1053,60. Найдено (m/z): 1054,9 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₄ H ₈₃ N ₇ O ₁₄ : 1053.60. Found (m / z): 1054.9 (M + H) ⁺ .

Пример 63Example 63

Синтез [Val]³-аплидина (SVPL1)Synthesis of [Val] ³ -aplidine (SVPL1)

Следуют методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SVPL2 (10 мг, 11 мкмоль) и F1 (10,5 мг, 57 мкмоль). Указанное в заглавии соединение (8 мг, 69%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=10,9 и 12,3 мин).Follow the procedure developed for the synthesis of SAPL1 based on SVPL2 (10 mg, 11 μmol) and F1 (10.5 mg, 57 μmol). The title compound (8 mg, 69%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isotrate ratio ACN / H ₂ O 85:15 (flow: 7 ml / min, 250 × 21 mm, 270 nm, t _R = 10.9 and 12.3 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,02 (м, 24Н), 1,13-1,38 (м, 9Н), 1,55 (м, 2Н), 1,67-1,81 (м, 4Н), 1,95-2,02 (м, 3H), 2,10-2,17 (м, 2Н), 2,26-2,39 (м, 2Н), 2,56 (с, 3H), 2,57 (с, 3H), 2,58 (с, 3H), 2,74-2,92 (м, 1Н), 3,10 (с, 3H), 3,15 (с, 3H), 3,20 (м, 1Н), 3,36 (дд, J₁=4,4, J₂=14,2, 1Н), 3,49-3,72 (м, 5Н), 3,79 (с, 3H), 3,97-4,13 (м, 2Н), 4,38 (дд, J₁=4,6, J₂=14,2, 1Н), 4,49 (м, 1Н), 4,60 (м, 1Н), 4,68-4,81 (м, 2Н), 5,11 (м, 1Н), 5,26-5,30 (м, 1Н), 5,33-5,40 (м, 1Н), 6,84 (д, J=7,8, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,36-7,52 (м, 2Н), 7,48 (д, J=9,6, 1Н), 7,61 (д, J=6,8, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.02 (m, 24H), 1.13-1.38 (m, 9H), 1.55 (m, 2H), 1.67 -1.81 (m, 4H), 1.95-2.02 (m, 3H), 2.10-2.17 (m, 2H), 2.26-2.39 (m, 2H), 2 56 (s, 3H), 2.57 (s, 3H), 2.58 (s, 3H), 2.74-2.92 (m, 1H), 3.10 (s, 3H), 3, 15 (s, 3H), 3.20 (m, 1H), 3.36 (dd, J ₁ = 4.4, J ₂ = 14.2, 1H), 3.49-3.72 (m, 5H ), 3.79 (s, 3H), 3.97-4.13 (m, 2H), 4.38 (dd, J ₁ = 4.6, J ₂ = 14.2, 1H), 4.49 (m, 1H), 4.60 (m, 1H), 4.68-4.81 (m, 2H), 5.11 (m, 1H), 5.26-5.30 (m, 1H), 5.33-5.40 (m, 1H), 6.84 (d, J = 7.8, 2H), 7.08 (d, J = 8.3, 2H), 7.36-7.52 (m, 2H), 7.48 (d, J = 9.6, 1H), 7.61 (d, J = 6.8, 1H).

ESI-MC Рассчит. для С₅₄Н₈₄N₈O₁₃ 1052,62. Найдено (m/z): 1053,6 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₄ H ₈₄ N ₈ O ₁₃ 1052.62. Found (m / z): 1053.6 (M + H) ⁺ .

Пример 64Example 64

Синтез [Hiv]³-[изобутирил]⁸-дидемнина A (8ISHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [Isobutyryl] ^8- didemnin A (8ISHPL1)

К раствору SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль) в DCM (200 мкл) при 0°С в атмосфере Ar добавляют DIPEA (3 мкл, 16,8 мкмоль) и изобутирилхлорид (1,4 мкл, 13,4 мкмоль). После 3 ч при 22°С добавляют DCM (3 мл) и смесь промывают последовательно водн. HCl (2 мл, 0,1 н), водн. NaHCO₃ (2 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (2 мл), сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют в вакууме. Очистка остатка путем ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=19 мин) дает указанное в заглавии соединение (10 мг, 94%) в виде белого твердого вещества.To a solution of SHPL2 (10 mg, 11.2 μmol) in DCM (200 μl) at 0 ° C in an Ar atmosphere, DIPEA (3 μl, 16.8 μmol) and isobutyryl chloride (1.4 μl, 13.4 μmol) were added. After 3 hours at 22 ° C, DCM (3 ml) was added and the mixture was washed successively with aq. HCl (2 ml, 0.1 N) aq. NaHCO ₃ (2 ml, sat.) And brine (2 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated in vacuo. Purification of the residue by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isotrate ratio ACN / H ₂ O 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 19 min) gives the title compound (10 mg, 94%) as a white solid.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,10 (24Н, м), 1,13-1,65 (18Н, м), 1,72-2,58 (6Н, м), 2,56 (с, 3H), 2,89 (с, 3H), 2,92 (м, 2Н), 3,13 (м, 2Н), 3,36 (дд, J₁=4,6, J₂=15,6, 1H), 3,54-3,73 (м, 3H), 3,78 (с, 3H), 3,91 (м, 2Н), 4,40 (м, 1H), 4,60 (м, 1H), 4,89 (м, 1H), 4,99 (д, J=5,3, 1H), 5,03 (м, 1H), 5,20 (м, 1H), 6,73 (д, J=9,3, 1H), 6,84 (д, J=9,6, 2Н), 7,08 (д, J=9,6, 2Н), 7,55 (д, J=8,6, 1H), 7,82 (д, J=11, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.10 (24H, m), 1.13-1.65 (18H, m), 1.72-2.58 (6H, m) 2.56 (s, 3H), 2.89 (s, 3H), 2.92 (m, 2H), 3.13 (m, 2H), 3.36 (dd, J ₁ = 4.6, J ₂ = 15.6, 1H), 3.54-3.73 (m, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.91 (m, 2H), 4.40 (m, 1H), 4.60 (m, 1H), 4.89 (m, 1H), 4.99 (d, J = 5.3, 1H), 5.03 (m, 1H), 5.20 (m, 1H) 6.73 (d, J = 9.3, 1H); 6.84 (d, J = 9.6; 2H); 7.08 (d, J = 9.6; 2H); 7.55 ( d, J = 8.6, 1H); 7.82 (d, J = 11, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,78, 14,63, 15,69, 17,92, 19,03, 19,31, 19,66, 21,03, 22,29, 23,19, 23,85, 24,71, 25,14, 27,27, 28,22, 30,39, 30,51, 31,15, 33,80, 34,25, 35,61, 38,85, 39,63, 46,98, 48,51, 53,29, 53,65, 55,49, 56,01, 56,35, 57,26, 66,07, 69,07, 70,94, 79,33, 114,31, 130,08, 130,60, 158,84, 168,79, 169,75, 170,34, 170,68, 171,36, 171,73, 174,02, 179,84. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.78, 14.63, 15.69, 17.92, 19.03, 19.31, 19.66, 21.03, 22.29, 23, 19, 23.85, 24.71, 25.14, 27.27, 28.22, 30.39, 30.51, 31.15, 33.80, 34.25, 35.61, 38.85, 39.63, 46.98, 48.51, 53.29, 53.65, 55.49, 56.01, 56.35, 57.26, 66.07, 69.07, 70.94, 79, 33, 114.31, 130.08, 130.60, 158.84, 168.79, 169.75, 170.34, 170.68, 171.36, 171.73, 174.02, 179.84.

ESI-MC Рассчит. для C₅₀H₈₀N₆O₁₂: 956,58. Найдено (m/z): 957,5 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₀ H ₈₀ N ₆ O ₁₂ : 956.58. Found (m / z): 957.5 (M + H) ⁺ .

Пример 65Example 65

Синтез [Val]³-[изобутирил]⁸-дидемнина A (8ISVPL1)Synthesis of [Val] ³ - [Isobutyryl] ^8- didemnin A (8ISVPL1)

Следуют методике, разработанной для синтеза 8ISHPL1, исходя из SVPL2 (20 мг, 22,6 мкмоль). Указанное в заглавии соединение (19 мг, 88%) получают после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение АСМ/Н₂О 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=19 мин).Follow the procedure developed for the synthesis of 8ISHPL1 based on SVPL2 (20 mg, 22.6 μmol). The title compound (19 mg, 88%) was obtained after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, AFM / H ₂ O ratio 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 19 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,81-1,02 (м, 24Н), 1,14-1-38 (м, 5Н), 1,15 (д, J=6,6, 3H), 1,19 (д, J=6,6, 3H), 1,38-1,80 (м, 7Н), 1,80-2,40 (м, 6Н), 2,57 (с, 3H), 2,58-2,64 (м, 1Н), 2,85-2,92 (м, 1Н), 2,93 (с, 3H), 3,16 (дд, J₁=10,5, J₂=14,4, 1Н), 3,36 (дд, J₁=4,5, J₂=14,4, 1Н), 3,39 (уш.с, 1Н), 3,56 (дд, 1Н, J=4,5, 10,8), 3,59-3,72 (м, 3H), 3,78 (с, 3H), 4,01 (тд, J₁=3,3, J₂=10,2, 1Н), 4,39-4,47 (м, 2Н), 4,58 (дд, J₁=5,7, J₂=7,5, 1Н), 4,79 (т, J=9,9, 1H), 5,03-5,14 (м, 2Н), 6,84 (д, J=8,4, 2H), 7,04 (д, J=7,8, 1H), 7,08 (д, J=8,4, 1H), 7,36 (д, J=9,0, 1H), 7,45 (д, J=10,2, 1H), 7,51 (д, J=10,2, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.81-1.02 (m, 24H), 1.14-1-38 (m, 5H), 1.15 (d, J = 6.6, 3H), 1.19 (d, J = 6.6, 3H), 1.38-1.80 (m, 7H), 1.80-2.40 (m, 6H), 2.57 (s, 3H), 2.58-2.64 (m, 1H), 2.85-2.92 (m, 1H), 2.93 (s, 3H), 3.16 (dd, J ₁ = 10.5 , J ₂ = 14.4, 1H), 3.36 (dd, J ₁ = 4.5, J ₂ = 14.4, 1H), 3.39 (br s, 1H), 3.56 (dd , 1H, J = 4.5, 10.8), 3.59-3.72 (m, 3H), 3.78 (s, 3H), 4.01 (td, J ₁ = 3.3, J ₂ = 10.2, 1H), 4.39-4.47 (m, 2H), 4.58 (dd, J ₁ = 5.7, J ₂ = 7.5, 1H), 4.79 (t , J = 9.9, 1H), 5.03-5.14 (m, 2H), 6.84 (d, J = 8.4, 2H), 7.04 (d, J = 7.8, 1H), 7.08 (d, J = 8.4, 1H), 7.36 (d, J = 9.0, 1H), 7.45 (d, J = 10.2, 1H), 7, 51 (d, J = 10.2, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 180,24, 175,10, 173,18, 171,14, 170,72, 170,42, 169,38, 168,73, 158,87, 130,60, 130,02, 114,33, 71,31, 70,50, 66,11, 59,47, 57,42, 56,56, 55,51, 54,93, 53,84, 48,83, 47,13, 41,94, 38,94, 35,67, 34,17, 33,63, 31,32, 31,10, 29,96, 28,32, 27,25, 25,30, 25,05, 24,82, 24,01, 23,22, 21,42, 19,88, 19,72, 11,25, 18,51, 15,60, 14,32, 11,96. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 180.24, 175.10, 173.18, 171.14, 170.72, 170.42, 169.38, 168.73, 158.87, 130, 60, 130.02, 114.33, 71.31, 70.50, 66.11, 59.47, 57.42, 56.56, 55.51, 54.93, 53.84, 48.83, 47.13, 41.94, 38.94, 35.67, 34.17, 33.63, 31.32, 31.10, 29.96, 28.32, 27.25, 25.30, 25, 05, 24.82, 24.01, 23.22, 21.42, 19.88, 19.72, 11.25, 18.51, 15.60, 14.32, 11.96.

ESI-MC Рассчит. для С₅₀Н₈₁N₇О₁₁: 955,60. Найдено 956,8 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₀ H ₈₁ N ₇ O ₁₁ : 955.60. Found 956.8 (M + H) ⁺ .

Пример 66Example 66

Синтез [Hiv]³-[бутирил]⁸-дидемнина A (8BSHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [butyryl] ^8- didemnin A (8BSHPL1)

Следуют методике, разработанной для синтеза 8ISHPL1, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль). Указанное в заглавии соединение (9 мг, 84%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=18,6 мин).Follow the procedure developed for the synthesis of 8ISHPL1 based on SHPL2 (10 mg, 11.2 μmol). The title compound (9 mg, 84%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isotrate ratio ACN / H ₂ O 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, 270 nm, t _R = 18.6 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,11-1,72 (м, 18Н), 1,75-2,51 (м, 6Н), 2,56 (с, 3H), 2,84 (с, 3H), 2,92 (м, 2Н), 3,15 (м, 2Н), 3,35 [дд, J₁=5,0, J₂=15,6, 1Н), 3,54-3,77 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,91 (м, 2Н), 4,40 (м, 1Н), 4,60 (м, 1Н), 4,89 (м, 1Н), 4,98 (д, J=6,0, 1Н), 5,04 (м, 1Н), 5,20 (м, 1Н), 6,78 (д, J₁=9,6, 1Н), 6,84 (д, J₁=9,6, 2Н), 7,08 (д, J₁=9,6, 2Н), 7,54 (д, J₁=9,6, 1Н), 7,82 (д, J₁=10,6, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.10 (m, 24H), 1.11-1.72 (m, 18H), 1.75-2.51 (m, 6H) 2.56 (s, 3H), 2.84 (s, 3H), 2.92 (m, 2H), 3.15 (m, 2H), 3.35 [dd, J ₁ = 5.0, J ₂ = 15.6, 1H), 3.54-3.77 (m, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.91 (m, 2H), 4.40 (m, 1H), 4.60 (m, 1H), 4.89 (m, 1H), 4.98 (d, J = 6.0, 1H), 5.04 (m, 1H), 5.20 (m, 1H) 6.78 (d, J ₁ = 9.6, 1H), 6.84 (d, J ₁ = 9.6, 2H), 7.08 (d, J ₁ = 9.6, 2H), 7 54 (d, J ₁ = 9.6, 1H); 7.82 (d, J ₁ = 10.6, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,82, 14,15, 14,55, 15,72, 17,96, 18,67, 19,01, 21,05, 22,37, 23,13, 23,84, 24,71, 25,14, 27,30, 28,21, 29,92, 30,38, 30,63, 33,78, 34,25, 35,69, 35,97, 38,85, 39,61, 46,98, 48,52, 53,27, 55,49, 55,99, 56,25, 57,27, 66,07, 69,07, 70,96, 79,40, 114,31, 130,08, 130,59, 158,85, 168,78, 169,73, 170,42, 170,64, 171,36, 171,65, 174,07, 175,79. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.82, 14.15, 14.55, 15.72, 17.96, 18.67, 19.01, 21.05, 22.37, 23, 13, 23.84, 24.71, 25.14, 27.30, 28.21, 29.92, 30.38, 30.63, 33.78, 34.25, 35.69, 35.97, 38.85, 39.61, 46.98, 48.52, 53.27, 55.49, 55.99, 56.25, 57.27, 66.07, 69.07, 70.96, 79, 40, 114.31, 130.08, 130.59, 158.85, 168.78, 169.73, 170.42, 170.64, 171.36, 171.65, 174.07, 175.79.

ESI-MC Рассчит. для C₅₀H₈₀N₅O₁₂: 956,60. Найдено (m/z): 957,8 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₀ H ₈₀ N ₅ O ₁₂ : 956.60. Found (m / z): 957.8 (M + H) ⁺ .

Пример 67Example 67

Синтез [Hiv]³-[гексаноил]⁸-дидемнина A (8BSHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [Hexanoyl] ^8- didemnin A (8BSHPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза 8ISHPL1, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 82%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=27,8 мин).Following the procedure developed for the synthesis of 8ISHPL1, starting from SHPL2 (10 mg, 11.2 μmol), the title compound (9 mg, 82%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, iso ACN ratio / H ₂ O 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 27.8 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,11-1,72 (м, 22Н), 1,80-2,51 (м, 6Н), 2,56 (с, 3H), 2,84 (с, 3H), 2,93 (м, 2Н), 3,14 (м, 2Н), 3,35 (дд, J₁=4,4, J₂=14,1, 1H), 3,54-3,76 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,91 (м, 2Н), 4,41 (м, 1H), 4,60 (м, 1H), 4,88 (м, 1H), 4,98 (д, J₁=5,3, 1H), 5,03 (м, 1H), 5,19 {м, 1H), 6,76 (д, J₁=8,7, 1H), 6,84 (д, J₁=8,7, 2Н), 7,08 (д, J₁=8,7, 2Н), 7,51 (д, J₁=8,8, 1H), 7,81 (д, J₁=9,7, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.10 (m, 24H), 1.11-1.72 (m, 22H), 1.80-2.51 (m, 6H) 2.56 (s, 3H), 2.84 (s, 3H), 2.93 (m, 2H), 3.14 (m, 2H), 3.35 (dd, J ₁ = 4.4, J ₂ = 14.1, 1H), 3.54-3.76 (m, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.91 (m, 2H), 4.41 (m, 1H), 4.60 (m, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.98 (d, J ₁ = 5.3, 1H), 5.03 (m, 1H), 5.19 {m, 1H ), 6.76 (d, J ₁ = 8.7, 1H), 6.84 (d, J ₁ = 8.7, 2H), 7.08 (d, J ₁ = 8.7, 2H), 7.51 (d, J ₁ = 8.8, 1H); 7.81 (d, J ₁ = 9.7, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,59, 13,94, 14,34, 15,49, 17,73, 18,77, 20,81, 22,14, 22,46, 22,90, 23,60, 24,47, 24,69, 24,90, 27,08, 27,97, 30,14, 30,40, 31,54, 33,53, 33,76, 34,02, 35,47, 38,62, 39,40, 46,76, 48,28, 53,04, 55,26, 55,78, 55,90, 57,04, 65,84, 68,82, 70,72, 79,17, 114,07, 129,84, 130,36, 158,61, 168,54, 169,51, 170,15, 170,41, 171,12, 171,42, 173,86, 175,75. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.59, 13.94, 14.34, 15.49, 17.73, 18.77, 20.81, 22.14, 22.46, 22, 90, 23.60, 24.47, 24.69, 24.90, 27.08, 27.97, 30.14, 30.40, 31.54, 33.53, 33.76, 34.02, 35.47, 38.62, 39.40, 46.76, 48.28, 53.04, 55.26, 55.78, 55.90, 57.04, 65.84, 68.82, 70, 72, 79.17, 114.07, 129.84, 130.36, 158.61, 168.54, 169.51, 170.15, 170.41, 171.12, 171.42, 173.86, 175.75.

ESI-MC Рассчит. для C₅₂H₈₄N₆O₁₂: 984,61. Найдено (m/z): 985,8 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₂ H ₈₄ N ₆ O ₁₂ : 984.61. Found (m / z): 985.8 (M + H) ⁺ .

Пример 68Example 68

Синтез Изобутирил-Pro-OBnSynthesis of Isobutyryl-Pro-OBn

К раствору H-Pro-OBn·HCl (500 мг, 2,07 ммоль) в DCM (10 мл) при 0°С добавляют в атмосфере аргона NMM (680 мкл, 6,21 ммоль). Через 10 мин добавляют изобутирилхлорид (240 мкл, 2,27 ммоль), реакционной смеси дают нагреться до 20°С и перемешивают 5 ч. Смесь фильтруют и фильтрат промывают последовательно воды. HCl (15 мл, 1 н), воды. NaHCO₃ (10 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (10 мл), затем сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая 560 мг (98%) указанного в заглавии соединения. Rf=0,42 (гекс.:EtOAc 1:1).To a solution of H-Pro-OBn · HCl (500 mg, 2.07 mmol) in DCM (10 ml) at 0 ° C was added NMR (680 μl, 6.21 mmol) in argon atmosphere. After 10 minutes, isobutyryl chloride (240 μl, 2.27 mmol) was added, the reaction mixture was allowed to warm to 20 ° C and stirred for 5 hours. The mixture was filtered and the filtrate was washed successively with water. HCl (15 ml, 1 N), water. NaHCO ₃ (10 ml, sat.) And brine (10 ml), then dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure to obtain 560 mg (98%) of the title compound. Rf = 0.42 (hex.: EtOAc 1: 1).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 1,20-1,40 (2д, 6Н), 1,90-2,35 (м, 4Н), 2,35 (кв, 1Н), 3,40-3,80 (м, 2Н), 4,30 (м, 1Н), 5,20 (м, 2Н), 7,40 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.20-1.40 (2d, 6H), 1.90-2.35 (m, 4H), 2.35 (q, 1H), 3.40 -3.80 (m, 2H), 4.30 (m, 1H), 5.20 (m, 2H), 7.40 (m, 5H).

Пример 69Example 69

Синтез Изобутирил-Pro-ОНSynthesis of Isobutyryl-Pro-OH

К раствору изобутирил-Pro-OBn (430 мг, 1,56 ммоль) в дегазированном МеОН добавляют Pd/C (10%) (43 мг, 10% м/м) и затем последовательно продувают сильной струей Ar и пробулькивают водород. Смесь перемешивают в атмосфере H₂ 14 ч и затем дегазируют и фильтруют. Раствор концентрируют и остаток кристаллизуют МТВЕ/гекс., получая 140 мг (48%) указанного в заглавии соединения в виде белого твердого вещества.To a solution of isobutyryl-Pro-OBn (430 mg, 1.56 mmol) in degassed MeOH was added Pd / C (10%) (43 mg, 10% m / m) and then sequentially purged with a strong stream of Ar and bubbled hydrogen. The mixture was stirred under H _{2 for} 14 hours and then degassed and filtered. The solution was concentrated and the residue was crystallized with MTBE / hex. To give 140 mg (48%) of the title compound as a white solid.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 1,20 (м, 6Н), 1,90-2,10 (м, 3H), 2,50 (м, 1Н), 2,70 (кв, 1Н), 3,40-3,70 (м, 2Н), 4,60 (дд, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.20 (m, 6H), 1.90-2.10 (m, 3H), 2.50 (m, 1H), 2.70 (q, 1H ), 3.40-3.70 (m, 2H), 4.60 (dd, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₉H₁₅NO₃: 185,11. Найдено (m/z): 186,1 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₉ H ₁₅ NO ₃ : 185.11. Found (m / z): 186.1 (M + H) ⁺ .

Пример 70Example 70

Синтез [Hiv]³-[изобутирил]⁹-аплидина (9ISHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [Isobutyryl] ⁹ -aplidine (9ISHPL1)

К раствору изобутирил-Pro-ОН (10 мг, 54 мкмоль) в DCM (150 мкл) при 0°С добавляют DIPCDI (5 мкл, 32 мкмоль). Перемешивание продолжают 60 мин и затем смесь переносят в колбу, содержащую SHPL2 (10 мг, 11,2 моль) в DCM (150 л). После 4 ч при 2-4°С смесь разбавляют DCM (2 мл) и промывают последовательно водн. HCl (1 мл, 0,1 н), водн. NaHCO₃ (1 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (1 мл), органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Остаток очищают ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=13 и 14 мин), что дает 9ISHPL1 (9 мг, 72%) в виде белого твердого вещества.To a solution of isobutyryl-Pro-OH (10 mg, 54 μmol) in DCM (150 μl) at 0 ° C was added DIPCDI (5 μl, 32 μmol). Stirring was continued for 60 minutes and then the mixture was transferred to a flask containing SHPL2 (10 mg, 11.2 mol) in DCM (150 L). After 4 hours at 2-4 ° C., the mixture was diluted with DCM (2 ml) and washed successively with aq. HCl (1 ml, 0.1 N) aq. NaHCO ₃ (1 ml, sat.) And brine (1 ml), the organic phase is dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated. The residue was purified by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isotrate ratio ACN / H ₂ O 85:15 (flow: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 13 and 14 min), which gives 9ISHPL1 (9 mg, 72%) as a white solid.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,12-1,50 (м, 18Н), 1,52-2,70 (м, 10Н), 2,56 (с, 3H), 3,00-3,44 (м, 4Н), 3,08 (с, 3H), 3,55-3,72 (м, 5Н) 3,78 (с, 3H), 4,00 (м, 3H), 4,26 (м, 1Н), 4,62 (м, 2Н), 4,86 (м, 1Н), 5,02 (д, J=5,3, 1H), 5,30 (м, 2Н), 6,84 (д, J=9,0, 2Н), 7,07 (д, J=9,0, 2Н), 7,29 (д, J=11,0, 1Н), 7,80 (д, J=9,0, 1Н); 7,88 (д, J=11, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.10 (m, 24H), 1.12-1.50 (m, 18H), 1.52-2.70 (m, 10H) 2.56 (s, 3H), 3.00-3.44 (m, 4H), 3.08 (s, 3H), 3.55-3.72 (m, 5H) 3.78 (s, 3H), 4.00 (m, 3H), 4.26 (m, 1H), 4.62 (m, 2H), 4.86 (m, 1H), 5.02 (d, J = 5.3 , 1H), 5.30 (m, 2H), 6.84 (d, J = 9.0, 2H), 7.07 (d, J = 9.0, 2H), 7.29 (d, J = 11.0, 1H); 7.80 (d, J = 9.0, 1H); 7.88 (d, J = 11, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 12,04, 14,44, 16,91, 17,94, 18,96, 19,03, 19,15, 21,07, 21,59, 23,87, 24,10, 24,89, 25,08, 26,04, 27,54, 28,21, 28,87, 30,33, 31,61, 32,64, 33,77, 34,24, 36,19, 39,07, 39,33, 39,81, 46,87, 47,52, 48,45, 54,74, 55,49, 56,20, 57,08, 58,50, 66,41, 69,13, 71,48, 79,16, 114,27, 130,30, 130,59, 158,80, 168,55, 169,88, 170,86, 171,06, 171,22, 173,63, 174,92, 176,19. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 12.04, 14.44, 16.91, 17.94, 18.96, 19.03, 19.15, 21.07, 21.59, 23, 87, 24.10, 24.89, 25.08, 26.04, 27.54, 28.21, 28.87, 30.33, 31.61, 32.64, 33.77, 34.24, 36.19, 39.07, 39.33, 39.81, 46.87, 47.52, 48.45, 54.74, 55.49, 56.20, 57.08, 58.50, 66, 41, 69.13, 71.48, 79.16, 114.27, 130.30, 130.59, 158.80, 168.55, 169.88, 170.86, 171.06, 171.22, 173.63, 174.92, 176.19.

