PT97061B - Metodo para a utilizacao de tenidap como inibidor da activacao de colagenase e da actividade de mieloperoxidase - Google Patents

Description

MÉTODO PARA A UTILIZAÇÃO DE TENIDAP COMO INIBIDOR DA ACTIVAÇÃO DE COLAGEMASE E DA ACTIVIDADE DE MIELOPEROXIDASE”

MEMÓRIA DESCRITIVA

Resumo

O presente invento diz respeito è utilização de tenidap _? 5-c 1 oro-2 , 3-d i--hidro-2-oxo-3- C 2-tien i 1 car boni 1) -indo 1 e-1 -carboxamida, e dos seus sais com bases farmaceuticamenie aceitáveis para inibir a activaçSo de oolagenase num mamífero e para inibir a actividade de mieloperoxidase num mamífero» Este invento diz também respeito à utilização de tenidap e dos seus sais no tratamento de afeoçSes mediadas por oolagenase e de doenças tais como doenças de ressorção ósseo., ulceração da cárnea., doenças periodontais, doenças inflamatórias e feridas da pele e queimaduras em mamíferos» Os métodos de acordo com este invento compreendem a administração de uma quantidade eficaz de tenidap ou dos seus sais a um mamífero»

Este invente diz respeito à utilização de tenidap e dos seus sais de base farmaceuticamente aceitáveis para inibir a activação da colagena.se num mamífero. Este invento diz também respeito à utilização de tenidap e dos seus sais de base farmaceuticamente aceitáveis no tratamento de afecçSes e doenças mediadas por colagenase tais como doenças de resorção de osso, úlceras da córnea, doenças periodontais, doenças inflamatórias e feridas da pele e queimaduras num mamífero, Além disso, sste invento diz respeito à utilização de tenidap e das seus sais de base farmaceuticamente aceitáveis para inibir a actividade da mieloperoxidase num mamífero. Os métodos deste invento compreendem a administração de una quantidade eficaz de tenidap ou dos seus sais a um tal mamífera.

Tenidap, 5-cloro~2,3-di-hidro'-2~o>:o“3“C2~tienilcarba~ nilí-indole-l-carboxamida, possui a fórmula estrutural

Tenidap e os seus sais de base farmaceuticamente aceitáveis, entre outras 3—substituídas—2-oxindole-i-carboxami— das, são revelados e reivindicados na Patente dos EJJ.A, 4,550,672 que é atribuída àquele a quem é atribuída a presente. A patente revela que esses compostos, para além de serem úteis como agentes anti-inflamatórios e analgésicos, são agentes inibidores tanto da enzima ciclooxigenase CCQí como da enzima

I ipoxigsnase (LO)- Os ensinamentos dessa patente são incoporados a título de referencia« aqui

A utilização de tenidap s das seus sais de base farmacsuticamente aceitáveis, entre certas outras 3—substituídas—2— -oxindole-l-carboxamidas, para inibir a biossíntess de interleuquina·-! num mamífero e no tratamento de doenças e disfunções mediadas por interleuquina-í é revelada na Patente dos E.U.A.. 4,861,794 que é atribuída àquele a quem é atribuída a presente»

A Patente dos E»U„A» 4,853,409, atribuída àquele a quem é atribuída a presente, revela a utilização de tenidap e dos seus sais de base farmaceuticamente aceitáveis, entre certas outras

S-substituídas-Z-oxindole-í-carboxamidas, para suprimir a função de cálulas-T num mamífero e no tratamento de doenças autoimunitárias do tipo sistémico ou orgão—específicas mediadas por células-T.

Uma forma anidra, cristalina, do sal de sódio de tenidap é revelada no Pedido de patente Europeia 277,738 que foi apresentada no nome daquele a quem ê atribuída a presente.

