RU2235543C1 - Method for increasing inspecific body resistance - Google Patents

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: the present innovation deals with increasing body resistance to infection in case of oncological and autoimmune diseases, for accelerating the restoration of normal functioning in patient's organs and tissues affected due to medicinal side effect, for increasing resistance to toxic substances. Thus, one should prescribe ascorbigen at the dosage of 10 mg/kg for 5-30 d. The method provides increased inspecific resistance to infectious and toxic agents, enables to decrease the risk for the development of severe sickness and accelerate recovery in patients.

EFFECT: higher efficiency.

3 cl, 2 dwg, 6 ex, 1 tbl

Description

Изобретение относится к медицине и может быть использовано во всех случаях, когда необходимо повысить резистентность организма: для предупреждения инфекций и терапии больных, страдающих инфекционными и воспалительными заболеваниями; для химиопрофилактики канцерогенеза и терапии онкологических больных, для улучшения результатов терапии больных, страдающих аутоиммунными заболеваниями; для ускорения восстановления нормального функционирования органов и тканей (кроветворение, иммунореактивность, желудочно-кишечный тракт, волосяной покров), пораженных в результате побочного действия лекарств; для повышения сопротивляемости к токсическим веществам.The invention relates to medicine and can be used in all cases when it is necessary to increase the body's resistance: to prevent infections and treat patients suffering from infectious and inflammatory diseases; for chemoprophylaxis of carcinogenesis and therapy of cancer patients, to improve the results of treatment of patients suffering from autoimmune diseases; to accelerate the restoration of the normal functioning of organs and tissues (hematopoiesis, immunoreactivity, gastrointestinal tract, hairline) affected by side effects of drugs; to increase resistance to toxic substances.

Известно, что в настоящее время сопротивляемость многих людей к инфекциям, онкологическим заболеваниям и токсическим веществам снижена. Специфические методы повышения сопротивляемости организма, такие как вакцинация, часто не эффективны. Поэтому актуальной задачей является поиск препаратов, неспецифически повышающих резистентность организма или потенцирующих действие специфических стимуляторов. Результаты терапии многих пациентов, страдающих инфекционными и онкологическими заболеваниями, с помощью имеющихся средств часто являются неудовлетворительными, в частности, в связи с устойчивостью к лекарствам и защитным силам организма патогенных микроорганизмов и опухолевых клеток, имеющей различную природу и интенсивность (врожденная, приобретенная, частичная, полная, к одному, нескольким или всем существующим препаратам). В связи с этим актуальной является задача разработки препаратов, потенцирующих действие имеющихся лекарств, помогающих последним проявлять свою активность.It is known that at present, the resistance of many people to infections, cancer and toxic substances is reduced. Specific methods to increase the body's resistance, such as vaccination, are often not effective. Therefore, the urgent task is to search for drugs that non-specifically increase the body's resistance or potentiate the action of specific stimulants. The results of the treatment of many patients suffering from infectious and oncological diseases using available means are often unsatisfactory, in particular, due to the resistance to drugs and the body's defenses of pathogenic microorganisms and tumor cells, which has a different nature and intensity (congenital, acquired, partial, complete, to one, several or all existing drugs). In this regard, the urgent task is to develop drugs that potentiate the effects of existing drugs that help the latter to show their activity.

Наконец, при использовании практически всех противоинфекционных и особенно противоопухолевых препаратов могут развиваться побочные эффекты различной степени тяжести. Так, побочные эффекты противоопухолевых цитостатиков составляют самую большую часть всех ятрогенных заболеваний. Например, эффективный цитостатик ЦИКЛОФОСФАМИД, широко применяющийся самостоятельно и в комбинациях с другими лекарствами и облучением для лечения пациентов, страдающих онкологическими, аутоиммунными и воспалительными заболеваниями, часто вызывает нейтропению, иммунодепрессию, поражение слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и облысение [Sartori S., et al, 2000]. В результате этого понижается противоинфекционная сопротивляемость и резко увеличивается риск развития инфекционных осложнений, часто в результате проникновения патогенных микроорганизмов из просвета кишки в кровь [N.M. Blijlevens, J.P. Donnelly, and 3-Е. de Pauw, 2001]. В настоящее время не существует эффективных препаратов для профилактики и лечения вызванного радиохимиотерапией поражения слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта (мукозит) [Woo Р.С., et al, 2000]. Разработка таких препаратов необходима для улучшения результатов и безопасности лечения цитостатиками.Finally, when using almost all anti-infective and especially anti-tumor drugs, side effects of varying severity can develop. Thus, the side effects of antitumor cytostatics make up the largest part of all iatrogenic diseases. For example, the effective cytostatic Cyclophosphamide, widely used alone and in combination with other drugs and radiation for the treatment of patients suffering from cancer, autoimmune and inflammatory diseases, often causes neutropenia, immunosuppression, damage to the mucous membrane of the gastrointestinal tract and baldness [Sartori S., et al, 2000]. As a result, anti-infective resistance decreases and the risk of developing infectious complications increases sharply, often as a result of the penetration of pathogenic microorganisms from the intestinal lumen into the blood [N.M. Blijlevens, J.P. Donnelly, and 3E. de Pauw, 2001]. Currently, there are no effective drugs for the prevention and treatment of radiochemotherapy-induced damage to the gastrointestinal mucosa (mucositis) [Woo RS, et al, 2000]. The development of such drugs is necessary to improve the results and safety of treatment with cytostatics.

Известен способ повышения неспецифической резистентности организма путем введения ОЛЕКСИНА. Этот препарат представляет собой очищенный водный экстракт из листьев персика. Его активность связывают с веществами фенольной структуры, в частности флавоноидами (Добрица В.П. и др. 2001). Недостатком способа является часто развивающаяся индивидуальная непереносимость. Нет сведений о его воздействии на токсическую алопецию и иммунные клетки кишечника. Фармакокинетика ОЛЕКСИНА не может быть полностью охарактеризована, а действие на иммунологический статус может приводить к неожиданным эффектам.A known method of increasing nonspecific resistance of the body by introducing OLEXIN. This preparation is a purified aqueous extract of peach leaves. Its activity is associated with substances of the phenolic structure, in particular flavonoids (Dobritsa V.P. et al. 2001). The disadvantage of this method is the often developing individual intolerance. There is no information on its effect on toxic alopecia and intestinal immune cells. The pharmacokinetics of OLEXINE cannot be fully characterized, and the effect on the immunological status can lead to unexpected effects.

Сущность изобретения состоит в том, что назначают аскорбиген в дозе 10 мг/кг, в течение 5-30 дней.The essence of the invention lies in the fact that prescribe ascorbigen at a dose of 10 mg / kg, for 5-30 days.

Аскорбиген является одним из наиболее важных соединений, образующихся при обработке растений семейства крестоцветных. К семейству крестоцветных (Cruciferous) относятся все виды кочанной капусты, брюссельская и цветная капуста, брокколи, репа, брюква, редиска и другие овощи. Растения этого семейства интенсивно используются в питании человека. Эпидемиологические и экспериментальные данные, в частности, указывают на то, что недостаток этих овощей в пище способствует развитию заболеваний, в частности некоторых видов рака, а присутствие в достаточном количестве, наоборот, обеспечивает антиканцерогенные свойства [Graham S., et al, 1978; Wattenberg L.W., et al, 1975; Stoewsand G.S., Babish J.B. and Wimberly H.C., 1978; Wattenberg L.W, 1983; Boyd J.N, Babish J.G. and Stoewsand G.S., 1982].Ascorbigen is one of the most important compounds formed during the processing of plants of the cruciferous family. The cruciferous family includes all types of cabbage, Brussels sprouts and cauliflower, broccoli, turnips, rutabaga, radish and other vegetables. Plants of this family are intensively used in human nutrition. Epidemiological and experimental data, in particular, indicate that the lack of these vegetables in food contributes to the development of diseases, in particular some types of cancer, and the presence of a sufficient amount, on the contrary, provides anticarcinogenic properties [Graham S., et al, 1978; Wattenberg L.W., et al, 1975; Stoewsand G.S., Babish J.B. and Wimberly H.C., 1978; Wattenberg L. W, 1983; Boyd J.N. Babish J.G. and Stoewsand G.S., 1982].

Аскорбиген, 2-С-(индол-3-ил)метил-α-L-ксило-гекс-3-улофуранозоно-1,4-лактон получают синтетически из L-аскорбиновой кислоты и индолил-3-карбинола. Это индивидуальное оптически активное соединение (Муханов В.И. и др., 1984). Синтетический продукт по данным ЯМР, ВЭЖХ и ТСХ полностью идентичен природному.Ascorbigen, 2-C- (indol-3-yl) methyl-α-L-xylohex-3-ulofuranosono-1,4-lactone is synthetically prepared from L-ascorbic acid and indolyl-3-carbinol. This is an individual optically active compound (Mukhanov V.I. et al., 1984). The synthetic product according to NMR, HPLC and TLC is completely identical to natural.

Существенными признаками предложения являются режим и параметры способа. В специальных исследованиях показано, что увеличение дозы приводит к токсическому эффекту, а уменьшение дозы приводит к снижению заявленного эффекта. Укорочение сроков введения препарата снижает эффективность воздействия, а удлинение сроков введения не приводит к усилению эффективности.The essential features of the proposal are the mode and parameters of the method. Special studies have shown that increasing the dose leads to a toxic effect, and reducing the dose leads to a decrease in the declared effect. Shortening the timing of administration of the drug reduces the effectiveness of the impact, and lengthening the timing of administration does not lead to increased effectiveness.