ESI-MC Рассчит. для С₅₅Н₈₇N₇O₁₃: 1053,64. Найдено (m/z): 1054,6 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₅ H ₈₇ N ₇ O ₁₃ : 1053.64. Found (m / z): 1054.6 (M + H) ⁺ .

Пример 71Example 71

Синтез [Val]³-[изобутирил]⁹-аплидина (9ISVPL1)Synthesis of [Val] ³ - [Isobutyryl] ⁹ -aplidine (9ISVPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ISHPL1, исходя из SVPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 77%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=15,3 мин).Following the procedure developed for the synthesis of 9ISHPL1, starting from SVPL2 (10 mg, 11.2 μmol), the title compound (9 mg, 77%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, iso ACN ratio / H ₂ O 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 15.3 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,01 (м, 24Н), 1,14-1,37 (м, 12Н), 1,148-2,35 (м, 8Н), 2,55 (с, 3H), 2,57-2,68 (м, 1Н), 2,77-2,83 (м, 1Н), 3,12 (с, 3H), 3,19-3,23 (м, 1Н), 3,35-3,41 (м, 2Н), 3,52-3,56 (м, 1Н), 3,58-3,70 (м, 3H), 3,78 (с, 3H), 4,03-4,13 (м, 1Н), 4,33-4,35 (м, 1Н), 4,44-4,48 (м, 1Н), 4,55-4,66 (м, 2Н), 4,70-4,83 (м, 1Н), 5,35-5,39 (м, 2Н), 6,82 (д, J=8,4, 2Н), 7,06 (д, J=8,4, 2Н), 7,25 (уш.с, 2Н), 7,37 (д, 10,5, 1Н), 7,46 (д, J=8,7, 1Н), 7,60 (д, J=9,3, 1Н), 8,07 (уш.с, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.01 (m, 24H), 1.14-1.37 (m, 12H), 1.148-2.35 (m, 8H), 2 55 (s, 3H), 2.57-2.68 (m, 1H), 2.77-2.83 (m, 1H), 3.12 (s, 3H), 3.19-3.23 (m, 1H), 3.35-3.41 (m, 2H), 3.52-3.56 (m, 1H), 3.58-3.70 (m, 3H), 3.78 (s , 3H), 4.03-4.13 (m, 1H), 4.33-4.35 (m, 1H), 4.44-4.48 (m, 1H), 4.55-4.66 (m, 2H), 4.70-4.83 (m, 1H), 5.35-5.39 (m, 2H), 6.82 (d, J = 8.4, 2H), 7.06 (d, J = 8.4, 2H), 7.25 (br s, 2H), 7.37 (d, 10.5, 1H), 7.46 (d, J = 8.7, 1H) 7.60 (d, J = 9.3, 1H); 8.07 (br s, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 12,10, 14,44, 16,84, 18,63, 18,95, 19,92, 21,31, 21,61, 23,91, 24,05, 24,86, 25,00, 25,30, 26,06, 27,41, 28,33, 28,93, 30,00, 31,76, 32,65, 33,59, 31,16, 36,21, 39,17, 41,71, 42,19, 47,08, 47,57, 48,88, 54,37, 54,65, 55,50, 56,15, 57,33, 58,70, 59,33, 66,45, 70,92, 71,54, 114,29, 130,28, 130,59, 158,82, 168,41, 170,08, 170,52, 170,69, 171,03, 172,65, 173,80, 175,68, 176,42. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 12.10, 14.44, 16.84, 18.63, 18.95, 19.92, 21.31, 21.61, 23.91, 24, 05, 24.86, 25.00, 25.30, 26.06, 27.41, 28.33, 28.93, 30.00, 31.76, 32.65, 33.59, 31.16, 36.21, 39.17, 41.71, 42.19, 47.08, 47.57, 48.88, 54.37, 54.65, 55.50, 56.15, 57.33, 58, 70, 59.33, 66.45, 70.92, 71.54, 114.29, 130.28, 130.59, 158.82, 168.41, 170.08, 170.52, 170.69, 171.03, 172.65, 173.80, 175.68, 176.42.

ESI-MC Рассчит. для C₅₅H₈₈N₈O₁₃: 1052,65. Найдено (m/z): 1053,8 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₅ H ₈₈ N ₈ O ₁₃ : 1052.65. Found (m / z): 1053.8 (M + H) ⁺ .

Пример 72Example 72

Синтез Z-NVa-Pro-OMeSynthesis of Z-NVa-Pro-OMe

Следуя методике, разработанной для синтеза F2, из Z-NVa-OH (261 мг, 1,04 ммоль), H-Pro-OMe-HCl (156,6 мг, 0,94 ммоль), указанное в заглавии соединение (315 мг, 87%) получают в виде бесцветного масла после очистки ЖХ-диоксид кремния (гекс. - EtOAc, градиент 3:1 - 1:1). R_t=0,42 (гекс. - EtOAc 1:1).Following the procedure developed for the synthesis of F2, from Z-NVa-OH (261 mg, 1.04 mmol), H-Pro-OMe-HCl (156.6 mg, 0.94 mmol), the title compound (315 mg , 87%) are obtained as a colorless oil after purification by LC-silica (hex. - EtOAc, gradient 3: 1 - 1: 1). R _t = 0.42 (hex. - EtOAc 1: 1).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,97 (т, J=6,9, 2Н), 1,44 (секст., J=7,5, 2Н), 1,53-1,65 (м, 1Н), 1,68-1,77 (м, 1Н), 1,82-2,09 (м, 3H), 2,17-2,24 (м, 1Н), 3,43-3,80 (м, 2Н), 3,71 (с, 3H), 4,45-4,55 (м, 2Н), 5,07 (с, 2Н), 5,51 (д, J=8,4, 1Н), 7,32-7,35 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.97 (t, J = 6.9, 2H), 1.44 (sext., J = 7.5, 2H), 1.53-1.65 (m, 1H), 1.68-1.77 (m, 1H), 1.82-2.09 (m, 3H), 2.17-2.24 (m, 1H), 3.43-3 80 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 4.45-4.55 (m, 2H), 5.07 (s, 2H), 5.51 (d, J = 8.4 , 1H); 7.32-7.35 (m, 5H).

Пример 73Example 73

Синтез NVa-Pro-OHSynthesis of NVa-Pro-OH

К раствору Z-NVa-Pro-OMe (36 мг, 99 мкмоль) в смеси ТГФ и МеОН (130 мкл:130 мкл) при 0°С добавляют водн. LiOH (130 мкл, 15% м/м). После 6 ч перемешивания реакционную смесь распределяют между Н₂O (3 мл) и диэтиловым эфиром (3×2 мл). Органическую фазу экстрагируют затем NaHCO₃ (3×2 мл). Объединенные водные фазы нейтрализуют (рН 5) водн. HCl (0,1 н) и экстрагируют Et₂O (3×3 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют, получая указанное в заглавии соединение (36 мг, колич.) в виде бесцветного масла.To a solution of Z-NVa-Pro-OMe (36 mg, 99 μmol) in a mixture of THF and MeOH (130 μl: 130 μl) at 0 ° C was added aq. LiOH (130 μl, 15% m / m). After 6 hours of stirring, the reaction mixture was partitioned between H ₂ O (3 ml) and diethyl ether (3 × 2 ml). The organic phase is then extracted with NaHCO ₃ (3 × 2 ml). The combined aqueous phases neutralize (pH 5) aq. HCl (0.1 N) and extracted with Et ₂ O (3 × 3 ml). The organic phase was dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated to give the title compound (36 mg, quant.) As a colorless oil.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,96 (т, J=6,9, 2H), 1,41 (секст., J=7,4, 2H), 1,53-1,65-1,77 (м, 2H), 1,82-2,10 (м, 3H), 2,17-2,24 (м, 1Н), 3,52-3,81 (м, 2H), 4,45-4,58 (м, 2H), 5,07 (уш.с, 2H), 5,81 (д, J=8,4, 1Н), 7,30-7,35 (м, 5Н), 7,41 (уш.с, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.96 (t, J = 6.9, 2H), 1.41 (sext., J = 7.4, 2H), 1.53-1.65 -1.77 (m, 2H), 1.82-2.10 (m, 3H), 2.17-2.24 (m, 1H), 3.52-3.81 (m, 2H), 4 , 45-4.58 (m, 2H), 5.07 (br s, 2H), 5.81 (d, J = 8.4, 1H), 7.30-7.35 (m, 5H) 7.41 (br s, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₁₈H₂₄N₂O₅: 348,17. Найдено (m/z): 349,2 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₁₈ H ₂₄ N ₂ O ₅ : 348.17. Found (m / z): 349.2 (M + H) ⁺ .

Пример 74Example 74

Синтез [ZNVa-Pro]9-аплидина (9NVSAPL2)Synthesis of [ZNVa-Pro] 9-aplidine (9NVSAPL2)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SAPL2 (18 мг, 19 мкмоль) и Z-NVa-Pro-OH (34 мг, 97 мкмоль), указанное в заглавии соединение (16 мг, 66%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=29 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL1, starting from SAPL2 (18 mg, 19 μmol) and Z-NVa-Pro-OH (34 mg, 97 μmol), the title compound (16 mg, 66%) was obtained as a white solid substances after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isotrate ratio ACN / H ₂ O 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 29 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,84-0,96 (м, 27Н), 1,12-1,85 (м, 19Н), 2,00-2,25 (м, 7Н), 2,30-2,40 (м, 1Н), 2,54 (с, 3H), 2,62 (дд, J₁=10,5, J₂=17,7, 1Н), 2,93 (д, 4,2, 1Н), 3,14 (с, 3H), 3,14-3,20 (м, 1Н), 3,28-3,34 (м, 2Н), 3,50-3,67 (м, 4Н), 3,77-3,80 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 3,82-3,91 (м, 1Н), 4,00-4,17 (м, 2Н), 4,27 (дд, J₁=6,3, J₂=13,2, 1Н), 4,43-4,51 (м, 2Н), 4-58-4,63 (м, 1Н), 4,69-4,75 (м, 1Н), 4,77-4,82 (м, 1Н), 5,07 (д, 1Н, J=12,9, 2Н), 5,13 (д, J=12,9, 1Н), 5,32-5,41 (м, 2Н), 6,07 (д, J=8,7, 1Н), 6,83 (д, J=8,4, 2Н), 7,06 (д, J=8,4, 2Н), 7,17 (д, J=9, 9, 1Н), 7,32 (м, 5Н), 7,83 (д, J=9,0, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.84-0.96 (m, 27H), 1.12-1.85 (m, 19H), 2.00-2.25 (m, 7H) 2.30-2.40 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.62 (dd, J ₁ = 10.5, J ₂ = 17.7, 1H), 2.93 ( d, 4.2, 1H), 3.14 (s, 3H), 3.14-3.20 (m, 1H), 3.28-3.34 (m, 2H), 3.50-3, 67 (m, 4H), 3.77-3.80 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.82-3.91 (m, 1H), 4.00-4.17 ( m, 2H), 4.27 (dd, J ₁ = 6.3, J ₂ = 13.2, 1H), 4.43-4.51 (m, 2H), 4-58-4.63 (m , 1H), 4.69-4.75 (m, 1H), 4.77-4.82 (m, 1H), 5.07 (d, 1H, J = 12.9, 2H), 5.13 (d, J = 12.9, 1H), 5.32-5.41 (m, 2H), 6.07 (d, J = 8.7, 1H), 6.83 (d, J = 8, 4, 2H), 7.06 (d, J = 8.4, 2H), 7.17 (d, J = 9, 9, 1H), 7.32 (m, 5H), 7.83 (d, J = 9.0, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,68, 13,74, 14,56, 15,24, 16,39, 16,85, 18,61, 20,94, 21,26, 23,34, 23,70, 24,76, 24,90, 25,02, 26,00, 27,17, 27,81, 28,54, 31,29, 31,40, 33,30, 33,85, 33,86, 36,19, 38,62, 38,84, 41,31, 46,91, 47,21, 49,38, 49,49, 52,50, 54,96, 55,24, 55,25, 56,50, 57,17, 57,96, 62,53, 66,40, 67,93, 70,64, 81,37, 114,04, 127,89, 127,77, 128,32, 129,97, 130,29, 136,84, 156,72, 158,55, 168,48, 169,36, 169,58, 170,52, 171,27, 171,71, 172,54, 173,22, 205,08. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.68, 13.74, 14.56, 15.24, 16.39, 16.85, 18.61, 20.94, 21.26, 23, 34, 23.70, 24.76, 24.90, 25.02, 26.00, 27.17, 27.81, 28.54, 31.29, 31.40, 33.30, 33.85, 33.86, 36.19, 38.62, 38.84, 41.31, 46.91, 47.21, 49.38, 49.49, 52.50, 54.96, 55.24, 55, 25, 56.50, 57.17, 57.96, 62.53, 66.40, 67.93, 70.64, 81.37, 114.04, 127.89, 127.77, 128.32, 129.97, 130.29, 136.84, 156.72, 158.55, 168.48, 169.36, 169.58, 170.52, 171.27, 171.71, 172.54, 173, 22, 205.08.

ESI-MC Рассчит. для C₆₇H₁₀₀N₈O₁₆: 1277,3, Найдено (m/z): 1273,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₆₇ H ₁₀₀ N ₈ O ₁₆ : 1277.3, Found (m / z): 1273.7 (M + H) ⁺ .

Пример 75Example 75

Синтез [Hiv]³-[Z-NVa-Pro]⁹-аплидина (9NVSHPL2)Synthesis of [Hiv] ³ - [Z-NVa-Pro] ⁹ -aplidine (9NVSHPL2)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 ммоль) и Z-NVa-Pro-OH (20 мг, 56 мкмоль), указанное в заглавии соединение (8 мг, 60%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=26,7 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL1, starting from SHPL2 (10 mg, 11.2 mmol) and Z-NVa-Pro-OH (20 mg, 56 μmol), the title compound (8 mg, 60%) was obtained as white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isotrate ratio ACN / H ₂ O 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 26.7 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,12-1,80 (м, 22Н), 1,82-2,35 (м, 6Н), 2,42 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 2,96-3,38 (м, 4Н), 3,10 (с, 3H), 3,48-3,72 (м, 5Н), 3,78 (с, 3H), 3,88 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,18 (м, 1Н), 4,47 (м, 1Н), 4,68 (м, 2Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J₁=5,3, 1Н), 5,08 (м, 2Н), 5,28 (м, 1Н), 5,42 (м, 1Н), 6,10 (д, J=8,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2H), 7,07 (д, J=8,3, 2H), 7,31 (м, 6Н), 7,72 (д, J=4,3, 1H) 7,78 (д, J=8,7, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.10 (m, 24H), 1.12-1.80 (m, 22H), 1.82-2.35 (m, 6H) 2.42 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.96-3.38 (m, 4H), 3.10 (s, 3H), 3.48-3.72 (m 5H), 3.78 (s, 3H), 3.88 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 4.18 (m, 1H), 4.47 (m, 1H), 4 68 (m, 2H), 4.87 (m, 1H), 5.02 (d, J ₁ = 5.3, 1H), 5.08 (m, 2H), 5.28 (m, 1H) 5.42 (m, 1H), 6.10 (d, J = 8.3, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8, 3, 2H), 7.31 (m, 6H), 7.72 (d, J = 4.3, 1H); 7.78 (d, J = 8.7, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 12,06, 13,88, 14,22, 16,85, 17,76, 18,89, 19,18, 21,12, 21,47, 23,72, 23,98, 25,08, 26,25, 27,57, 28,15, 28,79, 30,32, 31,61, 33,45, 33,72, 34,07, 35,95, 38,92, 39,59, 39,90, 46,87, 47,44, 48,46, 52,76, 55,21, 55,49, 56,77, 57,17, 58,37, 66,41, 66,65, 69,22, 71,14, 79,07, 114,24, 127,87, 128,00, 128,56, 130,25, 130,55, 157,00, 158,79, 168,82, 169,86, 170,36, 170,58, 170,77, 171,30, 171,86, 173,28, 174,94. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 12.06, 13.88, 14.22, 16.85, 17.76, 18.89, 19.18, 21.12, 21.47, 23, 72, 23.98, 25.08, 26.25, 27.57, 28.15, 28.79, 30.32, 31.61, 33.45, 33.72, 34.07, 35.95, 38.92, 39.59, 39.90, 46.87, 47.44, 48.46, 52.76, 55.21, 55.49, 56.77, 57.17, 58.37, 66, 41, 66.65, 69.22, 71.14, 79.07, 114.24, 127.87, 128.00, 128.56, 130.25, 130.55, 157.00, 158.79, 168.82, 169.86, 170.36, 170.58, 170.77, 171.30, 171.86, 173.28, 174.94.

ESI-MC Рассчит. для C₆₄H₉₆N₈O₁₅: 1216,7. Найдено m/z: 1217,5 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₆₄ H ₉₆ N ₈ O ₁₅ : 1216.7. Found m / z: 1217.5 (M + H) ⁺ .

Пример 76Example 76

Синтез [NVa-Pro]⁹-аплидина (9NVSAPL1)Synthesis of [NVa-Pro] ⁹ -aplidine (9NVSAPL1)

Дегазированную смесь 9NVSAPL2 (10 мг, 7,8 мкмоль) и Pd/C (10%, 5 мг) в IPA:H₂O (0,2 мл: 0,1 мл) насыщают (и выдерживают при 1 атм) газообразным водородом при перемешивании в течение 14 ч. Затем смесь фильтруют (тефлон, 0,45 мкм) и концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии соединение (8,8 мг, колич.) в виде белого твердого вещества.A degassed mixture of 9NVSAPL2 (10 mg, 7.8 μmol) and Pd / C (10%, 5 mg) in IPA: H ₂ O (0.2 ml: 0.1 ml) is saturated (and held at 1 atm) with hydrogen gas with stirring for 14 hours. Then the mixture was filtered (Teflon, 0.45 μm) and concentrated in vacuo to give the title compound (8.8 mg, quant.) as a white solid.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,85-0,95 (м, 27Н), 1,18-1,51 (м, 18Н), 1,50-2,45 (м, 7Н), 2,59-2,83 (м, 1Н), 2,57 (с, 3H), 2,57-2,80 (м, 3H), 2,81-2,95 (м, 1Н), 3,14 (с, 3H), 3,15-3,40 (м, 3H), 3,52-3,79 (м, 4Н), 3,79 (с, 3H), 4,45-4,52 (м, 1Н), 4,61-4,65 (м, 1Н), 4,70-4,85 (м, 2Н), 5,17 (д, J=3,3, 1H), 5,36-5,39 (м, 2Н), 6,84 (д, J=8,1, 2Н), 7,86 (д, J=8,7, 2Н), 7,19 (д, J=10,2, 1Н), 7,82 (д, J=9,0, 1Н), 7,80-7,85 (м, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.85-0.95 (m, 27H), 1.18-1.51 (m, 18H), 1.50-2.45 (m, 7H) 2.59-2.83 (m, 1H), 2.57 (s, 3H), 2.57-2.80 (m, 3H), 2.81-2.95 (m, 1H), 3 14 (s, 3H), 3.15-3.40 (m, 3H), 3.52-3.79 (m, 4H), 3.79 (s, 3H), 4.45-4.52 (m, 1H), 4.61-4.65 (m, 1H), 4.70-4.85 (m, 2H), 5.17 (d, J = 3.3, 1H), 5.36 -5.39 (m, 2H), 6.84 (d, J = 8.1, 2H), 7.86 (d, J = 8.7, 2H), 7.19 (d, J = 10, 2, 1H), 7.82 (d, J = 9.0, 1H), 7.80-7.85 (m, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₉H₄₀N₈O₁₄: 1138,69. Найдено (m/z): 1193,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₉ H ₄₀ N ₈ O ₁₄ : 1138.69. Found (m / z): 1193.7 (M + H) ⁺ .

Пример 77Example 77

Синтез [Hiv]³-[NVa-Pro]⁹-аплидина (9NVSHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [NVa-Pro] ⁹ -aplidine (9NVSHPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза 9NVSAPL1, исходя из 9NVSHPL2 (10 мг, 8,2 мкмоль), указанное в заглавии соединение (8 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества.Following the procedure developed for the synthesis of 9NVSAPL1, starting from 9NVSHPL2 (10 mg, 8.2 μmol), the title compound (8 mg, quant.) Was obtained as a white solid.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,10 (м, 30Н), 1,12-1,85 (м, 22Н), 1,92-2,35 (м, 6Н), 2,42 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 3,10-3,45 (м, 4Н), 3,10 (с, 3H), 3,50-3,70 (м, 5Н), 3,78 (с, 3H), 3,82 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,26 (м, 1Н), 4,65 (м, 1Н), 4,64 (м, 1Н), 4,88 (м, 1Н), 5,02 (д, J=5,3, 1Н), 5,32 (м, 2Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,38 (д, J=8,7, 1Н), 7,60 (д, J=4,3, 1Н), 7,80 (д, J=9,3, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.10 (m, 30H), 1.12-1.85 (m, 22H), 1.92-2.35 (m, 6H) 2.42 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 3.10-3.45 (m, 4H), 3.10 (s, 3H), 3.50-3.70 (m 5H), 3.78 (s, 3H), 3.82 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.65 (m, 1H), 4 64 (m, 1H), 4.88 (m, 1H), 5.02 (d, J = 5.3, 1H), 5.32 (m, 2H), 6.84 (d, J = 8 , 3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.38 (d, J = 8.7, 1H), 7.60 (d, J = 4.3, 1H) 7.80 (d, J = 9.3, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 12,03, 14,13, 14,30, 16,80, 17,81, 18,72, 19,15, 21,09, 21,55, 23,73, 23,96, 25,07, 26,16, 27,55, 28,17, 28,72, 29,91, 30,33, 31,52, 33,80, 34,17, 36,00, 38,94, 39,51, 39,84, 46,88, 47,51, 48,45, 55,01, 55,49, 56,91, 57,15, 58,10, 66,37, 69,17, 71,10, 79,12, 114,29, 130,21, 130,57, 158,82, 163,66, 168,91, 169,86, 170,38, 170,75, 170,82, 171,30, 173,22, 174,79. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 12.03, 14.13, 14.30, 16.80, 17.81, 18.72, 19.15, 21.09, 21.55, 23, 73, 23.96, 25.07, 26.16, 27.55, 28.17, 28.72, 29.91, 30.33, 31.52, 33.80, 34.17, 36.00, 38.94, 39.51, 39.84, 46.88, 47.51, 48.45, 55.01, 55.49, 56.91, 57.15, 58.10, 66.37, 69, 17, 71.10, 79.12, 114.29, 130.21, 130.57, 158.82, 163.66, 168.91, 169.86, 170.38, 170.75, 170.82, 171.30, 173.22, 174.79.

ESI-MC Рассчит. для C₅₆H₉₀N₈O₁₃: 1082,66. Найдено m/z: 1083,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₆ H ₉₀ N ₈ O ₁₃ : 1082.66. Found m / z: 1083.7 (M + H) ⁺ .

