NO176072B - Fremgangsmåte og materiale for bestemmelse av ioner i fluider, og blandinger for bestemmelse av kalium- og natriumioner - Google Patents
Fremgangsmåte og materiale for bestemmelse av ioner i fluider, og blandinger for bestemmelse av kalium- og natriumioner Download PDFInfo
- Publication number
- NO176072B NO176072B NO885350A NO885350A NO176072B NO 176072 B NO176072 B NO 176072B NO 885350 A NO885350 A NO 885350A NO 885350 A NO885350 A NO 885350A NO 176072 B NO176072 B NO 176072B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- ions
- ion
- sodium
- potassium
- enzyme
- Prior art date
Links
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 title claims description 99
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 89
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 title claims description 87
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 title claims description 71
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 35
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 21
- 239000011591 potassium Substances 0.000 title claims description 21
- 239000000463 material Substances 0.000 title claims description 14
- 239000012530 fluid Substances 0.000 title claims description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 67
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 67
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 67
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 45
- 108020005115 Pyruvate Kinase Proteins 0.000 claims description 39
- 102000013009 Pyruvate Kinase Human genes 0.000 claims description 39
- FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N Sodium cation Chemical compound [Na+] FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 33
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 31
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 24
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 24
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 22
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 20
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 claims description 18
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 16
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims description 15
- 239000002739 cryptand Substances 0.000 claims description 15
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims description 14
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 14
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 12
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 102000003902 Cathepsin C Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000267 Cathepsin C Proteins 0.000 claims description 11
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 11
- NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N Potassium ion Chemical compound [K+] NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000011575 calcium Substances 0.000 claims description 11
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims description 11
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 11
- 102000007590 Calpain Human genes 0.000 claims description 10
- 108010032088 Calpain Proteins 0.000 claims description 10
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 10
- NLMDJJTUQPXZFG-UHFFFAOYSA-N 1,4,10,13-tetraoxa-7,16-diazacyclooctadecane Chemical compound C1COCCOCCNCCOCCOCCN1 NLMDJJTUQPXZFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- HBBGRARXTFLTSG-UHFFFAOYSA-N Lithium ion Chemical compound [Li+] HBBGRARXTFLTSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 claims description 8
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 claims description 8
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 claims description 8
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910001416 lithium ion Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 claims description 8
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims description 8
- 108090000856 Lyases Proteins 0.000 claims description 7
- 102000004317 Lyases Human genes 0.000 claims description 7
- 108010070648 Pyridoxal Kinase Proteins 0.000 claims description 7
- 102100038517 Pyridoxal kinase Human genes 0.000 claims description 7
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 7
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims description 6
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 claims description 6
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 108010081577 aldehyde dehydrogenase (NAD(P)+) Proteins 0.000 claims description 6
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 6
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 claims description 5
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 claims description 5
- 101000892220 Geobacillus thermodenitrificans (strain NG80-2) Long-chain-alcohol dehydrogenase 1 Proteins 0.000 claims description 5
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 claims description 5
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 claims description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 5
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 claims description 5
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims description 5
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 5
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 claims description 4
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 claims description 3
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 claims description 3
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 claims description 3
- 102000000496 Carboxypeptidases A Human genes 0.000 claims description 3
- 108010080937 Carboxypeptidases A Proteins 0.000 claims description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 claims description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 3
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 claims description 3
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 claims description 3
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 claims description 3
- 239000010949 copper Substances 0.000 claims description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 claims description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 3
- AUFVJZSDSXXFOI-UHFFFAOYSA-N 2.2.2-cryptand Chemical compound C1COCCOCCN2CCOCCOCCN1CCOCCOCC2 AUFVJZSDSXXFOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HDLXPNDSLDLJHF-UHFFFAOYSA-N 4,7,13,16,21-pentaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.5]tricosane Chemical compound C1COCCOCCN2CCOCCOCCN1CCOCC2 HDLXPNDSLDLJHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010092060 Acetate kinase Proteins 0.000 claims description 2
- 102100032534 Adenosine kinase Human genes 0.000 claims description 2
- 108020000543 Adenylate kinase Proteins 0.000 claims description 2
- 102000003846 Carbonic anhydrases Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000209 Carbonic anhydrases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000030523 Catechol oxidase Human genes 0.000 claims description 2
- 108010031396 Catechol oxidase Proteins 0.000 claims description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 claims description 2
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 102000001390 Fructose-Bisphosphate Aldolase Human genes 0.000 claims description 2
- 108010068561 Fructose-Bisphosphate Aldolase Proteins 0.000 claims description 2
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 claims description 2
- 102000005548 Hexokinase Human genes 0.000 claims description 2
- 108700040460 Hexokinases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 2
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 claims description 2
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- VTJUKNSKBAOEHE-UHFFFAOYSA-N calixarene Chemical class COC(=O)COC1=C(CC=2C(=C(CC=3C(=C(C4)C=C(C=3)C(C)(C)C)OCC(=O)OC)C=C(C=2)C(C)(C)C)OCC(=O)OC)C=C(C(C)(C)C)C=C1CC1=C(OCC(=O)OC)C4=CC(C(C)(C)C)=C1 VTJUKNSKBAOEHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000003983 crown ethers Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000002555 ionophore Substances 0.000 claims description 2
- 230000000236 ionophoric effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000011133 lead Substances 0.000 claims description 2
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 150000001455 metallic ions Chemical class 0.000 claims description 2
- 108010050430 phosphoglycolate phosphatase Proteins 0.000 claims description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 claims description 2
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910021380 Manganese Chloride Inorganic materials 0.000 claims 1
- GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L Manganese chloride Chemical compound Cl[Mn]Cl GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- DFCUAVZTQIHXJA-UHFFFAOYSA-K [Mg++].[Li]Cl.[O-]S([O-])(=O)=O Chemical compound [Mg++].[Li]Cl.[O-]S([O-])(=O)=O DFCUAVZTQIHXJA-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 claims 1
- 102000005840 alpha-Galactosidase Human genes 0.000 claims 1
- 108010030291 alpha-Galactosidase Proteins 0.000 claims 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 claims 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 claims 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 claims 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 claims 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 claims 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 claims 1
- 210000002011 intestinal secretion Anatomy 0.000 claims 1
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 claims 1
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 claims 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 claims 1
- 239000011565 manganese chloride Substances 0.000 claims 1
- 235000002867 manganese chloride Nutrition 0.000 claims 1
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 claims 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 claims 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 21
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 16
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 14
- -1 mercury ions Chemical class 0.000 description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 10
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 8
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 7
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 5
- 238000013461 design Methods 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 2-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 4
- 239000012482 calibration solution Substances 0.000 description 4
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 4
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 4
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KUWPCJHYPSUOFW-YBXAARCKSA-N 2-nitrophenyl beta-D-galactoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O KUWPCJHYPSUOFW-YBXAARCKSA-N 0.000 description 3
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical compound NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 3
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 3
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 3
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002730 mercury Chemical class 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 3
- RUFPHBVGCFYCNW-UHFFFAOYSA-N 1-naphthylamine Chemical compound C1=CC=C2C(N)=CC=CC2=C1 RUFPHBVGCFYCNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KMVWNDHKTPHDMT-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tripyridin-2-yl-1,3,5-triazine Chemical compound N1=CC=CC=C1C1=NC(C=2N=CC=CC=2)=NC(C=2N=CC=CC=2)=N1 KMVWNDHKTPHDMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 2-oxoglutaric acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)C(O)=O KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VIIIJFZJKFXOGG-UHFFFAOYSA-N 3-methylchromen-2-one Chemical group C1=CC=C2OC(=O)C(C)=CC2=C1 VIIIJFZJKFXOGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 4-aminoantipyrine Chemical compound CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 5'-adenylphosphoric acid Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O XTWYTFMLZFPYCI-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N Acetaldehyde Chemical compound CC=O IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N Adenosine diphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O XTWYTFMLZFPYCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000950981 Bacillus subtilis (strain 168) Catabolic NAD-specific glutamate dehydrogenase RocG Proteins 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 2
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical compound [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000016901 Glutamate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N Glycolaldehyde Chemical compound OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N Pyridoxal Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M Thiocyanate anion Chemical compound [S-]C#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 2
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 2
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010083141 dipeptidyl carboxypeptidase Proteins 0.000 description 2
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 2
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000005048 flame photometry Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 150000002678 macrocyclic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229910001437 manganese ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 2
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 description 2
- VBEGHXKAFSLLGE-UHFFFAOYSA-N n-phenylnitramide Chemical compound [O-][N+](=O)NC1=CC=CC=C1 VBEGHXKAFSLLGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 description 2
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000006501 nitrophenyl group Chemical group 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 2
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002268 wool Anatomy 0.000 description 2
- KNDZCZRECXTRHP-HNNXBMFYSA-N (2s)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-n-(4-nitrophenyl)-3-phenylpropanamide Chemical compound C([C@H](NC(=O)CN)C(=O)NC=1C=CC(=CC=1)[N+]([O-])=O)C1=CC=CC=C1 KNDZCZRECXTRHP-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- YBADLXQNJCMBKR-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 YBADLXQNJCMBKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZFWAHZCOKGWUIT-UHFFFAOYSA-N 1-anilino-3-phenyliminourea Chemical compound C=1C=CC=CC=1N=NC(=O)NNC1=CC=CC=C1 ZFWAHZCOKGWUIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JDIIGWSSTNUWGK-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazol-3-ium;chloride Chemical compound [Cl-].[NH2+]1C=CN=C1 JDIIGWSSTNUWGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HORQAOAYAYGIBM-UHFFFAOYSA-N 2,4-dinitrophenylhydrazine Chemical compound NNC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O HORQAOAYAYGIBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AJTVSSFTXWNIRG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(2-hydroxyethyl)amino]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+](CCO)CCS([O-])(=O)=O AJTVSSFTXWNIRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWKSKIMOESPYIA-UHFFFAOYSA-N 2-acetamido-3-sulfanylpropanoic acid Chemical compound CC(=O)NC(CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RMZNXRYIFGTWPF-UHFFFAOYSA-N 2-nitrosoacetic acid Chemical compound OC(=O)CN=O RMZNXRYIFGTWPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPBJMKMKNCRKQB-UHFFFAOYSA-N 3,3-bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)-2-benzofuran-1-one Chemical compound C1=C(O)C(C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3C(=O)O2)C=2C=C(C)C(O)=CC=2)=C1 CPBJMKMKNCRKQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NUFBIAUZAMHTSP-UHFFFAOYSA-N 3-(n-morpholino)-2-hydroxypropanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CC(O)CN1CCOCC1 NUFBIAUZAMHTSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NYZMKJHGHNWMNX-UHFFFAOYSA-N 4-methyl-2-oxochromene-7-carboxamide Chemical compound C1=C(C(N)=O)C=CC2=C1OC(=O)C=C2C NYZMKJHGHNWMNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 description 1
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 description 1
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 241000699662 Cricetomys gambianus Species 0.000 description 1
- NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N D-Glucose 6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102100029921 Dipeptidyl peptidase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100020750 Dipeptidyl peptidase 3 Human genes 0.000 description 1
- 102000003779 Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108090000194 Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108700036514 EC 3.4.14.1 Proteins 0.000 description 1
- 102000002464 Galactosidases Human genes 0.000 description 1
- 108010093031 Galactosidases Proteins 0.000 description 1
- 241000193385 Geobacillus stearothermophilus Species 0.000 description 1
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 101000931862 Homo sapiens Dipeptidyl peptidase 3 Proteins 0.000 description 1
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588915 Klebsiella aerogenes Species 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 239000002841 Lewis acid Substances 0.000 description 1
- 102100024295 Maltase-glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- JOCBASBOOFNAJA-UHFFFAOYSA-N N-tris(hydroxymethyl)methyl-2-aminoethanesulfonic acid Chemical compound OCC(CO)(CO)NCCS(O)(=O)=O JOCBASBOOFNAJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010033645 Pancreatitis Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108090000882 Peptidyl-Dipeptidase A Proteins 0.000 description 1
- 102000004270 Peptidyl-Dipeptidase A Human genes 0.000 description 1
- 239000004721 Polyphenylene oxide Substances 0.000 description 1
- 108010053763 Pyruvate Carboxylase Proteins 0.000 description 1
- 108010011939 Pyruvate Decarboxylase Proteins 0.000 description 1
- 108010042687 Pyruvate Oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100039895 Pyruvate carboxylase, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 1
- 229910021607 Silver chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000003217 Tetany Diseases 0.000 description 1
- 108010067973 Valinomycin Proteins 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- LIPOUNRJVLNBCD-UHFFFAOYSA-N acetyl dihydrogen phosphate Chemical compound CC(=O)OP(O)(O)=O LIPOUNRJVLNBCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000012445 acidic reagent Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- IPPWILKGXFOXHO-UHFFFAOYSA-N chloranilic acid Chemical compound OC1=C(Cl)C(=O)C(O)=C(Cl)C1=O IPPWILKGXFOXHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- FCFNRCROJUBPLU-UHFFFAOYSA-N compound M126 Natural products CC(C)C1NC(=O)C(C)OC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(C(C)C)OC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(C)OC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(C(C)C)OC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(C)OC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(C(C)C)OC1=O FCFNRCROJUBPLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 150000004696 coordination complex Chemical class 0.000 description 1
- 238000003869 coulometry Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002633 crown compound Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- LMBWSYZSUOEYSN-UHFFFAOYSA-N diethyldithiocarbamic acid Chemical compound CCN(CC)C(S)=S LMBWSYZSUOEYSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 229940092559 enterobacter aerogenes Drugs 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000004992 fission Effects 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 150000008195 galaktosides Chemical class 0.000 description 1
- 230000005283 ground state Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N iminodiacetic acid Chemical compound OC(=O)CNCC(O)=O NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229910052816 inorganic phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 150000007517 lewis acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002731 mercury compounds Chemical class 0.000 description 1
- LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L mercury dichloride Chemical compound Cl[Hg]Cl LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- RBXVOQPAMPBADW-UHFFFAOYSA-N nitrous acid;phenol Chemical class ON=O.OC1=CC=CC=C1 RBXVOQPAMPBADW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940066734 peptide hydrolases Drugs 0.000 description 1
- 239000003444 phase transfer catalyst Substances 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- DTBNBXWJWCWCIK-UHFFFAOYSA-K phosphonatoenolpyruvate Chemical compound [O-]C(=O)C(=C)OP([O-])([O-])=O DTBNBXWJWCWCIK-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000005375 photometry Methods 0.000 description 1
- 229920000570 polyether Polymers 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229960003581 pyridoxal Drugs 0.000 description 1
- 235000008164 pyridoxal Nutrition 0.000 description 1
- 239000011674 pyridoxal Substances 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 238000007430 reference method Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M silver monochloride Chemical compound [Cl-].[Ag+] HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- UVFAEQZFLBGVRM-MSMWPWNWSA-N succinyl-Leu-Leu-Val-Tyr-7-amino-4-methylcoumarin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCC(O)=O)CC(C)C)C(=O)NC=1C=C2OC(=O)C=C(C)C2=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 UVFAEQZFLBGVRM-MSMWPWNWSA-N 0.000 description 1
- 125000000446 sulfanediyl group Chemical group *S* 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 229920003002 synthetic resin Polymers 0.000 description 1
- 239000000057 synthetic resin Substances 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 229910021654 trace metal Inorganic materials 0.000 description 1
- FCFNRCROJUBPLU-DNDCDFAISA-N valinomycin Chemical compound CC(C)[C@@H]1NC(=O)[C@H](C)OC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)OC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)OC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)OC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)OC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)OC1=O FCFNRCROJUBPLU-DNDCDFAISA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/64—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving ketones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/32—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving dehydrogenase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/37—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving peptidase or proteinase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/40—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving amylase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/48—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving transferase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/527—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving lyase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/84—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving inorganic compounds or pH
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2334/00—O-linked chromogens for determinations of hydrolase enzymes, e.g. glycosidases, phosphatases, esterases
- C12Q2334/10—O-linked chromogens for determinations of hydrolase enzymes, e.g. glycosidases, phosphatases, esterases p-Nitrophenol derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2337/00—N-linked chromogens for determinations of peptidases and proteinases
- C12Q2337/10—Anilides
- C12Q2337/12—Para-Nitroanilides p-NA
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/91—Transferases (2.)