Ниже приводятся результаты исследований, подтверждающие преимущества заявленного способа.The following are the results of studies confirming the advantages of the claimed method.

1. Влияние аскорбигена на клетки Панета, участвующие в формировании врожденного иммунитета, и защитную функцию слизистой оболочки тонкой кишки.1. The effect of ascorbigen on Paneth cells involved in the formation of innate immunity, and the protective function of the small intestine mucosa.

Материалы и методы:Materials and methods:

Исследование проведено на 30 мышах С₅₇В1 и на 20 мышах-гибридах F₁ (СВАxС₅₇В1) самцах массой тела 20-22 грамма.The study was conducted on 30 C ₅₇ B1 mice and on 20 F ₁ hybrid mice (CBAxC ₅₇ B1) males weighing 20-22 grams.

Животные получали аскорбиген в разовых дозах от 10 до 1000 мг/кг в желудок в течение 14 дней. По окончании курса введений животных забивали. Участки тонкой кишки фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина, по стандартной методике заливали в парафин, короткие серии срезов окрашивали гематоксилин-эозином.Animals received ascorbigen in single doses from 10 to 1000 mg / kg in the stomach for 14 days. At the end of the administration course, the animals were killed. Sections of the small intestine were fixed in a 10% solution of neutral formalin, poured into paraffin according to the standard method, short series of sections were stained with hematoxylin-eosin.

Результаты:Results:

На первые сутки после 14-кратного введения препарата в слизистой оболочке тонкой кишки было найдено резкое увеличение числа клеток Панета. В части желез они располагались не только в области дна железы, но и выполняли полностью крипту вплоть до шейки железы. Если в норме соотношение клеток Панета и камбиальных элементов цилиндрического эпителия составляет 1:1, то при применении аскорбигена оно увеличивается до 2:1.On the first day after a 14-fold administration of the drug, a sharp increase in the number of Paneth cells was found in the small intestine mucosa. In part of the glands, they were located not only in the area of the bottom of the gland, but also completely performed crypt up to the neck of the gland. If the normal ratio of Panet cells to cambial elements of the cylindrical epithelium is 1: 1, then with the use of ascorbigen it increases to 2: 1.

Количество эозинофильных гранул в клетках Панета и их размеры также резко увеличивались. Просвет крипты железы был расширен и заполнен гранулами, выделившимися из клеток Панета путем эндоцитоза.The number of eosinophilic granules in Paneth cells and their sizes also increased sharply. The lumen of the crypt of the gland was expanded and filled with granules released from Paneth cells by endocytosis.

В области ворсинок кишечного эпителия увеличивалось число бокаловидных клеток.In the area of the villi of the intestinal epithelium, the number of goblet cells increased.

В собственной пластинке слизистой оболочки тонкой кишки было выявлено разрастание капиллярной сети по типу развития молодой грануляционной ткани.In the own plate of the mucous membrane of the small intestine, the growth of the capillary network was revealed according to the type of development of young granulation tissue.

Отмечено также увеличение числа интраэпителиальных лимфоцитов до 3-5 на железу, тогда как у интактных животных оно составляет 1 на несколько желез.An increase in the number of intraepithelial lymphocytes to 3-5 per gland was also noted, while in intact animals it is 1 per several glands.

Таким образом, увеличение числа и усиление активности клеток Панета, увеличение количества интраэпителиальных лимфоцитов, утолщение собственной пластинки слизистой оболочки и увеличение слизеобразующих бокаловидных клеток позволяет предположить, что препарат аскорбиген, примененный перорально в виде 14-дневного курса в разовых дозах от 10 до 1000 мг/кг, обладает способностью усиливать защитную функцию слизистой оболочки тонкой кишки.Thus, an increase in the number and increase in the activity of Paneth cells, an increase in the number of intraepithelial lymphocytes, a thickening of the lamina propria, and an increase in mucus-forming goblet cells suggest that the drug is ascorbigen taken orally as a 14-day course in single doses from 10 to 1000 mg / kg, has the ability to enhance the protective function of the mucous membrane of the small intestine.

2. Влияние аскорбигена на процессы репарации повреждений слизистой оболочки тонкой кишки, вызванных введением ЦИКЛОФОСФАМИДА.2. The effect of ascorbigen on the processes of repair of damage to the mucous membrane of the small intestine caused by the introduction of CYCLOPHOSFAMIDE.

Материалы и методы:Materials and methods:

Исследование проведено на 32 мышах-гибридах F₁ (CBAxC₅₇B1) самцах массой тела 20-22 грамма. Животные были разбиты на 4 группы, каждая из которых содержала по 8 мышей:The research was performed on 32 mice hybrids F ₁ (CBAxC ₅₇ B1) males weighing 20-22 grams. Animals were divided into 4 groups, each of which contained 8 mice:

1. Группа интактного контроля.1. The intact control group.

2. Группа мышей, получавших аскорбиген per os в дозе 100 мг/кг в течение 14 дней.2. A group of mice treated with ascorbigen per os at a dose of 100 mg / kg for 14 days.

3. Группа положительного контроля, в которой животные получали ЦФ однократно внутрибрюшинно в дозе 200 мг/кг.3. The positive control group, in which animals received CF once intraperitoneally at a dose of 200 mg / kg

4. Группа мышей, которым ЦФ вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 200 мг/кг (МПД), а через 24 часа начинали пероральное введение аскорбигена в разовой дозе 100 мг/кг в течение 14 дней.4. A group of mice to which CF was administered once intraperitoneally at a dose of 200 mg / kg (MTD), and after 24 hours, oral administration of ascorbigen in a single dose of 100 mg / kg was started for 14 days.

На первый день после 14-дневного курса введений аскорбигена (16 день эксперимента) животные в опытных и контрольных группах были забиты, участки тонкой кишки фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине, заливали в парафин, срезы окрашивали гематоксилин-эозином.On the first day after a 14-day course of ascorbigen injections (day 16 of the experiment), the animals in the experimental and control groups were blocked, sections of the small intestine were fixed in 10% neutral formalin, embedded in paraffin, and sections were stained with hematoxylin-eosin.

Результаты:Results:

У животных, получавших ЦФ однократно внутрибрюшинно в дозе 200 мг/кг, на 16 сутки после введения в тонкой кишке сохранялись признаки повреждения слизистой оболочки. Они выражались в виде крупных очагов деструкции эпителия желез, расположенных главным образом в области крипт. В ряде желез просвет крипт резко расширен, в просвете - клеточный детрит и большое количество крупных эозинофильных гранул. В зонах повреждения клетки Панета находились в состоянии балонной дистрофии. Их число резко увеличено. Они расположены не только в области дна желез, но распространялись вплоть до шейки, увеличены в размерах и заполнены множеством гранул. Часть клеток Панета - в состоянии деструкции.In animals that received CF once intraperitoneally at a dose of 200 mg / kg, on the 16th day after administration in the small intestine, signs of mucosal damage remained. They were expressed as large foci of destruction of the epithelium of the glands located mainly in the crypt region. In a number of glands, the lumen of the crypts is sharply expanded, in the lumen - cell detritus and a large number of large eosinophilic granules. In the areas of damage, Paneth cells were in a state of balloon dystrophy. Their number has increased dramatically. They are located not only in the area of the bottom of the glands, but spread all the way to the neck, enlarged and filled with many granules. Part of Paneta cells is in a state of destruction.

Ворсинки слизистой оболочки в области повреждения истончены, отдельные - в состоянии деструкции.The fibers of the mucous membrane in the area of damage are thinned, separate - in a state of destruction.

В собственной пластинке слизистой оболочки отмечена гибель клеток, истончение волокнистых структур, образование кистоподобных полостей разных размеров.In their own plate of the mucous membrane, cell death, thinning of fibrous structures, and the formation of cystic cavities of different sizes are noted.

В зонах регенерации, которые встречаются наряду с очагами деструкции, число клеток Пакета не отличалось от нормы. Они содержали небольшое количество мелких эозинофильных гранул.In the regeneration zones, which are found along with the foci of destruction, the number of Pack cells did not differ from the norm. They contained a small amount of small eosinophilic granules.

В области ворсинок регенерация происходила быстрее, чем в области крипт. Регенерировавшие ворсинки короткие, немногочисленные.Regeneration in the villi occurred faster than in the crypt region. Regenerated villi are short, few in number.

14-дневное введение аскорбигена в разовой дозе 100 мг/кг per os после однократного внутрибрюшинного введения ЦФ в дозе 200 мг/кг приводило на 16 сутки эксперимента к практически полному восстановлению структуры ворсинок и собственной пластинки слизистой оболочки. Их повреждение выражалось лишь в наличии небольших очагов отека. На отдельных ворсинках в области верхушки сохранялись зоны некроза цилиндрического эпителия.A 14-day administration of ascorbigen in a single dose of 100 mg / kg per os after a single intraperitoneal administration of CF at a dose of 200 mg / kg on day 16 of the experiment led to an almost complete restoration of the structure of the villi and mucosal lamina propria. Their damage was expressed only in the presence of small foci of edema. On separate villi in the apex region, zones of necrosis of the cylindrical epithelium were preserved.

В области крипт сохранились единичные кисты. Клетки Пакета по морфологическому строению и количеству не отличались от интактного контроля. В части желез встречались клетки Панета в состоянии вакуольной дистрофии.In the area of crypts, isolated cysts were preserved. Pack cells in morphological structure and quantity did not differ from intact control. In part of the glands, Paneth cells were found in the state of vacuole dystrophy.

