RU1307844C - Способ получени биомассы дрожжей - Google Patents
Способ получени биомассы дрожжейInfo
- Publication number
- RU1307844C RU1307844C SU3873929A RU1307844C RU 1307844 C RU1307844 C RU 1307844C SU 3873929 A SU3873929 A SU 3873929A RU 1307844 C RU1307844 C RU 1307844C
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- heat treatment
- yeast
- strain
- temperature
- vkm
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к микробиологической промышленности, в чааности к способам получени биомассы дрожи ей на этаноле. Целью изобетени вл етс улучшение качества целевого продукта за счет предотвращени его инфицированности посторонней микрофлороЯ Штамм Candida valida ВКМУ-2327 выращивают в режиме хемостата .при лимитировании роста клеток этанолом на модифицированной среде 8-Е при температ и jrfH 4,0. .Скорость протока ч . Парй1иальное давление кислорода в среде 40 - 50% от насыщени После уаановлени стационарного соао ни iQffibTypbi провод т термооб1 ботку, дл чего отлю- чают проток в ферментере, температуру повышают до 50 - 53% и выдерживают культу в течение 025 - 1,0 ч после чего снова подключают проток Стационарное состо ние куга)Туры после термообработки наступает через 7 - 8 ч Способ основан на обнаруженной способности штамма Candida salida ВКМУ-2327 расти при температуре 55 - 60°С и позвол ет улучиить качестю поучаемой би шассы за счет предотфащени ее инф щфо- ванности посторонней микрофлорой. 1табл
Description
Изобретение относитс к микробиологической промышленности и представл ет собой способ получени биомзссы дрожжей на этиловом спирте.
Целью изобретени вл етс улучшение качества целевого продукта за счет предотвращени его инфицированности посторонней микрофлорой.
Способ заключаетс в том, что дрожжи Candida vallda ВКМ У-2327 с рко выраженными термотолерантными свойстсзами (обнаружены способности роста при 50-53°С) культивируют на питательной среде, содержащей этиловый спирт и минеральные соли в качестве источника азота, фосфора и микроэлементов . В случае инфицировани либо с профилактической целью провод ттер.мо- обработку при темп ературе ВО-53 С и тече- ние 0,25-1,0 ч, затем продолжают культивирование.
Дл изучени выживаемости дрожжевой мезофильной микрофлоры были поставлены специальные эксперименты. С этой целью из ВКМ были получены 20 штаммов мезофильных дрожжей, растущих на минеральной среде с этанолом. Кроме того, дл сравнени исследовали некоторые термотолерантные штаммы дрожжей.
Штаммы дрожжей раздельно выращивают на скошенном сусло-агаре при температуре 28°С в течение 48 ч. .Затем с кос ка делают смыв 3 мл стерильной гзодопровод- ной-воды, осторожно встр хивают пробирку , культуру смывают с поверхности агаризованной среды и полученную суспензию клеток в количестве 1 мл внос т в заранее приготовленные колбы на 500 мл с 100 мл среды 8-Е следующего состава (на 1 л): (NH4)2HPO/i 1,5 г; KH.POl 0,7 г; MgSO-v 7Н20 0,8 г; fx aCi 0,05 г; FeSO.r бНаО 16,7 мг; CaCl2- 2Н20 0:66 мг; ZnSO/ - 6H20 0,13 мг; CuS04- 5Н20 0,16мг; MnSO/i 0,15 мг; CoCS2 6Н20 0,18 мг; этанол 1 об.%; дрожжевой автолизат 0,2 об.%.
Выращивание провод т в колбах на качалке при28°С в течение 48 ч. Далее из колб делают отбор проб в количестве 3 мл и провод т высев на чашки Петри с сусло-агаром в количестве 0,05 мл (контроль). Затем суспензию клеток прогревают в ультратермостате при (50-53°С) ± 0,5°С в течение 30-60 мин, после чего делают высеп по 0,05 мл на чашки с сусло-агаром (опыт). Чашки инкубируют при 28°С в течение 72 ч. По истечении указанного срока провод т просмотр выросших колоний, Оценка визуальна по п тибалльной шкале, где 5 баллов - обильный рост, 4 балла - хороший рост, 3 балла - средний рост, 2 - слабый рост.
1 балл едва различимый рост, О - отсутствие роста.
