NO155844B - Fremgangsmaate og reagens for bestemmelse av alfa-amylase. - Google Patents
Fremgangsmaate og reagens for bestemmelse av alfa-amylase. Download PDFInfo
- Publication number
- NO155844B NO155844B NO77770446A NO770446A NO155844B NO 155844 B NO155844 B NO 155844B NO 77770446 A NO77770446 A NO 77770446A NO 770446 A NO770446 A NO 770446A NO 155844 B NO155844 B NO 155844B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- phosphate
- glucose
- amylase
- approx
- reagent
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 27
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 title description 8
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 title 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 title 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 title 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 claims description 45
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 claims description 45
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 claims description 44
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 34
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 20
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 15
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 15
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 claims description 9
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 claims description 9
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 claims description 9
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims description 9
- VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N Glc6P Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- GUBGYTABKSRVRQ-ASMJPISFSA-N alpha-maltose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-ASMJPISFSA-N 0.000 claims description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 7
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 claims description 7
- 229930010764 α-maltose Natural products 0.000 claims description 7
- NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N D-Glucose 6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 6
- 108010057899 Maltose phosphorylase Proteins 0.000 claims description 6
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 6
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 claims description 5
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 4
- BIRSGZKFKXLSJQ-SQOUGZDYSA-N 6-Phospho-D-gluconate Chemical compound OP(=O)(O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O BIRSGZKFKXLSJQ-SQOUGZDYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 3
- 102000004567 6-phosphogluconate dehydrogenase Human genes 0.000 claims description 2
- 108020001657 6-phosphogluconate dehydrogenase Proteins 0.000 claims description 2
- 125000003071 maltose group Chemical group 0.000 claims description 2
- FNZLKVNUWIIPSJ-UHNVWZDZSA-N D-ribulose 5-phosphate Chemical compound OCC(=O)[C@H](O)[C@H](O)COP(O)(O)=O FNZLKVNUWIIPSJ-UHNVWZDZSA-N 0.000 claims 1
- FNZLKVNUWIIPSJ-UHFFFAOYSA-N Rbl5P Natural products OCC(=O)C(O)C(O)COP(O)(O)=O FNZLKVNUWIIPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 21
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 21
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 19
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 15
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 15
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 7
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 7
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 3
- 102000010705 glucose-6-phosphate dehydrogenase activity proteins Human genes 0.000 description 3
- 108040005050 glucose-6-phosphate dehydrogenase activity proteins Proteins 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 229910052816 inorganic phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 3
- 229920000945 Amylopectin Polymers 0.000 description 2
- 240000001929 Lactobacillus brevis Species 0.000 description 2
- 241000192130 Leuconostoc mesenteroides Species 0.000 description 2
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 2
- 241000588653 Neisseria Species 0.000 description 2
- 241001464937 Neisseria perflava Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000020006 aldose 1-epimerase Human genes 0.000 description 2
- 108091022872 aldose 1-epimerase Proteins 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- QZTKDVCDBIDYMD-UHFFFAOYSA-N 2,2'-[(2-amino-2-oxoethyl)imino]diacetic acid Chemical compound NC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O QZTKDVCDBIDYMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 2,2'-piperazine-1,4-diylbisethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCN1CCN(CCS(O)(=O)=O)CC1 IHPYMWDTONKSCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 32-alpha-galactosyl-3-alpha-galactosyl-galactose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(CO)OC(O)C2O)O)OC(CO)C1O DBTMGCOVALSLOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100283604 Caenorhabditis elegans pigk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M D-gluconate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-M 0.000 description 1
- RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N D-maltotriose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 RXVWSYJTUUKTEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000195619 Euglena gracilis Species 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 1
- 235000013957 Lactobacillus brevis Nutrition 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000005647 Mumps Diseases 0.000 description 1
- DBXNUXBLKRLWFA-UHFFFAOYSA-N N-(2-acetamido)-2-aminoethanesulfonic acid Chemical compound NC(=O)CNCCS(O)(=O)=O DBXNUXBLKRLWFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N NADP zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FTNIPWXXIGNQQF-UHFFFAOYSA-N UNPD130147 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(OC3C(OC(OC4C(OC(O)C(O)C4O)CO)C(O)C3O)CO)C(O)C2O)CO)C(O)C1O FTNIPWXXIGNQQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N UNPD55895 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(OC3C(OC(O)C(O)C3O)CO)C(O)C2O)CO)C(O)C1O LUEWUZLMQUOBSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWHOZGRAXYWRNX-VFUOTHLCSA-N alpha-D-glucose 1,6-bisphosphate Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H]1O RWHOZGRAXYWRNX-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- OJYGBLRPYBAHRT-UHFFFAOYSA-N alphachloralose Chemical compound O1C(C(Cl)(Cl)Cl)OC2C(O)C(C(O)CO)OC21 OJYGBLRPYBAHRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N ethanesulfonic acid Chemical compound CCS(O)(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 229940050410 gluconate Drugs 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- FJCUPROCOFFUSR-UHFFFAOYSA-N malto-pentaose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 FJCUPROCOFFUSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N malto-tetraose Natural products OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UYQJCPNSAVWAFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJCUPROCOFFUSR-GMMZZHHDSA-N maltopentaose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O1 FJCUPROCOFFUSR-GMMZZHHDSA-N 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-OUBHKODOSA-N maltotetraose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)CO)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-OUBHKODOSA-N 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N mannotriose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(CO)OC(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)C(O)C1O FYGDTMLNYKFZSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 208000010805 mumps infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 229940085991 phosphate ion Drugs 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 229960003080 taurine Drugs 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N β-1,4-galactotrioside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@@H](O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-BYLHFPJWSA-N 0.000 description 1
- 229930028731 β-maltose Natural products 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
- C12Q1/40—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase involving amylase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/902—Oxidoreductases (1.)
