PL127283B1 - Method of obtaining new methanediol diesters with penicillines and 1,1-penicillatic acid dioxide - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarza¬ nia nowych dwuestrów metanodiolu z penicyli¬ nami i 1,1-dwutlenkiem kwasu penicylanowego wykazujacych dzialanie przeciwbakteryjne. Tymi nowymi zwiazkami sa wiec dwuestry metanodio¬ lu, w których jedna grupe hydroksylowa metano¬ diolu poddano estryfikacji grupa karboksylowa kwasu 6-acyloaminopenicylanowego, a druga grupe karboksylowa metanodiolu poddano estry¬ fikacji grupa karboksylowa 1,1-dwutlenku kwasu penicylanowego.Cennymi zwiazkami posrednimi do wytwarzania nowTych dwuestrów sa ester 6-aminopenicylano- iloksymetylowy, estry chlorowcometylowe, estry alkilosulfonyloksymetylowe i estry arylosulfonylo- ksymetylowe, 1,1-dwutlenku kwasu penicylanowe¬ go.Opis patentowy RFN nr 2 824 535 i iranski opis patentowy nr 19 601 ujawniaja 1,1-dwutlenek kwa¬ su penicylanowego i jego estry latwo hydrolizu- jace in vivo, jako srodki przeciwbakteryjne i ja¬ ko inhibitory rozrywania pierscienia (3-laktamo- wego. 1,1-dwutlenek kwasu penicylanowego i jego estry hydrolizujace in vivo powoduja wzrost sku¬ tecznosci przeciwbakteryjmej pewnych zwiazków penicylin i cefalosporyn wobec pewnych bakterii.Belgijski opis patentowy nr 764 888 ujawnia pewne 6-acyloaminopenicylaniany 6'-acyloaminope- nicylanoiloksymetylu, pewne 6-aminopenicylania- ny G^acyloaminopenicylanoiloksymetylu, 6-amino- penicylanian 6?-aminopenicylanoiloksymetylu i 6- -aminopenicylanian chlorometylu. Opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 3 850 908 ujawnia estry chlorometylowe kilku naturalnych, 5 syntezowanych biologicznie i pólsyntetycznych zwiazków penicyliny.Zwiazki przeciwbakteryjne wytwarzane sposo¬ bem wedlug wynalazku sa wydajnie wchlaniane z przewodu zoftadkowo-jelitowego ssaków i po 10 wchlonieciu ulegaja przeksztalceniu do kwasu 6- -acyloaminopenicylanowego i 1,1-dwutlenku kwa¬ su penicylanowego.Sposobem wedlug wynalazku wytwarza sie no¬ we zwiazki o ogólnym wzorze 1, w którym R1 15 oznacza grupe 2-fenyloaceitylowa, 2-feaoksyacetylo- \va, 2-amino-2-ienyloacetylowa lut) 2-amino-2-(4- -hydroksyfenylo)acetylowa, a takze farmakologicz¬ nie dopuszczalne sole tych zwiazków.Cecha sposobu wedlug wynalazku jest to, ze 20 zwiazek o wzorze 2 poddaje sie reakcji z reak¬ tywna pochodna kwasu o wzorze R2COOH, w któ¬ rym R2 oznacza grupe R1, w której wszystkie wolne grupy aminowe zostaly zabezpieczone, przy czym reakcje prowadzi sie korzystnie w tempera- 25 turze od ^40 do 30°C w obojetnym rozpuszczal¬ niku, po czym ewentualnie usuwa sie grupy za¬ bezpieczajace grupe aminowa i ewentualnie wol¬ ny zwiazek o wzorze 1 przeprowadza sie w sól.Zwiazki o wzorze 1 sa pochodnymi kwasu pe- 30 nicylanowego o wzorze 3. We wzorze 3 linia 127 283przerywana wiazaca podstawniki z ukladem dwu- pierscieniowym wskazuje, ze podstawnik znajdu¬ je sie ponizej plaszczyzny ukladu dwupierscienio- wego. Mówi sie, ze podstawnik taki znajduje sie w konfiguracji a. Z kolei linia ciagla wiazaca 'podstawnik z ukladem dwupierscieniowym wska¬ zuje, ze podstawnik znajduje sie powyzej plasz¬ czyzny ukladu dwupierscieniowego. Te konfigu¬ racje uwaza sie za konfiguracje p.Tak wiec zwiazki o wzorach 1 i 2 nazywa sie .pochodnymi pemicylanianu penicylanoiloksymetylu o wtórze* 4,*w których w celu odróznienia pod¬ stawników "znajdujacych sie przy róznych ukla¬ dach dwupierscieniowych stosuje sie lokanty ze znakiem prirn, lub bez tego znaku.Jezeli gdziekolwiek w niniejszym opisie mowa jest o pochodnej kwasu penicylanowego, która