PT1807431E - Pirrolo[1,2-d][1,2-4]triazina como inibidores das quinases c-jun n terminal (jnk) e das quinases p-38 - Google Patents

Description

1 ΡΕ1807431

DESCRIÇÃO "PIRROLO[1,2-D][1,2-4]TRIAZINA COMO INIBIDORES DAS QUINASES C-JUN N TERMINAL (JNK) E DAS QUINASES P-38" São aqui proporcionados compostos que têm acti-vidade inibidora da citoquina. Os compostos em certas formas de realização são compostos pirrolotriazina para tratar condições associadas às quinases p38 e/ou JNK e para tratar condições associadas à quinase p38 ou JNK. São dados detalhes abaixo e nas reivindicações.

ANTECEDENTES

Um grande número de citoquinas participa na resposta inflamatória, incluindo as IL-1, IL-6, IL-8 e TNF-α. A superprodução de citoquinas tais como as IL-1 e TNF-α está implicada numa larga variedade de doenças, incluindo a doença inflamatória do intestino, artrite reu-matóide, psoríase, esclerose múltipla, choque por endo-toxinas, osteoporose, doença de Alzheimer, e insuficiência cardiaca congestiva, de entre outras [Henry et al., Drugs Fut., 24:1345-1354 (1999); Salituro et al., Curr. Med.

Chem., 6:807-823 (1999)]. Evidências em pacientes humanos indicam que proteínas antagonistas de citoquinas são eficazes no tratamento de doenças inflamatórias crónicas, tais como, por exemplo, o anticorpo monoclonal para o TNF-a 2 ΡΕ1807431 (Remicade) [Rankin et al., Br. J. Rheumatol., 34:334-342 (1995)], e a proteína de fusão TNF-α receptor Fc solúvel (Etanercept) [Moreland et al., 25 Ann. Intern. Med., 130:478-486 (1999)]. A biossíntese do TNF-α ocorre em muitos tipos de células em resposta a um estímulo externo, tal como, por exemplo, um mitogénio, um organismo infeccioso, ou um traumatismo. São importantes mediadores da produção do TNF-α as proteínas quinases activadas por mitogénio (MAP), incluindo as quinases JNK e p38. Estas quinases são activadas em resposta a vários estímulos de tensão, incluindo mas não limitados a citoquinas pró-inflamatórias, endotoxina, luz ultravioleta, e choque osmótico. As vias das JNK e da p38 são activadas pela estimulação de membros da família do receptor do TNF, tais como TNFR1, CD40, mediador da entrada do vírus do Herpes ('HVEM')/outra proteína associada ao receptor do TNF associada ao receptor (TRAF) ('ATAR'), CD95/Fas/Apol, receptores TRAIL/Apo2L e o receptor da citoquina de activação induzida relacionada com o TNF ('TRANCE'), activador do receptor do NF-kB ('RANK'). São conhecidas quatro isoformas da p38, isto é, ρ38α, ρ38β, ρ38γ, e ρ38δ. As isoformas oí e β são expressas em células inflamatórias e são moduladores chave da produção do TNF-α. A inibição das enzimas p38cx e β nas células resulta em níveis reduzidos da expressão do TNFa. Da mesma forma, a administração de inibidores da p38a e β em modelos animais da doença inflamatória tem provado que 3 ΡΕ1807431 tais inibidores são eficazes no tratamento destas doenças. Concordantemente, as enzimas p38 desempenham um papel importante em processos inflamatórios mediados pelas IL-1 e TNF-α. Estão divulgados compostos que alegadamente inibem a quinase p38 e as citoquinas tais como as IL-1 e o TNF-cx para utilização no tratamento de doenças inflamatórias nas Patentes dos Estados Unidos N.° 6 277 989 e 6 130 235 para Seios, Inc; Patente dos Estados Unidos N.° 6 147 080 e 5 945 418 para Vertex Pharmaceuticals Inc; Patente dos Estados Unidos N.° 6 251 914, 5 977 103 e 5 658 903 para Smith-Kline Beecham Corp.; Patente dos Estados Unidos N.° 5 932 576 e 6 087 496 para G. D. Searle & Co.; Patente WO 00/56738 e WO 01/27089 para Astra Zeneca; WO 01/34605 para Johnson & Johnson; WO 00/12497 (derivados de quinazolina como inibidores da quinase p38); WO 00/56738 (derivados de piridina e de pirimidina para o mesmo propósito); WO 00/12497 (discute a relação entre os inibidores da quinase p38); e WO 00/12074 (compostos de piperazina e de piperidina úteis como inibidores da p38). A JNK (quinase c-Jun N-terminal), também chamada de proteina quinase activada pela tensão (SAPK), é um membro da familia da quinase serina/treonina MAP. As cascatas de sinalização da quinase MAP são criticamente importantes na tradução dos sinais recebidos na membrana plasmática em alterações na fisiologia celular e na expressão genética. A JNK é activada em resposta a uma variedade de estimulos, incluindo citoquinas inflamatórias, factores de crescimento e tensões celulares tais como a luz UV. 4 ΡΕ1807431

As JNKs, conjuntamente com outras MAPKs, têm sido implicadas como tendo um papel na mediação da resposta celular ao cancro, agregação de plaquetas induzida pela trombina, perturbações por imunodeficiência, doenças auto-imunes, morte celular, alergias, osteoporose e doença cardiaca. Os alvos terapêuticos relacionados com a acti-vação das vias da JNK incluem a leucemia mielógena crónica (CML), artrite reumatóide, asma, osteoartrite, isquémia, cancro e doenças neurodegenerativas.

Têm sido identificados três genes distintos JNK1, JNK2, JNK3 e existem pelo menos dez diferentes isoformas de união das JNKs em células de mamíferos (Gupta et al., EMBO J., 15:2760-70 (1996)). Os membros da família JNK são activados por citoquinas pró-inflamatórias, tais como o factor de necrose tumoral cx (TNFa) e a interleucina-1 β (IL-Ιβ), bem como por tensão ambiental, incluindo a anisomicina, irradiação com UV, hipoxia, e choque osmótico (Minden et al., Biochemica et Biophysica Acta, 1333:F85-F104 (1997)). Estão divulgados compostos de pirrolotriazina úteis como inibidores da tirosina quinase no Pedido de Patente dos Estados Unidos com o Número de Série 09/573 829 apresentada a 18 de Maio de 2000, atribuída a Bristol-Myers Squibb. Adicionalmente, estão divulgados inibidores da quinase de pirrolotriazina na Patente WO 02/40486, atribuída a Bristol-Myers Squibb. Outros Pedidos de Patente divulgando inibidores da quinase p38 incluem: WO 03/032970, WO 03/033482, WO 03/032971, WO 03/032986, WO 03/032980, WO 03/032987, WO 03/033483, WO 03/033457 e WO 03/032972. A 5 ΡΕ1807431

Patente US 2004/082582 divulga pirrolo[2,1-f][1,2,4]tri-azinas que são inibidores da quinase p38 e c-Jun N-terminal. A Patente US 5 570 522 divulga pirrolo[l,2- d] [1,2,4]triazinas para tratar sintomas em perturbações cognitivas. Os compostos são diferentes dos da presente invenção.

SUMÁRIO São aqui proporcionados compostos, composições e métodos de tratamento, prevenção, ou para melhorar um ou mais sintomas de condições associadas à actividade da quinase p38 e/ou da quinase c-Jun N-terminal (JNK). Numa forma de realização, os compostos para utilização nas composições e métodos são pirrolotriazinas. Noutra forma de realização, os compostos são úteis como inibidores da quinase, incluindo as quinases ρ38α, ρ38β e/ou as quinases c-Jun N-terminal incluindo, mas não limitadas a, JNK1, JNK2 e JNK3. os compostos têm a

De acordo com a invenção, fórmula (V)

6 ΡΕ1807431 como definido na Reivindicação 1, que é aqui incorporada como referência. Estão divulqadas formas de realização adicionais da invenção nas Reivindicações 2 a 13 que são também aqui incorporadas como referência nesta descrição.

Também são divulgadas composições farmacêuticas contendo um composto com a fórmula V como definido acima em combinação com um veiculo farmaceuticamente aceitável. São divulgados compostos com a fórmula V para utilização em métodos de tratamento, prevenção ou melhoria de um ou mais sintomas de doença mediada pela citoquina num mamífero, pela administração a um paciente mamífero, com necessidade de tal tratamento, de um composto com a fórmula V. As doenças e perturbações tratadas, prevenidas, ou cujos sintomas sejam melhorados, incluem, mas não estão limitadas a, doenças inflamatórias crónicas, doença inflamatória do intestino, artrite reumatóide, psoríase, esclerose múltipla, choque por endotoxinas, osteoporose, doença de Alzheimer, e insuficiência cardíaca congestiva. São também divulgados métodos para prevenir ou inibir as respostas inflamatórias utilizando os compostos e composições aqui proporcionadas. São divulgados adicionalmente compostos com a fórmula V para utilização em métodos para inibir a actividade das quinases p38, incluindo as quinases p38a e ρ38β, e/ou as quinases c-Jun N-terminal, incluindo as JNK1, JKN2, e JNK3, utilizando os compostos e composições aqui proporcionadas. São proporcionados adicionalmente compostos com a fórmula V para utilização em métodos 7 ΡΕ1807431 de mediação da resposta da citoquina utilizando os compostos e composições aqui proporcionados. São divulgados artigos de preparação contendo material de embalagem, um composto ou composição aqui divulgados que são úteis para tratar, prevenir, ou melhorar um ou mais sintomas de doenças ou perturbações mediadas pela quinase p38 e/ou pela JNK, e um rótulo que indica que o composto ou composição é útil para tratar, prevenir, ou melhorar um ou mais sintomas de doenças ou perturbações mediadas pela quinase p38 e/ou pela JNK. DESCRIÇÃO DETALHADA A. Definições A menos que definido de outra forma, todos os termos técnicos e científicos aqui utilizados têm os mesmos significados como são vulgarmente entendidos por um perito na técnica à qual a(s) invenção(ões) pertence(m). Na eventualidade de haver uma pluralidade de definições para os termos aqui utilizados, prevalecem aqueles nesta secção. Onde seja feita referência a um URL ou outro tal identificador ou endereço, este subentende que tais identificadores podem mudar e a informação particular na internet pode ir e vir, mas informação equivalente pode ser encontrada procurando na internet. Referência a isso evidencia a disponibilidade e disseminação pública de tal informação.

Como aqui se utiliza, p38a refere-se à enzima 8 ΡΕ1807431 divulgada em Han et al. (1995) Biochim. Biophys, Acta 1265(2-3): 224-7. Como aqui se utiliza, ρ38β refere-se à enzima divulgada em Jiang et al. (1996) J. Biol. Chem. 271(30):17920-6. Como aqui se utiliza, ρ38γ refere-se à enzima divulgada em Li et al. (1996) Biochem. Biophys. Res. Commun. 228: 334-340. Como aqui se utiliza, ρ38δ refere-se à enzima divulgada em Wang et al. (1997) J. Biol. Chem. 272 (38) :23668-74.

