RO115884B1

RO115884B1 - Derivati de doramectin, procedeu de preparare, metoda de tratare

Info

Publication number: RO115884B1
Application number: RO96-00720A
Authority: RO
Inventors: Thomas Charles Crawford; Neil Demers; Stephen P Gibson; Charles William Murtiashaw; Constantine Sklavounos
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1993-10-05
Filing date: 1994-09-19
Publication date: 2000-07-28
Also published as: AU680039B2; EG20802A; DK0722453T3; NO305320B1; US5665708A; AP499A; MY111320A; DZ1816A1; SK45396A3; ATE185571T1; CA2173494A1; JPH08510758A; EP0722453A1; AU7545494A; LV11474A; OA10577A; IL111075A; GR3032042T3; LV11474B; TW282472B

Abstract

Inventia se refera la derivati de doramectin avand formulele generale structurale (III): si ( IV):Acesti derivati au proprietati antiparazitare. De asemenea, inventia se mai refera si la procedeul de preparare a acestor derivati, precum si la metode de tratare.

Description

Invenția se referă la derivați de doramectin, la procedeu de preparare a acestora și la o metodă de tratare a bolilor parazitare.

Doramectinul este un agent antiparazitic și antihelmintic larg, aparținând unei clase secundare de metaboliți cunoscuți ca avermectine. Conform brevetului US 5089480, doramectinul poate fi preparat prin fermentarea unei specii producătoare de avermectin a microorganismului. Streptomyces avermitilis, cum ar fi ATCC 31267, 31271 sau 31272, în condiții aerobe, într-un mediu nutritiv apos, conținând săruri anorganice și surse de carbon și azot asimilabile. O altă specie de microorganisme producătoare de avermectin este Streptomyces avermitilis ATCC 53568, care este descrisă de Dutton et al, în Journal of Antibiotics, 44,357-65(1991). Streptomyces avermitilis ATCC 31267, 31271, 31272 și 53568 sunt depuse la American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, USA, în condițiile Tratatului de la Budapesta.

în timpul procedurii de fermentare, prin care se obține compusul având formula I.

(O pot fi izolați diverși coproduși. Un coprodus major, care poate fi izolat în timpul fermentării microorganismelor specificate mai sus, are structura cu formula II

(IO

RO 115884 Bl

Izolarea compusului cu formula II din mediul de fermentare al Streptomyces avermitilis ATCC 53568 este descrisă de Dutton et al. identic ca mai sus. Compusul cu formula II este un compus activ antiparazitic și antihelmintic care a fost dezvăluit și revendicat în brevetul US 5 089 480. De preferință doramectinul, având formula II, se so transformă în doramectin cu formula I, care este un agent antiparazitic mai valoros.

Transformarea globală din acest procedeu este eliminarea grupei hidroxil de la C23, în pozițiile C-22 și C-23 ale moleculei, rămânând o olefină. Sunt procedee cu randamente scăzute, care efectuează aceeași transformare pe avermectine ușor diferite. De exemplu, atunci când grupa ciclohexil de la C-25 este o grupă sec-butil, 55 transformarea s-a realizat utilizând o secvență în cinci etape, cu un randament global de aproximativ 3,6%. (Mrozik et al., Tetrahedron Leftera. 1982, 23, 2377-78). Ținând cont de acest procedeu cu randament scăzut, cunoscut din stadiul tehnicii, este de dorit să se găsească un procedeu prin care materia primă să fie transformată mai eficient în doramectin. 6 o

Invenția de față are ca obiect un derivat de doramectin, care este reprezentat de formula generală structurală III

în care:

R¹ este o grupă alcanoil (C₂-C₅) sau ariloxiacetil; și

R² este un atom de hidrogen sau o grupă ariloxitiocarbonil.

De asemenea, invenția de față se mai referă la un derivat de doramectin, având formula generală structurală IV

(IV)

RO 115884 Bl în care R¹ este o grupă alcanoil (C₂-C₅) sau o grupă ariloxiacetil.

Un alt obiect al prezentei invenții îl constituie un procedeu de preparare a unui derivat de doramectin, având formula generală IV

în care R¹ este o grupă alcanoil (C₂-C₅) sau ariloxiacetil, care constă în aceea că un derivat având formula generală structurală III;

în care R¹ este o grupă alcanoil (C_s-C₅) sau ariloxiacetil și R² este o grupă ariloxitiocarbonil, este supus reacției întrun mediu de solvent inert de reacție, la o temperatură cuprinsă între circa 15O°C și 2OO°C timp de circa 2 h până la circa 48 h, în prezență de carbonat de calciu cu purjare continuă cu gaz inert.

Invenția de față mai conține un procedeu pentru prepararea unui derivat de doramectin, având formula generală structurală I

IU

RO 115884 Bl care constă în următoarele etape consecutive:

140 (a) reacția compusului cu formula structurală II

145

150

155 cu un agent de acilare, având formula generală (R⁴C0]₂0 sau R⁴C0X, în care R⁴ este o grupă ariloximetil și X este CI sau Br, obținându-se un derivat cu formula generală structurală III:

160

în care R¹ este ariloxiacetil și R² este hidrogen; 175 (b) după care derivatul cu formula generală structurală III în care R¹ este ariloxiacetil R² este un atom de hidrogen, astfel obținut, se supune reacției cu un compus de formula generală R³0C(=S]X, în care R³ este o grupă arii și X este un atom de CI sau Br, obținându-se un compus cu formula generală III, în care R¹este o grupă ariloxiacetil și R² este o grupă ariloxitiocarbonil; iso (c) apoi compusul cu formula generală III, în care R¹ este o grupă ariloxiacetil și

R² este o grupă ariloxitiocarbonil astfel obținut, se supune reacției într-un solvent de reacție inert, la o temperatură cuprinsă între circa 15Q°C și circa 2OO°C, timp de circa

RO 115884 Β1 h până la circa 48 h, în prezență de carbonat de calciu, în condiții de purjare continuă de gaz inert, pentru a se obține un derivat având formula generală structurală IV:

în care R¹ este o grupă ariloxiacetil și, în final, (d) se supune reacției derivatul cu formula generală IV, în care R¹ este o grupă ariloxiacetil cu o bază, într-un mediu de solvent alcoolic, pentru a se obține derivatul cu formula generală I.