w pozycji 6 zawiera grupe 2-amino-2-acetamido- wa, w której grupa acetamidowa jest podstawio¬ na lub grupe 2-amino-2-acetamidowa, w której grupy aminowe i acetamidowe sa podstawione, to nalezy rozumiec, ze odnosi sie to do zwiazku, w którym wspomniane grupy maja konfiguracje D.W sposobie wedlug wynalazku zwiazek o wzo¬ rze 1 wytwarza sie poddajac zwiazek o wzorze 2 acylowaniu reaktywna pochodna kwasu o wzo¬ rze R*^COÓH, w którym R2 ma wyzej podane znaczenie, po czym jezeli jest'to konieazne* usuwa sie z Ra wszystkie grupy zabezpieczajacet ,grupy aminowe.\ Powoduje to przemiane grupy R2-CO- w grupe R1-CO-.Reakcje acylowania prowadzi sie zwykle stosu¬ jac uklad reakcyjny z obojetnym rozpuszczalni¬ kiem. W typowej reakcji acylowania okolo 0,5— —3 równowazników molowych reaktywnej pochod¬ nej kwatfli o wzorze R2-COOH poddaje sie reak¬ cji ze zwiazkiem o wzorze 2, w ukladzie reakcyj¬ nym z obojetnym rozpuszczalnikiem w tempera¬ turze od okolo -40°C do okolo 30°C, a korzyst¬ nie w temperaturze od okolo —10°C do okolo 10°C. Korzystny stosunek reaktywnej pochodnej do zwiazku o wzorze 2 wynosi od 1,0 :1,0 do 1,2 : : 1,0.Obojetnymi rozpuszczalnikami reakcji, które stosuje sie zwykle w powyzszej reakcji acylowa¬ nia sa chlorowane weglowodory, takie jak chlo¬ roform i dwuchlorometan^ etery takie jak eter dwuetylowy i czterowodorofuran, estry o malym ciezarze czasteczkowym, takie jak octan etylu i octan butylu, ketony alifatycznego niskim cie¬ zarze czasteczkowym, takie jak aceton i keton metylowoetyIowy, trzeciorzedowe amidy takie jak N,N-dwumetyloformamid i N-metylopirolidyn, acetonitryl, woda i mieszaniny powyzszych. Jezeli stosuje sie uklad z rozpuszczalnikiem wodnym lub czesciowo wodnym, to odczyn roztworu po¬ winien odpowiadac wartosci pH 4^-9, korzystnie okolo7. ^ Zwykle stosowana reaktywna pochodna kwasu jest halogenek kwasowy, np. chlorek kwasowy.W tym przypadku korzystne jest, ale nie niezbed¬ ne, prowadzenie reakcji acylowania w obecnosci substancji wiazacej kwas.!T 283 4 Odpowiednimi zwiazkami wiazacymi kwasy sa trzeciorzedowe aminy, takie jak dwualkiloaminy, np. trójetyloamina, N-metylotmorfolina, N,N-dwu- metyloanilina, pirydyna i podobne, lub wodoro- *¦ weglan sodowy. Mozna równiez stosowac uklady buforowe, takie jak bufory fosforanowe.Innymi odpowiednimi reaktywnymi .. pochod¬ nymi kwasu o wzorze R2-COOH sa aktywne es¬ try. Przykladami aktywnych estrów sa estry fe- *10 nylowe, takie jak ester 4-nitrofenylowy " i 2,4,5- -trójnitrofenylowy, tioes;try, takie jak ester S-me- tylu i S-fenylu, oraz N-hydroksyestry, takie jak ester N-hydroksysukcynimidowy i N-hydroksyfta- limidowy. Powyzsze estry wytwarza sie dobrze 15 znanymi metodami. W wielu przypadkach aktyw¬ ne estry mozna zastapic odpowiednimi azydkami kwasowymi lub amidami imidazolowym lub tria- zolowym.Inny sposób aktywacji kwasu * o wzorze 20 R2-CQOH polega na utworzeniu mieszanego bez¬ wodnika tzn. utworzeniu mieszanego bezwodnika karboksylowo-weglowego lub dwukarboksylowego.W przypadku mieszanych bezwodników karboksy- lowo-weglowyeh sól karboksylowa kwasu o wzo- 25 rze R2-COOH poddaje sie zwykle reakcji z chlo- romrówczanem nizszego alkilu, np. chloromrów- czanem etylu; w przypadku mieszanego bezwod¬ nika dwukarboksylowego lsól karboksylowa kwasu ¦ ó wzorze R2-COOH poddaje sie zwykle reakcji 30 z roztoudtfw&nym przestrzennie chlorkiem nizsze¬ go alkanoilu np. chlorkiem piwaloilu.Poza sposobami omówionymi powyzej, kwas o wzorze R2-COOH mozna uaktywnic poddajac go reakcji ze srodkiem laczacym peptydy, zgodnie ze 135 znanymi metodami. Srodkami takimi sa karbo- dwuimidy np. dwucykloheksylokarbodwuimid, al- koksyacetylany, np. metoksyacetylan i etoksyace- tylen oraz N-etoksykarbonylo-2-e'toksy-l,2-dwuwo¬ dórochinolina. 