RU2260590C1 - 2,4-dioxo-5-(2-hydroxy-3,5-dichlorobenzylidene)imino-1,3-pyrimidine salts - Google Patents
2,4-dioxo-5-(2-hydroxy-3,5-dichlorobenzylidene)imino-1,3-pyrimidine salts Download PDFInfo
- Publication number
- RU2260590C1 RU2260590C1 RU2004112573/04A RU2004112573A RU2260590C1 RU 2260590 C1 RU2260590 C1 RU 2260590C1 RU 2004112573/04 A RU2004112573/04 A RU 2004112573/04A RU 2004112573 A RU2004112573 A RU 2004112573A RU 2260590 C1 RU2260590 C1 RU 2260590C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- compounds
- determination
- experiment
- drug
- dioxo
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
- C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
- C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
- C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
- C07D239/52—Two oxygen atoms
- C07D239/54—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals
- C07D239/545—Two oxygen atoms as doubly bound oxygen atoms or as unsubstituted hydroxy radicals with other hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, конкретно к синтетическим биологически активным производным пиримидина.The invention relates to medicine, namely to pharmacology, specifically to synthetic biologically active derivatives of pyrimidine.
Заявляемое вещество имеет выраженную противомикробную активность, направленную преимущественно против различных грибов, а также некоторых бактерий, простейших и вирусов, а также обладает противоопухолевым и противоболевым действием.The inventive substance has a pronounced antimicrobial activity, directed mainly against various fungi, as well as some bacteria, protozoa and viruses, and also has an antitumor and analgesic effect.
Кроме того, указанные соединения могут быть использованы для тех же целей в ветеринарии, косметологии, в качестве консервантов в строительстве, пищевой, кожевенной, деревообрабатывающей и других типах промышленности для профилактики и уничтожения различных микроорганизмов, преимущественно грибов.In addition, these compounds can be used for the same purposes in veterinary medicine, cosmetology, as preservatives in construction, food, leather, woodworking and other types of industry for the prevention and destruction of various microorganisms, mainly fungi.
Как известно, одну из наиболее серьезных проблем современной медицины представляют грибковые, а также бактериальные и вирусные заболевания, многие из которых крайне плохо поддаются лечению, что связано как с недостаточной эффективностью существующих препаратов, так и их быстрой изменчивостью, приводящей к появлению устойчивых форм, Fidel P.L. Jr, Vazquez J.A., Sobel J.D. Candida glabrata: review of epidemiology, pathogenesis and clinical disease with comparison to C.albicans 1999, 1:80-96. White T. Antifungal drug resistance in Candida albicans., ASM News 8:427-433.As you know, one of the most serious problems of modern medicine is represented by fungal as well as bacterial and viral diseases, many of which are extremely difficult to treat, due to both the insufficient effectiveness of existing drugs and their rapid variability leading to the emergence of resistant forms, Fidel PL Jr, Vazquez J.A., Sobel J.D. Candida glabrata: review of epidemiology, pathogenesis and clinical disease with comparison to C. albicans 1999, 1: 80-96. White T. Antifungal drug resistance in Candida albicans., ASM News 8: 427-433.
Схожие проблемы актуальны для ветеринарии и промышленности, где широко распространена порча продукта, связанная с развитием и распространением микроорганизмов. Наиболее распространенными препаратами для лечения грибковых заболеваний являются нистатин, флюконазол, тербинафин и некоторые другие (Энциклопедия лекарств РЛС-2000, М., 2000, стр.987). Вместе с тем, каждый из препаратов имеет определенные недостатки. Флюконазол, несмотря на широкий спектр действия, является фунгистатиком и не убивает грибы, а только блокирует их рост и размножение. Тербинафин не убивает дрожжеподобные грибы. Это крайне затрудняет использование этих препаратов для лечения людей с ослабленной иммунной системой. Другим распространенным препаратом является нистатин. Его главными недостатками следует считать низкую активность против многоклеточных грибов и распространенную к нему устойчивость у микробов. Наиболее активным противогрибковым препаратом является амфотерицин В, который является крайне токсичным и плохо переносимым большим числом пациентов.Similar problems are relevant for veterinary medicine and industry, where product spoilage associated with the development and spread of microorganisms is widespread. The most common drugs for the treatment of fungal diseases are nystatin, fluconazole, terbinafine and some others (Encyclopedia of drugs RLS-2000, M., 2000, p. 987). However, each of the drugs has certain disadvantages. Fluconazole, despite a wide spectrum of action, is fungistatic and does not kill fungi, but only blocks their growth and reproduction. Terbinafine does not kill yeast-like fungi. This makes it extremely difficult to use these drugs to treat people with weakened immune systems. Another common drug is nystatin. Its main disadvantages should be considered low activity against multicellular fungi and the widespread resistance to it in microbes. The most active antifungal drug is amphotericin B, which is extremely toxic and poorly tolerated by a large number of patients.
Наиболее близким по химической природе к заявляемому является -2,4-диоксо-5-арилиденимино-1,3-пиримидины общей формулыClosest to the claimed chemical nature is -2,4-dioxo-5-arylidenimino-1,3-pyrimidines of the general formula
где R независимо выбран из группы: Н, ОН, низший алкоксил, галоген, нитро, ди(низший)алкиламино; n=1-3, или два близлежащих R вместе бензольным кольцом, к которому они присоединены, при n=2,4 образуют бензо, дибензо и при n=2 образуют 3,4-диоксолановое кольцо, RU 2198166.where R is independently selected from the group: H, OH, lower alkoxyl, halogen, nitro, di (lower) alkylamino; n = 1-3, or two nearby Rs together with the benzene ring to which they are attached, at n = 2.4 form benzo, dibenzo and at n = 2 form a 3,4-dioxolane ring, RU 2198166.
