PT94309A

PT94309A - Processo para a preparacao de novas antraciclinas e de composicoes farmaceuticas que as contem

Info

Publication number: PT94309A
Application number: PT94309A
Authority: PT
Inventors: Claude Monneret; Jean-Claude Florent; Gilbert Gaudel
Original assignee: Hoechst Lab
Priority date: 1989-06-07
Filing date: 1990-06-07
Publication date: 1991-02-08
Also published as: FR2648137A1; CA2018480A1; JPH03193798A; AU5688890A; KR910000780A; EP0402259A1

Description

ι

LABORATOIRES HOECHST "PROCESSO PARA A PREPARAÇAO DE NOVAS ANTRACiCLINAS E DE COMPOSIÇPES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM" A presente invenção diz respeito a um processo para a preparação de novas antraciclinas, assim como de medicamentos que as contem.

As antraciclinas representadas pela formula geral

constituem uma importante família de antibióticos e de agentes antitumorais. Certos membros desta família (como por exemplo a daunorubicina e a doxorubicina} são utilizados em clinica com sucesso, para o tratamento de diversas formas de cancro (leuce·* mias agudas, cancros do peito, cancros das vias urinãrias, doen -2-

ças de HODGKIN, etc.}, A sua notável actividade citotõxica e contudo limitada pelos efeitos secundários nefastos e, em particular, por uma im portante cardiotoxicidade, Esta, ligada a dose de antibiótico utilizada, requer uma interrupção 'irreversível do tratamento a partir de um certo limiar.

Numerosos esforços, foram, por conseguinte, feitos durai^ te estes u1 timos anos para melhorar o índice terapêutico destes compostos: uma diminuição da cardiotoxicidade parece mais'impor, tante do que um aumento da sua eficácia ponderai,

As modificações efectuadas incidem sobre a aglícona e po dem dizer respeito a todos os ciclos (A-B-C-D) e/ou sobre o açúcar.

No que diz respeito as modificações realizadas sobre a aglícona, os compostos obtidos são classificados geralmente em diversas categorias de acordo com a substituição do ciclo B:

. Derivados di-hidroxilados na posição 6 e 11 O esta categoria pertencem a daunorubicina *· composto de formula ge·* ral II - e a doxorubicina - composto de formula geral líIL

. Derivados mono-hidroxilados na posição 6 (serie 11» -desoxi}.

Derivados mono-hidroxilados na posição 11 (série 6 - -desoxi).

Demonstrou-se anteriormente que a substituição da cadeia lateral destes glicosidos , respectivamente COCH^ e COCH^OH, por um grupo CH20H conduz a novos glicSsidos antitumorais que apresentam uma actividade antitumoral semelhante a dos compostos de acordo com a técnica anterior mas que não apresentam resistência cruzada com a doxorubicina,

Pode-se citar particularmente a patente de invenção europeia N9 44 954 em nome de F, HOFFMANN-LA RQCH.E & CQ e a paten te de invenção francesa N9 84 Q3634 em nome de LABORATQIRES HOE

CHST que descrevem glicosidos comportando tais antraciclinonas,

No que diz respeito as modificações Incidentes sobre o açúcar, efectuaram-se numerosas pesquisas sobre estas moléculas para determinar a relação entre a sua estrutura e a sua activi-dade biológica. Sobressai destas pesquisas que modificações ao nível dos açúcares levam frequentemente § obtenção de análogos, farmacol ogicamenltfi rtiais interessantes do que o composto inicial, Estas modificações levam , com efeito, a uma diminuição da dose terapeuticamente eficaz, uma actividade antitumoral mafs marcada, reacções secundárias, particularmente a cardiotoxicidade, tH minuídas (cf. particularmente as trabalhos de F, ARCAMONE "Doxo-rubicina" Academic Press, New York, 1981) sobre a daunosamina , açúcar das daunorubicina e doxorubicina,

Entre as modificações propostas figura, entre outras , a desoxigenação do C-41 do açúcar Ccf. patente de invenção europeia N9 0 048 967 de FARMITALIA}; segundo os inventores desta patente de invenção, o composto 3 representado na figura B a se guir apresenta uma actividade antitumoral muito interessante.

-5^

-5^ BI RI B2 RI B3 RI OH ; R = H (daunorubicina] R = OH (doxorubicina] R = H (patente de invenção europeia N9 O 048 967] A inversão da configuração do açúcar ao nível dos carbo nos 3' e/ou 4' - ver a figura c a seguir *· ;

OH

ch2r2

CCJ contribui igualmente para preparar derivados farmacologicamente muito interessantes, 0 gltcosido C4 tem uma forte actividade antitumoral e o composto desoxigenado Cg constituiuo objectivo de uma patente de invenção (Cario ERBA, Jpn, Kokai Tokkyo Koho JP 57-142-981, FARMITALIA, BE 891, 837],

Os açúcares de formulas gerais B e C comportam uma fun^ ção amina em C-3‘; a presença de uma tal função amtna primária -6-

ou secundaria em C-31 (a daunosamina por exemplo] parece indis pensãvel para a actividade antitumoral destes, compostos, em par ticular devido ao seu papel nos processos de intercalação no ADN (G. L. TONG e colab., “J. Med, Chem," 1979, 22, 912 e A, DIMARCO e colab., "Arzneim Forcfi.", 19.75, ,25, 3681, A patente de invenção norte-americana N9 4 6.84 629, em nome de FARMITALIA Cario ERBA S,psA., descreve antraciclinas de rivadas da daunorubicina ou da doxorubictna (ye.r fêrmula geral B indicada antes) comportando um açúcar aminado na posição 4',

Contudo, estas antraciclinas tem o inconveniente de apre sentar uma resistência cruzada com a doxorubicina, A requerente, continuando o estudo empreendido hl jã via rios anos (cf, particularmente as patentes de invenção francesas N9s 2 551 Q57, 2 560 876, 2 565 982, 2 584 40.6 e 2 59.1 5991 che gou a novas antracicl inas que são, por um lado, agentes citotcJ-xicos e antitumorais potentes, não apresentando no entanto qual quer cardiotoxicidade aumentada em relação aos compostos da te£ nica anterior e, por outro lado, em que o processo de preparação ê fácil de realizar e pouco dispendioso, visto apresentar um bom rendimento, A presente invenção tem por objectivo antraciclinas,re presentadas pela formula geral -7-

