NL8501324A

NL8501324A - Cefalosporineantibiotica en werkwijze voor het bereiden en toepassen van deze antibiotica.

Info

Publication number: NL8501324A
Application number: NL8501324A
Authority: NL
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 1984-05-10
Filing date: 1985-05-09
Publication date: 1985-12-02
Also published as: ZA853518B; LU86153A1; JPS6156185A; SE8502317L; NZ212029A; GB8511703D0; DE3516777A1; ES8702917A1; BE902381A; DK205085D0; IT1181667B; FR2564095A1; ES542958A0; IT8548062A0; ATA139685A; AT391319B; GB8411954D0; AU4221185A; FR2564095B1; GB2159515A

Description

- 1 - jm «

Cefalosporineantibiotica en werkwijze voor het bereiden en toepassen van deze antibiotica.

Deze uitvinding heeft betrekking op cefalosporinen 5 en verbeteringen ervan, in het bijzonder op nieuwe cefalosporine-verbindingen en derivaten daarvan met waardevolle antibiotische eigenschappen.

De cefalosporineverbindingen volgens deze uitvinding worden aangeduid onder verwijzing naar ,,cefamM volgens 10 J. Amer. Chem, Soc., 1962, j34, 3400, waarbij de uitdrukking "cefem" duidt op de cefambasisstruktuur met een dubbele binding.

Cefalosporineantibiotica worden op grote schaal toegepast bij de behandeling van ziekten of aandoeningen ver-15 oorzaakt door pathogene bacteriën bij mensen en dieren en zijn in het bijzonder bruikbaar bij de behandeling van ziekten veroorzaakt door bacteriën die resistent zijn ten opzichte van andere bacteriën, zoals penicillineverbindingen en bij de behandeling van voor penicilline gevoelige patiënten. Het is 20 vaak wenselijk een cefalosporineantibioticum te gebruiken dat zowel een werking tegen gram-positieve als gram-negatieve micro-organismen uitoefent en er is aanzienlijk veel research verricht op de ontwikkeling van verschillende typen cefalosporineantibiotica met een breed spektrum.

25 In het Britse octrooischrift 1342241 van aan vraagster is een klasse cefalosporineantibiotica beschreven die tot kenmerk hebben dat ze op de 3-plaats zijn gesubstitueerd door een vinylgroep, die desgewenst gesubstitueerd kan zijn door een al of niet gesubstitueerde alifatische, cycloalifa-30 tische, aromatische of aralifatische groep.

In het Britse octrooischrift 1399086 van aanvraagster is een nieuwe klasse cefalosporineantibiotica beschreven die een 7^ -(oC -veretherde oximino)acylamidogroep bevatten, welke oximinogroep de syn-configuratie heeft. Deze 35 klasse antibiotische verbindingen is gekenmerkt door een krach- : % 0 è

.. J * V

·' - 2 - tige antibacteriele werking tegen een reeks gram-positieve en gram-negatieve organismen gekoppeld met een bijzonder hoge stabiliteit tegen^ -lactamasen, die door verschillende gram-negatieve organismen worden geproduceerd. De 3-substituent van 5 de cefalosporineverbindingen kan onder andere een desgewenst gesubstitueerde vinylgroep zijn.

Het Britse octrooischrift 1496757 van aanvraagster heeft betrekking op cefalosporineantibiotica met een ΐβ -(syn--veretherde oximino.)acylamidogroep, waarin de veretherende 10 groep door een carboxylgroep is gesubstitueerd. De 3-substituent kan onder andere een desgewenst gesubstitueerde vinylgroep zijn en voorbeelden worden gegeven.van verbindingen die een 3-(2-methoxycarbonyl)vinyl- of 3-(2-cyaan)-vinylgroep bezitten.

In de Europese octrooiaanvrage 30630 zijn cefalo-15 sporineantibiotica beschreven met op de 3-plaats een ongesubstitueerde vinylgroep en een grote verscheidenheid aan mogelijke substituenten op de 7^-plaats. Van een van de verbindingen waarvoor rechten zijn gevraagd, namelijk (6R,7B.)-7-/T(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2- (carboxymethoxyimino)aceetamidq2-3-ethenyl-20 cef-3-em-4-carboxylaat is vermeld dat deze met succes bij klinische proeven is toegepast bij de behandeling van mensen via orale toediening, hoewel ze bij orale toediening aan muizen vrijwel geen werking vertoont tegen stammen van de gram-positieve Staphylococcus aureus organismen. Bovendien is de 25 absorptie uit het maag-darmstelsel slechts matig, evenals de farmacokinetische halfwaardetijd ervan.

Er bestaat echter in het algemeen een behoefte aan een verbinding met een goede werking tegen zowel gram-positieve als gram-negatieve organismen gekoppeld met een goede 30 orale absorptie. Men heeft nu bepaalde nieuwe 3-(desgewenst gesubstitueerde but-l-een-3-ynyl)cefalosporineverbindingen gevonden die in het algemeen de gewenste, gunstige eigenschappen vertonen. Beschermde vormen van deze verbindingen en voorlopers daarvan zijn eveneens waardevol als tussenprodukten bij de 35 bereiding van de aktieve antibiotica volgens de uitvinding.

J 5 C 1 3 2 4 * - 3 - ♦

Volgens een aspekt van de uitvinding worden de Λ verbindingen met de algemene formule I verschaft, waarin R een -Nl^groep of een geacyleerde of gesilyleer- de aminogroep, 2 5 R een waterstof- of halogeenatoom of een alkyl-, aryl-, carboxyl- of lage alkoxycarbonylgroep, een waterstofatoom of een carboxylgroepWok- kerende groep en B of NS —> 0 (*l - of jQ -) voorstellen, 10 en waarbij de stippellijn die de 2-, 3- en 4-plaatsen overbrugt aangeeft dat de verbinding een cef-2-em- of cef-3-emrverbinding is, en de zouten, solvaten en esters daarvan.

Volgens een ander aspekt van de uitvinding worden de cefalosporineantibiotica met formule Ia verschaft, waarin 15 R^ een acylgroep gekozen uit (i) een groep met formule R CI^CO-, waarin R een desgewenst gesubstitueerde, 5- of 6-leden tellende, heterocyclische arylgroep met een of een aantal heteroatomen gekozen uit S, N en 0 in de ring is, 20 (ii) een groep met formule R - C - CO -,

N

\kc k waarin R een desgewenst gesubstitueerde carbocyclische of c heterocyclische arylgroep is en R een waterstofatoom of een 25 desgewenst gesubstitueerde acyl-, alkyl-, alkenyl-, alkinyl-, cycloalkyl-, cycloalkylalkyl-, aryl(heterocyclische of carbocyclische)- of aralkyl (heterocyclische of carbocyclische) groep weergeeft en (iii) een groep met formule R^CH-CO-,

30 X

^ 0 waarin R een hiervoor voor R gedefinieerde betekenis heeft of een desgewenst gesubstitueerde carbocyclische groep is en X een amino-, hydroxyl-, geacyleerde hydroxyl-, carboxyl- of 2 veresterde carboxylgroep weergeeft, voorstelt en R een water-35 stof- of halogeenatoom of een alkyl- , aryl-(carbocyclische of ο " Λ 1 ^ 2 h v j V “· > * * » - 4 - heterocyclische), carboxyl- of lage alkoxycarbonylgroep voor- stelt en de niet-toxische zouten, 1-oxyden en niet-toxische, metabolisch labiele, esters ervan.

De 1-oxyden van de verbindingen volgens de uit-5 vinding kunnen in de ö^_ of -vorm voorkomen; de sulfiden van de verbindingen volgens de uitvinding worden echter aanbevolen.

Indien R* in de verbindingen volgens de uit-vinding een groep met formule R - C - CO - voorstelt, zijn 10 N

V

de verbindingen volgens de uitvinding syn-isomeren met betrekking tot de configuratie van de oximinogroep. De syn-isomeer- • c vorm wordt gedefinieerd door de configuratie van de -0R -groep 15 met betrekking tot de carboxamido-groep. In deze beschrijving wordt de syn-configuratie structureel aangegeven als

Rb - C - CONÏÏ- II.

20 N

\ e

OR

Het zal duidelijk zijn dat omdat de oximgroep 25 in de 7-zijketen van dergelijke verbindingen volgens de uitvinding tot geometrische isomeren leidt, enigemenging met het overeenkomstige anti-isomeer kan plaatsvinden.

Het zal verder duidelijk zijn dat de verbindingen volgens de uitvinding als geometrische isomeren met 30 betrekking tot dé 3-substituent kunnen voorkomen. De substituenten aan de dubbele binding kunnen dus in de cis-, dat wil zeggen

Η H

N = c/ 35 / \ C - C - ft 5 n i v -

•%5' V V “ ^ .s* “V

- 5 - als in de trans-, dat wil zeggen E\ /C— C_ /—^

5 / H

isomeervormen voorkomen. Zowel deze geometrische isomeren als de mengsels daarvan vallen binnen het kader van de uitvinding.

Onder voorbeelden van heterocyclische aryl-10 groepen voor R vallen 3- en 4-isoxazolyl, tetrazolyl, thia-zolyl, furyl, thienyl, isothiazolyl, thiadiazolvl, py-razolyl, pyridyl, pyrimidinyl en oxadiazolyl. Dergelijke groepen kunnen desgewenst gesubstitueerd zijn door bijvoorbeeld een of een aantal halogeenatomen (bijvoorbeeld chloor, broom of jodium), 15 of door nitro, hydroxyl, amino, lage (bijvoorbeeld met 1-6 koolstof atomen) alkyl, lage (bijvoorbeeld met 1-6 koolstofatomen) alkoxy of lage (bijvoorbeeld met 2-6 koolstofatomen)acyloxy, bijvoorbeeld alkanoyloxy, groepen.

Onder aanbevolen carbocyclische of hetero-20 cyclische arylgroepen voor R vallen bijvoorbeeld fenyl, thiazolyl, isothiazolyl, furyl, thienyl, thiadiazolyl, oxadiazolyl, pyridyl, pyrazinyl, pyridazinyl en pyrimidinyl. Derge-lijke groepen kunnen desgewenst bijvoorbeeld gesubstitueerd zijn door een of een aantal halogeenatomen, bijvoorbeeld chloor, 25 broom of jodium, of nitro, hydroxyl, amino, lage (bijvoorbeeld met 1-6 koolstofatomen)alkyl, lage (bijvoorbeeld met 1-6 koolstofatomen) alkoxy of lage (bijvoorbeeld met 2-6 koolstofatomen)-acyloxy, bijvoorbeeld alkanoyloxy, groepen. Een bijzonder aanbevolen groep voor R^ is de 2~aminothiazool-4-ylgroep.

c 30 Onder voorbeelden van de groep R vallen alkyl- groepen met 1-4 koolstofatomen (bijvoorbeeld de methyl-, ethyl-of prop-2-yl-groep), alkenylgroepen met 2-4 koolstofatomen (bijvoorbeeld de allylgroep), alkynylgroepen met 2-4 koolstofatomen (bijvoorbeeld de propynylgroep), cycloalkylgroepen met 35 3-6 koolstofatomen (bijvoorbeeld de cyclobutyl- of cyclopentyl- « £ Λ n 4 0 Λ L· ï 4 ν'4 - 6 - groep), C^_g cycloalkyl Cj_^ alkylgroepen (bijvoorbeeld de cyclopropylmethylgroep), een arylgroep, zoals de fenylgroep of een heterocyclische 5- of 6-ring die tenminste een heteroatoom gekozen uit S, N en 0 bevat, zoals de thienyl-, furyl- of pyridyl-5 groep of een aralkylgroep, .zoals de benzyl- of fur-3-ylmethyl-groep of een alkanoylgroep met 2-6 koolstofatomen, zoals de acetylgroep.

De R -groep kan desgewenst gesubstitueerd zijn door bijvoorbeeld hydroxyl, alkoxy (bijvoorbeeld methoxy^amino, 10 gesubstitueerde amino (bijvoorbeeld methyl- of dimethylamino), nitro, carbamoyl, gesubstitueerde carbamoyl (bijvoorbeeld methyΙοί dimethylcarbamoy1), carboxyl, veresterde carboxyl (bijvoorbeeld een ^2-5 alkoxycarbonylgroep, zoals de methoxycarbonyl-groep) en cyaangroepen, of door halogeenatomen (bijvoorbeeld 15 chloor, broom of jodium). Een bijzonder aanbevolen groep voor c R is de carboxymethylgroep.

Onder voorbeelden van de R^-groep vallen die 3. * d.

welke hiervoor voor groep R zijn vermeld. Bovendien kan R

bijvoorbeeld worden gekozen uit fenyl, 4-hydroxyfenyl, cyclo- 20 hexa-1,4-dieen-l-yl, naftyl en benzothienyl.

Voorbeelden van de X-groep zijn bijvoorbeeld de amino-, acetoxy-en ethoxycarbonylgroep.

2

Onder voorbeelden van de R -groep vallen waterstof, chloor, broom, alkyl met 1-4 koolstofatomen (zoals 25 de methyl- of ethylgroep), fenyl, furyl, carboxyl of ^-5 alkoxycarbony1, zoals de methoxycarbonylgroep.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen in tautomere vormen voorkomen (bijvoorbeeld indien R een 2-aminothiazolylgroep voorstelt) en het zal duidelijk zijn dat 30 deze tautomere vormen, bijvoorbeeld de :2-iminothiazolylvorm, eveneens binnen het kader van de uitvinding vallen.

Binnen het kader van de uitvinding vallen eveneens de solvaten (in het bijzonder de hydraten) van de verbindingen met formule Ia. Binnen het kader van de uitvinding 35 vallen eveneens de solvaten van niet-toxische zouten van de ver- 850 1 3 24 *► * - 7 - bindingen met formule Ia en niet-toxische zouten en solvaten van niet-toxische, metabolisch labiele, esters van de verbindingen met formule Ia.

De verbindingen met formule Ia volgens de uit-5 vinding vertonen een anti-bacteriele werking tegen een grote verscheidenheid van gram-positieve en gram-negatieve bacteriën.

Verbindingen met formule Ia volgens de uitvinding blijken een krachtige werking tegen verschillende 10 leden van de Enterobacteriaceae (bijvoorbeeld stammen van Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Shighella sonnei,

Serratia marcescens, Citrobacter diversus, Providence species,

Proteus mirabilis, en in het bijzonder indool-positieve Proteus organismen zoals Proteus vulgaris en Proteus morganii) en stam-15 men van Haemophilus influenzae te vertonen. Ze zijn eveneens aktief tegen gram-positieve bacteriën, zoals Staphylococcus aureus.

Verbindingen met formule Ia in de trans-configu-ratie bleken bij orale toediening goed geabsorbeerd te worden.

20 Een aanbevolen klasse verbindingen volgens de uitvinding kan worden weergegeven door formule Ib, waarin R een thiazolyl-, thiadiazolyl-, furyl-, thienyl- of pyrimi-dylgroep, desgewenst gesubstitueerd door een of een aantal substituenten gekozen uit amino of halogeen (chloor, broom of 25 jodium) voorstelt, R een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, alkenylgroep met 2-4 koolstofatomen, alkynylgroep met 2-4 koolstofatomen, cycloalkylgroep met 3-6 koolstofatomen of een C^^cycloalkyl-Cj_^alkylgroep, desgewenst gesubstitueerd door carbamoyl, methylcarbamoyl, dimethylearba-30 moyl, carboxyl, alkoxycarbonyl of halogeen, weergeeft en R^ een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, fenyl-, carboxyl- of een alkoxycarbonylgroep is.

De aktiviteit van deze verbindingen tegen gram-negatieve bacteriën, zoals die welke hiervoor zijn vermeld, is in het algemeen 35 hoog en strekt zich uit tot vele $ -lactamase-producerende, gram- f» ' Λ ·' s' · ' bO U ; o C 4 Λ ·*' - 8 - negatieve stammen. De verbindingen bezitten eveneens een grote stabiliteit tegen β -lactamasen gevormd door een reeks gram- positieve en gram-negatieve organismen.

Een meer aanbevolen klasse verbindingen volgens 5 de uitvinding kan worden weergegeven door fomule Ic, waarin cT 1 R een waterstofatoom of een methyl-, ethyl-, carboxymethyl-, 2-carboxyprop-2-yl-, carbamoylmethyl- of methoxycarbonylmethyl-2' groep en R een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-4 kool-stofatomen (bijvoorbeeld de methyl- of ethylgroep) voorstellen, 10 en de niet-toxische zouten en niet-toxische, metabolisch labiele, esters ervan.

De verbindingen met formule Ic bleken een goede werking tegen een grote verscheidenheid van gram-positieve en gram-negatieve bacteriën te bezitten.

15 De verbindingen met formule Ic waarin de 3- substituent zich in de trans-configuratie bevindt^ blijken bij orale toediening^te worden geabsorbeerd. De trans-isomeren en hun niet-toxische zouten en niet-toxische, metabolisch labiele, esters zijn dus vooral aanbevolen verbindingen volgens de 20 uitvinding.

Twee verbindingen volgens de uitvinding die op basis van hun goede orale absorptie en krachtige anti-bacteriele werking in het bijzonder aanbeveling verdienen zijn (6R,7R)-7-£’(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2-(carboxymethoxy-25 imino)aceetamido7-3-(r(E)-hex-l-een-3-ynyl7_cef-3-em-4-carbonzuur en (6R,7R)-7-£(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2-(carboxymethoxyimino)- aceetamidoJ-3-ZT(E)-but-l-een-3-ynyl7-cef-3-em-4-carbonzuur.

Een buitengewone verbinding volgens de uit-30 vinding is (6R,7R)-7-£*(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2-(carboxy- methoxyimino)aceetamido7-3-/j(E)-pent-l-een-3-ynyi7-cef-3-em-4-carbonzuur, met formule ld, en de niet-toxische zouten en niet-toxische, metabolisch labiele, esters daarvan. Vooral moet het natriumzout worden genoemd.

35 Deze verbinding bezit-, zowel in vitro en in vivo, 85 0 1 3 2 -} » » - 9 - een, goede werking tegen gram-positieve organismen als een krachtige werking tegen een breed spektrum van gram-negatieve organismen. Ze wordt bij orale toediening goed geabsorbeerd en is met succes toegepast bij de behandeling van experimentele 5 infekties (bijvoorbeeld Escherichia coli en Staphylococcus aureus) in kleine knaagdieren via orale toediening. Bovendien bleek de verbinding een buitengewoon langdurige farmacokinetische halveringstijd bij muizen te hebben en dit betekent dat een minder frequente dosering dan normaal mogelijk kan zijn. Deze combinatie 10 van orale absorptie, goede spiegels van een antibacteriele werking met breed spektrum in vivo en langdurige farmacokinetische hal- -da£j veringstijd is bijzonder verrassend om/de meeste cefalosporine-antibiotica die tot nu toe beschikbaar waren bij orale toediening niet doeltreffend waren en een frequentere dosering nodig 15 maakten.

De niet-toxische zoutderivaten die door reaktie van een of een aantal carboxylgroepen die in de verbindingen met formule Ia aanwezig zijn kunnen worden gevormd omvatten anorganische basezouten, zoals alkalimetaalzouten (bijvoorbeeld 20 natrium- en kaliumzouten) en aardalkalimetaalzouten (bijvoor beeld calciumzouten), aminozuurzouten (bijvoorbeeld lysine-en argininezouten), zouten van organische basen (bijvoorbeeld procaine, fenylethylbenzylamine, dibenzylethyleendiamine, ethanolamine, diethanolamine en N-methylglucosaminezouten).

25 Onder andere niet-toxische zoutderivaten vallen zuuradditie- zouten wanneer de verbindingen een basische groep bevatten, bijvoorbeeld gevormd met waterstofchloride, waterstofbromide, zwavelzuur, salpeterzuur, fosforzuur, mierezuur en trifluor-azijnzuur. De zouten kunnen eveneens in de vorm van hars-30 produkten aanwezig zijn, bijvoorbeeld gevormd met een polystyreen-hars of een verknoopte polystyreen-divinylbenzeencopolymeerhars die amino.of kwaternaire aminogroepen of sulfonzuurgroepen bevat, of met een hars die carboxylgroepen bevat, bijvoorbeeld een polyacrylzuurhars. Oplosbare basezouten (bijvoorbeeld alkali-35 metaalzouten, zoals het natriumzout) van de verbindingen met -r -Λ *1 *7 Λ ƒ

V w / 1 yj “J

% 4 * -10- formule Ia kunnen, wegens de snelle verdeling van dergelijke zouten in het lichaam na de toediening, eveneens voor therapeutische toepassingen worden aangewend. Zijn bij een bepaalde toepassing, bijvoorbeeld voor gebruik in depotprpparaten, onop-5 losbare zouten van verbindingen met formule Ia gewenst, dan kunnen dergelijke zouten op een gebruikelijke wijze, bijvoorbeeld met geschikte organische aminen, worden bereid.

Deze en andere zoutderivaten, zoals de zouten met tolueen-p-sulfonzuur en methaansulfonzuur, kunnen als 10 tussenprodukten bij het bereiden en/of zuiveren van de onderhavige verbindingen met formule Ia worden toegepast, bijvoorbeeld bij de hierna beschreven werkwijzen.

Onder niet-toxische, metabolisch labiele, esterderivaten die door verestering van een of een aantal 15 carboxylgroepen in de ouderverbindingen met formule Ia kunnen worden gevormd vallen acyloxyalkylesters, bijvoorbeeld lage alkanoyloxy-methyl- of -ethylesters, zoals acetoxy-methyΙοί -ethyl- of pivaloyl-oxymethylesters en alkoxycarbonyloxy-alkylesters, zoals ethoxycarbonyloxyethylesters. Behalve de 20 hiervoor genoemde esterderivaten, vallen binnen het kader van de onderhavige uitvinding eveneens de verbindingen met formule Ia in de vorm van andere, fysiologisch aanvaardbare, equivalenten, dat wil zeggen fysiologisch aanvaardbare verbindingen die, evenals de metabolisch labiele esters, in vivo in de 25 antibiotische ouderverbindingen met formule Ia worden omgezet.

De verbindingen met formule Ia volgens de uitvinding kunnen voor het behandelen van vele ziekten veroorzaakt door pathogene bacteriën in mensen of dieren, zoals in-fekties van het ademhalingsstelsel of van de urinewegen, 30 worden toegepast.

Volgens een verder aspekt van de uitvinding wordt een werkwijze voor het bereiden van verbindingen met de algemene formule I, zoals hiervoor gedefinieerd, en de zouten, solvaten en esters daarvan, verschaft welke omvat: 35 (A), voor de bereiding van verbindingen waarin τ o λ $ kj * 4 "ï

* V

-11- R een. geacyleerde aminogroep voorstelt, acylering van een verbinding met formule X of een zout daarvan, waarin R een aminogroep of een gesilyleerde aminogroep weergeeft, of (B) , voor de bereiding van verbindingen waarin 5 R een gesilyleerde aminogroep weergeeft, silylering van een verbinding met formule I of een zout daarvan, waarin R een aminogroep is, of (C) reaktie van een verbinding met formule IV, waarin , B en de stippellijn de hiervoor gedefinieerde beteke- 10 nissen hebben, R een -NEL^-groep of een gesilyleerde of geace- tyleerde aminogroep of een beschermde vorm van genoemde geacy- leerde aminogroep voorstelt en Y een substituent is die in staat is met een of een aantal reagentia te reageren onder vorming 2 of invoering van een groep met formule -CH^CH-CSC-R op 15 de 3-plaats, met een of een aantal genoemde reagentia.