- G01N2333/904—Oxidoreductases (1.) acting on CHOH groups as donors, e.g. glucose oxidase, lactate dehydrogenase (1.1)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/91—Transferases (2.)
- G01N2333/912—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
- G01N2333/91205—Phosphotransferases in general
- G01N2333/9121—Phosphotransferases in general with an alcohol group as acceptor (2.7.1), e.g. general tyrosine, serine or threonine kinases
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse angår fremgangsmåte og reagens for
å bestemme a-amylase-konsentrasjonen i vandige oppløsninger f.eks. i serum og urin.
a-amylase er et enzym som fremstilles i kroppen hos mennesker og som finnes i væsker såsom blod, urin og spytt. Det er ikke fullt ut kjent i hvilken del av kroppen hvor nevnte a-amylase fremstilles, men det er klart at når sunnhets-tilstanden er god, så vil konsentrasjonen av a-amylase i forskjellige kroppsvæsker variere innenfor et visst sett av verdier. Det er videre kjent at når visse patologiske tilstander er tilstede i kroppen, så vil a-amylasekonsentrasjonen være høyere eller lavere enn det normale nivå man har under en god helsetilstand. Når f.eks. en person har betennelse i bukspyttkjertelen, kusma eller kreft i bukspyttkjertelen, så vil a-amylasekonsentrasjonen være langt høyere enn det som er normalt. Videre vil forskjellige leversyk-dommer gi a-amylasekonsentrasjoner som er langt lavere enn det normale.
De metoder man vanligvis bruker for å bestemme a-amylase-konsentras j oner innbefatter vanligvis at man bruker stivelse, fordi a-amylasen har en katalytisk effekt på hydrolysen av 1,4-bindingene i amylose og amylopektinfraksjonene i stivelse. Hvis denne hydrolyse blir helt fullstendig, vil a-amylasen progressivt nedbryte stivelsen til glukose,
maltose og oligosakkarider. Man har utviklet visse metoder for å korrelere senkningen i turbiditeten eller viskositeten på en vandig stivelsesoppløsning etter amylosehydrolyse,
med den resulterende a-amylasekonsentrasjon.
Andre metoder bruker mengden av reduserende stoffer som fremstilles ved nevnte a-amylase-stivelsesreaksjon, som et mål for a-amylasekonsentrasjonen, eller bruke den hastighet med hvilken et fargestoff frigjøres fra en farget stivelse ved hjelp av a-amylasen, som et mål for konsentrasjonen av nevnte a-amylase.
Det er også utviklet en enzymatisk metode for å måle a-amylasekonsentrasjonen, noe som skjer ved å bruke a-amylase eller andre enzymer for å hydrolysere stivelse til glukose som så måles gjennom koblede enzymatiske reaksjoner. Slike fremgangsmåter har imidlertid vist seg å være lite tilfredsstillende fordi man i svært mange prøver som skal analyseres allerede har glukose som også vil reagere gjennom det nevnte koblede enzymatiske reaksjonsskjema, slik at man får fremstilt lett påvisbare produkter i tillegg til det som fremstilles ved den enzymatiske stivelseshydrolyse. Konsentrasjonen av dette endogene glukose er vanligvis ganske betydelig sammenlignet med den mengde glukose som fremstilles ved den enzymatiske hydrolyseteknikk, og på grunn av dette må slik tilstedeværende glukose først elimineres fra prøven før fremgangsmåten kan brukes.
