NO341412B1 - Diketo-piperazin- og –piperidinderivater, farmasøytiske blandinger omfattende slike, slike blandinger omfattende ytterligere anti-HIV midler og slike blandinger for behandling av sykdom - Google Patents

Diketo-piperazin- og –piperidinderivater, farmasøytiske blandinger omfattende slike, slike blandinger omfattende ytterligere anti-HIV midler og slike blandinger for behandling av sykdom Download PDF

Info

Publication number
NO341412B1
NO341412B1 NO20084257A NO20084257A NO341412B1 NO 341412 B1 NO341412 B1 NO 341412B1 NO 20084257 A NO20084257 A NO 20084257A NO 20084257 A NO20084257 A NO 20084257A NO 341412 B1 NO341412 B1 NO 341412B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
group
heteroaryl
alkyl
phenyl
aryl
Prior art date
Application number
NO20084257A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
NO20084257L (no
Inventor
Tao Wang
John F Kadow
Zhongxing Zhang
Zhiwei Yin
Nicholas A Meanwell
Alicia Regueiro-Ren
Jacob Swidorski
Ying Han
David J Carini
Original Assignee
Viiv Healthcare Uk No 4 Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Viiv Healthcare Uk No 4 Ltd filed Critical Viiv Healthcare Uk No 4 Ltd
Publication of NO20084257L publication Critical patent/NO20084257L/no
Publication of NO341412B1 publication Critical patent/NO341412B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

