PL230593B1 - Sposob wytwarzania nalewki alkoholowej na bazie poroza jelenia szlachetnego (cervus elaphus) - Google Patents

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nalewki alkoholowej na bazie rosnącego poroża jelenia szlachetnego (cervus elaphus). Nalewka otrzymana zastrzeganym sposobem charakteryzuje się wysoką zawartością aktywnych biologicznie substancji, znajduje zastosowanie w leczeniu ogólnego osłabienia, przeziębienia, wyczerpania, depresji, reuma toidalnego zapalenia stawów, impotencji, zwiększa odporność i podnosi ogólną kondycję organizmu.

Sposób wytwarzania biologicznie aktywnego produktu z surowego poroża renifera znany z rosyjskiego opisu patentowego nr RU2077331, polega na mechanicznym rozdrabnianiu suchego surowca do wielkości cząstek od 150 do 400 mm, po czym wieloetapowej ekstrakcji w temperaturze pokojowej. We wstępnym etapie ekstrakcję prowadzi w 70% etanolu przez 72 godziny, po czym ekstrakt zlewa się, w tym etapie ilość alkoholu do suro wca wynosi 6:1, po czym w 60% alkoholu przez 48 godzin, w tym etapie ilość alkoholu do surowca wynosi 4:1, a następnie surowiec traktuje się 50% alkoholem przez 24 godziny i ponownie ekstrakt zlewa się, w tym etapie ilość alkoholu do surowca wynosi 2:1, następnie łączy się i miesza wszystkie ekstrakty, zakwasza kwasem octowym do pH 4,7, schładza do temperatury od minus 15°C do minus 20°C, a chłodzony ekstrakt filtruje.

Sposób wytwarzania biologicznie aktywnego koncentratu z poroża jelenia znany z rosyjskiego opisu patentowego nr RU2461384, polega na tym, że rogi jelenia miele się do wielkości cząstek 100 mikronów i poddaje hydrolizie enzymatycznej, następnie ekstrakcję i hydrolizę enzymatyczną prowadzi się w dwóch etapach, w pierwszym etapie hydrolizę enzymatyczną prowadzi się w obecności enzymu pepsyny w ilości 2% wagowych dodanego do mieszaniny poroża w wodzie o stosunku 1:3, przez 4 godziny w temperaturze 40°C, po czym odwirowuje się i filtruje hydrolizat, a w drugim etapie przeprowadza się enzymatyczną fermentację hydrolizatu uzyskanego w pierwszym etapie, przy czym fermentację prowadzi się w obecności enzymu papainy w ilości 30 tysięcy jednostek ze wskaźnikiem 2% dodanego do mieszaniny poroża w wodzie o stosunku 1:1,5 do 4 godzin w temperaturze 40°C, a uzyskany ekstrakt poddaje się po odwirowaniu i filtracji po drugim etapie fermentacji rozcieńcza się wodą do stosunku 1:5 oraz podgrzewa w temperaturze 95-98°C przez 3 godziny, a następnie końcowy produkt odwirowuje się, filtruje i suszy odcieku w temperaturze poniżej 50°C i przy ciśnieniu 0,9 atm do zawartości wilgoci 4-5%.

Zgodnie ze znanymi ze stosowania sposobami wytwarzania ekstraktu z poroża jelenia, poroże jest homogenizowane, a składniki biologicznie aktywne otrzymuje się w procesie ekstrakcji przy użyciu wody lub alkoholu, filtracji, wirowania, liofilizacji i sproszkowania. Często w procesie stosuje się wysoką temperaturę podczas procesu wstępnej konserwacji i oddzielenia skóry od reszty poroża, suszenia, ekstrakcji i proszkowania. Stosowane procedury powodują znaczne obniżenie zawartości substancji aktywnych oraz rozkład białek pod wpływem temperatury. Najczęściej poroże pozyskuje się w 8 tygodniu wzrostu, wielokrotnie płucze, myje, pasteryzuje lub wstępnie konserwuje poprzez gotowanie, następnie poroże suszy się poprzez odwadniane w podciśnieniu, schładza i miele na proszek lub zamraża, bywa też poddawane działaniu mikrofal i podczerwieni. Często po pozyskaniu poroży zamraża się je i jest to naturalny proces jego przechowywania i konserwacji lub stan zamrożenia wykorzystywany jest w technologii jego mielenia. Ostatecznie w postaci sproszkowanej (kapsułki), tabletki lub wyciągi dociera do punktów sprzedaży. Wysoka temperatura oraz duże cząsteczki sproszkowanego poroża wpływają negatywnie na aktywność i przyswajalność substancji aktywnych. Ponadto wiele substancji zawartych w porożu jest słabo rozpuszczalnych w wodzie. W tym celu stosuje się ekstrakcję alkoholem na przykład dodając etanol do zhomogenizowanego lub sproszkowanego poroża, co znacznie zwiększa zawartość m.in. białek w produkcie końcowym. Opisane procedury są długotrwałe i kosztowne.

Istota sposobu, według wynalazku, polega na tym, że jałowe pozyskane fragmenty szczytowej części rosnącego poroża jelenia szlachetnego pomiędzy 50 a 80 dniem wzros tu, korzystnie w 60 dniu, o długości od 20 cm do 50 cm, czyści się poprzez mechaniczne usunięcie welwetu, następnie oczyszczone fragmenty poroża przemywa się 0,4% kwasem bornym, a umyte płucze w bieżącej wodzie, po czym fragmenty rozdrabnia się mechanicznie, korzystnie miele do konsystencji mielonego mięsa. Tak przygotowaną masę poddaje się kilkutygodniowej ekstrakcji za pomocą alkoholu etylowego o stężeniu od 40% do 60%, w ilości 5 części alkoholu na 1 część zmielonej masy, przy czym podczas ekstrakcji mieszaninę wytrząsa się co kilka dni i przechowuje się w ciem

PL 230 593 B1 nym i chłodnym miejscu, po ekstrakcji mieszaninę cedzi się na sitach i odwirowuje w wirówce o wydajności 600 g/5 min, otrzymany supernatant ponownie filtruje się i rozlewa do ciemnych szklanych naczyń.

Ujawniono zastosowanie nalewki alkoholowej na bazie poroża jelenia szlachetnego, jako leku przeznaczonego do co najmniej jednej z poniższych aktywności: zwiększania libido, stymulacji wzrostu, immunostymulacji, stymulacji pracy mięśni czynnikiem IG F1, przyspieszania rekonwalescencji, immunosupresji, przeciw osteoporozie, przywraca prawidłowe funkcjonowanie stawów, hamuje wydzielanie prostaglandyn - działa przeciwzapalnie, łagodzi stres, reguluje funkcję przysadki, podwzgórza oraz produkcję neurotransmiterów w szczególności serotoniny i dopaminy, wzmacnia układ nerwowy, profilaktycznie przeciw chorobie wieńcowej, udarom i anemii, w zaburzeniach seksualnych, impotencji, podnosi poziom testosteronu w osoczu krwi u mężczyzn, a także działa odmładzająco, do regulacji metabolizmu, proliferacji komórek, przyspieszania przemiany materii i regeneracji tkanek zwłaszcza podczas gojenia ran.

Ujawniono zastosowanie nalewki alkoholowej na bazie poroża jelenia szlachetnego, do wytwarzania produktów kosmetycznych przeznaczonych do pielęgnacji skóry.

Nalewka alkoholowa na bazie poroża jelenia szlachetnego (Cervus elaphus) wytworzona sposobem, według wynalazku, z fragmentów świeżo pobranych części rosnącego poroża, charakteryzuje się wysoką zawartością substancji aktywnych biologicznie, w tym peptydów o małej i dużej masie molekularnej. Zaletą wynalazku jest jak najszybsze pozyskanie rosnącego fragmentu poroża jelenia, bez obcinania całości i narażania zwierzęcia na stres. Obserwacje zwierzęcia pokazują, że w miejscu pobrania dochodzi do szybkiej regeneracji.

Przedmiot wynalazku objaśniony jest w przykładzie wytwarzania nalewki alkoholowej na bazie rosnącego poroża jelenia szlachetnego.

P r z y k ł a d 1

Sposób wytwarzania nalewki alkoholowej na bazie poroża jelenia szlachetnego (Cervus elaphus) polega na tym, że jałowe pozyskane fragmenty szczytowej części rosnącego poroża jelenia szlachetnego długości od 20 cm do 50 cm, pobrane w 60 dniu wzrostu, w narkozie przeprowadzonej systemem zdalnej iniekcji, czyści się poprzez mechaniczne usunięcie welwetu, następnie oczyszczone fragmenty poroża przemywa się 0,4% kwasem bornym w celu odkażenia i pozbycia się zanieczyszczeń, a umyte płucze w bieżącej wodzie. Po czym fragmenty rozdrabnia się mechanicznie, korzystnie miele do konsys tencji mielonego mięsa, a tak przygotowaną masę poddaje się kilkutygodniowej ekstrakcji za pomocą alkoholu etylowego o stężeniu 50%, w ilości 5 części alkoholu na 1 część zmielonej masy, przy czym mieszaninę podczas ekstrakcji przechowuje się w ciemnym i chłodnym miejscu. Mieszaninę podczas ekstrakcji wytrząsa się co kilka dni. Po ekstrakcji mieszaninę cedzi się na sitach i odwirowuje w wirówce o wydajności 600 g/5 min, otrzymany supernatant ponownie filtruje się i rozlewa do ciemnych szklanych naczyń.

P r z y k ł a d 2

Sposób wytwarzania nalewki alkoholowej na bazie poroża jelenia szlachetnego (Cervus elaphus) przebiega jak w przykładzie pierwszym z tą różnicą, że jałowe pozyskane fragmenty szczytowej części rosnącego poroża jelenia szlachetnego długości od 20 cm do 50 cm, pobiera się w 50 dniu wzrostu, przygotowaną masę poddaje się kilkutygodniowej ekstrakcji za pomocą alkoholu etylowego o stężeniu 40%, a otrzymany supernatant ponownie filtruje się na filtrach bibułowych i rozlewa do ciemnych szklanych butelek o pojemności 50 ml.

P r z y k ł a d 3

Sposób wytwarzania nalewki alkoholowej na bazie poroża jelenia szlachetnego (Cervus elaphus) przebiega jak w przykładzie pierwszym z tą różnicą, że jałowe pozyskane fragmenty szczytowej części rosnącego poroża jelenia szlachetnego długości od 20 cm do 50 cm, pobiera się w 80 dniu wzrostu, a przygotowaną masę poddaje się kilkutygodniowej ekstrakcji za pomocą alkoholu etylowego o stężeniu 60%.

Otrzymaną nalewkę alkoholową na bazie poroża jelenia szlachetnego poddan o analizie proteomicznej, w wyniku której stwierdzono, że stężenie białka wyznaczone metodą Bradforda wobec krzywej standardowej, sporządzonej z użyciem albuminy surowiczej, w analizowan ej nalewce wynosi 1,05 mg/ml. Ponadto analiza nalewki metodą elektroforezy w żelu poliakrylamidowym barwionym błękitem Coomassiego w warunkach denaturujących w obecności SDS, wykazała że nalewka jest heterogenna i zawiera od 14 do 50 różnych białek, wielkość białek zawiera się pomiędzy 5kDa

PL 230 593 Β1 a 250kDa, a dominującym procentowo (powyżej 90%) jest albumina surowicza. Mapowanie peptydowe białek zostało przeprowadzone w celu identyfikacji białek. Po analizie elektroforetycznej, z żelu wycięte zostały fragmenty odpowiadające przedziałom mas cząsteczkowych w zakresie od 10 do 100 kDa. Po ekstrakcji, białka zostały poddane ograniczonej proteolizie za pomocą trypsyny, odsolone na mikrokolumienkach C18 i po zmieszaniu z matrycą (α-CHCA) zanalizowane w spektrometrze masowym typu MALDI-TOF w trybie MS i MS/MS w celu uzyskania szczegółowych informacji o składzie masowym poszczególnych fragmentów. Analizator masy mierzy masę cząsteczkową peptydów, dzięki czemu powstaje „masowy odcisk palca” peptydów (ang. Peptide Mass Fingerprinf), Poniżej zamieszczona jest tabela zawierająca zidentyfikowane w nalewce białka pochodzące z przeszukania łącznie baz MASCOT i ProteinPilot.

1	Pełna nazwa białka	Pochodzenie
Serotransferrin (Siderophilin)	Sus scrofa
2	Interleukin-6 receptor subunit alpha	Sus scrofa domesticus
3	Erythronate-4-phosphate dehydrogenase	Aeromonas salmonicida
4	Thiamine biosynthesis protein thiC	Anaplasma phagocytophilum
5	Serum albumin	Ovis aries
6	Serum albumin	Canis familiaris
7	Hemoglobin cathodic subunit beta	Anguilla anguilla
S	Hemoglobin subunit beta-A	Bos javanicus
9	Hemoglobin subunit beta	Sus scrofa

Wyniki powtórzonego badania na zawartość białek z trawieniem trypsyną i analizą proteomiczną po 5 i 20 godzinach i dla zagęszczonej nalewki, przedstawia tabela zamieszczona poniżej.

PL 230 593 Β1

	Pełna nazwa białka
1	50S ribosomal protein L28
2	DNA replication licensing factor mcm5
3	Erythronate-4-phosphate dehydrogenase
4	Hemoglobin fetal subunit beta
5	Hemoglobin subunit alpha-1/2
6	Hemoglobin subunit beta-1
7	Heparin-binding growth factor 1 (HBGF-laFGF)
8	lnterleukin-6 receptor subunit alpha (IL-6R-alpha)
9	Lactotransferrin (Lactoferrin)
10	Myosin heavy chain, non-muscle (Myosin II, Non-muscle MHC Mucin-19, MUC-19)
11	N-(5'-phosphoribosyl)anthranilate isomerase
12	Platelet glycoprotein Ib alpha chain (GP-Ib alpha, Glycocalicin)
13	Putative ankyrin repeat protein FPV162
14	Serotransferrin (Transferrin, Siderophilin, Beta-1 metal-binding globulin)
15	Serum albumin
16	Shikimate dehydrogenase
17	tRNA undine 5-carboxymethyiaminomethyl modification enzyme mnmG (Glucose-inhibited division protein A)
18	Tumor necrosis factor ligand supcrfamily member 10 (TNF-related apoptosisinducing ligand, Apo-2 ligand, TRAIL)
19	Virulence factor-related M protein
20	Xylulose kinase

Rosnące poroże zawiera takie składniki jak: czynniki wzrostu IGF-1, IFG-2, które stymulują proliferację komórek i przeciwdziałają starzeniu się organizmu EGF, FGF, VEGF, NGF, BMP4, gangliozydy, prostaglandyny stanowiące czynniki przeciwzapalne, minerały w szczególności siarkę, fosfor, magnez, potas, wapń, cynk, miedź, żelazo, selen, testosteron i estrogeny wpływające na metabolizm organizmu, aminokwasy, glikozaminoglikany np.: siarczan chondroityny przeciwdziałający zapaleniu stawów, kwas hialuronowy o działanie anti-agening, kolagen typu I, II i X przeciwdziałający starzeniu skóry, mukopolisacharydy, glikolipidy, fosfolipidy (kwas omega-6), erytropoetyna oraz hematopoetyna stymulujące produkcję erytrocytów.

Przykład 4

Zastosowanie nalewki alkoholowej na bazie poroża jelenia szlachetnego (Cervus elaphuś) do wytwarzania leku przeznaczonego do co najmniej jednej z poniższych aktywności: zwiększania libido, stymulacji wzrostu, immunostymulacji, stymulacji pracy mięśni czynnikiem IGF1, przyspieszania rekonwalescencji, immunosupresji, przeciw osteoporozie, przywraca prawidłowe funkcjonowanie stawów, hamuje wydzielanie prostaglandyn - działa przeciwzapalnie, łagodzi stres, reguluje funkcję przysadki, podwzgórza oraz produkcję neurotransmiterów w szczególności serotoniny i dopaminy, wzmacnia układ

PL 230 593 B1 nerwowy, profilaktycznie przeciw chorobie wieńcowej, udarom i anemii, w zaburzeniach seksualnych, impotencji, podnosi poziom testosteronu w osoczu krwi u mężczyzn, a także działa odmładzająco, do regulacji metabolizmu, proliferacji komórek, przyspieszania przemiany materii i regeneracji tkanek zwłaszcza podczas gojenia ran. Przy wymienionych aktywnościach stosuje się kilkanaście kropel dziennie nalewki rozlanej do ciemnych szklanych butelek.

P r z y k ł a d 5

Zastosowanie nalewki alkoholowej na bazie poroża jelenia szlachetnego (Cervus elaphus) do wytwarzania produktów kosmetycznych przeznaczonych do pielęgnacji skóry.

Zastosowanie nalewki na przykładzie wytwarzania kremu lanolinowego. Krem lanolinowy do pielęgnacji i ochrony skóry zawiera białą wazelinę w ilości 1000 g, parafinę w ilości 1500 g, lanoliny bezwodnej w ilości 1500 g, O1. Vaselini w ilości 1000 g, wodę w ilości 1000 g, olejek do kremów w ilości 60 g oraz substancja czynna w postaci nalewki alkoholowej na bazie poroża jelenia szlachetnego (Cervus elaphus) w ilości 1000 g, przy czym nalewka alkoholowa dodawana jest do kremu po wychłodzeniu mieszaniny do 30°C. Krem charakteryzuje się delikatną formułą, co pozwala na jego aplikację na wszystkich obszarach naszej skóry, również na twarzy i dekolcie, w szczególności polecany jest dla cery dojrzałej jako krem na noc. Lanolina wytwarza naturalną, silną barierę, która chroni naszą skórę przed wnikaniem brudu w pory skóry oraz pozwala na szybkie usunięcie go z naszych rąk po wykonanej pracy.

Krem silnie nawilża suchą i szorstką skórę, pękającą skórę na palcach, suche i szorstkie łokcie, łuszczącą się suchą skórę nóg, pękającą skórę na piętach, pękające brodawki, blizny, rozstępy, przy egzemach, łuszczycy, a także do pielęgnacji skóry diabetyków zwłaszcza przy zrogowaceniach skóry, pęknięciach, uczuciu świądu, podrażnieniach i owrzodzeniach.

Claims (1)

1. Zastrzeżenie patentowe

   1. Sposób wytwarzania nalewki alkoholowej na bazie poroża jelenia szlachetnego (Cervus elaphus) polegający na ekstrakcji surowca w alkoholu, znamienny tym, że jałowe pozyskane fragmenty szczytowej części rosnącego poroża jelenia szlachetnego pomiędzy 50 a 80 dniem wzrostu, korzystnie w 60 dniu, o długości od 20 cm do 50 cm, czyści się poprzez mechaniczne usunięcie welwetu, następnie oczyszczone fragmenty poroża przemywa się 0,4% kwasem bornym, a umyte płucze w bieżącej wodzie, po czym fragmenty rozdrabnia się mechanicznie, korzystnie miele do konsystencji mielonego mięsa, a tak przygotowaną masę poddaje się kilkutygodniowej ekstrakcji za pomocą alkoholu etylowego o stężeniu od 40% do 60%, w ilości 5 części alkoholu na 1 część zmielonej masy, przy czym podczas ekstrakcji mieszaninę wytrząsa się co kilka dni i przechowuje się w ciemnym i chłodnym miejscu, po ekstrakcji mieszaninę cedzi się na sitach i odwirowuje w wirówce o wydajności 600 g/5 min, otrzymany supernatant ponownie filtruje się i rozlewa do ciemnych szklanych naczyń.

   Departament Wydawnictw UPRP Cena 2,46 zł (w tym 23% VAT)