- G01N2333/912—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
- G01N2333/91205—Phosphotransferases in general
- G01N2333/9121—Phosphotransferases in general with an alcohol group as acceptor (2.7.1), e.g. general tyrosine, serine or threonine kinases
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/914—Hydrolases (3)
- G01N2333/924—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/962—Prevention or removal of interfering materials or reactants or other treatment to enhance results, e.g. determining or preventing nonspecific binding
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Light Receiving Elements (AREA)
- Semiconductor Lasers (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Description
Denne oppfinnelse angår en fremgangsmåte og et materiale for bestemmelse av ioner, i det følgende også betegnet analytter, i biologiske og ikke-biologiske fluider. Oppfinnelsen angår også blandinger for bestemmelse av kalium- og natriumioner, og en fremgangsmåte for å måle konsentrasjonen av disse i samme kyvette.
Oppfinnelsen er basert på den evne mange analytter
har til å stimulere eller inhibere aktiviteten av et følsomt enzym. Analyttene kan være kationer eller anioner, metalliske eller ikke-metalliske, enkle eller sammensatte. I praksis viser det seg ofte at analytten er til stede i prøven i en konsentrasjon som ligger utenfor følsomhetsområdet for det relevante analytiske indikatorenzym, eller at forstyrrelser forårsakes av tilstedeværelse av andre ioner som enzymet også
er følsomt overfor. Med denne oppfinnelse løses disse problemer på forskjellige måter.
Innenfor klinisk biokjemi er måling av serumelektro-lytter de mest vanlige analytiske tester som utføres i hospitaler. Disse målinger kreves ikke bare ved rutineundersøkel-ser, men ofte i nødssituasjoner og livstruende situasjoner hvor det er nødvendig med hurtig analyse. Da en viktig kilde for forsinkelser i hospitaler er transporten av prøver fra pleieavdelingene til diagnoselaboratoriene, vil en metode som lett kan utføres så å si ved sengekanten være særlig verdifull i nødssituasjoner.
En vanlig metode til å analysere kalium og natrium i praktisk klinisk biokjemi er flammefotometri. Denne metode er basert på det prinsipp at visse atomer, når de energetiseres ved oppvarmning, eksiteres og emitterer lys av en karakteristisk bølgelengde når de vender tilbake til basistilstanden. Intensiteten av strålingsenergien av karakteristisk bølge-lengde som utvikles av atomene i flammen, er direkte proporsjonal med antallet atomer som eksiteres i flammen, hvilket igjen er direkte proporsjonalt med konsentrasjonen av den angjeldende substans i prøven. Utstyret som kreves, er kom-plekst og relativt kostbart og krever bruk av brennbare gasser.
En alternativ metode, spesielt beregnet for natrium, kalium og klorid, gjør bruk av ioneselektive elektroder. Ideelt vil hver elektrode oppvise en unik ioneselektiv egenskap som gjør at den bare gir respons på ett ion. I praksis er dette ikke tilfellet, og forstyrrende ioner finnes for samtlige ioneselektive elektroder. Dessuten er ionespesifikke elektroder ikke absolutt spesifikke, selv om det vanligvis er mulig å foreta korreksjoner. Elektrodene måler det utviklede potensiale i nærvær av det spesifikke ion. Instrumenteringen er relativt kostbar. Ingen av metodene kan utføres spektrofotometrisk, og det kliniske behov for ionemåling resulterer derfor i en vesentlig økning i kompleksiteten av kommersielt tilgjengelige kliniske analyseanordninger, av hvilke de fleste er konstruert først og fremst for spektrofotometriske under-søkelser. Begge metoder krever en betydelig grad av dyktighet og kunnskaper for å kunne utnyttes på en tilfredsstillende måte.
På tilsvarende måte krever rutinemessig bestemmelse av klorid ved hjelp av coulometriske metoder spesiell instru-mentering. Sluttpunktet for denne titreringsmetode påvises ved en økning i den elektriske fluks ved fullføring av dannelsen av uoppløselig sølvkloridprodukt. Alternativt kan det benyttes potentiometriske bestemmelser, som også er meget tidkrevende og involverer bruk av tilleggsutstyr.
For klorid finnes det dessuten flere fotometriske og titrimetriske metoder, som f.eks. innbefatter: titrimetrisk bestemmelse av frie Hg<2+->ioner via difenyl-
carbazonkompleks,
kolorimetrisk bestemmelse av rhodanidkomplekset av jern,
som dannes etter dissosiering av kvikksølvkompleksene etter utfeining av HgCl2(Skeggs, Clin. Chem. 10, 1964,
918f.; Schmidt, Zentralblatt Pharm. 124 (9), 1985, 527f), kolorimetrisk bestemmelse av kloranilinsyre fra det re-spektive kvikksølvsalt (Reuschler, Klin. Wochenschrift 40,
1962, 489),
bestemmelse av det fargede Cu<2+->klompleks av diethyldithio-carbaminsyre fra det fargeløse kvikksølvsalt (tysk off.-skrift nr. 2 137 146),
den temmelig vanlige TPTZ-metode (tripyridyl-s-triazin)
(R. Fried, Zeitschr. Klin. Chem., Klin. Bioch. 10, 1972,
s. 280f; tysk off.skrift nr. DE 215 3387), som på tilsvarende måte er basert på dannelse av et farget metallkom-pleks etter dissosiering av et kvikksølvkompleks.
En vesentlig ulempe ved disse metoder består i at de krever anvendelse av oppløsninger som inneholder meget giftige substanser. Enkelte av metodene er kompliserte og upresise (f.eks. titreringsmetoden). Mange av reagensene er ustabile, og kalibreringskurvene er ikke-lineære (f.eks. rhodanid-metoden). Noen av disse metoder krever dessuten en forbehandling for å eliminere forstyrrelser som følge av prøvens protein-innhold.
En forbedret TPTZ-metode er beskrevet i WO 83/002670, men bruk av giftige kvikksølvforbindelser er fortsatt en ulempe. Den eneste kolorimetriske metode hvor det ikke benyttes kvikksølvioner, er bestemmelsen av hexaklorkomplekser av Fe(III) i en perklorsyreoppløsning (F. Hoppe, Ther. Ggw. 110(4), 1971, 554f.; H. Mahner, Zeitschr. Klin. Chem., Klin. Biochem. 11(11), 1973, 451f.; W.T. Law, Clin. Chem. 26 (13) 1980, 1974fw-US patentskrift nr. 4 278 440). En betydelig begrensning av denne metode ligger i bruken av sterkt sure reagenser som er korrosive og derfor ikke er forlikelige med mekaniske pipettesystemer. En ytterligere ulempe består deri at bilirubin i prøvene forårsaker forstyrrelser.
Kalsium er ytterligere et eksempel på en elektrolytt som bestemmes rutinemessig i kliniske laboratorier. Konsentrasjonen av dette metallion i kroppsvæsker reguleres innenfor et smalt område. Patologiske høye eller lave konsentrasjoner kan medføre livstruende forstyrrelser som f.eks. utilstrekkelig nyrefunksjon, pancreatitis, tetania og kongestiv hjertesvikt.
En av de tidligste metoder for bestemmelse av kalsium er den beskrevet av Tisdall (J. Biol. Chem. 63, 461-465, 1925), ved hvilken kalsium utfelles med oxalsyre, som i sin tur bestemmes kolorimetrisk. Metoden involverer et sentrifuge-ringstrinn og er derfor meget tidkrevende. Den er ikke spesi-fikk for kalsium og er avhengig av en omhyggelig behandling av prøver. Metoden er i mange laboratorier blitt erstattet med titrimetriske og direkte kolorimetriske utførelser. Først-nevnte er også beheftet med den ulempe at utførelsen er kom-plisert og omstendelig og krever store prøvevolumer. I den sistnevnte utførelse påvirker kalsium fargen av et fargestoff, f.eks. orthocresolfthaleinkompleksion, som kan måles i et fotometer. På grunn av metodens enkelhet er den egnet for automatisering i kliniske laboratorier. Metoden involverer imidlertid bruk av aggressive, sterkt alkaliske oppløsninger og giftige substanser. Den er særlig utsatt for forstyrrelser fra en rekke serumkomponenter, f.eks. lipider, proteiner, fosfat og bilirubin og vil derfor ikke gi god overensstemmelse med referansemetoder basert på atomabsorpsjon og flammefotometri. En ytterligere ulempe ved den kolorimetriske utførelse ligger deri at kalibreringskurvene er ikke-lineære, og at fargen er sterkt avhengig av temperaturen.
I W.H. Outlaw og O.H. Lowry, Analytical Biochemistry 92, 370-374 (1979) beskrives det en enzymbefordret test for måling av kaliumioner i vev. Ved metoden benyttes pyruvat-kinase fra kaninmuskler, som aktiveres av kaliumioner og natriumioner, idet de førstnevnte er omtrent førti ganger mer effektive. På grunn av denne mangel på spesifisitet kan metoden være egnet for plantemateriale, hvor kaliumioner er de kationer som forekommer i overveiende mengde, men den er uegnet for målinger i kroppsvæsker som f.eks. serum, som inneholder tredve ganger så mange natriumioner som kalium-ioner. Derfor gir natriumioner uakseptable forstyrrelser ved bruk av den enzymatiske fotometriske teknikk som beskrives av Lowry et al., for måling av kalium i plasma eller serum. Et ytterligere problem består i at ammoniumioner gir en tilsvarende aktivering som kaliumioner. I den ovennevnte publikasjon tar man ikke for seg eller løser disse vesentlige problemer med hensyn til analyse av kaliumioner i biologiske fluider som f.eks. serum, og det foreslås der ingen metode for bestemmelse av natriumioner.
Det er derfor et siktemål med den foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe en fremgangsmåte og et reagens ved hjelp av hvilke de ovennevnte problemer kan unngås. I henhold til oppfinnelsen løses problemene ved hjelp av en fremgangsmåte for bestemmelse av ioner (analytter) i fluider hvor innvirkningen av disse ioner på aktiviteten av et enzym måles.
Med foreliggende oppfinnelse tilveiebringes det således en fremgangsmåte for bestemmelse av ioner i fluider, kjennetegnet ved at innvirkningen av disse ioner på aktiviteten av et enzym måles og et bindemiddel tilsettes for å maskere interfererende ioner.
Det tilveiebrignes også et materiale for bestemmelse av ioner i fluider, kjennetegnet ved at det omfatter et enzym hvis aktivitet påvirkes av ionet, og et bindemiddel som er til stede for å maskere interfererende ioner.