OPPFINNELSESOMRÅDE
Denne oppfinnelse tilveiebringer forbindelser som har medikament- og biopåvirkende egenskaper, deres farmasøytiske blandinger og fremgangsmåter
for anvendelse.
Særlig vedrører oppfinnelsen diketo-piperazin- og -piperidinderivater som
har unik antiviral aktivitet. Nærmere bestemt vedrører foreliggende oppfinnelse forbindelser som er egnet for behandlingen av HIV og AIDS.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN
HIV-1- (human immunodeficiency virus-1) infeksjon er fortsatt et vesentlig medisinsk problem, hvor anslagsvis 40 millioner mennesker i verden var infisert på slutten av 2005. Antallet tilfeller av HIV og AIDS (acquired immunodeficiency syndrome) har steget hurtig. I 2005 ble det rapportert nærmere 5,0 millioner nye infeksjoner, og 3,1 millioner mennesker døde av AIDS. Dagens tilgjengelige medikamenter for behandlingen av HIV innbefatter nukleoside revers transkriptase (RT) inhibitorer eller godkjente enkeltpille kombinasjoner: zidovudin (eller AZT eller Retrovir®), didanosin (eller Videx®), stavudin (eller Zerit®), lamivudin (eller 3TC
eller Epivir®), zalcitabin (eller DDC eller Hivid®), abacavir succinat (eller Ziagen®), Tenofovir disoproxil fumaratsalt (eller Viread®), emtricitabin (eller FTC), Combivir®
(inneholder -3TC pluss AZT), Trizivir® (inneholder abacavir, lamivudin og
zidovudin), Epzicom® (inneholder abacavir og lamivudin), Truvada® (inneholder Viread® og emtricitabin); ikke-nukleoside revers transkriptaseinhibitorer: nevirapin (eller Viramune®), delavirdin (eller Rescriptor®) og efavirenz (eller Sustiva®) og peptidomimetiske proteaseinhibitorer eller godkjente formuleringer: saquinavir, indinavir, ritonavir, nelfinavir, amprenavir, lopinavir og Kaletra® (lopinavir og Ritonavir). Hvert av disse medikamentene kan bare forbigående hindre virus-replikasjon dersom de benyttes alene. Benyttet i kombinasjon har disse medikamentene en dyptgripende effekt på viremi og sykdomsutvikling. Signifikante reduksjoner i dødsfall blant AIDS-pasienter har faktisk nylig vært dokumentert som en følge av den utstrakte anvendelse av kombinasjonsterapi. På tross av disse imponerende resultatene sviktet imidlertid kombinasjons-medikamentterapiene for 30 til 50% av pasientene. Utilstrekkelig medikamentstyrke, etterlevelsessvikt, begrenset vevspenetrering og medikamentspesifikke begrensninger i enkelte celletyper (f.eks. de fleste nukleosidanaloger kan ikke fosforyleres i hvilende celler) kan være ansvarlig for den ufullstendige undertrykkelse av følsomme virus. Den høye replikasjonshastighet og hurtige omsetning av HIV-1 kombinert med hyppig inkorporering av mutasjoner, fører dessuten til opptreden av medikament-resistente varianter og behandlingssvikt når det inngår sub-optimale medikament-konsentrasjoner. Der trengs derfor nye anti-HIV midler som oppviser distinkte resistensmønstere og gunstig farmakokinetikk, så vel som større sikkerhet, for å gi flere behandlingsmuligheter. Forbedrede HIV fusjonsinhibitorer og HIV "entry-coreseptor" antagonister er to eksempler på nye klasser av anti-HIV midler som for tiden studeres av en rekke forskere.
Egenskapene til en klasse HIV "entry inhibitors" betegnet "HIV attachment" inhibitorer er blitt forbedret som forsøk på å oppnå forbindelser med maksimal anvendelighet og effekt som antivirale midler. En publikasjon som beskriver indoler, hvorav strukturen vist nedenfor for BMS-705 er representativ, har vært beskrevet [Antiviral Indoleoxoacetyl Piperazine Derivatives].
To andre forbindelser, i litteraturen omtalt som BMS-806 og BMS-043, har vært beskrevet både i den akademiske litteratur og i patenter:
Enkelte beskrivelser av deres egenskaper i humane kliniske forsøk er beskrevet i litteraturen.
Det skal bemerkes at i alle tre av disse strukturene inngår et piperazinamid (i disse tre strukturene et piperazin-fenylamid) og denne gruppe er direkte forbundet med en oksoacetyldel. Oksoacetylgruppen er i 3-stillingen forbundet med 4-fluorindol i BMS-705 og i 3-stillingen av substituerte azaindoler i BMS-806 og BMS-043.
I et forsøk på å oppnå forbedrede anti-HIV-forbindelser, har senere publikasjoner delvis beskrevet modifiserte substitusjonsmønstere på indolene og azaindolene. Eksempler på slike bestrebelser omfatter: (1) nye substituerte indol-oksoeddiksyre-piperazinderivater, (2) substituerte piperazinyloksoacetylindol-derivater og (3) substituerte azaindoloksoeddiksyre-piperazinderivater.
Erstatning av disse gruppene med andre heteroaromatiske eller substituerte heteroaromatiske eller bicykliske hydrokarboner er også vist å være mulig. Eksempler er: (1) indol, azaindol og beslektede heterocykliske amidopiperazin-derivater; (2) bicyklo-4.4.0 antivirale derivater; og (3) diazaindolderivater.
Et lite utvalg erstatninger for piperazinamid-delen av molekylene er også beskrevet og blant disse eksemplene er (1) enkelte piperidinalkener; (2) enkelte pyrrolidinamider; (3) enkelte N-aryl- eller heteroarylpiperaziner; (4) enkelte piperazinyl-ureaforbindelser; og (5) enkelte karbolin-holdige forbindelser.
Fremgangsmåter for fremstilling av prodrugs for denne klasse av forbindelser ble beskrevet i Prodrugs of Piperazine and Substituted Piperidine Antiviral Agents (Ueda et al., U.S. non-provisional application Ser. No. 11/066.745, innlevert 02/25/2005 eller US20050209246A1 eller WO2005090367A1).
En publisert PCT patentsøknad WO2003103607A1 (11. juni, 2003) angir en test egnet for bestemmelse av enkelte HIV-inhibitorer.
Flere publiserte patentsøknader beskriver studier av kombinasjon med piperazinbenzamid-inhibitorer, for eksempel US20050215543 (WO2005102328A1), US20050215544 (WO2005102391A1) og US20050215545 (WO2005102392A2).
En publikasjon om nye forbindelser innen denne klassen av tilkoblings-inhibitorer (Jinsong Wang et. al. Org. Biol. Chem. 2005, 3, 1781-1786.) og en patentsøknad for enkelte mer fjernt relaterte forbindelser finnes i W02005/016344 publisert 24. februar, 2005.
Publiserte patentsøknader WO2005/016344 og WO2005/121094 beskriver også piperazinderivater som er HIV-inhibitorer. Forbindelsene beskrevet i disse søknadene adskiller seg strukturelt fra forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse.
WO 2005/004801 A tilveiebringer forbindelser med formel (I), innbefattende farmasøytisk akseptable salter derav, som har medikament og bio-påvirkningseiendommer, deres farmasøytiske sammensetninger og fremgangsmåte for bruk. Disse forbindelsene har unik antiviral aktivitet, enten alene eller i kombinasjon med andre antivirale midler, antiinfeksiver, immunmodulatorer eller HIV-inngangshemmere.
WO 99/67237 tilveiebringer et substituert 4-, 5-, 6- og 7-indol- eller indolinderivat som er potente serotonin reuptake inhibitorer og har 5-HT1A reseptor antagonistisk aktivitet.
US 3,135, 794 A angår 1-[(1-, 2- og 3-indolyl)-lavere]piperazin derivater og mellomprodukter og fremstilling av slike.
Intet i disse referanser kan oppfattes som å angi eller foreslå de nye forbindelsene ifølge denne oppfinnelse og deres anvendelse til inhibering av HIV-infeksjon.
SAMMENFATNING AV OPPFINNELSEN
Foreliggende oppfinnelse vedrører forbindelser med formel I, de farmasøytisk akseptable salter og/eller solvater (f.eks. hydrater) derav, deres farmasøytiske formuleringer og deres anvendelse til pasienter som lider av eller er utsatt for et virus så som HIV. Forbindelsene med formel I, deres farmasøytisk akseptable salter og/eller solvater er effektive anticirale midler, særlig som inhibitorer av HIV. De er anvendelige for behandlingen av HIV og AIDS.
En utførelsesform av foreliggende oppfinnelse er rettet mot en forbindelse med formel I eller farmasøytisk akseptable salter derav,
hvor:
A er valgt fra gruppen bestående av:
hvor
- - representerer en karbon-karbon binding eller eksisterer ikke;
R<1>er hydrogen, Ci-C4-alkyl eller Ci-C4-fluoralkyl;
R<2>er hydrogen;
R<4>, R<5>, R6 og R<7>er hver uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen, hydroksy, halogen, cyano, nitro, Ci-C4-alkyl, Ci-C4-fluoralkyl, ORa, NRaRt>, COORaog Gruppe B;
Ra og Rber hver uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen,
Ci-C4-alkyl og Gruppe B;
R<4N>er 0 eller eksisterer ikke;
Y er valgt fra gruppen bestående av fenyl, C5-C7monocyklisk heteroaryl,
C9-C10bicyklisk aryl, C9-C10bicyklisk heteroaryl, C4-C7heteroalicyklyl og C5-C7-cykloalkyl, hvor nevnte heteroaryl eller heteroalicyklyl inneholder fra 1 til 4 heteroatomer valgt fra 0, N og S, og med det forbehold at når Y er en bicyklisk heteroarylgruppe er både X og Y koblet til en felles ring hvor nevnte aryl, heteroaryl og heteroalicyklyl eventuelt er substituert med ett til tre like eller forskjellige halogenatomer eller fra én til tre like eller forskjellige substituenter valgt fra okso, hydroksyl, Ci-Ce-alkyl, -NR<55>R<56>, -OCi-Ca-alkyl, -S-Ri, -S(0)2Ri, CF3, CN, hvor nevnte Ci-C6-alkyl eventuelt kan være substituert med Gruppe B;
Z er valgt fra gruppen bestående av C3-7-cykloalkyl,
-COOR3, 4-, 5- eller 6-leddet ringcyklisk N-laktam, -C(0)NR<42>R<43>, -C(0)R<57>, hvor R<57>eventuelt er substituert med CN eller Gruppe B; aryl og heteroaryl; hvor nevnte aryl erfenyl; nevnte heteroaryl er valgt fra gruppen bestående av pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, furanyl, tienyl, pyrrolyl, imidazolyl, tiazolyl, isotiazolyl, oksazolyl, isoksazolyl og C9-C10bicyklisk heteroaryl med 1-4 heteroatomer; hvor nevnte aryl eller heteroaryl eventuelt er substituert med én eller to av like eller forskjellige medlemmer valgt fra gruppen bestående av amino, nitro, cyano, hydroksy, C1-6-alkoksy, -C(0)NH2, Ci-6-alkyl, -NHC(0)CH3, halogen, trifluormetyl og Gruppe B; Gruppe B er valgt fra gruppen bestående av-C(O)NR<40>R<41>, aryl, heteroaryl, heteroalicyklyl, C(0)R<3>, C(=N-0-R1)R3,acetal, UR<8a>, (Ci-6)alkylNR40R41, (C1-6)alkylCOOR<8b>; hvor nevnte aryl, heteroaryl og heteroalicyklyl eventuelt er substituert med ett til tre like eller forskjellige halogenatomer eller fra én til tre like eller forskjellige substituenter valgt fra gruppen F; hvor aryl er naftyl eller substituert fenyl; hvor heteroaryl er et mono- eller bicyklisk system som inneholder fra 3 til 7 ringatomer for et monocyklisk system og opptil 12 atomer i et kondensert bicyklisk system, inklusivt fra 1 til 4 heteroatomer; hvor heteroalicyklyl er en 3- til 7-leddet monocyklisk ring som kan være delvis umettet og kan være substituert med 1 eller 2 oksogrupper og kan inneholde fra 1 til 2 heteroatomer i ringskjelettet og som kan være kondensert til en benzen- eller pyridinring; eller Gruppe B er (Ci-6)alkyl og (C2-6)alkenyl; hvor nevnte (Ci-6)alkyl og (C2-6)alkenyl eventuelt uavhengig er substituert med et medlem valgt fra gruppen bestående av fenyl, heteroaryl eller -C(0)NR<55>R<56>; eller med fra ett til tre like eller forskjellige halogenatomer; hvor heteroaryl er et monocyklisk system som inneholder fra 3 til 7 ringatomer, inklusivt fra 1 til 4 heteroatomer; Gruppe F er valgt fra gruppen bestående av okso, (Ci-6)alkyl, (C3-7)cykloalkyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyklyl, hydroksy, (Ci-6)alkoksy, aryloksy, (Ci-6)tioalkoksy, cyano, halogen, nitro, -C(0)R<57>, benzyl, -NR<42>C(0)-(Ci-6)alkyl, -NR42C(0)-(C3-6)cykloalkyl, -NR<4>2C(0)-aryl, -NR42C(0)-heteroaryl, -NR<42>C(0)-heteroalicyklyl, et 4-, 5- eller 6-leddet ringcyklisk N-laktam, -NR<42>S(0)2-(Ci-6)alkyl, -NR<42>S(0)2-(C3-6)cykloalkyl, -NR<4>2S(0)2-aryl, -NR42S(0)2-heteroaryl, -NR<42>S(0)2-heteroalicyklyl, S(0)2(Ci-6)alkyl, S(0)2aryl, -S(0)2 NR42R43,NR42R43, (Ci-6)alkylC(0)NR42R43, C(0)NR42R4<3>, NHC(0)NR42R4<3>, OC(0)NR42R4<3>, NHC(0)OR5<4>, (Ci-6)alkylNR42R43, COOR<54>og (Ci-6)alkylCOOR<54>; hvor nevnte (Ci-6)alkyl, (C3-7)cykloalkyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyklyl, (Ci-6)alkoksy og aryloksy, eventuelt er substituert med ett til ni like eller forskjellige halogenatomer eller fra én til fem like eller forskjellige substituenter valgt fra gruppen G; hvor aryl er fenyl; heteroaryl er et monocyklisk system som inneholder fra 3 til 7 ringatomer, inklusivt fra 1 til 4 heteroatomer; heteroalicyklyl er valgt fra gruppen bestående av aziridin, azetidin, pyrrolidin, piperazin, piperidin, tetrahydrofuran, tetrahydropyran, azepin og morfolin; Gruppe G er valgt fra gruppen bestående av (Ci-6)alkyl, (C3-7)cykloalkyl, aryl, heteroaryl, heteroalicyklyl, hydroksy, (Ci-6)alkoksy, aryloksy, cyano, halogen, nitro, -C(0)R<57>, benzyl, ikke-aromatisk heterocyklyl med 1-2 heteroatomer, -NR<48>C(0)-(Ci-6)alkyl, -NR<48>C(0)-(C3-6)cykloalkyl, -NR48C(0)-aryl, -NR48C(0)-heteroaryl, -NR<48>C(0)-heteroalicyklyl, et 4-, 5- eller 6-leddet ringcyklisk N-laktam, -NR<48>S(0)2-(Ci-6)alkyl, -NR<48>S(0)2-(C3-6)cykloalkyl, -NR48S(0)2-aryl, -NR48S(0)2-heteroaryl, -NR<48>S(0)2-heteroalicyklyl, sulfinyl, sulfonyl, sulfonamid, NR<48>R<49>, (Ci-e)alkyl C(0)NR<48>R<49>, C(0)NR48R<49>, NHC(0)NR<48>R49, OC(0)NR<48>R<49>, NHC(0)OR<54>', (Ci-e)alkylNR48R4<9>, COOR<54>og (Ci-6)alkylCOOR<54>; hvor aryl er fenyl; heteroaryl er et monocyklisk system som inneholder fra 3 til 7 ringatomer, inklusivt fra 1 til 4
heteroatomer; heteroalicyklyl er valgt fra gruppen bestående av aziridin, azetidin, pyrrolidin, piperazin, piperidin, tetrahydrofuran, tetrahydropyran, azepin og morfolin;
R<3>er valgt fra gruppen bestående av C1-C4alkyl, aryl, heteroaryl og heteroalicyklyl; hvor nevnte Ci-C4-alkyl, aryl, heteroaryl og heteroalicyklyl eventuelt er substituert med ett til tre like eller forskjellige halogenatomer eller med fra én til tre like eller forskjellige substituenter valgt fra gruppen F;
hvorfor R<3>, R<8>, R<8a>, R<8b>aryl er fenyl; heteroaryl er et mono- eller bicyklisk system som inneholder fra 3 til 7 ringatomer for monocykliske systemer og opptil 10 atomer i et bicyklisk system, inklusivt fra 1 til 4 heteroatomer; hvor heteroalicyklyl er valgt fra gruppen bestående av aziridin, azetidin, pyrrolidin, piperazin, piperidin, tetrahydrofuran, tetrahydropyran, azepin og morfolin;
R<8>er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, (Ci-6)alkyl, (C3-7)cykloalkyl, (C2-6)alkenyl, (C3-7)cykloalkenyl, (C2-6)alkynyl, aryl, heteroaryl og heteroalicyklyl; hvor nevnte (Ci-6)alkyl, (C3-7)cykloalkyl, (C2-6)alkenyl, (C3-7)cykloalkenyl, (C2-6)alkynyl, aryl, heteroaryl og heteroalicyklyl eventuelt er substituert med ett til seks like eller forskjellige halogenatomer eller fra én til fem like eller forskjellige substituenter valgt fra gruppen F;
R<8a>er et medlem valgt fra gruppen bestående av aryl, heteroaryl og heteroalicyklyl; hvor hvert medlem uavhengig eventuelt er substituert med ett til seks like eller forskjellige halogenatomer eller fra én til fem like eller forskjellige substituenter valgt fra gruppen F;
R<8b>er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, (Ci-6)alkyl og fenyl;
R9,R10,R11,R12,R13,R14,R15,R1<6>er hver uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen og (Ci-6)alkyl; hvor nevnte (Ci-6)alkyl eventuelt er substituert med ett til tre like eller forskjellige halogenatomer eller én hydroksygruppe eller ett O (Ci-e)alkyl eller én NR<55>R56;eller hvor én av R<9>,R10 eller én avR11,R12med én av R<15>, R<16>eller én av R<13>, R<14>kan danne henholdsvis én-, to- eller tre-atomers broer
omfattende alkyl- eller nitrogenatomer;
X er N eller CH (når X er CH kan konfigurasjonen i senteret X være racemisk eller ren (R)- eller ren (S)-konfigurasjon);
U er valgt fra gruppen bestående av NH eller NCH3, 0 og S;
R40 ogR<41>er uavhengig valgt fra gruppen bestående av
(a) hydrogen; (b) (Ci-6)alkyl substituert med ett til tre like eller forskjellige halogenatomer (c) (Ci-6)alkoksy, aryl, heteroaryl eller heteroalicyklyl; eller R<40>og R<41>tatt sammen med nitrogenet som de er bundet til, danner et medlem valgt fra gruppen bestående av aziridin, azetidin, pyrrolidin, piperazin, 4-NMe-piperazin, piperidin, azepin og morfolin; og hvor nevnte aryl, heteroaryl og heteroalicyklyl eventuelt er substituert med én til to like eller forskjellige substituenter valgt fra Ci-C3alkyl, halogen, hydroksyl, -OR<55>, -NR55R56; -C(0)NR<55>R56;hvorforR40ogR41 aryl er fenyl; heteroaryl er et monocyklisk system som inneholder fra 3 til 6 ringatomer, inklusivt fra 1 til 4 heteroatomer; heteroalicyklyl er valgt fra gruppen bestående av aziridin, azetidin, pyrrolidin, piperazin, piperidin, tetrahydrofuran, tetrahydropyran, azepin og morfolin;
R42 og R<43>er uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen,
(Ci-6)alkyl, allyl, (Ci-6)alkoksy, (C3-7)cykloalkyl, aryl, heteroaryl og heteroalicyklyl; eller R<42>og R<43>tatt sammen med nitrogenet som de er bundet til, danner et medlem valgt fra gruppen bestående av aziridin, azetidin, pyrrolidin, piperazin (eventuelt substituert med Gruppe B), 4-NMe-piperazin, piperidin, azepin og morfolin; og hvor nevnte (Ci-6)alkyl, (Ci-6)alkoksy, (C3-7)cykloalkyl, aryl, heteroaryl og heteroalicyklyl eventuelt er substituert med ett til tre like eller forskjellige halogenatomer eller fra én til to like eller forskjellige substituenter valgt fra gruppen G; hvor for R<42>og R<43>aryl er fenyl; heteroaryl er et monocyklisk system som inneholder fra 3 til 6 ringatomer, inklusivt fra 1 til 4 heteroatomer; heteroalicyklyl er et medlem valgt fra gruppen bestående av aziridin, azetidin, pyrrolidin, piperazin, piperidin, tetrahydrofuran, tetrahydropyran, azepin og morfolin;
R46er valgt fra gruppen bestående av H, OR<57>og NR<55>R56;
R<47>er valgt fra gruppen bestående av H, amino, halogen, fenyl og
(Ci-6)alkyl;
R48 og R<49>er uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen,
(Ci-6)alkyl og fenyl;
R<50>er valgt fra gruppen bestående av H, (Ci-6)alkyl, (C3-6)cykloalkyl og benzyl; hvor hver av nevnte (Ci-6)alkyl, (C3-7)cykloalkyl og benzyl eventuelt er substituert med ett til tre like eller forskjellige halogen, amino, OH, CN eller NO2;
R<54>er valgt fra gruppen bestående av hydrogen og (Ci-6)alkyl;
R54' er (Ci-e)alkyl;
R<55>og R<56>er uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen og (Ci-e)alkyl; og
R<57>er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, (Ci-6)alkyl og fenyl; og
med det forbehold at forbindelsen med formel (I) ikke er 1-(2-(5-fluor-1H-indol-3-yl)-1,2-dioksoetyl)-4-(6-metoksykarbonyl-1 H-indol-4-yl)piperazin eller
I en foretrukket utførelsesform står R<1>for H,
R5 er H,
R<4N>eksisterer ikke.
I en foretrukket utførelsesform er R<4>halogen eller OR<a>.
I en foretrukket utførelsesform, erR<9>,R10,R11,R12,R13,R14, R15 R16 hver uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen, C1-C4alkyl og C1-C4-fluoralkyl.
I en foretrukket utførelsesform er A
I en foretrukket utførelsesform er Y fenyl,
C5-C7monocyklisk heteroaryl,
C9-C10bicyklisk aryl,
C9-C10bicyklisk heteroaryl,
C4-C7heteroalicyklyl og
C5-C7cykloalkyl.
I en foretrukket utførelsesform er Y tetrazol, triazol, pyrazol, imidazol, pyridin, pyrazin, pyrimidin eller pyridazin.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er anvendelige for behandling av pattedyr infisert med et virus, spesielt hvor nevnte virus er HIV, omfattende administrering av en antiviralt effektiv mengde av en forbindelse med formel I og én eller flere farmasøytisk akseptable bærere, hjelpestoffer eller fortynningsmidler, til nevnte pattedyr. Eventuelt kan forbindelsen med formel I administreres i kombinasjon med en antiviral effektiv mengde av et AIDS-behandlingsmiddel valgt fra gruppen bestående av: (a) et AIDS antiviralt middel; (b) et antiinfeksjonsmiddel; (c) en immunmodulator; og (d) HIV "entry" inhibitorer.
En annen utførelsesform av foreliggende oppfinnelse er en farmasøytisk blanding som omfatter en antiviralt effektiv mengde av en forbindelse med formel I og én eller flere farmasøytisk akseptable bærere, hjelpestoffer, fortynningsmidler og eventuelt i kombinasjon med en antiviral effektiv mengde av et AIDS-behandlingsmiddel valgt fra gruppen bestående av: (a) et AIDS antiviralt middel; (b) et antiinfeksjonsmiddel; (c) en immunmodulator; og (d) HIV "entry" inhibitorer.
DETALJERT BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN
Siden forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan ha asymmetriske sentra og derfor forekomme som blandinger av diastereomerer og enantiomerer, omfatter foreliggende oppfinnelse de enkelte diastereoisomere og enantiomere formene av forbindelsene med formel I i tillegg til blandingene av disse.
Definisjoner
Betegnelsen "C-i-e-alkyl" betyr i denne sammenheng og i kravene (om intet annet er angitt) rettkjedede eller forgrenede alkylgrupper så som metyl, etyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, t-butyl, amyl, heksyl.
"Ci-C4-fluoralkyl" refererer seg til F-substituert Ci -C4-alkyl, hvor minst ett H-atom er erstattet med F-atom og hvert H-atom uavhengig kan være erstattet med F-atom;
"Halogen" refererer seg til klor, brom, jod eller fluor.
En "aryl" gruppe refererer seg til en utelukkende karbon-monocykliske eller kondenserte ring-polycykliske (dvs. ringer som har felles par av karbonatomer) grupper som har et fullstendig konjugert pi-elektronsystem. Eksempler på arylgrupper er fenyl, naftalenyl og antracenyl.
I denne sammenheng refererer en "heteroaryl" gruppe seg til en monocyklisk eller kondensert ring- (dvs. ringer som har et tilstøtende atompar felles) gruppe som i ringene har ett eller flere atomer valgt fra gruppen bestående av nitrogen, oksygen og svovel, og dessuten har et fullstendig konjugert pi-elektronsystem. Om intet annet er angitt kan heteroarylgruppen være knyttet til enten et karbon- eller nitrogenatom i heteroarylgruppen. Det skal bemerkes at betegnelsen heteroaryl er ment å omfatte et N-oksyd av det opphavelige heteroaryl dersom et slikt N-oksyd er kjent som kjemisk mulig. Eksempler på heteroarylgruppererfuryl, tienyl, benzotienyl, tiazolyl, imidazolyl, oksazolyl, oksadiazolyl, tiadiazolyl, benzotiazolyl, triazolyl, tetrazolyl, isoksazolyl, isotiazolyl, pyrrolyl, pyranyl, tetrahydropyranyl, pyrazolyl, pyridyl, pyrimidinyl, kinolinyl, isokinolinyl, purinyl, karbazolyl, benzoksazolyl, benzimidazolyl, indolyl, isoindolyl, pyrazinyl. diazinyl, pyrazin, triazinyl, tetrazinyl og tetrazolyl.
I denne sammenheng refererer en "heteroalicyklisk" gruppe seg til en monocyklisk eller kondensert ringgruppe som i ringene ett eller flere atomer valgt fra gruppen bestående av nitrogen, oksygen og svovel. Ringer velges blant de som gir stabile arrangementer av bindinger og er ikke ment å innbefatte ikke-eksisterende systemer. Ringene kan også ha én eller flere dobbeltbindinger. Ringene har imidlertid ikke et fullstendig konjugert pi-elektronsystem. Eksempler på heteroalicykliske grupper er azetidinyl, piperidyl, piperazinyl, imidazolinyl, tiazolidinyl, 3-pyrrolidin-1-yl, morfolinyl, tiomorfolinyl og tetrahydropyranyl.
En "alkyl" gruppe refererer seg til et mettet alifatisk hydrokarbon omfattende rettkjedede og forgrenede grupper. Fortrinnsvis har alkylgruppen 1 til 20 karbonatomer (når det her angis et nummerisk område; f.eks. "1-20", betyr det at gruppen, i dette tilfelle alkylgruppen, kan inneholde 1 karbonatom, 2 karbonatomer, 3 karbonatomer, etc, opptil og inklusivt 20 karbonatomer). Mer foretrukket er alkylgruppen av middels størrelse med 1 til 10 karbonatomer. Mest foretrukket er det et lavere alkyl som har 1 til 4 karbonatomer.
En "cykloalkyl" gruppe refererer seg til en fullstendig karbon-monocyklisk eller kondensert ring (dvs. ringer som har tilfelles et nabostilt par av karbonatomer) hvor én eller flere ringer ikke har et fullstendig konjugert pi-elektronsystem. Eksempler på cykloalkylgrupper er cyklopropan, cyklobutan, cyklopentan, cyklopenten, cykloheksan, cykloheksadien, cykloheptan, cykloheptatrien og adamantan.
En "alkenyl" gruppe refererer seg til en alkylgruppe, som definert her, som har minst to karbonatomer og minst én karbon-karbon dobbeltbinding.
En "alkynyl" gruppe refererer seg til en alkylgruppe, som definert her, som har minst to karbonatomer og minst én karbon-karbon trippelbinding.
En "hydroksy" gruppe refererer seg til en -OH-gruppe.
En "alkoksy" gruppe refererer seg til både en -O-alkyl- og en -O-cykloalkylgruppe som definert her.
En "aryloksy" gruppe refererer seg til både en -O-aryl- og en -O-heteroarylgruppe, som definert her.
En "heteroaryloksy" gruppe refererer seg til en heteroaryl-O-gruppe med heteroaryl, som definert her.
En "heteroalicykloksy" gruppe refererer seg til en heteroalicyklisk-O-gruppe med heteroalicyklisk, som definert her.
En "tiohydroksy" gruppe refererer seg til en -SH-gruppe.
En "tioalkoksy" gruppe refererer seg til både en S-alkyl- og en -S-cykloalkylgruppe, som definert her.
En "tioaryloksy" gruppe refererer seg til både en -S-aryl- og en -S-heteroarylgruppe, som definert her.
En "tioheteroaryloksy" gruppe refererer seg til en heteroaryl-S-gruppe med heteroaryl, som definert her.
En "tioheteroalicykloksy" gruppe refererer seg til en heteroalicyklisk -S-gruppe med heteroalicyklisk, som definert her.
En "karbonyl" gruppe refererer seg til en -C(=0)-R"-gruppe, hvor R" er valgt fra gruppen bestående av hydrogen, alkyl, alkenyl, alkynyl, cykloalkyl, aryl, heteroaryl (bundet gjennom et ringkarbonatom) og heteroalicyklisk (bundet gjennom et ringkarbonatom), slik som hver av disse her er definert.
En "aldehyd" gruppe refererer seg til en karbonylgruppe hvor R" er hydrogen.
En "tiokarbonyl" gruppe refererer seg til en -C(=S)-R"-gruppe, hvor R" er som definert her.
En "keto" gruppe refererer seg til en -CC(=0)C-gruppe hvor karbonatomet på den ene eller begge sider av C=0 kan være alkyl, cykloalkyl, aryl eller et karbonatom av en heteroaryl- eller heteroalicyklisk gruppe.
En "trihalogenmetankarbonyl" gruppe refererer seg til en Z3CC(=0) gruppe, hvor nevnte Z er et halogen.
En "C-karboksy" gruppe refererer seg til en -C(=0)0-R" gruppe, hvor R" er som definert her.
En "O-karboksy" gruppe refererer seg til en R"C(-0)0 gruppe, hvor R" er som definert her.
En "karboksylsyre" gruppe refererer seg til en C-karboksygruppe, hvor R" er hydrogen.
En "trihalogenmetyl" gruppe refererer seg til en -CZ3-gruppe, hvor Z er en halogengruppe som definert her.
En "trihalogenmetansulfonyl" gruppe refererer seg til en Z3CS(=0)2gruppe, hvor Z er som definert ovenfor.
En "trihalogenmetansulfonamido" gruppe refererer seg til en Z3CS(=0)2NR<X>gruppe, hvor Z er som definert ovenfor og Rx er H eller (Ci-6)alkyl.
En "sulfinyl" gruppe refererer seg til en -S(=0)-R"gruppe, hvor R" er (C-i-6)alkyl.
En "sulfonyl" gruppe refererer seg til en -S(=0)2R"gruppe, hvor R" er (C-i-6)alkyl.
En "S-sulfonamido" gruppe refererer seg til -S(=0)2NR<X>R<Y>, hvor Rx og RY uavhengig er H eller (Ci-6)alkyl.
En "N-sulfonamido" gruppe refererer seg til en R"S(=0)2NRx gruppe, hvor Rx er H eller (Ci-e)alkyl.
En "O-karbamyl" gruppe refererer seg til en -OC(=0)NRxR<y>gruppe, hvor Rx og RY uavhengig er H eller (Ci-6)alkyl.
En "N-karbamyl" gruppe refererer seg til en R<x>OC(=0)NR<y>gruppe, hvor Rx og Ry uavhengig er H eller (Ci-6)alkyl.
En "O-tiokarbamyl" gruppe refererer seg til en -OC(=S)NRxR<y>gruppe, hvor Rx og Ry uavhengig er H eller (Ci-6)alkyl.
En "N-tiokarbamyl" gruppe refererer seg til en R<x>OC(=S)NR<y>gruppe, hvor Rx og Ry uavhengig er H eller (Ci-6)alkyl.
En "amino" gruppe refererer seg til en -NH2gruppe.
En "C-amido" gruppe refererer seg til en -C(=0)NRxR<y>gruppe, hvor Rx og Ry uavhengig er H eller (Ci-6)alkyl.
En "C-tioamido" gruppe refererer seg til en -C(=S)NRxR<y>gruppe, hvor Rx og Ry uavhengig er H eller (Ci-6)alkyl.
En "N-amido" gruppe refererer seg til en R<x>C(=0)NR<y>gruppe, hvor Rx og Ry uavhengig er H eller (Ci-6)alkyl.
En "ureido" gruppe refererer seg til en -NR<x>C(=0)NR<y>R<y2>gruppe, hvor Rx, Ry og R<y2>uavhengig er H eller (Ci-e)alkyl.
En "guanidino" gruppe refererer seg til en -R<x>NC(=N)NR<y>R<y2>gruppe, hvor Rx, Ry og R<y2>uavhengig er H eller (Ci-e)alkyl.
En "guanyl" gruppe refererer seg til en R<x>R<y>NC(=N)-gruppe, hvor Rx og Ry uavhengig er H eller (Ci-6)alkyl.
En "cyano" gruppe refererer seg til en -CN-gruppe.
En "silyl" gruppe refererer seg til -Si(R")3, hvor R" er (Ci-6)alkyl eller fenyl. En "fosfonyl" gruppe refererer seg til P(=0)(ORx)2, hvor Rx er (Ci-e)alkyl.
En "hydrazino" gruppe refererer seg til en -NR<x>NR<y>R<y2>-gruppe, hvor Rx, Ry og R<y2>uavhengig er H eller (Ci-6)alkyl.
En "4-, 5- eller 6-leddet ringcyklisk N-laktam" gruppe refererer seg til
Hver to nabostilte R-grupper kan kombineres under dannelse av en ytterligere aryl-, cykloalkyl-, heteroaryl- eller heterocyklisk ring kondensert til den ring som opprinnelig bar disse R-gruppene.
Det er kjent at nitrogenatomer i heteroarylsystemer kan "delta i en heteroarylring-dobbeltbinding", og dette refererer seg til den form av dobbeltbindinger i de to tautomere strukturene som omfatter fem-leddede ring-hetero-arylgrupper. Som velkjent for kjemikere på området avgjør dette hvorvidt nitrogenatomer kan være substituert. Beskrivelsen og kravene ifølge foreliggende oppfinnelse er basert på de kjente generelle prinsipper for kjemisk binding. Det er underforstått at kravene ikke omfatter strukturer som er kjent som ustabile eller ute av stand til å eksistere ifølge litteraturen.
Fysiologisk akseptable salter og prodrugs av her angitte forbindelser ligger innenfor rammen oppfinnelsen. Betegnelsen "farmasøytisk akseptabelt salt" er her og i kravene ment å omfatte ugiftige baseaddisjonssalter. Egnede salter omfatter de som er avledet av organiske og uorganiske syrer så som saltsyre, hydrogenbromidsyre, fosforsyre, svovelsyre, metansulfonsyre, eddiksyre, vinsyre, melkesyre, sulfinsyre, sitronsyre, maleinsyre, fumarsyre, sorbinsyre, akonitsyre, salicylsyre, ftalsyre. Betegnelsen "farmasøytisk akseptabelt salt" er her også ment å omfatte salter av sure grupper, så som et karboksylat, med slik motioner som ammonium, alkalimetallsalter, særlig natrium eller kalium, jordalkalimetallsalter, særlig kalsium eller magnesium og salter med egnede organiske baser så som lavere alkylaminer (metylamin, etylamin, cykloheksylamin) eller med substituerte lavere alkylaminer (f.eks. hydroksyl-substituerte alkylaminer så som dietanolamin, trietanolamin eller tris(hydroksymetyl)-aminometan) eller med baser så som piperidin eller morfolin.
I fremgangsmåten ifølge foreliggende oppfinnelse betyr betegnelsen "antiviral effektiv mengde" den totale mengde av virkestoff for fremgangsmåten som er tilstrekkelig til å vise en meningsfull fordel for pasienten, dvs. heling av akutte tilstander som kjennetegnes ved inhibering av HIV-infeksjonen. Anvendt for et enkelt virkestoff administrert alene, refererer betegnelsen til vedkommende ingrediens som sådan. Anvendt på en kombinasjon, refererer betegnelsen seg til kombinerte mengder av virkestoffene som resulterer i den terapeutiske effekt, enten de administreres i kombinasjon, etter hverandre eller samtidig. Betegnelsene "behandle, behandling av, behandling" som benyttes her og i kravene, betyr forhindring eller lindring av sykdommer assosiert med HIV-infeksjon.
Foreliggende oppfinnelse er også rettet mot kombinasjoner av forbindelsene med ett eller flere midler anvendelige ved behandlingen av AIDS. For eksempel kan forbindelsene ifølge denne oppfinnelse administreres effektivt enten i perioder før eksponering og/eller etter eksponering, i kombinasjon med effektive mengder av AIDS antivirale midler, immunmodulatorer, antiinfektiva eller vaksiner, så som de i de etterfølgende tabell.
Dessuten kan de her beskrevne forbindelsene benyttes i kombinasjon med en annen klasse av midler til behandling av AIDS og som betegnes HIV "entry" inhibitorer. Eksempler på slike HIV "entry" inhibitorer er omtalt i DRUGS OF THE FUTURE 1999, 24(12), s. 1355-1362; CELL, Bd. 9, s. 243-246, Okt. 29, 1999; og DRUG DISCOVERY TODAY, Bd. 5, nr. 5, Mai 2000, s. 183-194 og Inhibitors of the entry of HIV into hostcells. Meanwell, Nicholas A.; Kadow, John F. Current Opinion in Drug Discovery & Development (2003), 6(4), 451-461. Nærmere bestemt kan forbindelsene benyttes i kombinasjon med andre "attachment" inhibitorer, fusjonsinhibitorer og kjemokinreseptor-antagonister rettet enten mot CCR5- eller CXCR4-coreseptoren.
Det vil være klart at rammen for kombinasjoner av forbindelsene ifølge denne oppfinnelse med AIDS-antivirale midler, immunmodulatorer, anti-infeksjonsmidler, HIV "entry" inhibitorer eller vaksiner er ikke begrenset til listen i tabellen ovenfor, men omfatter prinsipielt enhver kombinasjon med hvilken som helst farmasøytisk blanding egnet for behandlingen av AIDS.
Foretrukne kombinasjoner er samtidige eller vekslende behandlinger med en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse og en inhibitor for HIV protease og/eller en ikke-nukleosid inhibitor av HIV revers transkriptase. En eventuell fjerde komponent i kombinasjonen er en nukleosid inhibitor av HIV revers transkriptase, så som AZT, 3TC, ddC eller ddl. En foretrukket inhibitor av HIV protease er Reyataz® (virkestoff Atazanavir). Typisk administreres en dose på 300 til 600 mg én gang per dag. Denne kan administreres sammen med en lav dose Ritonavir (50 til 500 mg). En annen foretrukket inhibitor av HIV protease er Kaletra®. En annen egnet inhibitor av HIV protease er indinavir, som er sulfatsaltet av N-(2(R)-hydroksy-1-(S)-indanyl)-2(R)-fenylmetyl-4-(S)-hydroksy-5-(1-(4-(3-pyridyl-metyl)-2(S)-N'-(t-butylkarboksamido)-piperazinyl))-pentanamid-etanolat og som syntetiseres i henhold til U.S. 5.413.999. Indinavir administreres i alminnelighet i en dose på 800 mg tre ganger per dag. Andre foretrukne proteaseinhibitorer er nelfinavir og ritonavir. En annen foretrukket inhibitor av HIV protease er saquinavir som administreres i en dose på 600 eller 1200 mg tid. Foretrukne ikke-nukleoside inhibitorer av HIV revers transkriptase innbefatter efavirenz. Fremstillingen av ddC, ddl og AZT er også beskrevet i EPO 0.484.071. Disse kombinasjonene kan ha uventede virkninger på begrensning av spredningen og graden av infeksjon av HIV. Foretrukne kombinasjoner innbefatter de med de følgende (1) indinavir med efavirenz og, eventuelt, AZT og/eller 3TC og/eller ddl og/eller ddC; (2) indinavir og hvilke som helst av AZT og/eller ddl og/eller ddC og/eller 3TC, særlig indinavir og AZT og 3TC; (3) stavudin og 3TC og/eller zidovudin; (4) zidovudin og lamivudin og 141W94 og 1592U89; (5) zidovudin og lamivudin.
I slike kombinasjoner kan forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse og andre virkestoffer administreres separat eller sammen. Dessuten kan administreringen av ett element være før, samtidig med eller etter administreringen av andre midler.
Foretrukne kombinasjoner er samtidige eller vekslende behandlinger med en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse og en inhibitor for HIV protease og/eller en ikke-nukleosid inhibitor av HIV revers transkriptase. En eventuell fjerde komponent i kombinasjonen er en nukleosid inhibitor av HIV revers transkriptase, så som AZT, 3TC, ddC eller ddl. En foretrukket inhibitor av HIV protease er indinavir, som er sulfatsaltet av N-(2(R)-hydroksy-1-(S)-indanyl)-2(R)-fenylmetyl-4-(S)-hydroksy-5-(1-(4-(3-pyridyl-metyl)-2(S)-N'-(t-butylkarboksamido)-piperazinyl))-pentanamid-etanolat og syntetiseres i henhold til U.S. 5.413.999. Indinavir administreres i alminnelighet i en dose på 800 mg tre ganger per dag. Andre foretrukne proteaseinhibitorer er nelfinavir og ritonavir. En annen foretrukket inhibitor av HIV protease er saquinavir som administreres i en dose på 600 eller 1200 mg tid. Foretrukne ikke-nukleoside inhibitorer av HIV revers transkriptase inkluderer efavirenz. Fremstillingen av ddC, ddl og AZT er også beskrevet i EPO 0.484.071. Disse kombinasjonene kan ha uventede virkninger på begrensning av spredningen og graden av infeksjon av HIV. Foretrukne kombinasjoner inkluderer de med de følgende (1) indinavir med efavirenz og, eventuelt, AZT og/eller 3TC og/eller ddl og/eller ddC; (2) indinavir og hvilken som helst av AZT og/eller ddl og/eller ddC og/eller 3TC, særlig indinavir og AZT og 3TC; (3) stavudin og 3TC og/eller zidovudin; (4) zidovudin og lamivudin og 141W94 og 1592U89; (5) zidovudin og lamivudin.
I slike kombinasjoner kan forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse og andre virkestoffer administreres separat eller sammen. Dessuten kan administreringen av ett element kan være før, samtidig med eller etter administreringen av andre midler.
Forkortelser
Følgende forkortelser, hvorav de fleste er konvensjonelle forkortelser som er velkjent for fagmannen, benyttes gjennom beskrivelsen inklusivt eksemplene. Enkelte av de anvendte forkortelsene er som følger:
h = time(r)
rt = romtemperatur
mol = mol
mmol = millimol
g = gram
mg = milligram
ml_ = milliliter
TFA = trifluoreddiksyre
DCE = 1,2-dikloretan
CH2CI2= diklormetan
TPAP = tetrapropylammonium-perruthenat
THF = tetrahydofuran
DEPBT = 3-(dietoksyfosforyloksy)-1,2,3-benzotriazin-4(3H)-on DMAP = 4-dimetylaminopyridin
P-EDC = polymer-båret 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid
EDC = 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid
DMF = A/,A/-dimetylformamid
Hunigs base = A/,A/-diisopropyletylamin
MCPBA = mefa-klorperbenzoesyre
azaindol = 1/-/-pyrrolo-pyridin
4- azaindol = 1/-/-pyrrolo[3,2-6]pyridin
5- azaindol = 1/-/-pyrrolo[3,2-c]pyridin
6- azaindol = 1/-/-pyrrolo[2,3-c]pyridin
7- azaindol = 1/-/-pyrrolo[2,3-6]pyridin
PMB = 4-metoksybenzyl
DDQ = 2,3-diklor-5,6-dicyano-1,4-benzokinon
OTf = trifluormetansulfonoksy
NMM = 4-metylmorfolin
PIP-COPh = 1-benzoylpiperazin
NaHMDS = natrium-heksametyldisilazid
EDAC = 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid
TMS = trimetylsilyl
DCM = diklormetan
DCE = dikloretan
MeOH = metanol
THF = tetrahydrofuran
EtOAc = etylacetat
LDA = litium-diisopropylamid
TMP-Li = 2,2,6,6-tetrametylpiperidinyllitium
DME = dimetoksyetan
DIBALH = diisobutylaluminium-hydrid
HOBT = 1-hydroksybenzotriazol
CBZ = benzyloksykarbonyl
PCC = pyridinium-klorkromat
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan administreres peroralt, parenteralt (inklusivt subkutane injeksjoner, intravenøse, intramuskulære, intrasternale injeksjons- eller infusjonsteknikker), ved sprayinhalasjon eller rektalt, i enhetsdoseformuleringer inneholdende konvensjonelle ugiftige farmasøytisk akseptable bærere, adjuvanser og fortynningsmidler.
I henhold til foreliggende oppfinnelse tilveiebringes dessuten en forbindelse med formel I for behandling og en farmasøytisk blanding for behandling av virus-infeksjoner som HIV-infeksjon og AIDS. Behandlingen innebærer administrering av en farmasøytisk blanding omfattende en farmasøytisk bærer og en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse.
De farmasøytiske blandingene kan være i form av peroralt administrerbare suspensjoner eller tabletter; nesespray, sterile injiserbare preparater, foreksempel som sterile injiserbare vandige eller oljeaktige suspensjoner eller suppositorier.
For peroral administrering som en suspensjon, fremstilles disse blandingene etter velkjente teknikker innen farmasøytisk formulering, og disse kan inneholde mikrokrystallinsk cellulose som fyllmiddel, alginsyre eller natriumalginat som suspenderingsmiddel, metylcellulose som viskositetsforbedrer og/eller søtningsmiddel/aromamidler kjent på området. Som tabletter med umiddelbar frigjøring kan disse blandingene inneholde mikrokrystallinsk cellulose, dikalsium-fosfat, stivelse, magnesiumstearat og laktose og/eller andre hjelpestoffer, binde-midler, fyllmidler, sprengemidler, fortynningsmidler og smøremidler kjent på området.
De injiserbare løsningene eller suspensjonene kan formuleres i henhold til kjent teknikk, ved å benytte egnede ugiftige, parenteralt akseptable fortynnings-eller løsningsmidler, så som mannitol, 1,3-butandiol, vann, Ringers løsning eller isotonisk natriumklorid-løsning eller passende dispergerings- eller fukte- og suspenderingsmidler, så som sterile blandinger av ikke-flyktige oljer, inklusivt syntetiske mono- eller diglycerider, og fettsyrer inklusivt oljesyre.
Forbindelsene ifølge denne oppfinnelse kan administreres peroralt til mennesker i et doseringsområde på 1 til 100 mg/kg kroppsvekt i avdelte doser. Et foretrukket doseringsområde er 1 til 10 mg/kg kroppsvekt peroralt i avdelte doser. Et annet foretrukket doseringsområde er 1 til 20 mg/kg kroppsvekt i avdelte doser. Det vil imidlertid være klart at det spesifikke dosenivå og hyppigheten av dosering for en bestemt pasient kan varieres og vil avhenge av en rekke faktorer inklusivt aktiviteten til den bestemte forbindelse som benyttes, den metabolske stabilitet og lengden av virkningen av vedkommende forbindelse, alder, kroppsvekt, generell helsetilstand, kjønn, diett, administreringsmåte og -tid, utskillingshastighet, medikamentkombinasjon, alvoret av vedkommende sykdom og av verten som gjennomgår behandling.
Kjemi
Foreliggende oppfinnelse omfatter forbindelser med formel I, deres farmasøytiske formuleringer og deres anvendelse til pasienter som lider av eller er mottagelige for HIV-infeksjon. Forbindelsene med formel I inkluderer farmasøytisk akseptable salter derav. Generelle fremgangsmåter for å konstruere forbindelser med formel I og mellomprodukter anvendelige for deres syntese er beskrevet i de etterfølgende Skjemaer.
Reaksjonsskjemaer.
Fremstilling av forbindelser med Formel I
Fremstillingen av templat A-CO-CO-CI og A-CO-CO-OH er beskrevet i detalj i US6469006B1, US6573262B2, US6900323B2, US20050090522A1, US6825201, US20050261296A1, US20040186292A1, US20050267130A1, US6900206B2, US20040063746, WO-00076521, WO-00162255, WO-00204440, WO-02062423, WO-02085301, WO-03068221 og US-2004/0063744.
En kjemiker med kunnskap på området vil vite om mange standard-betingelser for omsetning av et amin med et acylhalogenid 1 (Skjema 1) og karboksylsyre 4 (Skjema 2) som vil kunne benyttes til å omdanne syrekloridet eller syren til de ønskede amidprodukter. Noen generelle referanser til disse metoder og retningslinjer for bruk finnes i "Comprehensive Organic Transformation" av Richard C. Larock, Wiley-VCH, New York, 1989, 972 (Carboxylic acids to amides), 979 (Acid halides to amides).
Skjema 1
Skjema 1 viser en generell fremgangsmåte for fremstilling av et amid fra piperazinamidin 2 og acylklorid 1. En passende base (fra katalytisk mengde til et overskudd) valgt fra natriumhydrid, kaliumkarbonat, trietylamin, DBU, pyridin, DMAP eller di-isopropyletylamin ble tilsatt til en løsning av forbindelse 2 og acylklorid i et passende løsningsmiddel valgt blant diklormetan, kloroform, benzen, toluen, THF, dietyleter, dioksan, aceton, N,N-dimetylformamid eller pyridin ved romtemperatur. Reaksjonen ble foretatt enten ved romtemperatur eller eksperimentelt bestemte optimaltemperaturer opptil 150°C over et tidsrom på 30 minutter til 16 timer, for å gi forbindelse 3 som kan være enten forbindelser med formel I eller forløpere. Enkelte utvalgte referanser som innebærer slike reaksjoner omfatter a) Indian J. Chem., Sed B 1990, 29, 1077; 2) Chem. Sei. 1998, 53, 1216; 3) Chem. Pharm. Bull. 1992, 40, 1481; 4) Chem. Heterocycl. Compd. 2002, 38, 539.
Som vist i Skjema 2 kan struktur 2 alternativt kobles med en syre 4 ved å benytte standardreagenser for dannelse av amidbinding eller peptidbinding. Mange reagenser for amidbindingskoblinger vil være kjent av organiske kjemikere, og nesten alle disse er anvendelige for å fremstille koblede amidprodukter. Kombinasjonen av EDAC og trietylamin i tetrahydrofuran eller BOPCI og diisopropyletylamin i kloroform har oftest vært benyttet, men DEPBT eller andre koblingsreagenser som PyBop vil kunne benyttes. Andre egnede koblings-betingelser gjør bruk av HATU ((a) J. Chem. Soc. Chem Comm. 1994, 201; (b) J. Am. Chem. Soc. 1994, 116,11580). Dessuten representerer DEPBT (3-(dietoksyfosforyloksy)-l ,2,3-benzotriazin-4(3/-/)-on) og A/,A/-diisopropyletylamin, vanlig kjent som Hunigs base, en annen effektiv metode for å danne amid-bindingen og gi forbindelser med formel I. DEPBT anskaffes enten fra Aldrich eller fremstilles etter fremgangsmåten beskrevet i Organic Lett., 1999, 1, 91. Typisk benyttes et inert løsningsmiddel som DMF eller THF, men andre aprotiske løsningsmidler vil kunne benyttes.
