NO312299B1 - Motilin-lignende polypeptider med mave-tarm-motorstimulerende aktivitet - Google Patents
Motilin-lignende polypeptider med mave-tarm-motorstimulerende aktivitet Download PDFInfo
- Publication number
- NO312299B1 NO312299B1 NO19942690A NO942690A NO312299B1 NO 312299 B1 NO312299 B1 NO 312299B1 NO 19942690 A NO19942690 A NO 19942690A NO 942690 A NO942690 A NO 942690A NO 312299 B1 NO312299 B1 NO 312299B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- glu
- leu
- gln
- lys
- group
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 143
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 108
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 title claims abstract description 97
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 title claims abstract description 15
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 title claims abstract description 10
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims abstract description 91
- -1 alicyclic amino acid Chemical class 0.000 claims abstract description 50
- LVRVABPNVHYXRT-BQWXUCBYSA-N 52906-92-0 Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 LVRVABPNVHYXRT-BQWXUCBYSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 101800002372 Motilin Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 102000002419 Motilin Human genes 0.000 claims abstract description 25
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims abstract description 23
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Chemical group CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Chemical group C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims abstract description 20
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims abstract description 20
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 20
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 20
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims abstract description 18
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims abstract description 17
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 claims abstract description 15
- ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N D-arginine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- USPFMEKVPDBMCG-LBPRGKRZSA-N N-benzyloxycarbonyl-L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 USPFMEKVPDBMCG-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 229930028154 D-arginine Natural products 0.000 claims abstract description 13
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims abstract description 13
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 claims abstract description 12
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 claims abstract description 12
- ZDXPYRJPNDTMRX-GSVOUGTGSA-N D-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229930195715 D-glutamine Natural products 0.000 claims abstract description 11
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical group C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims abstract description 8
- QUOGESRFPZDMMT-RXMQYKEDSA-N (2r)-2-amino-6-(diaminomethylideneamino)hexanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims abstract description 7
- AHLPHDHHMVZTML-SCSAIBSYSA-N D-Ornithine Chemical compound NCCC[C@@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-SCSAIBSYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims abstract description 7
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 125000001494 2-propynyl group Chemical group [H]C#CC([H])([H])* 0.000 claims abstract description 6
- OGNSCSPNOLGXSM-GSVOUGTGSA-N D-2,4-diaminobutyric acid Chemical compound NCC[C@@H](N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 125000004103 aminoalkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims abstract description 6
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 claims abstract description 5
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 claims abstract description 5
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- 229960002429 proline Drugs 0.000 claims abstract description 5
- DCXYFEDJOCDNAF-UWTATZPHSA-N D-Asparagine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UWTATZPHSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 229930182846 D-asparagine Natural products 0.000 claims abstract description 4
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 4
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 29
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 25
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 23
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 22
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 17
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 claims description 17
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 15
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 15
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 12
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 11
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 claims description 9
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 claims description 9
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 claims description 8
- ORQXBVXKBGUSBA-QMMMGPOBSA-N β-cyclohexyl-alanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1CCCCC1 ORQXBVXKBGUSBA-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 8
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims description 7
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 claims description 7
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 claims description 6
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 6
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 6
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 5
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- GEYBMYRBIABFTA-VIFPVBQESA-N O-methyl-L-tyrosine Chemical compound COC1=CC=C(C[C@H](N)C(O)=O)C=C1 GEYBMYRBIABFTA-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 5
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 5
- 229960004295 valine Drugs 0.000 claims description 5
- PEMUHKUIQHFMTH-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-amino-3-(4-bromophenyl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(Br)C=C1 PEMUHKUIQHFMTH-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 4
- PZNQZSRPDOEBMS-QMMMGPOBSA-N 4-iodo-L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(I)C=C1 PZNQZSRPDOEBMS-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 4
- NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N Fenclonine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(Cl)C=C1 NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 claims description 4
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 4
- BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-(cyclohexylazaniumyl)propanoate Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1CCCCC1 BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N 0.000 claims description 3
- IYKLZBIWFXPUCS-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(naphthalen-1-ylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(N[C@@H](C)C(O)=O)=CC=CC2=C1 IYKLZBIWFXPUCS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 3
- RWLSBXBFZHDHHX-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(naphthalen-2-ylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(N[C@@H](C)C(O)=O)=CC=C21 RWLSBXBFZHDHHX-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 3
- 125000001637 1-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(*)=C([H])C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 claims description 3
- WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumyl-3-thiophen-2-ylpropanoate Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CS1 WTOFYLAWDLQMBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000001622 2-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C([H])=C(*)C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 claims description 3
- 125000000175 2-thienyl group Chemical group S1C([*])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 3
- 125000003349 3-pyridyl group Chemical group N1=C([H])C([*])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 3
- 125000004800 4-bromophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1Br 0.000 claims description 3
- 125000001255 4-fluorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1F 0.000 claims description 3
- XWHHYOYVRVGJJY-UHFFFAOYSA-N 4-fluorophenylalanine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(F)C=C1 XWHHYOYVRVGJJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000006306 4-iodophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1I 0.000 claims description 3
- 125000004172 4-methoxyphenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(OC([H])([H])[H])=C([H])C([H])=C1* 0.000 claims description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 claims description 3
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 125000003854 p-chlorophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(*)=C([H])C([H])=C1Cl 0.000 claims description 3
- QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-[3-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CC(N(CCCl)CCCl)=C1 QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims description 2
- 229930182832 D-phenylalanine Natural products 0.000 claims description 2
- ORQXBVXKBGUSBA-UHFFFAOYSA-N cyclohexyl D-alanine Natural products OC(=O)C(N)CC1CCCCC1 ORQXBVXKBGUSBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims 4
- CNMAQBJBWQQZFZ-LURJTMIESA-N (2s)-2-(pyridin-2-ylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1=CC=CC=N1 CNMAQBJBWQQZFZ-LURJTMIESA-N 0.000 claims 1
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 abstract description 14
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 84
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 43
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 37
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 29
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 23
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 22
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 22
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 16
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 230000004044 response Effects 0.000 description 15
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 14
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 14
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 13
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 13
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 13
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 13
- QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N L-Homoarginine Natural products OC(=O)C(N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 11
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 11
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 10
- QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N L-homoarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 10
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 9
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 9
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 8
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-methyl-pyrrolidinone Natural products CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 6
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 6
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- 102000057413 Motilin receptors Human genes 0.000 description 5
- 108700040483 Motilin receptors Proteins 0.000 description 5
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N hydroxymethyl benzene Natural products OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 5
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- OIOAKXPMBIZAHL-LURJTMIESA-N (2s)-2-azaniumyl-5-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-5-oxopentanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)CC[C@H](N)C(O)=O OIOAKXPMBIZAHL-LURJTMIESA-N 0.000 description 4
- DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 1,1-ethanedithiol Chemical compound CC(S)S DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 238000005112 continuous flow technique Methods 0.000 description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N dichloromethane Natural products ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 4
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 4
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 4
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 4
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000037023 motor activity Effects 0.000 description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 4
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010051153 Diabetic gastroparesis Diseases 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 3
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 3
- 125000002059 L-arginyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])C(=N[H])N([H])[H] 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 3
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 230000002183 duodenal effect Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N subtilin Chemical compound CC1SCC(NC2=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(=C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)CSC(C)C2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C2NC(=O)CNC(=O)C3CCCN3C(=O)C(NC(=O)C3NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CC=4C5=CC=CC=C5NC=4)CSC3)C(C)SC2)C(C)C)C(C)SC1)CC1=CC=CC=C1 WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N 0.000 description 3
- WTKYBFQVZPCGAO-LURJTMIESA-N (2s)-2-(pyridin-3-ylamino)propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1=CC=CN=C1 WTKYBFQVZPCGAO-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N Acetaldehyde Chemical compound CC=O IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 125000001176 L-lysyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(N([H])[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101500016661 Sus scrofa Motilin Proteins 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- 229910000102 alkali metal hydride Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000008046 alkali metal hydrides Chemical class 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 2
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 2
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000005515 capillary zone electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000037020 contractile activity Effects 0.000 description 2
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 2
- 125000000582 cycloheptyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 2
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 2
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 2
- 230000005176 gastrointestinal motility Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000001769 paralizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002572 peristaltic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 2
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 2
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 2
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003673 urethanes Chemical class 0.000 description 2
- GBROUWPNYVBLFO-QHCPKHFHSA-N (2s)-2-[9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl(methyl)amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound C([C@H](N(C)C(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 GBROUWPNYVBLFO-QHCPKHFHSA-N 0.000 description 1
- OIXLLKLZKCBCPS-RZVRUWJTSA-N (2s)-2-azanyl-5-[bis(azanyl)methylideneamino]pentanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N.OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N OIXLLKLZKCBCPS-RZVRUWJTSA-N 0.000 description 1
- OYULCCKKLJPNPU-GTNSWQLSSA-N (2s,3s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H]([C@@H](O)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 OYULCCKKLJPNPU-GTNSWQLSSA-N 0.000 description 1
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- URKWZKVFCSGYMB-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(1-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound CC(O)C1CNCCN1CCS(O)(=O)=O URKWZKVFCSGYMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000022 2-aminoethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000002038 D-arginyl group Chemical group N[C@@H](C(=O)*)CCCNC(=N)N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 231100000491 EC50 Toxicity 0.000 description 1
- 101500028621 Homo sapiens Motilin Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010021333 Ileus paralytic Diseases 0.000 description 1
- 201000005081 Intestinal Pseudo-Obstruction Diseases 0.000 description 1
- 125000003338 L-glutaminyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(=O)N([H])[H] 0.000 description 1
- 125000003440 L-leucyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000000769 L-threonyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])[C@](O[H])(C([H])([H])[H])[H] 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000012901 Milli-Q water Substances 0.000 description 1
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000015731 Peptide Hormones Human genes 0.000 description 1
- 108010038988 Peptide Hormones Proteins 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 206010043087 Tachyphylaxis Diseases 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010047163 Vasospasm Diseases 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000004202 aminomethyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229940090047 auto-injector Drugs 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical group 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000805 composite resin Substances 0.000 description 1
- 230000009989 contractile response Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N dcm dichloromethane Chemical compound ClCCl.ClCCl DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 1
- 238000011067 equilibration Methods 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000030136 gastric emptying Effects 0.000 description 1
- 230000030135 gastric motility Effects 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 210000000110 microvilli Anatomy 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000004118 muscle contraction Effects 0.000 description 1
- 230000003183 myoelectrical effect Effects 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- PSACHCMMPFMFAJ-UHFFFAOYSA-N nmm n-methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1.CN1CCOCC1 PSACHCMMPFMFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 201000007620 paralytic ileus Diseases 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000002325 prokinetic agent Substances 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006104 solid solution Substances 0.000 description 1
- 238000012430 stability testing Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-N sulfonic acid Chemical compound OS(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N tert-butyl alcohol Substances CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/63—Motilins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører nye polypeptider med potent mave-tarm motorstimulerende aktivitet og forsterket meta-bolstabilitet nyttig for behandling av tilstander kjennetegnet ved et redusert basalnivå av mave-tarm motoraktivitet såsom diabetis gastroparese, paralytisk tarmslyng og postoperativ tarmslyng.