En annen velkjent teknikk er den såkalte iodometriske metode som bruker den velkjente reaksjon mellom iodin og stivelse som danner en blå farge. Når den blåfargede stivelse-iodoppløs-ning hydrolyseres med a-amylase, vil blåfargen forsvinne etter hvert som a-amylasen bryter ned stivelsen. Fargeforandringen på den blå stivelse-iodoppløsningen er således et visst mål for a-amylasekonsentrasjonen. Denne fremgangsmåte har man imidlertid vanligvis ikke ansett å være fullt ut å stole på, fordi man antar at fargeforandringen ikke står i et lineært forhold til konsentrasjonen av a-amylasen.
Alle de forannevnte fremgangsmåter har i en viss grad kunnet angi a-amylasekonsentrasjonen, men ingen er i seg selv fullt ut tilfredsstillende, fordi de ikke i seg selv lar seg gjennomføre med nøyaktige måleinstrumenter, eller de er for tidkrevende.
Det er derfor en hensikt ved foreliggende oppfinnelse å til-veiebringe en ny reagens og en ny fremgangsmåte hvori nevnte reagens anvendes, hvorved de problemer som hittil har vært forbundet med bestemmelse av a-amylasekonsentrasjoner unngås, idet fremgangsmåten kan utføres raskt, er enkel og pålitelig og gir reproduserbare resultater. Disse hensikter oppnås ved at man har utviklet en ny kinetisk teknikk for å måle a-amylasekonsentrasjoner i vandige oppløsninger, og denne teknikk er basert på følgende reaksjoner:
hvor konsentrasjonen av a-amylase i den vandige oppløsning bestemmes ved å måle dannelseshastigheten av NADH, som derved gir et mål for a-amylasekonsentrasjonen. Ifølge foreliggende oppfinnelse er det tilveiebragt en fremgangsmåte for bestemmelse av a-amylase, og denne fremgangsmåten er kjennetegnet ved at man (a) utfører følgende simultane reaksjoner i en vandig oppløs-ning ved pH 6-7,5; (i) omsetter et polysakkarid som har glukosemolekyler i alt vesentlig forbundet gjennom a-1,4-bindinger i nærvær av a-amylase for dannelse av a-maltose; (ii) omsetter a-maltose med fosfationer i nærvær av maltosefosforylase for dannelse av glukose og 6-D-glukose-l-fosfat; (iii) omsetter B-D-glukose-l-fosfat i nærvær av 6-D-fosfoglukomutase for dannelse av glukose-6-fosfat;
og
(iv) omsetter glukose-6-fosfat i nærvær av glukose-6-fosfat-dehydrogenase og et ko-enzym valgt fra
gruppen bestående av 6-nikotinamid-adenin-dinukleotid, 8-nikotinamid-adenin-dinukleotidfosfat og blandinger derav for dannelse av den reduserte form av nevnte ko-enzym og 6-fosfoglukonat; og (b) måler dannelseshastigheten av nevnte reduserte ko-enzym,
idet a-amylasen som måles er hastighetsbegrensende.
Ifølge oppfinnelsen er det også tilveiebragt et reagenssystem for bruk ved den ovenfor angitte fremgangsmåte, og dette reagenssystemet er kjennetegnet ved at det pr. liter reagens omfatter: (a) minst ca. 1 g av et polysakkarid som har glukosemolekyler hovedsakelig forbundet gjennom a-i,4-bindinger; (b) 0,01-0,1 molar konsentrasjon av fosfationer; (c) minst ca. 200 Internasjonale Enheter av maltose-f osf orylase ; (d) minst ca. 1 mmol av et ko-enzym valgt fra gruppen bestående av B-nikotinamid-adenin-dinukleotid, B-nikotinamid-adenin-dinukleotidfosfat, og blandinger derav; (e) minst ca. 500 Internasjonale Enheter av glukose-6-fosfat-dehydrogenase; og (f) minst ca. 100 Internasjonale Enheter av B-D-fosfoglukomutase.
De følgende forkortelser er brukt i de ovenfor angitte reaksjoner og vil bli benyttet i det etterfølgende:
Forkortelser
PO.= - fosfation
4
MP - maltose-fosforylase
B-D-G1P - B-D-glukose-l-fosfat
6-PGM - B-D-fosfoglukomutase
G-l,6-diP - D-glukose-1,6-difosfat
G-6-P - glukose-6-fosfat
6-PG. - 6-fosfoglukonat
G6PDH - glukose-6-fosfat-dehydrogenase
6PDH - 6-fosfoglukonat-dehydrogenase NAD - B-nikotinamid-adenindinukleotid
NADH - redusert form av B-nikotinamid-adenin-dinukleotid
Reagenssystemet ifølge foreliggende oppfinnelse innholder utgangsmaterialet i reaksjon I, a-l,4-bundet glukan, samt alle de andre bestanddelene unntatt a-amylase, som er nødven-dig for å få alle de fire nevnte reaksjoner til å løpe slik det er angitt, dvs. fosfationer, MP, 3-PGM og G6PDH. Dette reagenssystem kan tilveiebringes og brukes som en blanding, eller kan tilveiebringes som et sett bestående av en rekke reagenser som hver inneholder en eller flere av ingrediensene i reaksjonssystemet, som deretter blandes når de brukes i foreliggende fremgangsmåte. Alle de forannevnte ingredienser i nevnte reaksjonssystem er stabile som en blanding, og det er derfor foretrukket at systemet tilveiebringes som en blanding ettersom dette i vesentlig grad letter arbeidet.