Таким образом, пероральное применение аскорбигена в виде 14-дневного курса в разовой дозе 100 мг/кг приводит к ускорению процессов репарации повреждений слизистой оболочки тонкой кишки, вызываемых однократным введением ЦФ в дозе 200 мг/кг.Thus, the oral administration of ascorbigen in the form of a 14-day course in a single dose of 100 mg / kg leads to an acceleration of the repair processes of damage to the small intestinal mucosa caused by a single administration of CF at a dose of 200 mg / kg.

3. Влияние аскорбигена на процессы репарации повреждений структуры лимфоидных органов, вызванных введением ЦИКЛОФОСФАМИДА.3. The effect of ascorbigen on the processes of repair of damage to the structure of lymphoid organs caused by the introduction of CYCLOPHOSFAMIDE.

Материалы и методы:Materials and methods:

Исследование проведено на 24 мышах-гибридах F₁ (СВАxС₅₇В1) самцах массой тела 20-22 грамма. Животные были разбиты на 3 группы, каждая из которых содержала по 8 мышей:The study was conducted on 24 hybrid mice F ₁ (CBAxC ₅₇ B1) males weighing 20-22 grams. Animals were divided into 3 groups, each of which contained 8 mice:

1. Группа интактного контроля.1. The intact control group.

2. Группа положительного контроля, в которой животные получали ЦФ однократно внутрибрюшинно в дозе 200 мг/кг.2. The positive control group, in which animals received CF once intraperitoneally at a dose of 200 mg / kg

3. Группа мышей, которым ЦФ вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 200 мг/кг (МПД), а через 24 часа начинали пероральное введение аскорбигена в разовой дозе 100 мг/кг в течение 14 дней.3. A group of mice to which CF was administered once intraperitoneally at a dose of 200 mg / kg (MTD), and after 24 hours, oral administration of ascorbigen in a single dose of 100 mg / kg for 14 days was started.

На первый день после 14-дневного курса введений аскорбигена (16 день эксперимента) животные в опытных и контрольных группах были забиты, тимус, селезенку и лимфоузлы фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине, заливали в парафин, срезы окрашивали гематоксилин-эозином.On the first day after a 14-day course of ascorbigen injections (day 16 of the experiment), the animals in the experimental and control groups were blocked, the thymus, spleen and lymph nodes were fixed in 10% neutral formalin, embedded in paraffin, and sections were stained with hematoxylin-eosin.

Результаты:Results:

Тимус.Thymus.

ЦИКЛОФОСФАМИД. При однократном внутрибрюшинном введении ЦФ в МПД на 7 сутки в тимусе отмечено некоторое сужение корковой зоны, умеренная атрофия лимфоидной ткани как в корковой, так и в мозговой зонах, появление кистоподобно растянутых синусов в мозговой зоне и на границе с корковой. Умеренная атрофия лимфоидной ткани корковой и мозговой зон тимуса сохраняется в течение двух недель после введения препарата.Cyclophosphamide. With a single intraperitoneal injection of CF in the MTD on day 7, a certain narrowing of the cortical zone, moderate atrophy of the lymphoid tissue both in the cortical and cerebral zones, and the appearance of cystiform stretched sinuses in the cerebral zone and at the border with the cortical are noted in the thymus. Moderate atrophy of the lymphoid tissue of the cortical and brain zones of the thymus persists for two weeks after administration of the drug.

ЦФ + Аскорбиген. 14-дневное введение аскорбигена после однократного применения ЦФ уменьшало повреждающее действие последнего на лимфоидную ткань тимуса. Повреждающее действие на 15 сутки после применения ЦФ выражалось лишь в небольшой атрофии лимфоидной ткани в мозговой зоне.CF + Ascorbigen. A 14-day administration of ascorbigen after a single application of CF reduced the damaging effect of the latter on the lymphoid tissue of the thymus. The damaging effect on the 15th day after the application of CF was expressed only in a small atrophy of lymphoid tissue in the brain area.

Селезенка.Spleen.

ЦИКЛОФОСФАМИД. Введение ЦФ приводило к 7 суткам наблюдения к умеренной атрофии лимфоидной ткани, которая сохранялась до 15 суток эксперимента. Количество мегакариобластов и мегакариоцитов на 7 сутки несколько увеличено. К 15 суткам оно существенно возрастает. Очаги экстрамедуллярного кроветворения на 7 сутки встречаются не чаще, чем в контроле. Через 2 недели после однократного введения ЦФ их становится значительно больше.Cyclophosphamide. The introduction of CF led to 7 days of observation to moderate atrophy of lymphoid tissue, which persisted until the 15th day of the experiment. The number of megakaryoblasts and megakaryocytes on day 7 is slightly increased. By 15 days, it increases significantly. Foci of extramedullary hematopoiesis on the 7th day are not more common than in the control. 2 weeks after a single injection of CF, they become much larger.

ЦФ + Аскорбиген. При применении аскорбигена в виде 14-дневного курса на следующий день после однократного введения ЦФ на 1 сутки по окончании введений аскорбигена (15 сутки после введения ЦФ) число очагов экстрамедуллярного кроветворения увеличивалось во много раз. При этом они были, в основном, миелоцитарного типа. Количество мегакариоцитов и мегакариобластов также возрастало. Никаких признаков атрофии лимфоидной ткани не выявлено.CF + Ascorbigen. When ascorbigen was used in the form of a 14-day course the day after a single administration of CF for 1 day after the administration of ascorbigen (15 days after the administration of CF), the number of foci of extramedullary hematopoiesis increased many times. Moreover, they were mainly of the myelocytic type. The number of megakaryocytes and megakaryoblasts also increased. No signs of atrophy of lymphoid tissue were detected.

Лимфоузел.Lymph node.

ЦИКЛОФОСФАМИД. На 7 сутки после введения ЦФ в лимфоузлах была найдена умеренная атрофия лимфоидной ткани в корковой зоне, которая сохранялась до 15 суток наблюдения. К 15 суткам под капсулой лимфоузла можно видеть небольшие очаги склероза. В мозговой зоне встречались очаги миелоидного кроветворения.Cyclophosphamide. On the 7th day after the introduction of CF in the lymph nodes, moderate atrophy of the lymphoid tissue in the cortical zone was found, which persisted until 15 days of observation. By 15 days, small foci of sclerosis can be seen under the capsule of the lymph node. Foci of myeloid hematopoiesis were found in the brain zone.

ЦФ + Аскорбиген. Структура лимфоузлов не отличается от контроля.CF + Ascorbigen. The structure of the lymph nodes is no different from the control.

Таким образом, пероральное введение аскорбигена в дозе 100 мг/кг в течение 14 дней после однократного внутрибрюшинного введения ЦИКЛО-ФОСФАМИДА позволяет ускорить восстановление лимфоидной ткани тимуса, селезенки и лимфоузлов.Thus, the oral administration of ascorbigen at a dose of 100 mg / kg for 14 days after a single intraperitoneal injection of CYCLO-PHOSPHAMIDE allows to accelerate the restoration of lymphoid tissue of the thymus, spleen and lymph nodes.

4. Влияние АСКОРБИГЕНА на лейкоцитопению у мышей, вызванную применением ЦИКЛОФОСФАМИДА.4. The effect of ascorbigen on leukocytopenia in mice caused by the use of CYCLOPHOSFAMIDE.

Материалы и методы.Materials and methods.

Исследования проведены на мышах-гибридах F₁ (CBAxC₅₇Black) самцах массой тела 18-22 грамма, полученных из центрального питомника РАМН “Крюково”.The studies were carried out on hybrid mice F ₁ (CBAxC ₅₇ Black) males weighing 18-22 grams, obtained from the Central nursery RAMS "Kryukovo".

Животных содержали в виварии НИИНА им. Г.Ф. Гаузе РАМН на стандартном пищевом рационе брикетированных экструзированных кормов со свободным доступом к питьевой воде.The animals were kept in the vivarium NIINA them. G.F. Gauze RAMS on a standard diet of briquetted extruded feed with free access to drinking water.

Циклофосфамид (аптечный ЦИКЛОФОСФАМИД) растворяли в физ. растворе и вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 300 мг/кг в сутки 0.Cyclophosphamide (pharmacy Cyclophosphamide) was dissolved in physical. solution and was administered once intraperitoneally at a dose of 300 mg / kg per day 0.

Субстанцию АСКОРБИГЕНА растворяли в воде и в 1%-ной концентрации вводили в желудок при помощи шприца с металлической канюлей в дозе 100 мг/кг ежедневно в течение 14 дней, начиная с нулевых суток.The substance of ASKORBIGEN was dissolved in water and in a 1% concentration was injected into the stomach using a syringe with a metal cannula at a dose of 100 mg / kg daily for 14 days, starting from zero days.

Ежедневно следили за состоянием и поведением животных, на 3, 5, 8, 11 и 16 сутки определяли массу животных и брали периферическую кровь из хвоста для определения общего количества лейкоцитов.The condition and behavior of the animals was monitored daily; on the 3rd, 5th, 8th, 11th and 16th days, the mass of animals was determined and peripheral blood was taken from the tail to determine the total number of leukocytes.

Результаты.Results.

Показано, что ЦИКЛОФОСФАМИД к 3 суткам приводит к снижению общего количества лейкоцитов до 500-1500 клеток в мм³. Наблюдается второе снижение лейкоцитов до 7-10,5 тыс. клеток в мм³. Восстановление до нормы происходит к 15-16 суткам. (Фиг. 1)It was shown that Cyclophosphamide by 3 days leads to a decrease in the total number of leukocytes to 500-1500 cells in mm ³ . There is a second decrease in leukocytes to 7-10.5 thousand cells in mm ³ . Recovery to normal occurs by 15-16 days. (Fig. 1)

Применение АСКОРБИГЕНА в указанном выше режиме не влияло на уровень общего количества лейкоцитов.The use of ASKORBIGEN in the above mode did not affect the level of the total number of leukocytes.