0 OH

Π)

a qual R-j representa um atomo de hidrogénio ou um grupo de formula geral COR^, na qual R^ representa um grupo alquilo Ci-Og; R2 representa um ftonio de hidrogénio ou um atomo de i£ do; R3 representa um grupo azida, morfolino, uma amtna pri maria, uma amina secundaria de formula geral NHRg , na qual Rg representa um grupo COcF^, CQCHg, ftaH mido, uma amina terciaria de formula geral NRy-^Ry, na qual R7 representa um grupo benztlo, metilo, ann nonitrf10;

Rg representa um atomo de hidrogénio ou um grupo acilo C&ventuaímente substituído ou benzi!0 eventual^ mente substituído. -8-

As antraciclinas preparadas pelo processo de acordo com a presente invenção tem a vantagem de apresentar um ganho de po tencia da actividade sem aumentar a sua toxicidade, Tem igual -mente a vantagem de não apresentar resistência cruzada com a do xorubi ci na. A presente invenção tem igualmente por gbjectivo um pro cesso para a preparação das antracicl inas de acordo com a presen_ te invenção, caracterizado pelo facto de compreender as seguintes etapas:

1) glicosidação da aglTcona de fêrmula 0 OH

01 com um açúcar de formula geral

(V) na qual X representa um átomo de Bromo ou uma Itgação dupla i

Rg e R5 têm os significados definidos antes; 2) hidrólise selectiva do ciclo acetHlico; 3} depois, eventualmente, saponificaçao do grupo éster C-31, quando o símbolo R5 não representar um ãtomo de hidrogénio; e 4) eventualmente uma alqullação da função amína obtida,

De acordo com a presente invenção, quando o símbolo Rg representa um grupo amína secundaria, o processo compreende,além disso, uma etapa de desprotecção da função amína secundaria,

De acordo com um modo de realização vantajoso deste pro cesso, quando o símbolo X representa um ãtomo de Bromo, a g.lico_ sidação realiza-se de acordo com a reacção de KQENIGS-KNQRR se gundo o esquema reacclonal I dado a seguir;

ESQUEMA REACCIONAL I 0 OH

Br 0 OH OH R 1 1 ' 3 ESQUEMA REACCIONAL I (cont.)

O OH

A aglTcona de fórmula geral 1 ê a descrita no pedido de patente de invenção francesa nQ 2 560 876 em nome de ROECHST,

De acordo com uma disposição vantajosa deste modo de reali^ zação, a aglTcona 1 transforma-se em antraciclina mediante glicos£ dação com um açúcar de formula 3, de acordo com o esquema reacci£ nal indicado a seguir:

ESQUEMA REACCIONAL II

6

Obtim-se então a (S)-cis-l-Q-(4-azido~2,4,6-tridesoxíi!2£· -L-l í xo-hexopi ranosi 1) -1,2,3,4,6,11 -hexa-fudro^l ,3,5,1 2-tetra-fn droxi-3-hidroximetil-naftacenodiona de formula 5. 0 brometo do azido-açucar 3 obtêm-se a partir da 1-0-ace ti 1-3-aceti1-4-azido-2,4,6-tridesoxi-1ixo-bexopiranose de formula

N3 OAc (2) mediante bromação, dela .mesma obtida a partir da meti:!-4-azido-3-0i--benzoil-2,4,6-tridesoxf-L-2ju(£-hexopiranose descrita por MARTIN e colab,, "Carbohydr, Res,, 1987, 166, 59, Tipicamente, o composto de formula 2 obtêm-se mediante tratamento deste metil-gH cosido descrito na literatura com uma mistura de acido sulfurico em anidrido acético e de acido acético, 0 derivado halogenado de fórmula 3^ obtém-se, em seguida, mediante reacçao do HBr com o composto de formula 2 em solução em benzeno.

De acordo com uma outra disposição vantajosa deste modo de realização, transforma-se a aglTcona de fórmula 1 em antraci-clina mediante glicosidação com um açócar de fórmula 8, de acordo com o esquema reaccional III, a seguir:

-13/ ESQUEMA REACC.IONAL III

2 -14-

Obtem-se então a (S [-cis-1 -Q-[4-amino-2,4 ,6-tridesoxi -0(r -L-lixo-hexopi ranosí1)-1,2,3,4,6,11-hexa-hidro-l,3,5,12-tetra-M droxi-3-hidroximetil-6,ll-naftaceno-diona de fêrmula 12, 0 bromo-açucar de formula 8 resulta da acção do HBr sobre o derivado correspondente acetilado de formula 7, a seguir:

OBZ; (71 descrito por A, MARTIN e colab, ["Cardobydr, Res,", 1087, 166 , 199} .

De acordo com uma modalidade vantajosa desta disposição mediante alquilação do composto de fBrmula 12 obtido antes, ob-têm-se o composto de formula 14, 0 OH'

15-, 'Γ

Segundo um outro modo de realizaçSo vantajoso do processo de acordo com a presente invenção, quando o símbolo X representar uma dupla ligaçao, a glicosidaçao realtza-se na presença de N-iodo-succinimida de acordo com o seguinte esquema reaccio-nal IV:

ESQUEMA REACCIONAL IV

0 OH

1 15

16 17

ESQUEMA REACCIONAL IV

O OH O OH

Prepara-se igualmente o glical de formula 15 a partir do composto de formula 7 tal como definido antes, mediante hidrólise acida na presença de um ácido inorgânico fraco e agitação em piridina na presença de cloreto de metano-sulfonilo e de trietil^ ami na.

Alem das disposições anteriores, a presente invenção com preende ainda outras disposições que sobressairão da descrição que se segue, A presente invenção diz mais particularmente respeito a um processo para a preparação de novas antraciclinas, assim como de composições para uso terapêutico que as contêm, para a sua utilização em quimioterapia anti-cancerosa,

Estas novas antraciclinas tem propriedades citotõxicas e antitumorais notáveis, como se refere nos ensaios farmacológicos descritos adiante. -17-