Videre tilveiebringes det blandinger for bestemmelse av kaliumioner, anvendt fortrinnsvis ved 37°C, kjennetegnet ved at de omfatter de forbindelser i de konsentrasjoner som er angitt i patentkravene 37-40. Det tilveiebringes også en blanding for bestemmelse av natriumioner, fortrinnsvis målt ved 37°C, kjennetegnet ved at den omfatter de forbindelser i de konsentrasjoner som er angitt i patentkrav 41.
Endelig tilveiebringes det en fremgangsmåte for måling av kalium- og natriumionekonsentrasjonen i samme kyvette, kjennetegnet ved at natriumionekonsentrasjonen analyseres ved bestemmelse av reaksjonshastigheten, pH-verdien i inkubasjonsblandingen senkes, og deretter måles kaliumionekon-sentrasj onen.
Et hovedtrekk ved denne oppfinnelse er bruken av selektive bindemidler for å bringe den frie konsentrasjon av analytten innenfor det optimale område for det analytiske enzym, spesielt når det ikke er praktisk å fortynne fluidet. Et ytterligere trekk ved oppfinnelsen består i å benytte konkurrerende inhibitorer for det relevante analytiske enzym for å redusere dets følsomhet for analytten, hvorved det blir mulig å måle sistnevnte i en høyere konsentrasjon. Dette er særlig nyttig f.eks. når selektive bindemidler ikke er lett tilgjengelige eller er uakseptabelt kostbare.
Et annet trekk ved oppfinnelsen består deri at selektive bindemidler benyttes for å redusere de frie konsentrasjoner av forstyrrende ioner til nivåer hvor forstyrrelsen ikke lenger er vesentlig. Det gjøres også bruk av den kjennsgjerning at en konkurrerende inhibitor kan konkurrere mer effektivt med forstyrrende ioner enn med analytten og derved øke enzymets følsomhet for analytten i forhold til det forstyrrende ion.
Et viktig trekk er valget av optimale reaksjonsbetin- geiser, deriblant valget av et egnet isoenzym, slik at de stimulerende eller inhiberende virkninger av analytten blir vesentlig sterkere enn for de forstyrrende ioner. Dessuten må virkningen av analytten og de forstyrrende ioner på aktiviteten av det analytiske enzym være additiv, slik at dersom konsentrasjonen av forstyrrende ioner er kjent, kan konsentrasjonen av analytten lett bestemmes ved subtraksjon. Når et forstyrrende ion vites å forekomme i en relativt konstant konsentrasjon i fluidet som skal analyseres, kan det tas hensyn til dette ved at det innlemmes en passende konsentrasjon av det forstyrrende ion i standardoppløsninger (kalibreringsopp-løsninger). En annen metode til å teste slike analytter går ut på å anvende en konkurrerende bindetest hvor analytten fortrenger et annet ion fra et bindemiddel, og virkningene av det frigjorte ion på aktiviteten av et egnet enzym bestemmes.
Disse generelle prinsipper kan best illustreres ved i detalj å vise deres anvendelse ved bestemmelse av kalium-, natrium-, kalsium-, klorid- og bicarbonationer i plasma eller serum. De er imidlertid anvendelige på et bredt utvalg ioner, f.eks. på kationer som f.eks. magnesium, mangan, lithium, bly, sink, kobber, jern eller andre tungmetaller. Eksempler på ikke-metalliske ioner som kan bestemmes, er protoner og ammonium. Også forbindelser som gir dannelse av ammonium, f.eks. urea, kan bestemmes.
Enzymer som kan benyttes, er f.eks. (H.J. Evans et al., Ann. Rev. Plant Physiol. 17, 47, 1966): Transferaser som f.eks. fosforholdige gruppeoverførende transferaser. En slik transferase kan f.eks. være pyruvat-kinase. I stedet for pyruvat-kinase kan andre kinaser, som f.eks. adenylatkinase eller hexokinase, som er følsomme for magnesiumioner eller manganioner, benyttes. En annen transferase er acetatkinase (fra E. coli). Et annet eksempel er pyridoxalkinase fra hjerner, hvilken er følsom for sinkioner.
Hvdrolaser så som glycosidaser, f.eks. a- eller 8-D-galactosidase (fra Escherichia coli), carboxypeptidase A (fra bukspyttkjertelen fra kveg), collagenase (fra Clostridium hystolicum), amylase (fra spytt eller bukspyttkjertel) eller fosfoglycollatfosfatase.
Også peptidhydrolaser slik som cystein- eller thio-avhengige proteinaser, hvor spesifikke eksempler er calpain I og II (også betegnet kalsiumaktivert nøytral protease) beskrevet av Sasaki et al. i J. Biol. Chem. 259, 12489-12494,
(1984). De sistnevnte enzymer kan isoleres og renses fra en rekke forskjellige animalske vevmaterialer, som f.eks. rot-telever og -nyre, røde blodlegemer fra mennesker og svin, kveghjerner og skjelettmuskler fra kaniner, i henhold til fremgangsmåten beskrevet av A. Kitahara et al., J. Biochem. 95, 1759-1766 (1984). Et ytterligere eksempel er dipeptidylaminopeptidase I (E.C. 3.4.14.1, Cathepsin C), J. Ken McDonald, Bioch. Biophys. Res. Communication 24(5), 66, 771f. En annen kilde for enzymene er proteiner erholdt ved genrekom-binasj onsteknikker.
Oxidoreductaser som f.eks. glyceroldehydrogenase (fra Entero-bacter aerogenes), acetaldehydrogenase (fra gjær) eller tyrosinase (catecholoxidase).
Lyaser som f.eks. aldolase (fra gjær) eller carbonisk anhydrase (fra røde blodlegemer fra kveg).
Andre egnede enzymer er diverse enzymer fra halogenofile organismer. En annen kilde for enzymene ér proteiner erholdt ved genrekombinasjonsteknikker.
Selektive bindemidler: Et bredt utvalg av bindemidler er tilgjengelig for binding av analytter eller forstyrrende ioner. Slike binde- eller maskeringssubstanser er cryptander, coronander, kronethere, podander, sfærander, hemisfærander, calixarener og kombinasjoner derav, naturlig forekommende ionoforer, f.eks. antibiotika, sykliske peptider som f.eks. valinomycin, kompleksoner og chelateringsmidler, f.eks. imino-dieddiksyre, EDTA, nitrotrieddiksyre og derivater derav. Slike forbindelser er beskrevet i Kontakte (Merck), 1977, nr. 1, s.
11 ff og s. 29 ff; Kontakte (Merck), 1977, nr. 2, s. 16 ff; Kontakte (Merck), 1977, nr. 3, s. 36 ff; "Phase Transfer Catalysts, Properties and Applications" (Merck-Schuchards) 1987, "Thermodynamic and Kinetic Data for Cation-Macrocycle Interaction"; R.M. Izatt et al., Chemical Reviews 85, 271-339
(1985); "Data for Biochemical Research", 1986, R.M.C. Dawson et al., 3. utgave, 399-415, Clarendon press, Oxford; F. Vogtle et al., "Chem. Macrocycles", Springer Verlag, New York, 1985; G.W. Gokel et al., "Macrocyclic Polyether Synthesis", Springer Verlag, New York, 1982; M. Hiraoka, "Crown Compounds", Else-vier, Amsterdam, Oxford, New York, 1982; J.M. Lehn et al., J.Am. Chem. Soc. 97, 6700-6707 (1975); G. Schwarzenbach et al., Helv.Chim. Acta 28, 828 (1945); S.F.A. Kettle, "Koordi-nat ionsverbindungen, Taschentext 3", Verlag Chemie, Wein-heim/Bergstr. 1972; A.E. Martell et al., "Die Chemie der Metallchelatverbindungen", Verlag Chemie, Weinheim/Bergstr. 1958; M. Becke-Goehring et al., "Komplexchemie", Springer Verlag, 1970; F. Kober, "Grundlagen der Komplexchemie", Otto Salle Verlag, Frankfurt/Main 1979; G. Schwarzenbach et al., Helv.Chim.Acta 31, 1029 (1948); R.G. Pearson et al., Science 151, 172 (1966). Eksempler på chelateringsmidler som er i stand til å binde flerverdige ioner, spesielt toverdige kationer, er ethylenglycol-bis-(2-aminoethylether)-N,N,N',N'-tetraeddiksyre (betegnet EGTA) og (ethylendinitrilo)-tetraeddiksyre (EDTA). Skjønt det finnes mange bindemidler som kan binde flerverdige ioner, f.eks. EDTA og dets derivater, er midler som binder énverdige ioner, mindre vanlige. Tetrafenylbor binder kaliumioner. En gruppe forbindelser med større mulighe-ter er imidlertid cryptander, som er eksempler på reagenser som kan binde énverdige kationer selektivt i vandige oppløs-ninger. (R.M. Izatt et al., Chem. Reviews 85, 271-339). Spesielle eksempler på cryptander er "Kryptofix"-forbindelsene fra Merck-Schuchardt, f.eks.: 4, 7,13,16,21-pentaoxa-l,10-diazabicyclo-[8.8.5]-tricosan, "Kryptofix" 221, side 438, Merck-Schuchardt-katalogen for 1987/88, nr. 810646 (K 221).
4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicyclo-[8.8.8]-hexacosan, "Kryptofix" 222, side 438, Merck-Schuchardt-katalogen for 1987/88, nr. 810647 (K 222).
Som maskeringsforbindelser for eliminering av for styrrende anioner kan de følgende klasser av substanser even-tuelt benyttes: anioncryptander, heterocyclofaner, catapinander og uorganiske metallkoarplekser eller uoppløselige salter. Spesielle eksempler på forbindelser som danner komplekser med anioner, er beskrevet i litteraturen, f.eks. azamono- eller azapolycykler, makrocykliske kvartære tetrahedronforbindelser, makrocykliske bis-metallkomplekser, makrocykler med kovalent innlemmende Lewis-syresentere, protonerte eller alkylerte kvartære cryptander eller catapinander (F.P. Schmidtchen, Nachrichten Chem. Techn. lab. 36(1), 1988, S. 8f; E. Graf, J. Amer. Chem. Soc. 98 (20), 1976, 6403f; C.H. Park, J. Amer. Chem. Soc. 90 (9), 1968, 2431f) samt f.eks. hexaklorkomplekset av Fe(III) eller sølvnitrat.
Bindemidlenes funksjon: Disse bindemidler anvendes for de følgende formål:
1. For selektiv binding av forstyrrende ioner.
2. For å redusere konsentrasjonen av analyttene til optimale konsentrasjoner for måling, dersom fortynning av prøven ikke kan foretas. 3. I en utførelsesform av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er bindemidlet til stede og danner et kompleks med 11 indikator "-ioner, hvorfra indikatorionene fortrenges støkiometrisk av analyttionene, og hvor innvirkningen av de fortrengte indikatorioner på aktiviteten av enzymet bestemmes, hvorved det fås et indirekte mål på konsentrasjonen av analyttioner. Ved denne fremgangsmåte er f.eks. enzymet pyruvat-kinase, mens indikatorionene er kalium, bindemidlet er "Kryptofix" 221 og ionet som skal bestemmes er natrium;
eller enzymet er en kinase, mens indikatorionet erMg<2+>, bindemidlet er et chelateringsmiddel, f.eks. EDTA, og ionet er et metall; eller enzymet er pyridoxalkinase, indikatorionet er Zn<2*>, bindemidlet er "Kryptofix" 221 og ionet er et tungmetall; eller enzymet er a-amylase, mens bindemidlet er Ag eller Hg
og ionet som skal bestemmes, er klorid; eller enzymet er collagenase, mens bindemidlet er et chelateringsmiddel som f.eks. EDTA, og ionet som skal bestemmes, er kalsium.
Fluider for analyse: De biologiske fluider i hvilke bestemmelsen av analytter foretas, er blod, serum, plasma, svette, transudater eller exudater eller f.eks. urin. Andre eksempler på fluider er vann fra vann-nettet eller ekstrakter av næring-smidler eller frukt eller gjærede væsker, som f.eks. vin.
Bestemmelse av kalium- og natriumioner.
De viktigste krav som stilles til en tilfredsstillende fremgangsmåte for bestemmelse av kaliumioner i serum eller plasma, på basis av følsomheten av pyruvat-kinase for kaliumioner, er kravene om å overvinne forstyrrelsene som forårsakes av natrium- og ammoniumioner. I henhold til de generelle prinsipper som oppfinnelsen er basert på, kan dette oppnås ved hjelp av én eller flere av de følgende utførelser: 1. Selektiv binding av natriumioner med et egnet bindemiddel, f.eks. "Kryptofix" 221. 2. Valg av Bacillus stearothermophilus istedenfor kaninmuskler som kilde for pyruvat-kinase, fordi det bakterielle enzym har en følsomhet for kaliumioner i forhold til natriumioner som er dobbelt så stor som for enzymet fra muskler. 3.Innlemmelse av ioner som er konkurrerende inhibitorer for det følsomme indikatorenzym i testen, f.eks. bruk av lithiumioner som konkurrerer med natriumioner og kaliumioner.