Como aqui se utiliza, "JNK" refere-se à quinase c-Jun N-terminal, também designada proteina quinase acti-vada por tensão (SAPK). Ela é um membro da familia quinase serina/treonina MAP. Têm sido identificados três genes distintos, JNK1, JNK2, JNK3 e existem pelo menos dez diferentes isoformas de união das JNKs em células de mamíferos (Gupta et al. , EMBO J., 15:2760-70 (1996)). Os membros da familia JNK são activados por citoquinas pró-inflamatórias, tais como o factor de necrose tumoral cx (TNFa) e a inter-leucina-ΐβ (IL-Ιβ), bem como por tensão ambiental, incluindo a anisomicina, irradiação com UV, hipoxia, e choque osmótico (Minden et al., Biochemica et Biophysica Acta, 1333:F85-F104 (1997)). A presente divulgação também menciona derivados farmaceuticamente aceitáveis de um composto que incluem seus sais, ésteres, enol-éteres, enol-ésteres, acetais, cetais, ortoésteres, hemiacetais, hemicetais, ácidos, bases, solvatos, e hidratos. Tais derivados podem ser prontamente preparados pelos peritos na técnica utilizando 9 ΡΕ1807431 métodos conhecidos para tais derivatizações. Os compostos produzidos podem ser administrados a animais ou humanos sem efeitos tóxicos substanciais e são quer farmaceuticamente activos quer pró-fármacos. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, sais de amina, tais como mas não limitados a N,N'-dibenziletileno-diamina, cloroprocaina, colina, amoniaco, dietanolamina e outras hidroxialquilaminas, etilenodiamina, N-metilglu-camina, procaina, N-benzilfenetilamina, 1-para-clorobenzil-2-pirrolidin-l'-ilmetilbenzimidazole, dietilamina e outras alquilaminas, piperazina e tris(hidroximetil)aminometano; sais de metais alcalinos, tais como mas não limitados a, litio, potássio e sódio; sais de metais alcalino-terrosos, tais como mas não limitados a, bário, cálcio e magnésio; sais de metais de transição, tais como mas não limitados a, zinco; e sais de outros metais, tais como mas não limitados a, hidrogenofosfato de sódio e fosfato dissódico; e incluindo também, mas não limitado a, nitratos, boratos, metanossulfonatos, benzenossulfonatos, toluenossulfonatos, sais de ácidos minerais, tais como mas não limitados a, cloridratos, bromidratos, iodidratos e sulfatos; e sais de ácidos orgânicos, tais como mas não limitados a acetatos, trifluoroacetatos, oxalatos, benzoatos, salicilatos, malea-tos, lactatos, malatos, tartratos, citratos, ascorbatos, succinatos, butiratos, valeratos e fumaratos. Adicionalmente, podem ser formados zwitteriões ("sais internos"). Em certas formas de realização, as formas de sal dos compostos melhoram a taxa de dissociação dos compostos e a biodisponibilidade oral. Os ésteres farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, ésteres 10 ΡΕ1807431 alquilo, alcenilo, alcinilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, heteroaralquilo, cicloalquilo e heterociclilo de qrupos ácidos, incluindo, mas não limitados a, ácidos carboxí-licos, ácidos fosfóricos, ácidos fosfinicos, ácidos sulfó-nicos, ácidos sulfinicos e ácidos borónicos. Os enol-éteres farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, derivados com a fórmula C=C(OR) onde R é hidrogé-nio, alquilo, alcenilo, alcinilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, heteroaralquilo, cicloalquilo ou heterociclilo. Os enol-ésteres farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, derivados com a fórmula C=C(0C(0)R) onde R é hidrogénio, alquilo, alcenilo, alcinilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, heteroaralquilo, cicloalquilo ou heterociclilo. Os solvatos e hidratos farmaceuticamente aceitáveis são complexos de um composto com uma ou mais moléculas de solvente ou de água, ou com de 1 a cerca de 100, ou de 1 a cerca de 10, ou de uma a cerca de 2, 3 ou 4, moléculas de solvente ou de água. 0 termo "alquilo" refere-se a grupos hidrocar-boneto não substituídos de cadeia linear ou ramificada com de 1 a 20 átomos de carbono, numa forma de realização, de 1 a 7 átomos de carbono. A expressão "alquilo inferior" refere-se a grupos alquilo não substituídos com de 1 a 4 átomos de carbono. Quando é utilizado um índice com referência a um grupo alquilo ou outro, o índice refere-se ao número de átomos de carbono que o grupo pode conter. O termo "alquilo (Co_C4) " inclui uma ligação e grupos alquilo com de 1 a 4 átomos de carbono. 11 ΡΕ1807431 O termo "cicloalquilo" refere-se a um sistema em anel de hidrocarboneto cíclico não aromático saturado ou parcialmente não saturado contendo de 1 a 3 anéis e de 3 a 7 carbonos por anel que podem estar adicionalmente condensados com um anel carbocíclico C3-C7 não saturado. Grupos exemplares incluem ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo, ciclo-heptilo, ciclooctilo, ciclodecilo, ciclododecilo, e adamantilo. Um "cicloalquilo substituído" está substituído com um ou mais grupos alquilo ou alquilo substituído como descrito acima, ou um ou mais grupos descritos acima como substituintes alquilo. A expressão "cicloalquilo inferior" refere-se a um sistema em anel de hidrocarboneto cíclico não aromático saturado ou não saturado não substituído contendo de 3 a 5 átomos de carbono. "Alquileno" significa um radical hidrocarboneto divalente saturado linear com um a seis átomos de carbono ou um radical hidrocarboneto divalente saturado ramificado com três a seis átomos de carbono, por exemplo, metileno, etileno, propileno, 2-metilpropileno, pentileno, e semelhantes . "Alcenilo" significa um radical hidrocarboneto monovalente linear com dois a seis átomos de carbono ou um radical hidrocarboneto monovalente ramificado com três a seis átomos de carbono, contendo pelo menos uma ligação dupla, por exemplo, etenilo, propenilo, e semelhantes. "Alcenileno" significa um radical hidrocarboneto 12 ΡΕ1807431 divalente linear com dois a seis átomos de carbono ou um radical hidrocarboneto divalente ramificado com três a seis átomos de carbono, contendo pelo menos uma ligação dupla, por exemplo, etenileno, propenileno, e semelhantes. "Alcinilo" significa um radical hidrocarboneto monovalente linear com dois a seis átomos de carbono ou um radical hidrocarboneto divalente ramificado com três a seis átomos de carbono, contendo pelo menos uma ligação tripla, por exemplo, etinilo, propinilo, e semelhantes. "Alcinileno" significa um radical hidrocarboneto divalente linear com dois a seis átomos de carbono ou um radical hidrocarboneto monovalente ramificado com três a seis átomos de carbono, contendo pelo menos uma ligação tripla, por exemplo, etinileno, propinileno, e semelhantes. "Alcoxilo" significa um radical -0R onde R é alquilo como definido acima, por exemplo, metoxilo, etoxilo, propoxilo, 2-propoxilo, e semelhantes. "Acilo" significa um radical -C(0)R onde R é alquilo ou haloalquilo, por exemplo, acetilo, trifluoro-acetilo, e semelhantes. "Acilamino" significa um radical -NRC(0)R' onde R é hidrogénio ou alquilo, e R' é alquilo, heteroalquilo ou heterociclilalquilo opcionalmente substituído, por exemplo, acetilamino, 2-amino-2-metilpropionamida, e semelhantes. 13 ΡΕ1807431 "Halo" significa fluoreto, cloreto, brometo, ou iodo, geralmente fluoreto e cloreto. "Haloalquilo" significa alquilo substituído com um ou mais átomos iguais ou diferentes de halogéneos, por exemplo, -CH2C1, -CF3, -CH2CF3, -CH2CC13, e semelhantes. "Arilo" significa um radical hidrocarboneto aromático monociclico ou biciclico monovalente com 6 a 10 átomos no anel por exemplo, fenilo, 1-naftilo, 2-naftilo, e semelhantes. O anel arilo pode estar opcionalmente condensado com um anel saturado monociclico com 5, 6 ou 7 membros contendo opcionalmente 1 ou 2 heteroátomos seleccionados independentemente a partir de oxigénio, azoto ou enxofre, sendo os átomos restantes do anel de carbono onde um ou dois átomos de carbono estão substituídos opcionalmente por um grupo carbonilo. Os radicais arilo representativos com anéis condensados incluem, mas não estão limitados a, 2,3-di-hidrobenzo[1,4]dioxano, cromano, isocromano, 2,3-di-hidrobenzofurano, 1,3-di-hidroisobenzofurano, benzo[1,3]-dioxole, 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina, 1,2,3,4-tetra-hidroquinolina, 2,3-di-hidro-lH-indole, 2,3-di-hidro-lH-isoindole, benzimidazol-2-ona, 3H-benzoxazol-2-ona, e semelhantes . "Heteroarilo" significa um radical aromático monociclico ou biciclico monovalente com 5 a 10 átomos no anel contendo um, dois, ou três heteroátomos no anel 14 ΡΕ1807431 seleccionados a partir de N, O, ou S, sendo os restantes átomos do anel de carbono. O termo também inclui aqueles radicais onde um heteroátomo no anel tenha sido oxidado ou quaternizados, tais como, por exemplo, para formar um N-óxido ou um sal quaternário. Os exemplos representativos incluem, mas não estão limitados a, tienilo, benzotienilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, quino-linilo, quinoxalinilo, imidazolilo, furanilo, benzofura-nilo, tiazolilo, isoxazolilo, benzisoxazolilo, benzimidazo-lilo, triazolilo, pirazolilo, pirrolilo, indolilo, 2-piri-donilo, 4-piridonilo, N-alquil-2-piridonilo, pirazinonilo, piridazinonilo, pirimidinonilo, oxazolonilo, e os seus correspondentes N-óxidos, (por exemplo piridilo N-óxido, quinolinilo N-óxido), os seus sais quaternários e semelhantes . "Heterociclo" ou "heterociclilo" significa um radical não aromático cíclico com 3 a 8 átomos no anel nos quais um ou dois átomos do anel são heteroátomos seleccionados a partir de N, O, ou S(0)n, (onde n é um número inteiro de 0 a 2), sendo os restantes átomos do anel de carbono onde um ou dois átomos de carbono estão substituídos opcionalmente por um grupo carbonilo. O termo também inclui aqueles radicais onde um átomo de azoto do anel tenha sido oxidado ou quaternizado, tal como, por exemplo, para formar um N-óxido ou um sal quaternário. Os exemplos representativos incluem, mas não estão limitados a, tetra-hidropiranilo, tetra-hidrofuranilo, tetra-hidro-tiofenilo, piperidino, morfolino, piperazino, pirrolidino, 15 ΡΕ1807431 oxiranilo, dioxano, 1,3-dioxolanilo, 2,2-dimetil-l,3-dioxalanilo, sulfolanilo, 2-oxazolidonilo, 2-imidazoli-donilo, S,S-dioxotiomorfolino, e semelhantes. "Heterocicloamino" significa um grupo cíclico monovalente saturado com 4 a 8 átomos no anel, em que pelo menos um átomo do anel é N e contém opcionalmente um átomo do anel adicional seleccionado a partir de N ou 0, sendo os restantes átomos do anel de carbono. 0 termo inclui grupos tais como pirrolidino, piperidino, morfolino, piperazino e semelhantes. "Alquilo, alcenilo, alcinilo, alcoxilo ou ciclo-alquilo opcionalmente substituído" significa um grupo alquilo, alcenilo, alcinilo, alcoxilo ou cicloalquilo, como aqui definido, que está opcionalmente substituído independentemente com um, dois, três ou quatro ou mais substi-tuintes seleccionados a partir de alquilo, fenilo, benzilo, haloalquilo, heteroalquilo, halo, ciano, heterociclilo, acilo, -0R (onde R é hidrogénio ou alquilo) , -NRR' (onde R e R' são seleccionados independentemente a partir de hidrogénio, acilo, ou alquilo que está substituído opcionalmente com hidroxilo, alcoxilo, ciano, halo ou heterociclilo), -NHC0R (onde R é alquilo que está substituído opcionalmente com hidroxilo, alcoxilo, ciano, halo ou heterociclilo), -NRS(0)nR' (onde R é hidrogénio ou alquilo, n é um número inteiro de 0 a 2; e R' é hidrogénio, alquilo ou heteroalquilo, e está substituído opcionalmente com hidroxilo, alcoxilo, ciano, halo ou heterociclilo) , 16 ΡΕ1807431 -NRS (O) nNR'R" (onde R é hidrogénio ou alquilo, n é um número inteiro de 0 a 2; e R' e R" são independentemente hidrogénio, alquilo ou heteroalquilo e estão substituídos opcionalmente com hidroxilo, alcoxilo, ciano, halo ou heterociclilo), -S(0)nR (onde n é um número inteiro de 0 a 2; e R é hidrogénio, alquilo ou heteroalquilo e está substituído opcionalmente com hidroxilo, alcoxilo, ciano, halo ou heterociclilo), -S(0)nNRR' (onde n é um número inteiro de 0 a 2; e R e R' são independentemente hidrogénio, alquilo ou heteroalquilo e estão substituídos opcionalmente com hidroxilo, alcoxilo, ciano, halo ou heterociclilo), -COOR, -(alcileno)COOR (onde R é hidrogénio ou alquilo), -C0NR'R" ou - (alcileno)CONR'R" (onde R' e R" são independentemente hidrogénio ou alquilo, ou formam conjuntamente um anel heterociclilo com o átomo de azoto ao qual estão ligados). "Arilo, heteroarilo ou heterociclilo substituído opcionalmente" significa um anel arilo, heteroarilo ou heterociclilo como definido acima, que está opcionalmente substituído independentemente com um, dois, três, quatro ou mais substituintes seleccionados a partir de alquilo, fenilo, benzilo, haloalquilo, heteroalquilo, halo, ciano, acilo, -0R (onde R é hidrogénio ou alquilo), -NRR' (onde R e R' são independentemente seleccionados a partir de hidrogénio, alquilo ou acilo), -NHCOR (onde R é alquilo), -NRS(0)nR' (onde R é hidrogénio ou alquilo, n é um número inteiro de 0 a 2 e R' é hidrogénio, alquilo ou heteroalquilo), -NRS (0)nNR'R" (onde R é hidrogénio ou alquilo, n 17 ΡΕ1807431 é um número inteiro de 0 a 2 e R' e R" são independentemente hidrogénio, alquilo ou heteroalquilo), -S(0)nR (onde n é um número inteiro de 0 a 2 e R é hidrogénio, alquilo ou heteroalquilo), - S(0)nNRR' (onde n é um número inteiro de 0 a 2 e R e R' são independentemente hidrogénio, alquilo ou heteroalquilo), -C00R, -(alcileno)COOR (onde R é hidrogénio ou alquilo), -C0NR'R" ou -(alcileno)CONR'R" (onde R' e R" são independentemente hidrogénio ou alquilo). "Heteroalquilo" significa um radical alquilo como definido acima, contendo um, dois ou três substituintes seleccionados a partir de -NRaRb, -0RC em que Ra, Rb e Rc são, independentemente uns dos outros, hidrogénio, alquilo ou acilo, ou Ra e Rb formam conjuntamente um grupo hetero-cicloamino. Os exemplos representativos incluem, mas não estão limitados a, hidroximetilo, acetoximetilo, 3-hidroxi-propilo, 1,2-di-hidroxietilo, 2-metoxietilo, 2-aminoetilo, 2-dimetilaminoetilo, 2-acetilaminoetilo, 3-[pirrolidin-1-il]etilo e semelhantes. "Heteroalcenilo" significa um radical alcenilo como definido acima, contendo um ou dois substituintes seleccionados a partir de -NRaRb, -0RC ou -S(0)nRd em que Ra, Rb e Rc são, independentemente uns dos outros, hidrogénio ou alquilo, e Rd é alquilo ou -NRR' (onde R e R' são, independentemente um do outro, hidrogénio ou alquilo. Os exemplos representativos incluem, mas não estão limitados a, 3-hidroxi-l-propenilo, 3-aminoprop-l-enilo, 2-aminossul-foniletenilo, 2-metilsulfoniletenilo, e semelhantes. 18 ΡΕ1807431 "Heteroalcinilo" significa um radical alcinilo como definido acima, contendo um ou dois substituintes seleccionados a partir de -NRaRb, -0RC, -S(0)nRd ou -S(0)nNRR' (onde R e R' são, independentemente um do outro, hidrogénio ou alquilo) em que Ra, Rb e Rc são, independentemente uns dos outros, hidrogénio ou alquilo, e Rd é alquilo e n é um número inteiro de zero a dois. Os exemplos representativos incluem, mas não estão limitados a, 3-hidroxi-l-propinilo, 3-dimetilaminoprop-l-inilo e semelhantes . "Heteroalcoxilo" significa um radical -0R onde R é um grupo heteroalquilo como definido acima, por exemplo, 2- hidroxietoxilo, 3-hidroxipropoxilo, 2,3-di-hidroxipro-poxilo, 2-aminoetoxilo, e semelhantes. "Heteroalquilamino" significa um radical -NRaRb onde Ra é hidrogénio ou alquilo, e Rb é um grupo heteroalquilo como definido acima, por exemplo, 2-hidro-xietilamino, 3-dimetilaminopropilamino, e semelhantes. "Heterociclilalquilo substituído opcionalmente" significa um radical -RaRb onde Ra é um grupo alquileno, e Rb é um grupo heterociclilo substituído opcionalmente como definido acima, por exemplo, 2-(morfolin-4-il)etilo, 3- (piperidin-l-il)-2-metilpropilo, e semelhantes. "Heterociclilalcenilo substituído opcionalmente" 19 ΡΕ1807431 significa um radical -RaRb onde Ra é um grupo alcenileno e Rb é um grupo heterociclilo substituído opcionalmente como definido acima, por exemplo, 3-(morfolin-4-il)-prop-1-enilo, 3-(piperidin-l-il)-prop-l-enilo, 3-(4-metilpipera-zin-l-il)-prop-l-enilo, e semelhantes. "Heterociclilalcinilo substituído opcionalmente" significa um radical -RaRb onde Ra é um grupo alcinilo e Rb é um grupo heterociclilo substituído opcionalmente como definido acima, por exemplo, 3-(morfolin-4-il)-prop-1-inilo, 3-(piperidin-l-il)-prop-l-inilo, e semelhamtes. "Heterociclilalcoxilo substituído opcionalmente" significa um radical -0R onde R é um grupo heteroci-clilalquilo substituído opcionalmente como definido acima, por exemplo, 2-(morfolin-4-il)-etoxilo, 3-(piperazin-l-il)-propoxilo, 2-[2-oxopirrolidin-l-il]-etoxilo, e semelhantes. "Heterociclilalquilamino substituído opcionalmente" significa um radical -NRaRb onde Ra é hidrogénio ou alquilo e Rb é um grupo heterociclilalquilo substituído opcionalmente como definido acima, por exemplo, 2-(pir-rolidin-2-il)-etilamino, 3-(piperidin-l-il)-propilamino, e semelhantes. "Heteroaralquiloxilo substituído opcionalmente" significa um radical -0-Ra onde Ra é um radical hetero-aralquilo, por exemplo, 2-(piridin-3-il)-etoxilo, 2-[3(2H)-piridazon-l-il]-etoxilo e semelhantes. 20 ΡΕ1807431 "Opcional" ou "opcionalmente" significa que o evento ou circunstância subsequentemente descrito pode mas não necessita de ocorrer, e que a descrição inclui exemplos onde o evento ou circunstância ocorre e exemplos nos quais ele não ocorre. Por exemplo, "grupo arilo mono- ou di-subs-tituído opcionalmente com um grupo alquilo" significa que o alquilo pode mas não necessita de estar presente, e a descrição inclui situações onde o grupo arilo está mono- ou di-substituido com um grupo alquilo e situações onde o grupo heterociclo não está substituido com o grupo alquilo. "Grupo protector de amino" refere-se àqueles grupos orgânicos intencionados para protegerem átomos de azoto contra reacções indesejadas durante os procedimentos de síntese, por exemplo, benzilo, benziloxicarbonilo (CBZ), terc-butoxicarbonilo (Boc), trifluoroacetilo, e semelhantes .

