PT1601677E - Pirrolopirimidina espiro-substituídas - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO "PIRROLOPIRIMIDINA ESPIRO—SUBSTITUÍDAS"

Esta invenção relaciona-se com inibidores de protease cisteína, em particular com inibidores de pirro-lopirimida catepsina K ou catepsina S ou inibidores com actividades mistas e com as suas utilizações farmacêuticas para o tratamento ou profilaxias de doenças ou condições médicas em que está implicada catepsina K ou catepsina S ou ambas estão implicadas.

Catepsina K e catepsina S são membros da família das enzimas catepsina cisteína lisosomais, compreendendo e.g. catepsina B, K, L e S, que estão implicados em várias doenças incluindo dor neuropática, inflamação, artrite reumatóide, osteoartrite, osteoporose, tumores (em especial invasão tumoral e metástase tumoral), obesidade, doença coronária, aterosclerose (incluindo aterosclerose com ruptura de placas e destabilização), doenças auto-imunes (incluindo rejeição de transplantes). Estes compostos da invenção que são inibidores duais de catepsina K e catepsina S ou inibidores específicos de catepsina S e catepsina K podem ser úteis nas doenças aqui mencionadas.

Consequentemente a presente invenção fornece um composto de fórmula I, ou um seu sal ou éster farmaceu-ticamente aceitável ΡΕ1601677 2

fórmula I ε \. em que E é um radical de fórmula a ou fórmula b \ / A—·** "x.

O \ fórmula a

fórmula b em que A é CH2, CH2-CH2 ou C=0;

B é CH2, C=0 ou D é CH2, ou C=0; 3 ΡΕ1601677 G é CH2, CH2C=0 ou CH2-CH2; J é CH2, C=0 ou CH2-CH2; L é H, OCH3, halo, ou alcoxi inferior; M é CH2 ou NH; Q é H, alquilo inferior, alquilo inferior substituído com hidroxi, aril-alquilo inferior opcionalmente substituído, alquil inferior-sulfonilo, aril carbocíclico-alquilo inferior, aril carbocíclico-alquilo inferior substituído com alcoxi inferior, aril carbocíclico-alquilo inferior substituído com halo, alquilo inferior substituído com N-heterociclo, arilo carbocíclico substituído com alcoxi inferior, aminocarbonilo, cicloalquil- aminocarbonilo, alquil inferior-carbonilo substituído com N-heterociclo, aril carbocíclico-alquilo inferior substituído com halo, alcoxi inferior-carbonilo, ou alquil inferior-carbonilo; e R é alquilo inferior, para-clorofeniletilo, ci-clo-hexiletilo, dimetilbutilo, difluorociclo-hexiletilo, ciclopentiletilo ou ciclo-heptiletilo.

Numa forma de realização preferida da invenção é fornecido um composto de fórmula I-(i), ou um seu sal ou éster farmaceuticamente aceitável 4 ΡΕ1601677

em que Q-i é H, alquilo inferior, alquilo inferior substituído com hidroxilo, alquilo inferior substituído com N-heterociclo, aril-alquilo inferior mono- ou di-subs-tituído, aril carbocíclico-alquilo inferior substituído com alcoxi inferior; e R é como definido acima.

Numa outra forma de realização preferida da invenção é fornecido um composto de fórmula I-(ii), ou um seu sal ou éster farmaceuticamente aceitável

ΡΕ1601677 5 fórmula I-(ii) em que Q-ii é H, alquilo inferior, alquilo inferior substituído com N-heterociclo, aril carbocíclico-alquilo inferior substituído com halo, alquil inferior-carbonilo; e L e R são como definidos acima.

Numa outra forma de realização preferida da invenção é fornecido um composto de fórmula I-(iii), ou um seu sal ou éster farmaceuticamente aceitável

fórmula I-(iii) em que B-iii é CH2; G-iii é CH2CH2; J-iii é CH2CH2; Q-iii é H, cicloalquil-aminocarbonilo, amino- carbonilo, arilo carbocíclico substituído com alcoxi infe- 6 ΡΕ1601677 rior, alquil inferior-carbonilo, aril carbocíclico-alquilo inferior ou alquil inferior-carbonilo substituído com N-heterociclo; e R é como definido acima.

Numa outra forma de realização preferida da invenção é fornecido um composto de fórmula I, fórmula I-(i), fórmula I-(ii), fórmula I-(iii, em que R é RI = alquilo inferior.

Numa outra forma de realização preferida da invenção é fornecido um composto de fórmula I, fórmula I-(i), fórmula I-(ii), fórmula I-(iii), em que R é R5 = 2,2-dimetil-propilo.

Numa outra forma de realização preferida da invenção é fornecido um composto de fórmula I, fórmula I-(i), fórmula I-(ii), fórmula I-(iii), em que R é R6 = dimetil-butilo.

Numa outra forma de realização preferida da invenção é fornecido um composto de fórmula I, fórmula I-(i), fórmula I-(ii), fórmula I-(iii) em que R é R2 = para-clorofeniletilo, ciclo-hexiletilo, dimetilbutilo, difluoro-ciclo-hexiletilo, ciclopentiletilo ou ciclo-heptiletilo.

Numa outra forma de realização preferida da invenção é fornecido um composto de fórmula I-(iv), ou um seu sal ou éster farmaceuticamente aceitável ΡΕ1601677 7

fórmula I-(iv) em que R3 é (8-alquil inferior-carbonilo)-2,8-diaza-espiro[4.5]dec-2-ilmetilo, (8-alquil inferior-sulfonil)- 2,8-diaza-espiro[4.5]dec-2-ilmetilo, (8-aril-alquil inferior)-2,8-diaza-espiro[4.5]dec-2-ilmetilo,

>

Ó' s λ F γ- i J \ 8· -jt-S T '>·/ ,n j. w 0 ϋ \ L O % b ú'" \ \ OU R4 é para-clorofenilmetilo, ciclo-hexilmetilo, dimetilpropilo, difluorociclo-hexilmetilo, ciclopentil-metilo ou ciclo-heptilmetilo; e Q é como definido acima.

A presente invenção também fornece processos para a preparação de compostos de fórmula I e dos seus sais e ésteres, compreendendo o passo de acoplamento com um composto de fórmula II Q—f* \ Ώ A-

í “N

OH ΡΕ1601677

fórmula II

em que Q, G, J, M, A, B, D são como definido acima, com um composto de fórmula III

fórmula III em que X é halo e R é como definido acima, e recuperando o composto resultante na forma de base livre, ou num seu sal ou éster farmaceuticamente aceitável. 0 procedimento de acoplamento anterior pode ser levado a cabo em solução e.g. solução de DMF na presença de K2CO3, por exemplo à temperatura ambiente com agitação e.g. durante 12 horas. Como grupos protectores apropriados podem ser utilizados para proteger grupos funcionais reactivos durante o processo de acoplamento e podem ser removidos após o processo de acoplamento, por exemplo como descrito aqui de seguida nos Exemplos. 0 tratamento das misturas reaccionais e a purificação dos compostos assim obtidos pode ser levado a cabo de acordo com procedimentos conhecidos ou de acordo com os Exemplos.

Acima e em outros locais na presente descrição os 9 ΡΕ1601677 termos que se seguem têm os seguintes significados.

Halo, significa I, Br, Cl ou F. 0 termo "inferior" referido acima e a partir daqui relacionados com radicais ou compostos orgânicos respectivamente definidos como ramificados ou não-ramifiçados com até e incluindo 6 átomos de carbono.

Um grupo "alquilo inferior" é ramificado ou não-ramifiçado e contem de 1 até 6 átomos de carbono. Alquilo inferior representa, por exemplo, metilo, etilo, propilo, butilo, isopropilo, isobutilo, butilo terciário ou neo-pentilo (2,2-dimetilpropil). "Alquilo inferior substituído com halo" é alquilo inferior C1-C7 substituído com até 6 átomos de halo, preferencialmente alquilo inferior mono-, di- ou tri-substituído.

Um grupo "alcoxi inferior" é ramificado ou não ramificado e contem de 1 a 6 átomos de carbono, preferencialmente 1-4 átomos de carbono. Alcoxi inferior representa por exemplo metoxi, etoxi, propoxi, butoxi, isopropoxi, isobutoxi ou butoxi terciário. "Arilo" representa um radical fenilo ou naftilo. Preferencialmente um "arilo carbocíclico" constituído unicamente por átomos de carbono e átomos de hidrogénio 10 ΡΕ1601677 opcionalmente substituído, mono-, di- ou tri-substituído por um, dois ou três radicais seleccionados de alquilo inferior, alcoxi inferior, hidroxi, halogéneo. Preferido como arilo carboxílico é fenilo ou fenilo opcionalmente substituído, por exemplo, como descrito nos exemplos, e.g. mono-, di- ou tri-substituído com halo, alquilo inferior, ou alcoxi inferior. "Cicloalquilo" representa um hidrocarboneto cíclico saturado opcionalmente substituído por alquilo inferior que contem 3 a 10 anéis de carbono e é preferencialmente ciclopropilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo ou opcionalmente substituído por alquilo inferior. "N-heterociclo" representa uma fracção hetero-cíclica contendo azoto, saturada, parcialmente insaturada ou aromática ligada através de um átomo de azoto tendo de 3 a 8 átomos no anel, opcionalmente contendo mais um hete-roátomo O opcionalmente substituído por um alquilo inferior ou alquil inferior-carbonilo. "Alquil inferior-carbonilo" refere-se a um radical de fórmula -C(0)Ra em que Ra é um radical alquilo inferior definido acima, por exemplo, acetilo, etilcar-bonilo, ou n-propilcarbonilo.

Os compostos da invenção são obtidos quer na forma livre, quer como um seu sal se estão presentes grupos formadores de sais. Compostos da invenção tendo grupos 11 ΡΕ1601677 básicos podem ser convertidos em sais de adição de ácido, em especial sais farmaceuticamente aceitáveis. Estes são formados, por exemplo, com sais inorgânicos, tal como ácidos minerais, por exemplo ácido sulfúrico, um ácido fosfórico ou halídrico, ou com ácidos orgânicos carbo-xilicos, tal como ácidos alcano (C1-C4)-carboxílicos que, por exemplo, são não-substituídos ou substituídos com halo-géneo, por exemplo ácido acético, tal como ácidos dicar-boxílicos saturados ou não saturados, por exemplo ácido oxálico, succínico, maleico ou fumárico, tal como ácidos hidroxicarboxílicos, por exemplo ácido glicólico, láctico, málico, tartárico ou cítrico, tal como aminoácidos, por exemplo ácido aspártico ou glutâmico, ou com ácidos sulfónicos, tal como ácidos alquil (C1-C4)-sulfónicos (por exemplo ácido metanossulfónico) ou ácidos arilsulfónicos que são não-substituídos ou substituídos (por exemplo por halogéneo). Sais preferidos são os formados com ácido clorídrico, ácido metanossulfónico e ácido maleico.

Tendo em consideração a estreita relação entre os compostos livres e os compostos na forma de sais, sempre que um composto é referido neste contexto, um sal correspondente é também considerado, desde que isto seja possível ou apropriado nestas circunstâncias.

Os compostos, incluindo os seus sais, podem também ser obtidos na forma dos seus hidratos, ou incluir outros solventes utilizados para a sua recristalização. 12 ΡΕ1601677

Se um ou mais grupos funcionais, por exemplo carboxi, hidroxi, amino, ou mercapto, são ou necessitam de ser protegidos num composto de fórmula I, porque não devem tomar parte na reacção, estes são grupos que habitualmente são utilizados na síntese de compostos peptídeos, e também de cefalosporinas e penicilinas, assim como derivados de ácidos nucleicos e açucares.

Os grupos protectores podem já estar presentes em precursores e devem proteger os grupos funcionais relacionados com reacções secundárias não desejadas, tal como acilações, eterificações, esterificações, oxidações, solvó-lises, e reacções semelhantes. É uma característica dos grupos protectores que sejam facilmente removidos, i.e. sem reacções secundárias não desejáveis, habitualmente por solvólise, redução, fotólise ou também por actividade enzimática, por exemplo sob condições análogas às condições fisiológicas, e não estão presentes nos produtos finais.

Os compostos de partida de fórmula II e fórmula III podem ser produzidos como descrito nos Exemplos.

Os compostos da invenção apresentam valores de propriedades farmacológicas em mamíferos e são portanto úteis como fármacos. Estes são particularmente úteis como inibidores de catepsina K ou catepsina S ou ambos.