Volgens weer een ander aspekt van de uitvinding wordt een werkwijze voor het bereiden van de cefalosporine-antibiotica met formule Ia, zoals hiervoor gedefinieerd, en de niet-toxische zouten, solvaten, 1-oxyden en de niet-toxische, 20 metabolisch labiele, esters daarvan, verschaft, welke omvat (A ) acylering van een verbinding met formule 2 3

II, waarin R een hiervoor gedefinieerde betekenis heeft, R

een waterstofatoom of een carboxylgroepblokkerende groep, bijvoorbeeld de rest van een estervormende alifatische of 25 aralifatische alkohol of een ester-vormend fenol, silanol of stannanol, waarbij de genoemde alkohol, fenol, silanol of stannanol bij voorkeur 1-20 koolstofatomen voorstelt en B ^ S of (¢^.- of -) voorstellen en de stippel lijn die de 2-, 3- en 4-plaatsen overbrugt aangeeft dat de 30 verbinding een cef-2-em- of cef-3-em-verbinding is, of een zout, bijvoorbeeld een zuuradditiezout, bijvoorbeeld gevormd met een mineraal zuur, zoals waterstofchloride, waterstof-bromide, zwavelzuur, salpeterzuur of fosforzuur of een organisch zuur, zoals methaansulfonzuur of tolueen-p-sulfonzuur, of een 35 N-silylderivaat daarvan, met een zuur met formule III, waarin \J * rj __ —β· -12- » « * 1A 1 R een hiervoor voor R aangegeven betekenis heeft of een beschermde vorm ervan is, of met een acyleringsmiddel dat daarmede overeenkomt, (B*) reaktie van een verbinding met formule IVa, IA 3 ... . .

5 waarin R , R , B en de stippellijn de hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben en Y een substituent is die in staat is met een of een aantal reagentia te reageren onder vorming of invoe- 2 ring van een groep met formule -CH=CH-C=C-R op de 3-plaats, met een of een aantal van de genoemde reagentia.

10 Telkens indien het nodig en/of wenselijk is, indien het wenselijk is een verbinding met formule Ia, zoals hiervoor gedefinieerd , of een niet-toxisch zout, solvaat, 1-oxyde of een niet-toxische, metabolisch labiele, ester daarvan te vormen, kan elk van de volgende stappen, in elke geschikte 15 volgorde, worden uitgevoerd: 2 i) omzetting van een Δ. -isomeer in het gewenste A ^-isomeer, 20 ii) reduktie van een verbinding waarin B = \g --^ o tot een verbinding waarin B = ^S, iii) oxydatie van een verbinding waarin B = ^ S tot een verbinding waarin B = ^ S -? 0, 25 iv) vorming van een niet-toxisch zout, v) vorming van een solvaat, 30 vi) vorming van een niet-toxische, metabolisch labiele, ester, vii) scheiding van isomeren, 35 viii) isomerisatie van de dubbele binding in de 8501324 K a -13- zijketen op de 3-plaats van de cis- in de trans-configuratie, of omgekeerd en ix) verwijdering van eventueel aanwezige carboxyl-5 groepblokkerende en/of 0- of N-beschermende groepen.

Onder acyleringsmiddelen die bij werkwijze (A) of (A1) voor de bereiding van de verbindingen met formules I of Ia kunnen worden toegepast vallen zuurhalogeniden, in het bij-10 zonder zuurchloriden of -bromiden. Dergelijke acyleringsmiddelen kunnen worden verkregen door reaktie van een geschikt zuur, bijvoorbeeld een zuur met formule III of een zout daarvan^, met een halogeneringsmiddel, bijvoorbeeld fosforpentachloride, thionylchloride of oxalylchloride.

15 Acyleringen onder toepassing van zuurhalogeniden kunnen worden uitgevoerd in waterige en niet-waterige reaktie-media, geschikt bij temperaturen van -50 tot +50° C, bij voorkeur bij een temperatuur tussen -40 en +30° C, desgewenst in aanwezigheid van een zuurbindend middel. Onder geschikte reaktie-20 milieus vallen waterige ketonen, zoals waterige aceton, waterige alkoholen, zoals waterige ethanol, esters, zoals ethylacetaat, gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals methyleenchloride, amiden, zoals dimethylaceetamide, nitrilen, zoals acetonitril of mengsels van twee of een aantal van dergelijke oplosmiddelen.

25 Geschikte zuurbindende middelen zijn bijvoorbeeld tertiaire aminen (bijvoorbeeld triethylamine of dimethylaniline), anorganische basen, bijvoorbeeld calciumcarbonaat of natrium-dicarbonaat en oxiranen, zoals lage 1,2-alkyleenoxyden, bijvoorbeeld ethyleenoxyde of propyleenoxyde, die het bij de 30 acyleringsreaktie vrijgekomen waterstofhalogenide binden.

Zuren, bijvoorbeeld die met formule III, kunnen zelf als acyleringsmiddelen bij de bereiding van verbindingen met formule I of Ia worden toegepast. Het is wenselijk acyleringen onder toepassing van zuren met formule III uit 35 te voeren in aanwezigheid van een condensatiemiddel, bijvoorbeeld " λ *i t -*) f . i * "1 / ·Λ W* * ^ w i * -14- een carbodiimide, zoals Ν,Ν'-dicyclohexylcarbodiimide of N-ethyl-N’- j^-dimethylaminopropylcarbodiimide, een carbonyl-verbinding, zoals carbonyldiimidazool of een isoxazoliumzout, zoals N-ethyl-5-fënylisoxazoliumperchloraat.

5 De acylering kan eveneens geschieden met andere amidevormende derivaten van zuren, bijvoorbeeld zuren met formule III,' zoals bijvoorbeeld een geaktiveerde ester, een symmetrisch anhydride of een gemengd anhydride, bijvoorbeeld gevormd met pivalinezuur of met een halogeenformiaat, zoals een laag alkyΙ-ΙΟ halogeenformiaat. Eveneens kunnen gemengde anhydriden met fosforzuren, bijvoorbeeld fosforzuur of fosforig-zuur, zwavelzuur, of alifatische of aromatische sulfonzuren, bijvoorbeeld tolueen-p-sulfonzuur, worden gevormd. Een geaktiveerde ester kan geschikt in situ worden gevormd onder toepassing van 15 bijvoorbeeld 1-hydroxybenzotriazool, in aanwezigheid van een condensatiemiddel, zoals hiervoor aangegeven. Ook kan de geaktiveerde ester van tevoren worden gevormd.

Het is wenselijk acyleringsreakties onder toepassing van de vrije zuren of hun hiervoor genoemde amide-20 vormende derivaten in een watervrij reaktiemilieu uit te voeren, zoals methyleenchloride, tetrahydrofuran, dimethylformamide of acetonitril.

Een andere aktiveringsmethode is bijvoorbeeld de reaktie van een zuur, bijvoorbeeld met formule III, met 25 een oplossing of suspensie die van tevoren gevormd is door een carbonylhalogenide, in het bijzonder oxalylchloride of fosgeen, of een fosforylhalogenide, zoals fosforoxychloride, toe te voegen aan een oplosmiddel, zoals een gehalogeneerde koolwaterstof, bijvoorbeeld methyleenchloride, dat een laag 30 acyl tert.amide, zoals Ν,Ν-dimethylformamide, bevat. Men kan de geaktiveerde vorm van het zuur daarna met een 7-amino-verbinding met formule I of II in een geschikt oplosmiddel of mengsel van oplosmiddelen, bijvoorbeeld een alkohol, bijvoorbeeld waterige ethanol of waterige, industriële gedenatureerde 35 alkohol laten reageren. De acyleringsreaktie kan geschikt worden 8501324 « * -15- uitgevoerd bij een temperatuur tussen -50° tot +50° C, bij voorkeur tussen -40° C en +30° C, desgewenst in aanwezigheid van een zuurbindend middel, bijvoorbeeld zoals hiervoor vermeld, bijvoorbeeld triethylamine.

5 Desgewenst kunnen de hiervoor beschreven acyleringsreakties worden uitgevoerd in aanwezigheid van een katalysator, zoals 4-dimethylaminopyridine.

De zuren, bijvoorbeeld met formule III en acyleringsmiddelen die daarmede overeenkomen kunnen desgewenst j0 in de vorm van hun zuuradditiezouten worden bereid en toegepast. Zo kunnen bijvoorbeeld zuurchloriden geschikt als hun hydrochloridezouten en zuurbromiden als hun hydrobromide-zouten worden toegepast.

Voorbeelden van verbindingen met formule IV 15 en IVa die als uitgangsmaterialen bij de hiervoor beschreven werkwijzen (C)en (B*) worden toegepast omvatten verbindingen waarin Y een groep voorstelt die wordt gekozen uit: e e i) CH=PR waarin de R -groepen, die al of 20 niet gelijk kunnen zijn, alkyl-, aralkyl-, aryl- of dialky1- aminogroepen of een dergelijke groep gesubstitueerd door een of een aantal halogeenatomen, nitrogroepen, cyaangroepen, aminogroepen, gesubstitueerde aminogroepen (bijvoorbeeld alkyΙοί acyl-gesubstitueerde aminogroepen) of acylgroepen, 25 of een amfoteer ionogene vorm van de groep, voorstellen, e ® ii) CH^Q, waarin Q een /PR groep voorstelt (waarin R een hiervoor gedefinieerde betekenis heeft, of een P(0)R^2_groep is, waarin de R^-groepen, die al of niet gelijk 30 kunnen zijn, een alkoxy-, aryloxy- of aralkoxygroep voorstellen, welke groepen.desgewenst gesubstitueerd kunnen zijn door een of een aantal halogeenatomen, nitrogroepen ,cyaangroepen ,aminogroepen, gesubstitueerde aminogroepen (bijvoorbeeld alkyl- of acyl-gesubstitueerde aminogroepen) of acylgroepen, 35 C X es A „ r, ~ c : λ / & W -a*, o Λ A * -16- iii) (CH„) CHO (waarin n = 0 of 1) of waarin - Z n n = 1, een enolvorm of derivaat (bijvoorbeeld een acylderivaat) daarvan, of 5 iv) (CEL) Z, waarin n een hiervoor gedefinieerde Z n betekenis heeft en Z een gemakkelijk verwijderbaar atoom of groep, zoals een halogeenatoom, bijvoorbeeld een chloor- of broomatoom, of een acyloxygroep, zoals een trifluormethaan-sulfonyloxygroep, tolueen-p-sulfonyloxygroep, methaansulfonyΙ-ΙΟ oxygroep of acetoxygroep, voorstelt.

De werkwijzen (C) en (B^) kunnen in een inert oplosmiddel,. bijvoorbeeld een inert organisch oplosmiddel, en geschikt bij een temperatuur van -80 tot +120° C, bij 15 voorkeur van 0-80° C, worden uitgevoerd. Onder geschikte inerte, organische oplosmiddelen vallen bijvoorbeeld een koolwaterstof, bijvoorbeeld benzeen of tolueen, een gehalogeneerde koolwaterstof, bijvoorbeeld dichloormethaan, een ether, bijvoorbeeld diethylether, tetrahydrofuran of dioxan, een amide, bijvoorbeeld 20 dimethylformamide, dimethylaceetamide of hexamethylfosforamide, een sulfoxyde, bijvoorbeeld dimethylsulfoxyde, of een sulfon, bijvoorbeeld sulfolaan.

Volgens een speciale uitvoeringsvorm van werkwijze (B^) kan een verbinding volgens de uitvinding worden bereid 25 door reaktie van een verbinding met formule IVa, waarin Y een 0 -CEKPR .-groep voorstelt, of een amfotere ïonvorm daarvan, J 2a met een carbonylverbinding met formule V, waarin R een hier- 2 voor voor R . gedefinieerde betekenis heeft of een trialkyl-silylgroep is waarin de alkylgroepen, die al of niet gelijk 30 kunnen zijn, bijvoorbeeld gekozen zijn uit een alkylgroep met 1-6 koolstofatomen, bijvoorbeeld de methylgroep.

Bij deze uitvoeringsvorm van de werkwijze wordt de reaktie bij voorkeur uitgevoerd in een tweefasen-systeem dat water en een met water niet-mengbaar organisch 35 oplosmiddel, zoals een gehalogeneerde koolwaterstof, bijvoor- 85 0 1 3 2 4 * * .

-17- beeld dichloormethaan, bevat.

De verbindingen met formule IVa, waarin Y de -CH=PR „-groep voorstelt, kunnen in situ uit een fosfomum-^ Φ e verbinding met formule -CH^ PR ^ worden verkregen door 5 reaktie met een base. Onder geschikte basen vallen bijvoorbeeld alkalimetaal- en aardalkalimetaalhydroxyden, carbonaten en waterstofcarbonaten, bijvoorbeeld natriumhydroxyde of natrium-waters tof carbonaat, dinatriumwaterstoffosfaat, hydriden, bijvoorbeeld natriumhydride en organische basen, zoals tert.stik-10 stofbasen, bijvoorbeeld triethylamine of alkyllithiaten, bijvoorbeeld butyllithium.

Het bij de hiervoor beschreven reaktie van een verbinding met formule IVa met een verbinding met formule 2a V, waarin R een trialkylsilylgroep voorstelt, gevormde tussen- 2 15 produkt kan worden omgezet m een verbinding waarin R een waterstofatoom is door reaktie met bijvoorbeeld zilvernitraat en kaliumcyanide.

In een andere uitvoeringsvorm van werkwijze kan een verbinding met formule IVa, waarin Y een -C^Q-groep 20 voorstelt, of een zout daarvan, in aanwezigheid van een base in reaktie worden gebracht met een carbonylverb inding met formule V, onder vorming van een verbinding volgens de uitvinding. Onder geschikte basen vallen die welke hiervoor zijn genoemd.

25 De verbindingen met formule IVa, waarin Y een Θ * . · -CH=PR 2 of -CH^Q-groep voorstelt, kunnen op een gebruikelijke wijze worden bereid, bijvoorbeeld volgens de methoden beschreven in het Britse octrooischrift 1.342.241 of in de Europese octrooiaanvrage 30.630.

30 Volgens een andere uitvoeringsvorm van werkwijze B* kan een verbinding volgens de uitvinding worden verkregen

door reaktie van een verbinding met formule IVa, waarin Y

een -(CH„) CHO-groep of een enolvorm of derivaat daarvan voor-2 n stelt, met een metaalzout met een anion met formule VI, waarin 2 . ...

35 R een hiervoor aangegeven betekenis heeft en m = 0 mdien n m 0 1 3 ? £ , » » -18- groep Y = 1, of is 1 indien η = 0.

Voorbeelden van metalen die in staat zijn met een anion met formule VI een zout te vormen zij n bijvoorbeeld lithium, magnesium, kwik, zink, cadmium en koper.

5 Indien Y de -CHO-groep voorstelt , dat wil zeggen indien n = 0, kan een verbinding met formule IVa in

reaktie worden gebracht met een verbinding met formule VII

2 e of een verbinding met formule VIII, waarin R , R en Q de hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben, waarbij de 10 reaktie met een verbinding met formule VIII in aanwezigheid van een base wordt uitgevoerd. Onder geschikte basen vallen alkalimetaal- en aardalkalimetaalhydroxyden, carbonaten en waterstofcarbonaten, bijvoorbeeld natriumhydroxyde en natrium-waterstofcarbonaat en organische basen^zoals tertiaire stikstof-15 basen, bijvoorbeeld triethylamine en alkyllithiaten, bijvoorbeeld butyllithium.

Desgewenst kan een verbinding met formule VU

worden gevormd door reaktie van een overeenkomstige fosfonium- verbinding met een base. Onder geschikte basen vallen die welke

20 hiervoor voor de reaktie van een verbinding met formule VIII

met een verbinding met formule IVa zijn genoemd.

Verbindingen met formule IVa, waarin Y een “(CIl^nCHO-groep voorstelt, kunnen op een gebruikelijke wijze worden verkregen, bijvoorbeeld volgens de methoden beschreven 25 in het Britse octrooischrift 1155024, het Amerikaanse octrooi- schrift 3351597 of de Europese octrooiaanvrage 53962.

Volgens weer een andere uitvoeringsvorm van werkwijze B kan een verbinding volgens de uitvinding worden bereid door reaktie van een verbinding met formule IVa, 30 waarin Y een ~(CH0) Z-groep voorstelt, waarin n en Z de z n hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben,, met een metaalzout 2 met een anion met formule IX, waarin R een hiervoor gedefinieerde betekenis heeft en U de aCH-groep is indien n in de Y-groep = 0 of de -S (Oj^R-groep of Sg (O^R-groep (waarin w 35 = 1 of 2 en R een aryl- of aralkylgroep weergeeft) indien n in \___A.

-19- . groep Y = I.

Voorbeelden van metalen die in staat zijn met een anion met formule XX een zout te vormen zijn die welke hiervoor zijn genoemd.

5 Stelt U de =CH-groep voor, dan kan het metaal- zout met het anion met formule IX in de vorm van een metaal 2 (bijvoorbeeld kopercomplex zijn, bijvoorbeeld LiCu(CH*CH.C=CR )T, waarin T de (CH=CH.C=CR.Vgroep of een organische groep die in staat is een complex met koper te vormen, doch die niet aan 10 de reaktie zal deelnemen, voorstelt.

Verbindingen met formule IVa, waarin Y een -(CH.) Z-groep voorstelt, kunnen op een gebruikelijke wijze z π worden bereid, bijvoorbeeld volgens de methoden beschreven in de Britse octrooischriften 1326531 en 1461323.

15 Het zal duidelijk zijn dat bij de hiervoor beschreven reaktie van een verbinding met formule IVa, waarin Y een -(C^^CHO-groep voorstelt, met een metaalzout met een anion met formule VI, een alkohol als tussenprodukt kan worden gevormd, welke alkohol door verwijdering van water in een 20 verbinding volgens de uitvinding met de benodigde koolstof- koolstof-dubbele binding kan worden omgezet. Het kan geschikt zijn het alkoholtussenprodukt in een geacetyleerd derivaat, zoals een tosylaat, mesylaat of acetaat, om te zetten en de eliminatiereaktie op het aldus gevormdeacylaat uit te voeren.

25 Het tussen-produkt dat door reaktie van een verbinding met formule IVa, waarin Y een -(CH„) Z groep voorstelt, met een metaalzout met een anion met formule IX, waarin U een S(0) R of S’e(O) R-groep weergeeft, kan worden gevormd, kan w w door verwijdering van een sulfeen- of sulfinezuur (of het 30 overeenkomstige seleenzuur) in een verbinding volgens de uitvinding met een gewenste koolstof-koolstof-dubbele binding op de 3-plaats worden omgezet.

Dergelijke hiervoor beschreven eliminatie-reakties kunnen op een gebruikelijke wijze worden uitgevoerd, 35 bijvoorbeeld in een inert, organisch milieu, zoals dat waarin e* 5 fi ή ” *: .

ft ii 4 * i-» 'J ij * 0-4 . > -20- het tussenprodukt was', gevormd en bij een temperatuur tussen 0 en 100° C. Desgewenst kan de eliminatiereaktie in aanwezigheid van een katalysator, zoals een niet-nucleofiele base, bijvoorbeeld triethylamine, worden uitgevoerd.

5 Het bij de hiervoor beschreven werkwijzen ver kregen reaktieprodukt kan volgens vele methoden, waaronder her-kristallisatie^ionoforese, kolomchromatografie en onder gebruikmaking van ionenuitwisselaars (bijvoorbeeld door chroma-tograferen over ionenuitwisselende harsen) of macroverknoopte 10 harsen, uit het reaktiemengsel, dat bijvoorbeeld onveranderd cefalosporineuïtgangsmateriaal en andere stoffen kan bevatten, worden afgescheiden.

2

Een fa -cefalosporineesterderivaat verkregen volgens de werkwijze van de uitvinding kan worden omgezet in 15 het overeenkomstige, gewenste A. -derivaat door bijvoorbeeld behandeling van de A ^-ester met een base, zoals pyridine of triethylamine.

Een cef-2-em- of cef-3-emreaktieprodukt kan eveneens worden geoxydeerd tot het overeenkomstige cef-3-em 1-20 oxyde, bijvoorbeeld door reaktie met een perzuur, bijvoorbeeld perazijnzuur of m-chloorperbenzoezuur en het verkregen sulfoxyde kan desgewenst daarna, zoals hierna zal worden beschreven, worden gereduceerd tot het overeenkomstige, gewenste cef-3-em-sulfide.

25 Indien een verbinding wordt verkregen waarin B

= ^ S -^ 0, dan kan deze, desgewenst,, worden omgezet in het overeenkomstige sulfide door bijvoorbeeld reduktie van het overeenkomstige acyloxysulfonium- of alkoxysulfoniumzout, in situ bereid door reaktie met bijvoorbeeld acetylchloride in 30 het geval van een acetoxysulfoniumzout, waarbij de reduktie bijvoorbeeld wordt uitgevoerd met natriumdithioniet of jodide-ionen, zoals in een oplossing van kaliumjodide in een met water mengbaar oplosmiddel, bijvoorbeeld azijnzuur, aceton, tetra-hydrofuran, dioxan, dimethylformamide of dimethylaceetamide.

35 De reaktie kan verlopen bij een temperatuur tussen -20 en +50° C.

8501324 -21-

Indien bij een van de hiervoor beschreven werkwijzen een mengsel van de cis- en trans-geometrische isomeren wordt verkregen, dan kunnen deze desgewenst volgens gebruikelijke methoden, bijvoorbeeld kristallisatie, gefraktioneerde kristal-5 lisatie of chromatografie, worden gescheiden. Op overeenkomstige wij ze^ indien de verbindingen een oximgroep in de zijketen op de 7-plaats bevatten, en als een mengsel van syn- en anti-isomeren wordt verkregen, kan hét syn-isomeer volgens dergelijke gebruikelijke methoden worden verkregen.

10 Teneinde de scheiding van de cis- en trans- isomeren te vergemakkelijken, kan het geschikt zijn het mengsel van de cefalosporine cis- en trans-isomeren te oxyderen tot de overeenkomstige sulfoxyden, de cis- en trans-isomeren volgens de hiervoor beschreven methoden te scheiden en desgewenst de 15 sulfoxyden te reduceren tot de gewenste sulfiden, bijvoorbeeld volgens de hierin beschreven methoden.

Indien nodig en/of wenselijk kan het cis-isomeer worden geisomeriseerd tot het overeenkomstige trans-isomeer, bijvoorbeeld door een mengsel van de cis- en trans-isomeren 20 te verhitten in een inert oplosmiddel, zoals tolueen, op een temperatuur van bijvoorbeeld 80-110° C.

In enkele gevallen, bijvoorbeeld indien geen oximsubstituent aanwezig is, kan het reaktiemengsel geschikt een isomerisatiekatalysator, zoals jodium, bevatten.

25 Metabolisch labiele esterderivaten van de verbindingen met formule Ia kunnen worden verkregen door reaktie van de verbinding met formule Ia of een zout of beschermd derivaat daarvan met het geschikte, veresterende middel, zoals een acyloxyalkylhalogenide (bijvoorbeeld jodide), geschikt in 30 een inert, organisch oplosmiddel, zoals dimethylformamide óf aceton, desgewenst gevolgd door verwijdering van eventuele beschermende groepen.

Basezouten van de verbindingen met formule I of Ia kunnen worden verkregen door reaktie van het zuur met formule 35 I of Ia met een geschikte base. Zo kunnen bijvoorbeeld de natrium- . i' f; 1 " ; ' i * -22- of kaliumzouten worden vedir^en,onder toepassing van het respektievelijke 2-ethylhexanoaat- of waterstofcarbonaatzout.

Zuuradditiezouten kunnen worden bereid door reaktie van een verbinding met formule I of Ia of een metabolisch labiel 5 esterderivaat daarvan met het geschikte zuur.