Entre as diferentes antraciclínas de acordo com a presen te invenção, que apresentam resultados farmacolBgicos muito interessantes, citam-se especialmente: . a (S)-cis-l -Q-(4-azido-2,4,6-tridesoxl-o(-L-l .ixo-hexo-piranosil )-1 ,2,3,4,6,11 -hexa-hidro-1 ,3,5,12-tetra-hidroxi-3-hidro ximetil-6-11-naftaceno-diona de formula 6; , a (S)-cis-l -0-(4-amino-2,4,6-tridesoxi -«C-J.-1 ixo-hexo-piranosil )-l ,2,3,4,6,11-hexa-hidro-1 ,3,5,12-tetra-hidroxi-3-hidro ximetil-6,11-naftaceno-diona de formula 12; , o cloridrato de (S)-cis-l-Q-(4-amino-2,4,6-tridesaxi--oi~ L “1 i xo-hexo pi ranosil )-1,2,3,4,6,11 -hexa-hidro-1 ,3,5,1 2-tetra-hi-droxi—3-hidroximetil-6,11-naftaceno-diona de formula 13; , a (S)-cis-l-0-(3-morfolino-2,4,6-tridesoxi-*-L-l i xo-- hexo pi ranosil )-1,2,3,4,6,11 -hexa-hidro-1,3,5,1 2-tetra-hídroxi-3--hidroximeti1 -6,11 -naftaceno-diona de formula· Ί'4; , a (S)-cis-l -Q-(4-amino-2,4,6-trtdesOxt'-2-iedo-^-L.-tà lohexopi ranosil)-l,2,3,4,6,11-hexa-hidro-l,3,5,12-tetra-hidroxi--3-hidroximeti!-6,11-naftaceno-diona de formula lâ, A presente invenção sera melhor compreendida com a ajuda do complemento da descrição que se segue, que se refere a exemplos de realização do processo objecto da presente, invenção assim como a exemplos que demonstram as propriedades terapêuticas dos -18-

referidos glicosidos.

Exemplo 1: (S)-Cis-l-0-(3-0-aceti'l-4-azido-2,4 , e-tridesoxi^od-L--1 ixo-h.exopi ranosi 1) -1,2,3,4,6, Π -h.exa-h.idro-1 ,3,5,1 2-tetra-h.í-droxi-3-hidromettl - 3,13-isop.ropil ideno-6,1 1 -naftaceno-diona , de fórmula 4. A uma solução de 140 mg (0,35 mmole) de. agltcona de formula 1 em 150 ml de diclorometano adiciona-se 0,87 g (4 mmoles) de Óxido amarelo de mercúrio, 0,23 g (Q,68 mmole} de brometo mercúri

O cq e l;5gde peneiro molecular pulverizado de 4A, Adiciona-se por último o bromo-açúcar de fórmula 3 preparado extemporaneameji te a partir do composto de formula 2 (184 mg ou seja 0,71 mmole com borbulhamento em solução benzenica com uma corrente de HBr durante 5 minutos seguida de coevaporação duas vezescom benzeno anidro). Agita-se durante 18 Horas H temperatura ambiente e extrai-se depois com diclorometano da maneira Habitual, Obtem-se deste modo 250 mg do composto bruto que se submete a uma cromato grafia sobre gel de sílica com uma mistura de Hexano/EtoAC (4:1) como eluente, Obtem-se deste modo 200 mg (ou seja 96%) de compos to de formula 4 puro, Recristal i:za-se em acetato de etilo para se obter: P. -F.: 143-145°C (dec.J;

(*}2° D + 148° (c 1, clorofórmio); IV (clorofórmio) : 21OQ (azidol, 1725 (ester) e 1680 cm^ (quinona quelatada)

·/ RMN 1Η: cf 8v25 (m) e 7 ,75 (m) (4 H-aròrnáticos} 5,'50 (m,!^ 7 Hz, EM }, 5,20 (m, J=10 Hz, J' =4 Hz, J" = 3 Hz, H~3‘), 5,QQ (m, J=0'=3 Hz, EM1), 4,27 (q, 0 = 6,5 Hz, J '<0,5 Hz, H-5'}, 3,89 (d), e 3,82 [d] (AB , J=9 Hz, CH2-13), 3,78 (m, J = 3 Hz, 0' <0,5 Hz, H-4'}, 3,24 (.d) e 2,82 (d) (AB, J = 1 8 Hz, CH^4), 2,Q3 (s, QAc}, 1,46 (s. 2 Me, íso propilideno) , 1,32 (d, J = 6,5 Hz, CH^g.); DCI/NH3 : m/z 611 (M+NH4)+, 414, 396, 233, 215, 155, 132;

Rf: Hexano-EtOAc (4:1} : 0,30,

Anal : Calcd. para C3qH3-|0-jQN3 (593, 57} ; C, 60,70; H, 5,26 , N, 7,08.Encontrada:C, 60,75; H, 5,35, N, 7,1Q,

Exemplo 2; (S)-cis-l -Q-^-Q-acetil ^4^aztdo-2,4,6^trtdésoxi-^>6~ -L_-l ixo-hexopf ranostl )-1,2,3,4,6,11 -bexa-bidro-l ,3,5,12-tetra-tii( droxi-3-h.idroximeti 1-6,11 -naftaceno-diona, de formula 5, , A uma solução de 150 mg de composto de formula 4 em uma mistura de 3 ml de acetona e 3 ml de metanol, adicionam-se 24 ml de acido acético e por fim 3 ml de água e aquece-se e agitasse a solução durante uma noite a 50°C, Extrai-se com EtOAc para se obter 140 mg de composto bruto que se submete a uma cromatografia sobre gel de sTlica com uma mistura de diclorometano /MeOH (95:5) como eluente. Obtém-se deste modo 80 mg (57¾) de composto de fórmula 5 puro que se cristaliza em acetato de etilo, P. F,; 21Q°C; 20 n (aí) + 136Q (c, 0,1, cloroformio);

D IV.: (clorofórmio) : 2100 (azida), 1725 (ester) e 1680 cm^ (quinona quelatada). -2Q- RMN ]H: S 13,42 (s) e 13,17 (s) [OH fenois], 8,25 (ml e 7,76 (m) (4 H aromáticos], 5,50 (m, W|-2r7Hz, EM] 5,20 (m, W-f· #8 Hz, Η-Γ), 5,07 (m, J = T2 Hz, 0-=0- = 3 Hz, H-31}, 4,20 (q, 0=6,5 Hz, 0-4.0,5 Hz, H-51), 3,71 (d] e 3,50 (d) (AB, 0 = 11 Hz, CH2-13), 3,20 (d) e 2,55 (d) (AB, 0=18 Hz, CH2-4], 2,Q2 (s, OAc], 1,36 (d, J=6,5 Hz, CH3-6'), 2,15-1,80 (ιη, 4H, CH2-2 e CH2-2']; DCI/NH3 : m/z 571 (M+NH4+), 356, 233, 215 ( Rico de fcase ) e 138;

Anal. Calcd. para C27H27N3°1Q C553.51] ; C, 58,58; H, 4,92; N, 7,59. Encontrado: C, 58,62, H, 5,04; N, 7,65,

Exemplo 3; ($)-Cis-l-0-(4-azido-2,4,6-tridesQxí^M.-l ixo-hexo- piranosil-1 ,2,3,4,6,11 -hexa-Eiidro-l ,3,5,12-tetra^Mdroxi>3-.-[ii-droximetil“6,ll-naftaceno-dtona, de formula 6,