Os efeitos de inibição da catepsina K dos compostos da invenção podem ser demonstrados in vitro 13 ΡΕ1601677 medindo a inibição e.g. da catepsina K recombinante humana. 0 ensaio in vitro é levada a cabo como se segue. 0 ensaio é levado a cabo em placas de micro-titulação de 96 cavidades à temperatura ambiente utilizando catepsina K humana recombinante. A inibição da catepsina K é ensaiada a uma concentração de enzima (0,16 nM) e de substrato (54 mM Z-Phe-Arg-AMCA-Peptide Institute Inc. Osaka, Japão) constante em tampão de fosfato de sódio 100 mM, pH 7,0, contendo ditiotreitol 2mM, Tween 80 20 mM e EDTA 1 mM. A catepsina K é pré-incubada com os inibidores durante 30 min, e a reacção é iniciada pela adição do substrato. Após 30 min de incubação a reacção é parada pela adição de E-64 (2 mM) , e a intensidade da fluorescência é lida num leitor de placas de multi-cavidades a comprimentos de onda de excitação e de emissão de 360 e 460 nm, respectivamente.

Os compostos da Invenção tipicamente têm IC50S para a inibição da catepsina K humana menos de cerca de 100 nM abaixo a cerca de 1 nM ou menos, preferencialmente de cerca de 5 nM ou menos, i.e. cerca de 0,2 nM. O Exemplo 3-0 tem um valor de IC50S no ensaio descrito acima de cerca de 0,16 nM. Compostos preferidos são com descrito acima com R=R1, e.g. compostos dos exemplos 1 a 4 com R=R1, que têm efeitos de inibição de catepsina K. Mais preferidos são compostos como definido acima R=R5, mais preferido Exemplo 3-0 . 14 ΡΕ1601677

Os efeitos de inibição da catepsina S dos compostos da invenção podem ser demonstrados in vitro medindo a inibição e.g. da catepsina S humana recombinante. 0 ensaio in vitro é levado a cabo em placas de microtitulação de 96 cavidades (Greiner Gmg h, Alemanha), transparentes, de fundo plano à temperatura utilizando catepsina S humana recombinante. A inibição de catepsina S humana é ensaiada a concentrações de enzima constante e concentrações de substrato variáveis (o substrato é Z-Leu-Leu-4-metilcumaril-7-amida (Bachem (Suiça)) em 100 partes de fosfato de sódio 0,2M, Ph 7,0, contendo EDTA 2 mM, 2 partes de Triton-X 1%, 10 partes de ditiotreitol (DTT) 20 mM e 58 partes de água destilada. O ensaio é iniciado por adição da solução de enzima (concentração 13 vezes superior à concentração final da Catepsina S humana recombinante) à mistura reaccional contendo várias concentrações do substrato correspondente e do composto. São utilizadas concentrações de substrato entre 3,4 e 17 μΜ. A Catepsina S humana recombinante é utilizada a uma concentração final de 0,04 nM. Os compostos teste dão utilizados em concentrações entre 0,4 e 2 vezes o IC50 determinado para composto em relação à enzima. A fluorescência relativa é medida continuamente durante 30 minutos e a velocidade inicial é obtida a partir de cada curva de progresso. Os padrões de inibição e os valores de K± são determinados pela análise de representação de Dixon. 15 ΡΕ1601677

Compostos da Invenção têm valores de IC50S para a inibição da catepsina S humana inferiores a cerca de 100 nM descendo até cerca de 1 nM ou abaixo, preferencialmente cerca de 5 nM ou menos. Compostos preferidos são compostos como definido acima com R=R2 e.g. exemplo 4-8 tem um valor de IC50 no ensaio descrito acima de cerca de 9nM.

Compostos da invenção que têm efeitos de inibição dual, i.e. efeitos de inibição no ensaio da catepsina K e na catepsina S como descrito acima têm tipicamente IC50S para a inibição de catepsina K e a catepsina S humana inferior a cerca de 100 nM em ambos os ensaios, descendo até cerca de 1 nM ou menos em ambos os ensaios, preferencialmente cerca de 5 nM ou menos. Compostos preferidos com um efeito de inibição dual são compostos como definido acima com R=R6 e.g., exemplo 4-3 com um valor de IC50 na catepsina K humana de 8 nM e de 6 nM na catepsina S humana. Ou o exemplo 4-9 com um valor de IC50 na catepsina K humana de 16 nM e de 10 nM na catepsina S humana.

Tendo em vista a sua actividade como inibidor de catepsina K e/ou catepsina S, os compostos da invenção são particularmente úteis nos mamíferos como agentes para o tratamento e profilaxia de doenças e condições médicas envolvendo níveis elevados de catepsina K e/ou catepsina S. Estas doenças incluem doenças envolvendo infecções por organismos tal como pneumocystis carinii, trypsanoma cruzi, trypsanoma brucei, crithidia fusiculata, assim como doenças por parasitas tal como schistosomiasis e malária, tumores 16 ΡΕ1601677 (invasão tumoral e metástase tumoral), e outras doenças tal como leucodistrofia metacromática, distrofia muscular, amitrofia, dor neuropática, e.g. dor neuropática crónica, exemplifica por condições tal como neuropatia diabética, neuralgia pós-herpética, neuralgia trigeminal, polineuro-patia diabética dolorosa, dor após derrame cerebral (dor central), dor após amputação, dor mielopática ou radiculo-pática (e.g. estenose espinal, aracnoidite, flbrose epineural) , dor facial atípica e síndromas tal como causalgia (síndromas de dor regional complexos), perturbações auto-imunes, incluindo, mas não estando limitado a diabetes com início na juventude e esclerose múltipla, perturbações alérgicas, incluindo mas não estando limitado a, asma, e respostas imunes alogénicas, incluindo, mas não estando limitado a, rejeição de transplante de órgãos.

Em particular, a catepsina K foi implicada nas doenças de perda óssea excessiva, e assim os Compostos da Invenção podem ser utilizados para o tratamento e profilaxia de tais doenças, incluindo osteoporose, osteoporose de várias origens (e.g. juvenil, menopausa, pós-menopausa, pós-traumática, causada pela idade avançada ou por terapia com corticoesteróide ou inactividade), doenças das gengivas tal como gengivite e periodontite, doença de Paget, hipercalcemia e doença metabólica óssea. Os Compostos da Invenção também podem tratamento ou profilaxia da degradação excessiva da cartilagem ou da matriz, incluindo osteoartrite e artrite reumatóide assim como algumas doenças neoplásticas envolvendo a expressão de níveis 17 ΡΕ1601677 elevados de enzimas proteolíticas e degradação da matriz. Preferencialmente os inibidores de catepsina K são utilizados no tratamento de osteoporose e osteoartrite.

Em particular, a catepsina S foi implicada no tratamento e também na prevenção de dor neuropática, e.g., dor neuropática crónica, exemplifica por condições tal como neuropatia diabética, neuralgia pós-herpética, neuralgia trigeminal, polineuropatia diabética dolorosa, dor após derrame cerebral (dor central), dor após amputação, dor mielopática ou radiculopática (e.g. estenose espinal, aracnoidite, fibrose epineural), dor facial atípica e síndromas tal como causalgia (síndromas de dor regional complexos), osteoartrite e artrite reumatóide, perturbações auto-imunes, incluindo, mas não estando limitado a diabetes com início na juventude e esclerose múltipla, perturbações alérgicas, incluindo mas não estando limitado a, asma, e respostas imunes alogénicas, incluindo, mas não estando limitado a, rejeição de transplante de órgãos. Preferencialmente os inibidores de catepsina S são úteis no tratamento da dor neuropática, esclerose múltipla, osteoartrite e artrite reumatóide.

Inibidores duais podem assim ser implicados em doenças em que ambas as catepsinas desempenham um papel, e.g. dor neuropática, inflamação, artrite reumatóide, osteoartrite, osteoporose, tumores (em especial invasão tumoral e metástase tumoral), obesidade, doença coronária, aterosclerose (incluindo ruptura e destabilização da placa 18 ΡΕ1601677 aterosclerótica), doenças auto-imunes, esclerose múltipla, doenças respiratórias, doenças infecciosas e doenças mediadas imunologicamente (incluindo rejeição de transplantes), preferencialmente dor neuropática, artrite reumatóide e osteoartrite.

Os efeitos benéficos são avaliados em testes farmacológicos in vitro e in vivo geralmente conhecidos na técnica, e são aqui ilustrados. As propriedades citadas acima são demonstradas nos testes in vitro e in vivo, utilizando com vantagem mamíferos, e.g. ratazanas, ratos, cães, coelhos, macacos ou órgãos e tecidos isolados, assim como preparações de enzimas de mamíferos, quer natural quer preparadas e.g. por tecnologia recombinante. Os Compostos da Invenção podem ser aplicados in vitro na forma de soluções, e.g. preferencialmente soluções aquosas ou suspensões, e in vivo quer de modo entérico quer parenté-rico, vantajosamente de modo oral, e.g. como suspensão ou solução aquosa, ou em formulações sólidas em cápsulas ou comprimidos. A dosagem in vitro pode variar entre concentrações de cerca de 1CT5 molear e IO-9 molear. A dosagem in vivo pode variar, dependendo da via de administração, entre cerca de 0,1 e 100 mg/kg. A eficácia dos Compostos da Invenção para o tratamento da osteoporose pode ser determinada utilizando o modelo animal in vivo "OVX macaco cynomolegus". Este modelo é bem conhecido na técnica e é um modelo comum para validar um composto para a osteoporose (ver e.g. Jerome CP, 19 ΡΕ1601677

Peterson PE (2001) Bone; 29 (1):1-6). A eficácia dos Compostos da Invenção para o tratamento de dor inflamatória crónica ou neuropática pode ser determinada utilizando os modelos animais in vivo que se seguem.

Modelo da dor inflamatória crónica: A hiperalgesia mecânica induzida por Adjuvante Completo de Freund pode ser utilizada como um modelo para a dor inflamatória crónica (Stein, C. et al. Pharmacol. Biochem. Behav. (1988) 31:445-451). Neste modelo, habitualmente um rato Sprague-Dawley ou Wistar macho (200-250 g) recebem uma injecção intraplantar de 25 pL de adjuvante completo de Freund numa pata traseira. Uma inflamação marcada ocorre nessa pata traseira. São geralmente administrados fármacos para a avaliação da eficácia, 24 horas após o traumatismo inflamatório, quando se considera que a hiperalgesia mecânica está completamente estabelecida.

Modelos de dor neuropática crónica:

Dois modelos animais de dor neuropática crónica podem ser utilizados os quais envolvem alguma forma de dano dos nervos periféricos. No modelo de Seltzer (Seltzer et al. (1990) Dor 43:205-218) os ratos são anestesiados e uma pequena incisão é feita a meio da parte superior de uma coxa (habitualmente no lado esquerdo) para expor o nervo 20 ΡΕ1601677 ciático. O nervo é cuidadosamente limpo de tecidos conjuntivos exteriores num local próximo do trocanteriano distai até ao ponto em que o nervo do bíceps semitendinosus posterior se insere no nervo ciático comum. Uma sutura de seda 7-0 é inserida no nervo com uma mini-agulha de corte invertido, com uma curvatura de 3/8, e firmemente atado de modo que o dorsal 1/3 a ½ da espessura do nervo é mantido dentro da ligadura. 0 músculo e a pele são fechados com suturada e agrafados e a ferida é polvilhada com antibiótico em pó. Nos animais simulados o nervo ciático é exposto mas não ligado e a ferida é fechada tal como nos animais não simulados. No Modelo da constrição crónica do ferimento (CCI)(Bennett, G.J. e Xie, Y.K. Pain (1988) 33:87-107) os ratos são anestesiados e uma pequena incisão é feita a meio da parte superior de uma coxa (habitualmente no lado esquerdo) para expor o nervo ciático. O nervo é limpo de tecido conjuntivo exterior e quatro ligaduras de categute cromado 4/0 são atadas de modo frouxo à volta do nervo com aproximadamente 1 mm entre cada, de modo que as ligaduras só dificilmente constringem a superfície do nervo. A ferida é fechada com sutura e agrafos como descrito acima. Nos animas simulados o nervo ciático são é exposto mas não é ligado e as feridas são fechadas como nos animais não simulados.