Verbindingen met formule II, dat wil zeggen verbindingen met formule I waarin R een aminogroep voorstelt, die als uitgangsmateriaal bij de werkwij zen (A), (B) en (A^) worden toegepast, kunnen in het algemeen worden bereid door 10 N-deacylering van een verbinding met formule I, waarin R een geacyleerde aminogroep voorstelt, waarin de acylgroep onder geschikte omstandigheden kan worden verwijderd. De genoemde uitgangsmaterialen kunnen in het bijzonder worden verkregen door N-deacylering van een verbinding met formule X, waarin 2 3 15 R , R , B en de stippellijn de hiervoor gedefinieerde betekenissen hebben en R^ een acylgroep van een carbonzuur, gekozen uit bijvoorbeeld formyl, fenoxyacetyl, fenylacetyl, gesubstitueerde fenoxy- of fenylacetyl, thienylacetyl of 5-amino-adipoyl, of de laatste waarin een of beide carboxyly en amino- 20 groepen daarvan zijn geblokkeerd, of t-butoxycarbonyl of een .. 4 dergelijke acylgroep van koolzuur is, of waarin de R -groep en het aangrenzende waterstofatoom tezamen een diacylgroep afgeleid van een diacarbonzuur, bijvoorbeeld een ftaalimido- 4 of maleimidogroep, waarin R NH dus een aan N-gehechte hetero-25 cyclische groep is, voorstellen. De verbindingen met formule X kunnen zelf worden verkregen volgens methoden analoog aan de hiervoor beschreven werkwijze C. De N-deacylering kan op een gebruikelijke wijze geschieden, bijvoorbeeld onder toepassing van PCl^, zoals beschreven in het Britse octrooischrift 30 1241655,

Het is ook mogelijk een verbinding met formule II te bereiden uit een 7-aminocefalosporineverbinding, volgens methoden analoog aan de hiervoor beschreven werkwijze (C).

De zuren met formule III kunnen volgens ge-35 bruikelijke methoden worden verkregen.

t*. *3 ? Jft ƒ S ^ !i - i Af *1 -V_> tsf ** V* m* n ♦ , -23-

Voor toepassing als uitgangsmateriaal bij de bereiding van de verbindingen volgens de uitvinding waarin de zijketen op de 7-plaats een oximgroep bevat, worden verbindingen met de algemene formule III en de zuurhalogeniden en -anhydriden 5 die daarmede overeenkomen, evenals verbindingen met formule IVa, bij voorkeur toegepast in hun syn-isomeervorm of in de vorm van mengsels van de syn-isomeren en de overeenkomstige anti-isomeren die tenminste 90 % syn-isomeer bevatten.

Het zal duidelijk zijn dat in enkele van de 10 hiervoor beschreven omzettingen het noodzakelijk kan zijn eventuele gevoelige groepen in de betreffende verbinding te beschermen, teneinde ongewenste nevenreakties te vermijden.

Geschikte beschermende groepen zijn bijvoorbeeld beschreven in "Protective Groups in Organic Chemistry" door J.F.W. McOmie 15 (Plenum Press, London, 1973) en "Protective Groups in Organic

Synthesis" door Theodora W. Greene (Wiley Interscience, New York, 1981). Het kan bijvoorbeeld tijdens elk van de hiervoor vermelde reakties nodig zijn een eventuele N^-groep te beschermen, bijvoorbeeld in een aminothiazolylgedeelte, bijvoorbeeld door 20 trityleren, acetyleren (bijvoorbeeld chlooracetyleren of formy-leren), protoneren of volgens een andere gebruikelijke methode.

De beschermende groep kan daarna op elke geschikte wijze die geen afbraak van de gewenste verbinding teweegbrengt worden verwijderd, bijvoorbeeld in het geval van een tritylgroep door 25 toepassing van een desgewenst gehalogeneerd carbonzuur, bijvoorbeeld azijnzuur, mierezuur, chloorazijnzuur of trifluor-azijnzuur of onder gebruikmaking van een mineraal zuur, bijvoorbeeld waterstofchloride of mengsels van dergelijke zuren, bij voorkeur in aanwezigheid van een protisch oplosmiddel, 30 zoals water, of in het geval van een chlooracetylgroep, door behandeling met thioureum.

Het is wenselijk dat groepen die carboxyl-groepen blokkeren of hydroxylgroepen beschermen die toegepast worden bij de bereiding van de verbindingen volgens de uitvin-35 ding of van de noodzakelijke uitgangsmaterialen groepen zijn die Λ ‘ '** * V . Λ ƒ ui '*} V * v * -24-

6drStG

gemakkelijk bij een Ïretap van de reaktievolgorde kunnen worden afgesplitst, geschikt in de laatste stap. Het kan soms echter geschikt zijn niet-toxische, metabolisch labiele, carboxyl-groepblokkerende groepen toe te passen, zoals acyloxymethyl-5 of -ethyl-groepen, (bijvoorbeeld acetoxymethyl of -ethyl of pivaloyloxymethyl) en deze in het eindprodukt te behouden, teneinde een geschikt esterderivaat van een verbinding met formule Ia te geven.

Geschikte groepen die de carboxylgroep blokkeren 10 en de hydroxylgroep beschermen zijn bekend uit de stand der techniek; een lijst van representatieve geblokkeerde carboxyl-groepen is opgenomen in het Britse octrooischrift 1399086.

Onder aanbevolen geblokkeerde carboxylgroepen vallen aryl lage alkoxycarbonylgroepen, zoals p-methoxybenzyloxycarbonyl, 15 p-nitrobenzyloxycarbonyl en difenylmethoxycarbonyl, lage alkoxycarbonylgroepen, zoals p-butoxycarbonyl en lage halogeenalkoxy-carbonylgroepen, zoals 2,2,2-trichloorethoxycarbonyl. Voorbeelden van hydroxylbeschermende groepen zijn bijvoorbeeld alkyl-, aralkyl-, aryl- en acylgroepen . De blokkerende en/of bescher-20 mende groepen kunnen daarna volgens elk van de in de literatuur beschreven geschikte methoden worden verwijderd^ zo kan bijvoorbeeld een door zuur of base gekatalyseerde hydrolyse vaak worden toegepast, evenals door enzymen gekatalyseerde hydrolysemethoden.

De antibiotisch werkzame verbindingen volgens 25 de uitvinding kunnen op elke geschikte wijze voor toedienings-doeleinden worden verwerkt, in analogie met andere antibiotica en de uitvinding omvat daardoor eveneens farmaceutische preparaten die een of een aantal antibiotisch werkzame verbindingen volgens de uitvinding, geschikt voor toepassing bij de humane 30 of veterinaire geneeskunde, bevatten. Dergelijke preparaten kunnen worden aangeboden voor een gebruikelijke toepassing, met behulp van eventueel nodige farmaceutische dragers of excipienten.

De preparaten kunnen worden aangeboden in een 35 vorm die geschikt voor absorptie door het maag-darmstelsel, in 85 0 1 3 24 -25- het bijzonder indien het aktieve bestanddeel oraal wordt geabsorbeerd, zoals het hiervoor vermelde, vooral aanbevolen trans-isomeer. Tabletten en capsules voor orale toediening kunnen in de eenheidsdoseringsvorm zijn en kunnen gebruikelijke exci-5 pienten ,zoals bindmiddelen, bijvoorbeeld siroop, acasia, gelatine, sorbital, tragacanth of polyvinylpyrrolidon, vulstoffen, bijvoorbeeld lactose, suiker, maïszetmeel , calciumfosfaat, sorbitol of glycine, tabletteersmeermiddelen, bijvoorbeeld magnesium-stearaat, talk, polyethyleenglycol, siliciumdioxyde, middelen 10 die het uiteenvallen bevorderen, bijvoorbeeld aardappelzetmeel of aanvaardbare bevochtigende middelen, zoals natriumlauryl-sulfaat, bevatten. De tabletten kunnen volgens uit de stand der techniek bekende methoden zijn bekleed. Orale vloeibare preparaten kunnen waterige of olieachtige suspensies, oplos-15 singen, emulsies, siropen of elixers zijn of kunnen als een droog produkt, voor verwerking met water of een andere geschikte tt drager voor toepassing, worden verwerkt. Dergelijke vloeibare preparaten kunnen gebruikelijke toevoegsels., zoals suspendeer-middelen, bijvoorbeeld sorbitolsiroop, methylcellulose, glucose-20 suikersiroop, gelatine, hydroxyethylcellulose, carboxymethyl-cellulose, aluminiumstearaatgel of gehydrogeneerde eetbare vetten, emulgeermiddelen, bijvoorbeeld lecithine, sorbitanmono-oleaat of acacia, niet-waterige dragers, waaronder eetbare oliën, bijvoorbeeld amandelolie, gefraktioneerde kokosnootolie, 25 olieachtige esters, propyleenglycol of ethylalkohol, verduur- zamingsmiddelen, bijvoorbeeld methyl- of propyl p-hydroxybenzo-aten of sorbinezuur^bevatten. Zetpillen zullen gebruikelijke zetpilbasismaterialen, bijvoorbeeld cacaoboter of andere glycerinen, bevatten.

30 De antibiotisch werkzame verbindingen volgens de uitvinding kunnen worden verwerkt voor injektiedoeleinden en in een eenheidsdoseringsvorm, in ampullen of in houders met een veelvoudige dosis, indien nodig met een toegevoegd verduurzamingsmiddel, worden aangeboden. De preparaten kunnen 35 eveneens suspensies, oplossingen of emulsies in olieachtige £ -Λ 1 ~ ? 4 'J V 3 V - -26- of waterige dragers zijn en kunnen verwerkingsmiddelen, zoals suspendeermiddelen, stabilisatiemiddelen en/of dispergeer-middelen,bevatten. Het is ook mogelijk dat het aktieve bestanddeel zich in een poedervorm voor verwerking met een geschikte 5 drager, bijvoorbeeld steriel, pyrogeen-vnj water, voor de toepassing, bevindt.

Desgewenst kunnen dergelijke poederachtige preparaten een geschikte, niet-toxische base bevatten, teneinde de oplosbaarheid in water van het aktieve bestanddeel te ver-10 beteren en/of te verzekeren dat indien het poeder met water wordt verwerkt, de pH van het verkregen, waterige preparaat fysiologisch aanvaardbaar is. Het is ook mogelijk dat de base in het water aanwezig is waarmee het poeder wordt verwerkt.

De base kan bijvoorbeeld een anorganische base, zoals natrium-15 carbonaat, natriumbicarbonaat of natriumacetaat, of een organische base, zoals lysine of lysineacetaat, zijn.

Preparaten voor veterinair gebruik kunnen bijvoorbeeld worden verwerkt tot preparaten bestemd voor de borst, in langwerkende of snel vrijkomende basen.

20 De preparaten kunnen van 0,1 % af, bijvoorbeeld 0,1-99 %, aktief materiaal, bevatten, afhankelijk van de wijze van toediening. Vallen onder de preparaten eenheidsdoseringen, dan zal elke eenheid bij voorkeur 50-3000 mg, bijvoorbeeld 100-2000 mg, aktief bestanddeel bevatten. De dosis die voor het 25 behandelen van volwassen mensen wordt toegepast zal bij voorkeur variëren van 200-12000 mg, bijvoorbeeld 500-6000 mg, per dag, afhankelijk van de wijze van toedienen en de frequentie van het toedienen, de aard van de infektie en de werking van het antibioticum tegen de infekterende organismen. Zo zal 30 bijvoorbeeld bij het behandelen van volwassen mensen een hoeveelheid van 500-4000 mg per dag, intraveneus of intramusculair toegediend, normaliter voldoende zijn. Voor orale toediening aan volwassen mensen zal de dagelijkse dosis liggen tussen 200 en 4000 mg per dag, bijvoorbeeld 500-2000 mg per dag en 35 voor kinderen zal dit variëren van bijvoorbeeld 125-1000 mg per p 5 π *? 3 n «v xp * vJ *» i •r * -27- dag.

De uitvinding verschaft verder een methode voor het bestrijden van bacteriele infekties bij mensen en dieren, waarbij een anti-bacterieel doeltreffende hoeveelheid 5 van een antibiotisch werkzame verbinding met formule Ia, zoals gedefinieerd hiervoor, en/of een nietu toxisch zout en/of een niet-toxisch, metabolisch labiele ester daarvan, profylactisch of therapeutisch aan het betreffende objekt wordt toegediend.

10 Bovendien omdat de uitvinding het gebruik van een of een aantal verbindingen met formule Ia, zoals hiervoor gedefinieerd, en/of een niet-toxisch zout en/of een niet-toxisch, metabolisch labiele, ester daarvan, voor het verschaffen van een farmaceutisch of verterinair preparaat voor toepassing 15 bij het bestrijden van bacteriele infekties bij mensen en dieren.

De antibiotisch werkzame verbindingen volgens de uitvinding kunnen gecombineerd met andere therapeutische middelen, zoals antibiotica, bijvoorbeeld penicillinen of andere cefalosporinen, worden toegediend.

20

Bereiding 1 C( 6R, 7R) -7-/*(Z ) -2- (t-Butoxycarbony lme thoxy imino )-2-( 2-trityl- aminothiazool-4-yl)aceetamido7~4-difenylmethoxycarbonylcef-3-em- 3-ylmethyl/trifenylfosfoniumbromide.

25

Een oplossing van 0,524 g trifenylfosfine en 0,985 g difenylmethyl(6R,7R)-3-broommethyl-7-ZT(Z)-2-(t-butoxy-carbonylmethoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7~ cef-3-em-4-carboxylaat (bereid volgens de methode van het Britse 30 octrooischrift 2036738A) in 10 ml ethylacetaat werd 16 uren geroerd bij de omgevingstemperatuur. Gedurende deze tijd sloeg een vast produkt neer. Dit werd afgefiltreerd, gewassen met ethylacetaat en onder verminderde druk gedroogd, waardoor 0,848 g van de in de titel genoemde verbinding werd verkregen, Y' 35 (CHBr3) 3385, 3280 (M), 1790 (/£ -lactam), 1728, 1720 (ester), i·* A Λ 7 A / ' CO Μ * 0 £ 4 < ' -28- 1680, 1522 cm * (amide).

Bereiding 2 (Z)-2-(2-Difenylmethoxycarbonylmethoxyimino)-2-(2-tritylamino-5 thiazool-4-yl)azijnzuur.

Een geroerde oplossing van het natriumzout van (Z)-2-(hydroxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)azijnzuur in 50 ml dimethylformamide werd in een stikstofatmosfeer en bij 10 0° C behandeld met 1,0 g kalium t-butoxyde. Na 30 minuten werd de oplossing afgekoeld tot -40° C en behandeld met nog 1,0 g kalium t-butoxyde. Zodra de base volledig was opgelost werd een oplossing van 4,7 g difenylmethylbroomacetaat in 10 ml dimethylformamide toegedruppeld. Na 10 minuten liet men de 15 temperatuur van hetï ceaktiemengsel oplopen tot -20° C. Na nog eens 30 minuten werd 15 ml 2 N zoutzuur toegevoerd en werd het mengsel verdeeld tussen 100 ml ethylacetaat en 100 ml water. Door opwerken van de organische fase gevolgd door verdampen van het oplosmiddel verkreeg men een schuim, die uit 20 een mengsel van ethylacetaat en benzine * werd gekristalliseerd, waardoor men 2,07 g van de in de titel genoemde verbinding als een vaste stof verkreeg, X. (CDCl^) waarden omvatten 3,1 (-C02CH), 3,28 (thiazool.5H), 5,34 (-0CH2C02-).

25 Bereiding 3

Difenylmethyl (6R,7R)-3-broommethyl-7-/~(Z)-2-(difenylmethoxy-carbonylmethoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidoJ-cef-3-em-4-carboxylaat.

30 Men druppelde een oplossing van 3,19 ml oxalyl- chloride in 40 ml dichloormethaan bij -15° C en in een stikstofatmosfeer toe aan een geroerde oplossing van 3,87 ml dimethyl-formamide in 160 ml dichloormethaan. Men hield de verkregen, witte suspensie 30 minuten op ongeveer -5° C en koelde daarna 35 af tot -10° C. Het produkt van bereiding 2 (21,77 g) werd toege- o ü U ï 3 L s -29- voegd en de verkregen, oranjekleurige oplossing werd, voor weer koelen tot -10° C, 30 minuten geroerd hij een temperatuur tussen -5 en 0° C.

Ondertussen werd een geroerde suspensie van 5 16,51 g van het hydrochloride van difenylmethyl (6R,7R)-3-broom- methyl-7-amino-cef-3-em-4-carboxylaat in 200 ml dichloormethaan bij -25° C behandeld met 4,64 ml triethylamine en 9,51 ml N,N-dimethylaniline. Na enkele minuten werd de oplossing van het geaktiveerde zijketenzuur toegevoegd en men liet het reaktie-10 mengsel gedurende 90 minuten opwarmen tot 5° C. Vervolgens werd het mengsel uitgegoten in 500 ml water en de twee fasen werden gescheiden. De organische fase werd twee malen gewassen met telkens 500 ml 2 N zoutzuur, 500 ml water, 500 ml van een verzadigde natriumbicarbonaatoplossing en 500 ml van een natriumchloride-15 oplossing en gedroogd boven magnesiumsulfaat. Het oplosmiddel werd verwijderd en het residu werd chromatografisch gezuiverd, waardoor 29,23 g van de in de titel genoemde verbinding als een schuim werd verkregen. T (CDCl^) waarden omvatten 2,08 (-C0NH), 4,11 (7H), 4,96, 5,11 (-OCH^-) , 4,99 (6H), 5,54 20 5,83 (-CH2Br).

Bereiding 4 ( 6R, 7R) -7~Z~(Z ) ~2~ (Dif eny Ime thoxycarb onylme thoxy imino ) - 2- ( 2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7-4-difenylmethoxycarbonyl-cef-25 3-em-3-yl-methyl)trifenylfosfoniumbromide.

De in de titel genoemde verbinding werd bereid uit difenylmethyl (6R,7R)-3-broommethyl-7-^’(Z)-2-(difenyl-methoxycarbonylmethoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)-30 aceetamido7-cef-3-em-4-carboxylaat volgens de methode van hereiding 1 en vertoonde X (CDCl^) waarden omvattende 4,18 (7H), 4,94 (6H), 3,92, 4,87 (-CH^) en 5,00 (-CH^-).

35 9 K Γ* ' ' w ^ -30-

Bereiding 5

Difenylmethyl (6R,7R)-7-formamido-3-£(E)- en (Z)-pent-l-een- 3-ynyl7-ce£-3-em-4-carboxylaat.

5 Een geroerde oplossing van 7,61 g (6R,7R)-£4-di- fenylmethoxycarbonyl-7-formamidocef-3-em-ylmethyl7trifenyl-fosfoniumbromide in 100 ml dichloormethaan werd behandeld met 60 ml van een verzadigde natriumbicarbonaatoplossing.. Na 5 minuten werden 1,38 g but-2-ynal toegevoegd en het mengsel werd 10 3 uren geroerd. De fasen werden gescheiden en de organische fase werd gewassen met water, 2 M zoutzuur, water en een natrium-chlorideoplossing (elk 200 ml), gedroogd boven natriumsulfaat en ingedampt. Het residu werd gezuiverd door kolomchromatografie (200 g silicagel) waarbij men door elueren met een mengsel van 15 ethylacetaat en dichloormethaan (1:9) een mengsel van de in de titel genoemde verbindingen als een vast produkt verkreeg (2,18 g); (E):(Z) 1:3; X (ethanol) 258,5 nm (£ 4.600),

IQcLX

265,5 nm (S 4.600), 325 nm 17.500);V (CHBr.) 3415 max 3 1 (NH), 2210 (C=C), 1786 (jS -lactam), 1722 (C02R), 1700, 1500 cm 20 (HC0NH ); χ (DMS0-d6) 3,42, 4,30 (CH=CH-CsC-, Z isomeer), 3,87 (-CH=CH-C-C, E isomeer), 5,70, 6,07 (2-CH2, Z isomeer), 6,06, 6,35 (2-CH2, E isomeer), 7,97 (-C=C-CH3).

Bereiding 6 25 Difenylmethyl (6R, 7R) -7-formamido-3-/~(E) -pent-1 -een-3-ynyl7~ cef-3-em-4-carboxylaat.

Een oplossing van het produkt van bereiding 5 (2,11 g) in 100 ml tolueen, die een kristal jodium bevatte, 30 werd 5 uren in een stikstofatmosfeer onder terugvloeiing verhit. Onder koelen werd het neergeslagen, vaste produkt afgefiltreerd, gewassen met tolueen en ether en gedroogd, waardoor men 794 mg van de in de titel genoemde verbinding als fijne naalden verkreeg (de moederlogen werden weer verwerkt en gechromatogra-35 feerd , ter verkrijging van verder materiaal (796 mg)). De in de 8501324 -31- titel genoemde verbinding gaf (ethanol) 328 nm ( £ 26.100); max V (CHBrJ 3415, 3340 (NH), 2215 (CsC)-, 1786 ( /2- lactam), max j , / 1725 (C02R), 1698, 1500 cm (GONH). T (CDC13) 1,80 (CHO), 302 (CHPh2), 3,44 (NH), 4,13 (7H), 4,20 (-CH»CHCsC), 5,03 (6H), 5 6,45 en .6,56 (2-0Η£), 8,01 (CH3).

Bereiding 7

Dif eny lmethy 1 (6R, 7R) -7-amino-3-/r(E ) -pent-1 -ββη-3-yn.ylZ cef-3-em- 4-carboxylaat, hydrochloride.

10

Men druppelde aan een geroerde oplossing van 710 mg van het produkt van bereiding 6 in 5 ml methanol en 5 ml ether bij 0° C 0,29 ml fosforoxychloride toe. Daarna liet men de temperatuur van het reaktiemengsel gedurende 90 minuten 15 oplopen tot 20° C, concentreerde de verkregen oplossing door verdampen tot 2 ml en voegde het toe aan 50 ml ether, waardoor men het in de titel genoemde hydrochloride als een vast produkt (534 mg) verkreeg; X. mav (ethanol) 270 nm (£ 4800), 328 nm (f 22.600); Vs (Nujol) 2600 (NH_), 2210 (CsC), 1782 s max . j 20 (β -lactam, 1718 cm (C0£R); X (DMS0-d6) 2,92 (-CH=CH-C=C), 3,74 (CH=CH-CsC), 5,99, 6,26, (2-CH2), en 7,97 (CsC-Oy.

Bereiding 8

Dif eny lmethy 1 (6R, 7R)-7-amino-3-/T(E)-pent-l-een-3-ynyl7-cef-3-25 em-4-carboxylaat.

Een oplossing van 10 g van het produkt van bereiding 7 in 100 ml dichloormethaan werd 5 minuten geschud met 100 ml van een natriumbicarbonaatoplossing. Door opwerken 30 van de organische fase verkreeg men de in de titel genoemde verbinding als een schuim (942 g); % (CDCl^) waarden houden in 2,84 (-CH=CH-CsC), 4,24 (-CH?CH-ChC), 5,05 (7H), 5,26 (6H), 8,03 (CsC-CH3).

35 8501324 -32-

Bereiding 9

Dimethyl (1,1-dimethylethyl)(2-propynyloxy)silaan.

Men koelde een oplossing van 8,7 ml propargyl-5 alkohol, 25 g t-butyldimethylsilylchloride en 0,73 g 4-dimethyl-aminopyridine in 45 ml methyleenchloride af tot 0° C. Daarna druppelde men onder roeren gedurende 5 minuten 25,1 ml triethyl-amine toe. Na 18 uren werd het mengsel verdund met 50 ml methyleenchloride en twee malen geextraheerd met 75 ml porties water. De 10 waterige oplossingen werden samengevoegd en daarna geextraheerd met methyleenchloride (25 ml). De organische fasen werden samengevoegd en gewassen met water en een verzadigde oplossing van am -moniumchloride in water, gedroogd en drooggedampt, waardoor men 24,9 g van een olie verkreeg. Door destilleren onder ver-15 minderde druk verkreeg men de in de titel genoemde verbinding als een olie (20,8 g), kookpunt: 60-62° C (24 mm Hg).

Bereiding 10 4-ZÏ)imethyl(l, l-dimethylethyl)silyloxy_7~2-butynzuur.

20

Een oplossing van 18,3 ml van 1,6 M butyllithium in hexaan werd afgekoeld tot -50° C en hieraan werd 25 ml tetrahydrofuran toegevoegd. Onder roeren en in een stikstof-atmosfeer werd 5,0 g van het produkt van bereiding 9 in 5 ml 25 tetrahydrofuran toegedruppeld, waarbij men de reaktietemperatuur lager dan -50° C hield. Zodra het toevoegen van acetyleen was voltooid (ongeveer 10 minuten) werd het inleiden van stikstof gestaakt en werd droog kooldioxyde door de krachtig geroerde suspensie geborreld, terwijl men de temperatuur lager dan 30 -50° C hield. Na 2 uren werd het koelbad verwijderd en liet men de temperatuur van het mengsel oplopen tot kamertemperatuur.

