RU2017129911A - Биосенсорная система для быстрого обнаружения определяемых компонентов - Google Patents
Биосенсорная система для быстрого обнаружения определяемых компонентов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2017129911A RU2017129911A RU2017129911A RU2017129911A RU2017129911A RU 2017129911 A RU2017129911 A RU 2017129911A RU 2017129911 A RU2017129911 A RU 2017129911A RU 2017129911 A RU2017129911 A RU 2017129911A RU 2017129911 A RU2017129911 A RU 2017129911A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- signal
- biosensor
- antibody
- cell
- component
- Prior art date
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 33
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 22
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 22
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims 17
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims 17
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims 15
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims 15
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 claims 11
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims 8
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 claims 8
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 6
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 claims 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims 5
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims 4
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims 3
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 claims 3
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims 3
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims 3
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 claims 3
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 claims 3
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 claims 3
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 claims 3
- 230000004044 response Effects 0.000 claims 3
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 claims 2
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 claims 2
- 102000009438 IgE Receptors Human genes 0.000 claims 2
- 108010073816 IgE Receptors Proteins 0.000 claims 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 claims 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 claims 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims 2
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 claims 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 claims 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 claims 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims 2
- 230000008447 perception Effects 0.000 claims 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims 2
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 claims 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/70535—Fc-receptors, e.g. CD16, CD32, CD64 (CD2314/705F)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/315—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Streptococcus (G), e.g. Enterococci
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
- C07K14/36—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Actinomyces; from Streptomyces (G)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/12—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from bacteria
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6897—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids involving reporter genes operably linked to promoters
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
- G01N33/5047—Cells of the immune system
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/554—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being a biological cell or cell fragment, e.g. bacteria, yeast cells
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56911—Bacteria
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/20—Fusion polypeptide containing a tag with affinity for a non-protein ligand
- C07K2319/22—Fusion polypeptide containing a tag with affinity for a non-protein ligand containing a Strep-tag
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Virology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Claims (78)
1. Система быстрого обнаружения определяемых компонентов, содержащая:
(a) живую, генномодифицированную биосенсорную клетку, причем живая генномодифицированная биосенсорная клетка получена из клеточного компонента иммунной системы млекопитающих;
(b) репортерный белок, причем репортерный белок встроен внутрь и экспрессируется живой генномодифицированной биосенсорной клеткой, и при этом репортерный белок испускает поддающийся обнаружению сигнал в ответ на определенные, заранее заданные цитозольные изменения в живой генномодифицированной биосенсорной клетке;
(c) путь передачи сигнала, встроенный или естественным образом присутствующий в живой генномодифицированной биосенсорной клетке, причем путь передачи сигнала контролирует биологический процесс внутри цитозоля живой генномодифицированной биосенсорной клетки, и при этом биологический процесс, когда он происходит, вызывает испускание репортерным белком поддающегося обнаружению сигнала;
(d) по меньшей мере один тип детекторной молекулы, причем каждая детекторная молекула адаптирована для связывания с конкретным определяемым компонентом;
(e) по меньшей мере один определяемый компонент, причем этот по меньшей мере один определяемый компонент связывается с детекторной молекулой, которая является специфичной в отношении этого определяемого компонента;
(f) множество трансмембранных элементов, передающих сигнал, не являющихся антителами, экспрессируемые живой генномодифицированной биосенсорной клеткой, причем каждый элемент, передающий сигнал, адаптирован для восприятия детекторной молекулы; и
(g) при этом при связывании достаточного количества определяемых компонентов с достаточным количеством детекторных молекул, которые сами по себе связаны с трансмембранными элементами, передающими сигнал, не являющимися антителами, на поверхности биосенсорной клетки происходит агрегация элементов, передающих сигнал, путь передачи сигнала активируется, происходит биологический процесс и репортерный белок испускает обнаруживаемый сигнал.