Ao longo da especificação, os grupos ou substi-tuintes nela indicados podem ser escolhidos por um perito na técnica para proporcionarem espécies e compostos estáveis. Está também entendido que os grupos químicos, como aqui descritos, podem estar substituídos ou não substituídos, ser de cadeia linear ou ramificada, conforme o apropriado e desejado.

Estão contemplados todos os estereoisómeros dos compostos aqui proporcionados, quer na forma de mistura quer na forma pura ou substancialmente pura. A definição de compostos aqui proporcionada abrange todos os possíveis 21 ΡΕ1807431 estereoisómeros e as suas misturas. Ela abrange as formas racémicas e os isómeros ópticos isolados tendo a actividade especificada. As formas racémicas podem ser resolvidas por métodos fisicos, tais como, por exemplo, cristalização fraccionada, separação ou cristalização de derivados diastereoméricos ou separação por cromatografia em coluna quiral. Os isómeros ópticos individuais podem ser obtidos a partir dos racematos a partir dos métodos convencionais, tais como, por exemplo, formação de sais com um ácido opticamente activo seguida de cristalização.

Deverá ser adicionalmente entendido que os sol-vatos (por exemplo, hidratos) dos compostos aqui proporcionados estão também aqui contemplados. Os métodos de solvatação são geralmente conhecidos na técnica.

Como aqui se utiliza, tratamento significa qualquer maneira pela qual um ou mais dos sintomas de uma doença ou perturbação são melhorados ou, de outro modo, alterados beneficamente. Tratamento também abrange qualquer utilização farmacêutica dos compostos e composições aqui proporcionados, tais como a utilização para tratar doenças ou perturbações mediadas pela quinase p38 e/ou JNK, ou doenças ou perturbações nas quais a actividade da quinase p38, incluindo a actividade das quinases p38a e ρ38β, e/ou a actividade da JNK incluindo, mas não limitada a, JNK1, JNK2 e JNK3 está implicada.

Como aqui se utiliza, a melhoria dos sintomas de uma perturbação particular pela administração de um 22 ΡΕ1807431 composto ou composição farmacêutica particular refere-se a qualquer diminuição, tanto permanente como temporária, duradoura ou transitória que possa ser atribuída ou associada à administração da composição.

Como aqui se utiliza, IC50 refere-se a uma quantidade, concentração ou dosagem de um composto de teste particular que alcança uma inibição em 50% de uma resposta máxima, tal como a modulação da actividade da quinase p38cx e/ou da JKN, num ensaio que meça tal resposta.

Como aqui se utiliza, o termo "paciente" tem a intenção de incluir todos os indivíduos, incluindo a espécie dos mamíferos, tais como humanos, que sejam afectados pela mediação dos níveis da enzima p38 e/ou JNK. B. Compostos.

Os compostos da invenção têm a fórmula (V):

em que R1 é hidrogénio, alquilo ou halo; R2 é hidrogénio ou alquilo; 23 ΡΕ1807431 R3 é cloro, metilo, amino, carboxilo, etilaminocarbonilo, isopropilaminocarbonilo, ciclopropilaminocarbonilo, benzil-aminocarbonilo, morfolinocarbonilo, aminocarbonilo, metoxi-carbonilo, etoxicarbonilo, etoxicarbonilamino, isopropilo-xicarbonilamino, isobutiloxicarbonilamino, fenilaminocar-bonilo, oxazolilo, triazinilo ou etilaminocarbonilamino; R4 é seleccionado a partir do grupo consistindo de hidrogénio, halo, alquilo, alcoxilo, e hidroxilo; R6 é seleccionado a partir do grupo consistindo de hidrogénio, halo, alquilo, e alcoxilo; Q1 é alquilo, alcoxilo, aralquilamino, alquilamino ou cicloalquilamino; em que "alquilo" refere-se a grupos hidrocarboneto não substituídos de cadeia linear ou ramificada com 1 a 20 átomos de carbono, preferencialmente, de 1 a 7 átomos de carbono; "alcoxilo" significa um radical -OR onde R é alquilo como definido acima; "halo" significa fluoreto, cloreto, brometo, ou iodeto, preferencialmente fluoreto e cloreto; "cicloalquilo" refe-re-se a um sistema em anel de hidrocarboneto cíclico, não aromático, saturado ou parcialmente insaturado, contendo 1 a 3 anéis e 3 a 7 átomos de carbono por anel os quais podem estar adicionalmente condensados com um anel carbocí-clico(C3-C7) não saturado; e 24 ΡΕ1807431 "arilo" significa um radical hidrocarboneto monociclico ou biciclico aromático monovalente com 6 a 10 átomos no anel, em que o dito anel arilo pode estar opcionalmente condensado com um anel saturado monociclico com 5, 6 ou 7 membros contendo opcionalmente 1 ou 2 heteroátomos seleccionados independentemente a partir de oxigénio, azoto ou enxofre, sendo os restantes átomos do anel de carbono onde um ou dois átomos de carbono estão substituídos opcionalmente com um grupo carbonilo.

Em certos compostos aqui divulgados, R1 é hidrogénio ou metilo.

Em certas formas de realização, R2 é hidrogénio. R3 é cloro, metilo, amino, carboxilo, etilaminocarbonilo, isopropilaminocarbonilo, ciclopropilaminocarbonilo, benzil-aminocarbonilo, morfolinocarbonilo, aminocarbonilo, metoxi-carbonilo, etoxicarbonilo, etoxicarbonilamino, isopropilo-xicarbonilamino, isobutiloxicarbonilamino, fenilaminocar-bonilo, oxazolilo, triazinilo e etilaminocarbonilamino.

Em certos compostos aqui divulgados, R4 é alquilo ou alcoxilo. Em certas formas de realização, R4 é metilo ou metoxilo.

Noutras formas de realização, R4 é metilo. R5 é alcoxicarbonilo, aralquilaminocarbonilo, alquilaminocarbo-nilo e cicloalquilaminocarbonilo. 25 ΡΕ1807431

Em certos compostos aqui divulgados, R5 é etoxicarbonilo, benzilaminocarbonilo, metilaminocarbonilo e ciclopropilaminocarbonilo.

Em certos compostos aqui divulgados, R6 é hidrogénio.

Em certos compostos aqui divulgados, os compostos aqui proporcionados têm a fórmula:

em que as variáveis são como aqui definido em qualquer outra parte.

Em certas formas de realização da invenção, os compostos aqui proporcionados têm a fórmula:

as outras variáveis são como descrito na Reivindicação 2. 26 ΡΕ1807431

Em certas formas de realização da invenção, os compostos aqui proporcionados têm a fórmula:

as outras variáveis são como descrito na Reivindicação 3.

Em certas formas de realização da invenção, os compostos aqui proporcionados têm a fórmula:

em que Q2 é alcoxilo, ou alquilaminocarbonilo e as outras variáveis são como descrito na Reivindicação 4.

Em certas formas de realização da invenção, os compostos aqui proporcionados têm a fórmula: ΡΕ1807431 27 Ο

em que Q3 é hidrogénio, alquilo, cicloalquilo, aralquilo e arilo; e as outras variáveis são como descrito na Reivindicação 5.

Em certas formas de realização da invenção, o composto proporcionado é seleccionado a partir de:

ΡΕ1807431 28

8 .ΡΕ1807431 29

10 . Ο

11 . 12 . ΡΕ1807431 30

ΡΕ1807431 31

ΡΕ1807431 32

22 .

23.

24 . 33 ΡΕ1807431 e

Em certas formas de realização da invenção, o composto proporcionado é seleccionado a partir de: e

34 ΡΕ1807431

C. Preparação dos Compostos.

Os compostos aqui proporcionados podem ser preparados de acordo com os seguintes esquemas e com a sabedoria de um perito na técnica. Um método exemplificativo útil para a preparação de compostos aqui divulgados ou de acordo com a invenção está ilustrado no Esquema 1.

As pirrolo[1,2-d][1,2,4]triazin-4-ilaminas apropriadamente substituídas do tipo (I) , aqui proporcionadas, podem ser preparadas por vários meios, por exemplo como se mostra no Esquema 1, por reacção de uma amina apropriadamente substituída com um reagente tal como l,l'-tiocar-bonil-di-2(1H)-piridona, 1,1'-tiocarbonildiimidazole ou tiofosgénio num solvente tal como diclorometano ou dioxano proporciona o isotiocianato. 0 tratamento do isotiocianato com uma (lH-pirrol-2-ilmetileno)-hidrazina apropriadamente substituída proporciona a tioureia que é metilada e ciclizada a temperatura elevada para dar o composto I, sob o qual caem os compostos com a fórmula V de acordo com a invenção. ΡΕ1807431 35

Esquema 1

Π3'Λ>^'ΝΗ2 CHjCIj, RT ft3'

Η NCS THF R1

Mel, Base m,

# M

Aquecimento 196 °e

As referências de métodos adicionais de sintese são como se segue: 1) Reacções de formação de Heterociclos: Bioorg. Med. Chem. Letters 12: 3125-3128 (2002). A preparação de vários tioisocianatos, a partir da correspondente anilina pode ser prontamente alcançada por via do procedimento seguinte. A anilina é tratada com 1,1'-tiocarbonil-di-2(1H)-piridona em CH2CI2 durante 1-10 horas. Tipicamente, forma-se um precipitado, que é recolhido por filtração para dar o produto. Alternativamente, o solvente é removido in vacuo e o material resultante é purificado pelos muitos métodos conhecidos dos peritos na técnica. Da mesma forma, a preparação descrita no Exemplo IA proporciona outros meios úteis para a preparação do tioisocianato. 36 ΡΕ1807431 D. Formulação de composições farmacêuticas.

As composições farmacêuticas aqui divulgadas ou da invenção de acordo com a Reivindicação 10 contêm quantidades terapeuticamente eficazes de um ou mais dos compostos aqui divulgados ou de acordo com as Reivindicações de 1 a 6 que são úteis na prevenção, tratamento, ou melhoria de um ou mais dos sintomas das condições associadas à quinase p38 e/ou associadas à JNK, incluindo condições mediadas pelos TNF-α, IL-1, e/ou IL-8. Tais condições incluem, mas não estão limitadas a, doenças inflamatórias, doenças auto-imunes, perturbações destrutivas dos ossos, perturbações proliferativas, perturbações angiogé-nicas, doenças infecciosas, doenças neurodegenerativas, e doenças virais.

Em certas formas de realização desta divulgação ou da invenção, a doença é seleccionada a partir de pancreatite (aguda ou crónica), asma, alergias, sindrome de insuficiência respiratória no adulto, doença pulmonar obstrutiva crónica, glomerulonefrite, artrite reumatóide, lúpus sistémico eritematoso, escleroderma, tiroidite crónica, doença de Grave, gastrite auto-imune, diabetes, anemia hemolitica autoi-imune, neutropenia auto-imune, trombo-citopenia, dermatite atópica, hepatite crónica activa, miastenia grave, esclerose múltipla, doença inflamatória do intestino, colite ulcerosa, doença de Crohn, psoriase, doença do enxerto contra o hospedeiro, reacção inflamatória 37 ΡΕ1807431 induzida por endotoxina, tuberculose, aterosclerose, degeneração muscular, caquexia, artrite psoriática, sindrome de Reiter, gota, artrite traumática, artrite na rubéola, sinovite aguda, doença das células β pancreáticas; doenças caracterizadas por infiltração massiva de neutrófilos; espondilite reumatóide, artrite gotosa e outras condições artríticas, malária cerebral, doença pulmonar inflamatória crónica, silicose, sarcoidose pulmonar, doença de reabsorção óssea, rejeições de aloenxertos, febre e mialgias devidas a infecção, caquexia secundária a infecção, formação mielóide, formação de tecidos cicatriciais, colite ulcero-sa, pirexia, gripe, osteoporose, osteoartrite e perturbação nos ossos relacionada com múltiplos mielomas, leucemia mielógena aguda, leucemia mielógena crónica, melanoma metastático, sarcoma de Kaposi, mieloma múltiplo, sépsia, choque séptico, e Shigelose; doença de Alzheimer, doença de Parkinson, isquemias cerebrais ou doença neurodegenerativa causada por lesão traumática; perturbações angiogénicas incluindo tumores sólidos, neovascularização ocular, e hemangiomas infantis; doenças virais incluindo a hepatite infecciosa aguda (incluindo a hepatite A, hepatite B e hepatite C) , infecção pelo VIH e retinite por CMV, SIDA, SRAG, CRS ou malignidade, e herpes; acidente vascular cerebral, isquemia do miocárdio, isquemia em ataques cardíacos, hipoxia nos órgãos, hiperplasia vascular, lesão por reperfusão cardíaca e renal, trombose, hipertrofia cardíaca, agregação plaquetária induzida pela trombina, endotoxemia e/ou sindrome de choque tóxico, e condições associadas à prostaglandina endoperoxidase sintetase-2. 38 ΡΕ1807431

Adicionalmente, os inibidores da p38 e/ou JNK aqui proporcionados inibem a expressão de proteínas pró-inflamatórias induziveis tais como a prostaglandina endo-peroxide sintetase-2 (PGHS-2), também referida como ciclo-oxigenase-2 (COX-2). Concordantemente, condições adicionais associadas à p38 e/ou JNK incluem edema, analgesia, febre e dor, tais como a dor neuromuscular, dor de cabeça, dor causada pelo cancro, dor dentária e dor na artrite. Os compostos aqui proporcionados também podem ser utilizados para tratar infecções virais veterinárias, tais como as infecções por lentivirus, incluindo, mas não limitadas a, virus da anemia infecciosa equina; ou infecções por retrovirus, incluindo o virus da imunodeficiência felina, o virus da imunodeficiência bovina, e o virus da imunodefici-ência canina. Quando são aqui utilizados os termos "condição associada à p38", "doença ou perturbação associada à p38", "condição associada à JNK" ou "doença ou perturbação associada à JNK", cada um tem a intenção de abranger todas as condições identificadas acima como se repetidas na sua extensão, bem como qualquer outra condição que seja afectada pela actividade da quinase p38 e/ou JNK.