Un alt procedeu pentru prepararea unui derivat cu formula structurală I cuprinde următoarele etape consecutive:

(a) reacția unui compus cu formula generală structurală II:

(II)

RO 115884 Bl cu un agent de acilare având formula generală (R⁴C0)₂0 sau R⁴C0X, în care R⁴ este o 230 grupă alchil(C₁-C₄] și X este un atom de Cl sau Br, obținându-se derivatul cu formula generală III:

în care R¹ este o grupă alcanoil (C₁-C₄)și R² este un atom de hidrogen;

(b) după care derivatul cu formula (III), în care R¹ este o grupă alcanoil (C₁-C₄)și R² este un atom de hidrogen, astfel obținut, se supune reacției, cu un derivat de formula generală R³0C(=S]X, în care R³ este o grupă arii și X este un atom de Cl sau Br pentru a se obține un derivat cu formula generală III în care R¹ este o grupă alcanoil (G-CJ și 250 R² este o grupă ariloxi-tiocarbonil; apoi (c) derivatul cu formula generală III, în care R¹ este o grupă alcanoil (C_rC₄) și R²este o grupă ariloxitiocarbonil se supune reacției în mediu de solvent inert de reacție, la o temperatură cuprinsă între circa 15O°C și circa 2OO°C, timp de circa 2 h până la circa h, în prezență de carbonat de calciu, cu purjare continuă a amestecului de reacție 255 cu gaz inert, pentru a se obține un derivat cu formula generală IV:

în care R¹ este o grupă alcanoil (G’GI și în final [d] se supune reacției derivatul cu formula generală IV, în care R¹ este o grupă alcanoil (G'G). cu hidrură de litiu aluminiu, cianoborohidrură de sodiu sau trietilborohidrură de litiu, într-un mediu de solvent inert de reacție, pentru a se obține derivatul cu formula generală I. 275

RO 115884 Bl

Un alt obiect al prezentei invenții este o metodă de tratare a unui mamifer care suferă de o boală parazitară, prin administrarea mamiferului respectiv a unei cantități eficiente din punct de vedere parazitar, a unui derivat având caracteristicile de mai sus.

Invenția de față prezintă avantajul obținerii unui derivat de doramectin care are un agent antiparazitar, cu activitate mare, printr-un procedeu eficient, cu randament mărit.

Prin urmare, un obiect al acestei invenții îl reprezintă derivatul cu formula generală III, precum și transformarea compusului de formula II în doramectin, cu randament global mare. Derivatul cu formula generală III conform invenției este de fapt un compus intermediar, pentru obținerea doramectinului și are următoarea formulă:

în care R¹ este alcanoil (C₂-Cg) sau ariloxiacetil și R² este hidrogen sau ariloxitiocarbonil. Un alt intermediar este și derivatul cu formula generală IV

Compușii preferați conform acestei invenții sunt acei compuși cu formula generală (III) în care R¹ este alcanoil (C₂-C₅) fenoxiacetil sau alchilfC^CJ fenoxiacetil și R² este hidrogen sau aichil^-CJfenoxitiocarbonil. Compușii preferați în mod special din această grupă sunt compușii cu formula generală (III), în care R¹ este acetil sau fenoxiacetil și R²este hidrogen sau p-toliloxitiocarbonil.

De asemenea, compușii preferați îndeosebi, conform acestei invenții, sunt compușii cu formula geneală (IV), în care R¹ este alcanoil (C₂-C₅), fenoxiacetil sau alchil

RO 115884 Bl (C^-CJ fenoxiacetil. Compușii cei mai preferați din această grupă sunt compușii de formula (IV) în care R¹ este acetil sau fenoxiacetil.

Invenția de față mai are ca obiect un procedeu pentru prepararea unui compus cu formula generală (I). 325

cuprinzând etapele consecutive de:

a) reacția compusului cu formula (II) cu un agent de acilare de formula (R⁴C0)₂0 340 sau R⁴C0X, în care R este ariloximetil și X este CI sau Br, pentru a se obține compusul conform formulei (III), în care R¹ este ariloxiacetil și R² este H;

(b) reacția compusului cu formula (III), în care R¹ este ariloxiacetil și R² este H cu un compus de formula R³0C(=S)X, în care R³ este arii și X este CI sau Br, pentru a se obține compusul cu formula (III), în care R¹ este ariloxiacetil și R² este ariloxitiocarbonil; 345 (c) reacția compusului cu formula (III), în care R¹ este ariloxiacetil și R² este ariloxitiocarbonil într-un solvent inert de reacție la temperatura cuprinsă între circa 15O°C și circa 2OO°C, timp de la circa 2 h la circa 48 h, în prezența carbonatului de calciu cu barbotare continuă de gaz inert pentru a se obține compusul cu formula (IV) în care R¹ este ariloxiacetil; și 350 (d) reacția compusului cu formula (IV), în care R¹ este ariloxiacetil cu o bază într-un solvent de alcool, pentru a se obține compusul cu formula (I).

Un procedeu preferat este procedeul în care gazul inert aeste azotul. Un procedeu preferat în special este cel în care baza este NH, KOH, KCN, Na₂ C0₃, NaHC0₃sau NaOAc. Și mai preferate sunt procedeele care utilizează compușii preferați în mod 355 special din această invenție.