Результаты исследовани представлены в таблице. Из таблицы видно, что из 22
исследованных штаммов дрожжей в результате термообработки при 53°С в течение 30 мин способность к размножению сохран етс у Шести штаммов дрожжей, а выдерживание штаммов при этой же температуре в
0 течение SO мин приводит к потере жизнеспособности всех исследованных мезофильных штаммов дрожжей.
Во всех экспериментах провод т контроль на загр знение посторонней микро5 флорой в процессе культивировани путем микроскопироваии , а также высева суспензии клеток на чашки Петри с суслом-агаром. . С этой целью берут 0,5 мл суспензии и делают разведение в 100000 раз стерильной во0 допроводной водой. Высев провод т в количестве 100-200 клеток на чашки Петри с суслом-агаром. Чашки инкубируют при 28°С в течение 72 ч.
По истечении указанного срока про5 сматривают выросшие колонии дрожжей. Наличие посторонней дрожжевой микрофлоры определ ют по присутствию колоний разной формы, цвета, консистенции и другим морфологическим признакам.
0 Пример Штамм Candida valida ВКМ У-2327 хран т на скошенном сусле-агаре в пробирке, закрытой ватно-марлевой пробкой , при температуре 4-б С. Штамм выращивают па кос ке с суслом-агаром при 37°С
5 в течение 13 ч.
Дл получени инокул та (первой стадии ) в пробирку с культурой Candida vallda ВКМ У-2327 внос т около 5 мл стерильной водопроводной воды, осторожно встр хи0 вают пробирку, смыоают культуру с поверхности агаризованной среды и полученную суспензию внос т в стерильный биологический матрац с заранее приготовленной пло1цадкой сусла-агара. Суспензию рав5 номерно распредел ют по поверхности сусла-агара и выращивают при 37°С в течение 18ч.
Дл получени инокул та (второй стадии ) в биологический матрац с культурой
0 (инокул т первой стадии) внос т около 50 мл стерильной воды и, осторожно покачива матрац, смывают культуру с поверхности згаризозанной среды. Полученную суспензию перенос т в стерильную колбу с отрост5 ком и получают инокул т второй стадии, который используют дл засееа среды в ферментере.
Выращивание Candida vaiide 8КМ У- 2327 в ферментере АНКУМ-2М провод т в режиме хемостата при лимитировании роста клеток этанолом на модифицированной среде 8-Е следующего состава (на 1,0 л): (NH4)2HPO/) 1,5 г; КН2Р04 0,7 г; MgSO/j 7Н20 0,8 г; NaCI 0,05 г; бНаО 16,7 мг,- CaCl2- 2Н20 0,66 мг; ZnS04- 6Н20 0,18 мг: 5Н200,16 мг; МпЗОд 4Н20 0,15 мг; CoCl2- 6Н20 0,18 мг; этанол 1 об. %.
Температуру 36°С поддерживают на заданном уровне в пределах ±0,5°С. Значение рН среды устанавливают равным 4,0 ± ±0,1 автоматической подтитровкой 1% . Скорость протока в хемостате устанавливают 0,25 ч . Парциальное давление кислорода в среде (р 02) поддерживают 40- 50% от насыщени , Отбор проб дл анализа провод т после трехкратной смены объема среды в ферментере. После установлени стационарного состо ни культуры в услови х хемостата (оптическа плотность, температура , рН, р 02) провод т термообработку . С этой целью отключают проток в ферментере, температуру повышают до 50°С и культуру выдерживают в этих услови х в течение 30 мин, после чего снова подключают проток. Стационарное состо ние культуры после термообработки наступает через ч. В указанных услови х термообработки клетки штамма Candida vadda В KM У-2327 остаютс жизнеспособными на 59% и сохран ют способность к размножению.
П р и м е р 2. Осуществл ют, как описано в примере 1, но термообработку провод т при 50°С в течение 60 мин.
В указанных услови х штамм Cabdida valida В KM У-2327 сохран ет жизнеспособность , а также способность к размножению на 23%. Стационарное состо ние культуры после термообработки наступает через 7-8 ч.
Примерз. Осуществл ют, как описано 8 примере 1, но дл засева ферментера используют смесь двух штаммов (1;1)-Candlda valida ВКМ У-2327 и Candida utilis ВКМ У- 2332. После установлени стационарного состо ни в услови х хемостата (оптическа плотность, рН, р 02) провод т термообработку при температуре 50°С 30 мин. В указанных услови х термообработки клетки штамма Candida utilis ВКМ У-2332 погибают полностью, а у штамма Candida vaiida ВКМ У-2327 отмирает 41% клеток. Таким образом , в результате термообработки в культуре не остаетс дрожжей С. utilis ВКМ У-2332. а дрожжи. С.valida ВКМ У-2327 сохран ют жизнеспособность на 59 %, а также способность к размножению. Стационарное состо ние культуры в услови х хемостата наступает через 7-8 ч после термообработки.