Det følgende er den første reaksjon som brukes i foreliggende oppfinnelse:
(I) a-l,4-bundet glukan -—amY-*-ase .» a-maltose ;og andre maltooligosakkarider ;Nevnte a-l,4-bundne glukan kan være ethvert polysakkarid ;som er bundet primært opp av glukose, hvor glukosemolekylene i alt vesentlig er forbundet gjennom a-1,4-bindinger som kan angripes av a-amylasen. Eksempler på slike polysakkarider er stivelse, amylopektin, amylose, glykogen, dekstrin og deres nedbrytbare produkter, samt homologer av maltooligosakkarider, såsom maltotriose, maltotetraose og maltopentaose eller blandinger av disse. ;Stivelse er den foretrukne form av nevnte glukan, fordi ;det gir den beste kombinasjon av oppløselighet, rimelig pris, utvinning og stabilitet. "Superlose 500" er en vare-betegnelsé på en stivelse som brukes i den foretrukne ut-førelse av oppfinnelsen. Denne stivelse har god kaldtvanns-oppløselighet, gir bedre respons og linearitet enn de andre stivelser, gir god reproduserbarhet og er ikke-turbid i ;oppløsning. "Superlose 500" er en modifisert amylose. "Superlose 500" er et hvitt, granulært materiale med et fuktighetsinnhold på ca. 10%, en pH på 7 og en filmstrekk-fasthet på over 570 kg/cm2 . Viskositeten på "Superlose 500" i Brookfield eps ved 66°C er 185 for 14% faste stoffer, 55 for 10% faste stoffer, og 10 for 5% faste stoffer. Ved 24°C er viskositeten 2000 for 14% faste stoffer, 275 for 10% faste stoffer og 30 for 5% faste stoffer. "Superlose 500" løser seg lett i vann ved romtemperatur i motsetning til de fleste stivelser, som krever noen grad av omrøring og/eller oppvarming før de går i oppløsning. "Superlose 500" er fremstilt av en modifisert amylosefraksjon av potet-stivelse og inneholder ingen betydelige mengder av amylo-pektinfraksjonen av stivelse. ;"GR"-stivelse er varebetegnelsen for en annen stivelse som kan brukes i foreliggende oppfinnelse. Denne stivelse er dialysert før bruk og har følgende karakteristika: maksimum sulfataske på 7 vekt-%, 10% vekttap ved tørking, 1 g "GR"-stivelse har en reduserende evne som tilsvarer 7 mg maltose, pH på mellom 6,5 og 7,5 og en gunstig sensitiveringsprøve. ;Det er nødvendig at mengden av a-amylase er hastighetsbegrensende. Således må mengden av de andre bestanddelene i foreliggende reagenssystem være tilstede i egnede mengder slik at man sikrer at den observerte reaksjonshastighet for det fullstendige system er karakteristisk for og bestemmes av hastigheten på den a-amylase-katalyserte reaksjon (reaksjon I). For undersøkelse av vandige oppløsninger såsom menneskeserum eller urin, er det foretrukket å bruke en konsentrasjon av mellom 1,0 og 20 g av et a-l,4-bundet glukan pr. liter reagens. En glukankonsentrasjon på ca. 5 g pr. liter reagens brukes i den foretrukne utførelse. ;Den følgende er den annen reaksjon som brukes i foreliggende oppfinnelse: ;Den a-maltose som dannes ved første reaksjon reagerer med fosfationer og bruker maltose-fosforylase som en enzymatisk katalysatorer for å fremstille glukose og 3-D-glukose-1- ;fosfat. ;Fosfationene kan tilføres fra enhver kilde som er forenelig med reaksjonssystemet ifølge oppfinnelsen. Uorganiske fosfater kan f.eks. brukes. Det fosfat som brukes i den foretrukne utførelse, er en blanding av K2HP04 og KI^PO^ som danner en bufret oppløsning ved en pH på ca. 6,5 som er optimum. ;Konsentrasjonen av fosfationer bør være på et slikt nivå ;at man sikrer at a-amylasen er den hastighetsbegrensende forbindelse. Det er imidlertid ønskelig å ha en ikke for høy konsentrasjon av fosfationer, fordi store konsentrasjoner kan hemme aktiviteten av 3-PGM-enzymet. Det er foretrukket å ha 0,01-0,1 molar konsentrasjon av uorganisk fosfat, ;og 0,025 molar er