Det generelle middel 2, hvis anvendelse er eksemplifisert i Skjema 1 og 2, er enten kommersielt tilgjengelig eller kan fremstilles etter de generelle metoder som er beskrevet i den eksperimentelle del. Noen få ikke-begrensende eksempler på enten kommersielt tilgjengelige eller syntetiserte reagenser 2 er angitt nedenfor:
Når X er N i Formel I, kan den også fremstilles ved å koble acylklorid 1 eller syre 4 med Boc-beskyttet piperazin under betingelsene beskrevet i Skjema 1 og 2 for å gi forbindelse 5. Den følgende veletablerte avbeskyttelse av Boc-gruppen under sure betingelser vil gi piperazinamid 6. TFA og vandig HCI er de syrer som typisk benyttes for å bevirke fjerning av Boc-gruppen, mens de mest vanlig anvendte løsningsmidler enten er eter eller diklormetan. TFA kan i enkelte tilfeller benyttes både som reagens og løsningsmiddel. Andre sure midler, som f.eks. maursyre og løsningsmidler vil også kunne benyttes for å bevirke fjerning av BOC. Amidet 6 vil kunne omsettes med halogenid under Sn2, SNAr og metall-mediert krysskobling for å gi forbindelse 3 (forbindelser med formel I eller forløpere).
For Sn2 og SNAr reaksjon i et aprotisk (f.eks. THF, DMF, DMSO, benzen) eller protisk løsningsmiddel (f.eks. MeOH, EtOH, PrOH, BuOH) ved en temperatur fra romtemperatur til 150°C uten eller i nærvær av en base som NaH, pyridin, Et3N, di-Pr2NEt, Na2C03, K2CO3, kan piperazinamid 6 reagere med halogenid eller heteroarylsulfon 7 for å gi forbindelse 3.
For metall-mediert krysskobling kan temperaturen variere fra romtemperatur til 150°C og løsningsmidler fortrinnsvis være aprotiske løsningsmidler som THF, dioksan, DME, DMF og DMSO. Baser kan velges blant NaH, KH, pyridin, Et3N, di-Pr2NEt, Na2C03, K2CO3, NaHMDS, LiHMDS, KHMDS, Na3P04, Na2HP04 og NaH2P04. Pd-, Rh-, Ru-, Ni- eller Pt-midler kan benyttes som katalysatorer.
EKSEMPLER
De etterfølgende eksempler illustrerer typiske synteser av forbindelsene med Formel I slik som generelt beskrevet ovenfor. Disse eksemplene er kun illustrerende. Reagensene og utgangsmaterialene er lett tilgjengelige for fagmannen.
Kjemi
Typiske fremgangsmåter og karakterisering av utvalgte eksempler:
Om intet annet er angitt ble løsningsmidler og reagenser benyttet direkte som mottatt fra kommersielle kilder, og reaksjoner ble foretatt under nitrogen atmosfære. Hurtigkromatografi (Flash chromatography) ble foretatt på silikagel 60 (0,040-0,063 partikkelstørrelse; EM Science supply).<1>H NMR spektra ble tatt opp på Bruker DRX-500f ved 500 MHz (eller Bruker DPX-300B eller Varian Gemini 300 ved 300 MHz som angitt). Kjemiske skift ble angitt i ppm og etter 5 skala i forhold til 5TMS = 0. De følgende interne referanser ble benyttet for restprotoner i følgende løsningsmidler: CDCb (8h 7,26), CD3OD (8h 3,30) og DMSO-d6 (8h 2,50). Vanlige akronymer ble benyttet for å beskrive multiplisitetsmønsterne: s (singlett), d (dublett), t (triplett), q (kvartett), m (multiplett), b (bred), app (tilsynelatende). Koblingskonstanten ( J) er i Hertz. Alle væskekromatografiske data (LC) ble registrert med en Shimadzu LC-10AS væskekromatograf ved å benytte en SPD-10AV UV-Vis-detektor, hvor massespektrometriske (MS) data ble bestemt ved å benytte en Micromass Platform for LC i elektrospray-modus.
Alle væskekromatografiske data (LC) ble registrert med en Shimadzu LC-10AS væskekromatograf ved å benytte en SPD-10AV UV-Vis-detektor, hvor massespektrometriske (MS) data ble bestemt ved å benytte en Micromass Platform for LC i elektrospray-modus.
Fremstillingen av templater A-CO-CO-CI og A-CO-CO-OH er om intet annet er angitt detaljert beskrevet i US6469006B1, US6573262B2, US6900323B2, US20050090522A1, US6825201, US20050261296A1, US20040186292A1, US20050267130A1, US6900206B2, US20040063746, WO-00076521, WO-00162255, WO-00204440, WO-02062423, WO-02085301, WO-03068221 eller US-2004/0063744. Nærmere bestemt ble fremstillingen av 7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin, 2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre, 2-(4-metoksy-7-(1 H-1,2,3-triazol-1 -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre, 2-(7-klor-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre og 2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1 -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre fremstilt som beskrevet i US20050090522A1.
Eksempelkjemi Seksjon A
De følgende generelle metoder gjelder Eksempelkjemi Seksjon A:
LC/ MS- metoder ( dvs. identifisering av forbindelse)
Kolonne A: Xterra MS C18 5(xm 4,6x30mm kolonne
Kolonne B: Phenomenex 5n C18 4,6x30mm kolonne
Kolonne C: Xterra MS C18 4,6x30mm kolonne
Kolonne D: Phenomenex 4,6x50mm C18 5 nm kolonne
Kolonne E: Xterra 4,6x30mm S5 kolonne
Kolonne F: Phenomenex-Luna 4,6x50mm S10 kolonne
Kolonne G: Phenomenex 10n 3,0x50mm kolonne
Kolonne H: Phenomenex-Luna 4,6x30mm S5 kolonne
Kolonne I: Phenomenex 4,6x30mm 10 n kolonne
Kolonne J: Phenomenex C18 10^3,0x50mm kolonne
Kolonne K: Phenomenex, Onyx Monolithic C18 50x4,6mm kolonne
Gradient: 100% Løsningsmiddel A/0% Løsningsmiddel B til 0% Løsningsmiddel
A/100% Løsningsmiddel B
Gradienttid: Alle LC-MS, unntatt de som er angitt på annen måte, gjør bruk av 2
minutters gradienttid.
Holdetid: 1 minutt
Strømningshastighet: a. 5 mL/min
b. 4 mL/min
(Alle LC-MS, unntatt de som angis å benytte strømningshastighet b, ble oppnådd ved bruk av strømningshastighet a).
Detektorbølgelengde: 220 nm
Løsningsmiddelsystem I
Løsningsmiddel A: 10% MeOH/90% H2O/0,1% trifluoreddiksyre Løsningsmiddel B: 10% H2O/90% MeOH/0,1% trifluoreddiksyre
Løsningsmiddelsystem II
Løsningsmiddel A: 5% MeCN/95% H2O/10 mm ammoniumacetat Løsningsmiddel B: 95% MeCN/5% H2O/10 mm ammoniumacetat
(Alle LC-MS i de etterfølgende seksjoner, bortsett fra de som er angitt å benytte løsningsmiddelsystem II, ble oppnådd ved å benytte løsningsmiddelsystem I).
Forbindelser renset ved preparativ HPLC ble fortynnet i metanol (1,2 mL) og renset ved bruk av de etterfølgende metoder i et Shimadzu LC-10A automatisert preparativt HPLC-system.
Preparativ HPLC- metode ( dvs. rensing av forbindelse)
Rensemetode: Startgradient (40% B, 60% A) stigende til en sluttgradient (100% B, 0% A) i løpet av 20 minutter, holdetid i 3 minutter (100% B, 0% A).
Løsningsmiddel A: 10% MeOH/90% H2O/0,1% trifluoreddiksyre Løsningsmiddel B: 10% H.20/90% MeOH/0,1% trifluoreddiksyre Kolonne: YMC C18 S5 20x100 mm kolonne Detektorbølgelengde: 220 nm
Typiske fremgangsmåter og karakterisering av utvalgte eksempler: Fremstilling av middel 2
Metode A
Et overskudd av piperazin (5-10 ekv.) ble tilsatt til en løsning av elektrofil i THF, dioksan eller DMF. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 17 timer ved romtemperatur eller 115°C og reaksjonen avbrutt med mettet vandig NaHCCh. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc. De kombinerte organiske lag ble vasket med vann, tørket over MgSCUog filtrert, og filtratet ble konsentrert til en rest som ble benyttet i de videre reaksjoner uten rensing, eller renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Et overskudd av base (1-20 ekv., så som Et3N, iPr2NEt eller NaH) ble tilsatt til en løsning av N-Boc-piperazin (2-5 ekv.) i THF, dioksan eller DMF, etterfulgt av tilsetning av elektrofil (1 ekv.). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 17 timer ved romtemperatur eller 115°C og reaksjonen deretter avbrutt med mettet vandig NaHC03. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc. De kombinerte organiske lag ble tørket over MgS04og filtrert, og filtratet ble konsentrert til en rest som ble benyttet i de videre reaksjoner uten rensing, eller renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
N-Boc-piperazin-derivat ble løst i en sur løsning av TFA eller HCI i CH2CI2, eter, dioksan eller alkohol. Etter 0,5 til 17 timer ble løsningen konsentrert under vakuum for å gi en saltrest, som ble fordelt mellom vandig NaHCChog EtOAc. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc. De kombinerte organiske lag ble tørket over MgS04og filtrert, og filtratet ble konsentrert til en rest som ble benyttet i de videre reaksjoner uten rensing, eller renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Til en omrørt løsning av piperazin (2 ekv.) i tørr THF ble det tilsatt n-BuLi (2 til 4 ekv.) i THF ved romtemperatur. Etter omrøring i 0,5 timer ved romtemperatur, ble arylhalogenid (1 ekv.) tilsatt til anionløsningen, og reaksjonsblandingen ble omrørt i ytterligere 1 til 17 timer ved romtemperatur til 115°C. Reaksjonen ble avbrutt med MeOH og løsningsmidlene fordampet. Residuet ble fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03. Det vandige lag ble ekstrahert med EtOAc. Det organiske lag ble tørket over MgSCMog konsentrert for å gi råproduktet, som ble renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Til en løsning av metyltio-derivat (1 ekv.) i tørr CH2CI2eller HOAc ble det tilsatt mCPBA (2-5 ekv.) ved romtemperatur. Etter omrøring i 17 timer ved romtemperatur ble reaksjonen avbrutt med NaHS03og løsningsmidlene fordampet. Residuet ble fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03. Det vandige lag ble ekstrahert med EtOAc. Det organiske lag ble tørket over MgS04og konsentrert for å gi råproduktet, som ble renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Et overskudd av piperazin (5-10 ekv.) ble tilsatt til en løsning av sulfon- eller sulfoksyd-derivat i 1-butanol eller 1-pentanol. Reaksjonsblandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 17 timer. Etter avkjøling ble reaksjonen avbrutt med mettet vandig NaHC03. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc. De kombinerte organiske lag ble vasket med vann og tørket over MgS04og filtrert, og filtratet ble konsentrert til en rest som ble benyttet i de videre reaksjoner uten rensing, eller renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Til en løsning av alkohol-derivat (1 ekv) i tørr pyridin ble det tilsatt Ts-CI (1-2 ekv.) ved romtemperatur. Etter omrøring i 17 timer ved romtemperatur ble løsningsmidlene fordampet. Residuet ble fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03. Det vandige lag ble ekstrahert med EtOAc. Det organiske lag ble tørket over MgSCMog konsentrert for å gi råproduktet, som ble renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
En blanding av et overskudd av piperazin (5-10 ekv.) og tosylat (1 ekv.) i et forseglet rør, ble oppvarmet til 115°C-170°C i 1 til 17 timer. Etter avkjøling ble reaksjonen avbrutt med mettet vandig NaHCCh. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc. De kombinerte organiske lag ble vasket med vann og tørket over MgS04og filtrert, og filtratet ble konsentrert til en rest som ble benyttet i de videre reaksjoner uten rensing, eller renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Til en løsning av dihalogenid-derivat (1 ekv.) i tørr THF eller dioksan eller
DMF ble det tilsatt amin (1-1,5 ekv.) alene eller alkohol (1-1,5 ekv.) med NaH (1-5 ekv.) ved romtemperatur. Etter omrøring i 17 timer ved romtemperatur eller 115°C, ble piperazin-derivat (1-5 ekv.) tilsatt, og den resulterende blanding ble oppvarmet til 115°C i 1 time til 1 uke. Deretter ble løsningsmidlene fordampet. Residuet ble fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03. Det vandige lag ble ekstrahert med EtOAc. Det organiske lag ble vasket med vann, tørket over MgS04og konsentrert for å gi råproduktet, som ble renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Til en løsning av N-Boc-piperidin-derivat (1 ekv.) og en nukleofil så som et amin (1-5 ekv.) i tørr THF eller dioksan eller DMF, ble det tilsatt iPr2Net (1-10 ekv.) i et forseglbart rør. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 115°C-170°C i 1-17 timer før avkjøling. Deretter ble reaksjonen avbrutt med NaHC03. Det vandige lag ble ekstrahert med EtOAc. Det organiske lag ble tørket over MgS04og konsentrert for å gi råproduktet, som ble renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
N-Boc-piperidin-derivat ble løst i en sur løsning av TFA eller HCI i CH2CI2, eter, dioksan eller alkohol. Etter 0,5 til 17 timer ble løsningen konsentrert under vakuum for å gi en saltrest som ble fordelt mellom vandig NaHC03og EtOAc. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc. De kombinerte organiske lag ble tørket over MgS04og filtrert, og filtratet ble konsentrert til en rest som ble benyttet i de videre reaksjoner uten rensing, eller renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Til en løsning av piperidin- eller piperazinamin-derivat (1-2 ekv.) og en umettet ester (1 ekv.) i tørr THF eller dioksan, ble det tilsatt NaOMe (1 -10 ekv.). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur eller 120°C i 1-17 timer. Løsningsmidlene ble fjernet under vakuum, og residuet ble fordelt mellom NaHC03og EtOAc. Det vandige lag ble ekstrahert med EtOAc. Det organiske lag ble tørket over MgS04og konsentrert for å gi det rå laktamprodukt, som ble renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
UAIH4(1-5 ekv.) ble tilsatt til en løsning av laktam-derivat (1 ekv.) i tørr THF ved 0°C. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 17 timer før reaksjonen ble avbrutt med MeOH. Løsningsmidlene ble fjernet under vakuum, og residuet ble fordelt mellom NaHC03og EtOAc. Det vandige lag ble ekstrahert med EtOAc. Det organiske lag ble tørket over MgS04og konsentrert for å gi det rå laktamproduktet, som ble renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Ved romtemperatur ble Mel (1-5 ekv.) tilsatt til en løsning av tioderivat (1 ekv.) med KOH (5-10 ekv.) i vann eller med NaH (5-10 ekv.) i THF, dioksan eller DMF. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 til 17 timer. Løsningsmidlene ble fjernet under vakuum og residuet fordelt mellom NaHC03og EtOAc. Det vandige lag ble ekstrahert med EtOAc. Det organiske lag ble tørket over MgS04og konsentrert for å gi det rå metyltioprodukt, som ble renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Til en løsning av metyltio-derivat (1 ekv.) i tørr CH2CI2eller HOAc ble det tilsatt mCPBA (2-5 ekv.) ved romtemperatur. Etter omrøring i 17 timer ved romtemperatur ble reaksjonen avbrutt med NaHS03og løsningsmidlene fordampet. Residuet ble fordelt mellom EtOAc og mettet NaHC03. Det vandige lag ble ekstrahert med EtOAc. Det organiske lag ble tørket over MgS04og konsentrert for å gi råproduktene, sulfon- eller/og sulfoksyd-derivat, som ble renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Sulfon- eller sulfoksyd-derivat (1 ekv.) ble tilsatt til THF-løsningen av piperazinanion (5-10 ekv.) som ble fremstilt fra piperazin og BuLi (ekv. av BuLi/ekv. av piperazin = 1 til 2) ved romtemperatur i tørr THF. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur eller kokt under tilbakeløpskjøling i 17 timer. Etter avkjøling ble reaksjonen avbrutt med mettet vandig NaHC03. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc. De kombinerte organiske lag ble vasket med vann og tørket over MgS04og filtrert, og filtratet ble konsentrert til en rest som ble benyttet i de videre reaksjoner uten rensing, eller renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Hydroksyl- eller tio-derivat (1 ekv.) ble tilsatt til POCI3eller POBr3med eller uten DMF. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 100°C-170°C i 1 til 17 timer. Etter avkjøling ble reaksjonen avbrutt med mettet vandig NaHCCb. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc. De kombinerte organiske lag ble vasket med vann og tørket over MgS04og filtrert, og filtratet ble konsentrert til en rest som ble benyttet i de videre reaksjoner uten rensing, eller renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
En blanding av et overskudd av piperazin (5-10 ekv.) og halogenid (1 ekv.) i BuOH, PrOH, THF, dioksan eller DMF, ble omrørt ved romtemperatur eller oppvarmet til 170°C i 1 til 17 timer. Cu- eller Pd-katalysator kan benyttes. Reaksjonen ble avbrutt med mettet vandig NaHC03. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc. De kombinerte organiske lag ble vasket med vann og tørket over MgS04og filtrert, og filtratet ble konsentrert til en rest som ble benyttet i de videre reaksjoner uten rensing, eller renset ved silikagel kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Fremstilling av forbindelse 3
Metode A
Et3N eller iP^NEt (1-100 ekv.) ble tilsatt til en løsning av 2-ketoacylklorid
(1 ekv.) og piperazin eller piperidinderivat (1-5 ekv.) i et aprotisk løsningsmiddel (så som THF, DMF, dioksan, eter, acetonitril) og reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur eller 50°C eller 80°C eller 115°C i 17 timer før behandling med mettet vandig NaHC03-løsning. Det vandige lag ble ekstrahert med etylacetat. De organiske faser ble kombinert og tørket over vannfritt MgSCM. Konsentrasjon i vakuum ga et råprodukt, som ble renset ved utgnidning eller omkrystallisering eller silikagel-kolonnekromatografi eller i et Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Metode B
2-ketosyre (1 ekv.), piperazin (1-5 ekv.), 3-(dietoksyfosforyloksy)-1,2,3-benzotriazin-4(3H)-on (DEPBT) eller 0-(1H-benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetrametyluronium-tetrafluorborat (TBTU) (1-5 ekv.) og Hunigs base eller N-metylmorfolin (1-100 ekv.) ble samlet i THF eller DMF. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 17 timer. THF eller DMF ble fjernet ved inndampning under redusert trykk og residuet fordelt mellom etylacetat og 5-10% Na2C03vandig løsning. Det vandige lag ble ekstrahert med etylacetat. De organiske faser ble kombinert og tørket over vannfritt MgS04. Konsentrasjon i vakuum ga et råprodukt, som ble renset ved utgnidning eller omkrystallisering eller silikagel-kolonnekromatografi eller Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system. Metode C
Et3N eller iP^NEt (1-100 ekv.) ble tilsatt til en løsning av 2-ketoacylklorid
(1 ekv.) og Boc-piperazin (1-5 ekv.) i et aprotisk løsningsmiddel (så som THF, DMF, dioksan, eter, acetonitril) og reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur eller 50°C eller 80°C eller 115°C i 17 timer før reaksjonen ble avbrutt med mettet vandig NaHCCh-løsning. Det vandige lag ble ekstrahert med etylacetat. De organiske faser ble kombinert og tørket over vannfritt MgSCM. Konsentrering i vakuum ga et råprodukt, som ble renset ved utgnidning eller omkrystallisering eller silikagel-kolonnekromatografi eller i et Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
N-Boc-piperazin-ketoamidderivat ble løst i en sur løsning av TFA eller HCI i CH2CI2, eter, dioksan eller alkohol. Etter 0,5 til 17 timer ble løsningen konsentrert under vakuum for å gi en saltrest, som ble benyttet i neste trinn uten rensing. Eller ble salt utfeltfra løsningen vasket med CH2CI2, eter, dioksan eller alkohol før videre anvendelse.
Et overskudd av base (1-20 ekv., så som Et3N, iPr2NEt eller NaH) ble tilsatt til en løsning av 2-ketoacylpiperazin (1 ekv.) i THF eller DMF, etterfulgt av tilsetning av elektrofil (1 til 10 ekv.). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 17 timer ved romtemperatur eller 115°C og reaksjonen deretter avbrutt med mettet vandig NaHCCh. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc. De samlede organiske lag ble tørket over MgS04, filtrert og filtratet konsentrert til en rest, som ble anvendt i de videre reaksjoner uten rensing eller renset ved silikagel-kolonnekromatografi eller i et Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Metode D
2-ketosyre (1 ekv.), N-Boc-piperazin (1-5 ekv.), 3-(dietoksyfosforyloksy)-1,2,3-benzotriazin-4(3H)-on (DEPBT) eller 0-(1H-benzotriazol-1-yl)-N,N,N\N'-tetrametyluronium-tetrafluorborat (TBTU) (1-5 ekv.) og Hunigs base (1-100 ekv.) ble kombinert i THF eller DMF. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 17 timer. THF eller DMF ble fjernet ved inndampning under redusert trykk og residuet fordelt mellom etylacetat og 5-10% Na2C03vandig løsning. Det vandige lag ble ekstrahert med etylacetat. De organiske faser ble kombinert og tørket over vannfritt MgSCU. Konsentrering i vakuum ga et råprodukt, som ble renset ved utgnidning eller omkrystallisering eller silikagel-kolonnekromatografi eller i et Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
N-Boc-piperazin-ketoamidderivat ble løst i en sur løsning av TFA eller HCI i CH2CI2, eter, dioksan eller alkohol. Etter 0,5 til 17 timer ble løsningen konsentrert under vakuum for å gi en saltrest som ble benyttet i neste trinn uten rensing. Eller salt utfelt fra løsning ble vasket med CH2CI2, eter, dioksan eller alkohol før videre anvendelse.
Et overskudd av base (1-20 ekv., så som Et3N, iPr2NEt eller NaH), ble tilsatt til en løsning av 2-ketoacylpiperazin (1 ekv.) i THF eller DMF, etterfulgt av tilsetning av elektrofil (1 til 10 ekv.). Reaksjonsblandingen ble omrørt i 17 timer ved romtemperatur eller 115°C og reaksjonen deretter avbrutt med mettet vandig NaHCCh. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc. De samlede organiske lag ble tørket over MgS04, filtrert og filtratet konsentrert til en rest, som ble benyttet i videre reaksjoner uten rensing eller renset ved silikagel-kolonnekromatografi eller i et Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Metode E
I et forseglet rør ble azaindol eller indolhalogenid (bromid eller klorid), boran- eller stannan-middel (1-20 ekv.), Pd-katalysator (omfattende men ikke begrenset til Pd(PPh3)4, Pd(PPh3)2Cl2, Pd(OAc)2, Pd2(dba)3, PdCI2(dppf)2, 0,05-2 ekv.), base (omfattende men ikke begrenset til Na2C03, K2C03, Cs2C03, Na2HP03, NaH2P03, Na3P04, NaOAc, NaOEt, NaOtBu, EfeN, iPr2NEt, NaH, K2HPO3, KH2P03, K3PO4, KOAc, KOEt, KOtBu, 1-20 ekv.) kombinert i dioksan, toluen eller DMF i nærvær eller fravær av vann, med eller uten bruk av en ligand (omfattende men ikke begrenset til BINOL, BINAP, 2,2'-bipyridyl, trialkylfosfin, dppe, dppf, AsPhi3, 1-2 ekv.). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 50-170°C i 2-17 timer. Etter at blandingen var avkjølt til romtemperatur ble den helt over i vann. Løsningen ble ekstrahert med EtOAc eller diklormetan. De kombinerte ekstrakter ble konsentrert for å gi en rest som ble renset ved silikagel-kolonnekromatografi eller i et Shimadzu automatisert preparativt HPLC-system.
Eksempelkjemi. Seksjon B
De etterfølgende generelle metoder gjelder Eksempelkjemi Seksjon B:
LCMS data:
Metode 1
Gradienttid: 2 min
Strømningshastighet: 4 mL/min
Holdetid: Gradienttid + 1 minutt
Startkons.: 0% B
Elueringsmiddel A: 10% MeOH/90% H20 med 0,1% TFA Elueringsmiddel B: 90% MeOH/10% H2O med 0,1% TFA Kolonne: Phenomenex-luna 3,0 x 50 mm S10
Metode 2
Gradienttid: 2 min
Strømningshastighet: 5 mL/min
Holdetid: Gradienttid + 1 minutt Startkons.: 0% B
Elueringsmiddel A: 10% MeOH/90% H20 med 0,1% TFA Elueringsmiddel B: 90% MeOH/10% H2O med 0,1% TFA Kolonne: Phenomenex-luna 10^ C18 3,0 x 50 mm
Metode 3
Gradienttid: 2 min
Strømningshastighet: 5 mL/min
Holdetid: Gradienttid + 1 minutt Startkons.: 0% B
Elueringsmiddel A: 5% ACN/95% H2O med 10 mm
ammoniumacetat
Elueringsmiddel B: 95% ACN/5% H2O med 10 mm
ammoniumacetat
Kolonne: Luna 4,6 x 500 mm S10
Metode 4
Gradienttid: 3 min
Strømningshastighet: 4 mL/min
Holdetid: Gradienttid + 1 minutt Startkons.: 0% B
Elueringsmiddel A: 10% MeOH/90% H2O med 0,1% TFA Elueringsmiddel B: 90% MeOH/10% H2O med 0,1% TFA Kolonne: Phenomenex-luna 10^ C18 3,0 x 50 mm
Metode 5
Gradienttid: 4 min
Strømningshastighet: 4 mL/min
Holdetid: Gradienttid + 1 minutt
Metode 6 Metode 7 Fremstilling av 1-( 7- brom- 4- fluor- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H-tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion ( Forbindelse B- 1)
7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin (2,0 g, 9,3 mmol) ble tilsatt til en blanding av AICI3(7,5 g, 55,8 mmol) og etylmetylimidazoliumklorid (2,7 g, 18,6 mmol). Metylkloroksoacetat (2,1 ml_, 18,6 mmol) ble langsomt tilsatt til løsningen
ovenfor og blandingen omrørt ved romtemperatur i 3 timer. Reaksjonskolben ble anbrakt i et isbad, og vann ble langsomt tilsatt inntil det oppsto et hvitt bunnfall. Faststoffet ble oppsamlet ved filtrering og vasket med vann for å gi 2-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (2,4 g, 92%). LCMS: m/e 287 (M+H)<+>, retensjonstid 0,91 min (Metode 1).
2-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (5,0 g, 17,5 mmol) ble løst i DMF (100 ml_) og behandlet med 1-(1-fenyl-1H-tetrazol-5-yl)piperazin (4,0 g, 17,5 mmol), Hunigs base (9,2 ml_, 52,6 mmol) og TBTU (5,6 g, 17,5 mmol) og reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og vann ble tilsatt. Det ble utfelt et hvitt faststoff som ble oppsamlet ved filtrering og omkrystallisert to ganger med MeOH for å gi tittelforbindelsen (4,58 g) som et hvitt faststoff. Moderluten ble konsentrert og renset ved bruk av silikagel (CH2CI2til 5% MeOH/ChbCb) for å gi mer tittel-forbindelse (1,8 g).<1>HNMR (500 MHz, DMSO) 6 8,47 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,70-7,59 (m, 5H), 3,67 (m, 2H), 3,44 (m, 2H), 3,37 (m, 2H), 3,20 (m, 2H). LCMS: m/e 499 (M+H)<+>, retensjonstid 1,50 min (Metode 1).
Fremstilling av 1-( 4- fluor- 7-( 3- metyl- 1H- pyrazol- 1- yl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)-2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion ( Forbindelse B- 2) og 1-( 4- fluor- 7-( 5- metyl- 1H- pyrazol- 1- yl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)^ 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion ( Forbindelse B- 3)
En blanding av 1-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (50 mg, 0,1 mmol), kaliumkarbonat (13 mg, 0,1 mmol), kobber (6,0 mg, 0,1 mmol) og 3-metylpyrazol (32^L,
0,4 mmol) i /V-metylpyrrolidinon (0,5 mL) ble oppvarmet til 160°C i 6 timer. MeOH (3 mL) ble tilsatt og løsningen filtrert gjennom Celite. Løsningsmidlet ble fjernet i
vakuum og residuet løst i DMF og renset ved bruk av revers fase preparativ HPLC for å gi 1-(4-fluor-7-(3-metyl-1 H-pyrazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (6,9 mg) som et hvitt faststoff;<1>HNMR(500MHz, CDCb) 6 8,46 (d, J = 2Hz, 1H), 8,19 (s, 1H), 8,93 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 7,55-7,50 (m, 5H), 6,25 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,78 (m, 2H), 3,56 (m, 2H), 3,35 (m, 2H), 3,25 (m, 2H), 2,36 (s, 3H). LCMS: m/e 501 (M+H)<+>, retensjons-
tid 2,34 min (Metode 2) og 1-(4-fluor-7-(5-metyl-1H-pyrazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (13,7 mg);<1>HNMR (500 MHz, CDCb) 8 8,25 (m, 1H), 8,08 (bs, 1H), 7,65 (m, 1H), 7,60 (m, 5H), 6,27 (m, 1H), 3,87 (m, 2H), 3,66 (m, 2H), 3,46 (m, 2H), 3,36 (m, 2H), 2,83 (s, 3H). LCMS: m/e 501 (M+H)<+>, retensjonstid 2,34 min (Metode 2).
Fremstilling av 1-( 7-( 3- amino- 1H- pyrazol- 1- yl)- 4- fluor- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3-yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion ( Forbindelse B- 4) og 1-( 7-( 5- amino- 1H- pyrazol- 1- yl)- 4- fluor- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)^ 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion ( Forbindelse B- 5).
En blanding av 1-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (100 mg, 0,2 mmol), kaliumkarbonat (26 mg, 0,2 mmol), kobber (13 mg, 0,2 mmol) og 3-aminopyrazol (100^L, 1 mmol) i /V-metylpyrrolidinon (0,5 mL) ble oppvarmet til 160°C i 5 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og residuet løst i DMF og renset ved bruk av revers fase preparativ HPLC for å gi 1-(7-(3-amino-1H-pyrazol-1-yl)-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (15,9 mg) som et blekgult faststoff;<1>HNMR (500 MHz, DMSO) 6 8,34 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 8,29 (d, J= 1,5 Hz, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,70-7,58 (m, 5H), 5,92 (d, J= 2,5 Hz, 1H), 5,25 (m, 2H), 3,71 (m, 2H), 3,47 (m, 2H), 3,32 (m, 2H), 3,16 (m, 2H). LCMS: m/e 502 (M+H)<+>, retensjonstid 1,26 min (Metode 3); og 1-(7-(5-amino-1H-pyrazol-1-yl)-4-fluor-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)etan-1,2-dion (8,8 mg) som et blekgult faststoff;<1>HNMR (500 MHz, CDCIa) 6 8,21 (m, 1H), 8,11 (bs, 1H), 7,60 (m, 6H), 6,94 (m, 2H), 5,52 (m, 1H), 3,71 (m, 2H), 3,47 (m, 2H), 3,31 (m, 2H), 3,16 (m, 2H); LCMS: m/e 502 (M+H)<+>, retensjonstid 1,26 min (Metode 3).
Fremstilling av 1-( 4- fluor- 7-( 1H- pyrazol- 3- yl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1-fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion
En blanding av 2-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (500 mg, 1,0 mmol) (Forbindelse B-1), 3-(tributylstannyl)-1 H-pyrazol (358 mg, 1 mmol) og tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) (346 mg, 0,3 mmol) i 1,4-dioksan (3 mL) ble oppvarmet til 110°C i 6 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur, fortynnet med DMF og metanol, filtrert gjennom Celite og konsentrert under redusert trykk. Råproduktet ble deretter løst opp igjen i DMF og renset ved bruk av revers fase HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (180 mg, 37%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 6 ppm 3,17 (s, 2 H) 3,33 (s, 2 H) 3,47 (s, 2 H) 3,72 (s, 2 H) 6,97 (s, 1 H) 7,59 (s, 1 H) 7,64 (s, 2 H) 7,69 (s, 2 H) 7,96 (s, 1 H) 8,25 (s, 1 H) 8,31 (s, 1 H). LCMS: m/e 487 (M + H)<+>, retensjonstid 1,32 min (Metode 2).
Fremstilling av 1-( 4- fluor- 7-( 1- metyl- 1H- pyrazol- 3- yl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)-2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion
1 -(4-fluor-7-(1 H-pyrazol-3-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (30 mg, 0,06 mmol) i DMF (1 mL) ble behandlet med natriumhydrid (60% i olje, 31,2 mg, 0,78 mmol) og omrørt ved romtemperatur i 5 min. Metyljodid (56 jxL, 0,9 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur i 1 time. Reaksjonen ble avbrutt H2O og blandingen konsentrert under redusert trykk. Residuet ble løst i DMF og renset ved bruk av revers fase preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (20 mg, 67%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 5 ppm 3,15 (s, 2 H) 3,32 (s, 2 H) 3,47 (s, 2 H) 3,71 (s, 2 H) 4,05 (s, 3 H) 6,92 (s, 1 H) 7,58 - 7,65 (m, 3 H) 7,69 (s, 2 H) 7,91 (s, 1 H) 8,30 (d, J=12,83Hz, 2 H) 12,30 (s, 1 H). LCMS: m/e 501 (M + H)<+>, retensjonstid 1,37 min (Metode 3). Fremstilling av 1-( 7-( 1-( 2-( dimetylamino) etyl)- 1H- pyrazol- 3- yl)- 4- fluor- 1H-pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- d^ 1 -(4-fluor-7-(1 H-pyrazol-3-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (40 mg, 0,08 mmol) i DMF (1 mL) ble behandlet med natriumhydrid (60% i olje, 33,0 mg, 0,8 mmol) og omrørt ved romtemperatur i 5 min. 2-klor-N,N-dimetyletanamin-hydroklorid (115,2 mg,
0,8 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur i 1 time. Reaksjonen ble avbrutt med H2O og blandingen konsentrert under redusert trykk. Residuet ble løst i DMF og renset ved bruk av revers fase prep arativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (15 mg, 34%).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 8 ppm 2,96 (s, 6 H) 3,37 (s, 2 H) 3,63 (s, 2 H) 3,82 (s, 2 H) 3,89 (s, 2 H) 4,76 (s, 2 H) 7,11 (s, 1 H) 7,59 (s, 1 H) 7,64 (s, 2 H) 7,68 (s, 2 H) 7,92 (s, 1 H) 8,25 (s, 1 H) 8,36 (s, 1 H). LCMS: m/e 558 (M + H)<+>, retensjonstid 1,37 min (Metode 3).
Fremstilling av 1-( 4- fluor- 7-( 1-( 2- morfolinoetyl)- 1H- pyrazol- 3- yl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3-c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion 1 -(4-fluor-7-(1 H-pyrazol-3-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (40 mg, 0,08 mmol) i DMF (1 mL) ble behandlet med natriumhydrid (60% i olje, 33 mg, 0,8 mmol) og omrørt ved romtemperatur i 5 min. 4-(2-kloretyl)morfolin (149 mg, 0,8 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur i 1 time. Reaksjonen ble avbrutt med H2O og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble løst i DMF og renset ved bruk av av revers fase preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (20 mg, 67%).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 3,43 (s, 1 H) 3,77 (s, 5 H) 3,81 (s, 5 H) 4,08 (s, 2 H) 4,28 (s, 3 H) 4,37 (s, 4 H) 5,27 (s, 6 H) 7,56 (s, 1 H) 8,06 - 8,12 (m, 2 H) 8,13 (s, 2 H) 8,38 (s, 1 H) 8,70 (s, 1 H) 8,85 (s, 1 H). LCMS: m/e 600 (M + H)<+>, retensjonstid 1,22 min (Metode 3).
Fremstilling av 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- b] pyridin- 7- oksyd
3-(2-(4-benzoylpiperazin-1-yl)-2-oksoacetyl)-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-7-oksyd (2,0 g, 4,9 mmol) i en 10% vandig løsning av HCI (20 mL) ble oppvarmet til 100°C i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk og residuet vasket med etylacetat og kloroform. NaOH (1N) ble tilsatt inntil pH=7. Deretter ble etylacetat tilsatt for å vaske faststoffet. Faststoff inneholdende 3-(karboksykarbonyl)-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-7-oksyd ble deretter overført til neste trinn uten videre rensning.
En blanding av faststoffet inneholdende 3-(karboksykarbonyl)-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-7-oksyd ovenfor (200 mg, 0,84 mmol), trietylamin (0,5 mL, sssss), 1-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin (234 mg, 1,01 mmol) og TBTU
(404 mg, 1,26 mmol) ble omrørt ved romtemperatur i DMF (1 mL) i 24 timer. H2O ble tilsatt og reaksjonsblandingen konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved bruk av revers fase preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (15 mg, 4%).<1>H NMR (500 MHz, CDCb) 8 ppm 3,32 (s, 2 H) 3,37 (s, 2 H) 3,56 (s, 2 H) 3,79 (s, 2 H) 4,13 (s, 3 H) 6,83 (d, J=7,32 Hz, 1 H) 7,53 (d, J=6,71Hz, 1 H) 7,54 - 7,60 (m, 3 H) 8,16 (s, 1 H) 8,34 (d, J=6,71Hz, 1 H). LCMS: m/e 449 (M + H)<+>, retensjonstid 0,99 min (Metode 2).
Fremstilling av 1-( 7- klor- 4- metoksy- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H-tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion ( Forbindelse B- 6)
Til en løsning av2-(7-klor-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (5,3 g, 20,8 mmol) (fremstilt som beskrevet i US20050090522A1) i DMF (100 mL) ble det tilsatt 1-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin (4,8 g,
20.8 mmol), TBTU (7,4 g, 23,0 mmol) og N,N-diisopropyletylamin (12,0 mL,
68.9 mmol). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 16 timer. Løsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk og det gjenværende residuet oppløst i varm MeOH. Etter avkjøling oppsto et bunnfall. Bunnfallet ble oppsamlet ved filtrering og vasket med H2O (3 x 75 mL). Moderluten ble konsentrert under redusert trykk, deretter underkastet en andre krystallisering ved anvendelse av samme metode. De samlede bunnfall ga 1-(7-klor-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion som et lysebrunt faststoff (7,3 g, 15,6 mmol).<1>H NMR (500 MHz, CDCb) 6 9,64 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,62-7,50 (m, 5H), 4,00 (s, 3H), 3,83-3,81 (m, 2H), 3,57-3,56 (m, 2H), 3,43-3,41 (m, 2H), 3,33-3,32 (m, 2H). LCMS: m/e 467,3 (M + H)<+>, retensjonstid 1,99 min (Metode 2).
Fremstilling av etyl- 3-( 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5-yl) piperazin- 1- yl) aætyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- 1H- pyrazol- 5- karboksylat
( Forbindelse B- 7)
Til en suspensjon av 1-(7-klor-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (2,50 g, 5,35 mmol) i 1,4-dioksan (60 mL) i en forseglbar kolbe ble det tilsatt etyl-3-(tributylstannyl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (2,30 g, 5,36 mmol) etterfulgt av tetrakis(trifenylfosfin)palladium(O) (1,86 g, 1,61 mmol). Blandingen ble spylt med N2, kolben ble forseglet og blandingen oppvarmet til 120°C i 16 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur og fortynnet med MeOH (50 mL). Det gjenværende faststoff ble fjernet ved å filtrere blandingen gjennom et lag Celite og vasket med MeOH
(25 mL). Det gjenværende løsningsmiddel ble konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuum ble løst i MeOH og avsatt på silikagel. Etter at gelen var tørr, ble det benyttet en kolonne under bruk av "biotage" systemet med en 0 til 10% MeOH i CH2Cl2-gradient. Etter konsentrering av de ønskede fraksjoner ble 1,05 g etyl-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat gjenvunnet som et orange faststoff. LCMS: m/e 571,2 (M + H)<+>, retensjonstid 2,01 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 8 ppm 12,39 - 12,72 (m, 1 H) 8,37 (s, 1 H) 8,11 (s, 1 H) 7,52 - 7,76 (m, 6 H) 4,68 - 4,85 (m, 1 H) 4,38 (q, J=7,02 Hz, 2 H) 3,98 - 4,06 (m, 3 H) 3,67 - 3,73 (m, 2 H) 3,43 - 3,49 (m, 2 H) 3,28 - 3,36 (m, 2 H) 3,14 - 3,22 (m,2H)1,36 (t, J=7,17 Hz, 3 H).
Fremstilling av N-( 2- hydroksyetyl)- 3-( 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H-tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- 1H- pyrazol- 5-karboksamid- TFA ( Forbindelse B- 8)
Etyl-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,100 g,
0,175 mmol) ble blandet med etanolamin (0,75 mL) i et forseglbart rør. Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet. Blandingen ble omrørt i 67 timer ved rt. Blandingen ble fortynnet med DMF og avsatt på revers fase preparativ HPLC for rensing. Etter konsentrering av fraksjonene inneholdende produkt, ble 0,085 g av N-(2-hydroksyetyl)-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksamid TFA gjenvunnet som et hvitaktig faststoff. LCMS: m/e 586,3 (M + H)<+>, retensjonstid 1,19 min. (Metode 1).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-De) 8 ppm 12,51 (s, 1 H) 8,64 (s, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 8,10 (s, 1 H) 7,56 - 7,71 (m, 6 H) 7,25 (bre, 1H) 4,01 (s, 3 H) 3,70 (s, 2 H) 3,55 (t, J=6,22 Hz, 2 H) 3,27 - 3,48 (m, 7 H) 3,16 (s, 2 H).
Fremstilling av N-( 2-( 2- hydroksyetoksy) etyl)- 3-( 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl-1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- yl)-^ karboksamid- TFA ( Forbindelse B- 9)
Etyl-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,100 g,
0,175 mmol) ble blandet med 2-(2-aminoetoksy)etanol (0,75 mL) i et forseglbart rør. Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet. Blandingen ble omrørt i 67 timer ved rt. Blandingen ble fortynnet med DMF og avsatt på revers fase preparativ HPLC for rensing. Etter konsentrering av fraksjonene inneholdende produkt, ble 0,064 g av N-(2-(2-hydroksyetoksy)etyl)-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksamid-TFA gjenvunnet som et hvitaktig faststoff. LCMS: m/e 630,2 (M + H)<+>, retensjonstid 1,84 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,55 - 8,62 (m, 1 H) 7,99 - 8,07 (m, 1 H) 7,53 - 7,75 (m, 6 H) 4,07 - 4,18 (m, 3 H) 3,79 - 3,88 (m, 2 H) 3,58 - 3,76 (m, 8 H) 3,29 - 3,43 (m, 6 H).
Fremstilling av 3-( 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyirdin- 7- yl)- N-( 3-( 4- metylpiperazin- 1- yl) propyl)- 1H^ pyrazol- 5- karboksamid- TFA ( Forbindelse B- 10)
Etyl-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,100 g, 0,175 mmol) ble blandet med 1-(3-aminopropyl)-4-metyl piperazin (0,75 ml) i et forseglbart rør. Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet. Blandingen ble omrørt i 67 timer ved rt. Blandingen ble fortynnet med DMF og avsatt på revers fase preparativ HPLC for rensing. Etter konsentrering av fraksjonene inneholdende produkt, ble 0,093 g av 3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(3-(4-metylpiperazin-1 - yl)propyl)-1H-pyrazol-5-karboksamid-TFA gjenvunnet som et hvitaktig faststoff. LCMS: m/e 682,4 (M + H)<+>, retensjonstid 1,11 min (Metode 1).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-D6) 6 ppm 12,48 (s, 1 H) 10,82 (s, 1 H) 8,82 (s, 1 H) 8,35 (s, 1 H) 8,11 (s, 1 H) 7,53 - 7,72 (m, 6 H) 4,01 (s, 3 H) 3,10 - 3,79 (m, 20 H) 2,89 (s, 3 H) 1,88 - 2,03 (m, 2 H).
Fremstilling av 3-( 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- N-( 2-( pyrrolidin- 1- yl) etyl)- 1H^ karboksamid- TFA ( Forbindelse B- 11)
Etyl-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,100 g,
0,175 mmol) ble blandet med 1-(2-aminoetyl)-pyrrolidin (0,75 mL) i et forseglbart rør. Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet. Blandingen ble omrørt i 67 timer ved rt. Blandingen ble fortynnet med DMF og avsatt på revers fase preparativ HPLC for rensing. Etter konsentrering av fraksjonene inneholdende produkt, ble 0,100 g av 3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(2-(pyrrolidin-1 -yl)etyl)-1 H-pyrazol-5-karboksamid-TFA gjenvunnet som et mørkorange faststoff. LCMS: m/e 639,3 (M + H)<+>, retensjonstid 1,78 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,56 (s, 1 H) 8,06 (s, 1 H) 7,55 - 7,73 (m, 6 H) 4,11 (s, 3 H) 3,79 - 3,92 (m, 4 H) 3,13 - 3,67 (m, 12 H) 2,03 - 2,25 (m, 4 H).
Fremstilling av 3-( 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- N-( 2-( pyhdin- 4- yl) etyl)- 1H- pyrazo karboksamid- TFA ( Forbindelse B- 12)
Etyl-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,100 g,
0,175 mmol) ble blandet med 4-(2-aminoetyl)-pyridin (0,75 mL) i et forseglbart rør. Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet. Blandingen ble omrørt i 67 timer ved rt. Blandingen ble fortynnet med DMF og avsatt på revers fase preparativ HPLC for rensing. Etter konsentrering av fraksjonene inneholdende produkt, ble 0,035 g av 3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(2-(pyridin-4-yl)etyl)-1 H-pyrazol-5-karboksamid-TFA gjenvunnet som et hvitaktig faststoff. LCMS: m/e 647,2 (M + H)<+>, retensjonstid 1,77 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,74 - 8,83 (m, 2 H) 8,52 - 8,60 (m, 1 H) 8,02 - 8,12 (m, 3 H) 7,56 - 7,74 (m, 6 H) 4,08 - 4,16 (m, 3 H) 3,79 - 3,90 (m, 4 H) 3,59 - 3,67 (m, 2 H) 3,28 - 3,45 (m, 6
H).
Fremstilling av 3-( 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- N-( 2- morfolinoetyl)- 1H- pyrazol- 5-karboksamid- TFA ( Forbindelse B- 13)
Etyl-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,075 g,
0,131 mmol) ble blandet med 4-(2-aminoetyl)morfolin (0,75 mL) i etforseglbart rør. Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet. Blandingen ble omrørt i 67 timer ved rt. Blandingen ble fortynnet med DMF og avsatt på revers fase preparativ HPLC for rensing. Etter konsentrering av fraksjonene inneholdende produkt, ble 0,073 g 3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(2-morfolinoetyl)-1 H-pyrazol-5-karboksamid-TFA gjenvunnet som et hvitaktig faststoff. LCMS: m/e 655,3 (M + H)<+>, retensjonstid 1,74 min (Metode 2).<1>H NMR (300 MHz, MeOD) 6 ppm 8,57 (s, 1 H) 8,07 (s, 1 H) 7,56 - 7,74 (m, 6 H) 3,17 - 4,17 (m, 23 H).
Fremstilling av 3-( 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- N-( 2-( piperazin- 1- yl) etyl)- 1H- pyrazo^ karboksamid- TFA ( Forbindelse B- 14)
Etyl-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,100 g,
0,175 mmol) ble blandet med 1-(2-aminometyl)piperazin (0,75 mL) i et forseglbart rør. Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet. Blandingen ble omrørt i 67 timer ved rt. Blandingen ble fortynnet med DMF og avsatt på revers fase preparativ HPLC for rensing. Etter konsentrering av fraksjonene inneholdende produkt, ble 0,089 g 3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(2-(piperazin-1 -yl)etyl)-1 H-pyrazol-5-karboksamid-TFA gjenvunnet som et gyldenbrunt faststoff. LCMS: m/e 654,3 (M + H)<+>, retensjonstid 1,73 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,54 - 8,62 (m, 1 H) 8,01 - 8,10 (m, 1 H) 7,54 - 7,74 (m, 6 H) 4,08 - 4,16 (m, 3 H) 3,77 - 3,89 (m, 4 H) 3,60 (s, 10 H) 3,22 - 3,47 (m, 6 H).
Fremstilling av N-( 3-( dimetylamino) propyl)- 3-( 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl-1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- yl)-^ karboksamidTFA ( Forbindelse B- 15)