П р и м е р 4. Осуществл ют, как описано в примере 3, но термообработку провод т при температуре 50°С в течение 60 мин. В указанных услови х термообработки клетки 5 штамма С.utilis ВКМ У-2332 погибают полностью , а у штамма С.valida ВКМ У-2327 отмирает 77% клеток. Таким образом, в результате термообработки в культуре не остаетс дрожжей С.utilis ВКМ У-2332, а 10 дрожжи С.valida ВКМ У-2327 сохран ют жизнеспособность и способность к размножению на 23%. Стационарное состо ние культуры в услови х хемостата наступает через 7-8 ч после термообработки. 15П р им ерб.Осуществл ют, как описано
в примере 3, но термообработку провод т при температуре 53°С в течение 15 мин. В указанных услови х термообработки клетки штамма С.utilis ВКМ У-2332 погибают пол- 0 ностью, а у.штамма C.valida ВКМ У-2327 отмирает 80,2% клеток. Таким образом, в результате термообработки в культуре не остаетс дрожжей С.utilis ВКМ У-2332, а дрожжи C.valida ВКМ У-2327 сохран ют 5 жизнеспособность на 19,8%.
П р и м е. р 6. Штамм дрожжей C.valida ВКМ У-2327 выращивают, как описано в примере 1. После установлени стационарного состо ни в услови х хемостата в фер- 0 ментер дополнительно внос т смесь следующих штаммов мезофильных дрожжей:
C.aaserlВКМУ-1425
C.foliorumВКМУ-1453
5C.steatolyticaВКМ У-2596
C.vartiovaaralВКМУ-2115
Rhodotorula glutinisВКМ У-749
Torulopsis camarellli ВКМ У-1485 T.schataviiВКМУ-2094
0C.BIankilВКМУ-2100
C.sifvatlcaАКМ У-2597
C.vartiovaaraiВКМУ-2114
Cryptococcus laurentl ВКМ У-1627 Rh.muclleginosaВКМ У-80
5 T.lnconsplcuaВКМУ-740
C.kefyrВКМУ-257
Штаммы дрожжей раздельно выращивают на кос ках с суслом-агаром при температуре 28°С в течение 48 ч. Затем с каждого 0 кос ка делают смыв 5 мл стерильной водопроводной воды, осторожно встр хивают пробирку, культуру смывают с поверхности агаризованной среды и полученную суспензию перенос т в стерильную колбу с отрост- 5 ком. Полученный инокул т внос т в ферментер. После установлени стационарного состо ни е услови х хемостата (оптическа плотность, температура, рН) отключают проток, температуру повышают до 50°С и культуру выдерживают с этих услови х в течение 60 мин, после чего снова подключают проток. Стационарное состо ние культур в услови х хемостата наступает через 8 ч после термообработки.
В указанных услови х термообработки подавл ющее большинство колоний составл ют колонии штамма дрожжей C.vaiida ВКМ У-2327 и отдельные колонии других штаммов дрожжей, отличающихс по форме .
Пример. Осуществл ют, как описано в примере 6, но термообработку провод т при 53°С в течение 60 мин.
В указанных услови х термообработки способность к размножению сохран ет только штамм C.vaiida ВКМ У-2327. Стационарное cocfo ниe штамма C.vaiida ВКМ У- 2327 в услови х хемостата после термообработки наступает через 8 ч.
Таким образом, предлагаемый способ позвол ет по сравнению с известным предотвратить размножение посторонней дрожжевой мезофильной микрофлоры или очистить ot нее производственную культуру.
При такой технологии получени биомассы дрожжей на этаноле C.vaiida ВКМ
У-2327 можно избавитьс от загр знени культуры посторонними мезофильными дрожжами как в отделении чистой культуры, так и в промышленных аппаратах дл выращивани дрожжей C.vaiida ВКМ У-2327. Реализаци данного преимущества штамма обеспечивает стабильность технологического процесса и облегчает получение продукта посто нного высокого качества,
(56) Авторское свидетельство СССР №442204, кл, С 12 С 1/16, 1974.