den mest foretrukne mengde. ;Maltose-fosforylase er et enzym som katalyserer reaksjonen mellom a-maltose og uorganisk fosfat. Minst ca. 200 Internasjonale Enheter (IU) av dette enzym pr. liter reagens er nødvendig, men det er foretrukket å bruke ca. 2000 IU ;pr. liter. ;Den foretrukne kilde for maltose-fosforylase er en stamme ;av bakterien Lactobacillus brevis (ATCC 8287), og enzymet er ekstrahert og renset på vanlig kjente måter. Andre kilder for dette enzym er en stamme av Neisseria meningitides, Neisseria perflava og andre stammer av Lactobacillus. ;Den følgende reaksjon er den tredje som brukes i foreliggende oppfinnelse: ;Nevnte enzym B-fosfoglukomutase (B-PGM) katalyserer omdannelsen av B-D-glukose-l-fosfat til glukose-6-fosfat. B-fosfoglukomutase er tilstede i mengder på minst 100 IU pr. liter reagens, slik at a-amylasen i reaksjonen I forblir den hastighetsbegrensende bestanddel. Det er foretrukket at man bruker ca. 500 IU av B-PGM pr. liter reaksjon når man f.eks. skal undersøke konsentrasjonen av a-amylase i menneskeserum. Den foretrukne kilde for B-PGM er Lactobacillus brevis (ATCC 8287). Denne kan dyrkes og enzymet renses på vanlig kjent måte. Andre kilder innbefatter stammer av Neisseria meningitides, Neisseria perflava og Euglena gracilis. ;Det er foretrukket at glukose-1,6-difosfat (Glu-1,6-diP) ;er tilstede i enzymet slik at det kan virke som en kofaktor for e-<p>GM. B-PGM krever g-formen av Glu-1,6-diP for akti-vitet, men man antar at a-formen av denne kofaktor også ;kan virke. Den foretrukne konsentrasjon av Glu-1,6-diP ;bør være minst 0,01 g pr. liter reagens. Den optimale konsentrasjon er ca. 0,075 g pr. liter. ;Det er også foretrukket at man i enzymsystemet bruker di-valente kationer valgt fra gruppen beståa ende av Mn <+2> , Mg <+2>;■f* 2 ~l~ 2 2
Co , Zn eller Ni som kan virke som en kofaktor for B-PGM. Kationene Mn , Mg eller Co er foretrukket fremfor Zn eller Ni . Kationkonstruksjonen bør være minst 1 mmol pr. liter reagens og er fortrinnsvis ca. 8,4 mmol pr. liter.
Den følgende er den fjerde reaksjon i foreliggende fremgangsmåte :
Glukose-6-fosfatet reagerer med B_nikotinamid-adenin-dinukleotid og G6PDH slik at man får fremstilt 6-fosfo-
glukonat og NADH.
Mengden av NAD bør være tilstrekkelig høy til at man holder a-amylaser. som den hastighetsbegrensende bestanddel. Et egnet område for konsentrasjon av NAD ligger i området fra 1
til 10 mmol pr. liter reagens. Den foretrukne konsentrasjon av NAD er ca. 2,5 mmol. g-nikotinamid-adeninnukleotidfosfat (NADP) kan brukes i stedet for NAD i foreliggende oppfinnelse.
Nevnte glukose-6-fosfat-dehydrogenase (G-6-PDH) bør også
være tilstede i en konsentrasjon på minst 500 IU pr. liter reagens slik at denne reaksjon ikke er den hastighetsbegrensende reaksjon. Den foretrukne konsentrasjon av G-6-PDH-enzymet er ca. 5000 IU pr. liter reagens. Den foretrukne kilde for G-6-PDH er Leuconostoc mesenteroides (ATCC 12291), men kan også oppnås fra andre kilder.
Ved en foretrukket utførelse er det ønskelig å benytte
en femte reaksjon som en del av foreliggende fremgangsmåte:
Hensikten ved denne femte reaksjon er å øke følsomheten og
nøyaktigheten på prøven ved å øke mengden på den NADH som fremstilles.
Minimumskonsentrasjonen av 6-PDH bør være minst 200 Internasjonale Enheter pr. liter reagens. Den optimale konsentrasjon for nevnte reagens er ca. 700 Internasjonale Enheter
I pr. liter. Den foretrukne kilde for dette enzym er Leuconostoc mesenteroides (ATCC 12291), fra hvilken enzymet er blitt ekstrahert og renset på vanlig kjent måte, men enzymet kan selvsagt også oppnås fra andre kilder.
; Natriumklorid kan tilsettes reagenssystemet for å øke aktiviteten på a-amylasen.