Пример 78Example 78

Синтез [Hiv]³-[L-Lac(OTBDMS)]⁹-аплидина [9LSHPL2(L)]Synthesis of [Hiv] ³ - [L-Lac (OTBDMS)] ⁹ -aplidine [9LSHPL2 (L)]

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль) и (L)-Lac (OTBDMS)-Pro-OH (17 мг, 56 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 68%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, градиент ACN/H₂O 85:15 - 100:0 в 10 мин (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=30,1 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL1, starting from SHPL2 (10 mg, 11.2 μmol) and (L) -Lac (OTBDMS) -Pro-OH (17 mg, 56 μmol), the title compound (9 mg, 68 %) is obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, gradient ACN / H ₂ O 85:15 - 100: 0 in 10 min (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 30.1 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,08 (с, 3H), 0,10 (с, 3H), 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,11-1,72 (м, 18Н), 1,75-2,51 (м, 6Н), 2,41 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 3,00-3,40 (м, 5Н), 3,11 (с, 3H), 3,53-3,82 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,91 (м, 2Н), 4,02 (м, 1Н), 4,27 (м, 1Н), 4,50 (м, 1Н), 4,63 (м, 2Н), 4,87 (м, 1Н), 5,01 (д, J=4,8, 1H), 5,27 (м, 2Н), 6,84 (д, J=8,7, 2Н), 7,07 (д, J 8,7, 2H), 7,29 (д, J=9,7, 1H), 7,63 (д, J=5,8, 1H), 7,88 (д, J=9,7, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.08 (s, 3H), 0.10 (s, 3H), 0.82-1.10 (m, 24H), 1.11-1.72 (m, 18H), 1.75-2.51 (m, 6H), 2.41 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 3.00-3.40 (m, 5H), 3.11 (s, 3H), 3.53-3.82 (m, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.91 (m, 2H), 4.02 (m, 1H), 4 27 (m, 1H), 4.50 (m, 1H), 4.63 (m, 2H), 4.87 (m, 1H), 5.01 (d, J = 4.8, 1H), 5.27 (m, 2H), 6.84 (d, J = 8.7, 2H), 7.07 (d, J 8.7, 2H), 7.29 (d, J = 9.7, 1H), 7.63 (d, J = 5.8, 1H), 7.88 (d, J = 9.7, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ -4,26, -4,12, 12,04, 14,40, 16,91, 17,97, 19,14, 20,60, 21,11, 21,66, 23,82, 24,11, 24,96, 25,08, 26,11, 26,37, 27,53, 28,18, 28,37, 30,33, 31,69, 33,75, 34,19, 36,23, 39,00, 39,36, 39,81, 46,87, 47,64, 48,45, 54,91, 55,37, 55,48, 56,81, 57,08, 58,37, 66,38, 69,14, 69,89, 71,42, 79,19, 82,66, 114,23, 130,36, 130,59, 158,77, 168,43, 469,86, 170,72, 171,01, 171,21, 172,03, 173,62, 174,91. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ -4.26, -4.12, 12.04, 14.40, 16.91, 17.97, 19.14, 20.60, 21.11, 21.66, 23.82, 24.11, 24.96, 25.08, 26.11, 26.37, 27.53, 28.18, 28.37, 30.33, 31.69, 33, 75, 34.19, 36.23, 39.00, 39.36, 39.81, 46.87, 47.64, 48.45, 54.91, 55.37, 55.48, 56.81, 57.08, 58.37, 66.38, 69.14, 69.89, 71.42, 79.19, 82.66, 114.23, 130.36, 130.59, 158.77, 168, 43, 469.86, 170.72, 171.01, 171.21, 172.03, 173.62, 174.91.

ESI-MC Рассчит. для C₆₀H₉₉N₇O₁₄Si: 1169,7. Найдено m/z: 1170,9 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₆₀ H ₉₉ N ₇ O ₁₄ Si: 1169.7. Found m / z: 1170.9 (M + H) ⁺ .

Пример 79Example 79

Синтез [Hiv]³-[D-Lac(OTBDMS)]⁹-аплидина [9LSHPL2(D)]Synthesis of [Hiv] ³ - [D-Lac (OTBDMS)] ^9- aplidine [9LSHPL2 (D)]

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль) и (D)-Lac (OTBDMS)-Pro-OH (17 мг, 56 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 68%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, градиент ACN/H₂O 85:15 - 100:0 в 10 мин (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=30,4 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL1, starting from SHPL2 (10 mg, 11.2 μmol) and (D) -Lac (OTBDMS) -Pro-OH (17 mg, 56 μmol), the title compound (9 mg, 68 %) is obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, gradient ACN / H ₂ O 85:15 - 100: 0 in 10 min (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 30.4 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,03 (м, 3H), 0,06 (м, 3H), 0,87 (с, 9Н), 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,11-1,72 (м, 18Н), 1,75-2,30 (м, 6Н), 2,41 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 3,00-3,40 (м, 5Н), 3,06 (с, 3H), 3,56 (м, 1Н), 3,65 (м, 2Н), 3,78 (с, 3H), 3,90 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,17 (м, 1Н), 4,25 (м, 1Н), 4,39 (м, 1Н), 4,61 (м, 2Н), 4,86 (м, 1Н), 5,00 (д, J=4,8, 1Н), 5,25 (м, 2Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,29 (д, J=9,7, 1Н), 7,74 (д, J=5,3, 1Н), 7,87 (д, J=9,7, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.03 (m, 3H), 0.06 (m, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.82-1.10 (m, 24H ), 1.11-1.72 (m, 18H), 1.75-2.30 (m, 6H), 2.41 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 3.00- 3.40 (m, 5H), 3.06 (s, 3H), 3.56 (m, 1H), 3.65 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.90 (m , 1H), 4.01 (m, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.39 (m, 1H), 4.61 (m, 2H), 4 86 (m, 1H), 5.00 (d, J = 4.8, 1H), 5.25 (m, 2H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.29 (d, J = 9.7, 1H), 7.74 (d, J = 5.3, 1H), 7.87 (d, J = 9.7, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ -4,87, -4,84, 12,04, 14,38, 16,89, 17,94, 19,14, 20,24, 21,08, 21,60, 23,85, 24,12, 24,90, 25,06, 25,13, 26,01, 26,53, 27,53, 27,83, 28,20, 30,33, 31,51, 33,76, 34,20, 36,16, 38,99, 39,35, 39,82, 46,87, 47,02, 48,46, 54,79, 55,42, 55,48, 57,08, 57,18, 58,28, 66,39, 69,11, 71,43, 72,61, 79,18, 114,25, 130,29, 130,59, 158,79, 168,45, 169,86, 170,77, 170,81, 170,97, 171,20, 172,53, 173,67, 174,84. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ -4.87, -4.84, 12.04, 14.38, 16.89, 17.94, 19.14, 20.24, 21.08, 21.60, 23.85, 24.12, 24.90, 25.06, 25.13, 26.01, 26.53, 27.53, 27.83, 28.20, 30.33, 31, 51, 33.76, 34.20, 36.16, 38.99, 39.35, 39.82, 46.87, 47.02, 48.46, 54.79, 55.42, 55.48, 57.08, 57.18, 58.28, 66.39, 69.11, 71.43, 72.61, 79.18, 114.25, 130.29, 130.59, 158.79, 168, 45, 169.86, 170.77, 170.81, 170.97, 171.20, 172.53, 173.67, 174.84.

ESI-MC Рассчит. для C₆₀H₉₉N₇O₁₄Si: 1169,7. Найдено m/z: 1170,8 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₆₀ H ₉₉ N ₇ O ₁₄ Si: 1169.7. Found m / z: 1170.8 (M + H) ⁺ .

Пример 80Example 80

Синтез [Val]³-[L-Lac(OTBDMS)]⁹-аплидина [9LSVPL2(L)]Synthesis of [Val] ³ - [L-Lac (OTBDMS)] ^9- aplidine [9LSVPL2 (L)]

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL1, исходя из SVPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль) и (L)-Lac(OTBDMS)-Pro-ОН (17 мг, 56 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 68%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=17,8 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL1, starting from SVPL2 (10 mg, 11.2 μmol) and (L) -Lac (OTBDMS) -Pro-OH (17 mg, 56 μmol), the title compound (9 mg, 68 %) is obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, iso-ratio of ACN / H ₂ O 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 17.8 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,14 (с, 6Н), 0,71-1,06 (м, 27Н), 1,10-1,42 (м, ЮН), 1,43-1,84 (м, 8Н), 1,85-2,40 (м, 11Н), 2,57 (с, 3H), 2,80 (д, J=14,7, 1Н), 3,15 (с, 3H), 3,15-3,23 (м, 1Н), 3,33-3,42 (м, 2Н), 3,54 (дд, J₁=4,2, J₂=10,8, 1Н), 3,58-3,69 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,88-3,90 (м, 1Н), 4,05-4,12 (уш.т, 1Н), 4,32 (уш.с, 1Н), 4,43-4,68 (м, 4Н), 4,77 (т, J=10,5, 1H), 5,31-5,35 (м, 2Н), 6,83 (д, J=8,4, 2Н), 7,08 (д, J=8,7, 2Н), 7,39 (д, J=9,9, 1Н), 7,45 (д, J=9,0, 1Н), 7,60 (д, J=10,5, 1Н), 7,83 (д, J=4,5, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.14 (s, 6H), 0.71-1.06 (m, 27H), 1.10-1.42 (m, UN), 1.43 -1.84 (m, 8H), 1.85-2.40 (m, 11H), 2.57 (s, 3H), 2.80 (d, J = 14.7, 1H), 3.15 (s, 3H), 3.15-3.23 (m, 1H), 3.33-3.42 (m, 2H), 3.54 (dd, J ₁ = 4.2, J ₂ = 10, 8, 1H), 3.58-3.69 (m, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.88-3.90 (m, 1H), 4.05-4.12 (br. t, 1H), 4.32 (br s, 1H), 4.43-4.68 (m, 4H), 4.77 (t, J = 10.5, 1H), 5.31-5, 35 (m, 2H), 6.83 (d, J = 8.4, 2H), 7.08 (d, J = 8.7, 2H), 7.39 (d, J = 9.9, 1H ), 7.45 (d, J = 9.0, 1H), 7.60 (d, J = 10.5, 1H), 7.83 (d, J = 4.5, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ -4,67, -4,49, 11,84, 14,13, 16,67, 18,19, 18,41, 19,68, 20,48, 21,15, 21,40, 23,61, 23,92, 24,72, 24,80, 25,06, 25,88, 26,24, 27,17, 28,04, 28,13, 29,78, 31,57, 33,33, 33,81, 35,99, 38,84, 41,56, 41,95, 46,83, 47,52, 48,68, 54,09, 54,64, 55,26, 56,63, 57,13, 58,36, 59,12, 66,20, 70,10, 70,57, 71,27, 77,20, 114,01, 130,13, 130,36, 158,55, 168,09, 169,76, 170,07, 170,48, 170,77, 172,21, 172,33, 173,58, 175,45. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ -4.67, -4.49, 11.84, 14.13, 16.67, 18.19, 18.41, 19.68, 20.48, 21.15, 21.40, 23.61, 23.92, 24.72, 24.80, 25.06, 25.88, 26.24, 27.17, 28.04, 28.13, 29, 78, 31.57, 33.33, 33.81, 35.99, 38.84, 41.56, 41.95, 46.83, 47.52, 48.68, 54.09, 54.64, 55.26, 56.63, 57.13, 58.36, 59.12, 66.20, 70.10, 70.57, 71.27, 77.20, 114.01, 130.13, 130, 36, 158.55, 168.09, 169.76, 170.07, 170.48, 170.77, 172.21, 172.33, 173.58, 175.45.

ESI-MC Рассчит. для C₅₉H₄₀N₈O₁₄: 1168,72. Найдено (m/z): 1169,8 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₉ H ₄₀ N ₈ O ₁₄ : 1168.72. Found (m / z): 1169.8 (M + H) ⁺ .

Пример 81Example 81

Синтез [Hiv]³-[L-Lac]⁹-аплидина [9LSHPL1(L)]: тамандарина АSynthesis of [Hiv] ³ - [L-Lac] ⁹ -aplidine [9LSHPL1 (L)]: tamandarin A

К раствору 9LSHPL2(L) (16 мг, 14 мкмоль) в ТГФ (500 мкл, безв.) при 0°С в атмосфере Ar добавляют TBAF (50 мкл, 1М в ТГФ). После 1 ч при 22°С смесь концентрируют в вакууме и сырой продукт очищают флэш ЖХ (силикагель, град. DCM:MeOH 1%-5%), получая указанное в заглавии соединение (813 мг, 88%) в виде белого твердого вещества.To a solution of 9LSHPL2 (L) (16 mg, 14 μmol) in THF (500 μl, anhydrous) at 0 ° C in an Ar atmosphere was added TBAF (50 μl, 1M in THF). After 1 h at 22 ° C, the mixture was concentrated in vacuo and the crude product was purified by flash LC (silica gel, deg. DCM: MeOH 1% -5%) to obtain the title compound (813 mg, 88%) as a white solid.

Экспериментальные данные опубликованы: Fenical, W. et al., J. Org. Chem. 2000, 65, 782-792.Experimental data published: Fenical, W. et al., J. Org. Chem. 2000, 65, 782-792.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-0,96 (м, 18Н), 1,02 (д, J=3,4, 3H), 1,04 (д, J=3,4, 3H), 1,14-2,28 (м, 14Н), 1,24 (с, 3H), 1,34 (д, J=6,8, 3H), 1,43 (д, J=6,8, 3H), 2,44 (дд, J₁=7,8, J₂=17,1, 1Н), 2,58 (с, 3H), 3,00 (уш.с, 1Н), 3,10 (с, 3H), 3,14-3,31 (м, 2Н), 3,37-3,43 (м, 2Н), 3,56-3,72 (м, 5Н), 3,79 (с, 3H), 3,90 (т, J=7,8, 1Н), 4,02 (дт, J₁=3,4, J₂=9,8, 1Н), 4,25 (д, J=3,9, 1Н), 4,30 (т, J=6,8, 1Н), 4,37 (дд, J₁=7,3, J2=8,3, 1Н), 4,65 (м, 1Н), 4,71 (т, J=7,4, 1Н), 4,87 (т, J=11,2, 1Н), 5,03 (д, J=4,9, 1Н), 5,29 (дд, J₁=3,4, J₂=11,7, 1Н), 5,42 (м, 1Н), 6,83 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н], 7,34 (д, J=9,8, 1Н), 7,48 (д, J=5,4, 1Н), 7,76 (д, J=9,8, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-0.96 (m, 18H), 1.02 (d, J = 3.4, 3H), 1.04 (d, J = 3, 4, 3H), 1.14-2.28 (m, 14H), 1.24 (s, 3H), 1.34 (d, J = 6.8, 3H), 1.43 (d, J = 6.8, 3H), 2.44 (dd, J ₁ = 7.8, J ₂ = 17.1, 1H), 2.58 (s, 3H), 3.00 (br s, 1H), 3.10 (s, 3H), 3.14-3.31 (m, 2H), 3.37-3.43 (m, 2H), 3.56-3.72 (m, 5H), 3, 79 (s, 3H), 3.90 (t, J = 7.8, 1H), 4.02 (dt, J ₁ = 3.4, J ₂ = 9.8, 1H), 4.25 (d , J = 3.9, 1H), 4.30 (t, J = 6.8, 1H), 4.37 (dd, J ₁ = 7.3, J2 = 8.3, 1H), 4.65 (m, 1H), 4.71 (t, J = 7.4, 1H), 4.87 (t, J = 11.2, 1H), 5.03 (d, J = 4.9, 1H) 5.29 (dd, J ₁ = 3.4, J ₂ = 11.7, 1H), 5.42 (m, 1H), 6.83 (d, J = 8.3, 2H), 7, 07 (d, J = 8.3, 2H], 7.34 (d, J = 9.8, 1H), 7.48 (d, J = 5.4, 1H), 7.76 (d, J = 9.8, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₄H₈₅N₇O₁₄: 1055,6. Найдено: 1056,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₄ H ₈₅ N ₇ O ₁₄ : 1055.6. Found: 1056.7 (M + H) ⁺ .

Пример 82Example 82

Синтез [Hiv]³-[D-Lac]⁹-аплидина [9LSHPL1(D)]Synthesis of [Hiv] ³ - [D-Lac] ⁹ -aplidine [9LSHPL1 (D)]

Следуя методике, разработанной для синтеза 9LSHPL1(L), исходя из 9LSHPL2 (D) (20 мг, 17 мкмоль) и TBAF (50 мкл, 1М в ТГФ), получают указанное в заглавии соединение (14 мг, 78%) в виде белого твердого вещества, после очистки флэш ЖХ (силикагель, град. DCM:MeOH 1%-5%).Following the procedure developed for the synthesis of 9LSHPL1 (L), starting from 9LSHPL2 (D) (20 mg, 17 μmol) and TBAF (50 μl, 1M in THF), the title compound (14 mg, 78%) is obtained as white solid, after purification by flash LC (silica gel, deg. DCM: MeOH 1% -5%).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,78-1,08 (м, 18Н), 1,02 (д, J=3,9, 3H), 1,04 (д, J=3,4, 3H), 1,10-2,36 (м, 14Н), 1,20 (д, J=6,3, 3H), 1,34 (д, J=6,3, 3H), 1,37 (д, J=6,3, 3H), 2,38-2,50 (дд, J₁=7,8, J₂=17,5, 1H), 2,56 (с, 3H), 3,10 (с, 3H), 3,13-3,20 (м, 1H), 3,22-3,28 (м, 1H), 3,37-3,42 (дд, J₁=3,9, J₂=4,3, 1H), 4,61-4,68 (м, 3H), 3,69-3,76 (м, 3H), 3,77 (м, 1H), 3,78 (с, 3H), 3,90 (т, J=7,8, 1H), 3,97-4,07 (м, 1H), 4,26 (м, 1H), 4,41 (кв, J=6,3, 1H), 4,63 (м, 1H), 4,71 (м, 1H), 4,86 (т, J=10,7, 1H), 5,01 (д, J=4,8, 1H), 5,21-5,37 (м, 2Н), 6,83 (д, J=8,3, 2Н), 7,06 (д, J=8,3, 2Н), 7,41 (м, 2Н), 7,77 (д, J=9,2, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.78-1.08 (m, 18H), 1.02 (d, J = 3.9, 3H), 1.04 (d, J = 3, 4, 3H), 1.10-2.36 (m, 14H), 1.20 (d, J = 6.3, 3H), 1.34 (d, J = 6.3, 3H), 1, 37 (d, J = 6.3, 3H), 2.38-2.50 (dd, J ₁ = 7.8, J ₂ = 17.5, 1H), 2.56 (s, 3H), 3 10 (s, 3H), 3.13-3.20 (m, 1H), 3.22-3.28 (m, 1H), 3.37-3.42 (dd, J ₁ = 3.9 , J ₂ = 4.3, 1H), 4.61-4.68 (m, 3H), 3.69-3.76 (m, 3H), 3.77 (m, 1H), 3.78 ( s, 3H), 3.90 (t, J = 7.8, 1H), 3.97-4.07 (m, 1H), 4.26 (m, 1H), 4.41 (q, J = 6.3, 1H), 4.63 (m, 1H), 4.71 (m, 1H), 4.86 (t, J = 10.7, 1H), 5.01 (d, J = 4, 8, 1H), 5.21-5.37 (m, 2H), 6.83 (d, J = 8.3, 2H), 7.06 (d, J = 8.3, 2H), 7, 41 (m, 2H), 7.77 (d, J = 9.2, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₄H₈₅N₇O₁₄: 1055,62. Найдено: 1056,6 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₄ H ₈₅ N ₇ O ₁₄ : 1055.62. Found: 1056.6 (M + H) ⁺ .

Пример 83Example 83

Синтез [Val]³-[L-Lac]⁹-аплидина [9LSVPL1(L)]Synthesis of [Val] ³ - [L-Lac] ⁹ -aplidine [9LSVPL1 (L)]

Следуя методике, разработанной для синтеза 9LSHPL1, исходя из 9LSHPL2(D) (5 мг, 4,3 мкмоль), получают указанное в заглавии соединение (4 мг, 88%) в виде белого твердого вещества, после очистки флэш ЖХ (силикагель, град. DCM:MeOH 1%-5%).Following the procedure developed for the synthesis of 9LSHPL1, starting from 9LSHPL2 (D) (5 mg, 4.3 μmol), the title compound (4 mg, 88%) is obtained as a white solid, after purification by flash LC (silica gel, grad DCM: MeOH 1% -5%).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,02 (м, 18Н), 1,16-1,42 [и, 4Н), 1,32 (д, J=3,0, 3H), 1,40 (д, J=6,6, 3H), 1,56-1,83 (м, 8Н), 1,95-2,34 (м, 11Н), 2,58 (с, 3H), 2,84 (д, J=14,7, 1H), 3,15 (с, 3H), 3,15-3,23 (м, 1H), 3,36-3,42 (м, 1H), 3,55 (дд, J₁=9,0, J₂=10,5, 2H), 3,64-3,66 (м, 3H), 3,95 (дд, J₁=3,3, J₂=9,9, 1H), 4,08 (тд, J₁=7,5, J₂=17,1, 1H), 4,32 (уш.с, 1H), 4,41 (дд, J₁=6,6, J₂=9,9, 1H), 4,48 (дд, J₁=5,1, J₂=10,5, 1H), 4,61 (дд, J₁=6,0, J₂=6,6, 1H), 4,69-4,80 (м, 2H), 5,29-5,35 (м, 1H), 5,57 (м, 1H), 6,84 (д, J=8,1, 2H), 7,08 (д, J=8,7, 2H), 7,37 (д, J=3,9, 1H), 7,40 (д, J=5,4, 1H), 7,60 (д, J=10,8, 1H), 7,72 (д, J=3,9, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.02 (m, 18H), 1.16-1.42 [i, 4H), 1.32 (d, J = 3.0, 3H), 1.40 (d, J = 6.6, 3H), 1.56-1.83 (m, 8H), 1.95-2.34 (m, 11H), 2.58 (s, 3H), 2.84 (d, J = 14.7, 1H), 3.15 (s, 3H), 3.15-3.23 (m, 1H), 3.36-3.42 (m, 1H), 3.55 (dd, J ₁ = 9.0, J ₂ = 10.5, 2H), 3.64-3.66 (m, 3H), 3.95 (dd, J ₁ = 3, 3, J ₂ = 9.9, 1H), 4.08 (td, J ₁ = 7.5, J ₂ = 17.1, 1H), 4.32 (br s, 1H), 4.41 ( dd, J ₁ = 6.6, J ₂ = 9.9, 1H), 4.48 (dd, J ₁ = 5.1, J ₂ = 10.5, 1H), 4.61 (dd, J ₁ = 6.0, J ₂ = 6.6, 1H), 4.69-4.80 (m, 2H), 5.29-5.35 (m, 1H), 5.57 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.1, 2H), 7.08 (d, J = 8.7, 2H), 7.37 (d, J = 3.9, 1H), 7.40 (d , J = 5.4, 1H), 7.60 (d, J = 10.8, 1H), 7.72 (d, J = 3.9, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₄H₈₆N₈O₁₃: 1054,63. Найдено: 1055,8 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₄ H ₈₆ N ₈ O ₁₃ : 1054.63. Found: 1055.8 (M + H) ⁺ .

Синтез спиро[4,4]нонанового фрагмента:Synthesis of spiro [4,4] nonane fragment:

Пример 84Example 84

Синтез N-[(2R)-2-аллил-N-(трет-бутоксикарбонил)пролил]D-лейцина (9)Synthesis of N - [(2R) -2-allyl-N- (tert-butoxycarbonyl) prolyl] D-leucine (9)

К охлажденному (0°С) раствору 8 (1,53 г, 6 ммоль) в безв. DCM (33 мл) в атмосфере аргона добавляют: HOAt (980 мг, 7,2 ммоль), D-Leu-OBn.pTsOH (2,65 г, 12 ммоль), NMM (1,21 г, 12 ммоль) и DCC (1,48 г, 7,2 ммоль). Смесь перемешивают 2 ч при 0°С и затем 12 ч при к.т.; добавляют дополнительное количество D-Leu-OBn.pTsOH (0,66 г, 3 ммоль) и NMM (0,30 г, 3 ммоль) и смесь перемешивают еще 3 ч. Смесь фильтруют и растворитель концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в EtOAc (30 мл) и промывают последовательно NaHCO₃ (2×25 мл, нас.), лимонной кислотой (2×25 мл, 10%) и насыщенным раствором соли (25 мл). Органический раствор сушат (Na₂SO₄) и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают ЖХ-диоксид кремния (гекс. - EtOAc, 6:1), получая 9 (2,63 г, 96%) в виде бесцветного масла. [α]_D ²⁰ 12,4° (с 1, МеОН). ВЭЖХ [колонка Bondapack C₁₈ (Waters), 10 м, 3,9×300 мм, расход: 1 мл/мин, при 214 нм, элюент CAN/0,05% TFA (40:60)] t_R=9,08 мин].To a cooled (0 ° C) solution of 8 (1.53 g, 6 mmol) in anv. DCM (33 ml) under argon atmosphere was added: HOAt (980 mg, 7.2 mmol), D-Leu-OBn.pTsOH (2.65 g, 12 mmol), NMM (1.21 g, 12 mmol) and DCC (1.48 g, 7.2 mmol). The mixture is stirred for 2 hours at 0 ° C and then 12 hours at rt .; additional D-Leu-OBn.pTsOH (0.66 g, 3 mmol) and NMM (0.30 g, 3 mmol) were added and the mixture was stirred for another 3 hours. The mixture was filtered and the solvent was concentrated in vacuo. The residue was dissolved in EtOAc (30 ml) and washed successively with NaHCO ₃ (2 × 25 ml, sat.), Citric acid (2 × 25 ml, 10%) and brine (25 ml). The organic solution was dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by LC-silica (hex. - EtOAc, 6: 1) to give 9 (2.63 g, 96%) as a colorless oil. [α] _D ²⁰ 12.4 ° (s 1, MeOH). HPLC [column Bondapack C ₁₈ (Waters), 10 m, 3.9 × 300 mm, flow: 1 ml / min, at 214 nm, CAN eluent / 0.05% TFA (40:60)] t _R = 9, 08 min].

¹H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆) δ 0,86 (м, 6Н), 1,37 (с, 9Н), 1,55-1,72 (м, 5Н), 2,00 (м, 2Н), 2,64 (м, 1Н), 2,86 (м, 1Н), 3,15 (м, 1Н), 3,55 (м, 1Н), 4,41 (м, 1Н), 5,05-5,11 (м, 4Н), 5,63-5,72 (м, 1Н), 7,28-7,35 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 0.86 (m, 6H), 1.37 (s, 9H), 1.55-1.72 (m, 5H), 2.00 (m , 2H), 2.64 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 3.55 (m, 1H), 4.41 (m, 1H), 5 05-5.11 (m, 4H); 5.63-5.72 (m, 1H); 7.28-7.35 (m, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, ацетон-d₆) δ 21,6, 22,8, 24,6, 28,3, 34,7, 38,2, 41,3, 49,38, 51,0, 66,9, 69,7, 80,1, 119,1, 128,3, 132,7, 153,9, 172,8. ¹³ C-NMR (75 MHz, acetone-d ₆ ) δ 21.6, 22.8, 24.6, 28.3, 34.7, 38.2, 41.3, 49.38, 51.0, 66.9, 69.7, 80.1, 119.1, 128.3, 132.7, 153.9, 172.8.