Это вещество выбрано нами в качестве прототипа. Недостатком данного вещества является малая активность по отношению к некоторым микроорганизмам - микобактериям и хламидиям.This substance is selected by us as a prototype. The disadvantage of this substance is its low activity against certain microorganisms - mycobacteria and chlamydia.
Задачей изобретения является разработка нового противогрибкового препарата широкого спектра действия, обладающего выраженной активностью против грамположительных и грамотрицательных бактерий, вирусов, простейших, а также опухолевых клеток; также решается задача предотвращения порчи продуктов.The objective of the invention is to develop a new antifungal drug with a wide spectrum of activity, with pronounced activity against gram-positive and gram-negative bacteria, viruses, protozoa, as well as tumor cells; the task of preventing spoilage of products is also being addressed.
Поставленная задача решается путем синтеза нового вещества, а именно калиевой, или натриевой, или аммониевой солей 2,4-диоксо-5-(2-гидрокси-3,5-дихлорбензилиден)имино-1,3-пиримидина общей формулыThe problem is solved by the synthesis of a new substance, namely the potassium, or sodium, or ammonium salts of 2,4-dioxo-5- (2-hydroxy-3,5-dichlorobenzylidene) imino-1,3-pyrimidine of the General formula
где X выбран из группы: Na, К, NH4 +.where X is selected from the group: Na, K, NH 4 + .
Перечень синтезированных и заявляемых соединений приведен в таблице 1.The list of synthesized and claimed compounds are shown in table 1.
Заявленные вещества новы, поскольку они не известны из доступных источников информации. Наличие широкого спектра эффективной биологической активности у вновь синтезированных заявленных веществ не вытекает явным образом из предшествующего уровня знаний.The claimed substances are new because they are not known from available sources of information. The presence of a wide range of effective biological activity in newly synthesized claimed substances does not follow explicitly from the previous level of knowledge.
Сущность изобретения поясняют приведенные далее:The invention is illustrated by the following:
- способ получения новых производных 2,4-диоксо-5-(2-гидрокси-3,5-дихлорбензилиден)имино-1,3-пиримидина;- a method for producing new derivatives of 2,4-dioxo-5- (2-hydroxy-3,5-dichlorobenzylidene) imino-1,3-pyrimidine;
- данные ПМР спектроскопии соединений I-III (таблица 2);- PMR spectroscopy data of compounds I-III (table 2);
- данные экспериментов по определению противогрибковой активности заявляемых соединений в сопоставлении с известными эффективными современными средствами того же назначения, а именно:- data from experiments to determine the antifungal activity of the claimed compounds in comparison with known effective modern means of the same purpose, namely:
эксперимент 1 - определение противогрибковой активности заявляемых соединений;experiment 1 - determination of the antifungal activity of the claimed compounds;
эксперимент 2 - определение совместного действия заявляемых соединений и противогрибкового препарата флюконазола;experiment 2 - determination of the joint action of the claimed compounds and the antifungal drug fluconazole;
эксперимент 3 - определение совместного действия заявляемых соединений и противогрибкового препарата - нистатина;experiment 3 - determination of the joint action of the claimed compounds and the antifungal drug nystatin;
эксперимент 4 - определение терапевтического действия заявляемых соединений на экспериментальную инфекцию, вызванную грибами рода Candida;experiment 4 - determination of the therapeutic effect of the claimed compounds on an experimental infection caused by fungi of the genus Candida;
эксперимент 5 - определение противоопухолевой активности заявляемых соединений;experiment 5 - determination of the antitumor activity of the claimed compounds;
эксперимент 6 - определение противоболевой активности заявляемых соединений;experiment 6 - determination of the analgesic activity of the claimed compounds;
эксперимент 7 - определение острой токсичности заявляемых соединений;experiment 7 - determination of acute toxicity of the claimed compounds;
эксперимент 8 - определение действия на вирус простого герпеса;experiment 8 - determination of the action on the herpes simplex virus;
эксперимент 9 - определение антимикобактериального действия;experiment 9 - determination of antimycobacterial action;
эксперимент 10 - определение действия соединений по отношению к грамположительным и грамотрицательным бактериям;experiment 10 - determination of the action of compounds in relation to gram-positive and gram-negative bacteria;
эксперимент 11 - определение антипротозойного действия соединений по отношению к трихомонадам (Trichomonas vaginalis);experiment 11 - determination of the antiprotozoal effect of the compounds in relation to Trichomonas (Trichomonas vaginalis);
эксперимент 12 - определение возможности использования заявляемых соединений для борьбы со смешанной микробной инфекцией;experiment 12 - determination of the possibility of using the claimed compounds to combat mixed microbial infection;
эксперимент 13 - определение возможности использования заявляемых соединений для предотвращения порчи продуктов.experiment 13 - determination of the possibility of using the claimed compounds to prevent spoilage of products.
Способ получения новых производных 2,4-диоксо-5-(2-гидрокси-3,5-дихлорбензилиден)имино-1,3 -пиримидина (I, II, III).A method of obtaining new derivatives of 2,4-dioxo-5- (2-hydroxy-3,5-dichlorobenzylidene) imino-1,3-pyrimidine (I, II, III).