4. Enzymatisk fjerning av ammoniumioner.
Da lithiumioner er mindre effektive som konkurrent til kaliumioner, blir den netto virkning å øke den relative følsomhet av pyruvat-kinase overfor kaliumioner med ytterligere 50%, sammenlignet med natriumioner. I nærvær av lithiumioner blir dessuten virkningene av kalium- og natriumioner på aktiviteten av pyruvat-kinase additiv istedenfor kooperativ. Dette muliggjør måling av konsentrasjonen av enten kalium-eller natriumioner, forutsatt at konsentrasjonen av de andre ioner er kjent.
Ved bruk av utførelser 2 og 3 i fravær av bindemiddel er det mulig å oppnå en relativ følsomhet av pyruvat-kinase for kaliumioner, sammenlignet med natriumioner, av størrel-sesordenen 100:1. Dette innebærer at selv ved ekstremt unor-male natriumionekonsentrasjoner på enten 110 mmol/1 eller 170 mmol/1, vil feilen i den målte kaliumionekonsentrasjon ikke overskride 0,3 mmol/1, sammenlignet med en normal natrium-ionekonsentras j on i plasma på 140 mmol/1 (eksempel A). Dette anses ikke som tilstrekkelig nøyaktig for mange kliniske formål. Dersom imidlertid den virkelige konsentrasjon av natriumioner i plasmaet er kjent, er det mulig å foreta nøyak-tig måling av mengden av kaliumioner ned til ± 0,05 mmol/1 (eksempel B). Dersom utførelser 1-3 kombineres og det innlemmes et bindemiddel, f.eks. "Kryptofix" 221, kan den relative følsomhet av pyruvat-kinase for kaliumioner, sammenlignet med natriumioner, økes til >500:1. Under disse omstendigheter er det ikke nødvendig å kjenne natriumionekonsentrasjonen for å bestemme kaliumionekonsentrasjonen i plasmaet ned til 0,05 mmol/1 (eksempel C).
Disse fremgangsmåter for bestemmelse av konsentrasjonen av kaliumioner viser anvendeligheten av de generelle prinsipper som oppfinnelsen er basert på, med hensyn til å redusere forekomsten av forstyrrelser. På den annen side illustrerer måling av natriumioner i serum eller plasma best anvendelsen av disse prinsipper med hensyn til å regulere den effektive analyttkonsentrasjon. En måte å måle natriumioner på i henhold til oppfinnelsen er å benytte et enzym som er føl-somt for natriumioner. Et eksempel på et slikt enzym er 6-galactosidase (Kuby et al., J. Am. Chem. Soc. 75, 890, 1953). Imidlertid er området for natriumionekonsentrasjoner hvor dette enzym er mest følsomt, meget lavere enn det man hensiktsmessig kan oppnå i en plasmaprøve, uten at det foretas et fortynningstrinn•
I overensstemmelse med de prinsipper som oppfinnelsen er basert på, benyttes følgende utførelser for å redusere den effektive natriumionekonsentrasjon til optimale nivåer når fortynning av prøven ikke kan foretas. 1. Bruk av et bindemiddel for natriumioner, som f.eks.
"Kryptofix" 221. 2. Bruk av lithiumioner som en konkurrerende inhibitor for B-galactosidase, hvorved enzymets følsomhet for natriumioner nedsettes. 3. En kombinasjon av utførelser 1 og 2 gjør det lett å bestemme mengden av natriumioner i plasma eller serum ved bruk av B-galactosidase, og mengden av bindemiddel kan manipuleres slik at signalet for natriumione-konsentras joner under 110 mmol/1 minimeres, mens
signalet i det vanlige analyseområde (110-170 mmol/1) forbedres (eksempel D).
Natriumioner kan også måles ved hjelp av pyruvatkinase, forutsatt at det velges betingelser hvorunder stimule-ringen av enzymaktiviteten ved hjelp av kaliumioner reduseres, og at et bindemiddel for kaliumioner, f.eks. "Kryptofix" 222, innlemmes i reaksjonsblandingen (eksempel E).
Ved en annen fremgangsmåte for bestemmelse av nat-riumionekonsentras j onen i plasma tillates natriumionene å fortrenge kaliumioner fra "Kryptofix" 221, idet de frigjorte kaliumioner stimulerer aktiviteten av pyruvat-kinase proporsjonalt med natriumionekonsentrasjonen i plasmaet (eksempel
F).
Andre aspekter av oppfinnelsen er materialer og blandinger for bestemmelse av ioner i biologiske og ikke-biologiske fluider.
Blandingen ifølge foreliggende oppfinnelse kan være
til stede i oppløst eller i tørr form. Den kan være til stede impregnert på en egnet bærer. Et diagnostisk middel i form av en teststrimmel kan fremstilles ved impregnering av et bærer-
materiale, fortrinnsvis filterpapir, celluloseull eller ull av syntetiske fibere, med oppløsninger av de nødvendige reagenser som det er konvensjonelt å benytte for fremstilling av test-strimler, i lettflyktige oppløsningsmidler, som f.eks. aceton. Dette kan utføres i ett eller flere impregneringstrinn. De ferdige testpapirer kan anvendes som sådanne eller festes på i og for seg kjent måte til håndtak eller fortrinnsvis festes mellom syntetiske harpikser og finmaskede duker.
Bestemmelse av kaliumioner.
Ved bestemmelsen av kaliumioner blir et fluid, f.eks. blodplasma, inkubert med en puffret blanding inneholdende adenosindifosfat (ADP), fosfoenolpyruvat (PEP), redusert nicotinamidadenin-dinucleotid (NADH), pyruvat-kinase (PK) og lactatdehydrogenase (LDH). Dannelsen av pyruvat, og deretter av lactat, i denne blanding, ved reaksjoner katalysert av PK og LDH, er fullt og helt avhengig av tilstedeværelsen av egnede kationer, i fravær av hvilke PK er praktisk talt inak-tiv. NADH absorberer sterkt ved 340 nm, mens NAD ikke gjør det.
Under de valgte analysebetingelser som innbefatter tilstedeværelse av manganioner, hvilke kreves av den bakterielle PK, er hastigheten av oxydasjon av NADH proporsjonal med konsentrasjonen av kaliumioner (se eksempler A-C).
Under disse betingelser finner følgende reaksjoner sted:
Hastigheten av reaksjon (1) bestemmes av konsentrasjonen av kaliumioner som er til stede i systemet, og denne begrenser i sin tur hastigheten av reaksjon (2). Hastighetene av disse reaksjoner kan måles på flere måter. En standard-metode er spektrofotometrisk måling av den hastighet NADH forsvinner med ved reaksj on (2). NADH absorberer sterkt ved 340 nm, mens NAD ikke gjør det. Følgelig gir reaksjonsblandin-gens fall i absorpsjonsevne ved 340 nm (eller en alternativ bølgelengde) et direkte mål på reaksjonshastigheten, og av dette kan konsentrasjonen av kaliumioner som er til stede i blandingen, avledes. Alternativt kan det trekkes fordel av den kjennsgjerning at både reaksjon (1) og reaksjon (2) forbruker H+, hvorved protonkonsentrasjonen i reaksjonsblandingen nedsettes. Hastigheten med hvilken protonkonsentrasjonen synker, kan måles med et pH-meter eller ved hjelp av titrering. I disse sistnevnte tilfeller vil den benyttede konsentrasjon av buffer være meget mindre enn ved den spektrofotometriske metode. Også annet utstyr, såsom fluorimetere eller luminometere, kan benyttes for å overvåke aktiviteten av pyruvat-kinase.
Det finnes flere andre metoder for å påvise akkumu-lering av pyruvat som er forbundet med PK-aktivitet. Disse innbefatter enhver metode for bestemmelse av det uorganiske fosfat eller oxygen som forbrukes, eller hydrogenperoxyd; acetylfosfat eller carbondioxyd dannet ved enzymatisk virkning av pyruvat-oxidase; dannelse av hydrazon med 2,4-dinitrofenyl-hydrazin; bestemmelse av reaktantene eller produktene ved enzymatisk virkning av pyruvat-carboxylase; pyruvat-decar-boxylase eller pyruvat-dehydrogenase; bruk av flavin-koblede systemer; og isotopiske metoder for bestemmelse av ørsmå konsentrasjoner av substrater (M.N. Berry et al., Analytical Biochem. 118, 344-352 (1981)).
I en undersøkelse av 200 serumprøver ble det oppnådd god overensstemmelse med andre metoder, såsom ved flammefoto-metriske målinger og ved målinger med ioneselektive elektroder. En betydelig forstyrrelse ved metoden skyldes ammoniumioner, som vanligvis er til stede i serum, eller som akkumule-res ved henstand. Muligheten for ammoniumioneforstyrrelse kan unngås fullstendig ved at a-ketoglutarat (KG) og glutamatde-hydrogenase (GDH) innlemmes i reaksjonsblandingen. Ammoniumioner fjernes i et preinkuberingstrinn i henhold til reaksjonen:
I oppløsninger som f.eks. urin, hvor ammoniumioneinn-holdet kan være høyt, kan det benyttes en koblet reaksjon:
Ved den koblede metode benyttes glucose-6-fosfat-dehydrogenase. Forutsatt at den tilsatte glucose-6-P og -KG anvendes i overskudd i forhold til mengden av tilstedeværende ammoniumioner, vil samtlige ammoniumioner bli fjernet, mens NADH bibeholdes i reagenset.
Typiske konsentrasjonsområder for hovedreagensene ved enzymatisk bestemmelse av kaliumioner ved 37°C under anvendelse av en 10 ul prøve av plasma eller serum er:
Et annet eksempel som er følsomt overfor kaliumioner, er glycerol-dehydrogenase (E.C.C. Lin et al., B 235, 1820, 1960). Typiske konsentrasjonsområder for hovedreagensene ved enzymatisk bestemmelse av kaliumioner ved 37°C under anvendelse av glycerol-dehydrogenase er:
Et annet eksempel som er følsomt overfor kaliumioner, er acetaldehyd-dehydrogenase (S. Black, Arch. Biochem. Bio phys. 34, 86, 1951). Typiske konsentrasjonsområder for hovedreagensene ved enzymatisk bestemmelse av kaliumioner ved 37°C under anvendelse av acetaldehyd-dehydrogenase er:
Acetaldehyd (fra 0,02 mmol/1 til 1 mmol/1) kan anvendes istedenfor glycolaldehyd.
Acetaldehyd-dehydrogenase oppviser også esterase-aktivitet, slik at kaliumionekonsentrasjonen kan bestemmes ved overvåking av frigjøringen av 4-nitrofenol fra 4-nitrofenyl-acetat. Typiske konsentrasjonsområder for hovedreagensene ved enzymatisk bestemmelse av kaliumioner ved 37"C på basis av esteraseaktiviteten av acetaldehyd-dehydrogenase er:
Bestemmelse av natriumioner
I prinsippet er bestemmelsen av natriumioner under anvendelse av PK likeartet med bestemmelsen av kaliumioner. Imidlertid gjør det seg gjeldene visse viktige ulikheter. For det første er PK omtrent 40-100 ganger mer følsom for kalium-ioner enn for natriumioner, avhengig av inkuberingsbetingel-sene, som ovenfor angitt. Selv om natriumioner forekommer i plasmaet i en konsentrasjon som er omtrent 30 ganger høyere enn konsentrasjonen av kaliumioner, kan derfor de sistnevnte forstyrre natriumionemålingen.
I henhold til de generelle prinsipper som utnyttes i henhold til oppfinnelsen, blir lithiumioner utelatt, mens PK fra kaninmuskler foretrekkes fremfor det bakterielle enzym, og magnesiumioner kan anvendes istedenfor mangan. I henhold til én fremgangsmåte bindes kaliumionene spesifikt til "Kryptofix" 222, og virkningene av natriumioner på PK-aktiviteten måles direkte (eksempel E).
Typiske konsentrasjonsområder for hovedreagensene ved enzymatisk bestemmelse av natriumioner ved 37°C under anvendelse av en pyruvat-kinase er:
I henhold til en annen fremgangsmåte tillates natriumionene å fortrenge kaliumioner fra "Kryptofix" 221, idet de frigjorte kaliumioner stimulerer aktiviteten av PK i en grad som er avhengig av natriumionekonsentrasjonen (eksempel
F).
Typiske konsentrasjonsområder for hovedreagensene ved enzymatisk bestemmelse av natriumioner ved 37 °C under anvendelse av pyruvat-kinase for måling av fortreningen av kalium-ioner fra "Kryptofix" 221 er:
I en mer nøyaktig og presis utførelse av bestemmelsen benyttes et natriumioneavhengig enzym som f.eks. B-galactosidase (eksempel D).
Blodplasma inkuberes med en puffret blanding inneholdende 2-nitrofenyl-B-D-galactopyranosid (NPG) og enzymet B-D-galactosidase. Den av B-D-galactosidase katalyserte reaksjon er avhengig av tilstedeværelse av natriumioner, og aktivitets-hastigheten er et mål på natriumionekonsentrasjonen. Et viktig trekk ved denne metode er bruken av en egnet mengde natrium-ioneselektivt bindemiddel (f.eks. "Kryptofix" 221) for målinger i serum eller andre biologiske fluider hvor natriumione-konsentras j onen kan overskride 100 mmol/1, for å redusere natriumioner, slik at enzymet blir mest mulig følsomt for små endringer i natriumionekonsentrasjonen i det vanlige analyseområde (110-170 mmol/1). Under de valgte analysebetingelser, som innbefatter tilstedeværelse av magnesium- og lithiumioner i moderate konsentrasjoner, er graden av dannelse av 2-nit<*>ro-fenol og galactose praktisk talt porporsjonal med konsentrasjonen av natriumioner som måles. Magnesiumioner er nødvendige for å oppnå optimal B-galactosidaseaktivitet. Lithiumioner konkurrerer med natriumioner og øker derfor enzymets K,,, for natriumioner.