Ссылка, синтез 8: a) Seebach, D. et al. J. Am. Chem. Soc. 1983, 105, 5390-5398. b) Genin, М. J. et al. J. Org. Chem. 1993, 58, 2334-2337.Link, synthesis 8: a) Seebach, D. et al. J. Am. Chem. Soc. 1983, 105, 5390-5398. b) Genin, M. J. et al. J. Org. Chem. 1993, 58, 2334-2337.

Пример 85Example 85

Синтез (5R,8RS)-1-(трет-бутоксикарбонил)-7-[(1R)-1-бензилоксикарбонил-3-метилбутил]-8-гидрокси-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (10)Synthesis of (5R, 8RS) -1- (tert-butoxycarbonyl) -7 - [(1R) -1-benzyloxycarbonyl-3-methylbutyl] -8-hydroxy-6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane (10 )

К раствору 9 (1,56 г, 3,42 ммоль) в МеОН/Н₂О (2:1, 108 мл) в атмосфере аргона добавляют раствор OsO₄ (2,5% м/м, 2,9 мл) в трет-бутаноле. Перемешивание продолжают еще 10 мин и добавляют NaIO₄ (2,195 г, 10,3 ммоль). После 24 ч перемешивания реакционную смесь разбавляют H₂O (100 мл) и экстрагируют BtOAc (3×50 мл). Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором соли (50 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают ЖХ-диоксид кремния (гекс. - EtOAc, градиент 80:20 - 0:100%), получая диастереомеры 10а и 10b (вместе: 1,17 г, 76%) в виде белого твердого вещества.To a solution of 9 (1.56 g, 3.42 mmol) in MeOH / H ₂ O (2: 1, 108 ml) in an argon atmosphere, a solution of OsO ₄ (2.5% m / m, 2.9 ml) tert-butanol. Stirring was continued for another 10 minutes and NaIO ₄ (2.195 g, 10.3 mmol) was added. After 24 hours of stirring, the reaction mixture was diluted with H ₂ O (100 ml) and extracted with BtOAc (3 × 50 ml). The combined organic extracts were washed with brine (50 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by LC-silica (hex. EtOAc, gradient 80:20 - 0: 100%) to give diastereomers 10a and 10b (together: 1.17 g, 76%) as a white solid.

10а: ВЭЖХ [Column Novapack C₁₈ (Waters), 3,9×150 мм, ⌀=1 мл/мин, λ=214 нм, элюент: СН₃CN/0,05% TFA, (40/60)] t_R=14,45 мин. Т.пл.: 140-141°С. [α]_D ²⁰ -4° (с 1, МеОН).10a: HPLC [Column Novapack C ₁₈ (Waters), 3.9 × 150 mm, ⌀ = 1 ml / min, λ = 214 nm, eluent: CH ₃ CN / 0.05% TFA, (40/60)] t _R = 14.45 min. Mp: 140-141 ° C. [α] _D ²⁰ -4 ° (s 1, MeOH).

¹H-ЯМР (300 МГц, ацетон-d₆) δ 0,90 (м, 6Н), 1,29 (с, 9Н), 1,64-2,30 (м, 9Н); 2,68 [дд, 1Н, J₁=6, J₂=13, 1Н), 3,37 (м, 2Н), 4,51 (дд, 1Н), 5,13. (д, J=15, 2Н), 5,79 (т, J=5, 2Н), 7,40 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, acetone-d ₆ ) δ 0.90 (m, 6H), 1.29 (s, 9H), 1.64-2.30 (m, 9H); 2.68 [dd, 1H, J ₁ = 6, J ₂ = 13, 1H), 3.37 (m, 2H), 4.51 (dd, 1H), 5.13. (d, J = 15, 2H), 5.79 (t, J = 5, 2H), 7.40 (m, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, ацетон-d₆) δ 21,8, 23,8, 24,1, 24,9, 28,5, 39,6, 40,8, 41,5, 48,5, 66,8, 79,4, 79,8, 81,2, 129,1, 129,3, 128,6, 171,7, 172,0. ¹³ C-NMR (75 MHz, acetone-d ₆ ) δ 21.8, 23.8, 24.1, 24.9, 28.5, 39.6, 40.8, 41.5, 48.5, 66.8, 79.4, 79.8, 81.2, 129.1, 129.3, 128.6, 171.7, 172.0.

ESI-MC Рассчит. для C₂₅H₃₆N₂O₆: 460,26. Найдено m/z: 483,4 (M+Na)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₅ H ₃₆ N ₂ O ₆ : 460.26. Found m / z: 483.4 (M + Na) ⁺ .

10b: ВЭЖХ [Column Novapack C₁₈ (Waters), 3,9 x 150 мм, ⌀=1 мл/мин, λ=214 нм, элюент: СН₃CN/0,05% TFA, (40/60)] t_R=18,75 мин. Т.пл.: 134-135°С. [α]_D ²⁰+26 (с 1,2, МеОН).10b: HPLC [Column Novapack C ₁₈ (Waters), 3.9 x 150 mm, ⌀ = 1 ml / min, λ = 214 nm, eluent: CH ₃ CN / 0.05% TFA, (40/60)] t _R = 18.75 min. Mp: 134-135 ° C. [α] _D ²⁰ +26 (c 1.2, MeOH).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,90 (6Н, м), 1,40 (9Н, с), 1,50-2,60 (9Н, м), 3,40 (2Н, м), 4,20-5,40 (5Н, м), 7,40 (5Н, м). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.90 (6H, m), 1.40 (9H, s), 1.50-2.60 (9H, m), 3.40 (2H, m ), 4.20-5.40 (5H, m), 7.40 (5H, m).

¹³С-ЯМР (75 МГц, ацетон-d₆) δ 21,3, 23,2, 24,1, 24,9, 28,3, 38,9, 40,2, 42,5, 47,9, 53,2, 66,8, 77,5, 79,4, 80,6, 129,1, 171,2, 174,1. ¹³ C-NMR (75 MHz, acetone-d ₆ ) δ 21.3, 23.2, 24.1, 24.9, 28.3, 38.9, 40.2, 42.5, 47.9, 53.2, 66.8, 77.5, 79.4, 80.6, 129.1, 171.2, 174.1.

ESI-MC Рассчит. для С₂₅Н₃₆N₂O₆: 460,25. Найдено m/z: 483,5 (М+Na)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₅ H ₃₆ N ₂ O ₆ : 460.25. Found m / z: 483.5 (M + Na) ⁺ .

Пример 86Example 86

Синтез (5R)-7-[(1R)-1-бензилоксикарбонил-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана в виде трифторацетатной соли (11)Synthesis of (5R) -7 - [(1R) -1-benzyloxycarbonyl-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane as trifluoroacetate salt (11)

К раствору 10 (430 мг, 0,93 ммоль) в TFA (10 мл) добавляют NaBH₄ (106 мг, 2,8 ммоль). Смесь перемешивают 2 ч и затем реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток распределяют между Н₂O (5 мл) и DCM (20 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄) и концентрируют в вакууме, получая 11 в виде оранжевого масла (318 мг, колич.). [α]_D ²⁰+15 (с 1, МеОН).To a solution of 10 (430 mg, 0.93 mmol) in TFA (10 ml) was added NaBH ₄ (106 mg, 2.8 mmol). The mixture was stirred for 2 hours and then the reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was partitioned between H ₂ O (5 ml) and DCM (20 ml). The organic phase was dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated in vacuo to give 11 as an orange oil (318 mg, quant.). [α] _D ²⁰ +15 (s 1, MeOH).

¹H-ЯМР (300 МГц, ацетон-d₆) δ 0,91 (м, 6Н), 1,50 (м, 1Н), 1,66-1,94 (м, 2Н), 2,11-2,72 (м, 6Н), 3,48-3,72 (м, 4Н), 4,74 (дд, J₁=6, J₂=15, 1Н), 5,18 (с, 2Н), 7,37 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, acetone-d ₆ ) δ 0.91 (m, 6H), 1.50 (m, 1H), 1.66-1.94 (m, 2H), 2.11-2 72 (m, 6H), 3.48-3.72 (m, 4H), 4.74 (dd, J ₁ = 6, J ₂ = 15, 1H), 5.18 (s, 2H), 7 37 (m, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, ацетон-d₆) δ 21,2, 23,2, 23,9, 25,5, 30,2, 34,6, 38,0, 42,2, 46,6, 53,9, 67,6, 69,6, 129,3, 161,1, 161,6, 170,9, 172,6. ¹³ C-NMR (75 MHz, acetone-d ₆ ) δ 21.2, 23.2, 23.9, 25.5, 30.2, 34.6, 38.0, 42.2, 46.6, 53.9, 67.6, 69.6, 129.3, 161.1, 161.6, 170.9, 172.6.

ESI-MC Рассчит. для C₂₀H₂₈N₂O₃: 344,21. Найдено m/z: 345,3 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₀ H ₂₈ N ₂ O ₃ : 344.21. Found m / z: 345.3 (M + H) ⁺ .

Пример 87Example 87

Синтез (5R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (12)Synthesis of (5R) -1- (tert-butoxycarbonyl) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane (12)

К раствору 11 (150 мг, 0,44 ммоль) в ACN (5 мл) добавляют при перемешивании пентагидрат тетраметиламмонийгидроксида (158 мг, 0,87 ммоль) и Вос₂O (144 мг, 0,66 ммоль). Спустя 6 ч добавляют дополнительное количество ТМАН.5 Н₂O (158 мг) и Вос₂O (192 мг). Реакционную смесь перемешивают 2 ч и затем распределяют между Н₂O (10 мл) и DCM (25 мл). Водную фазу лиофилизуют и очищают ЖХ-диоксид кремния (DCM-MeOH, градиент 92:8 - 60:40), получая 12 (100 мг, 64%) в виде белого твердого вещества.To a solution of 11 (150 mg, 0.44 mmol) in ACN (5 ml) was added tetramethylammonium hydroxide pentahydrate (158 mg, 0.87 mmol) and Boc ₂ O (144 mg, 0.66 mmol) with stirring. After 6 hours, an additional amount of TMAN. 5 H ₂ O (158 mg) and Boc ₂ O (192 mg) were added. The reaction mixture was stirred for 2 hours and then partitioned between H ₂ O (10 ml) and DCM (25 ml). The aqueous phase is lyophilized and purified by LC-silica (DCM-MeOH, gradient 92: 8 - 60:40) to give 12 (100 mg, 64%) as a white solid.

Пример 88Example 88

Синтез (5R)-1-(изобутирил)-7-[(1R)-1-бензилоксикарбонил-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (13)Synthesis of (5R) -1- (isobutyryl) -7 - [(1R) -1-benzyloxycarbonyl-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane (13)

К раствору 11 (169 мг, 0,49 ммоль) в безв. DCM (10 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляют TEA (199 мг, 1,96 ммоль), DMAP (6 мг, 0,049 ммоль) и, по каплям, изобутирилхлорид (104 мг, 0,98 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают 24 ч. Сырой продукт распределяют между Н₂O (10 мл) и DCM (10 мл). Органическую фазу промывают насыщенным раствором соли (10 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют в вакууме. Чистое соединение 13 (150 мг, 74%) в виде белого твердого вещества получают после ЖХ-диоксид кремния (гекс. - EtOAc, градиент 60:40 - 0:100).To a solution of 11 (169 mg, 0.49 mmol) in anhydrous. DCM (10 ml) at 0 ° C. under argon atmosphere was added TEA (199 mg, 1.96 mmol), DMAP (6 mg, 0.049 mmol) and isobutyryl chloride (104 mg, 0.98 mmol) dropwise. The reaction mixture was allowed to warm to room temperature and stirred for 24 hours. The crude product was partitioned between H ₂ O (10 ml) and DCM (10 ml). The organic phase was washed with brine (10 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated in vacuo. Pure compound 13 (150 mg, 74%) was obtained as a white solid after LC-silica (hex. EtOAc, 60:40 - 0: 100 gradient).

ВЭЖХ [Column Novapack C₁₈ (Waters), 3,9×150 мм, ⌀=1 мл/мин, λ=214 нм, элюент: СН₃CN/0,05% TFA, (50/50)] t_R=4,50 мин. Т.пл.: 87°С. [α]²⁰ _D+9,6 (с 1,4, МеОН).HPLC [Column Novapack C ₁₈ (Waters), 3.9 × 150 mm, ⌀ = 1 ml / min, λ = 214 nm, eluent: CH ₃ CN / 0.05% TFA, (50/50)] t _R = 4.50 minutes Mp: 87 ° C. [α] ²⁰ _D + 9.6 (s 1.4, MeOH).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,90 (2д, J=7, 6H), 1,09-1,12 (2д, 6Н), 1,37 (септет, J=6, 1Н), 1,61-2,10 (м, 7Н), 2,64 (м, 2Н), 3,14 (дд, J₁=9, J₂=17, 1Н), 3,64 (м, 3H), 4,85 (дд, J₁=5, J₂=10, 1Н), 5,14 (д, J=6, 2Н), 7,32 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.90 (2d, J = 7, 6H), 1.09-1.12 (2d, 6H), 1.37 (septet, J = 6, 1H) 1.61-2.10 (m, 7H), 2.64 (m, 2H), 3.14 (dd, J ₁ = 9, J ₂ = 17, 1H), 3.64 (m, 3H) 4.85 (dd, J ₁ = 5, J ₂ = 10, 1H), 5.14 (d, J = 6, 2H), 7.32 (m, 5H).

¹³С-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 18,6, 18,7, 21,2, 23,1, 24,0, 24,8, 29,5, 32,5, 35,7, 37,6, 40,5, 47,8, 52,7, 66,7, 76,3, 170,8, 174,3, 174,9. ¹³ C-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 18.6, 18.7, 21.2, 23.1, 24.0, 24.8, 29.5, 32.5, 35.7, 37, 6, 40.5, 47.8, 52.7, 66.7, 76.3, 170.8, 174.3, 174.9.

ESI-MC Рассчит. для С₂₁H₃₄N₂O: 414,25. Найдено m/z: 415,4 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₁ H ₃₄ N ₂ O: 414.25. Found m / z: 415.4 (M + H) ⁺ .

Пример 89Example 89

Синтез (5R)-1-(пирувил)-7-[(1R)-1-бензилоксикарбонил-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (14)Synthesis of (5R) -1- (pyruvyl) -7 - [(1R) -1-benzyloxycarbonyl-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane (14)

Пирувилхлорид получают по методике, описанной в литературе, Pansare, S.V.; Gnana R.R. "Asymmetric Allylation and reduction on an Ephedrine-Derived Template: Stereoselective Synthesis of α-Hydroxy Acids и Derivatives" J. Org. Chem. 1998, 63, 4120-4124. α,α-Дихлорметилметиловый эфир (188 мг, 1,57 ммоль) добавляют к пировиноградной кислоте (115 мг, 1,31 ммоль). Реакционную смесь перемешивают 20 мин и полученный раствор нагревают до 50-55°С и затем перемешивают дополнительно 30 мин. Реакционную смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры и добавляют DCM (3 мл).Pyruvyl chloride is prepared according to the procedure described in the literature, Pansare, S.V .; Gnana R.R. "Asymmetric Allylation and reduction on an Ephedrine-Derived Template: Stereoselective Synthesis of α-Hydroxy Acids and Derivatives" J. Org. Chem. 1998, 63, 4120-4124. α, α-Dichloromethyl methyl ether (188 mg, 1.57 mmol) is added to pyruvic acid (115 mg, 1.31 mmol). The reaction mixture was stirred for 20 minutes and the resulting solution was heated to 50-55 ° C and then stirred for an additional 30 minutes. The reaction mixture was allowed to cool to room temperature and DCM (3 ml) was added.

К раствору 11 (150 мг, 0,33 ммоль) в безв. DCM (4 мл) при 0°С в атмосфере аргона добавляют TEA (200 мг, 1,98 ммоль), DMAP (4 мг, 0,033 ммоль) и свежеприготовленный раствор пирувилхлорида при 0°С. Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают 6 ч. Сырой продукт промывают последовательно лимонной кислотой (5 мл, 10%), водн. NaHCO₃ нас. (5 мл) и насыщенным раствором соли (5 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄) и концентрируют. Чистое соединение 14 (77 мг, 56%), в виде масла, получают после ЖХ-диоксид кремния (гекс. - EtOAc, 1:3).To a solution of 11 (150 mg, 0.33 mmol) in bezv. DCM (4 ml) at 0 ° C in argon atmosphere add TEA (200 mg, 1.98 mmol), DMAP (4 mg, 0.033 mmol) and a freshly prepared solution of pyruvyl chloride at 0 ° C. The reaction mixture was allowed to warm to room temperature and was stirred for 6 hours. The crude product was washed successively with citric acid (5 ml, 10%), aq. NaHCO ₃ us. (5 ml) and brine (5 ml). The organic phase is dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated. Pure compound 14 (77 mg, 56%), in the form of an oil, was obtained after LC-silica (hex. - EtOAc, 1: 3).

ВЭЖХ [Column Novapack C₁₈ (Waters), 3,9×150 мм, ⌀=1 мл/мин, λ=214 нм, элюент: ACN/0,05% TFA, (50/50)] t_R=5,87 и 6,72 мин.HPLC [Column Novapack C ₁₈ (Waters), 3.9 × 150 mm, ⌀ = 1 ml / min, λ = 214 nm, eluent: ACN / 0.05% TFA, (50/50)] t _R = 5, 87 and 6.72 minutes

¹H-ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 0,92 и 0,95 (2д, J=6, 6H); 1,42 (м, 1Н); 1,61-2,39 (м, 7Н), 2,44 (с, 3H), 2,77 (м, 1Н), 3,22 (м, 1Н), 3,56-3,78 (м, 2Н), 3,92 (м, 1Н), 4,67 и 4,85 (дд, J₁=6, J₂=10, 1Н), 5,21 (с, 2Н), 7,34 (м, 5Н). ¹ H-NMR (200 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.92 and 0.95 (2d, J = 6.6H); 1.42 (m, 1H); 1.61-2.39 (m, 7H), 2.44 (s, 3H), 2.77 (m, 1H), 3.22 (m, 1H), 3.56-3.78 (m, 2H), 3.92 (m, 1H), 4.67 and 4.85 (dd, J ₁ = 6, J ₂ = 10, 1H), 5.21 (s, 2H), 7.34 (m, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 21,2, 23,0, 24,4, 24,8, 26,4, 29,3, 35,6, 37,3, 40,7, 48,9, 53,0, 66,8, 68,6, 135,0, 166,0, 170,8, 173,0, 198,0. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 21.2, 23.0, 24.4, 24.8, 26.4, 29.3, 35.6, 37.3, 40.7, 48, 9, 53.0, 66.8, 68.6, 135.0, 166.0, 170.8, 173.0, 198.0.

ESI-MC Рассчит. для C₂₃H₃₀N₂O₅: 414,22. Найдено m/z: 415,4 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₃ H ₃₀ N ₂ O ₅ : 414.22. Found m / z: 415.4 (M + H) ⁺ .

Пример 90Example 90

Синтез (5R)-1-(2-метилакрилоил)-7-[(1R)-1-бензилоксикарбонил-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (15)Synthesis of (5R) -1- (2-methylacryloyl) -7 - [(1R) -1-benzyloxycarbonyl-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane (15)

Следуя методике, разработанной для синтеза 13, исходя из 11 (200 мг, 0,43 ммоль) и метилакрилоилхлорида (89 мг, 0,86 ммоль), получают указанное в заглавии соединение (70 мг, 50%) в виде бесцветного масла, после очистки ЖХ (силикагель, гекс. - EtOAc, 2:1). ВЭЖХ [Column Novapack C18 (Waters), 3,9×150 мм, ⌀=1 мл/мин, λ=214 нм, элюент: ACN/0,05% TFA, (25/75)]. Rt=6,38 мин.Following the procedure developed for synthesis 13, starting from 11 (200 mg, 0.43 mmol) and methyl acryloyl chloride (89 mg, 0.86 mmol), the title compound (70 mg, 50%) was obtained as a colorless oil, after purification LC (silica gel, hex. - EtOAc, 2: 1). HPLC [Column Novapack C18 (Waters), 3.9 × 150 mm, ⌀ = 1 ml / min, λ = 214 nm, eluent: ACN / 0.05% TFA, (25/75)]. Rt = 6.38 min.

¹Н-ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 0,91 (т, J=6, 6H), 1,44 (м, 1Н), 1,64-1,93 (м, 5Н), 1,93 (с, 3H), 1,96-2,12 (м, 2Н), 2,78 (м, 1Н), 3,20 (м, 1Н), 3,56-3,68 (м, 3H), 4,80 и 4,77 (2д, J=10, 1Н), 5,16 (с, 2Н), 5,19 (д, J=9, 2Н), 7,32 (м, 5Н). ¹ H-NMR (200 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.91 (t, J = 6, 6H), 1.44 (m, 1H), 1.64-1.93 (m, 5H), 1.93 (s, 3H), 1.96-2.12 (m, 2H), 2.78 (m, 1H), 3.20 (m, 1H), 3.56-3.68 (m, 3H), 4.80 and 4.77 (2d, J = 10, 1H), 5.16 (s, 2H), 5.19 (d, J = 9, 2H), 7.32 (m, 5H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 19,8, 21,4, 23,0, 24,2, 24,9, 29,9, 37,1, 37,7, 41,1, 50,2, 53,2, 66,6, 67,4, 116,9, 128,1, 128,3, 128,4, 135,0, 141,7, 170,7, 174,1. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 19.8, 21.4, 23.0, 24.2, 24.9, 29.9, 37.1, 37.7, 41.1, 50, 2, 53.2, 66.6, 67.4, 116.9, 128.1, 128.3, 128.4, 135.0, 141.7, 170.7, 174.1.

ESI-MC Рассчит. для C₂₄H₃₂N₂O₄: 412,24. Найдено m/z: 413,3 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₄ H ₃₂ N ₂ O ₄ : 412.24. Found m / z: 413.3 (M + H) ⁺ .

Пример 91Example 91

Синтез (5R)-1-(изобутирил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (16)Synthesis of (5R) -1- (isobutyryl) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane (16)

Дегазированный раствор 13 (134 мг, 0.32 ммол) в метаноле, содержащий 10% Pd/C (27 мг), гидрируют при 16 фунт/кв.дюйм в течение 24 ч. Смесь фильтруют через подушку из целита и фильтрованный раствор концентрируют при пониженном давлении, получая 16 (100 мг, 95%) в виде бесцветного масла. Т.пл. 68-69°С. [α]²⁰ _D-2° (с 1,1, МеОН).A degassed solution of 13 (134 mg, 0.32 mmol) in methanol containing 10% Pd / C (27 mg) was hydrogenated at 16 psi for 24 hours. The mixture was filtered through a pad of celite and the filtered solution was concentrated under reduced pressure. receiving 16 (100 mg, 95%) as a colorless oil. Mp 68-69 ° C. [α] ²⁰ _D -2 ° (c 1.1, MeOH).

¹H-ЯМР (300 МГц, ацетон-d₆) δ 0,87-0,91 (2д, J=7, 6H), 1,09-1,12 (2д, 6H), 1,46 (м, 1Н), 1,70 (м, 2Н), 1,90-2,10 (м, 5Н), 2,49 (м, 1Н), 2,70 (м, 1Н), 3,30 (м, 1Н), 3,49 (дт, J₁=8, J₂=10, 1Н), 3,61-3,75 (м, 2Н), 4,71 (дд, J₁=5, J₂=11, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, acetone-d ₆ ) δ 0.87-0.91 (2d, J = 7.6H), 1.09-1.12 (2d, 6H), 1.46 (m, 1H), 1.70 (m, 2H), 1.90-2.10 (m, 5H), 2.49 (m, 1H), 2.70 (m, 1H), 3.30 (m, 1H ), 3.49 (dt, J ₁ = 8, J ₂ = 10, 1H), 3.61-3.75 (m, 2H), 4.71 (dd, J ₁ = 5, J ₂ = 11, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 16,4, 16,6, 21,1, 23,0, 24,3, 25,0, 30,8, 32,6, 36,6, 36,9, 40,6, 48,0, 53,4, 67,5, 171,8, 174,2, 176,2. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 16.4, 16.6, 21.1, 23.0, 24.3, 25.0, 30.8, 32.6, 36.6, 36, 9, 40.6, 48.0, 53.4, 67.5, 171.8, 174.2, 176.2.

ESI-MC Рассчит. для C₁₇H₂₈N₂O₄: 324,20. Найдено: 323,3 (M-1)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₁₇ H ₂₈ N ₂ O ₄ : 324.20. Found: 323.3 (M-1) ⁺ .

Пример 92Example 92

Синтез (5R)-1-(пирувил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (17)Synthesis of (5R) -1- (pyruvyl) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane (17)

Дегазированный раствор 14 (79 мг, 0,26 ммоль) в метаноле (20 мл), содержащий Pd/C (10%, 22 мг), гидрируют при атмосферном давлении 45 мин. Фильтрованный раствор концентрируют при пониженном давлении, получая 17 (79 мг, 95%) в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ [Column Novapack C₁₈ (Waters), 3,9×150 мм, ⌀=1 мл/мин, λ=214 нм, элюент: ACN/0, 05% TFA, (20/80)]. Rt=13,14 мин.A degassed solution of 14 (79 mg, 0.26 mmol) in methanol (20 ml) containing Pd / C (10%, 22 mg) was hydrogenated at atmospheric pressure for 45 minutes. The filtered solution was concentrated under reduced pressure to obtain 17 (79 mg, 95%) as a white solid. HPLC [Column Novapack C ₁₈ (Waters), 3.9 × 150 mm, ⌀ = 1 ml / min, λ = 214 nm, eluent: ACN / 0, 05% TFA, (20/80)]. Rt = 13.14 min.