2. Система по п. 1, отличающаяся тем, что живая генномодифицированная клетка получена из В-клетки или Т-клетки, репортерный белок является экворином, путь передачи сигнала включает повышение уровня внутриклеточного кальция, детекторная молекула представляет собой антитело, которое связывается с пищевым патогеном, определяемый компонент является пищевым патогеном, а множество элементов, передающих сигнал, адаптировано для восприятия антитела посредством связывания с участком бактериального белка, связывающегося с IgG.
3. Система по п. 1, отличающаяся тем, что биосенсорная клетка получена из В-клетки или Т-клетки.
4. Система по п. 1, отличающаяся тем, что репортерный белок является экворином, а поддающийся обнаружению сигнал представляет собой вспышку синего света.
5. Система по п. 1, отличающаяся тем, что биологический процесс, контролируемый путем передачи сигнала, дополнительно включает повышение уровня внутриклеточного кальция.
6. Система по п. 1, отличающаяся тем, что элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, является химерным слитым белком, экспрессируемым биосенсорной клеткой, причем этот химерный белок дополнительно содержит:
(a) по меньшей мере один компонент белка, который адаптирован для связывания с по меньшей мере одним типом детекторной молекулы; а также
(b) по меньшей мере один компонент рецепторного комплекса, обычно экспрессируемого на поверхности того типа иммуноцитов, из которого была получена биосенсорная клетка.
7. Система по п. 6, отличающаяся тем, что по меньшей мере один компонент белка, который адаптирован для связывания с по меньшей мере одним типом детекторной молекулы, получен из бактериального белка, связывающегося с антителом.
8. Система по п. 6, отличающаяся тем, что по меньшей мере один компонент белка, который адаптирован для связывания с детекторной молекулой по меньшей мере одного типа, представляет собой домен связывания с антителом, полученный из рецепторного белка FcR или другого рецепторного белка.
9. Система по п. 6, отличающаяся тем, что по меньшей мере один компонент рецепторного комплекса, обычно экспрессируемый на поверхности иммуноцита, представляет собой IgM; Igα/β; IgE; CD19; CD3ζ или их комбинации.
10. Система по п. 1, отличающаяся тем, что элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, кодируется последовательностью ДНК, обладающей по меньшей мере 95% идентичностью с последовательностью ДНК, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11 и 17.
11. Система по п. 1, отличающаяся тем, что элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, является химерным слитым белком, аминокислотная последовательность которого выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12 и 18.
12. Система по п. 1, отличающаяся тем, что по меньшей мере одна детекторная молекула представляет собой растворимое антитело.
13. Система по п. 1, отличающаяся тем, что по меньшей мере одна детекторная молекула представляет собой растворимый IgG.
14. Система по п. 1, отличающаяся тем, что определяемый компонент является пищевым инфекционным агентом.
15. Система по п. 1, отличающаяся тем, что определяемый компонент представляет собой бактерию или вирус.
16. Способ обнаружения определяемого компонента, включающий приведение образца, содержащего определяемый компонент, в контакт с системой по п. 1, и обнаружение определяемого компонента при испускании сигнала репортерным белком.
17. Способ получения системы по п. 1, включающий трансфекцию или трансформацию иммуноцита одним или несколькими полинуклеотидами, кодирующими элементы (b), (с) и (f) системы.