40 Zwiazek o wzorze 2 mozna wytworzyc droga trzystopniowego procesu, który polega na prze¬ mianie kwasu 6-aminopenicylanowego w kwas 6-aminopenicylanowy o zabezpieczonej grupie ami¬ nowej, reakcji soli tego kwasu ze zwiazkiem 45 o wzorze 5, w którym X oznacza grupe latwo od- szczepiajaca sie i usunieciu grupy zabezpieczaja¬ cej amine. Do tego celu mozna stosowac wiele grup zabezpieczajacych grupy aminowe, a typo- ^ wymi ich przykladami sa grupy benzyloksykarbo- 50 nylowe, 4-nitrobenzyloksykarbonylowe i 2,2,2-trój- chloroetoksykarbonylowe. Przemiane kwasu 6-ami¬ nopenicylanowego w kwas 6-aminopenicylanowy o zabezpieczonej grupie aminowej i usuniecie gru¬ py zabezpieczajacej grupe aminowa prowadzi sie 55 znanymi sposobami. j Alternatywnie zwiazek o wzorze 2 mozna wy¬ tworzyc droga czteroetapowego procesu, który polega na przemianie kwasu 6-aminopenicylano¬ wego w kwas 6-aminopenicylanowy o zabezpie- 60 czonej ^grupie aminowej, reaikcji soli tego kwasu ze zwiazkiem o wzorze X-€H2-Y, w którym X ma podane wyzej znaczenie, a Y oznacza równiez grupe odszczepiajaca sie, reakcji otrzymanego pro¬ duktu ze, zwiazkiem o wzorze 6, w którym M G5 oznacza kation tworzacy karfooiksylan i usunieciuI2T 7 puszczainosci i stabilnosci skladnika aktywnego, a takze od zamierzonego dawkowania.W przypadku tabletek do stosowania doustnego uzywanymi zwykle nosnikami sa laktoza, cytry¬ nian sodowy i sole kwasu fosforowego. Stosowa- 6 nymi zwykle skladnikami tabletek sa skrobia oraz srodki poslizgowe, takie jak stearynian magnezo¬ wy, siarczan sodowolaurylowy i talk.Do podawania doustnego w postaci kapsulek uzytecznymi rozcienczalnikami sa laktoza i gliko- l* le polietylenowe o wysokim ciezarze czasteczko¬ wym, np. glikole polietylenowe, których ciezar czasteczkowy wynosi 2000—4000. Jezeli do poda¬ wania doustnego stosuje sie wodne zawiesiny, to wówczas skladnik aktywny laczy sie ze srodkami Xl emulgujacymi i zawiesinotwórczymi. W razie po¬ trzeby mozna dodac pewne srodki slodzace i/lub smakowe.Do podawania pozajelitowego, do którego nalezy stosowanie domiesniowe, dootrzewne, podskórne 2t i dozylne, wytwarza sie zwykle jalowe roztwory skladników aktywnych., przy czym odpowiednio reguluje sie i buforuje odczyn pH tych roztwo¬ rów. Przy podawaniu dozylnym nalezy kontrolo¬ wac calkowite stezenie substancji rozpuszczonych 25 w celu wytworzenia izotonicznego preparatu.Jak wczesniej stwierdzono, przeciwbakteryjne zwiazki wytworzone sposobem wedlug wynalazku mozna poddawac ludziom, a ich dawkowanie dzienne nie rózni sie znacznie od dawkowania W innych,^stosowanych klinicznie antybiotyków pe¬ nicylinowych. Lekarz przepisujacy lek okresli ostatecznie dawke odpowiednia dla* danego czlo¬ wieka, która bedzie róznic sie w zaleznosci od wieku* wagi i reakcji indywidualnego pacjenta, M a takze od charakteru i intensywnosci objawów u pacjenta.Zwiazki wedlug wynalazku zwykle stosuje sie doustnie w dawkach okolo 20—100 mg na kilo¬ gram wagi ciala dziennie, a pozajelitowo w daw- *• kach okolo 10—100 mg na kilogram wagi ciala dziennie i zwykle w podzielonych dawkach.W niektórych przypadkach moze byc konieczne stosowanie dawek spoza wymienionych zakresów.Wynalazek ilustruje ponizsze przyklady. Widmo * w ^podczerwieni (IR) mierzy sie przy uzyciu pas¬ tylek z bromkiem potasowym (pastylki KBr) a absorpcje pasm charakterystycznych odnosi sie do liczby falowej (cm-1).Widmo magnetycznego