Применение АСКОРБИГЕНА после ЦИКЛОФОСФАМИДА предотвращало развитие глубокой цитопении к 3-м суткам. Уровень лейкоцитов на этот срок составлял 1-3 тыс. клеток в мм³. Восстановление нормального количества лейкоцитов наступало к 6 суткам. Повторного снижения количества лейкоцитов не наблюдалось. Подсчет лейкоцитарной формулы показал, что восстановление уровня лейкоцитов происходит за счет нейтрофилов.The use of ASKORBIGEN after CYCLOPHOSFAMIDE prevented the development of deep cytopenia by the 3rd day. The leukocyte level for this period was 1-3 thousand cells in mm ³ . Recovery of the normal number of white blood cells occurred at 6 days. A second decrease in the number of leukocytes was not observed. Counting the leukocyte formula showed that the restoration of the level of leukocytes occurs due to neutrophils.

В группе животных, получавших ЦИКЛОФОСФАМИД, с 2-х суток развивался понос, а к 5-м суткам отмечалось снижение массы тела на 10%. (Фиг. 2) Восстановление массы тела до исходного уровня происходило лишь к 12-м суткам. При применении АСКОРБИГЕНА на фоне ЦИКЛОФОСФАМИДА у животных диарея была менее выраженная и кратковременная. Снижения массы тела животных в этой группе не наблюдалось.In the group of animals treated with CYCLOPHOSFAMID, diarrhea developed from the 2nd day, and by the 5th day a decrease in body weight by 10% was noted. (Fig. 2) The restoration of body weight to the initial level occurred only by the 12th day. When using ASKORBIGEN against the background of CYCLOPHOSFAMIDE in animals, diarrhea was less pronounced and short-term. No decrease in body weight of animals in this group was observed.

Заключение.Conclusion

Применение АСКОРБИГЕНА в дозе 100 мг/кг ежедневно в течение 14 дней перорально после однократного внутрибрюшинного применения ЦИК-ЛОФОСФАМИДА в дозе 300 мг/кг ускоряет восстановление показателей периферической крови до нормы, а также способствует снижению кишечной токсичности последнего.The use of ASKORBIGEN at a dose of 100 mg / kg daily for 14 days orally after a single intraperitoneal use of CIC-LOFOSFAMID at a dose of 300 mg / kg accelerates the restoration of peripheral blood counts to normal, and also helps to reduce intestinal toxicity of the latter.

5. Противобактериальная активность аскорбигена (АСГ).5. Antibacterial activity of ascorbigen (ASH).

Материалы и методы:Materials and methods:

В работе использовали мышат-сосунков колонии SHK в возрасте 3-4 дней. Беременные самки SHK получены из вивария ВНИХФИ (собственная разводка). За самками велось ежедневное наблюдение, сроки родов фиксировали.In the work, mouse suckers of SHK colony at the age of 3-4 days were used. Pregnant SHK females were obtained from VNIHFI vivarium (own wiring). The females were monitored daily; the birth dates were recorded.

Для получения сепсиса 3-4-дневным мышатам орально (через эластичный зонд) вводили бактериальную культуру в дозе 5×10⁶ КОЕ/мышь. Через 24 часа мышат осматривали, учитывали % гибели животных; далее мышат в стерильных условиях вскрывали и делали высевы на питательные среды путем отпечатков органов - селезенки, печени, почек. Кроме того, всегда брали для посева из сердца кровь. Для Staphylococcus aureus использовали желточно-солевой агар (МЖСА); для высева Гр^- культур - среду Левина. Для изучения профилактического действия АСГ новорожденных мышат в помете условно делили на 2 группы; в первой группе мышатам, начиная с 3-4-дневного возраста, орально (через эластичный зонд) вводили АСГ (из расчета 100 мг/кг) в течение 7-8 дней. Вторая группа являлась контрольной (без введения АСГ). Мышам в двух группах одновременно орально вводили Staphylococcus aureus (клинический изолят) в дозе 5×10⁶ КОЕ/мышь. Через 24 часа наблюдений учитывали гибель животных; мышат, включая павших, в стерильных условиях вскрывали, путем отпечатков сеяли органы и кровь из сердца на МЖСА.To obtain sepsis, 3-4-day-old mice were orally (via an elastic probe) injected with a bacterial culture at a dose of 5 × 10 ⁶ CFU / mouse. After 24 hours, the mice were examined, taking into account the% death of animals; Then, the mice were opened under sterile conditions and plated on nutrient media by imprints of organs - the spleen, liver, and kidneys. In addition, blood was always taken for sowing from the heart. For Staphylococcus aureus, yolk-salt agar (MLAA) was used; for sowing Gr ^- crops - Levin's environment. To study the prophylactic effect of ASH in newborns, mice in the litter were conditionally divided into 2 groups; in the first group, the mice, starting from 3-4 days of age, were orally (through an elastic probe) injected with ASH (at the rate of 100 mg / kg) for 7-8 days. The second group was the control (without the introduction of ASH). Mice in two groups were simultaneously orally administered with Staphylococcus aureus (clinical isolate) at a dose of 5 × 10 ⁶ CFU / mouse. After 24 hours of observation, the death of animals was taken into account; the mice, including the fallen, were opened under sterile conditions; organs and blood from the heart were sown by imprints on the MRSA.

Результаты:Results:

В результате орального заражения Staphylococcus aureus в дозе 5×10⁶ КОЕ 3-4 дневных мышат отмечалась гибель животных в 20-37,5% случаев.As a result of oral infection of Staphylococcus aureus at a dose of 5 × 10 ⁶ CFU of 3-4 day old mice, death of animals was observed in 20-37.5% of cases.

При высеве на селективную питательную среду (МЖСА) фиксировали положительный или отрицательный высев (см. таблицу, чертеж).When seeding on selective nutrient medium (MZHSA), positive or negative seeding was recorded (see table, drawing).

Из данных таблицы видно, что предварительное/профилактическое введение АСГ в течение 7 дней сопровождалось снижением % высева из печени, почек и селезенки более чем в 2 раза, а из крови в 3 раза по сравнению с контролем (животными, не получавшими АСГ).The table shows that the preliminary / prophylactic administration of ASH for 7 days was accompanied by a decrease in% of seeding from the liver, kidneys and spleen by more than 2 times, and from the blood by 3 times compared with the control (animals that did not receive ASH).

В предварительных опытах с использованием для заражения мышат Гр-культур бактерий (Е. coli, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae) также отмечалось резкое снижение высеваемости, особенно выраженное при посеве крови.In preliminary experiments with the use of bacteria G-cultures for infection of mice (E. coli, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae), a sharp decrease in seeding was also observed, especially pronounced during blood culture.

На мышатах-сосунках было показано положительное влияние АСГ на восстановление микрофлоры кишечника при дисбактериозе. Оральное введение мышатам с неспецифическим энтеритом, сопровождающимся диареей, АСГ (в дозе 100 мг/кг) в течение 3-х дней полностью прекращало диарею. Мышата начинали активно есть, больше двигаться. Продолжение введения АСГ до 10 дней способствовало улучшению количественных показателей микрофлоры кишечника. Так, например, у мышат, не получавших АСГ, содержание кишечной палочки (Е. coli), основного представителя нормальной микрофлоры кишечника, соответствовало 10⁴ КОЕ на 1 г фекалий. После 10-дневного курса АСГ (100 мг/кг, орально, ежедневно) содержание Е. coli увеличивалось до 10⁵ КОЕ на 1 г фекалий. Количественные показатели анаэробной флоры также приближались к норме. Уровень бифидобактерий (bifidobacterium) и лактобацилл (lactobacilli) увеличивался с 10⁴ КОЕ и 10⁷ КОЕ до 10⁵ КОЕ и 10⁸ КОЕ на 1 г фекалий соответственно. Следует отметить, что мышата, не получавшие АСГ, погибали в 80% случаев.The sucking mice showed a positive effect of ASH on the restoration of intestinal microflora in case of dysbiosis. Oral administration to mice with nonspecific enteritis, accompanied by diarrhea, ASH (at a dose of 100 mg / kg) for 3 days completely stopped diarrhea. Muscles began to eat actively, move more. Continued administration of ASH for up to 10 days contributed to an improvement in the quantitative indicators of intestinal microflora. So, for example, in mice that did not receive ASH, the content of E. coli, the main representative of the normal intestinal microflora, corresponded to 10 ⁴ CFU per 1 g of feces. After a 10-day course of ASH (100 mg / kg, orally, daily), the content of E. coli increased to 10 ⁵ CFU per 1 g of feces. Quantitative indicators of anaerobic flora also approached the norm. The levels of bifidobacteria (bifidobacterium) and lactobacilli (lactobacilli) increased from 10 ⁴ CFU and 10 ⁷ CFU to 10 ⁵ CFU and 10 ⁸ CFU per 1 g of feces, respectively. It should be noted that mice that did not receive ASH died in 80% of cases.