Invenția de față mai conține un procedeu de preparare a unui compus cu formula (I) prin reacția compusului cu formula (II) cu un agent de acilare de formula (R⁴C0)0 sau R⁴C0X, în care R⁴ este alchil C^C., și X este CI sau Br pentru a se obține compusul conform formulei generale (III) în care R¹ este alcanoil (C^CJ și R² este H; 3 60 (b) reacția compusului cu formula generală (III), în care R¹ este alcanoil (C-pCJ și R2 este H, cu un compus de formula R30C(=S)X, în care R³ este arii și X este CI sau Br, pentru a se obține compusul cu formula generală (III) în care R¹ este alcanoil (CrC₄) și R² este ariloxitiocarbonil;

(c) reacția compusului cu formula generală (III), în care R¹ este alcanoil (C_rC₄) și 3 65 R² este ariloxitiocarbonil într-un mediu inert de reacție la o temperatură cuprinsă între circa 15O°C și circa 2OO°C, timp de la circa 2 h la circa 48 h, în prezență de carbonat

RO 115884 Bl de calciu cu barbotare continuă de gaz inert de reacție, pentru a se obține compusul conform formulei generale (IV) în care R¹ este alcanoil (Ct-CJ; și (d) reacția compusului cu formula generală (IV), în care R¹ este alcanoil (Ct-CJ cu hidrură de litiu aluminiu, cianoborohirură de sodiu sau trietilborohidrură de litiu într-un solvent inert de reacție pentru a se obține compusul conform formulei (I).

Un procedeu preferat este acel procedeu în care gazul inert de reacție este azot. Procedeele în special preferate sunt acele procedee care utilizează compușii preferați conform acestei invenții.

Un alt obiect al acestei invenții constă într-o metodă de tratare a mamiferelor care suferă de o boală parazitară, prin administrarea la mamiferele respective a unei cantități eficiente antiparazitice, dintr-un compus cu formula generală (III) sau (IV).

Derivații conform prezentei invenții sunt preparați, cu ușurință, prin procedeul conform prezentei invenții și care este descris în detaliu în cele ce urmează.

Compusul cu formula (I) din această invenție este doramectinul, un agent antiparazitar și antihelmintic care este descris în brevetul US 5089480. Doramectinul este preparat din compusul cu formula generală (IV) de mai sus, prin reacția acestuia cu hidrură de litiu aluminiu, cianoborohidrură de sodiu sau trietilborohidrură de litiu sau saponificând esterul, în funcție de natura esterului care urmează a fi scindat.

în cazul în care R¹ este alcanoil (C2-Cg), grupa alcanoil (Cg-Cgjoxi este transformată într-o grupă hidroxi prin reacția compusului cu formula generală (IV), în care R¹ este alcanoil (C2-Cg) cu hidrură de litiu aluminiu, cianoborohidrură de litiu într-un solvent inert de reacție la o temperatură de circa -1OO°C la circa D°C, timp de circa 15 min la circa 24 h. Solvenții de reacție inerți adecvați pentru această reacție vor depinde de alegerea agentului reducător și vor fi selectați dintre solvenții cum ar fi dietil eter, dioxan, tetrahidrofuran, 2-metoximetil și 1,2-dimetoxietan, dar fără a se limita la aceștia. Un agent reducător preferat pentru această reacție este trietilborohidrură de litiu și un solvent deosebit de adecvat este tetrahidrofuranul. în general, pe durata amestecării reactivului cu substratul, se menține o temperatură de - 78°C la - 7O°C și pe o perioadă scurtă de timp, de obicei de la circa 15 min la 1 h, după aceea. La scurt timp după ce amestecarea este terminată, de obicei timp de 15 min până la 1 h, temperatura este lăsată să se ridice cu încetul, la temperatura ambiantă. Amestecul de reacție este stins și compusul având formula (I) este izolat, conform procedeelor standard cunoscute unui specialist obișnuit în domeniu.

în cazul în care R¹ este ariloxiacetil, grupa ariloxiacetiloxi se transformă într-o grupă hidroxi prin reacția derivatului cu formula generală (IV), în care R¹ este ariloxiacetil cu un hidroxid de metal alcalin într-un solvent alcoolic la o temperatură de la circa - 75°C la circa O°C timp de la circa 15 min la circa 24 h. Hidroxidul de metal alcalin preferat este hidroxidul de potasiu și un solvent preferat este metanolul. în general, reacția este realizată la o temperatură de - 35°C timp de circa o oră, timp după care compusul cu formula (I) este izolat conform procedeelor standard cunoscute unui specialist obișnuit în domeniu. Alternativ, această reacție poate fi realizată înlocuind amoniacul cu hidroxid de metal alcalin. în cazurile în care este utilizat amoniacul, reacția este realizată la circa 35°C până la Οθϋ, timp de circa o oră până la circa 16 h. Reacția este condusă, de preferință, în metanol la - 15°C, timp de circa 5-6 h. Compusul cu formula (I) obținut este izolat conform procedeelor standard din chimia organică, bine cunoscute unui specialist în domeniu.

RO 115884 Bl

415

Derivații cu formula generală (IV) din prezenta invenție sunt preparați cu ușurință, conform invenției, prin reacția unui compus cu formula generală (III) într-un solvent cu punct înalt de fierbere cum ar fi 2-metoxietileter sau 2-etoxietileter dar fără a se limita la aceștia, la o temperatură de la circa 15O°C până la circa 2OO°C, timp de la circa 2 h până la 48 h. Pentru a obține un randament maxim, amestecul de reacție este purjat continuu cu un gaz de reacție inert, cum ar fi azotul sau argon. Este de preferat ca reacția să fie realizată la 156°C - 158°C în 2-metoxietil-eter cu barbotare continuă de azot, timp de 12 h. Atunci când reacția este finalizată, derivatul cu formula generală (IV) este izolat conform procedeelor standard cunoscute unui specialist obișnuit în domeniu.

Derivații cu formula generală (III) din prezenta invenție, în care R² este ariloxitiocarbonil sunt preparați prin procedeul conform invenției, prin reacția unui derivat cu formula generală (III) din prezenta invenție în care R² este hidrogen cu un halotionoformiat cu formula generală R³0C(=S)X în care R³ este definit ca mai sus, întrun solvent de reacție inert, în prezența unui captator de proton cum ar fi piridina sau 4dimetilaminopiridina, timp de la circa 30 min la circa 12 h. Solvenții adecvați pentru această reacție includ acetatul de etil, 1,2-dimetoxietanul, 2-metoximetil eterul, 2-etoxietil eterul, solvenți aromatici, cum ar fi toluen, xilen și benzen și solvenți clorurați, cum ar fi, cloroform și clorură de metilen. Solvenții preferați pentru această reacție sunt acetatul de etil sau toluenul. Este de preferat ca reacția să fie lăsată să se desfășoare timp de la 2 la 4 h. Amestecul de reacție este încălzit între 4D°C până la aproximativ temperatura de reflux a solventului ales pentru acea reacție. Amestecul de reacție este stins și derivatul cu formula generală (III), în care R² este ariloxitiocarbonil este izolat conform procedeelor standard.