rezonansu jadrowego 5i (NMR) mierzy sie, przy czestotliwosci pola 60 MHz dla roztworów w deuterowanym chloroformie (CDC13) lub deuterowanym dwumetylosulfotlenku sciach na milion jako przesuniecie chemiczne w wzgledem czterometylosilanu. Stosuje sie naste¬ pujace skróty dla ksztaltu pików: s, singlet; d, dublet; t, tryplet; q, kwartet; m, multiplet.Przyklad I. Wytwarzanie 1,1-dwutlenku pe¬ nicylanianu 6,-<2-fenyloacetamidopenicylanoi)loksy- M metylu.Do roztworu 4,62 gx 1,1-dwutlenku penicylanianu e^aminopenicylanoiloksymetylu w 28 ml chloro¬ formu dodaje sie podczas mieszania 1,50 ml trój- etylóaminy. Mieszanine reakcyjna oziebia sie do 65 8 temperatury 0°C i wkrapla do niej w temperatu¬ rze 0°C roztwór 1,56 g chlorku 2-fenyloacetylu w 10 ml chloroformu. Otrzymana mieszanine mie¬ sza sie w temperaturze 0°C w ciagu 5 minut, a nastepnie w temperaturze 25°C w ciagu 30 mi¬ nut. Rozpuszczalnik usuwa sie poprzez odparowa¬ nie pod zmniejszonym cisnieniem, a pozostalosc rozdziela sie rozpuszczajac w ukladzie octan ety- lu-woda o wartosci pH 8. Oddziela sie warstwe octanu etylu, przemywa woda, suszy za pomoca siarczanu sodowego i odparowuje pod zmniejszo¬ nym cisnieniem otrzymujac tytulowy zwiazek.Widmo IR (pastylka KBr): 1783 cm"1.Widmo NMR (CDC13): d 7,4 (s), 6,3 (d), 5,9 (s, 5,8—6,3 (m), 4,65 (t), 4,45 (s), 3,05 (s), 3,45 (d), 1,62 (s) i 1,48—1,40 (m) ppm.Przyklad II. Wytwarzanie 1,1-dwutlenku pe- nieylinianu 6,-(2-fenoksyacetamido)penicylanoilo- ksymetylu.Stosujac tok postepowania z przykladu I wy¬ twarza sie tytulowy zwiazek poprzez acylow&nie 1,1-dwutlenku penicylanianu ^'-aminopenicylano- iloksymetylu chlorkiem 2^fenoksyacetylu.Widmo IR (pastylka KBr): 1786 cm-1.Widmo NiMR (CDC13): <5 7,4 (s), 5,85 (s), 5,45 (s), 5,05 (-s), 4,6 (t), 4,43 (s), 4,4 (s), 3,45 (d), 1,62 (s), 1,48 (s), 1,44 (s) i 1,4 (s) ppm.Przyklad HI. Wytwarzanie 1,1-dwutlenku penicylanianu 6,-(2-amino-2-fenyloacetamido)peni- cylanoiloksymetylu.Do roztworu 155,2 g pólwodnego N^l-metylo-2- -etoksykarbonylowmylo)^D-2-amino-2-fenylooctanu potasowego (Chem. Ber., 98, 789 (1966) w 2000 ml octanu metylu dodaje sie podczas mieszania 2,5 ml N-metylomorfoliny w 70 ml chloromrówczanu izobutylu w temperaturze — 15°C. Mieszanine re¬ akcyjna miesza sie w ciagu 15 'minut w tempera¬ turze — 15°C, a nastepnie wkrapla sie do niej w temperaturze — 15°C roztwór 1,1-dwutlenku pe¬ nicylanianu 6'-aminopenicylanoiloksymetylu w 1000 ml octanu metylu w ciagu 15 minut. Otrzymana mieszanine miesza sie w temperaturze 15°C w ciagu 1 godziny, po czym pozostawia do ogrzewania w temperaturze pokojowej. Nastepnie mieszanine reakcyjna przemywa sie woda, 0,5 m wodnym roztworem wodoroweglanu sodowego i powtórnie woda. Roztwór octanu etylu suszy sie . i odparowuje pod zmniejszonym cisnieniem. Po¬ zostalosc rozpuszcza sie w 2000 ml mieszaniny czterowodorofuran-woda w stosunku 1:1. i do¬ prowadza odczyn roztworu do wartosci pH 2,5.Roztwór o odczynie pH 2,5 miesza sie w ciagu 1 godziny, po czym usuwa sie duza ilosc cztero¬ wodorofuranu poprzez odparowanie pod zmniej¬ szonym cisnieniem. Odczyn fazy wodnej dopro¬ wadza sie do wartosci pH 8,5, po czym ekstrahuje sie faze wodna octanem etylu. Ekstrakty przemy¬ wa sie woda, suszy za pomoca siarczanu sodowego i odparowuje pod zmniejszonym cisnieniem otrzymuac tytulowy zwiazek.Dane fizykochemiczne dla produktu w postaci chlorowodorku sa nastepujace: Widmo IR (pastylka KBR) — pasma absorpcji przy 3400, 2930, 1790, 1690 1320 i 890 cm-1.V12TBS& grupy zabezpieczajacej grupe aminowa. ,Do tego celu mozna stosowac wiele grup zabezpieczaja¬ cych grupe