Motilin er et mave-tarm lineært polypeptidhormon som stimulerer mavehulen, tolvfingertarmen og tarmen. Til tross for at dets virkning ikke er fullstendig kjent spiller motilin en rolle ved å øke mavemotiliteten og stimulere pepsinytelsen og kan også være viktig ved regulering av det interfordøyelsesmyoelektriske komplekset. Human motilin er enda ikke blitt renset, men dets immunologiske egenskaper tyder sterkt på at det er meget lik motilin fra gris. Motilin fra gris inneholder 22 aminosyreresidier og kan bli representert ved formelen:
Motilin fra gris har en hydrofob region fra posisjonene 1 til 5, en hydrofil region fra posisjonene 11 til 22 og en koblende region fra posisjonene 6 til 10. Motilin fra gris har også en a-helisk sekundær struktur fra residiene 9 til 20
i den primære sekvensen. (Kahn et al, Biochemistry 29, 5743-5751 (1990)).
Administrering av motilin til friske mennesker akselererer tarmtransittiden og forsterker mavetømmingen. In vitro stimulerer motilin sammentrekninger i tolvfingertarmens glatte muskelstriper hos mennesker og kanin og isolerte glatte muskelceller i mave-tarm. I tillegg konkurrerer motilin og noen av dets derivater med radioaktivt merket motilin for bindingsseter på antralt vev fra menneske og kanin og dette tyder på at stimulering av spesifikke reseptorer i mave-tarmkanalen er ansvarlig for de fysiologis- ke virkningene til hormonet. Infusjon av motilin er blitt rapportert å stimulere tømming av faste stoffer og væsker i pasienter med diabetisk gastroparese (Peeters et al, Gastroenterology 100, A480 (1991)). I tillegg er motilin blitt anvendt for å behandle pasienter med paralytisk tarmslyng forårsaket av carsinomer i mave-tarmkanalen (Meyer et al, Med. Klin. 86, 515-517 (1991)).
Et hovedproblem når det gjelder motilin er dets relative korte halveringstid (t^) på 4,5 minutter i mennesker (Christofides et al, Gastroenterology 76, 903-907 (1979)). Denne korte halveringstiden gjør det nødvendig å administrere hormonet ved kontinuerlig infusjon for å indusere en terapeutisk effekt.
Den N-terminale aminosyresekvensen og visse residier i den midtre delen av motilin er vesentlig for den sammentrekkende aktivititeten (Macielag et al, Peptides 13, 565-569 (1992); Peeters et al, Peptides 13, 1103-1107 (1992); Poitras et al, Biochem. Biophys. Res. Commun. 183, 36-40 (1992)). Motilinlignende polypeptider som har en kortere C-terminal ende, inneholdene fra 3 til 5 basiske aminosyrer bundet fra posisjon 12 og med forskjellige aminosyresubstitusjoner i posisjonene 1 til og med 11 er blitt rapportert å ha aktivitet som er mindre enn, eller lik, den til motilin. Ingen av de motilinlignende polypeptidene ble rapportert å ha øket metabolsk stabilitet (japansk patent nr 2-311.495).
Et motilinlignende polypeptid med potent mave-tarm motorstimulerende aktivitet og forsterket metabolsk stabilitet vil dermed være nyttig for behandling av reduserte basale nivåer av mave-tarm motoraktiviteten.
Foreliggende oppfinnelse vedrører polypeptider med mave-tarm motorstimulerende aktivitet representert ved formelen:
inkludert optiske aktive isomeriske former og farmasøytiske akseptable syreaddisjonssalter derav hvor: A er L-stereoisomeren til en lipofil alifatisk eller alicyklisk aminosyre;
B er L-prolin eller L-alanin;
D er L-stereoisomeren til en lipofil alifatisk eller alicyklisk aminosyre;
E er L-stereoisomeren av en aromatisk, lipofilalifatisk eller alicyklisk aminosyre;
F er L-stereoisomeren til en aromatisk eller heteroaromatisk aminosyre;
G er glysin eller D-alanin;
H er L-glutaminsyre eller L-glutamin;
I er L-glutamin, L-glutaminsyre eller L-alanin;
J er en direktebinding mellom I og gruppen -NH- eller blir valgt fra gruppen bestående av Z, Z-Leu, Z-Leu-Gln, Z-Leu-Gln-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Arg, Z-Leu-Gln-Glu-Arg-Asn, Z-Leu-Gln-Glu-Arg-Asn-Lys og Z-Leu-Gln-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly, hvor Z blir valgt fra gruppen bestående av arginin, D-arginin, D-homoarginin, D-lysin, D-ornitin, D-2,4-diaminsmørsyre, D-glutamin, D-asparagin og D-alanin;
Ri er laverealkyl eller allyl;
R2blir valgt fra gruppen bestående av hydrogen, laverealkyl, propargyl og allyl;
R3blir valgt fra gruppen bestående av hydrogen, laverealkyl og allyl;
R4blir valgt fra gruppen bestående av laverealkyl, cykloalkyl, substituert og usubstituert aryl og heteroaryl, hvor arylgruppen kan være substituert med en eller flere substituenter valgt fra gruppen bestående av halogen, hydroksy og laverealkoksy;
R5blir valgt fra gruppen bestående av -CH2CONH2, aminoalkylgrupper inneholdene fra 1 til 3 karbonatomer og guanidinoalkylgrupper inneholdene 2 eller 3 karbonatomer;
R6er -COOH eller -C0NH2; og
m er 0 eller 1, symbolet<*>representerer et asymmetrisk karbonatom som kan være i D- eller L-konfigurasjon, og hver laverealkylgruppe inneholder fra 1 til 4 karbonatomer; forutsatt at:
(a) når m er 0, er R2og R3hydrogen, og J er en direktebinding, -NH-*CH(CH2R5)R^ gruppen har D-konfigurasjon; (b) R5er -CH2C0NH2bare når J er Z-Leu eller Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly; (c) når m=0, er R2og R3hydrogen, og J er Z, Z-Leu, Z-Leu-Gln, Z-Leu-Gln-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys og Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly, Z har
D-konfigurasjon; og
(d) polypeptidet er forskjellig fra motilin.
De nye polypeptidene ifølge foreliggende oppfinnelse bindes med høy affinitet til motilinreseptoren og etterligner de peristaltiske virkningene til motilin på mave-tarmvevet. De nye polypeptidene er også mere effektive prokinetikkmidler in vivo på grunn av at de demonstrerer øket stabilitet for biodegradering i relevante homogenater av organvev. Motilinlignende polypeptider inneholder et leucinresidie i stedet for metionin i posisjon 13 for høyere kjemisk stabilitet, et D-argininresidie i stedet for L-arginin i posisjon 12 for høyere potens og stabilitet, og et alkylert fenylalanin-residie i posisjon 1 for øket stabilitet overfor biodegradering. Polypeptidene ifølge foreliggende oppfinnelse er derfor nyttige for behandling av tilstander kjennetegnet ved et redusert basalnivå av mave-tarm motoraktiviteten så som, diabetisk gastroparese, paralytisk tarmslyng og postoperativ tarmslyng.
Foreliggende oppfinnelse vedrører nye polypeptider med potent mave-tarm motorstimulerende aktivitet samt fremgangsmåte for behandling av en tilstand med redusert basalnivå av mave-tarm motoraktivitet i et pattedyr, fortrinnsvis et menneske. Fremgangsmåtene omfatter administrering til pattedyret en mengde, terapeutisk effektiv for å lindre tilstanden, av et polypeptid representert ved formel (1)
inkludert optiske aktive isomere former og farmasøytiske akseptable syreaddisjonssalter derav. I formel (1) er m et tall fra 0 til 1, symbolet<*>representerer et asymmetrisk karbonatom som kan være i D- eller L-konf igurasj on, og hver laverealkylgruppe inneholder fra 1 til 4 karbonatomer, forutsatt at (a) når m er 0 er R2og R 3 hydrogen, og J er en direktebinding, -NH-*CH(CH2R5 )Rfc-gruppen har D-konfigurasjon; (b) R5er -CH2C0NH2bare når J er Z-Leu eller Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly; (c) når m = 0, er Eg og R3hydrogen, og J er Z, Z-Leu, Z-Leu-Gln, Z-Leu-Gln-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn, Z-Leu-Gln-Glu-Arg-Asn-Lys og Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly, Z har D-konfigurasjin: og (d) polypeptidet er forskjellig fra motilin. Gruppene A til og med J og R^til og med R6, er definert som angitt nedenfor.
De nye forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse definert ved formel (1), er polypeptider som kan ha lengder på fra 12 til 22 aminosyrer, og fortrinnsvis lengder på 12, 14, 16, 18, 20 eller 22 aminosyrer. Stereokjemien til aminosyrene i de nye polypeptidene er et vesentlig trekk ifølge foreliggende oppfinnelse. Den absolutte stereokjemien til de individuelle aminosyrene er L, dersom ikke annet er angitt, untatt for posisjon 1 (den amino-terminale aminosyren, (Ri)m(R2)N-<*>CH(CH2R4)C0-) som kan være L eller D, posisjon 8 (gruppe G) som kan være glycin eller D-alanin, posisjon 12 som kan være L eller D, og den C-terminale aminosyreposisjonen, -NH-*CH(CH2R5 )Ré, , som kan være L eller D.