A coiagenase é uma protease que é armazenada em grânulos específicos de neutrófilos sob uma forma latente» CHasty,

K.ft», et al.., d, Biol. Chem. 261.-:5645-565¾ <1986) e Hasty, K.A., et al», d» Biol .Chem» 262s 1004B- 10052 (198:7) »3 A coiagenase, na. sua forma activada, medeia diversas afecções e doenças num mamífero» Estas afecçSes e doenças incluem as seguintes, embora, não se limitem a elas: doenças de resorção de osso tais como osteoporose e cancro metastático do osso, ulceração da cárnea, doenças periodontais, doenças inflamatòrias das articulações, doenças, inf lamatòrias e feridas da pele e queimaduras» CHarris, E.D., et al», NEdM 291:6©5~609 (1974) e Harris, E»D,» et al.,

NEJM 291ι652-660 (1974)„3 A forma latente da colagenase pode ser activada per ácido hipocloroso. EWeiss, S.,d„, et al., Science 227; 747-749 (1985).3 A enzima mieloperoxidase converte o peróxido de hidrogénio, ele próprio o produto dismutado de radicais superóxido em ácido hipocloroso. Uma vez activada, a colagenase é capas de clivar de modo irreversível colagénio dos tipos 1, 2 e 3« CHasty, D.A., st al., J. Biol. Chem. 2ó2s16048-10052 (1987).]

Foi revelado que certos compostos de ouro podem interferir com a colagenase activada, mas apenas na presença de compostos organomercúricos. CMallya, 8„K., et al., J. Biol. Chem. 264s1594-1610 (1989) e Mallya, S.K, et al., Biochem. Bíophys. Res. Comm. 144s101-108 (1987).3 Além disso, foi também revelado que a penicilamina extrai hipocloritos e inibe a sua formação por meio de mieloperoxidase» CCuperus, R.A, , et al. , Arthritis Rheum. 28s1228-1233 (1985).3

Todavia, atê ao presente invento, não existia qualquer relata de utilização ou de intenção de utilizar tenidap e os seus sais para inibir a activação de colagenase e pra tratar afecçSes e doenças mediadas por colagenase tais como doenças de resorção de osso, ulceração da córnea, doenças periodontais, doenças inflamatórias da pele com tenidap, nem existia qualquer avaliação do seu papal nesse tratamentos. Além disso, não havia qualquer relatório acerca da utilização ou da intenção de utilizar tenidap ou os seus sais para, inibir a actividade da. mieloperoxida.se com tenidap, nem havia qualquer avaliação da sua capacidade para inibir a mieloperoxidase num mamífero.

Descobriu-se que tenidap e os seus sais de base farmaceuticamente aceitáveis inibem a. activação de colagenase num mamífero, sendo deste modo úteis na inibição da colagenase per se e no tratamento de afecçoes e doenças mediadas por colagenase.

Estas afecçSes e doenças mediadas por colagenase incluem as seguintes, embora não se limitem a elas: doenças de resorção de osso, ulceração da córnea, doenças periodontais, doenças inflamatórias- e feridas da pele e queimaduras. Além disso, descobriu-se que tenidap e os seus sais de base farmaceuticamente aceitáveis inibem a. actividade da mieloperoxidase num mamífero, sendo úteis na inibição da mielaperoaidase per se.

método de utilização de tenidap e dos sesu sais de base farmaceuticamente aceitáveis compreende a administração a um mamífero de uma sua quantidade eficaz. A administração pode incluir qualquer método conhecido para fornecer um composto a um mamífero de modo terapêutico, como administração oral ou parentérica tal como adiante se definem.

Tenidap, que possui a seguinte estrutura química

os seus sais de base farmaceuticamente aceitáveis e a sua preparação são descritos na Patente dos E.U.ft. 4,556,672, cujos ensinamentos são aqui incluídos a título de referência. Este invento diz respeito a novas utilizações de tenidap e dos seus sais que compreendera a inibição da activação de colagenase num mamífero e a inibição de mieloperoxidase num mamífero. Também são abrangidos pelo âmbito deste invento métodos de tratamento de

afecçSes s doenças mediadas por colagenase em mamíferos» tais afecçSes e doenças incluem as seguintes., embora não estejam a elas limitadas; doenças de resorção de osso tais como osteoporose e cancro metastático do osso., ulceração da córnea, doenças periodorttais, doenças inflamatórias e feridas da pele e queimaduras»