Het inleiden van het kooldioxyde werd nog 30 minuten voortgezet.

Men goot de suspensie langzaam uit in een oplossing van 3,5 g ammoniumchloride in 12 ml water en voegde daarna onder zacht 35 omschudden een mengsel van 3 ml geconcentreerd zoutzuur en 3 ml ,λ r* »1 *7 O 7.

8¾ ü 3 o £ % -33- water toe. De waterfase werd afgescheiden en vier malen geëxtraheerd met telkens 50 ml tetrahydrofuran. De organische extrakten werden samengevoegd, gedroogd en ingedampt, waardoor men de in de titel genoemde verbinding als een laag smeltend 5 vast produkt verkreeg (6,6 g) ~( (CDCl^) waarden omvatten 5,50 (C=C-CH2), 9,82 (C(CH3)3).

Bereiding 11

De ethylester van 4~Zciimethyl(l, l-dimethylethyl)silyloxy7~2-10 hutynzuur.

Aan een gekoelde (-5° C) oplossing van 1,6 M butyllithium in 62,4 ml n-hexaan en 50 ml ether voegde men onder roeren in een stikstofatmosfeer 17,0 g van het produkt 15 van bereiding 9 in 50 ml ether toe. Daarna voegde men aan het afgekoelde (-78° C) reaktiemengsel een oplossing van 13,3 ml ethylchloorformiaat in 10 ml ether in een portie toe. Men liet de temperatuur van het reaktiemengsel gedurende 4 uren oplopen tot kamertemperatuur en goot het mengsel vervolgens uit in ijs.

20 De lagen werden geschud en de bovenlaag werd onmiddellijk afgescheiden. De onderste, waterige laag werd drie malen geëxtraheerd met telkens 100 ml ether. De organische extrakten werden samengevoegd, gedroogd en ingedampt, waardoor men 26,25 g van een olie verkreeg. Deze werd onder verminderde druk gedestilleerd, 25 waardoor men de in de titel genoemde ester, kookpunt: 86,88° C/ 0,2 mm Hg, als een olie verkreeg.

Bereiding 12

De difenylmethylester van 4-/jdimethyl(l, l-dimethylethyl)silyloxy7~ 30 2-butynzuur.

Men druppelde een oplossing van 0,5 N difenyl-diazomethaan i.n methyleenchloride (59 ml, 30 m.mol) gedurende 1 uur toe aan een gekoelde (5° C), geroerde oplossing van 6,3 g 35 van het produkt van bereiding 10 in 100 ml dichloormethaan. Daar- 3501324 -34- na liet men de temperatuur van het reaktiemengsel gedurende 17 uren oplopen tot kamertemperatuur en dampte daarna in tot een purperen gom. Deze gom werd opgenomen in 100 ml methyleen-chloride en men druppelde mierezuur toe totdat de purperen kleur 5 was verdwenen. De verkregen oplossing werd ingedampt tot een olie (11,4 g)^die door chromatograferen werd gezuiverd, waardoor men de in de titel genoemde verbinding als een olie (3,00 g) verkreeg "f (CDClg) waarden omvatten 3,04 (-CO^CH-), 5,52 (GsC-GH^).

10 Bereiding 13

De difenylmethylester van 4-hydroxy-2-hutynzuur.

Men voegde onder roeren en bij kamertemperatuur aan een oplossing van het produkt van bereiding 12 in acetonitril 15 (50 ml) 1 ml van een 40 % oplossing van waterstoffluoride in water toe. Na 1 uur verdeelde men het reaktiemengsel tussen chloroform en water. Door opwerken van de organische fase gevolgd door indampen verkreeg men 2,9 g van een viskeuze, bruine olie, die door chromatograferen werd gezuiverd, waardoor men 20 de in de titel genoemde verbinding als een viskeuze olie verkreeg^ (CDClg) waarden omvatten 3,06 (-C02CH-), 5,63 (CsC-CH2-), 7,76 (OH).

Bereiding 14 25 De difenylester van 4-oxo-2-butynzuur.

Het produkt van bereiding 13 (2,80 g) in 280 ml ether werd behandeld met "zeer aktieve" mangaandioxyde (28 g) dat in porties en onder roeren bij kamertemperatuur werd toege-30 voegd. Na 1 uur werd de suspensie gefiltreerd en het filtraat tot een olie ingedampt. (1,15 g)^T (CDCl^) waarden zijn 0,67 (-CH0), 2,67 (Ph), 3,01 (CO^H-).

Bereiding 15 35 De ethylester van 4-hydroxy-2-butynzuur.

S T· pi ‘j τ 9 k 3 V 4 *} -35-

Volgens de methode van bereiding 13.werd de in de titel genoemde verbinding als een olie bereid uit het produkt van bereiding 11 (6,50 g) en deze verbinding had "C (CDCl^) waarden waaronder 5,58 (CsC-CH^-) > 5,76 (Cl^.Cl^), 5 8,72 (C02CH2CH3).

Bereiding 16

De ethylester van 4-oxo-2-butynzuur.

10 De in de titel genoemde verbinding (0,74 g) werd volgens de methode van bereiding 14 verkregen als een olie uit het produkt van bereiding 15 (1,99 g) en vertoonde T CDCl^) waarden van 0,77 (CHO), 5,74 (-C0£CH2-), 8,67 (CO^E^ay.

15 Bereiding 17

Di£enylmethyl(6R,7R)-7-£ormamido-3-/‘(E)- en (Z)-pent-l-een-3-ynyl7~ cef-3-em-4-earboxylaat.

Aan een oplossing van 56,5 g (6R,7R)-/4-difenyl-20 methoxycarbonyl-7-formamidocef-3-em-3-ylmethyl7trifenyIfosfonium- bromide in 700 ml dichloormethaan voegde men gedurende 5 minuten, onder krachtig roeren en bij 21° C 450 ml van een verzadigde oplossing van natriumbicarbonaat in water toe. Daarna voegde men but-2-ynal toe en roerde het uit twee fasen bestaande 25 mengsel 1 uur bij 21° C en liet het daarna 15 uren staan bij 10° C. De fasen werden gescheiden en de waterfase werd twee malen geextraheerd met telkens 200 ml dichloormethaan. De gecombineerde organische fasen werden achtereenvolgens gewassen met 500 ml water, 500 ml 2 M zoutzuur, 500 ml water en 500 ml 30 van een verzadigde natriumchlorideoplossing en gedroogd boven magnesiumsulfaat. Door verdampen van het oplosmiddel onder verminderde druk verkreeg men een schuim, die werd gechromato-grafeerd over Merck kiezelgel 60 (230-400 mesh) (1,3 kg) en achtereenvolgens werd geelueerd met respektievelijk een mengsel 35 van ethylacetaat en dichloormethaan (1;9) en dit mengsel in een 8501324 -36- verhouding van 1:5. De geschikte frakties werden gecombineerd, waardoor men de in de titel genoemde verbindingen als een vast produkt verkreeg (13,80 g), (E): (Z.) 1:4 door ^H NMR-; \

( TUcLX

(ethanol) 264,5 nm ( £ 5.000) en 323 nrn ( £ 18.000); V

mEx 5 (CHBr.) ent (DMSO-d,.) waarden gelijk aan die van berei-J o ding 5.

Bereiding 18

Difenylmethyl(6R,7R)-formamido-3-r(E)-pent-l-een-3-ynyl7~ce£-3-10 em-4-carboxylaat.

UHJ

Men suspendeerde een 1:4 mengsel (door/NMR van difenylmethyl(6R,7R)-7-formamido-3-£’(E)- en (Z)-pent-l-een-3- ynyl7cef-3-em-4-carboxylaat (13,75 g) in 600 ml tolueen, voegde 15 enkele kristallen jodium toe en verhitte het mengsel 5 uren in een stikstofatmosfeer onder terugvloeiing. Na elk uur voegde men nog enkele kristallen jodium toe. Het reaktiemengsel werd afgekoeld in ijs en een entkristal van de in de titel genoemde verbinding werd toegevoerd. Het verkregen neerslag werd afge- 20 filtreerd, achtereenvolgens twee malen gewassen met telkens 30 ml koude tolueen en twee malen met telkens 30 ml ether en gedroogd, waardoor men 6,87 g van een vast produkt verkreeg, dat uit 500 ml methanol werd herkristalliseerd, waardoor men 4,56 g van de in de titel genoemde verbinding als fijne naalden 25 verkreeg Ldl^ -125°. (c 0,53 in CHC13); max (ethanol) 327 nm ( ? 26, 600); (CHBr„) en X (CDC1 ), welke waarden v max 3 3 overeenkomen met die van bereiding 6. De methanolmoederloog werd geconcentreerd tot een residu, dat werd gecombineerd met de tolueenmoederloog en het mengsel werd tot 300 ml geconcen-30 treerd. De hiervoor beschreven werkwijze werd vier malen herhaald ter verkrijging van in totaal 4,80 g van de in de titel genoemde verbinding in de vorm van fijne naalden.

Voorbeeld 1 35 8501324 -37- (a) Difenylmethyl (6R, 7R) -T-[(2 ) -2- (t-butoxycarbonylmethoxy-imino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-y1)aceetamido7-3-/~(E & Z)-pent-1-een-3-ynyl}7~cef-3-em-4-carboxylaat.

5 Hen behandelde een geroerde oplossing van 1,0 g van het produkt van bereiding 1 in 15 ml dichloormethaan met 5 ml van een verzadigde natriumbicarbonaatoplossing. Na enkele minuten voegde men 0,29 ml but-2-yn-l-al (bereid volgens de methode van S. Galaj en Y-L. Pascal, Bull. Soc. Chim. France, 10 3979 (1972)) toe en roerde het mengsel gedurende 3,25 uren.

Daarna voegde men 10 ml water en 25 ml dichloormethaan toe en scheidde de twee fasen. De organische fase werd gewassen met 50 ml 2 M zoutzuur, 50 ml water en 50 ml van een verzadigde natriumchlorideoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en 15 ingedampt. Het residu werd gezuiverd over een kolom van 40 g silicagel, onder elutie met een mengsel van ethylacetaat en dichloormethaan (1:19), waardoor men 0,482 g van een mengsel van de in de titel genoemde verbindingen verkreeg, ψ (CHBr3) 3380 (NH), 3260 (NH), 2210 (-C=C~) 1788 (β -lactam), 20 1680, 1524 cm"1 (-C0NH-); t (DMS0-d6) 1,40 (-C0NH, E isomeer), 1,42 (-C0NH, Z isomeer, 3,18 (-C02CHPh2, Z isomeer), 3,20 (-C02-CHPh2, E isomeer), 3,28 (-CH=CH-CsC-CH3, Z isomeer), 4,13 (7H),

4,24 (~CH=CR-CsC-CH3, E isomeer), 4,45 (-CH=CH-C=C-CH3, Z isomeer), 4,93 (6H, Z isomeer), 4,94 (6H, E isomeer), 5,25 (-0CH2-25 C02-), 5,77, 6,16 (2-CH2, Z isomeer), 6,48, 6,59 (2-CH2, E

isomeer), 8,02 (-C=C-CH3).

(b) Difenylmethyl (1S,6R,7R)-7-/*(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy- imino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidQ7-3-£(E)-pent-30 l-een-3-ynyj7-cef-3-em-4-carboxylaat, 1-oxyde en difenylmethyl (IS, 6R,7R)-7-/*(Z)-2-(t-butoxy carbony lme thoxyimino)-2-(2-trity 1-aminothiazool-4-yl)aceetamido7-3-£(Z)-pent-1-een-3-ynyl/-cef-3-em-4-carboxylaat, 1-oxyde.

35 4F*. ^ Λ ' ‘Z ‘ -· α 5 U s w -38-

Men voegde 0,325 g 85 % n-chloorperbenzoezuur bij -20° C toe aan een geroerde oplossing van 1,53 g van het produkt van stap (a) in 40 ml dichloormethaan. Voordat men het mengsel gedurende 45 minuten liet opwarmen tot 0° C roerde 5 men het mengsel 15 minuten bij -20° C. Daarna verdunde men het mengsel met 35 ml dichloormethaan, waste het twee malen met telkens 75 ml van een verzadigde natriumbicarbonaatoplossing en 75 ml van een verzadigde natriumchlorideoplossing, droogde boven natriumsulfaat en dampte in. Het residu werd gezuiverd 10 door onder matige druk uitgevoerde chromatografie over een kolom van 500 g silicagel. Door elutie met een mengsel van chloroform en ether (9:.1) verkreeg men difenylmethyl (1S,6R,7R)- 7-£ (Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxyimino)-2-(2-tritylamino-thiazool-4-y1)aceetamidq7-2-if(Z)-pent-1-een-3-ynyl7cef-3-em-4-15 carboxylaat, 1-oxyde als een schuim (0,665 g), ^ (ethanol) 321,5 nm (l 19.500); V (CHBr,) 3380 (NH), 2200 (-C=C-), 1802 (^ -lactam), 1728 (C02R), 1678, 1520 (-C0NH-), 1048 cm (S-0); t (CDC1J 3,11 (-CH=CH-C-C-CH„), 4,45 (-CH=CH-C=C-CH_), j “* j — -j 5,26, 6,56, (2-CH2).Door verdere elutie, met hetzelfde elutie- 20 middel, verkreeg men difenylmethyl (lS,6R,7R)-7-£(Z)-(t-butoxy- carbonylmethoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidoJ- 3-ZT(E)-pent-l-een-3-ynyl7-cef-3-em-4-carboxylaat, 1-oxyde als een schuim (0,366 g), \ (ethanol) 328 nm (26900); ma.x V (CHBrJ 3380 (NH), 2215 (-CsC-), 1800 (/8 -lactam), 25 1726 (-C02R), 1678, 1520 (-C0NH-), 1062 cm" ( S=0); γ (CDC13) 4,26 (-CH=CH-C=C-CH3), 6,11, 6,91 (2-CH2).

(c) Difenylmethyl (6R,7R)-7-£‘(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy-imino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidQ7~3-/~(E)-pent-30 1-een-3-ynyl7-cef-3-em-4-carboxylaat.

Men voegde 581 mg kaliumjodide bij -20° C toe aan een geroerde oplossing van 425 mg difenylmethyl (1S,6R,7R)-£(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxyimino)-2-(2-tri tylaminothiazool-4-35 y 1) aceetamido7 ^-/"(Ε) -pent-1 -een-3-yny XJ cef-3-em-4-carboxy laat, 25 01 3 2 4 -39- 1-oxyde in 10 ml dimethyIformamide. Daarna voegde men na enkele minuten 0,124 ml acetylchloride toe en liet de temperatuur van het mengsel gedurende 30 minuten oplopen tot 0° C. Na nog 1,25 uur roeren bij 0°. C voegde men het mengsel toe aan 40 ml van een 5 krachtig geroerde 10 %Ts natriummethabisulfietoplossing en extraheerde twee malen met telkens 40 ml ethylacetaat. De samengevoegde extrakten werden twee malen gewassen met telkens 40 ml water en 40 ml van een verzadigde natriumchlorideoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en ingedampt. Het residu werd 10 gezuiverd over een kolom van 15 g silicagel, onder elutie met een mengsel van ethylacetaat en dichloormethaan (1:19), waardoor men 331 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim verkreeg \ (ethanol); 322,5 nm ( £ 24.600); (CHBr„) max /. ' max 3 3390, 3260 (NH), 2210 (-CsC-), 1788 (p -lactam), 1728 (C0£R), 15 1680, 1524 cm"1 (-C0NH-); p (CDC13) 4,23 (-CH=CH-C=C-CH3), 6,46, 6,56 (2-CH2).

(d) Difenylmethyl (6R, 7R) —7-/7(2) -2- (t-butoxycarbonylmethoxy-imino)-2-(tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido?-3-ZXZ)-pent-1-20 een-3-ynyl7-cef-3-em-4-carboxylaat.

Men voegde bij -20° C 1,086 g kaliumjodide toe aan een geroerde oplossing van 795 mg difenylmethyl (1S,6R,7R)- 7-/*(Z )-2-( t-butoxycarb ony lmethoxyimino ) -2- ( 2- tr i ty lamino thiazoo 1-25 4-yl) aceetamido_7-3-/"(Z)-pent-1 -een-3-yny l7~cef-3-em-4-carboxy laat, I-oxyde in 15 ml dime thy lf ormamide. Na enkele minuten voegde men 0,23 ml acetylchloride toe en liet de temperatuur van het mengsel gedurende 30 minuten oplopen tot 0° C. Na nog 30 minuten roeren bij 0° C voegde men het mengsel toe aan een 30 krachtig geroerde 10 % natriummeta-.bisulfietoplossing (75 ml) en extraheerde met 75 ml ethylacetaat. De samengevoegde extrakten werden twee malen gewassen met telkens 75 ml water en 75 ml van een verzadigde natriumchlorideoplossing, gedroogd boven natriumsulfaat en ingedampt. Het residu werd gezuiverd over een 35 kolom van 25 g silicagel, onder elutie met een mengsel van ethyl- j ' - 4Λ 4 v? V * «S έ -40- acetaat en dichloormethaan (1:19), waardoor men 625 mg van de in de titel genoemde verbinding in de vorm van een schuim verkreeg, \ (ethanol), 318 nm ( i 21.000); V (CHBr„) ÏUciX IuaX J — | 3390, 3260 (M), 1790 (β -lactam), 1728 (CO^), 1682, 1524 cm 5 (-C0NH-); (CDC13) 1,42 (-C0M), 3,08 (-CO^HPT^), 3,17 (thiazolyl), 3,28 (-CH=CHC5ïC-CH3), 4,13 (7H), 4,45 (-CH=CH-C=C-CH3), 4-,93 (6H, 5,24 (-OCH^O^), 5,76, 6,16 (2-CHp, 8,02 (-G=C-CH3).

(e) (6R,7R)-7-j~(Z)-2-(2-Aminothiazool-4-yl)-2-(earboxymethoxy- 10 imino) -aceetamido7“3-/*(E) -pent-1 -een-3~ynyl7-cef-3-em-4~carbon- zuur, trifluoracetaat.

Difenylmethyl (6R,7R)-7-/TZ)-2-(t-butoxycarbonyl-methoxyimino-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7-3-/’(E)-15 pent-l-een-3-ynyl7cef-3-em-4-carboxylaat (295 mg) werd geroerd 1 uur in 4 ml trifluorazijnzuur en 1 ml anisool. Daarna druppelde men de oplossing toe aan 50 ml krachtig geroerd water. Vervolgens voegde men nog 50 ml ether toe en scheidde na enkele minuten de twee fasen en extraheerde de organische fase met 10 ml water.

20 De samengevoegde waterige extrakten werden drie malen gewassen met telkens 25 ml ether, waarbij telkens met 5 ml water werd teruggewassen, en men verkreeg door concentreren en vriesdrogen 137 mg van de in de titel genoemde verbinding in de vorm van een schuim, \ (ethanol 233 nm ( ζ 19.900), / mdx ^ 25 317,5 nm ( ί 24.700); V (Nujol) 3300 (NH), 2210 (-C=C-), ' max 1772 (β -lactam), 2600, 1720 (-C02H) 1670, 1560, (-C0NH-), 1670 cm-1 (CF3C02-); Z (DMS0-d6) 0,46 (-COM), 2,93 (CH^CH-CsC-CH3), 3,15 (thiazolyl), 3,94 (CH?CH-C=C-CH3), 4,17 (7H), 4,77 (6H), 5,38 (-0CH2C02-), 6,16, 6,41 (2-CH2), 7,99 (-C=C-CH3).

30 (f) (6R,7R)-7-/l(Z)-2-(2-Aminothiazool-4-yl)-2-(carboxymethoxy-imino)-aceetamido7-3-/~(Z)-pent-l-een-3-ynyl)cef-3-em-4-earbon-zuur, trifluoracetaat.

35 Men roerde 570 mg difenylmethyl (6R,7R)-7-£(Z)- 8501324 -41- 2- (t-butoxycarbonylmethoxyimino)-2- (2-tritylaminothiazool-4-yl)-aceetamidg7-3-£(Z)-pent-l-een-3-yny]J-cef-3-em-4-carboxylaat gedurende 1 uur met 5 ml trifluorazijnzuur en 1,25 ml anisool. Daarna druppelde men de oplossing toe aan 50 ml krachtig ge-5 roerd water. Vervolgens voegde men 50 ml ether toe en scheidde na enkele minuten de twee fasen en extraheerde de organische fase met 10 ml water. De samengevoegde waterige extrakten werden tweemalen gewassen met telkens 25 ml ether, waarbij elke keer met 5 ml water werd teruggewassen, geconcentreerd en gevries-10 droogd, waardoor men 255 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim verkreeg. ^ (ethanol) 232,5 ( C 17.000), 313,5 ( ? 21.000); \f (Nujol) 3260 (NH), 1770 (β -lactam); 2500, 1722 (-C02H) 1668, 1554 (-C0NH-), 1668 cm (CF3C02-); X (DMS0-d6) 0,45 (-C0NH), 3,13 (thiazolyl), 3,28 15 (CH=CH-C=C-CH3), 4,17 (7H) 4,27 (CH=CH-CsC-CH3), 4,75 (6H), 5,36 (-0CH2C02-), 5,74, 6,11 (2-CH2), 7,96 (-CsC-CHg).

Voorbeeld 2

Difenylmethyl (6R, 7R)-7-/~(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxyimino)-2-20 (2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7-3-/'(E)-pent-l-een-3- ynyl7~cef-3-em-4-carboxylaat.

Men verhitte een oplossing van 90 mg difenyl-methyl (6R,7R)-7-/’(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxyimino)-2-(2-25 tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidq7-3-£(z)-pent-1-een-3- ynyl7cef-3-em-4-carboxylaat in 10 ml tolueen 120 uren in een stikstofatmosfeer onder terugvloeiing. Daarna verdampte men de tolueen en zuiverde het residu door kolomchromatografie over 5 g silicagel. Door elueren met een mengsel van ethyl-30 acetaat en petroleumether (2:3) verkreeg men 73 mg van de in de titel genoemde ester (E:Z, 3:1 volgens kernspinresonantie-spektrumvergelijking met authentieke monsters).

Voorbeeld 3 35 .Λ "i Λ A 7 Λ i Q Q \J ί J 4 -42- (a) Difenylmethyl (6R, 7R)-7-iT(Z)-2-(carbamoylinethoxyimino)-2-(2-trity laminothiazool-4-y 1) aceetamido.2-3-£(E ) -pent-1 -een-3-yny ~Q-cef-3-em-4-carhoxylaat ♦ 5 Men behandelde een geroerde oplossing van 432 mg difenylmethyl (6R, 7R)-7-amino-3-jf(E)-pent-1 -een-3-ynyljcef-3-em- 4-carboxylaat„ hydrochloride in 10 ml tetrahydrofuran met 125 ^ul triethylamine. Daarna voegde men 162 mg (Z)-2-(carbamoyl-methoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)azijnzuur, 162 mg 10 1-hydroxybenzotriazool.hydraat en 248 mg Ν,Ν'-dicyclohexylcarbo-diimide in deze volgorde toe. Na 3 uren werd het neergeslagen Ν,Ν'-dicyclohexylureum afgefiltreerd, het filtraat ingedampt en het residu gezuiverd door kolomchromatograferen over 60 g silicagel. Door elueren met een mengsel van ethylacetaat en 15 dichloormethaan (1:3) verkreeg men 441 mg van de in de titel genoemde verbinding in de vorm van een schuim, V (CHBr„)

TilflX j 3500, 3398 (NH2 + NH), 2215 (CaC), 1786 (^-lactam), 1722 (C02R), 1682, 1528 cm-1 (CONH); V (CDC13) 4,24 (CH=CH-C=C), 5,33 (0CH2C0NH2), 6,48, 6,60 (2-CH2), 8,02 (C=CCH3).