Buffer som innbefatter dikaliumhydrogenfosfat (I^HPO^)
og kaliumdihydrogenfosfat (KI^PO^) kan brukes for å oppnå en optimal pH for gjennomføring av foreliggende reaksjons-sekvens. Ikke-fosfatbuffere kan også brukes, men disse er ikke foretrukket ettersom fosfatbufferet tilveiebringer fosfationer. Eksempler på andre buffere som ble prøvet og funnet å være tilfredsstillende er piperazin-N,N<1->bis(2-etansulfonsyre), tris(hydroksymetyl)-aminometan, N-2-hydroks etylpiperazin-N'-2-etan-sulfonsyre og trietanolamin. Eksempl på andre buffere som også kan brukes er n-(2-acetamido)imino dieddiksyre, n-(2-acetamido)-2-aminoetansulfonsyre og N,N'-bis(2-hydroksyetyl)-2-aminoetansulfonsyre.
Hastigheten av NADH-fremstillingen og omregningen av denne hastighet til konsentrasjon av a-amylase oppnås på kjent måte. En slik fremgangsmåte brukes spektrofotometrisk metode for å måle forandringen med hensyn til absorpsjon av lys noe som skyldes fremstillingen av NADH, og målingen skjer fra 300 til 370 millimikron (nm) ved temperaturer varier-ende fra 15°C til 50°C. Det er foretrukket å bruke en bølgelengde på ca. 340 nm ved ca. 37°C.
Når hastigheten med hensyn til forandring av absorpsjon blir målt, så kan konsentrasjonen av a-amylase beregnes på følgende måte, hvor forandringen av absorpsjon måles ved en bølgelengde på 340 nm ved en temperatur på 37°C.
AA = forandring av absorpsjon/minutt
= totalt reaksjonsvolum
Vg = volum på prøve inneholdende a-amylase 6,22 = millimolar absorpsjonsindeks for NADH ved 340 nm
Eksempel 1
Ingredienser i en prøveblanding for a- amylase Det følgende er sammensetningen for en foretrukken reagens-blanding ifølge oppfinnelsen fremstilt som en en-liters oppløsning i deionisert vann:
pH justeres til 6,0-7,5, mens en pH på 6,5 er foretrukket.
Reagenssystemet ifølge oppfinnelsen kan lagres og brukes
i form av en vandig oppløsning, eller oppløsningen kan frysetørkes på vanlig måte og rekonstitueres med vann og er da ferdig for bruk. Reagenssystemet kan også fremstilles med bestanddelene i pulverisert form som så lett lar seg oppløse i vann når dette er nødvendig.
Enzymet B-amylase som finnes i planter i motsetning til a-amylase som finnes i varmblodige dyr, katalyserer en reaksjon som er lik den første reaksjon (i), idet den hydroly-serer a-l,4-bundet glukan til B-maltose.
For det tilfellets skyld at man trenger et reaksjonssystem for en analyse eller måling av B-amylase, så vil den eneste modifikasjon man trenger å gjøre i forhold til det forannevnte reagenssystem, være å tilsette enzymet mutarotase for å katalysere omdannelsen av B-maltose til a-maltose.
Den kinetiske g-amylase-metode innbefatter derfor de følgende simultane reaksjoner:
I den ovennevnte prøve for B-amylase er det nødvendig at mengden av B-amylase er hastighetsbegrensende. Mengden av de forskjellige reagenser som er tilstede i nevnte B-amylase-reagenssystem er de samme som angitt i forbindelse med a-amylase-reagenssystemet, idet den eneste forskjellen er at man tilsetter nevnte B-amylase-reagenssystem minst 2000 enheter, fortrinnsvis ca. 60.000 enheter, av mutarotase pr. liter reagens.
Claims (3)
1.
Fremgangsmåte for bestemmelse av a-amylase, karakterisert ved at man (a) utfører følgende simultane reaksjoner i en vandig oppløs-ning ved pH 6-7,5; (i) omsetter et polysakkarid som har glukosemolekyler hovedsakelig forbundet gjennom a-1,4-bindinger i nærvær av a-amylase for dannelse av a-maltose; (ii) omsetter a-maltose med fosfationer i nærvær av maltose-fosforylase for dannelse av glukose og 6-D-glukose-l-fosfat; (iii) omsetter 6-D-glukose-l-fosfat i nærvær av B-D-fosfoglukomutase for dannelse av glukose-6-fosfat; og (iv) omsetter glukose-6-fosfat i nærvær av glukose-6-fosfat-dehydrogenase og et ko-enzym valgt fra gruppen bestående av B-nikotinamid-adenindinukleotid, 6-nikotinamid-adenindinukleotidfosfat, og blandinger derav for dannelse av den reduserte form av nevnte ko-enzym og 6-fosfoglukonat; og (b) måler dannelseshastigheten av nevnte reduserte ko-enzym, hvor a-amylasen som måles er hastighetsbegrensende.