Tal como é revelado na Patente dos- E.U.A» 4,556,672, tenidap tem carácter acídica e forma saís com bases» Estão incluídos no Smbito deste invento todos esses sais de bases, que se podem formar tal como se explica nessa patente» Tais sais adequados, no âmbito do presente invento, incluem tanto os de tipo orgânico como os de tipo inorgânico e incluem os seguintes, embora não estejam a eles limitados; os sais formados com amónia, aminas orgânicas, hidróxidos de metais alcalinos, carbonatos de metais alcalinos, bicarbonatos de metais alcalinos, hidretos de metais alcalinos, alcóxidos de metais alcalinos, hidróxidos de metais alcalino-terrosos, carbonatos de metais alcalina-terrosos, hidretos de metais alcalino-terrosos e alcóxidos de metais alcalino—terrosos» Exemplos representativos de bases com as quais podem ser formados os sais de base referidos incluem amónia, aminas primárias, tais como n-propilamina, π-butilamina, anilina» ciclohexiiaroina, benzilamlna, p-toluidina, etanolamina e glucamina? aminas secundárias, tais como dietil— amina, dietanolamina, N-metilglucamina, N-metilanilina, morfolina, pirrolidina e piperidina; aminas terciárias, tais como trietilamina, trietanolamina, Ν,Ν-dimeti1anilina, N-eti1piperidina e N-meti Imorfolina? sódio? alcóxidos, tais potássio?

hidróxidos, tais como hidróxido de de sódio e metóxid de de uomo etóxido hidretos, tais· como hidreto sódio? e carbonatos, tais como carbonato de potássio e carbonato de sódio» SS.o sais preferidos os de sódio, potássio, amónio, etanolamina» dietanolamina e trietanolamina. Os sais de sódio de cálcio e hidreto são particularmente preferidos. Uma forma anidra cristalina de um sal de sódio é revelada, no Pedido de Patente Europeia. 277,738, apresentado no nome daquele a. que é atribuída a. presente. Os ensinamentos dessa, patente são aqui incluídos a título de referencia .

Também são abrangidos pelo 'âmbito deste invento os solvatos dos compostos atrás descritos, tais como os hemi-hidratos e mono-hidratos.

Os métodos deste invento compreendem a administração de tenidap e dos seus sais de ba.se íarmaceuticaraente aceitáveis a um mamífero. Esses compostos e os seus sais podem ser administrados a.o referido mamífero quer isoladamente, quer, e preferencialmen™ te, em combinação com veículos ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis numa composição farmacêutica, segundo práticas farmacêuticas convencionais. Uma tal administração pode ser oral ou parentérica. A designação administração parentérica, tal como é aqui utilizada, inclui administração intravenosa, intramuscular, intrsperitoneal, subcutânea, transdérmica e tópica, incluindo masnão se limitando a essa formas, inalação e lavagem oral, embora não esteja limitada a esses tipos ds administração. Embora, e de um modo geral, seja preferível administrar tais compostos e os seus sais por via oral, outros métodos podem ser preferíveis, de acordo com a atecçáo ou doença medxada por colagenase a ser tratada>

De um modo gerai, tenidap ~ os trados de modo desejável em doses variando cerca de 2O0 mg por dia, com uma gama de v cerca de 40 mg e cerca de 120 mg por dia , via oral, e entre cerca de i mg s cerca seus sais são adminisentre cerca de 20 mg e alares preferida entre para administração por de 200 mg por dia para administração por via parentérica, emtoor exitam ainda assim e necessariamente variações em função do peso do organismo a ser tratado, A dose apropriada para inibir a actividade de mieloperoxida.se e/ou inibir a activaçSo de coiagena.se num mamífero e parai o tratamento de afecções e doenças mediadas por colagenase com tenidap e os seus sais será facilmente determinada, pelos especialistas na técnica de receitar e/ou administrar tais compostos. Todavia, deve ter-se em conta que outras variações podem também ter lugar quanto a este aspecto, dependendo da espécie de mamífero a ser tratada e da sua resposta individual ao referido medicamento, bem como do tipo particular de formulação farmacêutica escolhido e do período de tempo durante o qual e dos intervalos a que se processa essa administração. Nalguns casos, níveis de dosagem inferiores ao limite mais baixo do intervalo de valores atrás referido podem ser mais do que adequados, enquanto que noutros casos podem ser usadas doses ainda maiores sem que por isso surjam quaisquer efeitos secundários perniciosos ou nocivos, desde que esse níveis de dosagem mais elevados sejam primeiro divididos em várias doses mais pequenas que são administradas ao longo do dia.