18. Система быстрого обнаружения определяемых компонентов, содержащая:
(а) живую генномодифицированную биосенсорную клетку, причем живая генномодифицированная биосенсорная клетка получена из клеточного компонента иммунной системы млекопитающего, и при этом живая генномодифицированная биосенсорная клетка экспрессирует множество рецепторных молекул по меньшей мере одного заданного типа на своей поверхности;
(b) репортерный белок, причем репортерный белок встроен внутрь и экспрессируется живой генномодифицированной биосенсорной клеткой, и при этом репортерный белок испускает поддающийся обнаружению сигнал в ответ на определенные, заранее заданные цитозольные изменения в живой генномодифицированной биосенсорной клетке;
(c) путь передачи сигнала, встроенный или естественным образом присутствующий в живой генномодифицированной биосенсорной клетке, причем путь передачи сигнала контролирует биологический процесс в цитозоле живой генномодифицированной биосенсорной клетки, и при этом биологический процесс, когда он происходит, вызывает испускание репортерным белком поддающегося обнаружению сигнала;
(d) по меньшей мере один тип детекторной молекулы, причем каждая детекторная молекула адаптирована для связывания с конкретным определяемым компонентом;
(e) по меньшей мере один определяемый компонент, причем этот по меньшей мере один определяемый компонент связывается с детекторной молекулой, которая является специфичной в отношении этого определяемого компонента;
(f) множество растворимых элементов, не являющихся антителами, передающих сигнал, причем каждый растворимый элемент, передающий сигнал, адаптирован для связывания с рецепторной молекулой на поверхности живой генномодифицированной биосенсорной клетки и детекторной молекулой; и
(g) при этом при связывании достаточного количества определяемого компонента с достаточным количеством детекторных молекул с достаточным количеством элементов, не являющихся антителами, передающих сигнал, которые сами по себе связаны с рецепторными молекулами на клеточной поверхности, происходит агрегация рецепторных молекул, активируется путь передачи сигнала, происходит биологический процесс, и репортерный белок испускает обнаруживаемый сигнал.
19. Система по п. 15, отличающаяся тем, что биосенсорная клетка получена из тучной клетки.
20. Система по п. 18, отличающаяся тем, что по меньшей мере один заранее определенный тип рецепторной молекулы, экспрессируемый на поверхности биосенсорной клетки, представляет собой FcεRI.
21. Система по п. 18, отличающаяся тем, что репортерный белок является экворином, а поддающийся обнаружению сигнал представляет собой вспышку синего света.
22. Система по п. 18, отличающаяся тем, что биологический процесс, контролируемый путем передачи сигнала, дополнительно включает повышение уровня внутриклеточного кальция.
23. Система по п. 18, отличающаяся тем, что каждый элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, является растворимым химерным слитым белком, который содержит бактериальный домен связывания с IgG, слитый с константным доменом IgE с помощью линкера GSASGSG (SEQ ID NO: 19).
24. Система по п. 18, отличающаяся тем, что каждый элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, представляет собой растворимый химерный слитый белок, содержащий домен связывания с антителом FcyRI, слитый с константным доменом IgE с помощью линкера GSASGSG (SEQ ID NO: 19).
25. Система по п. 18, отличающаяся тем, что элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, кодируется последовательностью ДНК, обладающей по меньшей мере 95% идентичностью последовательности ДНК, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 13 и 15.
26. Система по п. 18, отличающаяся тем, что элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, представляет собой химерный слитый белок, аминокислотная последовательность которого выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 14 и 16.
27. Система по п. 18, отличающаяся тем, что по меньшей мере одна детекторная молекула представляет собой растворимое антитело.
28. Система по п. 18, отличающаяся тем, что по меньшей мере одна детекторная молекула является растворимым IgG.
29. Система по п. 18, отличающаяся тем, что определяемый компонент является пищевым инфекционным агентом.
30. Система по п. 18, отличающаяся тем, что определяемый компонент представляет собой бактерию или вирус.
31. Способ детектирования определяемого компонента, включающий приведение образца, содержащего определяемый компонент, в контакт с системой по п. 18 и обнаружение определяемого компонента при испускании сигнала репортерным белком.
32. Способ получения системы по п. 18, включающий трансфекцию или трансформацию иммуноцита одним или несколькими полинуклеотидами, кодирующими элементы (b), (с) и (f) системы.