De følgende forkortelser blir anvendt i beskrivelsen:
Phe - fenylalanin
Tyr - tyrosin
Nie - norleucin
Leu - leucin
Cha - p-cykloheksylalanin
Val - valin
Ile - isoleucin
Gly - glycin
Ala - alanin
Glu - glutaminsyre
Gin - glutamin
Arg - arginin
h-Arg - homoarginin
Orn - ornitin
Dab - 2,4-diaminosmørsyre
Lys - lysin
Asn - aspargin
Me - metyl
Boe - t-butyloksykarbonyl
Cbz - benzyloksykarbonyl
Dhbt - 3,4-dihydro-4-oksobenzotriacin-3-yl
Fmoc - fluorenylmetyloksykarbonyl
Mbh - 4,4 '-dimetoksybenzhydryl
Mtr - 4-metoksy-2,3,6-trimetylbenzensulfonyl
Ptp - pentafluorfenyl
Trt - trityl
BOP - benzotriazolyloksy-trisdimetylaminofosfonium-heksafluorfosfat
DCC - N,N'dicykloheksylkarbodiimid
DCM - diklormetan
DIC - diisopropylkarbodiimid
DIEA - diisopropyletylamin
EDCC - N-dietylaminopropyl-N'-cykloheksylkarbodiimid HBTU - 2-(lH-benzotriazol-l-yl)-l,1,3,3-tetrametyluronium-heksafluorfosfat
HEPES - (N-[2-hydroksyetyl]piperazin-N'-[2-etansulfonsyre]) HMPA - hydroksymetylfenoksyacetoksy
HOBt - 1-hydroksybenzotriazol
MBHA - 4-metylbenzhydrylamino
PAM - hydroksymetylfenylacetamidometyl
PyBrOP - bromo-tris-pyrrolldino-fosfonium-heksafluorfosfat DMF - N,N-dimetylformamid
NMM - N-metylmorfolin
nmp - N-metylpyrrolidinon
TCA - trikloreddiksyre
TEA - trietylamin
TFA - trifluoreddlksyre
TFMSA - trifluormetansulfonsyre
Posisjon 1, den amino-terminale aminosyren,
(RX)m(R2)(R3 )N-*CH(CH2R4 )C0-
Aminosyren i den amino-terminale delen av polypeptidet (R1)m(R2)(R3)N-<K>CH(CH2R4)C0- i posisjon 1, kan ha L- eller D-konfigurasjon. R^er laverealkyl eller allyl; R2kan bli valgt fra gruppen bestående av hydrogen, laverealkyl, propargyl og allyl; og R3kan bli valgt fra gruppen bestående av hydrogen, laverealkyl og allyl. Betegnelsen "laverealkyl" som anvendt heri, refererer til lineære og forgrenede hydrokarbonrester inneholdende fra 1 til 4 karbonatomer. Eksempler på egnede laverealkylgrupper for R^, R2og R3er metyl, etyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl og sec-butyl, fortrinnsvis metyl.
Tallet m er 0 eller 1, og fortrinnsvis 0. Når m er 0, kan aminoresten være et primært amin hvor R2og R3er hydrogen. Aminoresten kan også være et sekundært amin, tertiæert amin eller kvaternært ammoniumsalt (m er 1) substituert med en, to eller tre, henholdsvis laverealkylgrupper med fra en til fire karbonatomer, og fortrinnsvis metyl eller etyl. Aminoresten kan også bli substituert ved en propargylgruppe for å tilveiebringe f.eks. N-propargyl, N-metyl-N-propargyl, N,N-dimetyl-N-propargyl substituerte aminorester, eller opp til tre allylgrupper. Den aminoterminale aminosyren er fortrinnsvis N-substituert, og de foretrukne substituentene er én til tre metylgrupper.
R4blir valgt fra gruppen bestående av laverealkyl, cykloalkyl, substituert og usubstituert aryl og heteroaryl, hvori arylgruppen kan inneholde en eller flere substituenter valgt fra gruppen bestående av halogen, hydroksy og laverealkoksy. Foretrukne substituerte og usubstituerte arylgrupper er fenyl, p-fluorfenyl, p-klorfenyl, p-bromfenyl, p-jodfenyl, p-hydroksyfenyl, p-metoksyfenyl, 1-naftyl og 2-naftyl. Foretrukne heteroarylgrupper er 3-indolyl, 2-tienyl og 3-pyridyl. Foretrukne cykloalkylgrupper er cyklopentyl, cykloheksyl og cykloheptyl. R4blir fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av metyl, etyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, cykloheksyl, fenyl, p-fluorfenyl, p-klorfenyl, p-bromfenyl, p-jodfenyl, p-hydroksyfenyl, p-metoksyfenyl, 1-naftyl, 2-naftyl, 3-indolyl, 2-tienyl og 3-pyridyl. Det er mer foretrukket at R4blir valgt fra gruppen bestående av fenyl og cykloheksyl. Eksempler på aminosyrerester fra hvilke (R1)n,(R2)(R3)N-<*>CH(CH2R4)CO- kan bli avledet, er fenylalanin, p-fluorfenylalanin, p-klorfenylalanin, p-bromfenylalanin, p-jodfenylalanin, p-klorfenylalanin, p-bromfenylalanin, p-jodfenylalanin, tyrosin, p-metoksyfenylalanin, 1-naftylalanin, 2-naftylalanin, tryptofan, p<->2-tienylalanin, p<->3-pyridylalanin, a-aminosmørsyre, norvalin, norleucin, leucin og cykloheksylalanin. For forbindelser med høye nivåer av mave-tarmperistaltisk aktivitet, er de foretrukne aminotermi- naie aminosyrene L-fenylalanin, D-fenylalanin, L-cykloheksylalanin og D-cykloheksylalanin.
Posisjon 2, gruppe Å
Gruppe A i posisjon 2 til polypeptidet er en aminosyre som er L-stereoisomeren til en lipofil aliftisk eller alicyklisk aminosyre. Eksempler på L-lipofile alifatiske og alicykliske aminosyrer er L-valin, L-isoleucin, L-leucin, L-norvalin, L-norleucin og L-cykloheksyalanin. Foretrukket gruppe A aminosyrer er L-valin, L-leucin og L-isoleucin.
Posisjon 3, gruppe B
Gruppe B i posisjon 3 til polypeptidet er en aminosyre som er L-prolin og L-alanin. For forbindelser som har høye nivåer av motilinresptoragonistisk aktivitet, utgjør den foretrukne gruppen B aminosyren L-prolin.
Posisjon 4, gruppe D
Gruppe D i posisjon 4 til polypeptidet er en aminosyre som er L-stereoisomeren til en lipofil alifatisk eller alicyklisk aminosyre. Eksempler på L-lipofile alifatiske og alicykliske aminosyrer er L-isoleucin, L-valin, L-leucin, L-norvalin, L-norleucin og L-cykloheksylalanin. Foretrukne gruppe D aminosyrer er L-isoleucin, L-leucin og L-cykloheksylalanin.
Posisjon 5, gruppe E
Gruppe E i posisjon 5 til polypeptidet er en aminosyre som er L-stereoismeren til en aromatisk, lipofilalifatisk eller alicyklisk aminosyre. Eksempler på L-aromatiske, lipofile alifatiske og alicykliske aminosyrer er rester avledet fra fenylalanin, p-fluorfenylalanin, p-klorfenylalanin, p-bromfenylalanin, p-jodfenylalanin, tyrosin, p-metoksyfenylalanin, 1-naftylalanin, 2-naftylalanin, leucin og cykloheksylalanin. Foretrukken gruppe E aminosyrer er L-fenylalanin og L-cykloheksylalanin.
Posisjon 6, L-treonin
Aminosyren i posisjon 6 til polypeptidet er L-treonin.
Posisjon 7, gruppe F
Gruppe F i posisjon 7 til polypeptidet er en aminosyre som er L-stereoisomeren til en aromatisk eller heteroaromatisk aminosyre. Eksempler på aromatiske og heteroaromatiske aminosyrer er tyrosin, fenylalanin, p-metoksyfenylalanin, histidin, tryptofan, p<->2-tienylalanin og p<->3-pyridylalanin. Foretrukket gruppe F aminosyrer er L-tyrosin, L-histidin og L-fenylalanin.
Posisjon 8, gruppe G
Gruppe G i posisjon 8 til polypeptidet er en aminosyre som er glycin eller D-alanin, og fortrinnsvis glycin.
Posisjon 9, gruppe H
Gruppe H i posisjon 9 til polypeptidet er en aminosyre som er L-glutaminsyre eller L-glutamin, og er fortrinnsvis L-glutaminsyre.
Posisjon 10, L-leucin
Aminosyren i posisjon 10 til polypeptidet er L-leucin.
Posisjon 11, gruppe I
Gruppe I i posisjon 11 til polypeptidet er en aminosyre som er L-glutamin, L-glutaminsyre eller L-alanin. Foretrukket gruppe I aminosyrer er L-glutamin og L-alanin.
Gruppe J
Gruppe J i polypeptidet kan være en direkte binding mellom gruppe I og -NH-gruppen eller kan bli valgt fra gruppen bestående av Z, Z-Leu, Z-Leu-Gln, Z-Leu-Gln-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Gly-Arg-Asn-Lys og Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly, og fortrinnsvis fra gruppen bestående av Z-Leu, Z-Leu-Glna-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn og Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly. Gruppe Z er en aminosyre valgt fra gruppen bestående av arginin, D-arginin, D-homoarginin, D-lysin, D-ornitin, D-2,4-diaminosmørsyre, D-glutamin, D-aspargin og D-alanin, fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av arginin, D-arginin, D-glutamin og D-alanin.
Posisjon 12
Når gruppe J i polypeptidet er en direkte binding mellom gruppe I og -NH-gruppen, er polypeptidet et dodekapeptid og aminosyren i posisjon 12 er den C-terminale delen, -NH-<*>CH(CH2R5)-R6av polypeptidet. Når gruppe J er en direkte binding og gruppene R2og R3i posisjon 1 til polypeptidet er hydrogen, har aminosyren i posisjon 12 D-konfigurasjonen. Gruppe R5er en aminoalkylgruppe inneholdende fra 1 til 3 karbonatomer, eller en guanidinoalkylgruppe inneholdende 2 eller 3 karbonatomer, og blir fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av guanidinoalkylgrupper inneholdende 2 eller 3 karbonatomer. Foretrukne aminoalkylgrupper er aminometyl, 2-aminoetyl og 3-amino-n-propyl. Foretrukne guanidinoalkylgrupper er N-2-guanidinoetyl og N-3-guanidino-n-propyl. Gruppe Rfc er -COOH eller -C0NH2, fortrinnsvis -C0NH2. Aminosyren i den C-terminale delen, -NH<*>CH(CH2R5)-Rfcav polypeptidet i denne tilførelsesformen, blir fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av arginin, D-arginin, lysin, D-lysin, D-ornitin, D-2,4-diaminosmørsyre og D-homoarginin, og blir fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av arginin, D-arginin og lysin.