Derivații cu formula generală (III) conform invenției, în care R² este hidrogen și R¹este alcanoil (C2-Cg) sau ariloxiacetil sunt preparați cu ușurință conform acestei invenții. Compusul de formula (II) se supune reacției cu un agent de acilare într-un solvent de reacție inert în prezența unui captator de proton, cum ar fi piridină, 4dimetilaminopiridină, piperidină, pirolidină, trietilamină, morfolină sau diizopropiletilamină, dar fără a se limita la aceștia, la o temperatură de la circa - 75°C la circa 0°C, timp de la circa 5 min la circa 8 h. Solvenții adecvați de reacție includ solvenți aromatici cum ar fi toluen, benzen sau xilen sau solvenți clorurați cum ar fi clorură de metilen, cloroform sau 1,2-diclormetan. Agenții adecvați de acilare sunt halogenuri acide, de obicei cloruri acide și anhidride acide. Atunci când în această reacție se utilizează ca agent de acilare o clorură acidă, este preferabil să se folosească drept amină organică, piridina. Când în această reacție ca agent de acilare se utilizează o anhidridă acidă, amina organică preferată în mod special este trietilamina. Solvenții preferați în general pentru aceste reacții, fie că se utilizează o clorură acidă fie o anhidridă acidă ca agent de acilare, sunt solvenții clorurați. Este preferată în mod special clorură de metilen. Când reacția este finalizată, amestecul de reacție este stins și derivatul cu formula (III) în care R² este hidrogen și R¹ este alcanoil (C2-C₅) sau ariloxiacetil este izolat conform procedurilor standard din chimia organică.

Compusul de formula (II) poate fi izolat prin fermentarea speciillor de Streptomyces avermitilis cum ar fi ATCC 31267, 31271 sau 31272 producătoare de avertmectin, așa cum se descrie în brevetul SUA 5 089 480 care este incorporat în această descriere prin referință. Alte metode pentru obținerea compusului de formula

420

425

430

435

440

445

450

455

RO 115884 Bl (II) includ izolarea din mediul de fermentare al Streptomyces avermitilis ATCC 53568, așa cum este descris în materialul documentar Dutton et al., Journal of Antibiotics, 44,357-651 (1991).

Derivații cu formula (III) și (IV) din prezenta invenție sunt utili ca intermediari pentru sinteza compusului cu formula (I), doramectin, pornind de la compusul cu formula (II).

Derivații cu formulele (III) și (IV) din prezenta invenție sunt utili ca agenți antiparazitari. Ultilitatea derivaților respectivi (III) și (IV) ca agenți antiparazitari este demonstrată de activitatea respectivilor compuși in vivo” pe un model de rozătoare așa cum descriu Gration et al., Veterinarz Parasitologz, 42, 1992, 273 - 279.

Derivații cu formulele (III) și (IV) sunt agenți antiparazitari cu activitate mare fiind utilizați în special ca antihelmintice, ectoparazitare, insecticide și acaricide.

Derivații cu formulele (III) și (IV) sunt eficienți pentru tratarea și prevenirea unei diversități de afecțiuni cauzate de endoparaziți incluzând, în particular, helmintiaza, care este cel mai adesea cauzată de o grupă de viermi paraziți descriși ca nematode și care pot provoca pierderi economice grele la porci, oi, cai și vite și pot afecta de asemenea animale domestice și păsările. Doramectinul este și el eficient împotriva altor nematode care afectează diverse specii de animale, incluzând de exemplu, Dirofilaria la câini și diverși paraziți cum ar fi Ancylostoma, Necator, Ascaris, Strongyloides, Trichinella, Capillaria, Trichuris, Enterobius și paraziți care sunt găsiți în sânge și alte țesuturi și organe cum ar fi viermii filiformi și stadiile extra-intestinale de Strongyloides și Trichinella.

Derivații cu formulele (III) și (IV) sunt valoroși de asemenea pentru tratarea și prevenirea infecțiilor artropode ale animalelor și păsărilor cum ar fi căpușele, păduchii, puricii, muștele de carne, insectele care mușcă și larvele dipterice migratoare care pot afecta vitele și caii.

Derivații cu formulele (III) și (IV) sunt, de asemenea, insecticizi activi contra dăunătorilor din gospodărie, cum ar fi gândacii, moliile, gândacul de covor și muștele de casă și sunt utili și contra insectelor dăunătoare ale grânelor depozitate și a plantelor agricole cum ar fi păianjenul, afidele și contra ortopterelor migratoare cum ar fi lăcustele.

Derivații cu formulele (III) și (IV) sunt administrați sub formă de formulări adecvate utilizării specifice dorite și a speciei particulare de animal gazdă care este tratat precum și a parazitului sau insectei implicate. Pentru utilizarea ca antihelminitic compusul poate fi administrat oral sub forma unei capsule, bolus, tabletă sau preferabil lichid de stropire, sau alternativ, poate fi administrat prin injectare, turnare sau ca implant. Astfel de formulări sunt preparate în manieră convențională în conformitate cu practica veterinară standard. Astfel, capsulele, holurile sau tabletele pot fi preparate amestecând ingredientul activ cu un diluant sau purtător adecvat fin divizat, conținând în plus un agent de dezintegrare și/sau un liant cum ar fi amidon, lactoză, talc, stearat de magneziu, etc. O formulare de stropire poate fi preparată dispersând ingredientul activ într-o soluție apoasă împreună cu agenții de dispersare sau umectare, etc., și formulările injectabile pot fi preparate sub forma unei soluții sterile care poate conține alte substanțe, de exemplu, suficiente săruri sau glucoză pentru a face ca soluția să fie izotonică cu sângele. Aceste formulări vor varia în ceea ce privește greutatea compusului activ în funcție de specia de animal gazdă care este tratat, de severitatea și tipul infecției și de greutatea corporală a gazdei. în general, pentru administrare orală sau injectabilă va fi

RO 115884 Bl satisfăcătoare o doză de la circa 0,001 la 10 mg pe kg de greutate corporală a animalului, dată ca o doză unică sau în doze individuale pe o perioadă de la 1 la 5 zile, sos dar desigur, pot fi situații în care sunt indicate doze mai mari sau mai mici și acestea fac parte din domeniul acestei invenții. Pentru administrarea injectabilă, o doză mai preferată este de la circa 0,02 mg la 2 mg pe kg de greutate corporală a animalului dată ca o doză unică sau doze divizate pe o perioadă de 1 la 5 zile.