Etyl-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,125 g, 0,219 mmol) ble blandet med 3-dimetylaminopropylamin (0,70 mL) i et forseglbart rør. Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet. Blandingen ble omrørt i 36 timer ved rt. Blandingen ble fortynnet med DMF og avsatt på revers fase preparativ HPLC for rensing. Etter konsentrering av fraksjonene inneholdende produkt, ble 0,010 g N-(3-(dimetylamino)propyl)-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksamid-TFA gjenvunnet som et hvitaktig faststoff. LCMS: m/e 627,6 (M + H)<+>, retensjonstid 1,75 min (Metode 2).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-De) 8 ppm 8,78 - 9,19 (m, 2 H) 8,23 (s, 1 H) 8,09 (s, 1 H) 7,55 - 7,73 (m, 6 H) 4,00 (s, 3 H) 2,70 - 2,79 (m, 6 H) 2,68 - 3,93 (m, 12 H) 1,96 - 2,15 (m, 2 H).
Fremstilling av N-( 2-( dimetylamino) etyl)- 3-( 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H-tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- 1H- pyrazol- 5-karboksamid- TFA ( Forbindelse B- 16)
Etyl-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,05 g,
0,088 mmol) ble blandet med N,N-dimetyletylendiamin (0,70 mL) i et forseglbart rør. Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet. Blandingen ble omrørt i 38 timer ved rt. Blandingen ble fortynnet med DMF og avsatt på revers fase preparativ HPLC for rensing. Etter konsentrering av fraksjonene inneholdende produkt, ble 0,020 g N-(2-(dimetylamino)etyl)-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksamid-TFA gjenvunnet som et gyldenbrunt faststoff. LCMS: m/e 613,2 (M + H)<+>, retensjonstid 1,75 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,56 (s, 1 H) 8,08 (s, 1 H) 7,59 - 7,73 (m, 6 H) 4,13 (s, 3 H) 3,82 - 3,86 (m, 4 H) 3,62 - 3,66 (m, 2 H) 3,40 - 3,48 (m, 4 H) 3,33 - 3,37 (m, 2 H) 3,03 (s, 6 H).
Fremstilling av 1-( 7- amino- 4- fluor- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H-tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion ( Forbindelse B- 17)
4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-amin (2,26 g, 15 mmol) ble tilsatt til en blanding av AICI3(12,0 g, 90,0 mmol) og etylmetylimidazoliumklorid (4,38 g, 30,0 mmol). Metylkloroksoacetat (3,6 mL, 30,0 mmol) ble langsomt tilsatt til løsningen ovenfor og blandingen omrørt ved romtemperatur i 3 timer. Reaksjonskolben ble anbrakt i et isbad og langsomt tilsatt vann inntil det oppsto et hvitt bunnfall. Faststoffet ble oppsamlet ved filtrering og suspendert i DMF. TEA (7 mL) ble tilsatt og blandingen omrørt ved romtemperatur i 1 time. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum. Kloroform (50 mL) ble tilsatt og faststoffet oppsamlet ved filtrering for å gi 2-(7-amino-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre som et klart gult faststoff (2,3 g, 90% rent). LCMS: m/e 238 (M+H)<+>, retensjonstid 0,96 min (Metode 3). 2-(7-amino-4-fluor-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (2,3 g, 10,0 mmol) ble løst i DMF (66 mL) og behandlet med 1-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin (2,31 g, 10,0 mmol), trietylamin (2,8 mL, 20,0 mmol) og TBTU (3,5 g, 11,0 mmol) og en katalytisk mengde DMAP. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og vann tilsatt. Det ble utfelt et hvitt faststoff som ble oppsamlet ved filtrering og omkrystallisert med MeOH for å gi tittelforbindelsen (2,4 g) som et gult faststoff.<1>HNMR (500 MHz, DMSO-De) 8 8,53 (s, 1H), 7,81 (d, J=4, 0 Hz; 1H), 7,75-7,54 (m, 5H), 3,69 (m, 2H), 3,44 (m, 2H), 3,33 (m, 2H), 3,17 (m, 2H). LCMS: m/e 436 (M+H)<+>, retensjonstid 1,73 min (Metode 2). Fremstilling av N-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1 H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- yl) acetamid ( Forbindelse B- 18)
1-(7-amino-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (100 mg, 0,23 mmol) ble løst i pyridin (2 mL) og
blandingen oppvarmet til 50°C. Acetylklorid (65^L, 0,92 mmol) ble tilsatt og blandingen omrørt ved denne temperatur i 1 time. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og residuet renset ved bruk av revers fase preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (55 mg).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 5 8,34 (s, 1H), 8,04 (d, J= 1,0 Hz, 1H), 7,70-7,58 (m, 5H), 3,69 (m, 2H), 3,45 (m, 2H), 3,34 (m, 2H), 3,16 (m, 2H), 2,17 (s, 3H). LCMS: m/e 478 (M+H)<+>, retensjonstid 1,07 min (Metode 3).
Fremstilling av 3-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1 H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- yl)- 1, 1- dimetylurea ( Forbindelse B- 19)
1-(7-amino-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (100 mg, 0,23 mmol) ble løst i pyridin (1 mL). Dimetylkarbamylklorid (0,21 mL, 2,3 mmol) ble tilsatt og blandingen oppvarmet til 50°C i 18 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og residuet renset ved bruk av revers fase preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et blekt gyldenbrunt faststoff (10 mg).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 8 8,89 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,70-7,59 (m, 5H), 3,67 (m, 2H), 3,44 (m, 2H), 3,37 (m, 2H), 3,20 (m, 2H), 3,11 (s, 3H), 2,88(s, 3H). LCMS: m/e 507 (M+H)<+>, retensjonstid 1,04 min (Metode 3).
Fremstilling av N1-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- yl)- N2, N2- dimetyloksalamid ( Forbindelse B- 20)
1-(7-amino-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (100 mg, 0,23 mmol) ble løst i DMF (2 mL) og behandlet med A/,A/-dimetyloksaminsyre (27 mg, 0,23 mmol), Hunigs base (0,14 mL, 0,8 mmol) og TBTU (81 mg, 0,25 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer. Løsningsmidlet ble fjernet i vakuum og vann tilsatt. Det utfeltes et faststoff som ble oppsamlet ved filtrering, løst i DMF og renset ved bruk av revers fase preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et blekgult faststoff (11 mg).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 8 8,47 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,70-7,50 (m, 5H), 5,76 (m, 1H), 4,10- 3,10 (m, 6H), 3,16 (s, 6H). LCMS: m/e 535 (M+H)<+>, retensjonstid 1,33 min (Metode 1). Fremstilling av 3-( tributylstannyl)- 1H- pyrazol- 5- karbaldehyd og ( 3-( tributylstannyl)-1 H- pyrazol- 5- yl) metanol
En løsning av etyl-3-(tributylstannyl)-1H-pyrazol-5-karboksylat (3,94 g, 9,18 mmol) i toluen (10 mL) ble avkjølt til -78°C. En 1M løsning av DIBAL-H i toluen (11,5 mL, 11,5 mmol) ble langsomt tilsatt blandingen. Blandingen ble oppvarmet til 0°C og omrørt i 9 timer. Etter 9 timer ble blandingen forsiktig behandlet med H2O (50 mL) under fortsatt avkjøling av blandingen. Blandingen ble ekstrahert (4 X 75 mL) med EtOAc. De samlede organiske lag ble vasket med mettet NaCI, tørket med Na2S04, filtrert og konsentrert under redusert trykk. Residuet ble deretter avsatt på en silikagelkolonne og renset ved bruk av "biotage" systemet med 0 til 40% EtOAc i heksan-gradient for først å fjerne aldehydet og uomsatt utgangsmateriale. Kolonnen ble deretter spylt med 50% CH2CI2i MeOH-løsning for å fjerne den gjenværende alkohol. Etter konsentrering av de ønskede fraksjoner ble 3-(tributylstannyl)-1H-pyrazol-5-karbaldehyd (1,125 g) gjenvunnet som en klar fargeløs olje og (3-(tributylstannyl)-1H-pyrazol-5-yl)metanol (0,525 g) gjenvunnet som et hvitt faststoff. LCMS: m/e 387,2 (M + H)<+>, retensjonstid 2,01 min (Metode 3) for 3-(tributylstannyl)-1 H-pyrazol-5-karbaldehyd og LCMS: m/e 389,3 (M + H)<+>, retensjonstid 2,59 min (Metode 2) for (3-(tributylstannyl)-1 H-pyrazol-5-yl)metanol.
De etterfølgende aminopyrazol-mellomprodukter ble dannet etter den følgende standardiserte reduktive amineringsprosedyre: 2-((3-(tributylstannyl)-1 H-pyrazol-5-yl)metylamino)etanol (pyrazol 1)
N<1>,N<1->dimetyl-N<2->((3-(tributylstannyl)-1H-pyrazol-5-yl)metyl)etan-1,2-diamin
(pyrazol 2)
N<1>,N<1>,N<2->trimetyl-N<2->((3-(tributylstannyl)-1H-pyrazol-5-yl)metyl)etan-1,2-diamin
(pyrazol 3)
2-(pyridin-4-yl)-N-((3-(tributylstannyl)-1 H-pyrazol-5-yl)metyl)etanamin (pyrazol 4)
Til en løsning av 3-(tributylstannyl)-1H-pyrazol-5-karbaldehyd (1,0 ekv, ca. 0,5 mmol skala) i DCE (2-3 mL) ble det tilsatt AcOH (1,0 ekv) etterfulgt av aminet (1,05-1,1 ekv) og tilslutt natrium-triacetoksyborhydrid (1,4 ekv). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1-3 timer. Blandingen ble gjort basisk med 1N NaOH (pH = 13) og ekstrahert tre ganger med CH2CI2. De samlede organiske lag ble tørket med Na2S04, tørkemidlet ble fjernet ved filtrering og den resulterende løsning konsentrert under redusert trykk. Ingen ytterligere rensing var nødvendig. LCMS: m/e 432,1 (M + H)<+>, retensjonstid 2,52 min (Metode 2) for 2-((3-(tributyl-stannyl)-1H-pyrazol-5-yl)metylamino)etanol. LCMS: m/e 459,2 (M + H)<+>, retensjonstid 3,44 min (Metode 4) for N<1>,N<1->dimetyl-N<2->((3-(tributylstannyl)-1H-pyrazol-5-yl)metyl)etan-1,2-diamin. LCMS: m/e 473,3,1 (M + H)<+>, retensjonstid 2,65 min (Metode 2) for N<1>,N<1>,N<2->trimetyl-N<2->((3-(tributylstannyl)-1 H-pyrazol-5-yl)metyl)etan-1,2-diamin. LCMS: m/e 493,6 (M + H)<+>, retensjonstid 4,29 min (Metode 5) for 2-(pyridin-4-yl)-N-((3-(tributylstannyl)-1 H-pyrazol-5-yl)metyl)-etanamin.
Fremstilling av 3-( 4- metoksy- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- yl)- 1H- pyrazol- 5- karboksylsyre ( Forbindelse B- 21)
Til en suspensjon av etyl-3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,124 g, 0,217 mmol) i DMF (1,5 mL) og H2O (1,5 mL) ble det tilsatt LiOH monohydrat (0,027 g, 0,651 mmol). Blandingen ble oppvarmet til 120°C i 24 timer. Reaksjonen var ikke fullstendig slik at ytterligere 0,05 g LiOH-hydrat sammen med 2 mL H2O ble tilsatt til blandingen som igjen ble oppvarmet til 120°C. Etter oppvarming i 24 timer var reaksjonen nesten fullstendig ifølge LCMS, og den ble avkjølt til romtemperatur og surgjort (pH = 1) med 6N HCI. Blandingen ble fortynnet med H2O og fordelt med EtOAc. Produktet utfelt fra de to lagene ble oppsamlet ved filtrering. Faststoffet ble vasket med kald MeOH og H2O. 3-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1H-pyrazol-5-karboksylsyren (0,08 g) ble oppsamlet som et lysegult faststoff. LCMS: m/e 542,97 (M + H)<+>, retensjonstid 1,86 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 8 ppm 12,10 -12,22 (s, 1 H) 8,25 (s, 1 H) 8,10 (s, 1 H) 7,56 - 7,77 (m, 5 H) 7,39 (s, 1 H) 3,99 (s, 3 H) 3,67 - 3,72 (m, 2 H) 3,40 - 3,46 (m, 2 H) 3,29 - 3,36 (m, 2 H) 3,14 - 3,20 (m, 2 H).
Fremstilling av 1-( 7-( 5-( hydroksymetyl)- 1H- pyrazol- 3- yl)- 4- metoksy- 1H- pyrrolo[ 2, 3-c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion
( Forbindelse B- 22)
I en forseglbar kolbe ble det fremstilt en blanding av 1-(7-klor-4-metoksy-
1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)etan-1,2-dion (0,150 g, 0,321 mmol) i 1,4-dioksan (5 mL). (3-(tributylstannyl)-1H-pyrazol-5-yl)metanol (0,137 g, 0,353 mmol) ble tilsatt etterfulgt av tetrakis(trifenylfosfin)-palladium(O) (0,150 g, 0,130 mmol). Blandingen ble spylt med N2,og kolben ble forseglet. Blandingen ble deretter oppvarmet til 120°C i 14 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen ble fortynnet med DMF og filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. Væsken ble konsentrert under redusert trykk og residuet oppløst i DMF. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi 0,037 g av et hvitaktig faststoff som 1-(7-(5-(hydroksymetyl)-1H-pyrazol-3-yl)-4-metoksy-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)etan-1,2-dion. LCMS: m/e 529,2 (M + H)<+>, retensjonstid 1,78 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,65 (s, 1 H) 7,98 (s, 1 H) 7,56 - 7,80 (m, 5 H) 7,16 (s, 1 H) 4,81 (s, 2 H) 4,15 (s, 3 H) 3,83 - 3,87 (m, 2 H) 3,63 - 3,68 (m, 2 H) 3,40 - 3,44 (m, 2 H) 3,34 - 3,39 (m, 2 H). Fremstilling av N1, N1- dimetyl- N2-( 1H- pyrazol- 3- yl) etan- 1, 2- diamin
3-aminopyrazol (5,0 g, 60,2 mmol) ble løst i AcOH (20 mL). En 50% i bo-løsning av kloracetaldehyd (8,0 mL, 63,2 mmol) ble langsomt tilsatt til blandingen. Blandingen ble avkjølt til 0°C og natriumcyanoborhydrid (4,2 g, 66,8 mmol) tilsatt til den avkjølte løsningen i to porsjoner i løpet av ti minutter. Blandingen ble opp-
varmet til romtemperatur og omrørt i 5 timer. Blandingen ble forsiktig gjort basisk med 1N NaOH til pH = 10. Blandingen ble fordelt i CH2CI2og ekstrahert fem ganger. De samlede organiske lag ble tørket med MgS04, filtrert og konsentrert under redusert trykk. En kolonne ble benyttet for å rense produktet ved bruk av en 0 til 5% MeOH i CH2Cl2-gradient. Det resulterende N-(2-kloretyl)-1 H-pyrazol-3-
amin ble gjenvunnet som en klar fargeløs olje (2,1 g). LCMS: m/e 146,2 (M + H)<+>, retensjonstid 0,72 min (Metode 3).
I en forseglbar kolbe ble N-(2-kloretyl)-1H-pyrazol-3-amin (0,214 g, 1,47
mmol) kombinert med 1,5 mL dimetylamin (40% i H2O). Kolben ble forseglet og blandingen oppvarmet til 100°C i 16 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur og overført til en rundkolbe med MeOH. Løsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk for å gi N<1>,N<1->dimetyl-N<2->(1H-pyrazol-3-yl)etan-1,2-diamin i kvantitativt utbytte. LCMS: m/e 155,3 (M + H)<+>, retensjonstid 0,96 min (Metode 3).
Fremstilling av 1 -(7-(3-(2-(dimetylamino)etylamino)-1 H-pyrazol-1 -yl)-4-fluor-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)etan-1,2-dionTFA
(Forbindelse B-23)
1 -(7-brom-4-fluor-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (0,100 g, 0,200 mmol) ble blandet med N<1>,N<1->dimetyl-N<2->(1H-pyrazol-3-yl)etan-1,2-diamin (0,140 g, 0,200 mmol), 1-metyl-2-pyrrolidinon (0,5 mL), K2CO3(0,028 g, 0,200 mmol) og Cu-pulver (0,013 g, 0,200 mmol). Blandingen ble oppvarmet til 160°C i 4,5 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur og fortynnet med DMF. DMF-blandingen ble filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff og løsningen renset ved preparativ HPLC. Etter rensing ble 1-(7-(3-(2-(dimetylamino)etylamino)-1H-pyrazol-1 -yl)-4-fluor-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion-TFA (0,010 g) gjenvunnet som et brunt faststoff. LCMS: m/e 573,5 (M + H)<+>, retensjonstid 1,88 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 8 ppm 8,42 (d, J=2,52 Hz, 1 H) 8,30 (s, 1 H) 7,95 (d, J=2,06 Hz, 1 H) 7,56 - 7,72 (m, 5 H) 6,01 (d, J=2,75 Hz, 1 H) 3,78 - 3,86 (m, 4 H) 3,59 - 3,64 (m, 2 H) 3,42 - 3,46 (m, 2 H) 3,34 - 3,39 (m, 4 H) 2,95 (s, 6 H).
Fremstilling av 1-( 7-( 5-(( 2- hydroksyetylamino) metyl)- 1H- pyrazol- 3- yl)- 4- metoksy-1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2-dion- TFA ( Forbindelse B- 24)
I en forseglbar kolbe ble det anbrakt en blanding av 1-(7-klor-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)etan-1,2-dion (0,240 g, 0,509 mmol) i 1,4-dioksan (5 mL). 2-((3-(tributylstannyl)-1H-pyrazol-5-yl)metylamino)etanol (0,241 g, 0,560 mmol) ble tilsatt etterfulgt av tetrakis-(trifenylfosfin)palladium(O) (0,177 g, 0,153 mmol). Blandingen ble spylt med N2, og kolben ble forseglet. Blandingen ble deretter oppvarmet til 120°C i 14 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen fortynnet med DMF og filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. Væsken ble konsentrert under redusert trykk og residuet løst i DMF. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi 0,050 g av et lysegult faststoff som 1-(7-(5-((2-hydroksyetylamino)metyl)-1H-pyrazol-3-yl)-4-metoksy-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion-TFA. LCMS: m/e 572,5 (M + H)<+>, retensjonstid 1,68 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,57 (s, 1 H) 8,06 (s, 1 H) 7,60 - 7,75 (m, 5 H) 7,42 (s, 1 H) 4,54 (s, 2 H) 4,14 (s, 3 H) 3,83 - 3,91 (m, 4 H) 3,62 - 3,68 (m, 2 H) 3,24 - 3,45 (m, 6 H).
Fremstilling av 1-( 7-( 5-(( 2-( dimetylamino) etylamino) metyl)- 1H- pyrazol- 3- yl)- 4-metoksy- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) etan- 1, 2- dion TFA ( Forbindelse B- 25)
I en forseglbar kolbe ble det anbrakt en blanding av 1-(7-klor-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)etan-1,2-dion (0,140 g, 0,306 mmol) i 1,4-dioksan (5 mL). 2-((3-(tributylstannyl)-1H-pyrazol-5-yl)metylamino)etanol (0,14 g, 0,306 mmol) ble tilsatt etterfulgt av tetrakis-(trifenylfosfin)palladium(O) (0,106 g, 0,092 mmol). Blandingen ble spylt med N2, og kolben ble forseglet. Blandingen ble deretter oppvarmet til 120°C i 15 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen ble fortynnet med DMF og filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. Væsken ble konsentrert under redusert trykk og residuet adsorbert på silikagel. En hurtigkolonne ble benyttet under bruk av en 0 til 100% MeOH i CbCb-gradient. Mens produktet enda var på kolonnen ble den spylt med DMF for å fjerne produktet. Det meste av DMF ble fjernet under redusert trykk og ble fjernet ytterligere ved oppløsning av produktet i CH2CI2og vask av det organiske lag 5 ganger med H2O. Det organiske lag ble tørket med Na2S04, filtrert og konsentrert under redusert trykk. 1-(7-(5-((2-(dimetylamino)etylamino)metyl)-1H-pyrazol-3-yl)-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dionTFA (0,053 g) ble gjenvunnet som et lysegult faststoff. LCMS: m/e 599,4 (M + H)<+>, retensjonstid 1,73 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 8 ppm 8,27 (s, 1 H) 7,95 (s, 1 H) 7,54 - 7,68 (m, 5 H) 6,92 (s, 1 H) 4,02 (s, 3 H) 3,93 (s, 2 H) 3,77 - 3,82 (m, 2 H) 3,52 - 3,58 (m, 2 H) 3,35 - 3,40 (m, 2 H) 3,24 - 3,30 (m, 2 H) 2,78 (t, J=6,71 Hz, 2 H) 2,53 (t, J=6,71 Hz, 2 H) 2,28 (s, 6 H).
Fremstilling av 1-( 7-( 5-((( 2-( dimetylamino) etyl)( metyl) amino) metyl)- 1H- pyrazol- 3-yl)- 4- metoksy- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5-yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion- TFA ( Forbindelse B- 26)
I en forseglbar kolbe ble det anbrakt en blanding av 1-(7-klor-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)etan-1,2-dion (0,165 g, 0,353 mmol) i 1,4-dioksan (5 mL). N<1>,N<1>,N<2->trimetyl-N<2->((3-(tributyl-stannyl)-1 H-pyrazol-5-yl)metyl)etan-1,2-diamin (0,175 g, 0,371 mmol) ble tilsatt etterfulgt avtetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) (0,122 g, 0,106 mmol). Blandingen ble spylt med N2, og kolben ble forseglet. Blandingen ble deretter oppvarmet til 120°C i 15 timer. Siden reaksjonen ifølge LCMS var ufullstendig, ble ytterligere 0,050 g N1,N1,N2-trimetyl-N2-((3-(tributylstannyl)-1 H-pyrazol-5-yl)metyl)etan-1,2-diamin tilsatt sammen med 0,075 g tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0). Blandingen ble spylt med N2, forseglet og igjen oppvarmet til 120°C i 6 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen fortynnet med DMF og filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. Væsken ble konsentrert under redusert trykk og residuet løst i DMF. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi 0,040 g av et lysegult faststoff som 1-(7-(5-(((2-(dimetylamino)etyl)(metyl)amino)-metyl)-1 H-pyrazol-3-yl)-4-metoksy-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion-TFA. LCMS: m/e 613,4 (M + H)<+>, retensjonstid 1,80 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,66 (s, 1 H) 8,06 (s, 1 H) 7,59 - 7,74 (m, 5 H) 7,45 (s, 1 H) 4,33 (s, 2 H) 4,15 (s, 3 H) 3,82 - 3,87 (m, 2 H) 3,62 - 3,67 (m, 2 H) 3,56 (t, J=6,56 Hz, 2 H) 3,39 - 3,44 (m, 2 H) 3,32 - 3,38 (m, 4 H) 2,99 (s, 6 H) 2,66 - 2,69 (m, 3 H). Fremstilling av 1-( 4- metoksy- 7-( 5-(( 2-( pyridin- 4- yl) etylamino) metyl)- 1H- pyrazol- 3-yl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) p^ 1, 2- dion TFA ( Forbindelse B- 27)
I en forseglbar kolbe ble det anbrakt en blanding av 1-(7-klor-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)etan-1,2-dion (0,195 g, 0,417 mmol) i 1,4-dioksan (7 mL). 2-(pyridin-4-yl)-N-((3-(tributylstannyl)-1 H-pyrazol-5-yl)metyl)etanamin (0,205 g, 0,417 mmol) ble tilsatt etterfulgt av tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) (0,144 g, 0,125 mmol). Blandingen ble spylt med N2, og kolben ble forseglet. Blandingen ble deretter oppvarmet til 120°C i 14 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble blandingen fortynnet med CH2CI2og MeOH og filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. Faststoffet ble vasket med MeOH for å sikre at intet produkt var igjen. Væsken ble konsentrert under redusert trykk og residuet løst i DMF. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi 0,028 g av et lysegult faststoff som 1-(7-(5-((2-hydroksyetylamino)metyl)-1H-pyrazol-3-yl)-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion TFA. LCMS: m/e 633,4 (M + H)<+>, retensjonstid 1,70 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,80 - 8,85 (m, J=6,10 Hz, 2 H) 8,60 (s, 1 H) 8,05 - 8,10 (m, 3 H) 7,59 - 7,73 (m, 5 H) 7,50 (s, 1 H) 4,61 (s, 2 H) 4,14 (s, 3 H) 3,81 - 3,87 (m, 2 H) 3,60 - 3,68 (m,4H) 3,04-3,07 (m, 6 H).
Fremstilling av etyl- 3-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- yl)- 1H- pyrazol- 5- karboksylat
I et forseglet rør inneholdende 1-( 7- brom- 4- fluor- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3-yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion ( Forbindelse B- 1)
(1,24 g, 2,48 mmol) i 1,4-dioksan (20 mL) ble det tilsatt etyl-3-(tributylstannyl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (1,12 g, 2,61 mmol) og Pd(PPhi3)4(0,87 g, 0,75 mmol). Blandingen ble spylt med N2, og kolben ble forseglet og oppvarmet til 100°C. Etter oppvarming i 14 timer ble blandingen avkjølt til romtemperatur, fortynnet med MeOH og ble filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. Løsningen ble konsentrert under redusert trykk og på nytt løst i DMF. DMF-løsningen ble avsatt på preparativ HPLC for rensing. Etter rensning ble tittel-produktet isolert som et hvitaktig faststoff (0,901 g). LCMS: m/e 559,6 (M + H)<+>, retensjonstid 2,283 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 8 ppm 14,52 (s, 1 H) 12,35 (s, 1 H) 8,26 - 8,41 (m, 2 H) 7,36 - 7,76 (m, 6 H) 4,29 - 4,47 (m, J=6,71 Hz, 2 H) 3,09 - 3,80 (m, 8 H) 1,36 (s, 3 H).
Fremstilling av 3-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- yl)- 1H- pyrazol- 5- karboksylsyre
Til en rundkolbe inneholdende etyl-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,058 g, 0,10 mmol) i DMF (5 mL) og vann (5 mL) ble det tilsatt litiumhydroksyd-monohydrat (0,044 g, 1,05 mmol). Blandingen ble oppvarmet til 100°C i 21,5 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur og HCI tilsatt til pH = 1. Faststoffet ble utfelt fra løsningen og oppsamlet ved filtrering for å gi tittelforbindelsen som et gult faststoff (0,03 g). LCMS: m/e 531,15 (M + H)<+>, retensjonstid 2,10 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 8 ppm 14,37 (s, 1 H) 13,58 (s, 1 H) 12,23 (s, 1 H) 8,21 - 8,42 (m, 2 H) 7,52 - 7,77 (m, 5 H) 7,35 (s, 1 H) 3,08 - 3,76 (m, 8 H). C-7 pyrazolkarboksamider ble fremstilt ved bruk av to forskjellig metoder. En generell fremgangsmåte for hver metode er angitt sammen med karakteristikaene av forbindelsene fra hver metode.
Metode 1
Til en kolbe inneholdende 3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylsyre (0,02-0,07 g, 1 ekv) i DMF (2 mL) ble det tilsatt Hunigs base (0,2 mL) etterfulgt av amin (1,2 ekv) og TBTU (1,1 ekv). Blandingen ble spylt med N2og omrørt ved romtemperatur. Etter 15-72 timer ble blandingen behandlet med vann og løsningen konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuum ble løst i DMF og filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt gjenværende faststoff. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi amidproduktene som deres TFA-salter.
Forbindelse: N-(2-(dimetylamino)etyl)-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-metyl-1 H-pyrazol-5-karboksamid-TFA
<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 8 ppm 8,37 - 8,42 (m, 1 H) 8,29 (s, 1 H) 7,58 - 7,74 (m, 5 H) 7,49 (s, 1 H) 3,97 - 4,04 (m, 2 H) 3,82 - 3,87 (m, 2 H) 3,61 - 3,67 (m, 2 H) 3,27 - 3,55 (m, 9 H) 3,06 (s, 6 H)
Forbindelse: 3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(2-hydroksyetyl)-N-metyl-1H-pyrazol-5-karboksamid-TFA
<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 8 ppm 8,45 (s, 1 H) 8,28 (d, J=2,75 Hz, 1 H) 7,57 - 7,71 (m, 5 H) 7,42 (d, J=6,71 Hz, 1 H) 3,71 - 3,89 (m, 6 H) 3,62 - 3,66 (m, 2 H) 3,16-3,46 (m, 7 H)
Forbindelse: 3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(2-hydroksyetyl)-1H-pyrazol-5-karboksamid-TFA<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 8 ppm 8,39 (s, 1 H) 8,24 (d, J=2,44Hz, 1 H) 7,57 - 7,71 (m, 5 H) 7,44 (s, 1 H) 3,81 - 3,85 (m, 2 H) 3,76 (t, J=5,65 Hz, 2 H) 3,61 - 3,66 (m, 2 H) 3,55 (t, J=5,65 Hz, 2 H) 3,36 - 3,41 (m, 2 H) 3,29 - 3,35 (m, 2 H)
Forbindelse: N-(3-(dimetylamino)propyl)-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-metyl-1 H-pyrazol-5-karboksamidTFA
<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 8 ppm 8,40 (s, 1 H) 8,29 (s, 1 H) 7,59 - 7,73 (m, 5 H) 7.47 (s, 1 H) 3,81 - 3,87 (m, 2 H) 3,69 - 3,76 (m, 2 H) 3,62 - 3,66 (m, 2 H) 3,16 - 3.48 (m, 7 H) 2,97 (s, 6 H) 2,87 - 2,91 (m, 2 H) 2,11 - 2,25 (m, 2 H)
Forbindelse: 3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(3-(4-metylpiperazin-1 -yl)propyl)-1 H-pyrazol-5-karboksamid-TFA
<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 8 ppm 8,37 (s, 1 H) 8,27 (d, J=2,44Hz, 1 H) 7,58 - 7,74 (m, 5 H) 7,46 (s, 1 H) 3,80 - 3,86 (m, 2 H) 3,60 - 3,66 (m, 2 H) 3,27 - 3,58 (m, 14 H) 3,05 - 3,12 (m, 2 H) 2,94 (s, 3 H) 1,99 - 2,07 (m, 2 H)
Metode 2
Til en forseglbar kolbe inneholdende etyl-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,05 g, 0,09 mmol) ble det tilsatt aminet (0,5 mL). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i tre dager og deretter fortynnet med DMF og sendt gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. DMF-løsningen ble deretter renset ved preparativ HPLC for å gi de ønskede amidproduktene.
Forbindelse: 3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(2-(pyrrolidin-1 -yl)etyl)-1 H-pyrazol-5-karboksamid-TFA
<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,38 (s, 1 H) 8,25 (d, J=2,44 Hz, 1 H) 7,56 - 7,70 (m, 5 H) 7,45 (s, 1 H) 3,78 - 3,89 (m, 6 H) 3,61 - 3,66 (m, 2 H) 3,50 (t, J=5,80 Hz, 2 H) 3,35 - 3,41 (m, 2 H) 3,29 - 3,35 (m, 2 H) 3,16 - 3,26 (m, 2 H) 2,01 - 2,26 (m, 4 H).
Forbindelse: 3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(2-(pyridin-4-yl)etyl)-1H-pyrazol-5-karboksamid-TFA
<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,78 (d, J=6,71 Hz, 2 H) 8,37 (s, 1 H) 8,23 (d, J=2,44 Hz, 1 H) 8,07 (d, J=6,71 Hz, 2 H) 7,62 - 7,69 (m, 5 H) 7,38 (s, 1 H) 3,80 - 3,86 (m, 4 H) 3,61 - 3,64 (m, 2 H) 3,28 - 3,41 (m, 6 H).
Forbindelse: 3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(2-morfolinoetyl)-1H-pyrazol-5-karboksamid-TFA
<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,38 (s, 1 H) 8,27 (d, J=2,75 Hz, 1 H) 7,58 - 7,71 (m, 5 H) 7,47 (s, 1 H) 4,11 (s, 2 H) 3,68 - 3,89 (m, 8 H) 3,63 (d, J=4,88 Hz, 4 H) 3,61 - 3,65 (m, 2 H) 3,48 (t, J=5,95 Hz, 2 H) 3,37 - 3,40 (m, 2 H).
Fremstilling av etyl- 3-( 4- fluor- 1- metyl- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5-yl) piperazin- 1- yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- yl)- 1- metyl- 1 H- pyrazol- 5-karboksylat og etyl- 3-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- 1- metyl- 1H- pyrazol- 5- karboksylat.
Til en løsning av etyl-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,050 g, 0,09 mmol) i DMF (2 mL) ble det dråpevis tilsatt en 2M-løsning i THF av NaHMDS (0,11 mL, 0,22 mmol) etterfulgt av Mel (0,05 mL, 0,9 mmol). Blandingen ble omrørt i 60 minutter ved rt, og reaksjonen avbrutt med 2 mL H2O. Løsnings-midlet ble fjernet under redusert trykk og residuet igjen løst i DMF. DMF-løsningen ble sendt gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt gjenværende faststoff og renset ved preparativ HPLC for å gi etyl-3-(4-fluor-1-metyl-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 -metyl-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,011 g) og etyl 3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 -metyl-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,011 g) som produktene.
Etyl-3-(4-fluor-1 -metyl-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1-metyl-1 H-pyrazol-5-karboksylat: LCMS: m/e 587,7 (M + H)<+>, retensjonstid 2,213 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,42 (s, 1 H) 8,31 (s, 1 H) 7,51 - 7,70 (m, 5 H) 7,25 (s, 1 H) 4,40 (q, J=6,92 Hz, 2 H) 4,27 (s, 3 H) 3,77 - 3,83 (m, 2 H) 3,73 (s, 3 H) 3,57 - 3,63 (m, 2 H) 3,33 - 3,40 (m, 2 H) 3,26 - 3,33 (m, 2 H) 1,39 (t, J=7,02 Hz, 3 H).
Etyl-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1-metyl-1 H-pyrazol-5-karboksylat: LCMS: m/e 573,5 (M + H)<+>, retensjonstid 1,747 min (Metode 1).<1>H NMR (500 MHz, KLOROFORM-D) 6 ppm 11,55 (s, 1 H) 8,43 (s, 1 H) 8,29 (s, 1 H) 7,73 (s, 1 H) 7,48 - 7,67 (m, 5 H) 4,35 - 4,48 (m, 2 H) 4,31 (s, 3 H) 3,80 - 3,89 (m, 2 H) 3,62 - 3,72 (m, 2 H) 3,30 - 3,47 (m, 4 H) 1,34-1,49 (m, 3 H).
Fremstilling av 3-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- yl)- N-( 2- hydroksyetyl)- 1- metyl- 1H- pyrazol- 5-karboksamid- TFA.
Til en forseglbar kolbe inneholdende etyl-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 -metyl-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,047 g, 0,08 mmol) ble det tilsatt etanolamin (0,7 mL). Blandingen ble forseglet og oppvarmet til 50°C i 20,5 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur og fortynnet med DMF og sendt gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi 3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-N-(2-hydroksyetyl)-1-metyl-1 H-pyrazol-5- karboksamid-TFA (0,014 g) som et hvitaktig faststoff. LCMS: m/e 588,7 (M + H)<+>, retensjonstid 2,03 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, CDCb) 8 ppm 8,35 (s, 1 H) 8,23 (s, 1 H) 7,50 - 7,61 (m, 6 H) 4,29 (s, 3 H) 3,78 - 3,85 (m, 4 H) 3,54 - 3,64 (m, 4 H) 3,40 (s, 2 H) 3,29 - 3,34 (m, 2 H) 2,79 (s, 1 H).
Fremstilling av N-( 3-( dimetylamino) propyl)- 3-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H-tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- 1- metyl- 1 H-pyrazol- 5- karboksamid- TFA.
Til en forseglbar kolbe inneholdende etyl-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 -metyl-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,058 g, 0,10 mmol) ble det tilsatt N1,N1-dimetylpropan-1,3-diamin (0,7 mL). Blandingen ble forseglet og oppvarmet til 50°C i 20,5 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur og fortynnet med DMF og sendt gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi N-(3-(dimetylamino)propyl)-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)acetyl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1-metyl-1H-pyrazol-5-karboksamid-TFA. (0,020 g) som et hvitaktig faststoff. LCMS: m/e 629,5 (M + H)<+>, retensjonstid 1,93 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 8 ppm 8,75 (s, 1 H) 8,61 (s, 1 H) 7,97 - 8,11 (m, 5 H) 7,79 (s, 1 H) 4,69 (s, 3 H) 4,21 - 4,25 (m, 2 H) 4,01 - 4,04 (m, 2 H) 3,91 (t, J=6,26 Hz, 2 H) 3,76 - 3,82 (m, J=3,66 Hz, 2 H) 3,65 - 3,75 (m, 10 H) 2,45 - 2,52 (m, 2 H).
Fremstilling av 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1 - fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- karbonitril.
Til en forseglbar kolbe inneholdende 1-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (0,10 g, 0,20 mmol) i 1,4-dioksan (5 ml) ble det tilsatt tributyltinn-cyanid (0,07 g,
0,22 mmol) etterfulgt av Pd(PPhi3)4 (0,07 g, 0,06 mmol). Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet og oppvarmet til 100°C. Etter oppvarming i 16 timer ble blandingen avkjølt til romtemperatur og løsningsmidlet fjernet i vakuum. Residuet ble løst i DMF og filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt gjenværende faststoff. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitaktig faststoff (0,028 g). LCMS: m/e 446,2 (M + H)<+>, retensjonstid 1,81 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 6 ppm 14,06 (s, 1 H) 8,66 (s, 1 H) 8,50 (d, J=2,14 Hz, 1 H) 7,56 - 7,70 (m, 5 H) 3,67 - 3,72 (m, 2 H) 3,33 - 3,50 (m, 4 H) 3,13-3,17 (m, 2 H).
Fremstilling av 1-( 7- acetyl- 4- fluor- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H-tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion.
Til en forseglbar kolbe inneholdende 1-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (0,10 g, 0,20 mmol) i 1,4-dioksan (5 mL) ble det tilsatt tributyl(1-etoksyvinyl)tinn (0,079 g, 0,22 mmol) etterfulgt av Pd(PPhi3)4 (0,07 g, 0,06 mmol). Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet og oppvarmet til 100°C. Etter oppvarming i 16 timer ble blandingen avkjølt til romtemperatur og løsningsmidlet fjernet i vakuum. Residuet ble løst i DMF og filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt gjenværende faststoff. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitaktig faststoff (0,025 g). LCMS: m/e 463,38 (M + H)<+>, retensjonstid 1,88 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, CDCb) 6 ppm 11,02 (s, 1 H) 8,35 (s, 1 H) 8,31 (d, J=2,75 Hz, 1 H) 7,52 - 7,62 (m, 5 H) 3,81 - 3,85 (m, 2 H) 3,61 - 3,65 (m, 2 H) 3,39 - 3,43 (m, 2 H) 3,31 - 3,35 (m, 2 H) 2,80 - 2,83 (m, 3 H).
Fremstilling av ( E)- 1-( 4- fluor- 7-( 1-( metoksyimino) etyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3-yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion.
Til en suspensjon av 1-(7-acetyl-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (0,05 g, 0,11 mmol) i EtOH (10 mL) ble det tilsatt metoksylamin-hydroklorid (0,05 g, 0,60 mmol). Blandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 1 time og deretter avkjølt til romtemperatur og konsentrert i vakuum. Residuet ble fortynnet med MeOH og det dannede faststoff oppsamlet og vasket med vann. Tittelforbindelsen ble isolert som et lysegult faststoff (0,025 g). LCMS: m/e 492,4 (M + H)<+>, retensjonstid 2,068 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 6 ppm 12,02 (s, 1 H) 8,36 (d, J = 2,14 Hz, 1 H) 8,27 (d, J=3,36 Hz, 1 H) 7,56-7,71 (m, 5 H) 4,13 - 4,16 (m, 3 H) 3,68-3,73 (m, 2 H) 3,43 - 3,48 (m, 2 H) 3,29 - 3,36 (m, 2 H) 3,13 - 3,18 (m, 2 H) 2,36 (s, 3 H).
Fremstilling av ( E)- 1-( 4- fluor- 7-( 1-( hydroksyimino) etyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 3-yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion.
Til en suspensjon av 1-(7-acetyl-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (0,05 g, 0,11 mmol) i EtOH (10 mL) ble det tilsatt hydroksylamin-hydroklorid (0,04 g, 0,58 mmol). Blandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling i 1 time og deretter avkjølt til romtemperatur og konsentrert i vakuum. Residuet ble fortynnet med MeOH og det dannede faststoff oppsamlet og vasket med vann. Tittelforbindelsen ble isolert som et hvitaktig faststoff (0,027 g). LCMS: m/e 478,5 (M + H)<+>, retensjonstid 1,53 min (Metode 1).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De)D 6 ppm 11,95 (s, 1 H) 11,61 (s, 1 H) 8,34 (d, J=1,83 Hz, 1 H) 8,30 (d, J=3,36 Hz, 1 H) 7,56 - 7,71 (m, 5 H) 3,68 - 3,72 (m, 2 H) 3,43 - 3,48 (m, 2 H) 3,30 - 3,34 (m, 2 H) 3,13 - 3,17 (m, 2 H) 2,35 (s, 3 H). Fremstilling av 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1 - fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- karboksamid.
Til en forseglbar kolbe inneholdende 1-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (1,0 g, 2,0 mmol) i 1,4-dioksan (20 mL) ble det tilsatt tributyltinn-cyanid (0,70 g, 2,2 mmol) etterfulgt av Pd(PPh3)4(0,12 g, 0,1 mmol). Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet og oppvarmet til 100°C. Etter oppvarming i 20 timer ble blandingen avkjølt til romtemperatur og fortynnet med MeOH (50 mL) og filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne faststoff. Løsningen ble tilsatt H2O (20 mL) og blandingen oppvarmet med en varmepistol. Faststoffet dannet etter avkjøling ble oppsamlet ved filtrering. Faststoffet ble løst i DMF og renset ved preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitaktig faststoff (30 mg). LCMS: m/e 464,11 (M + H)<+>, retensjonstid 1,095 min (Metode 3).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 8 ppm 12,78 (s, 1 H) 8,34 (d, J=2,14 Hz, 1 H) 8,30 (s, 1 H) 8,25 (d, J=3,36 Hz, 1 H) 7,88 (s, 1 H) 7,56 - 7,71 (m, 5 H) 3,67 - 3,72 (m, 2 H) 3,43 - 3,47 (m, 2 H) 3,30 - 3,34 (m, 2 H) 3,13-3,17 (m, 2 H).
Fremstilling av etyl- 3-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 3- fenyl- 1H- pyrazol- 4- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- yl)- 1H- pyrazol- 5- karboksylat.
Til en forseglbar kolbe inneholdende 2-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,15 g, 0,52 mmol) i 1,4-dioksan (5 mL) ble det tilsatt 2-(7-(5-(etoksykarbonyl)-1 H-pyrazol-3-yl)-4-fluor-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,24 g, 0,55 mmol) etterfulgt av Pd(PPhi3)4(0,18 g, 0,16 mmol). Blandingen ble spylt med N2, og røret ble forseglet og oppvarmet til 100°C. Etter oppvarming i 3 timer ble blandingen avkjølt til romtemperatur og fortynnet med MeOH. Løsningen ble sendt gjennom et lag Celite for å fjerne faststoff og den resulterende løsning konsentrert under redusert trykk. Residuet ble løst i DMF og avsatt på preparativ HPLC for rensing. 2-(7-(5-(etoksykarbonyl)-1H-pyrazol-3-yl)-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre ble isolert som et hvitaktig faststoff (0,043 g). LCMS: m/e 347,3 (M + H)<+>, retensjonstid 1,68 min (Metode 2).
Til en løsning av 2-(7-(5-(etoksykarbonyl)-1 H-pyrazol-3-yl)-4-fluor-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,017 g, 0,049 mmol) i DMF (1,5 mL) ble det tilsatt TBTU (0,017 g, 0,054 mmol), diisopropyletylamin (0,15 mL) og 1-(3-fenyl-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin (0,011 g, 0,049 mmol). Blandingen ble omrørt under N2ved romtemperatur i 14,5 timer og behandlet med 10 mL H2O. Løsnings-midlet ble fjernet under redusert trykk og residuet løst i DMF. DMF-løsningen ble sendt gjennom et lag Celite for å fjerne faststoff og DMF-løsningen renset ved preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitt faststoff (13,3 mg). LCMS: m/e 557,4 (M + H)<+>, retensjonstid 1,79 min (Metode 1).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,44 (s, 1 H) 8,31 (d, J=2,44 Hz, 1 H) 7,95 (d, J=7,32 Hz, 2 H) 7,63 (s, 1 H) 7,56 (s, 1 H) 7,46 (t, J=7,63 Hz, 2 H) 7,36 (t, J=7,48 Hz, 1 H) 4,46 (q, J=7,22 Hz, 2 H) 3,88 - 3,92 (m, 2 H) 3,65 - 3,70 (m, 2 H) 3,00 - 3,04 (m, 2 H) 2,91 -2,95 (m, 2 H) 1,45 (t, J=7,02 Hz, 3 H).
Fremstilling av 3-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 3- fenyl- 1H- pyrazol- 4- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- N-( 2- hydroksyetyl)- 1H- pyrazol- 5-karboksamid- TFA.
Til en kolbe inneholdende etyl-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(3-fenyl-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,025 g, 0,045 mmol) ble det tilsatt etanolamin (0,5 mL). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 15,5 timer og fortynnet med DMF og sendt gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitaktig faststoff (0,010 g). LCMS: m/e 572,4 (M + H)<+>, retensjonstid 1,87 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 6 ppm 12,23 (s, 1 H) 8,67 (s, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 8,28 (s, 1 H) 7,95 - 8,00 (m, 2 H) 7,57 - 7,64 (m, 2 H) 7,38 - 7,44 (m, 6,87 Hz, 2 H) 7,28 (t, J=6,56 Hz, 1 H) 3,74 - 3,80 (m, 2 H) 3,32 - 3,62 (m, 7 H) 2,84 - 2,91 (m, 2 H) 2,73 - 2,80 (m, 2 H).
Fremstilling av N-( 3-( dimetylamino) propyl)- 3-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 3- fenyl- 1H-pyrazol- 4- yl) piperazin- 1- yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- 1H- pyrazol- 5-karboksamid- TFA.
Til en kolbe inneholdende etyl-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(3-fenyl-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat (0,043 g, 0,077 mmol) ble det tilsatt N1,N1-dimetylpropan-1,3-diamin (0,5 mL). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 113 timer og fortynnet med DMF og sendt gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitaktig faststoff (0,03 g). LCMS: m/e 613,3 (M + H)<+>, retensjonstid 1,91 min (Metode 6).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 5 ppm 8,40 (s, 1 H) 8,27 (d, J=2,75 Hz, 1 H) 7,94 (d, J=7,32 Hz, 2 H) 7,64 (s, 1 H) 7,43 - 7,47 (m, 3 H) 7,35 (t, J=7,32 Hz, 1 H) 3,87 - 3,91 (m, 2 H) 3,64 - 3,68 (m, 2 H) 3,53 (t, J=6,41 Hz, 2 H) 3,24 - 3,29 (m, 2 H) 2,99 - 3,03 (m, 2 H) 2,95 (s, 6 H) 2,90 - 2,94 (m, 2 H) 2,05 - 2,13 (m, 2 H).
Fremstilling av 3-( 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 3- fenyl- 1H- pyrazol- 4- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyhdin- 7- yl)- N-( 2- morfolinoetyl)- 1H- pyrazol- 5-karboksamid- TFA.
Til en kolbe inneholdende etyl-3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(3-fenyl-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylat
(0,038 g, 0,068 mmol) ble det tilsatt 2-morfolinoetanamin (0,5 mL). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 113 timer og fortynnet med DMF og sendt gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi tittelforbindelsen som et hvitaktig faststoff (0,041 g). LCMS: m/e 641,6 (M + H)<+>, retensjonstid 1,73 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 6 ppm 8,39 (s, 1 H) 8,25 - 8,31 (m, 1 H) 7,92 - 7,97 (m, 2 H) 7,63 (s, 1 H) 7,42 - 7,47 (m, 3 H) 7,35 (t, J=7,48 Hz, 1 H) 4,07 - 4,16 (m, 2 H) 3,79 - 3,91 (m, 6 H) 3,70 - 3,77 (m, 2 H) 3,63 - 3,69 (m, 2 H) 3,46 - 3,50 (m, 2 H) 3,20 - 3,31 (m, 2 H) 2,98 - 3,03 (m, 2 H) 2,89 - 2,94 (m, 2 H).
Fremstilling av 4- fluor- N-( 2- hydroksyetyl)- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5-yl) piperazin- 1- yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- karboksamid.
Til en 15 mL rundkolbe inneholdende 1-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (0,05 g, 0,10 mmol) ble det tilsatt DMF (2,0 mL), trietylamin (0,4 mL), etanolamin (0,02 g, 0,33 mmol) og tilslutt Pd(PPh3)4(0,03 g, 0,03 mmol). Kolben ble anbrakt i en Parr-reaksjonsbeholder forsynt med en trykkmåler og en gass-innløpsventil. Beholderen ble forseglet og spylt med N2tre ganger og deretter spylt med karbonmonoksyd tre ganger, med et endelig karbonmonoksydtrykk på 3,4 atm. Beholderen ble oppvarmet til 50°C. Etter oppvarming i 15 timer ble blandingen avkjølt til romtemperatur, karbonmonoksydet ble fjernet med vakuum og beholderen spylt med N2. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk og fortynnet med DMF. DMF-løsningen ble sendt gjennom et lag Celite for å fjerne faststoff og renset ved preparativ HPLC. Tittelforbindelsen ble gjenvunnet som et hvitaktig faststoff (0,014 g). LCMS: m/e 508,3 (M + H)<+>, retensjonstid 1,35 min (Metode 1).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 8 ppm 12,85 (s, 1 H) 8,82 (s, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 8,28 (s, 1 H) 7,56 - 7,71 (m, 5 H) 3,67 - 3,72 (m, 2 H) 3,55 - 3,60 (m, 2 H) 3,39 - 3,50 (m, 5 H) 3,30 - 3,35 (m, 2 H) 3,13 - 3,17 (m, 2 H).
Fremstilling av 4-( dimetylamino)- N-( 2- hydroksyetyl)- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H-tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- karboksamidTFA.
Til en 15 mL rundkolbe inneholdende 1-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (0,05 g, 0,10 mmol) ble det tilsatt DMF (2,0 mL), trietylamin (0,4 mL), etanolamin (0,02 g, 0,33 mmol) og tilslutt Pd(PPh3)4(0,03 g, 0,03 mmol). Kolben ble anbrakt i en Parr-reaksjonsbeholder forsynt med en trykkmåler og en gass-innløpsventil. Beholderen ble forseglet og spylt med N2tre ganger og deretter spylt med karbonmonoksyd tre ganger, med et endelig karbonmonoksydtrykk på 3,4 atm. Beholderen ble oppvarmet til 70°C. Etter oppvarming i 15 timer ble blandingen avkjølt til romtemperatur, karbonmonoksydet ble fjernet med vakuum og beholderen spylt med N2. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk og fortynnet med DMF. DMF-løsningen ble sendt gjennom et lag Celite for å fjerne faststoff og renset ved preparativ HPLC. Tittelforbindelsen ble gjenvunnet som et gult faststoff (0,020 g). LCMS: m/e 533,5 (M + H)<+>, retensjonstid 1,35 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 8 ppm 8,96 (s, 1 H) 8,65 (s, 1 H) 7,59 - 7,72 (m, 5 H) 3,86 - 3,89 (m, 2 H) 3,79 (t, J=5,65 Hz, 2 H) 3,68 - 3,71 (m, 2 H) 3,64 (t, J=5,65 Hz, 2 H) 3,58 (s, 6 H) 3,40 - 3,44 (m, 2 H) 3,30 - 3,35 (m, 2 H).
Fremstilling av etyl- 4- fluor- 3-( 2- okso- 2-( 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1-yl) acetyl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridin- 7- karboksylat.
Til en 15 mL rundkolbe inneholdende 1-(7-brom-4-fluor-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)etan-1,2-dion (0,10 g, 0,20 mmol) ble det tilsatt DMF (4,0 mL), trietylamin (0,8 mL), etanol (0,05 g, 1,00 mmol) og tilslutt Pd(PPhi3)4 (0,06 g, 0,06 mmol). Kolben ble anbrakt i en Parr-reaksjonsbeholder forsynt med en trykkmåler og en gass-innløpsventil. Beholderen ble forseglet og spylt med N2tre ganger og deretter spylt med karbonmonoksyd tre ganger, med et endelig karbonmonoksydtrykk på 3,4 atm. Beholderen ble oppvarmet til 100°C. Etter oppvarming i 6 timer ble blandingen avkjølt til romtemperatur, karbonmonoksydet ble fjernet med vakuum og beholderen spylt med N2. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk og fortynnet med DMF. DMF-løsningen ble sendt gjennom et lag Celite for å fjerne faststoff og renset ved preparativ HPLC. Tittelforbindelsen ble gjenvunnet som et hvitaktig faststoff (0,020 g). LCMS: m/e 493,4 (M + H)<+>, retensjonstid 1,82 min (Metode 2).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 6 ppm 12,82 (s, 1 H) 8,43 (s, 1 H) 8,35 (d, J=3,05 Hz, 1 H) 7,57 - 7,70 (m, 5 H) 4,46 (q, J=7,12 Hz, 2 H) 3,67 - 3,72 (m, 2 H) 3,43 - 3,47 (m, 2 H) 3,31 - 3,35 (m, 2 H) 3,13 - 3,17 (m, 2 H) 1,39 (t, J=7,17 Hz, 3 H).
Til en rundkolbe tilkoblet en Dean-Stark felle inneholdende molekylsikt, 4Å
(0,25 g) ble det tilsatt 4-bromtiazol-2-karbaldehyd (4,4 g, 22,91 mmol). Utgangsmaterialet ble løst i benzen (45 mL) og tilsatt etylenglykol (1,406 mL, 25,2 mmol) etterfulgt av pTsOH (0,218 g, 1,146 mmol). Blandingen ble kokt under tilbakeløps-
kjøling i 3 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur og ekstrahert med mettet vandig NaHCCh. Blandingen ble vasket 2x med mettet NaHC03(40 mL), deretter én gang med mettet NaCI (40 mL). Det organiske lag ble tørket med Na2S04. Tørkemidlet ble fjernet ved filtrering og blandingen konsentrert under redusert trykk. Residuet ble renset ved "biotage" hurtigkromatografi under bruk av en 40 + M kolonne og en gradient med 0 til 20% EtOAc i heksaner. Produktet, 4-brom-2-(1,3-dioksolan-2-yl)tiazol (5,1 g, 21,60 mmol, 94% utbytte) ble oppnådd som en lysegul olje.
Til en løsning av 4-brom-2-(1,3-dioksolan-2-yl)tiazol (5,09 g, 21,56 mmol) i toluen (100 mL) ble det tilsatt heksametylditinn (10 g, 30,5 mmol) etterfulgt av tetrakis (2,491 g, 2,156 mmol). Blandingen ble forbundet med en kjøler og spylt med N2. Blandingen ble oppvarmet til 100°C i 4 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur og avsatt på en 40 + M "biotage" patron som på forhånd var mettet med heksaner med 0,1% Et3N. Det ønskede produkt ble renset ved bruk av 0-20% EtOAc i heksaner med 0,1% Et3N-gradient. Etter konsentrering i vakuum ble produktet 2-(1,3-dioksolan-2-yl)-4-(trimetylstannyl)tiazol (4,64 g, 14,50 mmol, 67,3 % utbytte) isolert som en lysegul olje. LCMS: m/e 322,0 (M + H)<+>, retensjonstid 2,23 min (Metode 7);<1>H NMR (500 MHz, CDCb) 6 ppm 7,39 (s, 1 H) 6,20 (s, 1 H) 4,03 - 4,20 (m, 4 H) 0,27 - 0,42 (m, 9 H).
Fremstilling av 1-( 7-( 2-( 1, 3- dioksolan- 2- yl) tiazol- 4- yl)- 4- metoksy- 1H- pyrrolo[ 2, 3-c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion B-58
Til en forseglbar 75 mL kolbe inneholdende 1-(7-klor-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)etan-1,2-dion (0,3 g, 0,643 mmol) ble det tilsatt en løsning av 2-(1,3-dioksolan-2-yl)-4-(trimetyl-stannyl)tiazol (0,210 g, 0,655 mmol) i 1,4-dioksan (10 mL). Blandingen ble spylt med N2og tilsatt Pd(PPh3)4(0,149 g, 0,129 mmol). Blandingen ble på nytt spylt med N2, og kolben ble forseglet og oppvarmet i et oljebad til 100°C. Etter oppvarming i 20 timer ble blandingen avkjølt til romtemperatur. Blandingen ble over-ført til en rundkolbe under bruk av MeOH som overførings-løsningsmiddel. Løsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk. Residuet ble løst på nytt i DMF og sendt gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt gjenværende faststoff. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC. Etter preparativ HPLC ble det oppsamlet en hovedsakelig ren prøve som et hvitaktig faststoff. En liten del av dette materialet ble fjernet og renset på nytt ved hurtigkromatografi (0-5% MeOH i diklormetan-gradient) [20 mg etter rensingen]. Resten av produktet ble brakt videre til neste trinn uten ytterligere rensing (0,305 g). LCMS: m/e 588,1 (M + H)<+>, retensjonstid 1,30 min (Metode 3).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-De) 6 ppm 12,20 (s, 1 H) 8,38 (s, 1 H) 8,22 (s, 1 H) 8,11 (s, 1 H) 7,68 - 7,72 (m, 2 H) 7,57 - 7,66 (m, 3 H) 6,29 (s, 1 H) 4,16 - 4,20 (m, 2 H) 4,07 - 4,10 (m, 2 H) 3,99 (s, 3 H) 3,67 - 3,71 (m, 2 H) 3,41 - 3,45 (m, 2 H) 3,30 - 3,32 (m, 2 H) 3,15 - 3,19 (m, 2 H). Fremstilling av 1-( 4- metoksy- 7-( 2-(( metylamino) metyl) tiazol- 4- yl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3-c] pyridin- 3- yl)- 2-( 4-( 1- fenyl- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dionTFA.
Til en suspensjon av 1-(7-(2-(1,3-dioksolan-2-yl)tiazol-4-yl)-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)etan-1,2-dion (0,305 g, 0,519 mmol) i H2O (2 mL, 111 mmol) ble det tilsatt TFA (1 mL, 12,98 mmol). Blandingen ble oppvarmet til 70°C. Etter oppvarming i 18 timer ble blandingen avkjølt til romtemperatur og omrørt ved romtemperatur i ytterligere 20 timer. Blandingen ble konsentrert under redusert trykk. Residuet ble løst i diklormetan og ekstrahert med mettet NaHCCh. Blandingen ble ekstrahert med diklormetan (3x10 mL) og tørket med Na2S04. Tørkemidlet ble fjernet ved filtrering. Den organiske løsningen ble konsentrert under redusert trykk og den resulterende blanding renset ved hurtigkromatografi (0 til 5% metanol i diklormetan-gradient). Produktet 4-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 - yl)acetyl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)tiazol-2-karbaldehyd (0,103 g, 0,189 mmol, 36,5% utbytte) ble oppsamlet som et lysegult faststoff.
Til en løsning av 4-(4-metoksy-3-(2-okso-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)tiazol-2-karbaldehyd (0,088 g, 0,162 mmol) i DCE (3 mL) ble det tilsatt eddiksyre (9,27 (j.L, 0,162 mmol) og 2M (i THF) metylamin (0,405 mL, 0,809 mmol). Blandingen ble omrørt i 15 minutter ved rt og tilsatt natrium-triacetoksyborhydrid (0,069 g, 0,324 mmol). Blandingen ble omrørt i 4 timer ved romtemperatur. Ytterligere 0,05 g Na(OAc)3BH ble tilsatt og blandingen omrørt natten over ved romtemperatur. Blandingen ble nøytralisert med mettet NaHCCte. Blandingen ble ekstrahert med diklormetan (3x10 mL) og tørket med Na2S04. Tørkemidlet ble fjernet ved filtrering og løsningen konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuum ble løst i DMF og filtrert gjennom et lag Celite for å fjerne eventuelt faststoff. DMF-løsningen ble renset ved preparativ HPLC for å gi 1-(4-metoksy-7-(2-((metylamino)metyl)tiazol-4-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)etan-1,2-dion, TFA (32,6 mg, 0,048 mmol, 29,9% utbytte) som et lysegult faststoff. LCMS: m/e 559,1 (M + H)<+>, retensjonstid 1,12 min (Metode 3).<1>H NMR (500 MHz, MeOD) 8 ppm 8,54 - 8,59 (m, 2 H) 8,08 (s, 1 H) 7,57 - 7,74 (m, 5 H) 4,82 (s, 2 H) 4,11 (s, 3 H) 3,82 - 3,86 (m, 2 H) 3,60 - 3,63 (m, 2 H) 3,39 - 3,42 (m, 2 H) 3,33 (s, 2 H) 2,95 (s, 3 H).
Eksempelkjemi Seksjon C
De følgende generelle metoder gjelder Eksempelkjemi Seksjon C:
HPLC metoder
#1 Dynamex C18, 4,6 x 250 mm, 8 mikrometer, Løsning A 0,05% TFA i vann/ACN (90:10), Løsning B 0,05% TFA i vann/ACN (10:90). gradient 0% B til 100% B;
#2 Phenomenex Gemini C18, 4,6 x 150 mm, 5 mikrometer, Løsning A 10 mM ammonium-bikarbonat (pH 7,8) i vann/ACN (95:5). Løsning B 10 mM ammonium-bikarbonat (pH 7,8) i vann/ACN (10:90), gradient 10% B til 50% B;
#3 Waters Xterra C18, 4,6 x 150 mm, 3,5 mikrometer, Løsning A 10 nM ammoniumacetat (pH 6,8) i vann/ACN (95:5). Løsning B 10 nM ammoniumacetat (pH 6,8) i vann/ACN (10:90), gradient 5% B til 100% B (13,15 min retensjon).
Fremstilling av 1-(( 2R, 6S)- 2, 6- dimetyl- 4-( 1- fenyl- 1 H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl)- 2-( 4- fluor- 7-( 1H- 1, 2, 3- thazol- 1- yl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- cjpyr^
( Forbindelse C- 1)
(3R,5S)-3,5-dimetyl-1-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin ble fremstilt etter Metode A i Kjemiseksjon 1 ved å benytte (2R,6S)-2,6-dimetylpiperazin og 5-klor-1 -fenyl-1 H-tetrazol. (3R,5S)-3,5-dimetyl-1 -(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin ble koblet med 2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre å benytte Metode B for fremstillingen av forbindelse 3 i Kjemiseksjon A for å gi det ønskede produkt 1-((2R,6S)-2,6-dimetyl-4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)-2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1 -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)etan-1,2-dion med de følgende karakteristika:
Renhet og retensjonstider oppnådd ved hver HPLC metode:
Metode 1) 98,6% renhet, 15,8 min. retensjonstid
Metode 2) 98,8% renhet, 12,85 min. retensjonstid
Metode 3) 99,1 % renhet, 13,15 min retensjonstid
MS 516(M+H) + ,514(M-H)-
HRMS beregnet 516,2020
funnet 516,2007
Smp. 254-256°C
<1>H NMR DMSO-d6: 1,19-1,24 (t, 6H, J= 6,6 Hz), 2,99-3,05 (dd, 1H, J= 3,9, 12,6 Hz), 3,15-3,21 (dd, 1H, J= 4,5, 12,6 Hz), 3,24-3,42 (m, 2H), 3,87-3.,90 (m, 1H), 4,58-4,61 (m, 1H), 7,62-7,71 (m, 5H), 8,11-8,12 (d, 1H, J= 0,9 Hz), 8,30-8,31 (m, 2H), 9,00-9,01 (d, 1H, J= 1,2 Hz), 13,04 (s, 1H).
Eksempelkjemi Seksjon D
De følgende generelle metoder gjelder Eksempelkjemi Seksjon D:
LC- MS analysemetode:
Metode 1
Gradienttime: 4 min
Strømningshastighet: 3 mL/min
Holdetid: Gradienttime + 1 minutt
Startkonkons.: 10% B
Elueringsmiddel A: H2O med 10 mM NH4OACElueringsmiddel B: ACN
Kolonne: Phenomenex, Onyx Monolithic C18 50x4,6mm
Metode 2
Gradienttid: 3 min
Strømningshastighet: 1 mL/min
Holdetid: Gradient time + 1 minutt
Startkons.: 0% B
Elueringsmiddel A: 5:95 ACN:vann med 10 mM NH4OACElueringsmiddel B: 95:5 ACN:vann med 10 mM NH4OACKolonne: Waters Xbridge 2,1x50 mm 5 nm C18
Metode 3
Gradienttid: 7,5 min
Strømningshastighet: 1,2 mL/min
Holdetid: Gradient time + 1 minutt
Startkons.: 10% B
Elueringsmiddel A: Vann med 10 mM NH4OACElueringsmiddel B: ACN
Kolonne: Agilent Zorbax SB-CN 4,6x75 mm 3,5 mikron
Fremstilling av forbindelse D
2-ketosyre (1 ekv.), piperazin (1-5 ekv.), 0-(1H-benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetrametyluronium-tetrafluorborat (TBTU) (1-5 ekv.) og Hunigs base (1-5 ekv.) ble kombinert i DMF. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 17 timer. Produktet ble renset ved et Waters eller Dinox automatisert preparativt HPLC-system. 2-ketosyre (1 ekv.), piperazin (1-5 ekv.), (2-(7-aza-1H-benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetrametyluronium-heksafluorfosfat) (HATU) (1-5 ekv.) og Hunigs base (1-5 ekv.) ble kombiner i DMF. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 17 timer. Produktet ble renset ved et Waters eller Dinox automatisert preparativt HPLC-system.
Eksempelkjemi Seksjon E
Fremstilling av 1-( 4- fluor- 7-( 1H- 1, 2, 3- triazol- 1- yl)- 1H- pyrrolo[ 2, 3- c] pyridinyl- 3- yl)- 2-( 4-( 1-( pyridin- 2- yl)- 1H- tetrazol- 5- yl) piperazin- 1- yl) etan- 1, 2- dion ( Forbindelse E- 1)
Del A: Til en løsning av 2-aminopyridin (9,41 g, 100 mmol) i metylenklorid (200 mL) ble det ved 25°C tilsatt tiokarbonyl-diimidazol (18,75 g, 100 mmol) og den resulterende blanding omrørt ved 25°C i 20 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter tilsatt tert-butylpiperazin-1-karboksylat (18,60 g, 100 mmol) og den resulterende blanding omrørt ved 25°C i 24 timer til. Blandingen ble fortynnet med dietyleter, vasket med vann (X3) og saltvann, tørket over vannfritt natriumsulfat, filtrert og konsentrert. Kolonnekromatografi på silikagel (eluering: 0-20% dietyleter/metylenklorid) ga tert-butyl-4-(pyridin-2-ylkarbamotioyl)piperazin-1 - karboksylat (13,60 g) som et fargeløst faststoff etter krystallisering fra en blanding av 1-klorbutan/heksan;<1>H NMR (300MHz, CDCI3) 6 7,97 (m, 1H), 7,64 (m, 2H), 6,88 (m, 1H), 4,00 (m, 4H), 3,51 (m, 4H), 1,44 (s, 9H).
Om kommersielt tilgjengelige fikk isotiocyanatene reagerer direkte med tert-butylpiperazin-1-karboksylat i metylenklorid ved 25°C. Det ønskede tiourea ble deretter isolert som beskrevet ovenfor.
Del B: En blanding av tert-butyl-4-(pyridin-2-ylkarbamotioyl)piperazin-1-karboksylat (15,30 g, 47,5 mmol), kaliumkarbonat (13,10 g, 95,0 mmol), jodmetan (3,00 mL, 47,5 mmol) og DMSO (200 mL) ble omrørt ved 25°C i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med etylacetat, vasket med vann (X4) og saltvann, tørket over vannfritt natriumsulfat, filtrert og konsentrert for å gi tert-butyl-4-(metyltio(pyridin-2-ylimino)metyl)piperazin-1-karboksylat (12,00 g) som et voksaktig faststoff;<1>H NMR (300MHz, CDCI3) 8 8,25 (m, 1H), 7,63 (m, 1H), 6,88 (m, 2H), 3,70 (m, 4H), 3,52 (m, 4H), 2,04 (s, 3H), 1,44 (s, 9H).
Del C: Til en løsning av tert-butyl-4-(metyltio(pyridin-2-ylimino)metyl)piperazin-1 -karboksylat (12,00 g, 36,0 mmol) i DMF (200 mL) ved 25°C ble det tilsatt natriumazid (11,60 g, 178 mmol), etterfulgt av kvikksølv(ll)klorid (10,90 g, 40,0 mmol) og den resulterende blanding omrørt ved 25°C i 19 dager. Blandingen deretter ble filtrert og faststoffet vasket med DMF. Det samlede filtrat ble konsentrert under vakuum og residuet fortynnet med etylacetat. Den resulterende blanding ble filtrert på nytt. Filtratet ble vasket med vann (X3) og saltvann, tørket over vannfritt natriumsulfat, filtrert og konsentrert. Kolonnekromatografi på silikagel (eluering: 0-20% dietyleter/metylenklorid) ga tert-butyl-4-(1-(pyridin-2-yl)-1H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-karboksylat (10,10 g) som et hvitaktig faststoff etter krystallisering fra en blanding av 1-klorbutan/heksan; massespektrometri: m/e: 332,11 (M+H)<+>[beregnet: 332,17];<1>H NMR (300MHz, CDCI3) 8 8,57 (m, 1H), 7,94 (m, 1H), 7,79 (d, 1H, J= 8Hz), 7,40 (m, 1H), 3,52 (m, 4H), 3,34 (m, 4H), 1,43 (s, 9H).
De følgende tetrazol-mellomprodukter ble fremstilt fra de angitte kommersielle utgangsmaterialene ved å benytte fremgangsmåtene beskrevet ovenfor.
Del D: Til en løsning av tert-butyl-4-(1-(pyridin-2-yl)-1H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-karboksylat (0,166 g, 0,50 mmol) i 1,4-dioksan (10 mL) ble det ved 25°C tilsatt 4,00 N HCI i 1,4-dioksan (10 mL) og blandingen omrørt ved 25°C i 16 timer. Blandingen deretter ble konsentrert under vakuum. Det resulterende faststoff ble løst i DMF (10 mL). Denne løsningen ble suksessivt tilsatt 2-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,137 g, 0,50 mmol), N-metylmorfolin (0,165 mL, 1,50 mmol) og TBTU (0,176 g, 0,55 mmol) og blandingen omrørt ved 25°C i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert og filtratet konsentrert under vakuum. Residuet ble løst i varm metanol og løsningen deretter langsomt avkjølt til romtemperatur. Bunnfallet ble frafiltrert, vasket med metanol og tørket under vakuum for å gi 1-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridinyl-3-yl)-2-(4-(1 -(pyridin-2-yl)-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1 -yl)etan-1,2-dion (0,076 g) som et hvitaktig faststoff; HRMS: 489,1662 (M+H)<+>[beregnet: 489,1660];<1>H NMR (500MHz, DMSO-De) 6 13,08 (brs, 1H), 9,02 (s, 1H), 8,67 (m, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,16 (t, 1H, J= 7,8Hz), 8,13 (s, 1H), 7,85 (d, 1 H, J = 7,8Hz), 7,64 (m, 1H), 3,74 (m 2H), 3,50 (m, 2H), 3,44 (m, 2H), 3,26 (m, 2H).
De følgende forbindelser ble fremstilt ved å benytte fremgangsmåtene beskrevet ovenfor.
Fremstilling av 1 -(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-tirazoM-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 - fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperidin-1 -yl)etan-1,2-dion (Forbindelse E-13)
Del A: Til en løsning av N-Boc-heksahydroisonikotinsyre (4,85 g, 21,2 mmol) i tetrahydrofuran (80 mL) ble det ved 25°C tilsatt karbonyldiimidazol (3,80 g, 23,3 mmol), og reaksjonsblandingen ble omrørt i 1,00 timer ved 25°C. Den resulterende blanding ble tilsatt anilin (2,10 mL, 23,3 mmol) og 1,8-diazabicyklo[5,4,0]undek-7-en (DBU) (3,20 mL, 21,2 mmol) og løsningen omrørt ved 25°C i 90 timer til. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med vann, 1,00 N saltsyre (80 mL) og etylacetat. Fasene ble separert og den organiske fase vasket med vann (X2) og saltvann, tørket over vannfritt natriumsulfat, filtrert og konsentrert. Kolonnekromatografi på silikagel (eluering: 0-20% dietyleter/metylenklorid) førte til tert-butyl-4-(fenylkarbamoyl)-piperidin-1-karboksylat (4,25 g) som et hvitt faststoff;<1>H NMR (300 MHz, CDCIa) 6 7,48 (d,
2H, J = 8,0Hz), 7,29 (t, 2H, J = 8,0Hz), 7,20 (br s, 1H), 7,08 (t, 1H, J = 8,0Hz), 4,16 (m, 2H), 2,75 (m, 2H), 2,35 (m, 1H), 1,89 -1,61 (m, 4H), 1,43 (s, 9H).
Del B: Til en løsning av tert-butyl-4-(fenylkarbamoyl)piperidin-1-karboksylat (4,24 g, 13,9 mmol) og diisopropylazodikarboksylat (5,40 mL, 27,9 mmol) i tetrahydrofuran (100 mL) ble det ved 25°C tilsatt trifenylfosfin (7,31 g, 27,9 mmol). Den resulterende reaksjonsblanding oppviste en svak eksoterm, og løsningen ble deretter omrørt ved romtemperatur i -0,25 timer inntil reaksjonsblandingen hadde vendt tilbake til 25°C. Den resulterende blanding ble tilsatt azidotrimetylsilan (3,65 mL, 27,9 mmol). I løpet av minutter dannet det seg et bunnfall, hvorpå blandingen ble omrørt ved 25°C i 7 dager. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under vakuum for å gi råproduktet. Kolonnekromatografi på silikagel (eluering: 10-50% etylacetat/heksan) førte til tert-butyl-4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperidin-1-karboksylat (2,58 g) som et hvitt faststoff etter krystallisering fra en blanding av 1-klorbutan/heksan;<1>H NMR (300MHz, CDCIa) 8 7,58 (m, 3H), 7,38 (m, 2H), 4,12 (m, 2H), 2,98 (m, 1H), 2,76 (m, 2H), 1,96 - 1,74 (m, 4H), 1,42 (s, 9H).
Del C: Til en løsning tert-butyl-4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperidin-1-karboksylat (0,165 g, 0,50 mmol) i 1,4-dioksan (10 mL) ble det ved 25°C tilsatt 4,00 N HCI i 1,4-dioksan (10 mL) og blandingen omrørt ved 25°C i 16 timer. Blandingen ble deretter konsentrert under vakuum. Det resulterende faststoff ble løst i DMF (10 mL). Denne løsningen ble suksessivt tilsatt 2-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,137 g, 0,50 mmol), N-metylmorfolin (0,165 mL, 1,50 mmol) og TBTU (0,176 g, 0,55 mmol) og blandingen omrørt ved 25°C i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble filtrert og filtratet konsentrert under vakuum. Residuet ble løst i varm metanol, hvorpå løsningen langsomt fikk avkjøles til romtemperatur. Bunnfallet ble frafiltrert, vasket med metanol og tørket under vakuum for å gi 1-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-(4-(1 -fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperidin-1 -yl)etan-1,2-dion (0,142 g) som et hvitaktig faststoff; Smp.: 257-258°C; HRMS: 487,1740 (M+H)<+>
[beregnet: 487,1755];<1>H NMR (500MHz, DMSO-De) 8 13,06 (br s, 1H), 9,02 (s, 1H), 8,32 (d, 1H, J= 1,8Hz), 8,30 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,58 (s, 5H), 4,37 (m, 1H),
3,67 (m, 1H), 3,32 (m, 1H), 3,25 (m, 1H), 3,03 (m, 1H), 2,01 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 1,83- 1,70 (m, 2H).
Eksempelkjemi Seksjon F
Fremstilling av biblioteket av amidopyrazoler
V=°R2RiNN / N-\ // \ NH R1R2NH, TBTU, [ / \, Jl fl NH f<=>\ N-N _^\^-N N— Njy
En blanding av 3-(4-fluor-3-(2-okso-2-(4-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)piperazin-1-yl)acetyl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-7-yl)-1 H-pyrazol-5-karboksylsyre (42 mg,
0,8 mmol), et amin (3,36 mmol), TBTU (0,88 mmol) og DIPEA (38,4 mmol) ble omrørt ved romtemperatur natten over. De rå reaksjonsblandingene ble renset ved revers fase preparativ HPLC.
LC-betingelser benyttet for å analysere sluttforbindelser:
Kolonne: Waters Xbridge 4,6x50 mm 5 nm C18
Metode: 10%B/90%A + modifikator til 95%B/5%A + modifikator A = Vann
B = ACN
Modifikator = 10 mM NH4OAC
Strømningshastighet = 2,5 mL/min
Gradienttid: 4 min
Holdetid: 5 min
Eksempelkjemi Seksjon G
Fremstilling av forbindelse G- I a og G- 2b
Trinn - 1
Natriumhydrid (0,12 g) ble anbrakt i tørr DMF (5 mL) og en løsning av 3-amino-4-fenyl-isoksazol (0,2 g i 2 mL DMF) ble tilsatt langsomt ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 min ved 0°C og en løsning av bis-(2-kloretylamin)hydroklorid (0,22 g) i DMF (1 mL) ble tilsatt meget langsomt. Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Reaksjonen ble avbrutt med kaldt vann (5 mL), og blandingen ble ekstrahert med etylacetat (3x40 mL). Inndampning av løsningsmiddel under redusert trykk ga råprodukt, som ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (2:8) som elueringsmiddel for å gi G-1-ln som et rent fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CDCb): 5 3,02(d, 4H), 3,50 (d, 4H), 7,27 - 7,80 (m, 5H). LCMS: 230,9 (M++ 1).
Trinn - 2
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1 -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,18 g), G-1-ln (0,1 g), TBTU (0,15 g) og Hunigs base (0,15 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL), og flyktige forbindelser ble fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL), vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske laget ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-1a som gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCb): 6 2,58 (s, 3H), 3,26 (bs, 2H), 3,36 (bs, 2H), 3,63 (bs, 2H), 3,89 (bs, 2H), 4,06 (s, 3H), 7,53 (s, 3H), 7,77 (d, 3H, J = 8 Hz), 8,21 (s, 1H), 9,13 (s, 1H), 11,04 (s, 1H).
<13>C NMR (400 MHz, CDCI3): 6 14,04, 40,48, 45,1, 48,91, 49,26, 57,02, 115,77, 121,39, 123,2, 124,14, 126,25, 127,79, 129,21, 129,55, 130,7, 136,52, 141,13, 147,66, 149,71, 158,53, 166,37, 185,23.
LCMS: 514,1 (M<+>+ 1), 512,6 (M<+>-1).
HPLC: 97,6% (NH4OAc/ACN; kolonne: C18 XDB, 250 x 4,6 mm).
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-tirazoM -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,18 g g), G-1-ln (0,1 g), TBTU (0,15 g) og Hunigs base (0,15 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL), og flyktige forbindelser ble fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL), og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-1b som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 3,27 (t, 2H, J = 6Hz), 3,35 (t, 2H, J = 6Hz), 3,71 (t, 2H, J = 6Hz), 3,90 (t, 2H, J = 6Hz), 7,52 (t, 3H, J = 4Hz), 7,78 (d, 2H, J = 8 Hz), 7,94 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,77 (s, 1H), 11,29 (s, 1H).
LCMS: 488,1 (M++ 1).
HPLC: 96,6% (NH4OAc/ACN; kolonne: C18 XDB, 250 x 4,6 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 2a, G- 2b og G- 2c
Fremstilling av mellomprodukt G- 2- ln
Trinn - 1
Til 4,7-dimetoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-hydroklorid (50 g) anbrakt i en 2L trehalset rundkolbe, ble det tilsatt 250 mL N-metyl-2-pyrrolidinon etterfulgt av 8 mL vann, som ble oppvarmet til 90°C i ca. 4 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur, fortynnet med vann (1L) og hele blandingen oppbevart i et kaldt rom i ca. 1 time. Det resulterende faststoff ble oppsamlet ved filtrering, vasket med kaldt vann og tørket i vakuumovn ved 50°C i 4 timer for å gi 7-hydroksyl-4-metoksy-6-azaindol som hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 3,70 (s, 3H), 6,32 - 6,33 (dd, 1H), 6,38 (s, 1H), 7,25-7,26 (d, 1H, J = 4 Hz), 10,5 (bs, 1H), 12,1 (bs, 1H).
Trinn - 2
Til ovennevnte forbindelse 7-hydroksyl-4-metoksy-6-azaindol (33 g) i en 1-halset rundkolbe, ble det tilsatt fosforoksyklorid (400 mL) og blandingen oppvarmet til 100°C i 18 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og konsentrert for å fjerne overskudd av fosforoksyklorid. Residuet ble langsomt helt over på is og nøytralisert med fast natriumbikarbonat. Blandingen ble ekstrahert med etylacetat (3x100 mL). De samlede organiske lag ble tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert for å gi 7-klor-1-4-metoksy-6-azaindol som hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 4,03 (s, 3H), 6,73 - 6,74 (dd, 1H), 7,36 - 7,37 (t,
1H), 7,63 (s, 1H) 8,9 (bs, 1H).
LCMS: 182,7 (M++ 1).
Trinn - 3
En løsning av 7-klor-4-metoksy-6-azaindol (3 g) og aluminiumklorid (2,3 g) i 100 mL diklormetan ble tilsatt til en blanding av metylkloroksalat (6 g) og aluminiumklorid (3,7 g) i 50 mL diklormetan. Hele blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 18 timer under nitrogenatmosfære. Reaksjonen ble avbrutt med 100 mL mettet vandig ammoniumacetatløsning, og blandingen ekstrahert med etylacetat (2x100 mL). De samlede organiske lag ble vasket med saltløsning, tørket over vannfritt natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble behandlet med metanol og filtrertfor å gi ren ester som hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 3,85 - 3,88 (s, 3H), 3,94 (s, 3H), 7,83 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 13,3 (bs, 1H).
Trinn - 4
Ovennevnte ester (1 g) og K2CO3(0,95 g) ble kombinert i 6 mL metanol/vann (1:1) blanding og omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble ekstrahert med etylacetat for å fjerne upolare forurensninger. Det vandige lag ble nøytralisert med 1,5N HCI til pH 5. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under redusert trykk for å gi ønsket syre, 2-(7-klor-4-metoksy-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre som ble benytett i det neste trinn uten ytterligere rensing.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 3,91 (s, 3H), 7,79 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 13,30 (bs, 1H).
LCMS: 254,9 (M<+>+ 1).
Trinn - 5
Natriumhydrid (2,1 g) i tørr DMF (10 mL) ble dråpevis tilsatt 5-klor-1H-tetrazol (5 g) løst i tørr DMF (20 mL) ved 0°C under nitrogen. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 0°C i ca. 30 min og dråpevis tilsatt piperazin (2,8 g) i DMF (10 mL) ved 0°C i ca. 10 min. Hele blandingen ble oppvarmet til 80°C i 18 timer og deretter avkjølt til romtemperatur og langsomt helt over på is. Det
resulterende faststoff ble frafiltrert, vasket med vann og tørket for å gi 1-(1 -fenyl-
1 H-tetrazol-5-yl)piperazin som et fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 2,91 - 2,93 (m, 4H), 3,22 - 3,33 (m, 4H), 7,49 - 7,63 (m, 5H).
Trinn - 6
Til 2-(7-klor-4-metoksy-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre
(0,15 g) i tørr DMF (3 mL) ble det tilsatt 1-(1-fenyl-1 H-tetrazol-5-yl)-piperazin (0,1 g), TBTU (0,219 g) og Hunigs base (0,2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og de flyktige forbindelsene fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCO3(2x20 mL) og saltvann (20 mL). Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-2-ln som gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 3,31 - 3,34 (s, 3H), 3,39 (bs, 2H), 3,47 (bs, 2H), 3,87-3,91 (s, 2H), 4,09 (s, 3H), 7,57 0-7,7 (8, 1H), 8,31 -8,34 (d, 1H), 13,3 (bs, 1H).
LCMS: 465,3 (M++ 1).
Trinn - 1
Natriumhydrid (0,20 g) i tørr THF (15 mL) ble tilsatt N-metyl-piperazin
(0,93 mL) under nitrogen ved 0°C. 2,3-dibrompyrazin (2 g) i 15 mL tørr THF ble tilsatt til blandingen ovenfor ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble kokt under tilbakeløp natten over og behandlet med vann (5 mL). Det organiske lag ble fjernet under vakuum. Den resulterende rå masse ble renset ved kolonnekromatografi for å gi 2-brom-5-(4-metylpiperazin-1-yl)pyrazin som et rent produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 2,39 (s, 3H), 2,57 (t, 4H, J = 6 Hz), 3,62 (t, 4H, J = 6 Hz), 7,88 (s, 1H), 8,14 (s,1H).
Trinn - 2
Forbindelsen 2-brom-5-(4-metylpiperazin-1-yl)pyrazin (0,25 g) løst i tørr DMF (5 mL) ble tilsatt heksa-n-butyl-di-tinn (0,615 mL). Reaksjonsblandingen ble avgasset under argonatmosfære 3-5 ganger. Tetrakis-(trifenylfosfin)palladium (0,128 g) ble tilsatt til blandingen ovenfor og ytterligere avgasset under argon atmosfære 3-5 ganger. Reaksjonsblandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling natten over, deretter avkjølt til romtemperatur, fortynnet med etylacetat og filtrert gjennom et Celite-lag. Filtratet ble konsentrert og renset ved kolonnekromatografi for å gi forbindelsen 2-(4-metylpiperazin-1-yl)-5-(tributylstannyl)pyrazin som en lysegul væske.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 1,36 (s, 10H), 1,58 (s, 6H), 1,63 (s, 6H), 1,69 (s, 6H), 2,39 (s, 3H), 3,95 (s, 4H), 4,07 (s, 4H), 8,18 (s, 1H), 9,30 (s, 1H).
Trinn - 3
Til en omrørt løsning av mellomprodukt 2-(4-metylpiperazin-1-yl)-5-(tributylstannyl)pyrazin (0,25 g) og G-ln-2 (0,38 g) i tørrxylen (15 mL) ble det under nitrogenatmosfære tilsatt kobber(l)jodid (10 mg). Reaksjonsblandingen ble avgasset med nitrogen og blandingen tilsatt Pd(Ph)4(0,065 g). Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpskokt i 24 timer ved 130°C. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og konsentrert under vakuum for å fjerne løsningsmidlet. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCl3(1:9) som elueringsmiddel for å gi G-2a som hvitt fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 2,26 (s, 3H), 3,16 (s, 2H) 3,32 og 3,42 (m, 7H), 3,67 (s, 7H), 3,97 (s, 3H), 7,57 - 7,64 (m, 3H), 7,69 (d, 2H, J = 8 Hz), 8,10 (s, 1H), 8,18 (d, 1H, J = 4 Hz), 8,33 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 12,45 (s, 1H).
LCMS: 609,2 (M++ 1).
HPLC: 95,3% (NH4OAc + 0,1%TFA/ACN; kolonne: C18 XDB, 250 x 4,6 mm).
Trinn - 1
Natriumhydrid (0,20 g) i THF (15 mL) ble tilsatt morfolin (0,735 mL) under nitrogen ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i ca. 15 minutter og deretter tilsatt 2,3-dibrompyrazin (2 g) løst i tørr THF (15 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved tilbakeløpsbetingelser natten over. Reaksjonsblandingen ble behandlet med vann (5 mL) og flyktige forbindelser fjernet under vakuum. Den resulterende rå masse ble renset ved kolonnekromatografi for å gi rent 4-(5-brompyrazin-2-yl)morfolin.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 3,53 (t, 4H, J = 6 Hz), 3,84 (t, 4H, J = 6 Hz), 7,88 (s, 1H), 8,16 (s, 1H).
Trinn - 2
Forbindelse 4-(5-brompyrazin-2-yl)morfolin (0,25 g) i tørr THF (5 mL) avkjølt til -78°C, ble tilsatt n-butyllitium (0,4 mL, 1M løsning i heksan) og omrørt i 2 timer ved -78°C. Reaksjonsblandingen ovenfor ble dråpevis tilsatt tri-n-butyl-tinnklorid (1,1 mmol) ved -78°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78°C i én time, behandlet med mettet ammoniumklorid-løsning og ekstrahert med etylacetat (3x15 mL). Det organiske lag ble vasket med vann (20 mL) etterfulgt av saltvann, tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert ved anvendelse av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi for å gi 4-(5-(tributylstannyl)pyrazin-2-yl)morfolin som lysegul væske.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): de 1,36 (s, 10H), 1,58 (s, 6H), 1,63 (s, 6H), 1,67 (s, 6H), 3,57 (s, 4H), 3,85(s, 4H), 8,13 (s, 1H), 8,36 (s, 1H).
Trinn - 3
Til en omrørt løsning av mellomprodukt 4-(5-(tributylstannyl)pyrazin-2-yl)morfolin (0,25 g) og G-2-ln (0,38 g) i tørrxylen under nitrogenatmosfære, ble det tilsatt kobber(l)jodid (10 mg). Reaksjonsblandingen ble avgasset ved bruk av nitrogen, og tilsatt Pd(PPhi3)4 (0,065 g). Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpskokt i 24 timer og konsentrert under vakuum for å fjerne løsningsmidlet. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-2b som et hvitt fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 3,16 (s, 2H), 3,42 (s, 3H), 3,63, 3,68, 3,75 (3s, 11H), 4,04 (s, 3H), 7,57-7,7 (m, 6H), 8,1, 8,19, 8,32 (3s, 3H), 9,09 (s, 1H). LCMS: 596,1 (M++ 1).
HPLC: 92% (0,1%TFA/ACN; kolonne: C18 BDS, 4,6 x 250 mm).
Fremstilling av G- 2c
Trinn - 1
Natriumhydrid (0,20 g) i THF (15 mL) ble tilsatt imidazol (0,57 g) og avkjølt til 0°C. Ovennevnte blanding ble tilsatt 2,3-dibrompyrazin (2 g) og hele
reaksjonsblandingen kokt under tilbakeløp natten over. Reaksjonsblandingen ble behandlet med vann 5 mL, og flyktige forbindelser ble fjernet under vakuum. Den resulterende rå masse ble renset ved kolonnekromatografi for å gi 2-brom-5-(1H-imidazol-1-yl)pyrazin som et rent produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 7,30 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,60 (s, 1H).
Trinn - 2
Forbindelse 2-brom-5-(1H-imidazol-1-yl)pyrazin (0,25 g) i tørr xylen ble tilsatt heksa-n-butyl-di-tinn (0,615 mL). Reaksjonsblandingen ble avgasset under argonatmosfære 3-5 ganger. Tetrakis(trifenylfosfin)palladium (0,128 g) ble tilsatt og ytterligere avgasset under argonatmosfære 3-5 ganger. Reaksjonsblandingen ble omrørt under tilbakeløpsbetingelser natten over. Reaksjonsblandingen ble avkjølt romtemperatur, fortynnet med etylacetat og filtrert gjennom et Celite-lag. Filtratet ble konsentrert og renset ved kolonnekromatografi for å gi 2-(1H-imidazol-1-yl)-5-(tributylstannyl)pyrazin som en lysegul væske.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 1,36 (s,10H ), 1,58 (s, 6H), 1,63 (s, 6H), 1,67 (s, 6H), 3,57 (d, 1H), 4,45(d, 1H), 4,65 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,36 (s, 1H).
Trinn - 3
Til en omrørt løsning av mellomproduktet 2-(1 H-imidazol-1 -yl)-5-(tributyl-stannyl)pyrazin (0,25 g) og G-2-ln (0,38 g) i tørrxylen under nitrogenatmosfære, ble det tilsatt kobber(l)jodid (10 mg). Reaksjonsblandingen ble avgasset ved bruk av nitrogen og tilsatt Pd(PPh3)4(0,065 g). Reaksjonsblandingen ble tilbakeløps-kokt i 24 timer og konsentrert under vakuum for å fjerne løsningsmidlet. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-2c som et hvitt fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 3,17 (t, 2H, J = 8 Hz), 3,44 (t, 2H, J = 4 Hz), 3,69 (t, 2H, J = 6 Hz), 4,04 (s, 3H), 7,24 (bs, 1H), 7,56 - 7,71 (m, 5H), 8,12 (d, 1H, J = 8 Hz), 8,26 (s, 2H), 8,73 (bs, 1H), 9,18 (s, 1H), 9,48 (s, 1H), 12,65 (s, 1H).
LCMS: 575,2 (M<+->1).
HPLC: 90,6% (0,1% TFA/ACN; kolonne: Hypersil BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 3a og G- 3b
Trinn - 1
1-(3-jodpyridin-2-yl)piperazin (0,5 g) i tørr toluen (10 mL) ble tilsatt fenyl-boronsyre (0,25 g) under nitrogenatmosfære. Reaksjonsblandingen ble tilsatt Pd(PPh3)4(10 mg) og en løsning av natriumkarbonat (0,3 g) i vann (2 mL). Reaksjonsblandingen ble gjennomboblet med nitrogengass i ca. 10 min og tilbakeløpskokt over natten. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til rt og fortynnet med
EtOAC, vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av EtOAc/heksan (2:8) som elueringsmiddel for å gi G-3-ln som en brun viskøs væske.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 3,06 (d, 4H), 3,14 (d, 4H), 6,94 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,38 - 7,68 (m, 5H), 8,25 (s, 1H).
LCMS: 239,9 (M++ 1).
Trinn - 2
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,18 g), G-3-ln (0,1 g), TBTU (0,15 g) og Hunigs base (0,15 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL), vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2SCMog konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-3a som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 2,56 (s, 3H), 3,15 (s, 2H), 3,28 (s, 2H), 3,44 (s, 2H), 3,71 (s, 2H), 4,04 (s, 3H), 7,0 (t, 1H, J = 6 Hz), 7,34 (t, 1H, J = 6 Hz), 7,44 (t, 2H, J = 6 Hz), 7,53 og 7,57 (2 x d, 3H, J = 8 Hz og 4 Hz), 7,72 (s, 1H), 8,17 (d, 1H, J = 2 Hz), 8,25 (d, 1H, J = 2 Hz), 9,09 (s, 1H), 11,03 (s, 1H).
<13>C NMR (400 MHz, CDCI3): 8 14,16, 41,12, 45,72, 48,49, 49,09, 56,93, 115,86, 117,62, 121,29, 123,11, 124,14, 127,51, 127,74, 127,89, 128,92, 136,44, 141,32, 149,66, 162,2, 166,47, 185,64.
LCMS: 523,1 (M<+>+ 1).
HPLC: 97,7% (NH4OAc/ACN; kolonne: C18 XDB, 250 x 4,6 mm).
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,18 g), G-ln-3 (0,1 g), TBTU (0,15 g) og Hunigs base (0,15 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL), vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-3b som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCb): 6 3,15 (t, 2H, J = 4 Hz), 3,29 (t, 2H, J = 6 Hz), 3,49 (d, 2H, J = 8 Hz), 3,73(t, 2H, J = 4 Hz), 7,01 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,36 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,45 (t, 2H, J = 8 Hz), 7,54 og 7,57 (dd, 3H, J = 8 Hz og 4 Hz), 7,93 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,25 (d, 1H, J = 4 Hz), 8,33 (d, 1H, J = 4 Hz), 8,76 (s, 1H), 11,22 (s, 1H). LCMS: 497,1 (M++ 1).
HPLC: 95,7% (NH4OAc/ACN; kolonne: C18 XDB, 250 x 4,6 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 4a, G- 4b, G- 4c og G- 4d
Trinn - 1
Til en omrørt løsning av cyanomellomprodukt G-4-ln-1 (300 mg) i tørr diklormetan (10 mL) under nitrogen, ble det tilsatt N-diklormetylen-N,N-dimetyl-ammoniumklorid (0,39 g) ved romtemperatur under nitrogen. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 15 minutter. Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpsbehandlet ved 50°C i én time. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og dråpevis tilsatt fenyl-hydrazin (0,168 g) og trietylamin (0,6 mL) i diklormetan (5 mL) i løpet av én time. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer og ble deretter tilbakeløpsbehandlet ved 55°C i én time. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til -10°C og tilsatt vann (10 mL) og konsentrert KOH (2 g i 5 mL) og omrørt i 15 minutter ved -10°C. Reaksjonsblandingen ble ekstrahert med diklormetan (5 x 20 mL). De samlede organiske lag ble tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert under vakuum. Den resulterende rå blanding av G-4-ln-2 og G-4-ln-3 ble renset ved hurtigkromatografi ved bruk av heksan/etylacetat (2:8) som elueringsmiddel for å gi rent G-4-ln-2 og G-4-ln-3 som lysegule væsker.
<1>H NMR (400 MHz, CDaOD): 8 1,45 (s, 9H), 2,95 (s, 6H), 3,09 (t, 4H, J = 4 Hz), 3,44 (bs, 4H), 7,38 (t, 1H, J = 8 Hz), 7,51 (t, 2H, J = 8 Hz), 7,62 (d, 2H, J = 8 Hz). LCMS: 373 (M+ + 1).
HPLC: 97,6% (0,1% HCOOH/ACN; kolonne: Genesis C18, 4,6 x 50 mm).
Trinn - 2
BOC-beskyttet amin G-4-ln-2 (500 mg) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. De flyktige forbindelsene ble fjernet fullstendig under redusert trykk og det resulterende råprodukt fortynnet med diklormetan (10 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHC03(2x10 mL) og saltvann (20 mL) og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin ln-4-ln-4, som ble benyttet i den neste reaksjon uten rensing.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,68 (s, 6H), 2,73 (m, 4H), 3,17 (t, 4H, J = 4 Hz), 7,31 (m, 1H), 7,48 (m, 4H).
<13>C NMR (DMSO-d6): 8 40,21 (2C), 41,29 (2C), 45,37, 47,06, 123,57 (2C), 127,09, 129,57 (2C), 139,3, 158,16, 162,97.
LCMS: 273 (M+ + 1).
HPLC: 97,5% (0,1% TFA/ACN; kolonne: C18 BDS, 4,6 x 50 mm).
Trinn - 3
Til en omrørt løsning av2-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt amin G-4-ln-4 (0,099 g), TBTU (0,178 g) og DIPEA (0,15 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOsog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert i rotasjonsfordamper. Det resulterende halvfaste stoff ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (0,5:9,5) som elueringsmiddel for å gi G-4a som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,85 (s, 6H), 3,06 (bs, 2H), 3,17 (bs, 2H), 3,49 (bs, 2H), 3,71 (bs, 2H), 7,30 (t, 1H, J = 8 Hz), 7,47 (t, 2H, J = 8 Hz), 7,65 (d, 2H, J = 8 Hz), 8,10 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 9,01 (s, 1H), 13,05 (s, 1H).
LCMS: 530,1 (M++ 1).
HPLC: 95,9% (0,1% TFA/ACN; kolonne: Hypersil BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Trinn - 4
Til en omrørt løsning av2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt amin G-4-ln-4 (0,090 g), TBTU (0,117 g) og DIPEA (0,15 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (0,5:9,5) som elueringsmiddel for å gi G-4b som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,5 (s, 3H), 2,87 (s, 6H), 3,07 (bs, 2H), 3,16 (bs, 2H), 3,43 (bs, 2H), 3,69 (bs, 2H), 3,99 (s, 3H), 7,30 (t, 1H, J = 8 Hz), 7,48 (t, 2H, J = 8 Hz), 7,66 (d, 2H, J = 8 Hz), 7,89 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 12,39 (s, 1H).
LCMS: 556,1 (M<+>+ 1), 554,4 (M<+>-1).
HPLC: 98,5% (0,1% TFA/ACN; kolonne: Hypersil BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Trinn - 5
Til BOC-beskyttet amin G-4-ln-3 (500 mg) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig under redusert trykk og residuet fortynnet med diklormetan (10 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHC03(2 x 10 mL) og saltvann (20 mL). Det organiske lag ble tørket over Na2S04og konsentrert til tørrhet for å gi amin G-4-ln-5, som ble benyttet i det neste trinn uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,68 (s, 6H), 2,75 (bs, 4H), 3,18 (bs, 4H), 7,31 (m, 1H), 7,49 (m, 4H).
<13>C NMR (DMSO-de): 8 40,21 (2C), 41,29 (2C), 45,37 , 47,06, 123,57 (2C), 127,09, 129,57 (2C), 139,3, 158,16, 162,97.
LCMS: 272,9 (M++ 1).
HPLC: 97,5% (0,1% TFA/ACN; kolonne: C18 BDS, 4,6 x 50 mm).
Trinn - 6
Til en omrørt løsning av2-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt amin G-4-ln-5 (0,099 g), TBTU (0,127 g) og DIPEA (0,15 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Oljen ble fortynnet med etylacetat (50 mL), vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (0,5:9,5) som elueringsmiddel for å gi G-4c som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,69 (s, 6H), 3,28 (s, 3H), 3,41 (d, 2H, J = 4Hz), 3,47 (d, 2H, J = 4Hz), 3,73 (t, 2H, J = 6 Hz), 7,32 (m, 1H), 7,44 - 7,50 (m, 4H), 8,12 (s, 1H), 8,32 (d, 1H, J = 4 Hz), 8,36 (s, 1H), 9,01 (d, 1H, J = 4 Hz).
LCMS: 530,2 (M++ 1).
HPLC: 96,3% (0,1% TFA/ACN; Hypersil BDS C18, 4,6 x 50).
Trinn - 7
Til en omrørt løsning av2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt amin G-4-ln-5 (0,090 g), TBTU (0,117 g) og DIPEA (0,15 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og løsningsmidler fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOsog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCl3(0,5:9,5) som elueringsmiddel for å gi G-4d som et fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 2,49 (s, 3H), 2,70 (s, 6H), 3,28 (bs, 2H), 3,42 (bs, 4H), 3,70 (bs, 2H), 3,99 (s, 3H), 7,32 (m, 1H), 7,49 (m, 4H), 7,89 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 12,39 (s, 1H).
LCMS: 556,1 (M<+>+ 1), 554,4 (M<+>-1).
HPLC: 99,5% (0,1% TFA/ACN; kolonne: Hypersil BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av forbindelse 5a og 5b
Fremstilling av mellomprodukt G- 5- ln
Trinn - 1
En 1L trehalset rundkolbe ble fylt med Boc-piperazin (20 g), tørt kaliumkarbonat (44,5 g) og tørr DMF (150 mL) under nitrogenatmosfære. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til 0°C og meget langsomt tilsatt bromacetofenon (23,5 g). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsutviklingen ble overvåket ved TLC. Etter at utgangsmaterialet var forbrukt ble reaksjonsblandingen tilsatt iskaldt vann (200 mL). Det utfelte hvite faststoff ble frafiltrert, vasket med vann (4x50 mL) og tørket for å gi tert-butyl-4-(2-okso-2-fenyletyl)piperazin-1-karboksylat som et rent produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 1,48 (s, 9H), 2,59 (s, 4H), 3,52 - 3,54 (s, 4H), 3,87 (s, 2H), 7,27-7,29(m, 1H).
Trinn - 2
Forbindelsen tert-butyl-4-(2-okso-2-fenyletyl)piperazin-1-karboksylat (18 g) anbrakt i en rundkolbe, ble meget langsomt tilsatt Brederecks reagens (11,33 g) under nitrogenatmosfære. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 55°C over natten. Reaksjonsutviklingen ble overvåket ved TLC. Etter at utgangsmaterialet var forbrukt ble dietyleter tilsatt til reaksjonsblandingen. Det resulterende faststoff ble frafiltrert og tørket under redusert trykk for å gi tert-butyl-4-(1-(dimetylamino)-3-okso-3-fenylprop-1-en-2-yl)piperazin-1-karboksylat som et rent produkt.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 1,36-1,41 (s, 9H), 2,87(s, 4H), 3,01 (s, 6H), 3,33 (s, 4H), 6,53(s, 1H), 7,32 - 7,42(m, 5H).
Trinn - 3