33. Биосенсор для быстрого обнаружения определяемых компонентов, содержащий:
(a) живую генномодифицированную клетку, причем живая генномодифицированная клетка получена из иммуноцита;
(b) репортерный белок, причем репортерный белок встроен внутрь и экспрессируется иммуноцитом, и при этом репортерный белок испускает поддающийся обнаружению сигнал в ответ на определенные, заранее заданные цитозольные изменения в иммуноците;
(c) путь передачи сигнала, встроенный или естественным образом присутствующий внутри иммуноцита, причем путь передачи сигнала контролирует биологический процесс в цитозоле иммуноцита, и при этом биологический процесс, когда он происходит, вызывает испускание поддающегося обнаружению сигнала; а также
(d) множество элементов, не являющихся антителами, передающих сигнал, которые непосредственно связываются с определяемым компонентом в анализируемом образце или которые опосредованно связываются с определяемым компонентом в анализируемом образце через комплекс определяемого компонента и по меньшей мере одного антитела или другой детекторной молекулы, причем связанные элементы, не являющиеся антителами, передающие сигналы, в дальнейшем взаимодействуют с биосенсорной клеткой, чтобы прямо или косвенно активировать путь передачи сигнала.
34. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что дополнительно содержит множество рецепторных молекул по меньшей мере одного определенного типа, экспрессируемых на поверхности генномодифицированной клетки, причем по меньшей мере один заранее определенный тип рецепторной молекулы взаимодействует с путем передачи сигнала, и при этом по меньшей мере один заранее определенный тип рецепторной молекулы связывается с элементами, не являющимися антителами, передающими сигнал.
35. Биосенсор по п. 34, отличающийся тем, что по меньшей мере один заранее определенный тип рецепторных молекул, экспрессируемый на поверхности генномодифицированной клетки, представляет собой FcεRI.
36. Биосенсор по п. 33, дополнительно содержащий по меньшей мере одно экзогенное антитело или другую детекторную молекулу, адаптированную для взаимодействия с элементами, передающими сигнал, не являющимися антителами, причем по меньшей мере одно экзогенное антитело или другая детекторная молекула также адаптированы для связывания с конкретным определяемым компонентом.
37. Биосенсор по п. 36, отличающийся тем, что по меньшей мере одно экзогенное антитело является растворимым IgG.
38. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что иммуноцит является В-клеткой, Т-клеткой или тучной клеткой.
39. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что элементы, не являющиеся антителами, передающие сигнал, экспрессируются генномодифицированной клеткой в виде трансмембранных химерных слитых белков.
40. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что элементы, не являющиеся антителами, передающие сигнал, вырабатываются генномодифицированной клеткой, а затем выводятся из генномодифицированной клетки в виде растворимых слитых белков.
41. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что репортерный белок является экворином, а поддающийся обнаружению сигнал представляет собой вспышку синего света.
42. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что биологический процесс, контролируемый путем передачи сигнала, дополнительно включает повышение уровня внутриклеточного кальция.
43. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, представляет собой химерный слитый белок, который содержит:
(a) по меньшей мере один белковый компонент, который адаптирован для связывания с по меньшей мере одним типом детекторной молекулы; и
(b) по меньшей мере один компонент рецепторного комплекса, обычно экспрессируемого на поверхности того типа иммуноцитов, из которого получена живая генномодифицированная клетка.
44. Биосенсор по п. 43, отличающийся тем, что по меньшей мере один белковый компонент, который адаптирован для связывания с детекторной молекулой по меньшей мере одного типа, получен из бактериального белка, связывающегося с антителом.
45. Биосенсор по п. 43, отличающийся тем, что по меньшей мере один компонент белка, который адаптирован для связывания с детекторной молекулой по меньшей мере одного типа, представляет собой домен связывания с антителом, полученный из рецепторного белка FcR или другого рецепторного белка.
46. Биосенсор по п. 43, отличающийся тем, что по меньшей мере один компонент рецепторного комплекса, обычно экспрессируемый на поверхности живой генномодифицированной клетки, представляет собой IgM; Igα/β; IgE; CD19; CD3ζ или их комбинации.
47. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, кодируется последовательностью ДНК, обладающей по меньшей мере 95% идентичностью последовательности ДНК, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11 и 17.
48. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, является химерным слитым белком, аминокислотная последовательность которого выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12 и 18.
49. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что каждый элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, представляет собой растворимый химерный слитый белок, который содержит бактериальный домен связывания с IgG, слитый с константным доменом IgE с помощью линкера GSASGSG (SEQ ID NO: 19).
50. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что каждый элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, представляет собой растворимый химерный слитый белок, который содержит домен связывания с антителом FcyRI, слитый с константным доменом IgE с помощью линкера GSASGSG (SEQ ID NO: 19).
51. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, кодируется последовательностью ДНК, обладающей по меньшей мере 95% идентичностью последовательности ДНК, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 13 и 15.
52. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что элемент, не являющийся антителом, передающий сигнал, является химерным слитым белком, аминокислотная последовательность которого выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 14 и 16.
53. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что определяемый компонент является пищевым инфекционным агентом.
54. Биосенсор по п. 33, отличающийся тем, что определяемый компонент представляет собой бактерию или вирус.
55. Химерный слитый белок, аминокислотная последовательность которого выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12 и 18.
56. Химерный слитый белок, аминокислотная последовательность которого выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 14 и 16.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201562140920P | 2015-03-31 | 2015-03-31 | |
US62/140,920 | 2015-03-31 | ||
PCT/US2016/025219 WO2016161088A2 (en) | 2015-03-31 | 2016-03-31 | Biosensor system for the rapid detection of analytes |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2017129911A true RU2017129911A (ru) | 2019-05-06 |
RU2017129911A3 RU2017129911A3 (ru) | 2020-01-27 |
RU2717658C2 RU2717658C2 (ru) | 2020-03-24 |
Family
ID=57007336
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017129911A RU2717658C2 (ru) | 2015-03-31 | 2016-03-31 | Биосенсорная система для быстрого обнаружения определяемых компонентов |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
EP (5) | EP3404411A3 (ru) |
JP (1) | JP6828005B2 (ru) |
KR (1) | KR102540406B1 (ru) |
CN (1) | CN107429286A (ru) |
CA (1) | CA2982133C (ru) |
ES (1) | ES2893879T3 (ru) |
IL (1) | IL254687B2 (ru) |
RU (1) | RU2717658C2 (ru) |
WO (1) | WO2016161088A2 (ru) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10613083B2 (en) | 2016-12-22 | 2020-04-07 | Fundamental Solutions Corporation | Universal biosensor system for analyte detection |
JP2020507060A (ja) * | 2016-12-22 | 2020-03-05 | ファンダメンタル ソリューションズ コーポレーション | 分析物検出のためのユニバーサルバイオセンサーシステム |
WO2019076262A1 (zh) * | 2017-10-18 | 2019-04-25 | 深圳华大生命科学研究院 | 检测目标分子化合物的生物感应器及包含该生物感应器的*** |
EP3765093A4 (en) * | 2018-03-15 | 2021-12-08 | Fundamental Solutions Corporation | PROGRAMMABLE IMMUNOCYTE RECEPTOR COMPLEX SYSTEM |
WO2020084620A1 (en) * | 2018-10-25 | 2020-04-30 | The State Of Israel, Ministry Of Agriculture & Rural Development, Agricultural Research Organization (Aro) (Volcani Center) | Means and method for point-of-care analysis of liquid samples |
CN113214374B (zh) * | 2020-02-06 | 2022-08-26 | 深圳华大基因股份有限公司 | 一种包虫病新抗原Cystatin蛋白 |
CN113050547B (zh) * | 2021-03-04 | 2022-03-25 | 宏晶微电子科技股份有限公司 | 测试激励生成方法、测试方法、电子设备、存储介质 |
KR102625649B1 (ko) | 2022-12-13 | 2024-01-17 | 주식회사 다이아슈어바이오 | 핵산 증폭 기술에서 신호전달물질을 이용한 핵산의 전기화학적 검출방법 |
KR20240094777A (ko) | 2022-12-16 | 2024-06-25 | 주식회사 다이아슈어바이오 | 생물학적 분석물의 성분 검출을 위한 효소-기질 반응 기반의 바이오센서 및 이를 이용한 검출방법 |
Family Cites Families (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20020168367A1 (en) * | 2000-04-28 | 2002-11-14 | Planet Biotechnology Incorporated | Novel immunoadhesins for treating and preventing viral and bacterial diseases |
US20020172673A1 (en) | 2000-09-06 | 2002-11-21 | Pharmexa A/S | Method for down-regulating IgE |
WO2008048300A2 (en) * | 2005-11-30 | 2008-04-24 | Massachusetts Institute Of Technology | Pathogen detection biosensor |
ATE506452T1 (de) * | 2001-02-07 | 2011-05-15 | Massachusetts Inst Technology | Optoelektronisches detektionssystem |
US8216797B2 (en) | 2001-02-07 | 2012-07-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Pathogen detection biosensor |
SK286037B6 (sk) * | 2001-05-09 | 2008-01-07 | Axis-Shield Asa | Testovací prístroj, testovacia náplň, testovacie zariadenie, jeho použitie a spôsob testovania |
US20050202442A1 (en) * | 2003-12-15 | 2005-09-15 | Morris David W. | Novel therapeutic targets in cancer |
AU2003239506B2 (en) * | 2002-05-20 | 2007-08-02 | Northrop Grumman Corporation | Automatic point source biological agent detection system |
US20070003561A1 (en) * | 2003-07-08 | 2007-01-04 | Sorensen Anders P | Binding member towards pneumococcus surface adhesin a protein (psaa) |
WO2007019376A2 (en) * | 2005-08-03 | 2007-02-15 | Rq Bioscience, Inc. | Methods and compositions for diagnosis of iga-and igm-mediated kidney diseases |
GB0614780D0 (en) | 2006-07-25 | 2006-09-06 | Ucb Sa | Biological products |
LT2519543T (lt) * | 2009-12-29 | 2016-10-10 | Emergent Product Development Seattle, Llc | Heterodimerus rišantys baltymai ir jų panaudojimas |
TW201302971A (zh) | 2011-06-28 | 2013-01-16 | Murata Manufacturing Co | 絕緣性接著層組合物、蓄電裝置用元件、蓄電裝置、及其等之製造方法 |
CN107266584B (zh) * | 2011-07-29 | 2022-05-13 | 宾夕法尼亚大学董事会 | 转换共刺激受体 |
US9023640B2 (en) * | 2011-12-13 | 2015-05-05 | Fundamental Solutions Corporation | Device for rapid detection of infectious agents |
WO2013116287A1 (en) * | 2012-01-31 | 2013-08-08 | Genentech, Inc. | Anti-ig-e m1' antibodies and methods using same |
US20140273020A1 (en) * | 2013-03-13 | 2014-09-18 | Applied Biomolecular Technologies | System for rapidly detecting infectious agents using a hybridoma-based biosensor |
WO2014160235A1 (en) * | 2013-03-13 | 2014-10-02 | Applied Biomolecular Technologies | Method for signal amplification in biosensor-based system for rapidly detecting infectious agents |
-
2016
- 2016-03-31 EP EP18180724.9A patent/EP3404411A3/en active Pending
- 2016-03-31 ES ES18180720T patent/ES2893879T3/es active Active
- 2016-03-31 CA CA2982133A patent/CA2982133C/en active Active
- 2016-03-31 EP EP18180720.7A patent/EP3404410B1/en active Active
- 2016-03-31 KR KR1020177031601A patent/KR102540406B1/ko active IP Right Grant
- 2016-03-31 EP EP18180727.2A patent/EP3404412A3/en active Pending
- 2016-03-31 WO PCT/US2016/025219 patent/WO2016161088A2/en active Application Filing
- 2016-03-31 CN CN201680016878.1A patent/CN107429286A/zh active Pending
- 2016-03-31 IL IL254687A patent/IL254687B2/en unknown
- 2016-03-31 EP EP18209257.7A patent/EP3470527A1/en not_active Withdrawn
- 2016-03-31 EP EP16774179.2A patent/EP3277831A4/en active Pending
- 2016-03-31 JP JP2018502612A patent/JP6828005B2/ja active Active
- 2016-03-31 RU RU2017129911A patent/RU2717658C2/ru active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IL254687B2 (en) | 2024-01-01 |