Når gruppe J i polypeptidet ikke er en direkte binding mellom gruppe I og -NH-gruppen, er aminosyren i posisjon 12 gruppe Z. Som angitt ovenfor er gruppe Z en aminosyre valgt fra gruppen bestående av arginin, D-arginin, d-homoarginin, D-lysin, D-ornitin, D-2,4-diaminosmørsyre, D-glutamin, D-asparagin og D-alanin. Gruppen S blir fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av arginin, D-arginin, D-glutamin og D-alanin, mer foretrukket er at gruppe Z er D-arginin. Når gruppene R2og R3i posisjon 1 til polypeptidet er hydrogen, har aminosyren til gruppe Z D-konfigurasjon.
Posisjon 13
Når polypeptidet i foreliggende oppfinnelse er et tridekapeptid, er aminosyren i posisjon 13 den C-terminale delen, -NH-*CH(CH2R5 )-R6 av polypeptidet, og kan ha L- eller D-konfigurasjon, og kan bli valgt fra gruppen bestående av lysin, ornitin, 2,4-diaminosmørsyre, arginin og homoarginin, fortrinnsvis L-lysin eller D-lysin.
Når polypeptidet ifølge foreliggende oppfinnelse er større enn et tridekapeptid, er aminosyren i posisjon 13 L-leucin.
Posisjon 14
Når polypeptidet i foreliggende oppfinnelse er et tetradekapeptid, er aminosyren i posisjon 14 den C-terminale delen, -NH-*CH(CH2R5 )~R6 av polypeptidet, og kan ha L- eller D-konfigurasjon, og kan bli valgt fra gruppen bestående av glutamin, lysin, ornitin, 2,4-diaminosmørsyre, arginin og homoarginin, og blir fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av L-lysin, D-lysin, L-glutamin og D-glutamin.
Når polypeptidet ifølge foreliggende oppfinnelse er større enn et tetradekapeptid, er aminosyren i posisjon 14 til polypeptidet L-glutamin.
Posisjon 15
Når polypeptidet i foreliggende oppfinnelse er et pentadekapeptid, er aminosyren i posisjon 15 den C-terminale délen,
-NH-*CH(CH2R5 )~R6 av polypeptidet, og kan ha L- eller D-konfigurasjon, og kan bli valgt fra gruppen bestående av
lysin, ornitin, 2,4-diaminosmørsyre, arginin og homoarginin, fortrinnsvis L-lysin eller D-lysin.
Når polypeptidet ifølge foreliggende oppfinnelse er større enn et pentadekapeptid, er aminosyren i posisjon 15 L-glutaminsyre.
Posisjon 16
Når polypeptidet i foreliggende oppfinnelse er et heksadekapeptid, er aminosyren i posisjon 16 den C-terminale delen, -NH-*CH(CH2R5 )-I?6 av polypeptidet, og kan ha L- eller D-konfigurasjon, og kan bli valgt fra gruppen bestående av lysin, ornitin, 2,4-diaminosmørsyre, arginin og homoarginin, fortrinnsvis L-lysin eller D-lysin.
Når polypeptidet ifølge foreliggende oppfinnelse er større enn et heksadekapeptid, er aminosyren i posisjon 16 til polypeptidet L-lysin.
Posisjon 17
Når polypeptidet i foreliggende oppfinnelse er et heptadekapeptid, er aminosyren i posisjon 17 den C-terminale delen, -NH-<*>CH(CH2R5)-Rfc av polypeptidet, og kan ha L- eller D-konfigurasjon, og kan bli valgt fra gruppen bestående av lysin, ornitin, 2,4-diaminosmørsyre, arginin og homoarginin, fortrinnsvis L-lysin eller D-lysin.
Når polypeptidet ifølge foreliggende oppfinnelse er større enn et heptadekapeptid, er aminosyren i posisjon 17 L-glutaminsyre.
Posisjon 18
Når polypeptidet i foreliggende oppfinnelse er et oktadekapeptid, er aminosyren i posisjon 18 den C-terminale delen, -NH-*CH(CH2Pv5 )~R6 av polypeptidet, og kan ha L- eller D-konfigurasjon, og kan bli valgt fra gruppen bestående av lysin, ornitin, 2,4-diaminosmørsyre, arginin og homoarginin, og blir fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av L-lysin, D-lysin, L-arginin og D-arginin.
Når polypeptidet ifølge foreliggende oppfinnelse er større enn et oktadekapeptid, er aminosyren i posisjon 18 til polypeptidet L-arginin.
Posisjon 19
Når polypeptidet ifølge foreliggende oppfinnelse er et nonadekapeptid, er aminosyren i posisjon 19 den C-terminale delen, -NH-<*>CH(CH2R5)-R6av polypeptidet, og kan ha L- eller D-konfigurasjon, og kan bli valgt fra gruppen bestående av lysin, ornitin, 2,4-diaminosmørsyre, arginin og homoarginin, fortinnsvis L-lysin eller D-lysin.
Når polypeptidet ifølge foreliggende oppfinnelse er større enn et nonadekapeptid, er aminosyren i posisjon 19 L-asparagin.
Posisjon 20
Når polypeptidet i foreliggende oppfinnelse består av 20 aminosyrer, er aminosyren i posisjon 20 den C-terminale delen, -NH-*CH(CH2R5)-Rfc av polypeptidet, og kan ha L- eller D-konfigurasjon, og kan bli valgt fra gruppen bestående av lysin, ornitin, 2,4-diaminosmørsyre, arginin og homoarginin, fortrinnsvis L-lysin eller D-lysin.
Når polypeptidet ifølge foreliggende oppfinnelse er større enn 20 aminosyrer, er aminosyren i posisjon 20 til polypeptidet L-lysin.
Posisjon 21
Når polypeptidet ifølge foreliggende oppfinnelse består av 21 aminosyrer, er aminosyren i posisjon 21 den C-terminale delen, -NH-<*>CH(CH2R5)-R&av polypeptidet, og kan ha L- eller D-konfigurasjon, og kan bli valgt fra gruppen bestående av lysin, ornitin, 2,4-diaminosmørsyre, aginin og homoarginin, fortrinnsvis L-lysin eller D-lysin.
Når polypeptidet ifølge foreliggende oppfinnelse er større enn 21 aminosyrer, er aminosyren i posisjon 21 glysin.
Posisjon 22
Aminosyren i posisjon 22 til visse polypeptider ifølge foreliggende oppfinnelse er den C-terminale delen, -NH-MCH( CH2R5 )-Réj » kan ha L- eller D-konf igurasj on og kan bli valgt fra gruppen bestående av glutamin, lysin, ornitin, 2,4-diaminosmørsyre, arginin og homoarginin og blir fortrinnsvis valgt fra gruppen bestående av L-lysin, D-lysin, L-glutamin og D-glutamin.
Resten tilstede i den C-terminale delen, -NH-<*>CH(CH2R5)-R&av polypeptidene ifølge foreliggende oppfinnelse, er en aminosyre med et C-terminalt karboksylsyrederivat R6, hvor R^er -COOH eller -C0NH2, fortrinnsvis -C0NH2. R5er som definert ovenfor.
Betegnelsen "cykloalkyl", som anvendt heri, betyr cykliske hydrokarbonrester inneholdende fra 5 til 7 karbonatomer. Eksempler på egnede sykliske hydrokarbonrester er cyklopentyl, cykloheksyl og cykloheptyl. Betegnelsen "halogen", som anvendt heri, innbefatter alle fire halogener, idet klor er foretrukket.
I en foretrukket utførelsesform blir forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse valgt fra gruppen bestående av:
og deres farmasøytisk akseptable addisjonssalter. I hvert tilfelle har aminosyrene L-konfigurasjon dersom ikke annet er angitt. I en mer foretrukket utførelsesform, blir forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse valgt fra gruppen bestående av: og deres farmasøytisk akseptable adddisjonssalter. I den mest foretrukne utførelsesformen, blir forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse valgt fra gruppen bestående av
og deres farmasøytisk akseptable addisjonssalter.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan bli fremstilt ved hjelp av forskjellige fremgangsmåter kjent innenfor fagområdet slik som ved fastfase-peptidsyntese eller ved klassisk oppløsningsfasesyntese. I fastfasemetoden blir peptidkjeden sekvensielt konstruert ved anvendelse av en harpiksbærer, vanligvis en polystyrenbasert, polyhip-basert eller en polyakrylamid/kieselguhr-komposittharpiks. Den voksende peptidkjeden blir koblet til harpiksbaereren ved hjelp av en egnet, syrelabil molekylær binder, slik som hydroksymetylfenylacetamidometyl (PAM), 4-metylbenzhydrylamino (MBHA) eller hydroksymetylfenoksyacetoksy (HMPA) deler. Peptidkjeden kan bli spaltet fra linkeren, og dermed harpiksbæreren, gjennom acidolyse ved anvendelse av hydrogen-fluorid, trifluoreddiksyre (TFA), trifluormetansulfonsyre (TFMSA) o.l.
Enten de mave-tarm-motorstimulerende polypeptidene ifølge foreliggende oppfinnelse blir fremstilt ved fastfase eller oppløsningsfasemetoder, innbefatter den vesentlige frem-stillingsmetoden kobling av aminosyresubenheter gjennom omsetning av karboksyldelen av en på egnet måte beskyttet aminosyre eller peptidfragment med aminogruppen til en annen på egnet måte beskyttet aminosyre eller peptidfragment for å danne en ny amidbinding. For å oppnå koblingsreaksjonen, må karboksyldelen bli aktivert. Aktivering oppnås gjennom anvendelse av standard koblingsreagenser slik som DCC, DIC, EDCC, BOP, HBTU eller PyBrOP. Med unntagelse av PyBrOP, kan en ekvimolar mengde HOBt bli tilsatt for å undertrykke racemisering av den aktiverte aminosyrekomponenten. Baser slik som NMM, DIEA eller TEA, kan bli anvendt i de tilfellene hvor det er nødvendig å anvende karboksylatsaltet til den tilsvarende aminosyren for aktivering.
Alternativt kan peptidene ifølge foreliggende oppfinnelse bli syntetisert ved kobling av aktive estere til komponentamino-syrene. Slike aktive estere innbefatter for eksempel en pentaklorfenylester, en pentafluorfenylester, en p-nitro-fenylester o.l.
I løpet av fremstillingen av peptidene ifølge foreliggende oppfinnelse, må andre reaktive funksjonaliteter av aminosyre-komponentene bli blokkert med hensiktsmessige beskyttelses-grupper. Generelt dikterer identiteten til den a-aminobeskyttende gruppen hvilken type av sidekjedebeskyttende grupper som må bli anvendt. For eksempel, i det tilfellet hvor a-aminogruppen er beskyttet som dets Boc-derivat, blir sidekjedebeskyttelsen vanligvis oppnådd med estere eller uretanderivater av benzylalkohol. Ester- og eterderivater av cykloheksanol har også blitt anvendt med noe hell. I kontrast til dette, kan det fremholdes at når a-aminogruppen er beskyttet som dets Fmoc-derivat, blir sidekjedefunksjonalite-ten generelt beskyttet som ester-, eter- eller uretanderivater av t-butanol. Alternative kombinasjoner av besksyttelses-grupper kan selvfølgelig bli anvendt, spesielt når peptidene ifølge foreliggende oppfinnelse blir fremstilt ved hjelp av oppløsningsfasemetodologi.