Forbindelsen tert-butyl-4-(1 -(dimetylamino)-3-okso-3-fenylprop-1 -en-2-yl)piperazin-1 -karboksylat (4 g) løst i etanol (40 mL) ble tilsatt hydrazinhydrat (1,17g) og reaksjonsblandingen kokt under tilbakeløpskjøling i 6 timer under kraftig omrøring. Reaksjonsutviklingen ble overvåket ved TLC. Etter at utgangsmaterialet var forbrukt ble reaksjonsblandingen avkjølt til romtemperatur og konsentrert under redusert trykk for å gi tert-butyl-4-(3-fenyl-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 1,48 (s, 9H), 2,81 (s, 4H), 3,48 - 3,55 (m, 4H), 7,27 -7,43(m, 5H), 7,94 (s, 1H), 8,3 (bs, 1H).
Trinn - 4
Til det BOC-beskyttede amin tert-butyl-4-(3-fenyl-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat (1 g) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuum fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHC03(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmidlet ga det ønskede amin G-5-ln, som ble benyttet i den neste reaksjon uten ytterligere rensing.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 2,81 (s, 4H), 3,48 - 3,55 (m, 4H), 7,27 - 7,43(m, 5H),7,94 (s, 1H), 8,3 (bs, 1H).
LCMS: 228,29 (M<+>+ 1).
HPLC: 99,64% (TFA/ACN; kolonne: C18 BDS, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av G- 5a
Til en omrørt løsning av2-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (90 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt G-5-ln (75 mg), TBTU (0,117 g) og DIPEA (0,1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL), og de flyktige forbindelsene ble fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2SCMog konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (2:8) som elueringsmiddel for å gi G-5a som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 2,78 (d, 2H), 2,87 (d, 2H), 3,53 (d, 2H), 3,77 (d, 2H), 7,27-7,63 (m, 5H), 8,0 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 8,34 (d, 2H), 9,01 (s, 1H), 12,62 (bs, 1H), 13,06 (bs, 1H).
<13>C NMR (DMSO-de): 8 54,14, 51,83, 52,13, 112,53, 122,59, 121,18, 121,39, 122,37, 125,31, 125,58, 126,36, 127,84, 128,24, 130,96, 133,24, 133,58, 140,85, 150,42, 153,0, 164,92, 183,79.
LCMS: 486,1 (M++ 1).
HPLC: 98,28% (H2O/ACN; kolonne: C18XDB, 4,6 x 250 mm).
Fremstilling av G- 5b
Til en omrørt løsning av2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt G-5-1 n (75 mg), TBTU (0,117 g) og DIPEA (0,1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og de flyktige forbindelsene fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (2:8) som elueringsmiddel for å gi G-5b som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,48 (s, 3H), 2,78 (m, 2H), 2,87 (m, 2H), 3,35 (m, 2H), 3,49 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 7,27 (m, 5H), 7,40 - 8,23 (m, 3H), 9,24 (s, 1H), 12,39 (bs, 1H), 12,63 (bs, 1H).
<13>C NMR (DMSO-de): 8 14,44, 46,02, 52,82, 52,95, 57,34, 114,71, 121,57, 123,27, 124,24, 126,20, 127,35, 128,85, 130,11, 139,18, 142,67, 149,77, 161,85, 166,67, 186,09.
LCMS: 512,0 (M++ 1).
HPLC: 97,27% (H2O/ACN; kolonne: C18XDB, 4,6 x 250 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 6a og G- 6b
Fremstilling av mellomprodukt G- ln- 6
Trinn - 1
Natriumhydrid (0,1 g) i en tørr 100 mL trehalset rundkolbe avkjølt til 0°C, ble tilsatt tørr dimetylformamid (2 mL). Ovennevnte blanding ble langsomt tilsatt forbindelse tert-butyl-4-(3-fenyl-1H-pyrazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat (0,5 g) i DMF (2 mL) ved 0°C. Etter 30 min ble 2-klor-N,N-dimetyletylamin (200 mg) i DMF (1 mL) tilsatt til ovennevnte blanding. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over, behandlet med is og ekstrahert med etylacetat. Det organiske lag ble vasket med vann (10 mL) og saltvann og tørket over natriumsulfat. Det organiske lag ble filtrert og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved bruk av 6% etylacetat i heksan som elueringsmiddel for å gi tert-butyl-4-(1-(2-(dimetylamino)etyl)-3-fenyl-1H-pyrazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat som et gråhvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 1,49 (s, 9H), 2,33 (s, 6H), 2,83-2,85 (t, 4H), 2,87 (t, 2H), 3,53 (t, 4H), 4,25 (t, 2H), 7,27 - 7,29(m, 1H), 8,01 (s, 1H).
Trinn - 2
Det BOC-beskyttede amin tert-butyl-4-(1-(2-(dimetylamino)etyl)-3-fenyl-1H-pyrazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat (300 mg) løst i tørr diklormetan (5 mL) ble tilsatt en eterløsning av HCI (10 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt i en time. Reaksjonsblandingen ble nøytralisert med mettet natriumbikarbonat-løsning og ekstrahert med diklormetan (3x10 mL). De samlede organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt G-6-ln ble benyttet i det neste trinn uten ytterligere rensing.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 6 2,33 (s, 6H), 2,83 - 2,85 (t, 4H), 2,87 (t, 2H), 3,53 (t, 4H), 4,25 (t, 2H), 7,27 - 7,29(m, 1H), 8,01 (s, 1H).
Fremstilling av G- 6a
Til 2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1 -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,15 g) i tørr DMF (3 mL) ble det tilsatt amin G-6-ln (0,1 g), TBTU (0,219 g, 0,67 mmol) og Hunigs base (0,2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCte (2x20 mL) og saltvann (20 mL). Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-6a som et fast produkt.
<1>H NMR (CDCb): 8 2,58 (s, 8H), 2,8 - 3,0 (m, 5H), 3,35 (bs, 2H), 3,61 (s, 2H), 3,86 (s, 2H), 4,1 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 7,32 (m, 1H), 7,41 (m, 3H), 7,97 (d, 2H), 8,24 (s, 1H), 9,12 (s, 1H).
LCMS: 583,3 (M++ 1).
HPLC: 94,1% (vann/ACN; kolonne: C 18, XDB, 4,6 x 250 mm).
Til 2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-tirazoM-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,15 g) i tørr DMF (3 mL) ble det tilsatt amin G-6-ln (0,1 g), TBTU (0,219 g) og Hunigs base (0,2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCO3(2x20 mL) og saltvann (20 mL). Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-6b som et fast produkt.
<1>H NMR (DMSO-de): 8 2,31 (s, 6H), 2,80 (m, 6H), 3,53 (s, 2H), 3,76 (s, 2H), 4,18 (t, 2H, J = 6 Hz), 7,24 (t, 1H, J = 6 Hz), 7,38 (t, 2H, 8 Hz), 7,67 (s, 1H), 7,96 (d, 2H, J = 8 Hz), 8,09 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 9,02 (s, 1H).
LCMS: 557,1 (M<+>+ 1).
HPLC: 99% (0,1% HCOOH/ACN; kolonne: Genesis C18, 50 * 4,6 mm, 3
Fremstilling av forbindelse G- 7a og G- 7b
Fremstilling av mellomprodukt G- 7- ln
Trinn - 1
Natriumhydrid (0,1 g) i en tørr 100 mL trehalset rundkolbe avkjølt til 0°C, ble tilsatt tørr DMF (2 mL) under nitrogen. Ovennevnte blanding ble langsomt tilsatt forbindelsen tert-butyl-4-(3-fenyl-1H-pyrazol-4-yl)piperazin-1 -karboksylat (0,5 g) i DMF (2 mL) omrørt ved 0°C i 30 minutter. 2-klormetylpyridin (300 mg) i DMF
(1 mL) ble langsomt tilsatt ovennevnte blanding ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble
omrørt ved romtemperatur natten over og behandlet med is. Produktet ble ekstrahert med etylacetat (3x10 mL). De samlede organiske lag ble vasket med vann, saltvann, tørket over natriumsulfat og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av 6% etylacetat i heksan for å gi tert-butyl-4-(3-fenyl-1-(pyridin-2-ylmetyl)-1H-pyrazol-4-yl)piperazin-1 -karboksylat som et gråhvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 1,48 (s, 9H), 2,80 (s, 4H), 3,53 (s, 4H), 5,57 (s, 2H), 7,27 - 7,33 (m, 5H), 7,85 - 8,02 (m, 4H), 8,61 (s, 1H).
Trinn - 2
Til tert-butyl-4-(3-fenyl-1 -(pyridin-2-ylmetyl)-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin-1 - karboksylat (300 mg) løst i tørr diklormetan (5 mL) ble det tilsatt en eterløsning av HCI (10 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt i én time. Reaksjonsblandingen ble nøytralisert med mettet natriumbikarbonat-løsning og ekstrahert med diklormetan (3x10 mL). De samlede organiske lag ble tørket over natriumsulfat, filtrert og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt G-7-ln ble benyttet i det neste trinn uten ytterligere rensing.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 2,80 (s, 4H), 3,53 (s, 4H), 5,57 (s, 2H), 7,27 - 7,33 (m, 5H), 7,85 - 8,02 (m, 4H), 8,61 (s, 1H).
Fremstilling av G- 7a
Til 2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1 -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,15 g) i tørr DMF (3 mL) ble det tilsatt amin G-7-ln (0,1 g), TBTU (0,219 g) og Hunigs base (0,2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og de flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCO3(2x20 mL) og saltvann
(20 mL). Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-7a som et fast produkt.
<1>H NMR (DMSO-de): 8 2,77 (s, 2H), 2,87 (s, 2H), 3,49 (s, 3H), 3,74 (s, 2H), 4,01 (s, 3H), 5,38 (s, 2H), 7,08 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,35 (m, 4H), 7,79 (m, 2H), 7,89 (s, 1H), 7,96 (d, 2H, J = 4 Hz), 8,23 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 12,38 (bs, 1H). LCMS: 603,2 (M++ 1).
HPLC: 96% (0,1% TFA/ACN; kolonne: Hypersil BDS C18, 4,6 x50mm, 5^).
Fremstilling av G- 7b
Til 2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1 -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,15 g) i tørr DMF (3 mL) ble det tilsatt amin G-7-ln (0,1 g), TBTU (0,219 g) og Hunigs base (0,2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCO3(2x20 mL) og saltvann (20 mL). Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-7b som et fast produkt.
<1>H NMR (DMSO-de): 6 2,77 (s, 2H), 2,87 (s, 2H), 3,54 (s, 2H), 3,77 (s, 2H), 5,37 (s, 2H), 7,08 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,32 (m, 4H), 7,76 (s, 2H), 7,96 (d, 2H, J = 8Hz), 8,12 (s, 1H), 8,34 (d, 2H, J = 12 Hz), 8,53 (s, 1H), 9,02 (s, 1H).
HPLC: 98% (0,1% TFA/ACN; kolonne: Hypersil BDS C18, 5 n, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 8a og G- 8b
Fremstilling av mellomprodukt G- 8- ln
Trinn - 1
Til en omrørt løsning av N-Boc-piperazin (1 g) i tørr THF (20 mL) ble det dråpevis tilsatt trietylamin (3 mL) etterfulgt av kloracetonitril (5,02 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Løsningsmidlet ble fjernet under vakuum og residuet fortynnet med etylacetat (20 mL). Det organiske lag ble konsentrert til tørrhet under redusert trykk for å gi tert-butyl-4-(cyanometyl)-piperazin-1-karboksylat som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 1,47 (s, 9H), 2,55 (t, 4H, J = 6 Hz), 3,49 (t, 4H, J = 4 Hz), 3,55 (s, 2H).
GC MS: 225
Trinn - 2
Natriumhydrid (0,1 g) i tørr DMF (5 mL) under nitrogen, ble tilsatt forbindelsen tert-butyl-4-(cyanometyl)piperazin-1 -karboksylat (0,5 g) og omrørt ved romtemperatur i en halv time. Benzaldehyd (280 mg) ble tilsatt til ovennevnte reaksjonsblanding og omrørt i 3 timer ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble behandlet med isvann (50 mL) og ekstrahert med etylacetat (3x10 mL). De samlede organiske lag ble vasket med saltvann (10 mL), tørket over natriumsulfat og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuum ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOhLChhCb (0,5:9,5) som elueringsmiddel for å gi tert-butyl-4-(1-cyano-2-fenylvinyl)piperazin-1-karboksylat som et rent produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 1,48 (s, 9H), 3,09 (t, 4H, J = 6 Hz), 3,56 (t, 4H, J = 4 Hz), 6,22 (s, 1H), 7,30 (d, 1H, J = 12 Hz), 7,38 (d, 2H, J = 8 Hz), 7,55 (d, 2H, J = 8 Hz).
Trinn - 3
Til en omrørt løsning av tert-butyl-4-(1-cyano-2-fenylvinyl)piperazin-1-karboksylat (100 mg) i tørr DMSO (2 mL) ble det tilsatt natriumazid (0,2 g) og blandingen oppvarmet til 110°C natten over. Reaksjonsblandingen ble forsiktig behandlet med vann (10 mL) og reaksjonsblandingen ekstrahert med diklormetan (3x10 mL). De samlede organiske lag ble vasket med saltvann (10 mL), tørket over natriumsulfat og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuum ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH:CH2Cl2(1:9) som elueringsmiddel for å gi tert-butyl-4-(5-fenyl-1H-1,2,3-triazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 1,4 (s, 9H), 2,92 (d, 4H, J = 4 Hz), 3,43 (m, 4H), 7,33 (m, 1H, J = 12 Hz og 16 Hz), 7,45 (t, 2H, 8 Hz), 7,85 (d, 2H, J = 8 Hz), 14,32 (s, 1H).
Trinn - 4
Til tert-butyl-4-(5-fenyl-1 H-1,2,3-triazol-4-yl)piperazin-1 -karboksylat
(500 mg) løst i tørr diklormetan (10 mL), ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuum fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-8-ln, som ble benyttet i neste reaksjon uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,84 (2s, 8H), 7,32 (t, 1H, J = 8 Hz), 7,45 (t, 2H, J = 6 Hz), 7,83 (d, 2H, J = 8 Hz).
LCMS: 230,1 (M++ 1).
Fremstilling av G- 8a
Trinn - 5
Til en omrørt løsning av2-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble et tilsatt G-8-ln (0,083 g), TBTU (0,128 g) og DIPEA (0,1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (2:8) som elueringsmiddel for å gi G-8a som gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,99 (s, 2H), 3,09 (s, 2H), 3,57 (s, 2H), 3,8 (s, 2H), 7,35 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,45 (t, 2H, J = 6 Hz), 7,87 (d, 2H, J = 8 Hz), 8,12 (s, 1H), 8,34 (d, 2H, J = 16 Hz), 9,02 (s, 1H), 13,08 (s, 1H), 14,4 (s, 1H).
LCMS: 487,1 (M++ 1).
HPLC: 95,2% (0,1% TFA/ACN; kolonne: Hypersil BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av G- 8b
Til en omrørt løsning av2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt G-8-ln (0,076 g), TBTU (0,117 g) og DIPEA (0,1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOsog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (2:8) som elueringsmiddel for å gi G-8b som et amorft faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,50 (s, 3H), 2,99 (t, 2H, J = 4 Hz), 3,1 (t, 2H, J = 6 Hz), 3,52 (t, 2H, J = 4 Hz), 3,77 (t, 2H, J = 6 Hz), 4,0 (s, 3H), 7,34 (t, 1H, J = 8 Hz), 7,46 (t, 2H, J = 8 Hz), 7,88 (t, 3H, J = 4 Hz), 8,23 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 12,4 (bs, 1H), 14,5 (bs, 1H).
LCMS: 513,1 (M++ 1).
HPLC: 90,39% (0,1% TFA/ACN; kolonne: Hypersil BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 9a og G- 9b
Trinn - 1
Natriumhydrid (0,3 g) i tørr DMF (2 mL) ble langsomt tilsatt en løsning av 5-amino-1-fenyl-pyrazol (0,5 g) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 1 time ved romtemperatur. Den ble på nytt avkjølt til 0°C og meget langsomt tilsatt en løsning av bis-(2-kloretylamin)-hydroklorid (0,61 g) i DMF (2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble behandlet med kaldt vann (5 mL) og ekstrahert med etylacetat (3x40 mL). Fordampning av løsningsmiddel under redusert trykk ga råproduktet, som ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCl3(2:8) som elueringsmiddel for å gi G-9-ln som et rent fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,36 - 3,06 (m, 8H), 5,95 (s, 1H), 7,29 (m, 1H), 7,30-8,32 (m, 5H).
<13>C NMR (DMSO-de): 8 45,45, 52,50, 94,80, 122,58, 126,91, 129,47, 140,16, 140,53, 152,63.
Trinn - 2
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,098 g), G-9-ln (0,076 g), TBTU (0,116 g) og Hunigs base (0,1 mL) ble blandet i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med
etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCl3(1:9) som elueringsmiddel for å gi G-9a som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 2,57 (s, 3H), 2,93 - 2,94 (t, 2H), 3,02 - 3,04 (t, 2H), 3,55 - 3,57 (t, 2H), 3,80 - 3,82 (t, 2H), 4,06 (s, 3H), 5,93 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,31- 7,46 (m, 5H), 7,80 (bs, 1H), 8,20 (s, 1H), 9,12 (s, 1H), 11,06 (bs,1 H).
<13>C NMR (CDCI3): 8 14,13, 41,03, 45,63, 50,77, 51,15, 56,97, 94,80, 115,74, 121,38, 123,13, 124,15, 127,22, 129,11, 129,70, 136,51, 139,74, 139,90, 141,28, 149,63, 150,74, 162,12, 166,39, 185,36.
LCMS: 512,1 (M++ 1).
HPLC: 96,12% (H2O/ACN; kolonne: C18XDB, 4,6 * 250 mm).
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,098 g), G-9-ln (0,076 g), TBTU (0,116 g) og Hunigs base (0,1 mL) ble blandet i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med
etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-9b som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 2,93 - 2,95 (t, 2H), 3,01 - 3,04 (t, 2H), 3,57 - 3,59 (t, 1H), 3,79-3,81 (t, 1H), 6,10 (s, 1H), 7,41 (m, 1H), 7,51 -7,75 (m, 5H), 8,01 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,93 (s, 1H).
<13>C NMR (DMSO-de): 8 31,13, 45,47, 51,06, 51,42, 95,85, 113,44, 113,50, 122,34,
122,55, 122,72, 123,58, 126,27, 127,16, 129,61, 132,22, 134,42, 140,16, 140,22, 142,83, 151,26, 151,47, 154,05, 166,08, 184,49.
LCMS: 486,1 (M++ 1).
HPLC: 99,08% (HCOOH/ACN; kolonne: C18XDB, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av G- 10a og G- 10b
Fremstilling av mellomprodukt G- 10- ln
Trinn - 1
Til fe/f-butyl-4-[(2-aminoetyl)amino]piperidin-1 -karboksylat (6 g) i tørr toluen (50 mL) avkjølt til -10°C, ble det langsomt tilsatt trimetylaluminium i tørr toluen under nitrogenatmosfære. Reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur og en andre porsjon av en løsning av ferf-butyl-4-[(2-aminoetyl)amino]piperidin-1-karboksylat (6 g i 50 mL toluen) ble tilsatt meget langsomt. Den samlede blanding ble oppvarmet til 55°C i 30 minutter. En løsning av etylbenzoat (7,4 g i 50 mL tørr toluen) ble tilsatt meget meget langsomt til reaksjonsblandingen ved 55°C i løpet av 40 minutter. Etter fullført tilsetning ble reaksjonsblandingen kokt under tilbakeløpskjøling natten over. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til 0°C og tilsatt vann (3x50 mL). Den samlede blanding ble filtrert gjennom et Celite-lag. Filtratet ble konsentrert under redusert trykk og den resulterende olje renset ved kolonnekromatografi for å gi tert-butyl-4-(2-fenyl-4,5-dihydro-1H-imidazol-1-yl)piperidin-1-karboksylat som et rent produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CDaOD): 8 1,45 (s, 9H), 1,71-1,75 (m, 4H), 2,62 (m, 2H), 3,85 (m, 1H), 3,95 (m, 4H), 4,91 (m, 2H), 7,56 - 7,63 (m, 5H).
LCMS: 330,1 (M++ 1).
Trinn - 2
Til tert-butyl-4-(2-fenyl-4,5-dihyclro-1 H-imidazol-1 -yl)piperidin-1 -karboksylat (2,2 g) løst i tørr diklormetan (100 mL), ble det tilsatt TFA (50 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet og residuet fortynnet med diklormetan. Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x50 mL) og saltvann (40 mL) og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel førte til det ønskede amin G-10-ln som ble benyttet i det neste trinn uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 1,88-1,91 (m, 2H), 2,15-2,21 (m, 2H), 2,85-2,90 (m, 2H), 3,22 - 3,25 (m, 2H), 3,88 - 4,05 (m, 5H), 7,46 - 7,74 (m, 5H), 10,98 (bs, 1H).
<13>C NMR (DMSO-de): 8 26,05, 42,12, 43,31, 45,48, 51,19, 123,20, 129,07, 129,83, 133,54, 166,19.
LCMS: 229,9 (M++ 1).
Fremstilling av G- 10a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,09 g) i tørr DMF (5 mL) ble tilsatt amin G-10-ln (0,08 g), TBTU (0,12 g) og Hunigs base (0,2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og løsningsmidler fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende halvfaste produkt ble renset ved kolonnekromatografi ved bruk av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-10a som et faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDaOD): 8 2,22 (m, 4H), 3,77 (m, 4H), 4,2 (m, 2H), 4,6 (m, 2H), 7,70 (m, 5H), 8,01 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 8,5 (s, 1H), 8,93 (s, 1H).
<13>C NMR (CD3OD): 8 30,14, 30,89, 41,25, 45,92, 46,23, 48,36, 79,47, 114,44, 124,50, 124,69, 124,96, 126,02, 126,30, 128,26, 129,21, 129,56, 130,32, 132,84, 134,46, 147,54, 153,38, 155,95, 168,48, 185,58.
LCMS: 487,1 (M<+>+ 1).
HPLC: 98,14% (NH4OAc/ACN; kolonne: C18 XDB, 4,6 x 250 mm).
Fremstilling av G- 10b
Til 2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1 -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,1 g) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt G-10-ln (0,076 g), TBTU (0,117 g) og Hunigs base (0,2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2SCMog konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-10b som et fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 2,55 (s, 3H), 2,76 - 2,81 (bs,1 H), 3,03 - 3,09 (t, 1H), 3,78 - 3,97 (m, 6H), 4,65 (s, 3H), 4,90 (d, 1H), 7,57 - 7,58 (d, 5H), 7,83 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 9,22 (s, 1H).
<13>C NMR (CD3OD): 8 13,73, 30,31, 30,77, 41,48, 45,62, 46,36, 48,36, 48,58, 54,70, 57,35, 115,64, 122,02, 124,98, 127,28, 129,17, 130,08, 130,54, 131,53, 132,05, 141,34, 143,24, 151,20, 162,78, 168,53, 168,59,187,35.
LCMS: 513,1 (M++ 1).
HPLC: 95,26% (NH4OAc/ACN; kolonne: C18 XDB, 4,6 x 250 mm).
Fremstilling av G- 11a og G- 11b
Fremstilling av mellomprodukt G- 11- ln
Trinn - 1
Tert-butyl-4-(2-fenyl-4,5-dihydro-1/-/-imidazol-1-yl)piperidin-1-karboksylat (0,1 g) og nikkelperoksyd ble løst i tørr benzen (20 mL) og kokt under tilbakeløps-kjøling ved 100°C over natten. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur, ble filtrert gjennom et Celite-lag og vasket med CHCI3(2x20 mL). Det organiske løsningsmiddel ble fjernet under redusert trykk, hvilket ga en olje som ble renset ved kolonnekromatografi ved bruk av etylacetat. Fordampning av løsningsmiddel ga et rent produkt, tert-butyl-4-(2-fenyl-1H-imidazol-1-yl)piperidin-1-karboksylat.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 1,47 (s, 9H), 1,89-1,96 (m, 4H), 3,0 (m, 2H), 4,23 (m, 2H), 4,32 (d, 1H), 7,08 (d, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,52 - 7,55 (m, 5H).
LCMS: 328,1 (M++ 1).
Trinn - 2
Til tert-butyl-4-(2-fenyl-1H-imidazol-1-yl)piperidin-1-karboksylat (600 mg) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble TFA (5 mL) tilsatt ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur og omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og residuet fortynnet med diklormetan. Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x10 mL) og saltvann (20 mL) og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel førte til det ønskede amin G-11-In som ble benyttet i det neste trinn uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 1,88-2,02 (m, 4H), 2,64 (m, 2H), 3,31 (m, 2H), 4,91 (m, 1H), 7,09 (d, 1H), 7,37 (d, 1H), 7,47 - 7,56 (m, 5H).
<13>C NMR (CD3OD): 8 34,83, 43,73, 46,16, 55,27, 62,18, 118,47, 128,36, 128,47, 128,64, 129,52, 129,61, 130,33, 130,46, 148,59.
Fremstilling av G- 11a
Til 2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1 -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,1 g) løst i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt amin G-11-In (0,074 g), TBTU (0,12 g) og Hunigs base (0,2 mL) og blandingen omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCO3(2x20 mL) og saltvann (20 mL). Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-11a som et fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 2,05 - 2,17 (m, 4H), 2,94 (bs,1H), 3,27-3,32 (bs, 1H), 3,95 (d, 1H), 4,73 (bs, 1H), 4,90 (d, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,44-7,92 (m, 5H), 8,01 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,92 (s, 1H).
<13>C NMR (CD3OD): 8 33,69, 34,54, 41,73, 46,44, 55,03, 114,80, 114,85, 118,64, 123,64, 127,23, 127,51, 128,92, 130,02, 130,40, 130,60, 131,52, 134,80, 141,91, 148,70, 167,63, 185,78.
LCMS: 485,1 (M++ 1).
HPLC: 95,38% (0,1% TFA/ACN; kolonne: C18 BDS, 4,6 x 250 mm).
Fremstilling av G- 11b
Til 2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1 -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,1 g) løst i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt amin G-11-In (0,079 g), TBTU (0,11 g) og Hunigs base (0,1 mL) og reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCO3(2x20 mL) og saltvann (20 mL). Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-11b som et fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CDaOD): 6 2,05 - 2,20 (m, 4H), 2,55 (s, 3H), 2,94 - 3,20 (t,1H), 3,23 - 3,27 (bs, 1H), 3,87 (d, 1H), 4,06 (s, 3H), 4,51 (bs, 1H), 4,91 (d, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,53 - 7,55 (m, 5H), 7,81 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 9,20 (s, 1H).
<13>C NMR (CD3OD): 8 13,77, 33,80, 34,32, 41,68, 46,43, 55,09, 57,38, 115,74, 118,62, 122,15, 124,64, 125,30, 128,96, 130,01, 130,40, 130,56, 131,03, 131,56, 139,49, 142,80, 148,70, 151,08, 162,93, 168,46, 187,54.
LCMS: 511,2 (M++ 1).
HPLC: 95,35% (NH4OAc/ACN; kolonne: C18XDB, 250 * 4,6 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 12a og G- 12b
Fremstilling av mellomprodukt G- 12- ln
Trinn - 1
Til en omrørt løsning av N-fenyletylendiamin (2 g) i absolutt alkohol (30 mL) ble det tilsatt karbondisulfid (2,23 g) under nitrogen. Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpskokt i tre timer og fikk anta romtemperatur. Det resulterende hvite faststoff (tioamid-mellomprodukt) ble frafiltrert, tørket og benyttet i det neste trinn uten videre rensing.
Til en omrørt løsning av tioamid-mellomprodukt (2 g) i tørr metanol (20 mL) ble det tilsatt metyljodid (3,1 g). Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpskokt i tre timer. Flyktige forbindelser ble fjernet under vakuum og det resulterende hvite faststoff, 2-(metyltio)-1-fenyl-4,5-dihydro-1H-imidazol, ble benyttet i det neste trinn uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 2,65 (s, 3H), 4,06 (t, 2H), 4,38 (t, 2H), 7,46 - 7,57 (m, 5H).
LCMS: 192,9 (M++ 1).
Trinn - 2
Til en omrørt løsning av2-(metyltio)-1-fenyl-4,5-dihydro-1H-imidazol
(100 mg) i toluen (5 mL) ble det tilsatt N-Boc-piperazin (0,48 g), og hele reaksjonsblandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling natten over. Løsningsmidlet ble fjernet fullstendig og etylacetat tilsatt til residuet. Det resulterende hvite faststoff, tert-butyl-4-(1 -fenyl-4,5-dihydro-1 H-imidazol-2-yl)piperazin-1 -karboksylat, ble frafiltrert, tørket og benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, CDaOD): 8 1,49 (s, 9H), 3,17 (m, 4H), 3,32 (m, 4H), 3,89 (t, 2H), 4,25 (t, 2H), 7,40 - 7,56 (m, 5H).
LCMS: 331,1 (M<+>+ 1).
Trinn - 3
Til tert-butyl-4-(1 -fenyl-4,5-dihydro-1 H-imidazol-2-yl)piperazin-1 -karboksylat (500 mg) i tørr diklormetan (10 mL) ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet under redusert trykk og residuet fortynnet med diklormetan (10 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x10 mL) og saltvann (20 mL) og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-12-ln som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,52 (m, 4H), 3,06 (m, 4H), 3,66 (t, 2H), 4,04 (t, 2H), 7,18-7,44 (m, 5H).
LCMS: 230,9 (M++ 1).
Fremstilling av G- 12a
Til en omrørt løsning av2-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (50 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt amin G-12-ln (41 mg), TBTU (64 mg) og DIPEA (0,1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-12a som et gult faststoff.
<1>H NMR (DMSO-de): 8 3,21 (d, 2H), 3,34 (m, 4H), 3,66 (d, 2H), 3,73 - 3,77 (t, 2H), 4,14-4,18 (t,2H), 7,30-7,50 (m, 5H), 8,11 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 9,0 (s, 1H).
LCMS: 488,1 (M++ 1).
HPLC: 99,66% (0,1% TFA/ACN; kolonne: C18 BDS, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av G- 12b
Til en omrørt løsning av2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (50 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt amin G-12-ln (38 mg), TBTU (0,117 g) og DIPEA (0,1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-12b som et gult faststoff.
<1>H NMR (DMSO-de): 8 2,72 (s, 3H), 3,06 (d, 2H), 3,18 (d, 2H), 3,31 (t, 2H), 3,33 - 3,62 (m, 4H), 3,90 (t, 2H), 3,95 (s, 3H), 7. 02 - 7,26 (m, 5H), 7,82 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 11,89 (bs, 1H).
LCMS: 514,2 (M++ 1).
HPLC: 99,25 % (NH4OAc/ACN; kolonne: C18 XDB, 250 x 4,6 mm).
Fremstilling av G- 13a og G- 13b
Trinn - 1
Til en løsning av 4-brom-1-metyl-5-fenyl-1H-pyrazol (0,2 g) i tørr toluen
(5 mL) ble det tilsatt piperizen (0,36 g) og natrium-tert-butoksyd (0,12 g) og reaksjonsblandingen ble avgasset i 5 minutter. Deretter ble BINAP (0,05 g), Pd(dba)2og DMF (0,1 mL) tilsatt til ovennevnte reaksjonsblanding og på nytt avgasset med nitrogen i 5 minutter. Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpsbehandlet over natten. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom et Celite-lag og vasket med etylacetat (2x20 mL). Flyktige forbindelser ble fjernet under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (2:8) som elueringsmiddel for å gi G-13-ln som en lysegul olje.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,50 (m, 4H), 2,64 (m, 4H), 3,67 (s, 3H), 7,30 (s, 1H), 7,36-7,53 (m, 5H).
<13>C NMR (CD3OD): 8 30,77, 41,09, 46,34, 48,37, 52,90, 53,78, 54,09, 129,88, 130,65, 131,21, 134,72, 135,53, 136,39, 163,08.
LCMS: 242,9 (M++ 1).
Trinn - 2
Til en omrørt løsning av2-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoedcliksyre (150 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt G-13-ln (96 mg), TBTU (175 mg) og DIPEA (0,2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-13a som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,50 (t, 2H), 2,70 (t,2H), 3,38 (bs,2H), 3,61 (t, 2H), 3,69 (s, 3H), 7,39 (s, 1H), 7,42-7,55 (m, 5H), 8,12 (s, 1H), 8,31 (bs, 1H), 9,01 (s, 1H), 13,05 (bs, 1H).
LCMS: 500,2 (M++ 1).
HPLC: 97,37% (0,1% TFA/ACN; kolonne: C18 BDS 4,6 x 50 mm).
Til en omrørt løsning av2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (150 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt G-13-ln (96 mg), TBTU (0,117 g) og DIPEA (0,2 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOsog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-13b som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCb): 8 2,56 (s, 3H), 2,84 (s,1 H), 2,93 (bs,1 H), 3,50 (bs, 2H), 3,77 (bs, 4H), 4,09 (s, 3H), 7,27 (s, 1H), 7,37 - 7,48 (m, 5H), 8,18 (s, 1H), 9,10 (s, 1H), 11,03 (s, 1H).
LCMS: 526,2 (M<+>+ 1).
HPLC: 94,59% (NH4OAc/ACN; kolonne: C18 XDB, 4,6 x 250 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 14a og G- 14b
Fremstilling av mellomprodukt G- 14- ln
Trinn - 1
En 100 mL trehalset rundkolbe ble tilsatt 6-fenyl-5-(piperazin-1-yl)pyridazin-3(2H)-on (2,0 g), tørr kaliumkarbonat (2,1 g) og tørr DMF (150 mL) under nitrogenatmosfære. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur og meget langsomt tilsatt benzoylklorid (1,5 g). Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 120°C i 4 timer. Reaksjonsutviklingen ble overvåket ved TLC. Etter at utgangsmaterialet var forbrukt ble reaksjonsblandingen avkjølt til 0°C og tilsatt iskaldt vann (20,0 mL), hvorpå den organiske forbindelse ble ekstrahert over i etylacetat (4x20 mL). De samlede organiske lag ble tørket (Na2S04) og konsentrert. Råmaterialet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCl3(1:9) som elueringsmiddel for å gi 5-(4-benzoylpiperazin-1-yl)-6-fenylpyridazin-3(2H)-on.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 2,94 - 3,41 (bs, 4H), 3. 49 - 3,73 (bs, 4H), 6,33 (s, 1H), 7,27-7,68 (m, 10H), 11,5(bs, 1H).
LCMS: 361,0 (M++ 1).
Trinn - 2
Til 5-(4-benzoylpiperazin-1-yl)-6-fenylpyridazin-3(2H)-on (1,3 g) i en énhalset rundkolbe ble det tilsatt fosforoksyklorid (10 mL) og blandingen oppvarmet til 80°C i 4 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og konsentrert for å fjerne overskudd av fosforoksyklorid. Residuet ble langsomt helt over på is og nøytralisert med fast natriumbikarbonat. Blandingen ble ekstrahert med etylacetat (3x100 mL). De samlede organiske lag ble tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert for å gi (4-(6-klor-3-fenylpyridazin-4-yl)piperazin-1-yl)(fenyl)metanon som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 2,96 - 3,09 (bs, 4H), 3. 43 - 3,51 (bs, 2H), 3,80 (bs, 2H), 6,94 (s, 1H), 7,26 - 7,84 (m, 10H).
LCMS: 378,8 (M<+->1).
Trinn - 3
Til (4-(6-klor-3-fenylpyridazin-4-yl)piperazin-1-yl)(fenyl)metanon (1 g) løst i metanol (40 mL) ble det tilsatt dimetylamin i THF (10 mL) under nitrogenatmosfære og reaksjonsblandingen oppvarmet til 60°C i 18 timer. Reaksjonsutviklingen ble overvåket ved TLC. Etter at utgangsmaterialet var forbrukt ble reaksjonsblandingen avkjølt til romtemperatur og nøytralisert med fast natriumbikarbonat. Blandingen ble ekstrahert med diklormetan (3x10 mL). De samlede organiske lag ble tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert for å gi (4-(6-(dimetylamino)-3-fenylpyridazin-4-yl)piperazin-1-yl)(fenyl)metanon som en gul væske.
LCMS: 387,9 (M++ 1).
Trinn - 4
Til (4-(6-(dimetylamino)-3-fenylpyridazin-4-yl)piperazin-1-yl)(fenyl)metanon (18 g) i en rundkolbe ble det tilsatt konsentrert saltsyre (10 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 85°C i 6 timer. Reaksjonsutviklingen ble overvåket ved TLC. Etter at utgangsmaterialet var forbrukt ble reaksjonsblandingen avkjølt til romtemperatur. Residuet ble langsomt helt over på is og nøytralisert med fast natriumbikarbonat. Blandingen ble ekstrahert med diklormetan (3x10 mL). De samlede organiske lag ble tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert for å gi G-14-ln som en gul væske.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 2,46 (s, 6H), 2,96 - 3,13 (d, 4H), 3,14 - 3,49 (d, 4H), 6,14 (s, 1H), 7,27 - 7,43 (m, 5H), 7,87 (s, 1H).
LCMS: 283,9 (M<+>+ 1).
Fremstilling av G- 14a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,098 g), G-14-ln (0,076 g), TBTU (0,116 g) og Hunigs base (0,1 mL) ble blandet i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-14a som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,90 (t, 2H), 3,0 (t, 2H), 3,11 (s, 6H), 3,31 (m, 2H), 3,31 (t, 2H), 6,38 (s, 1H), 7,36-7,47 (m, 5H), 8,12 (s, 1H), 8,31 (t, 2H), 9,01 (s, 1H), 13,01 (bs,1H).
LCMS: 541,1 (M++ 1).
HPLC: 99,64% (0,1% TFA/ACN; kolonne: BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av G- 14b
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,098 g), G-14-ln (0,076 g), TBTU (0,116 g) og Hunigs base
(0,1 mL) ble blandet i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med
etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCl3(1:9) som elueringsmiddel for å gi G-14b som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,50 (s, 3H), 2,91 (t, 2H), 2,99 (t, 2H), 3,12 (s, 6H), 3,35 (m, 2H), 3,58 (t, 2H), 3,99 (s, 3H), 6,40 (s, 1H), 7,35 - 7,47 (m, 5H), 7,89 (s, 1H), 8,20 (s, 1H), 9,22 (s, 1H), 12,35 (bs,1H).
LCMS: 567,2 (M++ 1).
HPLC: 99,82% (0,1% TFA/ACN; kolonne: BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av G- 15a og G- 15b
Fremstilling av mellomprodukt G- 15- ln
Trinn - 1
Til (4-(6-klor-3-fenylpyridazin-4-yl)piperazin-1-yl)(fenyl)metanon (1 g) løst i metanol (40 mL) ble det meget langsomt tilsatt palladium på kull (10 mol%) under nitrogenatmosfære, og reaksjonsblandingen ble omrørt under hydrogenatmosfære (1 kg trykk) i 3 timer. Reaksjonsutviklingen ble overvåket ved TLC. Etter at utgangsmaterialet var forbrukt ble reaksjonsblandingen filtrert gjennom Celite, vasket med metanol og filtratet konsentrert under redusert trykk for å gi fenyl(4-(3-fenylpyridazin-4-yl)piperazin-1-yl)metanon som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 2,45 - 4,04 (bs, 8H), 7,40 (s, 1H), 7,42 - 7,95 (m, 10H), 9,0 (s, 1H).
Trinn - 2
Til fenyl(4-(3-fenylpyridazin-4-yl)piperazin-1-yl)metanon (18 g) i en rundkolbe ble det tilsatt konsentrert saltsyre (10 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 85°C i 6 timer. Reaksjonsutviklingen ble overvåket ved TLC. Etter at utgangsmaterialet var forbrukt ble reaksjonsblandingen avkjølt til romtemperatur. Residuet ble langsomt helt over på is og nøytralisert med fast natriumbikarbonat. Blandingen ble ekstrahert med diklormetan (3x10 mL). De samlede organiske lag ble tørket over vannfritt natriumsulfat og konsentrert for å gi G-15-ln som en gul væske.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,64 (d, 4H), 2,80 (d, 4H), 4,09 (s, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,42 - 7,83 (m, 5H), 8,82 (s, 1H).
Fremstilling av G- 15a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,098 g), G-15-ln (0,076 g), TBTU (0,116 g) og Hunigs base (0,1 mL) ble blandet i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-15a som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,94 (t, 2H), 3,07 (t, 2H), 3,39 (m, 2H), 3,62 (t, 2H), 7,20 (s, 1H), 7,46 - 7,54 (m, 5H), 8,12 (s, 1H), 8,31 (d, 2H), 8,88 (d, 1H), 9,01 (s, 1H), 13,01 (bs,1H).
LCMS: 498,1 (M<+>+ 1).
HPLC: 99,41% (0,1% HCOOH/ACN; kolonne: Genesis C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av G- 15b
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,098 g), G-15-ln (0,076 g), TBTU (0,116 g) og Hunigs base
(0,1 mL) ble blandet i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med
etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCl3(1:9) som elueringsmiddel for å gi G-15b som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,50 (s, 3H), 2,94 (t, 2H), 3,06 (t, 2H), 3,33 (m, 2H), 3,58 (t, 2H), 3,98 (s, 3H), 7,23 (d, 1H), 7,46 - 7,54 (m, 5H), 8,21 (s, 1H), 8,89 (d, 1H), 9,24 (s, 1H), 12,39 (bs,1H).
LCMS: 524,1 (M++ 1).
HPLC: 96,79% (0,1% HCOOH/ACN; kolonne: Genesis C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 16
Trinn - 1
Natriumhydrid (0,1 g) i tørr DMF (2 mL) ble langsomt tilsatt en løsning av tert-butyl-4-(3-fenyl-1H-pyrazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat (0,5 g i 2 mL DMF) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 min ved 0°C og meget langsomt tilsatt en løsning av 2-kloretylmorfolin-hydroklorid (0,3 g) i DMF (1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Reaksjonen ble avbrutt med kaldt vann (5 mL), og blandingen ble ekstrahert med etylacetat (3x40 mL). Fordampning av løsningsmiddel under redusert trykk ga råproduktet, som ble renset ved kolonnekromatografi ved bruk av etylacetat/heksan (2:8) som elueringsmiddel for å gi forbindelsen tert-butyl-4-(1-(2-morfolinoetyl)-3-fenyl-1H-pyrazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat som et rent fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 1,48 (s, 9H), 2,65 - 2,70 (m, 4H), 2,84 (t, 2H), 3,3-3,54 (m, 4H) 3,63 (m, 6H,), 3,76 (m, 4H), 7,27 - 7,43(m, 5H), 7,54 (s, 1H).
LC-MS: 441 (M<+>+1)
Trinn - 2
Til tert-butyl-4-(1 -(2-morfolinoetyl)-3-fenyl-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin-1 - karboksylat (1 g) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble TFA (5 mL) tilsatt ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuet fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-16-ln, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 6 2,65 - 2,70 (m, 4H), 2,84 (t, 2H), 3,3-3,54 (m, 4H) 3,53 (m, 6H,), 3,66 (m, 4H), 7,27 - 7,43(m, 5H), 7,54 (s, 1H).
LC-MS: 340 (M++1)
Trinn - 3
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,098 g), G-16-ln (0,076 g), TBTU (0,116 g) og Hunigs base (0,1 mL) ble blandet i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/kloroform (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-16 som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,41 (m, 4H), 2,69 - 2,75 (m, 4H), 2,84 (s, 2H), 3,53 (d, 6H, 4 Hz), 3,76 (s, 2H), 4,16 (t, 2H, J = 8 Hz), 7,25 (t, 1H, J = 6 Hz), 7,38 (t, 2H, J = 8 Hz), 7,66 (s, 1H), 7,96 (d, 2H, J = 8 Hz), 8,11 (s, 1H), 8,30 og 8,34 (2s, 2H), 9,02 (s, 1H), 13,12 (s, 1H).
LCMS: 599,2 (M++ 1).
HPLC: 95,4% (0,1% TFA/ACN; kolonne: Hypersil BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 17a og G- 17b
Fremstilling av mellomprodukt G- 17- ln
Trinn - 1
Til en omrørt løsning av metyl-piperidin-4-karboksylat-HCI-salt (5 g) i diklormetan ble det tilsatt trietylamin inntil løsningen var basisk. Denne basiske reaksjonsblandingen ble tilsatt Boc-anhydrid (7,2 g) og omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble behandlet med vann (20 mL) og ekstrahert med diklormetan (3x10 mL). De samlede organiske lag ble tørket over Na2SCMog konsentrert til tørrhet for å gi 1 -tert-butyl-4-metyl-piperidin-1,4-dikarboksylat som et hvitt faststoff, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 1,45 (s, 9H), 1,62 - 1,64 (m, 2H), 1,89 (m, 2H), 2,83 (m,2H), 3,69 (s, 3H), 4,1 (m, 2H).
LC-MS: 244 (M++1)
Trinn - 2
Til en omrørt løsning avfenyletylendiamin (3 g) i tørr toluen (50 mL), avkjølt til -10°C, ble det dråpevis tilsatt trimetylaluminium (36 mL, 2M løsning i heksan) i løpet av 30 minutter. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble oppvarmet til 50°C. 1-tert-butyl-4-metyl-piperidin-1,4-dikarboksylat (8 g) i tørr toluen (50 mL) ble dråpevis tilsatt til ovennevnte blanding. Den samlede blanding ble omrørt ved 110°C i 5 timer, og deretter omrørt natten over ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble tilsatt vann (50 mL) etterfulgt av metanol (50 mL) og ble omrørt i 15 minutter ved 0°C. Hele blandingen ble deretter filtrert gjennom et Celite-lag og vasket med kloroform. Det samlede filtrat ble konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/kloroform (2:8) som elueringsmiddel for å gi tert-butyl-4-(1-fenyl-4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl)piperidin-1-karboksylat som et fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CDaOD): 8 1,47(s, 9H), 1,57 - 1,60 (m, 2H), 1,72 - 1,76(m, 2H), 2,56 - 2,57 (m, 3H), 3,84 (m, 2H), 3,92 (m, 2H), 4,08 (m, 2H), 7,27 - 7,48 (m, 5H).
LCMS: 230,1 (M<+>+ 1).
Trinn - 3
Til tert-butyl-4-(1 -fenyl-4,5-dihydro-1 H-imidazol-2-yl)piperidin-1 -karboksylat (500 mg) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuum fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-17-ln, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.<1>H NMR (400 MHz, CDsOD): 6 1,93 (m, 2H), 2,01 (m, 2H), 2,94 (m, 2H), 3,33 (m, 2H), 3,42 (m, 2H), 4,11 (m, 2H), 4,36 (m, 1H), 7,51 - 7,62 (m, 5H).
<13>C NMR (CDsOD): 8 31,28, 35,85, 46,45, 49,45, 52,11, 54,67, 79,48, 126,54, 127,54, 130,76, 142,57, 170,43.
LCMS: 231,0 (M++ 1).
Fremstilling av G- 17a
Til en omrørt løsning av2-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt G-17-ln (0,083 g), TBTU (0,128 g,) og DIPEA (0,1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2SCMog konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/kloroform (2:8) som elueringsmiddel for å gi G-17a som et gult faststoff.
<1>H NMR (DMSO-de): 6 1,5-1,9 (m, 4H), 2,73 (t, 2H), 3,01 (t, 1H), 3,58 (d, 1H), 3,77 (t, 2H), 3,94 (t, 2H), 4,36 (d, 1H), 7,3 (m, 3H), 7,45 (m, 2H), 8,0 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 9,03 (s, 1H).
LCMS: 487,1 (M++ 1).
HPLC: 94,7% (0,1% HCOOH/ACN; kolonne: Genesis C18 50 x 4,6 mm, 3u)
Fremstilling av G- 17b
Til en omrørt løsning av2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt G-17-ln (0,076 g), TBTU (0,117 g) og DIPEA (0,1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/kloroform (2:8) som elueringsmiddel for å gi G-17b (30 mg, 17%) som et gult faststoff.
<1>H NMR (DMSO-de): 8 1,65 (m, 4H), 2,49 (s, 3H), 2,80 (m, 2H), 3,01 (t, 1H), 3,55 (t, 1H), 3,72 (m, 4H), 3,95 (s, 3H), 4,29 (d, 1H), 7,20 (m, 3H), 7,40 (t, 2H), 7,83 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 9,24 (s, 1H).
LCMS: 513,2 (M<+>+ 1).
HPLC: 90,3% (0,1% TFA/CAN; kolonne: C18 BDS, 4,6 x 250 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 18
Fremstilling av mellomprodukt G- 18- ln
Trinn - 1
Til en omrørt løsning av tert-butyl-4-(1-fenyl-4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl)piperidin-1-karboksylat (100 mg) i tørr benzen (5 mL) ble det tilsatt nikkelperoksyd (350 mg) løst i tørr benzen (20 mL). Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpskokt over natten og filtrert gjennom et Celite-lag ved bruk av CHCI3som elueringsmiddel. De samlede organiske lag ble fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av etylacetat/heksan (3:7) for å gi tert-butyl-4-(1 -fenyl-1 H-imidazol-2-yl)piperidin-1 - karboksylat som et rent produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): 6 1,47(s, 9H), 1,67 - 1,70 (m, 2H), 1,72 - 1,76(m, 2H), 2,56 - 2,57 (m, 1H), 3,3 (m, 2H), 3,5 (m, 2H), 7,0-7,2 (S, 2H), 7,27 - 7,48 (m, 5H).
LC-MS: 328,1 (M++ 1).
Trinn - 2
Til tert-butyl-4-(1 -fenyl-1 H-imidazol-2-yl)piperidin-1 -karboksylat (500 mg) i tørr diklormetan (10 mL) ble TFA (5 mL) tilsatt ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet ved bruk av redusert trykk og residuet fortynnet med diklormetan (10 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCCh(2x10 mL) og saltvann (20 mL) og tørket over Na2SCM. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-18-ln som ble benyttet i den neste reaksjon uten ytterligere rensing.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 1,76 - 1,82 (m, 2H), 2,56 (m, 2H), 2,76 - 2,80 (m, 1H), 3,05 (m, 2H), 3,5 (m, 2H), 7,0-7,15 (S, 2H), 7,37 - 7,48 (m, 5H).