Prepara-se a antraciclina de formula 6 mediante glicosi-* dação da aglicona (patente de invenção francesa n9 2 560 876 de Hoechst) com 0 brometo da 3-acetil -4-azido-2-,4,6-tridesoxi-Fi.exo-piranose de formula 3 segutda de bidrolise selectiya do ciclo . acetãlico da antracícltna de formula 4 e ftnalmente saponifica-ção do grupo éster em C-31 da antractcltna de férmula 5, Ti pica v*- mente, a condensação do composto de férmula 1 com 0 composto de formula 3, em diclorometano-anid.ro, realiza-se com um rendimen to de 96%, na presença de oxido amarelo de mercúrio, brometo mej^ curico e de peneiro molecular, A hidrSlise do ciclo acetãlico do composto de formula 4, realiza-se em uma mistura de ãcido ac£ tona/metanol mediante adição de ãcido acético e ãgua, Finalmen- -21- te, a saponificação do éster em C-3' obtêm-se medtante tratamento do composto de formula 5 com hidróxido de sódio aquoso a Q°C, A uma solução de 6Q mg do composto de.fÓrmula 5 em 25 ml de diclorometano e 3 ml de metanol arrefecido a G°C, adiciona-se 1 ml de hidróxido de sódio aquoso Q,25N , Mantém-se a agitação durante 3 horas a 0°C e neutraliza-se depois a mistura reaccio-nal mediante adição gota-a-gota de AcOH, Após viragem de cor p-a ra vermelho, adiciona-se uma solução saturada de cloreto de sódio (r 20 ml) e extrai-se, depois, com acetato de etilo. Qbtém--se deste modo 6Q mg do composto de formula 6. $qB a forma de um resíduo cristalino, Mediante recristal ização em metanol do comi posto de fórmula 6 obtém-se: P. F, 241-242°C; (O/)20 83° (c 0,Q18, MeOHl;

D IV (clorofórmio); 21QQ azida; RMN ]H: $ 13,40 (s) e 12,40. (s) COtt fenois), 8,22 e 7,74 (m) (4 H aromãticos), 5,45 (m, WH-J-#7Hz, H-7), 5,17 (dd, J=J' = = 3 Hz, Η-Γ), 4,13 (q, J=S-/5/ J'<0,5 Hz, H-5.1), 3,28 (m, H-31), 3,65 (d, J=1Q) e 3,47 (d, J=10], (AB, 0*10 Hz, CH2-13), 3,58 Or go s, Η-4'Ι, 3,16 (d) e 2,53 (d) (AB, J*18, CH2-4), 2,10-1,60 (m, CH2-2' e CH2-2), 1,38 [d,0*6,5 Hz, CH3-6'1; DCI/NH3 : m/z 529. (M+NH*), 374, 356, 338, 321 , 275;

Rf 0,22 (CH2C12 : MeOH, 95:5, v/v);

Anal. Calcd. para C25H25Q9N-3 £511,47) C, 58,7Q; H, 4,92, Encontrado’: C, 58,52; H, 5,18,

f **

Exemplo 4: Acett1-4-azido-3-0-acetil -2,4,6-tridesoxi--L-líxo-he-xopiranosido, de formula 2, A uma solução de 9QQ mg de mettl -^-azido-S-Q-benzoil -2,4, 6-tridesoxi-L-l ixo-hexopiranosido,· em uma mistura de 5 ml de acn do acético e 5 ml de antdrtdo acético, adicionasse 0,5 ml de uma solução a 5% de acido sulftfrico puro em anidrido acético, Agita--se esta solução durante 2 horas e 30 minutos Ή temperatura am-> biente e extrai-se depois com éter mediante lavagem com uma solu_ ção saturada de hidrogenocarbonato de sddio,

Obtêm-se deste modo 8QQ mg de composto de f3rmula^2 sob a forma cristalina, P. F.: 48-50°C; 20 (<&) ; -69 (c, 0,2 cloroformio);

D IV (KBr) : 2110 (N3) e 1722, 1073 cm1 (éster]; DCI/NH3: m/z 275 (M+NH4+], 215 (M-60];· RMN V S 6,09 (d, J=3 Hz, H-l],. 5,27 Cm, J = 1 Q Hz, J'=5 Hz , J11=5 Hz, H-3), 3,04 (q, J=6,5, H-5) , 3,75 largo s, WaA^fiHz, H-4), 2,20 (m, J = 14 Hz, J'=10 Hz, J" = 3 Hz, H-2a, 2,0.9. (s] e 2,Q4 (s] (2 OAc], 1,88 (m, 0 = 14 Hz, J'=5 Hz, J"<0,5 Hz, H-2e], 1,19 (D, J=6,5, CH3-6],

Anal, Calcd, oara C] QH1 (257,25}; C, 46,69; H, 5,88; N, 16,33. Encontradoi C» .46,7.¾ H , 5,95; N, 16,4Q, - 2 3 -

Exemplo 5; (S) -cis-l -0-.(3-0-benzoíl -2,4,6-tri desoxf —4—Ctrl -fluoroacetamfdoj-^-L.-Hxo-fiexopíranosi 1 }-l ,2,3,4,*6,11 -hexa-hidro--Ί ,3,5', 12-tetra-hidroxi-3-hidroximetil-3,13-isopropi1i deno-6,11 --naftaceno-diona de formula 9, A uma solução de 4GQ mg [1 mmole^ de aglícona de formula 1, em 250 ml de diclorometano anidro, adicionam-se 3,24 g (15 mmo^ les) de oxido amarelo de mercúrio, 1,12 g (3,11 mmoles) de brometo mercurico e 4,8 g de peneiro molecular pulverizado de;4Ã, Adi^ ciona-se em seguida o bromo-açucar de fSrmula 8 preparado extemporaneamente a partir do composto de formula 7 (1,3 g, 3,34 mmo-les em 50 ml de benzeno e borbulhamento de HBr gasoso durante 5 minutos e depois coevaporação duas vezes com benzeno anidro), Agi:ta-se a mistura durante 18 fioras a temperatura ambiente, fil-* tra-se depois e evapora-se, Mediante cromatografia do resíduo sobre gel de sílica utilizando a mistura tolueno/acetona/AcOK (95:5:0,2) como eluente, obtem-se 700 mg do composto de formula 9-(ou seja 94¾) que cristaliza em acetona/ftexano; P. F.: 127-128°C;