20 (b) (6R,7R)-7-£‘(Z)-2-(Carbamoylmethoxyimino)-2-(2-aminothiazool- 4-yl) aceetamidQ7-3-/~(E) -pent-1 -een-3-ynyl? cef-3-em-4-carbon-zuur.trifluoracetaat.

25 Men voegde 4 ml trifluorazijnzuur toe aan een geroerde oplossing van 375 mg van het produkt van stap a) in 1 ml anisool. Na 45 minuten druppelde men het reaktiemengsel toe aan 50 ml snel geroerd water. Na 5 minuten werd de waterige oplossing vier malen uitgewassen met telkens 50 ml water, waar-30 bij telkens met 10 ml water werd teruggewassen. De waterige oplossing werd geconcentreerd tot 50 ml en gevriesdroogd, waardoor men 216 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim verkreeg, \ (ethanol) 237 nm ( ζ 19.700) en 319 nm ( { 28.200); V (Nujol) 3300 (NH), 2205 (-CSC-) en 1772

1 ’ Ql3iX

35 cm (^ -lactam); TT (DMS0-d6) waarden omvatten 0,14 (-C0NH), 85 ü13 2 4 -43- 2,55, 2,90 (-C0NH ) , 2,95 (-CH=Cïï-C5C), 3,94 (-CH=qH-CsC) 4,15 (7H), 4,76 (6H), 5,54 (OCI^CONiy en 7,99 (C=C-CH3).

Voorbeeld 4 5 (a) Difenylmethyl (6R, 7R)-7-£*(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxyimino)- 2-(2-ϋΓίίγ1βιηχηο^ίηζοο1-4-γ1)ηο6βί3ΐηίάο7-3-/*(Ε & Z)-4-fenyl-but-1-een-3-ynyl7~cef-3-em-4-carb oxylaat.

10 Volgens de methode van voorbeeld la) werd 1,37 g van het mengsel van de in de titel genoemde verbindingen verkregen door uit te gaan van het produkt van bereiding 1 (2,7 g) en 1,32 ml fenylpropynal, dat de volgende waarden had: \Λ (CHBr_) 3400, 3270 (NH), 2190 (-C=C-), 1790 (/2-lactam), max j 1 j 15 1730 (-C02R), 1682, 1526 cm (-C0NH-); T (CDG13), 3,96 (CH=CH-C=C-Ph, E isomeer), 4,18 (CH=CH-C=C-Ph, Z isomeer), 5,59, 6,04 (2-CH2> Z isomeer) en 6,38, 6,50 (2-C2, E-iso- meer).

20 (b) Difenylmethyl (lS,6R,7R)-7-/~(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy- imino)-2-(2-tritylaminothi.azool-4-yl)aceetamido7~3-/'(E)-4-£enylbut-l-een-3-ynyl2cef-3-em-4-carboxylaat.1-oxyde en difenylmethyl (IA, 6R, 7R)-7-£(Z)-2- (t-butoxycarbon.ylmethoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)-aceetamidó7~3-/~(Z)-4-fenylbut-l-een-25 3-yny£7cef-3-em-4-carboxylaat.1-oxyde.

De in de titel genoemde verbindingen werden verkregen volgens de methode van voorbeeld lb), uitgaande van 2,15 g van het produkt van stap a). Het produkt werd gezuiverd 30 door chromatograferen over een kolom van 150 g silicagel, onder elutie met een mengsel van ethylacetaat en dichloor- methaan (1:19)^waardoor men de tweede, in de titel genoemde, verbinding (het Z-isomeer) als een schuim (0,617 g) verkreeg, ^ (CHBr_) 3390 (NH), 1805 ($-lactam), 1730 (CO.R), max j . / δ 35 1680, 1526 (-C0HH-), 1066 cm"1 (’ SO); ί (CDC1 ) 2,95 3501324 -44- (-CH=CH-C=C-Ph), 4,18 (-CH=CH-C=C-Ph), 5,13, 6,46 (2-CH2).

Door verdere elutie, met hetzelfde elutiemiddel, verkreeg men de eerste in de titel genoemde verbinding (het E-isomeer) als een schuim (0,417 g), Ψ (CHBr_) 3400 (NH), 2195 (-C=C-), max ó .

5 1805 ( β -lactam) 1730 (-00^), 1680, 1526 (-C0NH-), 1066 cm ( S=0);t (CDC13) 4,04 (CH=C&-C=C-Ph), 6,05, 6,86 (2-CH2).

(c) Difenylmethyl (6R,7R)-7-£‘(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxyimino)- 2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7-3-ir(E)-4-fenylbut-l-een-10 3-ynyl7cef-3-em-4-carboxylaat.

De in de titel genoemde verbinding (310 mg) werd als een schuim verkregen volgens de methode van voorbeeld 1c), onder toepassing van het tweede produkt van stap b) (het 15 E-isomeer) (397 mg), dat de volgende waarden had: hj (CHBr_) 3400, 3260 (NH), 2195 (-C=C-), 1792 (/3 -lactam), 1730 (-C02R), 1682, 1528 cm"1 (-C0NH-)j T (CDC13) 3,98 (CH=CH-CsC-Ph), 6,39 6,51 (2-CH2).

20 (d) Difenylmethyl (6R,7R)-7-/r(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy- imino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido?-3-/,(Z)-4-fenylbut-l-een-3-ynylJcef-3-em-4-carboxylaat.

De in de titel genoemde verbinding (476 mg) 25 werd volgens de methode van voorbeeld lc) onder toepassing van het tweede produkt van stap b) (het Z-isomeer) als een schuim verkregen en gaf de volgende waarden: ^ max (CHBr3) 3400, 3260 (NH) ,2185 (-CsC-), 1790 (^-lactam) 1730 (-C02R), 1682, 1528 cm_1 (-C0NH); f (CDC13) 3,08 (CH=CH-C=C-Ph), 4,20 30 (CH=CH-C=C-Ph), 5,60, 6,05 (2-CH2).

(e) (6R,7R)-7-/"‘(Z)-2“(2-aminothiazool-4-yl-2-(carboxymethoxy-imino)-aceetamidq7-3-^‘(E)-4-fenylbut-l-een-3-ynyl7cef-3-em-4-carbonzüur.trifluoracetaat.

35 8501324 -45- . Hen roerde 291 mg van het produkt van stap c) 1 uur met 4 ml TFA en 1 ml anisool. Daarna concentreerde men de verkregen oplossing tot ongeveer 1-2 ml en druppelde haar aan 100 ml krachtig geroerde isopropylether toe. Het neerge-5 slagen vaste produkt werd afgefiltreerd, gewassen met ether en gedroogd, waardoor men 121 mg van de in de titel genoemde verbinding als een vast produkt verkreeg. ^mav (Nujol) 3300 (NH), 2180 (CaC-), 1720 (^-lactam), 1720 (-oyi), 1672 (CF3Co”), 1672, 1536 (-COM), 945 cm”1 (-CH-CH-); X (DMS0-d6) 10 9,45 (-COM-), 2,40-2,70 (Ph), 2,76 (CH=CH-CrC-Ph), 3,16 (thiazolyl), 3,63 (CH=CH-C=C-Ph), 4,12 (7H, 4,72 (6H), 5,37 (-0CH2C02H), 6,05, 6,35 (2-ay.

(f) (6R,7R)-7-/IZ)-2-(aminothiazool-4-yl)-2-(carboxymethoxy-15 imino) -aceetamidoJ-3-/f(Z) -4-f eny Ibut-1 -een-3-yny lJ-cef-3-em-4- carbonzuur.trifluoracetaat.

De in de titel genoemde verbinding (173 mg) werd volgens de methode van stap e) uit het produkt van stap .

20 b) als een vast produkt verkregen, welke verbinding de volgende waarden had: V (Nujol) 3300 (M); 2180 (-C=C-), 1772 (JS-max „ . t lactam), 1720 (-COM-), 1670 (CF3C0 ^, 1670, 1540 cm (-COM-)j X (CDC13) 0,44 (-COM-) , 2,40-2,60 (Ph), 3,06 (CH=CH-CsC-Ph), 3,13 (thiazolyl), 3,96 (CH=CH-CsC-Ph), 4,11 (7H), 4,68 (6H), 25 5,36 (-0CH2C02H), 5,64, 5,93 (2-CH2).

Voorbeeld 5 (a) Difenylmethyl (6R, 7R) -7-/*(Z)-2- (t-butoxycarbonylmethoxy-30 imino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidoZr3-/(E & Z)-hex- 1-een-3-yny ij cef-3-em-4-carboxylaat.

Het mengsel van in de titel genoemde verbindingen (3,48 g, E:Z, 1:2) werd volgens de methode van voorbeeld 35 la) als een schuim verkregen uit het produkt van bereiding 1

n s o « 3 9 L

-46- (9,00 g) en 2-pentynal fi>ereid volgens de oxydatie van Jones van 2-pentyn-l-ol, volgens de algemene methode van S. Galaj en Y-L. Pascal, Bull. Soc. Chim. Fran., 3970 (197217 O»18 g). Het mengsel had y* (CHBr ) 3400, 3270 (NH), 2270 (CsC) 1790, IüclX -j _ -t 5 (β -lactam), 1730 (C0£R), 1680, 1526 cm (-C0NH-); T (CDC13) 3,26, 4,42 (CH=CH-C=C, Z isomeer), 4,19 (CH=CH-C=C, E isomeer), 5,71, 6,14 (2-CH2, Z isomeer) 6,45, 6,56 (2-CH2, E isomeer).

(b) Difenylmethyl (lS,6R,7R)-7-/~(E)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy- 10 imino) -2- (2- trjtylaminothiazool-4-yl) aceetamidoJ-3-Z?Z)-hex-l- een-3-ynyl7eef-3-em-4-carboxylaat.1-oxyde en difenylmethyl (1S,6R, 7R) -7-£(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxyimino)-2-(2-tritylaminothia-zool-4-y l)-aceetamido7-3-7 (E)-hex-1 -een-3-ynyl7 cef-3-em-4-carboxy-laat.1-oxyde.

15

De in de titel genoemde verbindingen werden bereid volgens de methode van voorbeeld lb) uitgaande van 3,42 g van het produkt van stap a). Het ruwe produkt werd gezuiverd over een kolom van 500 g silicagel, onder elutie met een 20 mengsel van chloroform en ether (9ï1) waardoor de eerste in de titel genoemde verbinding (het Z-isomeer) als een schuim (1,74 g) werd verkregen, Vs (CHBr ) 3390 (NH), 2200 * Π13.Χ «5 (-CsC-), 1804 (yö -lactam), 1730 (-C0 R), 1680, 1526 (-C0NH-), 1050 cm-1 ( S=0); χ (CDC13) 3,07 (CH=CH-C=C-), 4,42 (CH=CH- 25 CsC-), 5,22, 6,54 (2-CH2), 7,65 (CH2CH3) en 8,84 (CH2CH3).

Door verdere elutie met hetzelfde elutiemiddel verkreeg men de tweede in de titel genoemde verbinding (het E-isomeer) als een schuim (0,973 g), ν' (CHBr.) 3400 (NH-), 2210 (-CsC-), 1804 (ƒ2 -lactam), 1680, 1526 (-C0NH-), 1062 cm ( S=0); 30 't (CDC1 ) 4,24 (CH-CH-CsC-), 6,10, 6,90 (2-CH ), 7,66 (CH^) en 8,84 (C^^).

(c) Difenylmethyl (6R,7R)-7-/*(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy- imino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidq/-3-77E)~hex~ï~ 35 een-3-ynyl/cef-3-em-4-carboxylaat.

j Li %) “ v 'V

-47-

Volgens de methode van. voorbeeld 1c) bereidde men onder toepassing van 0,923 g van het tweede produkt van stap b) (het E-isomeer) 0,803 g van de in de titel genoemde verbinding, met de volgende waarden: V (CHBr„) 3395, 3260

. ITlflX <| J

5 (NH), 2210 (CsC), 1790 -lactam), 1730 cm (C02R); ^ (CDC13> 2,74 (-CH=CH-C=C), 4,19 (-CH=CH-C=C), 6,46, 6,57 (2-CH2), 7,65 (CH2CH3), 8,83 (CH2CH3).

(d) Difenylmethyl (6R,7R)-7-/**(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy- 10 imino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido/-3-/'(Z)-hex-een- 3-ynyl7~cef-3-em-4-carboxylaat.

De in de titel genoemde verbinding (1,18 g) werd volgens de methode van voorbeeld lc) onder toepassing van 15 het eerste produkt van stap b) (het Z-isomeer) als een schuim verkregen en deze had de waarden v/' (CHBr_) 3400, 3270, j i (NH), 2200 (C=C), 1790 (^-lactam), 1730 (Oyi), 1680, 1526 cm (-C0NH-); X (GDC13) 3,25 (CH=CH-C=C), 4,42 (CH=CH-C=C), 5,72 6,15 (2-CH2), 7,64 (Q^CHg), 8,84 (CH^).

20 (e) (6R,7R)-7-/Tz)-2-(Aminothiazool-4-yl)-2-(carboxymethoxy-imino)-aceetamido7~3-ZtE)-hex-1-een-3-ynyl7cef-3-em-4-carbon-zuur.trifluoracetaat.

25 Men bereidde 113 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim volgens de methode van voorbeeld le) onder toepassing van het produkt van stap c) met als waarden:

ψ (Nujol) 1770 ( A -lactam); “ίΤ (DMS0-d6) waarden waar-max L

onder 0,46 (-C0NH), 2,94 (-CH=CH-CsC), 3,93 (-CH=CH-C=C), 4,16 30 (7H), 4,77 (6H), 5,36 (-OCH^OOH), 7,61 (CsC-Cg2) en 8,87 (c=c-ch2ch3).

(f) (6R,7R)-7-/%Z)-2-(2-Aminothiazool-4-yl)-2-(carboxymethoxy-imino ) -acee tamido7-3- βΧ) ~hex-1 -een-3-yny l7-ce£-3-em-4-carb on- 35 zuur.trifluoracetaat.

8301324 -48-

Men verkreeg 284 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim volgens de methode van voorbeeld le) onder toepassing van 1,108 g van het produkt van stap d), welke verbinding de volgende waarden had: (Nujol) 3280 (NH) , max 5 1770 -lactam); "f (DMS0-d6) waarden omvatten 0,45 (-C0NH-), 3,26 (-CH-CH-C=C), 4,25 (-CH=CH-CsC-), 4,15 (7H), 4,73 (6H), 5,34 (-0CH2C02H), 7,58 (CsC-Cg ), en 8,86 (-CsC-CH2CH3).

(g) (6R,7R)-7-/"(Z)-2-(2-Aminothiazool-4-yl)-2-(carboxymethoxy-10 imino)-aceetamido7-3-£(Z)-hex-l-een-3-ynyl7cef-3-em-4-carbon-zuur.hydrochloride.

Men behandelde een geroerde oplossing van het produkt van stap b) in 0,8 ml mierezuur met 56 ^ul 11 M zout-15 zuur. Na 2 uren en 30 minuten filtreerde men het reaktiemengsel en druppelde het filtraat toe aan 50 ml krachtig geroerde ether.

Het neergeslagen vaste produkt werd afgefiltreerd, gewassen met ether en onder verminderde druk gedroogd, waardoor men 78 mg van de in de titel genoemde verbinding als een vast pro-20 dukt verkreeg. Vs (Nujol) 3280 (HZË), 2200 (C=C) , 1776

HlclX * (-lactam); 'j' (DMS0-d6) waarden omvatten 0,27 (NH), 3,24 (-CH=CH-C=C), 4,24 (-CH-CH-C·), 4,17 (7H), 4,72 (6H), 5,28 (0CH2C02H), 7,68 (C=C-CH2) en 8,86 (C=C-CH2CH3).

25 Voorbeeld 6 a) Difenylmethyl (6R,7R)-7-£,(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy-imino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidoJ-3-/~(Z)-4-(trimethylsilyl)but-l-een-3-ynyl7-cef-3-em-4-carboxylaat en 30 difenylmethyl (GR,7R)-7~/yZ) 2-(t-butoxycarbonylmethoxyimino)- 2-(2-tritylaminothiazool·-4-yl·)-aceetamido7-3-/'(E)-4-(trimethylsilyl)-but-1-een-3-ynyl7cef-3-em-4-carboxylaat.

Men behandelde een geroerde oplossing van 2,70 g 35 van het produkt van bereiding 1 in 30 ml dichloormethaan met 35 0 1 3 2-4 -49- , 5 ml van een verzadigde oplossing, van natriumbicarbonaat. Daar na voegde men 0,545 g (trimethylsily^propynal (waarvan de bereiding is beschreven in Tett. Lett. 1973 p3963) toe en roerde het mengsel 3 uren en 30 minuten. Vervolgens voegde men 10 ml 5 water en 20 ml dichloormethaan toe en scheidde de twee fasen.

De organische fase werd gewassen met 50 ml 2 N zoutzuur, 50 ml water en 50 ml van een natriumchlorideoplossing en gedroogd boven natriumsulfaat. Het oplosmiddel werd verwijderd en het residu werd gechromatografeerd, waardoor men een mengsel van 10 de in de titel genoemde verbindingen in de vorm van een schuim (1,02 g) verkreeg. Het mengsel van isomeren werd door onder matige druk uitgevoerde chromatografie over 150 g silicagel gescheiden. Door elueren met een mengsel van ethylacetaat en benzine (1:3 —^ 1:2) verkreeg men de verbinding die 15 het eerst in de titel werd genoemd als een schuim (0,34 g), V (CHBrJ 3400, 3270 (NH), 2135 (C=C), 1790 cm"1 {β lactam),

ΙΠ5Χ <3 J

(CDClg) waarden omvatten 1,38 (C0NH), 3,23 (GH=CHC=C), 4,45 (CH=CH-C=C) 4,13 (7H), 4,92 (6H), 5,21, 5,32 (OCH^O^), 9,82 (SiiCH^)^)· Door verdere elutie verkreeg men 0,09 g van 20 een gemengde fraktie. Door verdere elutie verkreeg men de verbinding die als tweede in de titel is genoemd als een schuim (0,21 ζ),ψ (CHBrJ 3400, 3260 (NH)V 2150 (CsC), 1790 cm"1 max o (β -lactam); χ (CDCl^) waarden omvatten 1,36 (CONH), 4,19 (-CH=CH~C=C), 4,12 (7H), 4,93 (6H), 5,21, 5,32, (OCH^O), 9,80 25 (Si(CH3)3).

(b) Difenylmethyl (6R,7R)-7-jXz)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy-imino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7-3-/'(Z)-but-I-een-3-ynyl~7 cef-3-em-4-carboxylaat.

30

Men voegde in een stikstofatmosfeer, in het donker en onder koelen met een ijsbad een oplossing van 190 mg zilvernitraat in 2 ml water toe aan een geroerde oplossing van 378 mg van het eerste produkt van stap a) in 20 ml ethanol.

35 Na 75 minuten loste men de lichtgele suspensie op in 50 ml di- 8501324 -50- chloormethaan en behandelde, onder krachtig roeren, de verkregen, gele oplossing met 8 ml van een 5 % kaliumcyanideoplossing, snel gevolgd door 30 ml water. Na enkele minuten werden de twee lagen gescheiden en de waterige fase werd geextraheerd met di-5 chloormethaan. De samengevoegde organische extrakten werden gewassen met water en een natriumchlorideoplossing en gedroogd.

Het oplosmiddel werd verwijderd en het residu we.rd gezuiverd door chromatograferen, waardoor men 241 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim verkreeg, V* (CHBr_) . mEx j 10 3400, 3300 (NH), 1790 cm (β -lactam); χ (CDCl^) waarden omvatten 1,38 (CONH), 3,17 (-CH=CH-C=C), 4,46 (-CH=CH-C=C), 5,19, 5,31 (-0CH2C02), 6,64 (C=C-H).

c) Difenylmethyl (6R, 7R)-7-/"(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy-15 imino)-2-(2-(tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidq7-3-/ljE)-but-l-een-3-ynyl7~cef-3-em-4-carboxylaat.

Volgens de methode van stap b) werd uitgaande van 243 mg van het tweede produkt van stap a) de in de titel 20 genoemde verbinding bereid, welke verbinding de volgende waarden

had, ψ (CHBrJ 3400, 3300, (NH), 1790 cm"1 (/9 -lactam), max o J

X (CDC13) waarden omvatten 1,35 (CONH), 4,25 (CH=CH-C=C), 4,10 (7H), 4,92 (6H), 5,20, 5,31 (0CH2C02), 6,51 (C=C-H).

25 d) (6R,7R)-7-/*(Z)-2-(2-Aminothiazool-4-yl)-2-(carboxymethoxy-imino)-aceetamido7-3-/~(Z)-but-l-een-3-ynyl7cef-3-em-4-carbon-zuur.trifluoracetaat.

De in de titel genoemde verbinding (432 mg) 30 werd volgens de methode van voorbeeld le) verkregen uit 1033 mg van het produkt van stap b) en deze had de volgende waarden:

Vs (Nujol) 3280 (NH), 1772 cm"1 ( A -lactam); X (DMS0-d6) max f waarden omvatten 0,42 (CONH), 3,16 (-CH=CH-C=C-), 4,22 (-CH=CH-C=C), 4,15 (7H), 4,72 (6H), 5,35 (OCH^-), 5,48 (C=C-H).

35 05 0 13 24 -51-

Voorbeeld 7 a) Difenylmethyl (6R, 7R)-7-/^Z) -2-methoxycarhon.ylmethoxyimino- 2-(2-tritylamin.othiazool-4-yl)aceetamida7~~3-/r(E)“pent-l-een-3-5 ynyj7cef-3-em-4-carboxylaat.

Men druppelde bij -15° C, in een stikstofatmosfeer en onder roeren een oplossing van 0,14 ml oxalylchloride in 2 ml dichloormethaan gedurende 5 minuten toe aan een oplos-10 sing van 0,17 ml dimethylformamide in 7 ml dichloormethaan.

Daarna roerde men deze oplossing bij £-5° C zodra een wit neerslag werd gevormd. Dit mengsel werd afgekoeld tot -10° C en men voegde in een portie 0,83 g (Z)-2-(methoxycarbonylmethoxy-imino)-2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)azijnzuur toe. Dit loste 15 op, waardoor een heldere, bruine oplossing werd verkregen die, voor weer afkoelen tot -10° C, 30 minuten bij -5° C werd geroerd. Ondertussen werden bij -25° C 0,42 ml N,N-dimethyl-aniline en 0,20 ml triethylamine aan een oplossing van het produkt van bereiding 7 in 11 ml dichloormethaan toegevoegd.

20 De oplossing van de aktieve zijketen werd toegevoegd en men liet de temperatuur van het mengsel gedurende 2 uren en 30 minuten oplopen tot 10° C. Vervolgens werden 21 ml water toegevoegd en de lagen werden geschud. De organische laag werd afgescheiden en respektievelijk gewassen met 2 N zoutzuur, water, 25 een waterige oplossing van natriumbicarbonaat en een verzadigde oplossing van natriumchloride. De organische fase werd gedroogd boven natriumsuIfaat en ingedampt. Het produkt werd gezuiverd door chromatograferen over silicagel onder elutie met een mengsel van ethylacetaat en benzine, waardoor de in 30 de titel genoemde verbinding als een schuim werd verkregen (0,81 g), \Λ max (CHBr3) 3393, 3280 (NH), 2215 (CsC), 1787 cm_I ( β -lactam); (CDCl^) waarden omvatten 1,78 (C0NH), 4,10 (7H), 4,20 (-CH=CH-C=C), 4,92 (6H), 5,12 (-0CH2C02), 6,25 (-co2ch3), 8,00 (c=c-ch3).

35 O S f* *3 rJ> * v x- « -52- b) (6R,7R)-7-,ffiZ)-2-methoxycarbonylmethoxyimino-2-(2-aminothia-zool-4-yl)aceetamidQ7-3“Z(E)-pent-l-een-3—ynyffi-cef-3-em-4-car-boxylaat.