¹H-ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 0,93 (м, 6Н), 1,43 (м, 1Н), 1,71-2,22 (м, 7Н), 2,34 (с, 3H), 2,41 (с, 3H), 2,74 (м, 1Н), 3,31 (м, 1Н), 3,74 (м, 2Н), 3,92 (м, 1Н), 4,80 (дд, J₁=6, J₂=10, 1Н), 7,07 (уш.с, 1Н). ¹ H-NMR (200 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.93 (m, 6H), 1.43 (m, 1H), 1.71-2.22 (m, 7H), 2.34 (s, 3H ), 2.41 (s, 3H), 2.74 (m, 1H), 3.31 (m, 1H), 3.74 (m, 2H), 3.92 (m, 1H), 4.80 (dd, J ₁ = 6, J ₂ = 10, 1H), 7.07 (br s, 1H).

¹³С-ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 21,3, 23,2, 24,7, 25,1, 27,1, 29,9, 36,0, 37,0, 41,0, 49,3, 53,6, 69,1, 162,1, 172,7, 173,7, 197,5. ¹³ C-NMR (200 MHz, CDCl ₃ ) δ 21.3, 23.2, 24.7, 25.1, 27.1, 29.9, 36.0, 37.0, 41.0, 49, 3, 53.6, 69.1, 162.1, 172.7, 173.7, 197.5.

ESI-MC Рассчит. для С₂₃H₃₀N₂O₅: 324,17. Найдено m/z: 325,1 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₂₃ H ₃₀ N ₂ O ₅ : 324.17. Found m / z: 325.1 (M + H) ⁺ .

Пример 93Example 93

Синтез (5R)-1-(2-метилакрилоил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонана (18)Synthesis of (5R) -1- (2-methylacryloyl) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane (18)

К раствору 15 (65 мг, 0,16 ммоль) в метаноле (2,5 мл) добавляют водн. NaOH (1,6 мл, 1 н) и Н₂O (1,6 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре 1 ч. Полученную смесь концентрируют при пониженном давлении и остаток распределяют между Н₂O (20 мл) и DCM (20 мл). Водную фазу подкисливают до рН 2 с помощью водн. HCl (10 мл, 0,1 н) и экстрагируют DCM (3×20 мл). Объединенные органические фазы промывают насыщенным раствором соли (25 мл), сушат (Na₂SO₄) и концентрируют при пониженном давлении, получая 18 (44 мг, 85%) в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ [Column Novapack C₁₈ (Waters), 3,9×150 мм, ⌀=1 мл/мин, λ=214 нм, элюент: ACN/0,05% TFA, (25/75)] R_t=6,38 мин.To a solution of 15 (65 mg, 0.16 mmol) in methanol (2.5 ml) was added aq. NaOH (1.6 ml, 1 N) and H ₂ O (1.6 ml) and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. The resulting mixture was concentrated under reduced pressure and the residue was partitioned between H ₂ O (20 ml) and DCM (20 ml). The aqueous phase is acidified to pH 2 with aq. HCl (10 ml, 0.1 N) and extracted with DCM (3 × 20 ml). The combined organic phases were washed with brine (25 ml), dried (Na ₂ SO ₄ ) and concentrated under reduced pressure to obtain 18 (44 mg, 85%) as a white solid. HPLC [Column Novapack C ₁₈ (Waters), 3.9 × 150 mm, ⌀ = 1 ml / min, λ = 214 nm, eluent: ACN / 0.05% TFA, (25/75)] R _t = 6, 38 minutes

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,86 (д, J=5, 3H), 0,89 (д, J=5, 3H), 1,42 (м, 1Н), 1,55-2,25 (м, 8Н), 2,56 (м, 1Н), 3,19-3,44 (м, 2Н), 3,57-3,67 (м, 2Н), 4,78 (д, J=11, 1Н), 4,82 (д, J=11, 1Н), 5,18 (д, J=6, 2Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.86 (d, J = 5, 3H), 0.89 (d, J = 5, 3H), 1.42 (m, 1H), 1.55 -2.25 (m, 8H), 2.56 (m, 1H), 3.19-3.44 (m, 2H), 3.57-3.67 (m, 2H), 4.78 (d , J = 11, 1H), 4.82 (d, J = 11, 1H), 5.18 (d, J = 6, 2H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 19,5, 21,2, 23,1, 24,2, 25,1, 30,9, 36,5, 37,6, 40,9, 50,5, 53,7, 67,5, 117,5, 140,6, 170,8, 174,2. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 19.5, 21.2, 23.1, 24.2, 25.1, 30.9, 36.5, 37.6, 40.9, 50, 5, 53.7, 67.5, 117.5, 140.6, 170.8, 174.2.

ESI-MC Рассчит. для С₁₇Н₂₆N₂O₄: 322,19. Найдено: 323,2 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₁₇ H ₂₆ N ₂ O ₄ : 322.19. Found: 323.2 (M + H) ⁺ .

Пример 94Example 94

Синтез [(5R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан^7-9аплидина (9SBSAPL1)Synthesis of [(5R) -1- (tert-butoxycarbonyl) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane ^7-9 aplidine (9SBSAPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SAPL4 (10 мг, 13 мкмоль), 12 (5 мг, 14 мкмоль), HATU (12,4 мг), HOAt (4,5 мг), NMM (3,3 мкл), DCM (140 мкл) и ДМФ (70 мкл), указанное в заглавии соединение (11 мг, 73%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, R_t=30 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL3, starting from SAPL4 (10 mg, 13 μmol), 12 (5 mg, 14 μmol), HATU (12.4 mg), HOAt (4.5 mg), NMM (3.3 μl ), DCM (140 μl) and DMF (70 μl), the title compound (11 mg, 73%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, ACN / H ₂ O ratio 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, R _t = 30 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,85-0,97 (м, 24Н), 1,19-1,34 (м, 18Н), 1,48 (с, 9Н), 1,50-2,20 (м, 6Н), 2,32-2,36 (м, 1Н), 2,54 (с, 3H), 2,58-2,72 (м, 2Н), 2,97-3,08 (м, 1Н), 3,10-3,22 (м, 3H), 3,34 (дд, 1Н, J=3,9, 13,8), 3,46-3,79 (м, 6Н), 3,79 (с, 3H), 4,03-4,12 (м, 2Н), 4,28 (дд, 1Н, J=6,6, 13,2), 4,57-4,63 (м, 2Н), 4,79-4,88 (м, 2Н), 5,15 (д, 1Н, J=3,3), 5,21-5,23 (м, 1Н), 6,84 (д, 2Н, J=8,4), 7,07 (д, 2Н, J=8,7), 7,28 (д, 1Н, J=10,8), 7,79 (д, 1Н, J=6,6), 7,82 (д, 1Н, J=9,9). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.85-0.97 (m, 24H), 1.19-1.34 (m, 18H), 1.48 (s, 9H), 1.50 -2.20 (m, 6H), 2.32-2.36 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.58-2.72 (m, 2H), 2.97-3 08 (m, 1H), 3.10-3.22 (m, 3H), 3.34 (dd, 1H, J = 3.9, 13.8), 3.46-3.79 (m, 6H), 3.79 (s, 3H), 4.03-4.12 (m, 2H), 4.28 (dd, 1H, J = 6.6, 13.2), 4.57-4, 63 (m, 2H), 4.79-4.88 (m, 2H), 5.15 (d, 1H, J = 3.3), 5.21-5.23 (m, 1H), 6, 84 (d, 2H, J = 8.4), 7.07 (d, 2H, J = 8.7), 7.28 (d, 1H, J = 10.8), 7.79 (d, 1H J = 6.6), 7.82 (d, 1H, J = 9.9).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,66, 15,21, 15,43, 16,79, 17,23, 18,69, 18,77, 21,24, 23,67, 23,95, 24,10, 24,90, 25,10, 25,38, 27,04, 28,23, 28,75, 29,93, 31,61, 34,50, 33,88, 34,16, 36,20, 36,57, 38,76, 39,09, 39,78, 41,29, 47,27, 47,76, 49,60, 49,96, 52,66, 55,50, 56,26, 57,38, 58,18, 66,74, 66,86, 68,34, 70,53, 80,75, 81,93, 114,33, 130,23, 130,54, 168,08, 169,83, 170,18, 170,80, 171,43, 172,55, 175,04, 205,04. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.66, 15.21, 15.43, 16.79, 17.23, 18.69, 18.77, 21.24, 23.67, 23, 95, 24.10, 24.90, 25.10, 25.38, 27.04, 28.23, 28.75, 29.93, 31.61, 34.50, 33.88, 34.16, 36.20, 36.57, 38.76, 39.09, 39.78, 41.29, 47.27, 47.76, 49.60, 49.96, 52.66, 55.50, 56, 26, 57.38, 58.18, 66.74, 66.86, 68.34, 70.53, 80.75, 81.93, 114.33, 130.23, 130.54, 168.08, 169.83, 170.18, 170.80, 171.43, 172.55, 175.04, 205.04.

ESI-MC Рассчит. для C₆₀H₉₃N₇O₁₅ 1151,7. Найдено m/z: 1152,4 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₆₀ H ₉₃ N ₇ O ₁₅ 1151.7. Found m / z: 1152.4 (M + H) ⁺ .

Пример 95Example 95

Синтез [Hiv]³-[(5R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан]^7-9-аплидина (9SBSHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [(5R) -1- (tert-butoxycarbonyl) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane] ^{7 -9-} aplidine (9SBSHPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SHPL4 (10 мг, 13 мкмоль), 12 (5 мг, 14 мкмоль), HATU (14 мг), HOAt (5 мг), NMM (6 мкл), DCM (150 мкл) и ДМФ (50 мкл), указанное в заглавии соединение (10 мг, 70%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, R_t=28,1 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL3, starting from SHPL4 (10 mg, 13 μmol), 12 (5 mg, 14 μmol), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (6 μl), DCM (150 μl ) and DMF (50 μl), the title compound (10 mg, 70%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, iso-ratio ACN / H ₂ O 85:15 (flow: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, R _t = 28.1 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,80-1,07 (м, 24Н), 1,08-1-67 (м, 12Н), 1,48 (с, 9Н), 1,68-2,30 (м, ЮН), 2,41 (м, 1Н), 2,55 (с, 3H), 2,68 (м, 1Н), 2,94 (м, 1Н), 3,07-3,40 (м, 4Н), 3,42-3,72 (м, 6Н), 3,78 (с, 3H), 3,90 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,29 (м, 1Н), 4,63 (м, 1Н), 4,77 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J=4,8, 1H), 5,25 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,31 (д, J=9,7, 1Н), 7,50 (д, J=5,8, 1Н), 7,85 (д, J=9,7, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.80-1.07 (m, 24H), 1.08-1-67 (m, 12H), 1.48 (s, 9H), 1.68 -2.30 (m, UN), 2.41 (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.68 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 3.07- 3.40 (m, 4H), 3.42-3.72 (m, 6H), 3.78 (s, 3H), 3.90 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 4 29 (m, 1H), 4.63 (m, 1H), 4.77 (m, 1H), 4.87 (m, 1H), 5.02 (d, J = 4.8, 1H), 5.25 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.31 (d, J = 9.7 , 1H), 7.50 (d, J = 5.8, 1H), 7.85 (d, J = 9.7, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 12,07, 14,25, 17,12, 17,92, 19,15, 21,11, 21,18, 23,80, 24,00, 24,06, 24,86, 25,08, 25,15, 27,58, 28,21, 28,82, 30,33, 31,18, 33,78, 34,28, 35,77, 36,65, 39,07, 39,45, 39,86, 46,91, 48,14, 48,47, 52,62, 55,49, 57,13, 58,42, 66,36, 66,80, 69,14, 70,84, 79,19, 80,55, 114,27, 130,29, 130,59, 154,12, 158,81, 168,25, 169,84, 170,72, 170,80, 170,90, 171,25, 174,89. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 12.07, 14.25, 17.12, 17.92, 19.15, 21.11, 21.18, 23.80, 24.00, 24, 06, 24.86, 25.08, 25.15, 27.58, 28.21, 28.82, 30.33, 31.18, 33.78, 34.28, 35.77, 36.65, 39.07, 39.45, 39.86, 46.91, 48.14, 48.47, 52.62, 55.49, 57.13, 58.42, 66.36, 66.80, 69, 14, 70.84, 79.19, 80.55, 114.27, 130.29, 130.59, 154.12, 158.81, 168.25, 169.84, 170.72, 170.80, 170.90, 171.25, 174.89.

ESI-MC Рассчит. для C₅₇H₈₉N₇O₁₄ 1095,6. Найдено m/z: 1096,9 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₇ H ₈₉ N ₇ O ₁₄ 1095.6. Found m / z: 1096.9 (M + H) ⁺ .

Пример 96Example 96

Синтез [(5R)-1-(изобутирил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан]^7-9аплидина (9SISAPL1)Synthesis of [(5R) -1- (isobutyryl) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane] ^7-9 aplidine (9SISAPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SAPL4 (11 мг, 12,9 мкмоль), 16 (5 мг, 15,4 мкмоль), HATU (14 мг), HOAt (5 мг), NMM (3,6 мкл), DCM (155 мкл) и ДМФ (78 мкл), указанное в заглавии соединение (10 мг, 69%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=19 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL3, starting from SAPL4 (11 mg, 12.9 μmol), 16 (5 mg, 15.4 μmol), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (3.6 μl ), DCM (155 μl) and DMF (78 μl), the title compound (10 mg, 69%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, ACN / H ₂ O ratio 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 19 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,86-1,00 (м, 24Н), 1,12 (д, J=6,9, 3H), 1,18 (д, J=6,6, 3H), 1,34 (т, J=6,6, 2H), 0,90-1,30 (м, 7Н), 1,56-2,25 (м, 16Н), 2,30-2,80 (м, 3H), 2,55 (с, 3H), 2,95-3,06 (м, 1Н), 3,15-3,25 (м, 3H), 3,65 (дд, 1Н), 3,52-3,79 (м, 6Н), 3,79 (с, 3H), 3,98-4,15 (м, 1Н), 4,28 (дд, J₁=6,6, J₂=10,3, 1Н), 4,59 (м, 2H), 4,79-4,85 (м, 2H), 5,17 (д, J=3,6, 1Н), 5,40-5,44 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,4, 2H), 7,06 (д, J=8,7, 2H), 7,24 (д, J=11,1, 1Н), 7,90 (д, J=9,3, 1Н), 8,56 (д, J=5,1, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.86-1.00 (m, 24H), 1.12 (d, J = 6.9, 3H), 1.18 (d, J = 6, 6, 3H), 1.34 (t, J = 6.6, 2H), 0.90-1.30 (m, 7H), 1.56-2.25 (m, 16H), 2.30- 2.80 (m, 3H), 2.55 (s, 3H), 2.95-3.06 (m, 1H), 3.15-3.25 (m, 3H), 3.65 (dd, 1H), 3.52-3.79 (m, 6H), 3.79 (s, 3H), 3.98-4.15 (m, 1H), 4.28 (dd, J ₁ = 6.6 , J ₂ = 10.3, 1H), 4.59 (m, 2H), 4.79-4.85 (m, 2H), 5.17 (d, J = 3.6, 1H), 5, 40-5.44 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.4, 2H), 7.06 (d, J = 8.7, 2H), 7.24 (d, J = 11 , 1, 1H), 7.90 (d, J = 9.3, 1H), 8.56 (d, J = 5.1, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,50, 14,92, 15,22, 16,68, 16,95, 18,50, 18,59, 18,81, 20,94, 23,42, 23,80, 24,49, 24,68, 24,90, 25,11, 26,91, 27,98, 30,93, 31,30, 35,58, 33,88, 34,16, 35,85, 36,24, 38,64, 38,84, 39,71, 41,29, 47,01, 47,76, 49,42, 49,62, 52,66, 55,26, 55,73, 57,12, 58,21, 66,57, 67,40, 68,10, 70,79, 81,57, 114,07, 130,05, 130,31, 158,57, 168,12, 169,66, 170,08, 170,56, 171,13, 171,96, 172,37, 174,04, 175,41, 205,04. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.50, 14.92, 15.22, 16.68, 16.95, 18.50, 18.59, 18.81, 20.94, 23, 42, 23.80, 24.49, 24.68, 24.90, 25.11, 26.91, 27.98, 30.93, 31.30, 35.58, 33.88, 34.16 35.85, 36.24, 38.64, 38.84, 39.71, 41.29, 47.01, 47.76, 49.42, 49.62, 52.66, 55.26, 55, 73, 57.12, 58.21, 66.57, 67.40, 68.10, 70.79, 81.57, 114.07, 130.05, 130.31, 158.57, 168.12, 169.66, 170.08, 170.56, 171.13, 171.96, 172.37, 174.04, 175.41, 205.04.

ESI-MC Рассчит. для С₅₉Н₉₁N₇О₁₄: 1121,66. Найдено: 1122,8 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₉ H ₉₁ N ₇ O ₁₄ : 1121.66. Found: 1122.8 (M + H) ⁺ .

Пример 97Example 97

Синтез [Hiv]³-[(5R)-1-(трет-бутоксикарбонил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан]^7-9-аплидина (9SISHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [(5R) -1- (tert-butoxycarbonyl) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane] ^{7 -9-} aplidine (9SISHPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SHPL4 (10 мг, 13 мкмоль), 16 (4,5 мг, 14 мкмоль), HATU (14 мг), HOAt (5 мг), NMM (6 мкл), DCM (150 мкл) и ДМФ (50 мкл), указанное в заглавии соединение (10 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=16,9 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL3, starting from SHPL4 (10 mg, 13 μmol), 16 (4.5 mg, 14 μmol), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (6 μl), DCM ( 150 μl) and DMF (50 μl), the title compound (10 mg, 72%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, iso-ratio of ACN / H ₂ O 85:15 (flow: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 16.9 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,80-1,07 (м, 24Н), 1,08-1,47 (м, 12Н), 1,48-2,30 (м, 16Н), 2,36 (м, 2Н), 2,56 (с, 3H), 2,65 (м, 1Н), 2,96 (м, 1Н), 3,18 (м, 2Н), 3,36 (м, 2Н), 3,65 (м, 6Н), 3,78 (с, 3H), 3,91 (м, 1Н), 4,02 (м, 1Н), 4,25 (м, 1Н) 4,63 (м, 1Н), 4,72 (м, 2Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J=4,8, 1Н), 5,45 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,7, 2Н), 7,07 (д, J=8,7 2Н), 7,27 (д, J=4,8, 1Н), 7,88 (д, J=9,7, 1Н), 8,32 (д, J=4,8, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.80-1.07 (m, 24H), 1.08-1.47 (m, 12H), 1.48-2.30 (m, 16H) 2.36 (m, 2H), 2.56 (s, 3H), 2.65 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 3.18 (m, 2H), 3.36 ( m, 2H), 3.65 (m, 6H), 3.78 (s, 3H), 3.91 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 4.25 (m, 1H) 4 63 (m, 1H), 4.72 (m, 2H), 4.87 (m, 1H), 5.02 (d, J = 4.8, 1H), 5.45 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.7, 2H), 7.07 (d, J = 8.7 2H), 7.27 (d, J = 4.8, 1H), 7.88 (d, J = 9.7, 1H); 8.32 (d, J = 4.8, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₆H₈₇N₇O₁₃ 1065,6. Найдено m/z: 1066,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₆ H ₈₇ N ₇ O ₁₃ 1065.6. Found m / z: 1066.7 (M + H) ⁺ .

Пример 98Example 98

Синтез [(5R)-1-(пирувил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан]^7-9аплидина (9SPSAPL1)Synthesis of [(5R) -1- (pyruvyl) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane] ^7-9 aplidine (9SPSAPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SAPL4 (10 мг, 11,7 мкмоль), 17 (5 мг, 15,4 мкмоль), HATU (12 мг), HOAt (5 мг), NMM (5 мкл), DCM (140 мкл) и ДМФ (70 мкл), указанное в заглавии соединение (9 мг, 63%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=14,4 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL3, starting from SAPL4 (10 mg, 11.7 μmol), 17 (5 mg, 15.4 μmol), HATU (12 mg), HOAt (5 mg), NMM (5 μl), DCM (140 μl) and DMF (70 μl), the title compound (9 mg, 63%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, iso-ratio ACN / H ₂ O 85:15 (flow rate : 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 14.4 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,90-1,00 (м, 24Н), 1,05-1,40 (м, 12Н), 1,40-2,25 (м, 16Н), 2,27-2,41 (м, 1Н), 2,42-2,70 (м, 3H), 2,54 (с, 3H), 2,92-2,98 (м, 1Н), 3,12-3-38 (м, 4Н), 3,54-3,78 (м, 4Н), 3,79 (с, 3H), 4,01-4,12 (м, 2Н), 4,20-4,26 (м, 2Н), 4,57-4,62 (м, 2Н), 4,77-4,82 (м, 2Н), 535,18 (д, J=3,0, 2H), 5,37-5,42 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,7, 2Н), 7,07 (д, J=8,7, 2Н), 7,20 (д, J=9,6, 1Н), 7,85 (д, J=9,6, 1Н), 98,04 (д, J=5,4, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.90-1.00 (m, 24H), 1.05-1.40 (m, 12H), 1.40-2.25 (m, 16H) 2.27-2.41 (m, 1H), 2.42-2.70 (m, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.92-2.98 (m, 1H), 3 , 12-3-38 (m, 4H), 3.54-3.78 (m, 4H), 3.79 (s, 3H), 4.01-4.12 (m, 2H), 4.20 -4.26 (m, 2H), 4.57-4.62 (m, 2H), 4.77-4.82 (m, 2H), 535.18 (d, J = 3.0, 2H) 5.37-5.42 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.7, 2H), 7.07 (d, J = 8.7, 2H), 7.20 (d, J = 9.6, 1H), 7.85 (d, J = 9.6, 1H), 98.04 (d, J = 5.4, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,86, 14,97, 15,47, 16,78, 17,12, 18,84, 21,20, 21,27, 23,62, 24,14, 15,03, 25,15, 25,30, 27,35, 27,51, 28,19, 30,46, 31,52, 34,27, 35,95, 39,01, 40,07, 41,59, 47,25, 49,72, 53,08, 55,51, 55,81, 57,38, 58,21, 66,66, 68,19, 69,23, 70,74, 81,69, 85,15, 114,33, 130,13, 130,56, 158,85, 161,12, 168,49, 169,81, 169,91, 170,81, 171,38, 171,69, 172,60, 173,34, 197,64, 205,19. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.86, 14.97, 15.47, 16.78, 17.12, 18.84, 21.20, 21.27, 23.62, 24, 14, 15.03, 25.15, 25.30, 27.35, 27.51, 28.19, 30.46, 31.52, 34.27, 35.95, 39.01, 40.07, 41.59, 47.25, 49.72, 53.08, 55.51, 55.81, 57.38, 58.21, 66.66, 68.19, 69.23, 70.74, 81, 69, 85.15, 114.33, 130.13, 130.56, 158.85, 161.12, 168.49, 169.81, 169.91, 170.81, 171.38, 171.69, 172.60, 173.34, 197.64, 205.19.

ESI-MC Рассчит. для C₅₈H₈₇N₇O₁₅: 1121,63. Найдено 1122,3 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₈ H ₈₇ N ₇ O ₁₅ : 1121.63. Found 1122.3 (M + H) ⁺ .

Пример 99Example 99

Синтез [Hiv]³-[(5R)-1-(пирувил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан]^7-9аплидина (9SPSHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [(5R) -1- (pyruvyl) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane] ^7-9 aplidine (9SPSHPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SHPL4 (10 мг, 13 мкмоль), 17 (4,5 мг, 14 мкмоль), HATU (14 мг), HOAt (5 мг), NMM (6 мкл), DCM (150 мкл) и ДМФ (50 мкл), указанное в заглавии соединение (10 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=13,6 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL3, starting from SHPL4 (10 mg, 13 μmol), 17 (4.5 mg, 14 μmol), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (6 μl), DCM ( 150 μl) and DMF (50 μl), the title compound (10 mg, 72%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, iso-ratio of ACN / H ₂ O 85:15 (flow: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 13.6 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,80-1,10 (24Н, м), 1,11-1,80 (12Н, м), 1,81-2,30 (10Н, м), 2,45 (м, 1Н), 2,55 (с, 3H), 2,57 (с, 3H), 3,07-3,43 (м, 6Н), 3,52-3,77 (м, 6Н), 3,78 (с, 3H), 3,91 (м, 1Н), 4,03 (м, 1Н), 4,29 (м, 1Н), 4,63 (м, 1Н), 4,72 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 5,03 (д, J=4,3, 1Н), 5,45 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,29 (д, J=8,7, 1Н), 7,81 (д, J₁=9,2, 1Н), 7,87 (д, J=4,8, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.80-1.10 (24H, m), 1.11-1.80 (12H, m), 1.81-2.30 (10H, m) 2.45 (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.57 (s, 3H), 3.07-3.43 (m, 6H), 3.52-3.77 (m 6H), 3.78 (s, 3H), 3.91 (m, 1H), 4.03 (m, 1H), 4.29 (m, 1H), 4.63 (m, 1H), 4 72 (m, 1H), 4.87 (m, 1H), 5.03 (d, J = 4.3, 1H), 5.45 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8 , 3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.29 (d, J = 8.7, 1H), 7.81 (d, J ₁ = 9.2, 1H ), 7.87 (d, J = 4.8, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₅H₈₃N₇O₁₄: 1065,6. Найдено 1066,4 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₅ H ₈₃ N ₇ O ₁₄ : 1065.6. Found 1066.4 (M + H) ⁺ .