2 .
Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at man dessuten omsetter 6-fosfoglukonat i nærvær av nevnte ko-enzym og 6-fosfoglukonat-dehydrogenase for dannelse av den reduserte formen av nevnte ko-enzym og ribulose-5-fosfat.
3.
Reagenssystem for bruk ved fremgangsmåten ifølge krav 1, karakterisert ved at det pr. liter reagens omfatter: (a) minst ca. 1 g av et polysakkarid som har glukosemolekyler hovedsakelig forbundet gjennom a-1,4-bindinger; (b) 0,01-0,1 molar konsentrasjon fosfationer; (c) minst ca. 200 Internasjonale Enheter av maltose-forforylase; (d) minst ca. 1 mmol av et ko-enzym valgt fra gruppen bestående av 6-nikotinamid-adenindinukleotid, 6-nikotinamid-adenindinukleotidfosfat, og blandinger derav; (e) minst ca. 500 Internasjonale Enheter av glukose-6-fosfat-dehydrogenase; og (f) minst ca. 100 Internasjonale Enheter av 6-D-fosfoglukomutase .
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/657,976 US4036697A (en) | 1976-02-13 | 1976-02-13 | Kinetic assay for alpha-amylase |
| US05/758,518 US4097336A (en) | 1976-02-13 | 1977-01-11 | Reagent system for beta-amylase assay |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO770446L NO770446L (no) | 1977-08-16 |
| NO155844B true NO155844B (no) | 1987-03-02 |
| NO155844C NO155844C (no) | 1987-06-17 |
Family
ID=27097531
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO77770446A NO155844C (no) | 1976-02-13 | 1977-02-10 | Fremgangsmaate og reagens for bestemmelse av alfa-amylase. |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4097336A (no) |
| JP (1) | JPS52119296A (no) |
| CA (1) | CA1076935A (no) |
| DE (1) | DE2705859A1 (no) |
| DK (1) | DK160844C (no) |
| FR (1) | FR2394804A1 (no) |
| GB (1) | GB1540320A (no) |
| IT (1) | IT1077151B (no) |
| NL (1) | NL173285C (no) |
| NO (1) | NO155844C (no) |
| SE (1) | SE442406B (no) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1068586A (en) * | 1976-07-01 | 1979-12-25 | Abbott Laboratories | .alpha.-AMYLASE ASSAY UTILIZING MODIFIED STARCH AS THE SUBSTRATE |
| AT362526B (de) * | 1977-09-13 | 1981-05-25 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren und reagens zur bestimmung von alpha- -amylase |
| DE2748036C2 (de) * | 1977-10-26 | 1986-08-21 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur Gewinnung von Maltose-phosphorylase oder/und β-Phosphoglucose-mutase und Verwendung derselben |
| EP0048035B1 (en) * | 1978-06-06 | 1983-12-07 | Flow General, Inc. | Maltodextrin phosphorylase limit dextrin and method of producing it |
| CA1187388A (en) * | 1978-09-20 | 1985-05-21 | American Monitor Corporation | Stabilization of working reagent solutions containing nadh, nadph, and/or enzymes, and the use of such stabilized reagents in enzymes or substrate assays |
| JPS5768798A (en) | 1980-10-14 | 1982-04-27 | Toyo Jozo Co Ltd | Novel measurement of amylase activity |
| US4360413A (en) * | 1980-12-29 | 1982-11-23 | Beckman Instruments, Inc. | Creatine kinase isoenzyme electrophoretic technique and improved creatine kinase isoenzyme reagent for use therein |
| JPS6010026U (ja) * | 1983-06-30 | 1985-01-23 | 松下電工株式会社 | 吊金具への軒樋の取付構造 |
| JPS6058729U (ja) * | 1983-09-30 | 1985-04-24 | 松下電工株式会社 | 軒樋支持装置 |
| JPH0520821Y2 (no) * | 1986-07-07 | 1993-05-28 | ||
| US4990445A (en) * | 1988-01-20 | 1991-02-05 | Beckman Instruments, Inc. | Stable reagent and kinetic assay for alpha-amylase |
| JPH0227428U (no) * | 1989-03-23 | 1990-02-22 | ||
| US5645558A (en) * | 1995-04-20 | 1997-07-08 | Medical University Of South Carolina | Anatomically shaped vasoocclusive device and method of making the same |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR1508496A (fr) * | 1966-01-20 | 1968-01-05 | Warner Lambert Pharmaceutical | Produit et procédé pour le dosage de l'amylase |
| CA973499A (en) * | 1970-07-28 | 1975-08-26 | Hayashibara, Ken | Process for the preparation of amylose as the substrate for the quantitative analysis of amylose |