Fjerning av den Fmoc a-aminobeskyttende gruppen, kan lett bli oppnådd med en base, vanligvis piperidin. Sidekjedebeskyttende grupper kan bli fjernet ved behandling med TFA i nærvær av en hensiktsmessig karboniumionfanger, som også spalter bindingen mellom C-terminusen til peptidet og harpikslin-keren. Boc-beskyttelsesgruppen blir generelt fjernet ved behandling med fortynnet TFA. Etter TFA-spaltning, er cx-aminogruppen tilstede som TFA-saltet derav. For å gjøre a-aminogruppen til den voksende peptidkjeden reaktiv overfor det andre aminosyrederivatet, blir det harpiksbundede peptidet nøytralisert med en base slik som TEA eller DIEA. Sterk syre, slik som hydrofluorsyre eller TFMSA, inneholdende egnede oppfangere, blir deretter anvendt for å avspalte aminosyre-sidekjedene og spalter peptidet fra harpiksbæreren.
En fremgangsmåte for fremstilling av peptider i henhold til foreliggende oppfinnelse som inneholder den aminoterminale delen, (R-l )m(R2 ) (R3 )N-, er gitt. Når m = 0; er R2hydrogen eller laverealkyl; og E3er laverealkyl, og omfatter fremgangsmåten omsetting av den N-terminale aminogruppen (NH2-{AA)n-) til et egnet beskyttet peptid, eventuelt bundet til en uoppløselig bærer gjennom en hensiktsmessig linker, med et hensiktsmessig aldehyd eller keton og et alkalimetall-hydridreduserende middel. Aldehydet eller ketonet kan for eksempel være formaldehyd, acetaldehyd eller aceton. Alkalimetallhydridet kan f.eks. være et alkalimetall-borhydrid slik som natriumcyanoborhydrid. Fremgangsmåten blir hensiktsmessig utført i et egnet oppløsningsmiddel, slik som DMF eller NMP, eventuelt sammen med eddiksyre eller 1-hydroksyetylpiperazin-etansulfonsyre (HEPES), ved romtemperatur. Fremgangsmåten er mer fullstendig beskrevet i US-patent nr. 4.421.744, hvis beskrivelse er inkorporert heri som referanse.
Når m = 1; er E^og E3uavhengig laverealkyl eller allyl; og E2blir valgt fra gruppen bestående av laverealkyl, allyl og propargyl, og fremgangsmåten omfatter omsetning av den N-terminale aminogruppen (NR2R3~(AA)^-) til et egnet beskyttet peptid, eventuelt bundet til en uoppløselig bærer gjennom en hensiktsmessig linker, med en forbindelse representert ved formelen R^Hal, hvor R^er definert ovenfor og Hal er et halogenatom. Reaksjonen blir utført i et egnet oppløs-ningmsiddel, slik som DMF eller NMP, i nærvær av et egnet syrebindende middel, slik som natriumkarbonat eller kaliumkarbonat. Fremgangsmåten er mer fullstendig beskrevet i Benoiton-Chen, Proced. 14th. Europ.Pept.Symp., (1976), s. 149, og beskrivelsen er inkorporert heri som referanse. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse er effektive i form av den frie basen, og kan bli formulert og administrert i form av farmasøytisk akseptable syreaddisjonssalter for å oppnå stabilitet, hensiktsmessig krystallisering, øket oppløselighet o.l. Disse syreaddisjonssaltene blir dannet ved hjelp av konvensjonelle metoder ut fra egnede uorganiske eller organiske syrer slik som saltsyre, svovelsyre, sulfon-syre, vinsyre, fumarsyre, hydrobromsyre, glykosyre, sitron-syre, eplesyre, fosforsyre, ravsyre, eddiksyre, salpetersyre, benzosyre, askorbinsyre, p-toluensulfonsyre, benzensulfon-syre, naftalensulfonsyre, propionsyre o.l. syreaddisjonssaltene blir fortrinnsvis fremstilt fra saltsyre, eddiksyre eller ravsyre.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan bli kombinert med en farmasøytisk akseptabel bærer for å tilveiebringe en farmasøytisk sammensetning. Egnede bærere for forbindelsene som fri base, innbefatter propylenglykol-alkohl-vann, isotonisk vann, sterilt vann for injeksjon (USP), emulphor™-alkohl-vann, kremophor-EL™ eller andre egnede bærere kjent for fagfolk innenfor dette området.
Egnede bærere for syreaddisjonssaltene til forbindelsene innbefatter isotonisk vann, sterilt vann for injeksjon (USP), alene eller i kombinasjon med andre oppløsningsmidler slik som etanol, propylenglykol eller andre konvensjonelle oppløsningsmidler kjent for fagfolk innenfor dette området. En foretrukket bærer er en isotonisk vandig oppløsning av forbindelsen ifølge oppfinnelsen.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan bli administrer til pattedyr, f.eks. dyr eller mennesker, i mengder som er effektive for å tilveiebringe den ønskede mave-tarm-motorstimulerende aktiviteten. På grunn av at aktiviteten til forbindelsene og graden av ønsket terapeutisk effekt varierer, vil doseringsnivået til forbindelsen som blir anvendt også variere. Den aktuelle doseringen som blir administrert, vil også bli bestemt ut fra slike generelle anerkjente faktorer som kroppsvekten til pasienten og den individuelle hypersensitiviteten til den bestemte pasienten. Enhetsdoseringen for en spesiell pasient (mann) kan derfor variere fra så lavt som 0,1 jjg pr. kg. kroppsvekt som kan titreres til ønsket virkning. En foretrukket minimal dose for titrering er 1 pg/kg kroppsvekt.
Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan bli administrert ved hjelp av anerkjente, parenterale veier, i form av sterile oppløsninger eller suspensjoner, i bærere som tidligere er beskrevet. Disse preparatene kan inneholde minst omkring 0,1 vekt-# av forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse, men denne mengden kan bli variert til mellom omkring 0,1 vekt-# og omkring 50 vek-t# av forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse. Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse blir fortrinnsvis administrert intravenøst og anvendt dosering vil generelt være i området fra omkirng 0,1 pg til omkring 500 mg, og fortrinnsvis fra omkring 1 jjg til omkring 50 mg pr. 70 kg kroppsvekt. Denne doseringen kan bli administrert fra 1 til 4 ganger daglig.
Den sterile oppløsningen eller suspensjonen kan også innbefatte følgende adjuvanter: Et sterilt fortynningsmiddel, slik som vann for injeksjon, saltvannsoppløsning, fikserte oljer, polyetylenglykol, glyserin, propylenglykol eller andre syntetiske oppløsningsmidler, antibakterielle midler slik som benzylalkohol eller metylparaben; antioksyderende midler slik som askorbinsyre eller natrium-metabisulfitt; chelaterings-midler slik som etylendiamintetraeddiksyre (EDTA); buffere, slik som acetater, sitrater eller fosfater; og midler for justering av tonisiteten, slik som natriumklorid eller dekstrose. De parenterale preparatene kan innesluttes i ampuller, engangssprøyter eller beholdere med flere doserin-ger dannet av glass eller plast.
Forskjellige publikasjoner er blitt refert til i foreliggende oppfinnelse. Beskrivelsene i disse publikasjonene er i sin helhet inkorporert heri som referanse.
Foreliggende oppfinnelse vil bli ytterligere illustrert ved følgende eksempler.
Eksempel 1
[12-D-arginin, 13-leucin]motilin-(1-14)-peptid (gris) bis-trifluoracetatsalt
H-Phe-Val-Pro-Ile-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-D-Arg-Leu-Gln-OH.
Polypeptidet ble fremstilt på 2.0 g F-moc-L-Gln(Mbh)PepSyn KA harpiks (0.097 mequiv/g) ved fast fase kontinuerlig strøm-ningsteknikker ved anvendelse av en MilliGen modell 9050 peptid syntesemaskin. Alle residiene ble koblet som Pfp estere av Fmoc aminosyrene i nærvær av HOBt, med unntagelse av Thr som var ODhbt esteren. Sidekjede beskyttelse var som følger:D-Arg(Mtr), Glu(OtBu), Tyr(tBu) og Thr(tBu). Gin ble latt være ubeskyttet. Et fire-ganger molart overskudd av Fmoc aminosyren OPfp/HOBt i DMF ble anvendt for kobling. Koblingseffektiviteten ble registrert i Kaiser testen. Koblingstidene varierte fra 1 til 4 timer. Etter hver koblingssyklus ble fjerning av Fmoc-amino beskyttelsesgruppen oppnådd med 20% piperidin i DMF. Etter syntese ble det harpiksbindede peptidet vasket med DSM og tørket under vakuum over natt. Deblokkering og spaltning av peptidet fra harpiksen ble utført ved romtemperatur ved risting med vannfri TFA inneholdende 5% thioansiol, 3% etanditiol og 2% anisol (20 ml totalt) i 8 timer. Spaltningsoppløsningen ble deretter tilsatt dråpevis til 250 ml kald eter og det presipiterte peptidet ble samlet ved filtrering for oppnåelse av 320 mg (855é) av tittelpeptidet som et hvitt pulver. Peptidrensning ble oppnådd i tre forsøk (vanlig belastning = 107 mg pr forsøk) ved HPLC på en Waters Delta-Prep 3000 ved anvendelse av to C-18 kolonner i serier (250 x 20 mm, 15jj, Vydac). Oppløsningsmiddelsystemet var 0.196 TFA med en 30 minutter lang gradient til 6056 acetonitr il/4056 TFA ( 0. 1%) ved 20 ml/min med UV deteksjon ved 220 nm. Renheten til de individuelle fraksjonene ble vurdert ved analytisk HPLC (30 minutters gradient, 10056 TFA (0.156) til 10056 acetonitril, 1 ml/min, 214 nm; Rt = 17.37 minutter) og kapillær sone elektroforese. Rene fraksjoner (>9556) ble slått sammen og lyofilisert for tilveiebringing av 107 mg (2856) av tittelpolypeptidet som et dunaktig hvitt pulver.