LCMS: 228,1 (M++ 1).
Fremstilling av G- 18a
Til en omrørt løsning av2-(4-fluor-7-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt G-18-ln (0,076 g), TBTU (0,117 g) og DIPEA (0,1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/kloroform (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-18a som et gult faststoff.
<1>H NMR (DMSO-de): 6 1,8 (m, 4H), 3,0 (m, 3H), 3,62 (d, 1H), 4,36 (d, 1H), 6,97 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,43 (d, 2H), 7,55 (m, 3H), 8,12 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 9,02 (s, 1H), 13,06 (bs, 1H).
LCMS: 485,1 (M<+>+ 1).
HPLC: 97,3% (0,1% TFA/ACN; kolonne: C18 BDS, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av G- 18b
Til en omrørt løsning av2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-tnazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt G-18-ln (0,076 g), TBTU (0,117 g) og DIPEA (0,1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/kloroform (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-18b som et gult faststoff.
<1>H NMR (CD3OD): 6 1,9 (m, 4H), 2,56 (s, 3H), 2,85 (m, 1H), 3,12 (m, 2H), 3,8 (d, 1H), 4,04 (s, 3H), 4,59 (d, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,16 (s, 1H), 7,43 (s, 2H), 7,56 (m, 3H), 7,84 (s, 1H), 8,27 (s, 1H), 9,23 (s, 1H).
<13>C NMR (CD3OD): 8 13,76, 31,63, 32,18, 34,95, 42,24, 47,52, 57,55, 115,88, 122,15, 122,71, 124,57, 125,39, 127,52 (2C), 127,94, 130,25, 130,98 (2C), 131,65, 138,62, 139,54, 142,83, 151,21, 151,64, 162,93, 168,43, 187,37. LCMS: 511,2 (M++ 1).
HPLC: 97,3% (0,1% TFA/ACN; kolonne C18, BDS 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av G- 19a og G- 19b
Fremstilling av mellomprodukt G- 19- ln
Trinn - 1
Til en omrørt løsning avformamidin-acetat (2,8 g) i trietylamin (6 mL) i et forseglet rør, ble det tilsatt tert-butyl-4-(1 -(dimetylamino)-3-okso-3-fenylprop-1 -en-2-yl)piperazin-1-karboksylat (1,0 g), og reaksjonsblandingen ble oppvarmet til 140°C i 6 timer. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur, hvorpå trietylamin ble fjernet under redusert trykk. Vann (10 mL) ble tilsatt residuet og den organiske forbindelse ekstrahert over i etylacetat (4x20 mL). De samlede organiske lag ble tørket (Na2S04) og konsentrert. Råmaterialet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/kloroform (1:9) for å gi tert-butyl-4-(4-fenylpyrimidin-5-yl)piperazin-1 -karboksylat.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 1,48 (s, 9H), 2,59 (s, 4H), 3,52 - 3,54 (s, 4H), 7,27 - 7,50 (m,5H), 8,41 (s, 1H), 8,97 (s, 1H).
LC-MS: 341 (M<+>+1)
Trinn - 2
Til tert-butyl-4-(4-fenylpyrimidin-5-yl)piperazin-1-karboksylat (1 g) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble TFA (5 mL) tilsatt ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuum fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-19-ln (0,5 g), som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 2,59 (s, 4H), 3,52 - 3,54 (s, 4H), 7,27 - 7,50 (m, 5H), 8,41 (s, 1H), 8,97 (s, 1H).
LC-MS: 240 (M<+>+1)
Fremstilling av G- 19a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-tirazoM -yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,098 g), G-19-ln (0,076 g), TBTU (0,116 g) og Hunigs base (0,1 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/kloroform (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-19a som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,92 (bs, 2H), 3,02 (bs, 2H), 3,45 (bs, 2H), 3,67 (bs, 2H), 7,47 - 7,53 (m, 3H), 8,09 - 8,12 (m, 3H), 8,33 (m, 2H), 8,56 (s, 1H), 8,89 (s, 1H), 9,01 (s, 1H), 13,06 (bs,1H).
<13>C NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 14,13, 41,03, 45,63, 50,77, 51,15, 56,97, 94,80, 115,74, 121,38, 123,13, 124,15, 127,22, 129,11, 129,70, 136,51, 139,74, 139,90, 141,28, 149,63, 150,74, 162,12, 166,39, 185,36.
LCMS: 498,1 (M<+>+ 1).
HPLC: 96,67% (0,1% TFA/ACN; kolonne: Hypersil, BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av G- 19b
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,098 g), G-19-ln (0,076 g), TBTU (0,116 g) og Hunigs base (0,1 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur over natten. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi under anvendelse av metanol/kloroform (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-19b som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 2,57 (s, 3H), 3,03 (t, 2H), 3,12 (t, 2H), 3,57 (t, 2H), 3,82 (t, 2H), 4,08 (s, 3H), 7,27 - 7,51 (m, 5H), 7,78 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 9,00 (s, 1H), 9,12 (s, 1H), 11,05 (bs, 1H).
LCMS: 524,1 (M<+>+ 1).
HPLC: 98,38% (0,1% TFA i H2O/ACN; kolonne: Hypersil BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av forbindelse 20
Trinn - 1
Natriumhydrid (0,1 g) i tørr DMF (2 mL) ble langsomt tilsatt en løsning av tert-butyl-4-(3-fenyl-1H-pyrazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat (0,5 g i 2 mL DMF) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 min ved 0°C og meget langsomt tilsatt en løsning av etylbromacetat (1 g) i DMF (1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble behandlet med kaldt vann (5 mL) og ekstrahert med etylacetat (3x40 mL). Fordampning av løsningsmiddel under redusert trykk ga et råprodukt, som ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av etylacetat/heksan (2:8) som elueringsmiddel for å gi tert-butyl-4-(1 -(2-etoksy-2-oksoetyl)-3-fenyl-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin-1 - karboksylat som et rent fast produkt.
<1>H NMR (400MHz, CDCb): 8 1,2 (t, 3H), 1,48 (s, 9H), 2,86 (m, 4H), 3,54 (m, 4H), 4,08 (t, 2H), 5,0 (s, 2H), 7,28-7,43 (m, 5H), 7,8 (s, 1H).
LC-MS: 415 (M++1)
Trinn - 2
Til tert-butyl-4-(1 -(2-etoksy-2-oksoetyl)-3-fenyl-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin-1 - karboksylat (1 g) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuum fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-20-ln, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.
Trinn - 3
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,1 g), amin G-20-ln (0,08 g), TBTU (0,12 g) og Hunigs base (0,15 mL) ble kombinert i tørr DMF (5 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2SCMog konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av 5% metanol/kloroform (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-20.
<1>H NMR (400MHz,CDCb): 8 1,2 (t, 3H),2,75 (t, 2H), 2,86 (t, 2H), 3,54 (t, 2H),3,77 (t,2H), 4,18 (t, 2H),5,0 (s, 2H),7,28 (m, 1H),7,3 (m, 2H),7,6 (S, 1H),7,95 (d, 2H),8,1 (s, 1H),8,35 (d, 2H),9,0(s,1H),13(s,1H).
LC-MS: 572 (M++1).
HPLC: 95,166% (0,1% TFA/ACN; kolonne: HypersilBDSC18 5u (4,6 x 50) mm).
Fremstilling av forbindelse G- 21
Trinn - 1
Natriumhydrid (0,1 g) i tørr DMF (2 mL) ble langsomt tilsatt en løsning av tert-butyl-4-(3-fenyl-1H-pyrazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat (0,5 g i 2 mL DMF) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 min ved 0°C og meget langsomt tilsatt en løsning av kloracetonitril (0,138 g) i DMF (1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble behandlet med kaldt vann (5 mL) og ekstrahert med etylacetat (3x40 mL). Fordampning av løsningsmiddel under redusert trykk ga et råprodukt, som ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av etylacetat/heksan (2:8) som elueringsmiddel for å gi tert-butyl-4-(1 -(cyanometyl)-3-fenyl-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin-1 -karboksylat som et rent fast produkt.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 5 1,48 (s, 9H), 2,90 (s, 4H), 3,53 - 3,55 (s, 4H), 5,05 (s, 2H), 7,26 - 7,44 (m, 5H), 7,99 (s, 1H).
LC-MS: 367 (M++1).
Trinn - 2
Til tert-butyl-4-(1 -(cyanometyl)-3-fenyl-1 H-pyrazol-4-yl)piperazin-1 - karboksylat (1 g) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuum fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-21-ln, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 2,90 (s, 4H), 3,53 - 3,55 (s, 4H), 5,05 (s, 2H), 7,26 - 7,44 (m, 5H), 7,99 (s, 1H).
LC-MS: 367 (M++1).
Trinn - 3
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,098 g), forbindelse G-21-ln (0,076 g), TBTU (0,116 g) og Hunigs base (0,1 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2SCMog konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/kloroform (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-21 som et hvitaktig faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 6 2,6 (s, 3H), 2,9 - 3,2 (d, 4H), 3,63 (s, 2H), 3,9 (s, 2H), 4,1 (s, 3H), 5,06 (s, 2H), 7,31-7,45 (m, 4H), 7,79 (s, 1H), 7,95 (d, 2H), 8,23 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 11,02 (s, 1H).
LCMS: 551,1 (M<+>+ 1).
HPLC: 95,7% (0,1% TFA/ACN; kolonne: Hypersil BDS C18, 4,6 x 50 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 22a og G- 22b
Fremstilling av mellomprodukt G- 22- ln
Trinn - 1
1,2,3-triazol (5 g), 2-brompyridin (8,5 mL) og kobberjodid (0,68 g) ble anbrakt i tørr DMF under nitrogenatmosfære. 1,2-(N,N-dimetyl)cykloheksyldiamin (1,02 g) og kaliumfosfat (30,73 g) ble tilsatt ovennevnte blanding. Reaksjonsblandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling ved 110°C natten over. TLC indikerte intet utgangsmateriale, og reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite. Filtratet ble fortynnet med vann og produktet ekstrahert med diklormetan. Det organiske lag ble inndampet og råproduktet renset ved kolonnekromatografi ved bruk av 60-120 silikagel og petroleter/etylacetat som elueringsmiddel for å gi forbindelsen 2-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)pyridin som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 7,47 (m, 1H), 8,0 (s, 1H), 8,13 (d, 2H), 8,6 (d, 2H), 8,84 (s, 1H).
LC-MS: 147 (M++1)
Trinn - 2
I en 100 mL trehalset rundkolbe ble 2-(1H-1,2,3-triazol-1-yl)pyridin (2 g) i tørr THF (2 mL) tilsatt under nitrogen, n-butyllitium (2,3 mL) ble tilsatt ved - 78°C og blandingen omrørt i 5 minutter, hvorpå brom (1,86 mL) dråpevis ble tilsatt til ovennevnte reaksjonsblanding. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78°C i 1 time. TLC indikerte intet utgangsmateriale, og reaksjonsblandingen ble behandlet med mettet ammoniumklorid (50 mL) og tilsatt etylacetat. Det organiske lag ble vasket med natriumbisulfat og saltvann, tørket og konsentrert. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av petroleter/etylacetat som elueringsmiddel for å gi forbindelsen 2-(5-brom-1H-1,2,3-triazol-1-yl)pyridin som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 7,68 (m, 1H), 7,86 (m, 1H), 8,1 (s, 1H), 8,15 (m, 1H), 8,7 (m, 1H).
LC-MS: 226 (M++1).
Trinn - 3
En 100 mL enhalset rundkolbe ble tilsatt 2-(5-brom-1H-1,2,3-triazol-1-yl)pyridin (1,5 g), piperazin (2,8 g) og natrium-tert-butoksyd (0,56 g) i tørr toluen (20 mL) og avgasset i 20 min. Deretter ble Pd(dba)2(0,3 g), BiNAP (0,41 g) tilsatt og blandingen på nytt avgasset i 10 min. Reaksjonsblandingen ble kokt under tilbakeløpskjøling ved 107°C natten over. TLC indikerte intet utgangsmateriale. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 25 mL vann og ekstrahert med diklormetan. Det organiske lag ble fraskilt og konsentrert. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av 60-120 silikagel og 6% metanol/kloroform som elueringsmiddel for å gi forbindelsen G-22-ln som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 2,6-2,87 (d, 8H), 7,41 (s, 1H), 7,5-7,6 (m, 1H), 7,73(d, 1H), 8,0 (m, 1H), 8,64 (d, 1H).
LC-MS: 231(M++1).
Fremstilling av G- 22a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,119 g), forbindelse G-22-ln (0,1 g), BOP-reagens (0,19 g) og Hunigs base (0,22 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/kloroform (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-22a som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,96-2,98 (t, 2H), 3,11 (t, 2H), 3,37-3,46 (t, 2H), 3,68-3,71 (t, 2H), 7,52 (s,1H), 7,58 (d,1H), 7,8 (d, 1H), 8,1 (t, 2H), 8,31-8,36 (d,2H), 8,65 (t, 1H), 9,0 (s, 1H), 13 (s, 1H).
LC-MS: 487(M++1).
HPLC: 84,9% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av G- 22b
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,12 g), forbindelse G-22-ln (0,1 g), BOP-reagens (0,19 g) og Hunigs base (0,22 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/kloroform (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-22b som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 2,5 (s, 3H), 2,96-2,98 (t, 2H), 3,11 (t, 2H), 3,37-3,46 (t, 2H), 3,68-3,71 (t, 2H), 4,0 (s, 1H), 7,52 (s,1H), 7,58 (m,1H), 7,8 (d, 1H), 7,88 (s, 1H) 8,1 (t, 1H), 8,31-8,36 (d,1H), 8,65 (d, 1H), 9,23 (s, 1H). LC-MS: 513(M++1).
HPLC: 96,9% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av forbindelse G- 23
Trinn - 1
Natriumhydrid (0,02 g) i tørr DMF (5 mL) ble langsomt tilsatt en løsning av tert-butyl-4-(5-fenyl-1 H-1,2,3-triazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat (0,015 g i 5 mL DMF) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 min ved 0°C, hvorpå metyljodid (0,13 g) ble tilsatt meget langsomt. Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble behandlet med kaldt vann (5 mL) og ekstrahert med etylacetat (3x40 mL). Fordampning av løsningsmiddel under redusert trykk ga et råprodukt, som ble renset ved kolonnekromatografi ved bruk av 60-120 silikagel metanol/diklormetan (1:9) som elueringsmiddel for å gi tert-butyl-4-(2-metyl-5-fenyl-1 H-1,2,3-triazol-4-yl)piperazin-1 -karboksylat.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 1,4 (s, 9H), 2,92 (d, 4H), 3,43 (m, 5H), 4,05 (m, 2H), 7,33 (m, 1H), 7,45 (t, 2H), 7,85 (d, 2H).
LCMS: 345,1 (M<+>+ 1).
Trinn - 2
Til tert-butyl-4-(2-metyl-5-fenyl-1 H-1,2,3-triazol-4-yl)piperazin-1 -karboksylat (500 mg) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuum fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-23-ln, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 2,92 (d, 4H), 3,23 (m, 5H), 4,05 (m, 2H), 7,33 (m, 1H),7,45 (t, 2H), 7,85 (d, 2H).
LCMS: 245,1 (M<+>+ 1).
Trinn - 3
Til en omrørt løsning av2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (100 mg) i tørr DMF (5 mL) ble det tilsatt G-23-ln (0,076 g), TBTU (0,117 g) og DIPEA (0,1 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonen ble avbrutt med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOsog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert ved bruk av rotasjonsfordamper. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/diklormetan (2:8) som elueringsmiddel for å gi G-23 som et amorft faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 2,5 (s, 3H), 2,98-3,0 (t, 2H), 3,0-3,10 (t, 2H), 3,5-3,53 (t, 2H),3,73-3,79 (t, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,07 (s, 3H), 7,33 (m, 1H), 7,45 (t, 2H), 7,85 (d, 2H), 7,9 (s, 1H),8,23 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 12,42 (s, 1H).
LCMS: 527 (M<+>+ 1).
HPLC: 95% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av forbindelse G- 24a og G- 24b
Fremstilling av mellomprodukt G- 24- ln
Trinn - 1
Til en omrørt løsning av N-Boc-piperazin (5 g) i tørr diklormetan (100 mL) ble det dråpevis tilsatt trietylamin (10 mL) etterfulgt av kloracetonitril (25,02 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Løsningsmidlet ble fjernet under vakuum og residuet fortynnet med diklormetan (200 mL). Det organiske lag ble vasket med vann og saltvann og konsentrert til tørrhet under redusert trykk for å gi tert-butyl-4-(cyanometyl)piperazin-1 -karboksylat, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 1,47 (s, 9H), 2,55 (t, 4H), 3,49 (t, 4H), 3,55 (s, 2H). GC MS: 225
Trinn - 2
I en 100 mL trehalset rundkolbe ble mellomprodukt tert-butyl-4-(cyano-metyl)piperazin-1 -karboksylat (7 g) anbrakt i tørr THF (125 mL) under nitrogen. Litium-bis-trimetylsilylamid (10,8 g) ble tilsatt dråpevis ved - 78°C og blandingen omrørt i 1 time, hvorpå dietylklorfosfat (5,84 g) i 5 mL tørr THF ble tilsatt dråpevis til ovennevnte reaksjonsblanding. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78°C i 1 time. TLC indikerte intet utgangsmateriale, og reaksjonsblandingen ble behandlet med mettet ammoniumklorid (250 mL) og tilsatt etylacetat. Det organiske lag ble vasket med saltvann, tørket og konsentrert. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av 230-400 silikagel 2,5% metanol/kloroform som elueringsmiddel for å gi forbindelse tert-butyl-4-(cyano(dietoksyfosforyl)metyl)-piperazin-1-karboksylat som en gul væske.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 6 1,37 (t, 6H), 1,47 (s, 9H), 2,55 (t, 2H), 3,0 (t, 2H), 3,55 (m, 4H), 3,87-3,93 (d, 1H), 4,3 (q, 4H).
LCMS: 262 (M+-101).
Trinn - 3
I en 100 mL trehalset rundkolbe ble mellomprodukt tert-butyl-4-(cyano(dietoksyfosforyl)metyl)piperazin-1-karboksylat (5,5 g) anbrakt i tørr THF (25 mL) under nitrogen. Natrium-bis-trimetylsilylamid (3,3 g) ble tilsatt dråpevis ved 0°C og blandingen omrørt i 30 min, hvorpå pyridin-2-karboksaldehyd (1,67 g) i 15 mL tørr THF dråpevis ble tilsatt til ovennevnte reaksjonsblanding ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. TLC indikerte intet utgangsmateriale, og reaksjonsblandingen ble behandlet med mettet ammoniumklorid (50 mL) og tilsatt etylacetat. Det organiske lag ble vasket med saltvann, tørket og konsentrert til et råprodukt, forbindelsen tert-butyl-4-(1-cyano-2-(pyridin-2-yl)vinyl)piperazin-1 -karboksylat som en gul væske.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 6 1,47 (s, 9H), 3,10-3,2 (t, 4H), 3,55 (t, 4H), 6,24 (s, 1H), 7,14 (m, 1H), 7,55-7,67 (m, 2H), 8,58-8,6 (d, 1H).
LCMS: 315(M++1).
Trinn - 4
Til en omrørt løsning av tert-butyl-4-(1-cyano-2-(pyridin-2-yl)vinyl)piperazin-1-karboksylat (2,5 g) og natriumazid (0,4 g) i tørr DMSO (4 mL) ble oppvarmet til 110°C natten over. Reaksjonsblandingen ble forsiktig behandlet med vann (10 mL), hvorpå reaksjonsblandingen ble ekstrahert med diklormetan (3x10 mL). De samlede organiske lag ble vasket med saltvann (10 mL), tørket over natriumsulfat og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuum ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol:kloroform (1:9) som elueringsmiddel for å gi tert-butyl-4-(5-(pyridin-2-yl)-1 H-1,2,3-triazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 5 1,49 (s, 9H), 3,17-3,2 (t, 4H), 3,65 (t, 4H), 7,44 (m, 1H), 8,0 (m, 1H), 8,1 (d, 1H), 8,88 (d, 1H).
LCMS: 331 (M<+>+1).
Trinn - 5
Til tert-butyl-4-(5-(pyridin-2-yl)-1 H-1,2,3-triazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat (500 mg) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuum fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-24-ln, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 3,17-3,2 (t, 4H), 3,45 (t, 4H), 7,44 (m, 1H), 8,0 (d, 2H), 8,65 (d, 1H), 8,88 (bs, 1H).
LCMS: 231 (M<+>+1).
Fremstilling av G- 24a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (95 mg), forbindelse G-24-ln (100 mg), BOP-reagens (0,16 mg) og Hunigs base (0,2 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av diklormetan/metanol (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-24a som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 3,17-3,2 (t, 4H), 3,55 (t, 2H), 3,8 (t, 2H), 7,44 (m, 1H), 7,9-8,0 (m, 2H), 8,15 (s, 1H), 8,33-8,36 (d, 2H),8,5 (m, 1H),9 (s, 1H), 13 (bs,1H), 14,48 (s, 1H).
LCMS: 488,8 (M<+>+1).
HPLC: 90,4% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av G- 24b
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (95 mg), forbindelse G-24-ln (100 mg), BOP-reagens (0,16 mg) og Hunigs base (0,2 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOsog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av diklormetan/metanol (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-24b som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,55 (s, 3H), 3,17-3,2 (t, 4H), 3,55 (t, 2H), 3,8 (t, 2H), 4 (s, 3H), 7,31 (m, 1H), 7,9-8,0 (m, 3H), 8,25 (s, 1H), 8,63 (d, 1H), 9,24 (s, 1H), 12,4 (bs,1H), 14,48 (s, 1H).
LCMS: 512,8 (M<+>+1).
HPLC: 98,0% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av forbindelse G- 25a og G- 25b
Fremstilling av mellomprodukt G- 25- ln
Trinn - 1
I en 100 mL trehalset rundkolbe ble tert-butyl-4-(cyano(dietoksy-fosforyl)metyl)piperazin-1-karboksylat (5,0 g) anbrakt i tørr THF (25 mL) under nitrogen. Natrium-bis-trimetylsilylamid (3,0 g) ble dråpevis tilsatt ved 0°C og blandingen omrørt i 30 min, hvorpå tiazol-2-karboksaldehyd (1,60 g) i 15 mL tørr THF dråpevis ble tilsatt til ovennevnte reaksjonsblanding ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. TLC indikerte intet utgangsmateriale, og reaksjonsblandingen ble behandlet med mettet ammoniumklorid (50 mL) og tilsatt etylacetat. Det organiske lag ble vasket med saltvann og tørket og konsentrert til et råprodukt tert-butyl-4-(1-cyano-2-(tiazol-2-yl)vinyl)-piperazin-1-karboksylat som en gul væske.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 1,49 (s, 9H), 3,33 (t, 4H), 3,55 (m, 4H), 6,8 (s, 1H), 7,31(s, 1H), 7,82 (s, 1H).
LCMS: 321 (M<+>+1).
Trinn - 2
En omrørt løsning av tert-butyl-4-(1-cyano-2-(tiazol-2-yl)vinyl)piperazin-1-karboksylat (2,25 g) og natriumazid (0,4 g) i tørr DMSO (4 mL) ble oppvarmet til 110°C natten over. Reaksjonsblandingen ble forsiktig behandlet med vann (10 mL) og ekstrahert med diklormetan (3x10 mL). De samlede organiske lag ble vasket med saltvann (10 mL), tørket over natriumsulfat og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende residuum ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol:kloroform (1:9) som elueringsmiddel for å gi tert-butyl-4-(5-(tiazol-2-yl)-1 H-1,2,3-triazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 1,55 (s, 9H), 3,33 (t, 4H), 3,68 (m, 4H), 7,45(s, 1H), 7,98 (s, 1H).
LCMS: 335,7 (M<+>+1).
Trinn - 5
Til tert-butyl-4-(5-(tiazol-2-yl)-1 H-1,2,3-triazol-4-yl)piperazin-1-karboksylat (500 mg) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuum fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHCO3(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-25-ln, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 6 3,33 (t, 4H), 3,68 (m, 4H), 7,45(s, 1H), 7,98 (s, 1H). LCMS: 237 (M<+>+1).
Fremstilling av G- 25a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (95 mg), forbindelse G-25-ln (100 mg), BOP-reagens (0,16 mg) og Hunigs base (0,2 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHC03og saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av diklormetan/metanol (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-25a som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 3,47-3,56 (dd, 6H), 3,8 (t, 2H), 7,7-7,9 (s, 2H), 8,15 (s, 1H), 8,33-8,36 (d, 2H), 9 (s, 1H), 13 (bs, 1H), 14,7 (s, 1H). LCMS: 492 (M+-1).
HPLC: 86,6% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av G- 25b
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (95 mg), forbindelse G-25-ln (100 mg), BOP-reagens (0,16 mg)
og Hunigs base (0,2 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av diklormetan/metanol (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-25b som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,5 (s, 3H), 3,37-3,46 (m, 2H), 3,5 (m, 4H), 3,8 (t, 2H), 3,99 (s, 3H), 7,7 (s, 1H), 7,9 (s, 2H), 8,25 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 12,4 (bs, 1H), 14,7 (s, 1H).
LCMS: 518,6 (M<+->1).
HPLC: 91,2% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av forbindelse G- 26a og G- 26b
Fremstilling av mellomprodukt G- 26- ln
Trinn - 1
Til en omrørt løsning av fenylhydrazin (3 g) i absolutt alkohol (30 mL) ble det langsomt tilsatt dimetyl-N-cyanoditiokarbonat (4 g) under nitrogenatmosfære. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 80°C i to timer. Reaksjonsutviklingen ble overvåket ved TLC. Etter at utgangsmaterialet var forbrukt ble flyktige forbindelser fjernet fra reaksjonsblandingen under redusert trykk. Det resulterende residuum ble omkrystallisert fra petroleter for å gi 3-(metyltio)-1-fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-amin som et gult faststoff. Det oppnådde faststoff ble benyttet i det neste trinn uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,50 (s, 3H), 6,54 (s, 2H), 7,33 - 7,53 (m, 5H). LCMS: 206,7 (M<+>+ 1).
Trinn - 2
Natriumhydrid (4,7 g) i tørr DMF (100 mL) ble langsomt tilsatt en løsning av forbindelse 3-(metyltio)-1 -fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-amin (4 g i 10 mL DMF) ved 0°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 30 min ved 0°C og meget langsomt tilsatt en løsning av bis-(2-kloretyl)amin-hydroklorid (4,15 g) i tørr DMF (20 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt natten over ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble behandlet med kaldt vann (5 mL) og ekstrahert med etylacetat (3x40 mL). Fordampning av løsningsmiddel under redusert trykk ga et råprodukt, som ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/diklormetan (1:9) som elueringsmiddel for å gi 1-(3-(metyltio)-1-fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-yl)piperazin, G-26-ln som en brun olje.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,50 (s, 3H), 2,54 - 2,72 (m, 4H), 2,82 - 3,37 (m, 4H), 7,38-7,60 (m, 5H).
LCMS: 275,9 (M<+>+ 1).
Fremstilling av G- 26a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,1 g), amin G-26-ln (0,09 g), TBTU (0,128 g) og Hunigs base (0,15 mL) ble kombinert i tørr DMF (5 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk.
Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/diklormetan (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-26a.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 2,54 (s, 3H), 3,0 (m, 2H), 3,08 (m, 2H), 3,38 (m, 2H), 3,69 (m, 2H), 7,38 - 7,66 (m, 5H), 8,12 (s, 1H), 8,31 (d, 2H), 9,01 (s, 1H). LCMS: 532,9 (M<+>+ 1).
HPLC: 97,66% (0,1% TFA/ACN; kolonne: C18 BDS, 250 x 4,6 mm).
Fremstilling av G- 26b
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1H-1,2,4-triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,1 g), amin G-26-ln (0,09 g), TBTU (0,11 g) og Hunigs base (0,15 mL) ble kombinert i tørr DMF (5 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOaog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/diklormetan (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-26b.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 2,48 (s, 3H), 2,50 (s, 3H), 3,08 (m, 2H), 3,20 (m, 2H), 3,42 (m, 2H), 3,67 (m, 2H), 3,98 (s, 3H), 7,39 - 7,67 (m, 5H), 7,88 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 9,23 (s, 1H).
LCMS: 559,0 (M++ 1).
HPLC: 99,71% (0,1% TFA/ACN; kolonne: C18 BDS, 50 x 4,6 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 27a og G- 27b
Fremstilling av mellomprodukt G- 27- ln
Til en omrørt løsning av Raney-nikkel (2 g) i tørr THF (10 mL) ble det langsomt tilsatt forbindelse 1 -(3-(metyltio)-1 -fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-yl)piperazin (1 g) i tørr THF (10 mL) under nitrogenatmosfære. Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpskokt ved 70°C i tre timer. Reaksjonsutviklingen ble overvåket ved TLC. Etter at utgangsmaterialet var forbrukt ble katalysatoren fjernet ved filtrering ved bruk av metanol (10x2 mL). Filtratet ble konsentrert for å fjerne flyktige forbindelser. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi metanol/diklormetan (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-27-ln som en fargeløs væske.
<1>H NMR (400 MHz, CDaOD): 8 2,84 - 2,87 (t, 4H), 3,11 - 3,13 (t, 4H), 7,45 - 7,79 (m,5H), 7,92 (s, 1H).
LCMS: 229,9 (M++ 1).
Fremstilling av G- 27a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,1 g), amin G-27-ln (0,08 g), TBTU (0,12 g) og Hunigs base (0,15 mL) ble kombinert i tørr DMF (5 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/diklormetan (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-27a.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 3,07 (m, 2H), 3,20 (m, 2H), 3,48 (m, 2H), 3,71 (m, 2H), 7,40 - 7,83 (m, 5H), 8,12 (s, 1H), 8,31 (s, 2H), 8,35 (s, 1H), 9,01 (s, 1H), 13,01 (bs, 1H).
LCMS: 487,1 (M++ 1).
HPLC: 94,16% (0,1% TFA/ACN; kolonne: C18 BDS, 250 x 4,6 mm).
Fremstilling av G- 27b
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (0,1 g), amin G-27-ln (0,076 g), TBTU (0,11 g) og Hunigs base (0,15 mL) ble kombinert i tørr DMF (5 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCChog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av metanol/diklormetan (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-27b.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,50 (s, 3H), 3,09 (m, 2H), 3,20 (m, 2H), 3,43 (m, 2H), 3,67 (m, 2H), 3,98 (s, 3H), 7,40 - 7,57 (m, 5H), 7,84 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 9,24 (s, 1H), 12,39 (bs, 1H).
LCMS: 513,1 (M++ 1).
HPLC: 99,01% (0,1% TFA/ACN; kolonne: C18 BDS, 250 x 4,6 mm).
Fremstilling av forbindelse G- 28a og G- 28b
Fremstilling av mellomprodukt G- 28- ln
Trinn - 1
Til en omrørt løsning av G-26-ln (5 g) i diklormetan (10 mL) ble det tilsatt trietylamin (7,6 mL) inntil løsningen var basisk. Denne basiske reaksjonsblandingen ble tilsatt Boc-anhydrid (4,8 g) og blandingen omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble behandlet med vann (20 mL) og ekstrahert med diklormetan (3x10 mL). De samlede organiske lag ble tørket over Na2S04 og konsentrert til tørrhet for å gi tert-butyl-4-(3-(metyltio)-1 -fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-yl)piperazin-1-karboksylat (6 g) som et hvitt faststoff, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 1,49 (s, 9H), 2,50 (s, 3H), 2,54 - 2,72 (m, 4H), 2,82 - 3,37 (m, 4H), 7,38 - 7,60 (m, 5H).
LC-MS: 378 (M++ 1).
Trinn - 2
Til en omrørt løsning av tert-butyl-4-(3-(metyltio)-1 -fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-yl)piperazin-1 -karboksylat (3 g) i diklormetan (25 mL) ble det tilsatt m-klorperbenzoesyre (5,5 g) og blandingen omrørt ved romtemperatur natten over. Reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite og Celite-laget vasket med kloroform (3x10 mL). De samlede organiske lag ble vasket med mettet natriumbikarbonat-løsning og saltvann og konsentrert til tørrhet til et råprodukt tert-butyl-4-(3-(metylsulfonyl)-1 -fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-yl)piperazin-1 -karboksylat. Dette ble kolonnekromatografert ved anvendelse av 60-120 silikagel og 1,0% metanol/ kloroform som elueringsmiddel for å gi den rene forbindelse tert-butyl-4-(3-(metylsulfonyl)-l-fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-yl)piperazin-1-karboksylat som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 1,49 (s, 9H), 3,1 (t, 4H), 3,31-3,36 (m, 7H), 7,38 -7,60 (m, 5H).
LC-MS: 411 (M++ 1).
Trinn - 3
Til tert-butyl-4-(3-(metylsulfonyl)-1 -fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-yl)piperazin-1 - karboksylat (500 mg) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuum fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHC03(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga det ønskede amin G-28-ln, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 3,1 (t, 4H), 3,31-3,36 (m, 4H), 3,4-3,5 (s, 3H), 7,38-7,60 (m, 5H).
LC-MS: 310(M++ 1).
Fremstilling av G- 28a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (60 mg), forbindelse G-28-ln (80 mg), BOP-reagens (0,1 g) og Hunigs base (0,2 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHC03og saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av diklormetan/metanol (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-28a som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 3,15 (t, 2H), 3,28 (t, 2H), 3,3 (s, 3H), 3,48 (t, 2H), 3,69 (t, 2H), 7,5 (m, 1H), 7,53 (m, 2H), 7,71 (d, 2H), 8,12 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 9,01 (s, 1H),13,07 (s, 1H).
LC-MS: 565 (M++ 1).
HPLC: 95,2% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av G- 28b
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (75 mg), forbindelse G-28-ln (80 mg), BOP-reagens (0,1 g) og Hunigs base (0,2 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOsog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av diklormetan/metanol (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-28b som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,5 (s, 3H), 3,15 (t, 2H), 3,28 (t, 2H), 3,3 (s, 3H), 3,48 (t, 2H), 3,69 (t, 2H), 3,97 (s, 3H), 7,5 (m, 1H), 7,53 (m, 2H), 7,61 (d, 2H), 7,88 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 9,21 (s, 1H),12,4 (s, 1H).
LC-MS: 591 (M++ 1).
HPLC: 96,0% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av forbindelse G- 29a og G- 29b
Fremstilling av mellomprodukt G- 29- ln
Trinn - 1
Tørr metanol (10 mL) ble anbrakt i en ren og tørr trehalset rundkolbe forsynt med tilbakeløpskjøler, rørestav og et nitrogeninnløp. Natriummetall (564 mg) ble tilsatt porsjonsvis til ovennevnte reaksjonsblanding ved romtemperatur. Etter fullstendig oppløsning av natriummetall, ble tert-butyl-4-(3-(metylsulfonyl)-1-fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-yl)piperazin-1-karboksylat (1,0 g) i 5 mL metanol tilsatt og reaksjonsblandingen oppvarmet til 60°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 60°C natten over. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og langsomt behandlet med is. Produktet ble ekstrahert med etylacetat og det organiske lag vasket med vann og saltvann, tørket og konsentrert til et rent tert-butyl-4-(3-metoksy-1 -fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-yl)piperazin-1 -karboksylat som et hvitaktig faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 1,49 (s, 9H), 3,0 (t, 4H), 3,3 (m, 4H), 4,0 (s, 3H), 7,38-7,60 (m, 5H).
LC-MS: 360 (M++ 1).
Trinn - 2
Til tert-butyl-4-(3-metoksy-1 -fenyl-1 H-1,2,4-triazol-5-yl)piperazin-1-karboksylat (500 mg) løst i tørr diklormetan (10 mL) ble det tilsatt TFA (5 mL) ved 0°C. Reaksjonsblandingen fikk anta romtemperatur og ble omrørt over natten. Flyktige forbindelser ble fjernet fullstendig og det resulterende residuum fortynnet med diklormetan (20 mL). Det organiske lag ble vasket med mettet NaHC03(2x10 mL) og saltvann og tørket over Na2S04. Fordampning av løsningsmiddel ga den ønskede aminforbindelse G-29-ln, som ble benyttet i den neste reaksjon uten videre rensing.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 3,0 (t, 4H), 3,3 (m, 4H), 4,0 (s, 3H), 7,38 - 7,60 (m, 5H).
LC-MS: 259 (M++ 1).
Fremstilling av G- 29a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (95 mg), forbindelse G-29-ln (100 mg), BOP-reagens (0,16 mg) og Hunigs base (0,2 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOsog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av diklormetan/metanol (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-29a som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 3,08 (t, 2H), 3,2 (t, 2H), 3,46 (t, 2H), 3,68 (t, 2H), 3,83 (s, 3H), 7,36 (m, 1H), 7,48 (m, 2H), 7,65 (m, 2H),8,11 (s, 1H), 8,3 (s, 1H), 8,35 (s, 1H),9,01 (s, 1H), 13,06 (s, 1H).
LC-MS: 517 (M++ 1).
HPLC: 97,4% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av G- 29b
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (116 mg), forbindelse G-29-ln (100 mg), BOP-reagens (0,176 mg) og Hunigs base (0,2 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet
med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHC03og saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av diklormetan/metanol (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-29b som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,48 (s, 3H), 3,08 (t, 2H), 3,2 (t, 2H), 3,46 (t, 2H), 3,68 (t, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,98 (s, 3H), 7,36 (m, 1H), 7,48 (m, 2H), 7,65 (m, 2H),7,88 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 9,23 (s, 1H).
LC-MS: 543 (M++ 1).
HPLC: 97,1% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av forbindelse G- 30a og G- 30b
Fremstilling av mellomprodukt G- 30- ln
Trinn - 1
1,2,3-triazol (5 g), jodbenzen (9,72 mL) og kobberjodid (0,68 g) ble anbrakt i tørr DMF under nitrogenatmosfære. 1,2-(N,N-dimetyl)cykloheksyldiamin (1,02 g) og kaliumfosfat (30,73 g) ble tilsatt til ovennevnte blanding. Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpsbehandlet ved 110°C natten over. TLC indikerte intet utgangsmateriale, og reaksjonsblandingen ble filtrert gjennom Celite. Filtratet ble fortynnet med vann og produktet ekstrahert med diklormetan. Det organiske lag ble inndampet og råproduktet renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av 60-120 silikagel og petroleter/etylacetat som elueringsmiddel for å gi 1-fenyl-1 H-1,2,3-triazol som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 8 7,47 (m, 1H), 7,5-7,6 (m, 2H), 7,9 (d, 2H), 7,98 (s, 1H), 8,84 (s, 1H).
LC-MS: 145,6 (M<+>+1).
Trinn - 2
I en 100 mL trehalset rundkolbe ble det tilsatt 1-fenyl-1 H-1,2,3-triazol (1,2 g) i tørr THF (25 mL) under nitrogen, n-butyllitium (3,36 mL) ble tilsatt ved - 78°C og blandingen omrørt i 5 minutter, hvorpå brom (3,76 mL) dråpevis ble tilsatt til ovennevnte reaksjonsblanding. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved -78°C i 1 time. TLC indikerte intet utgangsmateriale, og reaksjonsblandingen ble behandlet med mettet ammoniumklorid (50 mL) og tilsatt etylacetat. Det organiske lag ble vasket med natriumbisulfat og saltvann, tørket og konsentrert. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av petroleter/etylacetat som elueringsmiddel for å gi 5-brom-1 -fenyl-1 H-1,2,3-triazol som et gult faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCIa): 5 7,47 (m, 1H), 7,5-7,6 (m, 2H), 7,9 (d, 2H), 8,05 (s, 1H).
LC-MS: 225 (M++1).
Trinn - 3
I en 100 mL énhalset rundkolbe ble det tilsatt 5-brom-1 -fenyl-1 H-1,2,3-triazol (0,6 g), piperazin (1,11 g) og natrium-tert-butoksyd (0,38 g) i tørr toluen (20 mL) og blandingen avgasset i 20 min. Deretter ble Pd(dba)2(0,11 g) og BiNAP (0,16 g) tilsatt og blandingen på nytt avgasset i 10 min. Reaksjonsblandingen ble tilbakeløpsbehandlet ved 107°C natten over. TLC indikerte intet utgangsmateriale. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 25 mL vann og ekstrahert med diklormetan. Det organiske lag ble fraskilt og konsentrert. Råproduktet ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av 60-120 silikagel og 6% metanol/kloroform som elueringsmiddel for å gi forbindelse G-30-ln som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, CDCI3): 5 2,5-2,72 (d, 8H), 7,41 (s, 1H), 7,5-7,6 (m, 3H), 7,73(d, 2H).
LC-MS: 230 (M++1).
Fremstilling av G- 30a
2-(4-fluor-7-(1 H-1,2,3-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (60 mg), forbindelse G-30-ln (50 mg), BOP-reagens (0,094 g) og Hunigs base (0,2 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCOsog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-30a som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 6 2,86-2,88 (t, 3H), 2,97-2,99 (t, 3H), 3,45-3,38 (t, 3H), 3,67-3,7 (t, 3H), 7,52 (s, 2H), 7,6 (m, 2H), 7,78 (m, 2H), 8,12 (s, 1H), 8,3-8,35 (d,2H), 9,0 (s, 1H), 13,0 (s, 1H).
LC-MS: 487 (M++1).
HPLC: 96,4% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Fremstilling av G- 30b
2-(4-metoksy-7-(3-metyl-1 H-1,2,4-triazol-1-yl)-1 H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)-2-oksoeddiksyre (60 mg), forbindelse G-30-ln (50 mg), BOP-reagens (0,094 g) og Hunigs base (0,2 mL) ble kombinert i tørr DMF (4 mL). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur natten over. Blandingen ble behandlet med metanol (10 mL) og flyktige forbindelser fjernet under redusert trykk. Den resulterende olje
ble fortynnet med etylacetat (50 mL) og vasket med 10% NaHCCteog saltvann. Det organiske lag ble tørket over vannfritt Na2S04og konsentrert under redusert trykk. Det resulterende råprodukt ble renset ved kolonnekromatografi ved anvendelse av MeOH/CHCb (1:9) som elueringsmiddel for å gi G-30b som et hvitt faststoff.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-de): 8 2,5 (s, 3H), 2,86-2,88 (t, 2H), 2,95-2,98 (t, 2H), 3,4-3,42 (t, 2H), 3,65-3,67 (t, 2H), 3,97 (s, 3H), 7,52 (s, 2H), 7,6 (m, 2H), 7,76-7,78 (d, 2H), 7,89 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 9,24 (s, 1H),12,4 (s, 1H).
LC-MS: 513(M++1).
HPLC: 97,7% (0,1% H3PO4/ACN; kolonne: YMC-PACK ODS-AQ (4,6x250) mm).
Biologi
• "nM" betyr mikromolar; • "mL" betyr milliliter; • "nL" betyr mikroliter;
• "mg" betyr milligram.
Materialene og de eksperimentelle prosedyrene som er benyttet for å oppnå resultatene angitt i Tabell 3-4 er beskrevet nedenfor.
Celler:
• Virusfremstilling - Den humane embryoniske nyrecellelinje, 293T, ble formert i Dulbecco's Modified Eagle Medium (Invitrogen, Carlsbad, CA) inneholdende
10% føtalt bovint serum (FBS, Sigma, St. Louis, MO).
• Virusinfeksjon - Den humane epitelcellelinje, HeLa, som uttrykker HIV-1 - reseptoren CD4 ble formert i Dulbecco's Modified Eagle Medium (Invitrogen, Carlsbad, CA) inneholdende 10% føtalt bovint serum (FBS, Sigma, St. Louis, MO) og supplert med 0,2 mg/mL Geneticin (Invitrogen, Carlsbad, CA).
Virus - Enkeltrunde infeksiøse rapportørvirus ble fremstilt ved co-transfektering av humane embryoniske nyre-293-celler med en HIV-1 envelope DNA-ekspresjons-vektor og et proviralt cDNA inneholdende en envelope-delesjonsmutasjon, og luciferase-rapportørgenet innsatt i stedet for HIV-1 nef-sekvenser (Chen et al., Ref. 41). Transfeksjoner ble foretatt ved bruk av NpofectAMINE PLUS reagens som beskrevet av produsenten (Invitrogen, Carlsbad, CA).
Eksperiment
1. HeLa CD4-celler ble utplatet i 96 brønns plater i en celletetthet på 1 X 10<4>celler per brønn i 100 (j.L Dulbecco's Modified Eagle Medium inneholdende
10% føtalt bovint serum og inkubert natten over.
2. Forbindelsen ble tilsatt til en 2 nL dimetylsulfoksyd-løsning, slik at den endelige testkonsentrasjon ble <10 nM. 3. 100 nl<_>enkeltrunde infeksiøse rapportørvirus i Dulbecco's Modified Eagle Medium ble deretter tilsatt til de utplatede celler og dyrket til en omtrentlig infeksjonsmultiplisitet (MOI) på 0,01 for å gi et endelig volum på 200 nl_ per brønn. 4. Virusinfiserte celler ble inkubert ved 37°C i et C02-varmeskap og høstet 72 timer etter infeksjon. 5. Virusinfeksjon ble overvåket ved å måle luciferase-ekspresjon fra viral DNA i de infiserte celler ved å benytte et testsett for luciferaserapportør-gen, som beskrevet av produsenten (Roche Molecular Biochemicals, Indianapolis, IN). Infiserte cellesupernatanter ble fjernet og 50 jxl_ lyseringsbuffer tilsatt per brønn. Etter 15 minutter ble 50 nl_ friskt rekonstituert luciferase-testreagens tilsatt per brønn. Luciferaseaktivitet ble deretter kvantifisert ved å måle luminescens i en Wallac mikrobeta-scintillasjonsteller. 6. Prosent inhiberng for hver forbindelse ble beregnet ved å kvantifisere nivået av luciferase-ekspresjon i celler infisert i nærvær av hver forbindelse som en prosentdel av den observert for celler infisert i fravær av forbindelse og ved å subtrahere den således bestemte verdi fra 100. 7. En ECso-verdi gir en fremgangsmåte for sammenligning av den antivirale styrke av forbindelsene ifølge denne beskrivelsen. Den effektive konsentrasjon for femti prosent inhibering (ECso) ble beregnet ved hjelp av Microsoft Excel X1fit kurvetilpasnings-programmet. For hver forbindelse ble kurver frem brakt fra prosent inhibering beregnet ved 10 forskjellige konsentrasjoner ved å benytte en fire-parameters logistikkmodell (modell 205). ECso data for forbindelsene er vist i Tabell 4. Tabell 3 utgjør nøkkelen for dataene i Tabell 4.
Resultater
NO20084257A 2006-04-25 2008-10-10 Diketo-piperazin- og –piperidinderivater, farmasøytiske blandinger omfattende slike, slike blandinger omfattende ytterligere anti-HIV midler og slike blandinger for behandling av sykdom NO341412B1 (no)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US79470306P 2006-04-25 2006-04-25
US79470006P 2006-04-25 2006-04-25
US11/733,283 US7807671B2 (en) 2006-04-25 2007-04-10 Diketo-piperazine and piperidine derivatives as antiviral agents
PCT/US2007/066700 WO2007127635A2 (en) 2006-04-25 2007-04-16 Diketo-piperazine and piperidine derivatives as antiviral agents