Em contraste com os modelos Seltzer e CCI, o modelo Chung envolve a ligação do nervo espinal, (kim, S.O. and Chung, J.M. Pain (1992):50:355-363). Neste modelo, os ratos são anestesiados e colocados numa posição de pronação 21 ΡΕ1601677 e é feita uma incisão na parte esquerda da espinha dorsal ao nivel L4-S2. Uma dissecção profunda através do músculo dorsal e a separação do músculo da medula espinal tem lugar no nível L4-S2 irá revelar parte do nervo ciático uma vez que este se ramifica para formar os nervos espinais L4, L5 e L6. 0 processo transverso L6 é cuidadosamente removido com uma pequena pinça saca-bocado permitindo a visualização destes nervos espinais. 0 nervo espinal L5 é isolado e atado com força com uma sutura de seda 7-0. A ferida é fechada com uma única sutura no músculo (seda 6-0) e um ou dois agrafos a fechar a pele e é polvilhada com antibiótico em pó. Em animais simulados o nervo L5 é exposto como anteriormente mas não é ligado e a ferida é fechada como anteriormente.

Coeficiente comportamental

Em todos os modelos de dor crónica (inflamatória e neuropática) a hiperalgesia é estimada medindo o limiar de contracção da pata de ambas as patas traseiras a um estímulo de pressão crescente utilizando um Analgesymeter (Ugo-Basile, Milão). A alodinia mecânica é estimada medindo o limiar de contracção à aplicação de um estímulo mecânico nocivo aplicado com pelos de Frey à superfície planar de ambas as patas traseiras. Hiperalgesia térmica é estimada medindo a latência da contracção a um estímulo térmico nocivo aplicado na parte debaixo de cada parte traseira. Com todos os modelos, hiperalgesia e alodinia mecânicas e hiperalgesia térmica desenvolvem-se dentro de 1-3 dias a 22 ΡΕ1601677 seguir à cirurgia e persistem durante pelo menos 50 dias. Para os ensaios descritos acima, os fármacos podem ser aplicados antes ou depois da cirurgia para estimar os seus efeitos no desenvolvimento da hiperalgesia, em particular aproximadamente 14 dias a seguir à cirurgia, para determinar a sua capacidade para reverter a hiperalgesia estabelecida . A percentagem de reversão da hiperalgesia é calculada como se segue: „ _ limiar após dose - limiar antes da dose % reversão = --- x 100 limiar natural (" naive” ) - limiar antes da dose

Nas experiências aqui descritas, ratos Wistar (machos) são utilizados nos modelos de dor descritos acima. Os ratos pesavam aproximadamente 120-140 gramas na altura da cirurgia. Todas as cirurgias são levadas a cabo sob anestesia por inalação de enflurano/02. Em todos os casos a ferida é fechada após o procedimento e deixa-se o animal recuperar. Em todos os modelos de dor utilizados, após alguns dias em todos menos os animais operados nos simulados, desenvolve-se uma hiperalgesia e alodinia mecânica e térmica em que há uma diminuição do limiar da dor e um aumento do reflexo de contracção como resposta da pata traseira ao toque, pressão e estimulo térmico. Após a cirurgia os animais também apresentam alterações carac-terísticas na pata afectada. Na maior parte dos animais os dedos da pata traseira afectada são mantidos unidos e o pé 23 ΡΕ1601677 é ligeiramente virado para um dos lados; em alguns ratos os dedos são também encaracolados para baixo. 0 modo de andar dos animais ligados varia, mas coxear não é comum. Alguns ratos são observados a levantar a pata traseira afectada do chão da gaiola e a demonstrar uma extensão rígida pouco comum do membro traseiro quando segurado. Os ratos tendem a ser muito sensíveis ao toque e podem vocalizar. De qualquer modo a saúde geral e as condições dos ratos são boas.

Os compostos da invenção, também são indicados para a prevenção ou tratamento de doença coronária, aterosclerose (incluindo ruptura e destabilização da placa aterosclerótica) (ver e.g. Cathepsina F and S block HDL3-induced cholesterol efflux from macrophage cells, Lindstedt et al., 2003, Biochemical and Biophysical research Communications 312:1019-1024) doenças auto-imunes, doenças respiratórias e doenças mediadas imunologicamente (incluindo rejeição de transplante). A eficácia anti-artrite dos compostos da invenção para o tratamento de artrite reumatóide pode ser determinada utilizando modelos tal como ou semelhantes ao modelo do adjuvante de artrite em rato, como descrito previamente (R.E.Esser, et al. J. Rheumatology, 1993, 20, 1176). A eficácia dos compostos da invenção para o tratamento de aterosclerose pode ser determinada utilizando modelos tal como ou semelhantes ao modelo de meniscectomia lateral parcial em coelho, como descrito previamente (Co- 24 ΡΕ1601677 lombo et al. Art H. Rheum. 1993, 26, 875-886). A eficácia dos compostos no modelo pode ser quantificada utilizando métodos de pontuação histológica, como descrito previamente (0'Byrne et al. Inflamm Res 1995, 44, S117-S118). A eficácia dos compostos da invenção para o tratamento da osteoporose pode ser determinada utilizando um modelo animal tal como do rato ou espécies semelhantes que sofreram ovariectomia, e.g. coelho ou macaco, em que os compostos teste são administrados ao animal e a presença de marcadores de reabsorção óssea são medidos na urina ou no soro (e.g. como descrito em Osteoporos Int (1997) 7:539-543) .

Consequentemente noutros aspectos a invenção fornece:

Os compostos da invenção para ser utilizado como um fármaco; uma composição farmacêutica compreendendo um composto da invenção como um ingrediente activo; um método para tratar um paciente que sofra de ou seja susceptivel a uma doença ou condição médica em que catepsina K e/ou catepsina S está implicada, compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de um composto da invenção ao paciente, e a utilização de um composto da invenção para a preparação de um medicamento para o tratamento terapêutico ou profiláctico de uma doença ou condição médica em que a catepsina K e/ou a catepsina S está implicada. 25 ΡΕ1601677 A presente invenção relaciona-se com métodos de utilização de compostos da invenção e dos seus sais farma-ceuticamente aceitáveis, ou das suas composições farmacêuticas, em mamíferos para a inibição de catepsina K e/ou catepsina S, e para o tratamento de condições dependentes de catepsina K e/ou catepsina S, tais como as condições dependentes de catepsina K e/ou catepsina S, aqui descritas, e.g. inflamação, dor neuropática, osteoporose, artrite reumatóide e osteoartrite.

Numa forma de realização preferida da invenção, a presente invenção relaciona-se com um método para a inibição selectiva da actividade da catepsina K num mamífero que compreende a administração a um mamífero que dela necessite uma quantidade eficaz de um composto da invenção para inibir catepsina K.

Mais especificamente este relaciona-se com um método de tratar osteoporose, artrite reumatóide, osteoartrite, e inflamação (e outras doenças como identificado acima) em mamíferos compreendendo a administração a um mamífero que dele necessite uma quantidade eficaz correspondente de um composto da invenção.

Numa forma de realização particular da invenção, a presente invenção relaciona-se com um método de inibir selectivamente a actividade da catepsina S num mamífero que compreende a administração a um mamífero que dele necessite uma quantidade eficaz de um composto da invenção para 26 ΡΕ1601677 inibir catepsina K e catepsina S.

Mais especificamente este relaciona-se com um método de tratar dor neuropática (e outras doenças como identificado acima) em mamíferos compreendendo a administração a um mamífero que dele necessite uma quantidade eficaz correspondente de uma quantidade eficaz de um composto da invenção.

Numa forma de realização particular da invenção, a presente invenção relaciona-se com um método de inibir a actividade da catepsina K e da catepsina S num mamífero que compreende a administração a um mamífero que dele necessite uma quantidade eficaz de um composto da invenção para inibir catepsina K e catepsina S.

Mais especificamente isto relaciona-se com um método para tratar dor neuropática, osteoporose, artrite reumatóide, osteoartrite, e inflamação (e outras doenças como identificado acima) em mamíferos compreendendo a administração a um mamífero que dele necessite uma correspondente quantidade eficaz de um composto da invenção.

Pretende-se que os exemplos que se seguem ilustrem a invenção e não são para ser considerados como suas limitações. As temperaturas são dadas em graus Centígrados. Se não for mencionado noutro lado, todas as evaporações são levadas a cabo sob pressão reduzida, preferencialmente entre cerca de 15 e 100 mm Hg (= 20-133 mbar). A estrutura 27 ΡΕ1601677 dos produtos finais, intermediários e materiais de partida é confirmada por métodos analíticos habituais, e.g. microanálise e características espectroscópicas (e.g. EM, IV, RMN) . As abreviaturas utilizadas são as habituais na técnica.

Exemplos

Exemplo 1:

Exemplo 1-0: Preparação de 7-(2,2-Dimetil-propil)-6-[2-(2-hidroxi-etil)-1,3~dloxo~2, 8-diaza-espiro[4.5]dec~8~ ilmetil]-7H-plrrolo[2,3-d]pirimidino-2-carbinitrilo 0 u

''V P' ·· I m N»T l Jl·* õ

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O Okk O / V o ''ΛλΑ* A. Preparaçao de 8-Benzil-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-1,3-diona 28 ΡΕ1601677 A uma solução de l-benzil-piperidin-4-ona (75,1 g, 0,40 mole) em tolueno (400 mL), são adicionados à temperatura ambiente éster etílico do ácido ciano-acético (50,6 mL, 0,48 mole) e ácido acético (18,2 mL, 0,32 mole). A mistura reaccional é refluída durante 4 h, é tratada com água gelada e é extraída com éter dietílico. Os extractos combinados são lavados com H2O, solução aquosa saturada de cloreto de sódio e são secas sobre sulfato de sódio para dar éster etílico do ácido (l-benzil-piperidin-4-iledeno)-ciano-acético num rendimento quantitativo.

Rf=0,53 (n-hexano:AcOEt=l:1). 3H) ; 2H) ; 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,30-1,37 (m, 2,58 (dd, 2 H); 2,64 (dd, 2H); 2,79 (dd, 2H); 3,15 (dd, 3,55 (s, 2H); 4,23-4,32 (m, 2H); 7,21-7,36 (m, 5H). A uma solução de éster etílico do ácido (1- benzil-piperidin-4-iledeno)-ciano-acético (112,9 g, 0,40 mole) em EtOH (500 mL) e H20 (100 mL), cianeto de potássio (64,6 g, 0,99 mole) é adicionado à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada a 65°C durante 24 h. Após remoção do EtOH, adiciona-se H20 ao resíduo. A fase aquosa é extraída com éter dietílico. Os extractos combinados são lavados com H20 e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, são secos sobre sulfato de sódio e evaporados para dar 77, 7 g de l-benzil-4-cianometil-piperidino-4-carboni-trilo. 29 ΡΕ1601677

Rf=0,38 (n-hexano:AcOEt=l:1). 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ: 1,76-1,81 (m, 3H) ; 2,10-2,05 (m, 2H); 2,23-2,39 (m, 2H); 2,69 (s, 2H); 2,90- 2,94 (m, 2H); 3,56 (s, 2H); 7,21-7,38 (m, 5H). Ácido acético (56,8 mL e ácido sulfúrico (11,8 mL) são adicionados a l-benzil-4-cianometil-piperidino-4-carbonitrilo (27,2 g, 0,114 mmole) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada a 125°C durante 1 h, é arrefecida até à temperatura ambiente e adiciona-se solução de NaOHaq saturada para ajustar o pH a 6,0. A mistura é extraída com diclorometano. Os extractos combinados são lavados com H2O e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, são secos sobre sulfato de sódio e evaporados para dar 8-benzil-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-1,3-diona (rendimento dos três passos: 81,8%).