Som substrat for B-D-galactosidase er også mange andre forbindelser egnede. Generelt blir den galactosidase-holdige prøve blandet med et egnet B-D-galactosidase-substrat, hvoretter substratet splittes av enzymet, og ett av fisjons-produktene deretter bestemmes på en passende måte. Man kan måle enten glycon som frigjøres ved innvirkningen av enzymet, eller aglycon. Som regel bestemmes det sistnevnte. Som substrat kan det naturlig forekommende substrat lactose benyttes, men det er særlig fordelaktig å benytte et kromogent galactosid. I Biochem. Z., 333, 209 (1960) beskrives således fenyl-6-D-galactosid samt visse andre derivater som er substituert på den aromatiske ring, f.eks. 2-nitrofenyl-B-D-galactosid (NPG) og 3-nitrofenyl-B-D-galactosid, som substrater for B-D-galactosidase. Fenolene som frigjøres ved hydrolyse, bestemmes fotometrisk i UV-området eller - hva nitrofenolene angår - i det kortbølgede, synlige bølgelengdeområde. En oxydativ kob-ling med aminoantipyrin kan også følge som en indikatorreak-sjon (se Analytical Biochem. 40, 281, 1971. Andre substrater er beskrevet i tysk off.skrift nr. 33 45 748 og tysk off.-skrift nr. 34 11 574.
Typiske konsentrasjonsområder for hovedreagensene ved enzymatisk bestemmelse av natriumioner ved 37°C under anvendelse av en 10 ul prøve av plasma eller serum er:
EGTA står for ethylen-bis-(oxyethylennitrilo)-tetra-eddiksyre. Det vil også være mulig å utføre analysen av natrium- og kaliumioner enzymatisk i den samme kyvette i form av en tvillingtest (se eksempel G).
Bestemmelse av kalsiumioner
For bestemmelse av kalsiumioner inkuberes en prøve av blodplasma (eller annet kroppsfluid) med en buffret blanding inneholdende peptidsubstratet succinyl-leucin-methionin-p- av Calpain I, er avhengig av tilstedeværelse av kalsiumioner, og graden av aktivitet er et mål på kalsiumionekonsentrasjonen. Et viktig trekk ved metoden er bruken av chelateringsmidler som er i stand til å binde kalsiumioner spesifikt for å nedsette deres konsentrasjon til et område hvor enzymet er mest følsomt. Under de valgte analysebetingelser, som innbefatter tilstedeværelse av L-cystein og 2-mercaptoethanol, er graden av dannelse av p-nitroanilin praktisk talt proporsjonal med den konsentrasjon av kalsium som måles.
Foretrukne peptidsubstrater kan beskrives ved den generelle formel:
hvor R betegner acetyl, benzoyl, carbobenzoxy, succinyl, tert-butoxycarbonyl eller 3-(2-furyl)-acryloyl; Pn- P2- P1betegner en peptidkjede med minst to rester, med preferanse for Tyr, Met, Lys eller Arg i Pj-stillingen og en Leu- eller Val-rest i P2-stillingen, og X betegner en chromogen eller fluorogen gruppe som frigjøres ved innvirkning av enzymet under dannelse av en påviselig fargeendring eller fluorescens. X kan være en nitrofenyl-, nafthyl- eller thiobenzylester og likeledes en nitroanilin-, nafthylamin- eller methylcumaringruppe, med eller uten ytterligere substituenter på den aromatiske ring. Noen egnede peptidderivater er også blitt beskrevet av T. Sasaki et al. i J. Biol. Chem. 259, 12489-12494. Eksempler på slike er succinyl-Leu-Met-MCA (MCA = 4-methylcumarin-7-amid), succinyl-Leu-Tyr- MCA, succinyl-Leu-Leu-Val-Tyr-MCA og tert-butoxycarbonyl-Val-Leu-Lys-MCA. Andre syntetiske substrater er beskrevet i Bergmeyer, "Methods of Enzymatic Analysis", 3. utgave, Vol. 5, s. 84-85, 1984.
Konsentrasjonsområdene for forbindelsene for en slik bestemmelsesmetode og reagensene er:
Stjernen<*>betyr at enheten er definert som den mengde enzym som øker absorpsjonsevnen ved 750 nm med 1,0 etter 30 minutters inkubering ved 30°C med casein som substrat (N. Yoshimura et al., J. Biol. Chem. 258, 8883-8889, (1983).
En hvilken som helst buffer med en pK i det nødven-dige pH-område og med ubetydelig bindekapasitet for kalsium kan benyttes ved testen. Mange av buffrene av Good-typen (N.E. Good et al., Biochem. 5, 467-477 (1966)), som f.eks. Tris, HEPES, MOPSO, BES, TES og imidazol, oppfyller disse krav (se eksempel H). Collagenase kan anvendes i stedet for Calpain I og kan testes fluorometrisk ved pH 6,5-7,5 med L-isoleucyl-L-analylglycylethylester, 0,02 mmol/1-0,2 mmol/1.
Bestemmelse av kloridioner
For bestemmelse av klorid i blod blir plasma inkubert med en buffret blanding inneholdende 0,01 mol/l cysteamin,
4 mmol/1 Gly-Phe-p-nitroanilid og 0,02 U/ml Cathepsin C. Dannelsen av p-nitroanilin er helt avhengig av tilstedeværelse av kloridanioner. Selektive bindemidler kan tilsettes i tillegg for å eliminere forstyrrelser forårsaket av bromidioner eller for å nedsette aktiviteten av kloridioner, slik.at konsentrasjonen av disse innstilles på det optimale område for enzymet. Under de valgte analysebetingelser (se eksempel 5) er graden av dannelse av p-nitroanilin:
proporsjonal med konsentrasjonen av kloridioner i prøven. I dette eksempel bestemmes reaksjonshastigheten ved å måle
økningen i absorpsjonen ved 405 nm.
Konsentrasjonsområdene for forbindelsene ved en slik bestemmelsesmetode:
En hvilken som helst buffer som har en pK i det nødvendige pH-område og en ubetydelig kloridkonsentrasjon, kan benyttes ved testen. Eksempler på enzymer av alle de ovenfor angitte kategorier (transferaser, hydrolaser, oxidoreductaser og lyaser) er i litteraturen vist å være kloridavhengige, spesielt dersom disse enzymer stammer fra halogenofile organismer. Kloridavhengigheten av enzymer av peptidasetypen er blitt inngående beskrevet. Eksempler er dipeptidylpeptidase I (Cathepsin C), EC 3.4.14.1 (J. Ken Mc Donald, Bioch. Bioph. Res. Communication, 24 (5) 1966, 771f) og dipeptidylpeptidase III EC. 3.4.14.3 (J. Ken Mc Donald, Journal of Biol. Chem. 241 (7) 1966, 1494f), som begge katalyserer hydrolyse av oligopep-tidderivater fra aminoendegruppen. Et annet eksempel er det angiotensinomdannende enzym EC 3.4.15.1 som er en dipeptidyl-carboxypeptidase som katalyserer hydrolytisk frigjøring av dipeptider fra carboxylendegruppen i et bredt spektrum av oligopeptider (P. Bunning et al., Bioch. 26, 1987, 3374f; R. Shapiro et al., Bioch. 22, 1983, 3850f).
I stedet for Gly-Arg-p-nitroanilid kan forskjellige andre dipeptid- eller oligopeptidsubstrater benyttes. Foretrukne peptidsubstrater kan beskrives ved den generelle formel :
For dipeptidylpeptidaseenzymene er R hydrogen, mens Pn- Pxbetegner en peptidkjede med minst to rester. X betegner en chromogen eller fluorogen gruppe som frigjøres ved innvirkning av enzymet under dannelse av en påvisbar fargeendring eller fluorescens. X kan være en nitrofenyl-, nafthyl- eller thiobenzylester og likeledes en nitroanilin-, nafthylamin- eller methylcumaringruppe, med eller uten ytterligere substituenter på den aromatiske ring. For dipeptidylcarboxypeptidaseenzymer betegner X peptidkjedens aminoendegruppe, mens R er en chromogen eller fluorogen gruppe som frigjøres under innvirkning av enzymet. R kan være en N-2-furanacryloyl- eller benzoylgruppe, med eller uten ytterligere substituenter (se eksempel I).
Som et ytterligere eksempel på enzymatisk bestemmelse av kloridioner (eksempel J) inkuberes plasma med en puffret blanding inneholdende 4,6-0-benzyliden-a-4-nitrofenyl-a-a-D-maltoheptaoksid(4,6-ethyliden-G7PNP) (5 mmol/1), a-amylase (0,60 U/ml) og a-glucosidase (= 30 U/ml). Dannelsen av p-nitrofenol er fullstendig avhengig av tilstedeværelse av kloridanioner, og det benyttes også her enten forhåndsfortynning, små prøvevolumer eller selektive bindemidler for å innstille kloridionekonsentrasjonen innenfor det optimale område for enzymet. Testprinsippet er sammenfattet nedenfor, og graden av forekomst av reaksjonen bestemmes ved måling av økningen i absorpsjon ved 405 nm. 2 ethyliden-G5+ 2 G2PNP + 2 ethyliden-G4+ 2 G3PNP + ethyliden-G3+ G4PNP
Konsentrasjonsområdene for forbindelsene benyttet ved denne bestemmelse er:
De variasjoner av testen som det er redegjort ovenfor
i forbindelse med Cathepsin C (eksempel I), gjelder også for eksempel J.
Bestemmelse av tungmetallioner
Disse metaller binder seg sterkt til cryptander som f.eks. "Kryptofix" 221 og "Kryptofix" 222. De vil derfor fortrenge andre metaller som er løsere bundet. Et eksempel på
et metallion som lett fortrenges, er sink. Sinkioner er til stede i meget små konsentrasjoner i plasma. Det er derfor hensiktsmessig å tilsette sinkioner som er kompleksbundet til K 221, til en puffret serumblanding. Dersom et tungmetall er
til stede, vil sinkionene frigjøres, og deres tilstedeværelse kan påvises ved stimulering av pyridoxalkinase (fra saue-hjerner), et enzym som er sterkt følsomt for sinkioner. Også mange andre lignende, konkurrerende bindetester er anvendelige.
Bestemmelse av bicarbonationer
Bicarbonationer kan bestemmes under anvendelse av en variant av prinsippene som utnyttes i henhold til oppfinnelsen. Mange ligander, f.eks. cryptandene, er pH-følsomme, og denne egenskap kan utnyttes for å bestemme bicarbonat. I hovedsak trekkes det fordel av bicarbonationenes evne til å nøytralisere protoner. Det kan vises at pH-verdien for en meget svakt bufret serumprøve, til hvilken det er blitt til-satt saltsyre, vil variere som en funksjon av bicarbonatkon-sentrasjonen. Den endelige pH bestemmes ved mengden av frie natriumioner (påvist med B-galactosidase) som er til stede, i nærvær av et pH-følsomt ionebindemiddel som f.eks. "Kryptofix" 221, og denne er en funksjon av den opprinnelige bicarbonat-konsentrasjon. I hovedsak surgjøres serum til pH ca. 4,5 med et like stort volum HC1 (75 mmol/1) for å overføre alt bicarbonat til hydroxylioner, og deretter foretas omsetning med et testsystem ved pH 7,5-7,8 under anvendelse av en fortynnet Tris-buffer (5 mmol/1) som innfører et ioneselektivt enzym,
som f.eks. B-galactosidase, og et egnet pH-følsomt ionebindemiddel. Natriumionekonsentrasjonen i prøven må være kjent for at det skal kunne oppnås nøyaktige resultater, fordi en
korreksjon er nødvendig på grunnlag av mengden av natriumioner i prøven. Metoden er vesentlig mindre følsom enn utførelser hvor det benyttes chromogene indikatorer som pH-detektorer (eksempel K).
Typiske konsentrasjonsområder for hovedreagensene ved enzymatisk bestemmelse av bicarbonationer ved 37°C under anvendelse av en 10 ul prøve av plasma eller serum er:
Behovet for å korrigere for natriumionekonsentrasjonen kan unngås ved bruk av et enzym (f.eks. pyridoxalkinase) som er følsomt for spormetaller (f.eks. sinkioner) som normalt er til stede i plasma i mikromolar konsentrasjon. Forutsatt at bindingen av spormetallet til dets bindemiddel er pH-følsom og oppviser en tilsvarende affinitet som den natriumioner har for "Kryptofix" 221, kan bicarbonationer måles ved at sinkionene innlemmes i reaksjonsblandingen i konsentrasjoner i et tilstrekkelig stort overskudd i forhold til dem som kan påtreffes i plasma. Følgelig vil endogene sinkioner ikke virke forstyrrende.
Fremgangsmåtene som er beskrevet ovenfor, er enkle, meget hurtige, nøyaktige og presise og kan utføres med billig apparatur. Risikoen i laboratorier forbundet med antennbare gasser, kan unngås, og likeledes mange problemer forbundet med ioneselektive elektroder. Fremgangsmåten kan tilpasses for anvendelse av stort utstyr for utførelse av et stort antall analyser, men den kan også anvendes ved bruk av billigere instrumenter for nødbruk nær sengekanten. Det er enkelt å pakke inn utstyret som trenges for utførelse av fremgangsmåten, som et utstyrssett. Dessuten kan bestemmelsen av kalium- og natriumionekonsentrasjonene utføres etter hverandre i samme kyvette (eksempel G). Fremgangsmåten vil også være anvendelig på legekontor ved bruk av en tørrkjemikaliemaskin. Skjønt disse fremgangsmåter er utviklet under anvendelse av automatiske spektrometere, kan de lett tilpasses automatisert eller manuelt laboratorieutstyr, som f.eks. fluorimetere, luminometere og isotoptellere.