2Q (cl) + 67,5° (c, 0,04, clorofOrmioJj

D IV (CHCI.3) 3420 (NH), 1725 (éster), 1670 (amida), 1625 e 1590 cm ^ (quinona); RMN ΊΗ: $ 13,69 (s) e 12,92 (s) (OH fenois) , 8,27 (m) 7,76 (m) e 7,50 (m) (9H aromãticos), 6,52 (d, J=1Q Hz, NH), 5,56 (m, % 7Hz, Η-Ί), 5,43 (m, 0 = 10 Hz, 0J =3 Hz, d"=3Hz, H-31), 5,05 (dd, J=J1=4 Hz; H-l‘) , 4,60 (q, J=6,5, 01< 0,5, H-51), 4,52 (m, H-41), 3,9.2 (d) e 3,85 (d) (AB, J=9 Hz, CH.2-13), 3,29 (d) e 2’89 (d) (AB, J = 18 Hz, CH2-10), 2,33-2,04 (m, 4H, CH2,.2 e CH·^'), 1,50 ->24·*

(s, 6H, Μθ2 isopropi 1 ideno), 1,24 (d, 0=6,5 Hz, CH3-6'); DCI/NH3 : m/z 743 (M+NH4+) , 379 ( .P/ico de base}

Rf : 0,20 (hexano-acetona, 4:1) e Q,47 {^tolueno-acetona, 9Q:1Q), Anal . Calcd. para *-37^34^τi^^3 (725,64) :(:-,61 ,23; H, 4,72; N, 1 ,93.

Encontrado: C,61,05,H, 4,8Q; N, 1,90,

Exemplo 6: (S) -cis-l -Q-(3^0.-benzotl) -2,4,6-tridesoxi'-4-tri-> f 1 uoroacetami do) -oí-L-1 ixo-tiexopiranosil /-1 ,2,4,6,11 -Hexa-^fiidro--1 ,3,5,1 2-tetra-hidroxi“3-fiídroximetil -6, Π -naf taceno^dtona de formula 10.

Agita-se durante 18 horas a 45°C, uma solução de 700 mg de composto de fórmula 9 em uma mistura de 42 ml de metanol, 42 ml de AcOH e 6 ml de agua. Extrai-se com acetato de etilo e sulb mete-se, em seguida, a uma cromatografía com uma mistura de diN clorometano/MeOH/AcOH (95:5:0,5) como eluente para se oEnter 350 mg de composto inicial de formula 9 e depois 330 mg de composto de formula 10. Uma segunda operação realizada a partir dos 35Q mg do composto de formula 9 fornece 130 mg de composto de fórmula 10 , ou seja um total de 460 mg (70%), Recristaliza--se 0 .compo_s to de fórmula Ifl. em metanol. P, F.: 149-152°C, 20 (°0 140a (c, Q,Q62, clorofórmio); D " RMN ΊΗ : S 13,46 (s) e 13,15 (.s) (OH fenois), 8,21 Cm), 7,73 (m) e 7,26 (m) (9ti aromáticos), 6,49 (d, J-1Q Hz, NH), 5,57 - -2

(m, h£ # 7 Hz, H-l), 5,30 (m, H-3'}, 5,25 Cm, 8 Hz, H-l 1) , 4,47 (m, H-41 ) , 4,45 (q, J=6,5, 0'-ς0,5, H-51), 3,71 (d) e 3,49 (d) AB, 0=12 Hz, CH2~13), 3,23 [d] e 2,50 [d] [AB, 0 = 18 Hz, CH2-4), 2,61-2,50 [ml e 2,31-1,76 (m) CCH2-2 e CH2-2‘); DCI/NH3 : m/z 7Q3 (M+NH4I, 365 e 225 (Pico de base)

Rf : 0,52 (diclorometano-MeQH, 95:5),

Anal . Calcd. para C^t^gNO-j-| Fg (685,58) ; C, 59,56$ H, 4,41; N, 2,04,

Encontrado: C, 59,25 ; H, 4,38, N, 2,20,

Exemplo 7: (S)-cis-1-0-(2,4,6-trtdesoxi-4-(trif1uoroacetamido]- -oí-L- fie xo pira no si 1)-1,2,3,4,6,11 -h.exa-hidro-1,3,5,12-tetra-Endro xi-6,11-naftaceno-diona de formula 21· A uma solução de 690 mg do composto de fSrmula jjO em uma mistura de 120 ml de diclorometano e 160 ml de metanol arrefecido a Q°C, adicionam-se 6 ml de hidróxido de sodio aquoso IN,

ApÕs 6 horas a 0°C, neutraliza-se a solução mediante adição,gota a gota, de acido acético puro, A solução vira para vermelho, Ex trai-se com diclorometano após adição de uma solução saturada de NaCl (10-20 ml)., Após as lavagens habituais e secagem sobre Na2SQ4, evapora-se 0 dissolvente sob pressão reduzida para se obter 7QQ mg do composto bruto,. Cristaliza-se 0 metanol para se obter 340 mg de composto de fórmula J1 e suhmetem^se entretanto as aguas· mães a uma cromatografia com uma mistura de diclòrometa no/metanol (9,5:5) para se obter 110 mg de composto de formula 11 igual mente puro, ou seja um total de 450 mg (70%] , -26

P. F.: 20 (*) D 206°C; ; + 78° (c, 0 ,Q5, díoxano) ; RMN 1H : 8 13,44 (s) e 13,16 (s) (OH feno is) 8,23 (m) e 7,74 (m) (4 H aromHticos), 6,41 (d, J=9 Hz, NH), 5,50 (d, J=3 Hz, H-l), 5,23 (m, uf £8 Hz, H-l '), 4,41 (q, J = 6,5 Hz, J*<Q,5.Hz, H-51) , 4,14 (m, H-3‘ e H-4'), 3,71 (d) e 3,50 (d). (AB, J-12 Hz, CH2-13), 3,21 (d) e 2,58 (d} (AB, 0=18 Hz, CH2-4), 2,50 (d, J = 14 Hz) e 1,82 (dd, J = 14 Hz, J'=3 Hz, CH2-2), 2,01 (dd, J = =14 Hz, J1=4 Hz, Η-2'e), 1,62 (m, Η-2'a), 1,26 (d, 0=6,5 Hz , CH3-6');

Rf : 0,30 (diclorometano-MeOH, 95:5],

Anal. Calcd. para C27^26^ 10N^3 C58l ,49} ! C, 55,77; H, 4,50; N, 2,40, Encontrado: C, 55,88; H, 4,6Q; N, 2,37,

Exemplo 8: (S) -Cis-1 -£-(4-amino-2,4,6-trídesoxi>^L.-l ixo-fiexo- piranos11)-1,2,3,4,6,11 -h.exa-Eii dro-l,3,5 ,12-tetra-ELtdroxí--3-Fit-> droximeti 1-6,11-naftaceno-d-iona , de formula £2« A síntese da antractcltna de formula 12, resulta da con densação da aglicona de fórmula £ com 0 brometo de 3-Q-benzofl--4-trifl uoroacetamido-2,4,6-trfdesoxf-L-l íxo-b-excptranose.. de formula 8, obtendo-se 0 composto de fórmula 9, seguida depois da desprotecçao da aglicona de fórmula £ para se obter 0 composto de fórmula ££, da saponifícação da função ester em C-31 para se obter 0 composto de fórmula 11 e, ftnalmente, da desprotecçao da função amina do composto de fórmula-JJ_, 0 composto de fórmula 9 -27-

obtém-se com 94% de rendimento mediante condensação do composto de formula 1_ com o composto de formula 8 em dtclorometano anj_ dro na presença de oxido amarelo de mercório, de brometo mercuri co e de penetro molecular, A hidrólise do ciclo acetélico do composto de fórmula 9 com uma mistura de metanol, agua e de 3ci do acético seguida de uma saponificaçao do composto de fórmula 10 primeiro com hidróxido de sódio aquoso a Q°C e depois a temperatura ambiente fornece respectivamente os. compostos de fórmulas 11 e 12, Isola-se esta 4-amino-antracicl ina sob. a forma de cloridrato de formula 13 mediante adição de uma solução metanó·* lica de ácido clorídrico. 0 bromo-açucar de fórmula 8 resulta da reacção entre o ácido bromTdrico e o derivado correspondente acetilado descrito. por A. MARTIN e colab., "Carbohydr, Res;,\ 1 987 , 19.9, A uma solução de 25Q mg CQ,43 mmoles) de composto de fór mula 11 em 10 ml de tetra-hidrofurano, adicionam-se 4Q ml de hi drÓxido de sódio 0,1N e agita-se a temperatura ambiente duren^ te 5 horas. Acidifica-se, em seguida, mediante adição de ácido clorídrico 5N até pH4, Após adição de dtclorometano, neutraliza-se mediante adição de uma solução saturada de hidrogenocarbo-nato de sódio.

Separa-se a fase orgânica, lava-s,.e com água, depois com agua saturada de cloreto de sódio e por fira evapora-se sob pres, são reduzida, Retoma-se. o resíduo com 1Q ml de uma mistura a 9:1 de clorofórmio e de metanol, arrefecida a Q0Cs Acidifica-se a solução ate pH3 com metanol clorídrico e evapora-se sob pres- -28·*

são reduzida. Dissolve-se o resíduo em 1 ml de metanol ao qual se adiciona, em seguida, eter, Filtra-se para se obter o clori drato de formula 13, P. F.: 185-190°C:

2Q D , -67° (.c, Q,Q3, MeOH] t

Anal . Calcd.. para ^H^gNQg : C, 57,50; Et, 5,40; N, 2,68, Encontrado: 0, 57,6Q, H, 5,38; N, 2,.74,

Exemplo 9: (S)-cis-l -Q-(4-morfol ino-2,4,6-tridesoxí-0£-L-l i.'xo- -Hexopi ranosi1}-l,2,3,4,6,11 -hexa-bi dro-1 ,3,5,1 2-tetra-bidroxi--3-hidroximetil-6,11-naftaceno-diona, de formula 14. A síntese de derivados da função amina como a 3-desamino--4-morfolino-antraciclina de formula F4 resulta da alquilação do composto de formula J_2 na presença de cianoboro-bidreto de sódio com 2,2'-oxabis-(acetal deido}, Sendo este. ultimo prepara^ do de acordo com o processo descrito por QTEY e colab,, "J, Org, Chem.", 1961, 26, 1673, a partir do 1,4-anidroeritritol,

Agita-se 62Q mg de 1,4-anidroeritritol em solução em 10 ml de ãgua, durante 12 Horas ã temperatura ambiente, na presença de 60Q mg de periodato de sodio, Neutralizasse então, a mistura reaccional mediante adição de bidrogenocarbonato de sódio e dilui-se depois com acetonttrilo, Agita-se o filtrado na presença de 20 mg ('0,04 mmolel de composto de formula 42. em solução em acetonitrflo, ao qual se adicionou antertormente 15 mg de cianoboro-hidreto de sodio dissolvidos em 5 ml de acetonítri- lo/ãgua (1:1, v/v). Apos 15 minutos, diluísse o meto reaccional com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sodio e extrai--se depois com acetato de ettlo, Submete-se a uma cromatografia com uma mistura de cloreto de mettle.no/metanol a 9Q;10 para se obter 15 mg de composto de formula 1^4, P. F.: 90°C (hexano); 20 (ci) + 60° (c, 0,03, THF) ;

D IV (KBr) ; 3415 (OH). 1625 e 159Q (quínona quelatada) RMN ^H : & 8,29 (m) e 7,68 (m), (4H aromáticos), 5,83 (largo singuleto WH-^ ;£Γ7Ηζ, H-l), 5,43 (dd, 8-1 ' ), 4,62 (q, J = 6,5

Hz, H-5'), 4,45 (m, H-3'), 4,02 (m, CH2-131, 3,70 (largo singuleto CH20CH2), 3,48 (d) e 3,25 (d) (AB, J = 18 Hz, CH2-4] , 3,10-2,90 (m, CH2-N-CH2), 2,60-2,17 (m, CH2-2 e CB2-2J1, 1,58 (d, CH3-6*); DCI/NH3: m/z 556 (M+H+), 218,200.

Anal, Calcd. para C2gH33N010 (555,28): C, 62,27 ; H, 5,99 ; N, 2,52. Encontrada: C, 62,75; H, 6,08; N, 261. -30- /

RESUMO FARMACOLÓGICO RESPEITANTE AOS GLICOSIDOS PREPARADOS PELO PROCESSO DE ACORDO COM A PRESENTE INVENÇÃO I - Ensaio de proliferação A - Protocolo operatõrío (redução MTT]; Células tumorais L121Q, A549 ou H.T29, com uma densidade 3 de 5.10 /ml em um meio RPMI são incubadas, em placas de roicroti^ tulação contendo 96 alvéolos durante 72 horas C37°C, 5% C02> 95% de humidade relativa] com diferentes concentrações de cada uma das antraciclinas preparadas pelo processo de acordo com a presente invenção.

As testemunhas consistem em células tumorais expostas a um meto de cultura. Preparam-se quatro alvéolos para cada uma das concentrações de antracicli-na e para a testemunha, Apõs 65 horas, adicionam-se 50^1 de MTT (2,5 mg/ml em PBS), 0 MTT sera reduzido na presença de células vivas em um corante formazan vermelho insolúvel. Depois de 7 a 24 horas de incubação suplementar (dependente das células utilizadas], reco-lhe-se o liquido sobrenadante, Solubiliza^se p corante formazan mediante adição de 1QQ jil de DMSO em cada alvéolo, seguida de uma agitação suave.

Determina-se a extinção para acada alyéolo, a 49.2 nm (fo tometro Multiscan 34Q ccFa, Flowb -31- .¾ Β - Resultados:

Os resultados estão expressos como a relação da destrui^ ção após incubação com as antraciclinas sobre a extinção obtida com as testemunhas, 0 coeficiente de variação § inferior a 15%,

Os resultados estão representados no Quadro I a seguir:

QUADRO I

Compostos EnsaiadoS—*, > ο 1 LO 1—1 C_> (/jg/mil ENSAIO COM MTT ' V 11210 til 29 A 549 6 0,13 0,46 0,24 12 0,021 0,03 0,24 · 11 0,015. 0,026 0,011 13 0,009 0,01 0,009 14· 0,15 - 0,13 0,054 doxorubi ci na Q-,02 não comunicado II - Efeito sobre as células leucemicas L121Q: A - Protocolo operatório 0 ensaio realiza-se de acordo com o processo descrito por Hamburger e Salmon, com algumas'modificações designadas a seguir, 0 meio utilizado e substituído por um meio de MeCoy 5A, -32- /

0 numero de células introduzidas nas caixas e reduzido pa_ 2 ra 5.10 celulas/caixa devido ao rãpido crescimento das células leucémicas L1210.

Incubam-se as células durante 1 hora a 37°C na presença de diferentes concentrações da substancia ensaiada, Lavam-se de pois as células duas vezes com McCoy 5A e colocam-se sobre uma placa de agarose de acordo com o método descrito por Hamburger e Salmon.

Colocam-se as caixas na estufa a 37°C sob uma atmosfera de 5% de C02» 20% de O2 e uma humidade relativa de 95%, durante 5 a 7 dias. Depois deste período, contaam-se as colónias de diã metro superior a 6Q jjm, com um microscópio de campo invertido, B - Resultados;

Os resultados reunidos, no Quadro II a seguir estão expressos em percentagem de colónias formadas a partir de células L1210 tratadas em relação as testemunhas não tratadas, 0 coeficiente de variação, quando da repetição das experiências, e infe rior a 15%.

QUADRO II ENSAIO SOBRE CÉLULAS LEUCEMICAS Compostos Ensaiados Experiência de um L121Q hora 6 0*2$ 12 0,07 Π 0,064 13 . 0,022 14 0,21 doxorubi ci na 0,21 III - Ensaio "in Vivo", Estudo do efeito do composto de formula 13; A - Protocolo operatÕrio

Preparação das células L1210:

Colhe-se um liquido de ascite em condições assépticas nos murganhos DBA2 (fémea, 18-20 g) sete dias depois da implantação.

Lava-se o liquido de ascite tres vezes com PBS, conta-se 6 e dilui-se finalmente em PBS, de maneira a obter-se 10 células/ /0,2 ml. - Transferência das células para a manutenção da 1 infra celular:

Injectam-se 10^ células em 0,2 ml de PBS no peritoneu de -34-

murganhos DBA2 para a propagação da linha celular, A transferência efectua-se uma vez por semana,

Transferencia das linhas celulares para o ensaio:

Injectam-se 1Q células em 0,2 ml de PBS intraperitoneal_ mente em murganhos BDF1 (fêmea 18-2Q g); utilizam-se 6 animais/ /grupo para cada concentração de substância e para o controlo, B - Determinação do efeito

I a) Os animais são pesados no primeiro dia e no quinto dia depois da administração do medicamento. Uma perda de peso superior a 20¾ no quinto dia ê utilizada como indicador do efeito toxico do composto, b] no fim da experiência, (morte de todos os animais ao sexagésimo dia do ensaio)., determina-se o tempo médio de sobrevi vência dos animais, em todos os grupos tendo maís de 65¾ de sobreviventes no quinto dia, de acordo com processos padrão, A partir do tempo de sobrevivência médio dos grupos tratados (MSTy) e dos grupos de controlo (Μ$Τς), dete,rmina-s:e o efeito antitumoral (T/C) era função da seguinte fórmula;

MSTT

T/C % = x 1QQ

MSTC -35-

Os valores TC superiores a 125¾ são considerados- como in dicadores de um efetto antitumoral significativo, 0 efeito antitumoral esta precisado no Quadro III a seguir:

QUADRO III LI 210

Nome Programa de dose Spttrna T/c administração [mg/kg/Inj,} % Doxorubicina 3 i,v, 8,1 148 Composto 13 3 i, v. 3,1 133 IV - Xenoenxertos: LXF A549 HT29 Doxorubicina +++ ++ ++ Composto 13 ++ + + 0 composto de formula li3 apresenta uma .activtdade antitu_ moral não desprezável exercendo-se com uma dose cerca de tres ve zes. mais baixa do que a da doxorubicina, Por outro lado ensaios realizados sobre xenoenxertos (."suBrenal capsule assay·"} demonstram que este composto ? acttvo sobre certos tumores sSltdos co- -36-

mo o do pulraão (LXF) e era raenor grau sobre a linha celular A549 e sobre um tumor do cólon (HT29).

Sobressai assim do descrito anteriormente que, a presente invenção não se limita de modo nenhum a estes métodos de utilização, de realização e de aplicação descritos de modo mais explicito; pelo contrario engloba todas as variantes que possam vir ao espírito do especialista na matéria, sem se desviar do quadro nem do alcance da presente invenção.

Claims

/ REIVINDICAÇÕES 1.- Processo para a preparação de antraciclinas de fórmula geral

na qual R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo de fórmula geral COR^, na qual R^ representa um grupo alquilo C-^-Cg? R2 representa um átomo de hidrogénio ou de iodo; Rg representa um grupo azida ou morfolino, uma amina -38-

primária, uma amina secundária de fórmula geral, NHR^ na qual Rg representa um grupo COCF^, COCH^ ou ftalimido, uma amina terciária de fórmula geral NRyRy, na qual Ry representa um grupo benzilo, metilo ou aminonitrilo; R^ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo acilo eventualmente substituído, ou um grupo benzilo eventualmente substituído, caracterizado pelo facto de compreender as seguintes etapas: (1) glicosidaçao da aglícona de fórmula 0 OH

com um açúcar de fórmula geral

r3 or5 (!') na qual X representa um átomo de bromo ou uma ligação dupla Cx'a R^ e Rjj têm os significados definidos antes; (2) hidrólise selectiva do ciclo acetálico; (3) eventualmente saponificação do grupo éster em C-3', quando ^-39-

o símbolo R^ não representa um átomo de hidrogénio. (4) depois, eventualmente, uma alquilação da função amina em C-4'.
2. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de, quando o símbolo representa uma função amina secundária, compreender, além disso, uma etapa de desprotecção da dita função amina secundária.
3. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de, quando o símbolo X representa um átomo de bromo, se realizar a glicosidação de acordo com a reacção de KOENIGS-KNORR segundo o esquema reaccional a seguir: esquema I

1’ 1

-40-

6*
4.- Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo facto de se transformar aaglícona de fórmula 1 em antraciclina mediante glicosidação com o açúcar de fórmula geral 3, de acordo com o seguinte esquema reaccional: 41-

ESQUEMA II

1 3

4 5 6 OH

6 -42-
5.- Processo de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo facto de se transformar a aglícona de formula 1 em antraciclina mediante glicosidaçao com um açúcar de fórmula 8, de acordo com o seguinte esquema reaccional: ESQUEMA III

9 10
6.- Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de, quando o símbolo X representa uma ligação dupla, a glicosidação se realizar na presença da N-iodo-succinimida de acordo com o seguinte esquema reaccional: ESQUEMA IV f? ψ

15 1 V -44-
7.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da (S)-cis-1-0-(4-azido-2,4,6-tridesoxi- ^-L-lixo-hexo-pi-ranosil)-1,2,3,4,6,11-hexa-hidro-l,3,5,12- tetra-hidroxi-3-hidro-ximetil-6,11-naftaceno-diona, de fórmula p

3 caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais cor-respondentemente substituídos
8,- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da (S)-cis-1-0-(4-amino-2,4,6-tridesoxi- -L-lixo-hexo-piranosil)-1,2,3,4,6,11-hexa-hidro-l,3,5,12-tetra-hidroxi-3-hidro- ximetil-6,11-naftaceno-diona, de fórmula

(12} 2 -46-

caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos
9.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da (S)-cis-l-O-(4-amino-2,4,6-tridesoxi-"X.-L-lixo-hexo- piranosil)-1,2,3,4,6,11-hexa-hidro-l,3,5,12-tetra-hidroxi-3-hi-droximetil-6,11-naftaceno-diona, de fórmula

2 (13) caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
10.- Processo de aocrdo com a reivindicação 1, para a preparação da (S)-cis-1-0-(4-morfolino-2,4,6-tridesoxi-^-L-lixo--hexopiranosil)-1,2,3,4,6,11-hexa-hidro-l,3,5,12-tetra-hidroxi--3-hidroximetil-6,11-naftaceno-diona, de fórmula -47

/

(14) Ο caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
11.- Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação da (S)-cis-1-0-(4-amino-2,4,6-tridesoxi-2-iodo- -L-ta-lo-hexopiranosil)-1,2,3,4,6,ll-hexahidro-l,3,5,12-tetra-hidroxi--3-hidroximetil-6,11-naftaceno-diona de fórmula

H c (19) caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos. -48-
12.- Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação do composto intermediário l-0-acetil-4-azido-3-acetil-2, 4,6-tridesoxi-L-lixo-hexopiranose de fórmula •OAc H3crx - (2), OAc W3 caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
13.- Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação do composto intermediário brometo de 4-azido-3-acetil-2,4, 6-tridesoxi-L-lixo-hexopiranose, de fórmula

caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
14.- Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação do composto intermediário brometo de 3-0-benzoíl-4-trifluor£ acetamido- -^-lixo-hexopiranose, de fórmula 49- 49-

COCF, 3 (δ) caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
15.- Processo de acordo com a reivindicação 6, para a preparação do composto intermediário 1,5-anidro-3-0-benzoíl-4-tri-fluoroacetamido-2,6-didesoxi-D-lixo-l-hexeno-itol, de fórmula

caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
16.- Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação do composto intermediário (S)-cis-1-0-(3-0-acetil-4-azi-do-2,4,6-tridesoxi- '^-L-lixo-hexopiranosil) -1,2,3,4,6,11-hexa--hidro-1,3,5,ll-tetra-hidroxi-3-hidroximetil-3,13-isopropilideno--6,11-naftaceno-diona, de fórmula -50-

3 (4) caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corre spondent emente substituídos.
17.- Processo de acordo com a reivindicação 4, para a preparação do composto intermediário (S)-cis-1-0-(3-0-acetil-4-azido--2,4,6-tridesoxi-'^ -k-lixo-hexopiranosil)-l,2,3,4,6,11-hexa-hidro--1,3,5,12-tetra-hidroxi-3-hidroximetil-6,11-naftaceno-diona, de fórmula

OH (5)

caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
18.- Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação do composto intermediário (S)-cis-1-0-(3-0-benzoíl-2,4,6--tridesoxi-4-(trifluoroacetamido)- ^-L-lixo-hexopiranosil)-1,2,3, 4,6,11-hexa-hidro-l,3,5,12-tetra-hidroxi-3-hidroximetil-3,13-iso- propilideno-6,11-naftaceno-diona, de fórmula

3 [OBt NHCOCF (9) caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos.
19.- Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação do composto intermediário (S)-cis-1-0-(3-0-benzoíl-2,4,6--tridesoxi-4- (trifluoroacetamido) -L-lixo-hexopiranosil) -1,2,4, 6,11-hexa-hidro-l,3,5,12-tetra-hidroxi-3-hidroximetil-6,11-nafta-ceno-diona, de fórmula -* ; ¢. -52-

ΟΗ NHCOCFj (10) caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais corres^ pondentemente substituídos.
20.- Processo de acordo com a reivindicação 5, para a preparação do composto intermediário (S)-cis-l-0-2,4,6-tridesoxi-4-(trifluoro-acetamido)-L-hexopiranosil)-1,2,3,4,6,11-hexa-hidro--1,3,5,12-tetra-hidroxi-6,11-naftaceno-diona, de formula

NHCOCF, 3 11) caracterizado pelo facto de se utilizarem compostos iniciais correspondentemente substituídos. ! -53
21.- Processo para a preparação de uma composição farmacêutica, caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade eficaz de uma antraciclina, preparada pelo processo de acordo com a reivindicação 1, como ingrediente activo com um excipiente apropriado , Lisboa, 07 de Junho de 1990 O Agsnte Oficial da Prcpr saade Indusfrial