6. Влияние аскорбигена на алопецию, вызванную введением циклофосфамида (ЦФ)6. The effect of ascorbigen on alopecia caused by the introduction of cyclophosphamide (CF)

Применение цитостатиков, в частности ЦФ, часто сопровождается развитием симптоматической алопеции (Алопеция симптоматическая - полное или частичное выпадение волос, развивающееся как симптом или осложнение при каких-либо заболеваниях, интоксикациях или повреждениях кожи) (син.: симптоматическая атрихия, симптоматический атрихоз, симптоматическое облысение, симптоматическая пелада, симптоматическая плешивость). На модели нами показано, что введение 200 мг/кг ЦФ внутрибрюшинно мышатам-сосункам на 8-9 день от рождения сопровождается через следующие 4-5 дня полной потерей волосяного покрова. Предварительное введение аскорбигена в дозе 100 мг/кг в течение 5 дней до инъекции ЦФ снижает выраженность (интенсивность) алопеции, а последующее введение аскорбигена способствует более интенсивному восстановлению волосяного покрова (фиг. 1). Мышата полностью восстанавливали волосяной покров на 3-4 дня раньше животных контрольной группы (без введения аскорбигена).The use of cytostatics, in particular CF, is often accompanied by the development of symptomatic alopecia (Symptomatic alopecia is complete or partial hair loss that develops as a symptom or complication in case of any disease, intoxication or skin damage) (syn.: Symptomatic atrichia, symptomatic atrichosis, symptomatic baldness symptomatic pelada, symptomatic baldness). We have shown on the model that the administration of 200 mg / kg CF intraperitoneally to sucker mice on the 8–9th day from birth is followed in the next 4–5 days by a complete loss of hair. Preliminary administration of ascorbigen at a dose of 100 mg / kg for 5 days prior to CF injection reduces the severity (intensity) of alopecia, and subsequent administration of ascorbigen contributes to a more intensive restoration of the scalp (Fig. 1). The mice completely restored the hair cover 3-4 days earlier than the animals of the control group (without the introduction of ascorbigen).

Это было подтверждено морфологическими исследованиями. При микроскопическом изучении в группе положительного контроля (мыши, получившие ЦФ однократно внутрибрюшинно в дозе 100 мг/кг) в коже был найден ряд патологических изменений. Они выражались в истончении слоя эпидермиса, умеренном отеке и фрагментации коллагеновых волокон дермы. В части волосяных фолликулов волос отсутствовал. При этом отдельные клетки матричного (камбиального) слоя и мышца, поднимающая волос, находились в состоянии атрофии.This has been confirmed by morphological studies. Microscopic examination in the positive control group (mice that received CF once intraperitoneally at a dose of 100 mg / kg) revealed a number of pathological changes in the skin. They were expressed in thinning of the epidermis layer, moderate edema and fragmentation of the collagen fibers of the dermis. In the part of the hair follicles, hair was absent. At the same time, individual cells of the matrix (cambial) layer and the muscle that lifts the hair were in a state of atrophy.

У мышей, получавших аскорбиген до и после введения ЦФ, эпидермис был без признаков повреждения, отек дермы отсутствовал, структура коллагеновых волокон дермы и придатков кожи без особенностей. Клетки матричного слоя волосяного фолликула и мышца, поднимающая волос, не отличались от нормыIn mice treated with ascorbigen before and after the administration of CF, the epidermis was without signs of damage, there was no edema of the dermis, and the structure of the collagen fibers of the dermis and appendages of the skin was unremarkable. The cells of the matrix layer of the hair follicle and the muscle that lifts the hair did not differ from the norm

Таким образом, применение аскорбигена в изученных дозе и режиме предотвращало развитие атрофических изменений в коже новорожденных мышей, возникающих под влиянием ЦФ.Thus, the use of ascorbigen in the studied dose and regimen prevented the development of atrophic changes in the skin of newborn mice that occur under the influence of CF.

Сущность изобретения поясняется следующими примерами.The invention is illustrated by the following examples.

Пример 1.Example 1

Исследование проведено на 30 мышах C₅₇B1 и на 20 мышах-гибридах F₁ (СВАxС₅₇В1) самцах массой тела 20-22 грамма.The study was conducted on 30 C ₅₇ B1 mice and on 20 F ₁ hybrid mice (CBAxC ₅₇ B1) males weighing 20-22 grams.

Животные получали аскорбиген в разовых дозах от 10 до 1000 мг/кг в желудок в течение 14 дней. По окончании курса введений животных забивали. Участки тонкой кишки фиксировали в 10%-ной растворе нейтрального формалина, по стандартной методике заливали в парафин, короткие серии срезов окрашивали гематоксилин-эозином.Animals received ascorbigen in single doses from 10 to 1000 mg / kg in the stomach for 14 days. At the end of the administration course, the animals were killed. Parts of the small intestine were fixed in a 10% solution of neutral formalin, poured into paraffin according to the standard method, short series of sections were stained with hematoxylin-eosin.

На первые сутки после 14-кратного введения препарата в слизистой оболочке тонкой кишки было найдено резкое увеличение числа клеток Панета. В части желез они располагались не только в области дна железы, но и выполняли полностью крипту вплоть до шейки железы. Если в норме соотношение клеток Панета и камбиальных элементов цилиндрического эпителия составляет 1:1, то при применении аскорбигена оно увеличивается до 2:1. Количество эозинофильных гранул в клетках Панета и их размеры также резко увеличивались. Просвет крипты железы был расширен и заполнен гранулами, выделившимися из клеток Панета путем эндоцитоза.On the first day after a 14-fold administration of the drug, a sharp increase in the number of Paneth cells was found in the small intestine mucosa. In part of the glands, they were located not only in the area of the bottom of the gland, but also completely performed crypt up to the neck of the gland. If the normal ratio of Panet cells to cambial elements of the cylindrical epithelium is 1: 1, then with the use of ascorbigen it increases to 2: 1. The number of eosinophilic granules in Paneth cells and their sizes also increased sharply. The lumen of the crypt of the gland was expanded and filled with granules released from Paneth cells by endocytosis.

В области ворсинок кишечного эпителия увеличивалось число бокаловидных клеток.In the area of the villi of the intestinal epithelium, the number of goblet cells increased.

В собственной пластинке слизистой оболочки тонкой кишки было выявлено разрастание капиллярной сети по типу развития молодой грануляционной ткани.In the own plate of the mucous membrane of the small intestine, the growth of the capillary network was revealed according to the type of development of young granulation tissue.

Отмечено также увеличение числа интраэпителиальных лимфоцитов до 3-5 на железу, тогда как у интактных животных оно составляет 1 на несколько желез.An increase in the number of intraepithelial lymphocytes to 3-5 per gland was also noted, while in intact animals it is 1 per several glands.

Таким образом, увеличение числа и усиление активности клеток Панета, увеличение количества интраэпителиальных лимфоцитов, утолщение собственной пластинки слизистой оболочки и увеличение слизеобразующих бокаловидных клеток позволяет предположить, что препарат аскорбиген, примененный перорально в виде 14-дневного курса в разовых дозах от 10 до 1000 мг/кг, обладает способностью усиливать защитную функцию слизистой оболочки тонкой кишки.Thus, an increase in the number and increase in the activity of Paneth cells, an increase in the number of intraepithelial lymphocytes, a thickening of the lamina propria, and an increase in mucus-forming goblet cells suggest that the drug is ascorbigen taken orally as a 14-day course in single doses from 10 to 1000 mg / kg, has the ability to enhance the protective function of the mucous membrane of the small intestine.

Пример 2.Example 2

Группа мышей-гибридов F₁ (СВАxС₅₇В1) самцов массой тела 20-22 грамма получала ЦФ однократно внутрибрюшинно в дозе 200 мг/кг (МПД), а через 24 часа начинали пероральное введение аскорбигена в разовой дозе 100 мг/кг в течение 14 дней.A group of F ₁ (CBAxC ₅₇ B1) mice-mice of males weighing 20-22 grams received CF once intraperitoneally at a dose of 200 mg / kg (MTD), and after 24 hours oral administration of ascorbigen in a single dose of 100 mg / kg for 14 days.

На первый день после 14-дневного курса введений животные были забиты, участки тонкой кишки фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине, заливали в парафин, срезы окрашивали гематоксилин-эозином.On the first day after a 14-day course of administration, the animals were slaughtered, sections of the small intestine were fixed in 10% neutral formalin, embedded in paraffin, and sections were stained with hematoxylin-eosin.

У животных, получавших ЦФ однократно внутрибрюшинно в дозе 200 мг/кг, на 16 сутки после введения в тонкой кишке сохранялись признаки повреждения слизистой оболочки. Они выражались в виде крупных очагов деструкции эпителия желез, расположенных главным образом в области крипт. В ряде желез просвет крипт резко расширен, в просвете - клеточный детрит и большое количество крупных эозинофильных гранул. В зонах повреждения клетки Панета находились в состоянии балонной дистрофии. Их число резко увеличено. Они расположены не только в области дна желез, но распространялись вплоть до шейки, увеличены в размерах и заполнены множеством гранул. Часть клеток Панета - в состоянии деструкции.In animals that received CF once intraperitoneally at a dose of 200 mg / kg, on the 16th day after administration in the small intestine, signs of mucosal damage remained. They were expressed as large foci of destruction of the epithelium of the glands located mainly in the crypt region. In a number of glands, the lumen of the crypts is sharply expanded, in the lumen - cell detritus and a large number of large eosinophilic granules. In the areas of damage, Paneth cells were in a state of balloon dystrophy. Their number has increased dramatically. They are located not only in the area of the bottom of the glands, but spread all the way to the neck, enlarged and filled with many granules. Part of Paneta cells is in a state of destruction.

Ворсинки слизистой оболочки в области повреждения истончены, отдельные - в состоянии деструкции.The fibers of the mucous membrane in the area of damage are thinned, separate - in a state of destruction.

В собственной пластинке слизистой оболочки отмечена гибель клеток, истончение волокнистых структур, образование кистоподобных полостей разных размеров.In their own plate of the mucous membrane, cell death, thinning of fibrous structures, and the formation of cystic cavities of different sizes are noted.

В зонах регенерации, которые встречаются наряду с очагами деструкции, число клеток Панета не отличалось от нормы. Они содержали небольшое количество мелких эозинофильных гранул.In the regeneration zones, which are found along with the foci of destruction, the number of Panet cells did not differ from the norm. They contained a small amount of small eosinophilic granules.

В области ворсинок регенерация происходила быстрее, чем в области крипт. Регенерировавшие ворсинки короткие, немногочисленные.Regeneration in the villi occurred faster than in the crypt region. Regenerated villi are short, few in number.

14-дневное введение аскорбигена в разовой дозе 100 мг/кг per os после однократного внутрибрюшинного введения ЦФ в дозе 200 мг/кг приводило на 16 сутки эксперимента к практически полному восстановлению структуры ворсинок и собственной пластинки слизистой оболочки.A 14-day administration of ascorbigen in a single dose of 100 mg / kg per os after a single intraperitoneal administration of CF at a dose of 200 mg / kg on day 16 of the experiment led to an almost complete restoration of the structure of the villi and mucosal lamina propria.

Таким образом, пероральное применение аскорбигена в виде 14-дневного курса в разовой дозе 100 мг/кг приводит к ускорению процессов репарации повреждений слизистой оболочки тонкой кишки, вызываемых однократным введением ЦФ в дозе 200 мг/кг.Thus, the oral administration of ascorbigen in the form of a 14-day course in a single dose of 100 mg / kg leads to an acceleration of the repair processes of damage to the small intestinal mucosa caused by a single administration of CF at a dose of 200 mg / kg.

Пример 3.Example 3

Группе мышей-гибридов F₁ (CBAxC₅₇B1) самцов массой тела 20-22 грамма ЦФ вводили однократно внутрибрюшинно в дозе 200 мг/кг (МПД), а через 24 часа начинали пероральное введение аскорбигена в разовой дозе 100 мг/кг в течение 14 дней.The group of hybrid mice F ₁ (CBAxC ₅₇ B1) males weighing 20-22 grams CF was administered once intraperitoneally at a dose of 200 mg / kg (MTD), and after 24 hours, oral administration of ascorbigen in a single dose of 100 mg / kg for 14 days.

На первый день после 14-дневного курса введений аскорбигена (16 день эксперимента) животные в опытных и контрольных группах были забиты, тимус, селезенку и лимфоузлы фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине, заливали в парафин, срезы окрашивали гематоксилин-эозином.On the first day after a 14-day course of ascorbigen injections (day 16 of the experiment), the animals in the experimental and control groups were blocked, the thymus, spleen and lymph nodes were fixed in 10% neutral formalin, embedded in paraffin, and sections were stained with hematoxylin-eosin.

Тимус.Thymus.

ЦИКЛОФОСФАМИД. При однократном внутрибрюшинном введении ЦФ в МПД на 7 сутки в тимусе отмечено некоторое сужение корковой зоны, умеренная атрофия лимфоидной ткани как в корковой, так и в мозговой зонах, появление кистоподобно растянутых синусов в мозговой зоне и на границе с корковой. Умеренная атрофия лимфоидной ткани корковой и мозговой зон тимуса сохраняется в течение двух недель после введения препарата.Cyclophosphamide. With a single intraperitoneal injection of CF in the MTD on day 7, a certain narrowing of the cortical zone, moderate atrophy of the lymphoid tissue both in the cortical and cerebral zones, and the appearance of cystiform stretched sinuses in the cerebral zone and at the border with the cortical are noted in the thymus. Moderate atrophy of the lymphoid tissue of the cortical and brain zones of the thymus persists for two weeks after administration of the drug.

ЦФ + Аскорбиген. 14-дневное введение аскорбигена после однократного применения ЦФ уменьшало повреждающее действие последнего на лимфоидную ткань тимуса. Повреждающее действие на 15 сутки после применения ЦФ выражалось лишь в небольшой атрофии лимфоидной ткани в мозговой зоне.CF + Ascorbigen. A 14-day administration of ascorbigen after a single application of CF reduced the damaging effect of the latter on the lymphoid tissue of the thymus. The damaging effect on the 15th day after the application of CF was expressed only in a small atrophy of lymphoid tissue in the brain area.

Селезенка.Spleen.

ЦИКЛОФОСФАМИД. Введение ЦФ приводило к 7 суткам наблюдения к умеренной атрофии лимфоидной ткани, которая сохранялась до 15 суток эксперимента. Количество мегакариобластов и мегакариоцитов на 7 сутки несколько увеличено. К 15 суткам оно существенно возрастает. Очаги экстрамедуллярного кроветворения на 7 сутки встречаются не чаще, чем в контроле. Через 2 недели после однократного введения ЦФ их становится значительно больше.Cyclophosphamide. The introduction of CF led to 7 days of observation to moderate atrophy of lymphoid tissue, which persisted until the 15th day of the experiment. The number of megakaryoblasts and megakaryocytes on day 7 is slightly increased. By 15 days, it increases significantly. Foci of extramedullary hematopoiesis on the 7th day are not more common than in the control. 2 weeks after a single injection of CF, they become much larger.

ЦФ + Аскорбиген. При применении аскорбигена в виде 14-дневного курса на следующий день после однократного введения ЦФ на 1 сутки по окончании введений аскорбигена (15 сутки после введения ЦФ) число очагов экстрамедуллярного кроветворения увеличивалось во много раз. При этом они были, в основном, миелоцитарного типа. Количество мегакариоцитов и мегакариобластов также возрастало. Никаких признаков атрофии лимфоидной ткани не выявлено.CF + Ascorbigen. When using ascorbigen in the form of a 14-day course the day after a single administration of CF for 1 day after the administration of ascorbigen (15 days after the administration of CF), the number of foci of extramedullary hematopoiesis increased many times. Moreover, they were mainly of the myelocytic type. The number of megakaryocytes and megakaryoblasts also increased. No signs of atrophy of lymphoid tissue were detected.

Лимфоузел.Lymph node.

ЦИКЛОФОСФАМИД. На 7 сутки после введения ЦФ в лимфоузлах была найдена умеренная атрофия лимфоидной ткани в корковой зоне, которая сохранялась до 15 суток наблюдения. К 15 суткам под капсулой лимфоузла можно видеть небольшие очаги склероза. В мозговой зоне встречались очаги миелоидного кроветворения.Cyclophosphamide. On the 7th day after the introduction of CF in the lymph nodes, moderate atrophy of the lymphoid tissue in the cortical zone was found, which persisted until 15 days of observation. By 15 days, small foci of sclerosis can be seen under the capsule of the lymph node. Foci of myeloid hematopoiesis were found in the brain zone.

ЦФ + Аскорбиген. Структура лимфоузлов не отличается от контроля.CF + Ascorbigen. The structure of the lymph nodes is no different from the control.

Таким образом, пероральное введение аскорбигена в дозе 100 мг/кг в течение 14 дней после однократного внутрибрюшинного введения ЦИКЛО-ФОСФАМИДА позволяет ускорить восстановление лимфоидной ткани тимуса, селезенки и лимфоузлов.Thus, the oral administration of ascorbigen at a dose of 100 mg / kg for 14 days after a single intraperitoneal injection of CYCLO-PHOSPHAMIDE allows to accelerate the restoration of lymphoid tissue of the thymus, spleen and lymph nodes.

Пример 4.Example 4

Мышам-гибридам F₁ (CBAxC₅₇B1) самцам массой тела 18-22 грамма вводили однократно ЦФ внутрибрюшинно, в дозе 300 мг/кг в сутки 0.Hybrid mice F ₁ (CBAxC ₅₇ B1) males weighing 18-22 grams were injected with CF once intraperitoneally at a dose of 300 mg / kg per day 0.

Субстанцию АСКОРБИГЕНА вводили в желудок при помощи шприца с металлической канюлей в дозе 100 мг/кг ежедневно в течение 14 дней, начиная с нулевых суток.The substance ASKORBIGEN was injected into the stomach using a syringe with a metal cannula at a dose of 100 mg / kg daily for 14 days, starting from zero days.

Ежедневно следили за состоянием и поведением животных, на 3, 5, 8, 11 и 16 сутки определяли массу животных и брали периферическую кровь из хвоста для определения общего количества лейкоцитов.The condition and behavior of the animals was monitored daily; on the 3rd, 5th, 8th, 11th and 16th days, the mass of animals was determined and peripheral blood was taken from the tail to determine the total number of leukocytes.

Показано, что ЦИКЛОФОСФАМИД к 3 суткам приводит к снижению общего количества лейкоцитов до 500-1500 клеток в мм³. Наблюдается второе снижение лейкоцитов до 7-10,5 тыс. клеток в мм³. Восстановление до нормы происходит к 15-16 суткам.It was shown that Cyclophosphamide by 3 days leads to a decrease in the total number of leukocytes to 500-1500 cells in mm ³ . There is a second decrease in leukocytes to 7-10.5 thousand cells in mm ³ . Recovery to normal occurs by 15-16 days.

Применение АСКОРБИГЕНА в указанном выше режиме не влияло на уровень общего количества лейкоцитов.The use of ASKORBIGEN in the above mode did not affect the level of the total number of leukocytes.

Применение АСКОРБИГЕНА после ЦИКЛОФОСФАМИДА предотвращало развитие глубокой цитопении к 3-м суткам. Уровень лейкоцитов на этот срок составлял 1-3 тыс. клеток в мм³. Восстановление нормального количества лейкоцитов наступало к 6 суткам. Повторного снижения количества лейкоцитов не наблюдалось. Подсчет лейкоцитарной формулы показал, что восстановление уровня лейкоцитов происходит за счет нейтрофилов.The use of ASKORBIGEN after CYCLOPHOSFAMIDE prevented the development of deep cytopenia by the 3rd day. The leukocyte level for this period was 1-3 thousand cells in mm ³ . Recovery of the normal number of white blood cells occurred at 6 days. A second decrease in the number of leukocytes was not observed. Counting the leukocyte formula showed that the restoration of the level of leukocytes occurs due to neutrophils.

В группе животных, получавших ЦИКЛОФОСФАМИД, с 2-х суток развивался понос, а к 5-м суткам отмечалось снижение массы тела на 10%. (Фиг. 2) Восстановление массы тела до исходного уровня происходило лишь к 12-м суткам. При применении АСКОРБИГЕНА на фоне ЦИКЛОФОСФАМИДА у животных диарея была менее выраженная и кратковременная. Снижения массы тела животных в этой группе не наблюдалось.In the group of animals treated with CYCLOPHOSFAMID, diarrhea developed from the 2nd day, and by the 5th day a decrease in body weight by 10% was noted. (Fig. 2) The restoration of body weight to the initial level occurred only by the 12th day. When using ASKORBIGEN against the background of CYCLOPHOSFAMIDE in animals, diarrhea was less pronounced and short-term. No decrease in body weight of animals in this group was observed.

Применение АСКОРБИГЕНА в дозе 100 мг/кг ежедневно в течение 14 дней перорально после однократного внутрибрюшинного применения ЦИКЛОФОСФАМИДА в дозе 300 мг/кг ускоряет восстановление показателей периферической крови до нормы, а также способствует снижению кишечной токсичности последнего.The use of ASKORBIGEN at a dose of 100 mg / kg daily for 14 days orally after a single intraperitoneal use of CYCLOPHOSFAMIDE at a dose of 300 mg / kg accelerates the restoration of peripheral blood indices to normal, and also helps to reduce intestinal toxicity of the latter.

Пример 5.Example 5

Для получения сепсиса 3-4 дневным мышатам орально (через эластичный зонд) вводили бактериальную культуру в дозе 5×10⁶ КОЕ/мышь. Через 24 часа мышат осматривали, учитывали % гибели животных; далее мышат в стерильных условиях вскрывали и делали высевы на питательные среды путем отпечатков органов - селезенки, печени, почек. Кроме того, всегда брали для посева из сердца кровь. Для Staphylococcus aureus использовали желточно-солевой агар (МЖСА); для высева Гр^- культур - среду Левина. Для изучения профилактического действия АСГ новорожденных мышат в помете условно делили на 2 группы; в первой группе мышатам, начиная с 3-4-дневного возраста, орально (через эластичный зонд) вводили АСГ (из расчета 100 мг/кг) в течение 7-8 дней. Вторая группа являлась контрольной (без введения АСГ). Мышам в двух группах одновременно орально вводили Staphylococcus aureus (клинический изолят) в дозе 5×10⁶ КОЕ/мышь. Через 24 часа наблюдений учитывали гибель животных; мышат, включая павших, в стерильных условиях вскрывали, путем отпечатков сеяли органы и кровь из сердца на МЖСА.To obtain sepsis, 3-4 day old mice were orally (via an elastic probe) injected with a bacterial culture at a dose of 5 × 10 ⁶ CFU / mouse. After 24 hours, the mice were examined, taking into account the% death of animals; Then, the mice were opened under sterile conditions and plated on nutrient media by imprints of organs - the spleen, liver, and kidneys. In addition, blood was always taken for sowing from the heart. For Staphylococcus aureus, yolk-salt agar (MLAA) was used; for sowing Gr ^- crops - Levin's environment. To study the prophylactic effect of ASH in newborns, mice in the litter were conditionally divided into 2 groups; in the first group, the mice, starting from 3-4 days of age, were orally (through an elastic probe) injected with ASH (at the rate of 100 mg / kg) for 7-8 days. The second group was the control (without the introduction of ASH). Mice in two groups were simultaneously orally administered with Staphylococcus aureus (clinical isolate) at a dose of 5 × 10 ⁶ CFU / mouse. After 24 hours of observation, the death of animals was taken into account; the mice, including the fallen, were opened under sterile conditions; organs and blood from the heart were sown by imprints on the MRSA.

В результате орального заражения Staphylococcus aureus в дозе 5×10⁶ КОЕ 3-4-дневных мышат отмечалась гибель животных в 20-37,5% случаев. При высеве на селективную питательную среду (МЖСА) фиксировали положительный или отрицательный высев. Выявлено, что предварительное/профилактическое введение АСГ в течение 7 дней сопровождалось снижением % высева из печени, почек и селезенки более чем в 2 раза, а из крови в 3 раза по сравнению с контролем (животными, не получавшими АСГ).As a result of oral infection with Staphylococcus aureus at a dose of 5 × 10 ⁶ CFU of 3-4-day-old mice, the death of animals was observed in 20-37.5% of cases. When plating on selective nutrient medium (MZHSA) positive or negative seeding was recorded. It was revealed that preliminary / prophylactic administration of ASH for 7 days was accompanied by a decrease in% of seeding from the liver, kidneys and spleen by more than 2 times, and from the blood by 3 times compared with the control (animals not receiving ASH).

В предварительных опытах с использованием для заражения мышат Гр^- культур бактерий (Е. coli, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae) также отмечалось резкое снижение высеваемости, особенно выраженное при посеве крови.In preliminary experiments using mice for infection Gy ^- bacterial cultures (E. coli, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumoniae) also observed a sharp decrease inoculation especially pronounced when blood cultures.

На мышатах-сосунках было показано положительное влияние АСГ на восстановление микрофлоры кишечника при дисбактериозе. Оральное введение мышатам с неспецифическим энтеритом, сопровождающимся диареей, АСГ (в дозе 100 мг/кг) в течение 3-х дней полностью прекращало диарею. Мышата начинали активно есть, больше двигаться. Продолжение введения АСГ до 10 дней способствовало улучшению количественных показателей микрофлоры кишечника. Так, например, у мышат, не получавших АСГ, содержание кишечной палочки (Е. coli), основного представителя нормальной микрофлоры кишечника, соответствовало 10⁴ КОЕ на 1 г фекалий. После 10-дневного курса АСГ (100 мг/кг, орально, ежедневно) содержание Е. coli увеличивалось до 10⁵ КОЕ на 1 г фекалий. Количественные показатели анаэробной флоры также приближались к норме. Уровень бифидобактерий (bifidobacterium) и лактобацилл (lactobacilli) увеличивался с 10⁴ КОЕ и 10⁷ КОЕ до 10⁵ КОЕ и 10⁸ КОЕ на 1 г фекалий соответственно. Следует отметить, что мышата, не получавшие АСГ, погибали в 80% случаев.The sucking mice showed a positive effect of ASH on the restoration of intestinal microflora in case of dysbiosis. Oral administration to mice with nonspecific enteritis, accompanied by diarrhea, ASH (at a dose of 100 mg / kg) for 3 days completely stopped diarrhea. Muscles began to eat actively, move more. Continued administration of ASH for up to 10 days contributed to an improvement in the quantitative indicators of intestinal microflora. So, for example, in mice that did not receive ASH, the content of E. coli, the main representative of the normal intestinal microflora, corresponded to 10 ⁴ CFU per 1 g of feces. After a 10-day course of ASH (100 mg / kg, orally, daily), the content of E. coli increased to 10 ⁵ CFU per 1 g of feces. Quantitative indicators of anaerobic flora also approached the norm. The levels of bifidobacteria (bifidobacterium) and lactobacilli (lactobacilli) increased from 10 ⁴ CFU and 10 ⁷ CFU to 10 ⁵ CFU and 10 ⁸ CFU per 1 g of feces, respectively. It should be noted that mice that did not receive ASH died in 80% of cases.

Пример 6.Example 6

Мышатам-сосункам на 8-9 день от рождения вводили 200 мг/кг ЦФ внутрибрюшинно. Через 4-5 дней у них отмечалась полная потеря волосяного покрова. Предварительное введение аскорбигена в дозе 100 мг/кг в течение 5 дней до инъекции ЦФ снижает выраженность (интенсивность) алопеции, а последующее введение аскорбигена способствует более интенсивному восстановлению волосяного покрова (Фиг. 1). Мышата полностью восстанавливали волосяной покров на 3-4 дня раньше животных контрольной группы (без введения аскорбигена).At 8–9 days from birth, 200 mg / kg CF was administered intraperitoneally to sucker mice. After 4-5 days, they had a complete loss of hairline. Preliminary administration of ascorbigen at a dose of 100 mg / kg for 5 days prior to CF injection reduces the severity (intensity) of alopecia, and subsequent administration of ascorbigen promotes more intensive restoration of the hairline (Fig. 1). The mice completely restored the hair cover 3-4 days earlier than the animals of the control group (without the introduction of ascorbigen).

Это было подтверждено морфологическими исследованиями. При микроскопическом изучении в группе положительного контроля (мыши, получившие ЦФ однократно внутрибрюшинно в дозе 100 мг/кг) в коже был найден ряд патологических изменений. Они выражались в истончении слоя эпидермиса, умеренном отеке и фрагментации коллегановых волокон дермы. В части волосяных фолликулов волос отсутствовал. При этом отдельные клетки матричного (камбиального) слоя и мышца, поднимающая волос, находились в состоянии атрофии.This has been confirmed by morphological studies. Microscopic examination in the positive control group (mice that received CF once intraperitoneally at a dose of 100 mg / kg) revealed a number of pathological changes in the skin. They were expressed in a thinning of the epidermis layer, moderate edema, and fragmentation of the colanic fibers of the dermis. In the part of the hair follicles, hair was absent. At the same time, individual cells of the matrix (cambial) layer and the muscle that lifts the hair were in a state of atrophy.

У мышей, получавших аскорбиген до и после введения ЦФ, эпидермис был без признаков повреждения, отек дермы отсутствовал, структура коллагеновых волокон дермы и придатков кожи без особенностей. Клетки матричного слоя волосяного фолликула и мышца, поднимающая волос, не отличались от нормы.In mice treated with ascorbigen before and after the administration of CF, the epidermis was without signs of damage, there was no edema of the dermis, and the structure of the collagen fibers of the dermis and appendages of the skin was unremarkable. The cells of the matrix layer of the hair follicle and the muscle that lifts the hair did not differ from the norm.

Таким образом, применение аскорбигена в изученных дозе и режиме предотвращало развитие атрофических изменений в коже новорожденных мышей, возникающих под влиянием ЦФ.Thus, the use of ascorbigen in the studied dose and regimen prevented the development of atrophic changes in the skin of newborn mice that occur under the influence of CF.

В целом, представленные материалы подтверждают преимущества заявленного способа, а именно: возможность повышения неспецифической резистентности к инфекционным и токсическим агентам, позволяющего уменьшить риск развития тяжелого заболевания и ускорить выздоровление больных.In general, the presented materials confirm the advantages of the claimed method, namely: the possibility of increasing nonspecific resistance to infectious and toxic agents, which reduces the risk of developing a serious illness and accelerate the recovery of patients.

Источники информацииSources of information

1. Диксон М. и Уэбб Э. Ферменты. М.: Мир, 1966, с.816.1. Dickson M. and Webb E. Enzymes. M .: Mir, 1966, p. 816.

2. Добрица В.П. и др. Современные иммуномодуляторы для клинического применения. Руководство для врачей. СПб.: Политехника, 2001, с.251 (прототип).2. Dobritsa V.P. et al. Modern immunomodulators for clinical use. A guide for doctors. St. Petersburg: Polytechnic, 2001, p.251 (prototype).

3. Кравченко Л.В., Авреньева Л.И., Гусева Г.В., Поздняков А.Л. и Тутельян В.А, БЭБиМ., 2001, т.131, с.544-547.3. Kravchenko L.V., Avreneva L.I., Guseva G.V., Pozdnyakov A.L. and Tutelyan V.A., BEBiM., 2001, v. 131, p. 544-547.

4. Муханов В.И., Ярцева И.В, Кикоть B.C., Володин Ю.Ю., Кустова И.Л., Лесная Н.А., Софьина З.П., Преображенская М.Н. Изучение аскорбигена и его производных. Биоорганическая химия, 1984, т. 10, №4, №6, с.554-559.4. Mukhanov V.I., Yartseva I.V., Kikot B.C., Volodin Yu.Yu., Kustova I.L., Lesnaya N.A., Sofyina Z.P., Preobrazhenskaya M.N. The study of ascorbigen and its derivatives. Bioorganic chemistry, 1984, v. 10, No. 4, No. 6, pp. 544-559.

5. Преображенская М.Н., Королев А.М.. Индольные соединения в овощах семейства крестоцветных. Биоорганическая химия, 2000, т.26, №2, с.97-110.5. Preobrazhenskaya MN, Korolev AM. Indole compounds in cruciferous vegetables. Bioorganic chemistry, 2000, vol. 26, No. 2, pp. 97-110.

6. Blijlevens N.M., Donnelly J.P. and B.E. de Pauw, Clin. Microb. Infect., 2001, v.7, suppl. 4, p.47.6. Blijlevens N.M., Donnelly J.P. and B.E. de Pauw, Clin. Microb. Infect., 2001, v. 7, suppl. 4, p. 47.

7. Bonnesen C., Eggleston I.M. and Hayes J.D., Cancer Res., 2001., v.61, pp. 6120-6130.7. Bonnesen C., Eggleston I.M. and Hayes J. D., Cancer Res., 2001., v. 61, pp. 6120-6130.

8. Boyd J.N., Babish J.G. and Stoewsand G.S., Food Chem., Toxicol., 1982, v.2, pp. 47-50.8. Boyd J.N., Babish J.G. and Stoewsand G. S., Food Chem., Toxicol., 1982, v. 2, pp. 47-50.

9. Bramwell В., Ferguson S., Scarlett N. and Macintosh A., Altem. Med. Rev., 2000, v.5, pp. 455-462.9. Bramwell B., Ferguson S., Scarlett N. and Macintosh A., Altem. Med. Rev. 2000, v.5, pp. 455-462.

10. Ettlinger M.G., Dateo G.P., Harrison B.W., Mabry T.J., Thompson C.P., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1961, v.47, pp. 1875-1880.10. Ettlinger M.G., Dateo G.P., Harrison B.W., Mabry T.J., Thompson C.P., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1961, v. 47, pp. 1875-1880.

11. Graham S., Dayal H., Swanson M., Mittelman A. and Wilkinson G., J. Nat. Cancer Inst., 1978, v.61, p.p. 709-714.11. Graham S., Dayal H., Swanson M., Mittelman A. and Wilkinson G., J. Nat. Cancer Inst., 1978, v. 61, p.p. 709-714.

12. Kiss G. and Neukom H., Helv Chim. Acta, 1966, v.49, pp. 989-992.12. Kiss G. and Neukom H., Helv Chim. Acta, 1966, v. 49, pp. 989-992.

13. Preobrazhenskaya M.N., Bukhman V.M., Korolev A.M., Efimov S.A., Pharmacol. & Ther., 1994, v.60, pp. 301-313.13. Preobrazhenskaya M.N., Bukhman V.M., Korolev A.M., Efimov S.A., Pharmacol. & Ther., 1994, v. 60, pp. 301-313.

14. Prochaska Z., Sanda V. and Sorm F., Coil. Czech. Chem. Commun., 1957, v.22, p.333.14. Prochaska Z., Sanda V. and Sorm F., Coil. Czech Chem. Commun., 1957, v. 22, p. 333.

15. Sartori S., Trevisani L., Nielsen I., Tassinari D., Panzini I., Abbasciano V., J. Clin. Oncol., 2000, v.l8, p.463.15. Sartori S., Trevisani L., Nielsen I., Tassinari D., Panzini I., Abbasciano V., J. Clin. Oncol., 2000, v.l8, p. 463.

16. Sepkovic D.W., Bradlow H.L., Michnovicz J., Murtezani S., Levy I. and Osbome M.P., Steroids, 1994, v.59, pp. 318-323.16. Sepkovic D.W., Bradlow H.L., Michnovicz J., Murtezani S., Levy I. and Osbome M.P., Steroids, 1994, v. 59, pp. 318-323.

17. Stephensen P.U., Bonnesen C., Schaldach C., Andersen O., Bjeldanes L.F. and Vang O., Nutr. Cancer, 2000, v.36. pp. 112-121.17. Stephensen P.U., Bonnesen C., Schaldach C., Andersen O., Bjeldanes L.F. and Vang O., Nutr. Cancer, 2000, v. 36. pp. 112-121.

18. Stoewsand G.S., Babish J.B. and Wimberly B.C., J. Environ Path Toxic., 1978, v.2, pp. 399-406.18. Stoewsand G.S., Babish J.B. and Wimberly B.C., J. Environ Path Toxic., 1978, v. 2, pp. 399-406.

19. Wattenberg L.W., Cancer Res., 1983, v.43, (Suppl.), pp. 2448s-2453s.19. Wattenberg L.W., Cancer Res., 1983, v. 43, (Suppl.), Pp. 2448s-2453s.

20. Wattenberg L.W., Loub W.D., Lam L.K. and Speier J., Fed. Proc., 1975, v.35, pp. 1327-1331.20. Wattenberg L.W., Loub W. D., Lam L.K. and Speier J., Fed. Proc., 1975, v. 35, pp. 1327-1331.

Claims (4)

1. Способ повышения неспецифической резистентности организма, включающий введение лекарственного препарата, отличающийся тем, что в качестве лекарственного препарата используют аскорбиген, который вводят курсами в дозе 10 мг/кг ежедневно в течение 5-30 дней.1. A method of increasing the nonspecific resistance of an organism, comprising administering a drug, characterized in that ascorbigen is used as a drug, which is administered in courses at a dose of 10 mg / kg daily for 5-30 days. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что аскорбиген вводят после окончания курса моно- или полихимиотерапии цитотоксическими препаратами.2. The method according to claim 1, characterized in that ascorbigen is administered after the course of mono- or polychemotherapy with cytotoxic drugs. 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что аскорбиген вводят при бактериальной инфекции.3. The method according to claim 1, characterized in that ascorbigen is administered for bacterial infection. 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что аскорбиген вводят при аллопеции, вызванной цитотоксическими препаратами.4. The method according to claim 1, characterized in that ascorbigen is administered in case of alopecia caused by cytotoxic drugs.

Images