I de følgende eksempler blir et lite prøvevolum
(10 ul, med mindre annet er angitt, i de tilfeller hvor det dreier seg om serum eller plasma) blandet med et reagens 1, inneholdende puffret substrat og visse kofaktorer, og det foretas inkubering i en gitt tid, vanligvis i 0,1-5 min. Avlesning av absorpsjonsevnen foretas normalt med jevne mellomrom under denne inkuberingsperiode. Et reagens 2, inneholdende indikatorenzymet, tilsettes deretter, og reaksjonshastigheten overvåkes. I enkelte eksempler inneholder Reagens 1 indikatorenzymet, mens Reagens 2 inneholder det passende substrat. Eksemplene viser den ferdige reaksjonsblanding etter at prøven, Reagens 1 og Reagens 2 er blitt blandet sammen.
Eksempel A (Sammenligningseksempel)
Måling av kaliumionekonsentrasjonen ved bruk av pyruvat-kinase uten noe bindemiddel for natriumioner; ukjent natriumionekon-sentras jon
Den endelige inkuberingsblanding inneholder:
Kaliumionestandardoppløsninger (kalibreringsopp-løsninger) inneholder 140 mmol/1 natriumioner for å kompensere for den stimulerende virkning av natriumioner som er til stede
i plasma, på pyruvatkinase.
Eksempel B (Sammenligningseksempel)
Måling av kaliumionekonsentrasjonen ved bruk av pyruvatkinase, uten noe bindemiddel for natriumioner; kjent natriumionekon-sentras j on
Inkuberingsblandingen og kalibreringsoppløsningen er som for eksempel A.
Det kan foretas en korreksjon for natriumionekon-sentras j onen i blandingen ved at man tilsetter (eller subtra-herer) 0,1 mmol/1 kalium for hver 10 mmol/1 som natriumione-konsentras j onen ligger under (eller over) 140 mmol/1 natriumioner. Imidlertid bør denne korreksjon verifiseres ved analyse av vandige oppløsninger med kjente natrium- og kaliumkonsen-trasjoner.
Eksempel C
Måling av kaliumionekonsentrasjonen ved bruk av pyruvatkinase, i nærvær av et bindemiddel for natriumioner.
Utføres som eksempel B, men humanserumalbumin utelates, og mediet inneholder i tillegg 6 umol "Kryptofix" 221 pr. test. Det velges en pH på 7,8 for å minimere variasjonene i fortrengningen av natriumioner fra "Kryptofix" 221 som følge av ulikheter i kaliumioneinnholdet i de enkelte prøver.
Eksempel D
Måling av natriumionekonsentrasjonen ved bruk av B-D-galactosidase
Variant a: Den ferdige inkuberingsblanding inneholder:
Reaksjonen overvåkes ved bølgelengde 420 nm (eller ved en bølgelengde nær denne) for å bestemme graden av dannelse av fri 2-nitrofenol og følgelig konsentrasjonen av natriumioner i den opprinnelige prøve.
Variant b: En alternativ tilnærmelse sammenlignet med Variant a ville være å redusere prøvens konsentrasjon ti ganger ved forhåndsfortynning eller å benytte et lite prøvevolum, i hvilket tilfelle cryptanden ville kunne utelates.
Variant c: Måling i fluider med lavt natriumioneinnhold (f.eks. < 20 mmol/1), i hvilket tilfelle cryptanden vil kunne utelates.
Eksempel E
Måling av konsentrasjonen av natriumioner med pyruvatkinase (direkte stimulering av enzymaktiviteten med natriumioner under betingelser hvor følsomheten av kaliumioner nedsettes)
Inkuberingsblandingen inneholder for en 10 ul plas-maprøve:
^3
Natriumionekalibreringsoppløsninger inneholder 4 mmol/1 kalium for å kompensere for kaliumets aktiverende virkning åv serum-kalium-ioner på pyruvatkinase.
Eksempel F
Måling av konsentrasjonen av natriumioner med pyruvatkinase (konkurrerende bindetest). Kjent kaliumionekonsentrasjon
Den ferdige inkuberingsblandingen inneholder for en 10 ul plasmaprøve:
Kaliumklorid settes til dette reagens og fortrenges støkiometrisk fra "Kryptofix" 221 av natriumioner, hvorved natriumionekonsentrasjonen i prøven kan bestemmes kvantitativt.
Eksempel G
Måling av kalium- og natriumionekonsentrasjonen i den samme kyvette (tvillingtest)
Natriumionekonsentrasjonen bestemmes først på samme måte som i eksempel D, bortsett fra at blandingen også inneholder :
Etter bestemmelsen av natriumioner ved bestemmelse av reaksjonshastigheten, senkes inkubasjonsblandingens pH til 7,4 med en alikvot saltsyre.
Deretter tilsettes de følgende bestanddeler i slike mengder at de angitte sluttkonsentrasjoner oppnås:
Reaksjonshastigheten kan så overvåkes ved 340 nm, men den kan også måles ved en noe større bølgelengde for å minimere eventuell forstyrrelse forårsaket av den 2-nitrofenol som frigjøres under natriumioneindikatorreaksjonen.
Eksempel H
Måling av kalsiumionekonsentrasionen ved bruk av Calpain I
I denne utførelse sentrifugeres en liten blodprøve for å frembringe plasma. For bestemmelsen av kalsiumioner ble prøven inkubert ved 30"C med en blanding inneholdende 50 mmol/1 imidazol-HCl-buffer, pH 7,3, 5 mmol/1 L-cystein, 2,5 mmol/1 2-mercaptoethanol, 0,1 mmol/1 EGTA og 5 mmol/1 Suc-Leu-Met-p-nitroanilid. Økningen av absorberingen ved 405 nm ble overvåket med fem minutters mellomrom. Hastigheten er proporsjonal med kalsiumionekonsentrasjonen i prøven.
Eksempel I
Måling av kloridionekonsentrasjonen ved bruk av cathepsin C
I denne utførelse sentrifugeres en liten blodprøve for å frembringe plasma (5 pl). For måling av kloridionekonsentrasjonen inneholder inkuberingsblandingen 0,05 mol/l citratbuffer pH 5,0, 10 mmol/1 cysteamin og 4 mmol/1 gly-arg-p-nitroanilid og 0,01 U/ml cathepsin C. Sistnevnte er blitt dialysert mot 10 mmol/1 natriumfosfatbuffer (pH = 6,8) og 43 vol% glycerol for å fjerne kloridioner.
Eksempel J
Måling av kloridionekonsentrasjonen ved ruk av - amylase
Inhiberingsblandingen inneholder for en 5 ul plas-maprøve:
Reaksjonen overvåkes ved 405 nm (eller ved en bølge-lengde nær denne) for å bestemme graden av dannelse av fri 4-nitrofenol og følgelig konsentrasjonen av kloridioner i den opprinnelige prøve.
Eksempel K
Måling av bicarbonationekonsentrasjonen ved bruk av B-D-galactosidase
Variant a: Den ferdige inkuberingsblanding inneholder:
EGTA står for ethylen-bis-(oxyethylennitrilo)-tetraeddiksyre. Prøven forhåndsinkuberes med et ekvivalent volum HC1 (for plasma, 75 mmol/1) for å nedsette prøvens pH til 4,5. Reaksjonen overvåkes deretter ved 420 nm (eller ved en bølgelengde nær denne) for å bestemme graden av dannelse av fri 2-nitrofenol og følgelig konsentrasjonen av bicarbonationer i den opprinnelige prøve. Det foretas en korreksjon for natrium-ionekonsentras j onen i den opprinnelige prøve.
Variant b: Pyridoxalkinase, pyridoxal og sinkioner benyttes istedenfor B-galactosidase og NGP.
Claims (43)
1. Fremgangsmåte for bestemmelse av ioner i fluider,karakterisert vedat innvirkningen av disse ioner på aktiviteten av et enzym måles og et bindemiddel tilsettes for å maskere interfererende ioner.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1,karakterisert vedat fluidet er et biologisk eller ikke-biologisk fluid.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 2,karakterisert vedat det biologiske fluid er blod, serum, plasma, urin, svette, cerebrospinalt fluid, lymfe- eller tarmsekreter, eksudater eller transudater, og at det ikke-biologiske fluid er vann eller en vandig ekstrakt eller blanding.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 1-3,karakterisert vedat enzymet er en transferase, en hydrolase, en oxidoreductase eller en lyase.
5. Fremgangsmåte ifølge krav 4,karakterisert vedat transferasen overfører fosforholdige grupper, og at hydrolasen er en glycosidase eller virker på peptidbindinger.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 5,karakterisert vedat hydrolasen er a- eller B-D-galactosidase, carboxypeptidase A, collagenase, amylase, calpain I, calpain II, dipeptidylaminopeptidase I (cathepsin C) eller fosfoglycollatfosfatase.
7. Fremgangsmåte ifølge krav 5,karakterisert vedat transferasen er pyruvatkinase, hexokinase, adenylatkinase, pyridoxalkinase eller acetatkinase og at hydrolasen er a- eller B-D-galactosidase eller carboxypeptidase A.
8. Fremgangsmåte ifølge krav 4,karakterisert vedat oxidoreductasen virker på gruppen CH-OH i donormolekyler eller på donorers aldehyd-eller oxo-gruppe.
9. Fremgangsmåte ifølge krav 4,karakterisert vedat oxidoreductasen er glyceroldehydrogenase, acetaldehyddehydrogenase eller tyrosinase (catecholoxidase).
10. Fremgangsmåte ifølge krav 4,karakterisert vedat lyasen er en carbon-carbon-lyase eller en carbon-oxygen-lyase.
11. Fremgangsmåte ifølge krav 9,karakterisert vedat lyasen er aldolase eller carbonisk anhydrase.
12. Fremgangsmåte ifølge krav 1-11,karakterisert vedat ionet er kalium, natrium, kalsium, magnesium, mangan, lithium, bly, sink, kobber, jern eller annet tungmetall eller et ikke-metallisk ion valgt blant protoner, bicarbonat, klorid, ammonium og substanser som fører til dannelse av ammonium.
13. Fremgangsmåte ifølge krav 1-12,karakterisert vedat konsentrasjonen av ionet som skal bestemmes, reduseres til et optimalt nivå for måling ved hjelp av et bindemiddel, dersom fortynning av prø-ven ikke kan foretas og/eller dersom enzymets følsomhet for ionene som skal bestemmes, må reduseres.
14. Fremgangsmåte ifølge krav 1-13,karakterisert vedat kaliumioner bestemmes ved bruk av pyruvatkinase, glyceroldehydrogenase eller acetaldehyddehydrogenase .
15. Fremgangsmåte ifølge krav 1-13,karakterisert vedat natriumioner bestemmes ved bruk av enzymet pyruvatkinase eller B-D-galactosidase.
16. Fremgangsmåte ifølge krav 1 - 15,karakterisert vedat de forstyrrende ioner eller analytter bindes ved hjelp av cryptander, coronander, podander, kronethere, sfærander, hemisfærander, calixarener og kombinasjoner derav, naturlig forekommende ionoforer, sykliske peptider, kompleksoner og chelateringsmidler og derivater derav, og metaller av første og annen sidegruppe av det perio-diske system.
17. Fremgangsmåte ifølge krav 1-16,karakterisert vedat man for bestemmelse av kaliumioner binder de forstyrrende natriumioner med 4,7,13,16,21-pentaoxa-l,10-diazabicyclo-[8.8.5]-tricosan ("Kryptofix" 221), og at man for. bestemmelse av natriumioner binder de forstyrrende kaliumioner med 4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicyclo-[8.8.8]-hexacosan("Kryptofix" 222).
18. Fremgangsmåte ifølge krav 13,karakterisert vedat man ved bestemmelse av natriumioner under anvendelse av B-galactosidase reduserer konsentrasjonen av frie natriumioner med et bindemiddel.
19. Fremgangsmåte ifølge krav 13,karakterisert vedat bindemidlet er "Kryptofix" 221.
20. Fremgangsmåte ifølge krav 13,karakterisert vedat bindemidlene ifølge krav 16 er tilstede og danner et kompleks med indikatorioner, fra hvilket indikatorionene fortrenges støkiometrisk av ionene som skal bestemmes, og ved at innvirkningen av de fortrengte indikatorioner på aktiviteten av enzymet måles, hvorved det fåes et indirekte mål på konsentrasjonen av analyttene.
21. Fremgangsmåte ifølge krav 20,karakterisert vedat enzymet er pyruvat- kinase, at indikatorionene er kalium, at bindemidlet er "Kryptofix" 221, og at ionet som skal bestemmes, er natrium.
22. Fremgangsmåte ifølge krav 20,karakterisert vedat enzymet er en kinase, at indikatorionet er Mg<2+>, at bindemidlet er et chelateringsmiddel, og at analyttionet er et metallion.