Ca o alternativă, compușii pot fi administrați sau alimentați animalelor și pentru 510 acest scop se poate prepara un concentrat aditiv pentru alimentație cau un premix pentru amestecare cu alimentația normală a animalului.

Pentru utilizarea ca insecticid pentru tratarea dăunătorilor agricoli compușii, sunt aplicați sub formă de sprayuri, prafuri, emulsii și altele asemenea în conformitate cu practica agricolă standard. 515

Așa cum se utilizează în cele de mai sus și în revendicările care urmează, termenul “solvent inert de reacție” se referă la orice solvent care nu interacționează cu materiile prime, reactivii, intermediarii sau compușii finali, într-o manieră care ar afecta negativ randamentul produsului dorit. Termenul gaz de reacție inert” se referă la orice gaz care nu interacționeazță cu materiile prime, reactivii, intermediarii și compușii finali 520 în nici o manieră care ar afecta negativ randamentul produsului dorit.

Așa cum se utilizează în descriere și în revendicări, termenul “arii” înseamnă fenil sau fenil substituit opțional cu unu până la trei grupe alese dintre alchil(C₁-C₄], alcoxifCqC₄) sau halogen.

Termenul “ariloxi înseamnă fenoxi sau fenoxi substituit opțional cu unu până la trei 525 grupe alese dintre alchilfCq-CJ, alcoxtfCq-CJ sau halogen.

Se dau, în continuare, exemple de realizare a invenției:

Exemplul 1. Compusul cu formula generală [III] în care R¹ este fenoxiacetil și R³este hidrogen.

□ soluție constând din 20 g derivat cu formula [III] în 400 ml clorură de metilen 530 și 10 ml piridină anhidră, sub azot, se răcește la - 78°C și se adaugă 15,1 ml clorură de fenoxiacetil, în picătură, în timp de 10 min. Amestecul de reacție se menține la - 70°C până la - 78°C timp de 1,5 h și apoi se stinge cu 250 ml de soluție saturată de bicarbonat de sodiu. Amestecul se agită, timp de 1,5 ore, stratul organic se separă, se extrage din nou cu 250 ml soluție saturată de bicarbonat de sodiu și se usucă pe MgSO₄ 535 anhidru. Solventul se îndepărtează apoi la vid pentru a se obține 25,7 g compus din titlu de puritate 95% ca un solid aproape alb (randament 96%). Timpul de retenție HPLC este de 7,9 min (Ultrasphere ODS 5 μ, 25 cm x 4,6 mm (Beckman); metanol:acetonitril:apă 559:383:58; 1,5 ml/min; UV 245 nm).

Exemplul 2. Compusul de formula generală [III] în care R¹ este fenoxiacetil și R³ 540 este p-toliloxitiocarbonil

O soluție constând din 10 g de compus obținut ca în exemplul 1 în 100 ml toluen și 30 ml piridină anhidră, sub azot, se încălzește la 100°C și în timp de 5 min se adaugă 7,7 ml O-p-tolilclortionoformiat. Amestecul se menține la 100 + 5°C, timp de 2 h, pentru a completa reacția, se răcește la 50°C și solvenții se îndepărtează la vid pentru a se 545 obține un reziduu brun. Acesta se dizolvă în 120 ml toluen, soluția se extrage cu 120 ml apă și de două ori cu 100 ml soluție saturată de bicarbonat de sodiu. Stratul organic separat se concentrează la circa 80 ml, se filtrează și se cromatografiază utilizând un sistem Prep-500 (Waters Associates) echipat cu două cartușe cu silica gel. Solventul de

RO 115884 Bl eluare este 75:25 + hexani: acetat de etil. Fracțiile conținând compusul dorit, se combină și solventul se îndepărtează la vid pentru a se obține 9,8 g compus de puritate 95,7% sub forma unui solid galben-brun (randament 83,2%). Timpul de retenție HPLC este de 15,2 min (Ultrasphere ODS 5 μ 25 cm x 4,6 mm (Beckman); metanol:acetonitril:apă-559:383:58; 1,5 ml/min; UV 245 nm).

Exemplul 3. 5,4''-O-IJifenoxiacetil-doramectin (compus cu formula IVÎn care fî⁷este fenoxiacetil]

La 8,5 g de compus obținut în exemplul 2, în 90 ml de 2-metoxietil eter se adaugă 4,5 g carbonat de calciu. Amestecul se încălzește apoi la 156 - 158°C cu agitare sub purjare continuă cu un curent de azot. După 24 h la 156 - 158°C, analiza amestecului arată prezența a 6,8 g de compus dorit evaporă la vid pentru a obține compusul sub forma unui ulei galben. Timpul de retenție HPLC este de 10,4 min (Ultrasphere ODS 5 μ, 25 cm x 4,6 mm (Beckman); metanol:acetonitril:apă 559:383:58:1,5 ml/min; UV 245 nm).

Exemplul 4. 5,4-O-difenoxiacetil-doramectin[compus cu formula IVîn care R¹ este fenoxiacetil]

La o soluție constând dintr-un gram de compus obținut în exemplul 2 în 20 ml 2etoxietil eter, se adaugă 500 mg carbonat de calciu. Amestecul se încălzește apoi la 185°C, cu agitare, sub purjare continuă cu un curent de azot. După 5 h, la 185°C, amestecul este lăsat să se răcească la temperatura camerei și se filtrează. Analiza HPLC a soluției (Ultrasphere ODS 5 μ, 25 cm x 4,6 mm (Beckman); metanol: acetonitril: apă - 559:383:58; 1,5 ml/min UV 245 nm) arată prezența a 796 mg compus (randament 91%).

Exemplul 5. Dorametchin (compusul de formula (l)J.

soluție constând din 500 mg compus obținut în exemplul 3 în 1 ml 2-metoxietil eter și 3,5 ml metanol se răcește la - 35°C și în picătură se adaugă, în timp de 1 min, 2,1 ml soluție metanolică 2M de KOH. Amestecul se menține la - 35°C cu agitare, timp de 1 h, pentru a completa reacția și apoi se adaugă 252 mg acid acetic glacial dizolvate în 0,5 ml metanol. Se îndepărtează sursa de răcire și se adaugă în picătură 2,2 ml de apă, timp de o oră, după care începe cristalizarea. După agitare timp de 1 oră la temperatura ambiantă, cristalele se colectează prin filtrare, se spală cu două porțiuni de 0,5 ml amestec metanol: apa 7:3 și se usucă într-o etuvă sub vid. Recristalizarea din metanol/apă conduce la 272 mg compus de puritate 93,8% (randament 70,6%). Timpul de retenție HPLC este de 6,5 min (Ultrasphere ODS 5 μ, 25 cm x 4,6 mm (Beckman); metanol.acetonitril.apă 860:51:89; 1,5ml/min; UV 245 nm).

Exemplul 6. Doramectin (compusul cu formula [I]]

La o soluție de 6,6 g compus obținut în exemplul 3, în 75 ml metanol răcită la 15°C, se adaugă 75 ml soluție saturată de amoniac în metanol. Amestecul se menține la - 15°C, timp de 5,5 h, pentru ca reacția să fie completă și apoi se purjează timp de 30 min cu azot. Volatilele se îndepărtează la vid, uleiul galben deschis rezultat se dizolvă cu 45 ml metanol și soluția se limpezește prin filtrare. La soluție se adaugă în picătură 5 ml de apă, după care începe cristalizarea. Amestecul se agită la temperatura ambiantă, timp de 2 h și apoi se adaugă 6,3 ml apă timp de 2,5 h. După agitare suplimentară timp de 1,5 h, solidul se colectează prin filtrare și se spală cu două porțiuni de 2,5 ml metanol: apă (7:3). După uscare într-o etuvă la vid, la temperatura ambiantă timp de 24 ore, se obțin 3,75 g produs de puritate 87,7% (randament 64%).

RO 115884 Bl

600

Exemplul 7. Compusul cu formula (III) în care R¹ este acetil și R² este hidrogen.

La o soluție constând din 20 g compus cu formula (II) în 200 ml clorură de metilen sub azot, se adaugă 28,6 g trietilamină și 1,06 g 4-dimetilaminopiridină. Soluția se răcește la - 5°C și în picătură, timp de 5 min, se adaugă 14,5 g anhidridă acetică, amestecul se menține la 0°C, timp de 20 min, pentru ca reacția să fie completă și care apoi se stinge la 0°C cu 200 ml de soluție saturată de bicarbonat de sodiu. Stratul organic se extrage din nou de două ori cu bicarbonat de sodiu saturat, se usucă pe MgS0₄ și solventul se îndepărtează la vid pentru a se obține 22,2 g produs de puritate 95% sub formă de solid alb (randamentul 96,7%). Timpul de retenție HPLC este de 6,6 min (Ultrasphere ODS 5 μ, 25 cm x 4,6 mm (Beckman); metanol:acetonitril: apă 902:36:62; 1 ,□ ml/min; UV 245 nm).

Exemplul 8. Compusul cu formula (III) în care R¹ este acetil și R² este hidrogen

La o suspensie constând din 5 g de compus cu formula (II) în 100 ml toluen sub azot, se adaugă 7,24 g trietilamină și 266 mg 4-dimetilaminopiridină. Amestecul se răcește la - 15°C și în picătură se adaugă 3,58 g anhidridă acetică timp de 5 min. Amestecul se agită la o temperatură de la - 10°C până la -15°C, timp de 30 min, pentru ca reacția să fie completă, se stinge cu 50 ml bicarbonat de sodiu apos saturat și se agită la temperatura ambiantă timp de 1 oră. Stratul organic se extrage din nou cu 50 ml soluție apoasă saturată de bicarbonat de sodiu, și se usucă prin distilarea parțială a solventului utilizând un aparat Dean-Stark. Soluția se analizează prin HPLC (Ultrasphere ODS 5 μ, 25 cm x 4,6 mm (Beckman); metanol: acetonitril :apă-902:36:62; 1,0 ml(min; UV 245 nm) și se constată că, conține 5,27 g produs (randament 96,5%).

Exemplul 9. Compusul cu formula (III) în care R¹ este acetil și R² este ptoliloxitiocarbonil

La o soluție de 20 g compus obținut în exemplul 7 în 200 ml acetat de etil sub azot, se adaugă 60 ml piridină anhidră, 22,2 g O-p-tolilclortionoformiat, după care se formează un precipitat galben. Amestecul se încălzește la reflux cu agitare, timp de 2 h, pentru ca reacția să fie completă și apoi se răcește la temperatura camerei. Volatilele se îndepărtează la vid, reziduul se distribuie între 150 ml acetat de etil și 150 ml apă și stratul organic se extrage de două ori cu soluție apoasă saturată de bicarbonat de sodiu și odată cu apă. Stratul de acetat de etil se usucă pe MgSO₄ și solventul se îndepărtează la vid. Reziduul se dizolvă în 25 ml acetat de etil și 5 ml clorură de metilen, soluția se limpezește prin filtrare și se cromatografiază utilizând un sistem Prep-500 (Waters Associates) echipat cu două cartușe cu silica gel. Solventul de eluare este hexan:acetat de etikclorură de metilen 70:25:5. Fracțiile conținând produs se combină și solventul se îndepărtează la vid pentru a se obține 19 g (randament 82,6%) produs sub formă de solid galben deschis. Timpul de retenție HPLC este de 17,1 min (Ultrasphere ODS 5 μ, 25 cm x 4,6 mm (Beckman); metanol:acetonitril:apă 902:36:62; 1,0 ml/min; UV 245 nm).

Exemplul 10 5,4-O-diacetil-doramectin (compusul cu formula IVîn care R¹ este acetil)

O suspensie constând din 9,5 g carbonat de calciu se încălzește la 156 - 158°C sub purjare continuă cu un curent de azot. La acest amestec se adaugă 18,7 g de compus obținut ca în exemplul 9; încălzirea, agitarea și prelungirea cu azot se continuă, timp de 25 h. După răcire la 50°C, amestecul se filtrează și solventul se îndepărtează la vid. Reziduul se dizolvă în 55 ml clorură de metilen, 25 ml acetat de etil și se adaugă

605

610

615

620

625

630

635

640

RO 115884 Bl ml hexani, soluția se filtrează și se cromatografiază utilizând un sistem Prep-500 (Waters Associates] echipat cu două cartușe cu silica gel. Solventul de eluare este hexani:acetat de etihclorură de metilen 70:25:5. Fracțiile conținând produs se combină și solventul se îndepărtează la vid pentru a se obține 13,7 g de produs de puritate 87% sub forma unui solid galben (randamentul 74,8%). Timpul de retenție HPLC este de 11,1 min (Ultrasphere ODS 5 μ, 25 cm x 4,6 mm (Beckman); metanol:acetonitril:apă 902:36:62; 1,0 ml(min; UV 245 mm).

Exemplul 11. 5,4-O-diacetil-doramectin (compusul cu formula [IV] în care R¹ este acetil]

La o soluție constând din 504 mg compus preparat ca în exemplul 9 în 25 ml 2etoxietileter, se adaugă 250 mg carbonat de calciu. Amestecul se încălzește apoi la 183 - 185°C, cu agitare sub purjare continuă de azot. După 1,5 h la 183 - 185°C, analiza amestecului arată prezența a 364,4 mg de produs (randament 84,7%).

Exemplul 12. Doramectin (compusul de formula [I]

La o soluție constând din 7,3 g compus obținut în exemplul 10 în 145 ml tetrahidrofuran anhidru sub azot, răcită la - 72°C, se adaugă 59,5 ml soluție 1,0 M soluție de trietilborohidrură de litiu în tetrahidrofuran, în picătură pe timpul a 45 min. Amestecul de reacție se agită la o temperatură de la - 72° până la - 70°C, timp de 1 h și apoi este lăsat să se încălzească cu încetul la temperatura camerei pentru a completa reacția. Amestecul se stinge apoi cu 75 ml apă și 75 ml clorură de metilen și se agită timp de 1 h. Straturile se separă, stratul apos se extrage cu 75 ml clorură de metilen și straturile organice combinate se spală de două ori cu 75 ml bicarbonat de sodiu apos saturat. Solvenții se evaporă la vid, reziduul se dizolvă în 54 ml metanol, și soluția se limpezește prin filtrare. La această soluție se adaugă în picătură pe timpul a 2D min 6,9 ml apă, după care începe cristalizarea. Amestecul se agită la temperatura ambiantă timp de 15 min și apoi se adaugă 6,2 ml apă în picătură pe timpul a 30 min. Amestecul se agită timp de 18 ore, solidul se colectează prin filtrare, se spală de două ori cu porțiuni de 2 ml de metanol: apă, 75:25, și se usucă într-o etuvă la vid pentru a se obține 4,27 g produs de puritate 89,5% (randament 57,3%).

Exemplul 13. Efectul purjării cu azot asupra reacției de eliminare termică

La o soluție constând din 5,3 g compus obținut în exemplul 2, în 55 ml 2metoxietil eter se adaugă 2,5 g carbonat de calciu. Amestecul se încălzește apoi la 157°C cu agitare în timp ce se barbotează continuu un curent de azot printr-un tub de dispersare a gazului. După 30 h, la 154°C - 157°C amestecul este lăsat să se răcească la temperatura camerei, se filtrează și se canalizează prin HPLC (Ultrasphere ODS 5 μ, 25 cm x 4,6 mm (Beckman); metanol:acetonitril:apă 559:383:58; 1,5 ml/min; UV 245 nm). Analiza arată prezența a 3,93 g 5,4-0-difenoxiacetil-doramectin (randament 84,8%).

Acest exemplu se repetă în condiții identice, incluzând utilizarea unui lot identic de compus obținut ca în exemplul 2, dar fără purjare de azot. Randamentul de produs în acest caz este de 47,5% ceea ce arată efectul benefic al purjării cu azot.

Claims

Revendicări

685

1. Derivat de doramectin caracterizat prin aceea că este reprezentat de formula generală structurală III (III)

690

695 este o grupă

700 în care:

R¹ este o grupă alcanoil (C₂-C₅) sau ariloxiacetil; și R² este un atom de hidrogen sau o grupă ariloxitiocarbonil.
2. Derivat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că R¹ alcanoil (Cg-Cg), fenoxiacetil sau alchilfCi-CJ fenoxiacetil sau alchil (C₁-C₄]fenoxiacetil și R²este un atom de hidrogen sau o grupă alchil (C^-CJ fenoxitiocarbonil.
3. Derivat conform revendicării 2, caracterizat prin aceea că R¹ este o grupă C₆H₅0CH₂(=D)-.
4. Derivat conform revendicării 3, caracterizat prin aceea că R² este un atom de hidrogen.
5. Derivat conform revendicării 3, caracterizat prin aceea că R² este o grupă p-CH₃-C₆H₅0C(=S]-.
6. Derivat conform revendicării 2, caracterizat prin aceea că R¹ este o grupă CH₃C(=O).
7. Derivat conform revendicării 6, caracterizat prin aceea că R² este un atom de hidrogen.
8. Derivat conform revendicării 6, caracterizat prin aceea că R² este o grupă p-CH₃-C₆H₅-0C(=0).
9. Derivat de doramectin caracterizat prin formula generală structurală IV;

705

710 aceea că este reprezentat de

715 (IV)

RO 115884 Bl unde R¹ este o grupă alcanoil (C₂-C₅) sau o grupă ariloxiacetil.
10. Derivat conform revendicării 9, caracterizat prin aceea că R¹ este o grupă alcanoil (C₂-C₅), fenoxiacetil sau alchil (G-CJ fenoxiacetil.
11. Derivat conform revendicării 10, caracterizat prin aceea că R¹ este o grupă CH₃C(=0]-.
12. Derivat conform revendicării 10, caracterizat prin aceea că R¹ este o grupă C₆H₅OCH₂C(=O]-.
13. Procedeu de preparare a unui derivat de doramectin având formula generală structurală IV:

în care R¹ este o grupă alcanoil (C₂-Cg) sau ariloxiacetil, caracterizat prin aceea că un derivat având formula generală structurală III:

în care R¹ este o grupă alcanoil (C₂-C₅) sau ariloxiacetil și R² este este o grupă ariloxitiocarbonil este supus reacției într-un mediu de solvent de reacție inert la o temperatură cuprinsă între circa 15O°C și 2OO°C, timp de circa 2 h până la circa 48 h, în prezență de carbonat de calciu cu purjare continuă a amestecului de reacție cu gaz inert.
14. Procedeu pentru prepararea unui derivat de doramectin având formula generală structurală I:

RO 115884 Bl caracterizat prin aceea că acesta cuprinde următoarele etape consecutive:

(a) reacția compusului cu formula generală structurală formula structurală II

790 cu un agent de acilare, având formula generală (R⁴C0₂0 sau R⁴C0X, în care R⁴ este o grupă ariloximetil și X este CI sau Br obținându-se un derivat cu formula generală structurală III:

805

810

RO 115884 Bl în care R¹ este ariloxiacetil și R² este hidrogen;

(b) după care derivatul cu formula generală structurală III în care R¹ este ariloxiacetil și R² este un atom de hidrogen, astfel obținut, se supune reacției cu un compus de formula generală R³0C(=S)X, în care R³ este o grupă arii și X este un atom de CI sau Br obținându-se un compus cu formula generală III, în care R¹ este o grupă ariloxiacetil și R² este o grupă ariloxitiocarbonil;

(c) apoi compusul cu formula generală III, în care R¹ este o grupă ariloxiacetil și R² este o grupă ariloxitiocarbonil astfel obținut, se supune reacției într-un solvent de reacție inert la o temperatură cuprinsă între circa 15O°C și circa 2OO°C, timp de circa 2 h până la circa 48 h, în prezență de carbonat de calciu în condiții de purjare continuă de gaz inert pentru a se obține un derivat având formula generală structurală IV;

în care R¹ este o grupă ariloxiacetil și, în final, (d) se supune reacției derivatul cu formula generală IV, în care R¹ este o grupă ariloxiacetil cu o bază într-un mediu de alcool drept solvent pentru a se obține derivatul cu formula generală I.
15. Procedeu conform revendicării 14, caracterizat prin aceea că gazul inert de reacție este azotul.
16. Procedeu conform revendicării 14, caracterizat prin aceea că baza este reprezentată de NH₃, KQH, KCN, Na₂CO₃, NaHC0₃ sau NaOAc.
17. Procedeu pentru prepararea unui derivat având formula structurală I (0

RO 115884 Bl

870 caracterizat prin aceea că cuprinde următoarele etape consecutive: (a) reacția unui compus cu formula generală structurală II:

875 cu un agent de acilare, având formula generală (R⁴C0)20 sau R⁴C0X în care R⁴ este o grupă alchil(C1-C₄] și X este un atom de Cl sau Br obținându-se derivatul cu formula generală III:

885

890

895 în care R¹ este o grupă alcanoil (C-j-CJ și R² este un atom de hidrogen;

(b) după care derivatul cu formula generală III, în care R¹ este o grupă alcanoil (C^ C4) și R² este un atom de hidrogen, astfel obținut, se supune reacției, cu un derivat de formula generală R³0C(=S]X, în care R³ este o grupă arii și X este un atom de Cl sau Br, pentru a se obține un derivat cu formula generală III în care R¹ este o grupă alcanoil (Cr C₄] și R² este o grupă ariloxitiocarbonil; apoi (c) derivatul cu formula generală III în care R¹ este o grupă alcanoil (C₁-C₄) și R²este o grupă ariloxitiocarbonil se supune reacției în mediu de solvent inert de reacție la o temperatură cuprinsă între circa 15O°C și circa 2OO°C timp de circa 2 h până la circa 48 h în prezență de carbonat de calciu cu purjare continuă a reacției cu gaz inert pentru a se obține un derivat cu formula generală IV:

900

905

RO 115884 Bl în care R¹ este o grupă alcanoil (C^CJ și în final (d) se supune reacției derivatul cu formula generală IV în care R¹ este o grupă alcanoil (CȚ-CJ cu hidrură de litiu aluminiu, cianoborohidrură de sodiu sau trietilborohidrură de litiu într-un mediu de solvent inert de reacție pentru a se obține derivatul cu formula structurală I.
18. Procedeu conform revendicării 17, caracterizat prin aceea că gazul inert este azot.
19. Procedeu conform revendicării 18, caracterizat prin aceea că se supune reacției derivatul cu formula generală IV, în care R¹ este o grupă (C-i-CJ cu trietilborohidrură de litiu.
20. Procedeu conform revendicării 19, caracterizat prin aceea că acesta cuprinde amestecarea derivatului cu formula generală IV în care R¹ este o grupă alcanoil (C.j-CJcu trietilborohidrură de litiu la o temperatură de - 78°C la - 7O°C, menținând temperatura respectivă de - 78°C la -7O°C, timp de 15 min până la 1 h și apoi ajustând temperatura la temperatura ambiantă.
21. Procedeu conform revendicării 13, caracterizat prin aceea că gazul inert de reacție este azot.
22. Metodă de tratare a unui mamifer care suferă de o boală parazitară, caracterizată prin aceea că se administrează mamiferului respectiv o cantitate eficientă din punct de vedere parazitar a unui derivat având caracteristicile din revendicarea 1.
23. Metodă de tratare a unui mamifer care suferă de o boală parazitară, caracterizată prin aceea că se administrează la mamiferul respectiv o cantitate eficientă de derivat, având caracteristicile descrise în revendicarea 9.