Chlstyakova Т. I.. MInkevlch 1. G., Eroshin V. К. Growth of the Thermotolerant. Yeast Candida valida on Ethanol: Dependences of
Naximai Growth Rate and Cell Blomass Jleld on Temperature, Eur, I. Appi. Microhlol. Blotechnol., 1983, 18, p. 225-228.
Примечание: 5 баллов - обильный рост, 4 балла - хороший рост, 3 балла - средний рост, 2 балла - слабый рост, 1 балл - едва различимый рост, О - отсутствие роста.
Claims (1)
- Формула изобретениСПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ ДРОЖЖЕЙ, предусматривающий непрерывное культивирование их в услови х аэрации на жидкой питательной среде, содержащей этанол в качестве источника углерода , источники азота, фосфора,Редактор Н.ТимонинаСоставитель Техред М.МоргенталЗаказ 3333ТиражПодписноеНПО Поиск Роспатента 113035. Москва. Ж-35, Раушска наб.. 4/5Производственно-издательский комбинат Патент, г. Ужгород, ул.Гагарина, 101Продолжение таблицыминеральные соли и микроэлементы, отличающийс тем, что, с целью улучшени качества целевого продукта за счет предотвращени его инфицированности посторонней микрофлорой, в процессе выращивани дрожжи выдерживают при температуре 50 - 53 С в течение 0,25 -1,0ч.Корректор Л.Пилипенко
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU3873929 RU1307844C (ru) | 1985-03-27 | 1985-03-27 | Способ получени биомассы дрожжей |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU3873929 RU1307844C (ru) | 1985-03-27 | 1985-03-27 | Способ получени биомассы дрожжей |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU1307844C true RU1307844C (ru) | 1993-11-30 |
Family
ID=21169350
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU3873929 RU1307844C (ru) | 1985-03-27 | 1985-03-27 | Способ получени биомассы дрожжей |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU1307844C (ru) |
-
1985
- 1985-03-27 RU SU3873929 patent/RU1307844C/ru active
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4757010A (en) | Production of clostridium acetobutylicum mutants of high butanol and acetone productivity, the resultant mutants and the use of these mutants in the joint production of butanol and acetone | |
CN107523504A (zh) | 裂殖壶菌突变株 | |
JPH03232497A (ja) | 発酵法によるl―グルタミンの製造方法 | |
CN107267422B (zh) | ***丛毛单胞菌hhala-001及采用该菌株生产l-丙氨酸的方法 | |
Frengova et al. | Effect of temperature changes on the production of yeast pigments co-cultivated with lacto-acid bacteria in whey ultrafiltrate | |
RU1307844C (ru) | Способ получени биомассы дрожжей | |
CN105647815B (zh) | 一种提高米曲霉曲酸产量的方法 | |
Fabian et al. | Dissociation in yeasts | |
CN107641602B (zh) | 一株产朊假丝酵母及其在发酵产蛋白中的应用 | |
US4357425A (en) | Process for producing L-amino acid oxidase | |
CN110643520A (zh) | 高产南极***素的南极真菌Geomyces sp.突变株及其应用 | |
CN116286513B (zh) | 一株希氏乳杆菌FR-1012及其工业化生产γ-氨基丁酸的方法 | |
CN115895898A (zh) | 一种高产苯乳酸的乳酸菌筛选方法 | |
CN112358970B (zh) | 拟微绿球藻及其应用 | |
KR0148042B1 (ko) | 내열성 효모 및 그를 이용한 알코올 발효법 | |
SU767196A1 (ru) | Способ выращивани продуцентов литических ферментов | |
KR960001816B1 (ko) | 발효에 의한 스트렙토키나제(streptokinase) 및 스트렙토도르나제(streptodornase)의 동시제조방법 | |
SU562205A3 (ru) | Способ получени алкалоидов спорыньи | |
RU2627182C1 (ru) | Штамм Aneurinibacillus migulanus и его применение для получения грамицидина С | |
SU1698290A1 (ru) | Способ отбора мутантов парафинусваивающих дрожжей | |
RU2103346C1 (ru) | Штамм гриба aspergillus niger - продуцент лимонной кислоты | |
SU514891A1 (ru) | Способ получени винной кислоты | |
CN117126743A (zh) | 一种微藻扩培混养培养基及其应用 | |
CN105316239A (zh) | 一种产高活力酸性蛋白酶的宇佐美曲霉及其应用 | |
CN116790381A (zh) | 一种白色的纤细裸藻突变株及其应用 |