23. Fremgangsmåte ifølge krav 20,karakterisert vedat enzymet er pyridoxalkinase, at indikatorionet er Zn<2+>, at bindemidlet er "Kryptofix" 221, og at analyttionet er et tungmetallion.
24. Fremgangsmåte ifølge krav 20,karakterisert vedat ionene som skal bestemmes, avstedkommer en endring i pH-verdien som fortrenger indikatorionene fra et kompleks med et pH-følsomt bindemiddel.
25. Fremgangsmåte ifølge krav 24,karakterisert vedat enzymet er B-galactosidase, at det pH-følsomme bindemiddel er "Kryptofix" 221, at indikatorionene er natrium, og at ionet som skal bestemmes er bicarbonat.
26. Fremgangsmåte ifølge ett av kravene 13 - 16,karakterisert vedat enzymet er a-amylase eller cathepsin C, at bindemidlet er Ag eller Hg, og at ionet som skal bestemmes, er klorid.
27. Fremgangsmåte ifølge ett av kravene 13 - 16,karakterisert vedat enzymet er collagenase eller calpain I eller calpain II, at bindemidlet er et chelateringsmiddel, og at ionet som skal bestemmes, er kalsium.
28. Fremgangsmåte ifølge krav 1-27,karakterisert vedat ioner som er konkurrerende inhibitorer for det følsomme indikatorenzym, innlemmes i testen.
29. Fremgangsmåte ifølge krav 28,karakterisert vedat ionene som skal bestemmes, er natrium eller kalium, og at den konkurrerende inhibitor utgjøres av lithiumioner.
30. Materiale for bestemmelse av ioner i fluider,karakterisert vedat det omfatter et enzym hvis aktivitet påvirkes av ionet, og et bindemiddel som er til stede for å maskere interfererende ioner.
31. Materiale ifølge krav 30, for bestemmelse av kalium-ioner ,
karakterisert vedat det omfatter pyruvat-kinase og en cryptand.
32. Materiale ifølge krav 30,karakterisert vedat cryptanden er "Kryptofix" 221.
33. Materiale ifølge krav 30, for bestemmelse av natriumioner,
karakterisert vedat det omfatter pyruvat-kinase og en cryptand.
34. Materiale ifølge krav 33,karakterisert vedat cryptanden er "Kryptofix" 222.
35. Materiale ifølge krav 30, for bestemmelse av natriumioner,
karakterisert vedat det omfatter B-D-galactosidase og en cryptand.
36. Materiale ifølge krav 35,karakterisert vedat cryptanden er "Kryptofix" 221.
37. Blanding for bestemmelse av kaliumioner, anvendt fortrinnsvis ved 37°C,
karakterisert vedat den omfatter:
38. Blanding for bestemmelse av kaliumioner, anvendt fortrinnsvis ved 37°C,
karakterisert vedat den omfatter:
39. Blanding for bestemmelse av kaliumioner, anvendt fortrinnsvis ved 37°C,
karakterisert vedat den omfatter:
40. Blanding for bestemmelse av kaliumioner, anvendt fortrinnsvis ved 37°C,
karakterisert vedat den omfatter:
41. Blanding for bestemmelse av natriumioner, fortrinnsvis målt ved 37°C,
karakterisert vedat den omfatter:
42. Fremgangsmåte for måling av kalium- og natriumione-konsentras j onen i samme kyvette,
karakterisert vedat natriumionekonsentrasjonen analyseres ved bestemmelse av reaksjonshastigheten, pH-verdien i inkubasjonsblandingen senkes, og deretter måles kaliumionekonsentrasjonen.
43. Fremgangsmåte ifølge krav 42,karakterisert vedat analyseblandingen ved analyse av natriumionekonsentrasjonen inneholder Tris-HCl, pH 8,7 (37°C) Dithiotreitol Magnesiumsulfat Lithiumklorid EGTA (lithiumsalt) Humant serum-albumin p-galaktosidase NPG
"Kryptofix" 221 ADP (fri syre) PEP (nøytralisert tris-salt) NADH
KG
GDH
og at det etter at pH-verdien er senket tilsettes be- . standdelene
LDH
PK
MnCl2
LiCl.
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
NO93932855A NO932855D0 (no) | 1987-04-10 | 1993-08-11 | Fremgangsmaate og materiale for bestemmelse av kaliumioneri fluider |
NO93932856A NO932856D0 (no) | 1987-04-10 | 1993-08-11 | Fremgangsmaate og materiale for bestemmelse av natriumioner i fluider |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
AUPI136587 | 1987-04-10 | ||
AUPI231187 | 1987-06-05 | ||
PCT/EP1988/000275 WO1988008137A1 (en) | 1987-04-10 | 1988-04-02 | Determination of ions in fluids |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
NO885350D0 NO885350D0 (no) | 1988-11-30 |
NO885350L NO885350L (no) | 1988-11-30 |
NO176072B true NO176072B (no) | 1994-10-17 |
NO176072C NO176072C (no) | 1995-01-25 |
Family
ID=25643255
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO885350A NO176072C (no) | 1987-04-10 | 1988-11-30 | Fremgangsmåte og materiale for bestemmelse av ioner i fluider, og blandinger for bestemmelse av kalium- og natriumioner |
NO93932856A NO932856D0 (no) | 1987-04-10 | 1993-08-11 | Fremgangsmaate og materiale for bestemmelse av natriumioner i fluider |
NO93932855A NO932855D0 (no) | 1987-04-10 | 1993-08-11 | Fremgangsmaate og materiale for bestemmelse av kaliumioneri fluider |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
NO93932856A NO932856D0 (no) | 1987-04-10 | 1993-08-11 | Fremgangsmaate og materiale for bestemmelse av natriumioner i fluider |
NO93932855A NO932855D0 (no) | 1987-04-10 | 1993-08-11 | Fremgangsmaate og materiale for bestemmelse av kaliumioneri fluider |
Country Status (24)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US6068971A (no) |
EP (9) | EP0286039B1 (no) |
JP (8) | JPH0642839B2 (no) |
KR (4) | KR920010313B1 (no) |
CN (3) | CN1051111C (no) |
AR (1) | AR241802A1 (no) |
AT (4) | ATE91025T1 (no) |
BR (1) | BR8806575A (no) |
CS (2) | CS170892A3 (no) |
DD (1) | DD269919A5 (no) |
DE (6) | DE3881931T2 (no) |
DK (1) | DK687488D0 (no) |
ES (4) | ES2097782T3 (no) |
FI (3) | FI885727A0 (no) |
HR (1) | HRP940731A2 (no) |
HU (5) | HU9201058D0 (no) |
IE (3) | IE940436L (no) |
IL (3) | IL101586A (no) |
LV (1) | LV11068B (no) |
NO (3) | NO176072C (no) |
NZ (3) | NZ224171A (no) |
RU (1) | RU2054674C1 (no) |
WO (1) | WO1988008137A1 (no) |
YU (1) | YU47192B (no) |
Families Citing this family (53)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0274343A1 (en) * | 1987-01-06 | 1988-07-13 | IntraCel Corporation | A system of reactants involving an apo-enzyme useful in immunological analysis and a method for carrying out immunoassays with this system |
KR920010313B1 (ko) * | 1987-04-10 | 1992-11-26 | 더 플린더스 유니버시티 오브 사우쓰 오스트레일리아 | 유체중 나트륨이온의 측정 |
US5013648A (en) * | 1988-09-09 | 1991-05-07 | Em Diagnostic Systems, Inc. | Enzymatic detection of monovalent anions |
JP2748134B2 (ja) * | 1988-11-29 | 1998-05-06 | オリエンタル酵母工業株式会社 | マグネシウムの定量方法 |
GB9015683D0 (en) * | 1990-07-17 | 1990-09-05 | Amersham Int Plc | Testing for metal ions |
CA2111112A1 (en) * | 1991-07-11 | 1993-01-21 | Ellen K. Silbergeld | Lead assay |
US5334507A (en) * | 1991-09-20 | 1994-08-02 | Toyo Boseki Kabushiki Kaisha | Composition for measurement of potassium ion concentration and composition for elimination of ammonium ions |
DE69226940T2 (de) * | 1991-12-02 | 1999-05-27 | Oriental Yeast Co. Ltd., Tokio/Tokyo | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Serumeisen oder von der Bindungsfähigkeit des ungesättigten Eisens durch Verwendung von Akonitase |
US5700652A (en) * | 1993-04-07 | 1997-12-23 | Kyowa Medex Co., Ltd. | Quantitative determination method for sodium ions |
JPH06311896A (ja) * | 1993-04-30 | 1994-11-08 | Kyowa Medex Co Ltd | カリウムイオンの定量方法 |
US5532136A (en) * | 1993-06-22 | 1996-07-02 | Bionebraska, Inc. | Monoclonal antibody assay and kit for detecting metal cations in body fluids |
JP3203105B2 (ja) * | 1993-08-23 | 2001-08-27 | 協和メデックス株式会社 | ナトリウムイオンの定量方法 |
DE4401868C1 (de) * | 1994-01-22 | 1995-02-16 | Lobbe Xenex Gmbh | Mikrobielles Verfahren zum Nachweis von Schadstoffen |
JPH07203991A (ja) * | 1994-01-24 | 1995-08-08 | Kyowa Medex Co Ltd | カリウムイオンの定量方法 |
US6114134A (en) * | 1997-06-25 | 2000-09-05 | International Reagents Corporation | Method for assaying biological specimens for substances contained in the components thereof and reagent to be used in this method |
DE69840725D1 (de) * | 1997-06-25 | 2009-05-20 | Sysmex Corp | Methode und reagenzien zum bestimmen von substanzen in biologischen proben |
JP4416866B2 (ja) * | 1998-07-30 | 2010-02-17 | オリエンタル酵母工業株式会社 | カルシウム測定用液状試薬 |
US6376210B1 (en) | 1999-07-06 | 2002-04-23 | General Atomics | Methods and compositions for assaying analytes |
US7192729B2 (en) | 1999-07-06 | 2007-03-20 | General Atomics | Methods for assaying homocysteine |
CA2377665A1 (en) * | 1999-07-06 | 2001-01-11 | General Atomics | Methods and compositions for assaying analytes |
US6610504B1 (en) | 2000-04-10 | 2003-08-26 | General Atomics | Methods of determining SAM-dependent methyltransferase activity using a mutant SAH hydrolase |
US7045098B2 (en) | 2001-02-02 | 2006-05-16 | James Matthew Stephens | Apparatus and method for removing interfering substances from a urine sample using a chemical oxidant |
US10022078B2 (en) | 2004-07-13 | 2018-07-17 | Dexcom, Inc. | Analyte sensor |
US20030022390A1 (en) * | 2002-05-30 | 2003-01-30 | Stephens James Matthew | Method and kit for making interfering substances in urine undetectable |
US6811997B2 (en) * | 2002-07-02 | 2004-11-02 | Bechtel Bwxt Idaho, Llc | Method for chromium analysis and speciation |
US7920906B2 (en) | 2005-03-10 | 2011-04-05 | Dexcom, Inc. | System and methods for processing analyte sensor data for sensor calibration |
US9247900B2 (en) | 2004-07-13 | 2016-02-02 | Dexcom, Inc. | Analyte sensor |
US7384760B2 (en) | 2004-04-30 | 2008-06-10 | General Atomics | Methods for assaying inhibitors of S-adenosylhomocysteine (SAH) hydrolase and S-adenosylmethionine (SAM)-dependent methyltransferase |
US7654956B2 (en) | 2004-07-13 | 2010-02-02 | Dexcom, Inc. | Transcutaneous analyte sensor |
EP1784162A2 (en) * | 2004-08-23 | 2007-05-16 | Remote Clinical Solutions, Inc. | System and method for modifying a fluid for oral administration |
US20060121548A1 (en) * | 2004-11-09 | 2006-06-08 | Remote Clinical Solutions, Inc. | Systems and methods for measuring sodium concentration in saliva |
US20070015287A1 (en) * | 2005-07-15 | 2007-01-18 | Remote Clinical Solutions, Inc. | Methods and devices for measuring analyte concentration in a nonblood body fluid sample |
JP2007116977A (ja) * | 2005-10-27 | 2007-05-17 | Toyobo Co Ltd | 他測定項目への影響低減方法 |
CN100458420C (zh) * | 2006-12-21 | 2009-02-04 | 中电投远达环保工程有限公司 | 硝酸汞滴定测量石灰石浆液中氯离子的方法 |
WO2008151208A1 (en) * | 2007-06-04 | 2008-12-11 | Lehigh University | Rapid sensing of toxic metals with hybrid inorganic materials |
WO2009020782A2 (en) * | 2007-08-06 | 2009-02-12 | Oft Labs Llc | Oral fluid assays for the detection of heavy metal exposure |
US8420341B2 (en) * | 2007-12-14 | 2013-04-16 | Genewiz Inc., Suzhou | Methods for measuring ADP |
WO2009135035A1 (en) * | 2008-05-02 | 2009-11-05 | Specialty Assays, Inc. | Enzymatic determination of potassium ions using stable nad(p)h analogs. |
KR101495970B1 (ko) | 2010-03-30 | 2015-02-25 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 칼슘 이온의 측정 방법 |
CN102539682A (zh) * | 2010-12-13 | 2012-07-04 | 苏州艾杰生物科技有限公司 | 氨(氨离子)的测定方法与氨(氨离子)诊断/测定试剂盒 |
CN102539696A (zh) * | 2010-12-13 | 2012-07-04 | 苏州艾杰生物科技有限公司 | 氨(氨离子)的测定方法与氨(氨离子)诊断/测定试剂盒 |
JP5100903B1 (ja) * | 2012-04-06 | 2012-12-19 | Akjグローバルテクノロジー株式会社 | リチウム試薬組成物、それを用いたリチウムイオン測定方法及び測定装置 |
JP5222432B1 (ja) * | 2012-11-07 | 2013-06-26 | Akjグローバルテクノロジー株式会社 | リチウム測定方法 |
KR101506147B1 (ko) * | 2013-12-13 | 2015-03-26 | 삼성전자 주식회사 | 시약 세트, 시료 검사방법, 미세유동장치 및 검사장치 |
RU2569172C1 (ru) * | 2014-05-05 | 2015-11-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт высокотемпературной электрохимии Уральского отделения Российской Академии наук | Способ определения концентрации протонов в протон-проводящих оксидных материалах |
CN105420344A (zh) * | 2015-12-12 | 2016-03-23 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种稳定、抗干扰能力强的血清钾检测试剂及检测方法 |