AAA: Thr 0.87 (1), Glx 3.02 (3), Gly 1.04 (1), Val 1.02 (1), Ile 0.92 (1), Leu 2.14 (2), Tyr 1.00 (1), Phe 1.93 (2), Arg 0.93 (1), FAB-MS: (M+H)<+>beregnet 1712, funnet 1712.
Eksempel 2
[1-N-metylfenylalanin, 3-alanin, 11-alanin, 12-D-arginin, 13-leucin, 14-D-lysin]motilin-(1-14)-peptidamid (gris)
(N-Me)-Phe-Val-Ala-Ile-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Ala-D-Arg-Leu-D-Lys-NH2.
Polypeptidet ble syntetisert på 0.85 g PAL harpiks (0.27 mequiv/g) ved fast fase kontinuerlige strømningsteknikker ved anvendelse av et MilliGen model 9050 peptid synteseapparat. Harpiksen ble blandet med 3.4 g glasskuler (syrevaskede, 150-212 mikron), tørr-pakkede inn i en kolonne med kontinuerlig strømning og svellet med DMF i 1 time før anvendelse. Fmoc-MePhe-OH ble koblet ved preaktivering med BOP og HOBt (1:1:1) i nærvær av 0.6M NMM i DMF. Fmoc-L-Thr-OH ble koblet som ODhbt esteren derav i nærvær av HOBt. Alle de andre residiene ble koblet som Pfp estere av Fmoc aminosyrene i nærvær av HOBt. Sidekjedebeskyttelse var som følger: D-Arg(Mtr), Glu(OtBu), Tyr(tBu), Thr(tBu), D-Lys(Boc), Gln(Trt). Et ftre-ganger molart overskudd av Fmoc aminosyrederivatet i DMF ble anvendt for kobling. Koblingseffektiviteten ble registrert ifølge Kaiser testen. Vanlige koblingstider varierte fra 1 til 4 timer. Etter hver syklus ble fjerning av Fmoc-a-amino beskyttende gruppen oppnådd med 2056 piperidin i DMF. Etter syntese ble det harpiks-bundede peptidet vasket med DCM og tørket under vakuum over natt. Deblokkering og spaltning av peptidet fra harpiksen ble utført ved romtemperatur ved risting med vannfri TFA inneholdende 5% tioansiol, 3% etanditiol og 2% anisol (20 ml totalt) i 8 timer. Spaltnings-oppløsningen ble deretter tilsatt dråpevis til 250 ml kald eter og det presipiterte peptidet ble samlet ved filtrering for oppnåelse av 210 mg ( 91%) av tittelpolypeptidet som et hvitt pulver. Peptidrensning ble oppnådd i tre forsøk (vanlig belastning = 70 mg pr. forsøk) ved HPLC på en Waters Delta-Prep 3000 ved anvendelse av to C-18 kolonner i serier (250 x 20 mm, 15jj, Vydac). Oppløsningsmiddelsystemet var 0.1% TFA med en 30 minutters gradient til b0% acetonitril/40% TFA (0.1$) ved 20 ml/min. med UV-deteksjon ved 220 nm. Renheten til de individuelle fraksjonene ble vurdert ved analytisk HPLC (30 minutters gradient, 100% TFA (0.1%) til 100% acetonitril, 1 ml/min, 214 nm; Rt = 17.06 minutter) og kapillærsone elektroforese. Rene fraksjoner (>95%) ble slått sammen og lyofilisert for tilveiebringing av 82 mg (36%) av tittelpolypeptidet som et dunaktig hvitt pulver.
AAA: Thr 0.95 (1), Glx 1.04 (1), Gly 1.04 (1), Val 0.74 (1), Ile 0.99 (1), Leu 2.11 (2), Tyr 1.01 (1), Phe 1.01 (1), Lys 1.03 (1), Arg 1.05 (1). FAB-MS: (M+H)<+>beregnet 1641, funnet 1641.
Eksempel 3
[1-N,N-dimetylfenylalanin, 13-leucin]motilin-(1-14 )-peptid amid (gris) bis-trifluoracetatsalt
(Me2N) -Phe-Val -Pro-1 le-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Arg-Leu-Gln-NH2
Polypeptidet ble syntetisert på NovaSynPR 500 harpiks på en 0.2 mmol skala ved fast fase kontinuerlige strømnings-teknikker ved anvendelse av et MilliGen model 9050 peptidsyntese apparat. Alle residiene ble koblet som Fpf estere av Fmoc aminosyrene i nærvær av HOBt, med unntagelse av Thr som var ODhbt esteren. Sidekjedebeskyttelsen var som følger: Arg/Mtr), Gln(Trt), Glu(OtBu), Tyr(tBu) og Thr(tBu). Et ftre-ganger molart overskudd av Fmoc aminosyrenOPfp/HOBt 1 DMF ble anvendt for kobling. Koblingseffektivlteten ble registrert i Kaiser test. Koblingstidene varierte fra 1 til 4 timer. Etter hver koblingssyklus ble fjerning av Fmoc-a-amino beskyttelsesgruppen oppnådd med 20% piperidin i DMF. Etter syntese ble det harpiks-bundede peptidet vasket med DCM og tørket under vakuum over natt. Harpiksen inneholdt fullstendig sammenstilt peptid og ble overført til en flaske inneholdende 20 ml NMP. Til denne suspensjonen ble det tilsatt sekvensielt 5 ml 37% vandig formaldehyd (300 ekv.), 126 mg natriumcyanoborhydrid (10 ekv.) og 200 pl iseddiksyre. Blandingen ble omrørt i 7 timer. Harpiksen ble filtrert og vasket med DMF (5 x 50 ml), DCM (5 x 50 ml) og tørket under vakuum. Deblokkering og spaltning av peptidet fra harpiksen ble utført ved romtemperatur ved risting med vannfri TFA inneholdende 5% tioanisol, 3% etanditiol og 2% anisol (20 ml totalt) i 8 timer. Spaltningsoppløsningen ble deretter dråpevis tilsatt til 250 ml kald eter og det presipiterte peptidet ble samlet ved filtrering for oppnåelse av tittelpolypeptidet som et hvitt pulver. Peptid rensing ble oppnådd i tre forsøk (vanlig belastning = 70 mg pr. forslk) ved HPLC på en Waters Delta-Prep 3000 ved anvendelse av to C-18 kolonner i serier (250 x 20mm, 15jj, Vydac). Oppløsnings-middelsystemet var 0.1% TFA med en 30 minutter lang gradient til 60% acetonitril/40% TFA (0.1%) ved 20 ml/min med UV deteksjon ved 220 nm. Rene fraksjoner (>95%) ble slått sammen og lyofilisert for å tilveiebringe 111 mg av tittelpolypeptidet som et dunaktig hvitt pulver.
AAA: Thr 0.84 (1), Glx 2.88 (3), Pro 1.03 (1), Gly 1.04 (1), Val 0.47 (1), Ile 0.87 (1), Leu 1.88 (2), Tyr 0.90 (1), Phe 0.97 (1), Arg 0.86 (1). FAB-MS: (M+H)<+>beregnet 1738, funnet 1738.
Eksempel 4
[1-N,N,N-trimetylfenylalanin , 13-leucin]motilin-(1-14 )-peptid (gris) bis-trifluoracetatsalt
(Me3N+) -Phe-Val -Pro-1 le-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Arg-Leu-Gln-OH
Polypeptidet ble syntetisert på FMOC-L-Gln-(Mbh) PepSynKA harpiks i en 0.2 mmol skala ved fast fase kontinuerlige strømningsteknikker ved anvendelse av et MilliGen model 9050 peptid syntese apparat. Alle residiene ble koblet som Pfp estere av Fmoc aminosyrene i nærvær av HOBt, med unntagelse av Thr som var ODhbt esteren. Sidekjedebeskyttelsen var som følger: Arg(Mtr), Gln(Trt), Glu(OtBu), Tyr(tBu) og Thr(tBu). Et fire-ganger molart overskudd av Fmoc aminosyren OPfp/HOBt i DMF ble anvendt for kobling. Koblingseffektiviteten ble registrert i Kaiser testen. Koblingstidene varierte fra 1 til 4 timer. Etter hver koblingssyklus ble fjerning av Fmoc-a-amino beskyttelsesgruppen oppnådd med 20% piperidin i DMF. Etter syntese ble harpiks-bundet peptid vasket med DCM og tørket under vakuum over natt. Harpiks inneholdende det fullstendig oppstilte peptidet ble overført til en flaske inneholdende 20 ml DMF. Til denne suspensjonen ble 5 ml metyliodid (400 ekv.) etterfulgt av 500 mg kaliumkarbonat (18 ekv.) tilsatt. Blandingen ble omrørt i 12 timer. Harpiksen ble filtrert og vasket med DMF (5 x 50 mL), vann (2 x 25 ml) DMF (5 x 50 ml) og tørket under vakuum. Deblokkering og spaltning av peptidet fra karpiksen ble utført ved romtemperatur ved risting med vannfri TFA inneholdende 5% tioanisol, 3% etanditiol, og 2% anisol (20 ml totalt) i 8 timer. Spaltningsoppløsningen ble deretter dråpevis tilsatt til 250 ml kald eter og det presipiterte peptidet ble samlet ved filtrering for oppnåelse av tittelpolypeptidet som et hvitt pulver. Peptidrensingen ble oppnådd i tre forsøk (vanlig belastning = 70 mg or forsøk) ved HPLC på en Waters Delta-Prep 3000 ved anvendelse av to C-18 kolonner i serier (250 x 20 mm, 15jj, Vydac). Oppløsningsmiddelsystemet var 0.1% TFA ned en 30 minutters gradient ti 60% acetonitril/40% TFA
(0.1%) ved 20 ml/min med UV deteksjon ved 220 nm. Rene fraksjoner (>95%) ble slått sammen og lyofilisert for å tilveiebringe 71 mg av tittelpolypeptidet som et lett hvitt pulver.
AAA: Thr 0.88 (1), Glx 3.25 (3), Pro 1.00 (1), Gly 1.00 (1), Val 0.30 (1), Ile 1,01 (1), leu 2.30 (2), Tyr 1.10 (1), Phe 1.10 (1), Arg 1.10 (1). FAB-MS: (M+H)<+>beregnet 1753, funnet 1753.
Eksempel 5
In vitro stabilitetstesting i 2% nyrehomogenat fra gris.