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20084257L NO20084257L (no) 2008-11-19
NO341412B1 true NO341412B1 (no) 2017-10-30

Family

ID=38335673

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20084257A NO341412B1 (no) 2006-04-25 2008-10-10 Diketo-piperazin- og –piperidinderivater, farmasøytiske blandinger omfattende slike, slike blandinger omfattende ytterligere anti-HIV midler og slike blandinger for behandling av sykdom

Country Status (17)

Country Link
US (2) US7807671B2 (no)
EP (1) EP2010525B1 (no)
JP (1) JP5214590B2 (no)
KR (1) KR101450349B1 (no)
AR (1) AR060658A1 (no)
AU (1) AU2007242989B2 (no)
BR (1) BRPI0710919A2 (no)
CA (1) CA2650382C (no)
EA (1) EA014957B1 (no)
ES (1) ES2432758T3 (no)
IL (1) IL194540A (no)
MX (1) MX2008013265A (no)
NO (1) NO341412B1 (no)
NZ (1) NZ571995A (no)
PE (1) PE20080318A1 (no)
TW (1) TWI394754B (no)
WO (1) WO2007127635A2 (no)

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040110785A1 (en) * 2001-02-02 2004-06-10 Tao Wang Composition and antiviral activity of substituted azaindoleoxoacetic piperazine derivatives
US20050075364A1 (en) * 2003-07-01 2005-04-07 Kap-Sun Yeung Indole, azaindole and related heterocyclic N-substituted piperazine derivatives
US20060100209A1 (en) * 2004-11-09 2006-05-11 Chong-Hui Gu Formulations of 1-(4-benzoyl-piperazin-1-yl)-2-[4-methoxy-7-(3-methyl-[1,2,4]triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl]-ethane-1,2-dione
US20060100432A1 (en) * 2004-11-09 2006-05-11 Matiskella John D Crystalline materials of 1-(4-benzoyl-piperazin-1-yl)-2-[4-methoxy-7-(3-methyl-[1,2,4]triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl]-ethane-1,2-dione
US7851476B2 (en) * 2005-12-14 2010-12-14 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of 1-benzoyl-4-[2-[4-methoxy-7-(3-methyl-1H-1,2,4-triazol-1-YL)-1-[(phosphonooxy)methyl]-1H-pyrrolo[2,3-C]pyridin-3-YL]-1,2-dioxoethyl]-piperazine
US7807671B2 (en) 2006-04-25 2010-10-05 Bristol-Myers Squibb Company Diketo-piperazine and piperidine derivatives as antiviral agents
US7504399B2 (en) 2006-06-08 2009-03-17 Bristol-Meyers Squibb Company Piperazine enamines as antiviral agents
CA2687931C (en) * 2007-05-31 2016-05-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh Ccr2 receptor antagonists and uses thereof
KR101167773B1 (ko) * 2007-08-03 2012-07-24 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｔａａｒ１ 리간드로서의 피리딘카복스아마이드 및 벤즈아마이드 유도체
US8242124B2 (en) 2008-06-25 2012-08-14 Bristol-Myers Squibb Company Diketopiperidine derivatives as HIV attachment inhibitors
JP5433690B2 (ja) * 2008-06-25 2014-03-05 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗−ｈｉｖ薬としてのジケト縮合アゾロピペリジンおよびアゾロピペラジン
WO2010013849A1 (ja) * 2008-08-01 2010-02-04 日本ケミファ株式会社 Ｇｐｒ１１９作動薬
DK2323633T3 (da) * 2008-09-04 2012-07-09 Bristol Myers Squibb Co Stabil, farmaceutisk sammensætning til optimeret indgivelse af en hiv-bindingshæmmer
EP2379525B1 (en) 2008-12-19 2015-07-29 Boehringer Ingelheim International GmbH Cyclic pyrimidin-4-carboxamides as ccr2 receptor antagonists for treatment of inflammation, asthma and copd
EP2424840B1 (en) * 2009-04-27 2014-08-06 Boehringer Ingelheim International GmbH Cxcr3 receptor antagonists
ES2524829T3 (es) 2009-12-17 2014-12-12 Boehringer Ingelheim International Gmbh Nuevos antagonistas del receptor CCR2 y usos de los mismos
WO2011084985A1 (en) 2010-01-07 2011-07-14 Boehringer Ingelheim International Gmbh Cxcr3 receptor antagonists
TW201200518A (en) * 2010-03-10 2012-01-01 Kalypsys Inc Heterocyclic inhibitors of histamine receptors for the treatment of disease
JP2013526507A (ja) 2010-05-12 2013-06-24 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 新規ｃｃｒ２受容体アンタゴニスト、その製造方法及び薬物としてのその使用
WO2011141477A1 (en) 2010-05-12 2011-11-17 Boehringer Ingelheim International Gmbh New ccr2 receptor antagonists, method for producing the same, and use thereof as medicaments
EP2571870B1 (en) 2010-05-17 2015-01-21 Boehringer Ingelheim International GmbH Ccr2 antagonists and uses thereof
US9018212B2 (en) 2010-05-25 2015-04-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pyridazine carboxamides as CCR2 receptor antagonists
US8962656B2 (en) 2010-06-01 2015-02-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh CCR2 antagonists
JP5613461B2 (ja) * 2010-06-02 2014-10-22 日本農薬株式会社 ピリミジン誘導体及び該誘導体を含有する農園芸用殺虫剤並びにその使用方法
WO2011159794A1 (en) * 2010-06-17 2011-12-22 Bristol-Myers Squibb Company Deuterated hiv attachment inhibitors
US8450361B2 (en) 2010-08-06 2013-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Substituted indole and azaindole oxoacetyl piperazinamide derivatives
WO2012075235A1 (en) 2010-12-02 2012-06-07 Bristol-Myers Squibb Company Alkyl amides as hiv attachment inhibitors
EP2696937B1 (en) * 2011-04-12 2017-05-17 VIIV Healthcare UK (No.5) Limited Thioamide, amidoxime and amidrazone derivatives as hiv attachment inhibitors
EP2731941B1 (en) 2011-07-15 2019-05-08 Boehringer Ingelheim International GmbH Novel and selective ccr2 antagonists
US8859550B2 (en) 2011-09-12 2014-10-14 Kalypsys, Inc. Heterocyclic inhibitors of histamine receptors for the treatment of disease
EP2895471B1 (en) * 2012-08-09 2016-11-23 VIIV Healthcare UK (No.5) Limited Piperidine amide derivatives as hiv attachment inhibitors
EP2892534B8 (en) * 2012-09-06 2021-09-15 Plexxikon Inc. Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
WO2014092100A1 (ja) * 2012-12-11 2014-06-19 武田薬品工業株式会社 複素環化合物
PT2968316T (pt) 2013-03-13 2019-10-29 Forma Therapeutics Inc Derivados de 2-hidroxi-1-{4-[(4-fenilfenil)carbonil]piperazin-1-il}etano-1-ona e compostos relacionados como inibidores da sintase de ácidos gordos (fasn) para o tratamento do cancro
WO2014160692A1 (en) * 2013-03-27 2014-10-02 Bristol-Myers Squibb Company 2-keto amide derivatives as hiv attachment inhibitors
US20160052923A1 (en) * 2013-03-27 2016-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Piperazine and homopiperazine derivatives as hiv attachment inhibitors
ES2671323T3 (es) 2013-07-22 2018-06-06 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Derivados 1¿(piperazin¿1¿il)¿2¿([1,2,4]triazol¿1¿il)¿etanona
WO2015063709A1 (en) * 2013-10-31 2015-05-07 Ranbaxy Laboratories Limited Process for the preparation of 1-(3-methyl-1-phenyl-1h-pyrazol-5-yl)piperazine
AR103399A1 (es) 2015-01-15 2017-05-10 Actelion Pharmaceuticals Ltd Derivados de (r)-2-metil-piperazina como moduladores del receptor cxcr3
ES2709985T3 (es) 2015-01-15 2019-04-22 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Derivados de hidroxialquil-piperazina como moduladores del receptor CXCR3
AU2016287584B2 (en) 2015-07-02 2020-03-26 Centrexion Therapeutics Corporation (4-((3R,4R)-3-methoxytetrahydro-pyran-4-ylamino)piperidin-1-yl)(5-methyl-6-(((2R,6S)-6-(p-tolyl)tetrahydro-2H-pyran-2-yl)methylamino)pyrimidin-4yl)methanone citrate
KR102014335B1 (ko) * 2017-12-01 2019-08-26 한국과학기술연구원 5-ht7 수용체의 조절제로 작용하는 아릴피라졸릴피페라진 또는 아릴피라졸릴다이아제페인의 유도체 및 이를 포함하는 중추신경계 질환 치료 또는 예방용 약학 조성물
CN113382633A (zh) 2018-10-29 2021-09-10 福马治疗股份有限公司 (4-(2-氟-4-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)苯甲酰基)哌嗪-1-基)(1-羟基环丙基)甲酮的固体形式
WO2020092667A1 (en) * 2018-11-02 2020-05-07 Merck Sharp & Dohme Corp. 2-amino-n-heteroaryl-nicotinamides as nav1.8 inhibitors
CN111004213B (zh) * 2019-12-26 2021-07-20 北京欣奕华科技有限公司 一种有机电致发光化合物及其应用
TW202321229A (zh) * 2021-08-18 2023-06-01 美商富曼西公司 殺真菌的取代的雜環化合物

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3135794A (en) * 1959-09-25 1964-06-02 Sterling Drug Inc 1-(n, n-dibenzylamino)-2-[n'-(halo-loweralkanoyl)-n'-(substituted)]-loweralkylenediamines
WO1999067237A1 (en) * 1998-06-19 1999-12-29 H. Lundbeck A/S 4,5,6 and 7-indole and indoline derivatives, their preparation and use
WO2005004801A2 (en) * 2003-07-01 2005-01-20 Bristol-Myers Squibb Company Indole, azaindole and related heterocyclic n-substituted piperazine derivatives

Family Cites Families (62)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8615562D0 (en) 1986-06-25 1986-07-30 Maggioni Farma Aminoalcohols
MX19185A (es) 1989-01-20 1993-12-01 Pfizer Procedimiento para preparar 3-(1,2,5,6-tretrahidropiridil)-pirrolopiridinas.
US5023265A (en) 1990-06-01 1991-06-11 Schering Corporation Substituted 1-H-pyrrolopyridine-3-carboxamides
IL99843A0 (en) 1990-11-01 1992-08-18 Merck & Co Inc Synergistic combination of hiv reverse transcriptase inhibitors
US5811432A (en) 1990-11-09 1998-09-22 Pfizer Inc Azaoxindole derivatives
US5192770A (en) 1990-12-07 1993-03-09 Syntex (U.S.A.) Inc. Serotonergic alpha-oxoacetamides
AU653855B2 (en) 1991-07-03 1994-10-13 Pharmacia & Upjohn Company Indolyl carbonyl pyridinyl-poperazine/piperidine derivatives
WO1993005020A1 (en) 1991-09-06 1993-03-18 Merck & Co., Inc. Indoles as inhibitors of hiv reverse transcriptase
US5124327A (en) 1991-09-06 1992-06-23 Merck & Co., Inc. HIV reverse transcriptase
US5413999A (en) 1991-11-08 1995-05-09 Merck & Co., Inc. HIV protease inhibitors useful for the treatment of AIDS
IT1265057B1 (it) 1993-08-05 1996-10-28 Dompe Spa Tropil 7-azaindolil-3-carbossiamidi
US5424329A (en) 1993-08-18 1995-06-13 Warner-Lambert Company Indole-2-carboxamides as inhibitors of cell adhesion
GB9420521D0 (en) 1994-10-12 1994-11-30 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
TW429256B (en) 1995-12-27 2001-04-11 Janssen Pharmaceutica Nv 1-(1,2-disubstituted piperidinyl)-4-(benzimidazolyl- and imidazopyridinyl)-piperidine derivatives
DE69719766T2 (de) 1996-08-29 2004-01-15 Takeda Chemical Industries Ltd Zyklische etherverbindungen als natriumkanal-modulatoren
DE19636150A1 (de) 1996-09-06 1998-03-12 Asta Medica Ag N-substituierte Indol-3-glyoxylamide mit antiasthmatischer, antiallergischer und immunsuppressiver/immunmodulierender Wirkung
WO1998028292A1 (en) 1996-12-23 1998-07-02 Smithkline Beecham Corporation Novel piperidine containing compounds
AU1454599A (en) 1997-11-10 1999-05-31 Dana-Farber Cancer Institute Compounds inhibiting cd4-gp120 interaction and uses thereof
CN1142909C (zh) 1998-03-26 2004-03-24 盐野义制药株式会社 具有抗病毒活性的吲哚衍生物
DE19814838C2 (de) 1998-04-02 2001-01-18 Asta Medica Ag Indolyl-3-glyoxylsäure-Derivate mit Antitumorwirkung
AU4710699A (en) 1998-06-30 2000-01-17 Eli Lilly And Company Bicyclic sPLA2 inhibitors
JP2002523448A (ja) 1998-08-28 2002-07-30 サイオス インコーポレイテッド ｐ３８−αキナーゼのインヒビター
GB9905010D0 (en) 1999-03-04 1999-04-28 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
AU772295B2 (en) 1999-05-21 2004-04-22 Scios Inc. Indole-type derivatives as inhibitors of p38 kinase
US6469006B1 (en) 1999-06-15 2002-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Antiviral indoleoxoacetyl piperazine derivatives
TWI269654B (en) 1999-09-28 2007-01-01 Baxter Healthcare Sa N-substituted indole-3-glyoxylamide compounds having anti-tumor action
US20020061892A1 (en) 2000-02-22 2002-05-23 Tao Wang Antiviral azaindole derivatives
US6476034B2 (en) 2000-02-22 2002-11-05 Bristol-Myers Squibb Company Antiviral azaindole derivatives
US6573262B2 (en) 2000-07-10 2003-06-03 Bristol-Myers Sqibb Company Composition and antiviral activity of substituted indoleoxoacetic piperazine derivatives
WO2002004440A1 (en) 2000-07-10 2002-01-17 Bristol-Myers Squibb Company Composition and antiviral activity of substituted indoleoxoacetic piperazine derivatives
DE10037310A1 (de) 2000-07-28 2002-02-07 Asta Medica Ag Neue Indolderivate und deren Verwendung als Arzneimittel
US20030207910A1 (en) 2001-02-02 2003-11-06 Tao Wang Composition and antiviral activity of substituted azaindoleoxoacetic piperazine derivatives
US20030069266A1 (en) 2001-02-02 2003-04-10 Tao Wang Composition and antiviral activity of substituted azaindoleoxoacetic piperazine derivatives
US20040110785A1 (en) 2001-02-02 2004-06-10 Tao Wang Composition and antiviral activity of substituted azaindoleoxoacetic piperazine derivatives
US6825201B2 (en) 2001-04-25 2004-11-30 Bristol-Myers Squibb Company Indole, azaindole and related heterocyclic amidopiperazine derivatives
US6667378B2 (en) 2001-06-22 2003-12-23 L'oreal, S.A. Reshapable hair styling composition comprising heterogeneous (meth)acrylic copolymer particles
IL161667A0 (en) 2001-11-09 2004-09-27 Scios Inc Method and composition to treat cystic fibrosis
US20030236277A1 (en) 2002-02-14 2003-12-25 Kadow John F. Indole, azaindole and related heterocyclic pyrrolidine derivatives
AU2003215469A1 (en) 2002-03-28 2003-10-13 Procyon Biopharma Inc. Pyridoxal-5-phosphate derivatives as hiv integrase inhibitors
US7037913B2 (en) 2002-05-01 2006-05-02 Bristol-Myers Squibb Company Bicyclo 4.4.0 antiviral derivatives
US7348337B2 (en) 2002-05-28 2008-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Indole, azaindole and related heterocyclic 4-alkenyl piperidine amides
US20040063744A1 (en) 2002-05-28 2004-04-01 Tao Wang Indole, azaindole and related heterocyclic 4-alkenyl piperidine amides
AU2003273608A1 (en) 2002-06-11 2003-12-22 Bristol-Myers Squibb Company Viral envelope mediated fusion assay
US6900206B2 (en) 2002-06-20 2005-05-31 Bristol-Myers Squibb Company Indole, azaindole and related heterocyclic sulfonylureido piperazine derivatives
US20040063746A1 (en) 2002-07-25 2004-04-01 Alicia Regueiro-Ren Indole, azaindole and related heterocyclic ureido and thioureido piperazine derivatives
AU2004264724A1 (en) 2003-08-14 2005-02-24 Pfizer Inc. Piperazine derivatives for the treatment of HIV infections
US20050124623A1 (en) 2003-11-26 2005-06-09 Bender John A. Diazaindole-dicarbonyl-piperazinyl antiviral agents
US7745625B2 (en) 2004-03-15 2010-06-29 Bristol-Myers Squibb Company Prodrugs of piperazine and substituted piperidine antiviral agents
US20050215544A1 (en) 2004-03-24 2005-09-29 Pin-Fang Lin Methods of treating HIV infection
US7776863B2 (en) 2004-03-24 2010-08-17 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating HIV infection
US20050215543A1 (en) 2004-03-24 2005-09-29 Pin-Fang Lin Methods of treating HIV infection
US7449476B2 (en) 2004-05-26 2008-11-11 Bristol-Myers Squibb Company Tetrahydrocarboline antiviral agents
US7087610B2 (en) 2004-06-03 2006-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Benzothiazole antiviral agents
WO2005121094A1 (en) 2004-06-09 2005-12-22 Pfizer Limited Piperazine and piperidine derivatives as anti-hiv-agents
US20060100209A1 (en) 2004-11-09 2006-05-11 Chong-Hui Gu Formulations of 1-(4-benzoyl-piperazin-1-yl)-2-[4-methoxy-7-(3-methyl-[1,2,4]triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl]-ethane-1,2-dione
US20060100432A1 (en) 2004-11-09 2006-05-11 Matiskella John D Crystalline materials of 1-(4-benzoyl-piperazin-1-yl)-2-[4-methoxy-7-(3-methyl-[1,2,4]triazol-1-yl)-1H-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl]-ethane-1,2-dione
US7183284B2 (en) 2004-12-29 2007-02-27 Bristol-Myers Squibb Company Aminium salts of 1,2,3-triazoles as prodrugs of drugs including antiviral agents
US7396830B2 (en) 2005-10-04 2008-07-08 Bristol-Myers Squibb Company Piperazine amidines as antiviral agents
US7501419B2 (en) 2006-04-25 2009-03-10 Bristol-Myers Squibb Company 4-Squarylpiperazine derivatives as antiviral agents
US7807671B2 (en) 2006-04-25 2010-10-05 Bristol-Myers Squibb Company Diketo-piperazine and piperidine derivatives as antiviral agents
US7572810B2 (en) * 2006-06-08 2009-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Alkene piperidine derivatives as antiviral agents
US7504399B2 (en) * 2006-06-08 2009-03-17 Bristol-Meyers Squibb Company Piperazine enamines as antiviral agents

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3135794A (en) * 1959-09-25 1964-06-02 Sterling Drug Inc 1-(n, n-dibenzylamino)-2-[n'-(halo-loweralkanoyl)-n'-(substituted)]-loweralkylenediamines
WO1999067237A1 (en) * 1998-06-19 1999-12-29 H. Lundbeck A/S 4,5,6 and 7-indole and indoline derivatives, their preparation and use
WO2005004801A2 (en) * 2003-07-01 2005-01-20 Bristol-Myers Squibb Company Indole, azaindole and related heterocyclic n-substituted piperazine derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
ES2432758T3 (es) 2013-12-05
US20080139572A1 (en) 2008-06-12
TW200811174A (en) 2008-03-01
US20070249579A1 (en) 2007-10-25
EA200802203A1 (ru) 2009-04-28
PE20080318A1 (es) 2008-04-10
CA2650382C (en) 2014-05-27
JP2009535352A (ja) 2009-10-01
AU2007242989A1 (en) 2007-11-08
TWI394754B (zh) 2013-05-01
NO20084257L (no) 2008-11-19
MX2008013265A (es) 2008-10-27
WO2007127635A3 (en) 2008-03-13
EP2010525A2 (en) 2009-01-07
KR20090005393A (ko) 2009-01-13
AR060658A1 (es) 2008-07-02
IL194540A (en) 2015-03-31
BRPI0710919A2 (pt) 2012-06-26
JP5214590B2 (ja) 2013-06-19
KR101450349B1 (ko) 2014-10-14
AU2007242989B2 (en) 2012-06-28
CA2650382A1 (en) 2007-11-08
WO2007127635A2 (en) 2007-11-08
EP2010525B1 (en) 2013-08-28
NZ571995A (en) 2011-11-25
US7807676B2 (en) 2010-10-05
US7807671B2 (en) 2010-10-05
IL194540A0 (en) 2009-08-03
EA014957B1 (ru) 2011-04-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO341412B1 (no) Diketo-piperazin- og –piperidinderivater, farmasøytiske blandinger omfattende slike, slike blandinger omfattende ytterligere anti-HIV midler og slike blandinger for behandling av sykdom
AU2003301958B2 (en) Indole, azaindole and related heterocyclic 4-alkenyl piperidine amides
JP5433690B2 (ja) 抗−ｈｉｖ薬としてのジケト縮合アゾロピペリジンおよびアゾロピペラジン
US7902204B2 (en) Diazaindole-dicarbonyl-piperazinyl antiviral agents
JP5433691B2 (ja) Ｈｉｖ結合阻害剤としてのジケトピペリジン誘導体
CN101432278B (zh) 作为抗病毒剂的二酮基哌嗪和哌啶衍生物
JP2016515580A (ja) Ｈｉｖ結合阻害剤としての２−ケトアミド誘導体

Legal Events

Date Code Title Description
CHAD Change of the owner's name or address (par. 44 patent law, par. patentforskriften)

Owner name: VIIV HEALTHCARE UK (NO. 5) LIMITED, GB

MM1K Lapsed by not paying the annual fees