5 Hen voegde 6 ml water toe aan een oplossing van het produkt van stap a) in 15 ml mierezuur en verhitte het mengsel 15 minuten, op 50° C. Daarna liet men de suspensie a£-koelen tot kamertemperatuur en filtreerde. Het vaste produkt werd gewassen met een mengsel van mierezuur en water (3:1) 10 en de gecombineerde wasvloeistoffen en filtraat werden ingedampt, waardoor een lichtbruine gom werd verkregen. Deze gom werd behandeld met ether en het verkregen vaste produkt werd afgefiltreerd, gewassen met ether en onder verminderde druk gedroogd, waardoor 0,33 g van de in de titel genoemde verbinding 15 als een wit, vast produkt werd verkregen, Y1 (Nujol) 3320 (NH), 2220 (C=C), 1770 cm (^ -lactam) ; X (DMS0-d6) waarden omvatten 0,45 (C0NH), 2,94 (-CH=CH-C=C), 3,96 (-CH=CH-C=C), 4,20 (7H), 4,79 (6H), 5,31 (-0CH2C02), 6,31 (-C02CH3), 8,00 (c=c-ch3).

20

Voorbeeld 8 a) Difenylmethyl (6R,7R)-7-(2-thienyl)aceetamido-3-£(E en Z)-4-fenyl-2-buteen-3-ynyl?-cef-3-em-4-carboxylaat.

25

Men voegde difenylmethyl (6R,7R)-7-(2-thienyl-aceetamido)-3-(trifenylfosforanylideenmethyl)cef-3-em-4-carboxy-laat (de bereiding hiervan is beschreven in het Britse octrooi-schrift 1342241) (4,69 g) in porties gedurende 4 uren en 30 uren 30 toe aan een geroerde oplossing van 3,75 ml fenylpropynal in 50 ml dichloormethaan. Na nog 21 uren roeren verdunde men het mengsel met 100 ml dichloormethaan en waste twee malen met telkens 150 ml van een 10 % oplossing van natriummetabisulfiet in water en 150 ml van een natriumchlorideoplossing. Na drogen 35 boven natriumsulfaat werd het oplosmiddel verwijderd en het residu 33 0 1 3 2 4 -53- chromatografisch gezuiverd over 200 g silicagel. Door elutie met mengsels van ethylacetaat en dichloormethaan verkreeg men de in de titel genoemde verbindingen (3:2) als een oranje, vast produkt (2,12 g), V* (Nujol) 3280 (NE), 2180 (CrC), 1777 cm”1 max — 5 (^-lactam); IT (CDCl^) waarden omvatten 3,49, 3,58 (CONH), 3;15 ((Z)-CH=CH-C=C), 4,00 ((E)-CH=CH-C=C), 4,22 (Z)-CH=CH-CrC).

b) Difenylmethyl (lS,6R,7R)-7-(2-thienyl)aceetamido-3-/~(Z)-4-£enyl-l-huteen-3-ynyl2-cef-3-em-4-carboxylaat.1-oxyde en difenyl- 10 methyl (IS,6R, 7R)-7-(2-thienyl)aceetamido-3-iT(E)-4-£enyl-l-buteen- 3-ynylZ cef-3-em-4-carboxylaat.1-oxyde.

De in de titel genoemde verbindingen werden bereid uit het produkt van stap a) (365 mg) volgens de methode 15 van voorbeeld 1b) . Het ruwe produkt werd chromatografisch gezuiverd over 20 g silicagel, onder elutie met een mengsel van ethylacetaat en dichloormethaan (1:19). Door elueren van de kolom verkreeg men eerst de verbinding die het eerst in de titel is genoemd (het Z-isomeer) als een vast produkt (175 mg), 20 ^max (Nujol) 3280 (NH)’ 2180 (CsC>» 1778 cm_I C β -lactam); X (DMS0-d6) waarden omvatten 1,54 (CONH), 3,11 (-CH=CH-CaC), 4,02 (7H en -CH=CH-CmC), 4,91 (6H). Door verdere elutie verkreeg men de verbinding die als tweede in de titel is genoemd (het E-isomeer) als een vast produkt (93 mg), \f~ (Nujol) . ΤΏΑΧ 25 3300 (NH), 2185 (C=C), 1796 cm ( β -lactam); >T (DMS0-d6) waarden omvatten 1,46 (CONH), 3,60 (-CH=CJï-C=C), 4,00 (7H), 4,93 (6H).

c) Difenylmethyl (6R,7R)-7-(2-thienyl)aceetamido-3-/~(Z)-4-£enyl-30 l-buteen-3-ynyl2~cef~3-em-4-carboxylaat.

Men druppelde bij -40° C en in een stikstof-atmosfeer een oplossing van 0,12 ml fosfortribromide in 5 ml dichloormethaan toe aan een geroerde oplossing van 719 g van 35 het eerste produkt van stap b) (het Z-isomeer) in 60 ml di- Λ 1 ** Λ £ '/ w 6 -54- chloormethaan. Na 15 minuten liet men de temperatuur vaihet reaktiemengsel gedurende 60 minuten oplopen tot 0° C en hield het, alvorens het uit te gieten in 100 ml van een ijskoude, verzadigde natriumbicarbonaatoplossing, 60 minuten op een tem- 5 peratuur tussen 0 en 5° C. Vervolgens voegde men 125 ml dichloor- methaan toe en scheidde de twee lagen. De organische fase werd gewassen met 150 ml 2 N zoutzuur en 150 ml van een natriumchloride- oplossing en gedroogd boven natriumsulfaat. Het oplosmiddel werd verwijderd en het residu werd chromatografisch gezuiverd 10 over 40 g silicagel. Door elutie met een mengsel van ethyl- acetaat en dichloormethaan (1,19) verkreeg men 347 mg van de

in de titel genoemde verbinding als een vast produkt. V

i max (CHBr^ 3400 (NH), 2185 (C=C), 1788 cm (fi -lactam); X (CDC13) waarden waaronder 3,14 (-CH=CH-C=C), 3,56 (NH), 4,18 (7H), 15 4,22 (-CH=CH-C=C), 5,00 (6H).

d) Difenylmethyl (6R,7R)-7-(2-thienyl)aceetamido-3-.£(E)-4-fenyl-1-buteen-3-ynyl7 cef-3-em-4-carboxylaat.

20 Men bereidde 206 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim uit het tweede produkt van stap b) (het E-isomeer), volgens de methode van stap c) en deze had de volgende waarden: V (CHBr„) 3400 (NH), 2195 (C=C), 1786 cm (p -lactam); X (CDCl^) waarden waaronder 3,62 25 (CONH), 3,98 (-CH?CH-C=C), 4,16 (7H) ,5,01 (6H), 6,17 (-CH^O).

e) (6R,7R)-7-(2-thienyl)-aceetamido-3-/~(Z)-4-fenyl-l-buteen-3-ynylj cef-3-em-4-carbonzuur.

30 Een geroerde oplossing van het produkt van stap c) in 0,5 ml anisool werd behandeld met 2,0 ml TFA. Na 15 minuten werd de oplossing ingedampt en het residu werd opgelost in 10 ml ethylacetaat. Men waste de oplossing twee malen met telkens 20 ml van een verdunde natriumbicarbonaatoplossing.

35 De samengevoegde waterige extrakten werden gewassen met 10 ml q e n 1 V v •ü’ ij 3 V i» "b -55- ethylacetaat en daarna door toevoegen van 2 N zoutzuur, in aanwezigheid van 25 ml ethylacetaat, aangezuurd tot pH 2. De twee lagen werden afgescheiden en de waterige fase werd geëxtraheerd met 25 ml ethylacetaat. De samengevoegde organische 5 extrakten werden gedroogd boven natriumsulfaat en ingedampt, waardoor men 122 mg van de in de titel genoemde verbinding als een vast produkt verkreeg;γ (Nujol) 3280 (NH), 2180 (CsC),

« H3X

1776 cm -lactam); ΐ- (DMS0-d6) waaronder 0,84 (NH), 3,08 (-CH=CH-CsC), 3,97 (-CH=CH-C=C), 4,24 (7H), 4,74 (6H).

10

Voorbeeld 9 a) Difenylmethyl-(6R, 7R)-7-(2-thienyl)aceetamido-3-/XE en Z)-pent- 1-een-3-ynyfl cef-3-em-4-carboxylaat.

15

Men voegde in een stikstofatmosfeer 1,00 g difenylmethyl(6R,7R)-7-(2-thienylaceetamido)-3-(trifenyl-fosforanylideenmethyl)cef-3-em-4-carboxylaat in porties en gedurende 1,5 uur toe aan een geroerde oplossing van 0,48 ml 20 2-butynal in 10 dichloormethaan. Na nog eens 2! uren roeren verwijderde men het oplosmiddel en de overmaat aldehyde en zuiverde het residu chromatografisch over 40 g silicagel.

Door elutie met een mengsel van ethylacetaat en dichloormethaan (1:19) verkreeg men de in de titel genoemde verbindingen 25 (3:2) als een vast produkt (0,20 g)^die als hun sulfoxyden bij de volgende proef werden gekarakteriseerd.

b) Dif enylmethyl (lS,6R,7R)-7-(2-thienyl)aceetamido-3-Z~(Z)-pent-l-een-3-ynyl3cef-3-em-4-carboxylaat.1-oxyde en difenylmethyl 30 (lS,6R,7R)-7-(2-thienyl)aceetamido-3-/*(E)~Psiit-l-een-3-ynyl7-cef-3-em-4-carboxylaat.1-oxyde.

De in de titel genoemde verbindingen werden volgens de methode van voorbeeld lb) bereid uit 185 mg van 35 het produkt van stap a). Het ruwe produkt werd chromatografisch Λ ? i. -1 t", J,

O Xj * u S

-56- gezuiverd over 20 g silicagel, Door elutie met een mengsel van ethylacetaat en dichloormethaan (1:7) verkreeg men 84 mg van de verbinding die het eerst in de titel is genoemd (het Z-isomeer) als een vast produkt; Vs (Nujol) 3290 (NH), 1782

j 1H2p3C

5 cm ( ^?-lactam); "C (DMS0-d6) waarden omvatten 1,50 (NH), 2,32 (-CH-CH-CsC), 4,04 (7H), 4,32 (-CH=CH-C=C), 4,97 (6H) , 7.99 (CsC-CH^). Door verdere elutie verkreeg men de verbinding die als tweede in de titel is genoemd (het E-isomeer) als een vast produkt (37 mg), ·£· (DMS0-d6) waarden omvatten 1,51 (NH), 10 2,94 (-CH=CH-C-C), 3,92 (-OT=CH-C=C), 4,06 (7H), 4,99 (6H) , 7.99 (CsC-CH3).

Voorbeeld 10 15 a) Difenylmethyl (6R,7R)-7-(2-thienyl)aceetamido-3-ÜE en Z)-4-trimethylsilyl)but-1-een-3-yny17cef-3-em-4-carboxylaat.

Men voegde 1,00 g difenylmethyl (6R,7R)-7-(2-thienylaceetamido)-3-(trifenylfosforanylideenmethyl)cef-3-em-4-20 carboxylaat in porties gedurende een uur toe aan een geroerde oplossing van 0,33 g (trimethylsilyl)propynal in 10 ml dichloormethaan. Na nog 22 uren roeren dampte men het mengsel in en zuiverde het residu door chromatograferen over 40 g silicagel. Door elutie met een mengsel van ethylacetaat en dichloor-25 methaan (1:49) verkreeg men 0,13 g van de in de titel genoemde verbindingen (2:1) als een schuim, V (CHBr„) 3400 (NH),

j fficlX

1790 cm (-lactam); -£ (CDCl^) waarden omvatten 3,21 (-CH=CH-C=C-), 3,69 (NH), 4,19 (7H), 4,42 (-CH-CH-CaC), 4,99 (6H).

30

Voorbeeld 11 a) Difenylmethyl (6R,7R)-7-£,(Z)-2-(difenylmethoxycarbonyl-methoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7-3-/~(Z)-35 4-(trimethylsilyl)but-e-een-3-ynyl7-cef-3-em-4-carboxylaat en a 5 π 1 ^ -)-a V r V· hr/ Ö ƒ -57- difenylmethyl (6R, 7R)-7-/‘(Z ) - (difenyImethoxycarb onylmethoxyimino) - 2-(2-tritylaminothiazóol-4-yl)aceetamido7~3-/*(E) -4-(trimethy1-silyl)but-1-een-3-ynyr7-cef-3-em-4-earboxylaat.

5 De in de titel genoemde verbindingen werden volgens de methode van voorbeeld 6a) bereid uit 15,00 g van het produkt van bereiding 4 en 2,79 g (trimethylsilyl)propynal.

Het mengsel van de in de titel genoemde verbindingen dat bij de eerste chromatografische zuiverings-10 stap werd verkregen werd met behulp van onder matige druk uitgevoerde chromatografie over 1000 g silicagel gescheiden.

Door elutie met een mengsel van ethylacetaat en benzine (1:3 —2:5) verkreeg men de eerste, in de titel genoemde verbinding (het Z-isomeer) als een schuim (3,11 g), 15 V (CHBr0) 3390, 3290 (NH), 2140 (C=C), 1790 cnf1 (Δ -lactam), max 3 Γ ~C (CDCl^) waarden omvatten 1,90 (CONH), 3,16 (-CH=CH-C=C), 4,10 (7H), 4,37 (-CH=CH-C=C), 4,98 (6H), 4,95, 5,10 (-OCH CO -), 9,81 (Si(GH^)^)· Door verdere elutie verkreeg men een gemengde fraktie als een schuim (1,22 g). Door verdere elutie verkreeg 20 men 1,49 g van de verbinding die als tweede in de titel is genoemd (het E-isomeer) als een schuim, \f (CHBr~) 3390, 3280 (NH), 2130 (C=C), 1788 cm {j8 -lactam);^ (CDCl^) waarden omvatten (CONH), 4,09 (7H), 4,26 (-CH=CH-C=C), 4,95, 5,12 (OCH^ C02-), 5,01 (6H), 9,78 (Si(CH3)3).

25 b) Difenylmethyl (6R,7R)-7-Z~(Z)-2-(difenylmethoxy-carbonyl-methoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7-3-/'(E)-but-1-een-3-ynylZ-cef-3-em-4-carboxylaat.

30 De in de titel genoemde verbinding (1,01 g) werd volgens de methode van voorbeeld 6b) als een schuim bereid uit 1,795 g van het tweede produkt van stap a) (het E-isomeer) en vertoonde de volgende waarden: \T (CHBr„) 3400 (NH), max 3 3305 (CsC-H), 1790 cm (β -lactam) ;ίΓ (CDC13) waarden omvatten 35 1,93 (CONH), 4,06 (7H), 4*,33 (-CH=OÏ-C=C), 4,94, 5,14 (-OCH^O^), 'v i", 1 ..

-· V * V Cm V

t -58- 5.00 (6H), 6,85 (C=C-H).

c) (6R, 7R) -7-,Z~(Z)-2-(2-Aminothiazool-4-y1) -2-carboxy-methoxy-imno)-aceetamido7~3-/XE)-but:-l-een-3-ynyiy-cef-3-eiii-4-carbon-5 zuur.

Men druppelde 8 ml water toe aan een geroerde oplossing van 687 mg van het produkt van stap b) in 20 ml mierezuur en verhitte het mengsel 1 uur op 50° C. Onder af-10 koelen werd het mengsel gefiltreerd. Het filtraat werd geconcentreerd en toegedruppeld aan 300 ml krachtig geroerde ether. De moedervloeistoffen werd afgedecan.treerd en het vaste produkt werd gewassen met meer ether (300 ml). Het vaste produkt werd afgefiltreerd, goed gewassen met ether en onder 15 verminderde druk gedroogd, waardoor men 167 mg van de in de titel genoemde verbinding verkreeg, ^ (EtOH) 229 nm 18.100) en 312,5 nm 19.500), (aceton-d6) waarden omvatten 1,40 (C0NH), 2,57 (-CH=CH-C=C), 3,94 (-CH=CH-C=C-), 4.00 (7H), 4,70 (6H), 5,22 (-0CH2C02-), 6,36 (-(^C-H).

20

Voorbeeld 12 a) Difenylmethyl (6R, 7R)-7-/*(Z)-2-(difenylmethoxycarbonyl-methoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7-3-25 /~(E en Z)-hex-l-een-3-ynyl7cef-3-em-4-carboxylaat.

Het mengsel van de in de titel genoemde verbindingen (2:1, 0,81 g) werd bereid uit 1,91 g van het produkt van bereiding 4 en 0,23 g 2-pentynal, volgens de methode van 30 voorbeeld la) en dit had de volgende waarden: Vs (CHBr_) i mEx j 3400, 3280 (NH) , 1780 cm ( β -lactam); X. (CDCl^) waarden omvatten 1,98 (CQNH), 3,16 (-CH=CH-C=C), 4,12 (7H), 4,36 (-CH=GH-C=C), 4,99 (6H), 4,98, 5,10 (-OCH^O^), 7,66 (C=C-CH2-), 8,86 (c=c-ch2ch3).

35 8501324 -59- b) Difenylmethyl (lS,6R,7R)-7-^(Z)-2-(difenylmethoxycarbonyl-methoxyimino)-2-(2-tritylamino thiazoo1-4-y1)aceetamido7-3-/~CZ)-hex-l-een-3-ynyl7-cef-3~effl-4-carboxylaat, 1-oxyde en difenylmethyl (IS, 6R, 7R)-7-/*(Z)-2- (dif enylmethoxycarbonylmethoxyiroino)-2- (2-^ tri tylaminothiazoo 1-4-y 1) aceetamido ) -3-^(E ) -hex-1 -een-3-yny 1/- cef-3-em-4-carbo:icylaat,,1-oxyde.

De in de titel genoemde verbindingen werden volgens de methode van voorbeeld 1b) bereid uit het produkt jq van stap a). Door chromatograferen verkreeg men eerst de verbinding die het eerst in de titel is genoemd (het Z-isomeer) als een schuim (2,76 g), Y (CHBr ) 3390 (NH), 2205 (C=C), 1802 cm (ƒ5 -lactam); (CDCl^) waarden omvatten 2,12 (-C0NH), 3,04 (-CH=CH-C=C), 3,93 (7H), 4,38 (-CH=CH-C=C), 5,05 15 (-0CH2C02-), 5,51 (6H), 7,65 (C3C-CH2-) , 8,86 (C=C-CH2CH3).

Door verdere elutie verkreeg men 0,40 g van een gemengde fraktie als een gele schuim. Door verdere elutie verkreeg men de verbinding die als tweede in de titel is genoemd (het E-isomeer) als een schuim (1,15 g), V* (CHBr,) 3390 (NH), 2210 (C=C), « ÏÏ132C j 2q 1802 cm (jOr' -lactam); X (CDCl^) waarden omvatten 2,18 (-C0NH) , 3,94 (7H), 4,26 (-CH=CH-C=C), 5,07 (-OCH^O^), 5,54 (6H), 7,66 (-C=C-CH2), 8,83 (C=C-CH2-Cg3).

c) Difenylmethyl (6R,7R)-7-j~(Z)-2-(di£enylmethoxycarbonyl-23 methoxyimino^Z-^-tritylaminothiazool^-y^aceetamidoT-B-ifCE)-hex-l-een-3-ynyl7cef-3-em-4-carboxylaat.

Volgens de methode van voorbeeld lc) werd 0,89 g van de in de titel genoemde verbinding bereid als 33 een schuim uit het tweede produkt van stap b) met de volgende waarden: V max (CHBr3) 3400 (NH), 1790 cm 1 (^-lactam); -p (CDC13) waarden omvatten 1,95 (-C0NH), 4,10 (7H), 4,27 (-CH=CH-C=C), 5,00 (6H), 4,95, 5,13 (-0CH2C02-), 7,61 (C=C-CH2), 8,81 (C=C-CH2CH3).

35 35 0 1 '6ï -j --------- «ij -60- d) (6R,7R)-7-/Tz)-2-(2-Aminothiazool-4-yl)-2-carboxymethoxy- iTnino)-aceetamido7~3-/TE)-hex-l-een-3"yiiyi7cef~3"em-4-carbon- zuur.

• 5 Völgens de methode van voorbeeld 11c) werden 361 mg van de in de titel genoemde verbinding als een vast produkt verkregen uit 828 mg van het produkt van stap c), welke verbinding de volgende waarden had: V (Nujol) 3300 1 λ msx (NH), 2200 (CsC), 1770 cm -lactam); t (DMS0-d6) waarden 10 omvatten 0,48 (C0NH), 2,94 (-CH=CH-C=C), 3,92 (-CÏÏ=CH-C=C), 4,17 (7H), 4,77 (6H), 7,60 (C=C-CH2-), 8,87 (C=C-CH2CH3).

Voorbeeld 13 15 a) Difenylmethyl (6R,7R)-7-/'(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxyimino)- 2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidq7-3--/‘(Z)-5-ethoxy-5-oxo-pent-l-een-3-ynyl7cef~3-em-4-carboxylaat en difenylmethyl (6R,7R)-~7j~(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxyimino)-2-(2-tritylaminothia-zool-4-yl)-aceetamidq?-3-/(E)-5-ethoxy-5-oxo-pent-I-een-3-ynylJ-20 cef-3-em-carboxylaat.

Men voegde aan een oplossing van 3,30 g (6R,7R)-£l-((Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy)-imino-2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)aceetamido)-4-difenylmethoxycarbonylcef-3-em-3-ylmethyl7~ 25 trifenylfosfoniumjodide (volgens de methode van bereiding 1 bereid uit het 3-joodmethylanalogon) in 30 ml methyleenchloride 3,30 g van een oplossing van het produkt van bereiding 16 (bevattende 40 Z van het produkt van bereiding 15) in 16 ml methyleenchloride toe. Daarna voegde men 16 ml van een ver-30 vaardigde oplossing van natriumbicarbonaat in water toe en roerde het mengsel gedurende 18 uren. De organische fase werd afgescheiden en achtereenvolgens gewassen met 25 ml 2 N zoutzuur, 40 ml water en 40 ml van een natriumchlorideoplossing.

De organische oplossing werd gedroogd en ingedampt tot een 35 schuim (4,72 g), die werd gezuiverd door chromatograferen over

βκή 1 % s L

-61- 100 g silicagel^ onder elutie met chloroform dat 0,02 % ethyl-acetaat bevatte, waardoor 1,48 g van een schuim werd verkregen.

De schuim werd gecombineerd met meer materiaal (0,90 g) verkregen bij een overeenkomstige proef en werd onderworpen 5 aan onder matige druk uitgevoerde chromatografie over 150 g silicagel. Door elutie met een mengsel van ethylacetaat en benzine (2:1) verkreeg men de verbinding die het eerst in de titel is genoemd (het Z-isomeer) als een schuim (0,87 g), \Λ (CHBr.) 3395, 3262 (NH), 2203 (CsC), 1794 cm”1 (/J-lactam), ’ max j 7 10 T (CDC13) waarden omvatten 1,30 (CONH), 3,05 (CH=CH-C=C), 4,06 (7H), 4,43 (-CH=CH-C=C), 4,89 (6H), 5,24 (-OCH^O^.

Door verdere elutie verkreeg men 0,73 g van de verbinding die als tweede in de titel is genoemd (het E-isomeer) als een schuim, V (CHBrJ 3395, 3262 (NH), 2203 (CsC), _1 max 3 15 1795 cm (j£> -lactam). X (CDCl3)waarden omvatten 1,29 (CONH), 4,06 (7H), 4,21 (-CH=CH-CsC), 4,90 (6H), 5,20, 5,30 (-0CH2C02-).

b) (6R,7R)-7-ZTZ)-2-Carboxymethoxyimino-2-(2-aminothiazool-4-yl)- aceetamido7~3-/XZ)-5-ethoxy-5-oxo-pent-I-een-3-ynyl7-cef-3-em-20 carbonzuur.