Пример 100Example 100

Синтез [Hiv]³-[(5R)-1-(акрилоил)-7-[(1R)-1-карбокси-3-метилбутил]-6-оксо-1,7-диазаспиро[4.4]нонан]^7-9аплидина (9SASHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [(5R) -1- (acryloyl) -7 - [(1R) -1-carboxy-3-methylbutyl] -6-oxo-1,7-diazaspiro [4.4] nonane] ^7-9 aplidine (9SASHPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза SAPL3, исходя из SHPL4 (10 мг, 13 мкмоль), 18 (5,8 мг, 14 мкмоль), HATU (14 мг), HOAt (5 мг), NMM (6 мкл), DCM (150 мкл) и ДМФ (50 мкл), указанное в заглавии соединение (10 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=16,4 мин).Following the procedure developed for the synthesis of SAPL3, starting from SHPL4 (10 mg, 13 μmol), 18 (5.8 mg, 14 μmol), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (6 μl), DCM ( 150 μl) and DMF (50 μl), the title compound (10 mg, 72%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, iso-ratio of ACN / H ₂ O 85:15 (flow: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 16.4 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,85-0,96 (м, 18Н), 1,02-1,05 (м, 6Н), 1,14-1,45 (м, 12Н), 1,49-1,64 (м, 4Н), 1,68-1,77 (м, 1Н), 1,89-2,05 (м, 3H), 1,99 (с, 3H), 2,10-2,28 (м, 4Н), 2,43 (дд, J₁=7,8, J₂=17,1, 1Н), 2,57 (с, 3H), 2,60-2,68 (м, 1Н), 2,97 (уш.с, 1Н), 3,13-3,40 (м, 4Н), 3,54-3,77 (м, 5Н), 3,79 (с, 3H), 3,89-4,07 (м, 2Н), 4,27 (м, 1Н), 4,64 (м, 1Н), 4,73 (м, 1Н), 4,88 (м, 1Н), 5,03 (д, J=4,4, 1Н), 5,30 (д, J=20, 1Н), 5,30-5,39 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,29 (с, 1Н), 7,88 (д, J=9,8, 1Н), 8,23 (д, J=7,4, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.85-0.96 (m, 18H), 1.02-1.05 (m, 6H), 1.14-1.45 (m, 12H) 1.49-1.64 (m, 4H), 1.68-1.77 (m, 1H), 1.89-2.05 (m, 3H), 1.99 (s, 3H), 2 10-2.28 (m, 4H), 2.43 (dd, J ₁ = 7.8, J ₂ = 17.1, 1H), 2.57 (s, 3H), 2.60-2, 68 (m, 1H), 2.97 (br.s, 1H), 3.13-3.40 (m, 4H), 3.54-3.77 (m, 5H), 3.79 (s, 3H), 3.89-4.07 (m, 2H), 4.27 (m, 1H), 4.64 (m, 1H), 4.73 (m, 1H), 4.88 (m, 1H ), 5.03 (d, J = 4.4, 1H), 5.30 (d, J = 20, 1H), 5.30-5.39 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.08 (d, J = 8.3, 2H), 7.29 (s, 1H), 7.88 (d, J = 9.8, 1H), 8.23 (d, J = 7.4, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₆H₈₅N₇O₁₃: 1063,6. Найдено 1064,6 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₆ H ₈₅ N ₇ O ₁₃ : 1063.6. Found 1064.6 (M + H) ⁺ .

Пример 101Example 101

Синтез [Hiv]³-[Z-Ala]⁹-аплидина (9ZASHPL2)Synthesis of [Hiv] ³ - [Z-Ala] ⁹ -aplidine (9ZASHPL2)

В колбу, содержащую Z-Ala-Pro-OH (36 мг, 112 мкмоль) в DCM (0,4 мл) при 0°С, в атмосфере аргона, добавляют DIPCDI (10 мкл, 64 мкмоль) и смесь перемешивают 60 мин. Затем добавляют раствор SHPL2 (20 мг, 22,5 мкмоль) в DCM (0,2 мл) и через 3 ч реакцию гасят добавлением водн. HCl (3 мл, 0,1 н). Смесь перемешивают 5 мин и затем разбавляют DCM (4 мл) и промывают последовательно водн. KHSO₄ (4 мл, 10%), водн. NaHCO₃ (4 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (4 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Очистка остатка ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=18,2 мин) дает 9ZASHPL2 (30 мг, 67%) в виде белого твердого вещества.To a flask containing Z-Ala-Pro-OH (36 mg, 112 μmol) in DCM (0.4 ml) at 0 ° C under argon, DIPCDI (10 μl, 64 μmol) was added and the mixture was stirred for 60 minutes. Then, a solution of SHPL2 (20 mg, 22.5 μmol) in DCM (0.2 ml) was added and after 3 hours the reaction was quenched by addition of aq. HCl (3 ml, 0.1 N). The mixture was stirred for 5 minutes and then diluted with DCM (4 ml) and washed successively with aq. KHSO ₄ (4 ml, 10%), aq. NaHCO ₃ (4 ml, sat.) And brine (4 ml). The organic phase is dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated. Purification of the residue by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isotrate ratio ACN / H ₂ O 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 18.2 min) gives 9ZASHPL2 (30 mg, 67%) as a white solid.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,12-1,50 (м, 18Н), 1,52-2,70 (м, 6Н), 2,45 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 2,96-3,38 (м, 4Н), 3,10 (с, 3H), 3,52-3,72 (м, 5Н), 3,85 (м, 1Н), 3,78 (с, 3H), 4,01 (м, 1Н), 4,18 (м, 1Н), 4,51 (м, 1Н), 4,64 (м, 1Н), 4,71 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J₁=5,3, 1Н), 5,06 (м, 2Н), 5,25 (м, 1Н), 5,42 (м, 1Н), 6,10 (д, J=8,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,31 (м, 6Н), 7,70 (д, J=4,3, 1Н), 7,77 (д, J=9,7, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.10 (m, 24H), 1.12-1.50 (m, 18H), 1.52-2.70 (m, 6H) 2.45 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.96-3.38 (m, 4H), 3.10 (s, 3H), 3.52-3.72 (m 5H), 3.85 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 4.01 (m, 1H), 4.18 (m, 1H), 4.51 (m, 1H), 4 64 (m, 1H), 4.71 (m, 1H), 4.87 (m, 1H), 5.02 (d, J ₁ = 5.3, 1H), 5.06 (m, 2H) 5.25 (m, 1H), 5.42 (m, 1H), 6.10 (d, J = 8.3, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7 07 (d, J = 8.3, 2H), 7.31 (m, 6H), 7.70 (d, J = 4.3, 1H), 7.77 (d, J = 9.7, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,80, 13,97, 16,63, 17,02, 17,48, 18,93, 20,86, 21,15, 23,45, 23,76, 24,78, 25,96, 27,31, 27,92, 28,50, 30,06, 31,36, 33,44, 33,82, 35,66, 38,70, 39,38, 39,63, 46,54, 46,62, 46,98, 47,10, 48,19, 48,59, 54,89, 54,97, 55,22, 56,44, 56,90, 58,14, 66,16, 66,36, 68,95, 70,94, 78,78, 114,00, 127,75, 128,30, 129,90, 130,26, 156,31, 158,53, 168,67, 169,57, 170,06, 170,25, 170,65, 171,97, 173,08, 174,67. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.80, 13.97, 16.63, 17.02, 17.48, 18.93, 20.86, 21.15, 23.45, 23, 76, 24.78, 25.96, 27.31, 27.92, 28.50, 30.06, 31.36, 33.44, 33.82, 35.66, 38.70, 39.38, 39.63, 46.54, 46.62, 46.98, 47.10, 48.19, 48.59, 54.89, 54.97, 55.22, 56.44, 56.90, 58, 14, 66.16, 66.36, 68.95, 70.94, 78.78, 114.00, 127.75, 128.30, 129.90, 130.26, 156.31, 158.53, 168.67, 169.57, 170.06, 170.25, 170.65, 171.97, 173.08, 174.67.

ESI-MC Рассчит. для C₆₂H₉₂N₈O₁₅ 1188,67. Найдено m/z 1189,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₆₂ H ₉₂ N ₈ O ₁₅ 1188.67. Found m / z 1189.7 (M + H) ⁺ .

Пример 102Example 102

Синтез [Hiv]³-[Вос-Ala]⁹-аплидина (9BASHPL2)Synthesis of [Hiv] ³ - [Vos-Ala] ⁹ -aplidine (9BASHPL2)

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль), Boc-Ala-Pro-OH (17 мг, 57 мкмоль), DIPCDI (5 мкл) и DCM (300 мкл), указанное в заглавии соединение (9 мг, 70%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 - 100:1 в 10 мин (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=14,5 мин).Following the procedure developed for the synthesis of 9ZASHPL2, from SHPL2 (10 mg, 11.2 μmol), Boc-Ala-Pro-OH (17 mg, 57 μmol), DIPCDI (5 μl) and DCM (300 μl), indicated in the title the compound (9 mg, 70%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, iso ratio ACN / H ₂ O 85:15 - 100: 1 in 10 min (flow: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 14.5 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,12-1,50 (м, 15Н), 1,40 (с, 9Н), 1,52-2,70 (м, 9Н), 2,45 (м, 1Н), 2,60 (с, 3H), 3,00-3,43 (м, 4Н), 3,10 (с, 3H), 3,62 (м, 5Н), 3,79 (с, 3H), 3,90 (м, 1Н), 4,02 (м, 1Н), 4,20 (м, 1Н), 4,41 (м, 1Н), 4,67 (м, 2Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J₁=4,3, 1Н), 5,26 (м, 1Н), 5,40 (м, 1Н), 5,76 (д, J=7,8, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,32 (д, J=9,7, 1Н), 7,73 (д, J=4,8, 1Н), 7,80 (д, J=9,7, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.10 (m, 24H), 1.12-1.50 (m, 15H), 1.40 (s, 9H), 1.52 -2.70 (m, 9H), 2.45 (m, 1H), 2.60 (s, 3H), 3.00-3.43 (m, 4H), 3.10 (s, 3H), 3.62 (m, 5H), 3.79 (s, 3H), 3.90 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 4.20 (m, 1H), 4.41 (m , 1H), 4.67 (m, 2H), 4.87 (m, 1H), 5.02 (d, J ₁ = 4.3, 1H), 5.26 (m, 1H), 5.40 (m, 1H), 5.76 (d, J = 7.8, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H) 7.32 (d, J = 9.7, 1H); 7.73 (d, J = 4.8, 1H); 7.80 (d, J = 9.7, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 12,06, 14,34, 16,88, 17,20, 27,77, 19,17, 21,10, 21,41, 23,72, 24,03, 25,06, 26,17, 27,60, 28,19, 28,60, 30,31, 31,63, 33,74, 35,96, 38,96, 38,93, 39,59, 39,86, 46,86, 47,27, 48,29, 48,45, 55,18, 55,42, 55,49, 56,59, 57,16, 58,44, 66,43, 69,14, 71,30, 79,05, 79,40, 114,29, 130,21, 130,54, 156,06, 158,83, 168,80, 169,87, 170,51, 170,64, 170,94, 171,31, 172,59, 173,45, 174,92. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 12.06, 14.34, 16.88, 17.20, 27.77, 19.17, 21.10, 21.41, 23.72, 24, 03, 25.06, 26.17, 27.60, 28.19, 28.60, 30.31, 31.63, 33.74, 35.96, 38.96, 38.93, 39.59, 39.86, 46.86, 47.27, 48.29, 48.45, 55.18, 55.42, 55.49, 56.59, 57.16, 58.44, 66.43, 69, 14, 71.30, 79.05, 79.40, 114.29, 130.21, 130.54, 156.06, 158.83, 168.80, 169.87, 170.51, 170.64, 170.94, 171.31, 172.59, 173.45, 174.92.

ESI-MC Рассчит. здля C₅₉H₉₄N₈O₁₅ 1154,68. Найдено m/z 1155,6 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. C ₅₉ H ₉₄ N ₈ O ₁₅ 1154.68. Found m / z 1155.6 (M + H) ⁺ .

Пример 103Example 103

Синтез [Hiv]³-[Ala]⁹-аплидина (9ASHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [Ala] ⁹ -aplidine (9ASHPL1)

В колбу, содержащую 9BASHPL2 (8 мг, 6,92 мкмоль), добавляют раствор соляной кислоты в безв. диоксане (1,5 мл, 5,3 н, 7,9 ммоль). Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре 5 ч или до полного исчезновения исходного материала (ТСХ). Затем раствор концентрируют при пониженном давлении и остаток растворяют в DCM и вновь концентрируют. Белый пенистый сырой продукт осаждают DCM/гекс. (2 мл/4 мл), получая 9ASHPL1 (7,2 мг, колич.) в виде белого твердого вещества.In a flask containing 9BASHPL2 (8 mg, 6.92 μmol), add a solution of hydrochloric acid in bezv. dioxane (1.5 ml, 5.3 n, 7.9 mmol). The resulting solution was stirred at room temperature for 5 hours or until the starting material (TLC) completely disappeared. Then, the solution was concentrated under reduced pressure, and the residue was dissolved in DCM and concentrated again. White foamy crude product precipitated with DCM / hex. (2 ml / 4 ml) to give 9ASHPL1 (7.2 mg, quant.) As a white solid.

ESI-MC Рассчит. для C₅₄H₈₆N₈O₁₃ 1054,6. Найдено m/z: 1055,6 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₄ H ₈₆ N ₈ O ₁₃ 1054.6. Found m / z: 1055.6 (M + H) ⁺ .

Пример 104Example 104

Синтез [Hiv]³-[Вос-Pro]⁸-дидемнина A (8PSHPL2)Synthesis of [Hiv] ³ - [Boc-Pro] ^8- didemnin A (8PSHPL2)

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль), Вос-Pro-ОН (13 мг, 57 мкмоль), DIPCDI (5 мкл) и DCM (300 мкл), указанное в заглавии соединение (9 мг, 74%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, градиент ACN/H₂O 85:15 - 100:0 в 10 мин (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=18,7 мин).Following the procedure developed for the synthesis of 9ZASHPL2, starting from SHPL2 (10 mg, 11.2 μmol), Boc-Pro-OH (13 mg, 57 μmol), DIPCDI (5 μl) and DCM (300 μl), the title compound (9 mg, 74%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, gradient ACN / H ₂ O 85:15 - 100: 0 in 10 min (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm , at 270 nm, t _R = 18.7 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,10 (м, 24Н), 1,12-2,30 (м, 22Н), 1,47 (с, 9Н), 2,41 (м, 1Н), 3,04 (с, 3H), 3,10-3,74 (м, 7Н), 3,78 (с, 3H), 3,91 (м, 1Н), 4,01 (м, 1Н), 4,31 (м, 1Н), 4,59 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 5,02 (д, J=4,8, 1Н), 5,16 (м, 1Н), 5,36 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,17 (д, J=6,3, 1Н), 7,35 (д, J=9,7, 1Н), 7,85 (д, J=9,7, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.10 (m, 24H), 1.12-2.30 (m, 22H), 1.47 (s, 9H), 2.41 (m, 1H), 3.04 (s, 3H), 3.10-3.74 (m, 7H), 3.78 (s, 3H), 3.91 (m, 1H), 4.01 ( m, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.59 (m, 1H), 4.87 (m, 1H), 5.02 (d, J = 4.8, 1H), 5.16 (m, 1H), 5.36 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.17 (d J = 6.3, 1H); 7.35 (d, J = 9.7; 1H); 7.85 (d, J = 9.7; 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 12,04, 14,41, 16,76, 17,97, 19,12, 21,03, 21,66, 23,92, 24,00, 24,77, 25,09, 25,20, 27,53, 28,21, 28,72, 29,67, 30,35, 31,23, 33,80, 34,30, 36,24, 39,05, 39,37, 39,80, 46,90, 47,33, 48,42, 54,48, 55,49, 55,58, 55,84, 57,12, 58,08, 66,31, 69,11, 71,05, 79,23, 80,28, 114,29, 130,23, 130,59, 154,91, 158,82, 168,37, 169,88, 170,66, 170,86, 171,28, 171,40, 174,10, 174,79. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 12.04, 14.41, 16.76, 17.97, 19.12, 21.03, 21.66, 23.92, 24.00, 24, 77, 25.09, 25.20, 27.53, 28.21, 28.72, 29.67, 30.35, 31.23, 33.80, 34.30, 36.24, 39.05, 39.37, 39.80, 46.90, 47.33, 48.42, 54.48, 55.49, 55.58, 55.84, 57.12, 58.08, 66.31, 69, 11, 71.05, 79.23, 80.28, 114.29, 130.23, 130.59, 154.91, 158.82, 168.37, 169.88, 170.66, 170.86, 171.28, 171.40, 174.10, 174.79.

ESI-MC Рассчит. для C₅₆H₉₁N₇O₁₄: 1085,6. Найдено m/z: 1086,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₆ H ₉₁ N ₇ O ₁₄ : 1085.6. Found m / z: 1086.7 (M + H) ⁺ .

Пример 105Example 105

Синтез [Hiv]³-[Pro]⁸-дидемнина A (8PSHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [Pro] ^8- didemnin A (8PSHPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ASHPL1, исходя из 8PSHPL2 (7 мг, 6,4 мкмоль), указанное в заглавии соединение (6 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества.Following the procedure developed for the synthesis of 9ASHPL1, starting from 8PSHPL2 (7 mg, 6.4 μmol), the title compound (6 mg, quant.) Was obtained as a white solid.

ESI-MC Рассчит. для C₅₁H₈₁N₇O₁₂: 983,59. Найдено m/z: 984,6 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₁ H ₈₁ N ₇ O ₁₂ : 983.59. Found m / z: 984.6 (M + H) ⁺ .

Пример 106Example 106

Синтез [Hiv]³-[Вос-Val]⁸-дидемнина A (8VSHPL2)Synthesis of [Hiv] ³ - [Boc-Val] ^8- didemnin A (8VSHPL2)

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, исходя из SHPL2 (10 мг, 11,2 мкмоль), Boc-Val-OH (12 мг, 56 мкмоль), DIPCDI (5 мкл) и DCM (300 мкл), указанное в заглавии соединение (9 мг, 82%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, градиент ACN/H₂O 85:15 - 100:0 в 10 мин (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=22,1 мин).Following the procedure developed for the synthesis of 9ZASHPL2, starting from SHPL2 (10 mg, 11.2 μmol), Boc-Val-OH (12 mg, 56 μmol), DIPCDI (5 μl) and DCM (300 μl), the title compound (9 mg, 82%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, gradient ACN / H ₂ O 85:15 - 100: 0 in 10 min (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm , at 270 nm, t _R = 22.1 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,10 (м, 30Н), 1,12-1,82 (м, 12Н), 1,45 (с, 9Н), 1,84-2,40 (м, 6Н), 2,56 (с, 3H), 2,96 (с, 3H), 2,97 (м, 3H), 3,13 (м, 1Н), 3,35 (м, 1Н), 3,56 (м, 1Н), 3,65 (м, 2Н), 3,79 (с, 3H), 3,85 (м, 1Н), 4,03 (м, 1Н), 4,24 (м, 1Н), 4,41 (м, 1Н), 4,61 (м, 1Н), 4,88 (м, 1Н), 4,99 (д, J₁=5,3, 1Н), 5,07 (м, 1Н), 5,19 (м, 1Н), 5,60 (д, J=8,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,03 (д, J=8,7, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,46 (д, J=10,2, 1H), 7,84 (д, J=9,2, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.10 (m, 30H), 1.12-1.82 (m, 12H), 1.45 (s, 9H), 1.84 -2.40 (m, 6H), 2.56 (s, 3H), 2.96 (s, 3H), 2.97 (m, 3H), 3.13 (m, 1H), 3.35 ( m, 1H), 3.56 (m, 1H), 3.65 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.85 (m, 1H), 4.03 (m, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.41 (m, 1H), 4.61 (m, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.99 (d, J ₁ = 5.3, 1H) ), 5.07 (m, 1H), 5.19 (m, 1H), 5.60 (d, J = 8.3, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.03 (d, J = 8.7, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.46 (d, J = 10.2, 1H), 7.84 (d , J = 9.2, 1H).

ESI-MC Рассчит. для С₅₆H₉₁N₇О₁₄: 1085,6. Найдено m/z: 1086,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₆ H ₉₁ N ₇ O ₁₄ : 1085.6. Found m / z: 1086.7 (M + H) ⁺ .

Пример 107Example 107

Синтез [Hiv]³-[Val]⁸-дидемнина A (8VSHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [Val] ^8- didemnin A (8VSHPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ASHPL1, исходя из 8VSHPL2 (8 мг, 7,4 мкмоль), указанное в заглавии соединение (7 мг, колич.) получают в виде белого твердого вещества.Following the procedure developed for the synthesis of 9ASHPL1, starting from 8VSHPL2 (8 mg, 7.4 μmol), the title compound (7 mg, quant.) Was obtained as a white solid.

ESI-MC Рассчит. для C₅₁H₈₃N₇O₁₂: 985,61. Найдено (m/z): 986,6 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₁ H ₈₃ N ₇ O ₁₂ : 985.61. Found (m / z): 986.6 (M + H) ⁺ .

Пример 108Example 108

Синтез [Hiv]³-[Val]⁸-[изобутирил]⁹дидемнина A (8V9ISHPL1)Synthesis of [Hiv] ³ - [Val] ⁸ - [Isobutyryl] ⁹ Didemnin A (8V9ISHPL1)

К раствору 8VSHPL1 (6 мг, 5,8 мкмоль) в DCM (200 мкл) при 0°С в атмосфере Ar добавляют NMM (3,3 мкл, 30 мкмоль) и изобутирилхлорид (2 мкл, 19 мкмоль). После 5 ч перемешивания при к.т. реакционную смесь разбавляют DCM (5 мл) и промывают последовательно воды. KHSO₄ (5 мл, 10%), водн. HCO₃Na (5 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (5 мл). Органический раствор сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая 8V9ISHPL1 (6 мг, 97%) в виде белого твердого вещества.To a solution of 8VSHPL1 (6 mg, 5.8 μmol) in DCM (200 μl) at 0 ° C in an Ar atmosphere was added NMM (3.3 μl, 30 μmol) and isobutyryl chloride (2 μl, 19 μmol). After 5 hours stirring at rt the reaction mixture was diluted with DCM (5 ml) and washed successively with water. KHSO ₄ (5 ml, 10%), aq. HCO ₃ Na (5 ml, sat.) And brine (5 ml). The organic solution was dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure to obtain 8V9ISHPL1 (6 mg, 97%) as a white solid.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,82-1,10 (м, 36Н), 1,12-1,85 (м, ЮН), 1,90-2,45 (м, 6Н), 2,56 (с, 3H), 2,90 (м, 1Н), 3,00 (с, 3H,), 3,13 (м, 2Н), 3,36 (дд, J₁=4,3, J₂=14,1, 1Н), 3,64 (м, 6Н), 3,78 (с, 3H), 3,87 (м, 1Н), 3,97 (м, 1Н), 4,21 (м, 1Н), 4,34 (м, 2Н), 4,61 (м, 1Н), 4,87 (м, 1Н), 4,98 (д, J=4,8, 1Н), 5,17 (м, 2Н), 6,24 (д, J=6,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,32 (д, J=6,3, 1Н), 7,35 (д, J=4,3, 1Н), 7,81 (д, J=9,7, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.82-1.10 (m, 36H), 1.12-1.85 (m, UN), 1.90-2.45 (m, 6H) 2.56 (s, 3H), 2.90 (m, 1H), 3.00 (s, 3H,), 3.13 (m, 2H), 3.36 (dd, J ₁ = 4.3 , J ₂ = 14.1, 1H), 3.64 (m, 6H), 3.78 (s, 3H), 3.87 (m, 1H), 3.97 (m, 1H), 4.21 (m, 1H), 4.34 (m, 2H), 4.61 (m, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.98 (d, J = 4.8, 1H), 5, 17 (m, 2H), 6.24 (d, J = 6.3, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H ), 7.32 (d, J = 6.3, 1H), 7.35 (d, J = 4.3, 1H), 7.81 (d, J = 9.7, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₅H₈₉N₇O₁₃, 1055,6. Найдено m/z: 1056,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₅ H ₈₉ N ₇ O ₁₃ , 1055.6. Found m / z: 1056.7 (M + H) ⁺ .