US11214821B2 (en) | 2016-07-18 | 2022-01-04 | Vision Diagnostics, Inc. | Reagents and methods of use with automated analyzers for obtaining a specific gravity index for urine |
RU2630695C1 (ru) * | 2016-12-14 | 2017-09-12 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт физической химии и электрохимии им. А.Н. Фрумкина Российской академии наук (ИФХЭ РАН) | 2,4,6-Трис[(2-дифенилфосфорил)-4-этилфенокси]-1,3,5-триазин в качестве электродоактивного селективного ионофора для катиона лития в пластифицированных мембранах ионоселективных электродов |
CN108607237B (zh) * | 2018-05-03 | 2019-06-21 | 大连理工大学 | 一种adp配基层析介质的保护方法 |
CN109187522A (zh) * | 2018-08-31 | 2019-01-11 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种血清钠比色法检测试剂盒 |
US20200300836A1 (en) * | 2018-10-12 | 2020-09-24 | Polymer Technology Systems, Inc. | Systems and methods for point-of-care detection of potassium |
CN111208176B (zh) * | 2020-01-15 | 2022-11-08 | 湖南工业大学 | 一种检测钾离子和钠离子浓度的电化学试条及其检测方法 |
CN113718015B (zh) * | 2021-08-27 | 2024-05-07 | 迪瑞医疗科技股份有限公司 | 一种体外酶法钾测定试剂盒的制备方法 |
Family Cites Families (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR1041630A (fr) * | 1950-02-25 | 1953-10-26 | Security Trust Company Of Roch | Composés indicateurs à base de résines d'échange d'ions |
US2791533A (en) * | 1951-02-24 | 1957-05-07 | Security Trust Company | Ion exchange resin indicator compound |
DE2137146B2 (de) | 1971-07-24 | 1974-07-04 | C.H. Boehringer Sohn, 6507 Ingelheim | Verfahren zur photometrischen Bestimmung von Chloridionen in Körperflüssigkeiten |
DE2349819A1 (de) * | 1973-10-04 | 1975-04-17 | Eppendorf Geraetebau Netheler | Verfahren zur enzymkinetischen konzentrationsbestimmung eines substrats |
JPS5414196A (en) * | 1977-07-05 | 1979-02-02 | Taiko Electric Works Ltd | Automatic posting device input expansion system |
JPS56164787A (en) * | 1980-05-21 | 1981-12-17 | Unitika Ltd | Production of heat-resistant pyruvate kinase |
US4278440A (en) | 1980-02-04 | 1981-07-14 | Union Carbide Corporation | Reagent and method for direct determination of chloride in serum |
CA1168705A (en) * | 1980-05-27 | 1984-06-05 | Hamish Small | Ion exchange chromatography with indirect photometric detection |
US4734375A (en) * | 1980-05-27 | 1988-03-29 | Miles Laboratories, Inc. | Ion specific test method |
ATE17500T1 (de) * | 1981-10-05 | 1986-02-15 | Boehringer Mannheim Corp | Linear kinetische feststellung von bicarbonat in koerperfluessigkeiten. |
DE3202779A1 (de) * | 1982-01-28 | 1983-08-04 | Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt | Kaliumreagens und verfahren zur bestimmung von kaliumionen |
US4393142A (en) | 1982-02-01 | 1983-07-12 | American Monitor Corporation | Assay method and reagent for the determination of chloride |
US4455371A (en) * | 1982-03-03 | 1984-06-19 | The Ohio State University Research Foundation | Oxalate oxidase composition for assay of oxalate |
US4663278A (en) * | 1982-04-30 | 1987-05-05 | Syva Company | Agglutination dependent enzyme channeling immunoassay |
US4657854A (en) * | 1983-05-05 | 1987-04-14 | Ivan Endre Modrovich | Assay systems based on magnesium-responsive enzymes |
CA1222438A (en) * | 1983-05-12 | 1987-06-02 | Steven C. Charlton | Unified test means for ion determination |
DE3345748A1 (de) | 1983-12-17 | 1985-08-29 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Phenolsulfonphthaleinyl-ss-d-galactoside, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung zur bestimmung der ss-d-galactosidase |
EP0150227A1 (en) * | 1983-12-23 | 1985-08-07 | FUJIREBIO KABUSHIKI KAISHA also trading as FUJIREBIO INC. | Dipeptide derivatives and their use in determining the activity of carboxypeptidase A |
DE3411574A1 (de) | 1984-03-29 | 1985-10-10 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Glycoside von resorufin-derivaten, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung zur bestimmung der aktivitaet von glycosidasen |
JPS61151460A (ja) * | 1984-12-25 | 1986-07-10 | Fuji Photo Film Co Ltd | カルシウムまたはマグネシウム分析用一体型多層分析要素 |
DD236114A1 (de) * | 1985-04-09 | 1986-05-28 | Univ Halle Wittenberg | Verfahren zur bestimmung von bakterieninfektion in liquores |
DE3614470A1 (de) * | 1985-05-02 | 1986-11-20 | Gary D. Flushing N.Y. Steinman | Verfahren zum messen der kaliumgehalte in biologischen fluessigkeiten |
IL79087A0 (en) * | 1985-07-02 | 1986-09-30 | Miles Lab | Multilayer ion test means |
JPS6236199A (ja) * | 1985-08-07 | 1987-02-17 | Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd | カルシウムイオンの定量法 |
JPH0612999B2 (ja) | 1986-11-17 | 1994-02-23 | 関東化学株式会社 | 塩素イオン定量用試薬 |
US4820647A (en) * | 1986-12-03 | 1989-04-11 | Biotrack, Inc. | Method for detecting a metal ion in an aqueous environment |
GB8708034D0 (en) * | 1987-04-03 | 1987-05-07 | British Telecomm | Optical fibre device fabrication |
KR920010313B1 (ko) * | 1987-04-10 | 1992-11-26 | 더 플린더스 유니버시티 오브 사우쓰 오스트레일리아 | 유체중 나트륨이온의 측정 |
US5384247A (en) * | 1987-04-10 | 1995-01-24 | Boehringer Mannheim, Gmbh | Determination of sodium ions in fluids |
US5162525A (en) * | 1987-07-31 | 1992-11-10 | Allied-Signal Inc. | Fluorogenic and chromogenic three-dimensional ionophores as selective reagents for detecting ions in biological fluids |
-
1988
- 1988-04-02 KR KR1019920701690A patent/KR920010313B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-04-02 ES ES91118973T patent/ES2097782T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 DE DE88105339A patent/DE3881931T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 ES ES91118956T patent/ES2097781T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 JP JP63503316A patent/JPH0642839B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 DE DE3855715T patent/DE3855715T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1988-04-02 EP EP88105339A patent/EP0286039B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 AT AT88105339T patent/ATE91025T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-04-02 KR KR1019920701689A patent/KR920010312B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-04-02 DE DE3855714T patent/DE3855714T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 EP EP92106026A patent/EP0504948A1/en not_active Withdrawn
- 1988-04-02 AT AT91118957T patent/ATE148793T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-04-02 KR KR1019880701651A patent/KR920009425B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-04-02 BR BR888806575A patent/BR8806575A/pt not_active Application Discontinuation
- 1988-04-02 ES ES91118957T patent/ES2098300T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 DE DE8888105339Q patent/DE3881931D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 EP EP88903229A patent/EP0309525A1/en active Pending
- 1988-04-02 DE DE883890267T patent/DE3890267T1/de not_active Withdrawn
- 1988-04-02 HU HU9201058A patent/HU9201058D0/hu not_active IP Right Cessation
- 1988-04-02 EP EP91118957A patent/EP0471391B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 WO PCT/EP1988/000275 patent/WO1988008137A1/en active Application Filing
- 1988-04-02 EP EP91118973A patent/EP0470652B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 ES ES88105339T patent/ES2058165T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 EP EP19920106023 patent/EP0494704A3/en not_active Withdrawn
- 1988-04-02 HU HU882491A patent/HUT51677A/hu unknown
- 1988-04-02 HU HU9201060A patent/HU9201060D0/hu not_active IP Right Cessation
- 1988-04-02 EP EP19920106025 patent/EP0494705A3/en not_active Withdrawn
- 1988-04-02 HU HU9201059A patent/HU9201059D0/hu not_active IP Right Cessation
- 1988-04-02 RU SU884613137A patent/RU2054674C1/ru active
- 1988-04-02 HU HU9201057A patent/HU9201057D0/hu not_active IP Right Cessation
- 1988-04-02 EP EP91118956A patent/EP0476715B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 AT AT91118973T patent/ATE146599T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-04-02 EP EP92106024A patent/EP0508388A1/en not_active Withdrawn
- 1988-04-02 DE DE3855790T patent/DE3855790T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-04-02 AT AT91118956T patent/ATE146600T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-04-06 IE IE940436A patent/IE940436L/xx unknown
- 1988-04-06 IE IE102288A patent/IE62537B1/en not_active IP Right Cessation
- 1988-04-06 IE IE940435A patent/IE940435L/xx unknown
- 1988-04-07 YU YU69988A patent/YU47192B/sh unknown
- 1988-04-07 NZ NZ224171A patent/NZ224171A/en unknown
- 1988-04-07 NZ NZ239095A patent/NZ239095A/en unknown
- 1988-04-07 NZ NZ239099A patent/NZ239099A/en unknown
- 1988-04-08 DD DD31455788A patent/DD269919A5/de not_active IP Right Cessation
- 1988-04-09 CN CN88102781A patent/CN1051111C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1988-04-10 IL IL10158688A patent/IL101586A/en not_active IP Right Cessation
- 1988-04-10 IL IL8601788A patent/IL86017A/en not_active IP Right Cessation
- 1988-04-10 IL IL10158588A patent/IL101585A/en not_active IP Right Cessation
- 1988-04-11 AR AR88310533A patent/AR241802A1/es active
- 1988-11-30 NO NO885350A patent/NO176072C/no unknown
- 1988-12-09 FI FI885727A patent/FI885727A0/fi not_active Application Discontinuation
- 1988-12-09 DK DK687488A patent/DK687488D0/da not_active Application Discontinuation
-
1989
- 1989-08-29 KR KR1019890012336A patent/KR920010132B1/ko not_active IP Right Cessation
-
1992
- 1992-02-27 JP JP4041359A patent/JP2610074B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-05-15 JP JP4123668A patent/JPH05130895A/ja active Pending
- 1992-05-15 JP JP4123665A patent/JPH05130893A/ja active Pending
- 1992-05-15 JP JP4123670A patent/JPH05130896A/ja active Pending
- 1992-05-15 JP JP04123666A patent/JP3080770B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-05-15 JP JP4123661A patent/JP2683182B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-05-15 JP JP4123660A patent/JPH05276993A/ja active Pending
- 1992-06-05 CS CS921708A patent/CS170892A3/cs unknown
- 1992-06-05 CS CS921707A patent/CS170792A3/cs unknown
- 1992-06-22 US US07/907,733 patent/US6068971A/en not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-06-30 LV LVP-93-902A patent/LV11068B/en unknown
- 1993-08-11 NO NO93932856A patent/NO932856D0/no unknown
- 1993-08-11 NO NO93932855A patent/NO932855D0/no unknown
-
1994
- 1994-01-22 CN CN94100881A patent/CN1089808C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1994-01-22 CN CN94100827A patent/CN1088109C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1994-06-16 FI FI942872A patent/FI942872A0/fi not_active Application Discontinuation
- 1994-06-16 FI FI942873A patent/FI942873A/fi unknown
- 1994-10-24 HR HRP-699/88A patent/HRP940731A2/xx not_active Application Discontinuation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
NO176072B (no) | Fremgangsmåte og materiale for bestemmelse av ioner i fluider, og blandinger for bestemmelse av kalium- og natriumioner | |
US5380649A (en) | Enzymatic determination of analyte ions in fluids by optimizing measurement levels | |
AU662510B2 (en) | Determination of ions in fluids | |
AU662516B2 (en) | Determination of ions in fluids | |
AU662515B2 (en) | Determination of ions in fluids | |
AU622859C (en) | Method and composition for the determination of potassium ions in fluids | |
AU662726B2 (en) | Determination of ions in fluids | |
AU651712B2 (en) | Determination of ions in fluids | |
RU2081411C1 (ru) | Композиция для определения ионов натрия (варианты) | |
AU622859B2 (en) | Method and composition for the determination of potassium ions in fluids |