Para efeitos de administração oral, podem utilizar—se comprimidos contendo excipientes tais como citrato de sódio, carbonato de cálcio e fosfato dicálcico, juntamente com diversos agentes de desintegração tais como amido e de preferência amido de batata ou tapioca, ácido algínico e certos silicatos complexos, em conjunto com agentes de ligação tais como polivinilpirrolidona, sucrose, gelatina e acácia. AdicionaImente, são muitas vezes úteis para efeitos· de produção de comprimidos agentes lubrificantes tais como estearato de magnésio, sulfato de sódio e laurilo e talco, embora a lista não se limite a estes. Composições sólidas de tipo análogo podem também ser usadas como agentes de enchimento em cápsulas de gelatina moles, elásticas e rígidas, materiais preferidos quanto a este aspecto incluem também, a título de exemplo mas sem que tal deva ser visto como uma limitação, lactose ou açúcar do leite bem como glicóis de polietileno de elevada massa molecular. Quando se desejam suspensões e/ou elixires aguosos para efeitos de administração oral, o ingrediente activo essencial pode ser combinado com vários agentes edulcorantes e aromatizantes, material corante ou corantes e, caso seja desejado, agentes emulsionantes e/ou agentes de suspensão, juntamente com diluentes tais como água, etanol, glicol de propileno, glicerina e várias combinações destes»

Embora a via geralmente preferida para a administração de tenidap e dos seus saís de base farmaceuticamente aceitáveis seja a oral, aqueles podem também ser administrados por via parentérica» Esta via de administração parentérica pode constituir o modo de administração preferido para o tratamento de certas afecções ou doenças mediadas por colagenase»

Para efeitos de administração parentérica, podem ser usadas soluções de tenidap ou de um seu sal em óleo de sésamo ou de amendoim ou numa solução aquosa de glicol de propileno, bem como soluções aquosas estéreis dos sais de base solúveis em água correspondentes previamente enumerados. Tais soluções aquosas devem, caso seja necessário, estar adequadamente tamponadas, ® o | diluente líquido deve ser tornado isotónico com solução salina ou glucose em quantidade suficiente» Estas soluções aquosas específicas são especialmente adequadas para efeitos de injecção intravenosa, intramuscular e subcutânea» Os meios aquosos i estéreis usados neste contexto são facilmente obtidos por meio de procedimentos convencionais conhecidas dos especialistas da técnica» Por exemplo, utiliza-se geralmente água destilada como diluente líquido e a preparação final é passada através de um filtro bacteriano adequado tal como um filtro de vidro sintered glass'^! ou um filtro de terra de diatomáceas ou de porcelana não ·~ vidrada» Os filtros deste tipo preferidos incluem os filtros Berkefeld, Chamberland e Asbestos Disk-Metal Seitz, em que o fluido é sigado para um recipiente estéril através de uma bomba de sução» Devem ser tomadas as medidas necessárias durante a preparação destas soluções injectáveis de modo a garantir que os produtos finais são obtidos de forma estéril» Para efeitos de administração transdérmica, a forma de dosagem do composto específico pode incluir;, a título de exemplo, soluções, loções, unguentos, cremes, geles, supositórios, formulações de libertação controlada e limitação da taxa e dispositivos para esse fim..

I Estas formas de dosagem compreendem o composto específico e podem incluir etanol, água, agentes que facilitem a penetração e veículos inertes tais como materiais produtores de gel, óleo mineral, agentes emulsionantes, álcool benzilico e outros análogos»

Composições para melhorar o fluxo transdérmico especificas são reveladas no Pedido de Patente Europeia 271,983 e no Pedido de Patente Europeia 331,382, que foram apresentadas em nome daquele a quem é atribuída a presente, cujos ensinamentos são aqui incorporados a. título de referência. Para efeitos de administração tópica, a forma de dosagem do composta específica pode incluir, por exemplo e sem que tal deve ser interpretado | como constituindo de algum modo uma limitação, soluções, loções, unguentos, cremes e geles»

A capacidade de tenidap para inibir a activação de i colagena.se e para inibir a actividade de mieloperoxidase foi determinada pelos procedimentos que a seguir se descrevem.

Obteve-se sangue humano completo de voluntários normais por meio de venipunctura para seringas heparinizadas» ft maior parte dos glóbulos vermelhos foi removida por meio de sedimentação com dextra.no e os neutrófilos foram separados por meio de centrifugação de densidade sobre hypaque ficoll» A frscção rica em neutrófilos foi lavada e os glóbulos vermelhosresiduais foram removidos por meio de lis© hipotónica segundo o procedimento descrito por Blackburn, W»D. et al., Arthritis Rhsum» 50?1006-1014 C1987). Os neutrófilos assim preparados foram usados no teste que a seguir se descreve, sendo a viabilidade das células assegurada mediante determinação da sua capacidade para excluir typan blue”. Em cada teste, a viabilidade das células excedia vulgarmente 95%«

A fim de testar a inibição da libertação de colaqenase activada por neutrófilos, realizou—se o seguinte teste» Suspensões celulares de neutrófilos foram incubadas a 37 *C durante 15-30 minutos na presença de diversas concentrações de tenidap ou de outros compostos em estudo. Tenidap foi dissolvido e diluído em água e adicionado às células directamente a partir daí. Outros compostos testados foram inicialmertte dissolvidos em NaOH 0,ÍM e depois diluídos em água antes de serem adicionados às células. Depois de as células terem sido incubadas na presença de tenidap ou de outro composto em estudo, as suspensões célula6 res <5 x 10 células/ml, 125 μΐ/cavidade) foram adicionadas a cavidades de placas microtiter revestidas a IgS e bloqueadas com albumina de soro de bovinos Cbovine serum albumin, ou BSA) e incubadas durante 45 minutos a 37°C. Como controlos, realizaram-se incubações semelhantes na ausência de IgS. Após a incubação, as suspensões de células foram centrifuoadas Í750 x g) durante 5 minutos a 4°C« Q material sobrenadante foi removido e adicionou— -se DFP ídiisopropilfluorofosfato) de modo a obter uma concentração final de i@ 'Ti a fim de .Inactivar as proteases de serina.

Depois, a actividade da colagenase no material sobrenadante tratado com DFP foi determinada oor meio de incubação, em •ί -η Ι.ώ triplicado, de partes alíquotas de 200 μΐ de material sobrenadan™ te com fibrilas de colagénio do tipo 1 reconstituídas marcadas com '~‘H em cavidades de cultura de tecidos de fundo chato de 7 mm P (Lmbro , Cat #76-032-05, Flow Laboratories HcLean, Va) tal como é descrito por Johnson-Wint, B., Anal. Biochem. 104;175™131 (1980),. As fibrilas reconstituídas em cada cavidade continham 75 pg de uma mistura de colagénio marcado com Ή e não-sarcado com uma actividade de 700® cpm» ft fim de determinar o valor total da radioactividade potencialmente libertada pelas fibrrilas em cada experiência, as fibrilas reconstituídas foram também incubadas com uma mistura de colagenase clostr.id.ial (25® mg/ml HBSS (Hank's faalanoed salt solution (solução salina equilibrada de Hank), 6I8CQ, Grand Island, Nova Iorque))» A fim de maximisar a sensibilidade e especificidade do teste, as incubações foram realizadas durante dezoito horas, em triplicado, a 37*C» No final do período de incubação, o material sobrenadante foi aspirado de cada cavidade e a radioactividade determinada por meio de contagem num aparelho de contagem de cintilações em líquidos. Um valor superior a 99% da radioactividade aplicada a cada cavidade foi recuperada das cavidades incubadas com colagenase hacteriana.» Os valores médios das contagens por minuto provenientes de fibrilas incubadas unicamente com solução tampão (HBSS) foram» substraídos do valor cpm medido em cada amostra de material sobrenadante. A partir dos valores em triplicado resultantes para cada amostra da imaterial sobrenadante foram calculados valores médios, que foram divididos pelo valor médio de cpm libertado pela colagenase hacteriana. a fim de ser determinada a lise percentual de fibrilas produzida por cada amostra, de material sobrenadante» 0 colagénio activado total libertado durante a incubação de dezoito horas foi então calculado e dividido pelo tempo de incubação afim de proporcionar valores para a actividade da colagenase (ng colagénio degradado/min) em cada, amostra de imaterial sobrenadante.

Em experiências paralelas, a libertação total de colagenase nos· matérias sobrenadantes foi determinada mediante a activação da colagenase latente nos materiais sobrenadantes com nersalilo l,0nM (Harris, E.D» e Vater, C.A», Methodology of sollagenase ísarchs substrate purification, enzyme activation and purification» Collagenase in Normal Pathological Connective Tissues. (Metodologias para trabalhos de investigação da colagenase: purificação de substratos, activação e purificação de enzimas» A Colagenase em Tecidos Conectivos Patológicos Normais») Organização de D»E» Woolley, J„M« Evanson, Chichester, •John Wiley & Sons, 19S0) antes da adição das amostras de material sobrenadante às fibrilas de colagénio marcadas radioactivamente» A fim de evitar uma subavaliação do valor total da colagenase libertada devido à inibição da actividade da protease por metabolitos oxidativos gerados durante a cativação dos neutrófilos, os materiais sobrenadantes usados para estas medidas foram derivados de neutrófilos activados na presença de azida de sódio í,0mM Cum agente inibidor de mieloperoxidase). As incubações e os cálculos da actividades da colagenase nos materiais sobrenadantes tratados com mersalilo foram realizados tal como se descreveu anteriormen™ te»

Utilizando o teste atrás descrito com tenidap, piroxicam, indometacina, ibuprofen e naxopren, com picos de valores de concentração dos compostos activos, obtiveram—se os valores indicados no Quadro I a seguir apresentados

QUADRO I

Inibição da Libertação de Colaqenase de Neutrófilos Activada

Composto Pico de valor de concentração ípH? Inibição em X

Tenidap!	O / s i-í	64
Piroxicem	*^5	10
I ndrass ta.c ina	«-? cr.	14
1buprofen	175	0
Na.proxen	80	0

Tal como se mostra no Quadro I, tanto o ibuprofen corno o naxopren, ambos agentes, inibidores da. cicloofiigena.se não revelaram qualquer efeito inibitório sobre a libertação da ccdagena.se activada. por neutrófilos. O piroxicam e a. indometaci— na, ambos também agentes inibidores da ciclooxigenase, apresentavam algum efeito inibitório sobre a. libertação de colagena.se activada, mas a valores suprafisiológicos de concentração desses compostos. 0 tenidap, a valores de concentração relevantes de um ponto de vista clínico, inibia de modo significativo a libertação de colagena.se activada de neutrófilos.

Um teste adicional foi realizado preparados tal como atrás se descreveu, presença e na ausência de tenidap e depois em que neutrófilos, foram incubados na estimulados por meio de incubação na presença de IgS, tal como atrás se descreveu. Os materiais sobrenadantes foram depois activados pela adição de mersalilo mercúrico orgânico. Em resultado deste teste, descobriu-se que o tenidap inibia em 22/i a quantidade total de colagenase libertada pelos neutrófilos. Assim, concluiu-se que a inibição por tenidap da libertação de colagenase activada é devida à inibição da. activação da. colaqenase.

A capacidade da tenidap para inibir a eatividade da mieloperoxidase foi demosntrada pela teste seguinte» Neutrófilos Cl ,25 x 10'^/ínl, preparados tal como atrás se descreveu) foram incubadas durante 60 minutos a 37°C em cavidades de cultura de tecidas revestidas quer com BSA, quer com IgG que tinham sido bloqueadas com BSA» Após incubação, as cavidades foram aspiradas e as células foram removidas por meio de centrifugação.

ieparadamente, extraiu-se mieloperoxidase de neutrófilos inteiros com NaCl 1M que foi separada dos restos de células por meio de centrifugação» Os matérias sobrenadantes foram submetidas a diálise contra HBSS« Depois, adicionaram-se aos materiais sobrenadantes dialisados diversas concentrações de tenidap» A actividade da mieloperoxidase foi em seguida determinada adicionando 20μ1 da material sobrenadante a 300 μΐ de solução tampão de acetato de sódio 0,2W, pH 4,5, contendo 17 mg de ácido 2,2'-azi~ no-di-(3-etilbenztiazolina)sulfónico e 600 μΐ de pèróxido de hidrogénio a 0,003%» Pi actividade da mieloperoxidase no material sobrenadante foi depois determinada pela alteração no valor de absorção a 412 nm usando um espectrofotómetro tal como se descreve em Shindler, J„S, et al», Eur. J. Biochem» 655325-331 CÍ976).

Claims (4)

1. REIVINDICAÇÕES lã« - Método de inibição da activação de colagenase num mamífero necessitando de tal inibição, caracterizado por compreender a administração a esse mamífero, por exemplo por via oral ou parentérica, de uma quantidade inibidora da activação de colagenase de tenidap ou de um seu sal com bases farmaceuticamente aceitável, em que o ingrediente activc é de preferência erca administrado em doses que variam desde cerca de 20 mg até c de 200 fflg, relativamente à administração oral, e desde cerca 1 mg até cerca de 200 mg por dia, relativamente à administr de parentérica.
2. 2â, - Método de tratamento de uma afecção ou doença mediada por colagenase num mamífero, parfcicularmente uma doença de ressorção óssea (nomeadamente osteoporose ou cancro ósseo metastático), ulceração da córnea, uma doença periodorstal, uma doença inflamatória da pele ou uma ferida da pele, caracterizado por compreender a administração a esse mamífero, por exemplo por via oral ou parentérica, ou por via tópica Cparticularmente rei ati. vamente è ulceração da córnea, doença periodorstal, doença inflamatória da pele ou ferida da pele) de uma quantidade permitindo tratar uma afecção ou doença mediada por colagenase de tenidap ou de um seu sal com bases farmaceuticamente aceitável, em que o ingrediente activo é de preferência administrado em doses que variam desde cerca de 20 mg até cerca de 200 mg, reiativamente á administração oral, e desde cerca de 1 mg até cerca de 200 mg por dia, relativamente ã administração parentérica.
3. 3â, - Método de tratamento de queimaduras da pele de um mamífero, caracterizado por compreender a administração a esse mamífero, por exemplo por via oral, parentérica ou tópica, de uma quantidade permitindo tratar a queimadura de tenidap ou de um seu sal com bases farmaceuticamente aceitável, em que o ingrediente activo é de preferência administrado em doses que variam desde cerca de 2® mg até cerca de 20® mg, rei a ti vamente è administração oral, e desde cerca de 1 mg até cerca de 20® mg por dia, relativamente á administração parentérica.
4. 4ã» - Método de inibição da actividade de mie 1 opera?;idase num mamífero necessitando de tal inibição, caracterizado por compreender a administração a esse mamífero, por exemplo por via oral ou parentérica, de uma quantidade inibidora da mieloperoxidase de tenidap ou de um seu sal com bases farmaceuticamente aceitável, em que o- ingrediente activo é de preferência administrado em doses que variam desde cerca de 2® mg até cerca de 20® mg, relativamente à administração oral, e desde cerca de 1 mg até cerca de 2®® mg por dia, relativsmente à administração parentérica»

   Lisboa, 18 de Março de 1991