Пример 109Example 109

Синтез [кумарин]⁸дидемнина A (8CSAPL1)Synthesis of [Coumarin] ⁸ Didemnin A (8CSAPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, исходя из SAPL2 (20 мг, 21 мкмоль) и кумарин-3-карбоновой кислоты (20 мг, 107 мкмоль), указанное в заглавии соединение (18 мг, получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (HyperPrep PEP 100 С18, изократное соотношение ACN/H₂O 85:15 (расход: 7 мл/мин, 250×21 мм, при 270 нм, t_R=16,5 мин).Following the procedure developed for the synthesis of 9ZASHPL2, starting from SAPL2 (20 mg, 21 μmol) and coumarin-3-carboxylic acid (20 mg, 107 μmol), the title compound (18 mg, was obtained as a white solid after purification by HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isotrate ratio ACN / H ₂ O 85:15 (flow rate: 7 ml / min, 250 × 21 mm, at 270 nm, t _R = 16.5 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,78-1,00 (м, 24Н), 1,20-2,50 (м, 22Н), 2,56 (с, 3H), 2,92 (с, 3H), 3,08-3,25 (м, 2Н), 3,90 (м, 1Н), 3,60 (м, 2Н), 3,70 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 3,92-4,25 (м, 3H), 4,60 (м, 1Н), 4,80 (м, 2Н), 5,15 (м, 1Н), 5,18 (д, J=3,4, 1Н), 5,28 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,20 (д, J=6,3, 1Н), 7,37 (м, 2Н), 7,45 (д, J=9,7, 1Н), 7,58 (м, 2Н), 7,96 (м, 1Н), 8,23 (м, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.78-1.00 (m, 24H), 1.20-2.50 (m, 22H), 2.56 (s, 3H), 2.92 (s, 3H), 3.08-3.25 (m, 2H), 3.90 (m, 1H), 3.60 (m, 2H), 3.70 (m, 1H), 3.79 ( s, 3H), 3.92-4.25 (m, 3H), 4.60 (m, 1H), 4.80 (m, 2H), 5.15 (m, 1H), 5.18 (d , J = 3.4, 1H), 5.28 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.08 (d, J = 8.3, 2H), 7 20 (d, J = 6.3, 1H), 7.37 (m, 2H), 7.45 (d, J = 9.7, 1H), 7.58 (m, 2H), 7.96 (m, 1H); 8.23 (m, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₉H₈₂N₆O₁₅: 1114,58. Найдено: 1116,3 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₉ H ₈₂ N ₆ O ₁₅ : 1114.58. Found: 1116.3 (M + H) ⁺ .

Пример 110Example 110

Синтез метилового эфира кумарин-3-карбониламиноуксусной кислоты (8G9C2)Synthesis of Coumarin-3-Carbonylaminoacetic Acid Methyl Ester (8G9C2)

В круглодонную колбу, содержащую метилглицин (89 мг, 1,00 ммоль), 3-карбоксикумарин, безв. DCM (25 мл), в атмосфере Ar, добавляют при комнатной температуре N'-(3-диметиламинопропил)-N-этилкарбодиимидгидрохлорид (EDC) (479 мг, 2,50 ммоль) и DMAP (489 мг, 4,00 ммоль). Полученную смесь перемешивают 1 ч 30 мин (полная конверсия по ТСХ). Затем добавляют DCM (20 мл) и раствор промывают последовательно водн. NaHCO₃ (10 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (10 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют. Полученный оранжевый твердый продукт очищают флэш ЖХ (силикагель, град. гекс.:EtOAc 1:1 - 2:1), что дает указанное в заглавии соединение (445 мг, колич.) в виде бесцветного масла. Rf=0,08 (гекс./BtOAc 1:1).Into a round bottom flask containing methylglycine (89 mg, 1.00 mmol), 3-carboxycoumarin, bezv. DCM (25 ml), in an Ar atmosphere, was added at room temperature N '- (3-dimethylaminopropyl) -N-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDC) (479 mg, 2.50 mmol) and DMAP (489 mg, 4.00 mmol). The resulting mixture was stirred for 1 h 30 min (complete conversion by TLC). Then, DCM (20 ml) was added and the solution was washed successively with aq. NaHCO ₃ (10 ml, sat.) And brine (10 ml). The organic phase is dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated. The resulting orange solid was purified by flash LC (silica gel, hex.: EtOAc 1: 1 - 2: 1), which afforded the title compound (445 mg, quant.) As a colorless oil. Rf = 0.08 (hex. / BtOAc 1: 1).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 3,79 (с, 3H), 4,25 (д, J=5,4, 2H), 7,40 (м, 2H), 7,74 (д, J=7,3, 1Н), 7,68 (м, 2H), 8,91 (с, 1Н), 9,25 (с, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 3.79 (s, 3H), 4.25 (d, J = 5.4, 2H), 7.40 (m, 2H), 7.74 (d J = 7.3, 1H); 7.68 (m, 2H); 8.91 (s, 1H); 9.25 (s, 1H).

ESI-MC Рассчит. для С₁₃H₁₁NO₅: 261,06. Найдено: 283,1 (M+Na)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₁₃ H ₁₁ NO ₅ : 261.06. Found: 283.1 (M + Na) ⁺ .

Пример 111Example 111

Синтез кумарин-3-карбониламиноуксусной кислоты (8G9C1)Synthesis of Coumarin-3-Carbonylaminoacetic Acid (8G9C1)

К раствору метилового эфира кумарин-3-карбониламиноуксусной кислоты (312 мг, 1,19 ммоль) в ТГФ (12 мл) в атмосфере Ar при 0°С (ледяная баня) добавляют по каплям раствор LiOH в Н₂O (0,2 М). Реакционную смесь энергично перемешивают при комнатной температуре до полной конверсии по ТСХ (2 часа). Раствор частично концентрируют и добавляют Et₂O (10 мл). Органический слой промывают NaHCO₃ (10 мл, нас.) и объединенные водные слои подкисливают 10% KHSO₄ (pH 3-4) и экстрагируют диэтиловым эфиром (3×20 мл). Органический слой концентрируют при пониженном давлении, получая 8G9C1 (280 мг, 95%) в виде белого твердого вещества.To a solution of coumarin-3-carbonylaminoacetic acid methyl ester (312 mg, 1.19 mmol) in THF (12 ml) in an Ar atmosphere at 0 ° C (ice bath) was added dropwise a solution of LiOH in H ₂ O (0.2 M ) The reaction mixture was vigorously stirred at room temperature until complete conversion by TLC (2 hours). The solution was partially concentrated and Et ₂ O (10 ml) was added. The organic layer was washed with NaHCO ₃ (10 ml, sat.) And the combined aqueous layers were acidified with 10% KHSO ₄ (pH 3-4) and extracted with diethyl ether (3 × 20 ml). The organic layer was concentrated under reduced pressure to obtain 8G9C1 (280 mg, 95%) as a white solid.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 4,18 (д, J=5,3, 2Н), 7,41 (м, 1Н), 7,45 (д, J=7,8, 1H), 7,74 (д, J=7,3, 1H), 7,78 (т, J=8,3, 1H), 7,85 (д, J=7,8, 1H], 8,89 (с, 1H), 9,41 (м, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 4.18 (d, J = 5.3, 2H), 7.41 (m, 1H), 7.45 (d, J = 7.8, 1H) 7.74 (d, J = 7.3, 1H), 7.78 (t, J = 8.3, 1H), 7.85 (d, J = 7.8, 1H], 8.89 ( s, 1H); 9.41 (m, 1H).

ESI-MC Рассчит. для С₁₂Н₉NO₅: 247,05. Найдено: 248,0 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₁₂ H ₉ NO ₅ : 247.05. Found: 248.0 (M + H) ⁺ .

Пример 112Example 112

Синтез [Gly]⁸-[кумарин]⁹дидемнина A (8G9CSAPL1)Synthesis of [Gly] ⁸ - [Coumarin] ⁹ Didemnin A (8G9CSAPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, исходя из SAPL2 (20 мг, 21 мкмоль) и кумарин-3-карбоновой кислоты (26 мг, 105 мкмоль), указанное в заглавии соединение (18 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (Symetry Prep™ C18, изократное соотношение ACN/H₂O 60:40 (расход: 3 мл/мин, 150×7,8 мм, при 270 нм, t_R=17,5 мин).Following the procedure developed for the synthesis of 9ZASHPL2, starting from SAPL2 (20 mg, 21 μmol) and coumarin-3-carboxylic acid (26 mg, 105 μmol), the title compound (18 mg, 72%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (Symetry Prep ™ C18, iso-ratio of ACN / H ₂ O of 60:40 (flow rate: 3 ml / min, 150 × 7.8 mm, at 270 nm, t _R = 17.5 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,85-0,94 (м, 24Н), 1,23-2,17 (м, 21Н), 2,30-2,44 (м, 1H), 2,56 (с, 3H), 3,01 (с, 3H), 3,10-3,24 (м, 2Н), 3,40 (дд, J₁=5,4, J₂=14,2, 1H), 3,59-3,74 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 3,99-4,21 (м, 4Н), 4,37-4,44 (м, 1H), 4,60 (м, 1H), 4,68 (м, 1H), 4,81 (т, J=9,8, 1H), 5,18 (д, J=3,4, 1H), 5,25 (дд, J₁=2,9, J₂=5,9, 1H), 5,20-5,45 (м, 1H), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,19-7,28 (м, 1H), 7,34-7,42 (м, 2Н), 7,63-7,72 (м, 2Н), 7,88 (д, J=8,3, 2Н), 9,00 (с, 1H), 9,57 (м, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.85-0.94 (m, 24H), 1.23-2.17 (m, 21H), 2.30-2.44 (m, 1H) 2.56 (s, 3H), 3.01 (s, 3H), 3.10-3.24 (m, 2H), 3.40 (dd, J ₁ = 5.4, J ₂ = 14, 2, 1H), 3.59-3.74 (m, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.99-4.21 (m, 4H), 4.37-4.44 (m, 1H), 4.60 (m, 1H), 4.68 (m, 1H), 4.81 (t, J = 9.8, 1H), 5.18 (d, J = 3.4, 1H) 5.25 (dd, J ₁ = 2.9, J ₂ = 5.9, 1H), 5.20-5.45 (m, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H ), 7.08 (d, J = 8.3, 2H), 7.19-7.28 (m, 1H), 7.34-7.42 (m, 2H), 7.63-7.72 (m, 2H), 7.88 (d, J = 8.3, 2H), 9.00 (s, 1H), 9.57 (m, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₆₁H₈₅N₇O₁₆: 1171,61. Найдено: 1172,5 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₆₁ H ₈₅ N ₇ O ₁₆ : 1171.61. Found: 1172.5 (M + H) ⁺ .

Пример 113Example 113

Синтез N-метилсульфонил-Pro-OBz (Р2)Synthesis of N-methylsulfonyl-Pro-OBz (P2)

К раствору Pro-OBn (HCl) (300 мг, 1,24 ммоль) в DCM (25 мл, безв.) при 0°С в атмосфере Ar добавляют по каплям с помощью шприца DIPEA (0,7 мкл) и метансульфонилхлорид (116 мкл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Добавляют DCM (10 мл) и раствор промывают последовательно водн. KHSO₄ (15 мл, 10%), водн. NaHCO₃ (15 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (15 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая чистый Р2 (350 мг, 1,24 ммоль, колич.) в виде белого твердого вещества. Rf=0,55 (гекс./AcOEt 1:1).To a solution of Pro-OBn (HCl) (300 mg, 1.24 mmol) in DCM (25 ml, anhydrous) at 0 ° C. in an Ar atmosphere was added dropwise using a DIPEA syringe (0.7 μl) and methanesulfonyl chloride (116 μl). The reaction mixture was stirred at room temperature overnight. DCM (10 ml) was added and the solution was washed successively with aq. KHSO ₄ (15 ml, 10%), aq. NaHCO ₃ (15 ml, sat.) And brine (15 ml). The organic phase was dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure to give pure P2 (350 mg, 1.24 mmol, quant.) As a white solid. Rf = 0.55 (hex. / AcOEt 1: 1).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 1,91-2,08 (м, 3H), 2,19-2,31 (м, 1Н), 2,93 (с, 3H), 3,38-3,54 (м, 2Н), 3,65 (с, 3H), 4,51 (дд, J₁=3,4, J₂=8,3, 1Н), 5,11 (д, J=12,2, 1Н), 5,18 (д, J=12,2, 1Н), 7,31 (м, 5Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.91-2.08 (m, 3H), 2.19-2.31 (m, 1H), 2.93 (s, 3H), 3.38 -3.54 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 4.51 (dd, J ₁ = 3.4, J ₂ = 8.3, 1H), 5.11 (d, J = 12.2, 1H), 5.18 (d, J = 12.2, 1H), 7.31 (m, 5H).

ESI-MC Рассчит. для C₁₃H₁₇NO₄S: 283,09. Найдено: 284,1 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₁₃ H ₁₇ NO ₄ S: 283.09. Found: 284.1 (M + H) ⁺ .

Пример 114Example 114

Синтез N-метилсульфонил-Pro-ОН (P1)Synthesis of N-methylsulfonyl-Pro-OH (P1)

Дегазированную смесь N-метилсульфонил-Pro-OBz (Р2) (250 мг, 0,88 ммоль) и Pd(OH)₂/C (20% Pd, 100 мг, 40% м/м) в IPA:Н₂O (26 мл: 13 мл) насыщают H₂ и выдерживают при 1 атм газообразного водорода 3 ч. Затем смесь фильтруют через тефлоновый фильтр (0,45 мкм) и концентрируют в вакууме, получая указанное в заглавии соединение (128 мг, 75% выход) в виде белого твердого вещества, без дополнительной очистки.Degassed mixture of N-methylsulfonyl-Pro-OBz (P2) (250 mg, 0.88 mmol) and Pd (OH) ₂ / C (20% Pd, 100 mg, 40% m / m) in IPA: H ₂ O ( 26 ml: 13 ml) saturate H ₂ and incubated at 1 atm of hydrogen gas for 3 hours. Then the mixture was filtered through a Teflon filter (0.45 μm) and concentrated in vacuo to give the title compound (128 mg, 75% yield) in as a white solid, without further purification.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 1,94-2,03 (м, 2Н), 2,07-2,14 (м, 1Н), 2,22-2,35 (м, 1Н), 2,96 (с, 3H), 3,44 (м, 2Н), 4,44 (дд, J₁=3,9, J₂=8,8, 2Н), 9,10 (м, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 1.94-2.03 (m, 2H), 2.07-2.14 (m, 1H), 2.22-2.35 (m, 1H) 2.96 (s, 3H), 3.44 (m, 2H), 4.44 (dd, J ₁ = 3.9, J ₂ = 8.8, 2H), 9.10 (m, 1H) .

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 24,96, 31,08, 38,46, 48,06, 60,66, 174,75. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 24.96, 31.08, 38.46, 48.06, 60.66, 174.75.

ESI-MC Рассчит. для C₆H₁₁NO₄S: 193,22. Найдено: 194,0 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₆ H ₁₁ NO ₄ S: 193.22. Found: 194.0 (M + H) ⁺ .

Пример 115Example 115

Синтез [Метилсульфонил]⁹аплидина (9MSAPL1)Synthesis of [Methylsulfonyl] ⁹ aplidine (9MSAPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза 9ZASHPL2, исходя из SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) и N-метилсульфонил-Pro-ОН (10 мг, 53 мкмоль), указанное в заглавии соединение (9 мг, 74%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (Symetry Prep С18, изократное соотношение ACN/H₂O 60:40 (расход: 3 мл/мин, 150×7,8 мм, при 270 нм, t_R=9 мин).Following the procedure developed for the synthesis of 9ZASHPL2, starting from SAPL2 (10 mg, 10.7 μmol) and N-methylsulfonyl-Pro-OH (10 mg, 53 μmol), the title compound (9 mg, 74%) was obtained as white solid after purification by HPLC (Symetry Prep C18, isotrate ratio ACN / H ₂ O 60:40 (flow rate: 3 ml / min, 150 × 7.8 mm, at 270 nm, t _R = 9 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,78-1,00 (м, 24Н), 1,20-2,50 (м, 26Н), 2,56 (с, 3H), 2,93 (м, 1Н), 3,04 (с, 3H), 3,06 (с, 3H), 3,08-3,25 (м, 2Н), 3,28-3,50 (м, 2Н), 3,60 (м, 2Н), 3,70 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 4,05 (м, 2Н), 4,17 (м, 1Н), 4,60 (м, 2Н), 4,81 (м, 2Н), 5,10 (м, 1Н), 5,19 (д, J=3,4, 1Н), 5,33 (м, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 6,86 (м, 1Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,09 (м, 1Н), 7,82 (д, J=9,2, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.78-1.00 (m, 24H), 1.20-2.50 (m, 26H), 2.56 (s, 3H), 2.93 (m, 1H), 3.04 (s, 3H), 3.06 (s, 3H), 3.08-3.25 (m, 2H), 3.28-3.50 (m, 2H), 3.60 (m, 2H), 3.70 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 4.05 (m, 2H), 4.17 (m, 1H), 4.60 (m , 2H), 4.81 (m, 2H), 5.10 (m, 1H), 5.19 (d, J = 3.4, 1H), 5.33 (m, 1H), 6.84 ( d, J = 8.3, 2H), 6.86 (m, 1H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.09 (m, 1H), 7.82 (d, J = 9.2, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₅H₈₇N₇O₁₅S: 1117,60. Найдено: 1118,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₅ H ₈₇ N ₇ O ₁₅ S: 1117.60. Found: 1118.7 (M + H) ⁺ .

Пример 116Example 116

Синтез [Метилсульфонил]⁸дидемнина A (8MSAPL1)Synthesis of [Methylsulfonyl] ⁸ Didemnin A (8MSAPL1)

К раствору SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) в DCM (200 мкл, безв.) при 0°С в атмосфере Ar добавляют DIPEA (3 мкл) и метансульфонилхлорид (0,85 мкл). Реакционную смесь перемешивают при 5°С в течение ночи. Добавляют DCM (10 мл) и раствор промывают последовательно водн. KHSO₄ (5 мл, 10%), водн. NaHCO₃ (5 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (5 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая чистый 8MSAPL1 (11 мг, колич.) в виде белого твердого вещества.To a solution of SAPL2 (10 mg, 10.7 μmol) in DCM (200 μl, anhydrous) at 0 ° C. under Ar atmosphere, DIPEA (3 μl) and methanesulfonyl chloride (0.85 μl) were added. The reaction mixture was stirred at 5 ° C. overnight. DCM (10 ml) was added and the solution was washed successively with aq. KHSO ₄ (5 ml, 10%), aq. NaHCO ₃ (5 ml, sat.) And brine (5 ml). The organic phase was dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure to give pure 8MSAPL1 (11 mg, quant.) As a white solid.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,83-0,97 (м, 24Н), 1,10-1,45 (м, 10Н), 1,50-1,65 (м, 5Н), 1,76-1,82 (м, 2Н), 2,00-2,20 (м, 3H), 2,27-2,36 (м, 1Н), 2,45-2,55 (м, 1Н), 2,56 (с, 3H), 2,90 (с, 3H), 3,02 (с, 3H), 3,08 (д, J=16,6, 1Н), 3,17 (дд, J₁=10,7, J₂=14,1, 1Н), 3,37 (м, 1Н), 3,60 (м, 2Н), 3,70 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 3,99-4,11 (м, 3H), 4,49 (м, 1Н), 4,59 (м, 1Н), 4,78 (м, 2Н), 5,06 (м, 1Н), 5,19 (д, J=3,9, 1Н), 6,68 (д, J=8,8, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,33 (д, J=9,8, 1Н), 7,61 (д, J=8,8, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.83-0.97 (m, 24H), 1.10-1.45 (m, 10H), 1.50-1.65 (m, 5H) 1.76-1.82 (m, 2H), 2.00-2.20 (m, 3H), 2.27-2.36 (m, 1H), 2.45-2.55 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 3.02 (s, 3H), 3.08 (d, J = 16.6, 1H), 3.17 (dd , J ₁ = 10.7, J ₂ = 14.1, 1H), 3.37 (m, 1H), 3.60 (m, 2H), 3.70 (m, 1H), 3.79 (s , 3H), 3.99-4.11 (m, 3H), 4.49 (m, 1H), 4.59 (m, 1H), 4.78 (m, 2H), 5.06 (m, 1H), 5.19 (d, J = 3.9, 1H), 6.68 (d, J = 8.8, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7, 07 (d, J = 8.3, 2H), 7.33 (d, J = 9.8, 1H), 7.61 (d, J = 8.8, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₀H₈₀N₆O₁₄S: 1020,55. Найдено: 1022,1 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₀ H ₈₀ N ₆ O ₁₄ S: 1020.55. Found: 1022.1 (M + H) ⁺ .

Пример 117Example 117

Синтез [биотин]⁸дидемнина A (8BISAPL1)Synthesis of [Biotin] ⁸ Didemnin A (8BISAPL1)

К раствору HATU (24 мг, 61 мкмоль), HOAt (8 мг, 63 мкмоль), SAPL2 (20 мг, 21,4 мкмоль) и d-биотина (7,8 мг, 32 мкмоль) в безв. DCM (400 мкл) при 0°С в атмосфере Ar добавляют по каплям с помощью шприца NMM. Полученную смесь перемешивают 2 ч при 0°С и затем при комнатной температуре еще 14 ч. Добавляют DCM (10 мл) и раствор промывают последовательно водн. KHSO₄ (5 мл, 10%), водн. NaHCO₃ (5 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (5 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Указанное в заглавии соединение (18 мг, 72%) получают в виде белого твердого вещества после очистки ВЭЖХ (Symetry Prep С18, градиент ACN/H₂O 60:40 - 100:0 в 10 мин (расход: 3 мл/мин, 150×7,8 мм, при 270 нм, t_R=6 мин).To a solution of HATU (24 mg, 61 μmol), HOAt (8 mg, 63 μmol), SAPL2 (20 mg, 21.4 μmol) and d-biotin (7.8 mg, 32 μmol) in bezv. DCM (400 μl) at 0 ° C. in an Ar atmosphere was added dropwise using an NMM syringe. The resulting mixture was stirred for 2 hours at 0 ° C and then at room temperature for another 14 hours. DCM (10 ml) was added and the solution was washed successively with aq. KHSO ₄ (5 ml, 10%), aq. NaHCO ₃ (5 ml, sat.) And brine (5 ml). The organic phase is dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure. The title compound (18 mg, 72%) was obtained as a white solid after purification by HPLC (Symetry Prep C18, gradient ACN / H ₂ O 60:40 - 100: 0 in 10 min (flow: 3 ml / min, 150 × 7.8 mm, at 270 nm, t _R = 6 min).

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,78-1,00 (м, 24Н), 1,20-1,98 (м, 23Н), 2,00-2,62 (м, 7Н), 2,53 (с, 3H), 2,80-3-00 (м, 2Н), 2,86 (с, 3H), 3,16 (м, 2Н), 3,35 (м, 2Н), 3,57 (м, 2Н), 3,70 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 4,01 (м, 2Н), 4,10 (м, 1Н), 4,31 (м, 1Н), 4,46 (м, 1Н), 4,56 (м, 1Н), 4,82 (м, 2Н), 5,00 (м, 1Н), 5,14 (м, 2Н), 5,67 (с, 1Н), 6,23 (с, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,28 (д, J=8,5, 1Н), 7,35 (д, J=7,8, 1Н), 8,01 (д, J=8,7, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.78-1.00 (m, 24H), 1.20-1.98 (m, 23H), 2.00-2.62 (m, 7H) 2.53 (s, 3H), 2.80-3-00 (m, 2H), 2.86 (s, 3H), 3.16 (m, 2H), 3.35 (m, 2H), 3.57 (m, 2H), 3.70 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 4.01 (m, 2H), 4.10 (m, 1H), 4.31 (m , 1H), 4.46 (m, 1H), 4.56 (m, 1H), 4.82 (m, 2H), 5.00 (m, 1H), 5.14 (m, 2H), 5 67 (s, 1H), 6.23 (s, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.28 (d, J = 8.5, 1H), 7.35 (d, J = 7.8, 1H), 8.01 (d, J = 8.7, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₉H₉₂N₈O₁₄S: 1168,65. Найдено: 1169,6 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₉ H ₉₂ N ₈ O ₁₄ S: 1168.65. Found: 1169.6 (M + H) ⁺ .