Som de fleste små lineære polypeptidene antas motilin å bli metabolisert av børstegrensecellene i nyren. Nyrehomogenat ble derfor valgt som modellsystem for vurdering av relativ in vivo biostabilitet til polypeptidene ifølge oppfinnelsen. Alle peptidene som skulle bli undersøkt ble inkubert i grisenyre (Pel Freeze, Inc., Rogers, Arkansas) (2% vekt/vol; sluttvolum = 4 ml; buffer = HEPES pH 7.0) ved 25°C. Både opprinnelig substratkonsentrasjon og indre standard (Fmoc-Gly) konsentrasjonen var 0.5 mg/ml. For å bestemme egnede inkubasjonstider og prøveintervaller ble to eksperimenter utført med hvert polypeptid. Det første forsøket var en grov vurdering av peptidstabiliteten. All prøvetakning ble utført i duplikat. Prøvevolumet var 180 pl.
Prøverensningen ble utført ved tilsetning av 20 pl 100% TCA (sluttvolum = 200 pl; slutt TCA konsentrasjon = 10%). Prøven ble vortex behandlet fra 5 til 10 sekunder for å forsikre likevekt, deretter sentrifugert for å sentrifugere ut presipiterte proteiner. Analysene ble utført på et Waters HPLC system med en WISP autoinjektor, en 5p Vydac C-18 analytisk kolonne og en Waters 481 UV detektor innstilt på 214 nm. Injeksjonsvolumet var 80 pl. De opprinnelige oppløsningsmiddelbetingelsene var 80% acetontril/20% (0.1%) TFA i Milli-Q vann med en 35 minutt gradient utført til 63% acetonitril/37% (0.1%) TFA ved 1 ml/min. Polypeptidsubstratet og metabolittoppene ble bestemt til indre standard og prøveforholdene i duplikat ble tatt gjennomsnitt av. Gjennomsnittlig forhold for peptidsubstratet ble uttrykt som prosentandel og plottet mot tiden. Første-ordens kinetikk ble oppstilt for behandling med data. Grad av fjerning av substratet ble beregnet ved anvendelse av Enzfitter programmet (Biosoft). Relative halveringstider ble definert ut fra forholdet:
EKSEMPEL 6
Bestemmelse av motilinresptor bindingsaffiniteten
Motilinresptorbindingsaffiniteten til peptidene ifølge denne oppfinnelsen ble bestemt ved anvendelse av den generelle prosedyren til Bormans, Peeters og Vantrappen, Regul. pept., 15, 143-153 (1986). Evnen som peptidene har til å erstatte [125I-Tyr<7>,Nle<13>]motilir (gris) bundet til kaninantral glatte muskelcellemcnibraner, ble bestemt ved testing to ganger, hver gang i duplikat, ved konsentrasjoner varierende fra IO-<11>til 10~<4>M. Konsentrasjonen som erstatter 50% merket (IC5Q) ble bestemt ved å tilpasse dataene til ligningen som beskriver erstatning ved å anta en enkelt klasse av motilinreseptorer hvortil merket og ikke-merket motilin bindes med lik affinitet og uten samsvar. Til-pasningen ble utført ved anvendelse av "iterative least-squares" prosedyren til SAS-software pakken (SAS Institute, Inc., Cary, NC, USA). Fra en stor serie av kontroll-eksperimenter ble dissosiasjonskonstanten til selve motilin beregnet som 0.75 nN (pK^= 9.12) og denne verdien ble anvendt i beregningene. Konsentrasjonen som erstatter 50% av markøren blir uttrykt ved anvendelse av dets negative logaritme (pIC50).
37
Eksempel 7
Kanin tolvfingertarm glattmuskelvevsstrimmelbad-analyse
Den sammentrekkende responsen til segmenter fra tolvfingertarm fra kanin ble bestemt isotonisk i vevsbad ifølge prosedyren til Depoortere et al., J. Gastrointestinal Motility, 1, 150-159 (1989). Den eksperimentelle protokollen besto av en likevektsperiode på en time, behandling med 10~<4>M acetylcholin etterfulgt av en utvaskningsperiode, en kumulativ dose-responskurve til en forbindelse med, på slutten, tilsetning av 10~<7>M motilin og til slutt IO-<4>M acetylcholin. Den endelige responsen overfor IO-<4>M acetylcholin var forskjellig med mer enn 5% i forhold til den opprinnelige responsen og resultatene ble fjernet. Forbindelsene ble testet i konsentrasjonsområdet 10-<11>til IO-<4>M. Punktet tilsvarende 50% av maksimal respons overfor motilin (<E>max) ble bestemt ved å tilpasse ligningen E = Emax(1 + EC5q/[L] gjennom datapunktene. For svake aktive forbindelser ble 90% av responsen overfor IO-<7>M motilin anvendt som Emax. Dosen som ga 5 0% av responsen blir uttrykt ved anvendelse av negativ logaritme (PEC50).
Eksempel 8
Sammentrekkende aktivitet i mavetarmkanalen til kanin.
Mongrelhunder av et hvilket som helst kjønn ble bedøvd med natriumpentobarbital 65 mg/kg intravenøst. Et midt-linjeinnsnitt ble utført i maven. Et tolvfingertarmsegment ble lokalisert, terminale arterier til segmentet ble identifisert og den nærmeste arterien med hensiktsmessig størrelse ble skrubbet ren for fett og muskelhinner. En nål med egnet diameter ble bøyd i en vinkel og tuppen ført inn i den rensede arterien. Nålen ble holdt i riktig posisjon i arterien i omtrent 30 sekunder helt til vaskulære spasmer var blitt avslappet og deretter ble et kateter ført inn i arterien og knyttet i posisjon med 000 silketråder. Det fine polyetylenkateteret (10-15 cm) ble kuttet til et punkt i en ende med en nål skutt inn i den andre enden. Midten av nålen ble utstyrt med en trevets stopper og kateteret ble fylt med heparinisert Krebs Ringer bikarbonat inneholdende 10 mM glukose. En bolus av. Krebs (luftfri) ble injisert inn i det arterielle kateteret og fordelingen av blekingen i segmentet ble notert. Dersom området var for stort er det mulig å stenge av kollaterale arterier dersom sirkuleringen til området blir opprettholdt. En "Bass type strain" gauge ble deretter sydd til serosa og orientert slik at de sirkulære muskelsammentrekningene kan bli registrert på en Beckman R611 dynograf. Elektroder av sølvtråd ble ført inn subserosalt på hver side av gaugen og ble koblet gjennom stimulus iso-ler ingsenheter til en Grass S88 elektrisk stimulator. Stimulering med elektrisk felt ble påført i 40V 0.5 ms og 5pps og amplituden til pen registratoren ble innstilt for å innbefatte sammentrekningsresponsen.
Alle peptidene som skulle bli injisert ble løst opp i Krebs og fortynnet i serier slik at for en hvilken som helst konsentrasjon var det maksimale volumet som skulle bli injisert 1 ml. Alle oppløsninger unntatt stamløsnings Krebs ble på eksperimentdagen oppbevart på is og kastet på slutten av dagen. For å bestemme en dose-respons kurve ble stedet først injisert med en bolus av omtrent 1 ml heparinisert Krebs for å tilveiebringe en spylingskontroll. Peptidagonis-ter (i volum på 1 ml spylt med 1 ml Krebs) ble injisert i logaritmiske deler helt til en respons som var maksimal i amplitude ble oppnådd. Injeksjonssetet ble deretter spylt med Krebs inneholdende 0,1% BSA for å erstatte eventuelt peptid som er igjen i den arterielle linjen. For peptider som virker ved motilinreseptoren ble det forsøkt å ikke injisere supermaksimale doser på grunn av at disse vil indusere tachyphylaxis. Når responsene fremkom ble 0.3 eller 0.5 log enhetsdeler anvendt. Et sted ble anvendt for en dose-respons bestemmelse bare hver 1/2 til 1 time.
Amplituden til kalibreringsresponsen for feltstimulering i hvert sted ble målt og anvendt som 100% for det stedet. Amplituden til responsen overfor agonist i hver dose ble bestemt, beregnet som 1% av kalibreringsresponsen og plottet mot konsentrasjonen. ED50av responsen representerer mengden av agonist som er nødvendig for å produsere en respons som var 50% av kalibreringsresponsen. Det reflekterer både effektiviteten til responsen og potensen, og det kan ikke klart sjelnes mellom disse.
Claims (10)
1.
Polypeptider,karakterisert vedat de har mave-tarm motorstimulerende aktivitet og er representert ved formelen:
inkludert optiske aktive isomere former og farmasøytiske akseptable syreaddisjonssalter derav hvor: A er L-stereoisomeren til en lipofil alifatisk eller alicyclisk aminosyre; B er L-prolin eller L-alanin; D er L-stereoisomeren til en lipofil alifatisk eller alicyclisk aminosyre; E er L-stereoisomeren til en aromatisk, lipofil alifatisk eller alicyclisk aminosyre; F er L-stereoisomeren til en aromatisk eller heteroaromatisk aminosyre; G er en glycin eller D-alanin; H er L-glutaminsyre eller L-glutamin; I er L-glutamin, L-glutaminsyre eller L-alanin; J er en direktebinding mellom I og gruppen -NH- eller blir valgt fra gruppen bestående av Z, Z-Leu, Z-Leu-Gln, Z-Leu-Gln-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys, og Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly, hvor Z blir valgt fra gruppen bestående av arginin, D-arginin, D-homoarginin, D-lysin, D-ornithin, D-2,4-diaminosmørsyre, D-glutamin, D-asparagin og D-alanin; Ri er lavere alkyl eller allyl; R 2 blir valgt fra gruppen bestående av hydrogen, lavere alkyl, propargyl og allyl; R3blir valgt fra gruppen bestående av hydrogen, lavere alkyl og allyl; R4blir valgt fra gruppen bestående av lavere alkyl, cycloalkyl , substituert og usubstituert aryl, og heteroaryl, hvor arylgruppen kan bli substituert med en eller flere substituenter valgt fra gruppen bestående av halogen, hydroksy og lavere-alkoksy; R5blir valgt fra gruppen bestående av -CH2CONH2, aminoalkylgrupper inneholdende fra 1 til 3 karbonatomer og guanidinoalkylgrupper inneholdende 2 eller 3 karbonatomer; R6er -COOH eller -C0NH2; og m er 0 eller 1, symbolet<*>representerer et asymmetrisk karbonatom som kan være i D eller L konfigurasjon, og hver lavere alkylgruppe inneholder fra 1 til 4 karbonatomer, forutsatt at: (a) når m er 0, er R2og R3hydrogen, og J er en direkte binding -NH-<*>CH(CH2R5)R6gruppe har D-konfigurasjon, (b) R5er -CH2C0NH2bare når J er Z-Leu eller Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly; (c) når m=0, er R2og R3hydrogen, og J er Z, Z-Leu, Z-Leu-Gln, Z-Leu-Gln-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys, og Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly, Z har D konfigurasjon og og (d) polypeptidet er forskjellig fra motilin.