Целевые соли 2,4-диоксо-5-(2-гидрокси-3,5-дихлорбензилиден)имино-1,3-пиримидина общей формулыTarget salts of 2,4-dioxo-5- (2-hydroxy-3,5-dichlorobenzylidene) imino-1,3-pyrimidine of the General formula
где Х выбран из группы: К, Na, NH4 +, получаются взаимодействием 5-аминоурацила или его солей щелочных металлов с дихлорсалициловым альдегидом. В качестве растворителя использована смесь этанол-вода 1:1. Продукты получались с выходами выше 90% от теоретического.where X is selected from the group: K, Na, NH 4 + , are obtained by reacting 5-aminouracil or its alkali metal salts with dichlorosalicylic aldehyde. The solvent used is a 1: 1 ethanol-water mixture. Products were obtained with yields above 90% of theoretical.
Синтез натриевой соли 2,4-диоксо-5-(2-гидрокси-3,5-дихлорбензилиден)имино-1,3-пиримидина.Synthesis of 2,4-dioxo-5- (2-hydroxy-3,5-dichlorobenzylidene) imino-1,3-pyrimidine sodium salt.
В колбу поместили 0,04 г едкого натра и 20 мл воды. К полученному раствору добавили 1,27 г 5-аминоурацила; полученную массу перемешивали до полного растворения аминоурацила. Параллельно в 50 мл этанола растворили 1,91 г 3,5-дихлорсалицилового альдегида и полученный раствор по каплям при перемешивании добавили к раствору натриевой соли 5-аминоурацила. Сразу же выпал осадок ярко-красного цвета. Реакционную смесь перемешивали в течение получаса. Полученный осадок отфильтровали, промыли спиртом, высушили. Выход продукта составил 98% от теоретического.0.04 g sodium hydroxide and 20 ml water were placed in the flask. To the resulting solution was added 1.27 g of 5-aminouracil; the resulting mass was stirred until complete dissolution of aminouracil. In parallel, 1.91 g of 3,5-dichlorosalicylic aldehyde was dissolved in 50 ml of ethanol, and the resulting solution was added dropwise with stirring to the solution of 5-aminouracil sodium salt. Immediately precipitated a bright red color. The reaction mixture was stirred for half an hour. The resulting precipitate was filtered off, washed with alcohol, and dried. The product yield was 98% of theoretical.
Соединения II и III были получены аналогичным способом, только вместо едкого натра были использованы едкое кали или гидроксид аммония.Compounds II and III were obtained in a similar way, only potassium hydroxide or ammonium hydroxide were used instead of caustic soda.
Соединения общей формулы представляют собой бесцветные или ярко окрашенные кристаллические вещества, растворимые в диметилсульфоксиде, пиридине. Температуры плавления всех веществ превышают 300°С.Compounds of the general formula are colorless or brightly colored crystalline substances soluble in dimethyl sulfoxide, pyridine. The melting points of all substances exceed 300 ° C.
Индивидуальность веществ доказана методом тонкослойной хроматографии на пластинках Silufol UV-254, элюент четыреххлористый углерод - изопропанол=9:1. Структура синтезированных веществ доказана методом ПМР-спектроскопии. Данные ПМР-спектроскопии соединений I-III представлены в таблице 2.The individuality of the substances was proved by thin layer chromatography on Silufol UV-254 plates, the eluent of carbon tetrachloride - isopropanol = 9: 1. The structure of the synthesized substances was proved by PMR spectroscopy. The PMR spectroscopy data of compounds I-III are presented in table 2.
Данные экспериментов по определению биологического действия заявляемых соединении.Data from experiments to determine the biological effect of the claimed compound.
Эксперимент 1. Определение противогрибковой активности заявляемых соединении.Experiment 1. Determination of antifungal activity of the claimed compound.
Активность препаратов против грибов определяли методом серийных разведении (таблица 3). В качестве препарата сравнения использовался флюконазол. Соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) и титровали в среде N-1, RPMI, Сабуро, так, что данный препарат содержался в отдельных пробирках со средой в концентрациях от 200 до 0,025 мг/л. Концентрация препарата в среде соседних пробирок (лунок) отличалась в два раза. В контроле использовали ДМСО, который разводили так же, как и препарат. Результаты учитывали после культивирования грибов при использовании оптимальных временных и температурных режимов для каждого вида.The activity of drugs against fungi was determined by serial dilution (table 3). Fluconazole was used as a reference drug. Compounds were dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) and titrated in N-1, RPMI, Saburo, so that this drug was contained in separate tubes with medium in concentrations from 200 to 0.025 mg / L. The concentration of the drug in the environment of neighboring tubes (wells) differed by half. DMSO was used in the control, which was diluted in the same way as the drug. The results were taken into account after cultivation of fungi using optimal time and temperature conditions for each species.
Определение действия заявляемых соединений на дрожжиTable 3
Determination of the effect of the claimed compounds on yeast
Показанные данные свидетельствуют о высокой активности препаратов по отношению к дрожжам.The data shown indicate a high activity of drugs in relation to yeast.
Определение действия заявляемых соединений на грибы рода CandidaTable 4
Determination of the effect of the claimed compounds on fungi of the genus Candida
Показанные данные свидетельствуют о высокой активности препаратов по отношению к одноклеточным грибам рода Candida для большей части использованных штаммов, превосходящей таковую у препарата сравнения - флюконазола.The data shown indicate a high activity of the drugs against unicellular fungi of the genus Candida for most of the strains used, superior to that of the reference drug - fluconazole.