Volgens de methode van voorbeeld le) bereidde men 0,33 g van de in de titel genoemde verbinding als een vast produkt uit het eerste produkt van stap a) (het Z-isomeer) met 25 de volgende waarden: Y" (Nujol) 3300 (NH), 2190 (C=C), nuix_* 1776 ( jS -lactam), 1720 cm (C02Et); (DMS0-d6) waarden om vatten 0,42 (-C0NH), 2,92 (-CH=CH-C=C), 4,05 (-CH;CH-C=), 4,11 (7H), 4,69 (6H), 5,37, (-OCH^-), 5,79 (CsC-CO^-).

30 c) (6R, 7R)-7-£tZ)-2-Carboxymethoxyimino-2-(2-aminothiazool-4-yl)- aceetamido7-3-/*(E )-5-ethoxy-5-oxo-pent-1 -een-3-yny XI cef-3-em-4-carbonzuur.

Volgens de methode van voorbeeld le) bereidde 35 men 0,18 g van de in de titel genoemde verbinding als een schuim Q 'j * O L· -62- (E-isomeer), .

uit het tweede produkt van stap a)/met de waarden: * (Nujol), 3280 (NH), 2190 (C=C), 1772 cm”1 ( $ -lactam);χ (DMS0-d6) waarden omvatten 0,41 (-C0NH-), 3,10 (-CH=CH-C=C), 3,73 (-CH=CH-C=C), 4,08 (7H), 4,71 (6H), 5,36 (-OCB^CO^), 5,78 5 (C=C-C02CH2-).

Voorbeeld 14 a) Difenylmethyl (6R,7R)-7-/>(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy- 10 imino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamido7-3-£’(E en Z)-5- difenyl-methoxy, 5-oxo-pent-1-een-3-ynylZcef-3-em-4-carboxy-laat.

Het mengsel van de in de titel genoemde ver- 15 bindingen (E:Z, 1:1) (0,24 g) werd volgens de methode van voorbeeld 13a) verkregen uit het produkt van bereiding 14 (0,24 g) inplaats van het produkt van bereiding 16, en had de waarden Γ (CHBrJ 3395, 3265 (NH), 2205 (C=C), 1795 cm"1 max 3 ( ^ -lactam) ; X. (CDCl^) waarden omvatten 1,26, 1,28 (-C0NH) , 20 4,06 (7H), 4,22 (-CH=CH-C=C), (E)), 4,43 (-CH-CI^-CsC-,(Z)), 4,91 (6H), 5,26 (-0CH CO -) .

b) (6R,7R)-7-/]tZ)-2-Carboxymethoxyimino-2-(2-aminothiazool-4-yl)-aceetamido7-3-/XE) en (Z) )-4-carboxy-but-l-een-3-ynyiQcef- 25 3-em-4-carbonzuur.

Onder roeren en bij 5° C werd 0,50 g van het produkt van stap a) in 1 ml anisool behandeld met 4,33 ml trifluorazijnzuur. Na 30 minuten werd het mengsel toege-30 druppeld aan 300 ml snel geroerd water. De verkregen suspensie werd afgefiltreerd, gedeeltelijk ingedampt en tenslotte gevriesdroogd, waardoor men 70 mg van de in de titel genoemde verbindingen als een schuim verkreeg (E:Z, 1:1); V

1 XTlcxX

(Nujol) 3300 (NH), 2200 (C=C), 1776 cm (^ -lactam) , ^ (DMS0-d6) 35 waarden omvatten 0,43 (-C0NH), 2,66 (-CH=CH-C=C, (E)) 2,96 3 s λ 1 3 9 4 -63-

J I

(-CH=CHC=C (Z)), 3,76 (-CH=CH-C=C, (E)), 4,08 (-CH=CH-C=C, (Z)), 4,12 (7H), 4,69 (7H), 4,69 (6H), 5,38 (-OCH^CO^).

Voorbeeld 15 5 a) Difenylmethyl (6R, 7R)-7-formamido-3-/XZ ) -hex-1 -een-3-ynyl7~ cef-3-em-4-carboxylaat.

Men behandelde een geroerde oplossing van 15,00 g 10 (6R, 7R) -/4-difenylmethoxycarbonyl-7-formamidocef-3-em-ylmethyl7- trifenylfosfoniumbromide (waarvan de bereiding is beschreven in het Britse octrooischrift 1342241) in 250 ml dichloormethaan met 75 ml van een verzadigde natriumbicarbonaatoplossing. Na enkele minuten voegde men in een portie 3,28 g 2-pentynol toe 15 en roerde het mengsel ongeveer 19 uren. De twee lagen werden gescheiden en de organische fase werd gewassen met 250 ml 2 N zoutzuur, 250 ml water en 250 ml van een natriumchloride- oplossing en gedroogd boven natriumsulfaat. Het oplosmiddel werd verwijderd en het residu werd gezuiverd door chromatogra- 20 feren over 750 ml silicagel. Door elutie met een mengsel van ethylacetaat en dichloormethaan (1:19 —? 1:14) verkreeg men 1,72 g van de in de titel genoemde verbinding als een vast produkt, (CHBr0) 3410 (NH), 2200 (CsC), 1783 cm"1 max j ( P>-lactam); X (CDCl^) waarden omvatten 1,76 (H-CO), 3,26 25 (-CH=CH-C=C), 3,54 (NH), 4,14 (7H), 4,42 (-CH=CH-C-), 4,98 (6H), 7,66 (C=C-CH2-).

b) Difenylmethyl (6R, 7R)-7-formamido-3-/~(E)-hex-l-een-3-ynylJ-cef-3-em-4-carboxylaat.

30

Men verhitte een oplossing van 1,19 g van het produkt van stap a) en een kristal jodium in 100 ml tolueen en verhitte gedurende 5 uren en 45 minuten onder terugvloei-ing, waarbij na 2 uren en 4 uren enkele verse kristallen 35 jodium werden toegevoegd. Het oplosmiddel werd verwijderd en het O 0 ‘J 5 0 d. *4 -64- residu werd gezuiverd door chromatograferen over 50 g silicagel.

Door elutie met een mengsel van ethylacetaat en dichloormethaan (1:9) verkreeg men 0,24 g van een mengsel. Door verdere elutie verkreeg men 0,66 g van de in de titel genoemde verbinding als 5 een vast produkt, V* (CHBr„) 3410 (NH), 2205 (C=C), 1784 cm * max 3 ( ^-lactam) Τ' (CDCl^) waarden omvatten 1,82 (HC0), 3,44 (NH)', 4,13 (7H), 4,20 (CH=CH-C=C), 5,04 (6H), 7,67 (CbC-CH2).

c) Difenylmethyl (6R,7R)-7-amino-3-.£*(E)~hex-l-een-ynyl7-cef-3-10 em-4-carboxylaat.hydrochloride.

Men druppelde onder koelen met een ijsbad aan een geroerde suspensie van 633 mg van het produkt van stap b) in 5 ml methanol en 5 ml ether (250 ^ul) fosforoxychloride 15 toe. Na 90 minuten verwijderde men het ijsbad en roerde nog 40 minuten bij kamertemperatuur. De oplossing werd geconcentreerd en toegevoegd aan 75 ml krachtig geroerde ether. Het neergeslagen vaste produkt werd afgefiltreerd, goed met ether gewassen en onder verminderde druk gedroogd, waardoor men 442 mg 20 van de in de titel genoemde verbinding als een vast produkt verkreeg, ^ (Nujol) 2600 (NH ), 2200 (C=C), 1783 cm"1

BlclX -3 ( j£ -lactam), ~C (DMS0“d6) waarden omvatten 2,93 (CH=CH-C-C), 3,74 (-CH«CH-C=C), 4,66, 4,78 (6H,7H), 7,60 (-C=C-CH2).

25 d) Difenylmethyl (6R,7R)-7-/T(Z)-2-difenylmethoxycarbonyl- methoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidqiZ-3-/T(E)-hex-l-een-3-ynyl7'-cef-3-ein-4-carboxylaat.

Volgens de methode van voorbeeld 3a) bereidde 30 men 224 g van de in de titel genoemde verbinding als een schuim uit 423 mg van het produkt van stap c), welke verbinding de volgende waarden had: V (CHBr ) 3400 (NH), 1790 cm (β -lactam); 'C (CDCl^) waarden omvatten 1,95 (-C0NH), 4,10 (7H), 4,27 (-CH-QH-CaC), 5,00 (6H), 4,95, 5,13 (-OCH^-), 35 7,61 (CaC-CH-).

•j ύ n i „ ,> J i 0 L *ϊί a) Difeny line thy 1 (6R,7R)-7-/~(Z)-2-(tritylóxyimino)-2-(2-trityl“ aminothiazool-4-yl)aceetamidg7-3-/'(E)-pent-l-een-3-ynyl7cef-3- 5 em-4-carboxylaat.

-65-

Voorbeeld 16

Men druppelde bij -15° C en in een stikstof-atmosfeer een oplossing van 0,14 ml oxalylchloride in 2 ml dichloormethaan gedurende 10 minuten toe aan een geroerde op-10 lossing van 0,3 ml dimethylformamide in 3 ml dichloormethaan.

Na 30 minuten bij een lagere temperatuur dan -5° C koelde men de witte suspensie af tot -10° C en voegde in een portie 1,126 g (Z)-2-(trityloxyimino)-2-(2-tritylamino-4-thiazolyl) azijnzuur toe. Men hield de heldere, gele oplossing 30 minuten bij -5tot0 C, 15 voordat men haar tot -10° C afkoelde. Vervolgens voegde men deze oplossing bij -25° C gedurende 1 minuut toe aan een geroerde oplossing van het produkt van bereiding 7 en 0,64 ml Ν,Ν-dimethylaniline in 5 ml dichloormethaan. Men liet de temperatuur van het reaktiemengsel gedurende 1 uur en 30 minuten 20 oplopen tot 5° C en verdeelde het tussen 100 ml dichloormethaan en 100 ml 2 M zoutzuur. De organische fase werd afgescheiden, gewassen met 2 M zoutzuur, water, een natriumbicarbo-naatoplossing, water en een natriumchlorideoplossing (elk 100 ml) en droogde boven natriumsulfaat. Het oplosmiddel werd 25 verdampt en het residu werd gezuiverd door chromatograferen over 60 g silicagel. Door elutie met een mengsel van ethyl-acetaat in dichloormethaan (1:50) verkreeg men 1,25 g van de in de titel genoemde verbinding als een schuim, X. (EtOH) 321,5 nm ( C 26.300); V* (CHBrJ 3400 (NH), 2220 (C=C),

1 ^ ΙΠ3.Χ J

30 1790 cm (^ -lactam); ~C (CDCl^) waarden omvatten 3,97 (7H), 4,28 (-CH=CH-C=C), 4,92 (6H), 8,02 (CsC.CH^.

b) (6R, 7R)-7-/*(Z ) -2- (Hydroxyimino )-2-( 2-amino thiazoo 1-4-y 1) -aceetamido2~3-£(E)-pent-1-een-3-yny12cef-3-em-4-carboxylaat.

35 trifluoracetaat.

* 5 rt f • · ,-¾ -4 -66-

Men voegde 8 ml TFA' toe aan een geroerde oplossing van 1,16 g van het produkt van stap a) in 2 ml anisool.

Na 45 minuten druppelde men het reaktiemengsel toe aan 100 ml snel geroerd water.Na 5 minuten werd de waterige oplossing 5 gewassen met ether (4 x 100 ml), waarbij elke keer werd teruggewassen met 10 ml water. De waterige oplossing werd geconcentreerd 100 ml, waarna men door vriesdrogen 143 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim verkreeg. De ether-extrakten werden ingedampt en het residu werd behandeld met 10 4 ml TFA en 1 ml anisool, zoals hiervoor vermeld, waardoor meer van de in de titel genoemde verbinding als een schuim (181 mg) werd verkregen, \Λ (Nujol) 3280 (NH), 2210 (C=C), _ I ΠΙβΧ 1770 cm ( β -lactam); (DMS0-d6) waarden omvatten 0,46 (C0NH), 2,93 (-CH=CH-C=C), 1,19 (7H), 4,79 (6ïï), 7,98 (C=C-CH3). 15

Voorbeeld 17 a) Difenylmethyl (6R,7R)-7-/~(Z)-2-(ethoxyimino)-2-(2-tritylamino-thiazool-4-yl)aceetamidq7-3-/|'(E)-pent-l-een-3-ynylJcef-3-em-4-20 carboxylaat.

Volgens de methode van voorbeeld 16a) bereidde men 582 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim uitgaande van 755 mg" (Z)-2-(ethoxyitnino)-2-(2-trityl-\en 700 mg van het produkt van bereiding 1/.

25 aminothiazool-4-yl)azi'jnzuur,fmet de volgende waarden: Xi.

4 nicix (CHBr3) 3400 (NH), 2216 (C=j^ 1790 cm ( -lactam); < (CDC13) waarden omvatten 3,15 (C0NH), 4,06 (7H), 4,23 (-CH=CH-C=C), 4,93 (6H), 5,66 (-OCH^), 8,02 (CaC-CH3), 8,66 (0-CH2Qö3).

30 b) (6R,7R)-7-.£(Z)-2-(Ethoxyimino)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-aceetamidQ7-3-jf(E)-pent-l-een-3-ynyl2cef-3-em-4-carbon-zuur.

Volgens de methode van voorbeeld 7b) bereidde 35 men 288 mg van de in de titel genoemde verbinding als een vast Λ;; j 3 q ώ «j -67- produkt uit het produkt van stap a), welke verbinding de volgende waarden had: V* (Nujol) 3300 (NH), 2210 (CsC), 1770 cm ^ max (^ -lactam); (DMSO-dö) waarden 0,44 (CONH), 2,94 (-CR=CH-C=C), 3,93 (-CÏÏ=CH-CsC), 4,19 (7E), 4,78 (6H), 5,87 5 (-0CH2-), 7,98 (C=C-CH3), 8,73 (-OCH^).

Voorbeeld 18 a) Difenylmethyl (6R, 7R)-7-J_(Z) -2- (t-butoxycarbonyImethoxyimino) -10 2-(2-furyl)aceetamido7-3-£(E)-pent-l-een-3-ynyl_Zcef-3-em-4- carboxylaat.

Men voegde 582 mg (Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy-imino)-2-(2-furyl)azijnzuur, 338 mg 1-hydroxybenzotriazool.

15 hydraat en 516 mg N,N,-dicyclohexylcarbodiimide in deze volgorde toe aan een geroerde oplossing van het produkt van bereiding 8 in tetrahydrofuran (15 ml). Na 2 uren werd het reaktiemengsel gefiltreerd, het filtraat ingedampt en het residu opgelost in ethylacetaat en weer gefiltreerd. De ethyl-20 acetaat werd verdampt en het residu werd gezuiverd door chro-matograferen over 60 g silicagel. Door elutie met een mengsel van ethylacetaat en benzeen (1:10) verkreeg men 1,062 g van de in de titel genoemde verbinding als een schuim, (EtOH), 288,5 nm ( £ 19.600) en 326 nm ( 1 20.500); ^ max 25 (CHBr3) 3380, 3260 (NH), 2220 (CsC), 1790 cm"1 ( ^ -lactam); X (CDC13) waarden omvatten 1,32 (CONH), 4,08 (7H), 4,21 (-CH=CH-CSC); 4,89 (6H), 5,28 (-0CH2C02-), 8,02 (C=C-CH3).

b) (6R, 7R) - 7-fX.Z) -2- (Carboxymethoxyimino )-2-( 2-fury 1) aceetamidq7“ 30 3-/(E)-pent-l-een-3-ynyï7c££~3-em-4-carbonzuur.

Men voegde 8 ml TEA toe aan een geroerde oplossing van 992 mg van het produkt van stap a) in 2 ml anisool.

Na 45 minuten werd de oplossing ingedampt, het verkregen residu 35 azeotroop gedestilleerd met 20 ml tolueen en opgelost in ethyl- ... >. ' «-.·*/ ·. Λ ** ✓ V * - V j -68- 4 * acetaat. De organische oplossing werd drie malen geextraheerd met tèlkens 50 ml van een natriumbicarbonaatoplossing. De samengevoegde waterige extrakten werden gewassen met 100 ml ethylacetaat en met 2 M zoutzuur, onder 100 ml ethylacetaat, 5 aangezuurd tot pïï 1,5. De lagen werden gescheiden en de waterige fase werd twee malen geextraheerd met telkens 75 ml ethylacetaat. De samengevoegde organische extrakten werden twee malen gewassen met telkens 200 ml water, gedroogd boven natriumsulfaat en ingedampt, waardoor men 669 mg van de in de titel genoemde verbin-10 ding als een schuim verkreeg, Ϋ (Nujol) 3250 (NH), 2205 i mdx (C=C), 1770 cm (β -lactam); (DMS0-d6); waarden omvatten 0,24 (NH), 2,90 (-CH=CH-C=C), 3,91 (-CH=CH-C=C), 4,14 (7H), 4,72 (6H), 5,30 (-0CH2C02-), 7,96 (C=C-CH3).

15 · Voorbeeld 19 a) Difenylmethyl (6R,7R)- 7- AZ ) -2-(methoxyimino)-2-(2-fury1)-aceetamido7-3-/~(E)-pent-l-een-3-ynyl7cef-3-em-4-carboxylaat.

20 Hen bereidde 555 mg van de in de titel genoemde verbinding als een vast produkt uit 355 mg (Z)-2-(2-furyl)-2-(methoxyimino)azijnzuur en 886 mg van het produkt van bereiding 8, volgens de methode van voorbeeld 3a), welke verbinding de volgende waarden had: V* (CHBr„) 3400 (NH), 2220 (CsC), 25 1788 cm ( β -lactam); f (CDCl^) waarden omvatten 4,06 (7H), 4,19 (-CH-CH-C=C-), 4,91 (6H), 5,91 (-0CH3), 8,02 (CsC-CH^.

b ) ( 6R, 7R) -7-£~(Z) - 2- (Me thoxy imino )-2-( 2-f ury 1) acee tamido7-3-/~(E) -pent-1 -een-3-yny ij cef-3-em-4-carbonzuur.

30

Men bereidde volgens de methode van voorbeeld 18b) 318 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim uit 487 mg van het produkt van stap a), welke verbinding de volgende waarden had: Vs (Nujol) 3260 (NH), 2204 (CsC), i max 35 1778 cm ( β -lactam); (DMS0-d6) waarden omvatten 0,17 (NH), 5501324 -69- 2,89 (-CH=CH-C-C), 3,89 (-CH=CH-C=C), 4,14 (7H), 4,72 (6H) ,6,03 (-0CH3) 7,94 (-CaC-CÏÏ3).

Voorbeeld 20 5 a) Difenylmethyl (6R,7R)-7-/~(Z) 2-(2-t-butoxycarhonylprop-2-oxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidq7-3-£(E)-pent- 1- een-3-ynyl7cef-3-em-4-carboxylaat.

10 Men bereidde volgens de methode van voorbeeld 16a) 959 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim uit 1,143 ml (Z)-2-(2-t-butoxycarbonylprop-2-oxy imino)- 2- (2-tritylaminothiazool-4-yl)-azijnzuur en 827 mg van het produkt van bereiding 7, welke verbinding de volgende waarden 15 had: V* (CHBr0) 3400, 3260 (NH), 2220 (CsC), 1790 cm”1 * IHHX j ( & -lactam); Γ (CDC13) waarden omvatten 1,93 (CONH), 4,03 (7H), 4,24 (-CH=CH-CsC), 4,94 (6H), 8,03 (CsC-ay 8,47, 8,52 (CCCH^.

b) (6R, 7R)-7-/(Z)-2-(2-Carboxyprop-2-ozyimino)-2-(2-aminothiazool- 20 4-y 1) -aceetamido7-3-/~(E) -pent-1 -een-3-yny lJ-cef-3-em-4-carboxy- laat.

Men voegde bij 5° C 8 ml TFA.toe aan een geroerde m2 ml anisool./ oplossing van 914 mg van het produkt van stap a)ANa 15 minuten 25 bij 5° C en 30 minuten bij 20° C druppelde men het reaktiemengsel toe aan 200 ml snel geroerd water. Na 5 minuten werd de waterige fase vier malen gewassen met telkens 100 ml ether, geconcentreerd tot 150 ml en gevriesdroogd, waardoor men 20 mg van een lichtgele schuim verkreeg. De etherextrakten werden ingedampt en 30 het residu werd behandeld met 2 ml TFA, zoals hiervoor beschreven, waardoor men 80 mg van een lichtgele schuim verkreeg.

De etherextrakten werden geconcentreerd tot 2 ml en toegedruppeld aan 150 ml snel geroerde diisopropylether. Het verkregen neerslag werd afgefiltreerd, vijf malen gewassen met ether en 35 onder verminderde druk gedroogd, waardoor men 90 mg van een 35 on·..-.

-70- bijna wit poeder verkreeg. De hiervoor genoemde drie frakties waren volgens in de omgekeerde fase uitgevoerde dunnelaag-chromatografie (acetonitril:water, 1:4) identiek en werden samengevoegd, waardoor men 196 mg van de in de titel genoemde 5 verbinding verkreeg ν'(Nujol) 3300 (NH), 1778 cm * (ƒ? -lactam); *£ (DMS0-d6) waarden omvatten 0,56 (CONH), 2,94 (-CH=CH-C=C), 3,93 (-CH=CH-C=C-), 4,13 (7H), 4,75 (6H), 7,99 (C=C-CH3), 8,50 (-C(CH3)2).

10 Voorbeeld 21 a) Difenylmethyl (2R,6R,7R)-7-(2-thienyl)aceetamido-3-/~(l-hydroxy)but-3-ynyl7cef-2-em-4-carboxylaat.

15 Een oplossing van 50 m.mol vers bereide propar- gylmagnesiumbromide in 50 ml tetrahydrofuran werd bij -70° C en in een stikstofatmosfeer gedurende 30 minuten toegedruppeld aan een geroerde oplossing van 2,59 g difenylmethyl (2R,6R,7R)- 3-formyl-7-(2-thienylaceetamido)cef-2-em-4-carboxylaat in 20 30 ml tetrahydrofuran. Na 1 uur op -70° C te hebben gehouden werd het reaktiemengsel afgeschrokken door toevoegen van 50 ml van een verzadigde ammoniumchlorideoplossing. Bij verwarmen tot 0° C werd het reaktiemengsel verdeeld tussen 150 ml ethylacetaat en 150 ml 1 M zoutzuur. De lagen werden gescheiden 25 en de waterige fase werd twee malen geextraheerd met telkens 50 ml ethylacetaat. De samengevoegde organische extrakten werden gewassen met water, een natriumbicarbonaatoplossing en een natriumchlorideoplossing (telkens 200 ml ) en gedroogd boven natriumsulfaat. Het oplosmiddel werd verdampt en het 30 residu werd gezuiverd door chromatograferen over 150 g silica-gel. Door elutie met een mengsel van gelijke delen ethylacetaat en petroleumether verkreeg men de in de titel genoemde verbinding als een schuim (1,25 g),T(CDCl3) waarden omvatten 3,54 (NH), 4,44, 4,46 (7H, 2 diastereoisomeren), 4,86, 4,88 (6H), 35 4,75, 4,91 (4H), 6,16 (-CH CO), 7,56 (-CH^sC-H), 8,00 (C=C-H).

5 S 3* 1 " ^ i ij 'J » — < -71- b) Difenylmethyl (2R,6R,7R)-7-(2-thienyl)aceetamido-3-^(E en Z)~ but-1-een-3-ynyl?cef-2-em-4-carboxylaat.

Men. voegde bij 0° C het produkt van stap a) 5 toe aan een geroerde oplossing van 40 mg, 0,52 m.mol, methaan-sulfonzuuranhydride in 2 ml dichloormethaan. Na I minuut voegde men 0,15 ml (1,05 m.mol) triethylamine toe. Nadat men het reaktiemengsel 30 minuten op 0° C had gehouden verdunde men het reaktiemengsel met 50 ml ethylacetaat, waste het met 2 M 10 zoutzuur, water, een natriumbicarbonaatoplossing en een natrium-chlorideoplossing (telkens 50 ml) en droogde boven natrium-sulfaat. Het oplosmiddel werd verdampt en het residu werd gezuiverd door chromatograferen over 15 g silieagel. Door elueren met een mengsel van ethylacetaat en petroleumether (1:2) ver-15 kreeg men 85 mg van de in de titel genoemde verbinding als een schuim }s (EtOH), 302,5 nm (^_ 21.400); "C (CDCl^) waarden omvatten 3,51 (-CH=CK-C-C), 4,42 (-CH=CH-C=C), 4,47 (7H), 4,78 (6H), 4,81 (4H), 6,18 (-CH^CO), 7,01 (CsC-H).

De (E)- en (Z)-isomeren van deze verbinding 20 konden volgens gebruikelijke methoden worden gescheiden. De 2 3 f\ -isomeren konden daarna in de overeenkomstige Δ -isomeren worden omgezet en daarna van de beschermende groepen worden ontdaan, volgens gebruikelijke methoden, waardoor (6R,7R)-7-(2- thienyl)-aceetamido-3-X’(E)-but-l-een-3-ynylJcef-3-em-4-carbon- 25 zuur of het overeenkomstige (Z)-isomeer werd verkregen.

Voorbeeld 22 a) Difenylmethyl (6R,7R)-7-£(Z)-2-(t-butoxycarbonylmethoxy-30 imino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)aceetamidg?-3-/lE)-pent- 1-een-3-ynyl2cef-3-em-4-carboxylaat.

Men druppelde aan een geroerde oplossing van 2,5 ml dimethylformamide in 50 ml dichloormethaan, die in een 35 stikstofatmosfeer tot -15° C is afgekoeld, gedurende 5 minuten - - - : o a * *=» ·--* * -72- een oplossing van 1,20 ml oxalylchloride in 15 ml dichloor-methaan toe en liet de temperatuur van de verkregen suspensie gedurende 10 minuten oplopen tot -5° C. Daarna koelde mennet mengsel weer af tot -10° C en voegde 6,40 g (Z)-2-(2-t-butoxy-5 carbonylmethoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazool-4-yl)-azijnzuur als een suspensie in 3 ml dichloormethaan toe. De verkregen oplossing werd 30 minuten geroerd bij -5° C en werd daarna weer afgekoeld tot -10° C. Aan een geroerde oplossing van 5,50 g difenylmethyl (6R,7R)-7-amino-3-£(E)-pent-l-een-3-ynyÏ7-10 cef-3-em-4-carboxylaat, hydrochloride en 6,0 ml N,N-dimethyl- aniline in 45 ml dichloormethaan, die in een stikstofatmosfeer tot -25° C is afgekoeld., werd snel de oplossing van de geakti-veerde zijketen toegevoegd en men liet de verkregen oplossing gedurende 30 minuten opwarmen tot 0° C en daarna gedurende 15 1 uur tot 21° C. Daarna werd het reaktiemengsel verdeeld tussen 500 ml 2 M zoutzuur en 900 ml dichloormethaan. Vervolgens werd de organische fase afgescheiden, achtereenvolgens gewassen met 500 ml 2 M zoutzuur, 500 ml water, 500 ml van een verzadigde oplossing van natriumbicarbonaat in water 20 en 500 ml van een natriumchlorideoplossing, gedroogd boven mag-nesiumsulfaat en geconcentreerd, waardoor men 11,90 g van een schuim verkreeg, die over 500 g Merck Kieselgel 60 (70-230 mesh) werd gechromatografèerd, onder toepassing van een elutie-mengsel van dichloormethaan en ethylacetaat (19:1). De geschikte 25 frakties werden samengevoegd, geconcentreerd tot 200 ml , achtereenvolgens uitgewassen met 100 ml 2 M zoutzuur, 100 ml water en 100 ml van een natriumchlorideoplossing, gedroogd boven magnesiumsulfaat en onder verminderde druk geconcentreerd tot de in de titel genoemde verbinding (9,05 g) als een schuim 30 werd verkregen, 1-q -107° (c 0,94 in DMSO); y

(ethanol) 324 nm (^28.500); V" (CHBr_) en (CDClJ

max j J

waarden identiek aan voorbeeld 1(c).

35 <e\ Τ A *7 rt f uiύl q « * -73- b) (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-Aminothiazool-4-yl)-2-(carboxyinethoxy-imino) -aceetamidq7-3-/'(E)-pen.t-1-een-3-ynylJ-cef-3-em-4-carbon-zuur, 5 Men voegde aan een oplossing van 3,37 g van het produkt van stap a) in 6 ml anisool 25 ml trifluorazijnzuur toe en roerde het verkregen mengsel 1 uur bij 21° C. Daarna voegde men 5 ml water toe en roerde nog eens 45 minuten bij 21° C. Vervolgens druppelde men de oplossing toe aan 600 ml 10 snel geroerde isopropylether en filtreerde het verkregen neerslag af, waste het twee malen met telkens 20 ml isopropylether en droogde het, waardoor men 1,63 g van een poeder verkreeg. Dit werd behandeld met 50 ml van een verzadigde oplossing van bicarbonaat in water en 100 ml water. Zodra de troebeling 15 ophield werd de verkregen suspensie verhit op een lagere temperatuur dan 40° C, waardoor een oplossing werd verkregen, die werd gechromatografeerd over 100 g Diaion HP-20 hars, onder elutie met achtereenvolgens 500 ml water, 300 ml 2 %fs (vol./vol.) waterige methanol en 700 ml 5 %'s (vol./vol.) wate-20 rige methanol. De geschikte frakties werden samengevoegd, geconcentreerd op 500 ml en de oplossing werd met 36 %’s (gew./gew.) zoutzuur aangezuurd tot pH 3,2. De verkregen suspensie werd geëxtraheerd met 300 ml van een mengsel van ethylacetaat en tetrahydrofuran (2:1) en de fasen werden gescheiden. De waterige 25 fase werd verzadigd met natriumchloride en weer geextraheerd met een mengsel van ethylacetaat en tetrahydrofuran (2:1) (2 x 300 ml). De samengevoegde organische extrakten werden gewassen met 200 ml van een natriumchlorideoplossing en het natriumchloride werd twee malen teruggeextraheerd met telkens 150 ml 30 van een mengsel van ethylacetaat en tetrahydrofuran (2:1).

De gecombineerde organische extrakten werden gedroogd boven natriumsulfaat en geconcentreerd tot een vast produkt , dat met 40 ml diethylether werd behandeld, gefiltreerd en gedroogd, waardoor men 1,16 g van de in de titel genoemde verbinding 35 verkreeg, jjj1 -120° (c 0,51 in DMSO); (ethanol) 232,5

- ; » -T

* 9 -74- nm ( ί 18.700) en 315 nm ( { 31.100); ν' (Nujol) 3700-2100 (NH2, NH + 0E), 2215 (-C=C-), 1762 (β -lactam), 1730 (-C02H). 1675 cm"1 (-C0NH-); (DMS0-d6) 0,44 (-C0NH-) 2,74 (NH2), 2,88 (-CH=CH-C=C-CH3), 3,15 (thiazolyl), 3,91 (-CH=CH-CsC-5 CH3), 4,14 (7H), 4,75 (6H) , 5,36 (-OCH^-) , 6,13, 6,38 (2-CH2), 7,97 (-C=C-CH3); HPLC 93,2 % zuiver.

Voorbeeld 23 10 Het natriumzout van (6R,7R)-7-^~(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2- (carboxymethoxyimino) -aceetamido7-3-£(E) -pent-1 -een-3-ynyl7~cef- 3-em-4-carbonzuur.

Men behandelde 4,59 g (6R,7R)-7-£(Z)-2-(2-amino-15 thiazool-4-yl)-2-(carbox3nnethoxyimino)-aceetamidq7~3-Z]’(E)-pent- l-een-3-ynylJ-cef-3-em-4-carbonzuur.trifluoracetaat met 50 ml van een verzadigde oplossing van natriumbicarbonaat in water en 50 ml water. Zodra het troebel worden ophield werd het verkregen neerslag afgefiltreerd, achtereenvolgens gewassen 20 met 2 ml water en drie malen met telkens 5 ml diethylether en gedroogd, waardoor men 0,22 g van de in de titel genoemde verbinding als fijne naalden verkreeg, smeltpunt*^ 230°; Cd 7^ -75,1° (c 0,42 in H„0); \ (pH 6 buffer) 232,5 nm ( ζ 16.500), £, ElclX Vb 312,5 nm ( \ 30.200);V (Nujol) 3700-2500 (NH , NH + OH), 25 2200 (-C=C), 1752 (^-lactam), 1688, 1535 (-C0NH-), 1600 cm (-C02-); X (D20) 2,96 (thiazolyl), 3,07 (-CH=CH-C=C-CH3), 4,19 (7H), 4,20 (-CH=CH-C=C-CH3), 4,76 (6H), 5,44 (-0CH2C02-), 6,32, 6,43 (2-CH2), 8,05 (-CsC-CEj).

30 Voorbeeld 24 a) Difenylmethyl (2,R,6R,7R)-7-(3,-t-butoxycarbonylamino-2t- fenylaceetamjdo)-3-/j(E)-pent-l-een-3-ynyi7-cef-3-em-4-carboxy- laat.

35 350 1 5 2 ·* -75-

Men voegde aan een oplossing van 207 mg van het produkt van bereiding 8 in 8 ml dichloormethaan 121 mg 2-t-butoxycarbonylamino-2-fenylazijnzuur, 115 mg 1-hydroxy-benzotriazool.hydraat en 155 mg dicyclohexylcarbodiimide toe.

5 Daarna roerde men het mengsel 17 uren bij 23° C. Het neergeslagen vaste produkt werd afgefiltreerd en twee malen gewassen met telkens 5 ml dichloormethaan en het gecombineerde filtraat en wasvloeistoffen werden achtereenvolgens gewassen met 10 ml water, twee malen met telkens 10 ml van een verzadigde oplossing 10 van natriumbicarbonaat in water en twee malen met telkens 10 ml water, gedroogd boven magnesiumsulfaat en drooggedampt. Het verkregen, vaste produkt werd gechromatografeerd over 25 ml silicagel, onder elutie met een mengsel van dichloormethaan en ethylacetaat (15:1). De geschikte frakties werden samen-15 gevoegd en ingedampt, waardoor men 195 mg van de in de titel genoemde ester als een vast produkt verkreeg, smeltpunt 178° tot 180°, )s (EtOH) 326,5 nm ( f 26.880). max i- b) (2R1,6R,7R)-7-(2t-Amino-2T-fenylaceetamido)-3-/j(E)-pent-l-20 een-3-ynyl)-cef-3-em-4-carbonzuur.trifluoracetaat.

Men voegde aan een mengsel van 167 mg van het produkt van stap a) en 0,3 ml anisool, gekoeld in ijs, 2 ml trifluorazijnzuur toe. Daarna roerde men de oplossing 25 1 uur in ijs en voegde het vervolgens toe aan 70 ml geroerde diisopropylether. Het neergeslagen, vaste produkt (41 mg) werd afgefiltreerd en gedroogd. Het filtraat werd onder verminderde druk geconcentreerd en het residu werd behandeld met 50 ml ether. Het verkregen, vaste produkt (52 mg) werd af ge-30 filtreerd. Beide ladingen van het produkt werden samengevoegd, behandeld met 5 ml ether, afgefiltreerd en gedroogd, waardoor men 88 mg van de in de titel genoemde verbinding verkreeg, H (EtOH) 332,5 nm (C 21.580), V (Nuhol) 3700

IH3X \ HlflX

tot 2100 (NH, OH, NH3 ), 2220 (C=C), 1772 (azetidine-2-on OO), 35 1700 (carbonzuur C=0), 1675 (amido C=0), 1570 (carboxylaat C=0) - j 'J : Q C 4 -76- en 725 cm"1 (fenyl), ~C (DMS0-d6) 0,42 (NH), 2,3 tot 2,8 (fenyl-protonen enM3+), 2,94 (d, J 17Hz, CH~CH-C=C) 4,03 (d, J 17Hz, CH=CH-C=C), 4,21 (C7-H), 4,89 (d, J 5 Hz, CgH), 4,93 (PhCH), 6,25 en 6,51 (ABq, J 18Hz, C2-H2) en 7,99 (CH3).

5

Voorbeeld A

Droog poeder voor injektiedoeleinden.

10

Men. vulde glazen flesjes aseptisch met het steriele natriumzout van (6R,7R)-7-/”(Z)-2-(2-amïnothiazoo 1-4-y 1)-2-(carboxymethoxyimino) aceetamido7-3-/*(E)-pent-1-een-3-yny 1/-cef-3-em-4-carbonzuur, zodat elk flesje een hoeveelheid equiva-15 lent aan 1 g watervrij cefalosporinezuur bevatte. Men spoelde de bovenruimten van de flesjes met steriele stikstof, sloot de flesjes met rubber schijven of stoppen en sloot af met een metalen bekleding (aangebracht door krimpen). Het produkt kan worden verwerkt door het korte tijd voor de toediening op te 20 lossen in water voor injektiedoeleinden of in een andere geschikte, steriele drager.

Voorbeeld B

25 Tablet voor orale toediening mg/tablet cefalosporine 250 natriumzetmeelglycollaat 5 microkristallijnecellulose 45 30 natriumlaurylsulfaat 3

Men zeefde (6R,7R)-7-J(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)- 2- (carboxymethoxyimino)aceetamid<a7“3-£(E)-pent-1 -een-3-ynyl7-cef- 3- em-4-carhonzuur en de microkristallijne cellulose door een 35 zeef van 40 mesh. Men zeefde het natriumzetmeelglucoaat en natrium- Λ Ί i 7 O i S 0 v ; o £ 4 -77- laurylsulfaat door een zeef van 60 mesh. Daarna mengde men de poeders samen in een geschikte menginrichting totdat een homogeen produkt werd verkregen. Men perste met geschikte stempels in een automatische tabletteermachine. De tahletten kunnen met een 5 dunne polymeerlaag, aangebracht met behulp van de gebruikelijke filmbekledingstechnieken, worden bekleed. In de bekledingslaag kan een pigment worden opgenomen.

Andere verbindingen volgens de uitvinding kunnen op een overeenkomstige wijze tot geneesmiddelpreparaten worden 10 verwerkt.

ft ™ Λ ii / ö 3 *j * 3 2 4

Claims

1. Verbindingen met de algemene formule I, waarin R een NH^-groep of een geacyleerde of gesily- leerde aminogroep, 2 5. een waterstof- of halogeenatoom of een alkyl-, aryl-, carboxyl- of lage alkoxycarbonylgroep, 3 R een waterstofatoom of een carboxylgroep-blokkerende groep en B ^ S of ^ 0 ( - of -) voorstel- 10 len en de stippellijn die de 2-, 3- en 4-plaatsen overbrugt ? » aangeeft dat de verbinding een cef-2-em- of cef-3-em-verbinding is, alsmede zouten, solvaten en esters daarvan.

2. Verbindingen met formule Ia, waarin R^ een acylgroep gekozen uit 15 i) een groep met formule R CH^CO-, waarin R een desgewenst gesubstitueerde, uit 5-of 6- leden bestaande, heterocyclische arylgroep met een of een aantal heteroatomen gekozen uit S, N en 0 in de ring, ii) een groep met formule R^ - C - CO - ,

20 N ^OR0 waarin R13 een desgewenst gesubstitueerde carbocyclische of hetero-cyclische arylgroep en R een waterstofatoom is, of een desgewenst gesubstitueerde acyl-, alkyl-, alkenyl-, alkynyl-, cyclo-25 alkyl-, cycloalkylalkyl-, aryl- of aralkylgroep en iii) een groep met formule R^CH-CO- 7 X d 3 · waarin R een hiervoor voor R aangegeven betekenis heeft of een desgewenst gesubstitueerde carbocyclische groep en X een 30 amino-, hydroxyl-, geacyleerde hydroxyl-, carboxyl- of ver- 2 esterde carboxylgroep weergeeft en R een waterstof- of halo- « » Λ ί ? S if θ 3 0 i 0 ί «ί *»' * -79- , geenatoom, of een alkyl-, aryl-, carboxyl- of lage alkoxycarbonyl- groep voorstelt, . alsmede de niet-toxische zouten, solvaten , 1-oxyden en niet-toxische, metabolisch labiele, esters daarvan.

3. Verbindingen volgens conclusie 2 met formule Ib, waarin ,1 Rb een thiazolyl-, thiadiazolyl-, furyl-, thienyl- of pyrimidyl- groep, desgewenst gesubstitueerd door een of een aantal sub- 10 stituenten gekozen uit amino of halogeen (chloor, broom of j odium), 1 RC een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, alkenylgroep met 2-4 koolstofatomen, alkynyl met 2-4 koolstof- 15 atomen, cycloalkylgroep met 3-6 koolstofatomen of een cycloalkyl-Cj_^-alkylgroep, desgewenst gesubstitueerd door carbamoyl, methyl-carbamoyl, dimethylcarbamoyl, carboxyl, 2 alkoxycarbonyl of halogeen, en R een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, fenylgroep, carboxyl- 20 groep of alkoxycarbonylgroep voorstellen, alsmede de niet-toxische zouten, solvaten en niet-toxische, metabolisch labiele, esters daarvan.

4. Verbindingen volgens conclusie 2 met formule c’' Ic, waarin R een waterstofatoom of een methylgroep, ethyl- 25 groep, carboxymethylgroep, 2-carboxyprop-2-yl-groep, carba- 2’ moylmethylgroep of methoxycarbonylmethylgroep en R een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-4 koolstofatomen voorstellen, alsmede de niet-toxische zouten, solvaten en niet-toxische, metabolisch labiele, esters daarvan.

5. Verbindingen volgens een der voorgaande conclusies, waarin de 3-substituent van de cefalosporine-kern de trans-eonfiguratie heeft.

6. Als verbinding volgens conclusie 2: (6R,7R)-7-/’(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2- 9 35 (carboxymethoxyimino)aceetamidq7~3-/*(E)-hex-1-een-3-ynyl7cef-3- S501324 -80- em-4-carbonzuur, of (6R,7R)-7-/*(Z)-2-(2-aminothiazool-4-yl)-2-(car-boxymethoxyimino) aceetamidoJ-3-/'(E)-but- l-een-3-ynyl7 cef-3-em- 4-carbonzuur. 5 7. (6R,7R)-7-/,(Z)-2-(2-amin8thiazool-4-yl)-2- (carboxymethoxyimino) aceetamidQ7-3-/1(E) -pent-1 -een-3-ynyl/ cef-3-em-4-carhonzuur, alsmede de niet-toxische zouten, solvaten en niet-toxiscbe , labiele esters daarvan.

8. Werkwijze voor het bereiden van cefalo- sporinederivaten, met het kenmerk, dat men verbindingen volgens conclusie 1 bereidt door: (A) , voor de bereiding van verbindingen waarin 2 3 ... , B, R , R en de stippellijn de m conclusie 1 aangegeven bete- 15 kenissen hebben en R een geacyleerde aminogroep voorstelt, acylering van een verbinding met formule I of een zout daarvan, waarin R een aminogroep of een gesilyleerde aminogroep is, of (B) , voor de bereiding van verbindingen waarin 2 3

20 B, R en R en de stippellijn de m conclusie 1 aangegeven betekenissen hebben en R een gesilyleerde aminogroep weergeeft, silylering van een verbinding met formule I of een zout daarvan, waarin R een aminogroep voorstelt, of (C) reaktie van een verbinding met formule IV, 3 ... 25 waarin R en B én de stippellijn de in conclusie 1 gedefinieerde A ' betekenissen hebben, R een -Nl^groep of een gesilyleerde of gea-cyleerde aminogroep voorstelt of een beschermde vorm van deze geacyleerde aminogroep is en Y een substituent weergeeft die in staat is met een of een aantal reagentiea te 30 reageren ter vorming of invoering van een groep met formule 2 -CH=CH-C=C-R op de 3-plaats , met een of een aantal van de genoemde reagentia.

9, Werkwijze voor het bereiden van verbindingen volgens de conclusie 2, met het kenmerk, dat men een verbinding 35 met formule ld bereidt, waarin 8 3 Ü i O 2 » 2 -81- R een waterstof- of halogeenatoom, of een alkyl-, aryl-, carboxyl- of lage alkoxycarbonylgroep voorstelt, 3 R een waterstofatoom of een carboxylgroep- 5 blokkerende groep is, IA R een groep voorstelt gekozen uit cL cL i) een groep met formule R CH^CO-, waarin R een desgewenst gesubstitueerde, uit 5- of 6-leden bestaande, heterocyclische arylgroep is met een of een aantal hetero-10 atomen gekozen uit S, N en 0 in de ring, ii) een groep met formule R - C - CO -, s, ' 0RC waarin een desgewenst gesubstitueerde carbocyclische of Q 15 heterocyclische arylgroep is en R een waterstofatoom, of een desgewenst gesubstitueerde acyl-, alkyl-, alkenyl-, alkynyl-, cycloalkyl-, cycloalkylalkyl-, aryl- of aralkylgroep weergeeft, en iii) een groep met formule R^CH-CO-,

20 X d 3· » waarin R een hiervoor voor R gedefinieerde betekenis heeft of een desgewenst gesubstitueerde carbocyclische groep is en X een amino-, hydroxyl-, geacyleerde hydroxyl-, carboxyl- of veresterde carboxylgroep voorstelt, of waarin 1A 25. een beschermde vorm van de hiervoor vermelde groepen i) tot iii) is, B = of -¥ 0 ( oC “ of -); en de stippellijn die de 2-, 3- of 4-plaats overbrugt'aangeeft dat de verbinding een cef-2-em- of cef-3-em-verbinding is, of een zout, solvaat of ester daarvan, volgens 30 een van de volgende methoden: (A*) acylering van een verbinding met formule 2 3 II, waarin B, R , R en de stippellijn de hiervoor aangegeven betekenissen hebben, of een zout of N-silyderivaat daarvan IA met een zuur met formule III, waarin R een hiervoor gedefi-35 nieerde betekenis heeft, of met een acyleringsmiddel dat daar- 3501524 -82- mede overeenkomt, of (B^) reaktie van een verbinding met formule IVa, 3 ... waarin R , B en de stippellijn de hiervoor m conclusie 1 ge- 1A 1 definieerde betekenissen hebben, R de hiervoor voor R gedefi-5 nieerde betekenissen heeft of een beschermde vorm daarvan weergeeft en Y een substituent voorstelt die in staat is met een of een aantal reagentia te reageren onder vorming of invoering 2 van een groep met formule -CH=CK-C=C-R op de 3-plaats^met een of een aantal van de genoemde reagentia, waarna, 'indien nodig, 10 en/of naarmate telkens wenselijk is, een van de volgende stappen, in elke gewenste volgorde, kan worden uitgevoerd: 2 i) omzetting van een ^ -isomeer in het gewenste /\ ^-isomeer, ii) reduktie van een verbinding waarin B = 15 > 0 onder vorming van een verbinding waarin B = ^S, iii) oxydatie van een verbinding waarin B = ^S, tot een verbinding waarin B = ^ 0, iv) vorming van een niet-toxisch zout, v) vorming van een solvaat, 20 vi) vorming van een niet-toxische, metabolisch labiele, ester, vii) scheiding van isomeren, viii) isomerisatie van de dubbele binding op de 3-plaats van de zijketen van de cis- tot de trans-configura-25 tie, of omgekeerd, en ix) verwijdering van eventueel aanwezige carboxylgroepblokkerende en/of 0- of N-heschermende groepen.

10. Farmaceutische preparaten die tenminste een of een aantal verbindingen volgens een der voorgaande 30 conclusies bevatten.

11. Farmaceutische prepraten volgens conclusie 10 die een of een aantal verbindingen volgens conclusie 2 bevatten.

12. Farmaceutische preparaten volgens conclusies 35 10 of 11 die tevens een of een aantal fysiologisch aanvaardbare ö v . O L h? 5 -83- dragers en/of excipienten bevatten.

13. Werkwijzen als beschreven in de beschrijving en/of voorbeelden. /L