| US3759794A (en) * | 1971-11-01 | 1973-09-18 | S Sax | Method for determination of amylase activity |
| US3888739A (en) * | 1973-05-07 | 1975-06-10 | Bio Reagents & Diagnostics Inc | Reagents and methods for determining amylase concentrations |
| US3879263A (en) * | 1973-09-06 | 1975-04-22 | Du Pont | Method for the determination of amylase |
| US4000042A (en) * | 1973-09-06 | 1976-12-28 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Diagnostic reagent for the determination of amylase |
| DE2741192C2 (de) * | 1977-09-13 | 1982-07-01 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur Bestimmung von alpha- Amylase |
-
1977
- 1977-01-11 US US05/758,518 patent/US4097336A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-01-31 IT IT19812/77A patent/IT1077151B/it active
- 1977-02-09 GB GB5238/77A patent/GB1540320A/en not_active Expired
- 1977-02-10 NO NO77770446A patent/NO155844C/no unknown
- 1977-02-10 JP JP1314977A patent/JPS52119296A/ja active Granted
- 1977-02-11 FR FR7703939A patent/FR2394804A1/fr active Granted
- 1977-02-11 DK DK061077A patent/DK160844C/da not_active IP Right Cessation
- 1977-02-11 DE DE19772705859 patent/DE2705859A1/de active Granted
- 1977-02-11 NL NLAANVRAGE7701455,A patent/NL173285C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-02-11 SE SE7701564A patent/SE442406B/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-02-11 CA CA271,565A patent/CA1076935A/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NL173285B (nl) | 1983-08-01 |
| JPS52119296A (en) | 1977-10-06 |
| DK160844B (da) | 1991-04-22 |
| NL7701455A (nl) | 1977-08-16 |
| NL173285C (nl) | 1984-01-02 |
| DE2705859C2 (no) | 1988-09-08 |
| FR2394804A1 (fr) | 1979-01-12 |
| NO770446L (no) | 1977-08-16 |
| NO155844C (no) | 1987-06-17 |
| SE7701564L (sv) | 1977-08-14 |
| SE442406B (sv) | 1985-12-23 |
| US4097336A (en) | 1978-06-27 |
| DK61077A (da) | 1977-08-14 |
| DK160844C (da) | 1991-10-07 |
| JPS5527800B2 (no) | 1980-07-23 |
| FR2394804B1 (no) | 1981-12-18 |
| DE2705859A1 (de) | 1977-08-18 |
| IT1077151B (it) | 1985-05-04 |
| GB1540320A (en) | 1979-02-07 |
| CA1076935A (en) | 1980-05-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| McCleary et al. | Quantitative measurement of total starch in cereal flours and products | |
| NO155844B (no) | Fremgangsmaate og reagens for bestemmelse av alfa-amylase. | |
| US4036697A (en) | Kinetic assay for alpha-amylase | |
| JPH047190B2 (no) | ||
| US4550077A (en) | β-Amylase determination | |
| US5962248A (en) | Quantitative determination method for chloride ions | |
| Nelson et al. | An investigation of the properties of rabbit muscle oligo-1, 4→ 1, 4-glucantransferase | |
| US4162194A (en) | Kinetic assay for acid phosphotase and composition therefore | |
| US4505756A (en) | Alpha-amylase assay and substrates for use therein | |
| US4304854A (en) | Alpha-amylase assay and substrates for use therein | |
| US4812398A (en) | Reagent for measuring amylase activity and measuring method thereof | |
| US4159923A (en) | Kinetic assay for inorganic phosphates and composition therefore | |
| JPS5931699A (ja) | α−アミラ−ゼ活性の測定法 | |
| JPH06315399A (ja) | α−アミラーゼ活性測定用試薬および測定方法 | |
| CA1068586A (en) | .alpha.-AMYLASE ASSAY UTILIZING MODIFIED STARCH AS THE SUBSTRATE | |
| US4990445A (en) | Stable reagent and kinetic assay for alpha-amylase | |
| JPH0373276B2 (no) | ||
| JPS5939300A (ja) | α−アミラ−ゼ活性の測定方法 | |
| JPH0824598B2 (ja) | アミラ−ゼ定量用試験試薬 | |
| CA1086199A (en) | Kinetic assay for alpha-amylase | |
| JPH05123193A (ja) | α−アミラーゼ活性の測定法およびα−アミラーゼ活性測定用試薬 | |
| EP0005867B1 (en) | An alpha-amylase assay, a reagent composition and a reagent system therefor | |
| DK159123B (da) | Fremgangsmaade ved kinetisk analyse for beta-amylase og reagens til anvendelse ved udoevelse af fremgangsmaaden | |
| EP0104780A1 (en) | Measurement of alpha-amylase activity | |
| CA1086198A (en) | Kinetic assay for alpha-amylase |