aminowa, takich jak grupy be.izylo- ksykarbonylowe, 4-nitrobenzyloksykarbonylowa i : 2,2,2-trójchloroetoksykarbonyIowa. Przemiane kwasu 6-aminopenicylanowego w kwas o zabez¬ pieczonej grupie aminowej i usuniecie grupy za¬ bezpieczajacej grupe aminowa prowadzi sie typo¬ wymi sposobami.Zwiazki o wzorze 1, które maja wlasciwosci za¬ sadowe np. zawierajace grupe aminowa w grupie R1, tworza addycyjne sole kwasowe, które rów¬ niez objete sa zakresem wynalazku.Addycyjne sole kwasowe wytwarza sie metoda- mi typowymi dla zwiazków penicylinowych " np. droga laczenia roztworu zwiazku o wzorze 1 w odpowiednim rozpuszczalniku (jak np. woda, aceton, metanol, etanol lub butanol) z roztworem zawierajacym stechiometrycznie równowazna iioic wlasciwego kwasu. Jezeli sól wytraca sie w pos-* taci osadu, wydziela sie ja za pomoca odsacze¬ nia. Alternatywnie mozna ja wydzielic za pomoca odparowania rozpuszczalnika lub w przypadku wodnych roztworów za pomoca liofilizacji.Szczególne znaczenie maja takie sole jak siar¬ czany, chlorowodorki, bromowodorki, azotany, fos¬ forany, cytryniany, winiany,. emboniany, nadchlo¬ rany, sulfosalicylany i 4-toluenosulfoniany.Do zastosowan leczniczych nadaja sie sole far¬ makologicznie dopuszczalne zwiazków wytworzo¬ nych sposobem wedlug wynalazku, przy czym so¬ le inne niz sole farmakologicznie dopuszczalne mozna stosowac do wielu celów, takich jak izolo¬ wanie i oczyszczanie poszczególnych zwiazków orazwzajemna przemiane soli farmakologicznie dopuszczalnych i ich 'odpowiedników nie bedacych iolami.Zwiazki o wzorze 1 maja* in vivo dzialanie przeciwbakteryjtie wobec ssaków i dzialanie to mozna wykazac stosujac metody typowe dla ' zwiazków penicylinowych. Na przyklad zwiazek 0 wzorze 1 podano myszom, u których wywolano ostra, infekcje poprzez wszczepianie dootrzewnowi znormalizowanej kultury bakterii chorobotwór¬ czych. * Intensywnosc infekcji znormalizowano w ten sposób, ze myszy otrzymaly 1—10 razy LDJ00/ /LD100: minimalna dawka wymagana do usmier¬ cenia X00% kontrolowanych myszy). Na zakoncze¬ nie t€?stu dzialanie zwiazku oceniono poprzez po~* liczenia ilosci mys/zy pozostalych przy zyciu, u których wywolano infekcje bakteryjna, a które otrzymaly zwiazek o wzorze 1. Zwiazki o wzorze 1 mozna podawac zarówno doustnie (p. o.) jak i- droga podskórna (s. c).Aktywnosc in vivo zwiazków przeciwbakteryj- nych o wzorze 1 powoduje, ze sa one odpowied¬ nie do zwalczania infekcji bakteryjnych u ssa¬ ków, lacznie z ludzmi, poprzez podawanie zarów- no doustne jak i droga pozajelitowa. Zwiazki sa' uzyteczne w zwalczaniu infekcji spowodowanych przez bakterie wlasciwe ludziom.Na ogól czynnikiem, który decyduje o tyni czy dana bakteria jest podatna na dany zwiazek o wzorze 1, jest podstawnik R1. Zwiazek o wzo¬ rze 1 po podaniu ssakom zarówno drciga doustna jak i pozajelitowa rozpada sie na .-odpo.wicd.Lii zwiazek o wzorze 7 (lub jego wolny kwas) i I,l- -dwutlenek kwasu penicylanowego. 5 1,1-dwut lenek- kwasu penicylanowego dziala nastepnie jako inhibitor reakcji rozerwania piers¬ cienia (3-laktamowego, co powoduje wzrost efek¬ tywnosci przeciwbakteryjnej zwiazku o wzorze 7 (lub jego wolnego kwasu). * - 10 Na przyklad gdy R1 ozuacza grupe 2-fenyloace- tylowa lub 2-fenoksyacetylowa, to zwiazki takie znajduja zastosowanie w zwalczaniu infekcji spo¬ wodowanych pi zez podatne szczepy Staphylococ- cus aureus, a gdy It1 oznacza grupe D-2-amino- 15 -2-fenykacetylowa lub D-2-amino-2-(4-hydroksy- fenylo)acetylowa, to zwiazki te stosuje sie w zwalczaniu infekcji spowodowanych przez/po¬ datne szczepy Eschericbia coli. • .*.Dla okreslenia czy konkretny szczep Staphylo- w coceus aureus lub Escherichia coli jest wrazliwy • na odpowiedni zwiazek o wzorze 1, mozna sto¬ sowac opisany wyzej test in vivo.Alternatywnie mozna zmierzyc najnizsze steze¬ nie inhibitora (MIC) mieszaniny zwiazku o wzo- 25 rze 7 (lub jego odpowiedniego wolnego kwasu) i zwiazku o wzorze 6 (lub jego odpowiedniego wolnego kwasu) w stosunku .1 : 1. .MIC-.-mozna zmierzyc za pomoca metody zalecanej przez Inter- national Collaborative Study on Aiitibiotie Seasi- -30 tivity Testing (Ericcson i Sherris, Acta.. Tatholo- gica et Microbiologica Scandinav, Supp. 217, Sec- tion B: 64—68 (1971), w której stosuje sie mózgo- wo-sercowy'agar infuzyjny (BHI) i urzadzenia do namnazania inoculum. . 35 Próbki po calonocnym wzroscie rozciencza sie stukrotnie w celu ich uzycia jako wzorcowego ino¬ culum (20.000—10.000 komórek w okolo 0,002 ml umieszcza sie na powierzchni agaru, stosujac 20 ml agaru BHI na I plytce). Stosuje sie dwanas- 40 cle. dwukrotnie rozcienczonych roztworów, *prz.y stezeniu poczatkowym testowanego leku 200 mg/ /ml. Podczas badania plytek po uplywie 13 godzin w temperaturze 37°C pomija sie pojedyncze ko¬ lonie. • *5 Wrazliwosc (MIC) badanego ustroju okresla sie jako najnizsze stezenie zwiazku zdolne do calko¬ witego zahamowania wzrostu, co stwierdza sie wizualnie.Podajac przeciwbakteryjny zwiazek wytworzony 50 sposobem wedlug wynalazku lub jego sól ssakom, : a szczególnie ludziom, zwiazek: ten mozna stoso¬ wac jako taki lub mozna go mieszac z innymi antybiotykami i/lub farmakologicznie dopuszczal¬ nymi nosnikami lub rozcienczalnika,mi. 55 Wspomniany nosnik lub rozcienczalnik wybiera sie majac na uwadze zamierzony sposób podawa¬ nia. Na przyklad przy podawaniu doustnym prze¬ ciwbakteryjny zwiazek wytworzony sposobem wedlug wynalazku mozna stosowac w postaci ta- 60 bletek, kapsulek, pastylek romboidalnego ksztaltu, kolaczyków, proszków, syropów, roztworów wod- no-alkoholowych, roztworów wodnych, zawiesin i innych znanych postaciach.Proporcja skladnika aktywnego do nosnika za- 65 lezy oczywiscie od wlasciwosci chemicznych, rcz-127 283 Widmo NMR1!! (DMSO, 60 MHz, TMS jako wzorzec): 9.45 (d, 1H, J•= 7 Hz), 8,90 (szeroki s, 5H), 5,80 (s, 2H), 5,50 (m, 2H), 5,15 (m, 2H), 4,45 % III), 4,35 (s, III), 3,00 (m, 1H), 3,00 (s, lii), 1,40 (s, 6H) i 1,30 (c, 3H) ppm.Widmo NMR13C (DMSO, TMS): 172,406, 17.1,931, 167,563, 160,151, 165,749, 133,622, 129,649, 128,946, 127,873, 81,0634, 69,7087, 67,1793, 63,9624, 63,2723, 60,6689, 58.6824, 54,8379, 37,6949, 30,1372, 26,4151, 19,6717 i 17,7702 ppm.Przyklad IV. Wytwarzanie 1,1-dwutlenku penicylanianu 6,-(2-amino-2-[4-hyuroksyfenylo]ace- tamido)penicylanoiloksymelylu.Stosujac tok postepowania z przykladu III wy¬ twarza sie tytulowy zwiazek z 1,1-dwutlenku pe¬ nicylanianu 6'-aminopenicylanoiloksymetylu iN-(l- -metylo-2-metok(sykarbonylowinylo)-D-2-amino-2- -(4-hydroksyfenylo)octanu sodowego (Journal of the Chemical Sociaty (London), czesc C. 1920 (1971)).Widmo IR (pastylka KBr): 1786 cm"1.Widmo NMR (CDC13) DMSO-d6): Ó 7,4—6,6 (m, 4H), 5,9 (s, 1H), 5,8—5,4 (m, 2H), 4,3—4,3 (m, 4H), 3,5 (d, ;2H) i 1,5 (m, 12H) ppm.Przyklad V. Wytwarzanie 4-toluenosulfonia- nu" 1,1-dwutlenku penicylanianu 6'-'(2-amino-2-fe- nyloacetamido)penicylanoiloksymetylu.Do mieszaniny 422 mg N-(l-metylo-2-metoksy- karbonylowmylo)-D-2-amino-2-fenyloodami pota¬ su i 2 kropli N-meftylomorfoliny w 10 ml aceto¬ nu, mieszanej w atmosferze azotu w temperatu¬ rze —20°C, dodaje sie.0,141 ml chloromrówczanu etylu. Mieszanie w temperaturze —20°C kontynu¬ uje sie w ciagu 30 minut, po czym pozwala sie, by temperatura wzrosla do —5°C w trakcie mie¬ szania. Po osiagnieciu tej temperatury chlodzi sie mieszanine reakcyjna do temperatury —30°C i w trakcie mieszania dodaje sie do niej roztwór okolo 680 mg 1,1-dwutlenku penicylanianu 6'-ami- nopenicylanoiloksymetylu w chloroformie. Pozwa¬ la sie, by temperatura wzrosla do 0°C, a po do¬ daniu nadmiaru chloroformu i wody warstwy roz¬ dziela sie i warstwe wodna przemywa chlorofor¬ mem. Polaczone roztwory chloroformowe przemy¬ wa sie woda przy wartosci pH 8,5, a nastepnie suszy przy uzyciu Na2S04.Po odparowaniu roztworu pod zmniejszonym cisnieniem uzyskuje sie 990 mg stalej substancji, która .rozpuszcza sie w 8 ml octanu etylu. Po do¬ daniu roztworu 300 mg monohydratu kwasu p- -toluenosulfonowego w 3 ml octanu etylu pow¬ staly roztwór przemywa sie po uplywie 20 minut woda i odparowuje pod zmniejszonym cisnieniem.Pozostalosc rozciera sie w eterze, a nastepnie roz¬ puszcza w acetonie. Po odparowaniu acetonu pod zmniejszonym cisnieniem pozostalosc rozpuszcza sie w chloroformie. Po odparowaniu chloroformu pod zmniejszonym cisnieniem otrzymuje sie 627 mg tytulowego zwiazku w postaci piany.Widmo NMR (DMSO-d6: <5 7,4 (m, 5H), 7,23 (m, 4H), 5,85 (m, 2H), 5,47 (m, 2H), 5,1 (m, 2H), 4,48 (s, 1H), 4,38 (s, 1H), 3,43 ,(m, 2H), 2,26 (s, 3H), 1,47 (m, 6H) i 1,37 (m, 6H) ppm. (TMS jako wzorzec wewnetrzny). * ?- li JO Przyklad VI. Wytwarzanie chlorowodorku lrl-dwutlenku penicylanianu G'-(2-amino-2-fenylo- acetamido)penk,ylanoiloksymetylu.Do mieszanego w temperaturze —35°C roztworu okolo 1,36 g 1.1-dwutlenku penicylanianu 6'-ami- nopenicylanoiloksymetylu w dwuchlorcmetanie do¬ daje sie 1,83 ml N,N-dwumetyloaniliny, a nastepnie 0,75 g chlorowodorku chlorku 2-amkio-2-£enylo- acetylu. Mieszanie kontynuuje sie w temperatu¬ rze —20°C w ciagu 30 minut, po czym w trakcie mieszania wlewa sie mieszanine reakcyjna do roztworu 0,24 g wodoroweglanu sodu w 10 ml wody. Po 10 minutach mieszania usuwa sie war¬ stwe dwuchlorometanu. Warstwe wodna ekstrahu- 15 je sie dwuchlorometanem, po czym polaczone roz¬ twory dwuchlorometanowe przemywa sie nasyco¬ nym roztworem NaCl, suszy za pomoca Na2S04 i odparowuje pod zmniejszonym cisnieniem. Po¬ zostalosc rozpuszcza sie w okolo 50 ml dwucMo- zo rometanu i powstaly roztwór dodaje sie powoli do okolo 100 ml heksanu. Wytracona stala sub¬ stancje odsacza sie, otrzymujac 1,37 g surowego zwiazku tytulowego. Produkt ten rozciera sie w eterze i rozpuszcza w okolo 25 ml dwuchloro- 25 metanu. Powstaly roztwór chlodzi sie do tempe¬ ratury okolo — 70°C i dodaje don powoli, w trak¬ cie mieszania, okolo 30 ml heksanu. Mieszanie kontynuuje sie w ciagu 10 minut, po czym od¬ sacza sie 1,19 g tytulowego zwiazku topniejacego 30 z rozkladem w temperaturze 164—170°C Widmo NMR (DMSO - d6, TMS jako wzorzec wewnetrzny) <5: 9,4 (d, 1H), 9,0 (szeroki s, 2H), 7,4 (m, 5H), 5,8 (s, 2H), 5,4 (m, 2H), 5,1 (szeroki s, 2H), 4,5 (s, 1H), 4,4 (s, 1H), 3,6 (m, 1H), 3,3 (m, & 1H), 1,4 (s, 3H) i 1,3 (s, 6H)..Widmo IR (pastylka KBR): 3400, 2950, 1790, 1690, 1320 i 990 cm1.Widmo NMR13C (DMSO —d6, TMS jako wzo¬ rzec wewnetrzny): 172,406, 171,931, 167,563, 166,131, « 165,749, 133,622, 129,640, 129,015, 123,546, 127,873, 81,0634, 69,7087, 67,1793, 63,9024, 62,2723, 60,6689, 53,6824, 54,8879, 37,6945, 30,1372, 26,4151, 19,6717 i 17,7702.Przy k l a d VII. Wytwarzanie chlorowodorku 1,1-dwutlenku penicylanianu 6'-[2-a'mino-2-<4-hy- droksyfenylo)acetamido]penicylanoiloksymetylu.Do roztworu 341 mg 2-(l-metylo-2-metok3ykar- bonylowinyloamiino)-2-(4-hydroksyfenylo)octanu czterobuiyloamoniowego w 5 ml acetonu dodaje sie w atmosferze azotu 1 krople N-metylomorfo- liny, po czym roztwór chlodzi sie do temperatury okolo —20°C. Po uplywie £ minut dodaje sie 0,06 ml chloromrówczanu metylu, a w 10 minut póz¬ niej, w temperaturze — 30°C, roztwór 276 mg 1,1- -dwutlenku penicylanianu 6'-aminopenicylanoilo- ksymetylu w niewielkiej ilosci dwuchlorometanu.Mieszanine reakcyjna pozostawia sie do ogrzania do temperatury pokojowej, po czym pod zmniej¬ szonym cisnieniem odparowuje sie rozpuszczalnik.Pozostalosc rozpuszcza sie w mieszaninie octanu etylu i wody. Po rozdzieleniu warstw warstwe octanowa suszy sie (Na2S04) i odparowuje pod zmniejszonym cisnieniem. Pozostalosc rozpuszcza sie w okolo 10 ml acetonu i 4 ml wody, po czym •* oclczyn doprowadza sie do wartosci pH 1,6 za 45 50 SI 8011 127 283 pomoca kwasu solnego. Wartosc te utrzymuje sie do zakonczenia reakcji hydrolizy enaminy. Po odparowaniu acetonu pod zmniejszonym cisnie¬ niem faze wodna ekstrahuje sie eterem i liofili¬ zuje, otrzymujac 250 mg tytulowego zwiazku.Widmo IR: 1780 cm"1 Widmo NMR: (IMSO — dg/D^O, TMS) 6: 7,08 (m, 4H), 5a92 (m, 2H), 5,5 (m, 2H), 5,07 (m, 1H), 4,97 (s, 1H), 4,5 (s, 1H), 4,33 (s, 1H), 3,47 (m, 2H), 1,50—1,38 (m, 12H) ppm.Zastrzezenie patentowe Sposób wytwarzania nowych dwuestrów meta- modiolu z penicylinami i i,l-dwutlenkiem kwasu 10 12 penicylanowego o ogólnym wzorze 1, w którym R1 oznacza grupe 2-fenyloacetylowa, 2-ienoksyace- tylowa, 2-amino-2-fenyloacetylo.wa lub 2-amino-2- -{4-hydroksyfenylo)acettlo^va, a takze farmakolo¬ gicznie dopuszczalnych soli tych zwiazków, zna¬ mienny tym, ze zwiazek o wzorze 2 poddaje sie reakcji z reaktywna pochodna kwasu o wzorze R2COOH, w którym R2 oznacza grupe R1, wr któ¬ rej wszystkie wolne grupy aminowe zostaly za¬ bezpieczone, przy czym reakcje prowadzi sie ko¬ rzystnie w temperaturze od —40 do 30°C w obo¬ jetnym rozpuszczalniku, po czym ewentualnie usu¬ wa sie grupy zabezpieczajace grupe aminowa i ewentualnie wolny zwiazck o wzorze 1 przepro¬ wadza sie w sól.H H R-NH x^ y -N f CH; CH, ^ O Hzór 1 \S H H l N- LiJxCH, ;Cv o" o o 'C — o Wzór Z li_f CH3 "'XOOH -N Hzór 3 O' . o o c— -o o CH2 O H i' CH, £ZJJJ]^CH3 0^\ yQ CH 9 »• ¦N- .XCH3 CH2 -c—-o Wzór A a o _/; ^- N- ^CH3 ^CH3 Vo-CH2-X Ó Sv -^' Hzór 5 Ha o -N Wzór S H H Q-CH R-NH O S -N— 3 COOM ,.CH3 ^CH3 '"COOM Wzór 7 LZGraf. Z-d Nr 2 — 398/86 85 ,egz. A4 Cm IM il PL PL PL PL

Claims (1)

1. Zastrzezenie patentowe Sposób wytwarzania nowych dwuestrów meta- modiolu z penicylinami i i,l-dwutlenkiem kwasu 10 12 penicylanowego o ogólnym wzorze 1, w którym R1 oznacza grupe 2-fenyloacetylowa, 2-ienoksyace- tylowa, 2-amino-2-fenyloacetylo.wa lub 2-amino-2- -{4-hydroksyfenylo)acettlo^va, a takze farmakolo¬ gicznie dopuszczalnych soli tych zwiazków, zna¬ mienny tym, ze zwiazek o wzorze 2 poddaje sie reakcji z reaktywna pochodna kwasu o wzorze R2COOH, w którym R2 oznacza grupe R1, wr któ¬ rej wszystkie wolne grupy aminowe zostaly za¬ bezpieczone, przy czym reakcje prowadzi sie ko¬ rzystnie w temperaturze od —40 do 30°C w obo¬ jetnym rozpuszczalniku, po czym ewentualnie usu¬ wa sie grupy zabezpieczajace grupe aminowa i ewentualnie wolny zwiazck o wzorze 1 przepro¬ wadza sie w sól. H H R-NH x^ y -N f CH; CH, ^ O Hzór 1 \S H H l N- LiJxCH, ;Cv o" o o 'C — o Wzór Z li_f CH3 "'XOOH -N Hzór 3 O' . o o c— -o o CH2 O H i' CH, £ZJJJ]^CH3 0^\ yQ CH 9 »• ¦N- .XCH3 CH2 -c—-o Wzór A a o _/; ^- N- ^CH3 ^CH3 Vo-CH2-X Ó Sv -^' Hzór 5 Ha o -N Wzór S H H Q-CH R-NH O S -N— 3 COOM ,.CH3 ^CH3 '"COOM Wzór 7 LZGraf. Z-d Nr 2 — 398/86 85 ,egz. A4 Cm IM il PL PL PL PL