EP3404412A3 (en) | 2019-02-13 |
RU2017129911A3 (ru) | 2020-01-27 |
CA2982133A1 (en) | 2016-10-06 |
EP3404410B1 (en) | 2021-07-14 |
EP3404411A2 (en) | 2018-11-21 |
KR102540406B1 (ko) | 2023-06-09 |
CN107429286A (zh) | 2017-12-01 |
ES2893879T3 (es) | 2022-02-10 |
IL254687A0 (en) | 2017-11-30 |
CA2982133C (en) | 2022-05-03 |
EP3404412A2 (en) | 2018-11-21 |
WO2016161088A3 (en) | 2016-11-24 |
EP3404411A3 (en) | 2019-02-13 |
JP2018516590A (ja) | 2018-06-28 |
EP3277831A2 (en) | 2018-02-07 |
JP6828005B2 (ja) | 2021-02-10 |
EP3470527A1 (en) | 2019-04-17 |
EP3404410A2 (en) | 2018-11-21 |
WO2016161088A2 (en) | 2016-10-06 |
EP3277831A4 (en) | 2019-01-09 |
KR20170132861A (ko) | 2017-12-04 |
EP3404410A3 (en) | 2019-01-30 |
IL254687B1 (en) | 2023-09-01 |
RU2717658C2 (ru) | 2020-03-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2017129911A (ru) | Биосенсорная система для быстрого обнаружения определяемых компонентов | |
Yousefi et al. | Optogenetic control shows that kinetic proofreading regulates the activity of the T cell receptor | |
EA201590216A1 (ru) | Способы оценки пригодности трансдуцированных t-клеток для введения | |
CN103620405B (zh) | 全面单克隆抗体产生 | |
IL275270A (en) | Recombinant scavenger cell surface proteins | |
Ling et al. | Structural constraints for the binding of short peptides to claudin-4 revealed by surface plasmon resonance | |
JP2012531897A5 (ru) | ||
AU2014232225A1 (en) | Protocol for identifying and isolating antigen-specific B cells and producing antibodies to desired antigens | |
van der Wal et al. | Bead-based suspension array for simultaneous detection of antibodies against the Rift Valley fever virus nucleocapsid and Gn glycoprotein | |
CN101082624B (zh) | 检测阪崎肠杆菌的酶联免疫吸附测试方法及其中所用的抗体 | |
JP2018528786A5 (ru) | ||
US9458244B2 (en) | Single chain multivalent binding protein compositions and methods | |
JP2016528486A5 (ru) | ||
Makino et al. | Analysis of peripheral B cells and autoantibodies against the anti-nicotinic acetylcholine receptor derived from patients with myasthenia gravis using single-cell manipulation tools | |
CA3038919A1 (en) | An engineered multi-component system for identification and characterisation of t-cell receptors, t-cell antigens and their functional interaction | |
HRP20210301T1 (hr) | Djelotvorna selektivnost rekombinantnih proteina | |
Noviski et al. | Optimal development of mature B cells requires recognition of endogenous antigens | |
Eyer et al. | The quantitative assessment of the secreted IgG repertoire after recall to evaluate the quality of immunizations | |
WO2011146120A3 (en) | Assay for identifying antigens that activate b cell receptors comprising neutralizing antibodies | |
Denham et al. | A generic cell surface ligand system for studying cell–cell recognition | |
Thibaut et al. | A novel assay for the detection of anti-human platelet antigen antibodies (HPA-1a) based on peptide aptamer technology | |
Funk et al. | Interrogating ligand-receptor interactions using highly sensitive cellular biosensors | |
Ludwig et al. | High‐throughput single‐cell sequencing of paired TCRα and TCRβ genes for the direct expression‐cloning and functional analysis of murine T‐cell receptors | |
JP2017525368A5 (ru) | ||
MX2021014171A (es) | Metodos para identificar y cuantificar proteinas de la celula huesped. |