Определение действия заявляемых соединений на многоклеточные грибы рода Aspergillus и MucorTable 5
Determination of the effect of the claimed compounds on multicellular fungi of the genus Aspergillus and Mucor
Показанные данные свидетельствуют о высокой активности заявляемых препаратов, многократно превосходящей таковую у препарата сравнения - флюконазола, по отношению к грибам родов Aspergillus и Mucor.The data shown indicate a high activity of the claimed drugs, many times superior to that of the comparison drug - fluconazole, in relation to fungi of the genera Aspergillus and Mucor.
Эксперимент 2. Определение совместного действия заявляемых соединений и противогрибкового препарата флюконазола. Результаты эксперимента приведены в таблице 6.Experiment 2. Determination of the joint action of the claimed compounds and the antifungal drug fluconazole. The experimental results are shown in table 6.
Совместное применение флюконазола и заявляемых соединенийTable 6
The combined use of fluconazole and the claimed compounds
Полученные данные указывают на возможность применения заявляемых соединений совместно с существующими лекарственными препаратами.The data obtained indicate the possibility of using the claimed compounds in conjunction with existing drugs.
Эксперимент 3. Определение совместное действия заявляемых соединений и противогрибкового препарата - нистатина. Результаты приведены в таблице 7.Experiment 3. Determination of the joint action of the claimed compounds and the antifungal drug nystatin. The results are shown in table 7.
Совместное применение нистатина и заявляемых соединенийTable 7
The combined use of nystatin and the claimed compounds
Полученные данные указывают на возможность применения заявляемых соединений совместно с нистатином.The data obtained indicate the possibility of using the claimed compounds in conjunction with nystatin.
Эксперимент 4. Определение терапевтического действия заявляемых соединений на экспериментальную инфекцию, вызванную грибами рода Candida.Experiment 4. Determination of the therapeutic effect of the claimed compounds on an experimental infection caused by fungi of the genus Candida.
Исследование проводили на беспородных белых мышах весом 24-26 г. Животным внутривенно водили патогенный штамм С.albicans VT-18 в количестве 1×109 бакт/животное. Вещество I вводили внутрибрюшинно. В контрольной группе по аналогичной схеме вводили изотонический раствор хлорида натрия или нистатин. Каждая группа включала 10 животных. Введение препарата продолжалось до момента гибели последнего животного в контрольной, нелеченной, группе. Испытуемый препарат вводили в дозе 5 мг/кг внутрибрюшинно. Флюконазол вводили аналогичным образом и в том же количестве. Эффективность действия оценивали по числу животных, выживших после гибели последнего погибшего в контрольной группе. В контрольной группе к 10 дню погибли все зараженные животные. Среди животных, получавших препарат I, остались живы все животные. Защита составила 100%. В группе, получавшей флюконазол, в живых остались 8 животных. Защита составила 80%. Полученные данные указывают на возможность и эффективность использования препарата I для лечения инфекционных состояний, вызванных грибами.The study was carried out on outbred white mice weighing 24-26 g. Animals were injected intravenously with a pathogenic strain of C. albicans VT-18 in an amount of 1 × 10 9 bact / animal. Substance I was administered intraperitoneally. In the control group, an isotonic sodium chloride solution or nystatin was administered according to a similar scheme. Each group included 10 animals. Administration of the drug continued until the death of the last animal in the control, untreated group. The test drug was administered at a dose of 5 mg / kg ip. Fluconazole was administered in a similar manner and in the same amount. The effectiveness of the action was evaluated by the number of animals surviving after the death of the last dead in the control group. In the control group, all infected animals died by day 10. Among animals treated with drug I, all animals remained alive. Protection was 100%. In the fluconazole-treated group, 8 animals survived. Protection amounted to 80%. The data obtained indicate the possibility and effectiveness of the use of drug I for the treatment of infectious conditions caused by fungi.
Эксперимент 5. Определение противоопухолевой активности заявляемых соединений. Результаты приведены в таблице 8.Experiment 5. Determination of the antitumor activity of the claimed compounds. The results are shown in table 8.
Исследование выполнено согласно требованиям Национального института здоровья США.The study was performed according to the requirements of the US National Institute of Health.
Эксперимент 6. Определение противоболевой активности заявляемых соединений.Experiment 6. Determination of the analgesic activity of the claimed compounds.
В группе из 3 крыс оценивали время, необходимое для отдергивания хвоста, помещенного под направленный источник теплового излучения. Удлинение времени реакции более чем на 50% после внутрибрюшинного введения препарата (30 мг/кг) указывало на наличие анальгезирующей активности. В качестве препарата сравнения использовали анальгин (2 мг/кг). Результаты приведены в таблице 9.In a group of 3 rats, the time required to pull back a tail placed under a directed source of thermal radiation was estimated. The lengthening of the reaction time by more than 50% after intraperitoneal administration of the drug (30 mg / kg) indicated the presence of analgesic activity. Analgin (2 mg / kg) was used as a comparison drug. The results are shown in table 9.
Оценка анальгезирующего действия заявляемых соединенийTable 9
Evaluation of the analgesic effect of the claimed compounds
Полученные данные указывают на наличие у заявляемых соединений противоболевой активности.The data obtained indicate the presence of the claimed compounds analgesic activity.
Эксперимент 7. Определение острой токсичности заявляемых соединений.Experiment 7. Determination of acute toxicity of the claimed compounds.
Испытуемое соединение вводили перорально с помощью желудочного зонда (1000 мг/кг) или внутрибрюшинно (300 мг/кг) белым нелинейным мышам массой 20-25 г (по 5 самцов и 5 самок в каждой из испытуемых групп), после чего наблюдали за их состоянием на протяжении 14 дней. Отсутствие симптоматики, свойственной токсическим эффектам, и отсутствие гибели животных в течение указанного времени позволяет сделать вывод о низкой токсичности изучаемого соединения. При наличии острых токсических эффектов доза уменьшается до выявления максимальной переносимой дозы.The test compound was administered orally using a gastric tube (1000 mg / kg) or intraperitoneally (300 mg / kg) to white non-linear mice weighing 20-25 g (5 males and 5 females in each of the test groups), after which their condition was monitored for 14 days. The absence of symptoms characteristic of toxic effects, and the absence of death of animals during the specified time allows us to conclude that the toxicity of the studied compound is low. In the presence of acute toxic effects, the dose is reduced to the maximum tolerated dose.
Острая токсичностьTable 10
Acute toxicity
Таким образом, проведенные исследования свидетельствуют, что в пределах использованных доз вещества не проявляют острой токсичности в использованной модели.Thus, studies have shown that within the used doses of the substance do not show acute toxicity in the model used.
Эксперимент 8. Определение действия на вирус простого герпеса.Experiment 8. Determination of the action on the herpes simplex virus.
Антивирусная активность изучалась по отношению к вирусу простого герпеса I типа (ВПГ-I/Ленинград/248/88) по общепринятому методу [Gentry G.A., Lawrency N., Lushbaugh N. Isolation and differentiation of Herpes simplex virus and Trichomonas vaginalis in cell culture, J. of Clinical Microbiology 1985, Vol.22, No.2, P.199-204]. Вирусы выращивали на перевиваемой культуре клеток Vero, полученной из банка клеточных культур Института цитологии РАН.Antiviral activity was studied in relation to the herpes simplex virus type I (HSV-I / Leningrad / 248/88) according to the generally accepted method [Gentry GA, Lawrency N., Lushbaugh N. Isolation and differentiation of Herpes simplex virus and Trichomonas vaginalis in cell culture, J. of Clinical Microbiology 1985, Vol.22, No.2, P.199-204]. Viruses were grown on a Vero transplantable cell culture obtained from a cell culture bank of the Institute of Cytology RAS.
Результаты оценивали по наличию цитопатогенного действия вируса на клетки через 36 часов культивирования при 37°С в СО2-инкубаторе.The results were evaluated by the presence of the cytopathogenic effect of the virus on the cells after 36 hours of cultivation at 37 ° C in a CO 2 incubator.
Для оценки цитопатического действия вируса подсчитывали число неизмененных клеток. Результаты приведены в таблице 11.To assess the cytopathic effect of the virus, the number of unchanged cells was counted. The results are shown in table 11.
Действие препарата при концентрации 100 мкг/мл на вирус простого герпесаTable 11
The effect of the drug at a concentration of 100 μg / ml on herpes simplex virus
Полученные результаты указывают, что приведенные в таблице соединения обладают активностью против вируса герпеса, сравнимой с таковой у стандартного препарата ацикловира, и превосходят по активности вещество - прототип.The results indicate that the compounds shown in the table have activity against the herpes virus, comparable to that of the standard preparation of acyclovir, and are superior in activity to the prototype substance.
Эксперимент 9. Определение антимикобактериального действия.Experiment 9. Determination of antimycobacterial action.
Для определения активности был использован стандартный штамм Mycobacterium tuberculosis H37Rv, чувствительный ко всем антимикробным препаратам. Оценку антимикобактериального действия проводили методом серийных разведений.To determine the activity, a standard strain of Mycobacterium tuberculosis H37Rv, sensitive to all antimicrobial agents, was used. Evaluation of the antimycobacterial effect was carried out by the method of serial dilutions.
Соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) и титровали так, что данный препарат содержался в отдельных пробирках со средой в концентрациях от 200 до 0,025 мг/л. Концентрация препарата в среде соседних пробирок отличалась в два раза. В контроле использовали ДМСО, который разводили так же, как и препарат. Результат учитывали после 72-часового культивирования бактерий при 37°С. Результаты приведены в таблице 12.Compounds were dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) and titrated so that this drug was contained in separate tubes with medium in concentrations from 200 to 0.025 mg / L. The concentration of the drug in the medium of neighboring tubes was two times different. DMSO was used in the control, which was diluted in the same way as the drug. The result was taken into account after a 72-hour cultivation of bacteria at 37 ° C. The results are shown in table 12.
Минимальная подавляющая концентрация (МПК) по отношению к M.tuberculosis H37Rv (мг/л)Table 12
Minimum inhibitory concentration (MIC) in relation to M. tuberculosis H37Rv (mg / l)
Приведенные данные показывают, что испытанные соединения обладают антимикобактериальной активностью по отношению к использованному штамму М. tuberculosis. Активность заявляемых соединений превосходит таковую у вещества - прототипа.The data show that the tested compounds have antimycobacterial activity in relation to the used strain of M. tuberculosis. The activity of the claimed compounds exceeds that of the substance of the prototype.
Эксперимент 10. Определение действия соединений по отношению к грамположительным и грамотрицательным бактериям.Experiment 10. Determination of the effect of compounds in relation to gram-positive and gram-negative bacteria.
В экспериментах использованы стандартные коллекционные штаммы и бактерии, выделенные от больных. Оценку проводили методом серийных разведений с использованием питательных сред, пригодных для культивирования соответствующих видов микроорганизмов.In the experiments, standard collection strains and bacteria isolated from patients were used. The evaluation was carried out by the method of serial dilutions using nutrient media suitable for the cultivation of the corresponding types of microorganisms.
Соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) и титровали в концентрациях от 500 до 0,025 мг/л. Концентрация препарата в среде соседних пробирок отличалась в два раза. Результат учитывали после 72-часового культивирования бактерий при 37°С. Результаты приведены в таблице 13.Compounds were dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) and titrated in concentrations from 500 to 0.025 mg / L. The concentration of the drug in the medium of neighboring tubes was two times different. The result was taken into account after a 72-hour cultivation of bacteria at 37 ° C. The results are shown in table 13.
АТСС922E.coli
ATCC922
Полученные данные указывают, что изученные вещества обладают широким спектром антимикробной активности по отношению к различным бактериям, в том числе к вегетативным формам спорообразующих бацилл (Bacillus cereus). Уровень активности указывает на возможность использовать данные вещества в качестве антисептика или в промышленности в качестве консервантов различных материалов.The data obtained indicate that the studied substances have a wide spectrum of antimicrobial activity in relation to various bacteria, including the vegetative forms of spore-forming bacilli (Bacillus cereus). The level of activity indicates the ability to use these substances as an antiseptic or in industry as preservatives for various materials.
Эксперимент 11. Определение антипротозойного действия соединений по отношению к трихомонадам (Trichomonas vaginalis).Experiment 11. Determination of the antiprotozoal effect of the compounds in relation to Trichomonas (Trichomonas vaginalis).
В экспериментах использованы штаммы, выделенные от больных. Оценку проводили методом серийных разведений с использованием питательных сред, пригодных для культивирования соответствующих видов микроорганизмов.In the experiments, strains isolated from patients were used. The evaluation was carried out by the method of serial dilutions using nutrient media suitable for the cultivation of the corresponding types of microorganisms.
Соединения растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) и титровали в концентрациях от 500 до 0,025 мг/л. Концентрация препарата в среде соседних пробирок отличалась в два раза. Результат учитывали после 72-часового культивирования бактерий при 37°С. Установлено, что препараты I-III угнетают размножение использованных простейших в концентрациях от 50 до 0,1 мкг/мл.Compounds were dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) and titrated in concentrations from 500 to 0.025 mg / L. The concentration of the drug in the medium of neighboring tubes was two times different. The result was taken into account after a 72-hour cultivation of bacteria at 37 ° C. It was established that preparations I-III inhibit the reproduction of the used protozoa in concentrations from 50 to 0.1 μg / ml.
Эксперимент 12. Определение возможности использования заявляемых соединений для борьбы со смешанной микробной инфекцией.Experiment 12. Determination of the possibility of using the claimed compounds to combat mixed microbial infection.
У лабораторных животных (морские свинки) выбривали часть волосяного покрова, наносили поверхностные царапины и втирали микробную смесь, состоящую из грибов рода Candida, стафилококка, кишечной палочки и энтерококка (штаммы см. пример 12). Через 24 часа у всех животных возникал местный воспалительный процесс. Для лечения использовали мазь, приготовленную из веществ I или II и ланолина. Вещества были добавлены в количестве 300 мг/кг. В контролях наносили чистый ланолин или стандартную мазь флюконазола. Каждая группа включала 5 животных. Критерием эффективности был срок полного заживления и восстановления кожного покрова. У животных в группах, леченных веществами, выздоровление наступило через 5 дней. В группах, получавших лечение ланолином или флюконазолом, через 6 дней все животные были больны и в дальнейшем были пролечены препаратами II и III.In laboratory animals (guinea pigs), part of the hair was shaved, surface scratches were applied, and a microbial mixture consisting of fungi of the genus Candida, staphylococcus, Escherichia coli and enterococcus was rubbed (for strains see Example 12). After 24 hours, all animals developed a local inflammatory process. For treatment, an ointment prepared from substances I or II and lanolin was used. Substances were added in an amount of 300 mg / kg. Pure lanolin or standard fluconazole ointment was applied in the controls. Each group included 5 animals. The criterion of effectiveness was the period of complete healing and restoration of the skin. In animals in groups treated with substances, recovery occurred after 5 days. In the groups treated with lanolin or fluconazole, after 6 days all animals were sick and were subsequently treated with drugs II and III.
Выздоровление этих групп наступило еще через 7 дней. Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что заявляемые препараты могут быть использованы местно для борьбы со смешанными инфекциями, вызванные грамположительными и грамотрицательными бактериями и грибами.Recovery of these groups occurred after another 7 days. Thus, the data obtained indicate that the claimed drugs can be used locally to combat mixed infections caused by gram-positive and gram-negative bacteria and fungi.
Эксперимент 13. Определение возможности использования заявляемых соединений для предотвращения порчи продуктов.Experiment 13. Determination of the possibility of using the claimed compounds to prevent spoilage of products.
В качестве модели было использовано сливочное масло, в которое были добавлены микробы, поименованные в примере 12 в количестве 105 бактерий каждого вида на 1 грамм масла. В масло также были добавлены испытуемые вещества I, II, III (готовили по 10 проб на каждое вещество). Вещества добавляли в количестве 200 или 300 мг/кг. Пробы инкубировали при 37°С, каждый день делая количественные высевы на питательные среды, предназначенные для роста соответствующих бактерий и грибов. В контроле, в масло был добавлен растворитель - ДМСО, использованный для приготовления проб испытуемых препаратов. После 24 часов инкубации в контрольных пробах зарегистрировано нарастание количества внесенных микробов в 10 раз. Из проб, где вещества были внесены в количестве 300 мг/кг, микроорганизмы не высевались. При внесенных 200 мг/кг у пробы II зарегистрировано сохранение внесенного количества псевдомонад. Через две недели (время наблюдения) в пробах, содержащих 300 мкг/мл веществ II и III, роста микробов не наблюдалось.As a model, butter was used, to which microbes were added, named in Example 12 in the amount of 10 5 bacteria of each species per 1 gram of oil. The test substances I, II, III were also added to the oil (10 samples for each substance were prepared). Substances were added in an amount of 200 or 300 mg / kg. Samples were incubated at 37 ° C, each day making quantitative seeding on nutrient media intended for the growth of the corresponding bacteria and fungi. In control, a solvent was added to the oil - DMSO, used to prepare samples of the tested drugs. After 24 hours of incubation, a 10-fold increase in the number of introduced microbes was recorded in control samples. From samples where substances were added in an amount of 300 mg / kg, microorganisms were not sown. When 200 mg / kg was added to sample II, the preservation of the introduced amount of pseudomonas was recorded. After two weeks (observation time) in samples containing 300 μg / ml of substances II and III, microbial growth was not observed.
Полученные данные свидетельствуют о возможности защиты пищевых продуктов от смешанной микробной порчи.The data obtained indicate the possibility of protecting food from mixed microbial spoilage.
Промышленная применимостьIndustrial applicability
Приведенные выше примеры и практические результаты синтеза и анализа заявляемых соединений подтверждают возможность лабораторного и промышленного синтеза заявляемых соединений средствами, освоенными современной фармацевтической и химической промышленностью, а также их строгую идентификацию общепринятыми методами контроля.The above examples and practical results of the synthesis and analysis of the claimed compounds confirm the possibility of laboratory and industrial synthesis of the claimed compounds by means developed by the modern pharmaceutical and chemical industries, as well as their strict identification by generally accepted control methods.
Серия экспериментов по определению биологической активности, представленная в отчетах, показала, что заявляемые соединения обладают выраженными противогрибковым (против одно- и многоклеточных грибов), а также противобактериальным и противовирусным, а также противоопухолевым и противоболевым действием. Приведенные факты доказывают достижение задач, поставленных изобретением.A series of experiments on the determination of biological activity presented in the reports showed that the claimed compounds have pronounced antifungal (against unicellular and multicellular fungi), as well as antibacterial and antiviral, as well as antitumor and anti-pain effects. The above facts prove the achievement of the objectives set by the invention.
Claims (1)
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004112573/04A RU2260590C1 (en) | 2004-04-20 | 2004-04-20 | 2,4-dioxo-5-(2-hydroxy-3,5-dichlorobenzylidene)imino-1,3-pyrimidine salts |
| PCT/RU2005/000216 WO2005103014A1 (en) | 2004-04-20 | 2005-04-19 | 2,4-dioxo-5-(2-hydroxy-3,5-dichloro-benzylidene)imino-1,3-pyrimidine salts |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2004112573/04A RU2260590C1 (en) | 2004-04-20 | 2004-04-20 | 2,4-dioxo-5-(2-hydroxy-3,5-dichlorobenzylidene)imino-1,3-pyrimidine salts |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2260590C1 true RU2260590C1 (en) | 2005-09-20 |
Family
ID=35196908
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2004112573/04A RU2260590C1 (en) | 2004-04-20 | 2004-04-20 | 2,4-dioxo-5-(2-hydroxy-3,5-dichlorobenzylidene)imino-1,3-pyrimidine salts |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2260590C1 (en) |
| WO (1) | WO2005103014A1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2448960C1 (en) * | 2010-12-06 | 2012-04-27 | Виктор Вениаминович Тец | Fungicidal agent |
| WO2015199572A1 (en) * | 2014-06-24 | 2015-12-30 | Виктор Вениаминович ТЕЦ | Fungicidal agent |
| RU2595870C1 (en) * | 2015-08-04 | 2016-08-27 | Виктор Вениаминович Тец | Drug for fungal infections |
| RU2669555C1 (en) * | 2018-01-19 | 2018-10-12 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СПХФУ Минздрава России) | 6-oxo-1-phenyl-2-(phenylamino)-1,6-dihydropyrimidine-4-olate of sodium and method for preparation thereof |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3361745A (en) * | 1964-10-14 | 1968-01-02 | Searle & Co | 1-alkenyl-3-alkyl-6-amino-5-(substituted-methyleneamino)-1, 2, 3, 4-tetrahydro-2, 4-pyrimidinediones |
| RU2207337C2 (en) * | 1998-11-18 | 2003-06-27 | Изаксон Елена Александровна | 6-(3-acetylphenyl)aminouracil |
| AU2964899A (en) * | 1998-12-04 | 2000-06-26 | Rimma Iliinichna Ashkinazi | 2,4-dioxo-5-arylidenimino-1,3-pyrimidines |
-
2004
- 2004-04-20 RU RU2004112573/04A patent/RU2260590C1/en active
-
2005
- 2005-04-19 WO PCT/RU2005/000216 patent/WO2005103014A1/en active Application Filing
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2448960C1 (en) * | 2010-12-06 | 2012-04-27 | Виктор Вениаминович Тец | Fungicidal agent |
| WO2012078070A1 (en) * | 2010-12-06 | 2012-06-14 | Tets Viktor Veniaminovich | Fungicide |
| US8987277B2 (en) | 2010-12-06 | 2015-03-24 | Viktor Veniaminovich Tets | Fungicide |
| WO2015199572A1 (en) * | 2014-06-24 | 2015-12-30 | Виктор Вениаминович ТЕЦ | Fungicidal agent |
| US9895371B2 (en) | 2014-06-24 | 2018-02-20 | Viktor Veniaminovich Tets | Fungicidal agent |
| US10154996B2 (en) | 2014-06-24 | 2018-12-18 | Viktor Veniaminovich Tets | Fungicidal agent |
| RU2595870C1 (en) * | 2015-08-04 | 2016-08-27 | Виктор Вениаминович Тец | Drug for fungal infections |
| WO2017023193A1 (en) * | 2015-08-04 | 2017-02-09 | Виктор Вениаминович ТЕЦ | Agent against fungal infections |
| US10624892B2 (en) | 2015-08-04 | 2020-04-21 | Viktor Veniaminovich Tets | Agent against fungal infections |
| RU2669555C1 (en) * | 2018-01-19 | 2018-10-12 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СПХФУ Минздрава России) | 6-oxo-1-phenyl-2-(phenylamino)-1,6-dihydropyrimidine-4-olate of sodium and method for preparation thereof |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2005103014A1 (en) | 2005-11-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20110269936A1 (en) | Method for Producing Biocidal Polyguanidine, and Biocidal Polyguanidine | |
| Alagarsamy et al. | AntiHIV, Antibacterial and Antifungal Activities of Some Novel 1, 4-disubstituted-1, 2, 4-triazolo [4, 3-a] quinazolin-5 (4H)-ones. | |
| US9937183B2 (en) | Antimicrobial compounds and methods of making and using the same | |
| MX2014015249A (en) | N-substituted second generation derivatives of antifungal antibiotic amphotericin b and methods of their preparation and application. | |
| Tamilvendan et al. | Syntheses, spectral, crystallographic, antimicrobial, and antioxidant studies of few Mannich bases | |
| Strelitz et al. | Aklavin, an antibiotic substance with antiphage activity | |
| RU2260590C1 (en) | 2,4-dioxo-5-(2-hydroxy-3,5-dichlorobenzylidene)imino-1,3-pyrimidine salts | |
| RU2365591C2 (en) | MEDICATION POSSESSING ANTI-VIRAL ACTIVITY AND CONTAINING 2-METHYLTHIO-5-METHYL-6-NITRO-1,2,4-TRIAZOLO[1,5-a]PYRIMIDIN-7(3H)-ON | |
| TWI675817B (en) | Substituted malonamides and their use as antibacterial drugs | |
| Gadhe et al. | Synthesis of some novel methyl2 (2 (arylideneamino) oxazol4 ylamino) benzoxazole5carboxylate derivatives as antimicrobial agents | |
| RU2370484C1 (en) | Vermicide medication based on n-(3-chloro-4-methylphenyl)-3,5-dibromosalicylamide | |
| Weinstein et al. | The Action of Urea and Some of its Derivatives on Bacteria: I. Bacteriostatic and Bactericidal Effects of Urea and Urethane | |
| JP4836629B2 (en) | Compound having antibacterial activity or antitumor activity and method for producing the same | |
| CN109111405B (en) | Aromatic thioether compound and pesticide and medical application thereof | |
| JPS6399061A (en) | Benzylpyrimidine derivative, manufacture and medicine | |
| RU2502511C1 (en) | Agent for treating coccidiosis in veterinary science | |
| Mahmood Qureshi et al. | Antimicrobial efficacy of metal-barbiturate conjugates against pathogenic strains of Escherichia coli and Staphylococcus aureus | |
| Mahyavanshi et al. | Synthesis and pharmacological studies of 1-(2-amino-1-(4-methoxyphenyl) ethyl) cyclohexanol analogs as potential microbial agents | |
| RU2595870C1 (en) | Drug for fungal infections | |
| RU2582236C1 (en) | 4,4,4-trichlor-1-(4-chlorophenyl)butane-1,3-dione possessing analgesic and antimicrobial activities | |
| SU562978A1 (en) | Thiazolidine derivatives possessing antifungus activity and method of obtaining same | |
| TREASA | SYNTHESIS, CHARACTERIZATION & ANTIBACTERIAL STUDY OF SULPHANILAMIDE SCHIFF BASES | |
| Pasupathi et al. | Synthesis characterization and antimicrobial activity of ethyl-4-(2, 4-dichlorophenyl)-1, 2, 3, 4-tetrahydro-6-methyl-2-thioxopyrimidine-5-carboxylate | |
| CN113999282B (en) | Antibacterial peptide LI7, repeated polypeptides LI14 and LI21 thereof, derivatives and application thereof | |
| Kumar et al. | Antimicrobial and antifungal activities of Co (II)-Potassium Propan-1, 3-Diol Di Xanthate |