Rf=0,4 0 (CH2C12:MeOH=l0:1) . 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ: 1,52-1,57 (m, 2H) ; 2,02-2,17 (m, 4H) ; 2,59 (s, 2H) ; 2, 86-2,90 (m, 2H) ; 3,52 (s, 2H); 7,21-7,28 (m, 2H), 7,30-7,37 (m, 3H), 7, 92 (s ig, 1H) . B. Preparação do Éster terc-butílico do ácido 1,3-dioxo-2, 8-diaza-espiro[4.5]decano-8-carboxílico 30 ΡΕ1601677

A 8-benzi1-2,8-diaza-espiro[ 4.5]decano-1,3-diona (28,3 g, 0,11 mole) e Pd(OH)2 (8,5 g) num balão de 2L, EtOH (438 mL) e ácido acético (5,5 mL) são adicionados à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada sob H2 à temperatura ambiente durante 15 h. O catalisador é removido por filtração e o EtOH é removido por evaporação para dar 2,8-diaza-espiro[4.5]decano-1,3-diona num rendimento quantitativo. A uma suspensão de 2,8-diaza-espi-ro[4.5]decano-1,3-diona (4,2 g, 25,2 mmole) em diclorometa-no (60 mL) , NaOH IN (26 mL, 26 mmole) e di-t-butildicarbo-nato (61, g, 27,2 mmole) em diclorometano (20 mL) são adicionados à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada durante 15 h. Ácido cítrico a 10% é adicionado a uma mistura reaccional e o pH da mistura é ajustado a 5. Os extractos combinados são lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, são secos sobre sulfato de magnésio e são concentrados sob vácuo para dar um produto sólido, que é lavado com éter dietílico.

Rendimento: 51%

Rf-0,25 (n hexano:acetato de etilo=l:l). 31 ΡΕ1601677 ^-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,47 (s, 9H) ; 1,55- 1,70 (m, 2H) ; 1,95-2,05 (m, 2H) ; 2,62 (s, 2H) ; 2,96-3,02 (m, 2H); 4,02-4,04 (m, 2H); 8,14 (s lg, 1H).

Preparação do Éster terc-butílico do ácido 1,3-dioxo-2-[2-(tetra-hidro-piran-2-iloxi)-etil]-2,8-diaza-espiro[4.5]decano- 8 -carboxí lico A uma suspensão do éster terc-butilico do ácido 1.3- dioxo-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-8-carboxílico (1,0 g, 3,7 mmole) em DMF (12 mL), 2-(2-bromoetoxi)-tetra-hidro-2H-pirano (0,62 mL, 4,1 mmole) e carbonato de potássio (0,62 mL, 4,5 mmole) são adicionados à temperatura ambiente e a mistura é agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. A mistura reaccional é tratada com água e é extraída com acetato de etilo. Os extractos combinados são lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de sódio, filtrados. 0 solvente é evaporado para dar 1,6 g de éster terc-butí lico do ácido 1.3- dioxo-2-[2-(tetra-hidro-piran-2-iloxi)-etil]-2,8-diaza-espiro [ 4 . 5 ] decano-8-carboxílico bruto.

Preparação de cloridrato de 2-(2-hidroxi-etil)-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-l,3-diona 32 ΡΕ1601677 A uma solução de éster terc-butílico do ácido 1.3- dioxo-2-[2-(tetra-hidro-piran-2-iloxi)-etil]-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-8-carboxílico bruto (1,6 g) em acetato de etilo (1 mL) , EtOH (1,0 mL) e HCl/acetato de etilo 4N (4 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. O solvente é removido por evaporação para dar 1,06 g de cloridrato de 2-(2-hidroxi-etil)-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-l,3-diona bruto.

Preparação de 7-(2,2-Dimetil-propil)-6-[2-(2-hidroxi-etil)- 1.3- dioxo-2,8-diaza-espiro[4.5]dec-8-ilmetil]-7H-pirro-lo[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo

Dissolveu-se 6-bromometil-7-(2,2-dimetil-propil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo (1,3 g, 4,25 mmole) e cloridrato de 2-(2-hidroxi-etil)-2,8-diaza-espi-ro[4.5]decano-1,3-diona bruto (1,1 g, 4,25 mmole) em DMF (14 mL) e adicionado à solução carbonato de potássio (1,8 g, 12,8 mmole). A mistura reaccional é agitada à temperatura ambiente durante 12 h e tratada com H2O e extraída com acetato de etilo. Os extractos combinados são lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de sódio e evaporados. O produto bruto é purificado por HPLC de fase reversa e as fracções são recolhidas e evaporadas. É adicionado bicarbonato de sódio saturado e é neutralizado e a fase aquosa é extraída com acetato de etilo. Os extractos combinados são lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre 33 ΡΕ1601677 sulfato de magnésio e evaporados para dar 0,5 g do produto desejado com um rendimento de 27%.

Rf=0,10 (n-hexano:acetato de etilo=l:l). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,01 (s, 9H) ; 1,52- 1,60 (m, 2H) ; 2,08-2,14 (m, 4H) ; 2,60 (s, 2H) ; 2,84-2,88 (m, 2H) ; 3,71-3,78 (m, 4H) ; 3,81 (s, 2H) ; 4,34 (s, 2H) ; 6,58 (s, 1H); 8,89 (s, 1H).

Repetindo os procedimentos descritos acima utilizando materiais de partida e condições adequadas são obtidos os compostos de fórmula I que se seguem identificados na Tabela 1 abaixo. o

N

Fórmula I-(i)

Tabela 1

Exemplo Rx Rendi mento Rf (solvente) RMN (400 MHz, δ) 1-1 H 43 0,48 (só EtOAc) (CDC13) : 1,03 (s, 9H); 1,50-1,57 (m, 2H); 2,10-2,25 (m, 4H); 2,62 (s, 2H); 2,84-2,95 (m, 2 H); 3,83 (s, 2 H); 4,36 (s, 2 H); 6,60 (s, 1H) ; 7,74 (s lg, 1H) ; 8,91 (s, 1H) \ 40 0,20 (CDC13) : 1,01 (s, 9H); 34 ΡΕ1601677 1,48-1,52 (m, 2H) ; 2 1-2 (a-hexano: 2,16 (m, 4H) ; 2,55 (s, AcOEt=l:1) 2,84-2,87 (m, 2H) ; 3,00 3H); 3,81 (s, 2H) ; 4,35 2 H); 6,58 (s, 1H) ; 8,89 1H) , 11-2Η) ; (s, (s, (s, 35 ΡΕ1601677 30 0,50 (CDC13) : 0,88 (t, 3H); 1,01 (s, 9H); 1,51- 1,65 (m, 4H); 1-3 (a-hexano: 2,07-2,19 (m, 4H) ; 2,54 (s, AcOEt=l:1) 2H); 2,84-2,87 (m, 2H) ; 3,44-3,48 (m, 2H) ; 3,81 (s, 2 H); 4,35 (s, 2H) ; 6,58 (s, 1H); 8,89 (s, 1H) Λ 35 0,50 (CDCI3) : 1,02 (s, 9H); 1,37 (d, 6H); 1,47- 1,50 (m, 2H); 1-4 (a-hexano: 2,04-2,20 (m, 4H) ; 2,51 (s, AcOEt=l:1) 2H); 2,84-2,87 (m, 2H) ; 3,82 (s, 2H); 4,35 -4,37 (m, 3H); 6,61 (s, 1H) ; 8,89 (s, 1H) Ο^ι 42 0,20 (CDCI3) : 1,01 1,51-1,54 (m, (s, 9H); 2H); 2,07- 1-5 (n-hexano: 2,17 (m, 4H); 2,40 -2,50 (m, AcOEt=l:1) 4H); 2,52-2,55 (m, 4H) ; 2,83-2,86 (m, 2H) ; 3,57- 3,61 (m, 6 H); 3,81 (s, 2H); 4,35 (s, 2 H); 6,58 (s, 1H); 8,89 (s, 1H) 50 0,40 (CDCI3) : 1,00 (s, 9H); F' 1,46-1,49 (m, 2H) ; 2,04- 1-6 (a-hexano: 2,14 (m, 4H); 2,55 (s, 2H); AcOEt=l:1) 2,81-2,84 (m, 2H) ; 3,79 (s, 2H); 4,34 (s, 2H) ; 4,60 (s, 2 H); 6,57 (s, 1H) ; 6,95- 6,99 (m, 2 H); 7,31 -7,35 (m, 2H); 8,88 (s, 1H) 36 ΡΕ1601677 26 0,250 (CDC13) : 1,00 (s, 9H); JL^ 1,48-1,52 (m, 2H) ; 2,06- 1-7 (a-hexano: 2,16 (m, 4H); 2,57 (s, 2H); AcOEt=l:1) 2,82-2,86 (m, 2H) ; 3,80 (s, 2H); 4,34 (s, 2H) ; 4,68 (s, 2H); 6,57 (s, 1H) ; 6,75- 6,83 (m, 2 H); 7,26 -2,30 (m, 1H); 8,89 (s, 1H) O 19 0,40 (CDCI3) : 1,00 1,47-1,51 (m, (s, 9H); 2H); 2,07- 1-8 (a-hexano: 2,18 (m, 4H); 2,54 (s, 2H); AcOEt=l:1) 2,82-2,85 (m, 2H) ; 3,76 (s, 6 H); 3,80 (s, 2H) ; 4,35 (s, 2H); 6,38-6,40 (m, 2H) ; 6,58 (s, 1H); 7, 06 (d, 1H); 8,88 (s, 1H) i 23 0,40 (CDCI3) : 1,00 (s, 9H); Q-K^ } 1,45-1,49 (m, 2H) ; 2,06- 1-9 (a-hexano: 2,14 (m, 4H); 2,54 (m, 2H); AcOEt=l:1) 2,81-2,84 (m, 2H) ; 3,79 (s, 2H); 3,84 (s, 6H) ; 4,34 (s, 2 H) ; 4,57 (s, 2H) ; 6,57 (s, 1H); 6,77 (d, 1H) ; 6,91- 6,93 (m, 2 H) ; 8,88 (s, 1H)

Exemplo 2:

Exemplo 2-0: Preparação de 7- (2,2-Dimetil-propil)-6-(5-metoxi-2-oxo-l,2-di-hidro-l'H-espiro[indole-3, 4'-piperidina]-1-ilmetil)-7-pirrole[2,3d]pirimidino-2- carbonitrilo 37 ΡΕ1601677 Ο -

A. Preparaçao do 2-Fluoro-4-metoxi-l-nitro-benzeno 0

A uma solução de 3-fluoro-4-nitro-fenol (25,3 g, 0,16 mole) em acetona (160 mL), adicionou-se carbonato de potássio (41,7 g, 0,30 mole) e iodeto de metilo (20,0 mL, 0,32 mole) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada a 40 °C durante 3 h. Após arrefecer até à temperatura ambiente, é adicionado diclorometano à mistura reaccional, a gual é filtrada e evaporada. É adicionado diclorometano ao resíduo e a fase orgânica é lavada como H20 e solução aguosa saturada de cloreto se sódio, é seca sobre sulfato de sódio e o solvente é evaporado para dar 2-fluoro-4-metoxi-l-nitro-benzeno com um rendimento de 98%.

Rf=0,5 (n-hexano:acetato de etilo=10:l). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 3,90 (s, 3H) ; 6,71-6,79 (m, 2H); 8,06-8,13 (m, 1H). 38 ΡΕ1601677 B. Preparaçao de 5-Metoxi-l,3-di-hidro-indol-2-ona

H 0 composto em epígrafe foi preparado de acordo com o método descrito na patente (W00206228). A uma solução de 2-fluoro-4-metoxi-l-nitro-benzeno (84,1 g, 0,49 mole) e malonato de dimetilo (129,9 g, 0,98 mole) em DMF (490 mL) , é adicionado carbonato de potássio (135,9 g, 0,98 mole) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada a 70°C durante 12 h. A mistura reaccional é adicionada a tolueno (393 mL) e HC1 12N (123 mL) e é extraída com acetato de etilo. Os extractos combinados são lavados com H2O e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de sódio e o solvente é evaporado para dar éster dimetílico do ácido 2-(5-metoxi-2-nitro-fenilo)-malónico.

Rf=0,8 (n-hexano:AcOEt=l:1). ^-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 3,80 (s, 6H) ; 3,89 (s, 3H); 5,45 (s, 1H); 6,94-6,96 (m, 2H); 8,15-8,20 (m, 1H). A uma solução de éster dimetílico do ácido 2—(5— metoxi-2-nitro-fenilo)-malónico e Pd-C 5% (7,0 g) num balão 39 ΡΕ1601677 de 1 L, é adicionado MeOH (490 mL) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada sob H2 à temperatura ambiente durante 15 h. Os catalisadores são removidos por filtração e o MeOH é evaporado para dar éster metilico do ácido 5-metoxi-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indole-3-carboxilico.

Rf=0,10 (n-hexano:acetato de etilo=l:l). A uma solução de éster metilico do ácido 5-metoxi-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-indole-3-carboxílico em MeOH (320 mL) , é adicionado HC1 6N (255 mL, 1,92 mole) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada a 70°C durante 3 h. Após arrefecer até à temperatura ambiente, é adicionado KOH 8N (269 mL, 1,82 mole) à mistura reaccional. A mistura reaccional é agitada a 40°C durante 30 min. É adicionado HCL 12N (41 mL) à mistura reaccional. MeOH é evaporado e o pó branco é filtrado.

Rendimento: 59% (três passos).

Rf=0,25 (n-hexano:AcOEt=l:1). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 3,51 (s, 2H); 3,78 (s, 3H); 6,72-6,85 (m, 3H); 7,60 (s lg, 1H). C. Preparação de 1'-Benzil-5-metoxiespiro[indole-3,4'-piperidin]-2(1H)-ona 40 ΡΕ1601677

A uma solução de NaHMDS (solução 1M em THF) (800 mL, 0,8 mole), são adicionadas a solução de 5-metoxi-l, 3-di-hidro-indol-2-ona (26,1 g, 0,16 mole) em THF (160 mL) e benzil-bis-(2-cloro-etil)-amina (47,3 g, 0,18 mole em THF (176 mL) a -78°C. A mistura reaccional é agitada durante 15 h à temperatura ambiente, tratada com cloreto de amónio saturado e água gelada e extraida com acetato de etilo. Os extractos combinados são lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de sódio e o solvente é evaporado. É adicionado éter etílico ao resíduo para dar o pó, que é filtrado.

Rendimento: 39%.

Rf=0,25 (n-hexano:AcOEt=l:1). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,81- 1,99 (m, 2H) ; 2, 00- -2,04 (m, 2H) ; 2,66-2,72 (m, 2H) ; 2,90 -2,96 (m, 2H) ; 3,67 (s, 2H); 3, 77 (s, 3H) ; 6,71- -6, 81 (m, 3H) ; 7, 00 (s, 1H) ; 7,25-7,40 (m, , 5H); 8,32 (s lg, 1H) . D. Preparaçao de 5-Metoxi-2-oxo-l,2-di-hidro-l'H-espiro-[indole-3,4'-piperidina]-1'-carboxilato de terc-butilo ΡΕ1601677 41 Ο Λ νΟ / V" Γ Ν> * Ν Η Τ A 1'-benzil-5-metoxiespiro[indole-3,4'-pipe-ridin]-2 (1Η) -ona (20,0 g, 62 mmole) e Pd/C (2,0 g) num balão de 500 mL, são adicionados EtOH (120 mL) e ácido acético (5,5 mL) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada sob H2 à temperatura ambiente durante 15 h. Os catalizadores são removidos por filtração e o EtOH é evaporado.

Rf=0,20 (n-hexano:AcOEt=l:1). A uma suspensão de 5-metoxiespiro[indole-3,4'-piperidin]-2(1H)-ona (9,9 g, 45,2 mmole) em diclorometano (50 mL) , são adicionados NaOH IN (45,2 mL, 45,2 mmole) e a solução de di-t-butildicarbonato (9,3 g, 45,2 mmole) em diclorometano (50 mL) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada durante 1 h. A mistura reaccional é lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, é seca sobre sulfato de magnésio e é concentrada em vácuo. Cromatografia sobre sílica gel (eluente: n-hexano:acetato de etilo=2:l e 1:1) deu 10,6 g do produto desejado.

Rendimento: 68%.

Rf=0,50 (n-hexano:AcOEt=l:1). 42 ΡΕ1601677 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,51 (s, 9H) ; 1,76- 1,89 (m, 4H); 3,70-3,90 (m, 7H); 6,74-6,76 (m, 1H); 6,83- 6,88 (m, 2H); 8,83 (s lg, 1H). E. Preparação de Éster terc-butílico do ácido 1-[ 2-ciano-7-(2,2-dimetil-propil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ilmetil]-5-metoxi-2-oxo-l,2-di-hidro-l'H-espiro[indole-3,4'-piperidina]-1'carboxílico

A uma solução de 5-metoxi-2-oxo-l,2-di-hidro-l'H-espiro[indole-3,4'-piperidina]-1'carboxilato de terc-butilo (10,6 g, 31,9 mmole) em DMF (70 mL), é adicionado NaH (1,4 g, 35,1 mmole) à temperatura ambiente e a mistura é agitada à temperatura ambiente durante 30 min. É adicionado 6-bromometil-7-(2,2-dimetil-propil)-7.H-pirrolo[2,3-d]piri-midino-2-carbonitrilo (9,5 g, 31,9 mmole) a 0°C e a mistura reaccional é agitada durante 4 h à temperatura ambiente. A mistura reaccional é tratada com água gelada e extraída com acetato de etilo. Os extractos são lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, é seca sobre sulfato de magnésio. Cromatografia sobre sílica gel (eluente: n-hexano:acetato de etilo=10:l e 1:1) deu 12,1 g do composto 43 ΡΕ1601677 em epígrafe.

Rendimento: 68%

Rf=0,50 (n-hexano:acetato de etilo=l:l). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,09 (s, 9H) ; 1,50 (s, 9H) ; 1,83-1,86 (m, 4H) ; 3, 78-3, 84 (m, 7H) ; 4,2 2 (s, 2H) ; 5, 13 (s, 2H); 6,37 (s, 1H) ; 6, 62-6,65 (m, 1H); 6,72-6,75 (m, 2H); 7,26 (s, 1H ) ; 8 ,84 (s, 1H) . F. Preparação de 7-(2,2-Dimetil-propil)-6-(5-metoxi-2-oxo-1,2-di-hidro-l'H-espiro[indole-3,4'-piperidina]-1-ilmetil)-7-pirrolo[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo

A uma solução de éster terc-butílico do ácido 1-[2-ciano-7-(2,2-dimetil-propil)-7-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ilmetil]-5-metoxi-2-oxo-l,2-di-hidro-l'H-espiro[indole-3,4'-piperidina]-1'carboxírico (12,1 g, 21,6 mmole) em diclorometano (100 mL) é adicionado TFA (5 mL) a 0°C. A mistura reaccional é agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Após remoção do solvente, é adicionado bicarbonato de sódio ao resíduo e a mistura é extraída com acetato de 44 ΡΕ1601677 etilo. Os extractos combinados são lavados solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de magnésio e concentrados sob vácuo. É adicionado acetato de etilo ao resíduo, que é filtrado para dar um produto amarelo pálido, 7-(2,2-dimetil-propil)-6-(5-metoxi-2-oxo-l, 2-di-hidro-1'H-espiro[indole-3,4'-piperidina]-1-ilmetil)-7-pirrolo[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo.

Rendimento: 91%.

Rf=0,15 (CH2C12 :MeOH=10:1) . 1H-RMN (40 0 MHz, CDC13) δ: 1 , 09 (s, 9H) ; 1, 90- 1, 94 (m, 2H) ; 2, 52-2,61 (m, 2H); 3,44- -3,50 (m, 2H) ; 3,80 (s, 3H) ; 3,87 -3, 94 (m, 2H) ; 4,24 (s, 2H) ; 5,12 (s , 2H) ; 6,37 (s, 1H) ; 6, 67 (d, 1H) ; 6,77· -6,80 (m, 1H) ; 7, 03 (s, 1H) ; 8,86 (s, 1H) e

Repetindo os procedimentos descritos acima utilizando os materiais de partida e as condições adequadas são obtidos os compostos de fórmula I-(ii) que se seguem como se identifica na Tabela 2 abaixo:

Fórmula I(ii) 45 ΡΕ1601677

Tabela 2

Exemplo RI R2 Rendi- Rf RMN mento (%) (solvente) (400 MHz , δ) H H 80 0,25 (CDC13) : 1,10 (s, 9H); 1, 84- 1,89 (m, 4H) ; 2-1 (MeOH CH2C12=1 4) 3,07- 3,13 (m, 2H) ; 3,38- 3,44 (m, 2H) ; 4,24 (s, 2H); 5, 15 (s, 2H) ; 6,36 (s, 1H) ; 6,73 (d, 1H); 7, 10 (t, 1H) ; 7,22 (t, 1H) ; 7, 47 (d, 1H); 8,84 (s, 1H) H / 22 0,40 (CDCI3) : 1,10 (s, 9H); 1,90- 1,95 (m, 2H) ; 2-2 (MeOH ch2ci2 2,30- 2,50 (m, 2H) ; = 1:4) 2,65 (s lg, 3H); 2, 95- 3,35 (m, 4H); 4,24 (s, 2H) ; 5,14 (s, 2H) ; 6,36 (s, 1H); 6,74 (d, 1H) ; 7,13 (t, 1H) ; 7,22 (t, 1H); 7, 43 (d, 1H) ; 8,84 (s, 1H) H 14 0,40 (CDC1 3) : 0,97 (t, 3H); 1,10 (s, 9H); 1,90- 2-3 (MeOH ch2ci2 1,95 (m, 2H); 2,30- = 1:4) 2,50 (m, 2H); 2,95- 3,35 (m, 6H); 4,25 (s, 2H) ; 5,13 (s, 2H) ; 6, 75 (d, 1H); 7, 13 (t, 1H) ; 7,25 (t, 1H) ; 7, 46 (d, 1H); 8, 85 (s, 1H) ΡΕ1601677 46 - 47 - ΡΕ1601677 Η 1 27 0, 45 (CDC13) : 1,10 (s, 9H); 1,24 (d, 6H); 1,92- 2-4 (MeOH:CH2C12 2,00 (m, 2H); 2,15- = 1:4) 2,30 (m, 2H); 2,90- 3,13 (m, 3H); 3,15- 3,25 (m, 2H); 4,24 (s, 2H) ; 5, 14 (s, 2H); 6,35 (s, 1H); 6,72 (d, 1H) ; 7, 11 (t, 1H); 7,20 (t, 1H); 7,46 (d, 1H) ; 8,83 (s, 1H) Η 41 0, 45 (CDCI3) : 0,97 (t, 3H); 1, 10 (s, 9H); 1,65- 2-5 (MeOH:CH2C12 1, 71 (m, 2H); 1,95- = 1:4) 2,00 (m, 2H); 2,20- 2,25 (m, 2H); 2,60- 2,64 (m, 2H); 2,90- 3,00 (m, 2H); 3,05- 3,15 (m, 2H); 4,24 (s, 2H) ; 5, 14 (s, 2H); 6,36 (s, 1H); 6,74 (d, 1H) ; 7,11 (t, 1H); 7,20 (t, 1H); 7,75 (d, 1H) ; 8,84 (s, 1H) Η Γί ,αΑλ 33 0, 15 (CDC1 3 ) : 1,11 (s, 9H); 1,90- 3,10 (m, 16H); 2-6 (só AcOEt) 3,70- 3,80 (m, 4H); 4,25 (s, 2 H); 5,16 (s, 2H) ; 6,35 (s, 1H); 6,74 (d, 1H); 7,31 (t, 1H) ; 7,24 (t, 1H); 7, 45 (d, 1H); 8,85 (s, 1H) 48 ΡΕ1601677 Η 60 0,55 (CDC13) : 1,10 (s, 9H); 1,95 -2,05 (m, 4H) ; 2-7 (MeOH:CH2C12 2, 75 -2,85 (m, 2H) ; = 1:4) 2,90 -3,05 (m, 2H) ; 3,67 (s lg, 2H); 4 , 23 (s, 2H); 5,14 (s, 2H) ; 6,35 (s, 1H); 6,72 (d, 1H) ; 7,02 (t, 1H) ; 7, 09 (t, 1H); 7,21 (t, 1H) ; 7,35 (t, 2H) ; 7, 43 (d, 1H); 8,83 (s, 1H) Η ο Α 45 0,25 (CDCI3) : 1,10 (s, 9H); 1,55 -1,59 (m, 2H) ; 2-8 (só AcOEt) 1,86 -1,91 (m, 4H) ; 2,18 (s, 3H); 3,73 - 3,79 (m, 2H); 4,24 (s, 2H) ; 5,16 (s, 2H) ; 6,75 (d, 1H); 7, 12 (t, 1H) ; 7,24 (t, 1H) ; 7,30 (d, 1H); 8, 85 (s, 1H) 16 0,40 (CDCI3) : 1,09 (s, 9H); 1,93 -2,10 (m, 4H) ; 2-9 (MeOH:CH2C12 2,50 (s, 3H); 2,75 - = 1:4) 2,85 (m, 2H); 2,90 - 3,10 (m, 2H); 3,77 (s, 3H) ; 4,22 (s, 2H) ; 5, 12 (s, 2H); 6,36 (s, 1H) ; 6,62 (d, 1H) ; 6,73 (dd, 1H); 7, 02 (d, 1H); 8,84 (s, 1H) 49 ΡΕ1601677 37 0,23 (DMSO): 1,04 (s, 9H); 1, 07 (t, 3H); 1,24 (d, 2-10 (MeOH:CH2C12 6H) ; 1,82-1,90 (m, = 1:3) 4H) ; 2,44-2,53 (m, 2H) ; 2,60-2,69 (m, 2H) ; 2,78-2,87 (m, 2H) ; 3,72 (s, 3 H); 4,27 (s, 2H); 5,23 (s, 2H) ; 6,43 (s, 1H); 6,79 (d, 1H); 6,83 (d, 1H) ; 7,15 (s, 1H); 9,02 (s, 1H) s* H 43 0,10 (CDC13) : 1,10 (s, 9H) ; 1,90 -2,05 (m, 2H); 2-11 (n-hexano: 2,30 -2,50 (m, 2H); AcOEt=l:1) 3,45 -3,60 (m, 2H); 3,90 -4,05 (m, 2H); 4,26 (s, 2H); 5,15 (s, 2H) ; 6,36 (s, 1H); 6,72 (dd, 1H); 6,99 (td, 1H); 7,12 (dd, 1H) ; 8,90 (s, 1H) / 38 0,40 (CDCI3) : 1,09 (s, 9H) ; 1,92 -2,10 (m, 4H); 2-12 (MeOH:CH2C12 2,52 (m, 3H); 2,85- = 1:4) 2,90 (m, 2H); 3,00- 3,10 (m, 2H); 4,22 (s, 2H) ; 5,143 (s, 2H); 6,34 (s, 1H); 6,65 (dd, 1H); 6,92 (td, 1H) ; 7,16 (dd, 1H); 8, 85 (s, 1H) 50 ΡΕ1601677 27 0,38 (DMSO ) : 1 ,04 (s, 9H); 1, 07 (t, 3H); 1,82- 2-13 (MeOH:CH2C12 1,95 (m, 4H); 2,44- = 1:5) 2,53 (m, 2H); 2,60- 2,70 (m, 2H); 2,77- 2,87 (m, 2H); 4,27 (s, 2H) ; 5,26 (s, 2H); 6, 44 (s, 1H); 6,92- 6,95 (m, 1H); 7,04- 7, 09 (m, 1H); 7,47- 7, 49 (m, 1H); 9,01 (s, 1H)

Exemplo 3

Exemplo 3-0: Preparação de 7- (2, 2-Dimetil-propil)-6- (1,3-dioxo-2,8-diaza-espiro[4,5]dec-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo o

U A. Preparaçao de 8-Benzil-2,8-diaza-espiro[4,5]decano-1,3-diona

A uma solução de l-benzil-piperidin-4-ona (75,1 g, 0,40 mole) em tolueno (400 mL) sao adicionados éster 51 ΡΕ1601677 etílico do ácido ciano-acético (50,6 mL, 0,48 mole) e ácido acético (18,2 mL, 0,32 mole) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é refluída durante 4 h, e tratada com água gelada e extraída com éter dietílico. Os extractos combinados são lavados com H20, solução aquosa saturada de cloreto de sódio e secos sobre sulfato de sódio para dar éter etílico do ácido (l-benzil-piperidin-4-ilideno)-ciano-acético num rendimento quantitativo.

Rf=0,53 (n-hexano:AcOEt=l:1). ^-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,30-1,37 (m, 3H) ; 2,58 (dd, 2H); 2,64 (dd, 2H); 2,79 (dd, 2H); 3,15 (dd, 2H); 3,55 (s, 2 H); 4,23-4,31 (m, 2H); 7,21-7,36 (m, 5H) . A uma solução de éster etílico do ácido (1-benzil-piperidin-4-ilideno)-ciano-acético (112,9 g, 0,40 mole) em EtOH (500 mL) e H20 (100 mL) é adicionado cianeto de potássio (64,6 g, 0,99 mole) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada a 65°C durante 24 h. Após remoção do EtOH, é adicionada H20 ao resíduo. A fase aquosa é extraída com éter dietílico. Os extractos combinados sao lavados com H2 0 e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de sódio e 0 solvente é evaporado para dar 77, 7 g de l-benzil-4-cianometil-pipe-ridino-4-carbonitrilo.

Rf=0,38 (n-hexano:AcOEt=l:1). ΡΕ1601677 52 H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,76-1,81 (m, 2H) ; 2,10-2,05 (m, 2H); 2,23-2,39 (m, 2H); 2,69 (s, 2H); 2,90-2,94 (m, 2H); 3,56 (s, 2H); 7,21-7,38 (m, 5H). Ácido acético (56,8 mL) e ácido sulfúrico (11,8 mL) são adicionados a l-benzil-4-cianometil-piperidino-4-carbonitrilo (27,2 g, 0,114 mmole) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada a 125°C durante 1 h, é arrefecida até à temperatura ambiente e é adicionado NaOHaq saturado para ajustar o pH a 6,0. A mistura é extraída com diclorometano. Os extractos combinados são lavados com H20 e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de sódio e o solvente é evaporado para dar 8-benzil-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-1,3-diona (rendimento dos três passos: 81,8%)

Rf=0,40 (CH2C12 :MeOH=10:1) . H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,52-1,57 (m, 2H) ; 2,02-2,17 (m, 4H) ; 2,59 (S, 2H) ; 2, 86-2, 90 (Μ, 2H) ; 3,52 (s, 2H); 7,21-7,28 (m, 5H); 7,30-7,37 (m, 3H); 7,92 (s lg 1H) . B. Preparação do Éster terc-butilíco do ácido 1,3-dioxo 2,8-diaza-espiro[4.5]decano-carboxílico

53 ΡΕ1601677 A 8-benzi1-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-l,3-diona (28,3 g, 0,11 mole) e Pd(OH)2 (8,5 g) num balão de 2 L, adicionou-se EtOH (438 mL) e ácido acético (5,5 mL) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada sob H2 à temperatura ambiente durante 15 h. Os catalisadores são removidos por filtração e o EtOH é evaporado para dar 2,8-diaza-espiro[4.5]decano-1,3-diona num rendimento quantitativo. A uma suspensão de 2,8-diaza-espiro[4.5]decano-1,3-diona (4,2 g, 25,2 mmole) em diclorometano (60 mL), são adicionados NaOH IN (26 mL, 26 mmole) e di-t-butildicar-bonato (6,1 g, 27,2 mmole) em diclorometano (20 mL) à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada durante 15 h. Adiciona-se ácido cítrico 10% à mistura reaccional e o pH da mistura é ajustado a 5. Os extractos combinados são lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de magnésio e concentrados sob vácuo para dar um produto sólido, que foi filtrado com éter dietílico.

Rendimento: 51%.

Rf=0,25 (n-hexano:acetato de etilo=l:l). 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ: 1 , 47 (m, 9H); 1.55- 1.70 (m, 2H); 1,95-2, 05 (m, . 2H); 2,62 (s, 2H) ; 2,96-3,02 CM 4, 02-4, 04 (m, 2H) ; 8,14 (s lg, 1H) . 54 ΡΕ1601677 C. Preparação de Éster terc-butílico do ácido 2-[ 2-ciano-7-(2,2-dimetil-propil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ilmetil]-1,3-dioxo-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-8-carboxílico

6-Bromometil-7-(2,2-dimetil-propil)-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo (1,0 g, 3,25 mmole) e éster terc-butilico do ácido 1,3-dioxo-2,8-diaza-espiro[4.5]de-cano-8-carboxílico (0,82 g, 3,42 inmole) são dissolvidos em DMF (15 mL) e é adicionado carbonato de potássio (0,58 g, 4,23 mmole) à solução. A mistura reaccional é agitada à temperatura ambiente durante 15 h e é tratada com solução saturada de cloreto de amónio e é extraída com acetato de etilo. Os extractos combinados são lavados com H20, solução aquosa saturada de cloreto de sódio e secos sobre sulfato de magnésio. Cromatografia sobre sílica gel (eluente: n-hexano: acetato de etilo=2:l) deu 1,56 g do éster terc-butilico do ácido 2-[ 2-ciano-7-(2,2-dimetil-propil)-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ilmetil]-l,3-dioxo-2,8-diaza-espiro [ 4 . 5 ] decano-8-carboxí lico com um rendimento de 97%.

Rf=0,30 (n-hexano:acetato de etilo=l:l). 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 0,99 (s, 9H); 1,40 (s, 9H) ; 1,66-1,68 (m, 4H) ; 2, 89-2,93 (m, 2H) ; 3,85-3, 88 (m, 2H); 4,25 (s, 2H); 4,90 (s, 2H); 6,62 (s, 1H); 9,06 (s,lH). 55 ΡΕ1601677 D. Preparação de 7-(2,2-Dimetil-propil)-6-(1,3-dioxo-2, 8-diaza-espiro[4.5]dec-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidi-no-2-carbonitrilo

A uma solução do éster terc-butílico do ácido 2- [2-ciano-7-(2,2-dimetil-propil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ilmetil]-1, 3-dioxo-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-8-carbo-xilico (1,5 g, 3,1 mmole) em diclorometano (20 mL) , é adicionado TFA (5 mL) a 0°C. A mistura reaccional é agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Após remoção do solvente, é adicionado bicarbonato de sódio ao resíduo e a mistura é extraída com diclorometano. Os extractos combinados são lavados com H20, solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de magnésio e concentrados sob vácuo para dar o produto desejado, 7-(2,2-dimetil-propil)-6-(1,3-dioxo-2,8-diaza-espiro[4.5]dec-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo.

Rendimento: 91%

Rf=0,15 (CH2Cl2:MeOH=10:1) . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,03 (s, 9H) ; 1,44- 1,51 (m, 2H); 1,69 (s lg, 1H); 1, 95-2, 02 (m, 2H) ; 2,66 (2, 2H); 2,69-2, 72 (m, 2H) ; 3,11-3,17 (m, 2H) ; 4,34 (s, 2H) ; 4,91 (s, 2H); 6,59 (s, 1H); 8,90 (s, 1H). 56 ΡΕ1601677

Repetindo os procedimentos descritos acima utilizando os materiais de partida e as condições apropriadas os compostos de fórmula I-(iii) que se seguem são obtidos como identificado na Tabela 3 abaixo.

Fórmula I-(iii)

Tabela 3

Exemplo Rx Rendi- Rf RMN mento (%) (solvente) (400 MHz, δ) C-AjjA. 41 0,55 (CDC13) : 1,06-1,16 1,02 (s, 9H); (m, 3H); 1,31- 3-1 (MeOH:CH2C12 1,42 (m, 2H) ; 1,52-1,72 =1:10) (m, 6H); 1,92-2,02 (m, 3H) ; 2,64 (s, 2H); 2,98- 3,65 (m, 1H); 3,84-3,90 (m, 2H); 4,28-4,30 (m, 1H); 4,33 (s, 2H); 4,92 (s, 2H); 6,60 (s, 1H); 8,91 (s, 1H) G 46 0,50 (CDC13) : 1,02 (s, 9H) ; 1,53-1,56 (m, 2H); 1,97- 3-2 (MeOH:CH2C12 2,03 (m, 2 H); 2,65 (s, =1:10) 2H) ; 2,81 (d, 3H); 3,01- 3,08 (m, 2H); 4,33 (s, 2H); 4,52 -4,52 (m, 1H); 4,92 (s, 2 H); 6,60 (s, 1H); 8,90 (s, 1H) ΡΕ1601677 57

58 ΡΕ1601677

Exemplo 4:

Exemplo 4-0: Preparação de 6-(8-Acetil-2, 8-diaza espiro[4.5]dec-2-ilmetil)-7-(3,3-dimetil-butil)-7H pirrolo[2,3~d]pirimidino-2-carbonitrilo

Cloridrato de 8-metanossulfonil-2,8-diaza-espiro[4.5]decano

A uma solução de éster terc-butílico do ácido 2,8-diaza-espiro[4.5]decano-2-carboxiílico (1,12 g, 4,66 mole) em CH2CI2 (10 mL), são adicionados trietilamina ((3,88 mL) e cloreto de metanossulfonilo (1,08 mL, 14 mmole) a 0°C. A mistura reaccional é agitada de um dia para o outro, é tratada com água gelada e extraída com diclorometano. Os extractos combinados são lavados com H2O, solução aquosa saturada de cloreto de sódio e secos sobre sulfato de sódio para dar o éster terc-butílico do ácido 8-metanossulfonil-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-2-carboxílico (1,32 g) bruto.

Rf = 0 , 7 (CH2CI2 :MeOH=10 : 1) . 1H-RMN (400 MHz , CDC13) δ: 1,46 (s, 9H); 1,66-1,76 (m, 6H); 2,76-2,80 (m, 2H); 3,00 59 ΡΕ1601677 (s, 3H); 3,15-3,25 (m, 2H); 3,36-3,45 (m, 4H). A uma solução de éster terc-butílico do ácido 8-metanossulfonil-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-2-carboxílico (1,32 g) em acetato de etilo (10 mL) , adicionou-se uma solução de HC1 em acetato de etilo 1M (20 mL). Após agitar durante 2 h à temperatura ambiente, o solvente é evaporado para dar cloridrato de 8-metanossulfonil-2,8-diaza-espiro-[4.5]decano como um sólido.

Rf=0,05 (só acetato de etil) . 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d3) δ: 1,62-1,68 (m, 4H) ; 1, 78-1, 82 (m, 2H) ; 2,87 (s, 3H) ; 2,98-3,12 (m, 6H); 3,20-3,23 (m, 2H); 9,49 (s lg, 1H); 9,59 (s lg, 1H).

Cloridrato de 1-(2,8-diaza-espiro[4.5]dec-8-il)-etanona

A uma solução de éster terc-butilico do ácido 2,8-diaza-espiro[4.5]decano-2-carboxiílico (1,12 g, 4,66 mole) em diclorometano (10 mL) , são adicionados trietil-amina (3,88 mL) e anidrido acético (1,32 mL, 14 mmole) a 0°C. A mistura reaccional é agitada de um dia para o outro, é tratada com água gelada e extraída com diclorometano. Os extractos combinados são lavados com H20, solução aquosa saturada de cloreto de sódio e secos sobre sulfato de sódio 60 ΡΕ1601677 para dar o éster terc-butilico do ácido 8-acetil-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-2-carboxilico (1,34 g) bruto.

Rf=0,6 (CH2CI2 :MeOH=10 : 1) . 1H-RMN (400 MHz , CDCI3) δ: 1,46 (s, 9H); 1,50-1,56 (m, 4H); 1,72-1,76 (m, 2H); 2,03 (s, 2H); 2,22 (s, 2H); 3,16-3,49 (m, 6H). A uma solução de éster terc-butilico do ácido 8-acetil-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-2-carboxílico (1,34 g) em acetato de etilo (10 mL) , é adicionada uma solução de HC1 em acetato de etilo 1M (20 mL). Após agitar durante 2 h à temperatura ambiente, a mistura reaccional é evaporada para dar cloridrato de 1-(2,8-diaza-espiro[4.5]dec-8-il)-etanona como um sólido.

Rf=0,05 (só acetato de etil). ^-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1, 44-1,59 (m, 4H) ; 1, 76-1, 83 (m, 2H) ; 2,07 (s, 3H) ; 2, 96-3,06 (m, 2H) ; 3,16-3,24 (m, 4H) ; 3,38-3,56 (m, 2H); 9,55 (s lg, 1H); 9,67 (s lg, 1H).

Intermediário I

I r

J ô « A uma solução de 5-metoxi-l,3-di-hidro-indol-2-ona (1,5 g, 10 mmole) em THF (160 mL) , é adicionada uma solução de NaHMDS (solução 1 M em THF) (50 mL, 50 mmole) a 61 ΡΕ1601677 -78°C. Após agitar durante 30 min a -78°C, é adicionado etil-bis-(2-cloro-etil)-amina (47,3 g, 0,18 mole) em THF (176 mL) e a mistura reaccional é agitada durante 15h à temperatura ambiente, é tratada com NH4Claq sat. e água gelada e é extraída com acetato de etilo. Os extractos combinados são lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de sódio e o solvente é evaporado. É adicionado éter etílico ao resíduo para dar o pó, que é filtrado.

Rf=0, 10 (CH2C12 :MeOH=30 :1) . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,17 (t, 3H) ; 1,87- -2,02 (m, 4H); 2,60 (q, 2H) ; 2,69-2,74 (m, 2H) ; 2,90-2,96 (m, 2H); 6,78-6,82 (m, 1H) ; 6,88-6,93 (m, 1H) ; 7,07-7,11 (m, 1H); 8,04 (s lg, 1H)

Intermediário L

A uma solução de 5-metoxi-l,3-di-hidro-indol-2-ona (1,06 g, 6,49 mmole) em THF (13 mL), é adicionada uma solução de NaHMDS (solução 1 M em THF) (32,5 mL, 32,5 mmole) a -78°C. Após agitar durante 30 min a -78°C, é adicionado cloridrato de metil-bis-(2-cloro-etil)-amina (1,37 g, 7,14 mole) e a mistura reaccional é agitada durante 13,5h à temperatura ambiente, é tratada com NH4Claq sat. e água gelada e é extraída com acetato de etilo. Os 62 ΡΕ1601677 extractos orgânicos são lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de sódio e o solvente é evaporado. É adicionado éter etilico ao resíduo para dar o pó, que é filtrado. O \—1 o II M-l CC (CH2C12: MeOH=3 0:1) . 1H-RMN (400 MHz, DMSO- d6 ) δ: 1,66-1,78 (m, 4H); ; 2,28 (s, 3H); 2,44-2,47 (m, 2H); 2, 71-2,77 (m, 2H ); 3,70 (s, 3H) ; 6,74 (s, 2H); 7,01 (s, 1H) ; 10,15 (S lg, 1H) . Intermediário

A uma solução do intermediário (422 mg, 1,76 mole) em diclorometano (5 mL), são adicionados trietilamina (1,2 mL) e anidrido acético a 0°C. A mistura reaccional é agitada durante 2 h, e é tratada com água gelada e extraída com diclorometano. A fase orgânica combinada é lavada com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre MgSCd, e concentrada em vácuo. O resíduo é purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (n-hexa-no:AcOEt=5:1) para dar o produto.

Rf=0,6 (CH2Cl2:MeOH=10 :1) . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1, 79-1,95 (m, 4H) ; 2,20 (s, 3H) ; 3,68-3, 74 (m, 1H) ; 3,80-3,67 (m, 1H); 3,98-4,22 (m, 2H); 6,90-6,92 (m, 1H); 63 ΡΕ1601677 7, 03-7, 07 (m, 1H) ; 7,22-7,26 (m, 2H); 8,06 (s lg, 1H) . 6-(8-Acetil-2,8-aza-espiro[4.5]dec-2-ilmetil)-7-(3,3-dime-til-butil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo õ

A uma solução de 6-bromometil-7-(3,3-dimetil-butil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo (440 mg, 1,37 mmole) em DMF (5 mL), são adicionados cloridrato de 1-(2,8-diaza-espiro[4.5]dec-8-il)-etanona (300 mg, 1,37 mmole) e K2CO3 (568 mg, 4,11 mmole) e trietilamina (5 mL) . A mistura é agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto durante 11 h. A mistura reaccional é diluída com água e extraída com AcOEt (duas vezes). As fases orgânicas combinadas são lavadas com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre MgSC>4, e concentradas in vacuo. O resíduo é purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (n-hexano:AcOEt=l:1) para dar o produto.

Rf=0 ,30 (n-hexano:AcOEt= = 1:1) . 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ: 1,05 (s, 9H); 1,53- 1, 72 (m, 8H); 2, 07 (s, 3H) ; 2,40-2,48 (m, 2H) ; 2,60-2,69 (m, 2H) ; 3,35-3, 45 (m, 2H) ; 3,60-3,67 (m, 1H) ; 3,74-3,82 (m, 2H) ; 4,40-4, 44 (m, 2H) ; 6,49 (s, 1H) ; 8,87 (s, 1H) . ΡΕ1601677 — 6 4 —

Repetindo os procedimentos descritos acima utilizando materiais de partida e condições adequadas os composto de fórmula I-iv que se seguem são obtidos como se identifica na Tabela 4 abaixo.

Tabela 4

Fórmula I-iv

ΡΕ1601677 65

ΡΕ1601677 66

67 ΡΕ1601677

Exemplo 4-13: Preparação do Ester terc-butílico do ácido 3-[2-ciano-7- (2-ciclo-hexil-etil)-7H-pirrolo[2, 3-d]pirimidin-6-ilmetil]-4-oxo-l-fenil-l, 3, 8-triaza-espiro[4.5]decano-8-carboxílico. 68 ΡΕ1601677 Éster terc-butílico do ácido 4-oxo-l-fenil-1,3,8-triaza-espiro[4.5]decano-8-carboxílico

A uma suspensão de 1-fenil-1,3,8-triaza-espi-ro [4.5] decan-4-ona (1,0 g, 4,32 mmole) em diclorometano (10 mL), solução saturada de bicarbonato de sódio (10 mL) e di-t-butildicarbonato (1,04 g, 4,76 mmole) em diclorometano (5 mL) são adicionados à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada durante lh e é tratada com H20 e é extraída com acetato de etilo. Os extractos combinados são lavados com H20 e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de sódio e o solvente é evaporado para dar o éster terc-butílico do ácido 4-oxo-l-fenil-1,3,8-triaza-espiro[4.5]decano-8-carboxílico. Rendimento: 100%. Rf=0,90 (CH2C12 :MeOH=20:1) . 1H-RMN (400 MHz, CDC13) δ: 1,51 (s, 9H) ; 1,63-1,71 (m, 2H); 2,50- 2,65 (m, 2H); 3, 50- -3,65 (m, 2H) ; 3,97-4,10 (m, 2H); 4,23 (s, 2H) ; 6,74-6, , 76 (m, 2H) ; 6,84- 6,88 (m, 1H) ; 7 ,01 (s lg, 1H) ; 7,23-7,27 (m, 2H). Éster terc-butílico do ácido 3-[2-ciano-7-(2-ciclo-hexil-etil)-7H-pirrolo[2,3 —d]pirimidin-6-ilmetil]-4-oxo-l-fenil-1,3,8-triaza-espiro[4.5]decano-8-carboxílico. 69 ΡΕ1601677

A uma solução de 6-clorometil-7-(2-ciclo-hexil-etil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo (600 mg, 1,98 mmole) em DMF (7 mL), são adicionados éster terc-butí-lico do ácido 4-oxo-l-fenil-1,3,8-triaza-espiro[4.5]decano-8-carboxílico (657 mg, 1,98 mmole) e hidreto de sódio (101 mg, 2,53 mmole). A mistura é agitada à temperatura ambiente sob atmosfera de azoto durante 14 h. A mistura reaccional é diluída com água e extraída coma AcOEt (duas vezes) . As fases orgânica combinadas são lavadas com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre MgSCq, e são concentrados em vácuo. O resíduo é purificado por cro-matografia em coluna sobre sílica gel (n-hexano:AcOEt=l:1) para dar o produto com um rendimento de 29%.

Rf=0,25 (n-hexano:AcOEt=l:1). 1H-RMN (400 MHz, CDC1 3) δ: 0, 97- Oh 1—1 (m, 7H) ; 1, 50 ( s, 9H) ; 1, 56-1, 82 (m, 8H) ; 2,45 -2, 60 (m, 2H) ; 3,50 -3, 65 ( s, 2H) ; 4, O 1 14 (m, 2H) ; 4,33- -4, 36 (m, 2H) ; 4, 64 (s, , 2H) r 4, 87 (s, 2H) ; 6, 72- 6, 74 (m, 2H) ; 00 -6, 90 (m, 1H) ; 7, 20 -7, 24 (m , 2H) ; 8 , 94 (s, 1H) . 70 ΡΕ1601677

Exemplo 4-14: Sal do ácido trifluroacético 7-(2-ciclo-hexil-etil)-6-(4-oxo-l-fenil-1,3,8-triaza-espiro[4.5]decan-3-ilmetil)-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo.

A uma solução do éster terc-butílico do ácido 3-[2-ciano-7-(2-ciclo-hexil-etil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-6-ilmetil]-4-oxo-l-fenil-l,3,8-triaza-espiro[4.5]decano-8-carboxílico (340 mg, 0,56 mmole) em diclorometano (5 mL), é adicionado ácido trifluoroacétio (5 mL). Após agitar durante 1H à temperatura ambiente, o solvente é evaporado sob azoto para dar o sal do ácido trifluroacético 7-(2-ciclo-hexil-etil)-6-(4-oxo-l-fenil-l,3,8-triaza-espiro[4.5]decan-3-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo num rendimento quantitativo. !Λ Hi II O , 10 (CH2C12:1 deOH= 20 : D . -RMN ( 400 MHz, CDC1; 3) δ: 0,98- -1, 38 (m, 5H ); i, 65- -1,83 (m , 8h; ); 1,98 1 INJ O NO (m, 2H) ; 2,71- -2, 80 (m, 2H) ; 3, 53- -3,56 (m , 2h; ); 3,94 1 O INJ (m, 2H) i; 4,38- -4, 42 (m, 2H) i; 4, 91 (s, 2H) ; 6, 71 (s, 1H) ; GN CO CO -6, 9 0 (m, 2H ); 7, 01 -7, 04 (m, 1H) ; 7, INJ CO 1 32 (m, 2H) ; 7, 85 (s ig, ih; >; 8, 25 (s lg , 1H) ; í ),08 (s, 1H) . 71 ΡΕ1601677

Exemplo 4-15: 6-(8-Acetil-4-oxo-l-fenil-l,3,8-triaza-espi- ro[4.5]dec-3-ilmetil)-7-(2-clclo-hexil-etll)-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo.

A uma solução do sal do ácido trifluroacético 7-(2-ciclo-hexil-etil)-6-(4-oxo-l-fenil-1,3,8-triaza-espiro-[4.5]decan-3-ilmetil)-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidino-2-carbo-nitrilo (142 mg, 0,28 mole) em diclorometano (2 mL) , são adicionados trietilamina (395 pL) e ácido acético (54 pL, 0,57 mmole) a 0°C. A mistura reaccional é agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente, é tratada com água gelada e é extraída com acetato de etilo. Os extractos combinados são lavados com H2O, solução aquosa saturada de cloreto de sódio e são secos sobre sulfato de sódio. Cromatografia sobre sílica gel deu 90 mg 6-(8-acetil-4-oxo-1-fenil-1,3,8-triaza-espiro[4.5]dec-3-ilmetil)-7-(2-ciclo-hexil-etil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo com um rendimento de 58%.

Rf=0,3 0 (n-hexano:AcOEt=l:1) . 1H-RMN (400 MHz, CDCI3) δ: 0,97-1, 40 (m, 6H) ; 1,64-1,82 (m, 9H) ; 2,14 (s 72 ΡΕ1601677 3H) ; 2, 37- -2,44 (m, 2H) ; 3, 40-3, 48 (m, 1H); 3, 74-3 , 79 (m 1H) ; 3, 93- 4, 01 (m, 1H) ; 4, 34-4, 38 (m, 2H) ; 4, 56-4 , 66 (m 3H) ; 4, 87 (s, 2H) ; 6,61 (s , 1H) ; 6,74-6,76 (m, 2H) ; 6,91 6, 95 (m , 1H); 7,23- 7, 25 (m, 2H) ; 8,94 (s, 1H) • Exemplo 4- -16: 6- (8 -Acet il- 2, 8-diaza-espiro[4 .5]dec- 8-ilme til) - 7- (2-ciclo-hexil-etil) -7H-pirrolo [2, 3-d]p4-r^idino ^ carbonitrilo.

A uma solução de 6-bromometil-7-(2-ciclo-hexil-etil )-7H-pirrlio[2,3-d]pirimidino-2-carbonitrilo (290 mg, 0,84 mole) em DMF (1,7 mL) , são adicionados éster terc-butilico do ácido 2,8-diaza-espiro[4.5]decano-2carboxílico (201 mg, 0,84 mmole) e carbonato de potássio (138 mg, 1,0 mmole). A mistura é agitada à temperatura ambiente sub atmosfera de azoto durante 14 h. A mistura reaccional é diluída com água e extraída com AcOEt (duas vezes). A fase orgânica combinada é lavada com água e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, é seca sobre MgS04, e concentrada em vácuo. O resíduo é purificado por cromatografia em coluna com sílica (n-hexano:AcOEt=l:1) para dar o éster terc-butílico do ácido 8-[2-ciano-7-(2-ciclo-hexil-etil)-7H-pirrolo[2,3-d]piridin-6-ilmetil]-2,8-diaza-espiro[4.5]- 73 ΡΕ1601677 decano-2-carboxílico com um rendimento de 71%. RF=0,45 (n- hexano:AcOEt=l:1). A uma solução de éster terc-butílico do ácido 8-[2-ciano-7-(2-ciclo-hexil-etil)-7H-pirrolo[2,3-d]piridin-6-ilmetil]-2,8-diaza-espiro[4.5]decano-2-carboxilico (300 mg, 0,59 mmole) em diclorometano (5 mL) , é adicionado ácido trifluoroacético (3 mL). Após agitar durante 1,5 h à temperatura ambiente, o solvente é evaporado para dar o sal do ácido acético 7-(2-ciclo-hexil-etil)-6-(2,8-diaza-espiro-[4.5]dec-8-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]piridin-2-carbonitrilo num rendimento quantitativo.

Rf=0,10 (CH2C12 :MeOH=10:1) . A uma solução do sal do ácido acético 7-(2-ciclo-hexil-etil) -6-(2,8-diaza-espiro[4.5]dec-8-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]piridin-2-carbonitrilo em piridina (5 mL) , são adicionados anidrido acético (0,28 mL, 2,90 mmole) a 0°C. A mistura reaccional é agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente, é tratada com água gelada e extraída com acetato de etilo. Os extractos combinados são lavados com H20, solução aquosa saturada de cloreto de sódio e secos sobre sulfato de sódio. Cromatografia sobre sílica gel deu 79 mg de 6-(2-acetil-2,8-diaza-espiro[4.5]dec-8-ilmetil)-7-(2-ciclo-hexil-etil)-7H-pirrolo[2,3-d]piridin-2-carbonitrilo com 30% de rendimento (3 passos).

Rf=0,5 (n-hexano:AcOEt=l:1). 1H-RMN (400 MHz, 74 ΡΕ1601677 CDC13) δ: 1,00-1,84 (m, 17H); 2,04 (s, 3H) ; 2,33-2,56 (m, 4H) ; 2,7 9 (dd, 2H) ; 3,25-3,35 (m, 2H) ; 3,47- -3,53 (m, 2H); 3,66-3,69 (m, 2H) ; 4,38-4,43 (m, 2H) ; 6,49 (s, 1H); 8,87 (s, 1H) .

Lisboa, 27 de Setembro de 2006

Claims (14)

1. ΡΕ1601677 1 REIVINDICAÇÕES ou 1. Composto de fórmula I, ou um seu sal éster farmaceuticamente aceitável:

   fórmula I em que E é um radical de fórmula a ou fórmula b GO—H \ 4' m D A—K \ fórmula a

   fórmula b em que A é CH2, CH2-CH2 ou C=0;

   B é CH2, C=0 ou 2 ΡΕ1601677 D é CH2, ou C=0; G é CH2, CH2C=0 ou CH2-CH2; J é CH2, C=0 ou CH2-CH2; L é H, OCH3, halo, ou alcoxi inferior; M é CH2 ou NH; Q é H, alquilo inferior, alquilo inferior substituído com hidroxi, aril-alquilo inferior opcionalmente substituído, alquil inferior-sulfonilo, aril carbocíclico-alquilo inferior, aril carbocíclico-alquilo inferior substituído com alcoxi inferior, aril carbociclico-alquilo inferior substituído com halo, alquilo inferior substituído com N-heterociclo, arilo carbocíclico substituído com alcoxi inferior, aminocarbonilo, cicloalquil-aminocar-bonilo, alquil inferior-carbonilo substituído com N-heterociclo, aril carbocíclico-alquilo inferior substituído com halo, alcoxi inferior-carbonilo, ou alquil inferior-carbonilo; e R é alquilo inferior, para-clorofeniletilo, ciclo-hexiletilo, dimetilbutilo, difluorociclo-hexiletilo, ciclopentiletilo ou ciclo-heptiletilo, em que "alquilo inferior" contém 1-6 átomos de carbono, "alquilo inferior substituído com halo" é C1-C7 3 ΡΕ1601677 alquilo substituído com até 6 átomos de halo, "alcoxi inferior" contém 1-6 átomos de carbono, "alquilo carbonilo" inferior refere-se a um radical -C(0)Ra, em que Ra é C1-C6 alquilo.
2. 2. Composto de fórmula I — (i) ou um seu sal ou éster farmaceuticamente aplicável

   fórmula I-(i) em que Q-i é H, alquilo inferior, alquilo inferior substituído com hidroxi, alquilo inferior substituído com N-heterociclo, alquilo inferior mono- ou di-substituído, aril carbocíclico-alquilo inferior substituído com alcoxi inferior; e "inferior" e R são como definido na reivindicação 1.
3. 3. Composto de fórmula I-(ii) ou um seu sal ou éster farmaceuticamente aplicável 4 ΡΕ1601677

   fórmula I-(ii) em que Q-ii é H, alquilo inferior, alquilo inferior substituído com N-heterociclo, aril carbocíclico-alquilo inferior substituído por halo, alquil inferior-carbonilo arilo e "inferior" e L e R são como definidos na reivindicação 1.
4. 4. Composto de fórmula I-(iii) ou um seu sal ou éster farmaceuticamente aplicável G

   \_ ,·····>.. / R fórmula I-(iii) em que 5 ΡΕ1601677 B-iii é CH2; G-iii é CH2CH2; J-iii é CH2CH2; Q-iii é H, cicloalquil-aminocarbonilo, amino-carbonilo, arilo carbocíclico substituído com alcoxi inferior, alquil inferior-carbonilo, aril carbocíclico-alquilo inferior ou alquilo inferior substituído com N-heterociclo; e "inferior" e R são como definido na reivindicação 1.
5. 5. Composto das reivindicações 1,2 ou 3, em que R é RI que é alquilo inferior.
6. 6. Composto das reivindicações 1,2 ou 3, em que R é R2 que é para-ciclofenilhetilo, ciclo-hexiletilo, dimetilbutilo, difluorociclo-hexiletilo, ciclopenteniletilo ou ciclo-heptiletilo.
7. 7. Composto das reivindicações 1,2 ou 3, em que R é R5 que é 2,2-dimetil-propilo.
8. Composto das reivindicações 1,2 ou 3, em que 6 ΡΕ1601677 R é R5 que é 3,3-dimetil-butilo.
9. 9. Composto de fórmula I-(iv) ou um seu sal ou éster farmaceuticamente aceitável

   fórmula I-(iv) em que R3 é (8-alquil inferior-carbonil)-2,8-diaza-espiro[4.5]dec-2-ilmetilo, (8-alquil inferior-sulfonil)-2,8-diaza-espiro[4.5]dec-2-ilmetilo, (8-aril-alquil inferior) -2,8-diaza-espiro[4.5]dec-2-ilmetilo,

   f O , V ( \ % f \ f Í--H \ \

   ϊ ou R4 é para-clorofenilmetilo, ciclo-hexilmetilo, dimetilpropilo, difluorociclo-hexilmetilo, ciclopentilme-tilo ou ciclo-heptilmetilo; e "inferior" e Q sao como definido na reivindicação 1.
10. 10. Composto seleccionado de qualquer um dos 7 ΡΕ1601677 Exemplos 1 a 4 ou um seu sal ou éster f armaceuticamente aceitável.
11. 11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-8 para ser utilizado como um fármaco.
12. 12. Composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-8 como um ingrediente activo.
13. 13. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-8 para a preparação de um medicamento para o tratamento terapêutico ou profilático de uma doença ou condição médica em que a catepsina K e/ou catepsina S está implicada.
14. 14. Processo para a preparação de um composto da reivindicação 1 compreendendo um composto de acoplamento de fórmula II / J· D / A““N V"'\ OH fórmula II em que Q é como definido na reivindicação 1, com um composto de fórmula m ΡΕ1601677 'frjp_____.x» A wtljí

    / R N

    em reivindicação base livre, aceitável. Lisboa, 27 de fórmula III que X é um halo e R é como definido na 1; e recuperando o composto resultante numa ou num seu sal ou éster f armaceut icamente Setembro de 2006