PT2167498E

PT2167498E - Compostos e composições como inibidores de itpkb

Info

Publication number: PT2167498E
Application number: PT08770796T
Authority: PT
Inventors: Donald S Karanewsky; Shifeng Pan; Yun Feng Xie; Badry Bursulaya; Dai Cheng; Jiqing Jiang; Yi Liu; Yongqin Wan; Yang Yang
Original assignee: Irm Llc
Priority date: 2007-06-15
Filing date: 2008-06-12
Publication date: 2010-11-29
Also published as: KR20100020997A; CA2688487A1; JP2010529993A; MX2009013215A; DE602008002600D1; US20100184748A1; US8178526B2; US20120202782A1; PL2167498T3; BRPI0813929A2; AU2008266185A1; EP2167498A1; ATE481400T1; ES2351545T3; EA200901656A1; WO2008157210A1; CN101743243A; AU2008266185B2; EP2167498B1

Description

ΕΡ 2 167 498/ΡΤ DESCRIÇÃO "Compostos e composições como inibidores de ITPKb"

Referência a pedidos relacionados

Este pedido reivindica a prioridade do pedido provisório com o número de série U.S. 60/944,345, apresentado em 15 de Junho de 2007.

Campo do invento O invento disponibiliza uma nova classe de compostos, composições farmacêuticas compreendendo estes compostos e métodos de utilização destes compostos para tratar ou prevenir doenças ou perturbações associadas a actividades anormais ou desreguladas das células B, particularmente doenças ou perturbações que envolvem uma activação anómala de 1,4,5-trifosfato de inositol-3-cinase B (ITPKb).

Antecedentes

As proteinas cinases representam uma grande família de proteínas, que desempenham um papel central na regulação de uma grande variedade de processos celulares e na manutenção do controlo sobre a função celular. Uma lista parcial e não limitativa destas cinases inclui: as cinases com substratos não proteicos como a IPTKb; os receptores tirosina-cinase como seja o receptor cinase do factor de crescimento derivado de plaquetas (PDGF-R), o receptor do factor de crescimento nervoso, trkB, Met e o receptor do factor de crescimento de fibroblastos, FGFR3; as tirosina-cinases que não são receptores, como ABI e a cinase de fusão BCR-ABI, Lck, Csk, Fes, Bmx e c-src; e as serina/treonina-cinases como b-RAF, c-RAF, sgk, as cinases MAP (por exemplo, MKK4, MKK6, etc.), SAPK2a, ΞΑΡΚ2β e SAPK3. Observou-se uma actividade de cinase anómala em muitos estados de doença, incluindo perturbações proliferativas benignas e malignas, assim como em doenças resultantes de uma activação inapropriada dos sistemas imune e nervoso. 2 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ

Os novos compostos deste invento inibem a actividade de iTPKb e espera-se, por conseguinte, que sejam úteis no tratamento de doenças associadas a ITPKb.

Sumário do invento

Num aspecto, o presente invento disponibiliza compostos de Fórmula I:

em que: n é seleccionado entre 0, 1, 2 e 3; m é seleccionado entre 0, 1, 2 e 3; A pode ter até 3 grupos seleccionados entre -CRi=, -CR2= e -CR5= substituídos por -N=;

Ri, R2 e R5 são seleccionados, de modo independente, entre hidrogénio, hidroxilo, halogéneo, ciano, alquilo Ci_6, alquilo Ci_6 substituído com halogéneo, alquilo C4-6 substituído com hidroxilo e alquilo Ci-6 substituído com ciano; R3 e R4, juntamente com os átomos de carbono aos quais R3 e R4 estão ligados, formam um heterociclo com 5 a 6 membros fundido com o anel A, que contém até 4 radicais seleccionados entre O, C(O), S(0)2, CR11R12 e NH; em que cada Rn e R42 é seleccionado, de modo independente, entre hidrogénio, alquilo C4_3 e alquilo C4_3 substituído com halogéneo; ou R44 e R42, juntamente com o carbono ao qual ambos estão ligados, formam um cicloalquilo C3_7; R6 e R7 são seleccionados, de modo independente, entre hidrogénio, alquilo C4-3 e alquilo C4-3 substituído com halogéneo; ou R6 e R7, juntamente com o carbono ao qual ambos estão ligados, formam um cicloalquilo C3-7;

Rg é seleccionado entre alquilo C4_6, alcenilo C2_6/ alquilo C4_6 substituído com halogéneo e alquilo C4_6 substituído com hidroxilo; ou dois grupos R8 podem combinar-se para formar 3 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ uma ponte alquilo; ou quando dois qrupos Rs estão ligados ao mesmo átomo de carbono, eles, juntamente com o carbono ao qual ambos estão ligados, formam um cicloalquilo C3_7; R9 é seleccionado entre Li-arilo C6-io, Li-heteroarilo Ci_i0, alquilo Ci_6, Li-cicloalquilo C3_i2 e Li-heterocicloalquilo C3_8; em que os referidos grupos arilo, heteroarilo, cicloalquilo e heterocicloalquilo de R9 podem estar opcionalmente substituídos com 1 a 3 radicais seleccionados, de modo independente, entre halogéneo, ciano, hidroxilo, alquilo Ci_3, alquilo Ci_3 substituído com halogéneo, alquilo Ci_3 substituído com ciano, alquilo Ci_3 substituído com hidroxilo, -C (0) R13, -C (0)NR13R14; em que Ri3 e Ri4 são seleccionados, de modo independente, entre hidrogénio e alquilo Ci_6;

Li é uma ligação, alquilo Ci-3 ou alquilo Ci_3 substituído com halogéneo; Y é N ou CR10;

Rio é seleccionado entre hidrogénio, alquilo Ci_6, -NR15R16, -NR15C (0)Rí6 e -C (0)NR15R16; em que cada Ri5 e Rlê é seleccionado, de forma independente, entre hidrogénio, alquilo Ci_6, arilo C6-ku heteroarilo Ci_i0, cicloalquilo C3_i2 e heterocicloalquilo C3-8; em que os referidos grupos arilo, heteroarilo, cicloalquilo e heterocicloalquilo podem estar opcionalmente substituídos com 1 a 3 radicais seleccionados, de modo independente, entre halogéneo, hidroxilo, ciano, alquilo Ci_6, alquilo Ci_6 substituído com halogéneo, alcoxi C1-6 e alcoxi C1-6 substituído com halogéneo; e os derivados N-óxido, os derivados de pró-fármacos, os derivados protegidos, os isómeros individuais e a mistura de isómeros destes; e os sais e solvatos farmaceuticamente aceitáveis (por exemplo, os hidratos) destes compostos.

Num segundo aspecto, o presente invento disponibiliza uma composição farmacêutica que contém um composto de Fórmula I ou um derivado N-óxido, os isómeros individuais e uma mistura destes isómeros; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com um ou mais excipientes adequados.

Num terceiro aspecto, o presente invento disponibiliza compostos para utilizar num método de tratamento de uma doença num animal, em que a inibição da actividade de cinase, 4 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ em particular da actividade de ITPKb, pode prevenir, inibir ou melhorar a patologia e/ou a sintomatologia das doenças, em que o método compreende administrar ao animal uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula I ou de um derivado N-óxido, dos isómeros individuais e de uma mistura dos seus isómeros, ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Num quarto aspecto, o presente invento proporciona a utilização de um composto de Fórmula I no fabrico de um medicamento para tratar uma doença num animal, em que a actividade de cinase, em particular a actividade de ITPKb, contribui para a patologia e/ou a sintomatologia da doença.

Num quinto aspecto, o presente invento disponibiliza um processo de preparação dos compostos de Fórmula I e dos derivados N-óxido, dos derivados de pró-fármacos, dos derivados protegidos, dos isómeros individuais e da mistura dos seus isómeros, e dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Descrição detalhada do invento

Definições "Alquilo" como um grupo e como um elemento estrutural de outros grupos, por exemplo, alquilo substituído com halogéneo e alcoxi, pode ser de cadeia linear ou ramificada. 0 grupo alcoxi Ci-4 inclui metoxi, etoxi e grupos similares. 0 grupo alquilo substituído com halogéneo inclui trifluorometilo, pentafluoroetilo e grupos similares. 0 grupo alquilo substituído com hidroxilo inclui hidroximetilo, hidroxietilo e grupos similares. "Arilo" designa um anel aromático monocíclico ou bicíclico fundido, que contém seis a dez átomos de carbono no anel. Por exemplo, o grupo arilo poderá ser fenilo ou naftilo, preferencialmente fenilo. "Arileno" designa um radical bivalente derivado de um grupo arilo. "Heteroarilo" é tal como definido para arilo acima, em que um ou mais dos membros do anel pode ser um heteroátomo 5 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ seleccionado entre -Ο-, -Ν=, -NR-, —C(Ο)—, -S-, —S(Ο)— ou -S (Ο) 2~r onde R é hidrogénio, alquilo C1-4 ou um grupo protector do azoto. Por exemplo, heteroarilo C1-10 inclui piridilo, indolilo, indazolilo, quinoxalinilo, quinolinilo, benzofuranilo, benzopiranilo, benzotiopiranilo, benzo[1,3]dioxol, imidazolilo, benzo-imidazolilo, pirimidinilo, furanilo, oxazolilo, isoxazolilo, triazolilo, tetrazolilo, pirazolilo, tienilo, etc. "Cicloalquilo" designa um anel monociclico, biciclico fundido ou policiclico em ponte, saturado ou parcialmente insaturado, contendo o número indicado de átomos no anel. Por exemplo, cicloalquilo C3_i0 inclui ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, etc. "Heterocicloalquilo" significa cicloalquilo, tal como definido neste pedido, na condição de um ou mais dos átomos de carbono do anel estar substituído por um grupo seleccionado entre -0-, -N=, -nr-, —C(0)—, -S-, -S(0)- ou -S(0)2-, em que R é hidrogénio, alquilo Ci_4 ou um grupo protector do azoto. Por exemplo, heterocicloalquilo C3-8, tal como utilizado neste pedido para descrever os compostos do invento, inclui morfolino, pirrolidinilo, pirrolidinil-2-ona, piperazinilo, piperidinilo, piperidinilona, 1,4-dioxa-8-aza-spiro[4,5]dec-8-ilo, etc. "Halogéneo" representa preferencialmente cloro ou flúor, mas também poderá ser bromo ou iodo. "Tratar" e "tratamento" referem—se a um método de alivio ou mitigação de uma doença e/ou dos seus sintomas concomitantes.

Descrição das concretizações preferidas 0 presente invento disponibiliza compostos, composições e métodos para o tratamento de uma doença relacionada com uma cinase, em particular das doenças relacionadas com a iPTKb. Por exemplo, as doenças auto-imunes, particularmente as doenças associadas às células B, estão relacionadas com a IPTKb. Por exemplo, a artrite reumatóide, o lúpus eritematoso sistémico (LES), a púrpura trombocitopénica imune (PTI) e a ΕΡ 2 167 498/ΡΤ β anemia hemolítica.

Numa concretização, com referência aos compostos de Fórmula I, n é seleccionado entre 1 e 2; m é seleccionado entre 0, 1 e 2; A pode ter até 3 grupos seleccionados entre -CRi=, -CR2= e -CR5= substituídos por -N=; Rlf R2 e R5 são hidrogénio; R6 e R7 são hidrogénio; Re é seleccionado entre alguilo Ci_6/ alguilo Ci_6 substituído com halogéneo e alquilo C1-6 substituído com hidroxilo; ou dois grupos R8 podem combinar-se para formar uma ponte alguilo; ou quando dois grupos R8 estão ligados ao mesmo átomo de carbono, eles, juntamente com o átomo de carbono ao qual ambos estão ligados, formam um grupo cicloalquilo C3_7; R9 é seleccionado entre Li-arilo C6-10/ Li-heteroarilo C1-10, alquilo C1-6, Li-cicloalquilo C3-12 e Li-heterocicloalquilo C3_8, em que os referidos grupos arilo, heteroarilo, cicloalquilo e heterocicloalquilo de R9 podem estar opcionalmente substituídos com 1 a 3 radicais seleccionados, de modo independente, entre halogéneo, ciano, hidroxilo, alquilo C1-3, alquilo Ci_3 substituído com halogéneo, alquilo Ci_3 substituído com ciano, alquilo Ci_3 substituído com hidroxilo, -C(0)Ri3, -C (0)NRi3Ri4; em que R13 e R14 são seleccionados, de forma independente, entre hidrogénio e alquilo Ci_6; lu é uma ligação ou alquilo Ci_3; Y é CR10 e Rio é hidrogénio.

Noutra concretização, o heterociclo com 5 a 6 membros formado a partir de R3 e R4 e fundido com o anel A, juntamente com os átomos de carbono aos quais R3 e R4 estão ligados, é seleccionado entre:

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ΕΡ 2 167 498/PT

Noutra concretização, R8 é seleccionado entre metilo, etilo, trifluorometilo, difluorometilo, fluorometilo e hidroximetilo; ou dois grupos R8 podem combinar-se para formar uma ponte alquilo seleccionada entre metilo, etilo e propilo; ou dois grupos R8 estão ligados ao mesmo átomo de carbono e, juntamente com o átomo de carbono ao qual ambos estão ligados, formam um grupo ciclopropilo.

Noutra concretização, R9 é seleccionado entre cicloalquilo C3_7, heterocicloalquilo C4_7, fenilo, piridinilo, pirazinilo, pirimidinilo e furo [3,2-c]piridin-4-ilo; em que o referido grupo fenilo, piridinilo, pirazinilo, pirimidinilo ou furo [3,2-c]piridin-4-ilo está opcionalmente substituído com 1 a 3 radicais seleccionados, de modo independente, entre trifluorometilo, ciano, bromo, cloro, hidroximetilo, metilcarbonilo, metilo, aminocarbonilo, nitro, iodo, flúor, metoxicarbonilo, hidroxilo, amino, carboxi e metoxi.

Noutra concretização estão compostos seleccionados entre: • 6—{4—[4—(5-trifluorometil-piridin-2-il)-[1,4]diazepan-1-ilmetil]-lH-pirazol-3-il}-benzo[e][1,3]oxazina-2,4-diona; • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)-metil)-lH-pirazol-3-il)-3H-benzo[e] [1,3]-oxazina-2,4-diona; • 6-(4-(((R)—4 —(5—(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3H-benzo[e][1,3]— oxazina-2,4-diona; • 6-(4-(((S)—4 —(5—(trifluorometil)-piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3H-benzo[e][1,3]— oxazina-2,4-diona; • 6-(4-(((R)—4 —(5—(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidrobenzo-[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-1,4-diazepan-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidrobenzo[e][1,3]— oxazin-2-ona; • 7-(4-(((R)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-1,2-di-hidro-isoquinolin-3(4H)-ona; 8 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ • 7-(4-(((R)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)isoquinolina- 1,3(2H,4H)-diona; • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-1,4-diazepan-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidroquinazolin-2(1H)-ona; • 7-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-1,4-diazepan-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-1,2-di-hidroisoquinolin-3(4H)-ona; • 6-(4-(((R)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-quinazolin-2(1H)-ona; • (R)—6—(4—((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona; • 6-(4-((3-(trifluorometil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)-metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H- benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)— 5 —(4 —((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona; • 6-(4-((3-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-3, 6-diazabiciclo- [3.1.1] heptan-6-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((2-(trifluorometil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((3-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-3,8-diazabiciclo [3.2.1] octan-8-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e] [1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((3-(5-(trifluorometil)-piridin-2-il)-3,8-diazabiciclo [3 . 2 . 1] octan-8-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-2H-benzo[e] [1,3] oxazina-2,4(3H)-diona; • (S)—6—(4—((3-(fluorometil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((4-(2,3-dimetilfenil)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-2H-benzo[e][1,3]oxazina-2,4(3H)-diona; 9 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)-metil)-lH-pirazol-3-il)-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona; • 6-(4-((4-(2,3-dimetilfenil)piperazin-l-il)metil)-1H-pirazol-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona; • (S)—6 —(4—((3-(trifluorometil)-4-(5-(trifluorometil)-piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R) -6-(4-((3-(trifluorometil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3, 4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (S)-6-(4-((3-(hidroximetil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)-2-(2-metil-4-((3-(2-oxo-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]-oxazin-6-il)-lH-pirazol-4-il)metil)piperazin-l-il)-isonicotinonitrilo; • (R)— 6 —(4—((3-metil-4-(4-(trifluorometil)pirimidin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)-6-(4-((3-metil-4-(5-metilpiridin-2-il)piperazin-l-il)-metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e] [1,3]-oxazin-2-ona; • (S)— 6 —(4 —((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e] [1,3]oxazin-2-ona; • (R)—6—(4—((4-ciclo-hexil-3-metilpiperazin-l-il)metil)-1H-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)—6—(5—((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-2H-l,2,3-triazol-4-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)-4,4-dimetil-6-(4-((3-meti1-4-(5-(trifluorometil)-piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-4,7-diazaspiro-[2.5]octan-7-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)-6-(2-metil-4-((3-(2-oxo-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3] oxazin-6-il)-lH-pirazol-4-il)metil)piperazin-l-il) -nicotinonitrilo; • (R)— 6 —(4 —((4-(5-cloropiridin-2-il)-3-metilpiperazin-l-il)-metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]-oxazin-2-ona; 10 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ • ácido (S)-1-((3-(2-οχο-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]- oxazin-6-il)-lH-pirazol-4-il)metil)-4-(5-(trifluorometil)-piridin-2-il)piperazina-2-carboxílico; • (S)-6-(4-((2-(hidroximetil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (S)—6—(4—((2-(fluorometil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo [e] [1,3]oxazin-2-ona; • (R)-6-(4-((3-metil-4-(4-(trifluorometil)fenil)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3] oxazin-2-ona; • (R)—6—(4—((4—(2—fluorobenzil)-3-metilpiperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)— 6 —(4—((4-(4-clorofenil)-3-metilpiperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]-oxazin-2-ona; • (R)-6-(4-((3-metil-4-(5-(trifluorometil)-piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (S)— 6 —(4 —((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo [e] [1,3]oxazin-2-ona; • (S)— 6 —(4—((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona; • (R)-6-(4-((3-metil-4-(3-(trifluorometil)fenil)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3] oxazin-2-ona, e • (S)-6-(4-((4-ciclo-hexil-3-metilpiperazin-l-il)metil)-1H-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona.

Outros compostos do invento estão detalhados nos

Exemplos e na Tabela I, abaixo.

Farmacologia e utilidade

Os compostos do invento modulam a actividade de IPTKb e, como tal, são úteis para tratar doenças ou perturbações em que uma actividade anómala de IPTKb contribui para a patologia e/ou a sintomatologia das doenças. 11 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ

Ao inibirem a activação e o desenvolvimento das células B, os inibidores de iTPKb do presente invento são úteis em várias aplicações terapêuticas. A inibição farmacológica de ITPKb proporciona um meio para inibir o mau funcionamento das células B em ambientes patológicos. Por exemplo, as células B desempenham um papel patológico na rejeição crónica de transplantes e no desenvolvimento de doenças auto-imunes (por exemplo, a artrite reumatóide, o LES, o lúpus e condições similares), da psoríase, da alergia (a asma, a renite, a DPOC, a dermatite) e outras, incluindo a anafilaxia e muitas doenças mediadas por complemento. Os compostos inibidores de ITPKb do invento podem ser agentes eficazes para tratar estas doenças em gue ITPKb actua de forma a promover a patogénese.

Outras doenças e condições gue são receptivas ao tratamento incluem doenças associadas a, ou mediadas por, uma proliferação anormal das células B, por exemplo, o linfoma de células B. Elas também englobam outras perturbações mediadas por anticorpos, por exemplo, as alergias, a psoríase, o lúpus eritematoso sistémico (LES), a cirrose biliar primária (CBP) e a púrpura trombocitopénica idiopática (PTI). Além de tratar estas doenças ou perturbações, os inibidores de ITPKb do presente invento também são úteis para prevenir ou modular o desenvolvimento destas doenças ou perturbações num sujeito (incluindo o ser humano e animais como outros mamíferos) suspeito de ser, ou conhecido por ser, propenso a estas doenças ou perturbações. Os moduladores de células B que podem ser empregues nas aplicações terapêuticas do invento incluem os inibidores de ITPKb específicos descritos nos Exemplos e nas tabelas abaixo. 0 invento proporciona, assim, um método para modular o desenvolvimento e a função dos linfócitos B num sujeito (humano ou outro mamífero) para o tratamento de doenças auto-imunes, em que o método compreende administrar ao sujeito um composto de fórmula I ou uma sua composição farmacêutica numa quantidade eficaz para modular a actividade de cinase ou o nível celular de ITPKb (tal como demonstrado pelos ensaios in vitro descritos abaixo), modulando, deste modo, a diferenciação e a função dos linfócitos B num sujeito. 0 composto pode regular negativamente o nível celular da molécula ITPKb ao inibir a actividade de cinase de ITPKb. 12 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ

De acordo com o exposto anteriormente, o presente invento disponibiliza adicionalmente um método para prevenir, tratar e/ou melhorar a condição de qualquer uma das doenças ou perturbações descritas acima num sujeito necessitado desse tratamento, em que o método compreende administrar ao referido sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz (consultar "Administração e composições farmacêuticas", abaixo) de um composto de Fórmula I ou de um seu sal f armaceuticamente aceitável. Os compostos de Fórmula I podem regular negativamente o nivel celular da molécula ITPKb ao inibirem a actividade de cinase de ITPKb, tal como referido nos ensaios in vitro descritos abaixo. Para qualquer uma das utilizações acima, a dose necessária variará consoante o modo de administração, a condição particular que se pretende tratar e o efeito desejado.

Administração e composições farmacêuticas

Em geral, os compostos do invento serão administrados em quantidades terapeuticamente eficazes via qualquer um dos modos habituais e aceitáveis conhecidos na arte, quer individualmente quer em combinação com um ou mais agentes terapêuticos. Uma quantidade terapeuticamente eficaz poderá variar grandemente dependendo da gravidade da doença, da idade e da saúde relativa do sujeito, da potência do composto utilizado e de outros factores. Em geral, obtêm-se resultados satisfatórios sistemicamente com doses diárias compreendidas entre cerca de 0,03 e 2,5 mg/kg de peso corporal. Uma dose diária indicada no mamífero de maior porte, por exemplo, o ser humano, encontra-se no intervalo compreendido entre cerca de 0,5 mg e cerca de 100 mg, convenientemente administrada, por exemplo, em doses divididas até quatro vezes por dia ou na forma retardada. As formas farmacêuticas unitárias adequadas para administração oral compreendem entre cerca de 1 e 50 mg de ingrediente activo.

Os compostos do invento podem ser administrados como composições farmacêuticas por qualquer via convencional, em particular entericamente, por exemplo, oralmente, por exemplo, sob a forma de comprimidos ou de cápsulas, ou parentericamente, por exemplo, sob a forma de soluções ou de suspensões injectáveis, topicamente, por exemplo, sob a forma 13 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ de loções, de géis, de unguentos ou de cremes, ou numa forma nasal ou de supositório. As composições farmacêuticas compreendendo um composto do presente invento, sob a forma livre ou sob uma forma de sal farmaceuticamente aceitável, em associação com pelo menos um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável, podem ser produzidas de uma forma convencional por meio de métodos de mistura, de granulação ou de revestimento. Por exemplo, as composições orais podem ser comprimidos ou cápsulas de gelatina compreendendo o ingrediente activo juntamente com a) diluentes, por exemplo, lactose, dextrose, sacarose, manitol, sorbitol, celulose e/ou glicina; b) lubrificantes, por exemplo, sílica, talco, ácido esteárico, o seu sal de magnésio ou cálcio e/ou polietilenoglicol; no caso dos comprimidos também c) aglutinantes, por exemplo, silicato de alumínio e magnésio, pasta de amido, gelatina, goma adragante, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio e/ou polivinilpirrolidona; se desejado, d) agentes de desintegração, por exemplo, amidos, gelose, ácido algínico ou o seu sal de sódio ou misturas efervescentes; e/ou e) absorventes, corantes, aromatizantes e adoçantes. As composições injectáveis podem ser soluções ou suspensões isotónicas aquosas, e os supositórios podem ser preparados a partir de emulsões ou de suspensões gordas. As composições poderão ser esterilizadas e/ou conter adjuvantes, tais como conservantes, estabilizadores, agentes molhantes ou emulsionantes, promotores de solução, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões. Além disso, elas também poderão conter outras substâncias de valor terapêutico. As formulações adequadas para aplicações transdérmicas incluem uma quantidade eficaz de um composto do presente invento juntamente com um veículo. Um veículo pode incluir solventes absorvíveis farmacologicamente aceitáveis para ajudar à passagem através da pele do hospedeiro. Por exemplo, os dispositivos transdérmicos encontram-se sob a forma de uma ligadura que compreende um membro de suporte, um reservatório contendo o composto, opcionalmente com veículos, opcionalmente uma barreira de controlo da velocidade para distribuir o composto na pele do hospedeiro a uma velocidade controlada e predeterminada ao longo de um período de tempo prolongado, e meios para prender o dispositivo à pele. É possível utilizar também formulações transdérmicas 14 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ matriciais. As formulações apropriadas para aplicação tópica, por exemplo, na pele e nos olhos, são preferencialmente soluções aquosas, unguentos, cremes ou géis bem conhecidos na arte. Estes poderão conter agentes de solubilização, estabilizadores, agentes de melhoramento da tonicidade, tampões e conservantes.

Os compostos do invento podem ser administrados em quantidades terapeuticamente eficazes, em combinação com um ou mais agentes terapêuticos (combinações farmacêuticas). Por exemplo, é possível a ocorrência de efeitos sinérgicos com outras substâncias imunomoduladoras ou anti-inflamatórias, por exemplo, quando utilizados em combinação com ciclosporina, rapamicina ou ascomicina, ou os seus análogos imunossupressores, por exemplo, ciclosporina A (CsA), ciclosporina G, FK-506, rapamicina ou compostos comparáveis, corticosteróides, ciclofosfamida, azatioprina, metotrexato, brequinar, leflunomida, mizoribina, ácido micofenólico, micofenolato de mofetil, 15-desoxi-espergualina, anticorpos imunossupressores, especialmente anticorpos monoclonais para os receptores de leucócitos, por exemplo, MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, B7, CD45, CD58 ou os seus ligandos, ou outros compostos imunomoduladores tais como CTLA41g. Quando os compostos do invento são administrados em conjunto com outras terapias, as dosagens dos compostos co-administrados variarão naturalmente dependendo do tipo de co-fármaco empregue, do fármaco específico empregue, da condição em tratamento, etc. 0 invento também disponibiliza combinações farmacêuticas, por exemplo, um kit, compreendendo a) um primeiro agente que é um composto do invento tal como aqui descrito, sob a forma livre ou sob a forma de um sal farmaceuticamente aceitável e b) pelo menos um co-agente. 0 kit pode compreender instruções para a sua administração.

Os termos "co-administração", "administração combinada" ou similares, tal como aqui utilizados, pretendem englobar a administração dos agentes terapêuticos seleccionados a um único doente e destinam-se a incluir os regimes de tratamento em que os agentes não são necessariamente administrados pela mesma via de administração ou ao mesmo tempo. 15 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ Ο termo "combinação farmacêutica", tal como aqui utilizado, designa um produto que resulta da mistura ou combinação de mais de um inqrediente activo e inclui tanto combinações fixas como combinações não fixas dos ingredientes activos. 0 termo "combinação fixa" significa que os ingredientes activos, por exemplo, um composto de Fórmula I e um co-agente, são ambos administrados a um doente simultaneamente, sob a forma de uma entidade ou dosagem única. 0 termo "combinação não fixa" significa que os ingredientes activos, por exemplo, um composto de Fórmula I e um co-agente, são ambos administrados a um doente como entidades separadas, simultânea, concomitante ou sequencialmente, sem limites de tempo específicos, em que esta administração proporciona níveis terapeuticamente eficazes dos 2 compostos no corpo do doente. A última também se aplica à terapia com cocktails, por exemplo, a administração de 3 ou mais ingredientes activos.

Processos para preparar os compostos do invento 0 presente invento também inclui processos para a preparação dos compostos do invento. Nas reacções descritas, pode ser necessário proteger os grupos funcionais reactivos, por exemplo, os grupos hidroxilo, amino, imino, tio ou carboxi, quando a sua presença é pretendida no produto final, para evitar a sua participação indesejada nas reacções. É possível utilizar os grupos protectores convencionais de acordo com a prática padrão, por exemplo, ver T.W. Greene & P.G.M. Wuts in "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley and Sons, 1991.

Os compostos de Fórmula I, em que R6 e R7 são ambos hidrogénio, podem ser preparados procedendo como no seguinte Esquema Reaccional I:

16 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ Esquema Reaccional I

π4 ** (2) <3> (I) em que η, m, A, Ri, R2, R3, R4, R5, Re, R9 e Rio são tal como definidos no Sumário do invento.

Um composto de Fórmula I pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula 3 com um composto de fórmula 4, na presença de um solvente adequado (por exemplo, DCM), utilizando um agente redutor apropriado (por exemplo, NaCNBH3) . Um composto de fórmula 3 pode ser preparado por reacção de um composto de fórmula 2 com o complexo de P0C13 e DMF, seguido da adição de uma base adequada (por exemplo, NaOH).

Exemplos detalhados da síntese de um composto de Fórmula I podem ser encontrados nos Exemplos abaixo.

Processos adicionais para preparar os compostos do invento

Um composto do invento pode ser preparado como um sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável, por meio da reacção da forma de base livre do composto com um ácido orgânico ou inorgânico farmaceuticamente aceitável. Em alternativa, um sal de adição de base farmaceuticamente aceitável de um composto do invento pode ser preparado por meio da reacção da forma de ácido livre do composto com uma base orgânica ou inorgânica farmaceuticamente aceitável.

Em alternativa, as formas de sal dos compostos do invento podem ser preparadas utilizando sais dos materiais de partida ou dos intermediários. 17 ΕΡ 2 1β7 498/ΡΤ

As formas de ácido livre ou de base livre dos compostos do invento podem ser preparadas a partir da correspondente forma de sal de adição de base ou sal de adição de ácido, respectivamente. Por exemplo, um composto do invento sob a forma de um sal de adição de ácido pode ser convertido na base livre correspondente por tratamento com uma base adequada (por exemplo, solução de hidróxido de amónio, hidróxido de sódio e similares). Um composto do invento sob a forma de um sal de adição de base pode ser convertido no ácido livre correspondente por tratamento com um ácido apropriado (por exemplo, ácido clorídrico, etc.).

Os compostos do invento na forma não oxidada podem ser preparados a partir dos N-óxidos de compostos do invento por tratamento com um agente redutor (por exemplo, enxofre, dióxido de enxofre, trifenilfosfina, boro-hidreto de litio, boro-hidreto de sódio, tricloreto de fósforo, tribrometo ou compostos similares) num solvente orgânico inerte adequado (por exemplo, acetonitrilo, etanol, dioxano aquoso ou solventes similares), a uma temperatura compreendida entre 0 e 80°C.

Os derivados de pró-fármacos dos compostos do invento podem ser preparados por métodos conhecidos pelos peritos na arte (por exemplo, para obter pormenores adicionais, ver Saulnier et al. (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, pp. 1985). Por exemplo, os pró-fármacos adequados podem ser preparados por reacção de um composto não derivatizado do invento com um agente de carbamilação apropriado (por exemplo, 1,1-aciloxialquilcarbanocloridato, carbonato de para-nitrofenilo ou compostos similares).

Os derivados protegidos dos compostos do invento podem ser preparados por meios conhecidos pelos peritos na arte. Uma descrição detalhada das técnicas aplicáveis à criação de grupos protectores e à sua remoção pode ser encontrada em T.W. Greene, "Protecting Groups in Organic Chemistry", 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999.

Os compostos do presente invento podem ser convenientemente preparados, ou formados durante o processo do invento, como solvatos (por exemplo, hidratos). Os 18 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ hidratos dos compostos do presente invento podem ser convenientemente preparados por recristalização a partir de uma mistura aquosa/solvente orgânico, utilizando solventes orgânicos como a dioxina, o tetra-hidrofurano ou o metanol.

Os compostos do invento podem ser preparados na forma dos seus estereoisómeros individuais, por reacção de uma mistura racémica do composto com um agente de resolução opticamente activo para formar um par de compostos diastereoisoméricos, separação dos diastereómeros e recuperação dos enantiómeros opticamente puros. Embora a resolução dos enantiómeros possa ser efectuada utilizando derivados diastereoméricos covalentes dos compostos do invento, os complexos dissociáveis são preferidos (por exemplo, os sais diastereoméricos cristalinos). Os diastereómeros possuem propriedades fisicas distintas (por exemplo, pontos de fusão, pontos de ebulição, solubilidades, reactividade, etc.) e podem ser facilmente separados fazendo uso destas diferenças. Os diastereómeros podem ser separados por cromatografia ou, preferencialmente, por técnicas de separação/resolução baseadas em diferenças de solubilidade. 0 enantiómero opticamente puro é depois recuperado, juntamente com o agente de resolução, por qualquer meio prático que não resulte em racemização. Uma descrição mais detalhada das técnicas aplicáveis à resolução de estereoisómeros dos compostos a partir da sua mistura racémica pode ser encontrada em Jean Jacques, André Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates and Resolutions", John Wiley and Sons, Inc., 1981.

Em resumo, os compostos de Fórmula I podem ser preparados por um processo que envolve: (a) o do Esquema Reaccional I; e (b) a conversão opcional de um composto do invento num sal farmaceuticamente aceitável; (c) a conversão opcional de uma forma de sal de um composto do invento numa forma de não sal; (d) a conversão opcional de uma forma não oxidada de um composto do invento num N-óxido farmaceuticamente aceitável; (e) a conversão opcional de uma forma de N-óxido de um composto do invento na sua forma não oxidada; 19 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ (f) a resolução opcional de um isómero individual de um composto do invento a partir de uma mistura de isómeros; (g) a conversão opcional de um composto não derivatizado do invento num derivado de pró-fármaco farmaceuticamente aceitável; e (h) a conversão opcional de um derivado de pró-fármaco de um composto do invento na sua forma não derivatizada. 0 presente invento também inclui todas as variações isotópicas adequadas dos compostos do invento ou dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Uma variação isotópica de um composto do invento ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável é definida como uma variação em que pelo menos um átomo é substituído por um átomo que possui o mesmo número atómico, mas uma massa atómica diferente da massa atómica habitualmente encontrada na natureza. Os exemplos de isótopos que poderão ser incorporados nos compostos do invento e nos seus sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, embora não estejam limitados a estes, os isótopos de hidrogénio, carbono, azoto e oxigénio tais como Η, H, C, C, C, N, 170, 180, 35S, 18F, 36C1 e 123I. Determinadas variações isotópicas dos compostos do invento e dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, aquelas em que é incorporado um isótopo radioactivo como 3H ou 14C, são úteis em estudos de distribuição tecidual de fármacos e/ou substratos. Em exemplos particulares, os isótopos 3H e 14C poderão ser utilizados pela sua facilidade de preparação e detectabilidade. Em outros exemplos, a substituição por isótopos como 2H poderá proporcionar determinadas vantagens terapêuticas resultantes de uma maior estabilidade metabólica, como seja um aumento da semivida in vivo ou uma redução dos requisitos de dose. As variações isotópicas dos compostos do invento ou dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser geralmente preparadas por procedimentos convencionais, utilizando variações isotópicas apropriadas de reagentes adequados. As variações isotópicas dos compostos têm potencial para modificar o destino metabólico de um composto e/ou criar pequenas alterações em propriedades físicas como a hidrofobicidade e propriedades similares. A variação isotópica apresenta potencial para reforçar a eficácia e a segurança, melhorar a biodisponibilidade e a semivida, alterar a ligação a proteínas, modificar a 20 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ biodistribuição, aumentar a proporção de metabolitos activos e/ou diminuir a formação de metabolitos reactivos ou tóxicos.

Na medida em que a produção dos materiais de partida não é descrita em particular, os compostos são conhecidos ou podem ser preparados analogamente a métodos conhecidos na arte ou tal como descritos nos Exemplos aqui a seguir.

Um perito na especialidade compreenderá que as transformações referidas acima são apenas representativas de métodos para a preparação dos compostos do presente invento, e que outros métodos bem conhecidos podem ser similarmente utilizados.

Exemplos O presente invento é adicionalmente exemplificado, mas não limitado, pelos exemplos seguintes que ilustram a preparação de compostos de Fórmula I de acordo com o invento.

Exemplo 1 6—{4—[4—(5-Trifluorometil-piridin-2-il)-[1,4]diazepan-1-ilmetil]-lH-pirazol-3-il}-benzo[e][1,3]oxazina-2,4-diona Λ c-^-cu hQnh

1. PQCI3-DMF 2. Na2C03

O

f3C' .NH

NaOAc EtOH

O

/ '‘nh \. DCM/MeOH/CHaCOOH 2. Na(AcO)3BH H

.NH F3C'

H

O

Uma mistura de 2-cloro-5-trifluorometilpiridina (362 mg; 1,99 mmoles) e [1,4]-diazepano (1000 mg; 9,98 mmoles) em DMF (6,0 ml) foi agitada durante 2 horas à temperatura ambiente, seguida de evaporação do solvente DMF sob vácuo. O resíduo foi distribuído entre acetato de etilo (30 ml) e água (40 ml) . A fase aquosa foi extraída uma vez com acetato de etilo (20 ml), e as fases orgânicas combinadas foram secas com Na2S04. A evaporação proporcionou um resíduo oleoso (1-(5-trifluoro-metil-piridin-2-il)-[1,4]-diazepano bruto), que foi utilizado 21

ΕΡ 2 167 498/PT directamente para a aminação redutiva na última etapa. À suspensão de 5-acetilsalicilamida (900 mg; 5,02 mmoles) em piridina (3,5 ml), a 0°C e sob agitação, adicionou-se clorocarbamato de etilo (600 mg; 5,53 mmoles) gota a gota, e a reacção foi aguecida a 98°C durante a noite. A piridina foi evaporada, e o resíduo foi distribuído entre acetato de etilo (100 ml) e água (60 ml). A fase orgânica foi lavada com HC1 (2N, 50 ml) e água (60 ml) e seca com Na2S04. À medida que a fase orgânica foi evaporando, o produto 6-acetil-benzo[e][1,3]oxazina-2,4-diona começou a precipitar. O precipitado foi recolhido por filtração e depois foi adicionalmente concentrado até o material de partida (5-acetilsalicilamida) começar a co-cristalizar. A uma suspensão de 6-acetil-benzo[e][1,3]oxazina-2,4-diona (626 mg; 3,05 mmoles) obtida acima em etanol (5,0 ml) adicionou-se uma solução de Na0Ac.3H20 (910 mg; 2,2 equiv.) e cloridrato de semicarbazida (408 mg; 1,20 equiv.) em água (5,0 ml). A mistura foi aquecida a 92°C durante 2 horas. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, o produto foi recolhido por filtração, lavado com acetonitrilo e seco sob vácuo para fornecer o derivado semicarbazona correspondente.

Adicionou-se a DMF anidro (2,50 ml), a 0°C e sob árgon, POCI3 (0,60 ml; 1,01 g; 6,56 mmoles) gota a gota. Após 10 minutos, removeu-se o banho de gelo para permitir a subida da temperatura até à temperatura ambiente. A semicarbazona obtida acima foi adicionada em porções, e a temperatura foi incrementada e mantida a 68°C durante 1 hora. A reacção foi parada com gelo/água. Utilizou-se Na2CC>3 para subir o pH para cerca de 11-12, seguido de neutralização com solução aquosa saturada de NH4C1. O precipitado foi recolhido por filtração e seco sob vácuo para fornecer 3-(2,4-dioxo-3,4-di-hidro-2H-benzo[e] [1,3]oxazin-6-il)-1H—pirazol-4-carbaldeído. A mistura de 3-(2,4-dioxo-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3] oxazin-6-il)-1H—pirazol-4-carbaldeido (51,4 mg; 0,2 mmoles) e 1-(5-trifluorometil-piridin-2-il)-[1,4]diazepano (24,5 mg; 0,1 mmoles) em cloreto de metileno (1,0 ml), metanol (0,5 ml) e ácido acético (15 μΐ) foi agitada durante 30 minutos à temperatura ambiente. Em seguida, adicionou-se Na(AcO)3BH (84 22

ΕΡ 2 167 498/PT mg; 4,0 equiv.), e a reacção foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. Após evaporação, o resíduo foi redissolvido em DMF (1,0 ml) e submetido a LC-MS preparativa de fase reversa (acetonitrilo/água/TFA gradiente 10-90% CH3CN em 7,5 min, Ultro 120 5 μΜ C18Q, 75x30mmDI). A solução de água/MeCN recolhida do sal TFA do produto foi evaporada para remover o acetonitrilo. Adicionou-se solução aquosa saturada de NaHC03 para subir o pH para cerca de 8-9. Em seguida, utilizou-se acetato de etilo para extrair o produto, e a fase orgânica foi seca com Na2S04. A evaporação do solvente forneceu 6—{4—[4-(5-trifluorometil-piridin-2-il)-[1,4]diazepan-l-ilmetil]-lH-pirazol-3-il}-benzo[e][1,3]— oxazina-2,4-diona como base livre.

Exemplo 2 6-(5-(((R)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-2H-1,2,3-triazol-4-il)-3,4-di-hidro-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona 0 h2n HO'

NaBH/lj/THF refluxo

trlatílamínar THF/ refluxo <

Br

CI2Pd(PPh3)2 DMFCuI Et3N

jOH 0^0' ΗΝΓ

Dess-Martin ^OH DMF <ΤΌ ^ /~\f CF3 DMF AcOH NaBH(OAc)3l //" HN'

CF3

Exemplo 2-1: Preparação de 2- (aminometil)-4-bromofenol 0

Dissolveu-se 5-bromo-2-hidroxibenzamida (2,16 g; 23 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ moles) e NaBH4 (1,52 g; 40 moles) em THF seco (150 ml) num balão de fundo redondo de duas tubuladuras tapado. Juntou-se iodo (5,06 g; 20 moles) em THF seco, sob atmosfera de azoto e a 0°C, ao longo de 2,5 horas. A mistura reaccional foi submetida a refluxo durante 3 horas e depois arrefecida a 0°C. O hidreto em excesso foi destruído por meio da adição cuidadosa de HC1 IN. Após remoção da maioria do solvente orgânico sob vácuo, a solução acídica aguosa foi diluída com HC1 IN (150 ml) e lavada três vezes com éter (30 ml de cada vez). O pH da solução aquosa foi ajustado a pH 6-7 através da adição cuidadosa de bicarbonato de sódio sólido. O produto foi recolhido por filtração e depois lavado com água. Secou-se o produto adicionalmente em estufa de vácuo durante a noite, fornecendo 2-(aminometil)-4-bromofenol que foi utilizado directamente na etapa seguinte sem purificação adicional.

Exemplo 2-2: Preparação de 6-bromo-3, 4-di-hidrobenzo[e]-[1,3]oxazin-2-ona

THF (0 (ll)

Uma solução de 2-(aminometil)-4-bromofenol (I) (1,16 g; 5,7 mmoles), trietilamina (111) e carbonildiimidazol (II) (1,86 g; 11,5 mmoles) em THF anidro (100 ml) foi sujeita a refluxo durante 4 horas. O solvente foi evaporado, e o resíduo dissolvido em diclorometano (DCM) (100 ml). A solução orgânica foi lavada com HC1 IN (20 mlx3) e, em seguida, com salmoura (50 ml). O solvente foi depois evaporado, e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia para fornecer 6-bromo-3,4-di-hidrobenzo[e]-[1,3]oxazin-2-ona sob a forma de um pó branco.

Exemplo 2-3: Preparação de 3, 4-di-hidro-6-(3-hidroxiprop-l-Inll)benzo [e][1,3]oxazln-2-ona

OH 24 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ A uma solução de 6-bromo-3,4-di-hidrobenzo[e][1,3] oxazin-2-ona (114 mg; 0,5 mmoles), PdCl2(PPh3)2 (60 mg; 0,05 mmoles), Cul (20 mg; 0,1 mmoles) e iodeto de tetrabutilamónio (74 mg; 0,2 mmoles) em 1 ml de DMF adicionou-se prop-2-in-l-ol (150 mg; 2,5 mmoles) e trietilamina (0,8 ml) via seringa, sob atmosfera de azoto. A mistura resultante foi aquecida a 75°C até o brometo de arilo ser consumido, tal como monitorizado por CCF. A solução arrefecida foi sujeita a partição entre acetato de etilo e água, e a camada orgânica foi depois lavada com salmoura e seca com Na2S04. A evaporação da solução, seguida de cromatografia em coluna, forneceu o produto de acoplamento 3,4-di-hidro-6-(3-hidroxiprop-l-inil)- benzo[e][1,3]oxazin-2-ona como um óleo incolor, m/e: 204 (M+l).

Exemplo 2-4: Preparação de 5-(3, 4-di-hidro-2-oxo-2H-benzo-[e][1,3]oxazin-6-il)-2H-1,2,3-triazol-4-carbaldeído

Dissolveu-se 3,4-di-hidro-6-(3-hidroxiprop-l-inil)benzo [e][1,3]oxazin-2-ona (30 mg; 0,15 mmoles) em dimetilformamida (DMF) (2 ml) e tratou-se com reagente de Dess-Martin (130 mg; 0,3 mmoles) à temperatura ambiente. Após agitação durante 1 hora, a reacção foi parada com HC1 IN (10 ml) e depois extraída com acetato de etilo (EtOAc) (10 mlx5). A fase orgânica combinada foi lavada com água, depois com solução aquosa saturada de cloreto de amónio e depois com salmoura. Após secagem com sulfato de sódio, o solvente foi removido sob vácuo para fornecer o aldeído bruto, que foi utilizado directamente na etapa seguinte. O aldeído bruto obtido acima foi dissolvido em DMSO (2 ml) e depois foi tratado com azida de sódio (98 mg; 1,5 mmoles) à temperatura ambiente. Após agitação durante 4 horas, a reacção foi parada com solução aquosa de bicarbonato de sódio (10 ml) e depois foi extraída com EtOAc (10 mlx5). A fase orgânica combinada foi lavada com água, depois com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e depois com salmoura. Após secagem com sulfato de sódio, o solvente foi 25 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ removido sob vácuo para fornecer o produto bruto, que foi depois purificado por cromatografia flash fornecendo 5-(3,4-di-hidro-2-oxo-2H-benzo[e][1,3]oxazin-6-il)-2H-1,2,3-triazol-4-carbaldeído como um óleo incolor, m/e: 245 (M+l).

Exemplo 2-5: Preparação de 6-(5-(((R)-4-(5-(trifluorometil) -piridin-2-il)-3-metilpiperazin-l-il)metil)-2H-1, 2, 3-triazol-4-11)-3, 4-di-hidrobenzo[e][1, 3]oxazin-2-ona

H

Misturou-se 5-(3,4-di-hidro-2-oxo-2H-benzo[e][l,3]oxazin-6-il)-2H-1,2,3-triazol-4-carbaldeído (15 mg; 0,06 mmoles) e (R)-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-2-metilpiperazina (20 mg; 0,08 mmoles) em DMF (1 ml), seguido da adição de ácido acético (AcOH) (30 μΐ) . A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos e, em seguida, adicionou-se triacetoxiboro-hidreto de sódio (42 mg; 0,2 mmoles). A suspensão resultante foi depois agitada à temperatura ambiente durante a noite. A reacção foi parada utilizando uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e depois foi extraída com acetato de etilo (10 mlx4). A fase orgânica combinada foi concentrada, e o produto bruto resultante foi purificado por HPLC, fornecendo 6-(5-(((R)-4-(5-(trifluorometil )piridin-2-il) -3-metilpiperazin-l-il)metil)-2H-1,2,3-triazol-4-il)-3,4-di-hidrobenzo[e] [1,3]oxazin-2-ona como um pó branco, m/e: 474 (M+l).

Repetindo os procedimentos descritos no exemplo acima, e utilizando os materiais de partida apropriados, obtêm-se os seguintes compostos de Fórmula I, tal como identificados na Tabela 1. 26 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ

Tabela 1

Numero do Composto Estrutura Dados físicos EM (m/z):(M+l) 2 F3c-f y~H, <h~\ í Ύ T W 0 H 473, 2 3 H HN'%í?:rY^V^k/^,_/=\_rF 1 L U '—N N—j) CF3 0^0"^ N—/ N-^ 487, 2 4 H 0 N'\ ΗΝΧΤίίνγ^ \ / \, _/=\_~c J L IJ Ν"Λ 0^-0^ W N-^ 487, 2 5 H TN> ΥΤΊί^ \-CF3 473, 2 6 °^3ΐΓ]ΐ'^··,ι-_/ι—1C^"cf3 H 459, 2 7 H XX^^ó-Çh*’ 527, 2 8 h/VYX_ ^^V—Z^S—rF A JLJJ '“N. // cp3 459, 2 9 H t H . _/ N'T^V \ /“< _/=\_ o=< *V—/* 'íi—y CF3 459, 2 10 H r ι^0^<Σ)"Ο-εΡ3 O^C)^ V-* N-' 471, 2 11 H F3C 527, 2 12 H 485, 2 27 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ Número do Composto Estrutura Dados físicos EM (m/z):(M+l) 13 ^N"0"CF3 499, 2 14 VS XXrCr'^ NV H 491, 2 15 N'~N H 432, 2 16 o ώ, ryO'"· girN^ N Nv H 459, 2 17 °'CO^Cr^ H 404, 2 18 Λ H Cl^N^ tF 3 _ TI r3-X)rOV Nv H 527, 2 19 H Q^N, CF, _ Ti ΛτΟ'** "-N H 527, 2 20 Vl £ .(V* ULrO^ NV H 489, 2 21 H n'n. ^YCF3 1XXxCtAj 28 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ Número do Composto Estrutura Dados físicos EM (m/z):(M+l) 22 H Ν'Κ v_y XN-/ 23 H n-n, r^yCF3 24 H N^N\ r^YCF3 0Λ„1ϋ Hj 25 H n-n' N—}~cf3 \_y h-J H 26 H ° ^N> “fjfY^-N 1M-O-0^ w 27 » J N H 430, 2 28 HNzN ^ Ο V·» 474, 2 29 "Λ 419, 2 30 HNL^hJ Λ 473, 2 31 aoJ v- 410, 3 29 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ Número do Composto Estrutura Dados físicos EM (m/z):(M+l) 32 F F 474, 2 33 501, 2 34 U_ Li.—-LL 0 *0 S©.*1 485, 2 35 ,HN=N jO'-’ 430, 2 36 Λ N N J N J® “ 439, 2 37 >px^r 8 503, 2 38 νύτΛ a 489, 2 39 Λ FvOr^) 8 491, 2 30 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ

Numero do Composto Estrutura Dados físicos EM (m/z):(M+l) 40 jjOt 472, 2 41 Cl H Vn 'n H 436, 2 42 Λ Cl ^ 438, 2 43 HN=N 472, 2 44 rJT# N-NH 473, 2 45 ___N AcOry h F ' 0 459, 2

Ensaios

Os compostos do presente invento foram analisados para medir a sua capacidade de inibição de ITPKb de acordo com os seguintes ensaios.

Purificação de ITPKb: A sequência de ADN que codifica os resíduos 640-942 de ITPKb murina foi amplificada por PCR a partir de uma construção de tamanho total presente no vector de expressão mamifero pKDNZ. O iniciador 3' incorporava um codão de terminação e um local PacI pendente. O produto foi digerido com PacI antes de ser ligado no plasmideo MH4, que 31 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ foi preparado por digestão com PM1I e Pacl. A clonagem no plasmideo MH4 adicionou a seguência MGSDKIHHHHHH à extremidade N-terminal da região traduzida. As enzimas mutantes foram preparadas por mutagénese dirigida, utilizando o kit Quikchange de Stratagene. A enzima iTPKb foi expressa na estirpe HK100 de Escherichia coli. Tipicamente, um lote de células de 4 1 foi crescido em meio LB contendo ampicilina 0,1 μρ/ιηΐ até uma A60o de 0,5 a 30°C, antes da indução com L-arabinose a 0,02% durante 6 horas. As células foram colhidas por centrifugação, e os depósitos foram ressuspensos em 50 ml de Tris 50 mM (pH 8), NaCl 100 mM, TCEP 1 mM e lisozima 0,1 mg/ml, com uma pastilha de inibidores de protease Complete (Roche). As células foram guebradas por ultra-sons, e os resíduos foram removidos por centrifugação durante 40 minutos a 35000*g. A purificação inicial foi efectuada utilizando três colunas Hi-Trap hp de 1 ml de níquel-Sepharose ligadas em série (Amersham). Após aplicação dos sobrenadantes dos depósitos, o material ligado foi lavado com Tris 20 mM (pH 8,0), imidazol 20 mM, glicerol a 10% (v/v) e TCEP 1 mM, antes da eluição com um gradiente de imidazol até 200 mM.

As fracções contendo ITPKb foram identificadas por SDS-PAGE, as fracções puras foram concentradas, e o tampão foi trocado, mediante a utilização de colunas centriprep 20 de 15 kDa, por Tris 20 mM (pH 8), KC1 200 mM, MgCl2 5 mM, DTT 0,5 mM, glicerol a 10%, IP3 1 μΜ e ATP 20 μΜ, para uma concentração final de proteína de 7 mg/ml.

Medição bioquímica da actividade de ITPKb: A actividade de ITPKb foi determinada utilizando o ensaio de depleção de ATP Kinase-Glo (Promega). O tampão de reacção do ensaio consistiu em Tris 50 mM (pH 8,0), NaCl 100 mM, DTT 1 mM, glicerol a 10%, MgCl2 5 mM, ATP 1 μΜ e IP3 10 μΜ (Alexis Biochemicals). Adicionaram-se depois 50 nl de inibidor a cada reacção de 40 μΐ, seguida de uma adição de 10 μΐ de ITPKb purificada (concentração final de 60 nM). A mistura reaccional foi incubada durante 60 minutos à temperatura ambiente e foi parada por meio da adição de um volume igual 32 ΕΡ 2 167 498/ΡΤ de reagente Kinase-Glo (Promega). A luminescência foi medida utilizando um instrumento Acquest de Molecular Devices.

Os compostos de Fórmula I possuem preferencialmente um valor de CI50 inferior a 500 nM, preferencialmente inferior a 250 nM, mais preferencialmente inferior a 100 nM, no que diz respeito à inibição da fosforilação de IP3.

Medição dos níveis intracelulares de IP3, IP4 e IP5 por HPLC: As células Jurkat foram obtidas de ATCC (clone E6-1) (www.ATCC.org Cat#TIB-152) . 107 células em 1 ml de meio RPMI-1640 isento de inositol e não contendo soro foram submetidas a marcação breve, a 37°C e durante 6 horas, com 15 μΟί de 3H-mio-inositol em inositol. As células foram depois diluídas para 4 ml de RPMI-1640 contendo FBS a 10% e incubadas durante a noite a 37°C. Em seguida, as células foram concentradas e ressuspensas em 1 ml de RPMI-1640 contendo FBS a 10%. Adicionou-se depois 1 μΐ de inibidor em DMSO. Adicionaram-se 50 pg de OKT3 e 10 pg de CD28 anti-humano (BD Pharmingen clone CD28.2), seguidos de uma incubação de 5 minutos a 37°C. As células foram depois concentradas, e a reacção foi parada com a ressuspensão do depósito de células em 100 μΐ de PBS contendo HC1 350 mM. Os extractos foram centrifugados para remover as proteínas e os resíduos celulares. Os polifosfatos marcados com inositol presentes nos extractos foram, em seguida, resolvidos por HPLC numa coluna Partisphere SAX (15 cmx4,6 mm). As amostras foram eluídas da forma que se segue com gradientes gerados pela mistura do tampão A ((NH4)H2P04 10 mM, pH 3,35, com H3P04) com o tampão B ((NH4)H2P04 1,7 M, pH 3,35, com H3PO4) . 0-12,5 minutos 0-100% Tampão B; 12,5-25 minutos 100% Tampão B; 25-30 minutos 0-100% Tampão A; 30-45 minutos 100% Tampão A. A radioactividade foi detectada com um detector β-Ram em linha de IN/US Systems.

Os compostos de Fórmula I possuem preferencialmente um valor de CI50 inferior a 1 μΜ, mais preferencialmente inferior a 500 nM, no que diz respeito à inibição da conversão de IP3 em IP4.

Lisboa, 2010-11-18

Claims

ΕΡ 2 167 498/PT 1/8 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de Fórmula I:

em que: n é seleccionado entre 0, 1, 2 e 3; m é seleccionado entre 0, 1, 2 e 3; A pode ter até 3 grupos seleccionados entre -CRi=, -CR2= e -CR5= substituídos por -N=; Ri, R2 e R5 são seleccionados de modo independente entre hidrogénio, hidroxilo, halogéneo, ciano, alquilo Ci_6, alquilo Ci_6 substituído com halogéneo, alquilo Ci_6 substituído com hidroxilo e alquilo Ci_6 substituído com ciano; R3 e R4, juntamente com os átomos de carbono aos quais R3 e R4 estão ligados, formam um heterociclo com 5 a 6 membros fundido com o anel A, contendo até 4 radicais seleccionados entre O, C(O), S(0)2, CR11R12 e NH; em que cada R11 e R12 é seleccionado, de modo independente, entre hidrogénio, alquilo Ci_3 e alquilo C4_3 substituído com halogéneo; ou Rn e R42, juntamente com o carbono ao qual ambos estão ligados, formam um cicloalquilo C3_7; R6 e R7 são seleccionados de modo independente entre hidrogénio, alquilo Ci_3 e alquilo Ci_3 substituído com halogéneo; ou R6 e R7, juntamente com o carbono ao qual ambos estão ligados, formam um cicloalquilo C3-7; R8 é seleccionado entre alquilo Ci_6, alcenilo C2~(,r alquilo C1-6 substituído com halogéneo e alquilo C4-6 substituído com hidroxilo; ou dois grupos R8 podem combinar-se para formar uma ponte alquilo; ou quando dois grupos R8 estão ligados ao mesmo átomo de carbono, eles, juntamente com o carbono ao qual ambos estão ligados, formam um cicloalquilo C3_7; Rg é seleccionado entre Li-arilo Cô-nn Li-heteroarilo Cmo, ΕΡ 2 167 498/ΡΤ 2/8 alquilo Ci-e, Li-cicloalquilo C3-12 e Li-heterocicloalquilo C3-8; em que os referidos grupos arilo, heteroarilo, cicloalquilo e heterocicloalquilo de R9 podem estar opcionalmente substituídos com 1 a 3 radicais seleccionados de modo independente entre halogéneo, ciano, hidroxilo, alquilo Ci_3, alquilo C1-3 substituído com halogéneo, alquilo Ci_3 substituído com ciano, alquilo Ci_3 substituído com hidroxilo, -C(0)Ri3, -C (O)NR13R14; em que cada Ri3 e Ri4 é seleccionado de modo independente entre hidrogénio e alquilo C1-6; Lx é uma ligação, alquilo Ci_3 ou alquilo Ci_3 substituído com halogéneo; Y é N ou CR10; Rio é seleccionado entre hidrogénio, alquilo Ci_6, -NR15R16, -NRi5C(0)Ri6 e -C (0)NR15R16; em que cada R15 e Ri6 é seleccionado de modo independente entre hidrogénio, alquilo Ci-6, arilo Ceio, heteroarilo Ci_i0, cicloalquilo C3-12 e heterocicloalquilo C3-8; em que os referidos grupos arilo, heteroarilo, cicloalquilo e heterocicloalquilo podem estar opcionalmente substituídos com 1 a 3 radicais seleccionados de modo independente entre halogéneo, hidroxilo, ciano, alquilo Ci-6, alquilo Ci_6 substituído com halogéneo, alcoxi em Ci_6 e alcoxi em C1-6 substituído com halogéneo; e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que: n é seleccionado entre 1 e 2; m é seleccionado entre 0, 1 e 2; A pode ter até 3 grupos seleccionados entre -CRi=, -CR2= e -CR5= substituídos por -N=; Ri, R2 e R5 são hidrogénio; R6 e R7 são hidrogénio; Re é seleccionado entre alquilo C1-6, alquilo Ci_6 substituído com halogéneo e alquilo Ci_6 substituído com hidroxilo; ou dois grupos R8 podem combinar-se para formar uma ponte alquilo; ou quando dois grupos Rs estão ligados ao mesmo carbono, formam juntamente com o carbono ao qual ambos estão ligados um cicloalquilo C3-7; Rg é seleccionado entre Li-arilo C6-io, Li-heteroarilo C1-10, alquilo C1-6, Li-cicloalquilo C3-12 e Li-heterocicloalquilo C3-s; em que os referidos grupos arilo, heteroarilo, cicloalquilo e heterocicloalquilo de Rg podem estar opcionalmente ΕΡ 2 167 498/ΡΤ 3/8 substituídos com 1 a 3 radicais seleccionados de modo independente entre halogéneo, ciano, hidroxilo, alquilo Ci_3, alquilo Ci_3 substituído com halogéneo, alquilo Ci_3 substituído com ciano, alquilo Ci_3 substituído com hidroxilo, —C (0) Ri3, -C (0) NRi3Ri4; em que cada R13 e R14 é seleccionado de modo independente entre hidrogénio e alquilo Ci-6; Li é uma ligação ou alquilo Ci_3; Y é CR10; e Rio é hidrogénio.
3. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que o heterociclo com 5 a 6 membros formado a partir de R3 e R4 e fundido com o anel A, juntamente com os átomos de carbono aos quais R3 e R4 estão ligados, é seleccionado entre:
4. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que R8 é seleccionado entre metilo, etilo, trifluorometilo, difluoro-metilo, fluorometilo e hidroximetilo; ou dois grupos R8 podem combinar-se para formar uma ponte alquilo seleccionada entre metilo, etilo e propilo; ou dois grupos R8 estão ligados ao mesmo carbono, e formam juntamente com o carbono ao qual ΕΡ 2 167 498/ΡΤ 4/8 ambos estão ligados um grupo ciclopropilo.
5. Composto de acordo com a reivindicação 4, em que R9 é seleccionado entre cicloalquilo C3-7, heterocicloalquilo C4-7, fenilo, piridinilo, pirazinilo, pirimidinilo e furo[3,2-c]-piridin-4-ilo; em que o referido grupo fenilo, piridinilo, pirazinilo, pirimidinilo ou furo[3,2-c]piridin-4-ilo está opcionalmente substituído com 1 a 3 radicais seleccionados, de modo independente, entre trifluorometilo, ciano, bromo, cloro, hidroximetilo, metilcarbonilo, metilo, aminocarbonilo, nitro, iodo, flúor, metoxicarbonilo, hidroxilo, amino, carboxi e metoxi.
6. Composto de acordo com a reivindicação 1, seleccionado entre: • 6-{4-[4-(5-trifluorometil-piridin-2-il)-[1,4]diazepan-1-il-metil]-lH-pirazol-3-il}-benzo[e][1,3]oxazina-2,4-diona; • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)-metil)-lH-pirazol-3-il)-3H-benzo[e][1,3]oxazina-2,4-diona; • 6-(4-(((R)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3H-benzo[e][1,3]-oxazina-2,4-diona; • 6-(4-(((S)—4 —(5—(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3H-benzo[e] [1,3] — oxazina-2,4-diona; • 6-(4-(((R)—4 —(5—(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidrobenzo-[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-1,4-diazepan-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidrobenzo[e][1,3]— oxazin-2-ona; • 7-(4-(((R)— 4 —(5 —(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-1,2-di-hidro-isoquinolin-3(4H)-ona; • 7-(4-(((R)—4 —(5—(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)isoquinolina- 1,3(2H,4H)-diona; • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-1,4-diazepan-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidroquinazolin-2(1H)-ona; ΕΡ 2 167 498/ΡΤ 5/8 • 7-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-1,4-diazepan-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-1,2-di-hidroisoquinolin-3(4H)-ona; • 6-(4-(((R)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-3-metil-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-quinazolin-2(llH)-ona; • (R)-6-(4-((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona; • 6-(4-((3-(trifluorometil)-4-(5-(trifluorometil)-piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)-metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e] [1,3]-oxazin-2-ona; • (R)-5-(4-((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona; • 6-(4-((3-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-3,6-diazabiciclo [3.1] heptan-6-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((2-(trifluorometil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((3-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-3,8-diazabiciclo [3.2.1] octan-8-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H- benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((3-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-3,8-diazabiciclo [3 . 2 . 1] octan-8-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-2H-benzo-[e][1,3]oxazina-2,4(3H)-diona; • (S)-6-(4-((3-(fluorometil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((4-(2,3-dimetilfenil)piperazin-l-il)metil)-1H-pirazol-3-il)-2H-benzo[e][1,3]oxazina-2,4(3H)-diona; • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)-metil)-lH-pirazol-3-il)-2H-benzo[b][1,4]oxazin-3(4H)-ona; • 6-(4-((4-(2,3-dimetilfenil)piperazin-l-il)metil)-1H-pirazol-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona; • (S) -6- (4- ( (3- (trifluorometil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; ΕΡ 2 167 498/ΡΤ 6/8 • (R)-6-(4-((3-(trifluorometil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (S)-6-(4-((3-(hidroximetil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)-2-(2-metil-4-((3-(2-oxo-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3] oxazin-6-il)-lH-pirazol-4-il)metil)piperazin-l-il)-isonicotinonitrilo; • (R)-6-(4-((3-metil-4-(4-(trifluorometil)-pirimidin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)-6-(4-((3-metil-4-(5-metilpiridin-2-il)piperazin-l-il)-metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]-oxazin-2-ona; • (S)—6—(4—((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)—6—(4—((4-ciclo-hexil-3-metilpiperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)—6—(5—((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-2H-l,2,3-triazol-4-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)-4,4-dimetil-6-(4-((3-meti1-4-(5-(trifluorometil)-piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • 6-(4-((4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-4,7-diazaspiro-[2.5]octan-7-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e] [1,3]oxazin-2-ona; • (R)-6-(2-metil-4-((3-(2-oxo-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]— oxazin-6-il)-lH-pirazol-4-il)metil)piperazin-l-il)-nicotinonitrilo; • (R)— 6 —(4—((4-(5-cloropiridin-2-il)-3-metilpiperazin-l-il)-metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo [e] [1,3] — oxazin-2-ona; • ácido (S)-1-((3-(2-oxo-3,4-di-hidro-2H-benzo [e] [1,3] - oxazin-6-il)-lH-pirazol-4-il)metil)-4-(5-(trifluorometil)-piridin-2-il)piperazina-2-carboxilico; • (S)— 6 —(4—((2-(hidroximetil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; ΕΡ 2 167 498/PT 7/8 • (S) — 6 — (4 — ((2-(fluorometil)-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e] [1,3]oxazin-2-ona; • (R) —6— (4— ( (3-metil-4-(4-(trifluorometil)fenil)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3] oxazin-2-ona; • (R)—6—(4—((4-(2-fluorobenzil)-3-metilpiperazin-l-il)-metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo [e] [1,3]-oxazin-2-ona; • (R)— 6 —(4—((4-(4-clorofenil)-3-metilpiperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona; • (R)— 6 —(4—((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo [e][1,3]oxazin-2-ona; • (S)— 6 —(4—((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e] [1,3]oxazin-2-ona; • (S)—6—(4—((3-metil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)-piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)benzo[d]oxazol-2(3H)-ona; • (R)-6-(4-((3-metil-4-(3-(trifluorometil)fenil)piperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3] oxazin-2-ona; e • (S)— 6 —(4—((4-ciclo-hexil-3-metilpiperazin-l-il)metil)-lH-pirazol-3-il)-3,4-di-hidro-2H-benzo[e][1,3]oxazin-2-ona.
7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6 para utilização em terapia.
8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6 para utilização num método de tratamento de uma doença auto-imune num sujeito.
9. Utilização de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6 para a preparação de um medicamento destinado ao tratamento de uma doença auto-imune num sujeito.
10. Composto para utilização num método de tratamento de acordo com a reivindicação 8 ou utilização de acordo com a reivindicação 9, em que o composto modula a actividade de cinase ou o nível celular de uma molécula ITPKb, modulando ΕΡ 2 167 498/ΡΤ 8/8 deste modo a diferenciação e a função dos linfócitos B no sujeito.
11. Composto para utilização num método de tratamento ou utilização de acordo com a reivindicação 10, em que o agente regula negativamente o nível celular da molécula ITPKb.
12. Composto para utilização num método de tratamento ou utilização de acordo com a reivindicação 10, em que o agente inibe a actividade de cinase da molécula ITPKb.
13. Composto para utilização num método de tratamento ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 12, em que o sujeito é humano e a molécula ITPKb é a ITPKb humana.
14. Composto para utilização num método de tratamento ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 13, em que a doença auto-imune é seleccionada entre artrite reumatóide, lúpus eritematoso sistémico, púrpura trombo-citopénica idiopática, anemia hemolítica e psoríase.
15. Composto para utilização num método de tratamento ou utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 13, em que o sujeito sofre de linfoma de células B. Lisboa, 2010-11-18