Пример 118Example 118

Синтез [фенилкарбамид]⁸дидемнина A (8PUSAPL1)Synthesis of [phenylcarbamide] ⁸ didemnin A (8PUSAPL1)

К раствору SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) в DCM (200 мкл, безв.) при 0°С в атмосфере Ar добавляют фенилизоцианат (1,3 мкл, 12 мкмоль) и реакционную смесь перемешивают при к.т. 4 часа. Добавляют DCM (10 мл) и раствор промывают последовательно водн. KHSO₄ (5 мл, 10%), водн. NaHCO₃ (5 мл, нас.) и насыщенным раствором соли (5 мл). Органическую фазу сушат (Na₂SO₄), фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая чистый 8PUSAPL1 (11 мг, 94%) в виде белого твердого вещества.To a solution of SAPL2 (10 mg, 10.7 μmol) in DCM (200 μl, anhydrous) at 0 ° C in an atmosphere of Ar, phenylisocyanate (1.3 μl, 12 μmol) was added and the reaction mixture was stirred at rt. 4 hours. DCM (10 ml) was added and the solution was washed successively with aq. KHSO ₄ (5 ml, 10%), aq. NaHCO ₃ (5 ml, sat.) And brine (5 ml). The organic phase was dried (Na ₂ SO ₄ ), filtered and concentrated under reduced pressure to give pure 8PUSAPL1 (11 mg, 94%) as a white solid.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,85-0,94 (м, 24Н), 1,11-1,43 (м, 4Н), 1,22 (д, J=6,8, 3H), 1,35 (д, J=6,8, 3H), 1,49-1,83 (м, 5Н), 1,73 (с, 3H), 2,02 (м, 1Н), 2,14 (м, 2Н), 2,34 (дт, J₁=3,4, J₂=6,8, 1Н), 2,54 (с, 3H), 2,91 (с, 3H), 3,04 (д, J=16,6, 1H), 3,17 (дд, J₁=11,2, J₂=14,6, 1Н), 3,36 (дд, J₁=3,9, J₂=14,2, 1Н), 3,57 (дд, J₁=4,4, J₂=10,7, 1Н), 3,59-3,63 (м, 1Н), 3,67-3,75 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 3,96-4,10 (м, 2Н), 4,19 (кв, J=6,8, 1Н), 4,58 (м, 1Н), 4,74 (дд, J₁=3,9, J₂=8,8, 1Н), 4,78-4,85 (м, 1Н), 5,05 (м, 2Н), 5,17 (д, J=3,4, 1Н), 6,52 (с, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,03-7,09 (м, 3H), 7,22-7,32 (м, 4Н), 7,39 (д, J=8,3, 2Н), 7,93 (д, J=8,8, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.85-0.94 (m, 24H), 1.11-1.43 (m, 4H), 1.22 (d, J = 6.8, 3H), 1.35 (d, J = 6.8, 3H), 1.49-1.83 (m, 5H), 1.73 (s, 3H), 2.02 (m, 1H), 2 14 (m, 2H), 2.34 (dt, J ₁ = 3.4, J ₂ = 6.8, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.91 (s, 3H), 3 04 (d, J = 16.6, 1H), 3.17 (dd, J ₁ = 11.2, J ₂ = 14.6, 1H), 3.36 (dd, J ₁ = 3.9, J ₂ = 14.2, 1H), 3.57 (dd, J ₁ = 4.4, J ₂ = 10.7, 1H), 3.59-3.63 (m, 1H), 3.67- 3.75 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.96-4.10 (m, 2H), 4.19 (q, J = 6.8, 1H), 4.58 ( m, 1H), 4.74 (dd, J ₁ = 3.9, J ₂ = 8.8, 1H), 4.78-4.85 (m, 1H), 5.05 (m, 2H), 5.17 (d, J = 3.4, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.84 (d, J = 8.3, 2H), 7.03-7.09 (m, 3H ), 7.22-7.32 (m, 4H), 7.39 (d, J = 8.3, 2H), 7.93 (d, J = 8.8, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,70, 15,51, 17,16, 18,74, 21,11, 22,41, 23,29, 23,98, 24,94, 25,10, 25,32, 26,97, 28,18, 30,36, 31,57, 34,44, 36,51, 38,86, 41,64, 45,23, 47,30, 49,80, 50,08, 54,60, 55,50, 56,06, 57,51, 62,77, 66,45, 68,17, 70,72, 81,93, 114,36, 120,76, 123,86, 129,12, 130,04, 130,57, 138,78, 141,00, 157,78, 158,87, 169,92, 170,68, 171,49, 172,43, 173,44, 181,47, 192,38, 204,93, 206,66. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.70, 15.51, 17.16, 18.74, 21.11, 22.41, 23.29, 23.98, 24.94, 25, 10, 25.32, 26.97, 28.18, 30.36, 31.57, 34.44, 36.51, 38.86, 41.64, 45.23, 47.30, 49.80, 50.08, 54.60, 55.50, 56.06, 57.51, 62.77, 66.45, 68.17, 70.72, 81.93, 114.36, 120.76, 123, 86, 129.12, 130.04, 130.57, 138.78, 141.00, 157.78, 158.87, 169.92, 170.68, 171.49, 172.43, 173.44, 181.47, 192.38, 204.93, 206.66.

ESI-MC Рассчит. для С₅₆Н₈₃N₇O₁₃: 1161,60. Найдено: 1062,6 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₆ H ₈₃ N ₇ O ₁₃ : 1161.60. Found: 1062.6 (M + H) ⁺ .

Пример 119Example 119

Синтез [фенилтиокарбамид]⁸дидемнина A (8PTSAPL1)Synthesis of [phenylthiocarbamide] ⁸ didemnin A (8PTSAPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза 8PUSAPL1, исходя из SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) и фенилтиоизоцианата (1,3 мкл, 12 мкмоль), после 15 ч перемешивания, получают указанное в заглавии соединение (11 мг, 93%) в виде белого твердого вещества, без дополнительной очистки.Following the procedure developed for the synthesis of 8PUSAPL1, starting from SAPL2 (10 mg, 10.7 μmol) and phenylthioisocyanate (1.3 μl, 12 μmol), after 15 hours of stirring, the title compound (11 mg, 93%) is obtained in as a white solid, without further purification.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,84-0,99 (м, 24Н), 1,14-1,46 (м, 9Н), 1,46-1,78 (м, 9Н), 1,98-2,19 (м, 3H), 2,34 (м, 1Н), 2,54 (с, 3H), 2,91 (м, 1Н), 3,00 (с, 3H), 3,08-3,21 (м, 1Н), 3,36 (дд, J₁=4,4, J₂=14,1, 1Н), 3,55-3,64 (м, 2Н), 3,66-3,74 (м, 1Н), 3,79 (с, 3H), 3,96-4,12 (м, 2Н), 4,21 (кв, J=6,8, 1Н), 4,59 (т, J=5,3, 1Н), 4,75 (дд, J₁=3,4, J₂=8,3, 1Н), 4,83 (т, J=10,3, 1Н), 5,05-5,12 (м, 2Н), 5,16 (д, J=3,4, 1Н), 6,30 (т, J=7,3, 1Н), 6,84 (д, J=8,3, 2Н), 7,07 (д, J=8,3, 2Н), 7,21-7,37 (м, 6Н), 7,93 (д, J=8,8, 1Н), 8,08 (д, J=8,8, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.84-0.99 (m, 24H), 1.14-1.46 (m, 9H), 1.46-1.78 (m, 9H) 1.98-2.19 (m, 3H), 2.34 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.91 (m, 1H), 3.00 (s, 3H), 3.08-3.21 (m, 1H), 3.36 (dd, J ₁ = 4.4, J ₂ = 14.1, 1H), 3.55-3.64 (m, 2H), 3 66-3.74 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.96-4.12 (m, 2H), 4.21 (q, J = 6.8, 1H), 4 59 (t, J = 5.3, 1H), 4.75 (dd, J ₁ = 3.4, J ₂ = 8.3, 1H), 4.83 (t, J = 10.3, 1H ), 5.05-5.12 (m, 2H), 5.16 (d, J = 3.4, 1H), 6.30 (t, J = 7.3, 1H), 6.84 (d , J = 8.3, 2H), 7.07 (d, J = 8.3, 2H), 7.21-7.37 (m, 6H), 7.93 (d, J = 8.8, 1H), 8.08 (d, J = 8.8, 1H).

¹³С-ЯМР (75 МГц, CDCl₃) δ 11,68, 15,28, 15,85, 17,15, 18,73, 21,12, 22,73, 23,66, 24,01, 25,13, 25,33, 26,62, 28,16, 29,92, 31,53, 32,42, 32,90, 34,41, 36,77, 38,86, 41,69, 47,28, 50,12, 55,50, 56,48, 57,51, 59,87, 66,47, 70,75, 81,91, 114,37, 125,25, 125,95, 126,57, 127,54, 129,12, 129,77, 130,06, 130,57, 135,43, 158,88, 168,54, 169,90, 170,70, 171,49, 172,38, 190,41. ¹³ C-NMR (75 MHz, CDCl ₃ ) δ 11.68, 15.28, 15.85, 17.15, 18.73, 21.12, 22.73, 23.66, 24.01, 25, 13, 25.33, 26.62, 28.16, 29.92, 31.53, 32.42, 32.90, 34.41, 36.77, 38.86, 41.69, 47.28, 50.12, 55.50, 56.48, 57.51, 59.87, 66.47, 70.75, 81.91, 114.37, 125.25, 125.95, 126.57, 127, 54, 129.12, 129.77, 130.06, 130.57, 135.43, 158.88, 168.54, 169.90, 170.70, 171.49, 172.38, 190.41.

ESI-MC Рассчит. для C₅₆H₈₃N₇O₁₂S: 1077,58. Найдено: 1078,5 (М+Н)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₆ H ₈₃ N ₇ O ₁₂ S: 1077.58. Found: 1078.5 (M + H) ⁺ .

Пример 120Example 120

Синтез [бутилкарбамид]⁸дидемнина A (8BUSAPL1)Synthesis of [Butylcarbamide] ⁸ Didemnin A (8BUSAPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза 8PUSAPL1, исходя из SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) и бутилтиоизоцианата (1,4 мкл, 12 мкмоль), после 4 ч перемешивания, получают указанное в заглавии соединение (9 мг, 78%) в виде белого твердого вещества, без дополнительной очистки.Following the procedure developed for the synthesis of 8PUSAPL1, starting from SAPL2 (10 mg, 10.7 μmol) and butylthioisocyanate (1.4 μl, 12 μmol), after 4 hours of stirring, the title compound (9 mg, 78%) is obtained in as a white solid, without further purification.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,85-0,94 (м, 24Н), 1,10-1,80 (м, 24Н), 2,03 (м, 1Н), 2,13 (м, 2Н), 2,33. (м, 1Н), 2,55 (с, 3H), 2,72 (с, 3H), 3,02 (д, J=16,1, 1Н), 3,17 (дд, J₁=11,2, J₂=14,2, 1Н), 3,23-3,40 (м, 3H), 3,62-3,78 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 4,03 (м, 2Н), 4,19 (кв, J=6,8, 1Н), 4,58 (м, 2Н), 4,71 (дд, J₁=3,4, J₂=8,3, 1Н), 4,82 (м, 1Н), 5,00 (м, 2Н), 5,16 (д, J=3,4, 1Н), 5,22-5,28 (м, 2Н), 6,85 (д, J=8,8, 2Н), 7,08 (д, J=8,3, 2Н), 7,21-7,29 (м, 1Н), 7,96 (д, J=9,2, 1Н). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.85-0.94 (m, 24H), 1.10-1.80 (m, 24H), 2.03 (m, 1H), 2.13 (m, 2H), 2.33. (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.72 (s, 3H), 3.02 (d, J = 16.1, 1H), 3.17 (dd, J ₁ = 11, 2, J ₂ = 14.2, 1H), 3.23-3.40 (m, 3H), 3.62-3.78 (m, 3H), 3.79 (s, 3H), 4.03 (m, 2H), 4.19 (q, J = 6.8, 1H), 4.58 (m, 2H), 4.71 (dd, J ₁ = 3.4, J ₂ = 8.3, 1H), 4.82 (m, 1H), 5.00 (m, 2H), 5.16 (d, J = 3.4, 1H), 5.22-5.28 (m, 2H), 6 85 (d, J = 8.8, 2H), 7.08 (d, J = 8.3, 2H), 7.21-7.29 (m, 1H), 7.96 (d, J = 9.2, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₄H₈₇N₇O₁₃: 1041,64. Найдено: 1042,7 (M+H)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₄ H ₈₇ N ₇ O ₁₃ : 1041.64. Found: 1042.7 (M + H) ⁺ .

Пример 121Example 121

Синтез [бутилтиокарбамид]⁸дидемнина A (8BTSAPL1)Synthesis of [Butylthiocarbamide] ⁸ Didemnin A (8BTSAPL1)

Следуя методике, разработанной для синтеза 8PUSAPL1, исходя из SAPL2 (10 мг, 10,7 мкмоль) и бутилтиоизоцианата (1,5 мкл, 12 мкмоль), после 15 ч взаимодействия, получают указанное в заглавии соединение (10 мг, 86%) в виде белого твердого вещества, без дополнительной очистки.Following the procedure developed for the synthesis of 8PUSAPL1, starting from SAPL2 (10 mg, 10.7 μmol) and butylthioisocyanate (1.5 μl, 12 μmol), after 15 hours of reaction, the title compound (10 mg, 86%) is obtained in as a white solid, without further purification.

¹H-ЯМР (300 МГц, CDCl₃) δ 0,86-0,97 (м, 24Н), 1,14-1,78 (м, 27Н), 1,99-2,14 (м, 3H), 2,34 (м, 1H), 2,55 (с, 3H), 2,88 (с, 3H), 3,01 (д, J=16,6, 1H), 3,16 (дд, J₁=11,2, J₂=14,6, 1H), 3,36 (дд, J₁=4,4, J₂=14,2, 1H), 3,49-3,74 (м, 3H), 3,79 (с, 3H), 4,02 (д, J=6,8, 2Н), 4,21 (кв, J=6,8, 1H), 4,58 (м, 1H;, 4,70 (дд, J₁=2,9, J₂=8,3, 1H), 4,82 (т, J=10,3, 1H), 5,07-5,12 (м, 2Н), 5,09 (д, J=3,9, 1H), 5,60 (м, 1H), 6,36 (дд, J₁=5,4, J₂=8,3, 1H), 6,84 (д, J=8,8, 2Н), 7,08 (д, J=8,8, 2Н), 7,84 (д, J=8,3, 1H), 7,91 (д, J=9,3, 1H). ¹ H-NMR (300 MHz, CDCl ₃ ) δ 0.86-0.97 (m, 24H), 1.14-1.78 (m, 27H), 1.99-2.14 (m, 3H) 2.34 (m, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.88 (s, 3H), 3.01 (d, J = 16.6, 1H), 3.16 (dd, J ₁ = 11.2, J ₂ = 14.6, 1H), 3.36 (dd, J ₁ = 4.4, J ₂ = 14.2, 1H), 3.49-3.74 (m, 3H ), 3.79 (s, 3H), 4.02 (d, J = 6.8, 2H), 4.21 (q, J = 6.8, 1H), 4.58 (m, 1H ;, 4.70 (dd, J ₁ = 2.9, J ₂ = 8.3, 1H), 4.82 (t, J = 10.3, 1H), 5.07-5.12 (m, 2H) 5.09 (d, J = 3.9, 1H), 5.60 (m, 1H), 6.36 (dd, J ₁ = 5.4, J ₂ = 8.3, 1H), 6, 84 (d, J = 8.8, 2H), 7.08 (d, J = 8.8, 2H), 7.84 (d, J = 8.3, 1H), 7.91 (d, J = 9.3, 1H).

ESI-MC Рассчит. для C₅₄H₈₇N₇O₁₂S: 1057,61. Найдено: 1080,7 (М+Na)⁺.ESI-MC Calculate. for C ₅₄ H ₈₇ N ₇ O ₁₂ S: 1057.61. Found: 1080.7 (M + Na) ⁺ .

Claims

1. Соединение формулы1. The compound of the formula

где X независимо означает -О- или -NH-;where X is independently —O— or —NH—;

Y означает -СО- или -СОСНСН₃СО-;Y is —CO— or —COCHCH ₃ CO—;

R₄ означает Н или алкильную группу;R ₄ means H or an alkyl group;

X₁ представляет О или S; иX ₁ represents O or S; and

когда Y означает -СО-, тогдаwhen Y means —CO— then

а) Х₂ независимо означает CR, О (и R₂ отсутствует) или N, где R независимо означает Н или органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы; иa) X ₂ independently means CR, O (and R _{2 is} absent) or N, where R independently means H or an organic group selected from an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group; and

R₁ и R₂ каждый независимо означает Н или органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы, амидогруппы RCONH-, где R означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу, где когда R₁ и R₂ каждый независимо означает органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы, или когда R амидогруппы RCONH- представляет алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу, эти группы необязательно замещены гетероциклической группой, которая представляет гетероароматическую или гетероалициклическую группу, содержащую один, два или три гетероатомов, выбранных из азота, кислорода или серы; илиR ₁ and R ₂ each independently means H or an organic group selected from an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group, an amido group RCONH-, where R is an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group, where when R ₁ and R ₂ each independently represents an organic group selected from an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group or an amido group RCONH- where R represents an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group, these groups being optionally substituted with het rotsiklicheskoy group which is a heteroaromatic or heteroalicyclic group containing one, two or three heteroatoms selected from nitrogen, oxygen or sulfur; or

в) где группа аа8 образует необязательно N-замещенный пролин формулыc) where the aa8 group forms an optionally N-substituted proline of formula

где R₃ независимо означает Н или органическую группу, выбранную из группы RSO₂- или ацильной группы RCO-, где R означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу, которые необязательно замещены одной или более необязательно защищенной аминогруппой; илиwhere R ₃ independently means H or an organic group selected from the group RSO ₂ - or an acyl group RCO—, where R is an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group that are optionally substituted with one or more optionally protected amino groups; or

с) R₁ и R₂ могут образовывать с Х₂ необязательно замещенную гетероциклическую группу, которая представляет гетероароматическую или гетероалициклическую группу, содержащую один, два или три гетероатомов, выбранных из азота, кислорода или серы; илиc) R ₁ and R ₂ can form an optionally substituted heterocyclic group with X ₂ that represents a heteroaromatic or heteroalicyclic group containing one, two or three heteroatoms selected from nitrogen, oxygen or sulfur; or

d) aa8 замещена на органическую группу, выбранную из группы RSO₂-, где R означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу;d) aa8 is substituted with an organic group selected from the group RSO ₂ -, where R is an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group;

когда Y означает -СОСНСН₃СО-, тогдаwhen Y is —COCHCH ₃ CO— then

а) Х₂ означает N, и R₁ и R₂ каждый независимо означает Н или органическую группу, выбранную из алкильной группы, алкенильной группы, арильной группы, аралкильной группы или ацильной группы RCO-, где R означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу, которые необязательно замещены гетероциклической группой, которая представляет гетероароматическую или гетероалициклическую группу, содержащую один, два или три гетероатомов, выбранных из азота, кислорода или серы; илиa) X ₂ is N, and R ₁ and R _{2 are} each independently H or an organic group selected from an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group or an acyl group RCO—, where R is an alkyl group, an alkenyl group, an aryl a group, an aralkyl group, which are optionally substituted with a heterocyclic group which represents a heteroaromatic or heteroalicyclic group containing one, two or three heteroatoms selected from nitrogen, oxygen or sulfur; or

в) где группа aa8 образует необязательно N-замещенный пролин формулыC) where the group aa8 forms an optionally N-substituted proline of the formula

где R₃ независимо группу RSO₂-, где R означает алкильную группу, которая необязательно замещена одной или более необязательно защищенной аминогруппой, гидроксигруппой;where R _{3 is} independently an RSO ₂ - group, where R is an alkyl group that is optionally substituted with one or more optionally protected amino groups, a hydroxy group;

c) R₁ и R₂ могут образовывать с Х₂ гетероциклическую группу, которая представляет гетероароматическую или гетероалициклическую группу, содержащую один, два или три гетероатомов, выбранных из азота, кислорода или серы; илиc) R ₁ and R ₂ can form a heterocyclic group with X ₂ that represents a heteroaromatic or heteroalicyclic group containing one, two or three heteroatoms selected from nitrogen, oxygen or sulfur; or

d) aa8 замещен на органическую группу, выбранную из группы RSO₂-, где R означает алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу, аралкильную группу, при условии исключения соединения следующей формулыd) aa8 is substituted with an organic group selected from the group RSO ₂ -, where R is an alkyl group, an alkenyl group, an aryl group, an aralkyl group, with the exception of the compounds of the following formula

и его фармацевтически приемлемые соли.and its pharmaceutically acceptable salts.

2. Соединение по п.1, где Х означает -NH-.2. The compound according to claim 1, where X is —NH—.

3. Соединение по п.1, где Х означает -O-.3. The compound of claim 1, wherein X is —O—.

4. Соединение по любому из пп.1-3, где Y означает -СО-.4. The compound according to any one of claims 1 to 3, where Y is —CO—.

5. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где R₄ означает метил.5. The compound according to any one of the preceding paragraphs, where R ₄ means methyl.

6. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где X₁ означает О.6. The compound according to any one of the preceding paragraphs, where X ₁ means O.

7. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где Y означает СО и X₂R₁ означает необязательно замещенную аралкилоксигруппу.7. The compound according to any one of the preceding paragraphs, where Y is CO and X ₂ R ₁ is an optionally substituted aralkyloxy group.

8. Соединение по п.7, где X₂R₁ означает бензилоксигруппу.8. The compound according to claim 7, where X ₂ R ₁ means benzyloxy.

9. Соединение по любому из пп.1-6, где X₂R₁ означает необязательно замещенную аминогруппу.9. The compound according to any one of claims 1 to 6, where X ₂ R ₁ means an optionally substituted amino group.

10. Соединение по п.9, где X₂R₁ означает группу -NHR₁, где R₁ означает необязательно замещенную алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу или аралкильную группу.10. The compound of claim 9, wherein X ₂ R ₁ is an —NHR ₁ group, where R ₁ is an optionally substituted alkyl group, alkenyl group, aryl group or an aralkyl group.

11. Соединение по п.10, где R₁ означает алкильную группу или арильную группу.11. The compound of claim 10, where R ₁ means an alkyl group or an aryl group.

12. Соединение по п.11, где R₁ означает фенильную группу или бутильную группу.12. The compound according to claim 11, where R ₁ means a phenyl group or a butyl group.

13. Соединение по любому из пп.1-6, где Y означает СО и X₂R₁ означает необязательно замещенную алкильную группу.13. The compound according to any one of claims 1 to 6, where Y is CO and X ₂ R ₁ is an optionally substituted alkyl group.

14. Соединение по п.13, где X₂R₁ означает пропильную группу, изопропильную группу, пентильную группу или группу биотина.14. The compound according to item 13, where X ₂ R ₁ means a propyl group, an isopropyl group, a pentyl group or a biotin group.

15. Соединение по любому из пп.1-6, где -C(=O)X₂R₁R₂ образует необязательно замещенную ацильную группу аминокислоты.15. The compound according to any one of claims 1 to 6, where -C (= O) X ₂ R ₁ R ₂ forms an optionally substituted acyl group of an amino acid.

16. Соединение по п.15, где необязательно замещенной ацильной группой аминокислоты является необязательно замещенный пролин.16. The compound of claim 15, wherein the optionally substituted acyl group of the amino acid is an optionally substituted proline.

17. Соединение по п.16, где необязательно замещенный пролин означает необязательно замещенный норвалинпролин, необязательно замещенный аланинпролин, Вос-пролин, необязательно замещенный алкилпролин.17. The compound according to clause 16, where the optionally substituted proline means optionally substituted norvalinproline, optionally substituted alanineproline, Boc-proline, optionally substituted alkylproline.

18. Соединение по п.16, где необязательно замещенный пролин означает норвалинпролин, Z-норвалинпролин, аланинпролин, Z-аланинпролин, Вос-аланинпролин, изобутирилпролин или необязательно защищенный D-лактилпролин.18. The compound according to clause 16, where the optionally substituted proline means norvalineproline, Z-norvalineproline, alanine proline, Z-alanine proline, Boc-alanine proline, isobutyryl proline or optionally protected D-lactylproline.

19. Соединение по любому из пп.1-5, где X₁ означает S и X₂R₁ означает группу - NHR₁, где R₁ означает замещенную алкильную группу, алкенильную группу, арильную группу или аралкильную группу.19. The compound according to any one of claims 1 to 5, where X ₁ means S and X ₂ R ₁ means a group —NHR ₁ , where R ₁ means a substituted alkyl group, an alkenyl group, an aryl group or an aralkyl group.

20. Соединение по п.21, где R₁ означает алкильную группу или арильную группу.20. The compound according to item 21, where R ₁ means an alkyl group or an aryl group.

21. Соединение по п.20, где R₁ означает фенильную группу или бутильную группу.21. The compound according to claim 20, where R ₁ means a phenyl group or a butyl group.

22. Соединение по любому из пп.1-6, где R₁ и R₂ вместе с Х₂ образуют необязательно замещенную гетероциклическую группу.22. The compound according to any one of claims 1 to 6, where R ₁ and R ₂ together with X ₂ form an optionally substituted heterocyclic group.

23. Соединение по п.22, где гетероциклическая группа означает кумарин.23. The compound according to item 22, where the heterocyclic group means coumarin.

24. Соединение по любому из пп.1-5, где аа8 замещен на органическую группу RSO₂-, где R принимает указанные значения.24. The compound according to any one of claims 1 to 5, where aa8 is substituted by an organic group RSO ₂ -, where R is as defined.

25. Соединение по п.24, где R означает метил.25. The compound of claim 24, wherein R is methyl.

26. Соединение по п.1, которое выбирают из группы, включающей26. The compound according to claim 1, which is selected from the group including

8-[фенилмочевина]дидемнин А,8- [phenylurea] didemnin A,

8-[бутилмочевина]дидемнин А,8- [butylurea] didemnin A,

3-[val]-8-[изобутирил]дидемнин А,3- [val] -8- [isobutyryl] didemnin A,

3-[Hiv]-9-[Ala]аплидин,3- [Hiv] -9- [Ala] aplidine,

3-[Hiv]-9-[Nva-Pro]аплидин,3- [Hiv] -9- [Nva-Pro] aplidine,

8-[кумарин]дидемнин А,8- [coumarin] didemnin A,

3-[val]-Z-дидемнин А,3- [val] -Z-didemnin A,

3-[Hiv]-8-[Val]дидемнин А,3- [Hiv] -8- [Val] didemnin A,

3-[Hiv]-8-[бутирил]дидемнин А,3- [Hiv] -8- [butyryl] didemnin A,

3-[Hiv]-9-[Z-ala]аплидин,3- [Hiv] -9- [Z-ala] aplidine,

3-[Hiv]-Z-дидемнин А,3- [Hiv] -Z-didemnin A,

3-[Hiv]-9-[Z-Nva-Pro]аплидин,3- [Hiv] -9- [Z-Nva-Pro] aplidine,

3-[Hiv]-9-[Boc-Ala]аплидин,3- [Hiv] -9- [Boc-Ala] aplidine,

3-[Hiv]-8-[Boc-Val]дидемнин А,3- [Hiv] -8- [Boc-Val] didemnin A,

3-[Hiv]-8-[Val]-9-[изобутирил]дидемнин А,3- [Hiv] -8- [Val] -9- [isobutyryl] didemnin A,

3-[Hiv]-8-[Pro]дидемнин А,3- [Hiv] -8- [Pro] didemnin A,

9-[метилсульфонил] аплидин.9- [methylsulfonyl] aplidine.

27. Соединение по п.26, которое представляет 8-[фенилмочевина]дидемнин А.27. The compound of claim 26, which is 8- [phenylurea] didemnin A.

28. Соединение по любому из предшествующих пунктов в форме фармацевтической соли.28. The compound according to any one of the preceding paragraphs in the form of a pharmaceutical salt.