As composições contêm um ou mais compostos aqui divulgados ou da invenção de acordo com as Reivindicações de 1 a 6. Os compostos são preferencialmente formulados em preparações farmacêuticas adequadas tais como soluções, suspensões, comprimidos, comprimidos dispersáveis, pilulas, cápsulas, pós, formulações para libertação prolongada ou 39 ΡΕ1807431 elixires, para administração oral ou em soluções ou suspensões estéreis para administração parentérica, bem como na forma de preparação para adesivo transdérmico e inaladores de pó seco. Tipicamente, os compostos descritos acima são formulados em composições farmacêuticas utilizando técnicas e procedimentos bem conhecidos na técnica (veja-se, por exemplo, Ansel Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, Quarta Edição 1985, 126). Nas composições, as concentrações eficazes de um ou mais compostos ou derivados farmaceuticamente aceitáveis é(são) misturadas com um excipiente ou veiculo farmaceuticamente aceitável. Os compostos podem ser derivatizados nos seus correspondentes sais, ésteres, enol-éteres ou ésteres, ácidos, bases, solvatos, hidratos ou pró-fármacos antes da formulação, como descrito acima. As concentrações dos compostos nas composições são eficazes para fornecerem uma quantidade, após administração, que trate, previna, ou melhore um ou mais dos sintomas ou condições associados com a quinase p-38 e/ou JNK, incluindo condições mediadas pelo TNF-a, IL-1, e/ou IL-8. Tais condições incluem, mas não estão limitadas a, cancro, reestenose coronária, osteoporose e sindromes caracterizados por inflamação crónica e/ou auto-imunidade .

Tipicamente, as composições são formuladas para administração na forma de dosagem única. Para formular uma composição, a fracção do peso do composto é dissolvida, suspensa, dispersada ou de qualquer outra forma misturada num veiculo seleccionado numa concentração eficaz de forma 40 ΡΕ1807431 que a condição tratada seja aliviada ou melhorada. Os excipientes ou veiculos farmacêuticos adequados para administração dos compostos aqui proporcionados incluem quaisquer de tais veiculos conhecidos dos peritos na técnica como sendo adequados para o particular modo de administração .

Adicionalmente, os compostos podem ser formulados como o único ingrediente farmaceuticamente activo na composição ou pode estar combinado com outros ingredientes activos. As suspensões lipossomais, incluindo lipossomas dirigidas a tecidos, tais como lipossomas dirigidas a tumores, podem também ser adequadas como veiculos farmaceuticamente aceitáveis. Estas podem ser preparadas de acordo com métodos conhecidos dos peritos na técnica. Por exemplo, as formulações em lipossomas podem ser preparadas como descrito na Patente dos Estados Unidos N.° 4 522 811. De forma breve, as lipossomas tais como as vesículas multila-melares (MLV's) podem ser formadas secando fosfatidilcolina do ovo e fosfatidilserina do cérebro (razão molar de 7:3) no interior de um balão. Uma solução de um composto aqui proporcionado em solução tampão salina de fosfato sem catiões divalentes (PBS) é-lhe adicionada e o balão é sacudido até que a película de lípido seja dispersada. As vesículas resultantes são lavadas para se remover o composto não encapsulado, granulada por centrifugação, e então ressuspensa em PBS. 0 composto activo é incluído no veículo farmaceu- 41 ΡΕ1807431 ticamente aceitável numa quantidade suficiente para exercer um efeito terapeuticamente útil na ausência de efeitos secundários indesejados no paciente tratado. A concentração terapeuticamente eficaz pode ser determinada empiricamente testando o composto em sistemas in vitro e in vivo aqui descritos e então extrapolados a partir dai para dosagens para humanos. A concentração de composto activo na composição farmacêutica dependerá das taxas de absorção, inactivação e de excreção do composto activo, das caracteristicas físico-químicas do composto, do plano de dosagem, e da quantidade administrada bem como de outros factores conhecidos dos peritos na técnica. Por exemplo, a quantidade que é fornecida é suficiente para melhorar um ou mais dos sintomas de doenças ou condições associadas à quinase p-38 e/ou JNK, incluindo as condições mediadas pelo TNF-α, IL-1, e/ou IL-8, como aqui descrito.

Tipicamente, uma dosagem terapeuticamente eficaz deverá produzir uma concentração no soro em ingrediente activo de desde cerca de 0,1 ng/mL a cerca de 50-100 pg/mL. As composições farmacêuticas deverão proporcionar tipicamente uma dosagem de desde cerca de 0,001 mg a cerca de 2000 mg de composto por quilograma de peso corporal por dia. As formas de dosagem unitária farmacêuticas são preparadas para proporcionarem desde cerca de 1 mg a cerca de 1000 mg e numa forma de realização, desde cerca de 10 mg a cerca de 500 mg do ingrediente activo essencial ou uma 42 ΡΕ1807431 combinação de ingredientes essenciais por forma de dosagem unitária. 0 ingrediente activo pode ser administrado de uma vez, ou pode ser dividido em num número de doses mais pequenas a serem administradas a intervalos de tempo. Está entendido que a dosagem precisa e a duração do tratamento é uma função da doença a ser tratada e pode ser determinada empiricamente utilizando protocolos de teste conhecidos ou por extrapolação a partir de dados de testes in vivo ou in vitro. É para ser referido que os valores das concentrações e das dosagens podem também variar com a gravidade da condição a ser aliviada. É para ser ainda entendido que para qualquer indivíduo particular, os regimes de dosagem específicos deverão ser ajustados ao longo do tempo de acordo com a necessidade do indivíduo e do julgamento profissional da pessoa que administra ou supervisiona a administração das composições, e que as gamas de concentrações aqui realçadas são apenas exempli-ficativas e não têm a intenção de limitar o objectivo ou prática das composições reivindicadas.

Os derivados farmaceuticamente aceitáveis incluem sais, hidratos e solvatos. 0 derivado é seleccionado de forma que as suas propriedades farmacocinéticas sejam superiores às do correspondente composto neutro.

Desta forma, as concentrações ou quantidades reais de um ou mais dos compostos aqui descritos ou dos 43 ΡΕ1807431 seus derivados farmaceuticamente aceitáveis são misturadas com um excipiente ou veiculo farmaceuticamente adequado para administração sistémica, tópica ou local para formar composições farmacêuticas. Os compostos são incluídos numa quantidade eficaz para melhorar um ou mais sintomas de, ou para tratar ou prevenir, doenças ou perturbações associadas à p-38 e/ou condições associadas à JNK incluindo, mas não limitadas a, doenças inflamatórias, doenças auto-imunes, perturbações destrutivas dos ossos, perturbações prolifera-tivas, perturbações anqiogénicas, doenças infecciosas, doenças neurodegenerativas, e doenças virais como aqui descrito. A concentração de composto activo na composição dependerá das taxas de absorção, inactivação e excreção do composto activo, do plano de dosagem, da quantidade administrada, da formulação particular bem como de outros factores conhecidos dos peritos na técnica.

As composições estão intencionadas para serem administradas por uma via adequada, incluindo oralmente, parentericamente, rectalmente, topicamente e localmente. Para a administração oral, são presentemente preferidas as cápsulas e os comprimidos. As composições estão na forma líquida, semi-líquida ou sólida e são formuladas de uma maneira adequada para cada via de administração. Numa forma de realização, os modos de administração incluem os modos de administração parentérica e oral. A administração oral é presentemente a mais preferida.

As soluções ou suspensões utilizadas para apli- 44 ΡΕ1807431 cação parentérica, intradérmica, subcutânea ou tópica podem incluir qualquer dos seguintes componentes: um diluente estéril, tal como água para injecção, solução salina, óleo fixado, polietilenoglicol, glicerina, propilenoglicol, dometilacetamida e outros solventes sintéticos; agentes antimicrobianos, tais como álcool benzilico e metilpara-benos; antioxidantes, tais como ácido ascórbico e bissul-fito de sódio; agentes de quelação, tais como o ácido etilenodiaminotetracético (EDTA); tampões, tais como acetatos, citratos e fosfatos; e agentes para o ajuste da tonicidade tais como o cloreto de sódio ou dextrose. As preparações parentéricas podem ser embaladas em ampolas, seringas descartáveis ou frascos para dose única ou múltipla, fabricados de vidro, plástico ou de outro material adequado.

Em casos nos quais os compostos apresentem uma solubilidade insuficiente, podem ser empregues métodos para solubilizar compostos. Tais métodos são conhecidos dos peritos na técnica, e incluem, mas não estão limitados a, utilização de solventes, tais como dimetilsulfóxido (DMSO), dimetilacetamida, utilizando surfactantes, tais como TWEEN®, ou a dissolução em bicarbonato de sódio aquoso.

Após a mistura ou adição do(s) composto(s), a mistura resultante pode ser uma solução, suspensão, emulsão ou semelhantes. A forma da mistura resultante depende de um número de factores, incluindo o modo de administração intencionado e a solubilidade do composto no excipiente ou 45 ΡΕ1807431 veículo seleccionado. A concentração eficaz é suficiente para melhorar os sintomas da doença, perturbação ou condição tratada e pode ser determinada empiricamente.

As composições farmacêuticas são proporcionadas para administração a humanos e animais em formas de dosagem unitária, tais como comprimidos, cápsulas, pílulas, pós, grânulos, soluções ou suspensões parentéricas, e soluções ou suspensões orais, e emulsões óleo-água contendo quantidades adequadas dos compostos ou seus derivados farmaceu-ticamente aceitáveis. Os compostos farmacêuticos terapeuti-camente activos e seus derivados são formulados e administrados tipicamente em formas de dosagem unitária ou em formas de dosagem múltipla. As formas de dosagem unitária, como aqui se utiliza, referem-se a unidades fisicamente discretas adequadas para indivíduos humanos ou animais e acondicionadas individualmente como é conhecido na técnica. Cada unidade unitária contém uma quantidade pré-determinada do composto terapeuticamente activo suficiente para produzir o desejado efeito terapêutico, em associação com o excipiente, veículo ou diluente farmaceuticamente requerido. Os exemplos de formas de dosagem unitária incluem ampolas e seringas e comprimidos ou cápsulas embalados individualmente. As formas de dosagem unitária podem ser administradas em fracções ou suas múltiplas. Uma forma de dose múltipla é uma pluralidade de formas de dose unitária idênticas embaladas numa única embalagem para serem administradas na forma de dosagens unitárias separadas. Os exemplos de formas de dose múltipla incluem frascos, garra- 46 ΡΕ1807431 fas de comprimidos ou cápsulas ou garrafas de pintos ou galões. Por isso, uma forma de dose múltipla é um múltiplo de doses unitárias que não estão separadas na embalagem. A composição pode conter conjuntamente com o ingrediente activo: um diluente tal como lactose, sacarose, fosfato dicálcico, ou carboximetilcelulose; um lubrificante, tal como estearato de magnésio, estearato de cálcio e talco; e um aglutinante tal como amido, gomas naturais, tais como goma de gelatina de acácia, glucose, melaço, polivinilpirrolidina, celuloses e seus derivados, povidona, crospovidonas e outros aglutinantes que tais conhecidos dos peritos na técnica. As composições liquidas farmaceuti-camente administráveis podem, por exemplo, ser preparadas dissolvendo, dispersando, ou de outra qualquer forma misturando um composto activo como definido acima e adjuvantes farmacêuticos opcionais num veículo, tal como, por exemplo, água, soro, dextrose aquosa, glicerol, glicóis, etanol, e semelhantes, para assim formar uma solução ou suspensão. Se desejado, a composição farmacêutica a ser administrada pode também conter quantidades menores de substâncias auxiliares não tóxicas tais como agentes humectantes, agentes emulsionantes, ou agentes solubilizantes, agentes tampão do pH e semelhantes, por exemplo, acetato, citrato de sódio, derivados de ciclodextrina, monolaurato de sorbitano, trietanolamina, acetato de sódio, oleato de trietanolamina, e outros agentes que tais. Os métodos reais de preparação de tais formas de dosagem são conhecidos, ou serão evidentes, para os peritos nesta técnica; por exemplo, veja-se 47 ΡΕ1807431

Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 15a Edição, 1975. A composição ou formulação a ser administrada conterá, em qualquer caso, uma porção do composto activo numa quantidade suficiente para aliviar os sintomas do individuo tratado. Podem ser preparadas formas de dosagem ou composições contendo o ingrediente activo na gama de 0,005% a 100% completando a totalidade a partir de veiculo não tóxico. Para administração oral, é preparada uma composição não tóxica farma-ceuticamente aceitável incorporando qualquer um dos exci-pientes normalmente empregues, tais como manitol, lactose, amido, estearato de magnésio, talco, derivados de celulose, croscarmelose sódica, glucose, sacarose, carbonato de magnésio ou sacarina sódica de qualidade farmacêutica. Tais composições incluem soluções, suspensões, comprimidos, cápsulas, pós e formulações de libertação prolongada, tais como, mas não limitadas a, implantes e sistemas de libertação microencapsulados, e polímeros biocompatíveis, biodegradáveis, tais como colagénio, vinilacetato de eti-leno, polianidridos, ácido poliglicólico, poliortoésteres, ácido poliláctico e outros. Os métodos de preparação destas composições são conhecidos dos peritos da técnica. As composições contempladas podem conter 0,001%-100% de ingrediente activo, em certas formas de realização, 0,1%-85%, tipicamente 75-95%.

Os compostos activos ou derivados farmaceutica-mente aceitáveis podem ser preparados com veículos que protejam o composto contra a eliminação rápida pelo 48 ΡΕ1807431 organismo, tais como formulações de libertação retardada ou revestimentos.

As composições podem incluir outros compostos activos para se obterem combinações desejadas de propriedades. Os compostos aqui proporcionados, ou os seus derivados farmaceuticamente aceitáveis como aqui descrito, podem também ser administrados vantajosamente para propósitos terapêuticos ou profilácticos conjuntamente com outro agente farmacológico conhecido na técnica geral como

tendo valor no tratamento uma ou mais das doenças ou condições médicas referidas aqui acima, tais como doenças ou perturbações associadas à quinase p-38 e ou JNK incluindo, mas não limitadas a, doenças inflamatórias, doenças auto-imunes, perturbações destrutivas dos ossos, perturbações proliferativas, perturbações angiogénicas, doenças infecciosas, doenças neurodegenerativas, e doenças virais. É para ser entendido que tal terapia de combinação constitui um aspecto adicional das composições e métodos de tratamento aqui proporcionados. 1. Composições para administração oral.

As formas de dosagem farmacêutica são tanto sólidas, em gel ou liquidas. As formas de dosagem sólidas são comprimidos, cápsulas, grânulos, e pós a granel. Os tipos de comprimidos orais incluem comprimidos e pastilhas comprimidas mastigáveis que podem ser revestidas enteri-camente, revestidas com açúcar ou revestidas com película. 49 ΡΕ1807431

As cápsulas podem ser cápsulas de gelatina dura ou mole, enquanto que os grânulos e pós podem ser proporcionados na forma não efervescente ou efervescente com a combinação de outros ingredientes conhecidos dos peritos na técnica.

Em certas formas de realização, as formulações são formas de dosagem sólidas, preferencialmente cápsulas ou comprimidos. Os comprimidos, pílulas, cápsulas, trocis-cos e semelhantes podem conter quaisquer dos seguintes ingredientes, ou compostos de natureza similar: um agre-gante; um diluente; um agente desagregante; um lubrificante; um deslizante; um agente adoçante; e um agente aromatizante.

Os exemplos de agregantes incluem celulose micro-cristalina, goma adragante, solução de glucose, mucilagem de acácia, solução de gelatina, sacarose e pasta de amido. Os lubrificantes incluem talco, amido, estearato de magnésio ou de cálcio, licopódio e ácido esteárico. Os diluentes incluem, por exemplo, lactose, sacarose, amido, caulino, sal, manitol e fosfato dicálcico. Os deslizantes incluem, mas não estão limitados a, dióxido de silício coloidal. Os agentes desagregantes incluem croscarmelose sódica, glicolato de amido sódico, ácido algínico, amido de milho, amido de batata, bentonite, metilcelulose, ágar-ágar e carboximetilcelulose. Os agentes de corantes incluem, por exemplo, qualquer dos corantes FD e C solúveis em água certificados e aprovados, suas misturas, e corantes FD e C insolúveis em água suspensos em hidrato de alumina. Os 50 ΡΕ1807431 agentes adoçantes incluem sacarose, lactose, manitol e agentes adoçantes artificiais tais como sacarina, e qualquer número de aromas liofilizados. Os agentes aromatizantes incluem aromas naturais extraídos a partir de plantas tais como frutos e misturas sintéticas de compostos que produzem uma sensação agradável, tais como, mas não limitados a hortelã-pimenta e salicilato de metilo. Os agentes humectantes incluem monoestearato de propileno-glicol, mono-oleato de sorbitano, monolaurato de dietileno-glicol e éter laurílico de polioxietileno. Os revestimentos eméticos incluem ácidos grodos, gorduras, ceras, goma laca, goma laca amoniacal e acetatoftalatos de celulose. As películas de revestimento incluem hidroxietilcelulose, carboximetilcelulose sódica, polietilenoglicol 4000 e acetatoftalato de celulose.

Se é desejada a administração oral, o composto poderá ser proporcionado numa composição que o proteja do ambiente acídico do estômago. Por exemplo, a composição pode ser formulada num revestimento entérico que mantenha a sua integridade no estômago e liberte o composto activo no intestino. A composição pode também ser formulada em combinação com um antiácido ou outro ingrediente que tal.

Quando a forma de dosagem unitária é uma cápsula, esta pode conter, em adição a material do tipo acima, um veículo líquido tal como um óleo gordo. Adicionalmente, as formas de dosagem unitárias podem conter vários outros materiais que modifiquem a forma física da forma da dosagem 51 ΡΕ1807431 unitária, por exemplo, revestimentos de açúcar e outros agentes entéricos. Os compostos podem também ser administrados, como um componente de um elixir, suspensão, xarope, bolacha, nebulizado, goma de mascar ou semelhantes. Um xarope pode conter, em adição aos compostos activos, sacarose como agente adoçante e certos conservantes, pigmentos e corantes e aromas.

Os materiais activos podem também ser misturados com outros materiais activos que não prejudiquem a acção desejada, ou com materiais que suplementem a acção desejada, tais como antiácidos, bloqueadores H2, e diuréticos. 0 ingrediente activo é um composto ou seu derivado farmaceuticamente aceitável como aqui descrito. Podem ser incluidas concentrações mais elevadas, até cerca de 98% em peso, do ingrediente activo.

Os veiculos farmaceuticamente aceitáveis incluídos em comprimidos são aglutinantes, lubrificantes, diluen-tes, agentes desagregantes, agentes de coloração, agentes aromatizantes, e agentes humectantes. Os comprimidos revestidos entericamente, devido ao seu revestimento entérico, resistem à acção do ácido do estômago e dissolvem-se ou desagregam-se nos intestinos neutros ou alcalinos. Os comprimidos revestidos com açúcar são comprimidos aos quais foram aplicadas várias camadas de substâncias farmaceuticamente aceitáveis. Os comprimidos revestidos com películas são comprimidos que tenham sido revestidos com um polimero ou outro revestimento adequado. Os comprimidos multi- 52 ΡΕ1807431 comprimidos fabricados com mais de um ciclo de compressão utilizando as substâncias farmaceuticamente aceitáveis previamente mencionadas. Os agentes de coloração podem também ser utilizados nas formas de dosagem acima. Os agentes aromatizantes e adoçantes são utilizados em comprimidos, e comprimidos revestidos com açúcar, multi-comprimidos e mastigáveis. Os agentes aromatizantes e adoçantes são especialmente úteis na formação de comprimidos mastigáveis e pastilhas.

As formas de dosagem liquidas orais incluem soluções, emulsões, suspensões, soluções aquosas e/ou suspensões reconstituídas a partir de grânulos não efervescentes e preparações efervescentes reconstituídas a partir de grânulos efervescentes. As soluções aquosas incluem, por exemplo, elixires e xaropes. As emulsões são tanto de óleo em água como de água em óleo.

Os elixires são preparações límpidas, adoçadas hidroalcoólicas. Os veículos farmaceuticamente aceitáveis utilizados em elixires incluem solventes. Os xaropes são soluções aquosas concentradas de um açúcar, por exemplo, sacarose, e podem conter um conservante. Uma emulsão é um sistema de duas fases no qual um líquido é dispersado na forma de pequenas gotas num outro líquido. Os veículos farmaceuticamente aceitáveis utilizados em emulsões são líquidos não aquosos, agentes emulsionantes e conservantes. As suspensões utilizam agentes de suspensão e conservantes farmaceuticamente aceitáveis. As substâncias farmaceuti- 53 ΡΕ1807431 camente aceitáveis utilizadas em grânulos não efervescentes, para serem reconstituídos numa forma de dosagem oral liquida, incluem diluentes, agentes adoçantes e humectantes. As substâncias farmaceuticamente aceitáveis utilizadas em grânulos efervescentes, para serem reconstituídos numa forma de dosagem oral liquida, incluem ácidos orgânicos e uma fonte de dióxido de carbono. Os agentes de coloração e aromatizantes são utilizados em todas as formas de dosagem acima.

Os solventes incluem glicerina, sorbitol, álcool etilico e xarope. Os exemplos de conservantes incluem glicerina, metil e propilparabeno, ácido benzóico, benzoato de sódio e álcool. Os exemplos de líquidos não aquosos utilizados em emulsões incluem óleo mineral e óleo de semente de algodão. Os exemplos de agentes emulsionantes incluem gelatina, acácia, goma adragante, bentonite, e surfactantes tais como mono-oleato de polioxietileno. Os agentes de suspensão incluem carboximetilcelulose sódica, pectina, goma adragante, Veegum e acácia. Os diluentes incluem lactose e sacarose. Os agentes adoçantes incluem sacarose, xaropes, glicerina e agentes adoçantes artificiais tais como sacarina. Os agentes humectantes incluem monoestearato de propilenoglicol, mono-oleato de sorbitano, monolaurato de dietilenoglicol e éter laurílico de polioxietileno. Os ácidos orgânicos incluem ácido cítrico e tartárico. As fontes de dióxido de carbono incluem bicarbonato de sódio e carbonato de sódio. Os agentes de coloração incluem qualquer um dos corantes FD e C aprovados 54 ΡΕ1807431 e certificados solúveis em água, e suas misturas. Os agentes aromatizantes incluem aromas naturais extraídos a partir de plantas tais como frutos, e misturas sintéticas de compostos que produzem uma sensação agradável ao paladar.

Para uma forma de dosagem sólida, a solução ou suspensão, em por exemplo carbonato de propileno, óleos vegetias ou triglicerideos, é preferencialmente encapsulada numa cápsula de gelatina. Tais soluções, e a sua preparação e encapsulamento, estão divulgadas nas Patentes dos Estados Unidos N.os 4 328 245; 4 409 239; e 4 410 545. Para uma forma de dosagem liquida, a solução, por exemplo num polietilenoglicol, pode ser diluída com uma quantidade suficiente de um veículo líquido farmaceuticamente aceitável, por exemplo água, para ser facilmente medida para administração.

Alternativamente, as formulações orais liquidas ou semi-sólidas podem ser preparadas dissolvendo ou dispersando o composto activo ou sal em óleos vegetais, glicóis, triglicerideos, ésteres de propilenoglicol (por exemplo, carbonato de propileno) e outros veículos que tais, e encapsulando estas soluções ou suspensões em conchas para cápsulas de gelatina dura ou mole. Outras formulações úteis incluem aquelas evidenciadas nas Patentes dos Estados Unidos N.os Re 28 819 e 4 358 603. De forma breve, tais formulações incluem, mas não estão limitadas a, aquelas contendo um composto aqui proporcionado, um mono- 55 ΡΕ1807431 ou poli-alquilenoglicol di-alquilado, incluindo, mas não limitado a, 1,2-dimetoximetano, diglima, triglima, tetra-glima, éter dimetilico de polietilenoglicol-350, éter dimetilico de polietilenoglicol-550, éter dimetilico de polietilenoglicol-750 em que 350, 550 e 750 se refere ao peso molecular médio aproximado do polietilenoglicol, e um ou mais antioxidantes, tais como hidroxitolueno butilado (BHT), hidroxianisole butilado (BHA), gaiato de propilo, vitamina E, hidroquinona, hidroxicumarinas, etanolamina, lecitina, cefalina, ácido ascórbico, ácido málico, sorbi-tol, ácido fosfórico, ácido tiodipropiónico e seus ésteres, e ditiocarbamatos.

Outras formulações incluem, mas não estão limitadas a, soluções aquosas alcoólicas incluindo um acetal farmaceuticamente aceitável. Os álcoois utilizados nestas formulações são quaisquer solventes misciveis em água farmaceuticamente aceitáveis tendo um ou mais grupos hidroxilo, incluindo, mas não limitados a, propilenoglicol e etanol. Os acetais incluem, mas não estão limitados a, di-(alquilo inferior)-acetais de aldeídos de alquilo inferior tais como acetaldeído de dietilacetal.

Em todas as formas de realização, as formulações em comprimidos e cápsulas podem ser revestidas como é sabido dos peritos na técnica de forma a modificar ou prolongar a dissolução do ingrediente activo. Assim, por exemplo, elas podem ser revestidas com um revestimento digestível entérico convencional, tal como salicilato de fenilo, ceras como acetato ftalato de celulose. 56 ΡΕ1807431 2. Injectáveis, soluções e emulsões. A administração parentérica, caracterizada geralmente por injecção, tanto subcutaneamente, intramuscularmente ou intravenosamente, está também aqui contemplada. Os injectáveis podem ser preparados nas formas convencionais, tanto como soluções ou suspensões liquidas, formas sólidas adequadas para solução ou suspensão num liquido antes da injecção, ou como emulsões. Os excipientes adequados são, por exemplo, água, soro, dextrose, glicerol ou etanol. Adicionalmente, se desejado, as composições farmacêuticas a serem administradas podem também conter quantidades menores de substancias não tóxicas auxiliares tais como agentes humectantes ou emulsionantes, agentes tampão do pH, estabilizantes, incrementadores da solubilidade, e outros agentes que tais, tais como, por exemplo, acetato de sódio, monolaurato de sorbitano, oleato de tri-etanolamina e ciclodextrinas. Está também aqui contemplada a implantação de um sistema de libertação lenta ou de libertação prolongada, de forma a que seja mantido um nivel constante de dosagem (veja-se, por exemplo, a Patente dos Estados Unidos N.° 3 710 795). De forma breve, um composto aqui proporcionado é disperso numa matriz interior sólida, por exemplo, polimetilmetacrilato, polibutilmetacrilato, cloreto de polivinilo plastificado ou não plastificado, nylon plastificado, tereftalato de polietileno plastificado, borracha natural, poli-isopreno, poli-isobutileno, polibutadieno, polietileno, co-polimeros de etilenovinil- 57 ΡΕ1807431 acetato, borrachas de silicone, polidimetilsiloxanos, co-polímeros de carbonato de silicone, polímeros hidrofilicos tais como hidrogeles de ésteres de ácido acrilico e metacrílico, colagénio, álcool polivinilico reticulado e acetato de polivinilo parcialmente hidrolisado reticulado, que está envolvida por uma membrana exterior polimérica, por exemplo, polietileno, polipropileno, co-polimeros de etileno/propileno, co-polimeros de etileno/acrilato de etilo, co-polimeros de etileno/acetato de vinilo, borrachas de silicone, siloxanos de polidimetilo, borracha de neoprene, polietileno clorinado, cloreto de polivinilo, co-polimeros de cloreto de vinilo com acetato de vinilo, cloreto de vinilideno etileno e propileno, ionómero de tereftalato de polietileno, borracha de butilo, borrachas de epicloro-hidrina, co-polímero de etileno/álcool viní-lico, terpolímero de etileno/acetato de vinilo/álcool vinilico, e co-polimero de etileno/viniloxietanol, que seja insolúvel nos fluidos corporais. O composto difunde-se através da membrana polimérica exterior num passo de controlo da taxa de libertação. A percentagem de composto activo contido em tais composições parentéricas está altamente dependente da sua natureza especifica, bem como da actividade do composto e das necessidades do individuo. A administração parentérica das composições inclui a administração intravenosa, subcutânea e intramuscular. As preparações para administração parentérica incluem soluções estéreis prontas para injecção, produtos solúveis secos estéreis, tais como pós liofilizados, 58 ΡΕ1807431 prontos para serem combinados com um solvente imediatamente antes da utilização, incluindo comprimidos hipodérmicos, suspensões estéreis prontas para injecção, produtos insolúveis secos estéreis prontos para serem combinados com um veiculo imediatamente antes da utilização e emulsões estéreis. As soluções podem ser tanto aquosas como não aquosas.

Se administrado intravenosamente, os veiculos adequados incluem soro fisiolóqico ou solução tampão salina de fosfato (PBS), e soluções contendo aqentes espessantes e solubilizantes, tais como qlucose, polietilenoglicol, e polipropilenoglicol e suas misturas.

Os veiculos farmaceuticamente aceitáveis utilizados em preparações parentéricas incluem veiculos aquosos, veiculos não aquosos, agentes antimicrobianos, agentes isotónicos, tampões, antioxidantes, anestésicos locais, agentes de suspensão e de dispersão, agentes emulsionantes, agentes sequestradores e quelantes e outras substâncias farmaceuticamente aceitáveis.

Os exemplos de veiculos aquosos incluem Injecção de Cloreto de Sódio, injecção de Ringer, injecção de Dextrose Isotónica, Injecção de água esterilizada, injecção de Dextrose e Lactato de Ringers. Os veiculos parentéricos não aquosos incluem óleos fixados de origem vegetal, óleo de semente de algodão, óleo de milho, óleo de sésamo e óleo de amendoim. Os agentes antimicrobianos em concentrações 59 ΡΕ1807431 bacteriostáticas ou fungistáticas deverão ser adicionados a preparações parentéricas acondicionadas em contentores para doses múltiplas que incluem fenóis ou cresóis, mercuriais, álcool benzílico, clorobutanol, ésteres metilico e propí-lico de ácido p-hidroxibenzóico, timerosal, cloreto de benzalcónio e cloreto de benzetónio. Os agentes isotónicos incluem cloreto de sódio e dextrose. Os tampões incluem fosfato e citrato. Os antioxidantes incluem bissulfato de sódio. Os anestésicos locais incluem cloridrato de procaina. Os agentes de suspensão e de dispersão incluem carboximetilcelulose sódica, hidroxipropilmetilcelulose e polivinilpirrolidona. Os agentes emulsionantes incluem Polisorbato 80 (TWEEN® 80). Um agente sequestrante ou quelante de iões metálicos inclui EDTA. Os veículos farmacêuticos também incluem álcool etílico, polietileno-glicol e propilenoglicol para veículos miscíveis em água e hidróxido de sódio, ácido clorídrico, ácido cítrico ou ácido láctico para o ajuste do pH. A concentração do composto farmaceuticamente activo é ajustada de forma a que uma injecção proporcione uma quantidade eficaz para produzir o efeito farmacológico desejado. A dose exacta depende da idade, peso e condição do paciente ou animal, como é sabido na técnica.

As preparações parentéricas em dose única são embaladas numa ampola, um frasco ou seringa com agulha. Todas as preparações para administração parentérica deverão ser estéreis, como é sabido e prática na técnica. 60 ΡΕ1807431

De forma ilustrativa, a infusão intravenosa ou intra-arterial de uma solução aquosa estéril contendo um composto activo é um modo eficaz de administração. Uma outra forma de realização é uma solução ou suspensão aquosa ou oleosa estéril contendo um material activo injectado conforme o necessário para produzir o desejado efeito farmacológico.

Os injectáveis são designados para administração local e sistémica. Tipicamente, uma dosagem terapeuti-camente eficaz é formulada para conter uma concentração de pelo menos cerca de 0,1% p/p a até cerca de 90% p/p ou mais, em certas formas de realização, mais do que 1% p/p do composto activo para o(s) tecido(s) tratado(s). O ingrediente activo pode ser administrado de uma vez, ou pode ser dividido num número de doses mais pequenas para serem administradas a intervalos de tempo. Entende-se que a dosagem precisa e duração do tratamento são uma função do tecido a ser tratado e podem ser determinadas empiricamente utilizando protocolos de ensaio conhecidos ou por extrapolação a partir de dados de ensaio in vivo ou in vitro. É para ser notado que os valores de concentração e de dosagem podem também variar com a idade do indivíduo tratado. É para ser ainda entendido que para qualquer indivíduo particular, os regimes de dosagem específicos deverão ser ajustados ao longo do tempo de acordo com a necessidade individual e do julgamento profissional da pessoas que administre ou supervisione a administração das 61 ΡΕ1807431 formulações, e que as gamas de concentrações aqui evidenciadas são apenas exemplificadoras e não têm a intenção de limitar o objectivo ou prática das formulações reivindicadas . 0 composto pode ser suspenso na forma micronizada ou noutra forma adequada ou pode ser derivatizado para produzir um produto activo mais solúvel ou para produzir um pró-fármaco. A forma da mistura resultante depende de um número de factores, incluindo o modo de administração intencionado e a solubilidade do composto no excipiente ou veiculo seleccionado. A concentração eficaz é suficiente para melhorar os sintomas da condição e pode ser determinada empiricamente. 3. Pós liofilizados.

Também com interesse aqui são os pós liofili-zados, que podem ser reconstituídos para administração como soluções, emulsões e outras misturas. Eles podem também ser reconstituídos e formulados como sólidos ou geles. 0 pó liofilizado, estéril, é preparado dissolvendo um composto aqui proporcionado, ou um seu derivado farmaceuticamente aceitável, num solvente adequado. 0 solvente pode conter um excipiente que melhore a estabilidade ou outro componente farmacológico do pó ou solução reconstituída, preparada a partir do pó. Os excipientes que podem ser utilizados incluem, mas não estão limitados a, 62 ΡΕ1807431 dextrose, sorbital, frutose, xarope de milho, xilitol, glicerina, glucose, sacarose ou outro agente adequado. 0 solvente pode conter também um tampão, tal como citrato, fosfato de sódio ou de potássio ou outro tampão que tal conhecido dos peritos na técnica, tipicamente, cerca do pH neutro. A subsequente filtração estéril da solução seguida de liofilização sob condições padronizadas conhecidas dos peritos na técnica proporciona a formulação desejada. Geralmente, a solução resultante será dividida em porções em frascos para liofilização. Cada frasco conterá uma dosagem única (10-1000 mg, numa forma de realização, 100-500 mg) ou em dosagens múltiplas do composto. O pó liofi-lizado pode ser armazenado sob condições apropriadas, tais como a cerca de 4 °C até à temperatura ambiente. A reconstituição do pó liofilizado com água para injecção proporciona uma formulação para utilização em administração parentérica. Para a reconstituição, são adicionados cerca de 1-50 mg, numa forma de realização, 5-35 mg, noutra forma de realização, cerca de 9-30 mg do pó liofilizado, por mL de água esterilizada ou de outro veiculo adequado. A quantidade precisa depende do composto seleccionado. Tais quantidades podem ser determinadas empiricamente. 4. Administração tópica.

As misturas tópicas são preparadas como descrito para a administração local e sistémica. A mistura 63 ΡΕ1807431 resultante pode ser uma solução, suspensão, emulsão ou semelhantes e são formuladas como cremes, geles, pomadas, emulsões, soluções, elixires, loções, suspensões, tinturas, pastas, espumas, aerossóis, irrigações, nebulizados, supositórios, ligaduras, pensos dérmicos ou quaisquer outras formulações adequadas para administração tópica.

Os compostos ou seus derivados farmaceuticamente aceitáveis podem ser formulados como aerossóis para aplicação tópica, tal como por inalação (vej a-se, por exemplo, as Patentes i dos Estados Unidos N.os 4 044 126, 4 414 209, e 4 364 923, que descrevem aerossóis para disponibilização de um esteróide útil para o tratamento de doenças inflamatórias, particularmente a asma) Estas formulações para administração no trato respiratório podem estar na forma de um aerossol ou solução para um nebu-lizador, ou como um pó microfino para insuflação, sozinho ou em combinação com um veiculo inerte tal como a lactose. Num tal caso, as partículas da formulação terão tipicamente diâmetros de menos do que 50 mícrones, numa forma de realização, menos do que 10 mícrones.

Os compostos podem ser formulados para aplicação local ou tópica, tal como para aplicação tópica na pele e membranas mucosas, tal como nos olhos, na forma de geles, cremes, e loções e para aplicação no olho ou para aplicação intracisternal ou intra-espinal. A administração tópica está contemplada para disponibilização transdérmica e também para administração nos olhos ou mucosas, ou para 64 ΡΕ1807431 terapias por inalação. As soluções nasais do composto activo sozinho ou em combinação com outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis podem também ser administradas .

Estas soluções, particularmente aquelas intencionadas par utilização oftálmica, podem ser formuladas como soluções isotónicas a 0,01% - 10%, com pH de cerca de 5-7, com sais apropriados. 5. Composições para outras vias de administração.

Estão também aqui contempladas outras vias de administração, tais como a aplicação tópica, pensos trans-dérmicos, e a administração rectal.

Por exemplo, as formas de dosagem farmacêutica para administração rectal são supositórios rectais, cápsulas e comprimidos para efeito sistémico. Supositórios rectais, como aqui utilizado, significam corpos sólidos para inserção no recto que fundem ou amolecem à temperatura corporal libertando um ou mais ingredientes farmacolo-gicamente ou terapeuticamente activos. As substâncias farmaceuticamente aceitáveis utilizadas em supositórios rectais são bases ou veículos e agentes para elevarem o ponto de fusão. Os exemplos de bases incluem manteiga de cacau (óleo de teobroma), glicerina-gelatina, Carbowax (polioxietilenoglicol) e misturas apropriadas de mono-, di-e triglicerídeos de ácidos gordos. Pode ser utilizada a 65 ΡΕ1807431 combinação de várias bases. Os agentes para elevar o ponto de fusão dos supositórios incluem espermacete e cera. Os supositórios rectais podem ser preparados tanto pelo método de compressão como por moldagem. 0 peso típico de um supositório rectal é de cerca de 2 a 3 gramas.

Os comprimidos e cápsulas para administração rectal são fabricados utilizando a mesma substância farmaceuticamente aceitável e pelos mesmos métodos das formulações para administração oral. E. Avaliação da Actividade dos Compostos.

Estão disponíveis procedimentos fisiológicos, farmacológicos e bioquímicos padronizados para ensaiar os compostos para identificar aqueles que possuam actividades biológicas que modulem a actividade de citoquinas, incluindo a actividade da quinase p38 e/ou JNK. A actividade inibidora do composto foi medida num ensaio de de enzima radioactiva. A composição de tampão foi adoptada a partir de Lisnock et al (Biochemistry, 1998, vol. 37, pp 16573-16581). 0 substrato de péptido foi seleccionado a partir de Chen et al (Biochemistry, 2000, vol. 39, 2079-2087). As concentrações de ρ38α, [γ-33Ρ-ΑΤΡ] e de péptido eram iguais a 1 nM, 85 μΜ e 250 μΜ, respecti-vamente. A incorporação do 33P no péptido foi medida utilizando a absorção em bases de filtro com subsequente lavagem com ácido fosfórico a 100 mM seguido de etanol. 66 ΡΕ1807431

Estão também descritas na literatura outras condições para o ensaio enzimático p38cx. Elas diferem do ensaio descrito quer na composição do tampão (Biochemistry, 2000, vol. 39, 2079-2087), quer no substrato (Biochemistry, 1998. vol. 37, pp 16573-16581), ou em ambos (Protein Sei., 1998, vol. 7, pp. 2249-2255). F. Métodos de utilização dos compostos e composições .

Numa parte adicional da presente divulgação, os compostos aqui proporcionados podem ser utilizados no tratamento, prevenção, ou melhoria de um ou mais sintomas de doenças inflamatórias. Um composto aqui proporcionado pode ser utilizado, numa outra forma de realização, para o fabrico de um medicamento para o tratamento ou profilaxia de doenças inflamatórias.

Os compostos aqui proporcionados são inibidores selectivos da actividade da quinase p38, em particular, da actividade das isoformas p38a e ρ38β e/ou JNK, em particular da actividade das JNK1, JNK2 e JNK3. Concordantemente, os compostos aqui proporcionados são úteis para tratar condições associadas à actividade da quinase p38 e/ou à actividade da JNK. Tais condições incluem doenças nas quais os níveis de citoquina são modulados como uma consequência da sinslização intracelular por via da p38, e em particular, doenças que estão associadas a uma 67 ΡΕ1807431 superprodução das citoquinas IL-1, IL-4, IL-8, e TNF-cx. As doenças que podem ser tratadas ou prevenidas pelos inibidores da p38 aqui proporcionados, podem ser agrupadas de forma conveniente pela citoquina (IL-1, TNF, IL-β, IL-8) de que se acredita serem responsáveis pela doença.

Assim, uma doença ou condição mediada pelo IL-1 inclui artrite reumatóide, osteoartrite, acidente vascular cerebral, endotoxemia, e/ou síndrome de choque tóxico, reacção inflamatória induzida por endotoxina, doença inflamatória do intestino, tuberculose, aterosclerose, degeneração muscular, caquexia, artrite psoriática, sindrome de Reiter, gota, artrite traumática, artrite na rubéola, sinovite aguda, diabetes, doença das células β pancreáticas e doença de Alzheimer. A doença ou condição mediada pelo TNF inclui, artrite reumatóide, espondilite reumatóide, osteoartrite, artrite gotosa e outras condições artríticas, sépsis, choque séptico, choque endotóxico, sépsis gram negativa, síndrome de choque tóxico, síndrome de insuficiência respiratória no adulto, malária cerebral, doença pulmonar inflamatória crónica, silicose, sarcoidose pulmonar, doenças de reabsorção óssea, lesão por reperfusão, reacção enxerto contra hospedeiro, rejeições alográficas, febre e mialgias devidas a infecção, caquexia secundária a infec-ção, SIDA, ARC ou malignidade, formação de quelóides, formação de tecido cicatricial, doença de Crohn, colite ulcerosa ou pirexia. As doenças mediadas pelo TNF também 68 ΡΕ1807431 incluem infecções virais, tais como o VIH, CMV, gripe e herpes; e infecções virais veterinárias, tais como as infecções pelo lentivirus, incluindo, mas não limitadas ao virus da anemia infecciosa equina, virus da artrite caprina, virus do visna ou virus maedi; ou infecções por retrovirus, incluindo o virus da imunodeficiência felina, virus da imunodeficiência bovina, ou virus da imunodefi-ciência canina. A doença ou condição mediada pelo IL-8 inclui doenças caracterizadas por infiltração massiva de neutró-filos, tais como psoríase, doença inflamatória dos intestinos, asma, lesão cardiaca e renal por reperfusão, sindrome de insuficiência respiratória no adulto, trombose e glomerulonefrite.

Adicionalmente, os compostos aqui proporcionados podem ser utilizados topicamente para tratar ou prevenir condições causadas ou exacerbadas pelo IL-1 ou TNF. Tais condições incluem articulações inflamadas, eczema, psoríase, condições inflamatórias da pele tais como a queimadura solar, condições inflamatórias dos olhos tais como conjuntivite, pirexia, dor e outras condições associadas à inflamação.

Estão aqui divulgados compostos com a fórmula V para utilização em métodos para tratar uma doença pela administração de um composto aqui proporcionado que inibe a actividade da quinase p38 e/ou JNK. Também estão aqui 69 ΡΕ1807431 divulgados compostos com a fórmula V para utilização em métodos para inibir ou retardar o aparecimento de uma doença ou perturbação pela administração de um composto aqui proporcionado. Os compostos com a fórmula V podem ser utilizados para se obter uma redução total ou parcial dos sintomas de uma doença ou estado de doença, e/ou para aliviar, melhorar, ou diminuir, a doença ou perturbação e/ou os seus sintomas. Quando aqui é feita referência à inibição da "quinase ρ-38α/β", isto significa que são inibidas tanto a quinase p38a e/ou a ρ38β. Assim, a referência a um valor de IC50 para inibir uma quinase ρ-38α/β significa que o composto tem tal eficácia para inibir pelo menos uma de, ou ambas das, quinases p38cx e ρ38β. Quando é aqui feita referência À inibição de "JNK 1/2/3", isto significa que qualquer das JNK1 e/ou JNK2 ou JNK3 são inibidas. Assim, a referência a um valor de IC50 par inibir a JNK 1/2/3 significa que o composto tem tal eficácia para inibir pelo menos uma, duas, ou três das quinases c-Jun N-terminal.

Com vista na sua actividade como inibidores da quinase ρ38α/β e/ou JNK, os compostos aqui divulgados ou de acordo com a invenção são úteis a tratar condições associadas à p-38 e/ou JNK incluindo, mas não limitadas a, doenças inflamatórias, doenças auto-imunes, perturbações destrutivas dos ossos, perturbações proliferativas, perturbações angiogénicas, doenças infecciosas, doenças neurodegenerativas, e doenças virais. 70 ΡΕ1807431

Numa forma de realização, as condições ou doenças específicas que podem ser tratadas com os compostos aqui proporcionados incluem, sem limitação, pancreatite (aguda ou crónica), asma, alergias, síndrome de insuficiência respiratória no adulto, doença pulmonar obstrutiva crónica, glomerulonefrite, artrite reumatóide, lúpus sistémico eritematoso, escleroderma, tiroidite crónica, doença de Grave, gastrite auto-imune, diabetes, anemia hemolítica autoi-imune, neutropenia auto-imune, trombocitopenia, dermatite atópica, hepatite crónica activa, miastenia grave, esclerose múltipla, doença inflamatória do intestino, colite ulcerosa, doença de Crohn, psoríase, doença do enxerto contra o hospedeiro, reacção inflamatória induzida por endotoxina, tuberculose, aterosclerose, degeneração muscular, caquexia, artrite psoriática, síndrome de Reiter, gota, artrite traumática, artrite na rubéola, sinovite aguda, doença das células β pancreáticas; doenças caracte-rizadas por infiltração massiva de neutrófilos; espondilite reumatóide, artrite gotosa e outras condições artríticas, malária cerebral, doença pulmonar inflamatória crónica, silicose, sarcoidose pulmonar, doença de reabsorção óssea, rejeições de aloenxertos, febre e mialgias devidas a infec-ção, caquexia secundária a infecção, formação mielóide, formação de tecidos cicatriciais, colite ulcerosa, pirexia, gripe, osteoporose, osteoartrite e perturbação nos ossos relacionada com múltiplos mielomas, leucemia mielógena aguda, leucemia mielógena crónica, melanoma metastático, sarcoma de Kaposi, mieloma múltiplo, sépsis, choque séptico, e Shigelose; doença de Alzheimer, doença de Parkinson, isquemias cerebrais ou doença neurodegenerativa causada por 71 ΡΕ1807431 lesão traumática; perturbações angiogénicas incluindo tumores sólidos, neovascularização ocular, e hemangiomas infantis; doenças virais incluindo a hepatite infecciosa aguda (incluindo a hepatite A, hepatite B e hepatite C) , infecção pelo VIH e retinite por CMV, SIDA, SRAG, CRS ou malignidade, e herpes; acidente vascular cerebral, isquemia do miocárdio, isquemia em ataques cardíacos, hipoxia nos órgãos, hiperplasia vascular, lesão por reperfusão cardíaca e renal, trombose, hipertrofia cardíaca, agregação plaque-tária induzida pela trombina, endotoxemia e/ou síndrome de choque tóxico, e condições associadas à prostaglandina endoperoxidase sintetase-2.

Adicionalmente, os inibidores da p38 e/ou JNK aqui divulgados ou de acordo com a invenção inibem a expressão de proteínas pró-inflamatórias induzíveis tais como a prostaglandina endoperoxidase sintetase-2 (PGHS-2), também referida como ciclo-oxigenase-2 (COX-2). Concordantemente, condições adicionais associadas à p38 e/ou JNK incluem edema, analgesia, febre e dor, tais como dor neuromuscular, dor de cabeça, dor causada pelo cancro, dor dentária e dor na artrite. Os compostos aqui divulgados ou de acordo com a invenção podem também ser utilizados para tratar infecções virais veterinárias, tais como as infec-ções por lentivirus, incluindo, mas não limitadas a, vírus da anemia infecciosa equina; ou infecções por retrovírus, incluindo o vírus da imunodeficiência felina, o vírus da imunodeficiência bovina, e o vírus da imunodeficiência canina. 72 ΡΕ1807431 G. Terapia de Combinação.

Também estão aqui divulgados compostos com a fórmula V para utilização em métodos de tratamento de condições associadas à quinase p38 e/ou JNK pela administração a um indivíduo com necessidade disso de uma quantidade eficaz de compostos aqui divulgados sozinhos ou em combinação uns com os outros e/ou com outros agentes terapêuticos adequados úteis no tratamento de tais condições. Exemplares de tais outros agentes terapêuticos aqui divulgados ou de acordo com a Reivindicação 9 incluem corticosteróides, rolipram, calfostina, CSAIDs, imidazo-(1,2-a)quinoxalinas substituídas na posição 4 como divulgado na Patente dos Estados Unidos N.° 4 200 750 e em S. Ceccarelli et al, "Imidazo(1,2-a)quinoxalin-4-amines: A Novel Class of Nonxanthine AI Adenosine Receptor Anta-gonists", European Journal of Medicinal Chemistry Vol. 33, (1998), nas páginas 943-955; Interleucina-10, glucocorti-cóides, salicilatos, óxido nítrico, e outros imunossupres-sores; inibidores da translocação nuclear, tais como deoxispergualina (DSG); fármacos anti-inflamatórios não esteróides (NSAIDs) tais como ibuprofeno, celecoxib e rofecoxib; esteróides tais como prednisona ou dexametasona; agentes antivirais tais como abacavir; agentes antiproli-ferativos tais como metotrexato, leflunomida, FK506 (tacrolimus, Prograf); fármacos citotóxicos tais como azatioprina e ciclofosfamida; inibidores do TNF-α tais como tenidap, anticorpos anti-TNF ou receptor do TNF solúvel, e rapamicina (sirolimus ou Rapamune) ou seus derivados. 73 ΡΕ1807431

Os outros agentes terapêuticos acima, quando empregues em combinação com os compostos aqui divulgados ou de acordo com a invenção, podem ser utilizados, por exemplo, naquelas quantidades no Physicians' Desk Reference (PDR) ou como determinado de outra forma por um perito médio na técnica. Nos métodos aqui proporcionados, tal(is) outro(s) agente(s) terapêutico(s) pode(m) ser administrado (s) antes de, simultaneamente com, ou a seguir À administração dos compostos aqui proporcionados.

Os Exemplos seguintes ilustram aqui formas de realização, e não estão intencionados para limitarem o objectivo das Reivindicações. As abreviaturas empregues nos Exemplos estão definidas abaixo. Os compostos nos Exemplos estão identificados pelo exemplo e passo no qual eles são preparados (por exemplo, "IA" designa o composto do titulo do passo A do Exemplo 1), ou pelo exemplo apenas onde o composto é o composto do titulo do exemplo (por exemplo, "2" designa o composto do titulo do Exemplo 2).

Abreviaturas:

Ph = fenilo Bz = benzilo t-Bu = butil Me = metilo Et = etilo

Pr propilo - 74 - ΡΕ1807431

Iso-P ou i-Pr = isopropilo

MeOH = metanol

EtOH = etanol

EtOAc = acetato de etilo

Boc = terc-butiloxicarbonilo CBZ = carbobenziloxilo ou carbobenzoxilo ou benzilo xicarbonilo DCM ou CH2CI2 = diclorometano DCE = 1,2-dicloroetano DMF = dimetiloformamida DMSO = dimetilsulfóxido TFA = ácido trifluoroacético THF = tetra-hidrofurano HATU = Hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-l il)-N, N, N', N'-tetrametilurónio KOH = hidróxido de potássio K2C03 = carbonato de potássio POCI3 = oxicloreto fosforoso KOtBu = t-butóxido de potássio EDC ou EDCI = cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil) 3-etilcarbodiimida DIPEA = di-isopropiletilamina HOBt = hidrato de 1-hidroxibenzotriazole m-CPBA = ácido m-cloroperbenzóico

NaH = hidreto de sódio

NaOH = hidróxido de sódio

Na2S203 = tiossulfato de sódio

Na2S04 = sulfato de sódio

Pd = paládio 75 ΡΕ1807431

Pd/C = paládio em carbono min = minuto (s) L = litro mL = mililitro yL = microlitro g = grama(s) mg = miligrama(s) mol = mole mmol = milimole(s) meq = miliequivalente RT ou rt = temperatura ambiente ret. t. ou tR = tempo de retenção em HPLC (minutos) sat ou sat'd = saturada

EXEMPLOS

Os espectros de massa foram obtidos com um espec-trómetro de massa HP 1100. Nos exemplos: "HPLC (condição A) " refere-se à avaliação do material por HPLC utilizando uma coluna Thermal C18 com 3 mm de diâmetro; um gradiente linear de sete minutos com solventes desde 5% de A a 95% de A (o residuo é B) ao longo dos sete minutos. O solvente A é acetonitrilo com 0,325% de TFA e o solvente B é água com 0,325% de TFA, tR é o tempo de retenção observado para o composto.

Exemplo 1

Preparação do éster etillco do ácido 4-(5- 76 ΡΕ1807431 ciclopropilcarbamoil-2-metoxi-fenilamino)-6-metilpirrolo-[1,2-d][1,2,4]triazino-7-carboxilico

A. Ácido 3-isotiocianato-4-metoxi-benzóico A uma solução de ácido 4-metoxi-benzóico (1,20 g, 7.18 mmol) , 3 0 mL de água com HC1 concentrado suficiente para a dissolução, foi adicionado CSCI2 (0,55 mL, 7.18 mmol). A mistura reaccional foi agitada durante 2,5 horas à temperatura ambiente. 0 sólido branco resultante foi recolhido por filtração e lavado com água e secado in vacuo para dar o composto do titulo, 1,37 g na forma de um sólido branco. Este material foi utilizado sem purificação adicional. B. Éster etílico do ácido 5-hidrazonometil-2-metil-lH-pirrolo-3-carboxílico A uma solução de éster etilico do ácido 5-formil-2-metil-lH-pirrolo-3-carboxílico (6,30 g, 0,034 mol) em EtOH (6,3 mL) foi adicionada uma solução de hidrazina 77 ΡΕ1807431 (1,69 mL, 0,034 mol) . A mistura reaccional foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. 0 precipitado resultante foi filtrado e secado in vacuo para dar o composto do titulo, 6,79 g na forma de um sólido amarelo claro. Este material foi utilizado sem purificação adicional .

C. A preparação de 1C A THF anidro (1,0 mL) foi adicionado IA (32 mg, 0,153 mmol) e 1B (100 mg, 0,154 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 horas. A esta mistura reaccional foi adicionado NaHCCb saturado (0,2 mL) e Mel (29 pL, 0,47 mmol). A mistura reaccional foi então agitada de um dia para o outro, filtrada através de uma

camada de Celite, e os solventes foram removidos in vacuo. O produto resultante foi purificado, por cromatografia em gel de sílica (MeOH 1-4%; CH2C12) para dar o composto 1C (31 mg). D. Éster etilico do ácido 4-(5-carboxi-2-metoxi-fenilamino)-6-metil-pirrolo[1,2-d][1,2,4]triazino-7-carboxilico 78 ΡΕ1807431

Uma solução de 3B (31 mg, 0, 074 mmol) em DMF (0,5 mL) foi aquecida por radiação de micro-ondas até 190 °C durante 30 minutos. A mistura reaccional foi aquecida de novo durante 30 minutos sob as mesmas condições e foio-lhe adicionada água (1 mL). 0 precipitado foi recolhido por filtração. 0 filtrado foi extraído com CH2C12 (lxl mL) . Os extractos foram combinados e secados sobre MgS04, filtrados e o solvente foi removido in vacuo. O precipitado foi combinado com o extracto e purificado por cromatografia em gel de sílica (4-7% de MeOH em CH2C12) . O solvente foi removido in vacuo para render o composto do título (13 mg) na forma de um sólido laranja. E. Éster etílico do ácido 4-(5-ciclopropilcar-bamoil-2-metoxi-fenilamino)-6-metil-pirrolo[l,2-d][1,2,4]-triazino-7-carboxílico A uma suspensão de HOBt (30 mg, 0,20 mmol), EDCI (30 mg, 0,16 mmol), ciclopropilamina (20 pL, 0,29 mmol) em DMF (0,5 mL) à temperatura ambiente foi adicionado éster etílico do ácido 4-(5-carboxi-2-metoxi-fenilamino)-6-metil-pirrolo[1,2-d] [ 1,2,4]triazino-7-carboxílico (13 mg, 0,035 mmol) . A mistura reaccional foi agitada de um dia para o outro. Foi-lhe adicionada água (1 mL) e o precipitado foi recolhido. O produto foi purificado por cromatografia "flash" sobre gel de sílica (1-3% de MeOH em CH2C12) dando o composto do título, 7 mg, na forma de um sólido amarelado. HPLC (condição A) Çr 4,37 minutos. MS m/z 410 [M+H]+. 79 ΡΕ1807431

Exemplo 2

Preparação de éster etílico do ácido 4-[2-metil-5-(4H-[1,2,4]triazol-3-il)-fenilamino]-6-metilpirrolo[1,2-d][1,2,4]triazino-7-carboxílico

A. Ά preparação de 2A

Foram agitados 3-(3-isotiocianato-4-metil-fenil)-4H-[ 1,2,4 ] triazole (22 mg, 0,10 mmol) e 1B (20 mg, 0,10 mmol) em THF (1,0 mL) à temperatura ambiente durante 1 hora. A esta mistura reaccional foi adicionado NaHCCb saturado (0,2 mL) e Mel (28 mg) . A mistura reaccional foi agitada durante 2 horas. Foi-lhe adicionada água (5 mL) e a mistura foi extraida com EtOAc (2 x 20 mL) . Os extractos combinados foram lavados com uma solução aquosa saturada de cloreto de sódio e secados sobre MgS04. O produto foi purificado por cromatografia em gel de sílica para dar 2A, 35 mg. 80 ΡΕ1807431

2Α B. Éster etilico do ácido 4-[2-metil-5-(4H-[1,2,4]triazol-3-il)-fenilamino]-6-metil-pirrolo[1,2-d] [1,2,4]triazino-7-carboxilico

Foi aquecido 2A (20 mg, 0,047 mmol) em DMF (0,5 mL) por radiação de micro-ondas até 190 °C durante 30 minutos. O material resultante foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto do titulo, 12 mg. HPLC (condição A) tR 4,48 minutos. MS m/z 378 [M+H]+.

Exemplo 3

Preparação do éster etilico do ácido 4-(5-ciclopropilcarbamoil-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirro-lo[l,2-d][1,2,4]triazino-7-carboxílico

ΡΕ1807431 81 A. Preparação de 3A. N-Ciclopropil-3-isotiocianato-4-metil-benzamida (159 mg, 0,69 mmol) e 1B (134 mg, 0,069 mmol) em THF (1,0 mL) foram agitados à temperatura ambiente de um dia para o outro. O solvente foi removido por evaporação dando um sólido amarelo. Este material foi suspenso em THF (5 mL) e NaOH (0,2 N, 5 mL) . A esta mistura reaccional foi adicionado Mel (43 yL, 0,69 mmol) e foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Foi-lhe adicionada água (5 mL) e a mistura foi extraida com CH2C12 (2 x 20 mL) . Os extractos combinados foram secados sobre Na2S04 e o solvente foi removido in vacuo, para render 3A, (311 mg).

Este material foi utilizado sem purificação adicional.

3A B. Éster etilico do ácido 4-(5-ciclopropilcar- bamoil-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirrolo[l,2-d][1,2,4]-triazino-7-carboxílico.

Foi aquecido 3A (0,69 mmol) em HOAc (4 mL) por 82 ΡΕ1807431 radiação de micro-ondas até 190 °C durante 15 minutos. O material resultante foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto do titulo, 55 mg. HPLC (condição A) tR 4,91 minutos. MS m/z 394 [M+H]+.

Exemplo 4

Preparação da benzilamlda do ácido 4-(5-ciclopro-pilcarbamoil-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirrolo[l,2-d]-[1,2,4]triazino-7-carboxílico

A. Benzilamlda do ácido 4-(5-ciclopropilcarba-moil-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirrolo[l,2-d][1,2,4]tri-azino-7-carboxílico A uma solução de ácido 4-(5-ciclopropilcarbamoil-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirrolo[1,2-d][1,2,4]triazino-7-carboxilico (37 mg, 0,13 mmol) em DMF (1 mL) foi adicionado EDCI (37 mg, 0,20 mmol), HOBt (30 mg, 0,20 mmol), EtsN (45 pL) e benzilamina (29 pL, 0,27 mmol). A mistura reac-cional foi agitada durante 3 horas à temperatura ambiente. 83 ΡΕ1807431 O material em bruto foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto do titulo, 3,3 mg na forma de um sólido esbranquiçado. HPLC (condição A) tR 4,40 minutos. MS m/z 455 [M+H]+.

Exemplo 5

Preparação do éster etilico do ácido 4-(5-etoxi-carbonilamino-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirrolo[1,2-d] [1,2,4]triazino-7-carboxilico O Et

O^NN

A. A preparação de 5A A THF anidro (2,0 mL) foi adicionado éster etilico do ácido (3-isotiocianato-4-metil-fenil)-carbâmico (32 mg, 0,153 mmol) e 1B (250 mg, 1,28 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. A esta mistura reaccional foi adicionado NaHCCb saturado (0,5 mL) e Mel (120 pL, 1,93 mmol) . A mistura reaccional foi então agitada de um dia para o outro, filtrada através de uma camada de Celite, e os solventes foram removidos in vacuo. 84 ΡΕ1807431 O produto resultante foi purificado por cromatografia em gel de silica (1/1 de EtOAc/hexanos) para dar 5C (280 mg) na forma de um sólido amarelo.

B. Éster etilico do ácido 4-(5-etoxicarbonil-amino-2-metil-fenilamino)-6-metil-pirrolo[l,2-d][1,2,4]-triazino-7-carboxílico

Foi aquecido 5A (50 mg) em DMF (0,2 mL) por radiação de micro-ondas até 190 °C durante 30 minutos. 0 material resultante foi purificado por HPLC preparativa para dar o composto do titulo, 15 mg. HPLC (condição A) tR 5,54 minutos. MS m/z 398 [M+H]+.

Exemplo 6

Ensaio enzimático de JNK:

Num volume final da mistura reaccional de 20 yL, foram incubados 5 nM de Jnk2 humano recombinante na 85 ΡΕ1807431 ausência ou na presença de inibidores do JNK putativos em concentrações crescentes com 25 mM de HEPES pH 7,5, 20 mM de fosfato de β-glicerol, 10 mM de MgCl2, 0,1 mM de orto-vanadato de sódio, 0,005% de Tween® 80, 10 μΜ de [γ-33Ρ-ΑΤΡ], 500 μΜ de substrato de péptido IPTTPITTTYFFFKKK e 2 mM de DTT. A reacção foi iniciada pela adição do [γ—33P — ATP]. Após incubação durante 20 minutos a 30 °C, as aliquotas foram transferidas para suportes de filtração P30/GF (PerkinElmer). Cada suporte de filtração foi lavado quatro vezes em 100 mL de ácido fosfórico a 0,5%, 0,5 mM de pirofosfato, depois duas vezes em 50 mL de etanol, secado e selado em saco contendo 5 mL de mistura de liquido de cintilação OptiPhase "SuperMix" (PerkinElmer). A radioacti-vidade incorporada no péptido foi quantificada num leitor de placas Trilux 1450 Microbeta. Os valores de IC50 foram calculados utilizando SigmaPlot.

Ensaio de p38<x O ensaio de p38cx empregue foi baseado em medições de ADP libertado na reacção de interesse através de oxidção do NADH obtido pelo acoplamento com reacções de piruvato quinase e lactato de-hidrogenase. Os ensaios foram realizados em placas para UV de 384 poços. O volume final foi de 25 pL preparados a partir da adição de 2,5 pL de composto dissolvidos em DMSO a 10%, 17,5 pL de tampão de ensaio e 5 pL de ATP. O tampão de ensaio continha os reagentes seguintes para dar a concentração final no ensaio: HEPES a 86 ΡΕ1807431 25 mM, 2-glicerofosfato a 20 mM, pH de 7,6, MgCl2 a 10 mM, ortovanadato de sódio a 0,1 mM, fosfoenolpiruvate a 0,5 mM, NADH a 0,12 mM, LDH a 3,1 mg/mL, piruvato quinase a 6,67 mg/mL, substrato de péptido a 0,25 mM, DTT a 2 mM, Tween 80 a 0,005% e quinase p38a a 20 nM proveniente de Upstate. Os compostos de teste foram pré-incubados com quinase p38a durante 60 minutos e a reacção começou pela adição de ATP até uma concentração final de 0,15 mM. As taxas reaccionais foram medidas a 340 nm utilizando um espectrofotómetro leitor de placas SpectraMax durante 10 minutos a 37 °C. Os dados de inibição foram analisados por regressão não linear dos mínimos quadrados utilizando SigmaPlot.

Resultados

Os compostos aqui exemplificados apresentaram actividade nos ensaios acima como inibidores da quinase p38. Adicionalmente, estes compostos têm mostrado inibirem o JNK2. A maioria dos compostos apresentou valores de IC50 para a quinase p38cx e para a quinase JNK2 de menos do que 10 μΜ, muitos menos do que 1 μΜ. As actividades inibidoras da p38 e da JNK2 de certos compostos aqui proporcionados estão apresentadas abaixo no Quadro 1. Para os valores de IC50 da quinase p38 e quinase JNK2, "+++" representa < 1 μΜ, "++" representa entre 1,0 μΜ e 10 μΜ e " + " representa > 10 μΜ. ΡΕ1807431 87

Quadro 1

Composto Inibição da p38a JNK 1 ++ + + 2 ++ ND 3 ++ + + + + 4 ++ + + + + 5 ++ + + + + 6 ++ + + 7 ++ + + + + 8 ++ + + + 9 ++ + + 10 ND + + 11 + + + + 12 + + + + 13 ND + + 14 ++ + + 15 ++ + + 16 ++ + + 17 ND + + 18 + + + + 19 + + + 20 + + + + 21 ND + 22 ND + 23 ND + 24 + +

Lisboa 11 de Novembro de 2010

Claims (13)

1. ΡΕ1807431 1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto um ou seu sal por adição de ácido farmaceuticamente aceitável em que o composto tem a fórmula V:

   em que R1 é hidrogénio, alquilo ou halo; R2 é hidrogénio ou alquilo; R3 é cloro, metilo, amino, carboxilo, etilaminocarbonilo, isopropilaminocarbonilo, ciclopropilaminocarbonilo, benzil-aminocarbonilo, morfolinocarbonilo, aminocarbonilo, metoxi-carbonilo, etoxicarbonilo, etoxicarbonilamino, isopropi-loxicarbonilamino, isobutiloxicarbonilamino, fenilamino-carbonilo, oxazolilo, triazinilo ou etilaminocarbonilamino; R4 é seleccionado a partir do grupo consistindo de hidrogénio, halo, alquilo, alcoxilo, e hidroxilo; R6 é seleccionado a partir do grupo consistindo de hidrogénio, halo, alquilo, e alcoxilo; Q1 é alquilo, alcoxilo, aralquilamino, alquilamino ou cicloalquilamino; 2 ΡΕ1807431 em que "alquilo" refere-se a grupos hidrocarboneto não substituídos de cadeia linear ou ramificada com 1 a 20 átomos de carbono, preferencialmente, de 1 a 7 átomos de carbono; "alcoxilo" significa um radical -0R onde R é alquilo como definido acima; "halo" significa fluoreto, cloreto, brometo, ou iodeto, preferencialmente fluoreto e cloreto; "cicloalquilo" refere-se a um sistema em anel de hidrocarboneto cíclico, não aromático, saturado ou parcialmente insaturado, contendo 1 a 3 anéis e 3 a 7 átomos de carbono por anel os quais podem estar adicionalmente condensados com um anel carbocíclico(C3-C7) não saturado; e "arilo" significa um radical hidrocarboneto monocíclico ou bicíclico aromático monovalente com 6 a 10 átomos no anel, em que o dito anel arilo pode estar opcionalmente condensado com um anel saturado monocíclico com 5, 6 ou 7 membros contendo opcionalmente 1 ou 2 heteroátomos selec-cionados independentemente a partir de oxigénio, azoto ou enxofre, sendo os restantes átomos do anel de carbono onde um ou dois átomos de carbono estão substituídos opcionalmente com um grupo carbonilo. 3 ΡΕ1807431
2. 2. Composto de acordo com a Reivindicação í, ou um seu sal por adição de ácido farmaceuticamente aceitável em que o composto tam a fórmula (VI):

   e em que as variáveis são como definido na Reivindicação 1.
3. 3. Composto de acordo com a Reivindicação 1, ou um seu sal por adição de ácido farmaceuticamente aceitável em que o composto tem a fórmula:

   (Vil) e em que as variáveis são como definido na Reivindicação 1. 4 ΡΕ1807431
4. 4. Composto de acordo com a Reivindicação 1, ou um seu sal por adição de ácido farmaceuticamente aceitável em que o composto tem a fórmula (VIII):

   em que as variáveis são como definido na Reivindicação 1, e em que Q2 é alcoxilo, ou alquilaminocarbonilo.
5. 5. Composto da Reivindicação 1, ou um seu sal por adição de ácido farmaceuticamente aceitável em que o composto tem a fórmula (IX):

   5 ΡΕ1807431 e em que as variáveis são como definido na Reivindicação 1, e em que Q3 é hidrogénio, alquilo, cicloalquilo, aralquilo ou arilo.
6. 6. Composto de acordo com a Reivindicação 1 seleccionado a partir de:

   O ΡΕ1807431 6

   ΡΕ1807431 7

   e 8 ΡΕ1807431

   ou um seu sal por adição de ácido farmaceuticamente aceitável .
7. 7. Composto da Reivindicação 1 para tratar, prevenir, ou melhorar um ou mais sintomas de doenças ou perturbações mediadas pela citoquina.
8. 8. Composto da Reivindicação 7, em que a doença ou perturbação é seleccionada a partir de doenças inflamatórias, doenças auto-imunes, perturbações destrutivas dos ossos, perturbações proliferativas, perturbações angio-génicas, doenças infecciosas, doenças neurodegenerativas, e doenças virais.
9. 9. Composto da Reivindicação 8, incluindo ainda um composto seleccionado a partir de um corticosteróide, rolipram, calfostina, um CSAID, uma imidazo-(1,2-a)quino-xalina substituida na posição 4, interleucina-10, um gluco-corticóide, um salicilato, óxido nitrico, um imunossupres-sor, um inibidor da translocação nuclear, deoxispergualina (DSG); um fármaco anti-inflamatório não esteróide (NSAID), ibuprofeno, celecoxib, rofecoxib; um esteróide, prednisona, 9 ΡΕ1807431 dexametasona; um agente antiviral, abacavir; um agente antiproliferativo, metotrexato, leflunomida, FK506; um fármaco citotóxico, azatioprina, ciclofosfamida; um inibi-dor do TNF-oí, tenidap, um anticorpo anti-TNF, um receptor do TNF solúvel, e rapamicina, ou seus derivados.
10. 10. Composição farmacêutica, incluindo um composto da Reivindicação 1 e um veiculo farmaceuticamente aceitável.
11. 11. Composição farmacêutica da Reivindicação 10, incluindo adicionalmente um ou mais dos seguintes: corti-costeróide, rolipram, calfostina, um CSAID, uma imidazo-(1,2-a)quinoxalina substituída na posição 4, interleucina-10, um glucocorticóide, um salicilato, óxido nitrico, um imunossupressor, um inibidor da translocação nuclear, deoxispergualina (DSG); um fármaco anti-inflamatório não esteróide (NSAID), ibuprofeno, celecoxib, rofecoxib; um esteróide, prednisona, dexametasona; um agente antiviral, abacavir; um agente antiproliferativo, metotrexato, leflunomida, FK506; um fármaco citotóxico, azatioprina, ciclo-fosfamida; um inibidor do TNF-oí, tenidap, um anticorpo anti-TNF, um receptor do TNF solúvel, e rapamicina, ou seus derivados.
12. 12. Composto de acordo com a Reivindicação 1 para utilização como um fármaco. 10 ΡΕ1807431
13. 13. Utilização de um composto de acordo com a Reivindicação 1 no fabrico de um medicamento para o tratamento de uma condição associada à citoquina. Lisboa, 11 de Novembro de 2010