2.
Polypeptid ifølge krav 1,karakterisertved at (R1)m(<R>2)(R3)N-<*>CH(CH2R4)CO- blir valgt fra gruppen bestående av L-fenylalanin, D-fenylalanin, L-cycloheksylalanin og D-cycloheksylalanin.
3.
Polypeptid ifølge krav 1,karakterisertved at A blir valgt fra gruppen bestående av L-valin, L-isoleucin, L-leucin, L-norvalin, L-norleucin og L-cycloheksylalanin.
4 •
Polypeptid ifølge krav 1,karakterisertved at det blir valgt fra gruppen bestående av L-isoleucin, L-valin, L-leucin, L-norvalin, L-norleucin og L-cycloheksylalanin.
5 .
Polypeptid ifølge krav 1,karakterisertved at E blir valgt fra gruppen bestående av fenylalanin, p-fluorfenylalanin, p-klorfenylkalanin, p-bromfenylalanin, p-iodfenylalaninm tyrosin, p-metoksyfenylalanin, 1-naftylalanin, 2-naftylalanin, leucin og cycloheksylalanin.
6.
Polypeptid ifølge krav 1,karakterisertved at F blir valgt fra gruppen bestående av tyrosin, fenylalanin, p-metoksyfenylalanin, histidin, tryptofan, p<->2-thienylalanin og p<->pyridylalanin.
7 .
Polypeptid ifølge krav 1,karakterisertved at J er en direkte binding mellom U og gruppen -NH-, eller blir valgt fra gruppen bestående av Z-Leu, Z-Leu-Gln-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu, Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn, og Z-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly og Z blir valgt fra gruppen bestående av arginin, D-arginin og D-glutamin.
8.
Polypeptid ifølge krav 1,karakterisertved at R4blir valgt fra gruppen bestående av metyl, etyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, cycloheksyl, fenyl, p-fluorfenyl, p-klorfenyl, p-bromfenyl, p-iodfenyl, p-hydroksyfenyl, p-metoksyfenyl, 1-naftyk, 2-naftyl, 3-indolyl, 2-thienyl og 3-pyridyl.
9.
Polypeptid ifølge krav 1,karakterisertved at R5blir valgt fra gruppen bestående av CHgCONHg og aminoalkylgrupper inneholdende fra 1 til 3 karbonatomer.
10.
Polypeptid ifølge krav 1,karakterisertved at gruppen -NH*CH(CH2R5 )-Rf, blir valgt fra gruppen bestående av arginin, D-arginin, lysin, D-lysin, glutamin, D-glutamin, D-ornithin, D-2,4-diaminosmørsyre og D-homoarginin.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/103,490 US5422341A (en) | 1993-08-06 | 1993-08-06 | Motilin-like polypeptides with gastrointestinal motor stimulating activity |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO942690D0 NO942690D0 (no) | 1994-07-18 |
| NO942690L NO942690L (no) | 1995-02-07 |
| NO312299B1 true NO312299B1 (no) | 2002-04-22 |
Family
ID=22295474
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO19942690A NO312299B1 (no) | 1993-08-06 | 1994-07-18 | Motilin-lignende polypeptider med mave-tarm-motorstimulerende aktivitet |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5422341A (no) |
| EP (1) | EP0646601B1 (no) |
| JP (1) | JP2949129B2 (no) |
| KR (1) | KR100360975B1 (no) |
| CN (1) | CN1054857C (no) |
| AT (1) | ATE194627T1 (no) |
| AU (1) | AU677324B2 (no) |
| CA (1) | CA2127330C (no) |
| DE (1) | DE69425212T2 (no) |
| DK (1) | DK0646601T3 (no) |
| ES (1) | ES2152293T3 (no) |
| FI (1) | FI111462B (no) |
| NO (1) | NO312299B1 (no) |
| TW (1) | TW434261B (no) |
| ZA (1) | ZA945436B (no) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5734012A (en) * | 1996-05-16 | 1998-03-31 | Ohmeda Pharmaceutical Products Division Inc. | Cyclic motilin-like polypeptides with gastrointestinal motor stimulating activity |
| IL140993A0 (en) * | 2000-05-15 | 2002-02-10 | Bayer Ag | Trypsin substrate and diagnostic device, and method of using same |
| US20050009205A1 (en) * | 2003-07-11 | 2005-01-13 | Ye Fang | Fluorescent ligands for GPCR arrays |
| ES2338789T3 (es) | 2003-06-18 | 2010-05-12 | Tranzyme Pharma Inc. | Antagonistas macrociclicos del receptor de motilina. |
| US20060287243A1 (en) * | 2005-06-17 | 2006-12-21 | Navneet Puri | Stable pharmaceutical compositions including motilin-like peptides |
| US20060293243A1 (en) * | 2005-06-17 | 2006-12-28 | Navneet Puri | Stable, buffered, pharmaceutical compositions including motilin-like peptides |
| EP2054429B1 (en) | 2006-09-11 | 2013-11-06 | Tranzyme Pharma, Inc. | Macrocyclic antagonists of the motilin receptor for treatment of gastrointestinal dysmotility disorders |
| US20080287371A1 (en) * | 2007-05-17 | 2008-11-20 | Tranzyme Pharma Inc. | Macrocyclic antagonists of the motilin receptor for modulation of the migrating motor complex |
| TWI471138B (zh) | 2009-07-29 | 2015-02-01 | Daiichi Sankyo Co Ltd | 賦予經黏膜吸收性之類似腸動素的胜肽化合物 |
| CN107383169A (zh) * | 2017-04-24 | 2017-11-24 | 青岛大学 | 一种具有胃肠运动刺激活性的多肽 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2753274B2 (ja) * | 1988-08-24 | 1998-05-18 | 株式会社三和化学研究所 | モチリン様ポリペプチドの製法並びにそのための組換えｄｎａ及び発現用プラスミド |
| EP0378078A1 (en) * | 1989-01-06 | 1990-07-18 | Sanwa Kagaku Kenkyusho Co., Ltd. | Motilin-like polypeptide and use thereof |
| JPH02311495A (ja) * | 1989-05-24 | 1990-12-27 | Sanwa Kagaku Kenkyusho Co Ltd | モチリン様活性を有するポリペプチド及びその用途 |
| JPH04364131A (ja) * | 1991-04-03 | 1992-12-16 | Sanwa Kagaku Kenkyusho Co Ltd | 易吸収性モチリン製剤 |
-
1993
- 1993-08-06 US US08/103,490 patent/US5422341A/en not_active Expired - Lifetime
-
1994
- 1994-06-24 AU AU65967/94A patent/AU677324B2/en not_active Ceased
- 1994-06-29 TW TW083105907A patent/TW434261B/zh not_active IP Right Cessation
- 1994-07-04 CA CA002127330A patent/CA2127330C/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-07-18 NO NO19942690A patent/NO312299B1/no not_active IP Right Cessation
- 1994-07-22 ZA ZA945436A patent/ZA945436B/xx unknown
- 1994-08-01 DE DE69425212T patent/DE69425212T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-08-01 DK DK94305707T patent/DK0646601T3/da active
- 1994-08-01 AT AT94305707T patent/ATE194627T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-08-01 EP EP94305707A patent/EP0646601B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-08-01 ES ES94305707T patent/ES2152293T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-08-04 JP JP6183351A patent/JP2949129B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1994-08-05 FI FI943651A patent/FI111462B/fi active
- 1994-08-05 KR KR1019940019380A patent/KR100360975B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1994-08-05 CN CN94115025A patent/CN1054857C/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TW434261B (en) | 2001-05-16 |
| EP0646601A1 (en) | 1995-04-05 |
| DK0646601T3 (da) | 2000-09-18 |
| FI111462B (fi) | 2003-07-31 |
| ATE194627T1 (de) | 2000-07-15 |
| NO942690L (no) | 1995-02-07 |
| CA2127330C (en) | 1998-07-14 |
| EP0646601B1 (en) | 2000-07-12 |
| FI943651A (fi) | 1995-02-07 |
| US5422341A (en) | 1995-06-06 |
| CN1119650A (zh) | 1996-04-03 |
| FI943651A0 (fi) | 1994-08-05 |
| ES2152293T3 (es) | 2001-02-01 |
| DE69425212D1 (de) | 2000-08-17 |
| NO942690D0 (no) | 1994-07-18 |
| JPH0770178A (ja) | 1995-03-14 |
| JP2949129B2 (ja) | 1999-09-13 |
| CA2127330A1 (en) | 1995-02-07 |
| AU6596794A (en) | 1995-02-16 |
| CN1054857C (zh) | 2000-07-26 |
| AU677324B2 (en) | 1997-04-17 |
| KR950005320A (ko) | 1995-03-20 |
| DE69425212T2 (de) | 2001-03-08 |
| KR100360975B1 (ko) | 2003-01-24 |
| ZA945436B (en) | 1995-04-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| BG62655B1 (bg) | Пептиди, способни да освобождават растежен хормон | |
| EP0647656B1 (en) | Motilin-like polypeptides that inhibit gastrointestinal motor activity | |
| CA2084061A1 (en) | Growth hormone releasing factor analogs | |
| JPS59501951A (ja) | ヒト膵臓ｇｒｆ | |
| KR100629013B1 (ko) | Ｉｇｆ-ⅰ 및 -ⅱ를 억제하는 ｇｈ-ｒｈ의 길항 유사체 | |
| US5734012A (en) | Cyclic motilin-like polypeptides with gastrointestinal motor stimulating activity | |
| RU2335506C2 (ru) | Пептидные аналоги gh-rh с антагонистическим действием, способ снижения уровня gh, способ снижения уровня igf-i и igf-ii, применение для ингибирования роста раковых клеток, фармакологически приемлемая композиция (варианты) | |
| EP0646601B1 (en) | Motilin-like polypeptides with gastrointestinal motor stimulating activity | |
| DK171682B1 (da) | Væksthormon-frigørende peptid og pharmaceutisk acceptable salte deraf, sammensætning med indhold deraf samt fremgangsmåde til fremstilling af peptider | |
| KR101417872B1 (ko) | 59번 위치에 아미노산 치환을 포함하는 인슐린 유사 성장 인자-1(ｉｇｆ-1)의 유사체 | |
| JP2002502381A (ja) | 環状ｃｒｆアンタゴニストペプチド | |
| JPH09506616A (ja) | 拮抗活性を有するｈＧＨ−ＲＨ（１−２９）ＮＨ▲下２▼の類似体 | |
| PT86091B (pt) | Processo para a preparacao de novos peptidos |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |