RU2022104485A - Антитела, связывающиеся с gprc5d - Google Patents

Claims (50)

1. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула, содержащая (а) первый антигенсвязывающий фрагмент, который связывается с первым антигеном,

причем первый антиген представляет собой GPRC5D, а первый антигенсвязывающий фрагмент содержит

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую определяющую комплементарность область тяжелой цепи (HCDR) 1 с SEQ ID NO: 83, HCDR 2 с SEQ ID NO: 84 и HCDR 3 с SEQ ID NO: 86, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую определяющую комплементарность область легкой цепи (LCDR) 1 с SEQ ID NO: 87, LCDR 2 с SEQ ID NO: 88 и LCDR 3 с SEQ ID NO: 89;

(ii) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую определяющую комплементарность область тяжелой цепи (HCDR) 1 с SEQ ID NO: 83, HCDR 2 с SEQ ID NO: 85 и HCDR 3 с SEQ ID NO: 86, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую определяющую комплементарность область легкой цепи (LCDR) 1 с SEQ ID NO: 87, LCDR 2 с SEQ ID NO: 88 и LCDR 3 с SEQ ID NO: 89,

(iii) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую определяющую комплементарность область тяжелой цепи (HCDR) 1 с SEQ ID NO: 90, HCDR 2 с SEQ ID NO: 91 и HCDR 3 с SEQ ID NO: 93, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую определяющую комплементарность область легкой цепи (LCDR) 1 с SEQ ID NO: 94, LCDR 2 с SEQ ID NO: 95 и LCDR 3 с SEQ ID NO: 97;

(iv) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую определяющую комплементарность область тяжелой цепи (HCDR) 1 с SEQ ID NO: 90, HCDR 2 с SEQ ID NO: 91 и HCDR 3 с SEQ ID NO: 93, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую определяющую комплементарность область легкой цепи (LCDR) 1 с SEQ ID NO: 94, LCDR 2 с SEQ ID NO: 96 и LCDR 3 с SEQ ID NO: 97; или

(v) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую определяющую комплементарность область тяжелой цепи (HCDR) 1 с SEQ ID NO: 90, HCDR 2 с SEQ ID NO: 92 и HCDR 3 с SEQ ID NO: 93, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую определяющую комплементарность область легкой цепи (LCDR) 1 с SEQ ID NO: 94, LCDR 2 с SEQ ID NO: 95 и LCDR 3 с SEQ ID NO: 97; и

(б) второй антигенсвязывающий фрагмент, который связывается со вторым антигеном, причем второй антиген представляет собой CD3, а второй антигенсвязывающий фрагмент содержит

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую определяющую комплементарность область тяжелой цепи (HCDR) 1 с SEQ ID NO: 29, HCDR 2 с SEQ ID NO: 30 и HCDR 3 с SEQ ID NO: 31, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую определяющую комплементарность область легкой цепи (LCDR) 1 с SEQ ID NO: 32, LCDR 2 с SEQ ID NO: 33 и LCDR 3 с SEQ ID NO: 34;

(i) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую определяющую комплементарность область тяжелой цепи (HCDR) 1 с SEQ ID NO: 98, HCDR 2 с SEQ ID NO: 99 и HCDR 3 с SEQ ID NO: 100, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую определяющую комплементарность область легкой цепи (LCDR) 1 с SEQ ID NO: 101, LCDR 2 с SEQ ID NO: 102 и LCDR 3 с SEQ ID NO: 103; или

(ii) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую определяющую комплементарность область тяжелой цепи (HCDR) 1 с SEQ ID NO: 106, HCDR 2 с SEQ ID NO: 107 и HCDR 3 с SEQ ID NO: 108, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую определяющую комплементарность область легкой цепи (LCDR) 1 с SEQ ID NO: 109, LCDR 2 с SEQ ID NO: 110 и LCDR 3 с SEQ ID NO: 111.

2. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по п. 1,

(i) в которой VH первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной последовательности SEQ ID NO: 13, и в которой VL первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 14; или

(ii) в которой VH первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной последовательности SEQ ID NO: 15, и в которой VL первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 16; или

(iii) в которой VH первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной последовательности SEQ ID NO: 48, и в которой VL первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 53; или

(iv) в которой VH первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной последовательности SEQ ID NO: 49, и в которой VL первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 52; или

(v) в которой VH первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной последовательности SEQ ID NO: 57, и в которой VL первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 64; или

(vi) в которой VH первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной последовательности SEQ ID NO: 58, и в которой VL первого антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 63.

3. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по п. 1 или 2, в которой VH второго антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность,

(i) которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 35, a VL второго антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 36;

(ii) которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 104, a VL второго антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 105; или

(iii) которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 112, a VL второго антигенсвязывающего фрагмента содержит аминокислотную последовательность, которая является по меньшей мере на около 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 113.

4. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-3, в которой первый и/или второй антигенсвязывающий фрагмент представляет собой молекулу Fab.

5. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-4, в которой второй антигенсвязывающий фрагмент представляет собой молекулу Fab, причем вариабельные домены VL и VH или константные домены CL и СН1, в частности вариабельные домены VL и VH, легкой цепи Fab и тяжелой цепи Fab замещены друг другом.

6. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-5, в которой первый антигенсвязывающий фрагмент представляет собой молекулу Fab, причем в константном домене аминокислота в позиции 124 независимо замещена лизином (K), аргинином (R) или гистидином (Н) (нумерация в соответствии с Kabat) и аминокислота в позиции 123 независимо замещена лизином (K), аргинином (R) или гистидином (Н) (нумерация в соответствии с Kabat), а в константном домене СН1 аминокислота в позиции 147 независимо замещена глутаминовой кислотой (Е) или аспарагиновой кислотой (D) (нумерация в соответствии с индексом EU по Kabat) и аминокислота в позиции 213 независимо замещена глутаминовой кислотой (Е) или аспарагиновой кислотой (D) (нумерация в соответствии с индексом EU по Kabat).

7. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-6, в которой первый и второй антигенсвязывающие фрагменты слиты друг с другом, необязательно посредством пептидного линкера.

8. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-7, в которой каждый из первого и второго антигенсвязывающих фрагментов представляет собой молекулу Fab и в которой (i) второй антигенсвязывающий фрагмент слит на С-конце тяжелой цепи Fab с N-концом тяжелой цепи Fab первого антигенсвязывающего фрагмента или (ii) первый антигенсвязывающий фрагмент слит на С-конце тяжелой цепи Fab с N-концом тяжелой цепи Fab второго антигенсвязывающего фрагмента.

9. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-8, содержащая третий антигенсвязывающий фрагмент.

10. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по п. 9, в которой третий антигенсвязывающий фрагмент является идентичным первому антигенсвязывающему фрагменту.

11. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-10, содержащая Fc-домен, состоящий из первой и второй субъединиц.

12. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по п. 11, в которой каждый из первого, второго и, в случае наличия, третьего антигенсвязывающего фрагмента представляет собой молекулу Fab; и в которой (i) второй антигенсвязывающий фрагмент слит на С-конце тяжелой цепи Fab с N-концом тяжелой цепи Fab первого антигенсвязывающего фрагмента, а первый антигенсвязывающий фрагмент слит на С-конце тяжелой цепи Fab с N-концом первой субъединицы Fc-домена, или (ii) первый антигенсвязывающий фрагмент слит на С-конце тяжелой цепи Fab с N-концом тяжелой цепи Fab второго антигенсвязывающего фрагмента, а второй антигенсвязывающий фрагмент слит на С-конце тяжелой цепи Fab с N-концом первой субъединицы Fc-домена; и в которой третий антигенсвязывающий фрагмент, в случае наличия, слит на С-конце тяжелой цепи Fab с N-концом второй субъединицы Fc-домена.

13. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по п. 11 или 12, в которой Fc-домен представляет собой Fc-домен IgG.

14. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по п. 13, в которой Fc-домен представляет собой Fc-домен IgG!.

15. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 11-14, в которой Fc-домен представляет собой Fc-домен человека.

16. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 11-15, в которой аминокислотный остаток в СН3-домене первой субъединицы Fc-домена замещен аминокислотным остатком, имеющим больший объем боковой цепи, с созданием, таким образом, выпуклости в СН3-домене первой субъединицы, которая может располагаться в полости в СН3-домене второй субъединицы, а аминокислотный остаток в СН3-домене второй субъединицы Fc-домена замещен аминокислотным остатком, имеющим меньший объем боковой цепи, с созданием, таким образом, полости в СН3-домене второй субъединицы, в которой может располагаться выпуклость в СН3-домене первой субъединицы.

17. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 11-16, в которой Fc-домен содержит одну или более аминокислотных замен, которые уменьшают связывание с Fc-рецептором и/или эффекторную функцию.

18. Один или более выделенных полинуклеотидов, кодирующих биспецифическую антигенсвязывающую молекулу по любому из пп. 1 17.

19. Один или более векторов, в частности экспрессионных векторов, содержащих полинуклеотид(ы) по п. 18.

20. Клетка-хозяин, содержащая полинуклеотид(ы) по п. 18 или вектор(ы) по п. 19.

21. Способ получения биспецифической антигенсвязывающей молекулы, которая связывается с GPRC5D, включающий этапы а) культивирования клетки-хозяина по п. 20 в условиях, подходящих для экспрессии биспецифической антигенсвязывающей молекулы, и б) необязательно, выделения биспецифической антигенсвязывающей молекулы.

22. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула, которая связывается с GPRC5D, полученная способом по п. 21.

23. Фармацевтическая композиция, содержащая биспецифическую антигенсвязывающую молекулу по любому из пп. 1-17 или п. 22 и фармацевтически приемлемый носитель.

24. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-17 или п. 22 или фармацевтическая композиция по п. 23 для применения в качестве лекарственного средства.

25. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула по любому из пп. 1-17 или п. 22 или фармацевтическая композиция по п. 23 для применения в лечении заболевания.

26. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула или фармацевтическая композиция по п. 25, причем заболевание представляет собой рак или аутоиммунное заболевание.

27. Биспецифическая антигенсвязывающая молекула или фармацевтическая композиция по п. 25, причем заболевание представляет собой множественную миелому.

28. Применение биспецифической антигенсвязывающей молекулы по любому из пп. 1-17 или п. 22 в производстве лекарственного средства для лечения заболевания.

29. Способ лечения заболевания у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества композиции, содержащей биспецифическую антигенсвязывающую молекулу по любому из пп. 1-17 или п. 22 в фармацевтически приемлемой форме.

30. Применение по п. 28 или способ по п. 29, причем указанное заболевание представляет собой рак или аутоиммунное заболевание.

31. Применение по п. 28 или способ по п. 29, причем указанное заболевание представляет собой множественную миелому.